JP2022532069A - Ｍａｓｐ阻害化合物およびその使用 - Google Patents

Abstract

本発明は、新規なマンノース結合レクチン（ＭＢＬ）関連セリンプロテアーゼ（ＭＡＳＰ）阻害化合物、ならびにその類似体および誘導体、その調製方法、疾患の治療および／または予防のための単独または組み合わせでの使用、ならびに疾患の治療および／または予防のための、特に腎臓および心臓血管ならびに虚血再灌流傷害の治療および／または予防のための医薬の製造のためのその使用に関する。

Description

本発明は、新規マンノース結合レクチン（ＭＢＬ）関連セリンプロテアーゼ（ＭＡＳＰ）阻害化合物、ならびにその類似体および誘導体、その調製方法、単独でのまたは組み合わせでの疾患の治療および／または予防のためのそれらの使用、ならびに疾患の治療および／または予防のための、特に腎臓障害および心臓血管障害および虚血再灌流傷害の治療および／または予防のための医薬の製造のためのそれらの使用に関する。

補体系はタンパク質、受容体および酵素の複雑なカスケードネットワークからなり、その多くは血流中を循環している。補体系は自然免疫の重要な構成要素であり、侵入する病原体に対する防御および死細胞およびウイルス感染細胞の除去に不可欠である。自然免疫応答と適応免疫応答の橋渡しを形成する。補体系の活性化は、敗血症および虚血再灌流傷害の病態、例えば心筋梗塞、虚血性腎障害または臓器移植後のものにも関与する。補体系には、レクチン経路、古典経路及び副経路（Ｄｕｎｋｅｌｂｅｒｇｅｒ ａｎｄ Ｓｏｎｇ，Ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ ａｎｄ ｉｔｓ ｒｏｌｅ ｉｎ ｉｎｎａｔｅ ａｎｄ ａｄａｐｔｉｖｅ ｉｍｍｕｎｅ ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ．Ｃｅｌｌ Ｒｅｓ．２０１０；２０（１）：３４－５０）の３つの分岐が同定されている。レクチン経路は血流中を循環しているレクチンの沈着によって活性化され、通常の条件下では、外来性および改変された炭水化物表面パターンをそれぞれ認識し、それらの表面を修飾することによって、侵入する病原体および死細胞に対する標識機能を有する。マンノース結合レクチン（ＭＢＬ）、フィコリンおよびコレクチンは肝臓、腎臓および他の器官において産生されるこれらのレクチンの主要な代表である（Ｇａｒｒｅｄら、補体－ＭＢＬおよびそれ以降のマンノース結合レクチン経路を通る旅、Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｒｅｖ．２０１６；２７４（１）：７４－９７）。それらの沈着に続いて、血流から本質的に２つの密接に関連するセリンプロテアーゼ、マンノース結合レクチン関連セリンプロテアーゼ１および２（ＭＡＳＰ－１およびＭＡＳＰ－２）のチモーゲンがさらに動員され、これらはチモーゲンが互いに近接する複合体を形成する。現在の概念は、インビボ（ｉｎ ｖｉｖｏ）条件下では、動員後のＭＡＳＰ－１チモーゲンは自己活性化し、次いで切断によってＭＡＳＰ－２チモーゲンを活性化するというものである。活性化されたＭＡＳＰ－１はさらに補体因子Ｃ２をＣ２ａとＣ２ｂに切断する。また、活性化されたＭＡＳＰ－２はＣ２と補体因子Ｃ４をＣ４ａとＣ４ｂに切断し、Ｃ２ａとともに補体因子Ｃ３転換酵素として働くＣ４ｂＣ２ａ複合体を形成する。Ｃ３転換酵素活性の構成と標的細胞表面への連続したＣ３沈着は、炎症メディエーターの生成と標的細胞溶解をもたらす共通の下流カスケードを活性化する３つの補体経路すべての収束点を表している。完全なヒト血清において、両方のＭＡＳＰ酵素の活性はＣ３転換酵素形成に必須である（Ｈｅｊａら、ＭＡＳＰ－２の排他的活性化因子としてのセリンプロテアーゼＭＡＳＰ－１の役割を明らかにする補体レクチン経路活性化の改訂されたメカニズム、Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ．２０１２；１０９（２６）：１０４９８－５０３）。

微小血管系は、炎症性および虚血性臓器障害時に決定的な役割を果たす。バリア機能、白血球輸送および凝固制御は、小血管における管腔内皮細胞表面の完全性に密接に依存している。管腔内皮表面は、その全体がグリコカリックスと呼ばれる膜に組み込まれた糖タンパク質、プロテオグリカン、糖脂質から伸びたグリコシル化伸長部の密なコートで覆われている。動物実験およびヒトの病理学から得られた試料の電子顕微鏡分析は、特に内皮グリコカリックスが敗血症のような炎症条件下と同様に虚血負荷時に急速かつ基本的に分解されることを示している。これらの変化は通常の条件下では検出できない血流への炭水化物残基の曝露をもたらす（総説についてはＳｉｅｖｅら、血管疾患における内皮糖衣層の調節と機能、Ｖａｓｃｕｌ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ、２０１８；１００：２６－３３を参照のこと）。特に細胞表面の他の変化に加えて、変化した炭水化物パターンは、レクチンを認識するパターンの沈着、続くＣ３沈着および細胞溶解の開始を引き起こすレクチン経路を活性化すると考えられる。ＭＢＬおよびＣ３沈着は、ヒトを含む種を超えて虚血および急性腎障害後に起こることが示された。レクチン経路活性化は、ＭＢＬおよびＭＡＳＰ－２の標的欠失が腎臓、心臓および腸の虚血再灌流損傷からマウスを保護したことから、再灌流損傷に特に関連があった（Ｍｏｌｌｅｒ－Ｋｒｉｓｔｅｎｓｅｎら、マンナン結合レクチンは虚血性再灌流マウス腎臓上の構造を認識し、組織損傷に関与している、Ｓｃａｎｄ Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ、２００５；６１（５）：４２６－３４；Ｓｃｈｗａｅｂｌｅら、マンナン結合レクチン関連セリンプロテアーゼ－２の標的化は、心筋および消化管の虚血／再灌流傷害からの保護をもたらす、Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ Ｕ Ｓ Ａ．２０１１；１０８（１８）：７５２３－８）。さらに、腎臓において主に発現される別のＭＡＳＰ活性化レクチンであるコレクチン１１の欠失は虚血性急性腎損傷に対して抵抗性のマウスを作製した（Ｆａｒｒａｒら、Ｃｏｌｌｅｃｔｉｎ－１１は、ストレス誘発Ｌ－フコースパターンを検出して、腎臓上皮損傷を誘発する、Ｊ Ｃｌｉｎ Ｉｎｖｅｓｔ、２０１６；１２６（５）：１９１１－１９２５）。ＭＡＳＰ－１およびＭＡＳＰ－２の選択的ペプチド阻害剤は、出発点としてヒマワリまたはグラスホッパーからの天然トリプシン阻害剤を使用するファージディスプレイライブラリーから同定されている。これらのペプチドはインビトロでレクチン経路依存性Ｃ３転換酵素形成を阻害することが示されている（Ｋｏｃｓｉｓら、ファージディスプレイによる補体のレクチン経路の選択的阻害は、マンノース結合レクチン関連セリンプロテアーゼ（ＭＡＳＰ）－１および－２に対する選択されたペプチドを表示します：レクチン経路活性化へのＭＡＳＰ－１の有意な寄与、Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ、２０１０；１８５（７）：４１６９－７８；Ｈｅｊａら、単一特異性阻害剤は、マンナン結合レクチン関連セリンプロテアーゼ－１（ＭＡＳＰ－１）の両方がレクチン経路の活性化に不可欠であり、ＭＡＳＰ－２の構造的可塑性を明らかにすることを示す、Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ、２０１２；２８７（２４）：２０２９０－３００）。しかし、これらのペプチド阻害剤の医薬的有用性およびインビボ効力についての証拠は、まだ利用可能ではない。同様に、ＭＡＳＰチモーゲン相互作用を妨害するＭＡＳＰ－２に対する抗体が同定され、非定型溶血性尿毒症症候群および他の炎症性腎障害のための臨床開発に持ち込まれている（ＣｌｉｎｉｃａｌＴｒｉａｌｓ．ｇｏｖ Ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｒ：ＮＣＴ０３２０５９９５；ＮＣＴ０２６８２４０７；ＮＣＴ０３６０８０３３）。しかし、急性、特に虚血性臓器障害の予防または治療における有用性の臨床的証明はまだ欠けている。

ＷＯ２００４／０７５８３７は、補体系の阻害による虚血再灌流傷害またはＴＡＡＡ修復に関連する組織損傷によって引き起こされる罹患率および死亡率を減少させるための、抗ＭＡＳＰ抗体、その機能的に等価なフラグメント、ならびにＭＡＳＰ結合ペプチドを開示する。補体系、主にレクチン経路に関連する疾患の治療のためのヒマワリＭＡＳＰ阻害剤－１（ＳＦＭＩ－１）およびヒマワリＭＡＳＰ阻害剤－２（ＳＦＭＩ－２）ならびにそれらの誘導体などの小ペプチドは、最初にＷＯ２０１０／１３６８３１に記載された。

ＷＯ２０１５／０５４２９８は、ＭＡＳＰ－１、ＭＡＳＰ－２、またはＭＡＳＰ－３の活性を低下させることによって、被験体（ｓｕｂｊｅｃｔ）における視力を維持するか、または視力喪失を低下させるための方法、および被験体における光受容体細胞死を阻害するか、または低下させるための方法を開示する。ＷＯ２００４／１０６３８４、ＷＯ２００５／１２３１２８、ＷＯ２００７／１１７９９６およびＷＯ２０１４／１４４５４２は、ＭＡＳＰ－２依存性補体活性化に関連する疾患の治療のための抗ＭＡＳＰ－２抗体を開示する。

ＷＯ２００４／０７５８３７ ＷＯ２０１０／１３６８３１ ＷＯ２０１５／０５４２９８ ＷＯ２００４／１０６３８４ ＷＯ２００５／１２３１２８ ＷＯ２００７／１１７９９６ ＷＯ２０１４／１４４５４２

Ｇａｒｒｅｄら、補体－ＭＢＬおよびそれ以降のマンノース結合レクチン経路を通る旅、Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｒｅｖ．２０１６；２７４（１）：７４－９７ Ｈｅｊａら、ＭＡＳＰ－２の排他的活性化因子としてのセリンプロテアーゼＭＡＳＰ－１の役割を明らかにする補体レクチン経路活性化の改訂されたメカニズム、Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ．２０１２；１０９（２６）：１０４９８－５０３ Ｓｉｅｖｅら、血管疾患における内皮糖衣層の調節と機能、Ｖａｓｃｕｌ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ、２０１８；１００：２６－３３ Ｍｏｌｌｅｒ－Ｋｒｉｓｔｅｎｓｅｎら、マンナン結合レクチンは虚血性再灌流マウス腎臓上の構造を認識し、組織損傷に関与している、Ｓｃａｎｄ Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ、２００５；６１（５）：４２６－３４ Ｓｃｈｗａｅｂｌｅら、マンナン結合レクチン関連セリンプロテアーゼ－２の標的化は、心筋および消化管の虚血／再灌流傷害からの保護をもたらす、Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ Ｕ Ｓ Ａ．２０１１；１０８（１８）：７５２３－８ Ｆａｒｒａｒら、Ｃｏｌｌｅｃｔｉｎ－１１は、ストレス誘発Ｌ－フコースパターンを検出して、腎臓上皮損傷を誘発する、Ｊ Ｃｌｉｎ Ｉｎｖｅｓｔ、２０１６；１２６（５）：１９１１－１９２５ Ｋｏｃｓｉｓら、ファージディスプレイによる補体のレクチン経路の選択的阻害は、マンノース結合レクチン関連セリンプロテアーゼ（ＭＡＳＰ）－１および－２に対する選択されたペプチドを表示します：レクチン経路活性化へのＭＡＳＰ－１の有意な寄与、Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ、２０１０；１８５（７）：４１６９－７８ Ｈｅｊａら、単一特異性阻害剤は、マンナン結合レクチン関連セリンプロテアーゼ－１（ＭＡＳＰ－１）の両方がレクチン経路の活性化に不可欠であり、ＭＡＳＰ－２の構造的可塑性を明らかにすることを示す、Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ、２０１２；２８７（２４）：２０２９０－３００

本発明の目的はＭＡＳＰ－１および／またはＭＡＳＰ－２酵素に対する阻害効果および他の有益な特性を有し、それらを以下に定義するＭＡＳＰ－１および／またはＭＡＳＰ－２関連障害の予防および／または治療のための効率的かつ安全な代替物として適切にする新規ペプチドを提供することであった。さらなる目的は、ヒトＭＡＳＰ－１および／またはＭＡＳＰ－２酵素および／またはラットＭＡＳＰ－１および／またはＭＡＳＰ－２酵素に対して改善された阻害効果を有する新規ペプチドを提供することであった。

本発明は一般に、ＭＡＳＰ－１および／またはＭＡＳＰ－２酵素の阻害剤として作用するペプチド、ならびにそれらを作製および使用する方法に関する。

特に、本発明は、以下の構造式（Ｉ）：

〔式中、
Ｘ^０は、式（ＩＩａ）

［ここで、
＊は、隣接するアミノ酸の末端アミノ基への結合を示し、
Ａは、結合またはＣ_１－Ｃ_６－アルキレンであり、ここで、Ｃ_１－Ｃ_６－アルキレン中の１つのＣＨ_２基は－Ｏ－または－Ｓ－と交換されていてもよく、Ｃ_１－Ｃ_６－アルキレンは、ヒドロキシ、メトキシ、エトキシ、カルボキシ、アミノおよびハロゲンからなる群から選択される同一または異なるラジカルによって、最大で三置換され、
Ｂは、存在しないか、アリール、ヘテロアリール、Ｃ_３－Ｃ_８－シクロアルキルまたはＣ_３－Ｃ_７－ヘテロシクロアルキルであり、
ここで、アリール、ヘテロアリール、Ｃ_３－Ｃ_８－シクロアルキルおよびＣ_３－Ｃ_７－ヘテロシクロアルキルは、Ｃ_１－Ｃ_４－アルキル、ヒドロキシル、メトキシ、エトキシ、カルボニル、カルボキシ、アミノおよびハロゲンの群から選択される同一または異なるラジカルによって、最大で三置換されることができ、
Ｒ^１は、水素、ハロゲン、アミノ、ヒドロキシルまたはＣ_１－Ｃ_２０－アルキルであり、ここで、Ｃ_１－Ｃ_２０－アルキルは、ヒドロキシル、カルボキシ、アミノおよびハロゲンからなる群から選択される同一または異なるラジカルによって、最大で三置換される］
の基を表し、
ｐは、０または１の整数を表し、
Ｘ^１は、任意の天然アミノ酸または非天然アミノ酸を表し、ここで、任意の天然アミノ酸および／または非天然アミノ酸はＤ－またはＬ－立体配置であることができ、
また、ｐが０であり、ｑが０と異なる場合、Ｘ^１の末端アミノ基は、置換されていないか、アセチル化されているか、またはＣ_１－Ｃ_２０－アルキルで一置換もしくは二置換されており、
ｑは、０から５までの整数を表し、
Ｘ^２は、Ｉ、Ｌ、Ｍ、ＶおよびＡからなるリストから選択される天然アミノ酸を表すか、またはＬ－Ｎ－メチルイソロイシン（（Ｎ－Ｍｅ）Ｉ）、ａｌｌｏ－Ｌ－イソロイシン（ａｌｌｏ－Ｉ）、Ｌ－シクロブチルアラニン（Ｃｂａ）、Ｌ－ノルバリン（Ｎｖａ）、Ｌ－２－アミノ酪酸（Ａｂｕ）、（２Ｓ，３Ｓ）－２－［（３Ｒ）－３－アミノ－２－オキソピロリジン－１－イル］－３－メチルペンタン酸、（２Ｓ，３Ｓ）－２－［２－オキソピペラジン－１－イル］－３－メチルペンタン酸、（２Ｓ，３Ｓ）－２－［（３Ｓ）－２－オキソピペラジン－１－イル］－３－メチルペンタン酸、Ｌ－メチオニン－Ｌ－スルホキシド、Ｌ－メチオニン－スルホンおよびＬ－ｔｅｒｔ－ブチルグリシンからなるリストから選択される非天然アミノ酸を表すが、
一方で、Ｌ－立体配置の天然アミノ酸および／または非天然アミノ酸のそれぞれは、Ｄ－立体配置の立体異性体で置き換えることができ、
および、ｐとｑが共に０であり、ｒが１である場合、Ｘ^２の末端アミノ基は置換されていないか、アセチル化されているか、またはＣ_１－Ｃ_２０－アルキルで一置換もしくは二置換されており、
ｒは、０または１の整数を表し、
Ｘ^３は、天然アミノ酸Ｃを表すか、またはＬ－ペニシラミン（Ｐｅｎ）とＬ－Ｎ－メチルシステイン（（Ｎ－Ｍｅ）Ｃ）からなるリストから選択される非天然アミノ酸を表し、
および、ｐおよびｑおよびｒがすべて０である場合、Ｘ^３の末端アミノ基は、置換されていないか、アセチル化されているか、またはＣ_１－Ｃ_２０－アルキルで一置換もしくは二置換されており、
Ｘ^４は、Ｓ、Ｃ、Ｔ、ＲもしくはＫからなるリストから選択される天然アミノ酸を表すか、またはａｌｌｏ－Ｌ－トレオニン（ａｌｌｏ－Ｔ）、Ｌ－ホモセリン（ｈＳｅｒ）およびＬ－オルニチン（Ｏｒｎ）からなるリストから選択される非天然アミノ酸を表し、
Ｘ^５は、天然アミノ酸ＲまたはＮ（５）－メチル－Ｌ－アルギニン（（Ｍｅ）Ｒ）を表し、
Ｘ^６は、Ｓ、ＣもしくはＴからなるリストから選択される天然アミノ酸、またはａｌｌｏ－Ｌ－トレオニン（ａｌｌｏ－Ｔ）およびＬ－２，３－ジアミノプロピオン酸（Ｄａｐ）からなるリストから選択される非天然アミノ酸を表し、
Ｘ^７は、Ｌ、ＦもしくはＮからなるリストから選択される天然アミノ酸を表すか、または２，３，３ａ，４，５，６，７，７ａ－オクタヒドロインドール－２－カルボン酸（Ｏｉｃ）、Ｌ－４－ブロモフェニルアラニン（（４－ブロモ）Ｆ）、２，５－ジフルオロ－Ｌ－フェニルアラニン（（２，５－ジフルオロ）Ｆ）、Ｌ－ｔｅｒｔ－ブチルアラニン（（ｔＢｕ）Ａ）、２－クロロ－Ｌ－フェニルアラニン（（２－クロロ）Ｆ）、Ｌ－２－ブロモフェニルアラニン（（２－ブロモ）Ｆ）、（Ｓ）－２－（アミノ）－１，６－ヘキサン二酸（ＡＡＤ）、（２Ｓ）－２－アミノ－４，４，４－トリフルオロブタン酸、Ｌ－２－アミノ－４－シアノ酪酸（Ｃｎｂａ）、４－フルオロ－ロイシン（（４－フルオロ）Ｌ）、（Ｓ）－（トリフルオロメチル）－Ｌ－システイン、（２Ｓ）－２－アミノ－３－（１－メチルシクロプロピル）プロパン酸、Ｌ－ｔｅｒｔ－ブチルグリシン（（ｔＢｕ）Ｇ）、３－（トリメチルシリル）－Ｌ－アラニン、２，５－ジフルオロ－Ｌ－フェニルアラニン、２－アミノ－７－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－７－オキソヘプタン酸、５，５，５－トリフルオロ－Ｌ－ロイシン（（トリフルオロ）Ｌ）、２－メチル－Ｌ－フェニルアラニン（（２－Ｍｅ）Ｆ）、Ｌ－シクロブチルアラニン（Ｃｂａ）、Ｌ－シクロペンチルアラニン（Ｃｐａ）、Ｌ－シクロプロピルメチルアラニン、Ｌ－トリフルオロメチルアラニン、Ｌ－ジフルオロメチルアラニン、２－フルオロ－Ｌ－フェニルアラニン（（２－フルオロ）Ｆ）、（２Ｓ）－３－（２，３－ジフルオロフェニル）－２－アミノプロパン酸、（２Ｓ）－３－（３－シアノーフェニル）―２－アミノプロパン酸、および（２Ｓ）－３－（インドール－４－イル）－２－（アミノ）プロパン酸からなるリストから選択される非天然アミノ酸を表し、
Ｘ^８は、天然アミノ酸Ｐを表すか、または（１Ｓ，２Ｓ，５Ｒ）－３－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－２－カルボン酸、Ｌ－ヒドロキシプロリン（Ｈｙｐ）、（３Ｓ）－モルホリン－３－カルボン酸（モルホリン－３－カルボキシリック）、Ｌ－ピペコリン酸（Ｐｉｐ）、（４ａＲ，６ａＲ，９Ｓ，１１ａＳ）－１１－オキソ－２，３，４，４ａ，６ａ，７，８，９，１１，１１ａ－デカヒドロ－１Ｈ－ピリド［３，２－ｅ］ピロロ［１，２－ａ］アゼピン－９－カルボン酸、トランス－４－フルオロプロリン（（トランス－４－フルオロ）Ｐ）及び（１Ｒ，２Ｓ，５Ｓ）－３－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－２－カルボン酸からなるリストから選択される非天然アミノ酸を表し、
Ｘ^９は、天然アミノ酸Ｐを表すか、または２，３，３ａ，４，５，６，７，７ａ－オクタヒドロインドール－２－カルボン酸（Ｏｉｃ）、Ｌ－ヒドロキシプロリン（Ｈｙｐ）、（２Ｓ，４Ｓ）－４－トリフルオロメチル－ピロリジン－２－カルボン酸（（４－ＣＦ３）Ｐ）、（２Ｓ，４Ｓ）－４－フルオロプロリン（（シス－４－フルオロ）Ｐ）、トランス－４－フルオロプロリン（（トランス－４－フルオロ）Ｐ）、（２Ｓ）－２－アミノ－４，４，４－トリフルオロブタン酸、Ｌ－トランス－３－ヒドロキシプロリン（（３Ｓ－ＯＨ）Ｐ、（１Ｒ，３Ｓ，５Ｒ）－２－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－３－カルボン酸、（６Ｓ）－５－アザスピロ［２．４］ヘプタン－６－カルボン酸、ｒｅｌ－（１Ｒ，３Ｒ，５Ｒ，６Ｒ）－６－（トリフルオロメチル）－２－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－３－カルボン酸、（２Ｓ）－２－アミノ－４，４，４－トリフルオロブタン酸、（２Ｓ，３ａＳ，６ａＳ）－オクタヒドロシクロペンタ［ｂ］－ピロール－２－カルボン酸、トランス－４－フルオロプロリン（（トランス－４－フルオロ）Ｐ）、（２Ｓ，４Ｓ）－４－フルオロプロリン（（シス－４－フルオロ）Ｐ））、Ｌ－４，４－ジフルオロプロリン（（ジフルオロ）Ｐ）、ｒｅｌ－（３Ｒ，６Ｒ）－１，１－ジフルオロ－５－アザスピロ［２．４］ヘプタン－６－カルボン酸（エナンチオマー１）およびｒｅｌ－（３Ｒ，６Ｒ）－１，１－ジフルオロ－５－アザスピロ［２．４］ヘプタン－６－カルボン酸（エナンチオマー２）からなるリストから選択される非天然アミノ酸を表し、
Ｘ^１０は、天然アミノ酸Ｉを表すか、またはＬ－シクロペンチルグリシン（Ｃｐｇ）、Ｌ－シクロヘキシルグリシン（Ｃｈｇ）、（Ｓ）－２－アミノ－３－エチル－ペンタン酸、３－クロロフェニルグリシン（（３－クロロ－Ｐｈ）Ｇ）、Ｌ－ｔｅｒｔ－ブチルグリシン、ａｌｌｏ－Ｌ－イソロイシン（ａｌｌｏ－Ｉ）、Ｌ－シクロブチルグリシン、Ｌ－ノルバリン（Ｎｖａ）および（２Ｓ）－２－（アミノ）－２－［（１Ｓ，３Ｒ）－３－ヒドロキシシクロヘキシル］酢酸からなるリストから選択される非天然アミノ酸を表し、
Ｘ^１１は、天然アミノ酸Ｃを表すか、またはＬ－Ｎ－メチルシステイン（（Ｎ－Ｍｅ）Ｃ）およびＬ－ペニシラミン（Ｐｅｎ）からなるリストから選択される非天然アミノ酸を表し、
Ｘ^１２は、天然アミノ酸Ｉを表すか、又はａｌｌｏ－Ｌ－イソロイシン（ａｌｌｏ－Ｉ）、（Ｓ）－２－アミノ－２－シクロブチル酢酸（Ｃｂｇ）、（２Ｓ，３Ｓ）－２－（（アミノ）メチル）－３－メチルペンタン酸、Ｌ－フェニルグリシン（Ｐｈｇ）、２－［（１Ｓ，２Ｓ）－１－（アミノ）－２－メチルブチル］－１，３－オキサゾール－４－カルボン酸、２－メチル－Ｄ－アロイソロイシン、Ｌ－ノルバリン（Ｎｖａ）、Ｌ－２－アミノ酪酸（Ａｂｕ）、Ｌ－ｔｅｒｔ－ブチルグリシン及びアミノイソ酪酸（Ａｉｂ）からなるリストから選択される非天然アミノ酸を表し、
および、ｕおよびｔおよびｓがすべて０のとき、Ｘ^１２の末端カルボキシル基は置換されていないか、またはアミド化されており、
Ｘ^１３は、Ｐ、Ａ、Ｓ、Ｔ、Ｇ、Ｄ、Ｅ、ＱもしくはＮからなるリストから選択される天然アミノ酸を表すか、またはＮ－メチル－グリシン（（Ｎ－Ｍｅ）Ｇ）、５－アザスピロ［２．４］ヘプタン－６－カルボン酸、Ｌ－２－アミノ酪酸（Ａｂｕ）、２－アミノイソ酪酸（Ａｉｂ）、２－メチル－Ｌ－プロリン（２－Ｍｅ）Ｐ、ヒドロキシプロリン（Ｈｙｐ）、２，３，３ａ，４，５，６，７，７ａ－オクタヒドロインドール－２－カルボン酸（Ｏｉｃ）、トランス－４－フルオロプロリン（（トランス－４－フルオロ）Ｐ）、（２Ｓ，４Ｓ）－４－フルオロプロリン（（シス－４－フルオロ）Ｐ）、Ｌ－４，４－ジフルオロプロリン（（ジフルオロ）Ｐ）、Ｌ－シクロペンチルグリシン（Ｃｐｇ）、（Ｓ）－２－アミノ－２－シクロブチル酢酸（Ｃｂｇ）および（２Ｓ）－ピロリジン－２－イル酢酸（ベータ－ホモ－Ｐ）からなるリストから選択される非天然アミノ酸を表すが、
一方で、Ｌ－立体配置の天然アミノ酸および／または非天然アミノ酸のそれぞれは、Ｄ－立体配置の立体異性体で置き換えることができ、
および、ｕおよびｔが共に０であり、ｓが０とは異なっているとき、Ｘ^１３の末端カルボキシル基は置換されていないか、またはアミド化されており、
ｓは、０から３までの整数を表し、
Ｘ^１４は、任意の天然アミノ酸または非天然アミノ酸を表すが、一方で任意の天然アミノ酸および／または非天然アミノ酸はＤ－またはＬ－立体配置であることができ、
および、ｕが０であり、ｔが０とは異なっているとき、Ｘ^１４の末端カルボキシル基は置換されていないか、またはアミド化されており、
ｔは、０から４までの整数を表し、
Ｘ^１５は、式（ＩＩｂ）

［ここで、
＊は、隣接するアミノ酸の末端カルボキシル基への結合を示し、
Ａ^１は、結合またはＣ_１－Ｃ_６－アルキレンであり、ここで、Ｃ_１－Ｃ_６－アルキレン中の１つのＣＨ_２基は－Ｏ－または－Ｓ－と交換されていてもよく、およびＣ_１－Ｃ_６－アルキレンは、ヒドロキシ、メトキシ、エトキシ、カルボキシ、アミノおよびハロゲンからなる群から選択された同一または異なるラジカルによって、最大で三置換され、
Ｂ^１は、存在しないか、またはアリール、ヘテロアリール、Ｃ_３－Ｃ_８－シクロアルキルまたはＣ_３－Ｃ_７－ヘテロシクロアルキルであり、
ここで、アリール、ヘテロアリール、Ｃ_３－Ｃ_８－シクロアルキルおよびＣ_３－Ｃ_７－ヘテロシクロアルキルは、Ｃ_１－Ｃ_４－アルキル、ヒドロキシル、メトキシ、エトキシ、カルボニル、カルボキシ、アミノおよびハロゲンの群から選択される同一または異なるラジカルによって、最大で三置換されることができ、および
Ｒ^２は、水素、ハロゲン、アミノ、ヒドロキシルまたはＣ_１－Ｃ_２０－アルキルであり、ここで、Ｃ_１－Ｃ_２０－アルキルは、ヒドロキシル、カルボキシ、アミノおよびハロゲンからなる群から選択される同一または異なるラジカルによって最大で三置換される］
の基を表し、
ｕは、０または１の整数を表し、
ただし、Ｘ^１～Ｘ^１４の少なくとも１つは非天然アミノ酸である〕
を含み、本質的にそれからなり、またはそれからなり、単離および／または精製することができる、ペプチドまたは誘導体、プロドラッグ、類似体、薬学的に許容される塩、溶媒和物または塩の溶媒和物を含有する化合物を提供する。

本発明はさらに、以下の式（ＩＩ）

〔式中、
Ｘ^１は、天然アミノ酸または非天然アミノ酸を表し、
ｑは、０または１の整数を表し、
Ｘ^２は、天然アミノ酸Ｉを表し、
ｒは、０または１の整数を表し、
Ｘ^３は、天然アミノ酸Ｃまたは非天然アミノ酸Ｌ－ペニシラミン（Ｐｅｎ）を表し、
Ｘ^４は、天然アミノ酸Ｓを表し、
Ｘ^５は、天然アミノ酸Ｒまたは非天然アミノ酸Ｎ（５）－メチル－Ｌ－アルギニン（（Ｍｅ）Ｒ）を表し、
Ｘ^６は、天然アミノ酸Ｓを表し、
Ｘ^７は、天然アミノ酸Ｌまたは非天然アミノ酸Ｌ－ｔｅｒｔ－ブチルアラニン（（ｔＢｕ）Ａ）を表し、
Ｘ^８は、天然アミノ酸Ｐまたは非天然アミノ酸Ｌ－プロリン（３，４－_２Ｈ）を表し、
Ｘ^９は、天然アミノ酸Ｐまたは非天然アミノ酸２，３，３ａ，４，５，６，７，７ａ－オクタヒドロインドール－２－カルボン酸（Ｏｉｃ）を表し、
Ｘ^１０は、天然アミノ酸Ｉを表し、
Ｘ^１１は、Ｌ－Ｎ－メチルシステイン（（Ｎ－Ｍｅ）Ｃ）およびＬ－ペニシラミン（Ｐｅｎ）からなるリストから選択される非天然アミノ酸を表し、
Ｘ^１２は、天然アミノ酸Ｉを表し、
Ｘ^１３は、天然アミノ酸Ｐを表し、
ｓは、０または１の整数を表し、
Ｘ^１４は、Ｄ、ＱおよびＥからなるリストから選択される天然アミノ酸を表し、
ｔは、０または１の整数を表し、
ここで、前記ペプチドのＮ末端は、置換されていないか、アセチル化されているか、またはＣ_１－Ｃ_２０－アルキルで一置換もしくは二置換されており、
前記ペプチドのＣ末端は置換されていないか、またはアミド化されており、および
前記ペプチドは、環化しており、好ましくはＸ^３およびＸ^１１を結合する連結を介して環化されている〕
のペプチドまたは誘導体、プロドラッグ、類似体、薬学的に許容される塩、溶媒和物または塩の溶媒和物を含有する化合物を提供する。

本明細書で別段の定義がない限り、本出願で使用される科学用語および技術用語は、当業者によって一般に理解される意味を有するものである。一般に、本明細書に記載される化学、分子生物学、細胞および癌生物学、免疫学、微生物学、薬理学、ならびにタンパク質および核酸化学に関連して使用される命名法、ならびにそれらの技術は当技術分野で周知であり、一般に使用されるものである。

本明細書全体を通して、用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」または「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」もしくわ「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」などのその変形は、指定された整数（または構成要素）または整数（または構成要素）の群の包含を意味すると理解されるが、他の整数（または構成要素）または整数（または構成要素）の群の排除は意味しないと理解される。単数形「ａ」、「ａｎ」および「ｔｈｅ」は文脈が別段明確に指示しない限り、複数形を含む。用語「含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」および「含有する（ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ）」は「含むが～に限定されない（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ ｂｕｔ ｎｏｔ ｌｉｍｉｔｅｄ ｔｏ）」を意味するために使用され、この表現は交換可能に使用することができる。特に、「ペプチドを含有する化合物」という表現は定義されたペプチド配列を含有し、ペプチドに共有結合したさらなる化学基または置換基、例えば、ペプチドまたは任意の他の化学基の薬力学的または薬物動態学的特性を増強するアミノ酸、脂肪酸、化学基を任意に含有することができる化合物を意味する。また、「ペプチドを含有する化合物」という表現は、ペプチドに共有結合したさらなる化学基または置換基を含まない、定義されたペプチド配列を明確に含むことも理解されるべきである。

本明細書中で使用される場合、以下の用語は特に明記しない限り、それらに帰する意味を有する。「から本質的になる（Ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｏｆ）」は、ペプチドが、比較されるペプチドと少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であると理解される。

用語「タンパク質」、「ポリペプチド」および「ペプチド」は、好ましくはペプチド（アミド）結合によって、互いに連結された２つ以上のアミノ酸の配列を広く指すために互換的に使用される。ペプチド（アミド）結合は１つのアミノ酸のカルボキシル基が別のアミノ酸のアミノ基と反応する場合に形成される。用語「タンパク質」、「ポリペプチド」および「ペプチド」はアミノ酸のポリマーの特定の長さを示さず、ポリペプチドが組換え技術、化学合成または酵素合成を使用して産生されるか、または天然に存在するかどうかを意味または区別することも意図されないことをさらに理解されるべきである。さらに、ペプチドは、本出願の定義下でアミノ酸でない１つ以上の部分を含み得ることが理解されるべきである。これらの部分は、好ましくはペプチドのＮ末端およびＣ末端に存在する。

本明細書で使用される「アミノ酸」または「任意のアミノ酸」とはアミン（－ＮＨ_２）およびカルボキシル（－ＣＯＯＨ）官能基を側鎖とともに含む有機化合物を指し、天然に存在するアミノ酸（α－Ｌ－アミノ酸など）、非天然アミノ酸（ｕｎｎａｔｕｒａｌ ａｍｉｎｏ ａｃｉｄｓ）、修飾アミノ酸（ｍｏｄｉｆｉｅｄ ａｍｉｎｏ ａｃｉｄｓ）、および非天然アミノ酸（ｎｏｎ－ｎａｔｕｒａｌ ａｍｉｎｏ ａｃｉｄｓ）を含む、ありとあらゆるアミノ酸を指す。「天然アミノ酸」とは天然に見出されるものを含み、例えば、ペプチド鎖に結合して、膨大なタンパク質の構成単位を形成する２３種のアミノ酸を含む。これらは主にＬ立体異性体であるが、細菌のエンベロープおよびいくつかの抗生物質にはＤ－アミノ酸が存在する。表２には標準的な遺伝暗号での２０種のタンパク構成天然アミノ酸が列挙されている。「非標準的である（ｎｏｎ－ｓｔａｎｄａｒｄ）」天然アミノ酸は、ピロリジン（メタン産生生物および他の真核生物に見出される）、セレノシステイン（多くの非真核生物ならびにほとんどの真核生物に存在する）、およびＮ－ホルミルメチオニン（細菌、ミトコンドリアおよび葉緑体における開始コドンＡＵＧによってコードされる）である。

「非天然（Ｕｎｎａｔｕｒａｌ）」または「非天然（ｎｏｎ－ｎａｔｕｒａｌ）」アミノ酸は天然に存在するか、または化学的に合成される非タンパク構成アミノ酸（すなわち、遺伝暗号に天然にコードされていないか、または見出されていないアミノ酸）である。１４０を超える天然アミノ酸が知られており、数千の組み合わせが考えられる。「非天然」アミノ酸の例にはβ－アミノ酸（β^３およびβ^２）、ホモアミノ酸、プロリンおよびピルビン酸誘導体、３－置換アラニン誘導体、グリシン誘導体、環置換フェニルアラニンおよびチロシン誘導体、線状核アミノ酸、ジアミノ酸、Ｄ－アミノ酸、およびＮ－メチルアミノ酸が含まれる。非天然または非天然アミノ酸には修飾アミノ酸も含まれる。「修飾」アミノ酸には、アミノ酸に天然に存在しない基（単数）、基（複数）、または化学的部分を含むように化学的に修飾されたアミノ酸（例えば、天然アミノ酸）が含まれる。本発明によれば、好ましい非天然アミノ酸を表１に列挙する。表１はＤ－および／またはＬ－立体異性体として非天然アミノ酸を示すが、本発明による好ましい非天然アミノ酸は表１に列挙される非天然アミノ酸のＤ－およびＬ－立体異性体の両方である。

表１：好ましい非天然アミノ酸

より好ましい非天然アミノ酸は、Ｎ－メチル－アラニン （Ｎ－Ｍｅ）Ａ、Ｎ－メチル－グリシン（（Ｎ－Ｍｅ）Ｇ）、（１Ｒ，３Ｓ，４Ｓ）－２－アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－３－カルボン酸、Ｌ－３－ブロモフェニルアラニン（（３－ブロモ）Ｆ）、Ｌ－Ｎ，Ｎ－ジメチルアラニン（（Ｎ，Ｎ－ジＭｅ）Ａ）、Ｎ，Ｎ－ジメチルグリシン（（Ｎ，Ｎ－ジＭｅ）Ｇ）、Ｎ－フェニルグリシン（（Ｎ－Ｐｈ）Ｇ）、（Ｒ）－ピペリジン－３－カルボン酸、（Ｓ）－ピペリジン－３－カルボン酸、Ｌ－ｔｅｒｔ－ブチルアラニン（（ｔＢｕ）Ａ）、Ｌ－２－ピリジルアラニン（２－Ｐａｌ）、Ｌ－３－ピリジルアラニン（３－Ｐａｌ）、Ｌ－４－ピリジルアラニン（４－Ｐａｌ）、３－（アミノメチル）安息香酸、３－アミノ－２，２－ジメチルプロピオン酸、３－アミノ－３－メチル酪酸、４－（アミノメチル）安息香酸、Ｌ－２－アミノ酪酸（Ａｂｕ）、１－アミノシクロブタン－１－カルボン酸（ＡＣＢＡ）、６－アミノヘキサン酸（Ａｈｘ）、２－アミノイソ酪酸（Ａｉｂ）、Ｌ－２－チエニルアラニン（ベータ－２－チエニルアラニン）、ベータ－アラニン（ベータ－Ａ）、ベータ－プロリン（ベータ－Ｐ）、Ｌ－シトルリン（Ｃｉｔ）、Ｌ－２，４－ジアミノ酪酸（Ｄａｂ）、Ｌ－２，３－ジアミノプロピオン酸（Ｄａｐ）、ガンマ－アミノ酪酸（ガンマ－Ａｂｕ）、Ｌ－３－メチルヒスチジン（３－Ｍｅ）Ｈ）、Ｌ－ジヒドロオロチン酸（Ｈｏｏ）、Ｌ－ノルロイシン（Ｎｌｅ）、Ｎ－メチル－Ｌ－プロリン（（Ｎ－Ｍｅ）Ｐ）、Ｌ－ノルバリン（Ｎｖａ）、Ｌ－オルニチン（Ｏｒｎ）、Ｌ－ピペコリン酸（Ｐｉｐ）、（２Ｓ）－２［（アミノ）－２－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）］酢酸；２，３，３ａ，４，５，６，７，７ａ－オクタヒドロインドール－２－カルボン酸（Ｏｉｃ）、Ｌ－Ｎ－メチルシステイン（（Ｎ－Ｍｅ）Ｃ）、Ｎ（５）－メチル－Ｌ－アルギニン（（Ｍｅ）Ｒ）、Ｌ－ペニシラミン（Ｐｅｎ）およびトラネキサム酸（トラネキサミック）からなるリストから選択される。

最も好ましい非天然アミノ酸は、Ｎ－メチル－Ｌ－アラニン （Ｎ－Ｍｅ）Ａ、Ｎ－メチル－グリシン（（Ｎ－Ｍｅ）Ｇ）、Ｌ－ノルロイシン（Ｎｌｅ）、Ｌ－ノルバリン（Ｎｖａ）、Ｌ－オルニチン（Ｏｒｎ）、Ｎ（５）－メチル－Ｌ－アルギニン（（Ｍｅ）Ｒ）、Ｌ－ｔｅｒｔ－ブチルアラニン（（ｔＢｕ）Ａ）、２，３，３ａ，４，５，６，７，７ａ－オクタヒドロインドール－２－カルボン酸（Ｏｉｃ）、Ｌ－Ｎ－メチルシステイン（（Ｎ－Ｍｅ）Ｃ）およびＬ－ペニシラミン（Ｐｅｎ）からなるリストから選択される。

さらに、本発明によるペプチドは、本発明の定義下でアミノ酸ではない１つ以上の化学基を含み得ることが理解されるべきである。これらの化学基はペプチドのＮおよび／またはＣ末端に存在することができ、式Ｘ^０およびＸ^１５によって表される。本発明のペプチドのすべてのアミノ酸および化学基は、ペプチド（アミド）結合を介して結合されることを理解されるべきである。一般に、ペプチドはα－アミノ酸のα－アミノ基とカルボキシ基を連結することによって形成され、α－アミノ酸はα－ペプチド結合によって連結される。本発明によれば、ペプチド結合は、それぞれの天然または非天然アミノ酸中に存在する任意のカルボキシル基およびアミノ基によって形成することができる。例えば、α－アミノ基に加えて第２のアミノ基を含むα－アミノ酸（例えば、Ｌ－リジン）またはα－カルボキシ基に加えて第２のカルボキシ基を含むα－アミノ酸（例えば、Ｌ－アスパラギン酸およびＬ－グルタミン酸）は、追加のアミノ基またはカルボキシ基を介して連結することができる。

当業者の理解によれば、本明細書に開示されるペプチド配列は、α－ペプチド結合を介して連結されるアミノ酸の配列を表す。α－ペプチド結合ではないペプチド結合を介して連結されたアミノ酸は「＊」でマークされている。「＊」はアミノ酸の左側または右側のいずれかにあり、そのアミノ酸の追加のアミノ基または追加のカルボキシ基が、隣接するアミノ酸（例えば（＊Ｌ）、（ｅ＊）、（＊Ｄａｐ）など）へのペプチド結合に使用されることを示す。

当業者の理解によれば、本明細書に開示されるペプチド配列は左から右に進み、配列の左端がペプチドの「Ｎ末端（Ｎ－ｔｅｒｍｉｎｕｓ）」（「アミノ末端」、「Ｎ末端（Ｎ－ｔｅｒｍｉｎａｌ ｅｎｄ）」）であり、配列の右端がペプチドの「Ｃ末端（Ｃ－ｔｅｒｍｉｎｕｓ）」（「カルボキシ末端」、「Ｃ末端（Ｃ－ｔｅｒｍｉｎａｌ ｅｎｄ）」）であることが示される。この用語Ｎ末端（アミノ末端、Ｎ末端）は、ペプチドが実際にＮ末端にアミノ基を含むかどうかにかかわらず適用される。この用語Ｃ末端（カルボキシ末端、Ｃ末端）は、ペプチドが実際にＣ末端にカルボキシ基を含むかどうかにかかわらず適用される。用語「末端アミノ基」は、Ｎ末端に存在する任意のアミノ基を意味し、用語「末端カルボキシル基」は、Ｃ末端に存在する任意のカルボキシル基を意味する。

本発明によれば、ｐが１を表す場合、Ｎ末端はＸ^０によって形成することができ。あるいは、ｑが少なくとも１を表し、ｐが０を表すとき、Ｎ－終端はＸ^１によって形成されることができる。あるいは、ｒが１を表し、ｐとｑが両方とも０を表すとき、Ｎ－終端はＸ^２によって形成され得る。ｐ、ｑおよびｒがすべて０を表す場合、Ｎ末端は、線状ペプチドの場合にはＸ^３によって形成される。Ｘ^３およびＸ^１１を結合する連結を介して環化され、およびｐ、ｑおよびｒがすべて０を表す場合、ペプチドはＮ末端を含まない。

本発明によれば、ｕが１を表す場合、Ｃ末端はＸ^１５によって形成することができる。あるいは、ｔが少なくとも１の整数を表し、ｕが０を表すとき、Ｃ末端はＸ^１４によって形成され得る。あるいは、ｓが１を表し、ｔおよびｕが両方とも０を表す場合、Ｃ末端はＸ^１３によって形成することができる。ｓ、ｔおよびｕがすべて０を表す場合、Ｃ末端はＸ^１２によって形成される。

本発明において、本明細書で使用される天然および非天然アミノアシル残基の名称は、好ましくは有機化学の命名法に関するＩＵＰＡＣ委員会およびα－アミノ酸の命名法（勧告、１９７４）、生化学、１４（２）、（１９７５）に記載される生化学命名法に関するＩＵＰＡＣ－ＩＵＢ委員会によって示唆される命名規則に従っている。

本明細書において、天然に存在するタンパク質構成アミノ酸は、通常、それらの従来の１文字略語によって指定される。あるいは、それらはまた、それらの３文字の略語（例えば、特に配列リストにおいて）によって、または以下の表２に示されるようなそれらのフルネームによって言及され得る：
表２：天然アミノ酸の標準的な略語

タンパク質を構成しないまたは天然に存在しないアミノ酸の場合、それらがそれらのフルネーム（例えば、オルニチンなど）によって言及されない限り、しばしば使用される３～６文字コードが、以下の略語リスト（表３）に示されるような略語を含み、それらの残基について使用される。

本明細書で使用される用語「Ｌ－アミノ酸」はアミノ酸の「Ｌ」異性体形態を指し、逆に、用語「Ｄ－アミノ酸」は、アミノ酸の「Ｄ」異性体形態を指す。さらに、Ａｌａ／Ａ、Ａｒｇ／Ｒなどの大文字でＬ－アミノ酸を、およびａｌａ／ａ、ａｒｇ／ｒなどの小文字でＤ－アミノ酸を示すことは、従来の方法である。

上記表２に示す形式、すなわち、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ等および本明細書において一般に使用されている３文字のコードは、明示的に別段の指示がない限り、一般に、Ｄ－及びＬ－形態ならびにホモ－及びノル－形態を含むものとする。接頭辞「ノル（ｎｏｒ）」は１個の炭素原子とそれに付随する水素原子を除去することによって親化合物から誘導され得る構造類似体を指す。接頭辞「ホモ（ｈｏｍｏ）」は、相同系列における次に高いメンバーを示す。特定の異性体形態への言及は上記の大文字の接頭辞Ｌ－またはＤ－（例えば、Ｄ－Ａｒｇ、Ｌ－Ａｒｇなど）によって示される。したがって、ホモ形態またはノル形態への特定の言及はそれぞれの接頭辞（例えば、ホモ－Ａｒｇ、ホモ－Ｒ、ノル－Ａｒｇ、ノル－Ｒ、ホモ－Ｃｙｓ、ホモ－Ｃなど）によって明示的に示される。

用語「Ｃ_１－Ｃ_６－アルキル」とは、１、２、３、４、５または６個の炭素原子を有する直鎖状または分枝鎖状の飽和一価炭化水素基、例えばメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｓｅｃ－ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ－ブチル、ペンチル、イソペンチル、２－メチルブチル、１－メチルブチル、１－エチルプロピル、１，２－ジメチルプロピル、ネオ－ペンチル、１，１－ジメチルプロピル、ヘキシル、１－メチルペンチル、２－メチルペンチル、３－メチルペンチル、４－メチルペンチル、１－エチルブチル、２－エチルブチル、１，１－ジメチルブチル、２，２－ジメチルブチル、３，３－ジメチルブチル、２，３－ジメチルブチル、１，２－ジメチルブチルまたは１，３－ジメチルブチル基、またはそれらの異性体を意味する。特に、前記基は１、２、３または４個の炭素原子（「Ｃ_１－Ｃ_４－アルキル」）、例えば、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｓｅｃ－ブチル イソブチル、またはｔｅｒｔ－ブチル基、より詳細には１、２または３個の炭素原子（「Ｃ_１－Ｃ_３－アルキル」）、例えば、メチル、エチル、ｎ－プロピルまたはイソプロピル基を有する。特に好ましいのは、メチル、エチル、ｎ－プロピルである。最も好ましいのはメチルである。

用語「Ｃ_１－Ｃ_２０－アルキル」とは、１～２０個の炭素原子を有する直鎖状または分岐鎖状の飽和一価炭化水素基、例えば、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｓｅｃ－ブチル イソブチル、ｔｅｒｔ－ブチルまたはペンチル、イソペンチル、ヘキシル、イソヘキシル、ヘプチル、イソヘプチル、オクチルおよびイソオクチル、ノニル、デシル、ドデシルまたはエイコシルを意味する。

用語「Ｃ_１－Ｃ_４－アルキレン」とは、１～４個の炭素原子を有する直鎖状または分枝鎖状の炭化水素架橋、例えば、メチレン、エチレン、プロピレン、（α－メチルエチレン、β－メチルエチレン、α－エチルエチレン、β－エチルエチレン、ブチレン、α－メチルプロピレン、β－メチルプロピレンおよびγ－メチルプロピレン）を意味する。

用語「Ｃ_１－Ｃ_６－アルキレン」とは、１～６個の炭素原子を有する直鎖状または分岐鎖状の炭化水素架橋、例えば、メチレン、エチレン、プロピレン、（α－メチルエチレン、β－メチルエチレン、α－エチルエチレン、β－エチルエチレン、ブチレン、α－メチルプロピレン、β－メチルプロピレン、γ－メチルプロピレン、α－エチルプロピレン、β－エチルプロピレン、γ－エチルプロピレン、ペンチレンおよびヘキシレンを意味する。

用語「Ｃ_３－Ｃ_８－シクロアルキル」とは、３、４、５、６、７または８個の炭素原子を含有する飽和炭化水素環を意味する。前記Ｃ_３－Ｃ_８－シクロアルキル基は例えば、単環式炭化水素環、例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチルまたはシクロオクチル基、二環式炭化水素環、例えば、ビシクロ［４．２．０］オクチルまたはオクタヒドロペンタレニル、またはノルボランまたはアダマンタンなどの架橋またはケージ飽和環基、およびキュバンである。

用語「Ｃ_３－Ｃ_７－ヘテロシクロアルキル」とは、Ｎ、ＯおよびＳ系列からの１個または２個の同一または異なった環ヘテロ原子を含有する４、５、６または７を有する飽和複素環を意味し、前記ヘテロシクロアルキル基は、炭素原子のいずれか１個または存在する場合には窒素原子を介して分子の残りの部分に結合することができる。前記Ｃ_３－Ｃ_７－ヘテロシクロアルキル基は例えば、これらに限定されないが、４員環、例えばアゼチジニル、オキセタニルまたはチエタニル；または例えば、５員環、例えばテトラヒドロフラニル、１，３－ジオキソラニル、チオラニル、ピロリヂニル、イミダゾリジニル、ピラゾリジニル、１，１－ジオキシドチオラニル、１，２－オキサゾリジニル、１，３－オキサゾリジニルまたは１，３－チアゾリジニル；または例えば、６員環、例えばテトラヒドロピラニル、テトラヒドロチオピラニル、ピペリジニル、モルホリニル、ジチアニル、チオモルホリニル、ピペラジニル、ヘキサヒドロピリミジニル、１，３－ジオキサニル、１，４－ジオキサニルまたは１，２－オキサジナニル（ｏｘａｚｉｎａｎｙｌ）；または例えば、７員環、たとえばアゼパニル、１，４－ジアゼパニルまたは１，４－オキサゼパニルであり得る。

用語「アリール」とは、６～１０個の炭素原子を有する不飽和または部分的に不飽和の環を意味する。好ましいアリール基は、フェニルおよびナフチルである。

用語「ヘテロアリール」とは、５、６、８、９、１０、１１、１２、１３または１４個の環原子（「５～１４員ヘテロアリール」基）、特に５、６、９または１０個の環原子を有する一価、単環式、二環式または三環式芳香族環を意味し、これは、系列：Ｎ、Ｏおよび／またはＳからの少なくとも１個の環ヘテロ原子および任意に１個、２個または３個のさらなる環ヘテロ原子を含み、環炭素原子を介して、または任意に環窒素原子（原子価によって許容される場合）を介して結合される。前記ヘテロアリール基は例えば、５員ヘテロアリール基、例えばチエニル、フラニル、ピロリル、オキサゾリル、チアゾリル、イミダゾリル、ピラゾリル、イソオキサゾリル、イソチアゾリル、オキサジアゾリル、トリアゾリル、チアジアゾリルまたはテトラゾリル；または例えば、６員ヘテロアリール基、例えばピリジニル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニルまたはトリアジニル；または例えば、三環式ヘテロアリール基、例えばカルバゾリル、アクリジニルまたはフェナジニル；または例えば、９員ヘテロアリール基、例えばベンゾフラニル、ベンゾチエニル、ベンゾオキサゾリル、ベンゾイソオキサゾリル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾトリアゾリル、インダゾリル、インドリル、イソインドリル、インドリジニルまたはプリニル；または例えば、１０員ヘテロアリール基、例えばキノリニル、キナゾリニル、イソキノリニル、シンノリニル、フタラジニル、キノキサリニルまたはプテリジニルであり得る。

一般に、特に言及しない限り、ヘテロアリールまたはヘテロアリーレン基は、その全ての可能な異性体形態、例えば：互変異性体および分子の残りの部分への結合点に関する位置異性体を含む。したがって、いくつかの例示的な非限定的な例では、用語ピリジニルとは、ピリジン－２－イル、ピリジン－３－イルおよびピリジン－４－イルを含み、または用語チエニルとは、チエン－２－イルおよびチエン－３－イルを含む。

配列のカルボキシ末端（Ｃ末端）に「－ＯＨ」部分または「－ＮＨ_２」部分のいずれかを組み込んだ配列が本明細書に開示されている。配列のＣ末端の「－ＯＨ」部分または「－ＮＨ_２」部分はそれぞれＣ末端にカルボキシ基またはアミド（－（Ｃ＝Ｏ）－ＮＨ_２）基が存在することに対応するヒドロキシ基またはアミノ基を示す。本発明のそれぞれの配列において、Ｃ末端「－ＯＨ」部分はＣ末端「－ＮＨ_２」部分に置換されていてもよく、本発明では「アミド化Ｃ末端」とも呼ばれ、逆もまた同様である。しかしながら、前記代替物の中ではＣ末端「－ＯＨ」部分が好ましい。

用語「アセチル化された」（「Ａｃ」とも略される）とは、ペプチドのＮ末端のアセチル化（ペプチドのＮ末端はアセチル化されている）によるＮ末端部分のアセチル保護を指す。

さらなる実施形態によれば、本発明は、式（Ｉ）を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなる、単離および／または精製され得る、ペプチドまたは誘導体、プロドラッグ、類似体、薬学的に許容される塩、溶媒和物または塩の溶媒和物を含有する化合物を提供し、ここで、
Ｘ^０は、（１Ｓ，２Ｓ，４Ｓ）－ビシクロ［２．２．１］ヘプト－５－エン－２－イル酢酸、（２，４－ジオキソイミダゾリジン－１－イル）酢酸、２－（チオモルホリン）酢酸（（２－チオモルホリン）アセチル）、２－（Ｎ－イソプロピル－Ｎ－メチルアミノ）酢酸、（Ｓ）－３－メチルバレリアン酸（（Ｓ）－３－メチルペンタン酸）、２－（３－ピリジル）酢酸、２－（シクロヘキシルアミノ）酢酸（２－（シクロヘキシルアミノ）アセチル）、２－（ジエチルアミノ）酢酸（２－（ジエチルアミノ）アセチル）、２－（モルホリン）酢酸（２－（モルホリン）アセチル）、２－（Ｎ－メチル－Ｎ－シクロプロピルアミノ）酢酸（２－（Ｎ－メチル－Ｎ－シクロプロピルアミノ）アセチル）、２－（ピペリジン）酢酸（２－（ピペリジン）アセチル）、２－（ピロリジン）酢酸（２－（ピロリジン）アセチル）、２－ヒドロキシ酢酸（２－ヒドロキシアセチル）、２－ヒドロキシイソ酪酸（２－ヒドロキシイソブチリック）、３－（アミノメチル）安息香酸、３－メトキシプロピオン酸、４－（アミノメチル）安息香酸、４－メチルペンタン酸（４－メチルバレリック）、５－クロロチオフェン－カルボン酸、１－（アミノメチル）－シクロプロピル－１－カルボン酸（ＡＣＭＰ）、アジピン酸、（Ｓ）－アゼチジン－２－カルボン酸、安息香酸（ベンゾイック）、４－（３，５－ジメチル－１，２－オキサゾール－４－イル）－Ｌ－フェニルアラニン、シクロブタンカルボン酸（シクロブタンカルボキシリック）、２－（シクロブチル）酢酸（シクロブチルアセティック）、シクロブチル酢酸（シクロブチルアセティック）、シクロヘキシル酢酸（シクロヘキシルアセティック）、シクロヘキサンカルボン酸（シクロヘキシルカルボキシリック）、シクロペンタンカルボン酸、シクロペンチル酢酸（シクロペンチルアセティック）、シクロプロパンカルボン酸（シクロプロパンカルボキシリック）、シクロプロピル酢酸、Ｄ－（＋）ビオチン、フマル酸、３－フェニルプロパン酸（ヒドロシンナミック）、イソ酪酸、イソバレリアン酸（イソバレリック）、Ｌ－（＋）－乳酸（ラクティック）、フェニル酢酸、ピペリジン－４－イル酢酸、ピバル酸（ピバリック）、スベリン酸、ｔｅｒｔ－ブチル酢酸、テトラヒドロピラニル－４－酢酸、テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－３－イル酢酸及びトランス－２－（３－（（ｔ－ブトキシ）カルボニルアミノ）シクロヘキシル）酢酸）からなるリストから選択される化学基であり、
ｐは、０または１の整数を表し、
Ｘ^１は、Ａ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｐ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷおよびＹからなるリストから選択される天然アミノ酸を表すか、またはＮ－メチル－アラニン （Ｎ－Ｍｅ）Ａ、Ｎ－メチル－グリシン（（Ｎ－Ｍｅ）Ｇ）、（１Ｒ、３Ｓ、４Ｓ）－２－アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－３－カルボン酸、Ｌ－３－ブロモフェニルアラニン（（３－ブロモ）Ｆ）、Ｌ－Ｎ、Ｎ－ジメチルアラニン（（Ｎ、Ｎ－ジＭｅ）Ａ）、Ｎ，Ｎ－ジメチルグリシン（（Ｎ，Ｎ－ジＭｅ）Ｇ）、Ｎ－フェニルグリシン（（Ｎ－Ｐｈ）Ｇ）、（Ｒ）－ピペリジン－３－カルボン酸、（Ｓ）－ピペリジン－３－カルボン酸、Ｌ－ｔｅｒｔ－ブチルアラニン（（ｔＢｕ）Ａ）、Ｌ－２－ピリジルアラニン（２－Ｐａｌ）、Ｌ－３－ピリジルアラニン（３－Ｐａｌ）、Ｌ－４－ピリジルアラニン（４－Ｐａｌ）、３－（アミノメチル）安息香酸、３－アミノ－２，２－ジメチルプロピオン酸、３－アミノ－３－メチル酪酸、４－（アミノメチル）安息香酸、Ｌ－２－アミノ酪酸（Ａｂｕ）、１－アミノシクロブタン－１－カルボン酸（ＡＣＢＡ）、６－アミノヘキサン酸（Ａｈｘ）、２－アミノイソ酪酸（Ａｉｂ）、Ｌ－２－チエニルアラニン（ベータ－２－チエニルアラニン）、ベータ－アラニン（ベータ－Ａ）、ベータ－プロリン（ベータ－Ｐ）、Ｌ－シトルリン（Ｃｉｔ）、Ｌ－２，４－ジアミノ酪酸（Ｄａｂ）、Ｌ－２，３－ジアミノプロピオン酸（Ｄａｐ）、ガンマ－アミノ酪酸（ガンマ－Ａｂｕ）、Ｌ－３－メチルヒスチジン（３－Ｍｅ）Ｈ）、Ｌ－ジヒドロオロチン酸（Ｈｏｏ）、Ｌ－ノルロイシン（Ｎｌｅ）、Ｎ－メチル－Ｌ－プロリン（（Ｎ－Ｍｅ））Ｐ）、Ｌ－ノルバリン（Ｎｖａ）、Ｌ－オルニチン（Ｏｒｎ）、Ｌ－ピペコリン酸（Ｐｉｐ）、（２Ｓ）－２［（アミノ）－２－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）］酢酸およびトラネキサム酸（トラネキサミック）からなるリストから選択される天然アミノ酸を表し、
一方、Ｌ－立体配置の各天然アミノ酸および／または非天然アミノ酸は、Ｄ－立体配置の立体異性体で置き換えることができ、
ｑは、０から５までの整数を表し、
Ｘ^２は、天然アミノ酸Ｉを表すか、またはＬ－Ｎ－メチルイソロイシン（（Ｎ－Ｍｅ）Ｉ）、ａｌｌｏ－Ｌ－イソロイシン（ａｌｌｏ－Ｉ）、Ｌ－シクロブチルアラニン（Ｃｂａ）、Ｌ－ノルバリン（Ｎｖａ）、Ｌ－２－アミノ酪酸（Ａｂｕ）、（２Ｓ，３Ｓ）－２－［（３Ｒ）－３－アミノ－２－オキソピロリジン－１－イル］－３－メチルペンタン酸、（２Ｓ，３Ｓ）－２－［２－オキソピペラジン－１－イル］－３－メチルペンタン酸および（２Ｓ，３Ｓ）－２－［（３Ｓ）－２－オキソピペラジン－１－イル］－３－メチルペンタン酸からなるリストから選択される非天然アミノ酸を表し、
一方、Ｌ－立体配置の各天然アミノ酸および／または非天然アミノ酸は、Ｄ－立体配置の立体異性体で置き換えることができ、
ｒは、０または１の整数を表し、
Ｘ^３は、天然アミノ酸Ｃまたは非天然アミノ酸Ｌ－ペニシラミン（Ｐｅｎ）を表し、
Ｘ^４は、Ｓ、Ｃ、Ｔ、ＲおよびＫからなるリストから選択される天然アミノ酸を表し、
Ｘ^５は、天然アミノ酸Ｒまたは非天然アミノ酸Ｎ（５）－メチル－Ｌ－アルギニン（（Ｍｅ）Ｒ）を表し、
Ｘ^６は、天然アミノ酸Ｓを表すか、またはａｌｌｏ－Ｌ－トレオニン（ａｌｌｏ－Ｔ）およびＬ－２，３－ジアミノプロピオン酸（Ｄａｐ）からなるリストから選択される非天然アミノ酸を表し、
Ｘ^７は、ＬおよびＮからなるリストから選択される天然アミノ酸を表すか、または２，５－ジフルオロ－Ｌ－フェニルアラニン（（２，５－ジフルオロ）Ｆ）、Ｌ－２－ブロモフェニルアラニン（（２－ブロモ）Ｆ）、２－クロロ－Ｌ－フェニルアラニン（（２－クロロ）Ｆ）、Ｌ－４－ブロモフェニルアラニン（（４－ブロモ）Ｆ）、４－フルオロ－Ｌ－ロイシン（（４－フルオロ）Ｌ）、Ｌ－ｔｅｒｔ－ブチルアラニン（（ｔＢｕ）Ａ）、Ｌ－ｔｅｒｔ－ブチルグリシン（（ｔＢｕ）Ｇ）、５，５，５－トリフルオロ－Ｌ－ロイシン（（（トリフルオロ）Ｌ）、（Ｓ）－２－（アミノ）－１，６－ヘキサン二酸（ＡＡＤ）、（２Ｓ）－２－アミノ－４，４，４－トリフルオロブタン酸、Ｌ－２－アミノ－４－シアノ酪酸（Ｃｎｂａ）、（Ｓ）－（トリフルオロメチル）－Ｌ－システイン、（２Ｓ）－２－アミノ－３－（１－メチルシクロプロピル）プロパン酸、（２Ｓ）－３－（２，３－ジフルオロフェニル）－２－アミノプロパン酸、２，３，３ａ，４，５，６，７，７ａ－オクタヒドロインドール－２－カルボン酸（Ｏｉｃ）、３－（トリメチルシリル）－Ｌ－アラニンおよび２－アミノ－７－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－７－オキソヘプタン酸からなるリストから選択される非天然アミノ酸を表し、
Ｘ^８は、天然アミノ酸Ｐを表すか、または（１Ｓ，２Ｓ，５Ｒ）－３－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－２－カルボン酸、（１Ｒ，２Ｓ，５Ｓ）－３－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－２－カルボン酸、トランス－４－フルオロプロリン（（トランス－４－フルオロ）Ｐ）、Ｌ－ヒドロキシプロリン（Ｈｙｐ）、（３Ｓ）－モルホリン－３－カルボン酸（モルホリン－３－カルボキシリック）、Ｌ－ピペコリン酸（Ｐｉｐ）および（４ａＲ，６ａＲ，９Ｓ，１１ａＳ）－１１－オキソ－２，３，４，４ａ，６ａ，７，８，９，１１，１１ａ－デカヒドロ－１Ｈ－ピリド［３，２－ｅ］ピロロ［１，２－ａ］アゼピン－９－カルボン酸からなるリストから選択される非天然アミノ酸を表し、
Ｘ^９は、天然アミノ酸Ｐを表すか、または２，３，３ａ，４，５，６，７，７ａ－オクタヒドロインドール－２－カルボン酸（Ｏｉｃ）、（６Ｓ）－５－アザスピロ［２．４］ヘプタン－６－カルボン酸、ｒｅｌ－（１Ｒ，３Ｒ，５Ｒ，６Ｒ）－６－（トリフルオロメチル）－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－３－カルボン酸、（２Ｓ，４Ｓ）－４－トリフルオロメチル－ピロリジン－２－カルボン酸（（４－ＣＦ３）Ｐ）、（２Ｓ，３ａＳ，６ａＳ）－オクタヒドロシクロペンタ［ｂ］ピロール－２－カルボン酸、（１Ｒ，３Ｓ，５Ｒ）－２－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－３－カルボン酸、（２Ｓ）－２－アミノ－４，４，４－トリフルオロブタン酸、Ｌ－トランス－３－ヒドロキシプロリン（（３Ｓ－ＯＨ）Ｐ、トランス－４－フルオロプロリン（（トランス－４－フルオロ）Ｐ）、Ｌ－ヒドロキシプロリン（Ｈｙｐ）、（２Ｓ，４Ｓ）－４－フルオロプロリン（（シス－４－フルオロ）Ｐ）、（３Ｒ，６Ｒ）－１，１－ジフルオロ－５－アザスピロ［２．４］ヘプタン－６－カルボン酸（エナンチオマー１）および（３Ｒ，６Ｒ）－１，１－ジフルオロ－５－アザスピロ［２．４］ヘプタン－６－カルボン酸（エナンチオマー２）からなるリストから選択される非天然アミノ酸を表し、
Ｘ^１０は、天然アミノ酸Ｉを表すか、または（２Ｓ）－２－（アミノ）－２－［（１Ｓ，３Ｒ）－３－ヒドロキシシクロヘキシル］酢酸、３－クロロフェニルグリシン（（３－クロロ－Ｐｈ）Ｇ）、（Ｓ）－２－アミノ－３－エチルペンタン酸、ａｌｌｏ－Ｌ－イソロイシン（ａｌｌｏ－Ｉ）、Ｌ－シクロヘキシルグリシン（Ｃｈｇ）、Ｌ－シクロペンチルグリシン（Ｃｐｇ）、Ｌ－シクロブチルグリシン及びＬ－ノルバリン（Ｎｖａ）からなるリストから選択される非天然アミノ酸を表し、
Ｘ^１１は、天然アミノ酸Ｃを表すか、またはＬ－Ｎ－メチルシステイン（（Ｎ－Ｍｅ）Ｃ）およびＬ－ペニシラミン（Ｐｅｎ）からなるリストから選択される非天然アミノ酸を表し、
Ｘ^１２は、天然アミノ酸Ｉを表すか、または２－［（１Ｓ，２Ｓ）－１－（アミノ）－２－メチルブチル］－１，３－オキサゾール－４－カルボン酸、（Ｓ）－２－アミノ－２－シクロブチル酢酸（Ｃｂｇ）、ａｌｌｏ－Ｌ－イソロイシン（ａｌｌｏ－Ｉ）、Ｌ－フェニルグリシン（Ｐｈｇ）、２－メチル－Ｄ－アロイソロイシンおよび（２Ｓ，３Ｓ）－２－（（アミノ）メチル）－３－メチルペンタン酸からなるリストから選択される非天然アミノ酸を表し、
および、ｕおよびｔおよびｓがすべて０の場合、Ｘ^１２の末端カルボキシル基は置換されていないかまたはアミド化されており、
Ｘ^１３は、Ｐ、ＡおよびＤからなるリストから選択される天然アミノ酸を表すか、または２－メチル－Ｌ－プロリン（２－Ｍｅ）Ｐ、Ｎ－メチル－グリシン（（Ｎ－Ｍｅ）Ｇ）、トランス－４－フルオロプロリン（（トランス－４－フルオロ）Ｐ）、Ｌ－２－アミノ酪酸（Ａｂｕ）、２－アミノイソ酪酸（Ａｉｂ）、ヒドロキシプロリン（Ｈｙｐ）および２，３，３ａ，４，５，６，７，７ａ－オクタヒドロインドール－２－カルボン酸（Ｏｉｃ）からなるリストから選択される非天然アミノ酸を表し、
一方、Ｌ－立体配置の各天然アミノ酸および／または非天然アミノ酸は、Ｄ－立体配置の立体異性体で置き換えることができ、
および、ｕおよびｔが共に０であり、ｓが０とは異なっている場合、Ｘ^１３の末端カルボキシル基は置換されていないか、またはアミド化されており、
ｓは、０から３までの整数を表し、
Ｘ^１４は、Ｄ、Ｅ、Ｇ、Ｋ、Ｎ、Ｐ及びＱからなるリストから選択される天然アミノ酸を表すか、または又は３－カルボキシフェニルアラニン（（３－カルボキシ）Ｆ）、（２Ｓ）－２－アミノ－４－（ベンジルアミノ）－４－オキソブタンカルボン酸（（Ｎ－ベンジル）Ｄ）、Ｎ－メチル－グリシン（（Ｎ－Ｍｅ）Ｇ）、６－アミノヘキサン酸（Ａｈｘ）、（２Ｓ）－ピロリジン－２－イル酢酸（ベータ－ホモ－Ｐ）、Ｌ－２，３－ジアミノプロピオン酸（Ｄａｐ）、Ｌ－オルニチン（Ｏｒｎ）およびトラネキサム酸（トラネキサミック）からなるリストから選択される非天然アミノ酸を表し、
および、ｕが０であり、ｔが０とは異なっている場合、Ｘ^１４の末端カルボキシル基は置換されていないか、またはアミド化されており、
一方、Ｌ－立体配置の各天然アミノ酸および／または非天然アミノ酸は、Ｄ－立体配置の立体異性体で置き換えることができ、
ｔは、０から４までの整数を表し、
Ｘ^１５は、（１Ｒ，３Ｓ）－３－（アミノ）シクロペンタンカルボン酸、（１Ｓ，３Ｒ）－３－（アミノ）シクロペンタンカルボン酸、（Ｒ）－４－アミノ－６－メチルヘプタン酸、（Ｓ）－（１－ピペリジン－３－イル）－酢酸、（Ｓ）－３－（１－ピロリジン－２－イル）－プロピオン酸、（Ｓ）－３－（２Ｈ－テトラゾール－５－イル）プロパン酸、（Ｓ）－ピロリジン－３－カルボン酸、５－アザスピロ［２．４］ヘプタン－１－カルボン酸および（２Ｓ）－３－（トリアゾール－１－イル）－２－（アミノ）プロパン酸からなるリストから選択される化学基であり、
ｕは、０または１の整数を表し、
ただし、前記ペプチドは、少なくとも１つの非天然アミノ酸を含む。

さらなる実施形態によれば、本発明は、式（Ｉ）を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなる、単離および／または精製され得る、ペプチドまたは誘導体、プロドラッグ、類似体、薬学的に許容される塩、溶媒和物または塩の溶媒和物を含有する化合物を提供し、ここで
Ｘ^０は、（１Ｒ，３Ｓ，４Ｓ）－２－アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－３－カルボン酸、（２－チオモルホリン）酢酸、（Ｎ－イソプロピル－Ｎ－メチルアミノ）酢酸、２－（３－ピリジル）酢酸、２－（シクロヘキシルアミノ）酢酸、２－（ジエチルアミノ）酢酸、２－（モルホリン）酢酸、２－（ピペリジン）酢酸、２－（ピロリジン）酢酸、３－（アミノメチル）安息香酸、４－（アミノメチル）安息香酸、１－（アミノメチル）－シクロプロピル－１－カルボン酸（ＡＣＭＰ）、アゼチジン－２－カルボン酸、安息香酸、シクロブチル酢酸、シクロプロピル酢酸、フェニル酢酸、ピペリジン－４－イル酢酸、テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－３－イル酢酸、トラネキサム酸およびトランス－２－（３－（（ｔ－ブトキシ）カルボニルアミノ）シクロヘキシル）酢酸からなるリストから選択される化学基であり、
ｐは、０または１の整数を表し、
Ｘ^１は、Ａ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｐ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷおよびＹからなるリストから選択される天然アミノ酸を表すか、またはＬ－Ｎ，Ｎ－ジメチルアラニン（（Ｎ，Ｎ－ジＭｅ）Ａ）、Ｎ－メチル－アラニン（Ｎ－Ｍｅ）Ａ、Ｎ－メチル－グリシン（（Ｎ－Ｍｅ）Ｇ）、Ｌ－２－ピリジルアラニン（２－Ｐａｌ）、Ｌ－３－ピリジルアラニン（３－Ｐａｌ）、Ｌ－４－ピリジルアラニン（４－Ｐａｌ）、Ｌ－２－アミノ酪酸（Ａｂｕ）、６－アミノヘキサン酸（Ａｈｘ）、２－アミノイソ酪酸（Ａｉｂ）、３－（アミノメチル）安息香酸、３－アミノ－２，２－ジメチルプロピオン酸、３－アミノ－３－メチル酪酸、４－（アミノメチル）安息香酸、ベータ－２－チエニルアラニン、（Ｓ）－ピロリジン－２－カルボン酸（ベータ－Ｐ）、Ｌ－シトルリン（Ｃｉｔ）、Ｌ－２，４－ジアミノ酪酸（Ｄａｂ）、Ｌ－２，３－ジアミノプロピオン酸（Ｄａｐ）、ガンマ－アミノ酪酸（ガンマ－Ａｂｕ）、Ｌ－３－メチルヒスチジン（Ｈ（３－Ｍｅ））、Ｌ－ジヒドロオロチン酸（Ｈｏｏ）、Ｌ－ノルロイシン（Ｎｌｅ）、Ｌ－ノルバリン（Ｎｖａ）、Ｌ－オルニチン（Ｏｒｎ）、Ｌ－ピペコリン酸（Ｐｉｐ）、Ｎ－メチル－Ｌ－プロリン（（Ｎ－Ｍｅ）Ｐ）、トラネキサム酸（トラネキサミック）、（１Ｒ，３Ｓ，４Ｓ）－２－アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－３－カルボン酸および（２Ｓ）－２［（アミノ）－２－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）］酢酸からなるリストから選択される非天然アミノ酸を表し、
一方、Ｌ－立体配置の各天然アミノ酸および／または非天然アミノ酸は、Ｄ－立体配置の立体異性体で置き換えることができ、
ｑは、０から５までの整数を表し、
Ｘ^２は、天然アミノ酸Ｉであるか、またはＬ－Ｎ－メチルイソロイシン（（Ｎ－Ｍｅ）Ｉ）、Ｌ－シクロブチルアラニン（Ｃｂａ）、Ｌ－ノルバリン（Ｎｖａ）およびＬ－２－アミノ酪酸（Ａｂｕ）からなるリストから選択される非天然アミノ酸を表し、
一方、Ｌ－立体配置の各天然アミノ酸および／または非天然アミノ酸は、Ｄ－立体配置の立体異性体で置き換えることができ、
ｒは、０または１の整数を表し、
Ｘ^３は、天然アミノ酸Ｃまたは非天然アミノ酸Ｌ－ペニシラミン（Ｐｅｎ）を表し、
Ｘ^４は、ＳおよびＴからなるリストから選択される天然アミノ酸を表し、
Ｘ^５は、天然アミノ酸Ｒを表し、
Ｘ^６は、天然アミノ酸Ｓまたは非天然アミノ酸ａｌｌｏ－Ｌ－トレオニン（ａｌｌｏ－Ｔ）を表し、
Ｘ^７は、ＮおよびＬからなるリストから選択される天然アミノ酸を表すか、または２，５－ジフルオロ－Ｌ－フェニルアラニン（（２，５－ジフルオロ）Ｆ）、Ｌ－２－ブロモフェニルアラニン（（２－ブロモ）Ｆ）、２－クロロ－Ｌ－フェニルアラニン（（２－クロロ）Ｆ）、４－フルオロ－Ｌ－ロイシン（（４－フルオロ）Ｌ）、Ｌ－ｔｅｒｔ－ブチルアラニン（（ｔＢｕ）Ａ）、（Ｓ）－（トリフルオロメチル）－Ｌ－システイン、（２Ｓ）－２－アミノ－３－（１－メチルシクロプロピル）プロパン酸および２，３，３ａ，４，５，６，７，７ａ－オクタヒドロインドール－２－カルボン酸（Ｏｉｃ）、３－（トリメチルシリル）－Ｌ－アラニンからなるリストから選択される天然アミノ酸を表し、
Ｘ^８は、天然アミノ酸Ｐを表すか、または（１Ｓ，２Ｓ，５Ｒ）－３－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－２－カルボン酸および（４ａＲ，６ａＲ，９Ｓ，１１ａＳ）－１１－オキソ－２，３，４，４ａ，６ａ，７，８，９，１１，１１ａ－デカヒドロ－１Ｈ－ピリド［３，２－ｅ］ピロロ［１，２－ａ］アゼピン－９－カルボン酸からなるリストから選択される非天然アミノ酸を表し、
Ｘ^９は、天然アミノ酸Ｐを表すか、または２，３，３ａ，４，５，６，７，７ａ－オクタヒドロインドール－２－カルボン酸（Ｏｉｃ）、（２Ｓ，４Ｓ）－４－トリフルオロメチル－ピロリジン－２－カルボン酸（（４－ＣＦ３）Ｐ）、（６Ｓ）－５－アザスピロ［２．４］ヘプタン－６－カルボン酸、ｒｅｌ－（１Ｒ，３Ｒ，５Ｒ，６Ｒ）－６－（トリフルオロメチル）－２－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－３－カルボン酸、（２Ｓ，３ａＳ，６ａＳ）－オクタヒドロシクロペンタ［ｂ］ピロール－２－カルボン酸、ｒｅｌ－（３Ｒ，６Ｒ）－１，１－ジフルオロ－５－アザスピロ［２．４］ヘプタン－６－カルボン酸（エナンチオマー１）およびｒｅｌ－（３Ｒ，６Ｒ）－１，１－ジフルオロ－５－アザスピロ［２．４］ヘプタン－６－カルボン酸（エナンチオマー２）からなるリストから選択される非天然アミノ酸を表し、
Ｘ^１０は、天然アミノ酸Ｉを表すか、または（２Ｓ）－２－（アミノ）－２－［（１Ｓ，３Ｒ）－３－ヒドロキシシクロヘキシル］酢酸、（Ｓ）－２－アミノ－３－エチル－ペンタン酸、Ｌ－シクロヘキシルグリシン（Ｃｈｇ）およびＬ－シクロペンチルグリシン（Ｃｐｇ）からなるリストから選択される非天然アミノ酸を表し、
Ｘ^１１は、天然アミノ酸Ｃを表すか、またはＬ－Ｎ－メチルシステイン（（Ｎ－Ｍｅ）Ｃ）およびＬ－ペニシラミン（Ｐｅｎ）からなる一覧から選択される非天然アミノ酸を表し、
Ｘ^１２は、天然アミノ酸Ｉを表すか、またはａｌｌｏ－Ｌ－イソロイシン（ａｌｌｏ－Ｉ）、（Ｓ）－２－アミノ－２－シクロブチル酢酸（Ｃｂｇ）および２－［（１Ｓ，２Ｓ）－１－（アミノ）－２－メチルブチル］－１，３－オキサゾール－４－カルボン酸からなるリストから選択される非天然アミノ酸を表し、
および、ｕおよびｔおよびｓがすべて０の場合、Ｘ^１２の末端カルボキシル基は置換されていないか、またはアミド化されており、
Ｘ^１３は、ＰおよびＤからなるリストから選択される天然アミノ酸を表すか、または２－アミノイソ酪酸（Ａｉｂ）、２－メチル－Ｌ－プロリン（２－Ｍｅ）Ｐおよびトランス－４－フルオロプロリン（（トランス－４－フルオロ）Ｐ）からなるリストから選択される非天然アミノ酸を表し、
一方、Ｌ－立体配置の各天然アミノ酸および／または非天然アミノ酸は、Ｄ－立体配置の立体異性体で置き換えることができ、
および、ｕとｔが共に０であり、ｓが０とは異なる場合、Ｘ^１３の末端カルボキシル基は置換されていないか、またはアミド化されており、
ｓは、０から３までの整数を表し、
Ｘ^１４は、Ｄ、Ｑ、Ｎ、ＥおよびＰからなるリストから選択される天然アミノ酸を表すか、または３－カルボキシフェニルアラニン（（３－カルボキシ）Ｆ）、Ｎ－メチル－グリシン（（Ｎ－Ｍｅ）Ｇ）、（２Ｓ）－ピロリジン－２－イル酢酸（ベータ－ホモ－Ｐ）、Ｌ－２，３－ジアミノプロピオン酸（Ｄａｐ）、Ｌ－オルニチン（Ｏｒｎ）およびトラネキサム酸（トラネキサミック）からなるリストから選択される天然アミノ酸を表し、
一方、Ｌ－立体配置の各天然アミノ酸および／または非天然アミノ酸は、Ｄ－立体配置の立体異性体で置き換えることができ、
および、ｕが０であり、ｔが０とは異なっている場合、Ｘ^１４の末端カルボキシル基は置換されていないか、アミド化されており、
ｔは、０から４までの整数を表し、
Ｘ^１５は、（１Ｒ，３Ｓ）－３－（アミノ）シクロペンタンカルボン酸、（１Ｓ，３Ｒ）－３－（アミノ）シクロペンタンカルボン酸、（Ｒ）－４－アミノ－６－メチルヘプタン酸、（Ｓ）－（１－ピペリジン－３－イル）－酢酸、（Ｓ）－３－（１－ピロリジン－２－イル）－プロパン酸、（Ｓ）－３－（２Ｈ－テトラゾール－５－イル）プロパン酸、（Ｓ）－ピロリジン－３－カルボン酸、５－アザスピロ［２．４］ヘプタン－１－カルボン酸および（２Ｓ）－３－（トリアゾール－１－イル）－２－（アミノ）プロピオン酸からなるリストから選択される化学基であり、
ｕは、０または１の整数を表し、
ただし、前記ペプチドは、少なくとも１つの非天然アミノ酸を含む。

さらなる実施形態によれば、本発明は、式（Ｉ）を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなり、単離および／または精製され得る、ペプチドまたは誘導体、プロドラッグ、類似体、薬学的に許容される塩、溶媒和物または塩の溶媒和物を含有する化合物を提供し、ここで、
ｐは、０の整数を表し、
Ｘ^１は、ＡおよびＧからなるリストから選択される天然アミノ酸を表すか、またはＮ－メチル－Ｌ－アラニン（Ｎ－Ｍｅ）Ａ、Ｎ－メチル－グリシン（（Ｎ－Ｍｅ）Ｇ）、Ｌ－ノルロイシン（Ｎｌｅ）、Ｌ－ノルバリン（Ｎｖａ）およびＬ－オルニチン（Ｏｒｎ）からなるリストから選択される非天然アミノ酸を表し、
ｑは、０または１の整数を表し、
Ｘ^２は、天然アミノ酸Ｉを表し、
ｒは、０または１の整数を表し、
Ｘ^３は、天然アミノ酸Ｃまたは非天然アミノ酸Ｌ－ペニシラミン（Ｐｅｎ）を表し、
Ｘ^４は、天然アミノ酸Ｓを表し、
Ｘ^５は、天然アミノ酸Ｒまたは非天然アミノ酸Ｎ（５）－メチル－Ｌ－アルギニン（（Ｍｅ）Ｒ）を表し、
Ｘ^６は、天然アミノ酸Ｓを表し、
Ｘ^７は、天然アミノ酸Ｌまたは非天然アミノ酸Ｌ－ｔｅｒｔ－ブチルアラニン（（ｔＢｕ）Ａ）を表し、
Ｘ^８は、天然アミノ酸Ｐを表し、
Ｘ^９は、天然アミノ酸Ｐまたは非天然アミノ酸２，３，３ａ，４，５，６，７，７ａ－オクタヒドロインドール－２－カルボン酸（Ｏｉｃ）を表し、
Ｘ^１０は、天然アミノ酸Ｉを表し、
Ｘ^１１は、天然アミノ酸Ｃを表すか、またはＬ－Ｎ－メチルシステイン（（Ｎ－Ｍｅ）ＣおよびＬ－ペニシラミン（Ｐｅｎ）からなるリストから選択される非天然アミノ酸を表し、
Ｘ^１２は、天然アミノ酸Ｉを表し、
および、ｕおよびｔおよびｓがすべて０の場合、Ｘ^１２の末端カルボキシル基は置換されていないか、またはアミド化されており、
Ｘ^１３は、天然アミノ酸Ｐを表し、
および、ｕおよびｔが共に０であり、ｓが０とは異なっている場合、Ｘ^１３の末端カルボキシル基は置換されていないか、またはアミド化されており、
ｓは、０または１の整数を表し、
Ｘ^１４は、Ｄ、ＱおよびＥからなるリストから選択される天然アミノ酸を表し、
および、ｕが０であり、ｔが０とは異なっている場合、Ｘ^１４の末端カルボキシル基は置換されていないか、またはアミド化されており、
ｔは、０または１の整数を表し、
ｕは、０の整数を表し、
ただし、前記ペプチドは少なくとも１つの非天然アミノ酸を含む。

さらなる実施形態によれば、本発明は、以下の式（ＩＩ）

〔式中、
Ｘ^１は、ＡおよびＧからなるリストから選択される天然アミノ酸を表すか、またはＮ－メチル－Ｌ－アラニン（Ｎ－Ｍｅ）Ａ、Ｎ－メチル－グリシン（（Ｎ－Ｍｅ）Ｇ）、Ｌ－ノルロイシン（Ｎｌｅ）、Ｌ－ノルバリン（Ｎｖａ）およびＬ－オルニチン（Ｏｒｎ）からなるリストから選択される非天然アミノ酸を表し、
ｑは、０または１の整数を表し、
Ｘ^２は、天然アミノ酸Ｉを表し、
ｒは、０または１の整数を表し、
Ｘ^３は、天然アミノ酸Ｃまたは非天然アミノ酸Ｌ－ペニシラミン（Ｐｅｎ）を表し、
Ｘ^４は、天然アミノ酸Ｓを表し、
Ｘ^５は、天然アミノ酸Ｒまたは非天然アミノ酸Ｎ（５）－メチル－Ｌ－アルギニン（（Ｍｅ）Ｒ）を表し、
Ｘ^６は、天然アミノ酸Ｓを表し、
Ｘ^７は、天然アミノ酸Ｌまたは非天然アミノ酸Ｌ－ｔｅｒｔ－ブチルアラニン（（ｔＢｕ）Ａ）を表し、
Ｘ^８は、天然アミノ酸Ｐまたは非天然アミノ酸Ｌ－プロリン（３，４－_２Ｈ）を表し、
Ｘ^９は、天然アミノ酸Ｐまたは非天然アミノ酸２，３，３ａ，４，５，６，７，７ａ－オクタヒドロインドール－２－カルボン酸（Ｏｉｃ）を表し、
Ｘ^１０は、天然アミノ酸Ｉを表し、
Ｘ^１１は、Ｌ－Ｎ－メチルシステイン（（Ｎ－Ｍｅ）Ｃ）およびＬ－ペニシラミン（Ｐｅｎ）からなるリストから選択される非天然アミノ酸を表し、
Ｘ^１２は、天然アミノ酸Ｉを表し、
Ｘ^１３は、天然アミノ酸Ｐを表し、
ｓは、０または１の整数を表し、
Ｘ^１４は、Ｄ、ＱおよびＥからなるリストから選択される天然アミノ酸を表し、
ｔは、０または１の整数を表し、
ここで、前記ペプチドのＮ末端は置換されていないか、アセチル化されているか、またはＣ_１－Ｃ_２０－アルキルで一置換または二置換されており、
前記ペプチドのＣ末端は置換されていないか、またはアミド化されており、および
前記ペプチドは、Ｘ^３およびＸ^１１を結合する連結を介して環化されている〕
のペプチドまたは誘導体、プロドラッグ、類似体、薬学的に許容される塩、溶媒和物または塩の溶媒和物を含有する化合物を提供する。

さらなる実施形態によれば、本発明は、式（ＩＩ）のペプチドまたは誘導体、プロドラッグ、アナログ、薬学的に許容される塩、溶媒和物または溶媒和物を含有する化合物を提供し、ここで、
Ｘ^１は、天然アミノ酸または非天然アミノ酸を表し、
ｑは、０または１の整数を表し、
Ｘ^２は、天然アミノ酸Ｉを表し、
ｒは、０または１の整数を表し、
Ｘ^３は、天然アミノ酸Ｃまたは非天然アミノ酸Ｌ－ペニシラミン（Ｐｅｎ）を表し、
Ｘ^４は、天然アミノ酸Ｓを表し、
Ｘ^５は、天然アミノ酸Ｒまたは非天然アミノ酸Ｎ（５）－メチル－Ｌ－アルギニン（（Ｍｅ）Ｒ）を表し、
Ｘ^６は、天然アミノ酸Ｓを表し、
Ｘ^７は、天然アミノ酸Ｌまたは非天然アミノ酸Ｌ－ｔｅｒｔ－ブチルアラニン（（ｔＢｕ）Ａ）を表し、
Ｘ^８は、天然アミノ酸Ｐまたは非天然アミノ酸Ｌ－プロリン（３，４－_２Ｈ）を表し、
Ｘ^９は、非天然アミノ酸２，３，３ａ，４，５，６，７，７ａ－オクタヒドロインドール－２－カルボン酸（Ｏｉｃ）を表し、
Ｘ^１０は、天然アミノ酸Ｉを表し、
Ｘ^１１は、天然アミノ酸Ｃを表すか、またはＬ－Ｎ－メチルシステイン（（Ｎ－Ｍｅ）Ｃ）およびＬ－ペニシラミン（Ｐｅｎ）からなるリストから選択される非天然アミノ酸を表し、
Ｘ^１２は、天然アミノ酸Ｉを表し、
Ｘ^１３は、天然アミノ酸Ｐを表し、
ｓは、０または１の整数を表し、
Ｘ^１４は、Ｄ、ＱおよびＥからなるリストから選択される天然アミノ酸を表し、
ｔは、０または１の整数を表し、
ここで、前記ペプチドのＮ末端は置換されていないか、アセチル化されているか、またはＣ_１－Ｃ_２０－アルキルで一置換または二置換されており、前記ペプチドのＣ末端は置換されていないか、またはアミド化されており、および
前記ペプチドは、Ｘ^３とＸ^１１を結合する連結を介して環化されている。

さらなる実施形態によれば、本発明は、式（ＩＩ）のペプチドまたは誘導体、プロドラッグ、類似体、薬学的に許容される塩、溶媒和物または塩の溶媒和物を含有する化合物を提供し、ここで、
Ｘ^１は、ＡおよびＧからなるリストから選択される天然アミノ酸を表すか、またはＮ－メチル－Ｌ－アラニン（Ｎ－Ｍｅ）Ａ、Ｎ－メチル－グリシン（（Ｎ－Ｍｅ）Ｇ）、Ｌ－ノルロイシン（Ｎｌｅ）、Ｌ－ノルバリン（Ｎｖａ）およびＬ－オルニチン（Ｏｒｎ）からなるリストから選択される非天然アミノ酸を表し、
ｑは、０または１の整数を表し、
Ｘ^２は、天然アミノ酸Ｉを表し、
ｒは、０または１の整数を表し、
Ｘ^３は、天然アミノ酸Ｃまたは非天然アミノ酸Ｌ－ペニシラミン（Ｐｅｎ）を表し、
Ｘ^４は、天然アミノ酸Ｓを表し、
Ｘ^５は、天然アミノ酸Ｒまたは非天然アミノ酸Ｎ（５）－メチル－Ｌ－アルギニン（（Ｍｅ）Ｒ）を表し、
Ｘ^６は、天然アミノ酸Ｓを表し、
Ｘ^７は、天然アミノ酸Ｌまたは非天然アミノ酸Ｌ－ｔｅｒｔ－ブチルアラニン（（ｔＢｕ）Ａ）を表し、
Ｘ^８は、天然アミノ酸Ｐまたは非天然アミノ酸Ｌ－プロリン（３，４－_２Ｈ）を表し、
Ｘ^９は、非天然アミノ酸２，３，３ａ，４，５，６，７，７ａ－オクタヒドロインドール－２－カルボン酸（Ｏｉｃ）を表し、
Ｘ^１０は、天然アミノ酸Ｉを表し、
Ｘ^１１は、天然アミノ酸Ｃを表すか、またはＬ－Ｎ－メチルシステイン（（Ｎ－Ｍｅ）Ｃ）およびＬ－ペニシラミン（Ｐｅｎ）からなるリストから選択される非天然アミノ酸を表し、
Ｘ^１２は、天然アミノ酸Ｉを表し、
Ｘ^１３は、天然アミノ酸Ｐを表し、
ｓは、０または１の整数を表し、
Ｘ^１４は、Ｄ、ＱおよびＥからなるリストから選択される天然アミノ酸を表し、
ｔは、０または１の整数を表し、
ここで、前記ペプチドのＮ末端は置換されていないか、またはアセチル化されており、
前記ペプチドのＣ末端は置換されていないか、またはアミド化されており、および
前記ペプチドは、Ｘ^３およびＸ^１１を結合する連結を介して環化されている。

特に、本発明は、式（Ｉ）のペプチドを含有する化合物、または式（ＩＩ）のペプチドを含有する化合物を提供する。

本発明によれば、式（Ｉ）のペプチドおよび式（ＩＩ）のペプチドには以下のＸ^１～Ｘ^１４の定義が適用され、式（Ｉ）のペプチドには位置Ｘ^０およびＸ^１５の定義が適用される。

本発明によれば、Ｘ^０は、存在する場合、本明細書の規定によれば、アミノ酸ではない化学基であり得る。

本発明のさらなる実施形態によれば、Ｘ^０は、２－シアノ安息香酸、（１Ｓ，２Ｓ，４Ｓ）－ビシクロ［２．２．１］ヘプト－５－エン－２－イル酢酸、（２，４－ジオキソイミダゾリジン－１－イル）酢酸、２－（チオモルホリン）酢酸（（２－チオモルホリン）アセチル）、２－（Ｎ－イソプロピル－Ｎ－メチルアミノ）酢酸、（Ｓ）－３－メチルバレリアン酸（（Ｓ）－３－メチルペンタン酸）、２－（３－ピリジル）酢酸、２－（シクロヘキシルアミノ）酢酸（２－（シクロヘキシルアミノ）アセチル）、２－（ジエチルアミノ）酢酸（２－（ジエチルアミノ）アセチル）、２－（モルホリン）酢酸（２－（モルホリン）アセチル）、２－（Ｎ－メチル－Ｎ－シクロプロピルアミノ）酢酸（２－（Ｎ－メチル－Ｎ－シクロプロピルアミノ）アセチル）、２－（ピペリジン）酢酸（２－（ピペリジン）アセチル）、２－（ピロリジン）酢酸（２－（ピロリジン）アセチル）、２－ヒドロキシ酢酸（２－ヒドロキシアセチル）、２－ヒドロキシイソ酪酸（２－ヒドロキシイソブチリック）、３－（アミノメチル）安息香酸、３－メトキシプロピオン酸、４－（アミノメチル）安息香酸、４－メチルペンタン酸（４－メチルバレリック）、５－クロロチオフェン－カルボン酸、１－（アミノメチル）－シクロプロピル－１－カルボン酸（ＡＣＭＰ）、アジピン酸、（Ｓ）－アゼチジン－２－カルボン酸、安息香酸（ベンゾイック）、４－（３，５－ジメチル－１，２－オキサゾール－４－イル）－Ｌ－フェニルアラニン、シクロブタンカルボン酸（シクロブタンカルボキシリック）、２－（シクロブチル）酢酸（シクロブチルアセティック）、シクロブチル酢酸（シクロブチルアセティック）、シクロヘキシル酢酸（シクロヘキシルアセティック）、シクロヘキサンカルボン酸（シクロヘキシルカルボキシリック）、シクロペンタンカルボン酸、シクロペンチル酢酸（シクロペンチルアセティック）、シクロプロパンカルボン酸（シクロプロパンカルボキシリック）、シクロプロピル酢酸、Ｄ－（＋）ビオチン、フマル酸、３－フェニルプロパン酸（ヒドロシンナミック）、イソ酪酸、イソバレリアン酸（イソバレリック）、Ｌ－（＋）－乳酸（ラクティック）、フェニル酢酸、ピペリジン－４－イル酢酸、ピバル酸（ピバリック）、スベリン酸、ｔｅｒｔ－ブチル酢酸、テトラヒドロピラニル－４－酢酸、テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－３－イル酢酸およびトランス－２－（３－（（ｔ－ブトキシ）カルボニルアミノ）シクロヘキシル）酢酸）からなるリストから選択される化学基を表す。

本発明のさらなる実施形態によれば、Ｘ^０は、２－シアノ安息香酸、（１Ｒ，３Ｓ，４Ｓ）－２－アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－３－カルボン酸、（２－チオモルホリン）酢酸、（Ｎ－イソプロピル－Ｎ－メチルアミノ）酢酸、２－（３－ピリジル）酢酸、２－（シクロヘキシルアミノ）酢酸、２－（ジエチルアミノ）酢酸、２－（モルホリン）酢酸、２－（ピペリジン）酢酸、２－（ピロリジン）酢酸、３－（アミノメチル）安息香酸、４－（アミノメチル）安息香酸、１－（アミノメチル）－シクロプロピル－１－カルボン酸（ＡＣＭＰ）、アゼチジン－２－カルボン酸、安息香酸、シクロブチル酢酸、シクロプロピル酢酸、フェニル酢酸、ピペリジン－４－イル酢酸、テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－３－イル酢酸、トラネキサム酸およびトランス－２－（３－（（ｔ－ブトキシ）カルボニルアミノ）シクロヘキシル）酢酸からなる一覧から選択される化学基を表す。

本発明のさらなる実施形態によれば、Ｘ^０は、上で定義した非天然アミノ酸、２－シアノ安息香酸、置換安息香酸またはフェニル酢酸から選択される化学基である。

本発明のさらなる実施形態によれば、Ｘ^０は、Ｈｏｏ、ＯＤＤまたはＡｈｘである。

本発明のさらなる実施形態によれば、ｐは、１の整数を表す。

本発明のさらなる実施形態によれば、ｐは、０の整数を表す。

さらなる実施形態によれば、本発明は、式（Ｉ）または式（ＩＩ）を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなり、単離および／または精製され得る、ペプチドまたは誘導体、プロドラッグ、類似体、薬学的に許容される塩、溶媒和物または塩の溶媒和物を含有する化合物を提供し、ここで、Ｘ^１は、任意の天然アミノ酸を表すか、または非天然アミノ酸を表し、好ましくは表１に列挙される非天然アミノ酸からなるリストから選択され、一方で、Ｌ－立体配置におけるそれぞれの天然アミノ酸および／または非天然アミノ酸は、Ｄ－立体配置における立体異性体によって置き換えることができる。

本発明のさらなる実施形態によれば、Ｘ^１は、Ａ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｐ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷおよびＹからなるリストから選択される天然アミノ酸を表すか、またはＮ－メチル－アラニン（Ｎ－Ｍｅ）Ａ、Ｎ－メチル－グリシン（（Ｎ－Ｍｅ）Ｇ）、（１Ｒ，３Ｓ，４Ｓ）－２－アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－３－カルボン酸、Ｌ－３－ブロモフェニルアラニン（（３－ブロモ）Ｆ）、Ｌ－Ｎ，Ｎ－ジメチルアラニン（（Ｎ，Ｎ－ジＭｅ）Ａ）、Ｎ，Ｎ－ジメチルグリシン（（Ｎ，Ｎ－ジＭｅ）Ｇ）、Ｎ－フェニルグリシン（（Ｎ－Ｐｈ）Ｇ）、（Ｒ）－ピペリジン－３－カルボン酸、（Ｓ）－ピペリジン－３－カルボン酸、Ｌ－ｔｅｒｔ－ブチルアラニン（（ｔＢｕ）Ａ）、Ｌ－２－ピリジルアラニン（２－Ｐａｌ）、Ｌ－３－ピリジルアラニン（３－Ｐａｌ）、Ｌ－４－ピリジルアラニン（４－Ｐａｌ）、３－（アミノメチル）安息香酸、３－アミノ－２，２－ジメチルプロピオン酸、３－アミノ－３－メチル酪酸、４－（アミノメチル）安息香酸、Ｌ－２－アミノ酪酸（Ａｂｕ）、１－アミノシクロブタン－１－カルボン酸（ＡＣＢＡ）、６－アミノヘキサン酸（Ａｈｘ）、２－アミノイソ酪酸（Ａｉｂ）、Ｌ－２－チエニルアラニン（ベータ－２－チエニルアラニン）、ベータ－アラニン（ベータ－Ａ）、ベータ－プロリン（ベータ－Ｐ）、Ｌ－シトルリン（Ｃｉｔ）、Ｌ－２，４－ジアミノ酪酸（Ｄａｂ）、Ｌ－２，３－ジアミノプロピオン酸（Ｄａｐ）、ガンマ－アミノ酪酸（ガンマ－Ａｂｕ）、Ｌ－３－メチルヒスチジン（３－Ｍｅ）Ｈ）、Ｌ－ジヒドロオロチン酸（Ｈｏｏ）、Ｌ－ノルロイシン（Ｎｌｅ）、Ｎ－メチル－Ｌ－プロリン（（Ｎ－Ｍｅ）Ｐ）、Ｌ－ノルバリン（Ｎｖａ）、Ｌ－オルニチン（Ｏｒｎ）、Ｌ－ピペコリン酸（Ｐｉｐ）、（２Ｓ）－２［（アミノ）－２－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）］酢酸およびトラネキサム酸（トラネキサミック）からなるリストから選択される非天然アミノ酸を表すが、Ｌ－立体配置の各天然アミノ酸および／または非天然アミノ酸はＤ－立体配置の立体異性体で置き換えることができる。

本発明のさらなる実施形態によれば、Ｘ^１はＡおよびＧからなるリストから選択される天然アミノ酸を表すか、またはＮ－メチル－Ｌ－アラニン（Ｎ－Ｍｅ）Ａ、Ｎ－メチル－グリシン（（Ｎ－Ｍｅ）Ｇ）、Ｌ－ノルロイシン（Ｎｌｅ）、Ｌ－ノルバリン（Ｎｖａ）およびＬ－オルニチン（Ｏｒｎ）からなるリストから選択される非天然アミノ酸を表すが、Ｌ－立体配置の天然アミノ酸および／または非天然アミノ酸はＤ－立体配置の立体異性体で置き換えることができる。

さらなる実施形態によれば、Ｘ^１は、ＡおよびＧからなるリストから選択される天然アミノ酸を表すか、またはＮ－メチル－Ｌ－アラニン（Ｎ－Ｍｅ）Ａ、Ｎ－メチル－グリシン（（Ｎ－Ｍｅ）Ｇ）、Ｌ－ノルロイシン（Ｎｌｅ）、Ｌ－ノルバリン（Ｎｖａ）およびＬ－オルニチン（Ｏｒｎ）からなるリストから選択される非天然アミノ酸を表す。

さらなる実施形態によれば、Ｘ^１は、天然アミノ酸Ａまたは非天然アミノ酸Ｎ－メチル－グリシン（（Ｎ－Ｍｅ）Ｇ）を表す。

本発明のさらなる実施形態によれば、ｐが０であり、ｑが０とは異なっている場合、Ｘ^１の末端アミノ基は、置換されていないか、アセチル化されているか、またはＣ_１－Ｃ_４－アルキルで一置換もしくは二置換されており、好ましくはＣ_１－Ｃ_２０－アルキルで一置換されている。

本発明のさらなる実施形態によれば、Ｘ^１は、メチル化されている。

本発明のさらなる実施形態によれば、Ｘ^１は、アセチル化される。

本発明のさらなる実施形態によれば、ｑは、０の整数を表す。

本発明のさらなる実施形態によれば、ｑは、１の整数を表す。

さらなる実施形態によれば、式（Ｉ）または式（ＩＩ）を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなり、単離および／または精製され得る、ペプチドまたは誘導体、プロドラッグ、類似体、薬学的に許容される塩、溶媒和物または塩の溶媒和物を含有する化合物を提供し、ここで、Ｘ^２はＩ、Ｌ、Ｍ、ＶおよびＡからなる一覧から選択される天然アミノ酸を表すか、またはＬ－Ｎ－メチルイソロイシン（（Ｎ－Ｍｅ）Ｉ）、ａｌｌｏ－Ｌ－イソロイシン（ａｌｌｏ－Ｉ）、Ｌ－シクロブチルアラニン（Ｃｂａ）、Ｌ－ノルバリン（Ｎｖａ）、Ｌ－２－アミノ酪酸（Ａｂｕ）、（２Ｓ，３Ｓ）－２－［（３Ｒ）－３－アミノ－２－オキソピロリジン－１－イル］－３－メチルペンタン酸、（２Ｓ，３Ｓ）－２－［２－オキソピペラジン－１－イル］－３－メチルペンタン酸、（２Ｓ，３Ｓ）－２－［（３Ｓ）－２－オキソピペラジン－１－イル］－３－メチルペンタン酸、Ｌ－メチオニン－Ｌ－スルホキシド、Ｌ－メチオニン－スルホンおよびＬ－ｔｅｒｔ－ブチルグリシンからなるリストから選択される非天然アミノ酸を表すが、Ｌ－立体配置の各天然アミノ酸および／または非天然アミノ酸はＤ－立体配置の立体異性体で置き換えることができる。

本発明のさらなる実施形態によれば、Ｘ^２は、天然アミノ酸Ｉを表すか、またはＬ－Ｎ－メチルイソロイシン（（Ｎ－Ｍｅ）Ｉ）、ａｌｌｏ－Ｌ－イソロイシン（ａｌｌｏ－Ｉ）、Ｌ－シクロブチルアラニン（Ｃｂａ）、Ｌ－ノルバリン（Ｎｖａ）、Ｌ－２－アミノ酪酸（Ａｂｕ）、（２Ｓ，３Ｓ）－２－［（３Ｒ）－３－アミノ－２－オキソピロリジン－１－イル］－３－メチルペンタン酸、（２Ｓ，３Ｓ）－２－［２－オキソピペラジン－１－イル］－３－メチルペンタン酸および（２Ｓ，３Ｓ）－２－［（３Ｓ）－２－オキソピペラジン－１－イル］－３－メチルペンタン酸からなるリストから選択される非天然アミノ酸を表すが、一方、Ｌ－立体配置の各天然アミノ酸および／または非天然アミノ酸は、Ｄ－立体配置の立体異性体で置き換えることができる。

本発明のさらなる実施形態によれば、Ｘ^２は、天然アミノ酸Ｉを表すか、またはＬ－Ｎ－メチルイソロイシン（（Ｎ－Ｍｅ）Ｉ）、Ｌ－シクロブチルアラニン（Ｃｂａ）、Ｌ－ノルバリン（Ｎｖａ）およびＬ－２－アミノ酪酸（Ａｂｕ）からなるリストから選択される非天然アミノ酸を表すが、一方、Ｌ－立体配置の各天然アミノ酸および／または非天然アミノ酸は、Ｄ－立体配置の立体異性体で置き換えることができる。

本発明のさらなる実施形態によれば、Ｘ^２は、天然アミノ酸Ｉを表す。

本発明のさらなる実施形態によれば、ｐおよびｑが両方とも０であり、ｒが１である場合、Ｘ^２の末端アミノ基は、置換されていないか、アセチル化されているか、またはＣ_１－Ｃ_２０－アルキルで一置換もしくは二置換されており、好ましくはＣ_１－Ｃ_４－アルキルで一置換されている。

本発明のさらなる実施形態によれば、ｒは、０の整数を表す。

本発明のさらなる実施形態によれば、ｒは、１の整数を表す。

さらなる実施形態によれば、本発明は式（Ｉ）または式（ＩＩ）を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなり、単離および／または精製され得る、ペプチドまたは誘導体、プロドラッグ、類似体、薬学的に許容される塩、溶媒和物または塩の溶媒和物を含有する化合物を提供し、ここで、Ｘ^３は、天然アミノ酸Ｃを表すか、またはＬ－ペニシラミン（Ｐｅｎ）およびＬ－Ｎ－メチルシステイン（（Ｎ－Ｍｅ）Ｃ）からなるリストから選択される非天然アミノ酸を表す。

本発明のさらなる実施形態によれば、Ｘ^３は、天然アミノ酸Ｃまたは非天然アミノ酸Ｌ－ペニシラミン（Ｐｅｎ）を表す。

本発明のさらなる実施形態によれば、Ｘ^３は、天然アミノ酸Ｃを表す。

本発明のさらなる実施形態によれば、ｐおよびｑおよびｒがすべて０である場合、Ｘ^３の末端アミノ基は、置換されていないか、アセチル化されているか、またはＣ_１－Ｃ_４－アルキルで一置換もしくは二置換されており、好ましくはＣ_１－Ｃ_２０－アルキルで置換されている。

さらなる実施形態によれば、本発明は、式（Ｉ）または式（ＩＩ）を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなり、単離および／または精製され得る、ペプチドまたは誘導体、プロドラッグ、類似体、薬学的に許容される塩、溶媒和物または塩の溶媒和物を含有する化合物を提供し、ここで、Ｘ^４は、Ｓ、Ｃ、Ｔ、ＲまたはＫからなるリストから選択される天然アミノ酸を表すか、またはａｌｌｏ－Ｌ－トレオニン（ａｌｌｏ－Ｔ）、Ｌ－ホモセリン（ｈＳｅｒ）およびＬ－オルニチン（Ｏｒｎ）からなるリストから選択される非天然アミノ酸を表す。

本発明のさらなる実施形態によれば、Ｘ^４は、Ｓ、Ｃ、Ｔ、ＲおよびＫからなるリストから選択される天然アミノ酸を表す。

本発明のさらなる実施形態によれば、Ｘ^４は、ＳまたはＴからなるリストから選択される天然アミノ酸を表す。

本発明のさらなる実施形態によれば、Ｘ^４は、天然アミノ酸Ｓを表す。

さらなる実施形態によれば、本発明は、式（Ｉ）または式（ＩＩ）を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなり、単離および／または精製され得る、ペプチドまたは誘導体、プロドラッグ、類似体、薬学的に許容される塩、溶媒和物または塩の溶媒和物を含有する化合物を提供し、ここで、Ｘ^５は、天然アミノ酸Ｒまたは非天然アミノ酸Ｎ（５）－メチル－Ｌ－アルギニン（（Ｍｅ）Ｒ）を表す。

本発明のさらなる実施形態によれば、Ｘ^５は、天然アミノ酸Ｒまたは非天然アミノ酸Ｎ（５）－メチル－Ｌ－アルギニン（（Ｍｅ）Ｒ）を表す。

本発明のさらなる実施形態によれば、Ｘ^５は、天然アミノ酸Ｒを表す。

さらなる実施形態によれば、本発明は、式（Ｉ）または式（ＩＩ）を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなり、単離および／または精製され得る、ペプチドまたは誘導体、プロドラッグ、類似体、薬学的に許容される塩、溶媒和物または塩の溶媒和物を含有する化合物を提供し、ここで、Ｘ^６は、Ｓ、ＣまたはＴからなるリストから選択される天然アミノ酸を表すか、またはａｌｌｏ－Ｌ－トレオニン（ａｌｌｏ－Ｔ）およびＬ－２，３－ジアミノプロピオン酸（Ｄａｐ）からなるリストから選択される非天然アミノ酸を表す。

本発明のさらなる実施形態によれば、Ｘ^６は、天然アミノ酸Ｓを表すか、またはａｌｌｏ－Ｌ－トレオニン（ａｌｌｏ－Ｔ）およびＬ－２，３－ジアミノプロピオン酸（Ｄａｐ）からなるリストから選択される非天然アミノ酸を表す。

本発明のさらなる実施形態によれば、Ｘ^６は、天然アミノ酸Ｓまたは非天然アミノ酸ａｌｌｏ－Ｌ－トレオニン（ａｌｌｏ－Ｔ）を表す。

本発明のさらなる実施形態によれば、Ｘ^６は、天然アミノ酸Ｓを表す。

さらなる実施形態によれば、本発明は、式（Ｉ）または式（ＩＩ）を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなり、単離および／または精製され得る、ペプチドまたは誘導体、プロドラッグ、類似体、薬学的に許容される塩、溶媒和物または塩の溶媒和物を含有する化合物を提供し、ここで、Ｘ^７は、Ｌ、ＦまたはＮからなるリストから選択される天然アミノ酸を表すか、または２，３，３ａ，４，５，６，７，７ａ－オクタヒドロインドール－２－カルボン酸（Ｏｉｃ）、Ｌ－４－ブロモフェニルアラニン（（４－ブロモ）Ｆ）、２，５－ジフルオロ－Ｌ－フェニルアラニン（（２，５－ジフルオロ）Ｆ）、Ｌ－ｔｅｒｔ－ブチルアラニン（（ｔＢｕ）Ａ）、２－クロロ－Ｌ－フェニルアラニン（（２－クロロ）Ｆ）、Ｌ－２－ブロモフェニルアラニン（（２－ブロモ）Ｆ）、（Ｓ）－２－（アミノ）－１，６－ヘキサン二酸（ＡＡＤ）、（２Ｓ）－２－アミノ－４，４，４－トリフルオロブタン酸、Ｌ－２－アミノ－４－シアノ酪酸（Ｃｎｂａ）、４－フルオロ－ロイシン（（４－フルオロ）Ｌ）、（Ｓ）－（トリフルオロメチル）－Ｌ－システイン、（２Ｓ）－２－アミノ－３－（１－メチルシクロプロピル）プロパン酸、Ｌ－ｔｅｒｔ－ブチルグリシン（（ｔＢｕ）Ｇ）、３－（トリメチルシリル）－Ｌ－アラニン、２，５－ジフルオロ－Ｌ－フェニルアラニン、２－アミノ－７－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－７－オキソヘプタン酸、５，５，５－トリフルオロ－Ｌ－ロイシン（（トリフルオロ）Ｌ）、２－メチル－Ｌ－フェニルアラニン（（２－Ｍｅ）Ｆ）、Ｌ－シクロブチルアラニン（Ｃｂａ）、Ｌ－シクロペンチルアラニン（Ｃｐａ）、Ｌ－シクロプロピルメチルアラニン、Ｌ－トリフルオロメチルアラニン、Ｌ－ジフルオロメチルアラニン、２－フルオロ－Ｌ－フェニルアラニン（（２－フルオロ）Ｆ）、（２Ｓ）－３－（２，３－ジフルオロフェニル）－２－アミノプロパン酸、（２Ｓ）－３－（３－シアノフェニル）－２－アミノプロパン酸、２－アミノ－５，５，５－トリフルオロ－４－メチル－ペンタン酸、（２Ｓ）－２－アミノ－５－メチル－ヘキサン酸および（２Ｓ）－３－（インドール－４－イル）－２－（アミノ）プロパン酸からなるリストから選択される非天然アミノ酸を表す。

本発明のさらなる実施形態によれば、Ｘ^７は、ＬおよびＮからなるリストから選択される天然アミノ酸を表すか、または２，５－ジフルオロ－Ｌ－フェニルアラニン（（２，５－ジフルオロ）Ｆ）、Ｌ－２－ブロモフェニルアラニン（（２－ブロモ）Ｆ）、２－クロロ－Ｌ－フェニルアラニン （（２－クロロ）Ｆ）、Ｌ－４－ブロモフェニルアラニン（（４－ブロモ）Ｆ）、４－フルオロ－Ｌ－ロイシン（（４－フルオロ）Ｌ）、Ｌ－ｔｅｒｔ－ブチルアラニン（（ｔＢｕ）Ａ）、Ｌ－ｔｅｒｔ－ブチルグリシン（（ｔＢｕ）Ｇ）、５，５，５－トリフルオロ－Ｌ－ロイシン（（トリフルオロ）Ｌ）、（Ｓ）－２－（アミノ）－１，６－ヘキサン二酸（ＡＡＤ）、（２Ｓ）－２－アミノ－４，４，４－トリフルオロブタン酸、Ｌ－２－アミノ－４－シアノ酪酸（Ｃｎｂａ）、（Ｓ）－（トリフルオロメチル）－Ｌ－システイン、（２Ｓ）－２－アミノ－３－（１－メチルシクロプロピル）プロパン酸、（２Ｓ）－３－（２，３－ジフルオロフェニル）－２－アミノプロパン酸、２，３，３ａ，４，５，６，７，７ａ－オクタヒドロインドール－２－カルボン酸（Ｏｉｃ）、３－（トリメチルシリル）－Ｌ－アラニンおよび２－アミノ－７－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－７－オキソヘプタン酸からなるリストから選択される非天然アミノ酸を表す。

本発明のさらなる実施形態によれば、Ｘ^７は、ＮもしくはＬからなるリストから選択される天然アミノ酸を表すか、または２，５－ジフルオロ－Ｌ－フェニルアラニン（（２，５－ジフルオロ）Ｆ）、Ｌ－２－ブロモフェニルアラニン（（２－ブロモ）Ｆ）、２－クロロ－Ｌ－フェニルアラニン（（２－クロロ）Ｆ）、４－フルオロ－Ｌ－ロイシン（（４－フルオロ）Ｌ）、Ｌ－ｔｅｒｔ－ブチルアラニン（（ｔＢｕ）Ａ）、（Ｓ）－（トリフルオロメチル）－Ｌ－システイン、（２Ｓ）－２－アミノ－３－（１－メチルシクロプロピル）プロパン酸および２，３，３ａ，４，５，６，７，７ａ－オクタヒドロインドール－２－カルボン酸（Ｏｉｃ）、３－（トリメチルシリル）－Ｌ－アラニンからなるリストから選択される天然アミノ酸を表す。

本発明のさらなる実施形態によれば、Ｘ^７は、天然アミノ酸Ｌまたは非天然アミノ酸Ｌ－ｔｅｒｔ－ブチルアラニン（（ｔＢｕ）Ａ）を表す。

本発明のさらなる実施形態によれば、Ｘ^７は、非天然アミノ酸Ｌ－ｔｅｒｔ－ブチルアラニン（（ｔＢｕ）Ａ）を表す。

本発明のさらなる実施形態によれば、Ｘ^７は、天然アミノ酸Ｌを表す。

さらなる実施形態によれば、本発明は、式（Ｉ）または式（ＩＩ）を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなり、単離および／または精製され得る、ペプチドまたは誘導体、プロドラッグ、類似体、薬学的に許容される塩、溶媒和物または塩の溶媒和物を含有する化合物を提供し、ここで、Ｘ^８は、天然アミノ酸Ｐを表すか、またはＬ－プロリン（３，４－_２Ｈ）、（１Ｓ，２Ｓ，５Ｒ）－３－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－２－カルボン酸、（１Ｒ，２Ｓ，５Ｓ）－３－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－２－カルボン酸、Ｌ－ヒドロキシプロリン（Ｈｙｐ）、（３Ｓ）－モルホリン－３－カルボン酸（モルホリン－３－カルボキシリック）、Ｌ－ピペコリン酸（Ｐｉｐ）、（４ａＲ，６ａＲ，９Ｓ，１１ａＳ）－１１－オキソ－２，３，４，４ａ，６ａ，７，８，９，１１，１１ａ－デカヒドロ－１Ｈ－ピリド［３，２－ｅ］ピロロ［１，２－ａ］アゼピン－９－カルボン酸、トランス－４－フルオロプロリン（（トランス－４－フルオロ）Ｐ）および（１Ｒ，２Ｓ，５Ｓ）－３－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－２－カルボン酸からなるリストから選択される天然アミノ酸を表す。

本発明のさらなる実施形態によれば、Ｘ^８は、天然アミノ酸Ｐを表すか、またはＬ－プロリン（３，４－_２Ｈ）、（１Ｓ，２Ｓ，５Ｒ）－３－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－２－カルボン酸、トランス－４－フルオロプロリン（（トランス－４－フルオロ）Ｐ）、Ｌ－ヒドロキシプロリン（Ｈｙｐ）、（３Ｓ）－モルホリン－３－カルボン酸（モルホリン－３－カルボキシリック）、Ｌ－ピペコリン酸（Ｐｉｐ）および（４ａＲ，６ａＲ，９Ｓ，１１ａＳ）－１１－オキソ－２，３，４，４ａ，６ａ，７，８，９，１１，１１ａ－デカヒドロ－１Ｈ－ピリド［３，２－ｅ］ピロロ［１，２－ａ］アゼピン－９－カルボン酸からなるリストから選択される非天然アミノ酸を表す。

本発明のさらなる実施形態によれば、Ｘ^８は、天然アミノ酸Ｐを表すか、またはＬ－プロリン（３，４－_２Ｈ）、（１Ｓ，２Ｓ，５Ｒ）－３－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－２－カルボン酸および（４ａＲ，６ａＲ，９Ｓ，１１ａＳ）－１１－オキソ－２，３，４，４ａ，６ａ，７，８，９，１１，１１ａ－デカヒドロ－１Ｈ－ピリド［３，２－ｅ］ピロロ［１，２－ａ］アゼピン－９－カルボン酸からなるリストから選択される非天然アミノ酸を表す。

本発明のさらなる実施形態によれば、Ｘ^８は、天然アミノ酸Ｐまたは非天然アミノ酸Ｌ－プロリン（３，４－_２Ｈ）を表す。

本発明のさらなる実施形態によれば、Ｘ^８は、天然アミノ酸Ｐを表す。

さらなる実施形態によれば、本発明は、式（Ｉ）または式（ＩＩ）を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなり、単離および／または精製され得る、ペプチドまたは誘導体、プロドラッグ、類似体、薬学的に許容される塩、溶媒和物または塩の溶媒和物を含有する化合物を提供し、ここで、Ｘ^９は、天然アミノ酸Ｐを表すか、または２，３，３ａ，４，５，６，７，７ａ－オクタヒドロインドール－２－カルボン酸（Ｏｉｃ）、Ｌ－ヒドロキシプロリン（Ｈｙｐ）、（２Ｓ，４Ｓ）－４－トリフルオロメチル－ピロリジン－２－カルボン酸（（４－ＣＦ３）Ｐ）、（２Ｓ，４Ｓ）－４－フルオロプロリン（（シス－４－フルオロ）Ｐ）、トランス－４－フルオロプロリン（（トランス－４－フルオロ）Ｐ）、（２Ｓ）－２－アミノ－４，４，４－トリフルオロブタン酸、Ｌ－トランス－３－ヒドロキシプロリン（（３Ｓ－ＯＨ）Ｐ、（１Ｒ，３Ｓ，５Ｒ）－２－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－３－カルボン酸、（６Ｓ）－５－アザスピロ［２．４］ヘプタン－６－カルボン酸、ｒｅｌ－（１Ｒ，３Ｒ，５Ｒ，６Ｒ）－６－（トリフルオロメチル）－２－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－３－カルボン酸、（２Ｓ）－２－アミノ－４，４，４－トリフルオロブタン酸、（２Ｓ，３ａＳ，６ａＳ）－オクタヒドロシクロペンタ［ｂ］ピロール－２－カルボン酸、トランス－４－フルオロプロリン（（トランス－４－フルオロ）Ｐ）、（２Ｓ，４Ｓ）－４－フルオロプロリン（（シス－４－フルオロ）Ｐ）、Ｌ－４，４－ジフルオロプロリン（（ジフルオロ）Ｐ）、ｒｅｌ－（３Ｒ，６Ｒ）－１，１－ジフルオロ－５－アザスピロ［２．４］ヘプタン－６－カルボン酸（エナンチオマー１）およびｒｅｌ－（３Ｒ，６Ｒ）－１，１－ジフルオロ－５－アザスピロ［２．４］ヘプタン－６－カルボン酸（エナンチオマー２）からなるリストから選択される非天然アミノ酸を表す。

本発明のさらなる実施形態によれば、Ｘ^９は、天然アミノ酸Ｐを表すか、または２，３，３ａ，４，５，６，７，７ａ－オクタヒドロインドール－２－カルボン酸（Ｏｉｃ）、（６Ｓ）－５－アザスピロ［２．４］ヘプタン－６－カルボン酸、ｒｅｌ－（１Ｒ，３Ｒ，５Ｒ，６Ｒ）－６－（トリフルオロメチル）－２－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－３－カルボン酸、（２Ｓ，４Ｓ）－４－トリフルオロメチル－ピロリジン－２－カルボン酸（（４－ＣＦ３）Ｐ）、（２Ｓ，３ａＳ，６ａＳ）－オクタヒドロシクロペンタ［ｂ］ピロール－２－カルボン酸、（１Ｒ，３Ｓ，５Ｒ）－２－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－３－カルボン酸、（２Ｓ）－２－アミノ－４，４，４－トリフルオロブタン酸、Ｌ－トランス－３－ヒドロキシプロリン（（３Ｓ－ＯＨ）Ｐ、トランス－４－フルオロプロリン（（トランス－４－フルオロ）Ｐ）、Ｌ－ヒドロキシプロリン（Ｈｙｐ）、（２Ｓ，４Ｓ）－４－フルオロプロリン（（シス－４－フルオロ）Ｐ）、（３Ｒ，６Ｒ）－１，１－ジフルオロ－５－アザスピロ［２．４］ヘプタン－６－カルボン酸（エナンチオマー１）および（３Ｒ，６Ｒ）－１，１－ジフルオロ－５－アザスピロ［２．４］ヘプタン－６－カルボン酸（エナンチオマー２）からなるリストから選択される非天然アミノ酸を表す。

本発明のさらなる実施形態によれば、Ｘ^９は、天然アミノ酸Ｐを表すか、または２，３，３ａ，４，５，６，７，７ａ－オクタヒドロインドール－２－カルボン酸（Ｏｉｃ）、（２Ｓ，４Ｓ）－４－トリフルオロメチル－ピロリジン－２－カルボン酸（（４－ＣＦ３）Ｐ）、（６Ｓ）－５－アザスピロ［２．４］ヘプタン－６－カルボン酸、ｒｅｌ－（１Ｒ，３Ｒ，５Ｒ，６Ｒ）－６－（トリフルオロメチル）－２－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－３－カルボン酸、（２Ｓ，３ａＳ，６ａＳ）－オクタヒドロシクロペンタ［ｂ］ピロール－２－カルボン酸、ｒｅｌ－（３Ｒ，６Ｒ）－１，１－ジフルオロ－５－アザスピロ［２．４］ヘプタン－６－カルボン酸（エナンチオマー１）およびｒｅｌ－（３Ｒ，６Ｒ）－１，１－ジフルオロ－５－アザスピロ［２．４］ヘプタン－６－カルボン酸（エナンチオマー２）からなるリストから選択される非天然アミノ酸を表す。

本発明のさらなる実施形態によれば、Ｘ^９は、天然アミノ酸Ｐまたは非天然アミノ酸２，３，３ａ，４，５，６，７，７ａ－オクタヒドロインドール－２－カルボン酸（Ｏｉｃ）を表す。

本発明のさらなる実施形態によれば、Ｘ^９は、非天然アミノ酸２，３，３ａ，４，５，６，７，７ａ－オクタヒドロインドール－２－カルボン酸（Ｏｉｃ）を表す。

さらなる実施形態によれば、本発明は、式（Ｉ）または式（ＩＩ）を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなり、単離および／または精製され得る、ペプチドまたは誘導体、プロドラッグ、類似体、薬学的に許容される塩、溶媒和物または塩の溶媒和物を含有する化合物を提供し、ここで、Ｘ^１０は、天然アミノ酸Ｉを表すか、またはＬ－シクロペンチルグリシン（Ｃｐｇ）、Ｌ－シクロヘキシルグリシン（Ｃｈｇ）、（Ｓ）－２－アミノ－３－エチル－ペンタン酸、３－クロロフェニルグリシン（（３－クロロ－Ｐｈ）Ｇ）、Ｌ－ｔｅｒｔ－ブチルグリシン、ａｌｌｏ－Ｌ－イソロイシン（ａｌｌｏ－Ｉ）、Ｌ－シクロブチルグリシン、Ｌ－ノルバリン（Ｎｖａ）および（２Ｓ）－２－（アミノ）－２－［（１Ｓ，３Ｒ）－３－ヒドロキシシクロヘキシル］酢酸からなるリストから選択される非天然アミノ酸を表す。

本発明のさらなる実施形態によれば、Ｘ^１０は、天然アミノ酸Ｉを表すか、または（２Ｓ）－２－（アミノ）－２－［（１Ｓ，３Ｒ）－３－ヒドロキシシクロヘキシル］酢酸、３－クロロフェニルグリシン（（３－クロロ－Ｐｈ）Ｇ）、（Ｓ）－２－アミノ－３－エチル－ペンタン酸、ａｌｌｏ－Ｌ－イソロイシン（ａｌｌｏ－Ｉ）、Ｌ－シクロヘキシルグリシン（Ｃｈｇ）、Ｌ－シクロペンチルグリシン（Ｃｐｇ）、Ｌ－シクロブチルグリシンおよびＬ－ノルバリン（Ｎｖａ）からなるリストから選択される非天然アミノ酸を表す。

本発明のさらなる実施形態によれば、Ｘ^１０は、天然アミノ酸Ｉを表すか、または（２Ｓ）－２－（アミノ）－２－［（１Ｓ，３Ｒ）－３－ヒドロキシシクロヘキシル］酢酸、（Ｓ）－２－アミノ－３－エチル－ペンタン酸、Ｌ－シクロヘキシルグリシン（Ｃｈｇ）およびＬ－シクロペンチルグリシン（Ｃｐｇ）からなるリストから選択される非天然アミノ酸を表す。

本発明のさらなる実施形態によれば、Ｘ^１０は、天然アミノ酸Ｉを表す。

さらなる実施形態によれば、本発明は、式（Ｉ）または式（ＩＩ）を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなり、単離および／または精製され得る、ペプチドまたは誘導体、プロドラッグ、類似体、薬学的に許容される塩、溶媒和物または塩の溶媒和物を含有する化合物を提供し、ここで、Ｘ^１１は、天然アミノ酸Ｃであるか、またはＬ－Ｎ－メチルシステイン（（Ｎ－Ｍｅ）Ｃ）およびＬ－ペニシラミン（Ｐｅｎ）からなるリストから選択される非天然アミノ酸を表す。

本発明のさらなる実施形態によれば、Ｘ^１１は、天然アミノ酸Ｃを表すか、またはＬ－Ｎ－メチルシステイン（（Ｎ－Ｍｅ）Ｃ）およびＬ－ペニシラミン（Ｐｅｎ）からなるリストから選択される非天然アミノ酸を表す。

本発明のさらなる実施形態によれば、Ｘ^１１は、Ｌ－Ｎ－メチルシステイン（（Ｎ－Ｍｅ）Ｃ）およびＬ－ペニシラミン（Ｐｅｎ）からなるリストから選択される非天然アミノ酸を表す。

本発明のさらなる実施形態によれば、Ｘ^１１は、非天然アミノ酸Ｌ－ペニシラミン（Ｐｅｎ）を表す。

さらなる実施形態によれば、本発明は、式（Ｉ）または式（ＩＩ）を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなり、単離および／または精製され得る、ペプチドまたは誘導体、プロドラッグ、類似体、薬学的に許容される塩、溶媒和物または塩の溶媒和物を含有する化合物を提供し、ここで、Ｘ^９は非天然アミノ酸２，３，３ａ，４，５，６，７，７ａ－オクタヒドロインドール－２－カルボン酸（Ｏｉｃ）を表し、Ｘ^１１は非天然アミノ酸Ｌ－Ｎ－メチルシステイン（（Ｎ－Ｍｅ）Ｃ）または非天然アミノ酸Ｌ－ペニシラミン（Ｐｅｎ）を表す。

本発明のさらなる実施形態によれば、Ｘ^９は非天然アミノ酸２，３，３ａ，４，５，６，７，７ａ－オクタヒドロインドール－２－カルボン酸（Ｏｉｃ）を表し、Ｘ^１１は、非天然アミノ酸Ｌ－ペニシラミン（Ｐｅｎ）を表す。

本発明のさらなる実施形態によれば、Ｘ^９は非天然アミノ酸２，３，３ａ，４，５，６，７，７ａ－オクタヒドロインドール－２－カルボン酸（Ｏｉｃ）を表し、Ｘ^１１は、Ｌ－Ｎ－メチルシステイン（（Ｎ－Ｍｅ）Ｃ）およびＬ－ペニシラミン（Ｐｅｎ）からなるリストから選択される非天然アミノ酸を表す。

さらなる実施形態によれば、本発明は、式（Ｉ）または式（ＩＩ）を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなり、単離および／または精製され得る、ペプチドまたは誘導体、プロドラッグ、類似体、薬学的に許容される塩、溶媒和物または塩の溶媒和物を含有する化合物を提供し、ここで、Ｘ^１２は天然アミノ酸Ｉを表すか、またはａｌｌｏ－Ｌ－イソロイシン（ａｌｌｏ－Ｉ）、（Ｓ）－２－アミノ－２－シクロブチル酢酸（Ｃｂｇ）、（２Ｓ，３Ｓ）－２－（（アミノ）メチル）－３－メチルペンタン酸、Ｌ－フェニルグリシン（Ｐｈｇ）、２－［（１Ｓ，２Ｓ）－１－（アミノ）－２－メチルブチル］－１，３－オキサゾール－４－カルボン酸、２－メチル－Ｄ－アロイソロイシン、Ｌ－ノルバリン（Ｎｖａ）、Ｌ－２－アミノ酪酸（Ａｂｕ）、Ｌ－ｔｅｒｔ－ブチルグリシンおよびアミノイソ酪酸（Ａｉｂ）からなるリストから選択される非天然アミノ酸を表す。

本発明のさらなる実施形態によれば、Ｘ^１２は、天然アミノ酸Ｉを表すか、または２－［（１Ｓ，２Ｓ）－１－（アミノ）－２－メチルブチル］－１，３－オキサゾール－４－カルボン酸、（Ｓ）－２－アミノ－２－シクロブチル酢酸（Ｃｂｇ）、ａｌｌｏ－Ｌ－イソロイシン（ａｌｌｏ－Ｉ）、Ｌ－フェニルグリシン（Ｐｈｇ）、２－メチル－Ｄ－アロイソロイシンおよび（２Ｓ，３Ｓ）－２－（（アミノ）メチル）－３－メチルペンタン酸からなるリストから選択される非天然アミノ酸を表す。

本発明のさらなる実施形態によれば、Ｘ^１２は、天然アミノ酸Ｉを表すか、またはａｌｌｏ－Ｌ－イソロイシン（ａｌｌｏ－Ｉ）、（Ｓ）－２－アミノ－２－シクロブチル酢酸（Ｃｂｇ）および２－［（１Ｓ，２Ｓ）－１－（アミノ）－２－メチルブチル］－１，３－オキサゾール－４－カルボン酸からなるリストから選択される非天然アミノ酸を表す。

本発明のさらなる実施形態によれば、Ｘ^１２は、天然アミノ酸Ｉを表す。

本発明のさらに別の実施形態によれば、ｕおよびｔおよびｓがすべて０である場合、Ｘ^１２の末端カルボキシル基は置換されていないか、またはアミド化されている。

さらなる実施形態によれば、本発明は、式（Ｉ）または式（ＩＩ）を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなり、単離および／または精製され得る、ペプチドまたは誘導体、プロドラッグ、類似体、薬学的に許容される塩、溶媒和物または塩の溶媒和物を含有する化合物を提供し、ここで、Ｘ^１３は、Ｐ、Ａ、Ｓ、Ｔ、Ｇ、Ｄ、Ｅ、ＱまたはＮからなるリストから選択される天然アミノ酸を表すか、またはＮ－メチル－グリシン（（Ｎ－Ｍｅ）Ｇ）、５－アザスピロ［２．４］ヘプタン－６－カルボン酸、Ｌ－２－アミノ酪酸（Ａｂｕ）、２－アミノイソ酪酸（Ａｉｂ）、２－メチル－Ｌ－プロリン（２－Ｍｅ）Ｐ、ヒドロキシプロリン（Ｈｙｐ）、２，３，３ａ，４，５，６，７，７ａ－オクタヒドロインドール－２－カルボン酸（Ｏｉｃ）、トランス－４－フルオロプロリン（（トランス－４－フルオロ）Ｐ）、（２Ｓ，４Ｓ）－４－フルオロプロリン（（シス－４－フルオロ）Ｐ）、Ｌ－４，４－ジフルオロプロリン（（ジフルオロ）Ｐ）、Ｌ－シクロペンチルグリシン（Ｃｐｇ）、（Ｓ）－２－アミノ－２－シクロブチル酢酸（Ｃｂｇ）および（２Ｓ）－ピロリジン－２－イル酢酸（ベータ－ホモ－Ｐ）からなるリストから選択される非天然アミノ酸を表すが、Ｌ－立体配置の各天然アミノ酸および／または非天然アミノ酸は、Ｄ－立体配置の立体異性体によって置き換えられ得る。

本発明のさらなる実施形態によれば、Ｘ^１３はＰ、ＡおよびＤからなるリストから選択される天然アミノ酸を表すか、または２－メチル－Ｌ－プロリン（２－Ｍｅ）Ｐ、Ｎ－メチル－グリシン（（Ｎ－Ｍｅ）Ｇ）、トランス－４－フルオロプロリン（（トランス－４－フルオロ）Ｐ）、Ｌ－２－アミノ酪酸（Ａｂｕ）、２－アミノイソ酪酸（Ａｉｂ）、ヒドロキシプロリン（Ｈｙｐ）および２，３，３ａ，４，５，６，７，７ａ－オクタヒドロインドール－２－カルボン酸（Ｏｉｃ）からなるリストから選択される非天然アミノ酸を表すが、Ｌ－立体配置の各天然アミノ酸および／または非天然アミノ酸は、Ｄ－立体配置の立体異性体によって置き換えられ得る。

本発明のさらなる実施形態によれば、Ｘ^１３はＰまたはＤからなるリストから選択される天然アミノ酸を表すか、または２－アミノイソ酪酸（Ａｉｂ）、２－メチル－Ｌ－プロリン（２－Ｍｅ）Ｐおよびトランス－４－フルオロプロリン（（トランス－４－フルオロ）Ｐ）からなるリストから選択される非天然アミノ酸を表すが、Ｌ－立体配置の各天然アミノ酸および／または非天然アミノ酸は、Ｄ－立体配置の立体異性体によって置き換えられ得る。

本発明のさらなる実施形態によれば、Ｘ^１３は、天然アミノ酸Ｐを表す。

本発明のさらなる実施形態によれば、ｓは、０の整数を表す。

本発明のさらなる実施形態によれば、ｓは、１の整数を表す。

本発明のさらに別の実施形態によれば、ｕおよびｔが両方とも０であり、ｓが０とは異なっている場合、Ｘ^１３の末端カルボキシル基は置換されていないか、またはアミド化されている。

本発明のさらなる実施形態によれば、ｔが０であり、ｓが１である場合、Ｘ^１３の末端カルボキシル基は置換されていないか、またはアミド化されている。

さらなる実施形態によれば、本発明は、式（Ｉ）または式（ＩＩ）を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなり、単離および／または精製され得る、ペプチドまたは誘導体、プロドラッグ、類似体、薬学的に許容される塩、溶媒和物または塩の溶媒和物を含有する化合物を提供し、ここで、Ｘ^１４は任意の天然アミノ酸または非天然アミノ酸を表すが、任意の天然アミノ酸および／または非天然アミノ酸は、Ｄ－立体配置またはＬ－立体配置であり得る。

本発明のさらなる実施形態によれば、Ｘ^１４は、Ｄ、Ｅ、Ｇ、Ｋ、Ｎ、ＰおよびＱからなるリストから選択される天然アミノ酸を表すか、または３－カルボキシフェニルアラニン（（３－カルボキシ）Ｆ）、（２Ｓ）－２－アミノ－４－（ベンジルアミノ）－４－オキソブタンカルボン酸（（Ｎ－ベンジル）Ｄ）、Ｎ－メチル－グリシン（（Ｎ－Ｍｅ）Ｇ）、６－アミノヘキサン酸（Ａｈｘ）、（２Ｓ）－ピロリジン－２－イル酢酸（ベータ－ホモ－Ｐ）、Ｌ－２，３－ジアミノプロピオン酸（Ｄａｐ）、Ｌ－オルニチン（Ｏｒｎ）およびトラネキサム酸（トラネキサミック）からなるリストから選択される非天然アミノ酸を表すが、Ｌ－立体配置の各天然アミノ酸および／または非天然アミノ酸はＤ－立体配置の立体異性体によって置き換えられ得る。

本発明のさらなる実施形態によれば、Ｘ^１４は、Ｄ、Ｑ、Ｎ、ＥおよびＰからなるリストから選択される天然アミノ酸を表すか、または３－カルボキシフェニルアラニン（（３－カルボキシ）Ｆ）、Ｎ－メチル－グリシン（（Ｎ－Ｍｅ）Ｇ）、（２Ｓ）－ピロリジン－２－イル酢酸（ベータ－ホモ－Ｐ）、Ｌ－２，３－ジアミノプロピオン酸（Ｄａｐ）、Ｌ－オルニチン（Ｏｒｎ）およぼトラネキサム酸（トラネキサミック）からなるリストから選択される非天然アミノ酸を表すが、Ｌ－立体配置の各天然アミノ酸および／または非天然アミノ酸は、Ｄ－立体配置の立体異性体によって置き換えられ得る。

本発明のさらなる実施形態によれば、Ｘ^１４は、Ｄ、ＱまたはＩからなるリストから選択される天然アミノ酸を表す。

本発明のさらなる実施形態によれば、Ｘ^１４は、天然アミノ酸Ｄを表す。

本発明のさらなる実施形態によれば、Ｘ^１４におけるＣ末端「－ＯＨ」部分は、Ｃ末端「－ＮＨ_２」部分に置き換えられている。

本発明のさらなる実施形態によれば、ｑは、０の整数を表す。

本発明のさらなる実施形態によれば、ｑは、１の整数を表す。

本発明のさらなる実施形態によれば、ｓおよびｔが整数１を表す場合、Ｘ^１４の末端カルボキシル基は置換されていないか、またはアミド化されている。

本発明のさらなる実施形態によれば、ｓおよびｔが１の整数を表す場合、Ｘ^１４の末端カルボキシル基は置換されていない。

本発明によれば、Ｘ^１５は、存在する場合、アミノ酸ではない化学基であってもよい。

本発明のさらなる実施形態によれば、Ｘ^１５は、－ＮＨ_２、－ＮＨ－Ｃ_１－Ｃ_６－アルキル、（１Ｒ，３Ｓ）－３－（アミノ）シクロペンタンカルボン酸、（１Ｓ，３Ｒ）－３－（アミノ）シクロペンタンカルボン酸、（Ｒ）－４－アミノ－６－メチルヘプタン酸、（Ｓ）－（１－ピペリジン－３－イル）－酢酸、（Ｓ）－３－（１－ピロリジン－２－イル）－プロピオン酸、（Ｓ）－３－（２Ｈ－テトラゾール－５－イル）プロパン酸、（Ｓ）－ピロリジン－３－カルボン酸、５－アザスピロ［２．４］ヘプタン－１－カルボン酸および（２Ｓ）－３－（トリアゾール－１－イル）－２－（アミノ）プロパン酸からなるリストから選択される化学基である。

本発明のさらなる実施形態によれば、Ｘ^１５は、－ＮＨ_２または－ＮＨ－Ｃ_１－Ｃ_６－アルキル、好ましくは－ＮＨ_２から選択される化学群である。

本発明のさらなる実施形態によれば、ｑは、０の整数を表す。

本発明のさらなる実施形態によれば、ｑは、１の整数を表す。

本発明のさらなる実施形態によれば、ペプチドのＮ末端は、置換されていないか、アセチル化されているか、またはＣ_１－Ｃ_２０－アルキルで一置換もしくは二置換されている。

本発明のさらなる実施形態によれば、ペプチドのＮ末端は、置換されていないか、アセチル化されているか、またはＣ_１－Ｃ_４－アルキルで一置換もしくは二置換されている。

本発明のさらなる実施形態によれば、ペプチドのＮ末端は、置換されていないか、またはアセチル化されている。

本発明のさらなる実施形態によれば、Ｃ末端は、置換されていないか、またはアミド化されている。

本発明のさらなる実施形態によれば、Ｎ末端およびＣ末端は置換されていない。

さらなる実施形態によれば、本発明は、式（Ｉ）または式（ＩＩ）を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなり、単離および／または精製され得る、ペプチドまたは誘導体、プロドラッグ、類似体、薬学的に許容される塩、溶媒和物または塩の溶媒和物を含有する化合物を提供し、それらは、実施例２９、４４、４５、６７、７５、１０９、１６６、１８５、４４３および４６６からなる群より選択されるか、または実施例２９、４４、４５、６７、７５、１０９、１６６、１８５、４４３、４６６および４９９からなる群より選択される。

式（Ｉ）または（ＩＩ）のペプチドは、線状であるか、または環化されていることができる。本明細書で使用される用語「環化される」は、ポリペプチド分子の一部（例えば、Ｃｙｓ、（Ｎ－Ｍｅ）ＣｙｓまたはＰｅｎ）がポリペプチド分子の別の部分（例えば、別のＣｙｓ、（Ｎ－Ｍｅ）ＣｙｓまたはＰｅｎ）に結合して、ジスルフィド架橋（－Ｓ－Ｓ－）または炭素－硫黄結合（例えば、（－ＣＨ_２－Ｓ－）もしくは（－（ＣＨ_２）_２－Ｓ－））、硫黄－炭素結合（例えば、（－Ｓ－ＣＨ_２－）または（－Ｓ－（ＣＨ_２）_２－））、炭素－硫黄－炭素結合（－ＣＨ_２－Ｓ－ＣＨ_２－）もしくは炭素－炭素結合（例えば、（－ＣＨ_２－ＣＨ_２－））のような他の類似の結合を形成することなどによって、閉環を形成する反応を指す。本発明によれば、ペプチドのＸ^３位とＸ^１１位との間の連結が好ましい。本発明によるペプチドの配列において、「＋」が続くアミノ酸は、環状ペプチドを指し、ここで、アミノ酸は、閉鎖環を形成するジスルフィド架橋によって「＋」が続く別のアミノ酸に連結される。あるいは、ポリペプチド分子の２つの連結された化学基が結合線によって示され得る。

さらなる実施形態によれば、本発明は、式（Ｉ）または式（ＩＩ）を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなり、単離および／または精製され得る、ペプチドまたは誘導体、プロドラッグ、類似体、薬学的に許容される塩、溶媒和物または塩の溶媒和物を含有する化合物を提供し、ここで、前記ペプチドは環化されている。

本発明のさらなる実施形態によれば、式（Ｉ）または式（ＩＩ）のペプチドは、Ｘ^３およびＸ^１１を結合する連結を介して環化される。

本発明のさらなる実施形態によれば、式（Ｉ）または式（ＩＩ）のペプチドは、Ｘ^３およびＸ^１１を結合する連結を介して環化され、ここで、Ｘ^３およびＸ^１１は式－Ｓ－Ｓ－、－ＣＨ_２－Ｓ－、－Ｓ－ＣＨ_２－、－ＣＨ_２－ＣＨ_２－、－Ｓ－（ＣＨ_２）_２－、－（ＣＨ_２）_２－Ｓ－または－ＣＨ_２－Ｓ－ＣＨ_２－のリンカーを介して結合される。

本発明のさらなる実施形態によれば、式（Ｉ）または式（ＩＩ）のペプチドは、Ｘ^３およびＸ^１１を結合する連結を介して環化され、ここで、Ｘ^３およびＸ^１１は式－Ｓ－Ｓ－のジスルフィド結合を介して結合される。

本発明のペチドは、繰り返し単位を特徴とする適切な水溶性ポリマーで置換することができる。適切なポリマーは、ポリアルキルオキシポリマー、ヒアルロン酸およびその誘導体、ポリビニルアルコール、ポリオキサゾリン、ポリ無水物、ポリ（オルトエステル）、ポリカーボネート、ポリウレタン、ポリアクリル酸、ポリアクリルアミド、ポリアクリレート、ポリメタクリレート、ポリオルガノホスファゼン、ポリシロキサン、ポリビニルピロリドン、ポリシアノアクリレート、およびポリエステルからなる群から選択され得る。

本発明のペチドは、少なくとも１つのポリエチレン基（ＰＥＧ基）で置換することができる。少なくとも１つのＰＥＧ基は、好ましくはＮ末端および／またはＣ末端に結合している。ＰＥＧ基はペプチドの化学基および／またはアミノ酸の任意の適切な官能基（例えば、ヒドロキシル基、カルボキシル基、アミノ基、チオール基、好ましくはアミノ基またはカルボキシ基）に結合され得る。好ましくは、本発明によるペプチドは、Ｎ末端に結合した１つのＰＥＧ基またはＣ末端に結合した１つのＰＥＧ基を含む。より好ましくは、１つのＰＥＧ基がアミド結合を介してＮ末端またはＣ末端に結合される。

ペプチドのＰＥＧ化はそれらの溶解性を増強し、免疫原性を減少させ、安定性を改善し、および／または腎クリアランスを減少させることによって半減期を延ばすことができ、これは１９８０年代初期から周知の概念である（Ｃａｌｉｃｅｔｉ Ｐ．、Ｖｅｒｏｎｅｓｅ Ｆ．Ｍ．、Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖ．Ｒｅｖ．２００３、５５、１２６１－１２７７）。いくつかの薬物について、これは成功して使用されているが、多くの例ではＰＥＧ化がこの概念がもはや適切ではない程度まで薬物物質の効力を低下させる（Ｔ．Ｐｅｌｅｇ－Ｓｈｕｌｍａｎら、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、２００４、４７、４８９７－４９０４）。

本発明によるＰＥＧ基は、エチレンオキシドのオリゴマーまたはポリマーを形成するために、少なくとも２つのエチレンオキシド単位を含有する任意の基である。ＰＥＧ基は、本発明のペプチドに共有結合され（ＰＥＧ化）、それでＰＥＧ化ペプチドと呼ばれる。一般に、分子に対するこのタイプの修飾は、当技術分野で周知である。

ＰＥＧ基は、相互接続部分、ポリマー部分、および末端基からなり得る。相互接続部分はＣ_１－Ｃ_２０アルキルから成ることができ、それはヘテロ原子または－Ｏ－、－Ｓ－、Ｎ（Ｒ^Ｘ）、Ｃ（Ｏ）、Ｃ（Ｏ）Ｒ^Ｘ、Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^Ｘ）、Ｎ（Ｒ^Ｘ）Ｃ（Ｏ）、１つまたは複数のＣ_３－Ｃ_８－シクロアルキル、Ｃ_３－Ｃ_７－ヘテロシクロアルキル、アリールまたはヘテロアリール（ｈｅｔｅｒａｒｙｌ）からなる群から選択される官能基によって中断されていてもよいか、または終端されていてもよく、ここで、Ｒ^Ｘは水素またはＣ_１－Ｃ_６－アルキルであり、これは、1つまたは複数の上記の原子または基によって中断されていてもよいか、または終端されていてもよく、これは、末端原子としてさらに水素を有する。ポリマー部分は、少なくとも２つのエチレンオキシド単位からなり、これは１つ以上のヘテロ原子または－Ｏ－、－Ｓ－、Ｎ（Ｒ^Ｘ）、Ｃ（Ｏ）、Ｃ（Ｏ）Ｒ^Ｘ、Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^Ｘ）、Ｎ（Ｒ^Ｘ）Ｃ（Ｏ）、Ｃ_１－Ｃ_６－ａｌｋｙｌ、Ｃ_３－Ｃ_８－シクロアルキル、Ｃ_３－Ｃ_７－ヘテロシクロアルキル、アリールまたはヘテロアリールからなる群から選択される官能基によって任意に中断または終端されていてもよく、ここで、Ｒ^Ｘが水素またはＣ_１－Ｃ_６－アルキルである。

末端基は、ヘテロ原子またはＯＨ、ＳＨ、Ｎ（Ｒ^Ｘ）_２、Ｃ（Ｏ）Ｒ^Ｘ；ＣＯＲ^Ｘ、ＣＯＯＲ^Ｘ、Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^Ｘ）、Ｎ（Ｒ^Ｘ）Ｃ（Ｏ）ＮＨ_２から選択される官能基から構成され得、ここで、Ｒ^Ｘは、水素またはＣ_１－Ｃ_６－アルキルである。好ましい末端基は、ＣＯＯＨおよびＣ（Ｏ）ＮＨ_２である。

本発明によるＰＥＧスペーサーの例は、１エチレングリコール単位（ｎ＝１；１０原子）を有するＰＥＧ１（１０原子）、２エチレングリコール単位（ｎ＝２；１３原子）を有するＰＥＧ２（１３原子）、３エチレングリコール単位（ｎ＝３；１６原子）を有するＰＥＧ３（１６原子）、４エチレングリコール単位（ｎ＝４；１９原子）を有するＰＥＧ４（１９原子）、５エチレングリコール単位（ｎ＝５；２２原子）を有するＰＥＧ５（２２原子）、６エチレングリコール単位（ｎ＝６；２５原子）を有するＰＥＧ６（２５原子）などを含む。

本明細書で定義されるＰＥＧ基は商業的供給者によって異なる名称で示されてもよく、これは本発明から異なる名称を有するそのような同一の化合物を除外しないことに留意されたい。

さらなる実施形態によれば、本発明は、式（Ｉ）または式（ＩＩ）を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなり、単離および／または精製され得る、ペプチドまたは誘導体、プロドラッグ、類似体、薬学的に許容される塩、溶媒和物または塩の溶媒和物を含有する化合物を提供し、ここで、前記ペプチドは、少なくとも１つのＰＥＧ基によって置換される。

本発明のさらなる実施形態によれば、ペプチドは、１つのＰＥＧ基によって置換されている。

本発明のさらなる実施形態によれば、ペプチドは１つのＰＥＧグループによって置換されており、ここで、ＰＥＧグループは、好ましくはアミド結合を介して、Ｃ末端に結合している。

本発明のさらなる実施形態によれば、ペプチドは少なくとも１つのＰＥＧ基によって置換されているが、少なくとも１つ以上のＰＥＧ基は式（ＩＩＩａ）

〔式中、
＊は、窒素原子または酸素原子への結合を示し、
Ｄは、Ｃ_１－Ｃ_４－アルキレンであり、
Ｙは、ヒドロキシル、メトキシ、エトキシ、カルボキシ、カルボキサミドまたはアミノからなる群から選択され、
ｎは、２～１５の整数を表す〕
の基であるか、または式（ＩＩＩｂ）

〔式中、
＊は、カルボニル基との結合を示し、
Ｄ^１は、Ｃ_１－Ｃ_４－アルキレンであり、
Ｙ^１は、ヒドロキシル、メトキシ、エトキシ、カルボキシ、カルボキサミドまたはアミノからなる群から選択され、
ｍは、２～１５の整数を表す〕
の基であるか、
またはＴＴＤＳである。

本発明のさらなる態様によれば、ペプチドは、少なくとも１つのＰＥＧ基によって置換されているが、ＰＥＧ１（１０原子）、ＰＥＧ２（１３原子）、ＰＥＧ３（１６原子）、ＰＥＧ４（１９原子）、ＰＥＧ４－ＣＨ_２ＣＯ_２Ｈ（１５原子）、ＰＥＧ５（２２原子）、ＰＥＧ５－ＣＨ_２ＣＯ_２Ｈ（１８原子）、ＰＥＧ７（２５原子）、ＰＥＧ８（２８原子）、ＰＥＧ９（３１原子）およびＴＴＤＳからなるリストから選択される少なくとも１つ以上のＰＥＧ基で置換されている。

本発明のペプチドは、少なくとも１つのＣ_８－Ｃ_２０脂肪酸を含むことができる。一般に、このような脂肪酸は、分枝状であっても環状であってもよい。少なくとも１つのＣ_８－Ｃ_２０脂肪酸は、好ましくはＮ－末端および／またはＣ－末端に結合される。Ｃ_８－Ｃ_２０脂肪酸はペプチドの化学基および／またはアミノ酸の任意の好適な官能基、例えば、ヒドロキシル基、カルボキシル基、アミノ基、チオール基、好ましくはアミノ基またはカルボキシ基に結合させることができる。好ましくは、本発明のペプチドは、Ｎ－末端に結合された１つのＣ_８－Ｃ_２０脂肪酸、またはＣ－末端に結合された１つのＣ_８－Ｃ_２０脂肪酸を含む。より好ましくは、１つのＣ_８－Ｃ_２０脂肪酸はＮ－末端またはＣ－末端に、アミド結合を介して結合される。Ｘ^０またはＸ^１５によって形成される脂肪酸側鎖は、脂肪酸＞Ｃ_８であることが好ましく、脂肪酸≧Ｃ_１２であることがより好ましく、脂肪酸≧Ｃ_１４であることがさらに好ましい。Ｘ^０またはＸ^１５によって形成される脂肪酸側鎖が、Ｃ_１２－Ｃ_１８脂肪酸、好ましくはＣ_１２－Ｃ_１６脂肪酸、またはＣ_１４－Ｃ_１８脂肪酸、またはＣ_１４－Ｃ_１６脂肪酸であることがさらに好ましい。最も好ましいのは、Ｃ_１６脂肪酸、例えば、パルミチン酸（パルミトイル、パーム）およびＣ_１８脂肪酸、例えば、１，１８－オクタデカン二酸（ＯＤＤ）である。

さらに、Ｎ末端またはＣ末端の部分は、特にアミノ末端またはカルボキシ末端がリンカーまたは別の化学的部分に結合している状況において、結合、例えば共有結合であってもよいことが理解される。

化学基、非天然アミノ酸または部分は、表３に示されるように本明細書中で省略され得る。

表３：化学基、非天然アミノ酸または配列中のさらなる部分に使用される略語／表現および命名法

本発明の式（Ｉ）または式（ＩＩ）によるペプチドのいくつかの部分の定義において、いくつかのアミノ酸と関連して使用される用語「模倣体（ｍｉｍｅｔｉｃ）」は、例えばアルギニン模倣体、イソロイシン模倣体またはプロリン模倣体などのそれぞれのアミノ酸模倣体を表す。一般に、「タンパク質模倣体」は、いくつかの他のタンパク質の作用または活性を生物学的に模倣するペプチド、修飾ペプチド、または任意の他の分子などの分子を示す。特定のアミノ酸に関連して用語「模倣体」を使用することと関連して、前記「模倣体」はそれぞれのアミノ酸の作用または活性を生物学的に模倣する任意の他のアミノ酸、アミノ酸類似体、アミノ酸誘導体、アミノ酸結合体などを示す。

本発明によるプロリン模倣体は、特に（１Ｓ，２Ｓ，５Ｒ）－３－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－２－カルボン酸、Ｈｙｐ、モルホリン－３－カルボキシリック、Ｐｉｐ、（４ａＲ，６ａＲ，９Ｓ，１１ａＳ）－１１－オキソ－２，３，４，４ａ，６ａ，７，８，９，１１，１１ａ－デカヒドロ－１Ｈ－ピリド［３，２－ｅ］ピロロ［１，２－ａ］アゼピン－９－カルボン酸または（トランス－４－フルオロ）Ｐ、（１Ｒ，２Ｓ，５Ｓ）－３－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－２－カルボン酸、Ｏｉｃ、Ｈｙｐ、（４－ＣＦ３）Ｐ、（シス－４－フルオロ）Ｐ、３，３－ジメチル－１，３－アザシロリジン－５－カルボン酸、（３Ｓ－ＯＨ）Ｐ、（１Ｒ，３Ｓ，５Ｒ）－２－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－３－カルボン酸、（６Ｓ）－５－アザスピロ［２．４］ヘプタン－６－カルボン酸、ｒｅｌ－（１Ｒ，３Ｒ，５Ｒ，６Ｒ）－６－（トリフルオロメチル）－２－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－３－カルボン酸、（２Ｓ，３ａＳ，６ａＳ）－オクタヒドロシクロペンタ［ｂ］ピロール－２－カルボン酸またはジフルオロプロリン、（３Ｒ，６Ｒ）－１，１－ジフルオロ－５－アザスピロ［２．４］ヘプタン－６－カルボン酸（エナンチオマー１）、（３Ｒ，６Ｒ）－１，１－ジフルオロ－５－アザスピロ［２．４］ヘプタン－６－カルボン酸（エナンチオマー２）および置換プロリンを含む。

本発明によるイソロイシン模倣体は、特に（Ｎ－メチル）－Ｉ、ａｌｌｏ－Ｉｌｅ、Ｃｂａ、Ｎｖａ、Ａｂｕ、Ｌｅｕ、Ｃｐｇ、シクロヘキシル－Ｇｌｙ、（Ｓ）－２－アミノ－３－エチル－ペンタン酸、３－クロロ－Ｐｈｇ、ａｌｌｏ－Ｉｌｅ、Ｃｈｇ、シクロブチルグリシン、ａｌｌｏ－Ｉｌｅ、Ｃｂｇ、（２Ｓ，３Ｓ）－２－（（アミノ）メチル）－３－メチルペンタン酸）、Ｐｈｇ、２－［（１Ｓ，２Ｓ）－１－（アミノ）－２－メチルブチル］－１，３－オキサゾール－４－カルボン酸、２－メチル－Ｄ－アロイソロイシン、Ｎｖａ、ＡｂｕまたはＡｌａを含む。

本発明によるロイシン模倣体は、特に（ｔＢｕ）Ａ、（２－クロロ）Ｆ、（２－ブロモ）Ｆ、ＡＡＤ、（２Ｓ）－２－アミノ－４，４，４－トリフルオロブタン酸、Ｃｎｂａ、（４－フルオロ）Ｌ、（Ｓ）－（トリフルオロメチル）－Ｌ－システイン、（２Ｓ）－２－アミノ－３－（１－メチルシクロプロピル）プロパン酸、Ｇｌｙ（ｔＢｕ）、３－（トリメチルシリル）－Ｌ－アラニン、２，５－ジフルオロ－Ｌ－フェニルアラニン、２－アミノ－７－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－７－オキソヘプタン酸、５，５，５－トリフルオロ－Ｌ－ロイシン（（トリフルオロ）Ｌ）、（２－Ｍｅ）Ｆ、Ｃｂａ、Ｃｐａ、シクロプロピルメチルアラニン、トリフルオロメチルアラニンまたはジフルオロメチルアラニン、（２－フルオロ）Ｆ、（２Ｓ）－３－（２，３－ジフルオロフェニル）－２－アミノプロパン酸、（２Ｓ）－３－（３－シアノフェニル）－２－アミノプロパン酸、２－アミノ－５，５，５－トリフルオロ－４－メチル－ペンタン酸、（２Ｓ）－２－アミノ－５－メチル－ヘキサン酸または（２Ｓ）－３－（インドール－４－イル）－２－（アミノ）プロパン酸を含む。

本発明はさらに、記載されたペプチドの類似体および誘導体を含む。本発明によるペプチドまたはアミノ酸配列の「類似体」または「誘導体」という用語は、特に、前記配列に対して、少なくとも８０％または少なくとも８５％、好ましくは少なくとも９０％、より好ましくは少なくとも９５％、さらにより好ましくは少なくとも９９％の同一性のアミノ酸配列を有し、および同じまたは同等の特性または活性を有する任意のアミノ酸配列を含む。配列同一性は、一般的な技術（例えば、視覚的比較）によって、または当該分野で一般的に使用される任意のコンピュータツールによって決定され得る。例としては、デフォルトパラメーターと共に使用されるＢＬＡＳＴプログラムが挙げられる。

本発明のペプチドまたはアミノ酸配列の類似体または誘導体は、１つ以上のアミノ酸の欠失もしくは挿入、または１つ以上のアミノ酸の置換、またはさらには選択的スプライシングさえ含む、本発明のペプチドの配列における突然変異または変異に由来する変化に起因し得る。これらの修飾のいくつかを組み合わせてもよい。好ましくは、本発明のアミノ酸配列の類似体はアミノ酸の配列に対しての保存的置換を含む。

本明細書中で使用される用語「保存的置換」は、１つ以上のアミノ酸が別の生物学的に類似した残基によって置換されることを示す。例としては、類似の特徴を有するアミノ酸残基、例えば、小アミノ酸、酸性アミノ酸、極性アミノ酸、塩基性アミノ酸、疎水性アミノ酸および芳香族アミノ酸の置換が挙げられる。例えば、アミノ酸の保存的置換が物理化学的性質によって分類される、以下の表４のスキームを参照のこと。Ｉ：中性、親水性；ＩＩ：酸およびアミド；ＩＩＩ：塩基性；ＩＶ：疎水性；Ｖ：芳香族、嵩高いアミノ酸、ＶＩ：中性または疎水性；ＶＩＩ：酸性；ＶＩＩＩ：極性。

表４：物理化学的性質に従ってグループ分けしたアミノ酸

ペプチド類似体または誘導体はまた、１つ以上のさらなる修飾（例えば、アミノ酸抱合体を形成するための別の化合物への接合）を含み得る。

そのような修飾は、代替的にまたは追加的に、本発明のペプチド中の１つ以上のアミノ酸残基、例えば、化学基Ｘ^０またはＰＥＧ基のようなポリマー部分との関連で上記に定義された化学基の側鎖への接合から生じ得る。このような修飾は例えば、ペプチドのｉｎ ｖｉｖｏ（例えば、血漿中）での溶解性および／または半減期、および／またはバイオアベイラビリティを増加させることができ、治療用タンパク質およびペプチドのクリアランス（例えば、腎クリアランス）を減少させることも知られている。適切な修飾は当業者に周知であり、特に、それに限定されないが、本発明のペプチドの１つ以上の側鎖のＰＥＧ化を含む。ここで、「ＰＥＧ化」はポリエチレングリコール（ＰＥＧ）構造を本発明のペプチドにカップリング（例えば、共有結合的に）させる作用を表す。当業者は例えばＷＯ２０１５／２００９１６Ａ１（これは参照により本明細書に組み込まれる）から、それぞれの抱合体を形成するための小ペプチドのアミノ酸側鎖にカップリングするための可能なＰＥＧをよく知っている。

特に断らない限り、本発明の全てのペプチドはＴＦＡ塩である。本発明は、本明細書で定義されるペプチドの薬学的に許容される塩および無塩形態（ｓａｌｔ ｆｒｅｅ ｆｏｒｍｓ）をさらに含む。ここで、薬学的に許容される塩は本発明のペプチドまたは化合物の塩または両性イオン形態を表し、それは、水または油溶性または分散性であり、過度の毒性、刺激、およびアレルギー反応を伴わずに疾患の治療に適しており、妥当な利益／リスク比と釣り合いがあり、それらの意図された用途に有効である。塩は化合物の最終的な単離および精製の間に、またはアミノ基を適切な酸と反応させることによって別々に調製され得る。代表的な酸付加塩には、酢酸塩、アジピン酸塩、アルギン酸塩、クエン酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、重硫酸塩、酪酸塩、樟脳塩、樟脳スルホン酸塩、炭酸塩、ジグルコン酸塩、グリセロリン酸塩、ヘミサルフェート、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、ギ酸塩、フマル酸塩、塩酸塩、臭化水素塩、ヨウ化水素塩、２－ヒドロキシエタンスルホン酸塩（イセチオネート）、乳酸塩、マレイン酸塩、メシチレンスルホン酸塩、メタンスルホン酸塩、ナフチレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、２－ナフタレンスルホン酸塩、シュウ酸塩、パモエート、ペクチン酸塩、過硫酸塩、３－フェニルプロピオン酸塩、ピクリン酸塩、ピバリン酸塩、プロピオン酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、トリクロロ酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、リン酸塩、グルタミン酸塩、重炭酸塩、パラ－トルエンスルホン酸塩、およびウンデカン酸塩が含まれる。好ましい酸付加塩には、トリフルオロアセテート、ギ酸塩、塩酸塩、およびアセテートが含まれる。

また、本発明の化合物中のアミノ基は、メチル、エチル、プロピル、およびブチルの塩化物、臭化物、およびヨウ化物；ジメチル、ジエチル、ジブチル、およびジアミルの硫酸塩；デシル、ラウリル、ミリスチル、およびステリルの塩化物、臭化物、およびヨウ化物；ならびに臭化ベンジルおよび臭化フェネチルで四級化することができる。治療上許容される付加塩を形成するために使用することができる酸の例には、塩化水素酸、臭化水素酸、硫酸、およびリン酸などの無機酸、ならびにシュウ酸、マレイン酸、コハク酸、およびクエン酸などの有機酸が含まれる。薬学的に許容される塩は適切には例えば、酸付加塩および塩基性塩の中から選択される塩であり得る。酸付加塩の例には、塩化物塩、クエン酸塩および酢酸塩が含まれる。

塩基性塩の例には、カチオンがアルカリ金属カチオン（例えば、ナトリウムまたはカリウムイオン）、アルカリ土類金属カチオン（例えば、カルシウムまたはマグネシウムイオン）、ならびに置換アンモニウムイオン（例えば、Ｎ（Ｒ^１）（Ｒ^２）（Ｒ^３）（Ｒ^４）^＋型のイオン、ここで、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３およびＲ^４は互いに独立して、代表的には水素、置換されていてもよいＣ_１－６－アルキルまたは置換されていてもよいＣ_２－６－アルケニルを示す）から選択される塩が含まれる。関連するＣ_１－６－アルキル基の例には、メチル、エチル、１－プロピルおよび２－プロピル基が含まれる。関連性のあるＣ_２－６－アルケニル基の例には、エテニル、１－プロペニルおよび２－プロペニルが含まれる。ここで、カチオンがナトリウム、カリウムおよびカルシウムの中から選択される塩が好ましい。

薬学的に許容される塩の他の例は、「Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ'ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ」、第１７版、Ａｌｆｏｎｓｏ Ｒ．Ｇｅｎｎａｒｏ（編）、Ｍａｒｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ、Ｅａｓｔｏｎ、ＰＡ、ＵＳＡ、１９８５（およびそのより最近の版）、「Ｅｎｃｙｃｌｏｐａｅｄｉａ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ」、第３版、Ｊａｍｅｓ Ｓｗａｒｂｒｉｃｋ（編）、Ｉｎｆｏｒｍａ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ ＵＳＡ（Ｉｎｃ．）、ＮＹ、ＵＳＡ、２００７に記載されている。また、適切な塩についての概説については、Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓａｌｔｓ：Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ，ａｎｄ Ｕｓｅ ｂｙ Ｓｔａｈｌ ａｎｄ Ｗｅｒｍｕｔｈ（ＷｉｌｅｙＶＣＨ、２００２）を参照されたい。他の適切な塩基性塩は、非毒性塩を形成する塩基から形成される。代表的な例としては、アルミニウム、アルギニン、ベンザチン、カルシウム、コリン、ジエチルアミン、ジオラミン、グリシン、リジン、マグネシウム、メグルミン、オラミン、カリウム、ナトリウム、トロメタミン、および亜鉛塩、好ましくはコリンが挙げられる。酸および塩基の半塩（Ｈｅｍｉｓａｌｔｓ）、例えば、半硫酸塩および半カルシウム塩を形成することもできる。

本発明は、本明細書で定義されるペプチドの溶媒和物をさらに含む。ここで、用語「溶媒和物」とは、溶質（例えば、本発明によるペプチドまたはその薬学的に許容される塩）と溶媒との間に形成される定義された化学量論の複合体をいう。これに関連して、溶媒は例えば、水、エタノールまたは別の薬学的に許容される、典型的には小分子有機種（例えば、酢酸または乳酸が挙げられるが、これらに限定されない）であり得る。問題の溶媒が水である場合、そのような溶媒和物は、通常、水和物と呼ばれる。

本発明の化合物は有用な薬理学的特性を有し、ヒトおよび動物における障害の予防および治療に使用することができる。

本発明の文脈において、用語「治療（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」または「治療（ｔｒｅａｔ）」は疾患、状態、障害、損傷または健康障害、そのような状態の発達、経過または進行および／またはそのような状態の症状の抑制、遅延、停止、改善、減弱、制限、減少、抑制、逆転または治癒を包含する（ここで、用語「治療（ｔｈｅｒａｐｙ）」は用語「治療（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」と同義であると理解される）。

本発明の文脈において、用語「予防（ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ）」、「予防（ｐｒｏｐｈｙｌａｘｉｓ）」または「予防（ｐｒｅｃａｕｔｉｏｎ）」は同義的に使用され、病気、状態、障害、傷害または健康障害、そのような状態の発生または進行、および／またはそのような状態の症状を罹患する、接触する、それらに苦しむ、または有するリスクの回避または減少を指す。

疾患、状態、障害、損傷または健康障害の治療または予防は、部分的にまたは完全に行われてもよい。

本発明の化合物は、心血管障害、心肺障害、腎障害、肺障害、線維性障害、血栓塞栓性障害、および炎症性障害の治療および／または予防に特に適している。

従って、本発明による化合物は例えば、心血管および心肺障害およびそれらの後遺症（ｓｅｑｕｅｌｓ）、例えば炎症性心疾患、心筋炎、心内膜炎、心膜炎、心臓病変を伴うおよび伴わないリウマチ性発熱、急性リウマチ性心膜炎、急性リウマチ性心内膜炎、急性リウマチ性心筋炎、心内膜炎を伴うおよび伴わない慢性リウマチ性心疾患、弁膜炎、心膜炎、不安定狭心症および急性心筋梗塞などの虚血性心疾患、心房性および心室性不整脈および伝導障害、例えばグレードＩ～ＩＩＩの房室ブロック、上室性頻脈性不整脈、心房細動、心房粗動、心室細動、心室粗動、心室性頻脈性不整脈、トルサード・ド・ポワント頻脈（Ｔｏｒｓａｄｅ ｄｅ ｐｏｉｎｔｅｓ ｔａｃｈｙｃａｒｄｉａ）、心房性および心室性期外収縮、ＡＶ－接合部期外収縮、洞不全症候群、脳動脈の閉塞および狭窄による脳卒中（例えば血栓塞栓性、動脈硬化性、感染性、炎症性血管病変後の脳梗塞）の治療および／または予防のための、脳内または頭蓋内出血による脳卒中、動脈、細動脈及び毛細血管の疾患（例えば、血栓塞栓性、動脈硬化性、感染性及び炎症性血管病変、変形性動脈内膜炎又は閉塞性動脈内膜炎、動脈瘤解離）による末梢虚血性組織損傷（例えば、動脈硬化性壊疽）、静脈炎及び血栓性静脈炎の治療および／または予防のための、循環器系の術後障害、例えば、全身性炎症反応症候群、手術後の血管麻痺、心臓切開後症候群、術後低血圧及び心不全を予防するための、血栓溶解療法、経皮経管的血管形成術（ＰＴＡ）、経皮的冠動脈形成術（ＰＴＣＡ）、バイパス手術並びに心臓、肺、肝臓及び腎臓移植後の虚血再灌流障害及び臓器機能不全の予防および治療のための、ならびに腎臓移植後の移植片機能遅延の治療および／または予防のための医薬に使用され得る。

本発明による化合物はさらに、ＭＡＳＰ媒介性末端器官損傷を予防することによる、心原性ショック、敗血症性ショックおよびアナフィラキシーショックなどのショックの治療に適している。

さらに、本発明の化合物は抗炎症作用を有し、したがって敗血症（ＳＩＲＳ）、多臓器不全（ＭＯＤＳ、ＭＯＦ）、腎臓の炎症性障害、慢性腸炎症（ＩＢＤ、クローン病、ＵＣ）、膵炎、腹膜炎、リウマチ障害、炎症性皮膚障害および炎症性眼障害の治療および／または予防のための抗炎症薬として使用することができる。

それらの活性プロフィールにより、本発明の化合物は、敗血症および全身性炎症反応症候群の心血管、肺、脳および腎臓の後遺症の治療および／または予防に特に適している。

本発明による化合物は、これらに限定されないが、バイパス手術、心臓弁手術、および大動脈瘤手術などの蘇生および外科的介入の文脈において、心臓および腎臓および他の器官への虚血および／または再灌流関連損傷の治療および／または予防に特に適している。

本発明による化合物はさらに、臓器または組織に対する虚血および／または再灌流関連の損傷を予防するために、ならびにまた、特に外科的介入のために、または移植医療の分野において、ヒトまたは動物起源の臓器、臓器部分、組織または組織部分の灌流および保存溶液のための添加剤として使用することもできる。

さらに、本発明による化合物は後天性溶血性貧血、溶血性尿毒症症候群、発作性夜間ヘモグロビン尿症［Ｍａｒｃｈｉａｆａｖａ－Ｍｉｃｈｅｌｉ］、凝固欠損、紫斑病および他の出血状態、播種性血管内凝固症候群［脱線維素症候群］、本態性（出血性）血小板血症、電撃性紫斑病、血栓性血小板減少性紫斑病、アレルギー性紫斑病、アレルギー性血管炎、リンパ球減少症および顆粒球増加症、ならびにサルコイドーシスを含むがこれらに限定されない、血液および造血器官および免疫系の疾患の治療および／または予防に適している。

さらに、本発明の化合物は、糖尿病の後遺症、例えば糖尿病の腎合併症、糖尿病性腎症、毛細血管内糸球体腎症、糖尿病の眼の合併症、糖尿病性網膜症、神経合併症、糖尿病性多発神経障害、および微小血管障害や壊疽などの循環器合併症の治療および／または予防に適している。

さらに、本発明の化合物は、多発性硬化症、髄膜炎および脳炎、細菌性およびウイルス性髄膜炎および脳炎、免疫後脳炎、炎症性多発神経障害、ならびに感染性および寄生虫性疾患における多発神経障害などの神経系の炎症性疾患の治療および／または予防に適している。

本発明による化合物はさらに、眼およびその付属器の疾患、例えば急性および亜急性虹彩毛様体炎、脈絡膜変性、脈絡網膜の炎症、感染性および寄生虫性疾患における脈絡網膜炎症、背景網膜症および網膜血管の変化、増殖性網膜症、黄斑変性症および後極、抹消網膜変性、乾性（非滲出性）および湿性（滲出性、血管新生）ＡＭＤを含む加齢黄斑変性症（ＡＭＤ）、脈絡膜血管新生（ＣＮＶ）、脈絡膜新生血管膜（ＣＮＶＭ）、嚢胞性黄斑浮腫（ＣＭＥ）、網膜上膜（ＥＲＭ）および黄斑穿孔、近視に関連する脈絡膜血管新生、網膜色素線条症および網膜色素線条症、網膜剥離、糖尿病性網膜症、糖尿病性黄斑浮腫（ＤＭＥ）、網膜色素上皮の萎縮性および肥厚性病変、網膜静脈閉鎖症、脈絡膜網膜静脈閉塞症、黄斑浮腫、網膜静脈閉鎖症に伴う黄斑浮腫、眼および付属器の術後障害、例えば白内障手術後の角膜症の治療および／または予防に適している。

さらに、本発明の化合物は、ウイルス性、細菌性、および真菌性肺炎、放射線性肺臓炎、塵肺症、アレルギー性肺胞炎、特定の有機性紛塵による気道疾患、例えば化学物質、ガス、煙霧および蒸気による農夫肺、気管支炎、肺臓炎および肺水腫、薬物誘発性間質性肺障害、成人呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）および急性肺損傷（ＡＬＩ）、肺の急性浮腫、線維症を伴う間質性肺疾患、リウマチ性肺疾患、他のびまん性結合組織障害における呼吸障害、例えば全身性エリテマトーデス、強皮症およびヴェゲナー肉芽腫症を含むがこれらに限定されない呼吸器系の疾患の治療および／または予防に適している。

さらに、本発明の化合物はインフルエンザウイルス（例えば、血清型Ｈ１Ｎ１、Ｈ５Ｎ１、Ｈ７Ｎ９の菌株によって引き起こされる）、およびコロナウイルス（例えば、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ、重症急性呼吸器症候群（ＳＡＲＳ）の病原体、ＭＥＲＳ－ＣｏＶ、中東呼吸器症候群（ＭＥＲＳ）の病原体、およびＣＯＶＩＤ－１９パンデミックの病原体であるＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２）などのウイルス感染によって引き起こされるが、これらに限定されない、微小血管損傷、血栓症および連続する血栓塞栓事象の治療および／または予防に適している。

さらに、本発明の化合物は、クローン病および潰瘍性大腸炎などの非感染性腸炎および大腸炎、膵炎（急性アルコール性および薬物誘発性膵炎を含む）、胆嚢炎、炎症性肝疾患、肝腎症候群、肝臓の術後障害、例えば肝臓手術後、を含むが、これらに限定されない消化器系の疾患の治療および／または予防に適している。

それらの活性プロファイルにより、本発明の化合物は、急性腎不全、急性腎障害（ＡＫＩ）、手術関連ＡＫＩ、敗血症関連ＡＫＩ、造影剤および化学療法誘発性ＡＫＩ、腎臓の虚血および梗塞、血液透析および血液透析濾過との関連における過敏症などの合併症、膀胱炎、放射線膀胱炎、前立腺の炎症性疾患、および子宮内膜症を含むが、これらに限定されない泌尿生殖器系の疾患の治療および／または予防に特に適している。

本発明による化合物はさらに、限定されるものではないが、外傷の初期の合併症、外傷性無尿、挫滅症候群、挫滅後の腎不全、筋肉の外傷性虚血、外傷性脳損傷、電流、放射線および極端な周囲空気温度および圧力への曝露後、煙、火および炎への曝露後、毒性動物および植物との接触後の器官損傷を含む、火傷および損傷の後遺症の治療および／または予防に適している。

それらの活性プロフィールにより、本発明の化合物は炎症性皮膚疾患、例えば、皮膚エリテマトーデス、水疱性障害および天疱瘡サブタイプのような表皮剥離性皮膚疾患、乾癬、皮膚炎および湿疹のような丘疹扁平上皮障害、じん麻疹および紅斑の治療にさらに適している。

さらなる実施形態によれば、本発明は、疾患の予防および／または治療における使用のための、式（Ｉ）または式（ＩＩ）を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなり、単離および／または精製され得る、ペプチドまたは誘導体、プロドラッグ、類似体、その薬学的に許容される塩または溶媒和物を含有する化合物を提供する。

さらなる実施形態によれば、本発明は、ＭＡＳＰ関連障害の予防および／または治療における使用のための、式（Ｉ）または式（ＩＩ）を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなり、単離および／または精製され得る、ペプチドまたは誘導体、プロドラッグ、類似体、その薬学的に許容される塩または溶媒和物を含有する化合物を提供する。

さらなる実施形態によれば、本発明は、ＭＡＳＰ関連障害の予防および／または治療に使用のために、ＭＡＳＰ－１および／またはＭＡＳＰ－２阻害剤として作用し、および／またはＣ３沈着を阻害する、式（Ｉ）または式（ＩＩ）を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなり、単離および／または精製され得る、ペプチドを含有する化合物または誘導体、プロドラッグ、類似体、薬学的に許容される塩、溶媒和物またはその塩の溶媒和物を提供する。

さらなる実施形態によれば、本発明は、心血管および心肺障害、挫滅（ｓｈｏｃｋ）、炎症性障害、心血管、肺、脳および腎臓の敗血症の後遺症、虚血および／または再灌流関連の損傷、急性腎損傷、移植片保護および遅延した移植片機能、血液および造血器官および免疫系の疾患、糖尿病の後遺症、神経系の炎症性疾患、眼の疾患、皮膚の疾患、呼吸器系、消化器系または泌尿生殖器系の疾患、ならびに火傷および損傷の後遺症の予防および／または治療における使用のための、式（Ｉ）または式（ＩＩ）を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなり、単離および／または精製され得る、ペプチドまたは誘導体、プロドラッグ、類似体、その薬学的に許容される塩または溶媒和物を含有する化合物を提供する。

さらなる実施形態によれば、本発明は、急性腎不全、急性腎損傷（ＡＫＩ）、手術関連ＡＫＩ、敗血症関連ＡＫＩ、造影剤および化学療法誘発ＡＫＩ、腎臓の虚血および梗塞、血液透析および血液透析濾過に関連する過敏症などの合併症、膀胱炎、放射線膀胱炎、前立腺の炎症性疾患、および子宮内膜症を含むが、これらに限定されない、泌尿生殖器系の疾患の予防および／または治療における使用のための、式（Ｉ）または式（ＩＩ）を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなり、単離および／または精製され得る、ペプチドまたは誘導体、プロドラッグ、類似体、その薬学的に許容される塩または溶媒和物を含有する化合物を提供する。

本発明はさらに、本明細書中に定義される少なくとも１つのペプチド、誘導体もしくは類似体、またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物、上記に定義される複合体もしくは医薬組成物を、被験体またはそれを必要とする患者に投与することによって、被験体または患者において、上記に定義されるＭＡＳＰ関連障害を治療または改善する方法に関する。

本明細書で使用される場合、「患者」、「被験体」または「個体」という用語は互換的に使用され、ヒトまたは非ヒト動物のいずれかを指すことができる。これらの用語にはヒト、霊長類、家畜動物（例えば、ウシ、ブタ）、コンパニオン動物（例えば、イヌ、ネコ）およびげっ歯類（例えば、マウスおよびラット）などの哺乳類が含まれる。「哺乳類」という用語はヒト、マウス、ラット、イヌ、ネコ、ハムスター、モルモット、ウサギ、家畜などの任意の哺乳類種を指す。

本発明によれば、本明細書で定義される少なくとも１つのペプチド、誘導体もしくは類似体、またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物、または上記で定義される複合体は治療有効量で患者または被験体に投与され、ここで、本発明の化合物の「治療有効量」は本明細書で定義されるとおりのＭＡＳＰ関連障害を治療するのに十分な量の本発明の化合物を記載することを意味する。特定の実施形態では、治療有効量があらゆる医療に適用できる所望の利益／リスク比を達成する。

本発明は特に、以下の実施形態を含み、式（Ｉ）または式（ＩＩ）で定義されるペプチドの置換基または部分は、独立して、以下に記載されるような意味を有し得る。

ペプチドまたはペプチドを含む化合物、または本明細書で定義されるその誘導体もしくは類似体、またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物、または複合体もしくは医薬組成物（以下で定義される）は、以下、一般に「本発明のＭＡＳＰ阻害ペプチド」とも呼ばれる。

いくつかの実施形態では、本発明のＭＡＳＰ阻害ペプチドがＭＡＳＰ－１および／またはＭＡＳＰ－２、例えばヒトＭＡＳＰ－１および／またはＭＡＳＰ－２に結合する。特定の実施形態において、本発明のＭＡＳＰ阻害ペプチドは、ヒトＭＡＳＰ－１および／またはＭＡＳＰ－２に特異的に結合する。本明細書中で使用される場合、「特異的に結合する」は、サンプル中の他の薬剤よりも、所定のリガンドとの特異的結合剤の優先的相互作用をいう。例えば、所与のリガンドに特異的に結合する特異的結合剤は、適切な条件下で、サンプル中の他の成分との任意の非特異的相互作用の量または程度を超えて観察可能な量または程度で、所与のリガンドに結合する。適切な条件は、所与の特異的結合剤と所与のリガンドとの間の相互作用を可能にするものである。これらの条件はｐＨ、温度、濃度、溶媒、インキュベーション時間などを含み、所与の特異的結合剤およびリガンド対の間で異なり得るが、当業者によって容易に決定され得る。いくつかの実施形態において、本発明のＭＡＳＰ阻害ペプチドはＭＡＳＰ阻害ペプチド参照化合物（例えば、本明細書中に提供されるＭＡＳＰ阻害ペプチド参照化合物のいずれか１つ）よりも高い特異性でＭＡＳＰ－１および／またはＭＡＳＰ－２に結合する。

したがって、本発明はさらに、ＭＡＳＰ－１またはＭＡＳＰ－２に結合した、本明細書で定義される少なくとも１つのペプチドまたはペプチド、誘導体または類似体を含有する化合物を含む複合体に関する。

いくつかの実施形態では、本発明のＭＡＳＰ阻害ペプチドは、ＭＡＳＰ－１および／またはＭＡＳＰ－２、特にヒトＭＡＳＰ－１および／またはＭＡＳＰ－２に対して特異的結合を示し、すなわち、選択されたＭＡＳＰ阻害ペプチド参照化合物よりも少なくとも約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％、２００％、３００％、４００％、５００％、７００％、１０００％、または１００００％高い。

いくつかの実施形態では、本発明のＭＡＳＰ阻害ペプチドがＭＡＳＰ－１および／またはＭＡＳＰ－２、特にヒトＭＡＳＰ－１および／またはＭＡＳＰ－２に対して、選択されたＭＡＳＰ阻害ペプチド参照化合物よりも少なくとも約１、２、３、４、５倍、または少なくとも約１０、２０、５０、または１００倍高い特異的結合を示す。

いくつかの実施形態において、本発明のＭＡＳＰ阻害ペプチドは、選択されたＭＡＳＰ阻害ペプチド参照化合物よりも少なくとも約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％、２００％、３００％、４００％、５００％、７００％、１０００％、または１００００％高い、ＭＡＳＰ－１および／またはＭＡＳＰ－２に対する結合親和性を示す。

いくつかの実施形態では、本発明のＭＡＳＰ阻害ペプチドは、選択されたＭＡＳＰ阻害ペプチド参照化合物よりも少なくとも約１、２、３、４、５倍、または少なくとも約１０、２０、５０、１００、または１０００倍高いＭＡＳＰ－１および／またはＭＡＳＰ－２に対する結合親和性を示す。

いくつかの実施形態では、本発明のＭＡＳＰ阻害ペプチドは、ＭＡＳＰ－１および／またはＭＡＳＰ－２（例えば、ラットまたはヒトＭＡＳＰ－１および／またはＭＡＳＰ－２）活性の阻害を示す。いくつかの実施形態では、活性がインビトロまたはインビボ活性、例えば、本明細書に記載のインビトロまたはインビボ活性である。いくつかの実施形態では、本発明のＭＡＳＰ阻害ペプチドは、選択されたＭＡＳＰ阻害ペプチド参照化合物によって阻害されたＭＡＳＰ－１および／またはＭＡＳＰ－２活性の少なくとも約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％、２００％、３００％、４００％、５００％、７００％、１０００％、または１００００％を阻害する。

特定の実施形態では、本発明のＭＡＳＰ阻害ペプチドは、選択されたＭＡＳＰ阻害ペプチド参照化合物よりも１．５、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１２０、１４０、１６０、１８０、または２００倍大きいＭＡＳＰ－１および／またはＭＡＳＰ－２阻害を示す。

さらなる特定の実施形態では、本発明のＭＡＳＰ阻害ペプチドのＭＡＳＰ－１および／またはＭＡＳＰ－２阻害活性は、ＭＡＳＰ－１および／またはＭＡＳＰ－２（例えば、ラットヒトＭＡＳＰ－１および／またはＭＡＳＰ－２）に対するＩＣ_５０を測定することによって決定される。ＭＡＳＰ－１および／またはＭＡＳＰ－２に対するＩＣ_５０の決定は、本明細書に示される生化学的アッセイを用いて行うことができる。本発明のＭＡＳＰ阻害ペプチドは、＜１，０００ｎＭ、好ましくは≦５００ｎＭ、より好ましくは≦３００ｎＭ、より好ましくは≦２５０ｎＭ、より好ましくは≦２００ｎＭ、より好ましくは≦１５０ｎＭ、より好ましくは≦１００ｎＭ、より好ましくは≦７５ｎＭ、より好ましくは≦５０ｎＭ、より好ましくは≦４５ｎＭ、より好ましくは≦４０ｎＭ、より好ましくは≦３５ｎＭ、より好ましくは≦３０ｎＭのＭＡＳＰ－１および／またはＭＡＳＰ－２に対するＩＣ_５０を示すことが特に好ましい。

いくつかの実施形態では、本発明のＭＡＳＰ阻害ペプチドは、選択されたＭＡＳＰ阻害ペプチド参照化合物と比較して、ＭＡＳＰ－１および／またはＭＡＳＰ－２（例えば、ラットまたはヒトＭＡＳＰ－１および／またはＭＡＳＰ－２）に対してより低いＩＣ_５０（すなわち、より高い結合親和性）を有する。いくつかの実施形態では、本発明のＭＡＳＰ阻害ペプチドはＭＡＳＰ－１および／またはＭＡＳＰ－２競合結合アッセイにおいて、選択されたＭＡＳＰ阻害ペプチド参照化合物のそれよりも少なくとも約５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％、２００％、３００％、４００％、５００％、７００％、１０００％または１００００％低いＩＣ_５０を有する。

いくつかの実施形態では、本発明のＭＡＳＰ阻害ペプチドは、選択されたＭＡＳＰ阻害ペプチド参照化合物のものよりも、少なくとも約５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９７％、９８％、９９％、または９９％、１００％、２００％、３００％、４００％、５００％、７００％、１０００％、または１００００％超のヒトＭＡＳＰ－１および／またはＭＡＳＰ－２活性のインビトロ阻害を示す。

いくつかの実施形態において、本発明のＭＡＳＰ阻害ペプチドは、選択されたＭＡＳＰ阻害ペプチド参照化合物のものよりも、約５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９７％、９８％、９９％、または９９％を超える、１００％、２００％、３００％、４００％、５００％、７００％、１０００％または１００００％超のヒトＭＡＳＰ－１および／またはＭＡＳＰ－２活性のインビボ阻害を示す。

本明細書中で使用されるように、特定の実施形態において、「ＭＡＳＰ－１および／またはＭＡＳＰ－２阻害活性」を有するＭＡＳＰ阻害ペプチドは、化合物が用量依存的および時間依存的様式で、インビトロまたは被験体（例えば、マウスまたはヒト）において、それに投与される場合（例えば、非経口経路によって、例えば、注射によって、または肺、鼻、舌下、舌、口腔、皮膚、経皮、結膜、視覚経路によって、またはインプラントもしくはステント経口投与として）、Ｃ３沈着を阻害する能力を有することを意味する。

いくつかの実施形態では、本発明のＭＡＳＰ阻害ペプチドは、Ｃ３沈着（例えば、ヒトＣ３沈着）の阻害を示す。いくつかの実施形態では、Ｃ３沈着の阻害は、インビトロまたはインビボ阻害によって決定される。いくつかの実施形態では、本発明のＭＡＳＰ阻害ペプチドは、選択されたＭＡＳＰ阻害ペプチド参照化合物によって阻害されたＣ３沈着の少なくとも約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％、２００％、３００％、４００％、５００％、７００％、１０００％、または１００００％を阻害する。

特定の実施形態では、本発明のＭＡＳＰ阻害ペプチドは、選択されたＭＡＳＰ阻害ペプチド参照化合物よりも１．５、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１２０、１４０、１６０、１８０、または２００倍大きいＣ３沈着の阻害を示す。

さらなる特定の実施形態において、本発明によるＭＡＳＰ阻害ペプチドのＭＡＳＰ－１および／またはＭＡＳＰ－２阻害活性は、インビトロまたは被験体（例えば、マウスまたはヒト）におけるＣ３沈着の阻害についてのそれらのＩＣ_５０の計測によって決定される。Ｃ３－沈着についてのＩＣ_５０の決定は、本明細書中に示されるＣ３ヒト沈着アッセイを用いて行うことができる。本発明のＭＡＳＰ阻害ペプチドは、＜１，０００ｎＭ、好ましくは≦５００ｎＭ、より好ましくは≦３００ｎＭ、より好ましくは≦２５０ｎＭ、より好ましくは≦２００ｎＭ、より好ましくは≦１５０ｎＭ、より好ましくは≦１００ｎＭ、より好ましくは≦７５ｎＭ、より好ましくは≦５０ｎＭ、より好ましくは≦４５ｎＭ、より好ましくは≦４０ｎＭ、より好ましくは≦３５ｎＭ、より好ましくは≦３０ｎＭのＣ３沈着についてのＩＣ_５０を示すことが特に好ましい。

いくつかの実施形態では、本発明のＭＡＳＰ阻害ペプチドは、選択されたＭＡＳＰ阻害ペプチド参照化合物のものよりも、少なくとも約５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９７％、９８％、９９％、または９９％、１００％、２００％、３００％、４００％、５００％、７００％、１０００％、または１００００％超のＣ３沈着のインビトロ阻害を示す。

いくつかの実施形態では、本発明のＭＡＳＰ阻害ペプチドは、選択されたＭＡＳＰ阻害ペプチド参照化合物のものよりも、少なくとも約５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９７％、９８％、９９％、または９９％、１００％、２００％、３００％、４００％、５００％、７００％、１０００％、または１００００％超のＣ３沈着のインビボ阻害を示す。

本発明によるペプチドはＭＡＳＰ阻害ペプチドとして作用し、その活性が、本発明の実施例による特異的アッセイおよび／またはインビボ研究の少なくとも１つに従って決定されることが特に好ましい。

それらの前述のＭＡＳＰ－１および／またはＭＡＳＰ－２阻害活性およびＣ３沈着の阻害活性のために、本発明のペプチドを含有する化合物または本発明のペプチド（それらの類似体、誘導体、およびその薬学的に許容される塩または溶媒和物、ならびに前述の複合体を含む）は、ＭＡＳＰ－１および／またはＭＡＳＰ－２関連障害の予防および／または治療における使用に適している。

さらなる実施形態によれば、本発明はＭＡＳＰ－１および／またはＭＡＳＰ－２阻害剤として作用し、および／またはＣ３沈着を阻害する、式（Ｉ）または式（ＩＩ）を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなり、単離および／または精製され得る、ペプチドまたは誘導体、プロドラッグ、類似体、薬学的に許容される塩、溶媒和物またはその塩の溶媒和物を含有する化合物を提供する。

本発明の化合物は、必要に応じて、単独で、または他の活性化合物と組み合わせて使用することができる。本発明はさらに、本発明による化合物の少なくとも１つおよび、特に前述の疾患の治療および／または予防のための、１つ以上のさらなる活性化合物を含有する薬剤に関する。適切な組み合わせ活性化合物として、例えば、および好ましくは、以下のものを言及することができる：
・ 環状グアノシン一リン酸（ｃＧＭＰ）および／または環状アデノシン一リン酸（ｃＡＭＰ）の分解を阻害する化合物、例えばホスホジエステラーゼ（ＰＤＥ）１、２、３、４および／または５の阻害剤、特にロフルミラストまたはレバミラストなどのＰＤＥ４阻害剤およびシルデナフィル、バルデナフィル、タダラフィル、ユデナフィル、ダサンタフィル、アバナフィル、ミロデナフィルまたはロデナフィルなどのＰＤＥ５阻害剤；
・ グアニル酸シクラーゼのＮＯ非依存性であるがヘム依存性の刺激物質、特にリオシグアト、ネロシグアト、ベルイシグアトおよびＷＯ００／０６５６８、ＷＯ００／０６５６９、ＷＯ０２／４２３０１、ＷＯ０３／０９５４５１、ＷＯ２０１１／１４７８０９、ＷＯ２０１２／００４２５８、ＷＯ２０１２／０２８６４７およびＷＯ２０１２／０５９５４９に記載の化合物；
・ グアニル酸シクラーゼのＮＯ非依存性およびヘム非依存性の活性化因子、特にランカシグアト、ＢＩ７０３７０４、ならびにＷＯ２０１２／１３９８８８、ＷＯ２００１／０１９７８０およびＷＯ２０１４／０１２９３４に記載の化合物；
・ プロスタサイクリン類似体およびＩＰ受容体アゴニスト、例えば、および好ましくはイロプロスト、ベラプロスト、トレプロスチニル、エポプロステノール、ＮＳ－３０４、セレキシパグ、またはラリネパグ；
・ エンドセリン受容体アンタゴニスト、例えばおよび好ましくはボセンタン、ダルセンタン、アンブリセンタン、マシセンタンまたはシタクスセンタン；
・ バソプレシン受容体拮抗薬、例えばトルバプタン、コニバプタン、レルコバプタン；
・ ヒト好中球エラスターゼ（ＨＮＥ）阻害剤、例えばおよび好ましくはシベレスタットまたはＤＸ－８９０（Ｒｅｌｔｒａｎ）；
・ シグナル伝達カスケードを阻害する化合物、特にチロシンキナーゼ阻害薬の群からの、例えばおよび好ましくは、ダサチニブ、ニロチニブ、ボスチニブ、レゴラフェニブ、ソラフェニブ、スニチニブ、セジラニブ、アキシチニブ、テラチニブ、イマチニブ、ブリバニブ、パゾパニブ、バタラニブ、ゲフィチニブ、エルロチニブ、ラパチニブ、カネルチニブ、レスタウルチニブ、ペリチニブ、セマキサニブ、マシチニブ、又はタンデュチニブ；
・ ＡＳＫ１キナーゼ阻害剤群からのシグナル伝達調節因子、例えばセロンセルチブ；
・ Ｒｈｏキナーゼ阻害剤、例えばおよび好ましくはファスジル、Ｙ－２７６３２、ＳＬｘ－２１１９、ＢＦ－６６８５１、ＢＦ－６６８５２、ＢＦ－６６８５３、ＫＩ－２３０９５またはＢＡ－１０４９；
・ 例として、ＡＬＫ１－Ｓｍａｄ１／５シグナル伝達経路の阻害剤、ＶＥＧＦおよび／またはＰＤＧＦシグナル伝達経路の阻害剤、シクロオキシゲナーゼ阻害剤、カリクレイン－キニン系の阻害剤またはスフィンゴシン－１－リン酸シグナル伝達経路の阻害剤の例および優先的阻害剤によって、血管壁の透過性を低下させる活性成分（浮腫形成）；
・ コルチコステロイド、たとえばコルチゾン、コルチゾール、プレドニゾロン、メチルプレドニゾロン、トリアムシノロンまたはデキサメタゾン；
・ 例えば、補体系の阻害剤、特に補体Ｃ５ａ受容体のアンタゴニスト、抗Ｃ５抗体または５－ＨＴ１Ａ受容体のアゴニストなど、酸化ストレス下の臓器への損傷を軽減する有効成分；
・ 転写因子Ｎｒｆ２のモジュレーター、刺激因子およびエンハンサー、例えばＣＸＡ－１０、オルチプラズ、フマル酸ジメチルまたはバルドキソロン；
・ アドレノメジュリンおよびアドレノメジュリン誘導体、例えばペグ化アドレノメジュリン、およびアドレノメジュリン安定剤、例えばアドレシズマブ；
・ 低酸素誘導因子プロリルヒドロキシラーゼ（ＨＩＦ－ＰＨ阻害剤）を阻害する化合物、例えばモリダスタット、バダデュスタット、ロキサデュスタット、ダプロデュスタットまたはデシダスタット；
・ 細胞死およびアポトーシス経路の誘導を阻害する化合物、例えばＱＰＩ－１００２；
・ Ｃ－Ｍｅｔアゴニストおよび肝細胞増殖因子模倣薬、例えばレファリン（ｒｅｆａｎａｌｉｎ）；
・ アルカリホスファターゼと組換え型アルカリホスファターゼ；
・ 炎症反応およびＴ細胞増殖を阻害する化合物、例えばレルテシモドのようなＣＤ２８拮抗化合物；
・ Ｔｈ１７ Ｔ細胞の活性化を調節する化合物、例えばＲＯＲｃ／ＲＯＲ－ガンマ転写因子のモジュレーター；
・ 例えば抗ＩＬ－１７および抗ＩＬ－２３抗体のＴｈ１７ Ｔ細胞反応に対抗する化合物、例えばイキセキズマブ、セクキヌマブ、ブロダルマブ、ウステキヌマブ、ゲセルクマブまたはＰＴＧ－２００；
・ 抗血栓剤、例えば、好ましくは血小板凝集阻害剤、抗凝固剤または繊維素溶解促進性物質の群からの抗血栓剤；
・ 本発明の好ましい実施形態において、本発明の化合物は血小板凝集阻害剤、例えば、好ましくはアスピリン、クロピドグレル、チクロピジンまたはジピリダモールと組み合わせて投与される。

・ 本発明の好ましい実施形態では、本発明の化合物がトロンビン阻害剤、例えば、好ましくはキシメラガトラン、メラガトラン、ダビガトラン、ビバリルジンまたはクレキサンと組合せて投与される。

・ 本発明の好ましい実施形態において、本発明の化合物はＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａアンタゴニスト、例えば、好ましくはチロフィバンまたはアブシキシマブと組み合わせて投与される。

・ 本発明の好ましい実施形態において、本発明による化合物は第Ｘａ因子阻害剤、例えば、および好ましくはリバーロキサバン、アピキサバン、フィデキサバン、ラザキサバン、フォンダパリヌクス、イドラパリヌクス、ＤＵ－１７６ｂ、ＰＭＤ－３１１２、ＹＭ－１５０、ＫＦＡ－１９８２、ＥＭＤ－５０３９８２、ＭＣＭ－１７、ＭＬＮ－１０２１、ＤＸ９０６５ａ、ＤＰＣ９０６、ＪＴＶ８０３、ＳＳＲ－１２６５１２またはＳＳＲ－１２８４２８と組合せて投与される。

・ 本発明の好ましい実施形態において、本発明の化合物は、ヘパリンまたは低分子量（ＬＭＷ）ヘパリン誘導体と組み合わせて投与される。

・ 本発明の好ましい実施形態において、本発明の化合物は凝固因子ＸＩの直接阻害剤、凝固因子ＸＩ発現の阻害剤、および抗凝固因子ＸＩ抗体（例えば、キシソマブ３Ｇ３）と組み合わせて投与される；
・ 本発明の好ましい実施形態において、本発明の化合物はミネラルコルチコイド受容体アンタゴニスト、例えば、好ましくはスピロノラクトン、エプレレノンまたはフィネレノンと組み合わせて投与される。

・ 本発明の好ましい実施形態では、本発明による化合物が利尿薬、例えば、および好ましくはフロセミド、ブメタニド、トルセミド、ベンドロフルメチアジド、クロルチアジド、ヒドロクロルチアジド、ヒドロフルメチアジド、メチルクロチアジド、ポリチアジド、トリクロルメチアジド、クロルタリドン、インダパミド、メトラゾン、キネタゾン、アセタゾラミド、ジクロルフェナミド、メタゾラミド、グリセロール、イソソルビド、マンニトール、アミロライドまたはトリアムテレンと組合せて投与される。

・ 本発明の好ましい実施形態において、本発明の化合物はＰＰＡＲ－ガンマアゴニスト、例えば、好ましくはピオグリタゾンまたはロシグリタゾンと組み合わせて投与される。

・ 本発明の好ましい実施形態において、本発明の化合物はＰＰＡＲ－デルタアゴニスト、例えば、好ましくはＧＷ５０１５１６またはＢＡＹ６８－５０４２と組み合わせて投与される。

さらなる実施形態によれば、本発明は、式（Ｉ）または式（ＩＩ）を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなり、単離および／または精製され得る、ペプチドまたは誘導体、プロドラッグ、類似体、薬学的に許容される塩、溶媒和物またはその塩の溶媒和物を含有する少なくとも1つの化合物と、ホスホジエステラーゼの阻害剤、グアニル酸シクラーゼの刺激剤または活性化剤、ＩＰ受容体アゴニスト、ミネラルコルチコイド受容体アンタゴニスト、利尿薬、ＰＰＡＲ－ガンマアゴニスト、ＰＰＡＲ－デルタアゴニスト、コルチコステロイド、酸化ストレス下で器官への損傷を低減する活性成分、細胞死およびアポトーシス経路の誘導を阻害する化合物、炎症反応とＴ細胞増殖を阻害する化合物、抗血栓症、血小板凝集阻害剤、トロンビン阻害剤、ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａアンタゴニスト、第Ｘａ因子阻害剤、ヘパリンまたは低分子量（ＬＭＷ）ヘパリン誘導体および凝固第ＸＩ因子の阻害剤からなる群より選択される１つ以上のさらなる活性成分と組み合わせて含む医薬組成物を提供する。

本発明はさらに、本明細書中に定義される少なくとも１つのペプチド、誘導体もしくは類似体、またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物、上記に定義される複合体もしくは医薬組成物、ならびに試薬、医療機器、説明書、またはそれらの任意の組み合わせから選択される少なくとも１つを含むキットオブパーツ組み合わせに関する。

本発明はさらに、ペプチド、その誘導体、類似体もしくは複合体、またはその医薬組成物の被験体への送達のための、本明細書に定義される少なくとも１つのペプチド、誘導体もしくは類似体、またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物、複合体または上記に定義される医薬組成物を含む医療機器に関する。

上記で定義した医薬組成物、キットオブパーツ組み合わせまたは医療機器は、特に本明細書で定義した障害または疾患の予防および／または治療における使用のためのものである。

本発明のＭＡＳＰ阻害ペプチドは、全身および／または局所活性を有することが可能である。この目的のために、それらは、例えば、経口、非経口、肺、鼻、舌下、舌、口腔、直腸、膣、皮膚、経皮、結膜、耳の経路を介して、またはインプラントもしくはステントとして、適切な様式で投与され得る。

これらの投与経路のために、本発明による化合物を適切な投与形態で投与することが可能である。

経口投与のために、本発明の化合物を、本発明の化合物を迅速におよび／または改変された様式で送達する当該分野で公知の投薬形態（例えば、錠剤（コーティングされていない、またはコーティングされた錠剤、例えば、遅延して溶解するか、または不溶性である腸溶性または制御放出コーティングを有する錠剤）、口腔内崩壊錠剤、フィルム／ウエハー、フィルム／凍結乾燥物、カプセル（例えば、硬または軟ゼラチンカプセル）、糖衣錠、顆粒、ペレット、粉末、エマルジョン、懸濁液、エアロゾルまたは溶液）に製剤することが可能である。本発明の化合物を、結晶および／または非晶質および／または溶解形態で前記剤形に組み込むことが可能である。

非経口投与は吸収段階（例えば、静脈内、動脈内、心臓内、脊髄内または腰部内）の回避により、または吸収の封入（例えば、筋肉内、皮下、皮内、経皮または腹腔内、眼内）により行うことができる。非経口投与に適した投与形態は、とりわけ、溶液、懸濁液、エマルジョン、凍結乾燥物または滅菌粉末の形態での注射および注入のための調製物である。

他の投与経路に適した例は、吸入のための医薬形態［とりわけ粉末吸入器、ネブライザー］、点鼻薬、点鼻溶液、鼻スプレー；舌、舌下または口腔投与のための錠剤／フィルム／ウエハー／カプセル；坐剤；点眼剤、眼軟膏、眼浴、眼挿入物、点眼剤、点耳剤、イヤースプレー、イヤーパウダー、イヤーリンス、イヤータンポン；膣カプセル、局所塗布、水性懸濁液（ローション、ミックスツラエ・アギタンダ（ｍｉｘｔｕｒａｅ ａｇｉｔａｎｄａｅ））、親油性懸濁液、エマルジョン、軟膏、クリーム、経皮治療系（例えばパッチ）、乳、ペースト、泡沫、散布粉末、インプラントまたはステントである。

さらなる実施形態によれば、本発明は、１つ以上の不活性、非毒性、薬学的に適切な賦形剤と組み合わせて、式（Ｉ）または式（ＩＩ）を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなり、単離および／または精製され得る、ペプチドまたは誘導体、プロドラッグ、類似体、薬学的に許容される塩、溶媒和物またはその塩の溶媒和物を含有する少なくとも1つの化合物を含む医薬組成物を提供する。

本発明による化合物は、記載された投与形態に組み込むことができる。これは、それ自体公知の様式で、薬学的に適切な賦形剤と混合することによって達成され得る。薬学的に適切な賦形剤には、とりわけ、以下のものが含まれ、
・ 充填剤および担体（例えば、セルロース、微結晶セルロース（例えば、Ａｖｉｃｅｌ（登録商標））、ラクトース、マンニトール、デンプン、リン酸カルシウム（例えば、Ｄｉ－Ｃａｆｏｓ（登録商標）））、
・ 軟膏基剤（例えば、石油ゼリー、パラフィン、トリグリセリド、ワックス、羊毛ワックス、羊毛ワックスアルコール、ラノリン、親水性軟膏、ポリエチレングリコール）、
・ 坐剤の基剤（例えば、ポリエチレングリコール、カカオバター、硬質脂肪）、
・ 溶媒（例えば、水、エタノール、イソプロパノール、グリセロール、プロピレングリコール、中鎖長トリグリセリド脂肪油、液体ポリエチレングリコール、パラフィン）、
・ 界面活性剤、乳化剤、分散剤または湿潤剤（例えば、ドデシル硫酸ナトリウム）、レシチン、リン脂質、脂肪アルコール（例えば、Ｌａｎｅｔｔｅ（登録商標））、ソルビタン脂肪酸エステル（例えば、Ｓｐａｎ（登録商標））、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル（例えば、Ｔｗｅｅｎ（登録商標））、ポリオキシエチレン脂肪酸グリセリド（例えば、Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ（登録商標））、ポリオキシエチレン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレン脂肪アルコールエーテル、グリセロール脂肪酸エステル、ポロキサマー（例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標））、
・ 緩衝剤、酸及び塩基（例えば、リン酸塩、炭酸塩、クエン酸、酢酸、塩酸、水酸化ナトリウム溶液、炭酸アンモニウム、トロメタモール、トリエタノールアミン）、
・ 等張剤（グルコース、塩化ナトリウムなど）、
・ 吸着剤（高分散シリカなど）、
・ 増粘剤、ゲル形成剤、増粘剤および／または結合剤（例えば、ポリビニルピロリドン、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、デンプン、カルボマー、ポリアクリル酸（例えば、Ｃａｒｂｏｐｏｌ（登録商標））；アルギネート、ゼラチン）、
・ 崩壊剤（例えば、変性デンプン、カルボキシメチルセルロースナトリウム、デンプングリコール酸ナトリウム（例えば、Ｅｘｐｌｏｔａｂ（登録商標））、架橋ポリビニルピロリドン、クロスカルメロースナトリウム（例えば、ＡｃＤｉＳｏｌ（登録商標）））、
・ 流量調節剤、潤滑剤、流動促進剤および離型剤（例えば、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、タルク、高分散シリカ（例えば、Ａｅｒｏｓｉｌ（登録商標）））、
・ 被覆材料（例えば、砂糖、セラック）および迅速に又は変性された方法で溶解するフィルム又は拡散膜のためのフィルム形成剤（例えば、ポリビニルピロリドン（例えば、Ｋｏｌｌｉｄｏｎ（登録商標））、ポリビニルアルコール、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、エチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、酢酸セルロース、酢酸フタル酸セルロース、ポリアクリレート、ポリメタクリレート、例えば、Ｅｕｄｒａｇｉｔ（登録商標））、
・ カプセル材料（例えばゼラチン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース）、
・ 合成ポリマー（例えば、ポリラクチド、ポリグリコリド、ポリアクリレート、ポリメタクリレート（例えば、Ｅｕｄｒａｇｉｔ（登録商標））、ポリビニルピロリドン（例えば、Ｋｏｌｌｉｄｏｎ（登録商標））、ポリビニルアルコール、ポリ酢酸ビニル、ポリエチレンオキシド、ポリエチレングリコールおよびそれらのコポリマーおよびブロックコポリマー）、
・ 可塑剤（例えば、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、グリセロール、トリアセチン、クエン酸トリアセチル、フタル酸ジブチル）、
・ 浸透促進剤、
・ 安定剤（例えば、酸化防止剤、例えば、アスコルビン酸、パルミチン酸アスコルビル、アスコルビン酸ナトリウム、ブチルヒドロキシアニソール、ブチルヒドロキシトルエン、没食子酸プロピル）、
・ 防腐剤（例えば、パラベン、ソルビン酸、チオメルサール、塩化ベンザルコニウム、酢酸クロルヘキシジン、安息香酸ナトリウム）、
・ 着色剤（例えば、無機顔料、例えば、酸化鉄、二酸化チタン）、
・ 香料、甘味料、風味料及び／又は臭気マスキング剤。

さらに、本発明は、本明細書に定義される少なくとも１つのペプチド、誘導体もしくは類似体、またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物、または上記に定義される複合体を含む医薬組成物に関する。

特に、本発明は、本明細書中に定義される少なくとも１つのペプチド、誘導体もしくは類似体、またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物、または上記に定義される複合体を、１つ以上の薬学的に適切な賦形剤と従来的に一緒に含む医薬組成物、および本発明によるそれらの使用に関する。

本発明による医薬組成物は、少なくとも１つの追加の活性成分、例えば好ましくは本明細書で定義される障害または疾患の予防および／または治療において活性である追加の活性成分を含むことができる。

本明細書で定義される少なくとも１つのペプチド、誘導体もしくは類似体、またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物、または上記で定義される複合体もしくは医薬組成物は、経腸的または非経口的（静脈内、筋肉内、腹腔内、胸骨内、皮下、皮内および関節内注射および注入を含む）、経口的、膣内、腹腔内、直腸内、局所的または口腔内に投与することができる。それぞれの投与経路のための適切な製剤は当業者に周知であり、これらに限定されないが、ピル、錠剤、腸溶コーティング錠剤、フィルム錠剤、層錠剤、経口投与のための徐放性または徐放性製剤、プラスター、局所徐放性製剤、糖衣錠、ペッサリー、ゲル、軟膏、シロップ、顆粒、坐薬、エマルジョン、分散液、マイクロカプセル、マイクロ製剤、ナノ製剤、リポソーム製剤、カプセル、腸溶性コーティングカプセル、粉末、吸入粉末、微結晶製剤、吸入スプレー、散剤、点滴剤、点鼻薬、鼻スプレー、エアロゾル、アンプル、溶液、ジュース、懸濁液、注入溶液または注射溶液などが挙げられる。

さらなる実施形態によれば、本発明は、心臓血管および心臓肺障害、挫滅、炎症性障害、心臓血管、肺、脳および腎臓の敗血症の後遺症、虚血および／または再灌流関連の損傷、急性腎臓損傷、移植片保護および遅延した移植片機能、血液および血液形成器官および免疫系の疾患、糖尿病の後遺症、神経系の炎症性疾患、眼の疾患、皮膚の疾患、呼吸器系、消化器系または泌尿生殖器系の疾患、熱傷および外傷の後遺症の予防および／または治療における使用のための１つ以上の不活性、非毒性、薬学的に適切な賦形剤と組み合わせて、式（Ｉ）または式（ＩＩ）を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなり、単離および／または精製され得る、ペプチドまたは誘導体、プロドラッグ、類似体、薬学的に許容される塩、溶媒和物またはその塩の溶媒和物を含有する少なくとも1つの化合物を含む医薬組成物を提供する。

さらなる実施形態によれば、本発明は、心臓血管および心臓肺障害、挫滅、炎症性障害、心臓血管、肺、脳および腎臓の敗血症の後遺症、虚血および／または再灌流関連の損傷、急性腎臓損傷、移植片保護および遅延した移植片機能、血液および血液形成器官および免疫系の疾患、糖尿病の後遺症、神経系の炎症性疾患、眼の疾患、皮膚の疾患、呼吸器系、消化器系または泌尿生殖器系の疾患、熱傷および外傷の後遺症の予防および／または治療における使用のための、ホスホジエステラーゼの阻害剤、グアニル酸シクラーゼの刺激剤または活性化剤、ＩＰ受容体アゴニスト、ミネラルコルチコイド受容体アンタゴニスト、利尿薬、ＰＰＡＲ－ガンマアゴニスト、ＰＰＡＲ－デルタアゴニスト、コルチコステロイド、酸化ストレス下で器官への損傷を低減する活性成分、細胞死およびアポトーシス経路の誘導を阻害する化合物、炎症反応およびＴ細胞増殖を阻害する化合物、抗血栓剤、血小板凝集阻害剤、トロンビン阻害剤、ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａアンタゴニスト、第Ｘａ因子阻害剤、ヘパリンまたは低分子量（ＬＭＷ）ヘパリン誘導体および凝固第ＸＩ因子の阻害剤からなる群より選択される１つ以上のさらなる活性成分と組み合わせて、式（Ｉ）または式（ＩＩ）を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなり、単離および／または精製され得る、ペプチドまたは誘導体、プロドラッグ、類似体、薬学的に許容される塩、溶媒和物またはその塩の溶媒和物を含有する少なくとも1つの化合物を含む医薬組成物を提供する。

さらなる実施形態によれば、本発明は、式（Ｉ）または式（ＩＩ）を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなり、単離および／または精製され得る、ペプチドまたは誘導体、プロドラッグ、類似体、薬学的に許容される塩、溶媒和物またはその塩の溶媒和物を含有する少なくとも1つの化合物を含む医薬組成物の有効量を投与することにより、または式（Ｉ）または式（ＩＩ）を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなり、単離および／または精製され得る、ペプチドまたは誘導体、プロドラッグ、類似体、薬学的に許容される塩、溶媒和物またはその塩の溶媒和物を含有する少なくとも1つの化合物を含む医薬組成物の有効量を１つ以上の不活性、非毒性、薬学的に適切な賦形剤と組み合わせて投与することにより、ヒトおよび動物における心臓血管および心臓肺障害、挫滅、炎症性障害、心臓血管、肺、脳および腎臓の敗血症の後遺症、虚血および／または再灌流関連の損傷、急性腎臓損傷、移植片保護および遅延した移植片機能、血液および血液形成器官および免疫系の疾患、糖尿病の後遺症、神経系の炎症性疾患、眼の疾患、皮膚の疾患、呼吸器系、消化器系または泌尿生殖器系の疾患、熱傷および外傷の後遺症の治療および／または予防する方法を提供する。

本発明のＭＡＳＰ阻害ペプチドの適切な用量は、健全な医学的判断の範囲内で主治医によって決定され得る。任意の特定の被験体についての特定の治療有効用量レベルは、以下を含む種々の因子に依存する：ａ）治療される障害および障害の重篤度；ｂ）使用される特定の化合物の活性；ｃ）使用される特定の組成物、患者の年齢、体重、一般的な健康、性別および食事；ｄ）投与の時間、投与経路、および使用される特定のヘプシジン類似体の排泄速度；ｅ）治療の期間；ｆ）使用されるＭＡＳＰ阻害ペプチドと組み合わせてまたは同時に使用される薬物、ならびに医学分野において周知の類似の因子。

特定の実施形態では、単回または分割投与で被験体または患者に投与される本発明のＭＡＳＰ阻害ペプチドの総日用量は、例えば、０．０００１～３００ｍｇ／ｋｇ体重／日または１～３００ｍｇ／ｋｇ体重／日、または約０．０００１～約１００ｍｇ／ｋｇ体重／日、例えば、約０．０００５～約５０ｍｇ／ｋｇ体重／日、例えば、約０．００１～約１０ｍｇ／ｋｇ体重／日、例えば、約０．０１～約１ｍｇ／ｋｇ体重／日であり、例えば、１～３回の用量などの１回以上の用量で投与することができる。一般に、本発明のＭＡＳＰ阻害ペプチドは連続的に（例えば、静脈内投与または別の連続薬物投与方法によって）投与され得るか、または特定の被験体について熟練した実施者によって選択される所望の投薬量および医薬組成物に依存して、間隔をおいて、典型的には規則的な時間隔で、被験体に投与され得る。規則的な投与投薬間隔には、例えば、１日１回、１日２回、２、３、４、５または６日毎に１回、週１回または２回、月１回または２回などが含まれる。

本発明は、医薬の製造のための、特に本明細書に定義される障害または疾患の予防および／または治療のための医薬の製造のための、本明細書に記載されるＭＡＳＰ阻害ペプチドの使用をさらに含む。

本発明は本発明のペプチド、それぞれ本明細書中に記載される、その誘導体もしくは類似体、またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物、または複合体を製造するためのプロセスをさらに含む。製造方法は、本発明の実施例に示す工程を含む。

一般に、本発明のＭＡＳＰ阻害ペプチドは合成的に、または半組換え的に製造することができる。

さらなる実施形態によれば、本発明は、固相ペプチド合成を使用することによって、式（Ｉ）または式（ＩＩ）を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなり、単離および／または精製され得る、ペプチドまたは誘導体、プロドラッグ、類似体、その薬学的に許容される塩または溶媒和物を含有する化合物を調製するための方法を提供する。

さらなる実施形態によれば、本発明は、式（Ｉ）または式（ＩＩ）を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなり、単離および／または精製され得る、ペプチドまたは誘導体、プロドラッグ、類似体、薬学的に許容される塩または溶媒和物または塩の溶媒和物を含有する化合物を調製するための方法であって、以下の工程を含む方法を提供する：
１． ０．２～１．０ｍｍｏｌ／ｇのローディングを有する２－クロロトリチル型樹脂、または０．２～１．０ｍｍｏｌ／ｇのローディングを有するＷａｎｇ型樹脂の使用、
２． 配列のｃ末端アミノ酸を樹脂上にロードし、
３． ＤＭＦまたはＮＭＰ中の１５～２５％ピペリジン溶液によるｆｍｏｃ保護の除去、
４． 配列中の次のアミノ酸を、ＨＢＴＵ、ＨＡＴＵまたはＤＩＣ／Ｏｘｙｍａのようなカップリング試薬を３～８当量の化学量論を用いてカップリングし、
５． 配列が完了するまで工程３および４を繰り返し、
６． ＴＦＡおよびチオールスカベンジャーを含む開裂カクテルを用いた固体支持体からのペプチドの開裂、
７． 酸化条件（空気またはＩ２）下での配列中の２つのシステインの環化、
８． 逆相ＨＰＬＣを用いた切断ペプチドの精製。

さらなる実施形態によれば、本発明は、式（Ｉ）または式（ＩＩ）を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなり、単離および／または精製され得る、ペプチドまたは誘導体、プロドラッグ、類似体、薬学的に許容される塩または溶媒和物または塩の溶媒和物を含有する化合物を調製するための方法であって、以下の工程を含む方法を提供する：
１． ０．２～１．０ｍｍｏｌ／ｇのローディングを有する２－クロロトリチル型樹脂、または０．２～１．０ｍｍｏｌ／ｇのローディングを有するＷａｎｇ型樹脂の使用、
２． 配列のｃ末端アミノ酸を樹脂上にロードし、
３． ＤＭＦまたはＮＭＰ中の１５～２５％ピペリジン溶液によるｆｍｏｃ保護の除去、
４． 配列中の次のアミノ酸を、ＨＢＴＵ、ＨＡＴＵまたはＤＩＣ／Ｏｘｙｍａのようなカップリング試薬を３～８当量の化学量論を用いてカップリングし、
５． 配列が完了するまで工程３および４を繰り返し、
６． ＴＦＡおよびチオールスカベンジャーを含む開裂カクテルを用いた固体支持体からのペプチドの開裂、
７． 酸化条件（空気またはＩ２）下での配列中の２つのシステインの環化、
８． 逆相ＨＰＬＣを用いた切断ペプチドの精製、
９． ＨＣｌ塩への変換。

本明細書中に定義される少なくとも１つのペプチド、誘導体もしくは類似体、またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物、または本明細書中に定義される複合体はまた、生化学的アッセイ（例えば、ＭＡＳＰ阻害剤に対する応答性を測定するための診断アッセイにおいて、またはＭＡＳＰ阻害剤結合に基づく任意の生化学的アッセイにおいて）において、生化学的薬剤として使用され得る。

本発明はまた、本発明によるＭＡＳＰ阻害ペプチドをエンコードする配列を含むポリ核酸ならびに本発明によるＭＡＳＰ阻害ペプチドをエンコードする配列を含むポリ核酸を含むベクターを含む。

本発明は、本発明の特定の実施形態に関連する以下の実施例によってさらに説明される。実施例は特に断らない限り、当業者に慣用的な周知の標準的技術を用いて実施した。以下の実施例は例示の目的のためだけのものであり、本発明の条件または範囲に関して完全に決定的であることを意図するものではない。したがって、それらは、本発明の範囲を限定するものとして決して解釈されるべきではない。

実施例
実験の項で使用した略語のリスト：
Å オングストローム
ａｑ． 水性、水溶液
ｂａｒ 圧力の単位
ＢＰＲ 背圧抑制装置
ｃｏｎｃ 濃縮
ｄ 二重線（ＮＭＲ）
ｄｄ 二重線の二重線（ＮＭＲ）
ＤＣＭ ジクロロメタン
ＤＥＡ ジエチルアミン
ＤＩＰＥＡ Ｎ，Ｎ，－ジイソプロピルエチルアミン（Ｈｕｅｎｉｇ｀ｓ ｂａｓｅ）
ＤＭＡＰ ４－ジメチルアミノピリジン
ＤＭＦ Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド
ＤＭＳＯ ジメチルスルホキシド
ｄｔ 三重線の二重線（ＮＭＲ）
ＥＡ 酢酸エチル
ｅｅ エナンチオマー過剰
ｅｎｔ エナンチオマー
ｅｑ 当量（ｓ）
ｅｑｕｉｖ 等価物（イオンクロマトグラフィー）
ＥＳＩ エレクトロスプレーイオン化（質量分析）
Ｆｍｏｃ－ＯＳｕ １－｛［（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシ）カルボニル］オキシ｝ピロリジン－２，５－ジオン
ＧＣ－ＭＳ 質量分析に連結したガスクロマトグラフィー
ｈ 時間（ｓ）
ＨＡＴＵ Ｏ－（７－アザベンゾトリアゾール－１－イル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウム－ヘキサフルオロホスフェート
ＨＰＬＣ 高圧液体クロマトグラフィー
ＩＣ イオンクロマトグラフィー
ＩＤ 内径
Ｌ リットル
ＬＣ－ＭＳ 質量分析に連結した液体クロマトグラフィー
ＬｉＨＭＤＳ リチウムビス（トリメチルシリル）アミド
ｌｉｔ． 文献
ｍ 多重線（ＮＭＲ）
ＭＡＬＤＩ マトリックス支援レーザー脱離／イオン化（質量分析）
Ｍｅ メチル
ｍｉｎ 分（ｓ）
ｍｍ ミリメートル
μｍ マイクロメートル（ミクロン）
Ｍ モル
ＭＰＬＣ 中圧液体クロマトグラフィー
ＭＳ 質量分析
ＭＴＢＥ ｔｅｒｔ－ブチルメチルエーテル
ＭＴＰ マイクロタイタープレート
ｍ／ｚ 質量電荷比（質量分析）
ｎｍ ナノメートル
ＮＭＰ Ｎ－メチル－２－ピロリドン
ＮＭＲ 核磁気共鳴分光法
ＰＢＳ リン酸緩衝生理食塩水
ＰＥ 石油エーテル
ＰＥＧ ポリエチレングリコール
ｐｏｓ 陽性
ｐｐｍ 百万分率
Ｐｒ プロピル
Ｐｓｉ ポンド／平方インチ（圧力）
ｑ／ｑｕａｒｔ 四重線（ＮＭＲ）
ｑｄ 二重線の四重線（ＮＭＲ）
ｑｕｉｎｔ 六重線（ＮＭＲ）
ｒａｃ ラセミ体
Ｒｆ 保持率（ＴＬＣ）
ＲＰ 逆相（液体クロマトグラフィー用）
Ｒｔ 保持時間（クロマトグラフィー）
ｓ 一重線（ＮＭＲ）
ｓ 秒（時間）
ＳＰＰＳ 固相ペプチド合成
ｔ 三重項（ＮＭＲ）
ＴＢＴＵ Ｏ（ベンゾトリアゾール－１－イル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウムテトラフルオロボラート
ｔＢｕ ｔｅｒｔ－ブチル
ＴＥＡ トリエチルアミン
ＴＨＦ テトラヒドロフラン
ＴＬＣ 薄層クロマトグラフィー
ＵＰＬＣ 超高速液体クロマトグラフィー
ＵＶ 紫外線
さらなる略語は、表２および３に見出すことができる。

分析ＬＣ－ＭＳ方法
方法１
ＭＳ装置型：ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃ ＬＴＱ－Ｏｒｂｉｔｒａｐ－ＸＬ；ＨＰＬＣ装置型：Ａｇｉｌｅｎｔ １２００ＳＬ；カラム：Ａｇｉｌｅｎｔ、ＰＯＲＯＳＨＥＬＬ １２０、３×１５０ｍｍ、ＳＢ－Ｃ１８ ２．７μｍ；溶離液Ａ：１Ｌ水＋０．１％トリフルオロ酢酸；溶離液Ｂ：１Ｌアセトニトリル＋０．１％トリフルオロ酢酸；グラディエント：０．０分２％Ｂ→１．５分２％Ｂ→１５．５分９８％Ｂ→１８．０分９８％Ｂ；オーブン：４０℃；流量：０．７５ｍＬ／分；ＵＶ検出：２１０ｎｍ
方法２
ＭＳ装置型：ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃ ＬＴＱ－Ｏｒｂｉｔｒａｐ－ＸＬ、ＨＰＬＣ装置型：Ａｇｉｌｅｎｔ １２００ＳＬ、カラム：Ａｇｉｌｅｎｔ、ＰＯＲＯＳＨＥＬＬ １２０；３×１５０ｍｍ、ＳＢ－Ｃ１８ ２．７μｍ、溶離液Ａ：１Ｌ水＋０．１％トリフルオロ酢酸、溶離液Ｂ：１Ｌアセトニトリル＋０．１％トリフルオロ酢酸、グラディエント：０．０分５％Ｂ→０．３分５％Ｂ→７．０分９８％Ｂ→１０分９８％Ｂ、オーブン：４０℃、流量：０．７５ｍＬ／分、ＵＶ検出：２１０ ｎｍ
方法３
ＭＳ装置型：Ｗａｔｅｒｓ ＴＯＦ ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ；ＵＰＬＣ装置型：Ｗａｔｅｒｓ Ａｃｑｕｉｔｙ Ｉ－ＣＬＡＳＳ；カラム：ＹＭＣ、ＴＲＩＡＲＴ Ｃ１８、７５×１ｍｍ、３．０μｍ×１２ｎｍ；溶離液Ａ：１Ｌ水＋０．０１％ギ酸；溶離液Ｂ：１Ｌアセトニトリル＋０．０１％ギ酸；グラディエント：０．０分１％Ｂ→２．０分１％Ｂ→８．０分９５％Ｂ→１０．０分９５％Ｂ；オーブン：５０℃；流量：０．６３ｍＬ／分；ＵＶ検出：２１０ｎｍ
方法４
ＭＳ装置型：Ｗａｔｅｒｓ ＴＯＦ ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ；ＵＰＬＣ装置型：Ｗａｔｅｒｓ Ａｃｑｕｉｔｙ Ｉ－ＣＬＡＳＳ；カラム：ＹＭＣ、ＴＲＩＡＲＴ Ｃ１８、７５×１ｍｍ、３．０μｍ、１２ｎｍ；溶離液Ａ：１Ｌ水＋０．０１％ギ酸；溶離液Ｂ：１Ｌアセトニトリル＋０．０１％ギ酸；グラディエント：０．０分１％Ｂ→１．０分１％Ｂ→１５．０分５０％Ｂ→１８．０分９５％Ｂ；オーブン：５０℃；流量：０．６３ｍＬ／分；ＵＶ検出：２１０ｎｍ
方法５
ＭＳ装置型：Ｗａｔｅｒｓ ＴＯＦ ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ、ＵＰＬＣ装置型：Ｗａｔｅｒｓ Ａｃｑｕｉｔｙ Ｉ－ＣＬＡＳＳ、カラム：Ｗａｔｅｒｓ、ＨＳＳＴ３、２．１×５０ｍｍ、Ｃ１８ １．８μｍ、溶離液Ａ：１Ｌ水＋０．０１％ギ酸、溶離液Ｂ：１Ｌアセトニトリル＋０．０１％ギ酸、グラジエント：０．０分２％Ｂ→０．５分２％Ｂ→７．５分９５％Ｂ→１０．０分９５％Ｂ、オーブン：５０℃、流量：１．００ｍＬ／分、ＵＶ検出：２１０ｎｍ
方法６
ＭＳ装置型： Ｗａｔｅｒｓ Ｓｙｎａｐｔ Ｇ２Ｓ；ＵＰＬＣ装置型：Ｗａｔｅｒｓ Ａｃｑｕｉｔｙ Ｉ－ＣＬＡＳＳ；カラム：Ｗａｔｅｒｓ、ＢＥＨ３００、２．１ｘ１５０ｍｍ、Ｃ１８ １．７μｍ；溶出液Ａ：１Ｌ水＋０．０１％ギ酸；溶出液Ｂ：１Ｌアセトニトリル＋０．０１％ギ酸；グラディエント：０．０分２％Ｂ→１．５分２％Ｂ→８．５分９５％Ｂ→１０．０分９５％Ｂ；オーブン：５０℃；流量：０．５０ｍＬ／分；ＵＶ検出：２２０ｎｍ
方法７
ＭＳ装置型：Ａｇｉｌｅｎｔ ６４１０ Ｔｒｉｐｌｅ Ｑｕａｄ；ＨＰＬＣ装置型：Ａｇｉｌｅｎｔ １２００；カラム：Ｇｅｍｉｎｉ－ＮＸ Ｃ１８ ５μｍ １１０Å １５０×４．６ｍｍ；溶離液Ａ：Ｈ_２Ｏ中の０．１％ＴＦＡ；溶離液Ｂ：ＡＣＮ中の０．１％ＴＦＡ；グラディエント：０．０分２０％Ｂ→２０分５０％Ｂ→２０．１分９０％Ｂ→２３分９０％Ｂ；オーブン温度：５０℃；流量：１．０ｍＬ／分；ＵＶ検出：２２０ｎｍ
方法８
ＭＳ装置型：Ａｇｉｌｅｎｔ ６４１０ Ｔｒｉｐｌｅ Ｑｕａｄ；ＨＰＬＣ装置型：Ａｇｉｌｅｎｔ １２００；カラム：Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ ＢＩＯ Ｗｉｄｅ Ｐｏｒｅ Ｃ１８ ５μｍ ３００Å×４．６ｍｍ；溶離液Ａ：Ｈ_２Ｏ中の０．１％ＴＦＡ；溶離液Ｂ：ＡＣＮ中の０．１％ＴＦＡ；グラディエント：０．０分１０％Ｂ→２０分８０％Ｂ→２０．１分９０％Ｂ→２３分９０％Ｂ；オーブン温度：５０℃；流量：１．０ｍＬ／分；ＵＶ検出：２２０ｎｍ
方法９
装置：Ｗａｔｅｒｓ ＡＣＱＵＩＴＹ ＳＱＤ ＵＰＬＣ Ｓｙｓｔｅｍ；カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ａｃｑｕｉｔｙ ＵＰＬＣ ＨＳＳ Ｔ３ １．８μｍ ５０×１ｍｍ；溶離液Ａ：１Ｌ水＋０．２５ｍＬ９９％ギ酸、溶離液Ｂ：１Ｌアセトニトリル＋０．２５ｍＬ９９％ギ酸；グラディエント：０．０分９０％Ａ→１．２分５％Ａ→２．０分５％Ａ；オーブン：５０℃；流量：０．４０ｍＬ／分；ＵＶ検出：２１０ｎｍ
方法１０
ＭＳ装置：Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ ＦＴ－ＭＳ；ＵＨＰＬＣ装置：Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ ＵｌｔｉＭａｔｅ ３０００；カラム：Ｗａｔｅｒｓ、ＨＳＳＴ３、２．１×７５ｍｍ、Ｃ１８ １．８μｍ；溶離液Ａ：１Ｌ水＋０．０１％ギ酸；溶離液Ｂ：１Ｌアセトニトリル＋０．０１％ギ酸；グラディエント：０．０分１０％Ｂ→２．５分９５％Ｂ；オーブン：５０℃；流量：０．９０ｍＬ／分；ＵＶ検出：２１０ｎｍ／最適積分経路２１０～３００ｎｍ
方法１１
ＭＳ装置：Ａｇｉｌｅｎｔ ＭＳ Ｑｕａｄ ６１５０；ＨＰＬＣ：Ａｇｉｌｅｎｔ １２９０；カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ａｃｑｕｉｔｙ ＵＰＬＣ ＨＳＳ Ｔ３ １．８μｍ ５０×２．１ｍｍ；溶離液Ａ：１Ｌ水＋０．２５ｍＬギ酸、溶離液Ｂ：１Ｌアセトニトリル＋０．２５ｍＬギ酸；グラディエント：０．０分９０％Ａ→０．３分９０％Ａ→１．７分５％Ａ→３．０分５％Ａ オーブン：５０℃；流量：１．２０ｍＬ／分；ＵＶ検出：２０５～３０５ｎｍ。

方法１２
装置：Ｗａｔｅｒｓ ＡＣＱＵＩＴＹ ＳＱＤ ＵＰＬＣ Ｓｙｓｔｅｍ；カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ａｃｑｕｉｔｙ ＵＰＬＣ ＨＳＳＴ３ １．８μｍ ５０ｘ１ｍｍ；溶離液Ａ：１Ｌ水＋０．２５ｍＬ９９％ギ酸、溶離液Ｂ：１Ｌアセトニトリル＋０．２５ｍＬ９９％ギ酸；グラディエント：０．０分９５％Ａ→６．０分５％Ａ→７．５分５％Ａ オーブン：５０℃；流量：０．３５ｍＬ／分；ＵＶ検出：２１０ｎｍ。

方法１３
装置：Ｗａｔｅｒｓ Ｓｉｎｇｌｅ Ｑｕａｄ ＭＳ Ｓｙｓｔｅｍ；Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ Ｗａｔｅｒｓ ＵＰＬＣ Ａｃｑｕｉｔｙ；カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＢＥＨ １８ １．７μｍ ５０×２．１ｍｍ；溶離液Ａ：１Ｌ水＋１．０ｍＬ（２５％アンモニア）／Ｌ、溶離液Ｂ：１Ｌアセトニトリル；グラディエント：０．０分９２％Ａ→０．１分９２％Ａ→１．８分５％Ａ→３．５分５％Ａ；オーブン：５０℃；流量：０．４５ｍＬ／分；ＵＶ検出：２１０ ｎｍ。

方法１４
ＭＳシステム：Ｗａｔｅｒｓ ＴＯＦ ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ；ＵＰＬＣシステム：Ｗａｔｅｒｓ Ａｃｑｕｉｔｙ Ｉ－ＣＬＡＳＳ；カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ａｃｑｕｉｔｙ ＵＰＬＣペプチドＢＥＨ Ｃ１８ ３００Å、１．７μｍ １５０×２．１ｍｍ；溶離液Ａ：１ｌ水＋０．１００ｍｌ９９％ギ酸、溶離液Ｂ：１ｌアセトニトリル＋０．１００ｍｌ９９％ギ酸；グラディエント：０．０分９０％Ａ→０．２５分９０％Ａ→８．０分４５％Ａ→１０．０分２％→１２．０分２％Ａ オーブン：５０℃；流量：０．４７５ｍｌ／分；ＵＶ検出：２１０ｎｍ。

方法１５
ＭＳ装置型：Ａｇｉｌｅｎｔ Ｇ６１１０Ａ；ＨＰＬＣ装置型：Ａｇｉｌｅｎｔ １２００シリーズＬＣ；ＵＶ ＤＡＤ；カラム：Ｃｈｒｏｍｏｌｉｔｈ Ｆｌａｓｈ ＲＰ－１８ｅ ２５×２．０ｍｍ；移動相Ａ：水中の０．０３７５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）；移動相Ｂ：アセトニトリル中の０．０１８７５％ＴＦＡ（Ｖ／Ｖ）；グラディエント：０．０１分５％Ｂ→０．８０分９５％Ｂ→１．２０分９５％Ｂ→１．２１分５％Ｂ→１．５分５％Ｂ；流量：１．５０ｍＬ／分；オーブン温度：５０℃；ＵＶ検出：２２０ｎｍおよび２５４ｎｍ。

ＭＡＬＤＩ方法
Ｂｒｕｋｅｒ ａｕｔｏｆｌｅｘ ｍａＸ ＬＲＦ ＭＡＬＤＩ ＭＳ Ｔｉｍｅ－ｏｆ－Ｆｌｉｇｈｔ （ＴｏＦ－ＭＳ）ｓｙｓｔｅｍ上で、Ｍａｔｒｉｘ Ａｓｓｉｓｔｅｄ Ｌａｓｅｒ Ｄｅｓｏｒｐｔｉｏｎ／Ｉｏｎｉｚａｔｉｏｎ（ＭＡＬＤＩ）質量分析法を用いて、選択されたペプチドについて正確な質量測定を行った。マトリックスとしてα－シアノ－４－ヒドロキシケイ皮酸（ＣＡＳ２８１６６－４１－８）を使用して、Ｂｒｕｋｅｒ ＭＡＬＤＩ標的プレート上でサンプルを調製した。１．０ｍＬのアセトニトリル－水（５０／５０または３０／７０）中のサンプルペプチド０．１～１．０ｍｇの溶液、および０．０５％トリフルオロ酢酸を含有する水中の５０％アセトニトリル中のマトリックス（１０ｍｇ／ｍＬ）のストック溶液を調製する。各溶液１．０ｕＬをＭＡＬＤＩ標的プレート上に置き、乾燥させる。次いで、サンプルは、分析の準備が整う。ＭＡＬＤＩ標的プレートに推奨されるサンプル調製物は、Ｂｒｕｋｅｒによって提供される文書に見出すことができる。

分析用イオンクロマトグラフィー法
方法：ＩＣ－定量
外部標準を使用したカチオンおよびアニオンの定量測定；装置：Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ ＩＣＳ ５０００＋；Ｃａｐｉｌｌａｒｙ ＩＣ Ｃｏｌｕｍｎｓ：ＩｏｎＰａｃ ＡＳ １１－ＨＣ ｕｎｄ ＩｏｎＰａｃ ＣＳ１６；溶離液：グラディエント溶離液［Ｈ］＋［ＯＨ］－；検出器：伝導性検出；可能なルーチンアニオン：酢酸塩、臭化物、クエン酸塩、塩化物、フッ化物、ギ酸塩、乳酸塩、メシレート、リン酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、トリフルオロ酢酸塩；可能なルーチンカチオン：アンモニウム、バリウム、カルシウム、カリウム、リチウム、ナトリウム、マグネシウム、コリン。

分析ガスクロマトグラフィー質量分析法
ＧＣ－ＭＳ方法１
装置：Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ ＤＳＱＩＩ、Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｔｒａｃｅ ＧＣ Ｕｌｔｒａ；カラム：Ｒｅｓｔｅｋ ＲＴＸ－３５ＭＳ，１５ｍ×２００μｍ×０．３３μｍ；ヘリウムを用いた一定流：１．２０ｍＬ／分；オーブン：６０℃；インレット：２２０℃；グラディエント：６０℃、３０℃／分→３００℃（３．３３分保持）。

ＮＭＲ
選択された化合物の^１Ｈ－ＮＭＲデーターは、^１Ｈ－ＮＭＲピークリストの形態で列挙されている。ここで、各シグナルピークについて、ｐｐｍでのδ値が与えられ、続いて丸括弧で報告されるシグナル強度が与えられる。異なるピークからのδ値－シグナル強度対は、コンマによって分離される。したがって、ピークリストは、一般的な形式：δ１（強度１）、δ２（強度２）、．、δｉ（強度ｉ）、．、δｎ（強度ｎ）、で記述される。

鋭い信号の強度は、印刷されたＮＭＲスペクトルにおける信号の高さ（ｃｍ）と相関する。他のシグナルと比較した場合、このデータは、シグナル強度の実際の比と相関させることができる。広い信号の場合、スペクトルに表示される最も強い信号と比較して、２つ以上のピーク、または信号の中心が、それらの相対強度と共に示される。^１Ｈ－ＮＭＲピークリストは古典的な^１Ｈ－ＮＭＲ読取りに類似しており、したがって、通常、古典的なＮＭＲ解釈に列挙された全てのピークを含む。さらに、古典的な１Ｈ－ＮＭＲプリントアウトと同様に、ピークリストは、溶媒シグナル、特定の標的化合物の立体異性体に由来するシグナル、不純物のピーク、１３Ｃサテライトピーク、および／またはスピニングサイドバンドを示すことができる。立体異性体のピーク、および／または不純物のピークは典型的には標的化合物のピークと比較して低い強度（例えば、＞９０％の純度）で示される。そのような立体異性体および／または不純物は特定の製造工程に典型的であり、したがって、それらのピークは「副生成物の指紋」に基づいて製造工程の再現を同定するのに役立ち得る。既知の方法（ＭｅｓｔＲｅＣ、ＡＣＤシミュレーション、または経験的に評価された期待値の使用）によって標的化合物のピークを計算する専門家は、必要に応じて、任意で追加の強度フィルターを使用して、表的化合物のピークを分離することができる。そのような操作は古典的な１Ｈ－ＮＭＲ解釈におけるピークピッキングと同様である。ピークリストの形態でのＮＭＲデータの報告の詳細な記載が刊行物「Ｃｉｔａｔｉｏｎ ｏｆ ＮＭＲ Ｐｅａｋｌｉｓｔ Ｄａｔａ ｗｉｔｈｉｎ Ｐａｔｅｎｔ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ」（参照、ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｒｅｓｅａｒｃｈｄｉｓｃｌｏｓｕｒｅ．ｃｏｍ／ｓｅａｒｃｈｉｎｇ－ｄｉｓｃｌｏｓｕｒｅｓ， Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｄｉｓｃｌｏｓｕｒｅ Ｄａｔａｂａｓｅ Ｎｕｍｂｅｒ ６０５００５， ２０１４， ０１ Ａｕｇ ２０１４）に見出すことができる。ピークピッキングのルーチンでは、Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｄｉｓｃｌｏｓｕｒｅ Ｄａｔａｂａｓｅ Ｎｕｍｂｅｒ ６０５００５に記載されているように、パラメータ「最小の高さ」を１％と４％との間で調整することができる。しかし、化学構造および／または測定された化合物の濃度に応じて、以下のようになる。パラメータ「最小の高さ」＜１％を設定するのが妥当。

調製実施例
一般的な合成方法
固相ペプチド合成（ＳＰＰＳ）は、自動ペプチド合成機を用いて、または手動で行われた。ペプチド合成は、典型的には０．１～１．０ｍｍｏｌのスケール範囲で行った。ペプチド合成を手動で行った場合、以下に記載する一般的な手順方法Ｃ、ＤおよびＥを使用した。自動化ペプチド合成を、Ｓｙｍｐｈｏｎｙ Ｘペプチド合成機（Ｇｙｒｏｓ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）で行った。

Ｆｍｏｃ保護アミノ酸（またはＦｍｏｃアミノ酸を調製するために使用される中間アミノ酸）は、Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ、Ｂａｃｈｅｍ、Ｉｒｉｓ Ｂｉｏｔｅｃｈ、Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ、Ａｌｆａ、Ｅｎａｍｉｎｅ、Ａｍａｔｅｋ、Ａｎｉｃｈｅｍ、ＡＣＢＲ、ＡＢＣ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ、ＡＰ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ、Ｃｏｍｂｉｂｌｏｃｋｓ、ＡｒＺａ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ、Ａｒｋ Ｐｈａｒｍ、Ａｃｒｏｔｅｉｎｃｈｅｍ、Ａｐｏｌｌｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、Ｂｉｏｆｉｎｅ、Ｂｒｏａｄｐｈａｒｍ、ＶＷＲ、またはＧｙｒｏｓ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ（フルオレニルメトキシカルボニル＝Ｆｍｏｃ）、ＧＬ Ｂｉｏｃｈｅｍ（Ｓｈａｎｇｈａｉ）Ｌｔｄ、Ｃｈｅｎｇｄｕ Ａｍｉｎｏｔｐ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｌｔｄ、Ｓｕｚｈｏｕ Ｈｉｇｈｆｉｎｅ Ｂｉｏｔｅｃｈ Ｃｏ．Ｌｔｄ、ＷｕＸｉ ＡｐｐＴｅｃから購入され、または他の中国のベンダーから供給された。いくつかの特別なｆｍｏｃ保護アミノ酸を内部で合成し、これらの合成方法を本明細書に記載する。内部で合成されるｆｍｏｃアミノ酸のいくつかも市販されている。Ｆｍｏｃ保護アミノ酸が市販されていなかったが、Ｂｏｃ保護（ｔｅｒｔ－ブチルオキシカルボニル＝Ｂｏｃ）非天然アミノ酸が市販されていた場合には当技術分野で一般に使用されている方法を使用して、脱保護および再保護によってＢｏｃ保護アミノ酸からｆｍｏｃ保護アミノ酸を調製した。本発明のペプチドの合成に使用される市販の非天然アミノ酸のＣＡＳ番号は、ほとんどの場合、表５に含まれている。ラセミアミノ酸（ＦｍｏｃまたはＢｏｃ）が購入された場合、当業者はエナンチオマーがキラルクロマトグラフィーを使用して分離され得ることを認識すべきであり、これは、実際にはペプチド合成の前にエナンチオマー的に純粋なアミノ酸を得るために行われたことがある。

以下の非天然アミノ酸は、本発明のペプチドを調製する際に使用されている。ＦｍｏｃまたはＢｏｃ保護されたアミノ酸は、市販の供給源（ＣＡＳ番号が入手可能である）を介して得られるか、または本明細書中に記載される方法によって内部合成されたかのいずれかであった。表５は、ペプチド合成に使用した化学基／アミノ酸のＣＡＳ番号（右欄）およびペプチド中に存在する対応する化学基／アミノ酸（左欄）を示す。

表５：本発明の非天然アミノ酸および化学基の入手可能性

固相樹脂は、Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ、Ｂａｃｈｅｍ、Ｉｒｉｓ Ｂｉｏｔｅｃｈ、Ｐｃａｓ Ｂｉｏｍａｔｒｉｘ、ＧＬ Ｂｉｏｃｈｅｍ（Ｓｈａｎｇｈａｉ）Ｌｔｄ、ＣＥＭ、またはＰｒｏｔｅｉｎ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓから購入した。樹脂ローディングは０．３～１．０ｍｍｏｌ／ｇであった。ペプチドは、所望のＣ末端に応じて、２－クロロトリチル樹脂、Ｗａｎｇ樹脂、またはＲｉｎｋアミド型樹脂上で合成した。フルオレニルメトキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）保護基の開裂は、室温でジメチルホルムアミド中の２０％ピペリジンを使用して達成された。各Ｆｍｏｃ切断工程を２回行った。８当量のＦｍｏｃ－アミノ酸、８当量のＤＩＣ（ジイソプロピルカルボジイミド）（ＤＭＦ中０．５Ｍ）および８当量のＯｘｙｍａ（シアノヒドロキシイミノ酢酸エチル）（ＤＭＦ中０．５Ｍ）を用いて、自動合成機（Ｓｙｍｐｈｏｎｙ Ｘ）上でアミノ酸をカップリングした。アミノ酸カップリングは、Ｓｙｍｐｈｏｎｙ Ｘを使用した場合、室温および窒素雰囲気下で行った。高価なまたは自己調製されたｆｍｏｃ－アミノ酸を使用した場合、３当量のＦｍｏｃ－アミノ酸を使用して、３当量のＤＩＣ（ＤＭＦ中０．５Ｍ）および３当量のＯｘｙｍａ（ＤＭＦ中０．５Ｍ）と共にカップリングを手動で行った。各アミノ酸カップリング工程を２回行った（二重カップリング）。あるいは、ペプチドは、３当量のＦｍｏｃ－アミノ酸、２．８５当量のＨＢＴＵ（（２－（１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イル）－１，１，３，３－テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート、ヘキサフルオロホスフェートベンゾトリアゾールテトラメチルウロニウム）（ＤＭＦ中０．５Ｍ）、および６当量のＤＩＰＥＡ（ＤＭＦ中０．５Ｍ）を使用して、ＳＰＰＳによって手動で調製した。ニンヒドリン試験を用いてカップリング反応をモニターした。

トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）／チオアニソール（ＴＡ）／１，２－エタンジチオール（ＥＤＴ）（９０：７：３）または９２．５％ＴＦＡ／２．５％ＥＤＴ／２．５％ＴＩＳ（トリイソプロピルシラン）／２．５％Ｈ_２Ｏを用いてペプチドを完全に脱保護した。メチオニンを含むペプチドについては、ペプチドをＴＦＡ中の１．６％ＥＤＴおよび１．２％トリメチルシリルブロミドの溶液で室温で２時間処理して酸化されたメチオニンを還元した。

ジスルフィド環化：
ジスルフィド架橋は、０．５ｍｇ／ｍＬの濃度で、０．１Ｍ重炭酸アンモニウム緩衝液（ｐＨ７．８３）中でペプチドを一晩振盪することによって形成した。次に、溶液を凍結乾燥した。あるいは、ジスルフィド架橋はｐＨ９．０に調整したアセトニトリル／水（しばしば３：７）の混合物中のペプチドを、１～３ｍｇ／ｍＬの濃度で、固体重炭酸アンモニウム緩衝液で一晩振盪することによって形成された。あるいは、２０℃で２分間、アセトニトリル／水（１：１）中１～１．３ｍｇ／ｍＬの濃度で、ヨウ素（Ｉ_２）（ＭｅＯＨ中０．１Ｍ）で酸化し、続いてチオ硫酸ナトリウム（水中０．１Ｍ）で処理し、続いて凍結乾燥することによって、ジスルフィド架橋を調製した。

任意のアセチル化：
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の１０当量の無水酢酸および２．５当量のＤＩＰＥＡを使用して、懸濁液をＲＴで１時間、オービタルシェーカー上で振盪することによって、Ｎ末端アセチル化を行った。溶媒を除去し、樹脂をＤＭＦ（５×）およびＤＣＭ（５×）で洗浄した。次いで、この手順を再び繰り返した。あるいは、無水酢酸／Ｎ－メチルモルホリン（ＮＭＭ）／ＤＭＦ（１０：５：８５）からなるキャッピング溶液１０ｍＬを用いて、懸濁液を室温で３０分間オービタルシェーカー上で振盪することによって、Ｎ末端アセチル化を行った。

ペプチド切断：
ＴＦＡ／ＥＤＴ／チオアニソール（９０：３：７）を含有する切断カクテルを調製した。切断カクテル（２ｍＬ）をペプチド含有樹脂に添加し、懸濁液をオービタルシェーカー上で２．５時間振盪した。冷エーテル（－２０℃）を加えてペプチドを沈殿させた。得られた溶液を窒素下で遠心分離し（Ｓｉｇｍａ ２－１６ＫＬ）、デカンテーション後に得られた固体を、遠心分離およびデカンテーションによって、冷エーテルでさらに３回洗浄した。得られた固体を分取ＨＰＬＣにより精製した。

あるいは、ＴＦＡ／ＥＤＴ／ＴＩＳ／Ｈ_２Ｏ（９２．５：２．５：２．５：２．５）を含む切断カクテルを調製した。切断カクテル（６ｍＬ（０．３ｍｍｏｌスケール））をペプチド含有樹脂に添加し、懸濁液をオービタルシェーカー上で２．５時間振盪した。冷ｔ－ブチルメチルエーテル（－２０℃）を加えてペプチドを沈殿させた。得られた溶液を３０００ｒｐｍで３分間遠心分離し、デカンテーション後に得られた固体を、遠心分離およびデカンテーションによって、冷ｔ－ブチルメチルエーテルでさらに３回（２０ｍＬ×３）洗浄した。得られた粗ペプチドを真空上で２時間乾燥させ、次いで分取ＨＰＬＣによって精製した。

分取ＨＰＬＣ：
Ａｇｉｌｅｎｔ １２６０ Ｐｒｅｐ逆相ＨＰＬＣまたはＫｎａｕｅｒ ＡＺＵＲＡ Ｐｒｅｐ逆相ＨＰＬＣを精製に使用した。カラムは、カラムスクリーの結果に基づいて選択される。ペプチドを１０～３０％ ＡＣＮ／水（典型的にはグラディエントの開始点）に溶解する。水およびアセトニトリルは両方とも０．１％のＴＦＡを含有する。流量２０ｍＬ／分、１０～３０％ＡＣＮ／水～８５～９０％ＡＣＮ／水を典型的に使用した。分画を、Ｃｈｒｏｍｏｌｉｔｈ Ｓｐｅｅｄｒｏｄカラム、５～９５％ＡＣＮ／水８分間のグラディエント）を使用するＨＰＬＣ（Ａｇｉｌｅｎｔ １２６０ Ｉｎｆｉｎｉｔｙ）によって、および以下のＬＣ－ＭＳ方法：方法１、方法２、方法３、方法４、方法５、方法６のうちの１つ以上によって分析した。

あるいは、Ｇｉｌｓｏｎ ＧＸ－２８１ Ｐｒｅｐ逆相ＨＰＬＣを精製に使用した。カラムは、カラムスクリーンの結果に基づいて選択した。ペプチドを１０～３０％ＡＣＮ／水（典型的にはグラディエントの開始点）に溶解する。水は０．０７５％のＴＦＡを含んでいた。通常、Ｌｕｎａカラム（２５ｘ２００ｍｍ、Ｃ１８ １０μｍ、１１０Å）またはＧｅｍｉｎｉカラム（３０ｘ１５０ｍｍ、Ｃ１８ ５μｍ、１１０Å）を使用した。分取高速液体クロマトグラフィーの条件：流量２０ｍＬ／分、１０～３０％ＡＣＮ／水～８５～９０％ＡＣＮ／水、波長２１４／２５４ｎｍ、オーブン温度 ３０^ｏＣ．分画を、方法Ｗ１または方法７を用いて高速液体クロマトグラフィー（Ａｇｉｌｅｎｔ １２６０ Ｉｎｆｉｎｉｔｙ）によって分析した。その後、ペプチドを、以下の方法：方法１、方法２、方法３、方法４、方法５、方法６のうちの１つ以上によって分析した。

ジスルフィド模倣体（ここで、－Ｓ－Ｓ－ジスルフィド結合が－ＣＨ_２－Ｓ－、－Ｓ－ＣＨ_２－、－ＣＨ_２－ＣＨ_２－、－Ｓ－（ＣＨ_２）_２－、－（ＣＨ_２）_２－Ｓ－または－ＣＨ_２－Ｓ－ＣＨ_２－で置き換えられている）は、本明細書に記載する方法と組み合わせて、以下の参考文献に記載される方法に従って作成することができる：（１）Ｈｏｎｇ－Ｋｕｉ Ｃｕｉ、Ｙｅ Ｇｕｏ、Ｙａｏ Ｈｅ、Ｆｅｎｇ－Ｌｉａｎｇ Ｗａｎｇ、Ｈａｏ－Ｎａｎ Ｃｈａｎｇ、Ｙｕ－Ｊｉａ Ｗａｎｇ、Ｆａｎｇ－Ｍｉｎｇ Ｗｕ、Ｃｈａｎｇ－Ｌｉｎ Ｔｉａｎ、Ｌｅｉ Ｌｉｕ、Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．２０１３、５２、９５５８－９５６２；（２）Ｙｅ Ｇｕｏ、Ｄｅ－Ｍｅｎｇ Ｓｕｎ、Ｆｅｎｇ－Ｌｉａｎｇ Ｗａｎｇ、Ｙａｏ Ｈｅ、Ｌｅｉ Ｌｉｕ、Ｃｈａｎｇ－Ｌｉｎ Ｔｉａｎ、Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．２０１５、５４、１４２７６－１４２８１；（３）Ｙａｎｇ Ｘｕ、Ｔａｏ Ｗａｎｇ、Ｃｈａｏ－Ｊｉａｎ Ｇｕａｎ、Ｙｉ－Ｍｉｎｇ Ｌｉ、Ｌｅｉ Ｌｉｕ、Ｊｉｎｇ Ｓｈｉ、Ｄｏｎａｌｄ Ｂｉｅｒｅｒ、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔｅｒｓ ２０１７、５８、１６７７－１６８０；（４）Ｔａｏ Ｗａｎｇ、Ｙｉ－Ｆｕ Ｋｏｎｇ、Ｙａｎｇ Ｘｕ、Ｊｉａｎ Ｆａｎ、Ｈｕａ－Ｊｉａｎ Ｘｕ、Ｄｏｎａｌｄ Ｂｉｅｒｅｒ、Ｊｕｎ Ｗａｎｇ、Ｊｉｎｇ Ｓｈｉ、Ｙｉ－Ｍｉｎｇ Ｌｉ、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔｅｒｓ ２０１７、５８、３９７０－３９７３；（５）Ｔａｏ Ｗａｎｇ、Ｊｉａｎ Ｆａｎ、Ｘｉａｏ－Ｘｕ Ｃｈｅｎ、Ｒｕｉ Ｚｈａｏ、Ｙａｎｇ Ｘｕ、Ｄｏｎａｌｄ Ｂｉｅｒｅｒ、Ｌｅｉ Ｌｉｕ、Ｙｉ－Ｍｉｎｇ Ｌｉ、Ｊｉｎｇ Ｓｈｉ、Ｇｅ－Ｍｉｎ Ｆａｎｇ、Ｏｒｇ．Ｌｅｔｔ．２０１８、２０、６０７４－６０７８；（６）Ｊａｎ－Ｐａｔｒｉｃｋ Ｆｉｓｃｈｅｒ、Ｒｉａ Ｓｃｈｏｅｎａｕｅｒ、Ｓｙｌｖｉａ Ｅｌｓ－Ｈｅｉｎｄｌ、Ｄｏｎａｌｄ Ｂｉｅｒｅｒ、Ｊｏｈａｎｎｅｓ Ｋｏｅｂｂｅｒｌｉｎｇ、Ｂｅｒｎｄ Ｒｉｅｄｌ、Ａｎｎｅｔｔｅ Ｇ． Ｂｅｃｋ－Ｓｉｃｋｉｎｇｅｒ、Ｊ Ｐｅｐ Ｓｃｉ．２０１９；ｅ３１４７；（７）Ｄｏｎｇ－Ｌｉａｎｇ Ｈｕａｎｇ、Ｊｉｎｇ－Ｓｉ Ｂａｉ、Ｍｅｎｇ Ｗｕ、Ｘｉａ Ｗａｎｇ、Ｂｅｒｎｄ Ｒｉｅｄｌ、Ｅｌｉｓａｂｅｔｈ Ｐｏｏｋ、Ｃａｒｓｔｅｎ Ａｌｔ、Ｍａｒｉｏｎ Ｅｒｎｙ、Ｙｉ－Ｍｉｎｇ Ｌｉ、Ｄｏｎａｌｄ Ｂｉｅｒｅｒ、Ｊｉｎｇ Ｓｈｉ、Ｇｅ－Ｍｉｎ Ｆａｎｇ、Ｃｈｅｍ．Ｃｏｍｍｕｎ．、２０１９、５５、２８２１－２８２４；（８）Ｓｈｕａｉ－Ｓｈｕａｉ Ｓｕｎ、Ｊｕｎｙｏｕ Ｃｈｅｎ、Ｒｕｉ Ｚｈａｏ、Ｄｏｎａｌｄ Ｂｉｅｒｅｒ、Ｊｕｎ Ｗａｎｇ、Ｇｅ－Ｍｉｎ Ｆａｎｇ、Ｙｉ－Ｍｉｎｇ Ｌｉ、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔｅｒｓ ２０１９、６０、１１９７－１２０１；（９）Ｃ．Ｍ．Ｂ．Ｋ．Ｋｏｕｒｒａ ａｎｄ Ｎ．Ｃｒａｍｅｒ、Ｃｈｅｍ．Ｓｃｉ．、２０１６、７、７００７－７０１２。

特に断らない限り、本発明の全てのペプチドはＴＦＡ塩である。

Ｍａｓｐペプチドの自動ＳＰＰＳの一般的方法（方法Ａ）
（（Ｎ－Ｍｅ）Ｇ）－ＩＣ＋ＳＲＳＬＰ－（Ｏｉｃ）－Ｉ－（Ｐｅｎ）＋ＩＰＤ－ＮＨ_２（実施例１６５）の合成が代表的である。

ペプチドは、標準的なＦｍｏｃ化学を用いて合成した。

自動化ＳＰＰＳを、Ｓｙｍｐｈｏｎｙ Ｘペプチド合成機（Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）で行った。ＣｈｅｍＭａｔｒｉｘ Ｒｉｎｋ Ａｍｉｄｅ樹脂を、典型的には、０．１ｍｍｏｌスケールで使用した（０．５ｍｍｏｌ／ｇのローディング）。樹脂を反応容器に入れ、装置上に置いた。合成中に以下のソリューションが作成され使用された：
１） Ｆｍｏｃアミノ酸：０．２Ｍ（８当量）
２） 活性化剤１：ＤＭＦ中の０．５Ｍ ＤＩＣ（７．５当量）
３） 活性化剤２：ＤＭＦ中の０．５Ｍ Ｏｘｙｍａ（７，５当量）
４） Ｆｍｏｃ脱保護：ＤＭＦ中の２０％ピペリジン
５） ＤＭＦ２ｍＬ中の無水酢酸（１０当量）
二重カップリングは、典型的には各アミノ酸について行った。高価な非天然ＦｍｏｃまたはＢｏｃアミノ酸、自家合成Ｆｍｏｃアミノ酸、またはＮ－メチル化アミノ酸については、シーケンスを中断し、このアミノ酸を手動でカップリングした（二重カップリングであるが、典型的にはより少ない試薬（３～５当量））。このカップリングが完了した後、合成を典型的にはシンセサイザー上で続けた。Ｎ－メチルアミノ酸がシーケンスに付加された場合、典型的には、次のアミノ酸も同様に手動でカップリングされた。全ての工程は、窒素下、室温で行った。Ｆｍｏｃ－ＰｅｎおよびＦｍｏｃ－Ｏｉｃは、典型的には自動ＳＰＰＳを用いて結合させた。Ｆｍｏｃ（Ｎ－Ｍｅ）Ｇは、典型的には手動でカップリングされた。Ａｈｘは常に手動でカップリングされた。

樹脂を膨潤させ、ＤＭＦ（３×３ｍＬ、１０分間）で洗浄した。樹脂がＦｍｏｃを含有する場合、Ｆｍｏｃを２０％ピペリジン溶液（２×３ｍＬ、１０分）で除去した。樹脂をＤＭＦ（６×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。

カップリング：
Ｆｍｏｃ－Ａｓｐ（ｔ－Ｂｕ）（４．０ｍＬ）を添加した。活性化剤１溶液（ＤＩＣ、１．５ｍＬ）および活性化剤２溶液（Ｏｘｙｍａ、１．５ｍＬ）を添加し、カップリングを２時間窒素バブリングしながら進行させた。溶液を排出し、ＤＭＦ（１×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。カップリング工程を繰り返した。Ｆｍｏｃ－Ａｓｐ（Ｏｔ－Ｂｕ）（４．０ｍＬ）を添加した。活性化剤１溶液（ＤＩＣ、１．５ｍＬ）および活性化剤２溶液（Ｏｘｙｍａ、１．５ｍＬ）を添加し、カップリングを２時間窒素バブリングしながら進行させた。溶液を排出し、ＤＭＦ（６×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。

Ｆｍｏｃ切断：
２０％ピペリジン溶液（２×３ｍＬ、１０分）を添加することによって、Ｆｍｏｃ保護基を除去した。樹脂をＤＭＦ（６×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。

カップリング：
Ｆｍｏｃ－Ｐｒｏ（４．０ｍＬ）を添加した。活性化剤１溶液（ＤＩＣ、１．５ｍＬ）および活性化剤２溶液（Ｏｘｙｍａ、１．５ｍＬ）を添加し、カップリングを２時間窒素バブリングしながら進行させた。溶液を排出し、ＤＭＦ（１×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。カップリング工程を繰り返した。Ｆｍｏｃ－Ｐｒｏ（４．０ｍＬ）を添加した。活性化剤１溶液（ＤＩＣ、１．５ｍＬ）および活性化剤２溶液（Ｏｘｙｍａ、１．５ｍＬ）を添加し、カップリングを２時間窒素バブリングしながら進行させた。溶液を排出し、ＤＭＦ（６×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。

Ｆｍｏｃ切断：
２０％ピペリジン溶液（２×３ｍＬ、１０分）を添加することによって、Ｆｍｏｃ保護基を除去した。樹脂をＤＭＦ（６×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。

カップリング：
Ｆｍｏｃ－Ｉｌｅ（４．０ｍＬ）を添加した。活性化剤１溶液（ＤＩＣ、１．５ｍＬ）および活性化剤２溶液（Ｏｘｙｍａ、１．５ｍＬ）を添加し、カップリングを２時間窒素バブリングしながら進行させた。溶液を排出し、ＤＭＦ（１×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。カップリング工程を繰り返した。Ｆｍｏｃ－Ｉｌｅ（４．０ｍＬ）を添加した。活性化剤１溶液（ＤＩＣ、１．５ｍＬ）および活性化剤２溶液（Ｏｘｙｍａ、１．５ｍＬ）を添加し、カップリングを２時間窒素バブリングしながら進行させた。溶液を排出し、ＤＭＦ（６×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。

Ｆｍｏｃ切断：
２０％ピペリジン溶液（２×３ｍＬ、１０分）を添加することによって、Ｆｍｏｃ保護基を除去した。樹脂をＤＭＦ（６×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。

カップリング：
Ｆｍｏｃ－Ｐｅｎ（Ｔｒｔ）（４．０ｍＬ）を添加した。活性化剤１溶液（ＤＩＣ、１．５ｍＬ）および活性化剤２溶液（Ｏｘｙｍａ、１．５ｍＬ）を添加し、カップリングを２時間窒素バブリングしながら進行させた。溶液を排出し、ＤＭＦ（１×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。カップリング工程を繰り返した。Ｆｍｏｃ－Ｐｅｎ（Ｔｒｔ）（４．０ｍＬ）を添加した。活性化剤１溶液（ＤＩＣ、１．５ｍＬ）および活性化剤２溶液（Ｏｘｙｍａ、１．５ｍＬ）を添加し、カップリングを２時間窒素バブリングしながら進行させた。溶液を排出し、ＤＭＦ（６×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。

Ｆｍｏｃ切断：
２０％ピペリジン溶液（２×３ｍＬ、１０分）を添加することによって、Ｆｍｏｃ保護基を除去した。樹脂をＤＭＦ（６×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。

カップリング：
Ｆｍｏｃ－Ｉｌｅ（４．０ｍＬ）を添加した。活性化剤１溶液（ＤＩＣ、１．５ｍＬ）および活性化剤２溶液（Ｏｘｙｍａ、１．５ｍＬ）を添加し、カップリングを２時間窒素バブリングしながら進行させた。溶液を排出し、ＤＭＦ（１×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。カップリング工程を繰り返した。Ｆｍｏｃ－Ｉｌｅ（４．０ｍＬ）を添加した。活性化剤１溶液（ＤＩＣ、１．５ｍＬ）および活性化剤２溶液（Ｏｘｙｍａ、１．５ｍＬ）を添加し、カップリングを２時間窒素バブリングしながら進行させた。溶液を排出し、ＤＭＦ（６×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。

Ｆｍｏｃ切断：
２０％ピペリジン溶液（２×３ｍＬ、１０分）を添加することによって、Ｆｍｏｃ保護基を除去した。樹脂をＤＭＦ（６×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。

カップリング：
Ｆｍｏｃ－Ｏｉｃ（４．０ｍＬ）を添加した。活性化剤１溶液（ＤＩＣ、１．５ｍＬ）および活性化剤２溶液（Ｏｘｙｍａ、１．５ｍＬ）を添加し、カップリングを２時間窒素バブリングしながら進行させた。溶液を排出し、ＤＭＦ（１×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。カップリング工程を繰り返した。Ｆｍｏｃ－Ｏｉｃ（４．０ｍＬ）を添加した。活性化剤１溶液（ＤＩＣ、１．５ｍＬ）および活性化剤２溶液（Ｏｘｙｍａ、１．５ｍＬ）を添加し、カップリングを２時間窒素バブリングしながら進行させた。溶液を排出し、ＤＭＦ（６×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。

Ｆｍｏｃ切断：
２０％ピペリジン溶液（２×３ｍＬ、１０分）を添加することによって、Ｆｍｏｃ保護基を除去した。樹脂をＤＭＦ（６×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。

カップリング：
Ｆｍｏｃ－Ｐｒｏ（４．０ｍＬ）を添加した。活性化剤１溶液（ＤＩＣ、１．５ｍＬ）および活性化剤２溶液（Ｏｘｙｍａ、１．５ｍＬ）を添加し、カップリングを２時間窒素バブリングしながら進行させた。溶液を排出し、ＤＭＦ（１×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。カップリング工程を繰り返した。Ｆｍｏｃ－Ｐｒｏ（４．０ｍＬ）を添加した。活性化剤１溶液（ＤＩＣ、１．５ｍＬ）および活性化剤２溶液（Ｏｘｙｍａ、１．５ｍＬ）を添加し、カップリングを２時間窒素バブリングしながら進行させた。溶液を排出し、ＤＭＦ（６×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。

Ｆｍｏｃ切断：
２０％ピペリジン溶液（２×３ｍＬ、１０分）を添加することによって、Ｆｍｏｃ保護基を除去した。樹脂をＤＭＦ（６×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。

カップリング：
Ｆｍｏｃ－Ｌｅｕ（４．０ｍＬ）を添加した。活性化剤１溶液（ＤＩＣ、１．５ｍＬ）および活性化剤２溶液（Ｏｘｙｍａ、１．５ｍＬ）を添加し、カップリングを２時間窒素バブリングしながら進行させた。溶液を排出し、ＤＭＦ（１×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。カップリング工程を繰り返した。Ｆｍｏｃ－Ｌｅｕ（４．０ｍＬ）を添加した。活性化剤１溶液（ＤＩＣ、１．５ｍＬ）および活性化剤２溶液（Ｏｘｙｍａ、１．５ｍＬ）を添加し、カップリングを２時間窒素バブリングしながら進行させた。溶液を排出し、ＤＭＦ（６×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。

Ｆｍｏｃ切断：
２０％ピペリジン溶液（２×３ｍＬ、１０分）を添加することによって、Ｆｍｏｃ保護基を除去した。樹脂をＤＭＦ（６×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。

カップリング：
Ｆｍｏｃ－Ｓｅｒ（ｔ－Ｂｕ）（４．０ｍＬ）を添加した。活性化剤１溶液（ＤＩＣ、１．５ｍＬ）および活性化剤２溶液（Ｏｘｙｍａ、１．５ｍＬ）を添加し、カップリングを２時間窒素バブリングしながら進行させた。溶液を排出し、ＤＭＦ（１×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。カップリング工程を繰り返した。Ｆｍｏｃ－Ｓｅｒ（ｔ－Ｂｕ）（４．０ｍＬ）を添加した。活性化剤１溶液（ＤＩＣ、１．５ｍＬ）および活性化剤２溶液（Ｏｘｙｍａ、１．５ｍＬ）を添加し、カップリングを２時間窒素バブリングしながら進行させた。溶液を排出し、ＤＭＦ（６×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。

Ｆｍｏｃ切断：
２０％ピペリジン溶液（２×３ｍＬ、１０分）を添加することによって、Ｆｍｏｃ保護基を除去した。樹脂をＤＭＦ（６×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。

カップリング：
Ｆｍｏｃ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）（４．０ｍＬ）を添加した。活性化剤１溶液（ＤＩＣ、１．５ｍＬ）および活性化剤２溶液（Ｏｘｙｍａ、１．５ｍＬ）を添加し、カップリングを２時間窒素バブリングしながら進行させた。溶液を排出し、ＤＭＦ（１×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。カップリング工程を繰り返した。Ｆｍｏｃ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）（４．０ｍＬ）を添加した。活性化剤１溶液（ＤＩＣ、１．５ｍＬ）および活性化剤２溶液（Ｏｘｙｍａ、１．５ｍＬ）を添加し、カップリングを２時間窒素バブリングしながら進行させた。溶液を排出し、ＤＭＦ（６×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。

Ｆｍｏｃ切断：
２０％ピペリジン溶液（２×３ｍＬ、１０分）を添加することによって、Ｆｍｏｃ保護基を除去した。樹脂をＤＭＦ（６×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。

カップリング：
Ｆｍｏｃ－Ｓｅｒ（ｔ－Ｂｕ）（４．０ｍＬ）を添加した。活性化剤１溶液（ＤＩＣ、１．５ｍＬ）および活性化剤２溶液（Ｏｘｙｍａ、１．５ｍＬ）を添加し、カップリングを２時間窒素バブリングしながら進行させた。溶液を排出し、ＤＭＦ（１×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。カップリング工程を繰り返した。Ｆｍｏｃ－Ｓｅｒ（ｔ－Ｂｕ）（４．０ｍＬ）を添加した。活性化剤１溶液（ＤＩＣ、１．５ｍＬ）および活性化剤２溶液（Ｏｘｙｍａ、１．５ｍＬ）を添加し、カップリングを２時間窒素バブリングしながら進行させた。溶液を排出し、ＤＭＦ（６×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。

Ｆｍｏｃ切断：
２０％ピペリジン溶液（２×３ｍＬ、１０分）を添加することによって、Ｆｍｏｃ保護基を除去した。樹脂をＤＭＦ（６×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。

カップリング：
Ｆｍｏｃ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）（４．０ｍＬ）を添加した。活性化剤１溶液（ＤＩＣ、１．５ｍＬ）および活性化剤２溶液（Ｏｘｙｍａ、１．５ｍＬ）を添加し、カップリングを２時間窒素バブリングしながら進行させた。溶液を排出し、ＤＭＦ（１×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。カップリング工程を繰り返した。Ｆｍｏｃ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）（４．０ｍＬ）を添加した。活性化剤１溶液（ＤＩＣ、１．５ｍＬ）および活性化剤２溶液（Ｏｘｙｍａ、１．５ｍＬ）を添加し、カップリングを２時間窒素バブリングしながら進行させた。溶液を排出し、ＤＭＦ（６×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。

Ｆｍｏｃ切断：
２０％ピペリジン溶液（２×３ｍＬ、１０分）を添加することによって、Ｆｍｏｃ保護基を除去した。樹脂をＤＭＦ（６×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。

カップリング：
Ｆｍｏｃ－Ｉｌｅ（４．０ｍＬ）を添加した。活性化剤１溶液（ＤＩＣ、１．５ｍＬ）および活性化剤２溶液（Ｏｘｙｍａ、１．５ｍＬ）を添加し、カップリングを２時間窒素バブリングしながら進行させた。溶液を排出し、ＤＭＦ（１×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。カップリング工程を繰り返した。Ｆｍｏｃ－Ｉｌｅ（４．０ｍＬ）を添加した。活性化剤１溶液（ＤＩＣ、１．５ｍＬ）および活性化剤２溶液（Ｏｘｙｍａ、１．５ｍＬ）を添加し、カップリングを２時間窒素バブリングしながら進行させた。溶液を排出し、ＤＭＦ（６×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。

Ｆｍｏｃ切断：
２０％ピペリジン溶液（２×３ｍＬ、１０分）を添加することによって、Ｆｍｏｃ保護基を除去した。樹脂をＤＭＦ（６×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。

自動ＳＰＰＳ中の手動カップリング：
Ｆｍｏｃ－（Ｎ－Ｍｅ）Ｇ（ＤＭＦ中０．２Ｍ、５当量）を樹脂に添加した。活性化剤１溶液（ＤＩＣ、１．５ｍＬ）および活性化剤２溶液（Ｏｘｙｍａ、１．５ｍＬ）を添加し、カップリングを２時間振盪しながら進行させた（Ｔｈｅｒｍｏｍｉｘｅｒ、ｒｔ）。溶液を濾過し、ＤＭＦ（１×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。カップリング工程を繰り返した。Ｆｍｏｃ－（Ｎ－Ｍｅ）Ｇ（ＤＭＦ中０．２Ｍ、５当量）を添加した。活性化剤１溶液（ＤＩＣ、１．５ｍＬ）および活性化剤２溶液（Ｏｘｙｍａ、１．５ｍＬ）を添加し、カップリングを２時間振盪しながら進行させた（Ｔｈｅｒｍｏｍｉｘｅｒ、ｒｔ）。溶液を濾過し、ＤＭＦ（６×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。

Ｆｍｏｃ切断：
２０％ピペリジン溶液（２×３ｍＬ、１０分）を添加することによって、Ｆｍｏｃ保護基を除去した。樹脂をＤＭＦ（６×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。

追加のアミノ酸が配列中に存在する場合、それらを上記の工程を用いてカップリングした。

試験切断：
手動カップリングを行った場合、典型的には、反応をモニターするために試験切断を行った。試験切断カクテルは、ＴＦＡ／ＥＤＴ／チオアニソール（９０：３：７）；室温および７５０ｒｐｍで、Ｔｈｅｒｍｏｍｉｘｅｒ上で１．５時間振盪した。分析は、上記の方法の１つを用いてＬＣ－ＭＳによって行った。

完全切断：
ペプチドを含有する樹脂をシリンジに入れ、３．０ｍＬの切断緩衝液ＴＦＡ／ＥＤＴ／チオアニソール（９０：３：７）を樹脂に添加した。混合物を室温で２．５時間振盪した。該溶液を濾取し、冷ジエチルエーテル（－２０^ｏＣ）を添加することにより該ペプチドを沈殿させた。この溶液を、窒素雰囲気下、Ｆａｌｃｏｎチューブ（６０ｍＬ）中で遠心分離（３０００ｒｐｍ）した。エーテルをデカントし、固体残渣を冷ジエチルエーテル（５×１０ｍＬ）で繰り返し洗浄した。次いで、固体残渣を乾燥させた。

ジスルフィド環化：
粗ペプチドを０．１Ｍ重炭酸アンモニウム（ｐＨ７．８～８．２）に１ｍｇ／２ｍＬの濃度で溶解した。溶液をオービタルシェーカー上で一晩、丸底フラスコ中で大気に開放して振盪させた。次いで、溶液を凍結乾燥して、白色粉末を得た。

ＨＰＬＣ精製のためのカラムスクリーニング：
ペプチドを５％ＣＨ_３ＣＮおよび９５％水中に溶解した。カラムスクリーニングを各ペプチドについて行い、精製にどの分取ＨＰＬＣ方法を使用するかを決定した。以下の分析カラムをスクリーニングした。

カラムスクリーニングには２つの方法がある：
１） ５－６０％ＡＣＮ＿８分＿１ｍＬ／分＿２５°Ｃ
２） ３０－８５％ＡＣＮ＿８分＿１ｍＬ／分＿２５°Ｃ
使用可能なカラム（５０ｍｍｘＩＤ４，６ｍｍ）（分取（Ｐｒｅｐ）カラムとしても使用可能）：
１） Ａｅｒｉｓ Ｃ１８（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ）
２） Ｘ－Ｂｒｉｄｇｅ Ｃ１８（Ｗａｔｅｒｓ）
３） Ｋｉｎｅｔｅｘ Ｃ１８（Ｃｏｒｅｓｈｅｌｌ Ｍａｔｅｒｉａｌ）（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ）
４） ＹＭＣ Ｔｒｉａｒｔ Ｃ１８（１００％水での溶出が可能）
５） Ｋｉｎｅｔｉｘ Ｂｉｐｈｅｎｙｌ（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ）
６） Ｘ－Ｓｅｌｅｃｔ Ｃ１８（正電荷）
７） Ｊｕｐｉｔｅｒ Ｐｒｏｔｅｏ Ｃ１８（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ）
８） Ｌｕｎａ Ｃ１８（フェノメネックス）
本発明のペプチドについては、以下の５つの分取カラムのうちの１つを使用した：
１） カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ、Ａｅｒｉｓ Ｐｅｐｔｉｄｅ ５μ ＸＢ－Ｃ１８、ＡＸＩＡ Ｐａｃｋｅｄ、２１，２ｘ２５０ｍｍ＋Ｃａｒｔｒｉｄｇｅ ５μ
２） カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ、Ｋｉｎｅｔｅｘ Ｃ１８ ５μ ２１，５ｘ２５０ｍｍ＋カートリッジ ５μ
３） カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ、Ｋｉｎｅｔｅｘ ５μ Ｂｉｐｈｅｎｙｌ １００Ａ、ＡＸＩＡ Ｐａｃｋｅｄ、２１，２ｘ２５０ｍｍ＋カートリッジ ５μ
４） カラム：ＹＭＣ Ａｃｔｕｓ Ｔｒｉａｒｔ Ｐｒｅｐ．Ｃ１８ １２ｎｍ、Ｓ－１０μｍ ２５０ｘ２０ｍｍ＋カートリッジ ３μｍ（１０ｘ４ｍｍ）
５） カラム：Ｗａｔｅｒｓ、Ｘｂｒｉｄｇｅ Ｐｒｅｐ．Ｃ１８．５μ ＯＢＤ １９ｘ２５０ｍｍ＋カートリッジ １０μ
カラムを選択したら、以下の方法の１つを使用した：
１） 方法：グラディエント５～６０％ＡＣＮ（水中の）（０．１０％ＴＦＡ）
２） 方法：グラディエント３０～８５％ＡＣＮ（水中の）（０．１０％ＴＦＡ）
３） カラムスクリーニングの結果に基づく集束グラディエント。

流量２０ｍＬ／分
合わせた画分を、ＨＰＬＣ（５～９５ ｉｎ ８ｉｎ、Ｃｈｒｏｍｏｌｉｔｈ ＳｐｅｅｄＲＯＤ ＆ ＹＭＣ Ｃ１８ ５～９５ ｉｎ １８ｍｉｎ）および上記のＬＣ－ＭＳ方法の１つを用いて分析した。

実施例１６５では、粗ペプチドをＣＨ_３ＣＮ／水（１：１）に溶解し、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ ＫｉｎｅｔｅｘカラムＣ１８ ５μ、２１．５×２５０ｍｍ＋５μカートリッジ、流量：２０ｍＬ／分、方法：水中５～６０％ＡＣＮ（それぞれ０．１０％ＴＦＡを含む）で４８分間に亘って精製した。合わせた画分を凍結乾燥して、３９ｍｇの実施例１６５（純度９５％）を得た。

表６：使用した材料及び条件の注記

Ｍａｓｐペプチドの自動ＳＰＰＳの一般的方法（方法Ｂ）
（（Ｎ－Ｍｅ）Ｇ）－ＩＣ＋ＳＲＳＬＰ－（Ｏｉｃ）－Ｉ－（Ｐｅｎ）＋Ｉ－（（５－アザスピロ［２．４］ヘプタン－１－カルボン酸）－ＯＨ（実施例１６４）の合成が代表的である。

ペプチドは、標準的なＦｍｏｃ化学を用いて合成した。

可能であれば、第１のアミノ酸（例えば、Ｆｍｏｃ－Ａｓｐ（ｔ－Ｂｕ）－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ｐｒｏ－ＯＨなどをプレロードした）をプレロードしたＷａｎｇ樹脂を、０．５５～０．７ｍｍｏｌ／ｇの典型的なローディングで使用した。最初のアミノ酸が利用できなかった場合、それを手動で添加した。

最初のアミノ酸がプレロード樹脂として利用できない場合、それを手動で添加し、クロロトリチル樹脂を合成に使用した。

２－クロロトリチル樹脂への最初のアミノ酸のローディング：
２－クロルトリチル樹脂（５００ｍｇ、０．７７５ｍｍｏｌ）を、５０ｍＬのＦａｌｃｏｎチューブ中の１０ｍＬのＤＣＭで１５分間膨潤させ、５－［（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシ）カルボニル］－５－アザスピロ［２．４］ヘプタン－１－カルボン酸（２８１ｍｇ、０．７７５ｍｍｏｌ）を、ＤＩＥＡ（６当量、０．８１ｍＬ）を添加したＤＣＭに溶解し、溶液を樹脂に添加した。溶液をアルゴンでパージし、室温で一晩振盪した。混合物を濾過し、ＤＭＦ（３×５ｍＬ）およびＤＣＭ（３×５ｍＬ）で洗浄した。メタノール（５ｍＬ）を加え、混合物を３０分間振盪し、次いで濾過した。樹脂をＤＭＦ（３×５ｍＬ）およびＤＣＭ（３×５ｍＬ）で洗浄した。メタノール（５ｍＬ）を再び添加し、混合物を３０分間振盪し、次いで濾過した。樹脂をＤＭＦ（３×５ｍＬ）およびＤＣＭ（３×５ｍＬ）で洗浄した。ローディングは、以下に記載されるローディング手順の決定に基づいて、０．４２ｍｍｏｌ／ｇであると決定された。

次いで、この樹脂を、Ｐｒｏｔｅｉｎ ＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓからのＳｙｍｐｈｏｎｙ Ｘ ｓｙｎｔｈｅｓｉｚｅｒ上で、０．１ｍｍｏｌスケールで自動ＳＰＰＳのために使用した。

樹脂ローディングの決定：
樹脂のローディングを決定するために、ＦＭＯＣ保護基は規定量の樹脂から切断され、その後、上澄み切断液中の得られたフルオレニル化合物の濃度は、３０１ｎｍでの測光により測定される。これは、樹脂上にロードされたアミノ酸の量と直接相関する。

１） １～３ｍｇの樹脂を、２ｍＬのエッペンドルフチューブまたは類似物中に秤量する（正確な量に注意）。

２） ＤＭＦ中の２０％ピペリジンの溶液１０００μＬを添加する。

３） 混合物を３０分間撹拌して、ＦＭＯＣ基を切断する。

４） 次いで、１００μＬの上清溶液を石英ガラスキュベットに移し、９００μＬの２０％ピペリジン／ＤＭＦで希釈する
５） １０００μｌのピペリジン／ ＤＭＦのブランク試料を第２のキュベットで調製する。

６） 参照サンプルからブランク値を決定した後、λ＝３０１ｎｍでの試験サンプルの吸光度をＵＶ－Ｖｉｓ光度計（Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｅｖｏｌｕｔｉｏｎ ２０１）で測定する。

７） より高い精度のために、複数の試験サンプル（典型的には２つ）を形成することができ、次いで、測定された吸光度の算術平均が計算のために使用される。

樹脂ローディングの計算：
ｍｍｏｌ／ｇ単位の樹脂ローディングＬ_３０１は、次式で計算される：

数式１

Ｅ＝吸光度
ε＝波長３０１ｎｍにおける吸光係数（７８００Ｌ／ｍｏｌ^＊ｃｍ）
ｍ＝樹脂使用量（ｇ）
Ｖ＝試料量（Ｌ）
Ｄ＝キュベットの層厚（ｃｍ）
ＶＦ＝希釈係数（＝１０）
Ｆｍｏｃ切断：
２０％ピペリジン溶液（２×３ｍＬ、１０分）を添加することによって、Ｆｍｏｃ保護基を除去した。樹脂をＤＭＦ（６×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。

後続のＦｍｏｃアミノ酸のカップリングは、方法Ａに記載されるように進行した。

以下の溶液を調製し、合成中に使用した：
１） Ｆｍｏｃアミノ酸：０．２Ｍ（８当量）
２） 活性化剤１：ＤＭＦ中の０．５Ｍ ＤＩＣ（７．５当量）
３） 活性化剤２：ＤＭＦ中の０．５Ｍ Ｏｘｙｍａ（７，５当量）
４） Ｆｍｏｃ脱保護：ＤＭＦ中２０％ピペリジン
５） ＤＭＦ２ｍＬ中の無水酢酸（１０当量）
二重カップリングは、典型的には各アミノ酸について行った。高価な非天然ＦｍｏｃもしくはＢｏｃアミノ酸、自家合成Ｆｍｏｃアミノ酸、またはＮ－メチル化アミノ酸については、シーケンスを中断し、このアミノ酸を手動でカップリングした（二重カップリングであるが、典型的にはより少ない試薬（３～５当量））。このカップリングが完了した後、合成を典型的にはシンセサイザー上で続けた。Ｎ－メチルアミノ酸がシーケンスに付加された場合、典型的には、次のアミノ酸も同様に手動でカップリングされた。全ての工程は、窒素下、室温で行った。Ｆｍｏｃ－ＰｅｎおよびＦｍｏｃ－Ｏｉｃは、典型的には自動ＳＰＰＳを用いて結合させた。Ｆｍｏｃ（Ｎ－Ｍｅ）Ｇは、典型的には手動でカップリングされた。Ａｈｘは常に手動でカップリングした。

Ｆｍｏｃ切断：
樹脂を膨潤させ、ＤＭＦ（３×３ｍＬ、１０分）で洗浄した。樹脂がＦｍｏｃを含有する場合、Ｆｍｏｃを２０％ピペリジン溶液（２×３ｍＬ、１０分）で除去した。樹脂をＤＭＦ（６×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。

カップリング：
Ｆｍｏｃ－Ｉｌｅ（４．０ｍＬ）を添加した。活性化剤１溶液（ＤＩＣ、１．５ｍＬ）および活性化剤２溶液（Ｏｘｙｍａ、１．５ｍＬ）を添加し、カップリングを２時間窒素バブリングしながら進行させた。溶液を排出し、ＤＭＦ（１×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。カップリング工程を繰り返した。Ｆｍｏｃ－Ｉｌｅ（４．０ｍＬ）を添加した。活性化剤１溶液（ＤＩＣ、１．５ｍＬ）および活性化剤２溶液（Ｏｘｙｍａ、１．５ｍＬ）を添加し、カップリングを２時間窒素バブリングしながら進行させた。溶液を排出し、ＤＭＦ（６×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。

Ｆｍｏｃ切断：
２０％ピペリジン溶液（２×３ｍＬ、１０分）を添加することによって、Ｆｍｏｃ保護基を除去した。樹脂をＤＭＦ（６×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。

カップリング：
Ｆｍｏｃ－Ｐｅｎ（Ｔｒｔ）（４．０ｍＬ）を添加した。活性化剤１溶液（ＤＩＣ、１．５ｍＬ）および活性化剤２溶液（Ｏｘｙｍａ、１．５ｍＬ）を添加し、カップリングを２時間窒素バブリングしながら進行させた。溶液を排出し、ＤＭＦ（１×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。カップリング工程を繰り返した。Ｆｍｏｃ－Ｐｅｎ（Ｔｒｔ）（４．０ｍＬ）を添加した。活性化剤１溶液（ＤＩＣ、１．５ｍＬ）および活性化剤２溶液（Ｏｘｙｍａ、１．５ｍＬ）を添加し、カップリングを２時間窒素バブリングしながら進行させた。溶液を排出し、ＤＭＦ（６×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。

Ｆｍｏｃ切断：
２０％ピペリジン溶液（２×３ｍＬ、１０分）を添加することによって、Ｆｍｏｃ保護基を除去した。樹脂をＤＭＦ（６×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。

カップリング：
Ｆｍｏｃ－Ｉｌｅ（４．０ｍＬ）を添加した。活性化剤１溶液（ＤＩＣ、１．５ｍＬ）および活性化剤２溶液（Ｏｘｙｍａ、１．５ｍＬ）を添加し、カップリングを２時間窒素バブリングしながら進行させた。溶液を排出し、ＤＭＦ（１×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。カップリング工程を繰り返した。Ｆｍｏｃ－Ｉｌｅ（４．０ｍＬ）を添加した。活性化剤１溶液（ＤＩＣ、１．５ｍＬ）および活性化剤２溶液（Ｏｘｙｍａ、１．５ｍＬ）を添加し、カップリングを２時間窒素バブリングしながら進行させた。溶液を排出し、ＤＭＦ（６×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。

Ｆｍｏｃ切断：
２０％ピペリジン溶液（２×３ｍＬ、１０分）を添加することによって、Ｆｍｏｃ保護基を除去した。樹脂をＤＭＦ（６×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。

カップリング：
Ｆｍｏｃ－Ｏｉｃ（４．０ｍＬ）を添加した。活性化剤１溶液（ＤＩＣ、１．５ｍＬ）および活性化剤２溶液（Ｏｘｙｍａ、１．５ｍＬ）を添加し、カップリングを２時間窒素バブリングしながら進行させた。溶液を排出し、ＤＭＦ（１×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。カップリング工程を繰り返した。Ｆｍｏｃ－Ｏｉｃ（４．０ｍＬ）を添加した。活性化剤１溶液（ＤＩＣ、１．５ｍＬ）および活性化剤２溶液（Ｏｘｙｍａ、１．５ｍＬ）を添加し、カップリングを２時間窒素バブリングしながら進行させた。溶液を排出し、ＤＭＦ（６×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。

Ｆｍｏｃ切断：
２０％ピペリジン溶液（２×３ｍＬ、１０分）を添加することによって、Ｆｍｏｃ保護基を除去した。樹脂をＤＭＦ（６×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。

カップリング：
Ｆｍｏｃ－Ｐｒｏ（４．０ｍＬ）を添加した。活性化剤１溶液（ＤＩＣ、１．５ｍＬ）および活性化剤２溶液（Ｏｘｙｍａ、１．５ｍＬ）を添加し、カップリングを２時間窒素バブリングしながら進行させた。溶液を排出し、ＤＭＦ（１×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。カップリング工程を繰り返した。Ｆｍｏｃ－Ｐｒｏ（４．０ｍＬ）を添加した。活性化剤１溶液（ＤＩＣ、１．５ｍＬ）および活性化剤２溶液（Ｏｘｙｍａ、１．５ｍＬ）を添加し、カップリングを２時間窒素バブリングしながら進行させた。溶液を排出し、ＤＭＦ（６×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。

Ｆｍｏｃ切断：
２０％ピペリジン溶液（２×３ｍＬ、１０分）を添加することによって、Ｆｍｏｃ保護基を除去した。樹脂をＤＭＦ（６×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。

カップリング：
Ｆｍｏｃ－Ｌｅｕ（４．０ｍＬ）を添加した。活性化剤１溶液（ＤＩＣ、１．５ｍＬ）および活性化剤２溶液（Ｏｘｙｍａ、１．５ｍＬ）を添加し、カップリングを２時間窒素バブリングしながら進行させた。溶液を排出し、ＤＭＦ（１×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。カップリング工程を繰り返した。Ｆｍｏｃ－Ｌｅｕ（４．０ｍＬ）を添加した。活性化剤１溶液（ＤＩＣ、１．５ｍＬ）および活性化剤２溶液（Ｏｘｙｍａ、１．５ｍＬ）を添加し、カップリングを２時間窒素バブリングしながら進行させた。溶液を排出し、ＤＭＦ（６×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。

Ｆｍｏｃ切断：
２０％ピペリジン溶液（２×３ｍＬ、１０分）を添加することによって、Ｆｍｏｃ保護基を除去した。樹脂をＤＭＦ（６×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。

カップリング：
Ｆｍｏｃ－Ｓｅｒ（ｔ－Ｂｕ）（４．０ｍＬ）を添加した。活性化剤１溶液（ＤＩＣ、１．５ｍＬ）および活性化剤２溶液（Ｏｘｙｍａ、１．５ｍＬ）を添加し、カップリングを２時間窒素バブリングしながら進行させた。溶液を排出し、ＤＭＦ（１×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。カップリング工程を繰り返した。Ｆｍｏｃ－Ｓｅｒ（ｔ－Ｂｕ）（４．０ｍＬ）を添加した。活性化剤１溶液（ＤＩＣ、１．５ｍＬ）および活性化剤２溶液（Ｏｘｙｍａ、１．５ｍＬ）を添加し、カップリングを２時間窒素バブリングしながら進行させた。溶液を排出し、ＤＭＦ（６×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。

Ｆｍｏｃ切断：
２０％ピペリジン溶液（２×３ｍＬ、１０分）を添加することによって、Ｆｍｏｃ保護基を除去した。樹脂をＤＭＦ（６×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。

カップリング：
Ｆｍｏｃ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）（４．０ｍＬ）を添加した。活性化剤１溶液（ＤＩＣ、１．５ｍＬ）および活性化剤２溶液（Ｏｘｙｍａ、１．５ｍＬ）を添加し、カップリングを２時間窒素バブリングしながら進行させた。溶液を排出し、ＤＭＦ（１×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。カップリング工程を繰り返した。Ｆｍｏｃ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）（４．０ｍＬ）を添加した。活性化剤１溶液（ＤＩＣ、１．５ｍＬ）および活性化剤２溶液（Ｏｘｙｍａ、１．５ｍＬ）を添加し、カップリングを２時間窒素バブリングしながら進行させた。溶液を排出し、ＤＭＦ（６×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。

Ｆｍｏｃ切断：
２０％ピペリジン溶液（２×３ｍＬ、１０分）を添加することによって、Ｆｍｏｃ保護基を除去した。樹脂をＤＭＦ（６×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。

カップリング：
Ｆｍｏｃ－Ｓｅｒ（ｔ－Ｂｕ）（４．０ｍＬ）を添加した。活性化剤１溶液（ＤＩＣ、１．５ｍＬ）および活性化剤２溶液（Ｏｘｙｍａ、１．５ｍＬ）を添加し、カップリングを２時間窒素バブリングしながら進行させた。溶液を排出し、ＤＭＦ（１×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。カップリング工程を繰り返した。Ｆｍｏｃ－Ｓｅｒ（ｔ－Ｂｕ）（４．０ｍＬ）を添加した。活性化剤１溶液（ＤＩＣ、１．５ｍＬ）および活性化剤２溶液（Ｏｘｙｍａ、１．５ｍＬ）を添加し、カップリングを２時間窒素バブリングしながら進行させた。溶液を排出し、ＤＭＦ（６×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。

Ｆｍｏｃ切断：
２０％ピペリジン溶液（２×３ｍＬ、１０分）を添加することによって、Ｆｍｏｃ保護基を除去した。樹脂をＤＭＦ（６×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。

カップリング：
Ｆｍｏｃ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）（４．０ｍＬ）を添加した。活性化剤１溶液（ＤＩＣ、１．５ｍＬ）および活性化剤２溶液（Ｏｘｙｍａ、１．５ｍＬ）を添加し、カップリングを２時間窒素バブリングしながら進行させた。溶液を排出し、ＤＭＦ（１×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。カップリング工程を繰り返した。Ｆｍｏｃ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）（４．０ｍＬ）を添加した。活性化剤１溶液（ＤＩＣ、１．５ｍＬ）および活性化剤２溶液（Ｏｘｙｍａ、１．５ｍＬ）を添加し、カップリングを２時間窒素バブリングしながら進行させた。溶液を排出し、ＤＭＦ（６×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。

Ｆｍｏｃ切断：
２０％ピペリジン溶液（２×３ｍＬ、１０分）を添加することによって、Ｆｍｏｃ保護基を除去した。樹脂をＤＭＦ（６×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。

カップリング：
Ｆｍｏｃ－Ｉｌｅ（４．０ｍＬ）を添加した。活性化剤１溶液（ＤＩＣ、１．５ｍＬ）および活性化剤２溶液（Ｏｘｙｍａ、１．５ｍＬ）を添加し、カップリングを２時間窒素バブリングしながら進行させた。溶液を排出し、ＤＭＦ（１×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。カップリング工程を繰り返した。Ｆｍｏｃ－Ｉｌｅ（４．０ｍＬ）を添加した。活性化剤１溶液（ＤＩＣ、１．５ｍＬ）および活性化剤２溶液（Ｏｘｙｍａ、１．５ｍＬ）を添加し、カップリングを２時間窒素バブリングしながら進行させた。溶液を排出し、ＤＭＦ（６×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。

Ｆｍｏｃ切断：
２０％ピペリジン溶液（２×３ｍＬ、１０分）を添加することによって、Ｆｍｏｃ保護基を除去した。樹脂をＤＭＦ（６×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。

自動ＳＰＰＳ中の手動カップリング：
Ｆｍｏｃ－（Ｎ－Ｍｅ）Ｇ（ＤＭＦ中０．２Ｍ、５当量）を樹脂に添加した。活性化剤１溶液（ＤＩＣ、１．５ｍＬ）および活性化剤２溶液（Ｏｘｙｍａ、１．５ｍＬ）を添加し、カップリングを２時間振盪しながら進行させた（Ｔｈｅｒｍｏｍｉｘｅｒ、ｒｔ）。溶液を濾過し、ＤＭＦ（１×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。カップリング工程を繰り返した。Ｆｍｏｃ－（Ｎ－Ｍｅ）Ｇ（ＤＭＦ中０．２Ｍ、５当量）を添加した。活性化剤１溶液（ＤＩＣ、１．５ｍＬ）および活性化剤２溶液（Ｏｘｙｍａ、１．５ｍＬ）を添加し、カップリングを２時間振盪しながら進行させた（Ｔｈｅｒｍｏｍｉｘｅｒ、ｒｔ）。溶液を濾過し、ＤＭＦ（６×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。

Ｆｍｏｃ切断：
２０％ピペリジン溶液（２×３ｍＬ、１０分）を添加することによって、Ｆｍｏｃ保護基を除去した。樹脂をＤＭＦ（６×３ｍＬ、３０秒）で洗浄した。

追加のアミノ酸が配列中に存在する場合、それらを上記の工程を用いてカップリングした。

試験切断：
手動カップリングを行った場合、典型的には、反応をモニターするために試験切断を行った。試験切断カクテルは、ＴＦＡ／ＥＤＴ／チオアニソール（９０：３：７）；室温および７５０ｒｐｍでＴｈｅｒｍｏｍｉｘｅｒ上で１．５時間振盪した。分析は、上記の方法の１つを用いてＬＣ－ＭＳによって行った。

完全切断：
ペプチドを含有する樹脂をシリンジに入れ、３．０ｍＬの切断緩衝液ＴＦＡ／ＥＤＴ／チオアニソール（９０：３：７）を樹脂に添加した。混合物を室温で２．５時間振盪した。該溶液を濾取し、冷ジエチルエーテル（－２０^ｏＣ）を添加することにより該ペプチドを沈殿させた。この溶液を、窒素雰囲気下、Ｆａｌｃｏｎチューブ（６０ｍＬ）中で遠心分離（３０００ｒｐｍ）した。エーテルをデカントし、固体残渣を冷ジエチルエーテル（５×１０ｍＬ）で繰り返し洗浄した。次いで、固体残渣を乾燥させた。

ジスルフィド環化：
粗ペプチドを０．１Ｍ重炭酸アンモニウム（ｐＨ７．８～８．２）に１ｍｇ／２ｍＬの濃度で溶解した。溶液をオービタルシェーカー上で一晩、丸底フラスコ中で大気に開放して振盪させた。次いで、溶液を凍結乾燥して、白色粉末を得た。

ＨＰＬＣ精製のためのカラムスクリーニング：
ペプチドを５％ＣＨ_３ＣＮおよび９５％水中に溶解した。カラムスクリーニングを各ペプチドについて行い、精製にどの分取ＨＰＬＣ方法を使用するかを決定した。以下の分析カラムをスクリーニングした。

カラムスクリーニングには２つの方法がある：
１） ５～６０％ＡＣＮ＿８分＿１ ｍＬ／分＿２５°Ｃ
２） ３０－８５％ ＡＣＮ＿８分＿１ ｍＬ／分＿２５°Ｃ
使用可能なカラム（５０ｍｍｘＩＤ ４，６ｍｍ）（分取（Ｐｒｅｐ）カラムとしても使用可能）：
１） Ａｅｒｉｓ Ｃ１８（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ）
２） Ｘ－Ｂｒｉｄｇｅ Ｃ１８（Ｗａｔｅｒｓ）
３） Ｋｉｎｅｔｅｘ Ｃ１８（Ｃｏｒｅｓｈｅｌｌ Ｍａｔｅｒｉａｌ）（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ）
４） ＹＭＣ Ｔｒｉａｒｔ Ｃ１８（１００％水での溶出が可能）
５） Ｋｉｎｅｔｉｘ Ｂｉｐｈｅｎｙｌ（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ）
６） Ｘ－Ｓｅｌｅｃｔ Ｃ１８（正電荷）
７） Ｊｕｐｉｔｅｒ Ｐｒｏｔｅｏ Ｃ１８（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ）
８） Ｌｕｎａ Ｃ１８（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ）
本発明のペプチドについては、以下の５つの分取カラムのうちの１つを使用した：
１） カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ、Ａｅｒｉｓ Ｐｅｐｔｉｄｅ ５μ ＸＢ－Ｃ１８、ＡＸＩＡ Ｐａｃｋｅｄ、２１，２ｘ２５０ｍｍ＋Ｃａｒｔｒｉｄｇｅ５μ
２） カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ、Ｋｉｎｅｔｅｘ Ｃ１８ ５μ ２１，５ｘ２５０ｍｍ＋カートリッジ５μ
３） カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ、Ｋｉｎｅｔｅｘ ５μ Ｂｉｐｈｅｎｙｌ １００Ａ、ＡＸＩＡ Ｐａｃｋｅｄ、２１，２ｘ２５０ｍｍ＋カートリッジ５μ
４） カラム：ＹＭＣ Ａｃｔｕｓ Ｔｒｉａｒｔ Ｐｒｅｐ．Ｃ１８ １２ｎｍ、Ｓ－１０μｍ ２５０ｘ２０ｍｍ＋カートリッジ３μｍ（１０ｘ４ｍｍ）
５） カラム：Ｗａｔｅｒｓ、Ｘｂｒｉｄｇｅ Ｐｒｅｐ．Ｃ１８ ５μ ＯＢＤ １９ｘ２５０ｍｍ＋カートリッジ１０μ
カラムを選択したら、以下の方法の１つを使用した：
１） 方法：グラディエント５～６０％ＡＣＮ（水中で）（０．１０％ＴＦＡ）
２） 方法：グラディエント３０～８５％ＡＣＮ（水中で）（０．１０％ＴＦＡ）
３） カラムスクリーニングの結果に基づく集束グラディエント。

流量２０ｍＬ／分
合わせた画分を、高速液体クロマトグラフィー（５－９５ ｉｎ ８ｉｎ， Ｃｈｒｏｍｏｌｉｔｈ ＳｐｅｅｄＲＯＤ ＆ ＹＭＣ Ｃ１８ ５－９５ ｉｎ １８ ｍｉｎ）によって、および上記に記載されるＬＣ－ＭＳ方法の１つを使用して分析した。

実施例１６４について、粗ペプチドをＣＨ_３ＣＮ／水（１：１）に溶解し、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ ＫｉｎｅｔｅｘカラムＣ１８ ５μ、２１．５×２５０ｍｍ＋５μカートリッジ、流量：２０ｍＬ／分、水中５～６０％ＡＣＮ（それぞれ０．１０％ＴＦＡを含む）で４８分間に亘って精製した。合わせた画分を凍結乾燥して、２９．８ｍｇの実施例１６４（純度９８．３％）を得た。

表７：使用した材料及び条件の注記

Ｍａｓｐペプチドの手動ＳＰＰＳの一般的方法（方法Ｃ）
配列ＡＩＣ＋ＳＲＳＬＰ－（Ｏｉｃ）－Ｉ－（Ｐｅｎ）＋ＩＰＮ－ＯＨ（実施例４１８）の合成が代表的である。

ペプチド合成：
ペプチドは、標準的なＦｍｏｃ化学を用いて合成した。

１） 樹脂調製：クロロトリチル樹脂（ＣＴＣ樹脂）（０．３ｍｍｏｌ、０．３ｇ、１．０ｍｍｏｌ／ｇ）に、ＤＣＭ（６．０ｍＬ）中のＦｍｏｃ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－ＯＨ（０．３ｍｍｏｌ、０．１８ｇ、１．０当量）およびＤＩＥＡ（０．２１ｍＬ、１．２ｍｍｏｌ、４．０当量）を添加した。混合物をＮ_２により２０℃で２時間撹拌した後、ＭｅＯＨ（０．３ｍｌ）を加え、さらにＮ_２により３０分間撹拌した。樹脂をＤＭＦ（６．０ｍＬ×３）で洗浄した。次いで、ＤＭＦ（６．０ｍｌ）中の２０％ピペリジンを加え、Ｎ_２により２０℃で２０分間撹拌した。次に、混合物を濾過して樹脂を得た。樹脂をＤＭＦ（６．０ｍＬ×３）で洗浄し、濾過して樹脂を得た。

２） カップリング：ＤＭＦ（３．０ｍＬ）中のＦｍｏｃ－Ｐｒｏ－ＯＨ（０．３０ｇ、０．９ｍｍｏｌ、３．０当量）ＨＢＴＵ（０．３２ｇ、０．８５ｍｍｏｌ、２．８５当量）およびＤＩＥＡ（１．８０ｍｍｏｌ、０．３２ｍＬ、６．００当量）をレジンに添加し、Ｎ_２により２０℃で３０分間撹拌した。次に、樹脂をＤＭＦ（６．０ｍＬ×５）で洗浄した。

３） 脱保護：ＤＭＦ中の２０％ピペリジン（６．０ｍｌ）を該樹脂に添加し、該混合物をＮ_２により２０℃で２０分間撹拌した。

４） 他のすべてのアミノ酸について工程２～３を繰り返す：
表８：使用した材料と条件の注記

ＤＭＦ中の２０％ピペリジンを３０分間のＦｍｏｃ脱保護に使用した。カップリング反応をニンヒドリン（Ｐｒｏを除くすべてのアミノ酸）およびクロラニル試験（Ｐｒｏ）によってモニターし、樹脂をＤＭＦ（５．０ｍＬ）で５回洗浄した。

ペプチド切断および精製：
１） 樹脂をＭｅＯＨ（６．０ｍＬ×５）で洗浄し、真空下で乾燥させて、０．６２ｇのペプチド樹脂を得た。次いで、６．０ｍｌの切断緩衝液（９２．５％ＴＦＡ／２．５％ＥＤＴ／２．５％ＴＩＳ／２．５％Ｈ_２Ｏ）を、２０℃で側鎖保護ペプチドレジンを含むフラスコに添加し、混合物を２．５時間撹拌した。

２） ペプチドを冷ｔ－ブチルメチルエーテル（５０ｍＬ）で沈殿させ、遠心分離（３０００ｒｐｍで３分）して、固体粗生成物を得た。粗ペプチド沈殿物をｔｅｒｔ－ブチルメチルエーテルでさらに２回洗浄する（２０．０ｍＬ×３）。粗ペプチドを真空上で２．０時間乾燥させて、０．４ｇの粗ペプチドを得る。

３） 粗生成物（０．４ｇ）をＣＨ_３ＣＮ（１５０ｍＬ）および水（１５０ｍＬ）に溶解した。ヨウ素（Ｉ_２）（ＭｅＯＨ中０．１Ｍ、１．５ｍｌ）を、黄色が持続するまで２０℃で添加した。次に、混合物を２０℃で２分間撹拌した。次いで、チオ硫酸ナトリウム（水中０．１Ｍ、０．０５ｍＬ）を、黄色が消えるまで滴下した。混合物を凍結乾燥して、粗粉末（０．４１ｇ）を得た
４） 粗ペプチドを分取ＨＰＬＣ（条件：Ａ：水中０．０７５％ＴＦＡ Ｂ：ＣＨ_３ＣＮ）によって精製し、凍結乾燥して、白色固形物およびＴＦＡ塩として、所望のペプチド（実施例４１８）（１０８．１ｍｇ、収率２３．０％、方法Ｗ１による純度９７．３％；方法７による純度９７．４％）を得た。精製条件：ペプチドをＴＦＡ／Ｈ_２Ｏ（７：３）に溶解し、流量２０ｍＬ／分、グラディエント１２～４２％、６０分間；保持時間＝４２分、Ｌｕｎａ ２５×２００ｍｍ、Ｃ１８ １０ｕｍ、１１０Åカラムで精製し、次にＧｅｍｉｎｉ １５０×３０ｍｍ、Ｃ１８ ５ｕｍ、１１０Åカラムで再度精製し、所望の純度に達した。

Ｃ末端アミドをこの方法に従って調製した場合、合成は、Ｒｉｎｋ Ａｍｉｄｅ ＭＢＨＡ樹脂（典型的には約０．４～０．６ｍｍｏｌ／ｇのローディング、上記の工程は同じである）を用いて開始した。

Ｍａｓｐペプチドの手動ＳＰＰＳの一般的方法（方法Ｄ）
Ｃ末端アミドを調製した場合、合成はＲｉｎｋ Ａｍｉｄｅ ＭＢＨＡ樹脂（典型的には約０．４～０．６ｍｍｏｌ／ｇのローディング）で開始し、配列ＰＩＣ＋ＳＲＳ－（（ｔＢｕ）Ａ）－ＰＰＩ－（Ｐｅｎ）＋ＩＰＤ－ＮＨ２（実施例９）の合成が代表的である。

Ｃ末端酸を調製した場合、合成は２－クロロトリチル樹脂で開始し、第１のＦｍｏｃアミノ酸を方法Ｃに記載の方法に従って添加した。

ペプチド合成：
ペプチドは、標準的なＦｍｏｃ化学を用いて合成した。

１） 樹脂調製：ＤＭＦ（１０．０ｍｌ）中のＲｉｎｋ Ａｍｉｄｅ ＭＢＨＡ樹脂（０．６６ｇ、０．３０ｍｍｏｌ、ローディング＝０．４５ｍｍｏｌ／ｇ）をＮ_２により２０℃で０．５時間撹拌した。次いで、ＤＭＦ（１０ｍｌ）中の２０％ピペリジンを加え、Ｎ_２により２０℃で２０分間撹拌した。次に、混合物を濾過して樹脂を得た。樹脂をＤＭＦ（１０×５ｍＬ）で洗浄し、濾過して樹脂を得た。

２） カップリング：ＤＭＦ（３．０ｍＬ）中のＦｍｏｃ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－ＯＨ（０．９ｍｍｏｌ、０．３７ｇ、３．０当量） ＨＢＴＵ（０．３２ｇ、０．８５ｍｍｏｌ、２．９５当量）およびＤＩＥＡ（１．８０ｍｍｏｌ、０．３２ｍＬ、６．００当量）をレジンに添加し、Ｎ_２により２０℃で３０分間撹拌した。次に、樹脂をＤＭＦ（１０．０ｍＬ×３）で洗浄した。

３） 脱保護：ＤＭＦ（１０．０ｍｌ）中の２０％ピペリジンを該樹脂に添加し、該混合物をＮ_２により２０℃で２０分間撹拌した。

４） 他のすべてのアミノ酸について、工程２～３を繰り返す。

表９：使用した材料及び条件の注記

ＤＭＦ中の２０％ピペリジンを３０分間のＦｍｏｃ脱保護に使用した。カップリング反応をニンヒドリン（Ｐｒｏを除くすべてのアミノ酸）およびクロラニル試験（Ｐｒｏ）によってモニターし、樹脂をＤＭＦ（５．０ｍＬ）で５回洗浄した。

ペプチド切断および精製：
１） 樹脂をＭｅＯＨ（６．０ｍＬ×５）で洗浄し、真空下で乾燥させて、０．６６ｇのペプチド樹脂を得た。次いで、６．０ｍｌの切断緩衝液（９０％ＴＦＡ／５％ＥＤＴ／２．５％ＴＩＳ／２．５％Ｈ_２Ｏ）を、２０℃で側鎖保護ペプチド樹脂を含むフラスコに添加し、混合物を２．５時間撹拌した。

２） ペプチドを冷ｔ－ブチルメチルエーテル（５０ｍＬ）で沈殿させ、遠心分離（３０００ｒｐｍで３分間）して、固体粗生成物を得た。粗ペプチド沈殿物をｔｅｒｔ－ブチルメチルエーテルでさらに３回洗浄した（２０．０ｍＬ×３）。粗ペプチドを真空上で２．０時間乾燥させて、０．４ｇの粗ペプチドを得る。

３） 粗生成物（０．４ｇ）をＣＨ_３ＣＮ（１５ｍＬ）および水（１５ｍＬ）に溶解して、濃度０．１ｍＭを得た。ＮＨ_４ＨＣＯ_３液（１Ｍ）を追加し、ｐＨ８～９程度に調整した。溶液を室温で約８時間振盪した。反応を高速液体クロマトグラフィーでモニターした。反応が完了した後、反応を酢酸でクエンチして、ｐＨを約６に調整した。次いで、反応混合物を凍結乾燥し、得られた固体を逆相ＨＰＬＣによって精製した。

４） 分取ＨＰＬＣ（条件：Ａ：水中０．０７５％ＴＦＡ Ｂ：ＣＨ_３ＣＮ）により粗ペプチドを精製し、凍結乾燥して、白色固形物およびＴＦＡ塩として所望のペプチド（実施例９）（２０２．４０ｍｇ、収率４１．４．０％、方法Ｗ１により純度９３．７％；方法７により純度９５．１％）を得た。精製条件：ペプチドをＴＦＡ／Ｈ_２Ｏ（７：３）に溶解した；流量２０ｍＬ／分；６０分間にわたるグラディエント１２～４２％；保持時間＝４２分；Ｌｕｎａ ２５×２００ｍｍ、Ｃ１８ １０μｍ、１１０Åカラムで精製した。

Ｍａｓｐペプチドの手動ＳＰＰＳのための別の一般的方法（方法Ｅ）
配列（（２Ｓ）－２［（アミノ）－２－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）］酢酸）－ＩＣ＋ＳＲＳＬＰ－（Ｏｉｃ）－ＩＣ＋Ｉ－ＯＨ（実施例１８４）の合成が代表的である。

ペプチド合成：
ペプチドは、標準的なＦｍｏｃ化学を用いて合成した。

下記の化学構造における暗いボールは、固相ペプチド合成（ＳＰＰＳ）、例えば、２－クロロトリチル樹脂、Ｒｉｎｋ ａｍｉｄｅ樹脂など、のために使用される固相ポリマー支持体を示す。
実施例１Ａ
（２Ｓ）（｛［（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ］カルボニル｝アミノ）（オキサン－４－イル）酢酸（単一の立体異性体）

アセトン／水（１５ｍＬ／１０ｍＬ）中の（２Ｓ）－アミノ（オキサン－４－イル）酢酸（９５０ｍｇ、５．９７ｍｍｏｌ）に、重炭酸ナトリウム（５．０１ｇ、５９．７ｍｍｏｌ）および１－（｛［（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ］カルボニル｝オキシ）ピロリジン－２，５－ジオン（２．１１ｇ、６．２７ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で週末にわたって撹拌した。懸濁液を水で処理し、ＭＢＴＥでさらに２回抽出した。水相を１Ｍ塩酸水溶液で酸性化し、ジクロロメタンでさらに３回抽出した。有機相を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、蒸発させた。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（Ｉｓｏｌｅｒａ；５０ｇ ＳＮＡＰ Ｕｌｔｒａ；グラディエント：シクロヘキサン５０％／酢酸エチル５０％＋１％酢酸～シクロヘキサン２０％／酢酸エチル８０％＋１％酢酸）により精製した。適切な画分を合わせ、蒸発させた。残渣をトルエンに溶解し、さらに２回蒸発させ、次いで残渣を真空下で乾燥させて、１．０８ｇ（純度１００％、収率４７％）の標的化合物を得た。

LC-MS (方法 9): R_t = 0.90 分; MS (ESIpos): m/z = 382 [M+H]^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.150 (0.43), -0.008 (4.33), 0.008 (3.74), 0.146 (0.43), 1.280 (1.03), 1.300 (2.26), 1.309 (2.36), 1.331 (2.75), 1.341 (2.92), 1.371 (2.77), 1.401 (2.54), 1.411 (2.32), 1.430 (1.49), 1.464 (6.34), 1.496 (3.49), 1.932 (1.76), 1.942 (2.14), 1.951 (1.93), 1.960 (2.08), 2.327 (0.64), 2.366 (0.64), 2.670 (0.64), 2.710 (0.65), 3.169 (2.11), 3.212 (2.67), 3.237 (6.32), 3.265 (6.90), 3.704 (0.49), 3.715 (0.49), 3.840 (4.66), 3.854 (5.62), 3.867 (4.30), 3.879 (6.28), 3.899 (5.14), 3.918 (3.56), 4.201 (2.11), 4.218 (5.83), 4.237 (9.07), 4.263 (8.42), 4.274 (9.80), 4.293 (5.14), 4.318 (1.05), 7.309 (6.35), 7.328 (15.12), 7.347 (9.86), 7.400 (9.65), 7.419 (15.88), 7.437 (7.02), 7.652 (5.77), 7.674 (5.52), 7.735 (8.21), 7.740 (8.28), 7.754 (7.63), 7.883 (16.00), 7.902 (14.80), 12.609 (0.56).
実施例２Ａ

反応はアルゴン雰囲気下で行った。５３ｍＬのジクロロメタン中のＮ－｛［（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ］カルボニル｝－Ｌ－イソロイシン（９．４０ｇ、２６．６ｍｍｏｌ）に、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（１９ｍＬ、１１０ｍｍｏｌ）および２－クロロトリチルクロリド樹脂（１０．０ｇ、１３．３ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で一晩振盪した。沈殿を濾過により集め、ＤＭＦで３回洗浄した。回収した樹脂をジクロロメタン／メタノール１：１で３０分間振盪した。樹脂を濾過によって回収し、メタノールおよびジクロロメタンで、交代で３回洗浄した。回収した樹脂を次の工程のために真空下で乾燥させた。

実施例３Ａ

２００ｍＬのＤＭＦ／ピペリジン４：１中の実施例２Ａ（１５．２ｇ、６．８２ｍｍｏｌ）を室温で１５分間振盪した。樹脂を濾過により集め、ＤＭＦで３回洗浄した。両方の工程を繰り返し、２００ｍＬのメタノールおよび２００ｍＬのジクロロメタンで、交代で３回洗浄した。回収した樹脂を次の工程のために真空下で乾燥させた。

実施例４Ａ

実施例３Ａ（１１．４ｇ、５．１３ｍｍｏｌ）を１００ｍＬのＤＭＦ中、室温で５分間膨潤させた。５０ｍＬのＤＭＦ中のＮ－｛［（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ］カルボニル｝－Ｓ－（トリフェニルメチル）－Ｌ－システイン（６．０１ｇ、１０．３ｍｍｏｌ）、ＤＩＣ（１．５ｍＬ、１０ｍｍｏｌ）およびＯｘｙｍａ（１．４２ｇ、１０．０ｍｍｏｌ）の混合物を加え、反応混合物を室温で２時間振盪した。樹脂を濾過により集め、ＤＭＦで３回洗浄した。カップリング工程を一晩繰り返した。樹脂を濾過により収集し、１５０ｍＬのＤＭＦで３回、次いで１５０ｍＬのメタノールおよび１５０ｍＬのジクロロメタンで、交代で３回以上洗浄した。回収した樹脂を次の工程のために真空下で乾燥させた。

実施例５Ａ

２００ｍＬのＤＭＦ／ピペリジン４：１中の実施例４Ａ（１８．９ｇ、８．５１ｍｍｏｌ）を室温で１５分間振盪した。樹脂を濾過により集め、ＤＭＦで３回洗浄した。両方の工程を繰り返し、回収した樹脂を２００ｍＬのメタノールおよび２００ｍＬのジクロロメタンで、交代で３回洗浄した。回収した樹脂を次の工程のために真空下で乾燥させた。

実施例６Ａ

実施例５Ａ（１６．３ｇ、７．３２ｍｍｏｌ）を１５０ｍＬのＤＭＦ中で室温で５分間膨潤させた。５０ｍＬのＤＭＦ中のＮ－｛［（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ］カルボニル｝－Ｌ－イソロイシン（５．１８ｇ、１４．６ｍｍｏｌ）、ＤＩＣ（２．２ｍＬ、１４ｍｍｏｌ）およびＯｘｙｍａ（２．０３ｇ、１４．３ｍｍｏｌ）の混合物を添加し、反応混合物を室温で２時間振盪した。樹脂を濾過により集め、ＤＭＦで３回洗浄した。カップリング工程を一晩繰り返した。樹脂を濾過により収集し、２００ｍＬのＤＭＦで３回、次いで２００ｍＬのメタノールおよび２００ｍＬのジクロロメタンで、交代で３回以上洗浄した。回収した樹脂を次の工程のために真空下で乾燥させた。
実施例７Ａ

２００ｍＬのＤＭＦ／ピペリジン４：１中の実施例６Ａ（２０．０ｇ、８．９８ｍｍｏｌ）を室温で１５分間振盪した。樹脂を濾過により集め、ＤＭＦで３回洗浄した。両方の工程を繰り返し、回収した樹脂を２００ｍＬのメタノールおよび２００ｍＬのジクロロメタンで、交代で３回洗浄した。回収した樹脂を次の工程のために真空下で乾燥させた。

実施例８Ａ

実施例７Ａ（１７．８ｇ、７．９９ｍｍｏｌ）を１５０ｍＬのＤＭＦ中で室温で５分間膨潤させた。５０ｍＬのＤＭＦ中の（２Ｓ，３ａＳ，７ａＳ）－１－｛［（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ］カルボニル｝オクタヒドロ－１Ｈ－インドール－２－カルボン酸（６．２５ｇ、１６．０ｍｍｏｌ）、ＤＩＣ（２．４ｍＬ、１６ｍｍｏｌ）およびＯｘｙｍａ（２．２１ｇ、１５．６ｍｍｏｌ）の混合物を添加し、反応混合物を室温で２時間振盪した。樹脂を濾過により集め、ＤＭＦで３回洗浄した。カップリング工程を週末にわたって繰り返した。樹脂を濾過により収集し、２００ｍＬのＤＭＦで３回、次いで２００ｍＬのメタノールおよび２００ｍＬのジクロロメタンで、交代で３回以上洗浄した。回収した樹脂を次の工程のために真空下で乾燥させた。

実施例９Ａ

２００ｍＬのＤＭＦ／ピペリジン４：１中の実施例８Ａ（２１．５ｇ、９．６８ｍｍｏｌ）を室温で３０分間振盪した。樹脂を濾過により集め、ＤＭＦで３回、次いで２００ｍＬのメタノールおよび２００ｍＬのジクロロメタンで、交代で３回以上洗浄した。回収した樹脂に、２００ｍＬのＤＭＦ／ピペリジン（４：１）を加え、室温で１時間振盪した。樹脂を濾過により集め、ＤＭＦで３回、次いで２００ｍＬのメタノールおよび２００ｍＬのジクロロメタンで、交代で３回以上洗浄した。回収した樹脂を次の工程のために真空下で乾燥させた。

実施例１０Ａ

実施例９Ａ（１８．１ｇ、８．１３ｍｍｏｌ）を１５０ｍＬのＤＭＦ中で室温で５分間膨潤させた。５０ｍＬのＤＭＦ中の１－｛［（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ］カルボニル｝－Ｌ－プロリン（１１．０ｇ、３２．５ｍｍｏｌ）、ＤＩＣ（４．９ｍＬ、３２ｍｍｏｌ）およびＯｘｙｍａ（４．５１ｇ、３１．７ｍｍｏｌ）の混合物を添加し、反応混合物を室温で週末にわたって振盪した。樹脂を濾過により収集し、２００ｍＬのＤＭＦで３回、次いで２００ｍＬのメタノールおよび２００ｍＬのジクロロメタンで、交代で３回以上洗浄した。回収した樹脂を次の工程のために真空下で乾燥させた。

実施例１１Ａ

１５０ｍＬのＤＭＦ／ピペリジン４：１中の実施例１０Ａ（２０．４ｇ、９．１６ｍｍｏｌ）を室温で３０分間振盪した。樹脂を濾過により集め、ＤＭＦで３回洗浄した。両方の工程を繰り返し、回収した樹脂を２００ｍＬのメタノールおよび２００ｍＬのジクロロメタンで、交代で３回洗浄した。回収した樹脂を次の工程のために真空下で乾燥させた。

実施例１２Ａ

実施例１１Ａ（１８．２ｇ、８．１８ｍｍｏｌ）を１５０ｍＬのＤＭＦ中で室温で５分間膨潤させた。５０ｍＬのＤＭＦ中のＮ－｛［（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ］カルボニル｝－Ｌ－ロイシン（１１．６ｇ、３２．７ｍｍｏｌ）、ＤＩＣ（４．９ｍＬ、３２ｍｍｏｌ）およびＯｘｙｍａ（４．５３ｇ、３１．９ｍｍｏｌ）の混合物を添加し、反応混合物を室温で一晩振盪した。樹脂を濾過により収集し、２００ｍＬのＤＭＦで３回、次いで２００ｍＬのメタノールおよび２００ｍＬのジクロロメタンで、交代で３回以上洗浄した。回収した樹脂を次の工程のために真空下で乾燥させた。

実施例１３Ａ

１５０ｍＬのＤＭＦ／ピペリジン４：１中の実施例１２Ａ（２０．９ｇ、９．４２ｍｍｏｌ）を室温で３０分間振盪した。樹脂を濾過により集め、ＤＭＦで３回洗浄した。両方の工程を繰り返し、回収した樹脂を２００ｍＬのメタノールおよび２００ｍＬのジクロロメタンで、交代で３回洗浄した。回収した樹脂を次の工程のために真空下で乾燥させた。

実施例１４Ａ

実施例１３Ａ（１８．０ｇ、８．１１ｍｍｏｌ）を１５０ｍＬのＤＭＦ中で室温で５分間膨潤させた。５０ｍＬのＤＭＦ中のＯ－ｔｅｒｔ－ブチル－Ｎ－｛［（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ］カルボニル｝－Ｌ－セリン（１２．４ｇ、３２．４ｍｍｏｌ）、ＤＩＣ（４．９ｍＬ、３２ｍｍｏｌ）およびＯｘｙｍａ（４．４９ｇ、３１．６ｍｍｏｌ）の混合物を添加し、反応混合物を室温で一晩振盪した。樹脂を濾過により収集し、２００ｍＬのＤＭＦで３回、次いで２００ｍＬのメタノールおよび２００ｍＬのジクロロメタンで、交代で３回以上洗浄した。回収した樹脂を次の工程のために真空下で乾燥させた。

実施例１５Ａ

２００ｍＬのＤＭＦ／ピペリジン４：１中の実施例１４Ａ（２１．４ｇ、９．６４ｍｍｏｌ）を室温で３０分間振盪した。樹脂を濾過により集め、ＤＭＦで３回洗浄した。両方の工程を繰り返し、回収した樹脂を２００ｍＬのメタノールおよび２００ｍＬのジクロロメタンで、交代で３回洗浄した。回収した樹脂を次の工程のために真空下で乾燥させた。

実施例１６Ａ

実施例１５Ａ（１８．９ｇ、８．５１ｍｍｏｌ）を１５０ｍＬのＤＭＦ中で室温で５分間膨潤させた。ＤＭＦ５０ｍＬ中のＮ^２－｛［（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ］カルボニル｝－Ｎ^５－［Ｎ－（２，２，４，６，７－ペンタメチル－２，３－ジヒドロ－１－ベンゾフラン－５－スルホニル）カルバムイミドイル］－Ｌ－オルニチン（２２．１ｇ、３４．０ｍｍｏｌ）、ＤＩＣ（５．１ｍＬ、３３ｍｍｏｌ）およびＯｘｙｍａ（４．７２ｇ、３３．２ｍｍｏｌ）の混合物を加え、反応混合物を室温で一晩振盪した。樹脂を濾過により収集し、２００ｍＬのＤＭＦで３回、次いで２００ｍＬのメタノールおよび２００ｍＬのジクロロメタンで、交代で３回以上洗浄した。回収した樹脂を次の工程のために真空下で乾燥させた。

実施例１７Ａ

２００ｍＬのＤＭＦ／ピペリジン４：１中の実施例１６Ａ（２３．８ｇ、１０．７ｍｍｏｌ）を室温で３０分間振盪した。樹脂を濾過により集め、ＤＭＦで３回洗浄した。両方の工程を繰り返し、回収した樹脂を２００ｍＬのメタノールおよび２００ｍＬのジクロロメタンで、交代で３回洗浄した。回収した樹脂を次の工程のために真空下で乾燥させた。

実施例１８Ａ

実施例１７Ａ（２２．１ｇ、９．９５ｍｍｏｌ）を１５０ｍＬのＤＭＦ中で室温で５分間膨潤させた。５０ｍＬのＤＭＦ中のＯ－ｔｅｒｔ－ブチル－Ｎ－｛［（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ］カルボニル｝－Ｌ－セリン（１５．３ｇ、３９．８ｍｍｏｌ）、ＤＩＣ（６．０ｍＬ、３９ｍｍｏｌ）およびＯｘｙｍａ（５．５１ｇ、３８．８ｍｍｏｌ）の混合物を添加し、反応混合物を室温で一晩振盪した。樹脂を濾過により収集し、２００ｍＬのＤＭＦで３回、次いで２００ｍＬのメタノールおよび２００ｍＬのジクロロメタンで、交代で３回以上洗浄した。回収した樹脂を次の工程のために真空下で乾燥させた。

実施例１９Ａ

２００ｍＬのＤＭＦ／ピペリジン４：１中の実施例１８Ａ（２４．７ｇ、１１．１ｍｍｏｌ）を室温で３０分間振盪した。樹脂を濾過により集め、ＤＭＦで３回洗浄した。両方の工程を繰り返し、回収した樹脂を２００ｍＬのメタノールおよび２００ｍＬのジクロロメタンで、交代で３回洗浄した。回収した樹脂を次の工程のために真空下で乾燥させた。

実施例２０Ａ

実施例１９Ａ（２２．２ｇ、９．９９ｍｍｏｌ）を１５０ｍＬのＤＭＦ中で室温で５分間膨潤させた。５０ｍＬのＤＭＦ中のＮ－｛［（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ］カルボニル｝－Ｓ－（トリフェニルメチル）－Ｌ－システイン（２３．４ｇ、４０．０ｍｍｏｌ）、ＤＩＣ（６．０ｍＬ、３９ｍｍｏｌ）およびＯｘｙｍａ（５．５４ｇ、３９．０ｍｍｏｌ）の混合物を添加し、反応混合物を室温で一晩振盪した。樹脂を濾過により収集し、２００ｍＬのＤＭＦで３回、次いで２００ｍＬのメタノールおよび２００ｍＬのジクロロメタンで、交代で３回以上洗浄した。回収した樹脂を次の工程のために真空下で乾燥させた。

実施例２１Ａ

２００ｍＬのＤＭＦ／ピペリジン４：１中の実施例２０Ａ（２４．５ｇ、１１．０ｍｍｏｌ）を室温で３０分間振盪した。樹脂を濾過により集め、ＤＭＦで３回洗浄した。両方の工程を繰り返し、回収した樹脂を２００ｍＬのメタノールおよび２００ｍＬのジクロロメタンで、交代で３回洗浄した。回収した樹脂を次の工程のために真空下で乾燥させた。

実施例２２Ａ

実施例２１Ａ（２２．３ｇ、１０．０ｍｍｏｌ）を１５０ｍＬのＤＭＦ中で室温で５分間膨潤させた。５０ｍＬのＤＭＦ中のＮ－｛［（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ］カルボニル｝－Ｌ－イソロイシン（１４．２ｇ、４０．１ｍｍｏｌ）、ＤＩＣ（６．０ｍＬ、３９ｍｍｏｌ）およびＯｘｙｍａ（５．５５ｇ、３９．０ｍｍｏｌ）の混合物を添加し、反応混合物を室温で週末にわたって振盪した。樹脂を濾過により収集し、２００ｍＬのＤＭＦで３回、次いで２００ｍＬのメタノールおよび２００ｍＬのジクロロメタンで、交代で３回以上洗浄した。回収した樹脂を次の工程のために真空下で乾燥させた。

実施例２３Ａ

７．５ｍＬのＤＭＦ／ピペリジン４：１中の実施例２２Ａ（１．００ｇ、２５０μｍｏｌ）を室温で３０分間振盪した。樹脂を濾過により集め、ＤＭＦで３回洗浄した。両方の工程を繰り返し、回収した樹脂をメタノールおよびジクロロメタンで、交代で３回洗浄した。回収した樹脂を次の工程のために真空下で乾燥させた。

実施例２４Ａ

実施例２３Ａ（１．００ｇ、２５０μｍｏｌ）を５ｍＬのＤＭＦ中で室温で５分間膨潤させた。１ｍＬのＤＭＦ中の（２Ｓ）－（｛［（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ］カルボニル｝アミノ（オキサン－４－イル）酢酸（３８１ｍｇ、１．００ｍｍｏｌ）、ＤＩＣ（１５０μＬ、９８０μｍｏｌ）およびＯｘｙｍａ（１３９ｍｇ、９７５μｍｏｌ）の混合物を添加し、反応混合物を室温で週末にわたって振盪した。樹脂を濾過によって集め、ＤＭＦで３回洗浄し、次いでメタノールおよびジクロロメタンで、交代でさらに３回洗浄した。回収した樹脂を次の工程のために真空下で乾燥させた。

実施例２５Ａ

７．５ｍＬのＤＭＦ／ピペリジン４：１中の実施例２４Ａ（１．００ｇ、２５０μｍｏｌ）を室温で３０分間振盪した。樹脂を濾過により集め、ＤＭＦで３回洗浄した。両方の工程を繰り返し、回収した樹脂をメタノールおよびジクロロメタンで、交代で３回洗浄した。回収した樹脂を次の工程のために真空下で乾燥させた。

実施例２６Ａ
（２Ｓ，３Ｓ）－２－｛［（２Ｒ）－２－｛［（２Ｓ，３Ｓ）－２－｛［（２Ｓ，３ａＳ，７ａＳ）－１－｛（２Ｓ）－１－［（２Ｓ，５Ｓ，８Ｓ，１１Ｓ，１４Ｒ，１７Ｓ，２０Ｓ）－２０－アミノ－１７－［（２Ｓ）－ブタン－２－イル］－８－（３－カルバムイミドアミドプロピル）－５，１１－ビス（ヒドロキシメチル）－２－（２－メチルプロピル）－２０－（オキサン－４－イル）－４，７，１０，１３，１６，１９－ヘキサオキサ－１４－（スルファニルメチル）－３，６，９，１２，１５，１８－ヘキサアザイコサナン－１－オイル］ピロリジン－２－カルボニル｝オクタヒドロ－１Ｈ－インドール－２－カルボニル］アミノ｝－３－メチルペンタノイル］アミノ｝－３－スルファニルプロパノイル］アミノ｝－３－メチルペンタン酸（単一の立体異性体）

実施例２５Ａ（１．００ｇ、２５０μｍｏｌ）に、ＴＦＡ／ＥＤＴ／チオアニソール（９０：３：７）の切断カクテルを添加し、混合物を室温で２時間振盪した。濾液を集め、樹脂をジクロロメタンで洗浄した。合わせた濾液を蒸発させた。残渣をジエチルエーテルと一緒に撹拌し、固体を濾過により集めた。固体をジエチルエーテルで数回洗浄し、次の工程のために真空下で乾燥させた。

実施例１８４
（（２Ｓ）－２［（アミノ）－２－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）］酢酸）－ＩＣ＋ＳＲＳＬＰ－（Ｏｉｃ）－ＩＣ＋Ｉ－ＯＨ（実施例１８４）
Ｎ－［（６Ｓ，９Ｓ，１２Ｓ，１５Ｓ，１８Ｒ，２３Ｒ，２６Ｓ，２８ａＳ，２９ａＳ，３３ａＳ，３５ａＳ）－１８－（｛Ｎ－［（２Ｓ）－２－アミノ－２－（オキサン－４－イル）アセチル］－Ｌ－イソロイシル｝アミノ）－２６－［（２Ｓ）－ブタン－２－イル］－１２－（３－カルバムイミドアミドプロピル）－９，１５－ビス（ヒドロキシメチル）－６－（２－メチルプロピル）－５，８，１１，１４，１７，２５，２８，３５－オクタオキソドトリアコンタヒドロ－１Ｈ，５Ｈ，２２Ｈ－ピロロ［２’，１’：１３，１４］［１，２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６］ジチアオクタアザシクロノナコシノ［１１，１０－ａ］インドール－２３－カルボニル］－Ｌ－イソロイシン（単一の立体異性体）

実施例２６Ａ（４２５ｍｇ、３０４μｍｏｌ）に、８５０ｍＬの０．１Ｍ重炭酸アンモニウム水溶液（ｐＨ７．８６）を添加した。反応混合物に空気を５分間通気した。反応混合物を開放フラスコ中で室温で一晩撹拌した。溶媒を凍結乾燥して、５８０ｍｇの白色固体を得た。上記の逆相ＨＰＬＣ（方法Ｂ）を用いた精製により、３つの画分７．４ｍｇ（＞９９％）、２４．５ｍｇ（９８％）および１５ｍｇ（９５％）の所望の実施例１８４を得た。

一般的方法Ｆ：ペプチドＴＦＡ塩のＨＣｌ塩への変換
ＡＩＣ＋ＳＲＳ－（（ｔＢｕ）Ａ）－ＰＰＩ－（（Ｎ－Ｍｅ）Ｃ）＋ＩＰＤ－ＮＨ２（ＨＣｌ塩）（実施例３０）の合成が代表的である。

自動イオン交換ステーションの手順：
Ｈｉｒｓｃｈｍａｎｎ社の蠕動ポンプ（Ｒｏｔａｒｕｓ ｖｏｌｕｍｅ ５０）、チューブ：Ｔｙｇｏｎ ２００１（ＩＤ ０，６４ｍｍ）
セッティング：
Ｈ_２Ｏによる洗浄：ランタイム１２００ｓ；８０分^－１；１サイクル（は３５ｍｌ容量）
ペプチドを用いた試料循環：ランタイム１２００ｓ；８０分^－１；１サイクル（は７０ｍｌ容量）
Ｈ_２Ｏによる洗浄（またはＨ_２Ｏ中の％ＡＣＮ：ランタイム１２００ｓ； ８０分^－１；１サイクル（は３５ｍｌ容量）
Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ ＩＲＡ ４１０（ＨＣｌ形態）を使用した。１５００ｍｇの樹脂を２つのフィルターカートリッジに入れ、脱イオン水で洗浄した（１０回）。

３ｍｌの５％ＡＣＮ／Ｈ_２Ｏ溶液に溶解したペプチドをカラムにロードし、カラムを１０回循環させた。カラムを水で洗浄し、溶液をＦａｌｃｏｎチューブに集め、凍結乾燥した。

７２．８３ｍｇの所望のペプチドをＨＣｌ塩として得た：ＬＣ－ＭＳ（＞９９％）；イオンクロマトグラフィー分析：３．７重量％Ｃｌ－（１．５７当量Ｃｌ－）、＜１重量％ＴＦＡ。

イオン交換プロセスはまた、以下のプロトコルを使用して実施され得る：
Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ ＩＲＡ ４１０樹脂（ＨＣｌ形態）（１～２ｇ）を１０ｍＬフリットシリンジに入れた（１００ｍｇのペプチドは１ｇのＩＲＡ ４１０樹脂を必要とする）
１） 樹脂を水で洗浄する（１０回×３ｍＬ）
２） 樹脂を水中の５％ＡＣＮで洗浄する（１回×３ｍＬ）
３） ペプチドを水中の５％ＡＣＮに溶解した
４） ペプチドをシリンジに添加し、溶液をカラムに１０～２０回循環させた。溶出液をＦａｌｃｏｎチューブに集める。

５） 樹脂を水中の５％ＡＣＮ（１０回×３ｍＬ）で洗浄し；この溶液をＦａｌｋｏｎ－チューブ中の溶液に添加する
６） 合わせた溶液を凍結乾燥する。

一般的方法ＦＡ：ペプチドＴＦＡ塩の他の塩への変換
その他の塩の形態：
塩化物対イオンは、所望の塩形態の溶液（例えば、酢酸ナトリウム）をカラムに繰り返し通し、次いで、カラムを水で繰り返し洗浄することによって、他の対イオンと交換され得る。次いで、ペプチドをロードし、上記の手順に従う。このようにして、ペプチドの酢酸塩、酒石酸塩、クエン酸塩、および乳酸塩が調製された。以下の３つの例は代表的なものである：
実施例２４９
配列：（（Ｎ－Ｍｅ）Ｇ）－ＩＣ＋ＳＲＳＬＰ－（Ｏｉｃ）－Ｉ－（Ｐｅｎ）＋ＩＰ－ＮＨ_２（酢酸塩）（実施例２４９）
Ｎ－［（６Ｓ，９Ｓ，１２Ｓ，１５Ｓ，１８Ｒ，２３Ｒ，２６Ｓ，２８ａＳ，２９ａＳ，３３ａＳ，３５ａＳ）－２６－［（２Ｓ）－ブタン－２－イル］－１２－（３－カルバムイミドアミドプロピル）－９，１５－ビス（ヒドロキシメチル）－２２，２２－ジメチル－１８－［（Ｎ－メチルグリシル－Ｌ－イソロイシル）アミノ］－６－（２－メチルプロピル）－５，８，１１，１４，１７，２５，２８，３５－オクタオキソドトリアコンタヒドロ－１Ｈ，５Ｈ，２２Ｈ－ピロロ［２’，１’：１３，１４］［１，２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６］ジチアオクタアザシクロノナコシノ［１１，１０－ａ］インドール－２３－カルボニル］－Ｌ－イソロイシル－Ｌ－プロリンアミド，酢酸塩
ＩＲＡ４１０塩化物樹脂（１２ｇ）を空の２０ｍＬ Ｂｉｏｔａｇｅカラムに入れ、樹脂をＡＣＮ－水の５％溶液で洗浄した（１０回）。カートリッジを自動イオン交換ステーションに取り付けた。レジンを２０カラム容量の１ＭＮａＯＨ溶液（２×１８００ｓ 回転数８０分^－１）で洗浄した。カラムを水で洗浄し、溶離液のｐＨがｐＨ９未満（カラム容量１０倍）になるまで洗浄した後、カラムを１Ｍ酢酸溶液（カラム容量１０倍）で溶離し、溶離液のｐＨが５を超えるまで水で洗浄した（カラム容量約１０倍）。ペプチド（Ｎ－Ｍｅ）ＧＩＣ＋ＳＲＳＬＰ－（Ｏｉｃ）－Ｉ－Ｐｅｎ＋ＩＰ－ＮＨ_２（ＴＦＡ塩）（１２００ｍｇ）を、１２ｍＬの５％ＡＣＮ／水でカラムにロードし、一般方法Ｆに従って１０回カラムを循環させた。次いで、レジンを５％ＡＣＮ／水溶液で１０回洗浄し、溶出液を５０ｍＬファルコンチューブに回収した。このスケールに使用したパラメータ設定は、以下の通りであった：
Ｈ_２Ｏでの洗浄：ランタイム３０８５ｓ；８０分－１；１サイクル（は９０ｍｌ容積）
ペプチドを用いたサンプル循環：ランタイム３０８５ｓ；８０分－１；１サイクル（は１８０ｍＬ容積）
Ｈ_２Ｏで洗浄（またはＨ_２Ｏ中で％ＡＣＮを使用：ランタイム３０８５ｓ；８０分－１；１サイクル（は９０ｍｌ容積）
合わせた溶離液を凍結乾燥して、１１２０ｍｇ（純度１００％、収率９７％）の標的酢酸塩を得た。

イオンクロマトグラフィー（塩化物含量）：＜１％塩化物
イオンクロマトグラフィー（ＴＦＡ含量）：＜１％ＴＦＡ
イオンクロマトグラフィー（酢酸塩含量）：７．１％酢酸塩＝１．８４当量
ＬＣ－ＭＳ（ＭＣＷ－ＴＯＦ－ＡＱ－ＹＭＣ－１８分）：Ｒｔ＝７．７４分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝７２５［Ｍ＋２Ｈ］^＋
実施例２６４
配列：（（Ｎ－Ｍｅ）Ｇ）－ＩＣ＋ＳＲＳＬＰ－（Ｏｉｃ）－Ｉ－（Ｐｅｎ）＋ＩＰ－ＮＨ_２（Ｌ－酒石酸塩）（実施例２６４）
Ｎ－［（６Ｓ，９Ｓ，１２Ｓ，１５Ｓ，１８Ｒ，２３Ｒ，２６Ｓ，２８ａＳ，２９ａＳ，３３ａＳ，３５ａＳ）－２６－［（２Ｓ）－ブタン－２－イル］－１２－（３－カルバムイミドアミドプロピル）－９，１５－ビス（ヒドロキシメチル）－２２，２２－ジメチル－１８－［（Ｎ－メチルグリシル－Ｌ－イソロイシル）アミノ］－６－（２－メチルプロピル）－５，８，１１，１４，１７，２５，２８，３５－オクタオキソドトリアコンタヒドロ－１Ｈ，５Ｈ，２２Ｈ－ピロロ［２’，１’：１３，１４］［１，２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６］ジチアオクタアザシクロノナコシノ［１１，１０－ａ］インドール－２３－カルボニル］－Ｌ－イソロイシル－Ｌ－プロリンアミド （２Ｒ，３Ｒ）－２，３－ジヒドロキシブタン二酸（Ｌ－（＋）酒石酸）塩
ＩＲＡ４１０塩化物樹脂（１２．５ｇ）を空の２０ｍＬ Ｂｉｏｔａｇｅカラムに入れ、樹脂をＡＣＮ－水の５％溶液で洗浄した（１０回）。カートリッジを自動イオン交換ステーションに取り付けた。樹脂を２０カラム容量の１ＭＮａＯＨ溶液（２×１８００ｓ回転数８０分^－１）で洗浄した。カラムを、溶離液のｐＨが＜ｐＨ９（１０カラム容量）になるまで水で洗浄し、次いで、カラムを、１Ｍ Ｌ－酒石酸溶液（１０カラム容量）で溶離し、次いで、溶離液のｐＨが＞５（約１０カラム容量）になるまで水で洗浄した。ペプチド（（Ｎ－Ｍｅ）Ｇ）－ＩＣ＋ＳＲＳＬＰ－（Ｏｉｃ）－Ｉ－（Ｐｅｎ）＋ＩＰ－ＮＨ_２（ＴＦＡ塩）（１２００ｍｇ）を、１２ｍＬの５％ＡＣＮ／水でカラムにロードし、一般法Ｆに従ってカラムを１０回循環させ、次いで、樹脂を５％ＡＣＮ／水溶液で１０回洗浄し、溶出液を５０ｍＬファルコン管に回収した。このスケールに使用したパラメータ設定は、以下の通りであった：
Ｈ_２Ｏによる洗浄：ランタイム３０８５ｓ；８０分^－１；１サイクル（は９０ｍｌ容積）
ペプチドを用いた試料循環：ランタイム３０８５ｓ；８０分^－１；１サイクル（は１８０ｍｌ容積）
Ｈ_２Ｏによる洗浄（またはＨ_２Ｏ中の％ＡＣＮ：ランタイム３０８５ｓ；８０分^－１；１サイクル（は９０ｍｌ容積）
合わせた溶離液を凍結乾燥して、１１７０ｍｇ（純度１００％、収率９１％）の標的Ｌ－酒石酸塩を得た。

イオンクロマトグラフィー（塩化物含量）：＜１％塩化物
イオンクロマトグラフィー（ＴＦＡ含量）：＜１％ＴＦＡ
イオンクロマトグラフィー（酢酸塩含量）：１３．４％酢酸塩＝１．４９当量
ＬＣ－ＭＳ（ＭＣＷ－ＴＯＦ－ＡＱ－ＹＭＣ－１８分）：Ｒｔ＝７．６２分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝７２５［Ｍ＋２Ｈ］^＋
実施例３７６
配列：（（Ｎ－Ｍｅ）Ｇ）－ＩＣ＋ＳＲＳＬＰ－（Ｏｉｃ）－Ｉ－（Ｐｅｎ）＋ＩＰ－ＮＨ_２（クエン酸塩）（実施例３７６）
Ｎ－［（６Ｓ，９Ｓ，１２Ｓ，１５Ｓ，１８Ｒ，２３Ｒ，２６Ｓ，２８ａＳ，２９ａＳ，３３ａＳ，３５ａＳ）－２６－［（２Ｓ）－ブタン－２－イル］－１２－（３－カルバムイミドアミドプロピル）－９，１５－ビス（ヒドロキシメチル）－２２，２２－ジメチル－１８－［（Ｎ－メチルグリシル－Ｌ－イソロイシル）アミノ］－６－（２－メチルプロピル）－５，８，１１，１４，１７，２５，２８，３５－オクタオキソドトリアコンタヒドロ－１Ｈ，５Ｈ，２２Ｈ－ピロロ［２’，１’：１３，１４］［１，２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６］ジチアオクタアザシクロノナコシノ［１１，１０－ａ］インドール－２３－カルボニル］－Ｌ－イソロイシル－Ｌ－プロリンアミド，２－ヒドロキシプロパン－１，２，３－トリカルボン酸（クエン酸）塩

ＩＲＡ４１０塩化物樹脂（２６ｇ）を空の２０ｍＬ Ｂｉｏｔａｇｅカラムに入れ、樹脂をＡＣＮ－水の５％溶液で洗浄した（１０回）。カートリッジを自動イオン交換ステーションに取り付けた。樹脂を２０カラム容量の１ＭＮａＯＨ溶液（２×１８００ｓ回転数８０分^－１）で洗浄した。カラムを、溶離液のｐＨが＜ｐＨ９（１０カラム容量）になるまで水で洗浄した。次いで、カラムを、１Ｍクエン酸溶液（１０カラム容量）で溶離し、次いで、溶離液のｐＨが＞５（約１０カラム容量）になるまで水で洗浄した。ペプチド（Ｎ－Ｍｅ）ＧＩＣ＋ＳＲＳＬＰ－（Ｏｉｃ）－Ｉ－Ｐｅｎ＋ＩＰ－ＮＨ_２（ＴＦＡ塩）（１２００ｍｇ）を、１２ｍＬの５％ＡＣＮ／水でカラムにロードし、一般法Ｆに従って１０回カラムを循環させた。次いで、樹脂を５％ＡＣＮ／水溶液で１０回洗浄し、溶出液を５０ｍＬファルコンチューブに回収した。このスケールに使用したパラメータ設定は、以下の通りであった：
Ｈ_２Ｏによる洗浄：ランタイム３０８５ｓ；８０分^－１；１サイクル（は９０ｍｌ容積）
ペプチドを用いた試料循環：ランタイム３０８５ｓ；８０分^－１；１サイクル（は１８０ｍｌ容積）
Ｈ_２Ｏによる洗浄（またはＨ_２Ｏ中の％ＡＣＮ：ランタイム３０８５ｓ；８０分^－１；１サイクル（は９０ｍｌ容積）
合わせた溶離液を凍結乾燥して、１３７０ｍｇ（純度１００％、収率９７％）の標的Ｌ－酒石酸塩を得た。

イオンクロマトグラフィー（塩化物含量）：＜１％塩化物
イオンクロマトグラフィー（ＴＦＡ含量）：＜１％ＴＦＡ
イオンクロマトグラフィー（酢酸塩含量）：１９．０％酢酸塩＝１．７７当量
ＬＣ－ＭＳ（ＭＣＷ－ＴＯＦ－ＡＱ－ＹＭＣ－１８分）：Ｒｔ＝７．６分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝７２５［Ｍ＋２Ｈ］^＋
当業者はイオンクロマトグラフィーによる化学量論が常に化学量論的であるとは限らない（例えば、１：２または１：１）が、水分含量は考慮されておらず、これは、いくつかの場合において測定された場合、８～１５％の水分含量であり得ることを認識する。

一般的方法Ｇ：無塩形態の調製
ＡＩＣ＋ＳＲＳＬＰ－（Ｏｉｃ）－Ｉ－（Ｐｅｎ）＋ＩＰＤ－ＮＨ_２（無塩形態）（実施例２７）の作成が代表的である。

５グラムのＴＦＡ塩（実施例７５）を、酸改質剤を用いずに７０^ｏＣのアセトニトリル水グラディエントを使用する逆相ＨＰＬＣによって精製した。所望の画分を合わせ、凍結乾燥した。２．２グラムの無塩形態（実施例２７）が得られた；ＬＣ－ＭＳ（＞純度９９％）；イオンクロマトグラフィー（＜１％ＴＦＡ）
一般的方法Ｈ：大規模合成
ＡＩＣ＋ＳＲＳ－（（ｔＢｕ）Ａ）－ＰＰＩ－（（Ｎ－Ｍｅ）Ｃ）＋ＩＰＤ－ＮＨ_２（実施例４８）の合成が代表的である

ペプチドは、標準的なＦｍｏｃ化学を用いて合成した。

１） ＭＢＨＡ樹脂（１８０ｍｍｏｌ）を入れた容器にＤＭＦを加え、樹脂を２時間膨潤させた。

２） Ｆｍｏｃ－Ｒｉｎｋアミドリンカを追加して３０秒間混合し、その後、飽和バッファを追加した。混合は、Ｎ_２バブルを用いて約１時間行われた。

３） 溶液を樹脂から排出し、樹脂をＤＭＦ洗浄（３０秒×３回）で洗浄した。

４） ２０％ピペリジン／ＤＭＦの溶液を添加し、窒素バブリングで３０分間混合した。

５） 溶液を排出し、樹脂をＤＭＦで洗浄した（５回）。

６） Ｆｍｏｃ－アミノ酸溶液を添加し、３０秒間混合し、次いで活性化緩衝液を添加した。混合は、Ｎ_２バブルを用いて約１時間行われた。

７） 各アミノ酸カップリングについて、工程３～６を繰り返した。

表１０：使用した材料と条件の注記

ＤＭＦ中の２０％ピペリジンの溶液を、Ｆｍｏｃ脱保護のために３０分間使用した。カップリング反応をニンヒドリン試験によりモニターし、樹脂をＤＭＦで５回洗浄した。

ペプチド切断および精製：
１） 切断緩衝液（９２．５％ＴＦＡ：２．５％ＥＤＴ：２．５％ＴＩＳ：２．５％Ｈ_２Ｏ）を、側鎖保護ペプチドを含むフラスコに室温で添加し、混合物を２時間撹拌した。

２） ペプチドを冷イソプロピルエーテルで沈殿させ、遠心分離した（５０００ｒｐｍで２分間）。

３） ペプチドをイソプロピルエーテルでさらに２回洗浄した。

４） 粗ペプチドを真空下で２時間乾燥させた。

ジスルフィド生成
Ｈ_２Ｏ／Ｉ（３Ｌ ２：１）中の粗線状ペプチド（１５ｇ、９．９２ｍｍｏｌ、１．０当量）（２０バッチ）の溶液に、ＮＨ_４ＨＣＯ_３（７．８４ｇ、９９．２ｍｍｏｌ、１０当量）を添加した。混合物を３０℃で１６時間撹拌し、ＨＣｌを添加してクエンチしてＰＨ～６として、次いで混合物を凍結乾燥した。凍結乾燥物をＰｒｅｐ－ＨＰＬＣによって精製して、所望の実施例４８（４１．８ｇ、９５．８％、収率１３．３％）を白色固体として得た（合計１５６．８ｇ）。

精製条件
装置：Ｓｈｉｍａｄｚｕ １０Ａ；ＰｅｐｔｉｄｅはＤＭＦ／Ｈ_２Ｏに溶解した。移動相：Ａ（Ｈ_２Ｏ（Ｈ_２Ｏ中に０．０７５％ＴＦＡ）、Ｂ ＥｔＯＨ；グラディエント：１０－５０％－６０分。保持時間：４７分；カラム：Ｌｕｎａ、Ｃ１８、１０μｍ，１００Ａ、２５ｃｍ×５０ｍｍ；流量：８０ｍＬ／分；波長：２２０／２５４ｎｍ；オーブン温度：室温。

方法Ｉ：（（Ｎ－Ｍｅ）Ａ）－ＩＣ＋ＳＲＳＬＰ－（Ｏｉｃ）－Ｉ－（Ｐｅｎ）＋ＩＰ－（（Ｎ－ベンジル）Ｄ）－ＮＨ _２ の調整（実施例４６２）
Ｎ－［（６Ｓ，９Ｓ，１２Ｓ，１５Ｓ，１８Ｒ，２３Ｒ，２６Ｓ，２８ａＳ，２９ａＳ，３３ａＳ，３５ａＳ）－２６－［（２Ｓ）－ブタン－２－イル］－１２－（３－カルバムイミドアミドプロピル）－９，１５－ビス（ヒドロキシメチル）－２２，２２－ジメチル－１８－［（Ｎ－メチル－Ｌ－アラニル－Ｌ－イソロイシル）アミノ］－６－（２－メチルプロピル）－５，８，１１，１４，１７，２５，２８，３５－オクタオキソドトリアコンタヒドロ－１Ｈ，５Ｈ，２２Ｈ－ピロロ［２’，１’：１３，１４］［１，２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６］ジチアオクタアザシクロノナコシノ［１１，１０－ａ］インドール－２３－カルボニル］－Ｌ－イソロイシル－Ｌ－プロリル－Ｎ^４－ベンジル－Ｌ－アスパルトアミド

ペプチドは、０．３ｍｍｏｌスケールでＲｉｎｋ Ａｍｉｄｅ ＭＢＨＡ樹脂（典型的には約０．４～０．６ｍｍｏｌ／ｇのローディング）上で調製した。最初のアミノ酸Ｆｍｏｃ－Ａｓｐ（２－フェニルイソプロピルエステル）－ＯＨ（ＣＡＳ ２００３３６－８６－３）を、方法Ｃに記載の方法を用いて樹脂に添加した。ペプチド配列を、方法Ｃに記載の工程を用いて構築した。配列が完了したら、ＤＣＭ中の１％ＴＦＡを３０分間用いて、２－ＯＰＰ保護基を除去した。Ｎ－ベンジルアミン（３当量）、ＤＩＣ（３当量）およびＯｘｙｍａ（３当量）を添加し、混合物を２時間振盪した。ペプチドを切断し、ジスルフィド結合を形成し、方法Ｃに従ってペプチドを精製した。

一般的方法Ｊ．（（Ｎ－Ｍｅ）Ｇ）－ＩＣ＋ＳＲＳＬＰ－（Ｏｉｃ）－Ｉ－（Ｐｅｎ）＋ＩＰ－（＊Ｄａｐ）－ＯＨの調製（実施例４６７）
Ｎ－［（６Ｓ，９Ｓ，１２Ｓ，１５Ｓ，１８Ｒ，２３Ｒ，２６Ｓ，２８ａＳ，２９ａＳ，３３ａＳ，３５ａＳ）－２６－［（２Ｓ）－ブタン－２－イル］－１２－（３－カルバムイミドアミドプロピル）－９，１５－ビス（ヒドロキシメチル）－２２，２２－ジメチル－１８－［（Ｎ－メチルグリシル－Ｌ－イソロイシル）アミノ］－６－（２－メチルプロピル）－５，８，１１，１４，１７，２５，２８，３５－オクタオキソドトリアコンタヒドロ－１Ｈ，５Ｈ，２２Ｈ－ピロロ［２’，１’：１３，１４］［１，２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６］ジチアオクタアザシクロノナコシノ［１１，１０－ａ］インドール－２３－カルボニル］－Ｌ－イソロイシル－Ｎ－［（２Ｓ）－２－アミノ－２－カルボキシエチル］－Ｌ－プロリンアミド

方法Ｃに従って２－クロロトリチル樹脂上にペプチドを調製した。方法Ｃに従ってＢＯＣ－Ｄａｐ（Ｆｍｏｃ）－ＯＨ（ＣＡＳ １２２２３５－７０－５）を樹脂上に添加し、方法Ｃに従ってペプチドを構築し、精製した。

一般的方法Ｋ．（２－（モルホリン）アセチル）－ＩＣ＋ＳＲＳ－（（ｔＢｕ）Ａ）－ＰＰＩ－（Ｐｅｎ）＋ＩＰＤ－ＮＨ２の調製（実施例２８３）
実施例２７Ａ
Ｎ－（ブロモアセチル）－Ｌ－イソロイシル－Ｌ－システイニル－Ｌ－セリル－Ｌ－アルギニル－Ｌ－セリル－４－メチル－Ｌ－ロイシル－Ｌ－プロリル－Ｌ－プロリル－Ｌ－イソロイシル－３－スルファニル－Ｌ－バリル－Ｌ－イソロイシル－Ｌ－プロリル－Ｌ－アルファ－アスパラギン

配列ＩＣ＋ＳＲＳ－（（ｔＢｕ）Ａ）－ＰＰＩ－（Ｐｅｎ）＋ＩＰＤ－ＮＨ２を、Ｒｉｎｋａｍｉｄｅ ＣｈｅｍＭａｔｒｉｘ樹脂上で、方法Ａに従って０．１ｍｍｏｌスケールで１２回調製し、樹脂含有ペプチド（２００ｍｇ １００μｍｏｌ）に、Ｎ，Ｎ’－ジイソプロピルカルボジイミド（３１μＬ、２００μｍｏｌ）、エチル（ヒドロキシイミノ）シアノアセテート（２８．４ｍｇ、２００μｍｏｌ）およびブロモ酢酸（１４μＬ、２００μｍｏｌ）を添加し、混合物を、５ｍＬのＤＭＦ中、室温で一晩、サーモミキサーシェーカー上で振盪した。樹脂を濾過し、ＤＭＦ（６×５ｍＬ）で洗浄し、ＤＣＭ（６×５ｍＬ）で洗浄し、次いで、次の工程のために真空下で乾燥させた。

実施例２８３
Ｎ－［（５ａＳ，１１Ｓ，１４Ｓ，１７Ｓ，２０Ｓ，２３Ｒ，２８Ｒ，３１Ｓ，３３ａＳ）－３１－［（２Ｓ）－ブタン－２－イル］－１７－（３－カルバムイミドアミドプロピル）－１１－（２，２－ジメチルプロピル）－１４，２０－ビス（ヒドロキシメチル）－２７，２７－ジメチル－２３－（｛Ｎ－［（モルホリン－４－イル）アセチル］－Ｌ－イソロイシル｝アミノ）－５，１０，１３，１６，１９，２２，３０，３３－オクタオキソオクタコサヒドロ－１Ｈ，５Ｈ，１０Ｈ－ジピロロ［２，１－ｊ：２’，１’－ｍ］［１，２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６］ジチアオクタアザシクロノナコシン－２８－カルボニル］－Ｌ－イソロイシル－Ｌ－プロリル－Ｌ－アルファ－アスパラギン

ＮＭＰ（１０ｍＬ）中の実施例２７ａ（２００ｍｇ、純度７４％、７７．７μｍｏｌ）にモルホリン（３４μｌ、３９０μｍｏｌ）を加え、懸濁液をサーモミキサーで、３７℃で振盪した。固体樹脂を濾過によって集め、１０ｍＬのＤＭＦおよび１０ｍＬのジクロロメタンでそれぞれ２回洗浄した。残渣をＴＦＡ／ＥＤＴ／チオアニソール（ｔｈｉｏｎａｉｓｏｌ）（９０：３：７）で処理し、室温で２時間振盪した。冷ジエチルエーテル（－１０^ｏＣ）で処理した後、懸濁液を窒素下で遠心分離し、冷ジエチルエーテルで３回（３×３０ｍｌ）洗浄した。残渣に０．１Ｍ重炭酸アンモニウム水溶液（４００ｍＬ）を加え、反応混合物を空気に開放した丸底フラスコ中で一晩振盪した。溶液を凍結乾燥し、凍結乾燥粉末を方法Ａに従って精製して、実施例２８３の２０．４ｍｇ（純度９８％、収率１６％）を得た。

実施例３００ （２－ヒドロキシアセチル）－ＩＣ＋ＳＲＳ－（（ｔＢｕ）Ａ）－ＰＰＩ－（Ｐｅｎ）＋ＩＰＤ－ＮＨ_２を副生成物として単離した。

一般的方法Ｌ．ナトリウムおよびコリン塩形態の調製
これらの塩は、無塩形態のペプチドから調製した。以下の２つの実施例は、一般的な方法の代表例である：
実施例４３１
Ｎ－［（６Ｓ，９Ｓ，１２Ｓ，１５Ｓ，１８Ｒ，２３Ｒ，２６Ｓ，２８ａＳ，２９ａＳ，３３ａＳ，３５ａＳ）－１８－［（Ｌ－アラニル－Ｌ－イソロイシル）アミノ］－２６－［（２Ｓ）－ブタン－２－イル］－１２－（３－カルバムイミドアミドプロピル）－９，１５－ビス（ヒドロキシメチル）－２２，２２－ジメチル－６－（２－メチルプロピル）－５，８，１１，１４，１７，２５，２８，３５－オクタオキソドトリアコンタヒドロ－１Ｈ，５Ｈ，２２Ｈ－ピロロ［２’，１’：１３，１４］［１，２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６］ジチアオクタアザシクロノナコシノ［１１，１０－ａ］インドール－２３－カルボニル］－Ｌ－イソロイシル－Ｎ－［（１Ｓ）－１，２－ジカルボキラトエチル］－Ｌ－プロリンアミド、ナトリウム塩

配列：ＡＩＣ＋ＳＲＳＬＰ－（Ｏｉｃ）－Ｉ－（Ｐｅｎ）＋ＩＰＤ－ＯＨ（ナトリウム塩）（実施例４３１）
２０ｍＬのアセトニトリル／水１：１中のＡＩＣ＋ＳＲＳＬＰ－（Ｏｉｃ）－Ｉ－（Ｐｅｎ）＋ＩＰＤ－ＯＨ（無塩形態）（１００ｍｇ）の溶液に、１．３ｍＬの０．１Ｍ水酸化ナトリウム溶液を添加した。混合物を真空下で乾燥させて、１０９ｍｇ（収率１０４％、純度９９％）の標的化合物を得た。

ＬＣ－ＭＳ（ＭＣＷ－ＴＯＦ－ＡＱ－ＹＭＣ－１８分）：Ｒ_ｔ＝８．６２分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝７８３［Ｍ＋２Ｈ］２＋
イオンクロマトグラフィー（ナトリウム含量）：２．９％ナトリウム＝２．０３当量
実施例４３２
Ｎ－［（６Ｓ，９Ｓ，１２Ｓ，１５Ｓ，１８Ｒ，２３Ｒ，２６Ｓ，２８ａＳ，２９ａＳ，３３ａＳ，３５ａＳ）－１８－［（Ｌ－アラニル－Ｌ－イソロイシル）アミノ］－２６－［（２Ｓ）－ブタン－２－イル］－１２－（３－カルバムイミドアミドプロピル）－９，１５－ビス（ヒドロキシメチル）－２２，２２－ジメチル－６－（２－メチルプロピル）－５，８，１１，１４，１７，２５，２８，３５－オクタオキソドトリアコンタヒドロ－１Ｈ，５Ｈ，２２Ｈ－ピロロ［２’，１’：１３，１４］［１，２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６］ジチアオクタアザシクロノナコシノ［１１，１０－ａ］インドール－２３－カルボニル］－Ｌ－イソロイシル－Ｎ－［（１Ｓ）－１，２－ジカルボキラトエチル］－Ｌ－プロリンアミド、２－ヒドロキシ－Ｎ，Ｎ，Ｎ－トリメチルエタン－１－アンモニウム）（コリン）塩

２０ｍＬのアセトニトリル／水１：１中のＡＩＣ＋ＳＲＳＬＰ－（Ｏｉｃ）－Ｉ－（Ｐｅｎ）＋ＩＰＤ－ＯＨ（無塩形態）（１００ｍｇ）の溶液に、５１１μＬの０．２５Ｍ水酸化コリン溶液を添加した。混合物を真空下で乾燥させて、１２２ｍｇ（収率１０５％、純度９９％）の標的化合物を得た。

ＬＣ－ＭＳ（ＭＣＷ－ＴＯＦ－ＡＱ－ＹＭＣ－１８分）：Ｒ_ｔ＝８．６５分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝７８３［Ｍ＋２Ｈ］２＋
イオンクロマトグラフィー（コリン含量）：１１．７％コリン＝１．９７当量
実施例１３
ＡＩＣ＋ＳＲＳＬＰ－（Ｏｉｃ）－Ｉ－（Ｐｅｎ）＋ＩＰＤ－ＯＨ（実施例１３）
（３Ｓ）－４－アミノ－３－（｛（２Ｓ）－１－［（２Ｓ，３Ｓ）－２－｛［（２Ｒ）－２－｛［（２Ｓ，３Ｓ）－２－｛［（２Ｓ，３ａＳ，７ａＳ）－１－｛（２Ｓ）－１－［（２Ｓ，５Ｓ，８Ｓ，１１Ｓ，１４Ｒ，１７Ｓ，２０Ｓ）－２０－アミノ－１７－［（２Ｓ）－ブタン－２－イル］－８－（３－カルバムイミドアミドプロピル）－５，１１－ビス（ヒドロキシメチル）－２－（２－メチルプロピル）－４，７，１０，１３，１６，１９－ヘキサオキソ－１４－（スルファニルメチル）－３，６，９，１２，１５，１８－ヘキサアザヘニコサナン－１－オイル］ピロリジン－２－カルボニル｝オクタヒドロ－１Ｈ－インドール－２－カルボニル］アミノ｝－３－メチルペンタノイル］アミノ｝－３－メチル－３－スルファニルブタノイル］アミノ｝－３－メチルペンタノイル］ピロリジン－２－カルボニル｝アミノ）－４－オキソブタン酸

ペプチド合成
ペプチドは、標準的なＦｍｏｃ化学を用いて合成した。

１） 樹脂の調製：ＣＴＣ樹脂（１５．０ｍｍｏｌ、１５．０ｇ、１．０ｍｍｏｌ／ｇ）に、ＤＣＭ（３００ｍＬ）中のＦｍｏｃ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－ＯＨ（１５．０ｍｍｏｌ、６．１７ｇ、１．０当量）およびＤＩＥＡ（１０．４ｍＬ、６０．０ｍｍｏｌ、４．０当量）を添加した。混合物を、２０℃で２時間、Ｎ_２で撹拌した。次にメタノール（１５．０ｍｌ）を加え、樹脂をさらに３０分間Ｎ_２で撹拌した。樹脂をＤＭＦ（３００ｍＬ×３）で洗浄した。次いで、ＤＭＦ（３００ｍｌ）中の２０％ピペリジン溶液を添加し、混合物を２０℃で２０分間、Ｎ_２で撹拌した。次に、混合物を濾過して樹脂を得た。樹脂をＤＭＦ（３００ｍＬ×３）で洗浄し、濾過して樹脂を得た。

２） カップリング：ＤＭＦ（１００ｍＬ）中のＦｍｏｃ－Ｐｒｏ－ＯＨ（１５．２ｇ、４５．０ｍｍｏｌ、３．０当量）、ＨＢＴＵ（１６．２ｇ、４２．８ｍｍｏｌ、２．８５当量）およびＤＩＥＡ（９０．０ｍｍｏｌ、１５．６ｍＬ、６．００当量）を樹脂に添加し、樹脂を２０℃で３０分間、Ｎ_２で撹拌した。次に、樹脂をＤＭＦ（３００ｍＬ×５）で洗浄した。

３） 脱保護：ＤＭＦ（３００ｍｌ）中の２０％ピペリジンを該樹脂に添加し、該混合物を２０℃で２０分間、Ｎ_２で撹拌した。

４） 他のすべてのアミノ酸について、工程２および３を繰り返した：
表１１：実施例１３に使用した試薬

ＤＭＦ中の２０％ピペリジンをＦｍｏｃ脱保護に３０分間使用した。カップリング反応をニンヒドリン（Ｐｒｏを除くすべてのアミノ酸）およびクロラニル試験（Ｐｒｏ）によってモニターし、樹脂をＤＭＦ（３００ｍＬ）で５回洗浄した。

ＨＢＴＵ、ＤＩＥＡサプライヤー：Ｓｕｚｈｏｕ Ｈｉｇｈｆｉｎｅ Ｂｉｏｔｅｃｈ Ｃｏ、Ｌｔｄ．
ペプチドの切断および精製
５） 樹脂をＭｅＯＨ（３００ｍＬ×５）で洗浄し、真空下で乾燥させて、４１．５ｇのペプチド樹脂を得た。次いで、４００ｍｌの切断緩衝液（９２．５％ＴＦＡ／２．５％３－メルカプトプロピオン酸／２．５％ＴＩＳ／２．５％Ｈ_２Ｏ）を、側鎖保護ペプチド樹脂を含有するフラスコに２０℃で添加し、混合物を２．５時間撹拌し、次いで濾過した。

６） ペプチドを冷ｔｅｒｔ－ブチルメチルエーテル（４０００ｍＬ）で沈殿させ、遠心分離（３０００ｒｐｍで３分間）して、粗固体ペプチドを得た。粗ペプチド沈殿物をｔｅｒｔ－ブチルメチルエーテルでさらに３回洗浄した（１０００ｍＬ×３）。次いで、粗ペプチドを真空下で２．０時間乾燥させて、２１．８ｇの粗ペプチドを得た。

７） 粗ペプチド（２１．８ｇ）をＣＨ_３ＣＮ（６．５Ｌ）および水（６．５Ｌ）に溶解し、黄色が持続するまで、Ｉ_２（ＭｅＯＨ中に０．１Ｍ、５５ｍＬ）を２０℃で添加した。次に、混合物を２０℃で２分間撹拌した。次いで、チオ硫酸ナトリウム溶液（水中に０．１Ｍ、１５ｍＬ）を、黄色が消えるまで滴下した。次いで、混合物を凍結乾燥して、粗粉末（２２．７ｇ）を得た。

８） 分取ＨＰＬＣによる粗ペプチドの精製（条件：Ａ：水中に０．０７５％ＴＦＡ Ｂ：ＣＨ_３ＣＮ）、生成物含有画分の収集、および凍結乾燥により、白色固体として、標的ペプチド（配列ＩＤ１３）が得られた
；（４３０５．１ｍｇ，収率１８．３％、１１０Å Ｃ１８ ＲＰ－ＨＰＬＣカラム（Ｇｅｍｉｎｉ Ｃ１８ ５μｍ １１０Å １５０ｘ４．６ｍｍ）によって９９．１％；３００Å Ｃ１８ ＲＰ－ＨＰＬＣカラム（Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ ＢＩＯ Ｗｉｄｅ Ｐｏｒｅ Ｃ１８ ５μｍ ３００Å １５０ｘ４．６ｍｍ）によって９７．８％、ＴＦＡ塩）。

表１２：精製条件

ＬＣ－ＭＳ：Ｒｔ＝１．３６９分；１５６４［Ｍ＋２Ｈ］＋
Ｒｔ＝８．７２分（純度９９．１％） Ｇｅｍｉｎｉ Ｃ１８ ５μｍ １１０Å １５０ｘ４．６ｍｍ
Ｒｔ＝９．４２分（９７．８％） Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ ＢＩＯ Ｗｉｄｅ Ｐｏｒｅｉ Ｃ１８ ５μｍ ３００Å １５０ｘ４．６ｍｍ
実施例１３（ＴＦＡ塩）から、実施例２９（ＨＣｌ塩）を一般的方法Ｆを用いて調製することができ；実施例５（無塩形態）を一般的方法Ｇを用いて調製することができる。実施例５からの実施例４３１（ナトリウム塩）および実施例４３２（コリン塩）の調製物を、それぞれ実施例４３１および実施例４３２として以下に示す。

実施例２３７
ＡＩＣ＋ＳＲＳＬ－（Ｌ－デヒドロプロリン）－（Ｏｉｃ）－Ｉ－（Ｐｅｎ）＋ＩＰＤ－ＯＨ（実施例２３７）
Ｎ－［（６Ｓ，９Ｓ，１２Ｓ，１５Ｓ，１８Ｒ，２３Ｒ，２６Ｓ，２８ａＳ，３５ａＳ）－１８－［（Ｌ－アラニル－Ｌ－イソロイシル）アミノ］－２６－［（２Ｓ）－ブタン－２－イル］－１２－（３－カルバムイミドアミドプロピル）－９，１５－ビス（ヒドロキシメチル）－２２，２２－ジメチル－６－（２－メチルプロピル）－５，８，１１，１４，１７，２５，２８，３５－オクタオキソ－６，７，８，９，１０，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７，１８，１９，２３，２４，２５，２６，２７，２８，２８ａ，２９，２９ａ，３０，３１，３２，３３，３３ａ，３５，３５ａ－トリアコンタヒドロ－３Ｈ，５Ｈ，２２Ｈ－ピロロ［２’，１’：１３，１４］［１，２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６］ジチアオクタアザシクロノナコシノ［１１，１０－ａ］インドール－２３－カルボニル］－Ｌ－イソロイシル－Ｌ－プロリル－Ｌ－アスパラギン酸

方法Ｃに従ってペプチドを調製した（３．１２ｇ）。このペプチドの分析データを表１６および表１７に示す。

実施例１４２
ＡＩＣ＋ＳＲＳＬ－（Ｐｒｏ－Ｄ２）－（Ｏｉｃ）－Ｉ－（Ｐｅｎ）＋ＩＰＤ－ＯＨ（実施例１４２）
Ｎ－［（１Ｒ，２Ｓ，６Ｓ，９Ｓ，１２Ｓ，１５Ｓ，１８Ｒ，２３Ｒ，２６Ｓ，２８ａＳ，３５ａＳ）－１８－［（Ｌ－アラニル－Ｌ－イソロイシル）アミノ］－２６－［（２Ｓ）－ブタン－２－イル］－１２－（３－カルバムイミドアミドプロピル）－９，１５－ビス（ヒドロキシメチル）－２２，２２－ジメチル－６－（２－メチルプロピル）－５，８，１１，１４，１７，２５，２８，３５－オクタオキソ（１，２－^２Ｈ_２）ドトリアコンタヒドロ－１Ｈ，５Ｈ，２２Ｈ－ピロロ［２’，１’：１３，１４］［１，２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６］ジチアオクタアザシクロノナコシノ［１１，１０－ａ］インドール－２３－カルボニル］－Ｌ－イソロイシル－Ｌ－プロリル－Ｌ－アスパラギン酸

実施例２３７からのペプチド（３０ｍｇ、１９．２μｍｏｌ）をメタノール－ｄ４（３ｍＬ）（純度９９．８％のＤ）に溶解し、ロジウムブラック（ＣＡＳ ７４４０－１６－６、ＡＣＢＲ、Ａｒｔｉｃｌｅ Ｎｏ．ＡＢ２５７４６）（１０ｍｏｌ％、１．９μｍｏｌ）を、Ｍ－Ｂｒａｕｎ Ｇｌｏｖｅｂｏｘにおいてアルゴン下で溶液に添加した。Ｃｈｅｍｓｐｅｅｄ Ｓｗｉｎｇ ＸＬプラットホーム上に配置され、Ｍ－Ｂｒａｕｎ Ｇｌｏｖｅｂｏｘ（Ｃｈｅｍｓｐｅｅｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ ＡＧ、Ｗｏｅｌｆｅｒｓｔｒａｓｓｅ ８，４４１４ Ｆｕｅｌｌｉｎｓｄｏｒｆ、Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ，Ｃｈｅｍｓｐｅｅｄ＠Ｃｈｅｍｓｐｅｅｄ．ｃｏｍ）内に封入されたＭＴＰ加圧反応器ブロックに８ｍｌの反応バイアルを入れた。反応物を６５０ｒｐｍの軌道速度で室温、３ｂａｒの重水素ガスの圧力下で１６時間一晩振盪した。圧力ブロックをアルゴンでパージし、バイアルを反応器ブロックから取り出した。メタノール－ｄ４をロータリーエバポレーターで蒸発させ、得られた固体を水（２ｍＬ）に溶解し、１時間撹拌して、交換可能な重水素原子を水素と交換した。１時間後、アセトニトリルを加え、生成物を逆相ＨＰＬＣで精製した［カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ａｅｒｉｓ Ｐｅｐｔｉｄｅ ５μ ＸＢ－Ｃ１８、ＡＸＩＡ Ｐａｃｋｅｄ、２１．２ｘ２５０ｍｍ＋カートリッジ５μ、流量：２０ｍＬ／分、Ｈ_２Ｏ／ＡＣＮ（酸性調整剤として０．１％ＴＦＡを含む）を使用した集束グラディエント。ＦＯＫ３０－４０：０分５％ＡＣＮ、０－１３分３０％ＡＣＮへの傾斜、１３－３９分４０％ＡＣＮへの平坦な傾斜、３９－４６分４０％ＡＣＮ均一］。生成物を含むクロマトグラフィー画分を分析ＨＰＬＣ（集束グラディエント）およびＬＣ－ＭＳにより分析し、それに従ってプールして、純生成物の２つの画分：１１．４ｍｇ（純度９０％、収率３４％）および４．２ｍｇ（純度９９％、収率１４％）を得た。このペプチドの分析データを表１６に示す。

生成ペプチドをトリプシン消化し、続いてジチオトレイトールと反応させ、得られたフラグメントをＴＯＦ－ＭＳ－ＭＳによって分析した。トリプシン消化は、アルギニンとセリンとの間のペプチドを切断した（正確な質量１５８３．８３８４、見出された１５８３．８５２［Ｍ＋２Ｈ］２＋）。ジチオトレイトールとの反応は２つのフラグメント、ＡＩＣＳＲ－ＯＨ（正確な質量５４８．２７４１、見出された５４８．２８３［Ｍ＋Ｈ］＋）およびＳＬ－（Ｐｒｏ－Ｄ２）－（Ｏｉｃ）－Ｉ－（Ｐｅｎ）＋ＩＰＤ－ＯＨ（正確な質量１０３７．５８００、見出された１０３８．５８７［Ｍ＋Ｈ］＋）を生成し、８３８．４７ａｍｕ（（Ｐｒｏ－Ｄ２）－（Ｏｉｃ）－Ｉ－（Ｐｅｎ）＋ＩＰＤ－ＯＨ）および７３８．４０ａｍｕＳＬ－（（Ｏｉｃ）－Ｉ－（Ｐｅｎ）＋ＩＰＤ－ＯＨ）のフラグメントで重水素の位置を確認した。

実施例２８Ａ
（２Ｓ，３ａＳ，６ａＳ）－オクタヒドロシクロペンタ［ｂ］ピロール－２－カルボン酸－塩化水素（１／１）（単一の立体異性体）

反応はアルゴン雰囲気下で行った。炭素上パラジウム（２００ｍｇ、１０％）に、２０ｍＬのメタノールおよびベンジル（２Ｓ，３ａＳ，６ａＳ）－オクタヒドロシクロペンタ［ｂ］ピロール－２－カルボン酸塩－塩化水素（１／１）（１．００ｇ、３．５５ｍｍｏｌ）を添加した。反応フラスコに水素ガス（１気圧）を入れ、反応混合物を水素雰囲気下、室温で一晩撹拌した。反応混合物を珪藻土で濾過し、濾過ケーキをメタノールで洗浄した。濾液を蒸発させ、真空下で乾燥させて、６９８ｍｇの標的化合物を得た。

（２Ｓ，３ａＳ，６ａＳ）－オクタヒドロシクロペンタ［ｂ］ピロール－２－カルボン酸は、無塩形態として市販もされている。

実施例２９Ａ
（２Ｓ，３ａＳ，６ａＳ）－１－｛［（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ］カルボニル｝オクタヒドロシクロペンタ［ｂ］ピロール－２－カルボン酸（単一の立体異性体）

１２ｍＬの水中の（２Ｓ，３ａＳ，６ａＳ）－オクタヒドロシクロペンタ［ｂ］ピロール－２－カルボン酸－塩化水素（１／１）（６８０ｍｇ，３．５５ｍｍｏｌ）に、重炭酸ナトリウム（２．９８ｇ，３５．５ｍｍｏｌ）と１８ｍＬのアセトン中の１－（｛［（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ］カルボニル｝オキシ）ピロリジン－２，５－ジオン（Ｆｍｏｃ－ＯＳｕ）（１．２６ｇ，３．７３ｍｍｏｌ）の溶液を加えた。反応混合物を室温にて一晩撹拌した。反応混合物を水で処理し、１Ｍ塩酸で酸性化し、酢酸エチルで２回抽出した。有機相を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、次いで蒸発させた。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ Ｉｓｏｌｅｒａ、カラム：５０ｇ ＳＮＡＰ Ｕｌｔｒａ；溶離液：ジクロロメタン／メタノール １００：２～１００：５）により分離した。適切な画分を合わせ、蒸発させ、真空下で乾燥させて、１．２７ｇ（純度９９％、収率９４％）の標的化合物を得た。

LC-MS (方法 10): R_t = 2.08 分; MS (ESI pos): m/z = 378 [M+H]^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.260 (1.76), 1.274 (1.85), 1.299 (1.78), 1.321 (2.09), 1.335 (2.38), 1.440 (0.92), 1.455 (1.10), 1.473 (0.87), 1.521 (3.61), 1.537 (3.86), 1.551 (2.28), 1.607 (4.53), 1.620 (3.68), 1.640 (3.08), 1.653 (1.66), 1.712 (2.02), 1.781 (1.38), 1.816 (2.30), 1.827 (2.26), 1.839 (2.37), 1.855 (1.68), 2.073 (1.20), 2.305 (0.83), 2.328 (1.99), 2.351 (1.35), 2.360 (1.64), 2.384 (0.92), 2.468 (0.60), 2.606 (1.50), 2.670 (1.11), 3.860 (0.94), 3.874 (1.94), 3.893 (1.95), 3.907 (0.92), 4.143 (2.61), 4.156 (3.68), 4.167 (5.16), 4.186 (5.89), 4.266 (1.43), 4.280 (3.20), 4.294 (2.11), 4.345 (1.31), 4.371 (3.19), 4.386 (3.83), 4.396 (4.39), 4.411 (3.74), 4.422 (2.40), 4.437 (0.98), 7.292 (0.97), 7.311 (3.89), 7.329 (6.99), 7.346 (6.08), 7.363 (2.49), 7.395 (9.91), 7.414 (16.00), 7.432 (6.98), 7.663 (9.73), 7.680 (6.46), 7.879 (12.31), 7.897 (11.49), 12.586 (0.80).
実施例３０Ａ
（１Ｒ，３Ｓ，５Ｒ）－２－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－３－カルボン酸（単一の立体異性体）

（１Ｒ，３Ｓ，５Ｒ）－２－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）－２－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－３－カルボン酸（ＣＡＳ ＲＮ：１９７１４２－３４－０、５００ｍｇ）を４ＭＨＣｌ－ジオキサン溶液（３ｍＬ）に溶解し、室温で８時間撹拌した。溶媒を蒸発させ、粗生成物を次の工程に直接使用した。

実施例３１Ａ
（１Ｒ，３Ｓ，５Ｒ）－２－｛［（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ］カルボニル｝－２－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－３－カルボン酸（単一の立体異性体）

３ｍＬの水中の（１Ｒ，３Ｓ，５Ｒ）－２－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－３－カルボン酸（実施例３０Ａ、２８０ｍｇ、２．２０ｍｍｏｌ）の溶液に、重炭酸ナトリウム（１．８５ｇ、２２．０ｍｍｏｌ）および４．５ｍＬのアセトン中の１－（｛［（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ］カルボニル｝オキシ）ピロリジン－２，５－ジオン（０．７８ｇ、２．３１ｍｍｏｌ）の溶液を加えた。反応混合物を室温にて一晩撹拌した。反応混合物を水で処理し、酢酸エチルで２回抽出した。有機相を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、次いで濃縮した。粗生成物を分取逆相ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ；Ｃ１８；１０μｍ；１２５×３０ｍｍ；溶離液Ａ：ＣＡＮ、溶離液Ｂ：０．１％ギ酸を含む水）によって精製し、生成物含有画分を合わせ、凍結乾燥して、８８．０ｍｇ（純度９６％、収率１１％）の標的化合物を得た。

LC-MS (方法 11): R_t = 1.32 分; MS (ESI pos): m/z = 372 [M+Na]^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.15), -0.008 (10.73), 0.008 (9.13), 0.146 (1.21), 0.468 (1.54), 0.534 (3.66), 0.803 (4.38), 1.682 (2.68), 2.072 (0.75), 2.128 (2.19), 2.142 (2.32), 2.223 (1.05), 2.293 (2.19), 2.327 (4.45), 2.349 (2.68), 2.366 (2.75), 2.523 (3.89), 2.670 (1.44), 2.710 (1.31), 2.816 (0.82), 3.413 (3.93), 3.757 (1.83), 4.010 (2.91), 4.140 (2.39), 4.211 (3.11), 4.285 (12.30), 6.929 (0.43), 6.950 (0.43), 7.340 (9.91), 7.358 (6.02), 7.406 (10.08), 7.425 (16.00), 7.443 (7.10), 7.650 (2.85), 7.702 (4.52), 7.724 (5.53), 7.746 (3.40), 7.892 (12.40), 7.910 (9.85), 12.680 (0.65).
このアミノ酸をＦｍｏｃ ＳＰＰＳに使用した。このｆｍｏｃアミノ酸は市販もされている。

実施例３２Ａ
ベンジル（２Ｒ，４Ｒ）－４－［（２Ｓ）－ブタン－２－イル］－２－ｔｅｒｔ－ブチル－５－オキソ－１，３－オキサゾリジン－３－カルボキシレート（単一の立体異性体）

１２０ｍＬのエタノール中のＤ－アロイソロイシン（８．０６ｇ、６１．４ｍｍｏｌ）の懸濁液に、１１ｍＬの水中の２．４５ｇの水酸化ナトリウムから作製された水酸化ナトリウム溶液を添加した。反応混合物を室温で９０分間撹拌し、次いで蒸発させた。残渣をペンタン１９５ｍＬで処理し、次いで２，２－ジメチルプロパナール（１０ｍＬ、９２ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を、丸底フラスコに取り付けたＤｅａｎ－Ｓｔａｒｋトラップを用いて４５℃で２４時間撹拌した。冷却後、溶媒を蒸発させ、残渣をトルエンで数回乾燥させた（共沸蒸留）。残渣を１６５ｍＬのジクロロメタンで処理し、０℃に冷却した。ベンジルカルボノクロリデート（１３ｍＬ、９２ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を０～４℃で１週間撹拌した。４－ジメチルアミノピリジン（３７５ｍｇ、３．１ｍｍｏｌ）および６５ｍＬの水を反応混合物に添加し、反応混合物を室温にし、次いで室温で一晩撹拌した。反応混合物を酢酸エチルで数回処理し、抽出した。合わせた有機相を１０％クエン酸水溶液で２回、次いで飽和重炭酸ナトリウム水溶液で２回洗浄した。水相を酢酸エチルで再抽出した。合わせた有機相を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、次いで蒸発させた。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（Ｉｓｏｌｅｒａ；溶離液：シクロヘキサン／酢酸エチル１００：３～１００：７）により精製した。生成物含有画分を合わせ、蒸発させ、次いで真空下で乾燥させて、８．７１ｇの標的化合物を得た。

実施例３３Ａ
ベンジル（２Ｒ，４Ｒ）－４－［（２Ｓ）－ブタン－２－イル］－２－ｔｅｒｔ－ブチル－４－メチル－５－オキソ－１，３－オキサゾリジン－３－カルボキシレート（単一の立体異性体）

反応はアルゴン雰囲気下で行った。１００ｍＬの乾燥ＴＨＦ中のベンジル（２Ｒ，４Ｒ）－４－［（２Ｓ）－ブタン－２－イル］－２－ｔｅｒｔ－ブチル－５－オキソ－１，３－オキサゾリジン－３－カルボキシレート（実施例３２Ａ、８．１２ｇ、２４．４ｍｍｏｌ）を－７８℃に冷却した。ヘキサメチルジシラジドカリウム（４４ｍＬ、２９ｍｍｏｌ）を滴下し、反応混合物を－７８℃で２時間撹拌した。ヨードメタン（２．３ｍＬ、３７ｍｍｏｌ）を反応混合物に滴下し、反応混合物を室温で２．５時間撹拌した。反応混合物に飽和塩化アンモニウム水溶液（２０ｍＬ）を加え、反応混合物を室温にした後、生成物を酢酸エチル中に抽出した。合わせた有機相を飽和重炭酸ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、次いで濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（Ｉｓｏｌｅｒａ、カラム：１００ｇ ＳＮＡＰ Ｕｌｔｒａ；溶離液：シクロヘキサン／酢酸エチル １００：３～１００：７）により精製した。生成物含有画分を合わせ、蒸発させ、次いで真空下で乾燥させて、３．２ｇの標的化合物を得た。

実施例３４Ａ
Ｎ－［（ベンジルオキシ）カルボニル］－２－メチル－Ｄ－アロイソロイシン（単一の立体異性体）

ベンジル（２Ｒ，４Ｒ）－４－［（２Ｓ）－ブタン－２－イル］－２－ｔｅｒｔ－ブチル－４－メチル－５－オキソ－１，３－オキサゾリジン－３－カルボキシレート（実施例３３Ａ、３．２０ｇ、９．２１ｍｍｏｌ）のメタノール（４０ｍＬ）溶液に１Ｍ水酸化ナトリウム溶液（４０ｍＬ）を加えた。反応混合物を還流下で２時間撹拌した。冷却後、メタノールを蒸発させた。残渣を１０％クエン酸溶液で処理し、生成物を酢酸エチル中に抽出した。水相を酢酸エチルでさらに２回抽出した。合わせた有機相を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥し、濾過し、蒸発させ、次いで真空下で乾燥させて、２．７７ｇの標的化合物を得た。

実施例３５Ａ
２－メチル－Ｄ－アロイソロイシン（単一の立体異性体）

反応はアルゴン雰囲気下で行った。１９０ｍＬのメタノール中のＮ－［（ベンジルオキシ）カルボニル］－２－メチル－Ｄ－アロイソロイシン（実施例３４Ａ、２．５７ｇ、９．２０ｍｍｏｌ）に、パラジウム炭素（３９０ｍｇ、１０％）を添加した。反応混合物を水素雰囲気下、室温、常圧で４時間撹拌した。反応混合物を珪藻土で濾過し、濾液を濃縮し、次いで真空下で乾燥させて、１．３２ｇ（収率９８％）の標的化合物を得た。

実施例３６Ａ
Ｎ－｛［（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ］カルボニル｝－２－メチル－Ｄ－アロイソロイシン（単一の立体異性体）

水（２０ｍＬ）およびアセトン（２９ｍＬ）の混合物中の２－メチル－Ｄ－アロイソロイシン（実施例３５Ａ、１．３２ｇ、９．０９ｍｍｏｌ）の溶液に、重炭酸ナトリウム（７．６４ｇ、９０．９ｍｍｏｌ）を添加し、次いでアセトン（２０ｍＬ）中の１－（｛［（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ］カルボニル｝オキシ）ピロリジン－２，５－ジオン（３．２２ｇ、９．５５ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。反応混合物を室温にて一晩撹拌した。反応混合物をＭＴＢＥで処理し、抽出した。水相を濃塩酸で酸性化し（ｐＨ１）、および酢酸エチルでさらに３回抽出した。合わせた有機相を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させた。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（Ｉｓｏｌｅｒａ、カラム：５０ｇ ＳＮＡＰ Ｕｌｔｒａ；溶離液：ジクロロメタン／メタノール １００：３～１００：５）により分離した。適切な画分を合わせ、蒸発させ、次いで真空下で乾燥させた。

続いて、ＭＴＢＥ相を５％重炭酸ナトリウム溶液で処理し、酢酸エチル（６００ｍＬ）で抽出した。水相を濃塩酸で酸性化し（ｐＨ１）、および酢酸エチルでそれぞれ抽出した。合わせた有機相を硫酸マグネシウム上で乾燥し、濾過し、蒸発させ、次いで真空下で乾燥した。合わせた粗生成物収量は２．５３ｇであった。

残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（Ｉｓｏｌｅｒａ、カラム：５０ｇ ＳＮＡＰ Ｕｌｔｒａ；溶離液：ジクロロメタン／メタノール ９７：３～９７：５）により精製した。生成物含有画分を合わせ、蒸発させ、次いで真空下で乾燥させて、９６７．４ｍｇの標的化合物を得た。生成物をさらに水／アセトニトリルに溶解し、使用前に凍結乾燥した。

LC-MS (方法 10): R_t = 2.10 分; MS (ESI pos): m/z = 368.1857 [M+H]⁺
このアミノ酸をＦｍｏｃ ＳＰＰＳに使用した。

実施例３７Ａ
（６Ｓ）－１，１－ジフルオロ－５－アザスピロ［２．４］ヘプタン－６－カルボン酸（立体異性体の混合物）

８５ｍＬのジクロロメタン中の（６Ｓ）－５－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）－１，１－ジフルオロ－５－アザスピロ［２．４］ヘプタン－６－カルボン酸（Ｏｍｅｇａ、ＣＡＳ １３５７４８２－０３－１）（２．５０ｇ、９．０２ｍｍｏｌ）にトリフルオロ酢酸（１５ｍＬ、２５０ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で２時間撹拌した。反応混合物を濃縮し、次の工程のために真空下で乾燥させた。

実施例３８Ａ
（６Ｓ）－５－｛［（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ］カルボニル｝－１，１－ジフルオロ－５－アザスピロ［２．４］ヘプタン－６－カルボン酸（立体異性体の混合物）

水（１３ｍＬ）中の（６Ｓ）－１，１－ジフルオロ－５－アザピロ［２．４］ヘプタン－６－カルボン酸（立体異性体の混合物）（実施例３７Ａ、１．６０ｇ、９．０３ｍｍｏｌ）の溶液に、重炭酸ナトリウム（７．５９ｇ、９０．３ｍｍｏｌ）、次いでアセトン（２０ｍＬ）中の１－（｛［（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ］カルボニル｝オキシ）ピロリジン－２，５－ジオン（３．２０ｇ、９．４８ｍｍｏｌ）の溶液を加えた。反応混合物を室温にて一晩撹拌した。反応混合物を水で処理し、ＭＴＢＥで２回抽出した。水相を塩酸でｐＨ３に酸性化し、ジクロロメタンで３回抽出した。有機相を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、蒸発させ、真空下で乾燥させて、３．３１ｇ（収率９２％）の標的化合物を得た。

LC-MS (方法 10): R_t = 1.99 分; MS (ESI pos): m/z = 400 [M+H]^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.106 (16.00), 1.589 (0.92), 1.605 (1.39), 1.619 (1.06), 1.627 (1.11), 1.655 (0.62), 1.682 (1.25), 1.703 (1.21), 1.916 (0.49), 1.949 (0.86), 1.978 (0.91), 2.012 (0.85), 2.042 (0.52), 2.086 (11.35), 2.558 (0.83), 2.568 (0.67), 2.591 (0.67), 2.645 (0.52), 2.670 (0.56), 3.077 (5.29), 3.442 (0.43), 3.452 (0.50), 3.471 (1.17), 3.479 (1.13), 3.500 (1.39), 3.527 (0.51), 3.562 (1.21), 3.627 (1.20), 3.652 (1.65), 3.677 (0.78), 4.186 (1.02), 4.200 (2.72), 4.223 (2.09), 4.238 (2.18), 4.257 (1.63), 4.279 (2.63), 4.294 (2.46), 4.306 (1.36), 4.322 (1.56), 4.348 (2.13), 4.359 (1.17), 4.372 (1.33), 4.382 (0.84), 4.477 (0.57), 4.499 (0.61), 4.510 (0.69), 4.518 (0.72), 4.533 (0.73), 4.541 (0.64), 5.754 (0.94), 7.300 (0.77), 7.316 (3.26), 7.334 (5.65), 7.353 (3.32), 7.406 (4.71), 7.425 (7.78), 7.443 (3.45), 7.640 (4.69), 7.659 (4.35), 7.683 (0.73), 7.884 (5.08), 7.903 (4.79).
実施例３９Ａ
（６Ｓ）－５－｛［（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ］カルボニル｝－１，１－ジフルオロ－５－アザスピロ［２．４］ヘプタン－６－カルボン酸（エナンチオマー１）及び（エナンチオマー２）

Ｃｈｉｒａｌｐｃｅｌ ＡＤ－Ｈ（ＳＦＣ）５μｍ、２５０×３０ｍｍカラム；溶離液：ＣＯ_２／イソプロパノール（８３：１７）；圧力：１３５バール；溶離液温度：３８℃；サイクロン温度：４０℃；サイクロン圧力：２４バール；流量：１００ｇ／分；検出：ＵＶ２１０ｎｍ；注射容量：０．４ｍＬ／注射；通常の操作条件下で、ＣＯ_２の１ｇ／分は約１ｍＬ／分に等しい、を使用するＴＨＡＲ超臨界流体クロマトグラフィーＰｒｅｐ ２００装置を使用して、ジアステレオマー混合物を分離した
シーケンス設定：サイクルタイム＝１１，２分
画分１を５．８５分～８．０分の間で収集した（エナンチオマー１）
画分２を８．４分～１０．２５分の間で収集した（エナンチオマー２）
画分を濃縮した。

分析ＳＦＣ－ＭＳ（Ａｇｉｌｅｎｔ、カラム：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＡＤ－３ ３μｍ １００×４，６ｍｍ、溶離液：ＣＯ_２／ｉｓｏ－プロパノール（８５：１５）；ＢＰＲ圧力：１３０ｂａｒ；ＢＰＲ温度：６０°Ｃ；カラム温度：４０°Ｃ；流量：３ｍＬ／分；ＵＶ ２１０ｎｍ）を用いて画分を分析した。

画分１（ｒｔ＝２．０８１分）には「（エナンチオマー１）」の追加が割り当てられた。

画分２（ｒｔ＝２．８３８分）には「（エナンチオマー２）」の追加が割り当てられた。

２つのエナンチオマーの立体化学は割り当てられなかった。

実施例４０Ａ
（３Ｒ＊，６Ｓ）－５－｛［（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ］カルボニル｝－１，１－ジフルオロ－５－アザピロ［２．４］ヘプタン－６－カルボン酸（単一のエナンチオマー、エナンチオマー１、３位の立体化学は定義されていない）

キラルＳＦＣ分取精製から、２，０１５ｇの表題化合物（１００％ｅｅ）を得た。

LC-MS (方法 10): R_t = 1.99 分; MS (ESI pos): m/z = 400 [M+H]^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (0.70), 0.008 (0.74), 1.032 (15.85), 1.047 (16.00), 1.285 (1.59), 1.568 (0.69), 1.589 (1.52), 1.617 (1.57), 1.635 (0.96), 1.656 (0.63), 1.686 (1.36), 1.702 (1.37), 1.941 (0.90), 1.974 (1.05), 2.008 (0.87), 2.041 (0.90), 2.073 (1.11), 2.557 (1.08), 2.566 (0.95), 2.591 (0.80), 2.645 (0.71), 2.670 (0.95), 2.701 (0.65), 3.451 (0.87), 3.468 (1.64), 3.479 (1.88), 3.495 (1.12), 3.505 (1.17), 3.626 (2.11), 3.651 (2.91), 3.677 (1.38), 3.770 (0.41), 3.778 (0.42), 4.169 (0.43), 4.186 (1.17), 4.200 (3.11), 4.221 (2.05), 4.238 (1.40), 4.256 (1.57), 4.279 (3.79), 4.293 (3.74), 4.304 (1.62), 4.322 (2.70), 4.336 (1.12), 4.348 (2.93), 4.358 (1.92), 4.371 (1.64), 4.381 (1.52), 4.509 (1.14), 4.517 (1.25), 4.531 (1.28), 4.540 (1.12), 7.300 (0.91), 7.315 (3.87), 7.334 (7.04), 7.350 (3.82), 7.352 (4.21), 7.406 (5.88), 7.424 (9.76), 7.443 (4.35), 7.640 (7.54), 7.658 (6.74), 7.885 (6.80), 7.904 (6.34), 10.194 (0.55), 10.991 (0.42).
このアミノ酸をＦｍｏｃ ＳＰＰＳに使用した。

実施例４１Ａ
（３Ｓ＊，６Ｓ）－５－｛［（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ］カルボニル｝－１，１－ジフルオロ－５－アザピロ［２．４］ヘプタン－６－カルボン酸（単一のエナンチオマー、エナンチオマー２、シクロプロピル中心の立体化学は割り当てられていない）

キラルＳＦＣ分取精製から、１．０４１ｇの表題化合物が得られた（９４．５８％ｅｅ）。

LC-MS (方法 10): R_t = 1.93 分; MS (ESI pos): m/z = 400 [M+H]^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.19), 0.008 (1.31), 1.031 (0.55), 1.047 (0.56), 1.285 (0.60), 1.583 (1.53), 1.604 (4.87), 1.627 (5.45), 1.650 (3.25), 1.673 (2.78), 1.682 (3.76), 1.704 (3.11), 1.718 (0.95), 1.915 (3.17), 1.949 (3.55), 1.979 (3.13), 2.012 (3.33), 2.073 (3.85), 2.526 (1.60), 2.590 (1.44), 2.626 (1.61), 2.649 (0.89), 2.659 (0.80), 3.471 (2.04), 3.498 (5.50), 3.527 (3.26), 3.561 (7.96), 3.570 (4.68), 3.598 (0.84), 4.167 (0.94), 4.183 (2.75), 4.199 (6.46), 4.223 (7.75), 4.238 (9.60), 4.258 (5.95), 4.277 (4.06), 4.290 (3.98), 4.306 (3.80), 4.319 (4.63), 4.340 (4.17), 4.346 (4.47), 4.354 (2.34), 4.367 (3.96), 4.477 (3.66), 4.497 (3.66), 7.300 (1.97), 7.318 (8.34), 7.334 (11.70), 7.337 (12.42), 7.352 (6.35), 7.355 (6.41), 7.407 (9.62), 7.425 (16.00), 7.444 (7.11), 7.633 (6.46), 7.651 (10.65), 7.666 (6.62), 7.683 (4.36), 7.883 (9.71), 7.893 (10.32), 7.901 (9.57), 7.912 (8.99), 12.802 (0.79), 12.984 (0.67).
このアミノ酸をＦｍｏｃ ＳＰＰＳに使用した。

実施例４２Ａ
３－［４－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－１－イル］－Ｎ－｛［（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ］カルボニル｝－Ｌ－アラニン（単一の立体異性体）

水／ｔｅｒｔ．ブタノール／ジクロロメタン（１：１：１）の混合物２７ｍＬ中の３－アジド－Ｎ－｛［（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ］カルボニル｝－Ｌ－アラニン（１．００ｇ、２．８４ｍｍｏｌ）に、ｔｅｒｔ－ブチル プロパ－２－イノエート（５８０μＬ、４．３ｍｍｏｌ）、硫酸銅（ＩＩ）五水和物（７０９ｍｇ、２．８４ｍｍｏｌ）および水１４ｍＬ中のアスコルビン酸ナトリウム（１．４１ｇ、７．１０ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温にて一晩撹拌した。反応混合物を水で処理し、希クエン酸で酸性化し、ジクロロメタンで３回抽出した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、次いで蒸発させた。残渣をアセトニトリル／水に溶解し、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｃｈｒｏｍａｔｏｒｅｘ Ｃ１８ １０μｍ １２５×４０ｍｍ；０．０５％ＴＦＡを含む水－アセトニトリルグラディエント：０～２分、２５％アセトニトリル、２～２２分、２５～７５％アセトニトリル、２３～２６分、７５％アセトニトリル、２６～２８分で２５％アセトニトリルに戻し；流量１００ｍＬ／分）によって２回に分けて分離した。生成物含有画分を合わせ、蒸発させ、真空下で乾燥させて、１．０２ｇ（純度１００％、収率７５％）の標的化合物を得た。

LC-MS (方法 11): R_t = 1.30 分; MS (ESI neg): m/z = 477 [M-H]^-
このアミノ酸をＦｍｏｃ ＳＰＰＳに使用した。

実施例４３Ａ
５－アザスピロ［２．４］ヘプタン－１－カルボン酸－トリフルオロ酢酸（１／１）

２５ｍＬのジクロロメタン中の５－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）－５－アザスピロ［２．４］ヘプタン－１－カルボン酸（１．００ｇ、４．１４ｍｍｏｌ）の溶液に、ＴＦＡ（９６０μＬ、１２ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で２時間撹拌した。反応混合物を蒸発させ、真空下で乾燥させて、０．８０ｇ（収率７６％）の標的化合物を得た。

LC-MS (方法 9): R_t = 0.18 分; MS (ESI pos): m/z = 142 [M+H]⁺
実施例４４Ａ
５－｛［（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ］カルボニル｝－５－アザスピロ［２．４］ヘプタン－１－カルボン酸

５ｍＬのアセトニトリルおよび５ｍＬの水の混合物中の５－アザスピロ［２．４］ヘプタン－１－カルボン酸－トリフルオロ酢酸（１／１）（実施例４３Ａ、９９４ｍｇ、３．９０ｍｍｏｌ）の溶液に、１－（｛［（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ］カルボニル｝オキシ）ピロリジン－２，５－ジオン（２．６３ｇ、７．７９ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（２．２ｍＬ、１６ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温にて一晩撹拌した。反応混合物を水で処理し、１Ｍ塩酸でｐＨ４に酸性化し、次いでジクロロメタンで３回抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させた。残渣をアセトニトリルで粉砕し、次いで沈殿を濾過により集め、アセトニトリルで洗浄した。ろ液を、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｃｈｒｏｍａｔｏｒｅｘ Ｃ１８ １０μｍ １２５ｘ４０ｍｍ；０．０５％ＴＦＡを含む水－アセトニトリル－グラディエント：０～２分、２５％アセトニトリル、２～２２分、２５～７５％アセトニトリル、２３～２６分、７５％アセトニトリル、２６～２８分で２５％アセトニトリルに戻し；流量１００ｍＬ／分）によって３回に分けて精製した。適切な画分を合わせ、蒸発させ、真空下で乾燥させて、１．１６ｇ（９５％純度、７８％収率）の標的化合物を得た。

LC-MS (方法 9): R_t = 0.99 分; MS (ESI pos): m/z = 364 [M+H]⁺
このアミノ酸をＦｍｏｃ ＳＰＰＳに使用した。

実施例４５Ａ
ｔｅｒｔ－ブチル（３Ｓ，５Ｓ，６Ｒ）－３－（２－メチルアリル）－２－オキソ－５，６－ジフェニル－モルホリン－４－カルボキシレート

２つのバッチを並行して実施した：ＴＨＦ（１．８Ｌ）およびＨＭＰＡ（１８０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（２Ｒ，３Ｓ）－６－オキソ－２，３－ジフェニル－モルホリン－４－カルボキシレート（９０．０ｇ、２５５ｍｍｏｌ）および３－ブロモ－２－メチル－プロパ－１－エン（３７．０ｇ、２７．６ｍＬ、２７４ｍｍｏｌ）の溶液に、窒素雰囲気下、－７０°Ｃでビス（トリメチルシリル）アミドナトリウム（２７９ｍＬ、ＴＨＦ中１Ｍ）を６０分間かけて滴下した。次いで、溶液を－７０℃で３０分間撹拌した。反応物を合わせ、飽和塩化アンモニウム水溶液（２．５Ｌ）でクエンチし、次いで酢酸エチル（２．０Ｌ×２）で抽出した。合わせた有機相を飽和塩化ナトリウム水溶液（１．５Ｌ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空下で濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル＝１／０、１０／１）によって精製して、残渣を得、残渣と石油エーテル／ＥｔＯＡｃ（２．０Ｌ／０．２Ｌ）との混合物を２５℃で０．５時間撹拌し、次いで濾過して、標的化合物１４５ｇ（純度８９％、収率６２％）を得た。

LC-MS: Rt = 1.027 分, MS+Na = 430.2
¹H NMR: CDCl₃: 7.35-7.00 (m, 8H), 6.52 (m, 2H), 6.35-6.28 (m, 1H), 5.15-4.82 (m, 4H), 2.95-2.70 (m, 2H), 1.87 (s, 3H), 1.41 (s, 3H), 1.03 (s, 6H)
実施例４６Ａ
（３Ｓ，５Ｓ，６Ｒ）－３－［（１－メチルシクロプロピル）メチル］－５，６－ジフェニル－モルホリン－２－オン

３つのバッチを並行して行った。１．３Ｌのジクロロメタン中のｔｅｒｔ－ブチル（３Ｓ，５Ｓ，６Ｒ）－３－（２－メチルアリル）－２－オキソ－５，６－ジフェニル－モルホリン－４－カルボキシレート（実施例４５Ａ、３５．０ｇ、７６ｍｍｏｌ）の溶液に、ジエチル亜鉛（４００ｍＬ、トルエン中１Ｍ）を０℃で３０分かけて加え、次にクロロ（ヨード）メタン（１４０ｇ、７９３ｍｍｏｌ、５７．６ｍＬ）を０℃で３０分かけて加えた。反応物を０℃で１．５時間撹拌した。反応物を合わせ、２．０Ｌの飽和重炭酸ナトリウム水溶液に注ぎ、溶液を濾過し、次いで濾液をジクロロメタン（１．０Ｌ×２）で抽出した。合わせた有機相を１．５Ｌの飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、短いシリカ片を通して濾過した。次いで、濾液を濃縮して残渣を得た。残渣と石油エーテル／酢酸エチル／ジクロロメタン（１０／１／１、４００ｍＬ）との混合物を２５℃で０．５時間撹拌し、濾過した。濾液を約１２０ｍＬに濃縮し、次いで濾過して、２０ｇ（純度９２％、収率２５％）の標的化合物を得た。

LC/MS: Rt = 0.909 分, M+H+ = 322.2
実施例４７Ａ
（２Ｓ）－２－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルアミノ）－３－（１－メチルシクロプロピル）プロパン酸

エタノール（５０ｍＬ）、液体アンモニア（６００ｍＬ）、ＴＨＦ（５００ｍＬ）、および（３Ｓ，５Ｓ，６Ｒ）－３－［（１－メチルシクロプロピル）メチル］－５，６－ジフェニル－モルホリン－２－オン（実施例４６Ａ、５７．４ｇ）を含有する撹拌溶液を－７０℃に冷却し、リチウム（８ｇ、１．１５モル）を、－７０℃で深青色が１０分間持続するまで－７０℃で０．５時間かけて小片で添加した。５０ｍＬの２０％塩化アンモニウム水溶液を注意深く添加することによって反応を停止させ、冷浴を除去し、反応物を２５℃に加温した。反応混合物を３００ｍＬの水で希釈し、ＭＴＢＥ（２００ｍＬ×２）で抽出した。水相を氷中で冷却し、１Ｍ塩酸水溶液でｐＨ＝１に酸性化し、直ちに酢酸エチル（８００ｍＬ×２）で抽出した。合わせた酢酸エチル相を３００ｍＬの飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下で濃縮して、２４ｇ（９９ミリモル）の標的化合物を得た。

実施例４８Ａ
（２Ｓ）－２－アミノ－３－（１－メチルシクロプロピル）プロパン酸塩酸塩

ジクロロメタン（６０ｍＬ）中の（２Ｓ）－２－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルアミノ）－３－（１－メチルシクロプロピル）プロパン酸（実施例４７Ａ、２４．０ｇ、９９ｍｍｏｌ）の溶液に、塩酸／ジオキサン（２００ｍＬ、４Ｍ）を２５℃で１５分かけて加え、次いで溶液を２５℃で０．５時間撹拌した。反応物を濃縮して残渣を得た。残渣を１５０ｍＬのＭＴＢＥで処理し、２５℃で１５分間撹拌し、次いで濾過して、１６ｇ（収率９０％）の標的化合物を得た。

¹H NMR: DMSO-d6: 0.21-0.33 (3 H, m), 0.37-0.51 (1 H, m), 1.64-1.81 (2 H, d), 3.88-3.92 (1 H, t), 8.41 (3 H, s), 13.73 (1 H, s)
実施例４９Ａ
（２Ｓ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－（１－メチルシクロプロピル）プロパン酸

ＴＨＦ（２００ｍＬ）および水（２００ｍＬ）中の（（２Ｓ）－２－アミノ－３－（１－メチルシクロプロピル）プロパン酸塩酸塩（実施例４８Ａ、１４ｇ、７７．９ｍｍｏｌ）および炭酸ナトリウム（２５ｇ、２３６ｍｍｏｌ）の溶液に、１－（｛［（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ］カルボニル｝オキシ）ピロリジン－２，５－ジオン（２５ｇ、７４．１ｍｍｏｌ）を０℃で３０分かけて加え、次いで溶液を０℃で２時間撹拌した。１００ｍＬの水を加えた。溶液をＭＴＢＥ（３００ｍＬ×２）で抽出した後、水相のｐＨを２Ｍ塩酸水溶液で２に調整した。合わせた有機相を飽和塩化ナトリウム水溶液１５０ｍＬで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、シリカの小カラムを通して濾過した。濾液を濃縮して残渣を得た。合わせた残渣（以前の実験から）をシリカゲルクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル（１０：１、３：１））によって精製して、半純粋な残渣を得た。残渣を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｌｕｎａ Ｃ１８ ２５０×５０ｍｍ、１０μｍ；移動相：［水（０．０５％ＨＣｌ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：３８％－６８％、３１分、５０％分］によりさらに精製して、２４．４ｇ（純度９７％、収率７４％）の標的化合物を得た。

LC-MS: Rt = 0.914 分, [M+H]+ = 366.1
¹H NMR: CDCl₃: δ ppm 0.23- 0.40 (4 H, m), 1.02- 1.20 (3 H, m), 1.48- 1.95 (2 H, m), 4.22- 4.33 (1 H, m), 4.39 - 4.61 (3 H, m), 5.26- 5.33 (1 H, m), 7.31- 7.49 (4 H, m), 7.56- 7.81 (4 H, m).
このアミノ酸をＦｍｏｃ ＳＰＰＳに使用した。

実施例５０Ａ
Ｎ－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）－Ｄ－メチオニル－Ｌ－イソロイシン酸メチル

Ｎ－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）－Ｄ－メチオニン（２．４２ｇ、９．７１ｍｍｏｌ）、Ｌ－イソロイシン酸メチル－塩酸（１／１）（１．７６ｇ、９．７１ｍｍｏｌ）、１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－オール（１．７８ｇ、１１．６ｍｍｏｌ）、３－｛［（エチルイミノ）メチレン］アミノ｝－Ｎ，Ｎ－ジメチルプロパン－１－アミン塩酸塩（１：１）（２．２３ｇ、１１．６ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（３．５ｍＬ、２０ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（３０ｍＬ）に溶解した。混合物を周辺温度で１６時間撹拌した。次に水（１００ｍＬ）を加え、混合物を酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機抽出物を、塩酸、水（１０ｍＬ）、飽和重炭酸ナトリウム水溶液（１０ｍＬ）およびブラインで連続的に洗浄し、次いで、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。有機層を濾過し、濾液を濃縮した。残渣をエーテルに溶解し、生成物を結晶化させた。固体を濾過し、エーテルおよびペンタンで連続的に洗浄した。３．１３ｇ（純度９９％、収率８６％）の表題化合物を得た。

実施例５１Ａ
メチル（２Ｓ、３Ｓ）－２－｛（３Ｒ）－３－［（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ］－２－オキソピロリジン－１－イル｝－３－メチルペンタノエート

メチルＮ－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）－Ｄ－メチオニル－Ｌ－イソロイシネート（実施例５０Ａ、２．８５ｇ、７．５７ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（４０ｍＬ）に溶解し、溶液を０℃に冷却した。トリメチルオキソニウムテトラフルオロボレート（１．１２ｇ、７．５７ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を室温で３時間撹拌した。炭酸カリウム（３．１３ｇ、２２．７１ｍｍｏｌ）を添加した。次に、混合物を１６時間加熱還流した。反応混合物をジクロロメタン５０ｍＬに注ぎ、水で５回洗浄した。有機層をブラインで洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、濾過した。濾液を濃縮し、ヘキサンから結晶化して、２．０１ｇ（純度１００％、収率８１％）の表題化合物を得た。

実施例５２Ａ
（２Ｓ，３Ｓ）－２－｛（３Ｒ）－３－［（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ］－２－オキソピロリジン－１－イル｝－３－メチルペンタン酸

メチル（２Ｓ，３Ｓ）－２－｛（３Ｒ）－３－［（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ］－２－オキソピロリジン－１－イル｝－３－メチルペンタノエート（実施例５１Ａ、１．９６ｇ、５．９７ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（７．８ｍＬ）およびメタノール（７．８ｍＬ）に溶解した。８ｍＬの水中の水酸化リチウム（３００ｍｇ、１２．５ｍｍｏｌ）の溶液を添加し、混合物を室温で１時間撹拌した。反応混合物を濃縮した後、白色残渣を水（４０ｍＬ）に溶解し、ＤＣＭ（６ｍＬ）で洗浄し、次いで１Ｍ塩酸（１２ｍＬ）で酸性化した。混合物を酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機抽出物を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、次いで濃縮した。残渣を酢酸エチルおよびヘキサンから結晶化させて、表題化合物１．３ｇ（純度１００％、収率６７％）を得た。

LC-MS: Rt = 0.914 分, [M+H]+ = 366.1
¹H NMR: CDCl₃: δ ppm 0.23- 0.40 (4 H, m), 1.02- 1.20 (3 H, m), 1.48- 1.95 (2 H, m), 4.22- 4.33 (1 H, m), 4.39 - 4.61 (3 H, m), 5.26- 5.33 (1 H, m), 7.31- 7.49 (4 H, m), 7.56- 7.81 (4 H, m).
実施例５３Ａ
Ｎ－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）グリシル－Ｌ－イソロイシン酸メチル

メチルＬ－イソロイシネート（３．００ｇ、２０．７ｍｍｏｌ）およびＮ－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）グリシン（３．９８ｇ、２２．７ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（２０ｍＬ）に溶解した。この溶液を氷浴中で０～５℃に冷却した。Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（３．６ｍＬ、２１ｍｍｏｌ）、１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－オール水和物（３１６ｍｇ、２．０７ｍｍｏｌ）および１－（３－ジメチルアミノプロピル）－３－エチルカルボジイミド塩酸塩（４．３６ｇ、２２．７ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で撹拌した。反応混合物を濃塩化アンモニウム水溶液でクエンチし、酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機抽出物を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（シクロヘキサン／酢酸エチル０％～１０％）により精製して、表題化合物５．４０ｇ（純度９０％、収率７８％）を得た。

LC-MS (方法 11): R_t = 1.13 分; MS (ESI pos): m/z = 247 [M-tBu]^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.819 (4.90), 0.835 (8.09), 0.853 (2.63), 1.152 (0.40), 1.174 (0.45), 1.354 (1.52), 1.375 (16.00), 1.459 (0.46), 3.561 (0.84), 3.571 (0.98), 3.577 (1.45), 3.594 (0.81), 3.630 (11.35), 4.220 (0.63), 4.237 (0.78), 4.240 (0.82), 4.257
実施例５４Ａ
グリシル－Ｌ－イソロイシン酸メチル

メチルＮ－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）グリシル－Ｌ－イソロイシネート（実施例５３Ａ、１．５０ｇ、４．９６ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（２７ｍＬ）に溶解した。トリフルオロ酢酸（３．０ｍＬ、３９ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で３０分間撹拌した。反応混合物を濃縮して粗生成物を得、これを次の工程に直接使用した。

実施例５５Ａ
Ｎ－（４－ニトロベンゼン－１－スルホニル）グリシル－Ｌ－イソロイシン酸メチル

メチルグリシル－Ｌ－イソロイシネート（実施例５４Ａ、１．００ｇ、４．９６ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（４０ｍＬ、６２０ｍｍｏｌ）に溶解し、トリエチルアミン（２．４ｍＬ、１７ｍｍｏｌ）を加え、次いで溶液を０℃に冷却した。４－ニトロベンゼン－１－スルホニルクロリド（１．２１ｇ、５．４６ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を１時間撹拌した。次いで、反応物を濃塩化アンモニウム水溶液でクエンチし、酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機抽出物を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、次いで濃縮して、表題化合物１．７０ｇ（収率７１％）を得た。生成物を次の工程に直接使用した。

実施例５６Ａ
メチル（２Ｓ、３Ｓ）－３－メチル－２－［４－（４－ニトロベンゼン－１－スルホニル）－２－オキソピペラジン－１－イル］ペンタノエート

メチルＮ－（４－ニトロベンゼン－１－スルホニル）グリシル－Ｌ－イソロイシネート（実施例５５Ａ、１．９２ｇ、４．９６ｍｍｏｌ）および１，２－ジブロモエタン（４．３ｍＬ、５０ｍｍｏｌ）をＤＭＦに溶解した。炭酸カリウム（６．８６ｇ、４９．６ｍｍｏｌ）を加え、混合物を６０℃に３時間加熱した。次いで、反応物を濃塩化アンモニウム水溶液でクエンチし、エーテルで３回抽出した。合わせた有機抽出物を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、次いで蒸発させた。粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（シクロヘキサン／酢酸エチル６：１）により精製して、表題化合物１．４０ｇ（純度９７％、収率６６％）を得た。

LC-MS (方法 11): R_t = 1.30 分; MS (ESI pos): m/z = 414 [M+H]⁺
実施例５７Ａ
メチル（２Ｓ、３Ｓ）－３－メチル－２－（２－オキソピペラジン－１－イル）ペンタノエート

メチル（２Ｓ、３Ｓ）－３－メチル－２－［４－（４－ニトロベンゼン－１－スルホニル）－２－オキソピペラジン－１－イル］ペンタノエート（実施例５６Ａ、１．４０ｇ、３．３９ｍｍｏｌ）およびベンゼンチオール（１．０ｍＬ、１０ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（２０ｍＬ）に溶解した。炭酸カリウム（９３６ｍｇ、６．７７ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で撹拌した。混合物を濾過し、蒸発させた。残渣をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（グラディエント ジクロロメタン／メタノール １００：０～９５：５）により精製して、３１０ｍｇ（収率４０％）の表題化合物を得、これを次の工程に直接使用した。

実施例５８Ａ
ｔｅｒｔ－ブチル４－［（２Ｓ，３Ｓ）－１－メトキシ－３－メチル－１－オキソペンタン－２－イル］－３－オキソピペラジン－１－カルボキシレート

メチル（２Ｓ、３Ｓ）－３－メチル－２－（２－オキソピペラジン－１－イル）ペンタノエート（実施例５７Ａ、３１０ｍｇ、１．３６ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１．７ｍＬ、２６ｍｍｏｌ）に溶解した。ジ－ｔｅｒｔ－ブチルジカーボネート（３７０μＬ、１．６ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を室温で１時間撹拌した。次いで、反応物を濃塩化アンモニウム水溶液でクエンチし、次いでＤＣＭ（２０ｍＬ）で３回抽出した。合わせた有機抽出物を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、次いで濃縮し、表題化合物４４０ｍｇ（純度９９％、収率９８％）を得た。

LC-MS (§方法 11): R_t = 1.27 分; MS (ESI pos): m/z = 273 [M+H-tBu]^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.807 (0.86), 0.826 (2.27), 0.844 (1.20), 0.870 (2.25), 0.887 (2.30), 1.410 (16.00), 3.645 (6.00), 3.963 (0.63), 3.970 (0.62), 4.766 (0.82), 4.792 (0.80), 5.754 (0.87).
実施例５９Ａ
（２Ｓ，３Ｓ）－２－［４－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）－２－オキソピペラジン－１－イル］－３－メチルペンタン酸

ｔｅｒｔ－ブチル４－［（２Ｓ、３Ｓ）－１－メトキシ－３－メチル－１－オキソペンタン－２－イル］－３－オキソピペラジン－１－カルボキシレート（実施例５８Ａ、４４０ｍｇ、純度８０％、１．０７ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１．４ｍＬ）およびメタノール（１．４ｍＬ）に溶解した。水（１．４ｍＬ）中の水酸化リチウム（５３．９ｍｇ、２．２５ｍｍｏｌ）の溶液を添加し、混合物を室温で１時間撹拌した。反応混合物を濃縮し、残渣を水に溶解し、次いでＤＣＭで洗浄した。水層を分離し、１Ｍ塩酸でｐＨ３～４に酸性化し、次いで酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、次いで減圧下で濃縮して、３１０ｍｇ（純度９５％、収率８７％）の表題化合物を無色油状物で得た。

LC-MS (方法 11): R_t = 1.11 分; MS (ESI neg): m/z = 313 [M-H]^-
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.809 (0.81), 0.827 (2.06), 0.845 (1.12), 0.908 (2.11), 0.924 (2.09), 1.411 (16.00), 3.438 (0.43), 3.968 (0.78), 4.688 (0.79), 4.713 (0.77).
実施例６０Ａ
Ｎ－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）－Ｌ－アラニル－Ｌ－イソロイシン酸メチル

Ｎ－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）－Ｌ－アラニン（１．５０ｇ、７．９３ｍｍｏｌ）およびＬ－イソロイシン酸メチル－塩化水素（１／１）（１．５８ｇ、８．７２ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（７．７ｍＬ）に溶解した。この溶液を氷浴中で０～５℃に冷却した。Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（１．４ｍＬ、７．９ｍｍｏｌ）、１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－オール水和物（１２１ｍｇ、７９３μｍｏｌ）および１－（３－ジメチルアミノプロピル）－３－エチルカルボジイミド塩酸塩（１．６７ｇ、８．７２ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で撹拌した。次いで、反応物を濃塩化アンモニウム水溶液でクエンチし、酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機抽出物を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、次いで濃縮した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（シクロヘキサン／酢酸エチル０％～１５％）により精製して、表題化合物２．１２ｇ（純度１００％、収率８４％）を得た。

LC LC-MS (方法 10): R_t = 1.70 分; MS (ESI pos): m/z = 317 [M+H]^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.00), 0.008 (0.77), 0.818 (3.17), 0.825 (4.25), 0.836 (7.51), 0.842 (4.72), 0.855 (3.30), 1.144 (4.07), 1.161 (4.10), 1.179 (0.54), 1.200 (0.53), 1.371 (16.00), 1.398 (13.44), 1.775 (0.49), 2.523 (0.85), 3.621 (15.73), 4.021 (0.46), 4.039 (0.60), 4.207 (1.06), 4.223 (1.19), 4.228 (1.22), 4.244 (1.06), 6.908 (0.61), 6.928 (0.58), 7.886 (0.57), 7.907 (0.60).
実施例６１Ａ
Ｌ－アラニル－Ｌ－イソロイシン酸メチル

メチルＮ－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）－Ｌ－アラニル－Ｌ－イソロイシネート（実施例６０Ａ、２．１０ｇ、６．６４ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（２０ｍＬ）に溶解した。トリフルオロ酢酸（２０ｍＬ、２６０ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を室温で３０分間撹拌した。反応混合物を濃縮し、粗ジペプチドを次の工程に直接使用した。

実施例６２Ａ
Ｎ－（４－ニトロベンゼン－１－スルホニル）－Ｌ－アラニル－Ｌ－イソロイシン酸メチル

メチルＬ－アラニル－Ｌ－イソロイシネート（実施例６１Ａ、１．４４ｇ、６．６４ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（５４ｍＬ）に溶解し、トリエチルアミン（３．２ｍＬ、２３ｍｍｏｌ）を添加し、次いで溶液を０℃に冷却した。４－ニトロベンゼン－１－スルホニルクロリド（１．６２ｇ、７．３０ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を撹拌した。次いで、反応物を濃塩化アンモニウム水溶液でクエンチし、ジクロロメタンで２回抽出した。合わせた有機抽出物を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、濃縮して、表題化合物１．６５ｇ（純度９５％、収率５９％）を得た。

LC-MS (方法 11): R_t = 1.18 分; MS (ESI neg): m/z = 400 [M-H]^-
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.008 (0.40), 0.676 (6.59), 0.693 (6.80), 0.740 (2.79), 0.758 (6.99), 0.777 (3.46), 1.013 (0.52), 1.025 (0.62), 1.047 (0.69), 1.066 (0.50), 1.117 (6.09), 1.135 (6.12), 1.175 (0.51), 1.192 (0.64), 1.203 (0.60), 1.210 (0.56), 1.222 (0.67), 1.237 (0.48), 1.243 (0.42), 1.551 (0.53), 1.568 (0.61), 1.578 (0.45), 1.584 (0.47), 1.988 (0.64), 3.577 (16.00), 3.933 (1.14), 3.948 (1.32), 3.953 (1.31), 3.968 (1.12), 4.056 (0.61), 4.073 (0.82), 4.091 (0.54), 7.994 (4.08), 7.999 (1.44), 8.012 (1.63), 8.016 (4.58), 8.135 (1.41), 8.155 (1.39), 8.365 (4.39), 8.383 (1.48), 8.388 (3.90), 8.463 (1.04), 8.482 (0.99).
実施例６３Ａ
メチル（２Ｓ、３Ｓ）－３－メチル－２－［（３Ｓ）－３－メチル－４－（４－ニトロベンゼン－１－スルホニル）－２－オキソピペラジン－１－イル］ペンタノエート

メチルＮ－（４－ニトロベンゼン－１－スルホニル）－Ｌ－アラニル－Ｌ－イソロイシネート（実施例６２Ａ、１．６５ｇ、４．１１ｍｍｏｌ）および１，２－ジブロモエタン（３．５ｍＬ、４１ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（３５ｍＬ）に溶解した。炭酸カリウム（５．６８ｇ、４１．１ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を６０℃に３時間加熱した。次いで、反応物を濃塩化アンモニウム水溶液でクエンチし、エーテルで３回抽出した。合わせた有機抽出物を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、次いで濃縮した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（シクロヘキサン／酢酸エチル６：１）により精製して、表題化合物１．６０ｇ（純度７０％、収率６４％）を得た。

LC-MS (方法 11): R_t = 1.30 分; MS (ESI pos): m/z = 428 [M+H]⁺
実施例６４Ａ
メチル（２Ｓ，３Ｓ）－３－メチル－２－［（３Ｓ）－３－メチル－２－オキソピペラジン－１－イル］ペンタノエート

メチル（２Ｓ、３Ｓ）－３－メチル－２－［（３Ｓ）－３－メチル－４－（４－ニトロベンゼン－１－スルホニル）－２－オキソピペラジン－１－イル］ペンタノエート（実施例６３Ａ、９００ｍｇ、２．１１ｍｍｏｌ）およびベンゼンチオール（６５０μＬ、６．３ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（１２ｍＬ）に溶解した。炭酸カリウム（５８２ｍｇ、４．２１ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で一晩撹拌した。混合物を濾過し、濃縮した。残渣をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（グラディエント ジクロロメタン／メタノール １００：０～９５：５）により精製して、表題化合物３３６ｍｇ（純度１００％、収率６６％）を得た。

LC-MS (方法 11): R_t = 1.30 分; MS (ESI pos): m/z = 428 [M+H]⁺
[M+H]⁺
実施例６５Ａ
ｔｅｒｔ－ブチル（２Ｓ）－４－［（２Ｓ、３Ｓ）－１－メトキシ－３－メチル－１－オキソペンタン－２－イル］－２－メチル－３－オキソピペラジン－１－カルボキシレート

メチル（２Ｓ、３Ｓ）－３－メチル－２－［（３Ｓ）－３－メチル－２－オキソピペラジン－１－イル］ペンタノエート（実施例６４Ａ、７３６ｍｇ、３．０４ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（８ｍＬ）に溶解した。ジ－ｔｅｒｔ－ブチルジカーボネート（１．０ｍＬ、４．６ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を室温で週末にわたって撹拌した。次いで、反応物を濃塩化アンモニウム水溶液でクエンチし、ＤＣＭで２回抽出した。合わせた有機抽出物を塩化ナトリウム溶液で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、次いで濃縮した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（シクロヘキサン／酢酸エチル ３：１）により精製して、表題化合物１．０８ｇ（純度１００％、収率１０４％）を得た。

LC-MS (方法 10): R_t = 1.98 分; MS (ESI pos): m/z = 343 [M+H]^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6₎ δ [ppm]: 0.800 (0.95), 0.818 (2.41), 0.837 (1.25), 0.875 (2.38), 0.892 (2.43), 1.305 (2.02), 1.323 (2.06), 1.414 (16.00), 3.645 (6.08), 4.769 (0.88), 4.795 (0.86).
実施例６６Ａ
（２Ｓ、３Ｓ）－２－［（３Ｓ）－４－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）－３－メチル－２－オキソピペラジン－１－イル］－３－メチルペンタン酸

ｔｅｒｔ－ブチル（２Ｓ）－４－［（２Ｓ，３Ｓ）－１－メトキシ－３－メチル－１－オキソペンタン－２－イル］－２－メチル－３－オキソピペラジン－１－カルボキシレート（実施例６５Ａ、１．０８ｇ、３．１５ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（４．５ｍＬ）とメタノール（４．５ｍＬ）の混合物に溶解した。水（４．５ｍＬ）中の水酸化リチウム（１５９ｍｇ、６．６２ｍｍｏｌ）の溶液を添加し、反応混合物を室温で１時間撹拌した。反応混合物を濃縮し、残渣を濃塩化アンモニウム水溶液に溶解した。水層を１Ｍ塩酸でｐＨ３～４に酸性化し、ＤＣＭで３回抽出した。合わせた有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、次いで濃縮して表題化合物９５２ｍｇ（純度１００％、収率９２％）を得た。

LC-MS (方法 9): R_t = 0.87 分; MS (ESI pos): m/z = 329 [M+H]^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.802 (1.09), 0.820 (2.24), 0.838 (1.18), 0.911 (2.22), 0.927 (2.28), 1.295 (0.50), 1.308 (2.03), 1.326 (1.99), 1.415 (16.00), 3.342 (0.65), 4.691 (0.84), 4.717 (0.82).
実施例６７Ａ
（２Ｒ，５Ｒ）－３，６－ジメトキシ－２－（プロパン－２－イル）－５－［（トリメチルシリル）メチル］－２，５－ジヒドロピラジン

（２Ｒ）－３，６－ジメトキシ－２－（プロパン－２－イル）－２，５－ジヒドロピラジン（２．９ｍＬ、１６ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（５８ｍＬ）に溶解し、溶液を－７８℃に冷却した。ｎ－ブチルリチウム（１０ｍＬ、１．６Ｍ、１６ｍｍｏｌ）を撹拌しながら滴下した。撹拌を－７８℃で１５分間続けた。（クロロメチル）（トリメチル）シラン（５．０ｍＬ、３６ｍｍｏｌ）を添加し、得られた混合物を周囲温度で一晩撹拌した。反応混合物を水で希釈し、ジエチルエーテルで抽出した。合わせた有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、次いで濃縮した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（シクロヘキサン／酢酸エチル２％）により精製して、表題化合物３．０ｇ（純度８７％、収率６０％）を得た。

LC-MS (方法 9): R_t = 1.47 分; MS (ESI pos): m/z = 271 [M+H]^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.036 (0.45), -0.028 (9.14), -0.020 (0.46), -0.008 (1.38), 0.580 (3.69), 0.597 (3.75), 0.737 (0.61), 0.762 (0.63), 0.773 (0.73), 0.798 (0.73), 0.959 (3.60), 0.977 (3.69), 1.107 (0.73), 1.119 (0.75), 1.143 (0.66), 1.148 (0.47), 1.155 (0.63), 1.370 (1.30), 2.512 (16.00), 3.574 (8.95), 3.582 (8.85), 3.885 (0.64), 3.894 (1.26), 3.903 (0.72), 3.999 (0.49), 4.023 (0.47).
実施例６８Ａ
３－（トリメチルシリル）－Ｌ－アラニン酸メチル

（２Ｒ、５Ｒ）－３，６－ジメトキシ－２－（プロパン－２－イル）－５－［（トリメチルシリル）メチル］－２，５－ジヒドロピラジン（実施例６７Ａ、３．００ｇ、１１．１ｍｍｏｌ）をメタノール（３０ｍＬ、７４０ｍｍｏｌ）に溶解し、溶液を０℃に冷却した。塩酸（１０ｍＬ、１０％）を加え、溶液を２時間撹拌した。溶液を蒸発させ、残渣をＤＣＭおよび炭酸ナトリウム溶液（１００ｍＬ、２．０Ｍ、２００ｍｍｏｌ）に溶解した。水層をＤＣＭで２回抽出した。ＤＣＭ抽出物を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、次いで濃縮した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（２％メタノール：（ＤＣＭ中１％Ｎ，Ｎ－ジエチルエタノールアミン））により精製して、２．８３ｇ（純度６８％、収率９９％）の表題化合物を得た。

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ[ppm]: -0.010 (3.10), 0.008 (1.81), 0.736 (0.85), 0.759 (0.89), 0.772 (1.48), 0.795 (1.56), 0.803 (1.89), 0.820 (1.90), 0.841 (1.84), 0.858 (2.43), 0.875 (1.64), 0.900 (4.19), 0.911 (1.07), 0.918 (8.65), 0.936 (4.28), 1.682 (1.42), 2.384 (1.35), 2.402 (4.11), 2.420 (4.02), 2.438 (1.25), 3.088 (0.55), 3.102 (0.54), 3.302 (1.19), 3.306 (1.81), 3.321 (1.27), 3.330 (1.15), 3.345 (1.03), 3.583 (16.00), 3.591 (0.48), 3.605 (4.33), 5.742 (4.37).
実施例６９Ａ
Ｎ－｛［（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ］カルボニル｝－３－（トリメチルシリル）－Ｌ－アラニン

３－（トリメチルシリル）－Ｌ－アラニン酸メチル（実施例６８Ａ、２．８３ｇ、純度６８％、１１．０ｍｍｏｌ）をメタノール（４４ｍＬ）に溶解し、溶液を０℃に冷却した。水酸化ナトリウム溶液（１１ｍＬ、１．０Ｍ、１１ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で一晩撹拌した。水（４０ｍＬ）、炭酸水素ナトリウム（９２２ｍｇ、１１．０ｍｍｏｌ）および炭酸ナトリウム（１．５３ｇ、１４．４ｍｍｏｌ）を加えた。メタノールを減圧下で除去し、次いで１，４－ジオキサン（３２ｍＬ）を水溶液に添加した。この溶液を氷浴中で０℃に冷却した。次に（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メチルカルボノクロリデート（Ｆｍｏｃ－Ｃｌ）（４．２６ｇ、１６．５ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を室温で５時間撹拌した。追加のＦｍｏｃ－Ｃｌ（１．４２ｇ、５．５ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物をさらに２時間撹拌した。等量の水およびｔｅｒｔ－ブチルメチルエーテルを反応混合物に加えた。水相を分離し、ｔｅｒｔ－ブチルメチルエーテルでさらに洗浄し、次いで１Ｍ塩酸（ｐＨ３～４）で酸性化した。酸性化した混合物をＭＴＢＥで３回抽出した。合わせた有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、次いで濃縮した。粗生成物を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ；Ｃ１８；１０μｍ；１２５×４０ｍｍ；溶離液：０．１％ＨＣＯＯＨを含むＡｃＣＮ／Ｈ_２Ｏ；流量：１００ｍＬ／分；グラディエント：０～５．５０分１０：９０；３．００分での試料注入；５．５０～１７．６５分～９５：５；１７．６５～１９．４８分９５：５；１９．４８～１９．６６分１０：９０；１９．６６～２０．７２分１０：９０；）で精製し、１．６５ｇ（９９％純度、収率３９％）の表題化合物を得た。

LC-MS (方法 10): R_t = 2.20 分; MS (ESI pos): m/z = 384 [M+H]^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.006 (16.00), 0.987 (3.81), 1.006 (3.64), 3.309 (2.95), 3.950 (0.67), 3.970 (1.71), 3.991 (1.59), 4.010 (0.53), 4.182 (0.67), 4.199 (1.66), 4.217 (1.67), 4.228 (1.08), 4.253 (2.79), 4.268 (3.86), 4.287 (1.60), 4.293 (0.85), 4.313 (0.41), 7.286 (1.24), 7.291 (1.27), 7.293 (1.31), 7.302 (2.68), 7.304 (2.70), 7.309 (2.55), 7.321 (1.75), 7.323 (1.70), 7.328 (1.57), 7.389 (2.90), 7.408 (4.73), 7.426 (2.11), 7.566 (1.81), 7.587 (1.74), 7.697 (2.14), 7.714 (3.62), 7.731 (1.81), 7.872 (4.43), 7.891 (4.02), 12.451 (0.54).
このアミノ酸は、Ｆｍｏｃ ＳＰＰＳで使用された。

実施例７０Ａ
ジ－ｔｅｒｔ－ブチル（２Ｓ）－５－ヒドロキシピロリジン－１，２－ジカルボン酸塩（異性体の混合物）

ジ－ｔｅｒｔ－ブチル（２Ｓ）－５－オキソピロリジン－１，２－ジカルボキシレート（ＣＡＳ－ＲＮ：９１２２９－９１－３，２１．０ｇ，７３．６ｍｍｏｌ）を２５０ｍＬのＴＨＦに溶解し、溶液を－７８℃に冷却した。水素化ジイソブチルアルミニウム（１６０ｍＬ、１．０Ｍ、１６０ｍｍｏｌ）を滴下し、混合物を－７８℃で１時間撹拌した。次に、反応物を２－プロパノール（２５ｍＬ）でクエンチした。ナトリウムカリウム（２Ｒ，３Ｒ）－２，３－ジヒドロキシブタンジオエート溶液（２００ｍＬ）を加え、混合物を室温で撹拌し、次いで反応混合物をＭＴＢＥおよび水で希釈した。水層を分離し、ＭＴＢＥでさらに２回抽出した。合わせた有機抽出物を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、残渣を減圧下で濃縮して、１９．５３ｇ（純度７９％、収率７３％）の表題化合物を無色油として得た。

実施例７１Ａ
ジ－ｔｅｒｔ－ブチル（２Ｓ）－５－メトキシピロリジン－１，２－ジカルボン酸塩（異性体の混合物）

ジ－ｔｅｒｔ－ブチル（２Ｓ）－５－ヒドロキシピロリジン－１，２－ジカルボキシレート（実施例７０Ａ、１９．５ｇ、６７．９ｍｍｏｌ）をメタノール（１６０ｍＬ）に溶解した。ピリジニウムパラ－トルエンスルホネート（３４１ｍｇ、１．３６ｍｍｏｌ）を溶液に添加し、反応混合物を室温で一晩撹拌した。反応混合物を濃縮し、粗生成物をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（グラディエント シクロヘキサン－シクロヘキサン酢酸エチル７：３）により精製して、１４．４ｇ（純度９０％、収率６４％）の表題化合物を得た。

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.363 (9.51), 1.375 (8.10), 1.393 (2.67), 1.419 (16.00), 1.756 (0.58), 1.775 (0.93), 1.781 (0.88), 1.807 (0.46), 3.225 (3.77), 3.240 (1.93), 3.261 (2.02), 3.307 (4.01), 4.059 (0.64), 4.081 (0.82), 5.128 (0.56).
実施例７２Ａ
ジ－ｔｅｒｔ－ブチル（２Ｓ）－５－シアノピロリジン－１，２－ジカルボン酸塩（異性体の混合物）

ジ－ｔｅｒｔ－ブチル（２Ｓ）－５－メトキシピロリジン－１，２－ジカルボキシレート（実施例７１Ａ、１４．４ｇ、４７．８ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（１２５ｍＬ）に溶解し、溶液を－４０℃に冷却した。トリメチルシリルトリフルオロメタンスルホネート（１．３ｍＬ）（１体積％）を添加し、次いでトリメチルシランカルボニトリル（７．０ｍＬ、５３ｍｍｏｌ）を４０分間かけて滴下した。その後、混合物を－４０℃でさらに１．５時間撹拌した。反応混合物をメタノール（１９ｍＬ）でクエンチし、次いで濃縮して、１４．８７ｇ（収率８６％）の表題化合物を単離した。

GC-MS (GC-MS 方法 1): 195.2 (M+-Boc), 139.1 (-Boc, -t-Bu)
実施例７３Ａ
ジ－ｔｅｒｔ－ブチル（２Ｓ）－５－ホルミルピロリジン－１，２－ジカルボン酸塩（異性体の混合物）

ジ－ｔｅｒｔ－ブチル（２Ｓ）－５－シアノピロリジン－１，２－ジカルボキシレート（実施例７２Ａ、１４．０ｇ、４７．２ｍｍｏｌ）を、ピリジン（２５０ｍＬ）、酢酸（１３０ｍＬ）および水（１３０ｍＬ）の混合物に溶解した。ラネー－ニッケル－水懸濁液（７０．０ｇ、純度５０％）を添加し、混合物を周囲圧力、８０℃で７時間にわたって水素化した。次いで、触媒を珪藻土の層上での濾過によって除去し、溶媒を２５０ｍＬの水で洗浄した。水相をＭＴＢＥ（６５０ｍＬ）で３回抽出した。合わせた有機層を水で３回洗浄し、ブラインで洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、次いで濾過した。濾液を減圧下で蒸発させ、残渣をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（グラディエント シクロヘキサン－シクロヘキサン／酢酸エチル７：３）により精製して、７．４０ｇ（純度８５％、収率４４％）の粘稠な油を得た。

GC-MS (GC-MS 方法 1): (M⁺ - CO); (M+ - CO, - Boc)
実施例７４Ａ
ジ－ｔｅｒｔ－ブチル（２Ｓ）－５－エテニルピロリジン－１，２－ジカルボキシレート（異性体の混合物）

臭化メチル（トリフェニル）ホスホニウムブロミド（１７．７ｇ、４９．４ｍｍｏｌ）を１８０ｍＬのＴＨＦに懸濁した。カリウムビス（トリメチルシリル）アミド溶液（トルエン中１Ｍ、７５ｍＬ、１５％溶液、４９ｍｍｏｌ）を室温で滴下し、１時間撹拌した。混合物を－７８℃に冷却した。ジ－ｔｅｒｔ－ブチル（２Ｓ）－５－ホルミルピロリジン－１，２－ジカルボキシレート（実施例７３Ａ、７．４０ｇ、２４．７ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（６０ｍＬ）に溶解した。溶液を添加し、室温で２時間撹拌した。反応混合物をカリウムナトリウム（２Ｒ，３Ｒ）－２，３－ジヒドロキシブタンジオエート（１４０ｍＬ）および水（８５ｍＬ）の溶液に注ぎ、ＭＴＢＥ（２１０ｍＬ）で３回抽出した。合わせた有機抽出物を塩化ナトリウム溶液で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、次いで濃縮した。粗生成物をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（グラディエント シクロヘキサン－シクロヘキサン酢酸エチル（９：１））により精製して、４．２５ｇ（純度１００％、収率５８％）の表題化合物を単離した。

GC-MS (GC-MS 方法 1): Rt = 5.07 分, 5.17 分; 197.3 (M+-Boc)
実施例７５Ａ
ｔｅｒｔ－ブチル５－ビニル－Ｌ－プロリネート（異性体の混合物）

ジ－ｔｅｒｔ－ブチル（２Ｓ）－５－エテニルピロリジン－１，２－ジカルボキシレート（実施例７４Ａ、４．２５ｇ、１４．３ｍｍｏｌ）を４５ｍＬのＤＣＭに溶解し、溶液を０℃に冷却した。トリメチルシリルトリフルオロメタンスルホネート（２．６ｍＬ、１４ｍｍｏｌ）を滴下し、得られた混合物を０℃で５分間撹拌した。次いで、反応物を濃炭酸水素ナトリウム水溶液（２１ｍＬ）でクエンチし、ＤＣＭで２回抽出した。合わせた有機層を硫酸マグネシウム上で乾燥し、濾過し、次いで濃縮した。粗生成物をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（グラディエント メタノール－ジクロロメタン（１００：２））により精製して、２．０９ｇ（純度１００％、収率７４％）の表題化合物を得た。

GC-MS (GC-MS 方法 1): Rt = 3.37 分, 3.50 分; 197.3 (M+)
実施例７６Ａ
ｔｅｒｔ－ブチル（５Ｒ）－５－エテニル－Ｌ－プロリネート（単一の立体異性体）

シリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィー（グラディエント シクロヘキサン－酢酸エチル－トリメチルアミン（７０：３０：１））によるｔｅｒｔ－ブチル－５－エテニル－Ｌ－プロリネート（ジアステロマー混合物）（実施例７５Ａ、２．５５ｇ、１２．９ｍｍｏｌ）の異性体分離により、表題化合物１．３５ｇ（純度１００％、収率５３％）を得た。

GC-MS (GC-MS 方法 1): Rt = 3.50 分; 197.3 (M+)
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.3-1.4 (1H), 1.40 (9H), 2.4 (1H), 3.5 (2H), 4.9 (1H), 5.15 (1H), 5.8 (1H).
実施例７７Ａ
１－ｔｅｒｔ－ブチル２－メチル－３－エテニルピペリジン－１，２－ジカルボキシレート（異性体の混合物）

無水ＴＨＦ（２０ｍＬ）中の臭化エテニルマグネシウム（３９ｍＬ、０．７０Ｍ、２７ｍｍｏｌ）の溶液を－３５℃に冷却し、次いで臭化銅（Ｉ）－硫化ジメチル（１：１）（７４１ｍｇ、３．６１ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。反応混合物を－３５℃で１時間撹拌した。１－ｔｅｒｔ－ブチル２－メチル５，６－ジヒドロピリジン－１，２（４Ｈ）－ジカルボキシレート（ＣＡＳ－ＲＮ：１５５９０５－８０－９、４．３５ｇ、１８．０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１０ｍｌ）溶液を混合物に加え、次いで反応混合物を－３５℃で６時間撹拌した。混合物を塩化アンモニウム水溶液（８５ｍＬ）およびアンモニア水溶液（８５ｍＬ）の混合物でクエンチし、ＭＴＢＥ（２８５ｍＬ）で２回抽出した。合わせた有機層を塩化アンモニウム水溶液（５７０ｍＬ）およびブライン（５７０ｍＬ）で順次洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、次いで濃縮した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（グラディエント：シクロヘキサン－酢酸エチル（２％～２０％））により精製して、表題化合物１．５９ｇ（純度１００％、収率３３％）を得た。

LC-MS (方法 12): R_t = 3.33 分; MS (ESI pos): m/z = 270 [M+H]^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.038 (0.51), 1.087 (0.77), 1.382 (16.00), 1.419 (0.83), 1.429 (0.59), 1.448 (0.73), 1.459 (0.80), 1.466 (0.54), 1.479 (1.01), 1.485 (1.09), 1.496 (0.73), 1.502 (0.66), 1.506 (0.59), 1.514 (0.47), 1.532 (0.47), 1.544 (0.42), 1.600 (0.64), 1.627 (0.61), 2.899 (0.88), 3.690 (13.11), 3.817 (0.47), 3.849 (0.45), 5.120 (2.03), 5.148 (0.90), 5.164 (1.49), 5.869 (0.57).
実施例７８Ａ
１－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）－３－エテニルピペリジン－２－カルボン酸（異性体の混合物）

１－ｔｅｒｔ－ブチル２－メチル３－エテニルピペリジン－１，２－ジカルボキシレート（実施例７７Ａ、１．５９ｇ、５．９０ｍｍｏｌ）をメタノール（５．９ｍＬ）およびＴＨＦ（１７．７ｍＬ）の混合物に溶解した。水酸化リチウム溶液（５．９ｍＬ、２．０Ｍ、１２ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を５０℃で５時間撹拌し、次いで室温に冷却した。反応混合物をＭＴＢＥ（７．５ｍＬ）で洗浄し、０℃に冷却し、１Ｍ塩酸（１４．５ｍＬ）で酸性化し、次いでＤＣＭ（１５ｍＬ）で５回抽出した。合わせた有機抽出物を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、次いで濃縮して、１．３９ｇ（純度１００％、収率９２％）の表題化合物を得た。

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.381 (16.00), 1.423 (0.70), 1.434 (0.57), 1.455 (0.77), 1.465 (1.32), 1.473 (0.93), 1.488 (1.66), 1.495 (1.29), 1.519 (0.46), 1.530 (0.40), 1.608 (0.80), 1.632 (0.75), 2.911 (0.96), 3.815 (0.50), 3.842 (0.47), 5.113 (1.95), 5.140 (0.73), 5.156 (1.59), 5.753 (0.50), 5.874 (0.51), 12.910 (0.69).
実施例７９Ａ
ｔ－ブチル２－｛［（２Ｓ，５Ｒ）－２－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）－５－ビニルピロリジン－１－イル］カルボニル｝－３－ビニルピペリジン－カルボキシレート（異性体の混合物）

１－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）－３－エテニルピペリジン－２－カルボン酸（ラセミ体）（実施例７８Ａ、１．３５ｇ、５．３０ｍｍｏｌ）およびｔｅｒｔ－ブチル（５Ｒ）－５－エテニル－Ｌ－プロリネート（実施例７６Ａ、９５０ｍｇ、４．８２ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（６０ｍＬ）に溶解した。Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（２．５ｍＬ、１４ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を０℃に冷却した。アセトニトリル（３０ｍＬ）中の１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イルオキシ）（トリピロリジン－１－イル）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（３．２６ｇ、６．２６ｍｍｏｌ）の溶液を混合物に加え、反応混合物を室温で２０時間撹拌した。反応混合物を濃縮し、ＭＴＢＥに再溶解し、水で洗浄した。水相をＭＴＢＥで再抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、次いで濃縮した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（シクロヘキサン／酢酸エチル（８５：１５））により精製して、２．０３ｇ（収率８８％）の表題化合物を得た。

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (0.60), 1.373 (10.15), 1.392 (16.00), 1.396 (14.53), 1.458 (0.57), 1.489 (0.46), 1.763 (0.46), 1.780 (0.56), 2.105 (0.42), 2.122 (0.42), 2.524 (0.41), 5.050 (0.44), 5.090 (0.70), 5.116 (0.79), 5.754 (1.04).
実施例８０Ａ
ジ－ｔｅｒｔ－ブチル（４ａＲ，６ａＲ，９Ｓ，１１ａＳ）－１１－オキソ－２，３，４，４ａ，６ａ，７，８，９，１１，１１ａ－デカヒドロ－１Ｈ－ピリド［３，２－ｅ］ピロロ［１，２－ａ］アゼピン－１，９－ジカルボキシレート（単一の立体異性体）

ｔｅｒｔ－ブチル２－｛［（２Ｓ，５Ｒ）－２－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）－５－ビニルピロリジン－１－イル］カルボニル｝－３－ビニルピペリジン－カルボキシレート（実施例７９Ａ、２．００ｇ、４．６０ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（１００ｍＬ）に溶解し、［１，３－ビス（２，４，６－トリメチルフェニル）イミダゾリジン－２－イリデン］（ジクロロ）（フェニルメチリデン）ルテニウム－トリシクロヘキシルホスファン（１：１）（７８１ｍｇ、９２０μｍｏｌ）を加えた。反応混合物を還流下で４８時間撹拌し、次いで、室温に冷却した。ＤＭＳＯ（２．０ｍＬ）を加え、反応混合物を室温で一晩撹拌した。反応混合物を濃縮し、粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（シクロヘキサン／酢酸エチル（２５％～５０％））によって精製して、表題化合物８０５ｍｇ（純度９９％、収率４２％）を得た。

LC-MS (方法 9): R_t = 1.12 分; MS (ESI pos): m/z = 407 [M+H]^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.296 (5.30), 1.361 (16.00), 1.378 (2.93), 5.540 (0.72), 5.562 (0.51).
実施例８１Ａ
（４ａＲ，６ａＲ，９Ｓ，１１ａＳ）－１－｛［（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ］カルボニル｝－１１－オキソ－２，３，４，４ａ，６ａ，７，８，９，１１，１１ａ－デカヒドロ－１Ｈ－ピリド［３，２－ｅ］ピロロ［１，２－ａ］アゼピン－９－カルボン酸（単一の立体異性体）

ジ－ｔｅｒｔ－ブチル－（４ａＲ，６ａＲ，９Ｓ，１１ａＳ）－１１－オキソ－２，３，４，４ａ，６ａ，７，８，９，１１，１１ａ－デカヒドロ－１Ｈ－ピリド［３，２－ｅ］ピロロ［１，２－ａ］アゼピン－１，９－ジカルボキシレート（実施例８０Ａ，８００ｍｇ、１．９７ｍｍｏｌ）を８ｍＬのＤＣＭに溶解し、溶液を０℃に冷却した。トリフルオロ酢酸（８．０ｍＬ、１００ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で１時間撹拌した。反応混合物を濃縮し、残渣を炭酸水素ナトリウム溶液（２０ｍＬ、ｐＨ＝８）で希釈した。（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メチルカルボノクロリデート（ＣＡＳ－ＲＮ：２８９２０－４３－６、７６４ｍｇ、２．９５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２４ｍｌ）溶液を加え、反応混合物を室温で１６時間撹拌した。反応混合物をＤＣＭ（１００ｍＬ）で希釈し、１Ｍ塩酸（４０ｍＬ）（ｐＨ＝１）で酸性化した。溶液をＤＣＭ（５０ｍＬ）で２回抽出し、合わせた有機抽出物を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、次いで濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ ９５／５）で精製して表題化合物６７６ｍｇ（純度１００％、収率７３％）を得た。

LC-MS (方法 10): R_t = 1.86 分; MS (ESI pos): m/z = 473 [M+H]^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (2.87), 0.008 (2.54), 0.778 (0.66), 0.800 (1.51), 0.808 (1.58), 0.832 (2.85), 0.856 (1.93), 0.865 (2.01), 0.889 (0.79), 1.125 (0.77), 1.157 (1.38), 1.182 (0.90), 1.215 (0.50), 1.235 (1.06), 1.517 (2.61), 1.538 (3.44), 1.563 (6.49), 1.593 (6.17), 1.610 (5.67), 1.636 (4.98), 1.660 (3.92), 1.684 (2.46), 1.719 (2.25), 1.747 (2.01), 1.846 (4.49), 1.858 (7.62), 1.868 (6.96), 1.901 (3.19), 2.010 (0.57), 2.073 (9.83), 2.189 (2.95), 2.200 (3.74), 2.241 (3.30), 2.276 (2.71), 2.307 (1.21), 2.327 (1.10), 2.366 (0.52), 2.398 (0.80), 2.428 (1.41), 2.456 (0.84), 2.670 (0.63), 2.710 (0.50), 2.816 (1.60), 2.833 (1.66), 2.849 (2.51), 2.862 (2.28), 2.877 (2.34), 2.895 (1.47), 3.040 (0.69), 3.075 (1.10), 3.086 (1.04), 3.101 (1.03), 3.121 (0.69), 3.690 (1.24), 3.724 (4.64), 3.744 (6.62), 3.756 (6.47), 3.777 (4.44), 3.823 (8.20), 3.852 (7.84), 4.120 (4.36), 4.137 (4.86), 4.148 (4.24), 4.191 (3.57), 4.202 (7.64), 4.212 (4.19), 4.261 (1.02), 4.276 (2.33), 4.291 (4.52), 4.316 (4.20), 4.328 (5.37), 4.346 (4.61), 4.370 (3.31), 4.383 (5.08), 4.395 (4.54), 4.411 (5.53), 4.422 (5.83), 4.456 (3.22), 4.595 (1.63), 4.761 (4.95), 4.773 (5.04), 4.788 (4.59), 4.800 (4.19), 5.364 (2.72), 5.393 (7.67), 5.422 (7.48), 5.451 (2.73), 5.510 (0.98), 5.540 (4.23), 5.553 (4.14), 5.585 (0.91), 7.282 (3.12), 7.300 (7.84), 7.319 (10.54), 7.337 (13.57), 7.355 (9.71), 7.366 (2.95), 7.377 (5.06), 7.399 (12.17), 7.420 (16.00), 7.438 (6.68), 7.521 (8.10), 7.539 (6.98), 7.613 (12.53), 7.631 (11.16), 7.646 (3.71), 7.665 (3.16), 7.847 (8.31), 7.865 (15.04), 7.884 (10.42), 7.908 (4.87), 12.429 (2.52).
このアミノ酸をＦｍｏｃ ＳＰＰＳに使用した。

実施例８２Ａ
（６Ｓ）－５－｛［（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ］カルボニル｝－５－アザスピロ［２．４］ヘプタン－６－カルボン酸

（６Ｓ）－５－アザスピロ［２．４］ヘプタン－６－カルボン酸（ＣＡＳ－ＲＮ：１５２７２３－５７－４、１．３８ｇ、９．７９ｍｍｏｌ）を水（１４ｍｌ）に溶解し、炭酸水素ナトリウム（８．２３ｇ、９７．９ｍｍｏｌ）を加えた。次に、アセトン（２１ｍＬ）中の１－（｛［（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ］カルボニル｝オキシ）ピロリジン－２，５－ジオン（ＣＡＳ－ＲＮ：８２９１１－６９－１、３．４７ｇ、１０．３ｍｍｏｌ）からの溶液を添加し、混合物を室温で一晩撹拌した。反応混合物を水で希釈し、ＭＴＢＥで２回抽出した。水層を１Ｍ塩酸でｐＨ３～４に酸性化し、ＤＣＭで３回抽出した。合わせた有機相を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、次いで濃縮して、３．３ｇ（純度１００％、収率９３％）の表題化合物を得た。

LC-MS (方法 9): R_t = 1.04 分; MS (ESI pos): m/z = 364 [M+H]^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.497 (1.67), 0.510 (2.34), 0.527 (5.55), 0.559 (3.82), 0.567 (5.51), 0.590 (9.33), 0.598 (11.21), 0.619 (1.87), 0.636 (0.58), 1.106 (9.23), 1.714 (2.14), 1.723 (2.15), 1.745 (2.40), 1.755 (2.50), 1.764 (1.94), 1.772 (1.85), 1.796 (2.02), 1.804 (1.93), 2.086 (7.36), 2.280 (2.12), 2.301 (2.47), 2.311 (2.21), 2.333 (2.24), 2.390 (1.75), 2.412 (2.07), 2.421 (1.87), 2.443 (1.71), 2.524 (0.88), 2.594 (3.10), 3.076 (2.73), 3.219 (3.24), 3.245 (4.13), 3.283 (3.41), 3.309 (5.19), 3.385 (5.05), 3.403 (4.32), 3.410 (3.56), 3.429 (3.16), 3.747 (1.01), 4.160 (0.68), 4.175 (1.57), 4.187 (3.09), 4.192 (3.69), 4.209 (6.08), 4.218 (4.18), 4.224 (3.09), 4.237 (2.43), 4.247 (1.22), 4.254 (2.15), 4.272 (16.00), 4.284 (3.83), 4.297 (4.75), 4.306 (2.72), 4.427 (2.10), 4.435 (2.31), 4.449 (2.34), 4.457 (2.02), 5.754 (0.45), 7.301 (1.47), 7.318 (5.18), 7.320 (5.43), 7.325 (2.74), 7.336 (7.24), 7.339 (7.37), 7.344 (4.81), 7.348 (3.25), 7.352 (3.50), 7.354 (3.84), 7.357 (3.67), 7.403 (9.03), 7.422 (14.80), 7.440 (6.64), 7.640 (8.10), 7.647 (7.82), 7.658 (7.43), 7.666 (6.87), 7.884 (10.09), 7.902 (9.58).
このアミノ酸をＦｍｏｃ ＳＰＰＳに使用した。

このＦｍｏｃアミノ酸はまた、実施例１２４Ａで調製した（６Ｓ）－５－アザスピロ［２．４］ヘプタン－６－カルボン酸から調製した。

実施例８３Ａ
（１Ｓ，３Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）－２－｛［（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ］カルボニル｝－６－（トリフルオロメチル）－２－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－３－カルボン酸およびｒｅｌ－（１Ｒ，３Ｒ，５Ｒ，６Ｒ）－２－｛［（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ］カルボニル｝－６－（トリフルオロメチル）－２－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－３－カルボン酸

（１Ｓ、３Ｓ、５Ｓ、６Ｓ）－６－（トリフルオロメチル）－２－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－３－カルボン酸（４５０ｍｇ、２．３１ｍｍｏｌ）を水（６ｍＬ）に溶解し、炭酸水素ナトリウム（１．９４ｇ、２３．１ｍｍｏｌ）を加えた。次に、アセトン（９ｍＬ）中の１－（｛［（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ］カルボニル｝オキシ）ピロリジン－２，５－ジオン（ＣＡＳ－ＲＮ：８２９１１－６９－１、８１７ｍｇ、２．４２ｍｍｏｌ）からの溶液を添加し、得られた懸濁液を室温で一晩撹拌した。反応混合物を水で希釈し、ＭＴＢＥで２回抽出した。水層を１Ｍ塩酸でｐＨ３～４に酸性化し、ＤＣＭで３回抽出した。合わせた有機相を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、次いで濃縮した。粗生成物を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ；Ｃ１８；１０μｍ；１２５×４０ｍｍ；溶媒：０、１％ＨＣＯＯＨを含むＡｃＣＮ／Ｈ_２Ｏ；流量：１００ｍＬ／分；グラディエント：０～５．５０分 １０：９０；３．００分での試料注入；５．５０～１７．６５分 ９５：５へのグラディエント；１７．６５～１９．４８分 ９５：５で；１９．４８～１９．６６分 １０：９０へ；１９．６６～２０．７２分 １０：９０；）により精製し、表題化合物の５７１ｍｇ（純度９６％、収率５７％）を得た。

LC-MS (方法 9): R_t = 1.06 分; MS (ESI pos): m/z = 418 [M+H]^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 2.073 (0.99), 2.203 (4.88), 2.345 (2.00), 2.366 (1.94), 3.755 (2.94), 4.078 (1.74), 4.221 (1.50), 4.253 (4.04), 4.270 (5.55), 4.290 (4.95), 4.337 (2.21), 7.293 (3.93), 7.301 (4.07), 7.312 (9.32), 7.319 (8.88), 7.330 (6.19), 7.337 (5.57), 7.407 (9.40), 7.425 (16.00), 7.444 (7.29), 7.695 (5.70), 7.887 (13.98), 7.906 (12.87), 12.866 (0.63).
この物質はまた、商業的に入手可能である（ＣＡＳ ＲＮ：１９８６９０５－５４－７）。

ｒｅｌ－（１Ｒ，３Ｒ，５Ｒ，６Ｒ）－６－（トリフルオロメチル）－２－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－３－カルボン酸（エナミン）を用いたラセミアミノ酸を同様に調製した。

これらのアミノ酸をＳＰＰＳに使用した。

実施例８４Ａ
メチルＮ－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）－Ｌ－イソロイシルセリネート（ジアステレオマーの混合物）

Ｎ－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）－Ｌ－イソロイシン（７．５０ｇ、３２．４ｍｍｏｌ）およびメチルＤＬ－セリネート－塩化水素（１／１）（５．０５ｇ、３２．４ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（６５ｍＬ）に溶解した。（ベンゾトリアゾール－１－イルオキシ）トリス（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（１４．９ｇ、３３．６ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（１１ｍＬ、６５ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で一晩撹拌した。ジクロロメタン（２５０ｍＬ）を加え、反応混合物を水、塩酸水溶液（１Ｍ）および炭酸水素ナトリウム水溶液で連続的に洗浄した。合わせた有機抽出物を硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、次いで濃縮した。粗生成物をＤＣＭに溶解し、水で十分に洗浄し、再び塩酸水溶液（１Ｍ）で２回洗浄し、次いで炭酸水素ナトリウム水溶液でさらに２回洗浄した。続いて、合わせた有機相を硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、次いで濃縮した。粗生成物を次の工程に直接使用した。

LC-MS (方法 11): 355.2 (M⁺Na⁺)
実施例８５Ａ
メチル２－｛（１Ｓ，２Ｓ）－１－［（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ］－２－メチルブチル｝－４，５－ジヒドロ－１，３－オキサゾール－４－カルボキシレート（ジアステレオマーの混合物）

メチルＮ－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）－Ｌ－イソロイシルセリネート（実施例８４Ａ、４．６２ｇ、１３．９ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（５１ｍＬ）に溶解し、溶液を－７８℃に冷却した。Ｎ－エチル－Ｎ－（トリフルオロ－ラムダ^４－スルファニル）エタナミン（２．２ｍｌ、１７ミリモル）を加え、反応混合物を－７８℃で１．５時間撹拌した。反応を炭酸カリウム（７．６８ｇ、５５．６ｍｍｏｌ）でクエンチし、次いで室温に冷却した。溶液を室温で１時間撹拌した。次に、溶液をＤＣＭ（５０ｍＬ）で希釈し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で３回洗浄した。水相をＤＣＭでさらに抽出した。合わせた有機相をブラインで洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、次いで濃縮して所望の生成物５．７５ｇを得た。

LC-MS (方法 11): 315.2 (M⁺H⁺), 337.2 (M⁺Na⁺)
実施例８６Ａ
メチル２－｛（１Ｓ，２Ｓ）－１－［（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ］－２－メチルブチル｝－１，３－オキサゾール－４－カルボキシレート

メチル２－｛（１Ｓ，２Ｓ）－１－［（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ］－２－メチルブチル｝－４，５－ジヒドロ－１，３－オキサゾール－４－カルボキシレート（実施例８５Ａ、４．３７ｇ、１３．９ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（３５ｍＬ、５４０ｍｍｏｌ）に溶解し、溶液を－４０℃で冷却した。ブロモ（トリクロロ）メタン（２．７ｍＬ、２７ｍｍｏｌ）を添加し、次いで２，３，４，６，７，８，９，１０－オクタヒドロピリミド［１，２－ａ］アゼピン（４．６ｍＬ、３１ｍｍｏｌ）も添加した。反応溶液を０℃で２．５時間撹拌し、次いでＤＣＭで希釈した。反応混合物を１０％クエン酸溶液で５回洗浄した。合わせた水層をＤＣＭで抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（グラディエント：シクロヘキサン／酢酸エチル（４：１））により精製して、２．２ｇ（収率５０．７％）の表題化合物を得た。

LC-MS (方法 10): 335.15 (M⁺Na⁺)
実施例８７Ａ
２－｛（１Ｓ，２Ｓ）－１－［（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ］－２－メチルブチル｝－１，３－オキサゾール－４－カルボン酸

メチル２－｛（１Ｓ，２Ｓ）－１－［（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ］－２－メチルブチル｝－１，３－オキサゾール－４－カルボキシレート（実施例８６Ａ、２．２１ｇ、７．０６ｍｍｏｌ）をメタノール（１３．５ｍＬ）に溶解した。水酸化ナトリウム水溶液（４．３ｍＬ、３Ｍ）を加え、反応混合物を４０分間撹拌し、次いで濃縮してメタノールを除去した。水溶液を１Ｍ塩酸水溶液（１４ｍＬ）で酸性化し、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、次いで減圧下で濃縮して、１２．０ｇ（純度９５％、収率５１％）の表題化合物を得た。

LC-MS (MCW_OA_S1): R_t = 1.13 分; MS (ESI neg): m/z = 297 [M+H]^-
実施例８８Ａ
（４Ｒ）－３－［（３Ｓ）－３－メチルペンタノイル］－５，５－ジフェニル－４－（プロパン－２－イル）－１，３－オキサゾリジン－２－オン

（３Ｓ）－３－メチルペンタン酸（８６７ｍｇ、７．４６ｍｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（５０ｍＬ）溶液を－３０℃に冷却した。２，２－ジメチルプロパノイルクロリド（９２０μｌ、７．５ｍｍｏｌ）を滴下し、反応混合物を－３０℃で１．５時間撹拌した。乾燥塩化リチウム（３４７ｍｇ、８．１７ｍｍｏｌ）および（４Ｒ）－５，５－ジフェニル－４－（プロパン－２－イル）－１，３－オキサゾリジン－２－オン（２．００ｇ、７．１１ｍｍｏｌ）（（Ｒ）－ＤＩＯＺ）を順次添加し、反応混合物をゆっくりと室温にし、一晩撹拌した。反応混合物を酢酸エチルおよび水で希釈した。水層を分離し、酢酸エチルで抽出した。合わせた酢酸エチル層を塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、次いで濃縮して、２．８７ｇの白色固体を得た。粗生成物を少量のメタノールでＤＣＭに溶解し、溶離液としてシクロヘキサン／酢酸エチル（８０：２０）を用いてシリカゲルカラムクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ Ｉｓｏｌｅｒａ、５０ｇカートリッジ）よって精製した。生成物含有画分を合わせ、濃縮し、乾燥させて、２．２５ｇ（純度９８％、収率８２％）の標的化合物を得た。

LC-MS (方法 10): R_t = 2.69 分; MS (ESI pos): m/z = 380 [M+H]^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.616 (13.33), 0.633 (13.58), 0.650 (7.84), 0.660 (16.00), 0.668 (15.61), 0.676 (15.27), 0.686 (7.40), 0.719 (0.40), 0.875 (12.87), 0.893 (12.59), 0.940 (0.92), 0.958 (1.50), 0.975 (2.08), 0.993 (2.23), 1.011 (1.38), 1.028 (0.84), 1.045 (1.41), 1.061 (1.93), 1.079 (1.89), 1.095 (1.16), 1.112 (0.62), 1.541 (0.55), 1.557 (1.29), 1.574 (1.91), 1.590 (1.82), 1.607 (1.10), 1.623 (0.40), 2.020 (0.71), 2.036 (1.44), 2.049 (1.78), 2.065 (1.28), 2.082 (0.50), 2.449 (2.60), 2.468 (2.84), 2.755 (2.63), 2.771 (2.50), 2.793 (2.05), 2.808 (1.92), 5.557 (5.98), 5.563 (5.64), 7.271 (2.61), 7.289 (6.37), 7.307 (5.02), 7.352 (5.04), 7.368 (10.74), 7.385 (9.60), 7.403 (3.47), 7.557 (8.45), 7.577 (6.54), 7.639 (8.45), 7.659 (6.92).
実施例８９Ａ
ベンジル｛（２Ｓ，３Ｓ）－３－メチル－２－［（４Ｒ）－２－オキソ－５，５－ジフェニル－４－（プロパン－２－イル）－１，３－オキサゾリジン－３－カルボニル］ペンチル｝カルバメート

文献手順（Ｓｅｂｅｓｔａ ａｎｄ Ｓｅｅｂａｃｈ、Ｈｅｌｖ．Ｃｈｉｍ．Ａｃｔａ ２００３、８６、４０６１－４０７２）に従った。（４Ｒ）－３－［（３Ｓ）－３－メチルペンタノイル］－５，５－ジフェニル－４－（プロパン－２－イル）－１，３－オキサゾリジン－２－オン（実施例８８Ａ、２．２０ｇ、５．８０ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（２０ｍＬ）に溶解し、溶液を－１５℃に冷却した。塩化チタン（ＩＶ）溶液（６．１ｍＬ、ＤＣＭ中１．０Ｍ、６．１ｍｍｏｌ）を－１５^ｏＣに維持しながら滴下し、次いでトリエチルアミン（８９０μｌ、６．４ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を－１５^ｏＣで３０分間撹拌した。

別の丸底フラスコ中で、ベンジル（メトキシメチル）カルバメート（１．２４ｇ、６．３８ｍｍｏｌ、ＣＡＳ ＲＮ：９４４７１－３５－９）のＤＣＭ（１０ｍＬ）溶液を０^ｏＣに冷却した。塩化チタン（ＩＶ）（６．４ｍＬ、ＤＣＭ中１．０Ｍ、６．４ミリモル）溶液を滴下し、次いで、溶液全体を、（４Ｒ）－３－［（３Ｓ）－３－メチルペンタノイル］－５，５－ジフェニル－４－（プロパン－２－イル）－１，３－オキサゾリジン－２－オンを含むフラスコに滴下した。反応混合物を０^ｏＣで４時間撹拌し、次いで室温で一晩撹拌した。塩化アンモニウム水溶液を添加することによって反応を停止させ、次いで追加のＤＣＭで希釈した。分離した有機層を１ＭＨＣｌ水溶液、１ＭＮａＯＨ水溶液、次いで塩化ナトリウム水溶液で洗浄した。有機層を濾過し、次いで濃縮して、３．３９ｇの黄色油を得た。粗生成物を、シクロヘキサン／酢酸エチル（８５：１５）溶離液を用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ Ｉｓｏｌｅｒａ １００ｇカートリッジ）によって精製した。生成物含有画分を合わせ、濃縮し、次いで乾燥して、９６．３％のジアステレオ選択性を有する表題化合物１．５０ｇ（純度９６％、収率４６％、選択性）を得た（ｌｉｔ．９６％）。

LC-MS (方法 10): R_t = 2.63 分; MS (ESI pos): m/z = 543 [M+H]^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.429 (3.22), 0.446 (3.32), 0.480 (1.44), 0.498 (3.18), 0.516 (1.79), 0.595 (4.27), 0.611 (4.65), 0.643 (0.49), 0.663 (0.46), 0.768 (0.45), 0.786 (0.46), 0.874 (3.86), 0.891 (4.01), 1.098 (0.48), 1.397 (16.00), 1.993 (0.45), 2.010 (0.57), 2.023 (0.45), 3.146 (0.44), 3.169 (0.66), 3.180 (1.02), 3.192 (0.63), 3.206 (0.44), 3.222 (0.53), 3.243 (0.48), 3.816 (0.57), 4.920 (0.59), 4.952 (1.85), 4.978 (2.04), 5.010 (0.65), 5.539 (1.70), 5.544 (1.73), 7.187 (0.53), 7.201 (0.87), 7.282 (3.41), 7.289 (5.28), 7.306 (4.14), 7.322 (1.84), 7.342 (2.69), 7.362 (3.73), 7.385 (3.47), 7.405 (1.52), 7.566 (3.08), 7.584 (2.46), 7.662 (2.88), 7.681 (2.48).
実施例９０Ａ
（２Ｓ，３Ｓ）－２－（｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝メチル）－３－メチルペンタン酸

ＴＨＦ（１５ｍＬ）中のベンジル｛（２Ｓ，３Ｓ）－３－メチル－２－［（４Ｒ）－２－オキソ－５，５－ジフェニル－４－（プロパン－２－イル）－１，３－オキサゾリジン－３－カルボニル］ペンチル｝カルバメート（実施例８９Ａ，１．４９ｇ，２．７５ｍｍｏｌ）の溶液を調製した。水（５ｍＬ）中のＬｉＯＨ（１０５ｍｇ、４．３９ｍｍｏｌ）の溶液を添加し、反応混合物を室温で２４時間撹拌した。ＨＰＬＣ分析は、反応が完了していないことを示したので、追加の当量の水（３ｍＬ）中のＬｉＯＨ（６５．８ｍｇ、２．７５ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で一晩撹拌した。反応混合物をジエチルエーテルで希釈し、混合物を５分間撹拌し、次いで濾過した。フィルターケーキを水およびエーテルで洗浄し、次いで層を分離した。水層を１ＭＨＣｌ水溶液でｐＨ１に酸性化し、ジエチルエーテルで３回抽出した。合わせたエーテル相を塩化ナトリウム溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、次いで濃縮した。高真空下で乾燥させた後、７１５ｍｇ（純度１００％、収率９３％）の表題化合物を得た。

LC-MS (方法 10): R_t = 1.71 分; MS (ESI pos): m/z = 280 [M+H]^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.837 (6.34), 0.856 (14.23), 0.863 (13.72), 0.880 (12.65), 1.098 (0.91), 1.117 (1.35), 1.133 (1.47), 1.151 (1.49), 1.170 (0.95), 1.348 (0.42), 1.367 (1.02), 1.380 (1.33), 1.398 (1.53), 1.414 (1.09), 1.431 (0.72), 1.596 (0.82), 1.611 (1.42), 1.627 (1.61), 1.644 (1.16), 1.660 (0.53), 1.908 (3.41), 2.396 (1.17), 2.413 (2.79), 2.429 (2.67), 2.445 (1.07), 2.501 (16.00), 3.139 (4.27), 3.155 (7.41), 3.171 (4.60), 5.000 (15.52), 7.221 (1.46), 7.234 (2.66), 7.248 (1.41), 7.283 (0.89), 7.290 (0.97), 7.300 (2.98), 7.318 (5.22), 7.332 (11.34), 7.339 (12.29), 7.356 (5.30), 7.375 (1.45), 12.135 (3.58).
実施例９１Ａ
（２Ｓ，３Ｓ）－２－（アミノメチル）－３－メチルペンタン酸

１０％炭素上パラジウム（１００ｍｇ）を丸底フラスコに秤量し、フラスコをアルゴンでフラッシュした。（２Ｓ，３Ｓ）－２－（｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝メチル）－３－メチルペンタン酸（実施例９０Ａ、７１０ｍｇ、２．５４ｍｍｏｌ）のメタノール（４０ｍｌ）溶液を加え、反応混合物を、常圧のＨ_２気体下、室温で撹拌した。ＨＰＬＣ分析は、室温で２時間後に反応が完了したことを示した。反応混合物をシリカゲルのプラグを通して濾過し、フィルターケーキをメタノールで数回洗浄した。合わせた濾液を減圧下で濃縮して、３４５ｍｇ（９３％）の表題化合物を得た。化合物を次の工程に直接使用した。

実施例９２Ａ
（２Ｓ，３Ｓ）－２－［（｛［（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ］カルボニル｝アミノ）メチル］－３－メチルペンタン酸

（２Ｓ，３Ｓ）－２－（アミノメチル）－３－メチルペンタン酸（実施例９１Ａ、３４４ｍｇ、２．３７ｍｍｏｌ）を炭酸ナトリウム水溶液（３２ｍＬ、０．１５Ｍ、４．７ｍｍｏｌ）に溶解した。１－（｛［（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ］カルボニル｝オキシ）ピロリジン－２，５－ジオン（９５９ｍｇ、２．８４ｍｍｏｌ）をアセトン（３０ｍＬ）に溶解し、この溶液を前の溶液に加え、反応混合物を室温で２時間撹拌した。反応混合物を濃縮してアセトンを除去した。水溶液を水で希釈し、酢酸エチルで抽出した。水層を１Ｍ塩酸水溶液でｐＨ３～４に酸性化し、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、次いで濃縮した。粗生成物を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ；Ｃ１８；１０μｍ；１２５×３０ｍｍ；溶媒：０．１％ＨＣＯＯを含むＡｃＣＮ／Ｈ_２Ｏ；流量：７５ｍＬ／分；グラディエント：０～５．５０分（１０：９０）；３．００分での試料注入；５．５０～１７．６５分 ９５：５へのグラディエント；１７．６５～１９．４８分（９５：５）；１９．４８～１９．６６分 １０：９０へのグラディエント；１９．６６～２０．７２分（１０：９０））によって精製して、表題化合物７９５ｍｇ（純度９６％、収率８８％）を得た。

LC-MS (方法 9): R_t = 1.06 分; MS (ESI pos): m/z = 368 [M+H]^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.04), 0.008 (0.54), 0.752 (0.73), 0.841 (7.69), 0.860 (16.00), 0.870 (15.28), 0.878 (10.54), 0.887 (13.22), 1.085 (0.41), 1.103 (0.99), 1.123 (1.45), 1.139 (1.58), 1.157 (1.60), 1.176 (1.00), 1.371 (1.16), 1.384 (1.50), 1.403 (1.71), 1.418 (1.23), 1.435 (0.83), 1.604 (0.88), 1.619 (1.50), 1.636 (1.70), 1.651 (1.23), 2.408 (1.27), 2.425 (2.91), 2.441 (3.13), 2.458 (1.88), 2.524 (0.87), 2.749 (0.82), 3.143 (4.18), 3.158 (6.08), 3.174 (3.40), 4.176 (1.25), 4.194 (3.04), 4.211 (4.04), 4.241 (8.74), 4.255 (4.27), 4.263 (3.35), 7.303 (5.42), 7.322 (12.94), 7.340 (10.81), 7.353 (1.98), 7.394 (7.49), 7.413 (11.83), 7.431 (5.34), 7.673 (5.88), 7.683 (5.84), 7.691 (5.19), 7.701 (4.30), 7.876 (12.54), 7.895 (11.30), 12.176 (1.21).
このアミノ酸をＳＰＰＳに使用した。

実施例９３Ａ
２－［（１Ｓ，２Ｓ）－１－（｛［（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ］カルボニル｝アミノ）－２－メチルブチル］－１，３－オキサゾール－４－カルボン酸

２－｛（１Ｓ，２Ｓ）－１－［（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ］－２－メチルブチル｝－１，３－オキサゾール－４－カルボン酸（実施例８７Ａ、１．８５ｇ、６．２１ｍｍｏｌ）をトリフルオロ酢酸（７．６ｍＬ、９９ｍｍｏｌ）に溶解し、溶液を１５分間撹拌した。次に、溶液をトルエンで希釈し、蒸発させた。この工程を再び繰り返した。粗生成物を１，４－ジオキサン（２０ｍＬ、２３０ｍｍｏｌ）および水（２０ｍＬ）に溶解した。炭酸カリウム（１．６０ｇ、１１．６ｍｍｏｌ）および１－｛［（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシ）カルボニル］オキシ｝ピロリジン－２，５－ジオン（２．３５ｇ、６．９６ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で一晩撹拌した。反応混合物を水（６５ｍＬ）で希釈し、１０％クエン酸水溶液でｐＨ２～３に酸性化した。反応混合物を酢酸エチルで抽出し（３回）、合わせた有機層をブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、次いで減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ジクロロメタン－メタノール（３～７％＋１％酢酸））で精製し、生成物含有画分を合わせ、トルエンで希釈し、次いで濃縮した。次いで、トルエンを再び添加し、次いで、溶液を濃縮して、２．０９ｇ（純度１００％、収率８０％）の表題化合物を得た。

LC-MS (MCW_FT_MS_M1): R_t = 2.01 分; MS (ESI pos): m/z = 421 [M+H]⁺
このアミノ酸をＳＰＰＳに使用した。

実施例９４Ａ
ジ（プロパ－２－エン－１－イル）アミノ］（１－メチル－１Ｈ－インダゾール－５－イル）酢酸（ラセミ体）

（１－メチル－１Ｈ－インダゾール－５－イル）ボロン酸（ＣＡＳ－ＲＮ：５９０４１８－０８－９、５００ｍｇ、２．８４ｍｍｏｌ）、オキソ酢酸（ＣＡＳ－ＲＮ：２９８－１２－４、３１０μｌ、純度５０％、２．８ｍｍｏｌ）およびＮ－（プロパ－２－エン－１－イル）プロパ－２－エン－１－アミン（ＣＡＳ－ＲＮ：１２４－０２－７、３５０μｌ、２．８ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（７．５ｍＬ）に溶解し、反応混合物を６０℃で４０時間撹拌した。冷却後、得られた固体を濾過し、酢酸エチルで洗浄し、乾燥させて、７４０ｍｇ（純度１００％、収率９１％）の表題化合物を得た。

LC-MS (方法 9): R_t = 0.44 分; MS (ESI neg): m/z = 284 [M-H]^-
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.008 (1.87), 2.073 (0.51), 3.110 (0.68), 3.125 (0.77), 3.147 (2.14), 3.161 (2.16), 3.176 (2.32), 3.193 (2.28), 3.213 (0.90), 3.230 (0.96), 4.030 (16.00), 4.531 (3.61), 5.110 (2.47), 5.134 (4.58), 5.174 (2.56), 5.752 (0.60), 5.768 (1.07), 5.778 (0.73), 5.783 (0.73), 5.794 (1.49), 5.810 (1.35), 5.820 (0.63), 5.826 (0.67), 5.837 (0.87), 5.852 (0.49), 6.514 (1.52), 7.432 (1.39), 7.435 (1.47), 7.454 (1.77), 7.457 (1.87), 7.602 (2.26), 7.624 (1.75), 7.699 (3.10), 8.041 (4.18).
実施例９５Ａ
（｛［（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ］カルボニル｝アミノ）（１－メチル－１Ｈ－インダゾール－５－イル）酢酸（ラセミ体）

１，３－ジメチル－１，３－ジアジナン－２，４，６－トリオン（ＣＡＳ－ＲＮ：７６９－４２－６、１．９７ｇ、１２．６ｍｍｏｌ）とテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（４８．６ｍｇ，４２．１μｍｏｌ）をアルゴン下の丸底フラスコに入れた。次に、［ジ（プロパ－２－エン－１－イル）アミノ］（１－メチル－１Ｈ－インダゾール－５－ｙｌ）酢酸（実施例９４Ａ、６００ｍｇ、２．１０ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＣＭ溶液を添加し、反応混合物を３５℃で２時間撹拌した。懸濁液を水アセトンおよび水で希釈し、次いで反応混合物を濃縮してＤＣＭを除去した。炭酸水素ナトリウム（２．６５ｇ、３１．５ｍｍｏｌ）を添加した（注意ガス形成）。１－（｛［（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ］カルボニル｝オキシ）ピロリジン－２，５－ジオン（７８０ｍｇ、２．３１ｍｍｏｌ）を懸濁液に加え、反応混合物を室温で一晩撹拌した。水および炭酸ナトリウム水溶液（１０％）を加え、溶液をＭＴＢＥで２回抽出した。水相をクエン酸水溶液で酸性化し、次いでＤＣＭで３回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムを乾燥し、濾過し、次いで濃縮した。残渣を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ；Ｃ１８；１０μｍ；１２５×４０ｍｍ；溶剤：０．１％ＨＣＯＯＨを含むＡｃＣＮ／Ｈ_２Ｏ；流量：１００ｍＬ／分；グラディエント：０～５．５０分（１０：９０）；３．００分での試料注入；５．５０～１７．６５分 ９５：５へのグラディエント；１７．６５～１９．４８分（９５：５）；１９．４８～１９．６６分 １０：９０へのグラディエント；１９．６６～２０．７２分（１０：９０））により精製して、表題化合物４２２ｍｇ（純度１００％、収率４７％）を得た。

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 2.073 (0.59), 4.041 (16.00), 4.198 (0.63), 4.215 (1.87), 4.231 (3.51), 4.253 (1.84), 4.269 (1.50), 4.280 (1.92), 4.298 (1.70), 4.319 (0.59), 5.256 (1.81), 5.276 (1.80), 7.275 (0.90), 7.293 (2.03), 7.320 (2.08), 7.339 (1.26), 7.388 (1.98), 7.406 (3.38), 7.424 (1.73), 7.445 (1.60), 7.467 (1.96), 7.621 (2.30), 7.643 (1.76), 7.744 (3.56), 7.763 (3.31), 7.792 (3.19), 7.875 (4.81), 7.893 (4.48), 8.063 (4.53), 8.213 (1.70), 8.232 (1.65), 12.835 (1.03).
実施例９６Ａ
（｛［（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ］カルボニル｝アミノ）（１－メチル－１Ｈ－インダゾール－５－イル）酢酸（エナンチオマー１）

ジアステレオマー混合物（実施例９５Ａ、６００ｍｇ）をメタノール／アセトニトリル（６０ｍＬ）に溶解し、Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＡＤ－Ｈ（ＳＦＣ）５μｍ、２５０×３０ｍｍカラム；溶離液：ＣＯ２／イソプロパノール（８０：２０）；圧力：１３５バール；温度溶離液：３８℃；流量：１００ｇ／分；検出：ＵＶ２１０ｎｍ；注入容量０．４ｍＬ／注入；一般的な操作条件下で、ＣＯ２の１ｇ／分は約１ｍＬ／分に等しい、を使用するＴＨＡＲ超臨界流体クロマトグラフィーＰｒｅｐ ２００装置を使用して分離した。

シーケンス設定：サイクルタイム＝１１．２分
画分１を５．８分で収集し（エナンチオマー１）、画分２を７．７分の間で収集した（エナンチオマー２）。画分を濃縮した。

分析用ＳＦＣ－ＭＳ（Ａｇｉｌｅｎｔ、カラム：Ｄａｉｃｅｌ ＡＤ－３ ３μｍ １００×４，６ｍｍ、溶離液：ＣＯ２／メタノール（８０：２０）；ＢＰＲ圧力：１３０バール；ＢＰＲ温度：６０℃；カラム温度：４０℃；流量：３ｍＬ／分；ＵＶ ２１０ｎｍ）を用いて画分を分析した。

２つのエナンチオマーの立体化学は割り当てられなかった。

１８５ｍｇのエナンチオマー１（１００％純度、９９．５％ｅｅ）が得られた（立体化学は測定されなかった）。

LC-MS (方法 10): R_t = 1.80 分; MS (ESI pos): m/z = 428 [M+H]^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 4.040 (16.00), 4.197 (0.54), 4.214 (1.44), 4.230 (2.80), 4.251 (1.59), 4.268 (1.38), 4.278 (1.68), 4.295 (1.46), 4.316 (0.48), 5.241 (1.20), 5.261 (1.19), 7.275 (0.78), 7.294 (1.73), 7.321 (1.78), 7.339 (1.11), 7.386 (1.77), 7.394 (1.54), 7.405 (2.97), 7.412 (2.26), 7.423 (1.63), 7.444 (1.36), 7.466 (1.53), 7.617 (1.85), 7.638 (1.42), 7.742 (3.01), 7.761 (2.84), 7.787 (2.53), 7.874 (4.50), 7.893 (4.19), 8.058 (4.56), 8.183 (0.93), 8.201 (0.92).
このアミノ酸をＳＰＰＳに使用した。

実施例９７Ａ
（｛［（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ］カルボニル｝アミノ）（１－メチル－１Ｈ－インダゾール－５－イル）酢酸（エナンチオマー２）

実施例９６Ａに記載のキラル分離法を用いて、１４５ｍｇ（純度１００％、９４．３％）のエナンチオマー２を得た（立体化学は決定されなかった）。

LC-MS (方法 10): R_t = 1.80 分; MS (ESI pos): m/z = 428 [M+H]^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (0.78), 0.008 (0.70), 4.040 (16.00), 4.198 (0.41), 4.214 (1.16), 4.230 (2.33), 4.252 (1.27), 4.268 (1.03), 4.278 (1.36), 4.295 (1.14), 4.300 (0.99), 5.243 (0.98), 5.262 (0.98), 7.276 (0.59), 7.294 (1.34), 7.313 (1.11), 7.321 (1.38), 7.340 (0.86), 7.387 (1.36), 7.394 (1.12), 7.406 (2.32), 7.413 (1.70), 7.424 (1.22), 7.431 (0.89), 7.444 (1.06), 7.466 (1.21), 7.618 (1.52), 7.640 (1.16), 7.743 (2.38), 7.762 (2.23), 7.787 (2.02), 7.875 (3.68), 7.894 (3.45), 8.059 (3.94), 8.188 (0.73), 8.207 (0.72).
このアミノ酸をＳＰＰＳに使用した。

実施例９８Ａ
ベンジルＮ－［（ベンジルオキシ）カルボニル］－３－ブロモ－Ｌ－フェニルアラニネート

Ｎ－［（ベンジルオキシ）カルボニル］－３－ブロモ－Ｌ－フェニルアラニン（１５．３ｇ、４０．５ｍｍｏｌ）をメタノール（１１３ｍＬ）に溶解した。炭酸セシウム（６．５９ｇ、２０．２ｍｍｏｌ）を添加し、ガスが発生しなくなるまで混合物を撹拌した。溶液を蒸発乾固した。残渣をＤＭＦ（１４０ｍＬ、１．８ｍｏｌ）に溶解し、（ブロモメチル）ベンゼン（５．３ｍＬ、４４ｍｍｏｌ）を滴下した。短時間後、固体が沈殿した。懸濁液をエーテルおよび水で希釈した。有機相を分離し、水相をジエチルエーテルで２回抽出した。合わせた有機層を水で洗浄し、ブラインで洗浄し、次いで硫酸マグネシウムで乾燥させた。結晶性残渣をエーテルに溶解し、ペンタンを添加した後、沈殿が形成された。固体を濾過し、乾燥させた。エーテル／ペンタン溶液を蒸発させ、エーテルに溶解した；ペンタンの添加後、沈殿が形成した。固体を濾過し、乾燥させて、１６．０ｇ（純度１００％、収率８４％）の表題化合物を得た。

LC-MS (方法 10): Rt = 2.42 分; MS (ESI pos): m/z = 468 [M+H]+
¹H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 2.874 (2.41), 2.895 (2.86), 2.902 (3.10), 2.923 (2.76), 3.071 (2.84), 3.082 (2.96), 3.099 (2.26), 3.109 (2.09), 3.636 (0.82), 4.336 (1.73), 4.347 (2.20), 4.353 (2.43), 4.357 (2.48), 4.363 (2.48), 4.373 (1.83), 4.383 (1.37), 4.921 (0.55), 4.963 (1.81), 4.989 (12.84), 4.994 (11.01), 5.020 (1.18), 5.043 (0.96), 5.093 (1.11), 5.119 (12.74), 5.139 (0.55), 5.147 (0.97), 7.174 (0.85), 7.211 (3.13), 7.226 (9.23), 7.241 (11.35), 7.248 (16.00), 7.263 (11.82), 7.298 (10.22), 7.313 (14.37), 7.316 (14.35), 7.321 (12.62), 7.332 (10.08), 7.336 (11.10), 7.344 (8.08), 7.351 (11.64), 7.366 (7.19), 7.379 (2.35), 7.414 (5.80), 7.429 (4.73), 7.499 (7.87), 7.880 (4.47), 7.896 (4.30).
実施例９９Ａ
３－［（２Ｓ）－３－（ベンジルオキシ）－２－｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝－３－オキソプロピル］安息香酸

反応をアルゴン下に設定した。２Ｌオートクレーブ（撹拌速度７５０ｒｐｍ）中に、酢酸パラジウム（ＩＩ）（２．１６ｇ、９．６１ｍｍｏｌ）、１，１’－ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン（１０．６３ｇ、１９．２２ｍｍｏｌ）および酢酸カリウム（４７．１ｇ、４８０ｍｍｏｌ）を添加する。オートクレーブをアルゴンでフラッシュし、乾燥ＤＭＦ（４５０ｍＬ）を添加することによって試薬を溶解する。乾燥ＤＭＦ（９３０ｍＬ）中のベンジルＮ－［（ベンジルオキシ）カルボニル］－３－ブロモ－Ｌ－フェニルアラニネート（実施例９８Ａ、４５．０ｇ、９６．１ｍｍｏｌ）の溶液をオートクレーブに添加し、続いて水（１８ｍＬ）を添加した。オートクレーブを密封し、窒素で繰り返しパージし、短時間撹拌した。オートクレーブを一酸化炭素（３バール）で加圧し、次いで８０℃に加熱し、および３バールに９６０分間保った。反応が完了した後、オートクレーブをパージし、開放し、次いで内容物を水（１３Ｌ）に溶解した。反応混合物を酢酸エチル（７Ｌ）で３回抽出し、合わせた有機層をブラインで洗浄し、次いで濃縮した。粗生成物を、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ（９５／５）を用いた分取順相クロマトグラフィー（１０ｋｇシリカゲル）によって精製し、次いで分取クロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨグラディエント、Ｂｉｏｔａｇｅ Ｉｓｏｌｅｒａ）によってさらに精製して、１０．７ｇ（純度９２％）の表題化合物を得た。

LC-MS (方法 10): R_t = 1.92 分; MS (ESI neg): m/z = 432.14 [M-H]^-
実施例１００Ａ
ベンジルＮ－［（ベンジルオキシ）カルボニル］－３－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）－Ｌ－フェニルアラニネート

３－［（２Ｓ）－３－（ベンジルオキシ）－２－｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝－３－オキソプロピル］安息香酸（実施例９９Ａ、１８．０ｇ、４１．５ｍｍｏｌ）に、ジクロロメタン（２８０ｍＬ、４．４ｍｏｌ）を加えた。シクロヘキサン（１４０ｍＬ、１．３ｍｏｌ）、ｔｅｒｔ－ブチル２，２，２－トリクロロエタンイミデート（３６．３ｇ、１６６ｍｍｏｌ）および（ジエチルエーテル）（トリフルオロ）ホウ素（１．６ｍＬ、１２ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で撹拌した。１時間後、追加の（ジエチルエーテル）（トリフルオロ）ホウ素（１．６ｍＬ、１２ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で一晩撹拌した。（ジエチルエーテル）（トリフルオロ）ホウ素（１ｍＬ、７．５ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で２時間撹拌した。追加のｔｅｒｔ－ブチル２，２，２－トリクロロエタンイミデート（９．０ｇ、４０．５ｍｍｏｌ）および追加の（ジエチルエーテル）（トリフルオロ）ホウ素（１ｍＬ、７．５ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で一晩撹拌した。懸濁液を濾過し、沈殿をＤＣＭ：シクロヘキサン（２：１）で洗浄した。溶液を濃炭酸水素ナトリウム水溶液で希釈した。合わせた水層をＤＣＭで２回抽出した。次いで、合わせた有機層を硫酸マグネシウム上で乾燥し、濾過し、次いで蒸発させた。得られた黒色油状物をシクロヘキサンおよび酢酸エチル（２％）と共に撹拌し、沈殿物を濾過し、濾液を蒸発させた。得られた黒色油状物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（シクロヘキサン－酢酸エチル（９：１））により精製して、表題化合物１２．１ｇ（純度１００％、収率６０％）を得た。

LC-MS (方法 9): R_t = 1.34 分; MS (ESI pos): m/z = [M+H]⁺490
実施例１０１Ａ
３－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）－Ｌ－フェニルアラニン

ベンジルＮ－［（ベンジルオキシ）カルボニル］－３－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）－Ｌ－フェニルアラニネート（実施例１００Ａ、１３．０ｇ、２６．６ｍｍｏｌ）をメタノール（２５０ｍＬ）に溶解した。１０％パラジウムチャコール（１．５４ｇ）を添加し、混合物を室温で４時間、周囲圧力で水素化した。沈殿が形成された。懸濁液をメタノールに溶解し、還流下で撹拌した。温かい溶液を珪藻土の層で濾過し、濾過ケーキをメタノール（約１Ｌ）で洗浄した。合わせた濾液を濃縮し、乾燥させて、６．１０ｇ（純度９４％、収率８１％）の表題化合物を得た。

LC-MS (方法 9): R_t = 0.59 分; MS (ESI neg): m/z = 264 [M-H]^-
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.525 (5.74), 1.546 (16.00), 2.326 (0.50), 2.366 (0.48), 2.670 (0.50), 2.709 (0.48), 3.169 (0.57), 7.400 (0.89), 7.419 (0.66), 7.501 (0.76), 7.739 (0.84), 7.759 (0.85), 7.796 (1.02).
実施例１０２Ａ
３－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）－Ｎ－｛［（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ］カルボニル｝－Ｌ－フェニルアラニン

３－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）－Ｌ－フェニルアラニン（実施例１０１Ａ、６．１０ｇ、２３．０ｍｍｏｌ）を水（１００ｍＬ）およびアセトン（１００ｍＬ）に溶解した。炭酸水素ナトリウム（１９．３ｇ、２３０ｍｍｏｌ）を添加した。１－（｛［（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ］カルボニル｝オキシ）ピロリジン－２，５－ジオン（８．１４ｇ、２４．１ｍｍｏｌ）のアセトン（１００ｍＬ）溶液を添加し、反応混合物を室温で一晩撹拌した。混合物を水で希釈し、ＭＴＢＥで１回抽出した。水層を１Ｍ塩酸で酸性化し、ＤＣＭで抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、次いで濃縮して表題化合物８．９０ｇ（純度１００％、収率７９％）を得た。生成物は有機層中にも存在した。有機層を濃縮した。ＤＣＭおよび１Ｍ塩酸を残渣に加え、混合物を５分間撹拌した。残渣を濾過し、水およびＤＣＭで洗浄した。層を分離し、水層をＤＣＭで抽出した。次いで、合わせた有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、次いで濃縮した。粗生成物をシリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィー（グラディエント ＤＣＭ：メタノール（０～１０％））により精製した。残渣をアセトニトリルに取り、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ；Ｃ１８；１０μｍ；１２５×４０ｍｍ；溶媒：０，１％ＨＣＯＯＨを含むＡｃＣＮ／Ｈ_２Ｏ；流量：１００ｍＬ／分；グラディエント：０～５．５０分（１０：９０）；３．００分での試料注入；５．５０～１７．６５分 ９５：５へのグラディエント；１７．６５～１９．４８分（９５：５）；１９．４８～１９．６６分 １０：９０へのグラディエント；１９．６６～２０．７２分（１０：９０））により精製した。合計で１．５８ｇ（純度１００％、収率１４％）の表題化合物が得られた。

LC-MS (方法 10): R_t = 2.27 分; MS (ESI neg): m/z = 486 [M-H]^-
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.106 (1.34), 1.144 (4.63), 1.519 (16.00), 1.544 (0.64), 2.086 (1.34), 2.119 (1.97), 2.483 (1.16), 2.595 (0.68), 3.077 (0.43), 3.319 (1.89), 4.158 (0.42), 4.169 (0.81), 4.181 (2.03), 4.195 (0.76), 4.203 (0.48), 4.541 (0.43), 7.259 (0.80), 7.277 (0.76), 7.293 (0.68), 7.312 (0.44), 7.378 (0.62), 7.384 (0.86), 7.397 (1.11), 7.403 (1.62), 7.415 (0.62), 7.422 (0.90), 7.521 (0.63), 7.540 (0.45), 7.583 (0.68), 7.605 (0.86), 7.626 (0.62), 7.747 (0.59), 7.766 (0.57), 7.784 (0.68), 7.806 (0.63), 7.847 (1.02), 7.864 (1.58), 7.883 (1.42).
このアミノ酸をＳＰＰＳに使用した。

実施例１０３Ａ
（２Ｓ，５Ｒ）－２－（２－エチルブチル）－３，６－ジメトキシ－５－（プロパン－２－イル）－２，５－ジヒドロピラジン

（２Ｒ）－３，６－ジメトキシ－２－（プロパン－２－イル）－２，５－ジヒドロピラジン（ＣＡＳ－ＲＮ：１０９８３８－８５９、２．９ｍＬ、１６ｍｍｏｌ）を無水ＴＨＦ（６０ｍＬ、７４０ｍｍｏｌ）に溶解し、溶液を－７８℃に冷却した。ｎ－ブチルリチウム（１０ｍＬ、１．６Ｍ、１６ｍｍｏｌ）を、－７８℃で撹拌しながら１５分間かけてゆっくりと滴下した。３－（ブロモメチル）ペンタン（５．９１ｇ、３５．８ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を－７８℃で２時間撹拌し、次いで一晩で室温に戻した。溶液を０^ｏＣに冷却し、水でゆっくりとクエンチした。ジエチルエーテルを添加し、数分間撹拌した後、有機層を分離した。水相をジエチルエーテルで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させた。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（シクロヘキサン／酢酸エチル２％）により精製して、表題化合物２．６０ｇ（純度９５％、収率５７％）を得た。

LC-MS (方法 10): R_t = 2.90 分; MS (ESI pos): m/z = 269 [M+H]^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (0.51), 0.008 (0.45), 0.608 (6.77), 0.624 (6.91), 0.771 (3.04), 0.790 (7.57), 0.796 (3.51), 0.808 (4.20), 0.815 (7.45), 0.833 (3.54), 0.999 (6.56), 1.016 (6.71), 1.179 (0.65), 1.197 (0.97), 1.215 (0.95), 1.223 (0.51), 1.232 (0.73), 1.240 (0.81), 1.257 (1.26), 1.275 (1.64), 1.294 (1.28), 1.310 (0.57), 1.343 (0.55), 1.356 (1.67), 1.364 (0.66), 1.369 (0.83), 1.376 (1.52), 1.388 (1.40), 1.398 (0.66), 1.403 (0.63), 1.409 (1.04), 1.422 (0.43), 1.459 (0.56), 1.474 (0.63), 1.489 (0.45), 1.637 (0.66), 1.647 (0.68), 1.656 (0.56), 1.667 (0.69), 1.670 (0.69), 1.681 (0.54), 1.690 (0.48), 1.700 (0.44), 2.191 (0.54), 2.199 (0.55), 2.208 (0.71), 2.216 (0.71), 2.225 (0.52), 2.233 (0.51), 3.597 (16.00), 3.616 (15.85), 3.916 (1.08), 3.925 (2.24), 3.933 (1.46), 3.959 (0.67), 3.969 (1.06), 3.980 (0.99), 3.990 (1.00), 4.000 (0.49).
実施例１０４Ａ
メチル４－エチル－Ｌ－ノルロイシネート

メタノール（３０ｍＬ）中の（２Ｓ，５Ｒ）－２－（２－エチルブチル）－３，６－ジメトキシ－５－（プロパン－２－イル）－２，５－ジヒドロピラジン（実施例１０３Ａ、２．６０ｇ、９．６９ｍｍｏｌ）の溶液を０℃に冷却し、塩酸の１０％水溶液（１０ｍＬ）を添加し、次いで反応混合物を２時間撹拌した。溶液を蒸発させ、残渣をＤＣＭおよび炭酸ナトリウム溶液（１００ｍＬ、２．０Ｍ）で希釈した。分離した水層をＤＣＭで２回抽出した。合わせた有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、次いで濃縮して表題化合物３．４９ｇ（純度４８％、収率１００％）を得た。

GC-MS (GC-MS 方法 1): R_t = 3.18 分, m/z = 173 [M+]
実施例１０５Ａ
４－エチル－Ｎ－｛［（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ］カルボニル｝－Ｌ－ノルロイシン

メチル４－エチル－Ｌ－ノルロイシネート（実施例１０４Ａ、３．９７ｇ、純度４８％、１１．０ｍｍｏｌ）にメタノール（１００ｍＬ）を加え、得られた溶液を０℃に冷却した。水酸化ナトリウム溶液（２４ｍＬ、１．０Ｍ）を添加し、反応混合物を０℃で１時間撹拌し、次いで室温に温め、さらに４時間撹拌した。水（８０ｍＬ）、炭酸水素ナトリウム（２．０３ｇ、２４．２ｍｍｏｌ）および炭酸ナトリウム（４．００ｇ、３７．７ｍｍｏｌ）を溶液に連続的に添加した。ロータリーエバポレーターによって反応混合物からメタノールを除去し、水溶液を１，４－ジオキサン（６０ｍＬ）で希釈した。懸濁液を０℃に冷却し、（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メチルカルボノクロリデート（ＣＡＳ－ＲＮ：２８９２０－４３－６、８．５４ｇ、３３．０ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温にて一晩撹拌した。水とＭＴＢＥを加え、短時間攪拌した後、有機層を分離した。水層をＭＴＢＥで抽出し、次いで、合わせた有機層を５％炭酸ナトリウム溶液で洗浄した。合わせた水層を硫酸水素カリウムでｐＨ１に酸性化し、水性懸濁液をＤＣＭで３回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、次いで濃縮した。粗生成物を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ；Ｃ１８；１０μｍ；１２５×４０ｍｍ；溶媒：０，１％ＨＣＯＯＨを含むＡｃＣＮ／Ｈ_２Ｏ；流量：１００ｍＬ／分；グラディエント：０～５．５０分（１０：９０）；３．００分での試料注入；５．５０～１７．６５分 ９５：５へのグラディエント；１７．６５～１９．４８分（９５：５）；１９．４８～１９．６６分 １０：９０へのグラディエント；１９．６６～２０．７２分（１０：９０）により精製し、表題化合物１．５７ｇ（純度１００％、収率３７％）を得た。

LC-MS (方法 11): R_t = 1.49 分; MS (ESI pos): m/z = 404 [M+Na]^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (3.19), 0.008 (3.01), 0.774 (6.73), 0.792 (16.00), 0.809 (13.36), 0.826 (14.04), 0.844 (7.32), 1.181 (0.92), 1.197 (1.90), 1.216 (3.12), 1.234 (3.84), 1.253 (2.82), 1.273 (1.79), 1.293 (2.23), 1.308 (3.41), 1.331 (4.60), 1.339 (4.12), 1.505 (0.45), 1.557 (3.55), 1.575 (5.01), 1.590 (3.09), 3.950 (1.22), 3.970 (2.67), 3.989 (2.69), 4.009 (1.11), 4.204 (1.35), 4.220 (3.90), 4.238 (7.46), 4.263 (5.22), 4.279 (3.57), 4.286 (5.10), 4.304 (3.43), 4.310 (2.32), 4.328 (1.06), 7.299 (2.60), 7.306 (2.93), 7.317 (5.73), 7.322 (5.59), 7.336 (3.69), 7.341 (3.48), 7.400 (6.17), 7.419 (10.33), 7.437 (4.62), 7.626 (4.21), 7.647 (3.80), 7.711 (8.98), 7.729 (8.16), 7.884 (9.94), 7.903 (9.15), 12.540 (0.98).
このアミノ酸をＳＰＰＳに使用した。

実施例１０６Ａ
Ｎ－｛［（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ］カルボニル｝－２，６－ジフルオロ－Ｌ－フェニルアラニン

メチル２，６－ジフルオロ－Ｌ－フェニルアラニネート（ＣＡＳ－ＲＮ：１１９２０５７－２８－５、１．０３ｇ、４．７９ｍｍｏｌ）にメタノール（１８．５ｍＬ）を加え、溶液を０℃に冷却した。水酸化ナトリウム溶液（４．８ｍＬ、１．０Ｍ）を加え、反応混合物を室温で１時間撹拌した。水（１７ｍＬ）、炭酸水素ナトリウム（４０２ｍｇ、４．７９ｍｍｏｌ）および炭酸ナトリウム（６６７ｍｇ、６．２９ｍｍｏｌ）を溶液に加えた。メタノールをロータリーエバポレーターによって除去し、水層を１，４－ジオキサン（１４ｍＬ）で希釈した。懸濁液を０℃に冷却し、（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メチルカルボノクロリデート（ＣＡＳ－ＲＮ：２８９２０－４３－６、１．８６ｇ、７．１８ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で２時間撹拌した。反応混合物を水で希釈し、ＭＴＢＥで洗浄した。水層を１Ｍ塩酸でｐＨ１に酸性化し、酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、濃縮して表題化合物１．７４ｇ（純度１００％、収率８６％）を得た。

LC-MS (方法 10): R_t = 2.00 分; MS (ESI pos): m/z = 424 [M+H]^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.157 (0.74), 1.175 (1.50), 1.193 (0.76), 1.988 (2.79), 2.992 (0.74), 3.014 (0.87), 3.025 (1.22), 3.048 (1.17), 3.118 (1.24), 3.134 (1.32), 3.153 (0.81), 3.169 (0.76), 3.316 (16.00), 4.021 (0.71), 4.039 (0.70), 4.131 (0.95), 4.149 (1.39), 4.166 (2.72), 4.194 (4.15), 4.213 (2.65), 4.235 (0.72), 7.013 (1.71), 7.033 (3.28), 7.053 (2.07), 7.290 (1.33), 7.307 (3.44), 7.323 (4.18), 7.341 (2.36), 7.357 (0.48), 7.397 (2.41), 7.415 (4.00), 7.434 (1.83), 7.639 (2.22), 7.659 (3.87), 7.679 (1.99), 7.818 (1.97), 7.839 (1.95), 7.876 (4.80), 7.894 (4.40), 12.793 (0.81).
このアミノ酸をＳＰＰＳに使用した。

実施例１０７Ａ
Ｎ－｛［（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ］カルボニル｝－２，５－ジフルオロ－Ｌ－フェニルアラニン

メチル２，５－ジフルオロ－Ｌ－フェニルアラニネート（ＣＡＳ－ＲＮ：１２１３４９１－９５－２）（２．２７ｇ、１０．５ｍｍｏｌ）にメタノール（４０ｍＬ）を加え、得られた溶液を０℃に冷却した。水酸化ナトリウム溶液（１１ｍＬ、１．０Ｍ）を加え、反応混合物を室温で１．５時間撹拌した。水（３５ｍＬ）、炭酸水素ナトリウム（８８６ｍｇ、１０．５ｍｍｏｌ）および炭酸ナトリウム（１．４７ｇ、１３．９ｍｍｏｌ）を溶液に加えた。メタノールをロータリーエバポレーターによって除去し、水層を１，４－ジオキサン（３０ｍＬ）で希釈した。懸濁液を０℃に冷却し、（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メチルカルボノクロリデート（ＣＡＳ－ＲＮ：２８９２０－４３－６、４．０９ｇ、１５．８ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を室温で２時間撹拌した。混合物を水で希釈し、ＭＴＢＥで洗浄した。水層を１Ｍ塩酸溶液でｐＨ１に酸性化し、酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。粗生成物をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（グラディエント ＤＣＭ：メタノール０－５％）により精製し、次いで残渣をアセトニトリル中に取り、再度分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ；Ｃ１８；１０μｍ；１２５×４０ｍｍ；溶媒：０，１％ＨＣＯＯＨを含むＡｃＣＮ／Ｈ_２Ｏ；流量：１００ｍＬ／分；グラディエント：０－５．５０分（１０：９０）；３．００分での試料注入；５．５０－１７．６５分 ９５：５へのグラディエント；１７．６５－１９．４８分（９５：５）；１９．４８－１９．６６分 １０：９０へのグラディエント；１９．６６－２０．７２分（１０：９０）により精製して、表題化合物１．８２ｇ（純度１００％、収率４１％）を得た。

LC-MS (方法 9): R_t = 1.04 分; MS (ESI pos): m/z = 424 [M+H]^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (2.88), 0.008 (2.75), 1.234 (0.68), 2.329 (0.47), 2.671 (0.46), 2.843 (2.48), 2.870 (3.13), 2.877 (3.47), 2.904 (3.10), 3.166 (3.44), 3.177 (3.74), 3.200 (2.97), 3.212 (2.73), 4.141 (1.90), 4.158 (5.16), 4.173 (9.08), 4.196 (12.08), 4.201 (12.22), 4.211 (8.55), 4.221 (7.38), 4.233 (3.76), 4.246 (2.97), 4.259 (2.15), 7.084 (0.87), 7.093 (1.61), 7.106 (2.33), 7.114 (3.81), 7.124 (3.21), 7.135 (2.97), 7.144 (2.17), 7.175 (3.13), 7.187 (4.77), 7.197 (6.58), 7.210 (7.69), 7.220 (4.45), 7.232 (3.61), 7.263 (4.47), 7.282 (9.79), 7.301 (7.22), 7.305 (7.95), 7.325 (4.82), 7.349 (0.45), 7.389 (6.78), 7.408 (11.73), 7.426 (5.46), 7.489 (0.48), 7.509 (0.67), 7.532 (0.46), 7.610 (7.40), 7.628 (12.92), 7.646 (6.48), 7.791 (6.23), 7.812 (6.10), 7.871 (16.00), 7.890 (14.50), 12.862 (3.43).
このアミノ酸をＳＰＰＳに使用した。

このアミノ酸は、実施例１２６Ａで調製したメチル２，５－ジフルオロ－Ｌ－フェニルアラニネートからも調製した。アミノ酸はまた、実施例１０６Ａに記載される手順を使用して、２，５－ジフルオロ－Ｌ－フェニルアラニネート（ＣＡＳ ＲＮ：３１１０５－９２－７）から調製され得る。

実施例１０８Ａ
テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－３－イル酢酸ベンジル（ラセミ体）

テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－３－イル酢酸（１．００ｇ、６．９４ｍｍｏｌ）をメタノール（１０ｍＬ、２５０ｍｍｏｌ）に溶解した。炭酸セシウム（１．１３ｇ、３．４７ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を、ガスの発生が停止するまで室温で撹拌した。次に、溶液を蒸発させた。残渣をＤＭＦ（１０ｍＬ）に溶解し、（ブロモメチル）ベンゼン（１．３ｍＬ、１１ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を室温で一晩撹拌した。追加の（ブロモメチル）ベンゼン（３２５μＬ、２．７５ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で３時間撹拌した。次いで、懸濁液を水およびエーテルで希釈した。数分間撹拌した後、有機層を分離した。水層をジエチルエーテルで３回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、次いで濃縮した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（シクロヘキサン／酢酸エチル（８５／１５））により精製して、表題化合物１．５０ｇ（純度１００％、収率９２％）を得た。

LC-MS (方法 10): R_t = 1.84 分; MS (ESI pos): m/z = 235 [M+H]^+
1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.161 (0.45), 1.170 (0.51), 1.183 (0.89), 1.187 (0.68), 1.191 (0.98), 1.196 (0.60), 1.204 (0.68), 1.208 (1.03), 1.212 (0.77), 1.217 (1.00), 1.229 (0.62), 1.238 (0.63), 1.428 (0.47), 1.447 (0.62), 1.449 (0.74), 1.455 (0.95), 1.463 (0.63), 1.468 (0.83), 1.476 (1.42), 1.484 (0.80), 1.489 (0.56), 1.498 (0.98), 1.501 (0.53), 1.506 (1.11), 1.509 (1.00), 1.516 (1.65), 1.523 (1.08), 1.532 (0.56), 1.543 (0.70), 1.550 (0.40), 1.747 (0.90), 1.751 (0.77), 1.755 (0.89), 1.764 (0.62), 1.773 (0.82), 1.777 (0.69), 1.781 (0.77), 1.887 (0.41), 1.894 (0.68), 1.901 (0.68), 1.908 (0.76), 1.914 (0.90), 1.921 (0.74), 1.927 (0.68), 1.934 (0.63), 2.194 (1.30), 2.208 (1.18), 2.225 (3.67), 2.239 (3.41), 2.255 (3.55), 2.270 (3.23), 2.286 (1.23), 2.301 (1.12), 3.018 (2.02), 3.038 (2.30), 3.041 (2.34), 3.059 (2.06), 3.246 (1.05), 3.252 (1.07), 3.267 (1.61), 3.273 (1.61), 3.289 (1.21), 3.295 (1.19), 3.685 (0.75), 3.692 (1.34), 3.705 (1.77), 3.708 (1.89), 3.713 (2.24), 3.716 (2.16), 3.726 (1.17), 3.730 (1.14), 3.734 (1.08), 3.738 (0.97), 5.089 (16.00), 7.310 (0.41), 7.315 (0.73), 7.320 (0.71), 7.327 (2.21), 7.334 (1.16), 7.339 (1.36), 7.342 (1.95), 7.345 (2.49), 7.348 (2.36), 7.351 (1.63), 7.360 (9.48), 7.364 (11.33), 7.371 (1.08), 7.376 (3.55), 7.378 (3.74), 7.382 (1.62), 7.390 (0.55), 7.393 (1.20), 7.395 (0.74).
実施例１０９Ａ
テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－３－イル酢酸ベンジル

ジアステレオマー混合物（実施例１０８Ａ、１．５ｇ）をメタノール／アセトニトリル（３０ｍＬ）に溶解し、Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＡＺ－Ｈ（ＳＦＣ）５μｍ、２５０×３０ｍｍカラム；溶離液：ＣＯ２／エタノール（９０：１０）；圧力：１３５バール；温度溶離液：３５℃；流量：１００ｇ／分；検出：ＵＶ２１０ｎｍ；注入体積：０．４ｍＬ／注入；一般的な操作条件下で、１ｇ／分のＣＯ２は約１ｍＬ／分に等しい、を使用するＴＨＡＲ超臨界流体クロマトグラフィーＰｒｅｐ ２００装置を使用して分離した。

シーケンス設定：サイクルタイム＝１１，２分
画分１を１．４８分で回収した（エナンチオマー１）
画分２を１．８９分の間に収集した（エナンチオマー２）
生成物含有画分を合わせ、濃縮した。

分析用ＳＦＣ－ＭＳ（Ａｇｉｌｅｎｔ、カラム：Ｄａｉｃｅｌ ＡＺ－３ ３μｍ １００×４，６ｍｍ、溶離液：ＣＯ２／エタノール（９０：１０）；ＢＰＲ圧力：１３０バール；ＢＰＲ温度：６０℃；カラム温度：４０℃；流量：３ｍＬ／分；ＵＶ ２１０ｎｍ）を用いて画分を分析した。

２つのエナンチオマーの立体化学は割り当てられなかった。

ベンジルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－３－イルアセテート（エナンチオマー１）を９９．５％ｅｅ（６４１ｍｇ（純度１００％））で得た。

LC-MS (方法 9): R_t = 0.98 分; MS (ESI pos): m/z = 235 [M+H]^+
1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.161 (0.45), 1.170 (0.51), 1.183 (0.89), 1.187 (0.67), 1.191 (0.98), 1.196 (0.61), 1.204 (0.67), 1.209 (1.03), 1.213 (0.77), 1.217 (1.00), 1.230 (0.61), 1.238 (0.62), 1.428 (0.48), 1.447 (0.61), 1.449 (0.75), 1.455 (0.95), 1.463 (0.64), 1.468 (0.82), 1.476 (1.41), 1.484 (0.79), 1.489 (0.56), 1.498 (0.98), 1.501 (0.52), 1.507 (1.05), 1.510 (1.00), 1.516 (1.65), 1.523 (1.07), 1.532 (0.55), 1.543 (0.70), 1.747 (0.90), 1.751 (0.78), 1.755 (0.89), 1.764 (0.63), 1.773 (0.81), 1.777 (0.69), 1.781 (0.78), 1.887 (0.40), 1.894 (0.69), 1.901 (0.68), 1.908 (0.76), 1.914 (0.91), 1.921 (0.74), 1.927 (0.67), 1.934 (0.64), 2.194 (1.30), 2.208 (1.18), 2.225 (3.69), 2.239 (3.42), 2.255 (3.56), 2.270 (3.24), 2.286 (1.23), 2.301 (1.12), 3.019 (2.02), 3.038 (2.29), 3.041 (2.36), 3.060 (2.07), 3.246 (1.05), 3.252 (1.08), 3.268 (1.63), 3.273 (1.63), 3.289 (1.24), 3.295 (1.23), 3.686 (0.75), 3.692 (1.34), 3.705 (1.73), 3.708 (1.90), 3.713 (2.19), 3.715 (2.20), 3.726 (1.19), 3.730 (1.13), 3.734 (1.08), 3.738 (0.97), 5.089 (16.00), 7.310 (0.40), 7.315 (0.74), 7.321 (0.69), 7.328 (2.23), 7.334 (1.13), 7.339 (1.36), 7.342 (1.99), 7.345 (2.52), 7.347 (2.34), 7.350 (1.66), 7.360 (9.33), 7.364 (11.16), 7.371 (1.09), 7.376 (3.58), 7.378 (3.72), 7.382 (1.63), 7.390 (0.54), 7.393 (1.20), 7.396 (0.75).
ベンジルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－３－イルアセテート（エナンチオマー２）も９９．５％ｅｅ（６１１ｍｇ（純度１００％））で得られた。

実施例１１０Ａ
テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－３－イル酢酸（エナンチオマー１）

１０％パラジウムチャコール（８４．０ｍｇ）をアルゴン下でメタノールで加湿した。ベンジルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－３－イルアセテート（実施例１０９Ａ、６４１ｍｇ、２．７４ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。次いで、反応混合物を室温で周囲圧力で２時間水素化した。触媒を珪藻土の層上で濾過により除去し、濾過ケーキをメタノールで洗浄し、ロータリーエバポレーターにより溶媒を除去して、表題化合物３６４ｍｇ（純度１００％、収率９２％）を得た。

GC-MS (GC-MS 方法 1): R_t = 3.57 分, m/z = 144 [M+]
¹H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.145 (1.98), 1.154 (2.21), 1.166 (4.03), 1.171 (3.11), 1.175 (4.45), 1.180 (2.85), 1.188 (3.11), 1.192 (4.69), 1.196 (3.55), 1.201 (4.57), 1.213 (2.68), 1.222 (2.75), 1.428 (1.03), 1.436 (1.93), 1.445 (1.35), 1.449 (1.65), 1.455 (2.72), 1.458 (3.25), 1.463 (4.18), 1.471 (2.92), 1.476 (3.82), 1.484 (6.50), 1.493 (3.67), 1.498 (2.58), 1.506 (5.73), 1.514 (6.62), 1.521 (7.99), 1.528 (5.13), 1.537 (2.67), 1.548 (3.18), 1.554 (1.80), 1.563 (0.64), 1.759 (1.78), 1.767 (4.22), 1.771 (3.85), 1.775 (4.26), 1.784 (2.89), 1.793 (3.85), 1.797 (3.49), 1.801 (3.85), 1.809 (1.56), 1.824 (0.81), 1.832 (1.31), 1.839 (1.87), 1.846 (3.17), 1.853 (3.16), 1.859 (3.72), 1.866 (4.34), 1.873 (3.58), 1.879 (3.34), 1.886 (3.00), 1.893 (1.65), 1.900 (1.44), 1.908 (0.69), 2.023 (6.18), 2.036 (5.11), 2.054 (16.00), 2.068 (14.33), 2.087 (15.54), 2.101 (13.64), 2.118 (5.69), 2.133 (5.09), 2.999 (9.23), 3.018 (10.90), 3.021 (11.02), 3.040 (9.47), 3.134 (0.64), 3.247 (6.14), 3.253 (6.29), 3.269 (9.57), 3.275 (9.49), 3.291 (7.06), 3.297 (6.90), 3.586 (0.59), 3.696 (3.77), 3.703 (6.42), 3.709 (4.14), 3.717 (8.63), 3.725 (11.12), 3.739 (5.37), 3.743 (5.40), 3.747 (5.21), 3.750 (4.68).
この物質をＳＰＰＳに使用した。

実施例１１１Ａ
（３Ｓ）－３－［（２Ｓ，５Ｒ）－３，６－ジメトキシ－５－（プロパン－２－イル）－２，５－ジヒドロピラジン－２－イル］シクロヘキサン－１－オン

（２Ｒ）－３，６－ジメトキシ－２－（プロパン－２－イル）－２，５－ジヒドロピラジン（４．６１ｇ、２５．０ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（２０ｍＬ）に溶解し、－７８℃に冷却した。ブチルリチウム（１６ｍＬ、１．６Ｍ、２５ｍｍｏｌ）を撹拌しながら滴下した。撹拌を－７８℃で１５分間続けた。リチウム（アザニジリデンメチリデン）（チオフェン－２－イル）銅（１００ｍＬ、０．２５Ｍ、２５ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を－７８℃で１５分間撹拌した。ＴＨＦ（１０ｍＬ）中のシクロヘキサ－２－エン－１－オン（２．４ｍＬ、２５ｍｍｏｌ）からの溶液を添加し、反応混合物を－７８℃で１０分間撹拌し、次いでそれをさらに周囲温度で２時間撹拌した。反応物を水でクエンチし、酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機層を炭酸水素ナトリウム溶液およびブラインで洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、次いで残渣を減圧下で濃縮して６．８ｇの無色油状物を得た。粗生成物をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（グラディエント シクロヘキサン－酢酸エチル ８５－１５）により精製して、表題化合物５．７ｇ（純度９０％、収率６４％）を得た。

LC-MS (方法 12): R_t = 3.14 分; MS (ESI pos): m/z = 281.2 [M+H]^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.587 (0.94), 0.604 (1.17), 0.617 (6.04), 0.634 (6.04), 0.971 (0.51), 0.988 (5.87), 0.995 (1.32), 1.005 (5.67), 1.012 (0.98), 1.032 (0.88), 1.049 (0.91), 1.575 (0.55), 1.596 (0.42), 1.607 (0.61), 1.750 (0.61), 1.760 (0.78), 1.784 (1.05), 1.794 (1.28), 1.816 (0.50), 1.837 (0.50), 1.843 (0.57), 1.874 (0.43), 1.979 (0.82), 2.012 (1.26), 2.024 (0.52), 2.032 (0.55), 2.044 (0.95), 2.057 (0.40), 2.122 (0.46), 2.148 (0.80), 2.156 (1.00), 2.164 (1.00), 2.173 (0.67), 2.181 (0.70), 2.190 (0.69), 2.199 (0.54), 2.207 (0.59), 2.225 (0.71), 2.242 (0.64), 2.259 (0.74), 2.275 (0.64), 2.294 (0.45), 2.310 (0.65), 2.319 (0.47), 2.329 (0.48), 2.338 (0.58), 2.348 (0.54), 3.602 (0.89), 3.631 (16.00), 3.642 (4.12), 3.652 (14.26), 3.902 (1.14), 3.911 (2.10), 3.920 (1.33), 3.943 (0.45), 4.069 (1.14), 4.078 (1.82), 4.086 (0.98), 4.492 (0.55), 5.674 (0.91).
実施例１１２Ａ
（１Ｒ，３Ｓ）－３－［（２Ｓ，５Ｒ）－３，６－ジメトキシ－５－（プロパン－２－イル）－２，５－ジヒドロピラジン－２－イル］シクロヘキサン－１－オール（２立体異性体存在）

（３Ｓ）－３－［（２Ｓ，５Ｒ）－３，６－ジメトキシ－５－（プロパン－２－イル）－２，５－ジヒドロピラジン－２－イル］シクロヘキサン－１－オン（実施例１１１Ａ、５．７０ｇ、２０．３ｍｍｏｌ）をメタノール（５０ｍＬ）に溶解し、０℃に冷却した。テトラヒドロホウ酸ナトリウム（７６９ｍｇ、２０．３ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で一晩撹拌した。追加のテトラヒドロホウ酸ナトリウム（７６９ｍｇ、２０．３ｍｍｏｌ）を加え、撹拌を室温で続けた。この工程を０．５当量のテトラヒドロホウ酸ナトリウムでさらに２回繰り返す。メタノールを蒸発させ、残渣を水および酢酸エチルで希釈した。数分間撹拌した後、層を分離した。水層を酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、残渣を減圧下で濃縮して、５．７ｇの黄色油を得た。粗生成物をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（グラディエント シクロヘキサン－シクロヘキサン酢酸エチル５％～３０％）により精製して、４．９５ｇ（収率８６％）の表題化合物を得た。

LC-MS (方法 10): R_t = 1.87 分; MS (ESI pos): m/z = 283.2 [M+H]⁺; R_t = 1.91 分; MS (ESI pos): m/z = 283.2 [M+H]^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.589 (1.83), 0.600 (6.10), 0.605 (2.52), 0.617 (6.02), 0.739 (0.91), 0.768 (0.96), 0.798 (0.42), 0.898 (0.47), 0.934 (0.50), 0.997 (6.80), 1.014 (7.00), 1.157 (0.53), 1.175 (0.92), 1.193 (0.73), 1.203 (0.72), 1.211 (0.59), 1.227 (0.47), 1.235 (0.72), 1.243 (0.51), 1.313 (0.52), 1.321 (0.63), 1.352 (0.99), 1.398 (2.43), 1.485 (0.59), 1.515 (0.56), 1.668 (0.44), 1.676 (0.56), 1.684 (0.44), 1.708 (0.51), 1.745 (0.57), 1.774 (0.54), 1.879 (0.58), 1.887 (0.56), 1.988 (1.39), 2.185 (0.54), 2.193 (0.57), 2.202 (0.73), 2.210 (0.75), 2.219 (0.55), 2.227 (0.55), 3.611 (7.06), 3.617 (3.03), 3.622 (16.00), 3.629 (14.28), 3.845 (0.55), 3.854 (0.50), 3.862 (1.17), 3.871 (2.39), 3.880 (1.79), 3.933 (1.11), 3.942 (1.74), 3.951 (0.86), 4.215 (0.59), 4.223 (0.57), 4.431 (2.16), 4.443 (2.10).
実施例１１３Ａ
メチル（２Ｓ）－アミノ［（１Ｓ）－３－ヒドロキシシクロヘキシル］アセテート（２つの立体異性体が存在する）

（３Ｓ）－３－［（２Ｓ，５Ｒ）－５－イソプロピル－３，６－ジメトキシ－２，５－ジヒドロピラジン－２－イル］シクロヘキサノール（実施例１１２Ａ、４．９５ｇ、１７．５ｍｍｏｌ）をメタノール（４５ｍＬ）に溶解し、溶液を０℃に冷却した。１０％塩酸水溶液（１５ｍＬ）を加え、反応混合物を０℃で短時間撹拌し、次いで室温で３時間撹拌した。反応混合物を濃縮し、残渣をＤＣＭで希釈し、次いで炭酸ナトリウム水溶液（１５０ｍＬ、２．０Ｍ、３００ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を撹拌し、次いで層を分離した。水層をＤＣＭで２回抽出した。合わせた有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、次いで濃縮した。粗生成物をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ：メタノール９５＋５）により精製して、１．９２ｇ（収率５８％）の表題化合物を得た。

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.04), 0.008 (0.93), 0.760 (0.69), 0.777 (0.71), 0.834 (0.61), 0.867 (1.92), 0.875 (1.16), 0.885 (1.54), 0.892 (1.18), 0.910 (0.45), 0.922 (0.61), 0.942 (1.05), 0.951 (0.95), 0.973 (1.17), 0.981 (1.06), 1.003 (0.54), 1.012 (0.50), 1.157 (0.67), 1.165 (0.41), 1.190 (0.65), 1.198 (0.44), 1.223 (0.42), 1.375 (0.69), 1.407 (0.79), 1.498 (0.52), 1.513 (0.89), 1.519 (0.95), 1.527 (0.74), 1.549 (0.69), 1.633 (2.72), 1.671 (0.69), 1.680 (0.78), 1.753 (1.26), 1.783 (1.67), 1.959 (0.49), 2.086 (0.85), 3.096 (0.46), 3.110 (0.48), 3.138 (1.12), 3.151 (1.10), 3.162 (1.07), 3.175 (1.02), 3.276 (0.43), 3.288 (0.55), 3.593 (0.71), 3.603 (4.85), 3.612 (16.00), 3.626 (1.87), 3.633 (0.96), 3.637 (1.57), 4.232 (0.60), 4.240 (0.55), 4.481 (1.83), 4.492 (1.73), 5.754 (0.68).
実施例１１４Ａ
（２Ｓ）－２－｛［（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシ）カルボニル］アミノ｝－２－［（１Ｓ）－３－ヒドロキシシクロヘキシル］酢酸（２つの立体異性体が存在する）

メチル（２Ｓ）－アミノ［（１Ｓ）－３－ヒドロキシシクロヘキシル］アセテート（実施例１１３Ａ、１．９２ｇ、１０．３ｍｍｏｌ）をメタノール（４０ｍＬ）に加え、溶液を０℃に冷却した。水酸化ナトリウム溶液（１０ｍＬ、１．０Ｍ、１０ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で１．５時間、次いで５０℃で１時間撹拌した。水（３７ｍＬ）、炭酸水素ナトリウム（８６１ｍｇ、１０．３ｍｍｏｌ）、および炭酸ナトリウム（１．４３ｇ、１３．５ｍｍｏｌ）を溶液に加えた。メタノールを蒸発させ、水層を１，４－ジオキサン（３０ｍＬ）で希釈した。懸濁液を０℃に冷却し、（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メチルカルボノクロリデート（ＣＡＳ－ＲＮ：２８９２０－４３－６、３．９８ｇ、１５．４ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で一晩撹拌した。水およびＭＴＢＥを加え、有機層を分離した。水層を酸性化し、ＤＣＭで３回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過した。粗生成物をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ：メタノール／ＨＯＡｃ ９５＋５＋１）により精製して、２．２２ｇ（収率５５％）の表題化合物を得た。

LC-MS (方法 10): R_t = 1.62 分; MS (ESI pos): m/z = 396.18 [M+H]⁺; R_t = 1.67 分; MS (ESI pos): m/z = 396.18 [M+H]⁺
実施例１１５Ａ
（２Ｓ）－２－（｛［（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ］カルボニル｝アミノ）－２－［（１Ｓ，３Ｒ）－３－ヒドロキシシクロヘキシル］酢酸（ジアステレオマー１）

ジアステレオマー１
（２Ｓ）－｛［（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシ）カルボニル］アミノ｝［（１Ｓ）－３－ヒドロキシシクロヘキシル］酢酸（実施例１１４Ａ、２．２２ｇ）を、実施例９６Ａに記載の方法を使用するキラルクロマトグラフィーによって精製して、８９０ｍｇ（純度１００％、収率４０％、９９％ｅｅ）のジアステレオマー１を得た。

LC-MS (方法 10): R_t = 1.62 分; MS (ESI pos): m/z = 396.2 [M+H]⁺
H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.878 (0.88), 0.909 (1.80), 0.940 (2.23), 0.962 (1.87), 0.986 (2.99), 1.025 (4.63), 1.053 (3.69), 1.083 (1.14), 1.151 (1.18), 1.184 (2.16), 1.217 (1.71), 1.249 (0.53), 1.492 (2.55), 1.523 (2.32), 1.668 (2.86), 1.701 (2.42), 1.779 (6.54), 1.802 (4.90), 2.073 (4.22), 3.875 (0.46), 3.900 (3.08), 3.916 (3.51), 3.921 (3.52), 3.936 (2.67), 4.197 (1.31), 4.211 (3.35), 4.223 (9.23), 4.238 (12.01), 4.242 (10.59), 4.253 (6.34), 4.270 (3.91), 4.296 (0.72), 4.563 (2.04), 7.312 (6.21), 7.331 (14.61), 7.349 (9.50), 7.402 (9.30), 7.420 (15.31), 7.439 (6.83), 7.603 (4.81), 7.624 (4.95), 7.752 (11.74), 7.770 (10.65), 7.884 (16.00), 7.903 (14.82), 8.155 (0.69).
このアミノ酸をＳＰＰＳに使用した。

実施例１１６Ａ
（２Ｓ）－２－（｛［（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ］カルボニル｝アミノ）－２－［（１Ｓ，３Ｓ）－３－ヒドロキシシクロヘキシル］酢酸（ジアステレオマー２）

また、（２Ｓ）－（｛［（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ］カルボニル｝アミノ）［（１Ｓ，３Ｓ）－３－ヒドロキシシクロヘキシル］酢酸（実施例１１４Ａ）のジアステレオマー混合物のキラルクロマトグラフィー中に単離されたのは、２８０ｍｇ（純度９５％、収率１２％）のジアステレオマー２であった。

LC-MS (方法 10): R_t = 1.67 分; MS (ESI pos): m/z = 396.2 [M+H]^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.862 (0.81), 0.879 (0.71), 1.024 (0.76), 1.055 (1.68), 1.084 (1.84), 1.113 (1.00), 1.274 (1.39), 1.308 (2.53), 1.339 (1.79), 1.404 (4.60), 1.430 (3.90), 1.498 (3.23), 1.531 (6.31), 1.566 (4.20), 1.609 (2.04), 1.640 (1.55), 2.179 (1.80), 2.328 (0.51), 2.670 (0.47), 3.820 (0.62), 3.839 (0.86), 3.858 (0.76), 3.904 (4.71), 3.920 (3.46), 3.925 (3.34), 3.941 (2.46), 4.195 (1.38), 4.210 (3.69), 4.223 (9.20), 4.238 (10.72), 4.244 (8.66), 4.254 (7.18), 4.272 (6.16), 7.309 (5.80), 7.328 (13.47), 7.346 (8.67), 7.400 (9.17), 7.419 (15.07), 7.437 (6.77), 7.487 (3.68), 7.508 (3.60), 7.546 (0.67), 7.637 (0.61), 7.748 (11.33), 7.767 (10.18), 7.883 (16.00), 7.901 (14.74).
このアミノ酸をＳＰＰＳに使用した。

実施例１１７Ａ
３－（｛［（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシ）カルボニル］アミノ｝メチル）シクロヘキサンカルボン酸（ラセミ体）

３－｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ］メチル｝シクロヘキサンカルボン酸（ラセミ体）（ＣＡＳ ＲＮ：１４５１４９－５５－９、１．００ｇ、３．８９ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（２０ｍＬ、３１０ｍｍｏｌ）に溶解し、トリフルオロ酢酸（２０ｍＬ、２６０ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で３０分間撹拌した。溶液を蒸発させ、残渣をアセトン（１５ｍＬ）に溶解した。水（１０ｍＬ）、炭酸水素ナトリウム（６．５３ｇ、７７．７ｍｍｏｌ）および１－（｛［（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ］カルボニル｝オキシ）ピロリジン－２，５－ジオン（ＣＡＳ－ＲＮ：８２９１１－６９－１１．３８ｇ、４．０８ｍｍｏｌ）を添加した。懸濁液を室温で一晩撹拌した。炭酸水素ナトリウム（６．５３ｇ、７７．７ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で１時間撹拌した。懸濁液を水で希釈し、ＭＴＢＥで抽出した。水層に塩酸水溶液（１Ｍ）を酸性化し、次いで酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、次いで濃縮し、蒸発させて、３つの生成物含有画分：１３０ｍｇ（純度９６％、収率８％）、１２７ｍｇ（純度９６％、収率８％）、５１．０ｍｇ（収率３％）を得た。

LC-MS (方法 9): R_t = 1.01 分; MS (ESI pos): m/z = 380 [M+H]^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.736 (0.49), 0.759 (1.44), 0.790 (1.73), 0.821 (0.80), 0.851 (0.96), 0.882 (2.75), 0.913 (2.99), 0.944 (1.23), 1.083 (0.45), 1.120 (0.52), 1.153 (1.38), 1.182 (3.81), 1.206 (3.18), 1.235 (1.28), 1.418 (1.48), 1.598 (1.97), 1.630 (2.23), 1.717 (2.24), 1.739 (1.48), 1.747 (1.53), 1.835 (1.93), 1.862 (3.95), 1.897 (2.04), 2.074 (2.00), 2.123 (1.19), 2.130 (1.10), 2.152 (2.02), 2.174 (0.85), 2.181 (0.95), 2.524 (1.06), 2.785 (0.60), 2.801 (1.06), 2.818 (2.22), 2.835 (3.08), 2.849 (2.89), 2.862 (3.29), 2.878 (2.21), 2.895 (1.16), 2.911 (0.57), 4.188 (1.46), 4.206 (3.84), 4.223 (3.22), 4.238 (0.88), 4.253 (0.91), 4.287 (11.07), 4.304 (6.87), 4.333 (0.64), 4.351 (0.40), 4.451 (0.68), 7.306 (6.09), 7.324 (16.00), 7.341 (10.19), 7.392 (6.85), 7.410 (10.96), 7.429 (4.86), 7.459 (0.43), 7.626 (0.73), 7.643 (0.75), 7.683 (9.67), 7.702 (8.66), 7.875 (11.34), 7.894 (10.10), 12.028 (1.95).
このアミノ酸をＳＰＰＳに使用した。

実施例１１８Ａ
ベンジル（２Ｓ）－２－（モルホリン－４－イル）プロパノエート

Ｌ－アラニン（５８９ｍｇ、６．６１ｍｍｏｌ）、１－ブロモ－２－（２－ブロモエトキシ）エタン（９１０μＬ、７．３ｍｍｏｌ）および炭酸ナトリウムをエタノールに溶解し、溶液を２日間還流した。懸濁液を室温にし、懸濁液を濾過した。濾液を蒸発させ、エタノール（３０ｍＬ）に懸濁し、３Ｍ塩酸を添加してｐＨを調整した（ｐＨ＝３に）。懸濁液を濾過し、濾液を蒸発させた。残渣をＤＭＦ（２０ｍＬ）に溶解した。炭酸セシウム（１．０８ｇ、３．３０ｍｍｏｌ）および（ブロモメチル）ベンゼン（１．６ｍＬ、１３ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で２日間撹拌した。次いで、水を添加し、次いで、この溶液を逆相ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ；Ｃ１８；１０μｍ；１２５×３０ｍｍ；０．１％ＨＣＯＯＨ修飾剤を含む溶離液ＡＣＮ／Ｈ_２Ｏ；流量：７５ｍＬ／分；グラディエント：０～５．５０分１０／９０；３．００分までの試料注射；５．５０～１７．６５分 ９５／５へのグラディエント；１７．６５～１９．４８分 ９５／５；１９．４８～１９．６６分 １０／９０へのグラディエント；１９．６６～２０．７２分 １０／９０；）によって精製した。所望の画分を合わせ、凍結乾燥して、８００ｍｇ（純度９８％、収率４８％）の表題化合物を無色油として得た；ｅｅ＞９９％。

LC-MS (方法 9): R_t = 0.51 分; MS (ESI pos): m/z = 250 [M+H]^+
1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.191 (10.46), 1.205 (10.52), 2.462 (0.66), 2.469 (0.77), 2.473 (0.76), 2.485 (1.55), 2.521 (1.43), 2.562 (0.63), 3.330 (0.93), 3.344 (2.66), 3.358 (2.62), 3.372 (0.86), 3.499 (0.46), 3.506 (0.63), 3.511 (0.45), 3.521 (2.34), 3.530 (3.52), 3.532 (3.50), 3.538 (3.54), 3.549 (2.18), 3.564 (0.56), 5.101 (0.60), 5.126 (5.99), 5.131 (5.75), 5.156 (0.57), 7.323 (0.69), 7.327 (0.52), 7.332 (1.27), 7.341 (1.23), 7.343 (0.94), 7.350 (1.14), 7.358 (0.50), 7.369 (1.15), 7.377 (16.00), 7.386 (6.48), 7.392 (0.46).
実施例１１９Ａ
（２Ｓ）－２－（モルホリン－４－イル）プロパン酸

パラジウム（活性炭上１０％）（１００ｍｇ）をアルゴン下でメタノールで湿らせた。その後、ベンジル（２Ｓ）－２－（モルホリン－４－イル）プロパノエート（実施例１１８Ａ、８００ｍｇ、３．２１ｍｍｏｌ）をメタノール（１００ｍＬ）に溶解し、湿らせた活性炭上のパラジウムをアルゴン下で溶液に添加した。次いで、懸濁液を、水素雰囲気下、周囲圧力で２時間水素化した。容器からアルゴンで水素をパージし、懸濁液をセライトで濾過した。ろ液を蒸発させ、残渣をＭｅＣＮ／Ｈ_２Ｏに溶解し、凍結乾燥して、表題化合物５０１ｍｇ（純度＞９９％、収率９８％）を淡褐色固形物として得た。

LC-MS (方法 9): R_t = 0.16 分; MS (ESI pos): m/z = 160 [M+H]^+
1H-NMR (500 MHz, deuterium oxide) δ [ppm]: 1.519 (16.00), 1.534 (15.96), 3.695 (1.39), 3.709 (4.02), 3.724 (3.89), 3.738 (1.30).
実施例１２０Ａ
１－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）－４－エチリデン－Ｌ－プロリン

メチル（トリフェニル）ホスホニウム臭化物（３４．７ｇ、９７．１ｍｍｏｌ）を４００ｍＬのＴＨＦに懸濁した。トルエン中のＫＨＭＤＳ溶液（１４６．６ｍＬ、１５％ｗ／ｖ、９７．１ｍｍｏｌ）を室温で滴下し、室温で１時間撹拌した。その後、溶液を０℃に冷却し、１－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）－４－オキソ－Ｌ－プロリン（１１．１ｇ、４８．６ｍｍｏｌ）を少しずつ添加した。混合物を室温で２．５時間撹拌した。水を反応混合物に加えた。混合物を１０％クエン酸溶液でわずかに酸性にし、酢酸エチルで３回抽出した。合わせた酢酸エチル層を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥し、次いで真空下で乾燥させて、濃いオレンジ色の樹脂を得た。粗生成物をさらに精製することなく次の工程に使用した。

実施例１２１Ａ
１－ｔｅｒｔ－ブチル２－メチル（２Ｓ）－４－メチリデンピロリジン－１，２－ジカルボキシレート

粗１－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）－４－エチリデン－Ｌ－プロリン（実施例１２０Ａ）（１１．０ｇ、４８．６ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（６０ｍＬ）に溶解した。炭酸カリウム（１０．１ｇ、７２．９ｍｍｏｌ）を添加し、次いでヨードメタン（４．５ｍｌ、７３ｍｍｏｌ）を添加し、次いで混合物を室温で一晩撹拌した。ＤＭＦをロータリーエバポレーターで除去し、酢酸エチルを加え、次いで混合物を水で１回洗浄した。水相を酢酸エチルで１回再抽出した。合わせた有機相を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥し、次いで真空下で乾燥し、粗生成物を得た。粗生成物をＤＣＭに溶解し、シクロヘキサン－酢酸エチル（８５／１５）の溶離液を使用して、Ｂｉｏｔａｇｅ Ｉｓｏｌａｒａフラッシュクロマトグラフィーシステムを使用する順相クロマトグラフィーによって精製して、１０．２ｇ（８０％）の表題化合物を黄色油として得た。

LC-MS (方法 10): R_t = 1.77 分; MS (ESI pos): m/z = 186 M-C4H8^+
1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.339 (16.00), 1.405 (10.53), 3.313 (10.02), 3.627 (3.90), 3.938 (2.21), 3.967 (0.60), 4.331 (0.51), 4.337 (0.54), 4.350 (0.57), 4.356 (0.59), 4.363 (0.47), 4.367 (0.42), 4.992 (1.33), 5.019 (1.17).
実施例１２２Ａ
５－ｔｅｒｔ－ブチル６－メチル（６Ｓ）－５－アザスピロ［２．４］ヘプタン－５，６－ジカルボキシレート

アルゴン下で、ジエチル亜鉛（２２ｍＬ、ヘキサン中１．０Ｍ、２２ｍｍｏｌ）を無水ＤＣＭ（２７ｍＬ）に溶解した。溶液を５℃に冷却し、次いでＤＣＭ（１７ｍＬ）中のＴＦＡ（１．７ｍＬ、２２ｍｍｏｌ）の溶液を１時間かけて滴下した。溶液を５℃でさらに３０分間撹拌した。無水ＤＣＭ（５ｍＬ）中のジヨードメタン（１．８ｍＬ、２２ｍｍｏｌ）の溶液を迅速に滴下し、得られた溶液を５℃で３０分間撹拌した。その後、無水ＤＣＭ（５ｍＬ）中の１－ｔｅｒｔ－ブチル２－メチル（２Ｓ）－４－メチリデンピロリジン－１，２－ジカルボキシレート（実施例１２１Ａ）（２．７０ｇ、１１．２ｍｍｏｌ）の溶液を反応混合物に添加した。反応混合物を解凍氷浴中で９０時間撹拌し、次いで飽和塩化アンモニウム水溶液でクエンチした。相を分離し、水相をＤＣＭで１回再抽出した。有機相を合わせ、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、次いで蒸発させて、１．５７ｇの粗生成物を黄色油として得た。油状物を酢酸エチル（５４ｍＬ）に溶解し、ジ－ｔｅｒｔ－ブチルジカーボネート（２．６ｍＬ、１１ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（３．１ｍＬ、２２ｍｍｏｌ）を連続的に添加し、次いで反応混合物を室温で一晩撹拌した。ＴＬＣ（石油エーテル／酢酸エチル１０／１；ニンヒドリンで着色）を用いて反応を制御した。石油エーテル－酢酸エチル（ＥＡ）（２％～１８％ ＥＡ）の溶離液グラディエントを使用して、Ｂｉｏｔａｇｅ Ｉｓｏｌａｒａフラッシュクロマトグラフィーシステム（１００ｇ Ｂｉｏｔａｇｅ ｃａｒｔｒｉｄｇｅ Ｕｌｔｒａ）を使用する順相クロマトグラフィーによって粗生成物を精製して、表題化合物１．０２ｇを無色油として得た。

実施例１２３Ａ
（６Ｓ）－５－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）－５－アザスピロ［２．４］ヘプタン－６－カルボン酸

５－ｔｅｒｔ－ブチル６－メチル（６Ｓ）－５－アザスピロ［２．４］ヘプタン－５，６－ジカルボキシレート（実施例１２２Ａ）（２．５０ｇ、９．７９ｍｍｏｌ）を５０％ＴＨＦ／水（４０ｍＬ）に溶解した。水酸化リチウム（７０３ｍｇ、２９．４ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で一晩撹拌した。ロータリーエバポレーターを用いてＴＨＦを除去し、水溶液を追加の水（２０ｍＬ）水で希釈し、ＭＴＢＥで１回洗浄した。分離した水相を１Ｍ塩酸（３０ｍＬ）で酸性化し、次いでＤＣＭで２回抽出した。合わせた有機相を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、次いで濃縮して、表題化合物２．４ｇを無色油状物として得た。

実施例１２４Ａ
（６Ｓ）－５－アザスピロ［２．４］ヘプタン－６－カルボン酸

（６Ｓ）－５－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）－５－アザスピロ［２．４］ヘプタン－６－カルボン酸（実施例１２３Ａ）（２．３６ｇ、９．７９ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（５０ｍＬ）に溶解した。トリフルオロ酢酸（１０ｍＬ、２５０ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で２時間撹拌した。反応制御は、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ ９／１）を用いて行った。溶液を蒸発させ、粗生成物を真空下で乾燥させて、表題化合物を褐色残渣として得た。これを次の工程に直接使用した（Ｆｍｏｃ保護、実施例８２Ａ参照）。

実施例１５Ａ
（２Ｓ，５Ｒ）－２－［（２，５－ジフルオロフェニル）メチル］－３，６－ジメトキシ－５－（プロパン－２－イル）－２，５－ジヒドロピラジン

反応はアルゴン下で行った。（２Ｒ）－３，６－ジメトキシ－２－（プロパン－２－イル）－２，５－ジヒドロピラジン（ＣＡＳ－ＲＮ：１０９８３８－８５－９）（２．９ｍｌ、１６ｍｍｏｌ）を無水ＴＨＦ（４０ｍＬ）に溶解し、溶液を－７８℃に冷却した。この温度で、ｎ－ブチルリチウム溶液（１０ｍＬ、ヘキサン中１．６Ｍ、１６ｍｍｏｌ）をゆっくりと滴下し、得られた溶液を－７８℃で１５分間撹拌した。次に、２－（ブロモメチル）－１，４－ジフルオロベンゼン（４．０５ｇ、１９．５ｍｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（１５ｍＬ）溶液を添加し、反応が室温になるまで撹拌を続けた。ＨＰＬＣによって反応の進行をモニターしながら、反応混合物を室温でさらに１時間撹拌した。混合物を水でクエンチし、酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機相を飽和塩化ナトリウム水溶液で１回洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥し、次いで濃縮して５．４６ｇの粗黄色油状物を得た。油状物を、Ｂｉｏｔａｇｅ Ｉｓｏｌａｒａフラッシュクロマトグラフィーシステム（１００ｇ Ｂｉｏｔａｇｅ ｃａｒｔｒｉｄｇｅ Ｕｌｔｒａ）を使用し、シクロヘキサン－酢酸エチル（ＥＡ）（９５／５）の溶離液を使用する順相クロマトグラフィーによって精製して、４．１６ｇ（８２％）の表題化合物を油状物として得た。

LC-MS (方法 10): R_t = 2.44 分; MS (ESI pos): m/z = 311 [M+H]^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.563 (6.79), 0.580 (6.97), 0.933 (6.65), 0.951 (6.88), 2.103 (0.58), 2.111 (0.61), 2.120 (0.78), 2.129 (0.79), 2.137 (0.59), 2.145 (0.57), 2.864 (0.79), 2.882 (0.83), 2.898 (1.08), 2.915 (1.09), 3.089 (1.06), 3.101 (1.10), 3.123 (0.82), 3.134 (0.81), 3.313 (7.20), 3.518 (1.28), 3.527 (2.46), 3.535 (1.37), 3.566 (16.00), 4.293 (0.58), 4.304 (1.07), 4.313 (1.08), 4.321 (1.01), 4.330 (0.58), 6.992 (0.47), 7.000 (0.66), 7.005 (0.63), 7.015 (1.06), 7.023 (0.71), 7.028 (0.64), 7.037 (0.63), 7.075 (0.63), 7.084 (0.91), 7.095 (0.74), 7.105 (0.66), 7.131 (0.68), 7.143 (0.73), 7.154 (1.05), 7.166 (1.04), 7.177 (0.45), 7.189 (0.40).
実施例１２６Ａ
メチル２，５－ジフルオロ－Ｌ－フェニルアラニネート

（２Ｓ，５Ｒ）－２－［（２，５－ジフルオロフェニル）メチル］－３，６－ジメトキシ－５－（プロパン－２－イル）－２，５－ジヒドロピラジン（実施例１２５Ａ）（４．１５ｇ、１３．４ｍｍｏｌ）をメタノール（３５ｍＬ）に溶解し、溶液を０℃に冷却した。１０％塩酸水溶液（１２ｍＬ）を加え、溶液を０℃で数分間撹拌した。次いで、反応溶液を室温にし、次いでこの温度で３時間撹拌した。メタノールを蒸発させた。残渣をＤＣＭで希釈し、２Ｍ炭酸ナトリウム水溶液（１２０ｍＬ）を加え、さらに得られた混合物を数分間激しく撹拌した。層を分離し、水相をＤＣＭで２回抽出した。合わせた有機相を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、次いで濃縮して、３．９７ｇの無色液体を得た。Ｂｉｏｔａｇｅ Ｉｓｏｌａｒａフラッシュクロマトグラフィーシステム（１００ｇ Ｂｉｏｔａｇｅ ｃａｒｔｒｉｄｇｅ Ｕｌｔｒａ）を使用し、シクロヘキサン－酢酸エチル（ＥＡ）（１０％～７５％ ＥＡ）のグラディエント溶離液を使用して、順相クロマトグラフィーによって粗液体を精製して、２．２７ｇ（７９％）の表題化合物を無色液体として得た。

LC-MS (方法 13): R_t = 1.20 分; MS (ESI pos): m/z = 216 [M+H]^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.833 (16.00), 2.733 (3.07), 2.753 (3.26), 2.767 (4.81), 2.787 (5.01), 2.889 (4.71), 2.904 (4.91), 2.923 (3.10), 2.938 (3.19), 3.315 (15.20), 3.401 (0.42), 3.553 (5.22), 3.568 (6.29), 3.572 (6.60), 3.768 (0.41), 7.060 (0.89), 7.069 (1.71), 7.081 (2.21), 7.090 (4.07), 7.101 (3.20), 7.111 (2.84), 7.120 (1.89), 7.151 (5.97), 7.163 (5.82), 7.174 (9.84), 7.186 (7.52), 7.196 (4.42), 7.208 (2.10).
実施例１２７Ａ
ｔｅｒｔ－ブチル（２Ｒ）－２－アミノ－３－［［（２Ｒ）－２－アミノ－３－ｔｅｒｔ－ブトキシ－３－オキソ－プロピル］ジスルファニル］プロパノエート

酢酸ｔｅｒｔ－ブチル（６３．２２ｇ、５４４．２４ｍｍｏｌ、７３ｍＬ）中のＬ－シスチン（ＣＡＳ ＲＮ：５６－８９－３）（１０．００ｇ、４１．６１ｍｍｏｌ）の懸濁液に、ＨＣｌＯ_４（１８．２６ｇ、１２７．２３ｍｍｏｌ、１１ｍＬ、純度７０％）（Ｈ_２Ｏ中７０％）を０℃で０．５時間かけて滴下し、次いで溶液を２０℃で１７時間撹拌した。氷を添加し、溶液をさらに精製することなく次の工程に使用した（理論上１４．６７ｇ）。

実施例１２８Ａ
ｔｅｒｔ－ブチル（２Ｒ）－３－［（２Ｒ）－３－ｔｅｒｔ－ブトキシ－２－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルアミノ）－３－オキソ－プロピル］ジスルファニル］－２－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルアミノ）プロパノエート

水（２００ｍＬ）およびＥＡ（２００ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（２Ｒ）－２－アミノ－３－［［（２Ｒ）－２－アミノ－３－ｔｅｒｔ－ブトキシ－３－オキソ－プロピル］ジスルファニル］プロパノエート（実施例１２７Ａから、理論上１４．６７ｇ）の混合物に、０℃でＮａ_２ＣＯ_３（３０．００ｇ、２８３．０８ｍｍｏｌ）およびＢｏｃ_２Ｏ（２７．２５ｇ、１２４．８５ｍｍｏｌ）を加え、混合物（ｐＨ８～９）を２０℃で１７時間撹拌した。混合物をＥＡ（１００ｍＬ）および水（２００ｍＬ）で希釈した。有機層を分離し、水層をＥＡ（２００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（２００ｍＬ）で洗浄し、濃縮して残渣を得、残渣をシリカルゲルクロマトグラフィー（ＰＥ／ＥＡ＝１／０～１／１）によって精製して、表題化合物の２つのバッチを得た：８．５ｇの粗生成物を淡褐色油として、６．５ｇを淡褐色油として。

¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) δ [ppm]: 1.51, 1.61, 1.62. 1.64, 3.11, 3.12, 3.14, 3.16, 3.19, 3.203, 3.23, 3.24, 4.44, 4.46, 4.48, 4.49, 5.35, 5.37.
実施例１２９Ａ
ｔｅｒｔ－ブチル（２Ｒ）－２－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルアミノ）－３－スルファニル－プロパノエート

ＴＨＦ（１５０ｍＬ）および水（１５ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（２Ｒ）－３－［（２Ｒ）－３－ｔｅｒｔ－ブトキシ－２－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルアミノ）－３－オキソ－プロピル］ジスルファニル］－２－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルアミノ）プロパノエート（実施例１２８Ａからの粗生成物、８．５ｇ）の溶液に、トリブチルホスファン（３．７７ｇ、４．６ｍＬ）を０℃で０．５時間にわたって加え、次いで溶液を２０℃で２時間撹拌した。混合物を、６．５ｇの希物質（実施例１２８Ａから）から調製した別のバッチで後処理した。両方の反応混合物を水（３００ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（１５０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相をブライン（３００ｍｌ）で洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、減圧濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＰＥ／ＥＡ＝４０／１～１０／１）により精製して、１２．５ｇの表題化合物を無色油状物として得、これを純粋として使用した。残留トリブチルホスフィンを含有する６．５ｇの不純なバッチも得たが、廃棄した。

¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) δ [ppm]: 1.45, 2.94, 2.95, 2.96, 2.97, 4.46, 4.47, 4.48, 4.49, 5.39, 5.41
実施例１３０Ａ
ｔｅｒｔ－ブチル（２Ｒ）－２－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルアミノ）－３－（トリフルオロメチルスルファニル）プロパノエート

３，３－ジメチル－１－（トリフルオロメチル）－１，２－ベンジオドキソール（１８ｇ、５４．５３ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（１５０ｍＬ）溶液に、ｔｅｒｔ－ブチル（２Ｒ）－２－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルアミノ）－３－スルファニル－プロパノエート（実施例１２９Ａからの１４ｇ、５０．４７ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（２０ｍＬ）溶液を－７８℃で３０分間Ｎ_２雰囲気化で加え、反応物をこの温度で１時間撹拌し、無色溶液にした。反応混合物を２０℃に加温し、１時間撹拌し、濃縮して残渣を得、これをシリカゲルクロマトグラフィー（ＰＥ／ＥＡ＝１／０～４０／１）により２回精製して、１３．２ｇの表題化合物を無色油状物として得た。

¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) δ [ppm]: 1.47, 3.26, 3.28, 3.30, 3.31, 3.45, 3.46, 3.48, 3.50, 4.47, 4.48, 5.34, 5.35.
実施例１３１Ａ
ｔｅｒｔ－ブチル（２Ｒ）－２－アミノ－３－（トリフルオロメチルスルファニル）プロパノエート塩酸塩

ＤＣＭ（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（２Ｒ）－２－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルアミノ）－３－（トリフルオロメチルスルファニル）－プロパノエート（実施例１３０Ａからの１２．２０ｇ、３５．３２ｍｍｏｌ）の溶液に、ＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、５０ｍＬ）の溶液を加え、反応物を１０℃で３時間撹拌した。混合物を濃縮して白色ガラス状固体を得、これを次の工程に直接使用した。

実施例１３２Ａ
ｔｅｒｔ－ブチル（２Ｒ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－（トリフルオロメチルスルファニル）－プロパノエート

ジオキサン（８０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（２Ｒ）－２－アミノ－３－（トリフルオロメチルスルファニル）プロパノエート塩酸塩（実施例１３１Ａからの粗生成物）の混合物に、飽和ＮａＨＣＯ_３（８０ｍＬ）およびＦｍｏｃ－ＯＳｕ（１９ｇ、５６．３３ｍｍｏｌ）を加え、反応物（ｐＨ～７～８）を１０℃で１７時間撹拌した。混合物を濃縮し、残渣を水（１００ｍＬ）で希釈し、次いでＥＡ（１００ｍＬ×２）で抽出した。有機層をブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、濃縮し、次いでシリカゲルクロマトグラフィー（ＰＥ／ＥＡ＝４０／１～１０／１）によって精製して、１３ｇの表題化合物を無色油状物として得た。

LC-MS (方法 15): R_t = 1.028 分; MS (ESI pos): m/z = 490.2 [M+Na]^+
1H-NMR (400 MHz, CDCl₃) δ [ppm]: 1.45, 3.32, 3.47, 3.36, 3,49, 3.50, 4.16, 4.22, 4.24, 4.26, 4.37, 4.44, 4.46, 4.58, 5.62, 5.64, 7.33, 7.35, 7.40, 7.42, 7.44, 7.56, 7.61, 7.77, 7.79.
¹⁹F-NMR: (376 MHz, CDCl₃) δ [ppm]: -40.85.
実施例１３３Ａ
２Ｒ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－（トリフルオロメチルスルファニル）プロパン酸

ＤＣＭ（１５ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（２Ｒ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－（トリフルオロメチルスルファニル）－プロパノエート（１３ｇ、２７．８１ｍｍｏｌ）の溶液に、ＴＦＡ（３０ｍＬ）およびチオアニソール（１５．７５ｇ、１２６．８１ｍｍｏｌ、１５ｍＬ）を加え、反応混合物を１０℃で１７時間撹拌した。混合物を濃縮して残渣を得、これを飽和ＮａＨＣＯ_３溶液（１００ｍＬ）で希釈し、次いでＥＡ（５０ｍＬ×２）で抽出した。有機層を１Ｍ ＨＣｌ（５０ｍＬ）で洗浄し、濃縮し、次いでシリカゲルクロマトグラフィー（ＰＥ／ＥＡ＝１０／１、次いでＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０／１～５／１）によって精製して、１０ｇの表題化合物を白色ガラス状固体として純度：９８．８％で得た。¹Ｈ－ＮＭＲは生成物が酢酸エチルを含有することを示したので、固体をＤＣＭ（８０ｍｌ）に再溶解し、濃縮し、次いで高真空下で乾燥して、９．６７ｇ（２３．２２ｍｍｏｌ、収率８３．５％、純度９８．８％）の表題化合物を白色ガラス状固体として得た。

LC-MS (方法 15): R_t = 0.895 分; MS (ESI pos): m/z = 434.1 [M+Na]^+
1H-NMR (400 MHz, CDCl₃) δ [ppm]: 3.25, 3.26, 3.32, 3.33, 3.93, 3.95, 4.22, 4.24, 4.26, 4.28, 4.30, 4.31, 6.95, 6.98, 7.31, 7.32, 7.33, 7.34, 7.39, 7,41, 7.42, 7.68, 7.70, 7.87, 7.89.
¹⁹F-NMR: (376 MHz, CDCl₃) δ [ppm]: -40.89
キラルＳＦＣ：Ｒ_ｔ＝２．４９分、９９％ｅｅ
キラルＳＦＣ条件：ＡＤ－３＿５ＣＭ＿ＩＰＡ（ＤＥＡ）＿１０＿２０＿３ＭＬ＿Ｔ３５カラム：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＡＤ－３ ５０×４．６ｍｍＩ．Ｄ．、３μｍ 移動相：１０％から２０％までのＣＯ_２中イソプロパノール（０．０５％ ＤＥＡ） 流量：３ｍＬ／分 波長：２２０ｎｍ。

このアミノ酸をＳＰＰＳに使用した。このアミノ酸はまた、商業的に入手可能である（ＣＡＳ－ＲＮ：１９９４３３１－２５－７）。

実施例１３４Ａ
ジ－ｔｅｒｔ－ブチル（２Ｓ）－５－オキソピロリジン－１，２－ジカルボキシレート

ＣＨ_３ＣＮ（２．００Ｌ）中の化合物ｔｅｒｔ－ブチル（２Ｓ）－５－オキソピロリジン－１，２－ジカルボキシレート（ＣＡＳ－ＲＮ：３５４１８－１６－７）（２９０ｇ、１．５７ｍｏｌ、１．００当量）およびＤＭＡＰ（１．９１ｇ、１５．６６ｍｍｏｌ、０．０１当量）の溶液に、Ｂｏｃ_２Ｏ（３４１ｇ、１．５７ｍｏｌ、３５９ｍＬ、１．００当量）を５℃で添加した。添加後、混合物を２０℃で１２時間撹拌した。ＴＬＣは、出発物質が完全に消費され、２つの新しいスポット（ＴＬＣ）が形成されたことを示した（ＰＥ／ＥＡ＝３／１、Ｒｆ＝０．４３、Ｒｆ＝０．９）。反応混合物を減圧濃縮してＣＨ_３ＣＮを除去し、残渣をＤＣＭ（１０００ｍＬ）と水（１０００ｍＬ）に分配した。有機相をブライン（３００ｍｌ）で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、減圧濃縮して、粗生成物を得た。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ_２、ＰＥ／ＥＡ＝１００／１～１０／１）により精製して、オフホワイトの固形物として表題化合物（２６０．００ｇ、８７４．７５ｍｍｏｌ、収率５５．７２％、純度９６％）を得た。

LC-MS (方法 15): R_t = 0.873 分; MS (ESI pos): m/z = 308.0 [M+Na]⁺, 331 [M+2Na]^+
1H-NMR (400 MHz, CDCl₃) δ [ppm]: 1.44-1.42 (d, J=8.4, 8H), 1.97-1.92 (m, 1H), 2.22-2.19 (m, 1H), 2.43-2.40 (m, 1H), 2.58-2.49 (m, 1H), 4.42-4.39 (m, 1H).
実施例１３５Ａ
ジ－ｔｅｒｔ－ブチル（２Ｓ）－４，４－ジアリル－５－オキソ－ピロリジン－１，２－ジカルボン酸

ＴＨＦ（４０．０ｍＬ）中のジ－ｔｅｒｔ－ブチル（２Ｓ）－５－オキソピロリジン－１，２－ジカルボキシレート（実施例１３４Ａから６１．９ｇ、２０８ｍｍｏｌ、１．００当量）の溶液に、ＬｉＨＭＤＳ（１Ｍ、４３７ｍＬ、２．１０当量）を－７３℃で滴下し、次いで－７３℃で１時間撹拌した。混合物に臭化アリル化合物（５０．４ｇ、４１６ｍｍｏｌ、２．００当量）を滴下した。添加後、混合物を１５℃で２時間撹拌した。ＴＬＣは、開始材料が完全に消費され、４つの新しいスポットが形成されたことを示した（ＰＥ／ＥＡ＝３／１、Ｒ_ｆ＝０．９、Ｒ_ｆ＝０．８、Ｒ_ｆ＝０．７、Ｒ_ｆ＝０．１）。反応混合物を飽和塩化アンモニウム水溶液（１０００ｍＬ）でクエンチし、ＤＣＭ（５００ｍＬ×３）で抽出し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、次いで減圧下で濃縮して、粗残渣を得た。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ_２、ＰＥ／ＥＡ＝１００／１～３０／１）により精製して、表題化合物（１００ｇ、収率３８％、純度８６％）を無色油状物として得た。
LC-MS (方法 15): R_t = 1.044 分; MS (ESI pos): m/z = 411.4 [M+2Na]^+
1H-NMR (400 MHz, CDCl₃) δ [ppm]: 1.49-1.43 (d, J=8.4, 8H), 1.87-1.82 (m, 1H), 2.22-2.18 (m,3H),
実施例１３６Ａ
ジ－ｔｅｒｔ－ブチル（２Ｓ）－４，４－ジアリルピロリジン－１，２－ジカルボキシレート

ジ－ｔｅｒｔ－ブチル（２Ｓ）－４，４－ジアリル－５－オキソ－ピロリジン－１，２－ジカルボキシレート（実施例１３５Ａからの８０．０ｇ、１８８ｍｍｏｌ、１．００当量）のＴＨＦ（３００ｍＬ）溶液に、－７８℃でＬｉＢＨＥｔ_３（１Ｍ、２２５ｍＬ、１．２０当量）を加えた。添加後、混合物を－７８℃で３時間撹拌した。ＬＣＭＳは、所望のＭＳが検出されたことを示した。ＴＬＣは２つの新しいスポットを形成した（ＰＥ／ＥＡ＝３／１、Ｒ_ｆ＝０．６５、Ｒ_ｆ＝０．８）。反応混合物を飽和炭酸ナトリウム水溶液（５０ｍＬ）で、０℃でクエンチし、次いで３０％Ｈ_２Ｏ_２（１ｍＬ）を０℃で滴下した。混合物を減圧下で濃縮してＴＨＦを除去し、次いで残渣を水（１０００ｍＬ）およびＤＣＭ（１０００ｍＬ）で希釈した。水相をＤＣＭ（３００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、次いで減圧下で濃縮して粗生成物を得た。粗残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ_２、ＰＥ／ＥＡ＝８０／１～３０／１）により精製して、表題化合物（５６．０ｇ、収率６９％、純度８５％）を無色油状物として得た。

LC-MS (方法 15): R_t = 1.192 分; MS (ESI pos): m/z = 390.3 [M+K]^+
1H-NMR (400 MHz, CDCl₃) δ [ppm]: 1.53-1.47 (m, 18H), 2.13-1.98 (m, 2H), 2.22-2.15 (m,3H), 2.39-2.24 (m, 1H), 2.92-2.91 (m, 1H), 4.22-4.08 (m, 1H), 5.18-5.06 (m, 5H), 5.85-5.77 (m, 2H).
実施例１３７Ａ
ジ－ｔｅｒｔ－ブチル（３Ｓ）－２－アザスピロ［４．４］ノン－７－エン－２，３－ジカルボキシレート

ＤＣＭ（４００．００ｍＬ）中のグラブス第１世代触媒（ＣＡＳ ＲＮ：１７２２２２－３０－９）（２．８５ｇ、３．４７ｍｍｏｌ、０．０５当量）の溶液に、ジ－ｔｅｒｔ－ブチル（２Ｓ）－４，４－ジアリルピロリジン－１，２－ジカルボキシレート（実施例１３６Ａから２５．０ｇ、６９．４ｍｍｏｌ、１．００当量）を３４℃で滴下した。滴下終了後、混合物を３４℃で、１時間Ｎ_２雰囲気下で撹拌した。ＴＬＣは２つの新しいスポットが形成されたことを示した（ＰＥ／ＥＡ＝５／１、Ｒ_ｆ＝０．６、Ｒ_ｆ＝０．７）。反応混合物を濾過し、減圧下で濃縮して、粗生成物を得た。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ_２、ＰＥ／ＥＡ＝１／０～８０／１）により精製して、表題化合物（１２．０ｇ）を無色油状物として得た。

¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) δ [ppm]: 1.46-1.43 (m, 18H), 1.92-1.87 (m, 1H), 2.45-2.22 (m, 5H), 3.49-3.29 (m, 2H), 4.21-4.19 (m, 1H), 5.64 (s, 2H).
実施例１３８Ａ
ジ－ｔｅｒｔ－ブチル（３Ｓ）－２－アザスピロ［４．４］ノナン－２，３－ジカルボキシレート

ＥｔＯＨ（１００ｍｌ）中のジ－ｔｅｒｔ－ブチル（３Ｓ）－２－アザピロ［４．４］ノン－７－エン－２，３－ジカルボキシレート（実施例１３７Ａから１２．０ｇ、３７．１ｍｍｏｌ、１．０当量、）の溶液に、Ｎ_２雰囲気下でＰｄ／Ｃ（１０％、０．１ｇ）を加えた。懸濁液を脱気し、Ｈ_２ガスで３回パージした。Ｈ_２（１５Ｐｓｉ）下で、２５℃で１６時間撹拌した。懸濁液の一部を濾過し、濾液を濃縮し、プロトンＮＭＲを行ったところ、所望の生成物が形成されたことが示された。反応混合物を濾過し、濾液を濃縮して、１０．０ｇ（粗）の表題化合物を白色固体として得た。

¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) δ [ppm]: 4.12-4.02 (m, 1H), 3.65-3.60 (m, 2H), 3.12-3.38 (m, 5H), 2.11-2.06 (m, 1H), 1.80-1.77 (m, 1H), 1.57-1.56 (m, 6H), 1.40-1.36 (m, 18H).
実施例１３９Ａ
（３Ｓ）－２－アザスピロ［４．４］ノナン－３－カルボン酸

化合物ジ－ｔｅｒｔ－ブチル（３Ｓ）－２－アザピロ［４．４］ノナン－２，３－ジカルボキシレート（実施例１３８Ａから１２ｇ、３６．８ｍｍｏｌ、１当量、）をＨＣｌ／ＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ）の溶液に添加し、次いで混合物を１５℃で１時間撹拌した。ＬＣ－ＭＳ分析は、出発物質が消費され、所望の標的質量が見出されたことを示した。反応混合物を真空中で濃縮して溶媒を除去し、７．５ｇ（３６．４ｍｍｏｌ、収率９９％）の粗表題化合物を白色固体として塩酸塩として得た。

¹H-NMR (400 MHz, DMSO) δ [ppm]: 10.07 (s, 1H), 8.81 (s, 1H), 4.38-4.27 (m, 1H), 3.16-3.02 (m, 2H), 2.22-2.21 (m, 1H), 1.96-1.90 (m, 1H), 1.63-1.56 (m, 8H).
実施例１４０Ａ
（３Ｓ）－２－｛［（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ］カルボニル｝－２－アザピロ［４．４］ノナン－３－カルボン酸

（３Ｓ）－２－アザスピロ［４．４］ノナン－３－カルボン酸（実施例１３９Ａからの５．１ｇ、２４．８ｍｍｏｌ）およびＦｍｏｃ－ＯＳｕ（１０．０ｇ、２９．７ｍｍｏｌ、１．２当量）のＴＨＦ（７０ｍＬ）およびＨ_２Ｏ（７０ｍＬ）溶液に、ＮａＨＣＯ_３（８．５ｇ、１０１ｍｍｏｌ、３．９４、４．０８当量）を加えた。混合物を１５℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳ分析は、出発物質が消費され、所望の標的質量が得られたことを示した。水（２００ｍｌ）を加え、次いで混合物をＤＣＭ（２００ｍｌ×２）で抽出した。合わせた有機相をブライン（１００ｍｌ）で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、次いで濃縮した。粗生成物を逆相ＭＰＬＣ（ＥＡ）で精製して、６．９ｇ（１７．５ｍｍｏｌ、収率７０％、純度９９％）の表題化合物を黄色固体として得た。

LC-MS (方法 15): R_t = 2.501 分; MS (ESI pos): m/z = 392.2 [M+H]^+
1H-NMR (400 MHz, CDCl₃) δ [ppm]: 7.80-7.79 (d, J = 7.2, 2H), 7.59-7.54 (m, 2H), 7.44-7.42 (m, 2H), 7.36-7.35(m, 2H), 4.55-4.52 (m, 2H), 4.42-4.38 (m, 1H), 4.31-4.20(m, 1H), 3.34-3.17(m,2H), 2.33-2.28 (m, 1H), 2.13-2.08 (m, 1H), 1.73-1.50 (m, 8H).
このアミノ酸をＳＰＰＳに使用した。このアミノ酸も市販されている（ＣＡＳ－ＲＮ：３９４７３４－７８－２）。

実施例１４１Ａ
（２Ｓ，４Ｒ）－４－（トリフルオロメチル）ピロリジン－２－カルボン酸

ＤＣＭ（７０ｍＬ）中の（２Ｓ，４Ｒ）－１－ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル－４－（トリフルオロメチル）ピロリジン－２－カルボン酸（７ｇ、２４．７ｍｍｏｌ、１当量）の溶液に、ＴＦＡ（８．００ｍＬ、１０８ｍｍｏｌ、４．３７当量）を加えた。混合物を１０℃で４時間撹拌した。ＬＣＭＳ分析は、出発物質が消費され、所望の標的質量が見出されたことを示した。反応混合物を真空下で濃縮し、粗生成物を次の工程に直接使用した。表題化合物（７．３４ｇ、２４．７ｍｍｏｌ、収率１００％、ＴＦＡ塩）を白色固体として得た。

LC-MS (方法 15): R_t = 0.18 分; MS (ESI pos): m/z = 184.1 [M+H]^+
1H-NMR (400 MHz, CDCl₃) δ [ppm]: 4.51-4.48 (m, 1H), 3.82 (m, 1H), 3.57-3.55 (m, 1H), 2.65-2.62 (m, 2H), 2.53-2.49 (m, 1H).
実施例１４２Ａ
（２Ｓ，４Ｒ）－１－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニル）－４－（トリフルオロメチル）ピロリジン－２－カルボン酸

Ｈ_２Ｏ（７０ｍＬ）およびアセトン（７０ｍＬ）中の粗（２Ｓ，４Ｒ）－４－（トリフルオロメチル）ピロリジン－２－カルボン酸（実施例１４１Ａからの２ｇ、６．７３ｍｍｏｌ、１当量、ＴＦＡ塩）の溶液に、Ｎａ_２ＣＯ_３（２．８５ｇ、２６．９ｍｍｏｌ、４当量）およびＦｍｏｃ－ＯＳｕ（２．７２ｇ、８．０８ｍｍｏｌ、１．２当量）を加えた。混合物を１０℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳ分析は１つのピークのみを示し、そして所望の質量が見出された。ＴＬＣ解析（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝１０／１）は、出発物質が消費され、主スポット（Ｒ_ｆ＝０．４）が現れたことを示した。ＨＣｌ溶液（１Ｍ、３０ｍＬ）を、ｐＨ＝２になるまで混合物に添加した。混合物をＤＣＭ（７０ｍＬ×２）で抽出し、合わせた有機相をブライン（７０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、次いで濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ_２、ＰＥ／ＥＡ＝１０／１～５／１）により精製し、黄色固形物として１．７ｇ（６１％、純度９７％）の表題化合物を得た。

LC-MS (方法 15): R_t = 2.425 分; MS (ESI pos): m/z = 406.2 [M+H]⁺ , 406.2 [M+Na]^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO) δ [ppm]: 7.92-7.89 (m, 2H), 7.66-7.64 (m, 2H), 7.42-7.41 (m, 2H), 7.35-7.32 (m, 2H), 4.16-4.19 (m, 4H), 3.72-3.50 (m, 3H), 2.38-2.30 (m, 2H), 2.18 (s, 1H).
¹⁹F-NMR (400 MHz, DMSO) δ [ppm]: -70.128, -70.275.
キラルＳＦＣ：Ｒ_ｔ＝２．３３分、９９％ｅｅ
キラルＳＦＣ条件：ＡＤ－３＿５ＣＭ＿ＩＰＡ（ＤＥＡ）＿１０＿２０＿３ＭＬ＿Ｔ３５カラム：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＡＤ－３ ５０×４．６ｍｍＩ．Ｄ．、３μｍ 移動相：１０％から２０％までのＣＯ_２中イソプロパノール（０．０５％ＤＥＡ） 流量：３ｍＬ／分 波長：２２０ｎｍ。

このアミノ酸をＳＰＰＳに使用した。

表１３：参照ペプチド

表１４：本発明によるペプチド

表１５：参照ペプチドの分析データ

表１６：本発明に従って調製したペプチドの分析データ

表１７：選択されたペプチドについてのＭａｌｄｉ質量スペクトルデータ

以下において、実施例２９、４４、４５、６７、７５、１０９、１６６、１８５、３４７、４４３、４６６および４９９は、それらの化学構造によって例示される。本発明は、これらの実施例の塩の薬学的に許容される塩、溶媒和物または塩の溶媒和物を含む。化学構造は、無塩形態として表示される。

実施例２９、配列：ＡＩＣ＋ＳＲＳＬＰ－（Ｏｉｃ）－Ｉ－（Ｐｅｎ）＋ＩＰＤ－ＯＨ（ＨＣｌ塩）

実施例４４、配列：（（Ｎ－Ｍｅ）Ｇ）－ＩＣ＋ＳＲＳ－（（ｔＢｕ）Ａ）－ＰＰＩ－（Ｐｅｎ）＋ＩＰ－（ＰＥＧ９（３１原子））－ＮＨ２

実施例４５、配列：ＡＩ－Ｃ＋ＳＲＳ－（（ｔＢｕ）Ａ）－Ｐ－（（６Ｓ）－５－アザスピロ［２．４］ヘプタン－６－カルボン酸）－Ｉ－（Ｐｅｎ）＋ＩＰＤ－ＮＨ２

実施例６７、配列：（（Ｎ－Ｍｅ）Ｇ）－ＩＣ＋ＳＲＳＬＰ－（Ｏｉｃ）－Ｉ－（Ｐｅｎ）＋ＩＰ－ＮＨ２（ＨＣｌ塩）

実施例７５、配列：ＡＩＣ＋ＳＲＳＬＰ－（Ｏｉｃ）－Ｉ－（Ｐｅｎ）＋ＩＰＤ－ＮＨ２

実施例１０９、配列：（（Ｎ－Ｍｅ）Ｇ）－ＩＣ＋ＳＲＳＬＰ－（Ｏｉｃ）－Ｉ－（Ｐｅｎ）＋ＩＰ－ＮＨ２

実施例１６６、配列：（３－アミノ－２，２－ジメチルプロピオン酸）－ＩＣ＋ＳＲＳ－（（ｔＢｕ）Ａ）－ＰＰＩ－（Ｐｅｎ）＋ＩＰＤ－ＮＨ２

実施例１８５、配列：ＡＩＣ＋ＳＲＳＬＰ－（Ｏｉｃ）－Ｉ－（（Ｎ－Ｍｅ）Ｃ）＋ＩＰＤ－ＮＨ２

実施例３４７、配列：ＩＣ＋ＳＲＳＬＰ－（Ｏｉｃ）－Ｉ－（Ｐｅｎ）＋ＩＰＤ－ＯＨ

実施例４４３、配列：（（Ｎ－Ｍｅ）Ａ）－ＩＣ＋ＳＲＳ－（（ｔＢｕ）Ａ）－Ｐ－（（３Ｒ，６Ｒ）－１，１－ジフルオロ－５－アザスピロ［２．４］ヘプタン－６－カルボン酸（エナンチオマー１））－Ｉ－（Ｐｅｎ）＋ＩＰ－ＮＨ２

実施例４６６、配列：（（Ｎ－Ｍｅ）Ｇ）－ＩＣ＋ＳＲＳＬＰ－（Ｏｉｃ）－Ｉ－（Ｐｅｎ）＋ＩＰＤＤ－ＯＨ

実施例４９９、配列：ＡＩＣ＋Ｓ－（Ａｒｇ（１３Ｃ６，１５Ｎ４））－ＳＬＰ－（Ｏｉｃ）－Ｉ－（Ｐｅｎ）＋ＩＰＤ－ＯＨ

生物学的インビトロ（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）試験
１．試験化合物のセリンプロテアーゼプロファイリング
試験化合物はカリクレイン、プラスミン、ＦＸＩａ、トロンビン、第Ｘａ因子、ｔＰＡ、およびトリプシンを含む異なるヒトセリンプロテアーゼからなるプロテアーゼパネルにおいて試験した。

試験の説明
試験化合物の阻害効力および／または選択性を測定した。このアッセイはプロテアーゼ触媒による切断の際に蛍光発生ペプチドプロテアーゼ基質から放出されるアミノメチルクマリン（ＡＭＣ）の蛍光検出に基づく。典型的にはヒト血漿から、またはヒト膵臓からのトリプシンについて精製された活性プロテアーゼまたはチモーゲン、および対応する基質は市販されている。

セリンプロテアーゼアッセイは以下の酵素および基質を含む。全ての酵素および基質をアッセイ緩衝液（５０ｍＭ Ｔｒｉｓ／ＨＣｌ ｐＨ７．４、１００ｍＭ ＮａＣｌ、５ｍＭ ＣａＣｌ２、０．１％ ＢＳＡ）で希釈する。最終的な分析濃度は次のとおりである；
・ カリクレイン（Ｋｏｒｄｉａ、０．２ｎＭ）、Ｈ－Ｐｒｏ－Ｐｈｅ－Ａｒｇ－ＡＭＣ（Ｂａｃｈｅｍ Ｉ－１２９５；５μＭ）
・ プラスミン（Ｋｏｒｄｉａ、０．１μｇ／ｍＬ、１．２ｎＭ）、ＭｅＯＳｕｃ－Ａｌａ－Ｐｈｅ－Ｌｙｓ－ＡＭＣ（Ｂａｃｈｅｍ Ｉ－１２７５、５０μＭ）
・ 第ＸＩａ因子（Ｋｏｒｄｉａ、０．１５ｎＭ）、Ｂｏｃ－Ｇｌｕ（ＯＢｚｌ）－Ａｌａ－Ａｒｇ－ＡＭＣ（Ｂａｃｈｅｍ Ｉ－１５７５；５μＭ）
・ トロンビン（Ｋｏｒｄｉａ、０．０２ｎＭ）、Ｂｏｃ－Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）－Ｐｒｏ－Ａｒｇ－ＡＭＣ（Ｂａｃｈｅｍ Ｉ－１５６０；５μＭ）
・ 第Ｘａ因子（Ｋｏｒｄｉａ、１．３ｎＭ）、Ｂｏｃ－Ｉｌｅ－Ｇｌｕ－Ｇｌｙ－Ａｒｇ－ＡＭＣ（Ｂａｃｈｅｍ Ｉ－１１００；５μＭ）
・ 組織プラスミノーゲン活性化因子（ｔＰＡ、Ｌｏｘｏ；２ｎＭ）、ＣＨ３ＳＯ２－Ｄ－Ｐｈｅ－Ｇｌｙ－Ａｒｇ－ＡＭＣ（Ｐｅｎｔａｐｈａｒｍ ０９１－０６；５μＭ）
・ トリプシン（Ｓｉｇｍａ；０．０４２Ｕ／ｍＬ）、基質Ｂｏｃ－Ｉｌｅ－Ｇｌｕ－Ｇｌｙ－Ａｒｇ－ＡＭＣ（Ｂａｃｈｅｍ Ｉ－１１００；５μＭ）。

試験化合物の効力を測定するために、酵素および該当する基質希釈液を使用してプロテアーゼアッセイを行う：
試験化合物または参照化合物の１μＬ／ウェル連続希釈物を含有する３８４ウェルマイクロタイタープレート（白色、Ｇｒｅｉｎｅｒ）に、２０μＬのアッセイ緩衝液、２０μＬの酵素希釈物、および２０μＬの基質を添加する。対照反応は試験化合物（ＤＭＳＯのみ）を含まない。典型的には室温で３０分間インキュベートした後（線形反応速度論）、蛍光（ｅｘ３６０ｎｍ、ｅｍ４６５ｎｍ）をマイクロタイタープレート蛍光リーダー（例えばＴｅｃａｎ Ｓａｆｉｒｅ ＩＩ）で測定する。ＩＣ_５０値はプロテアーゼ活性のパーセンテージに対して試験化合物の対数濃度をプロットすることによって決定される。

２．生化学的ヒトＭＡＳＰ－１およびＭＡＳＰ－２アッセイ
２．１ 組換えヒトＭＡＳＰ１およびＭＡＳＰ２活性プロテアーゼの組換え発現および蛋白質産生。
Ｃ末端ＨｉｓタグおよびＮ末端Ｉｇカッパ分泌シグナル（配列番号２）を有するアミノ酸２９７～６９９に対応するフラグメントをコードするヒトＭＡＳＰ１の切断ｃＤＮＡ配列を、哺乳動物発現ベクターｐｃＤＮＡ３．１（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）にサブクローニングした。

Ｃ末端ＨｉｓタグおよびＮ末端Ｉｇカッパ分泌シグナル（配列番号３）を有するアミノ酸２９７～６８６に対応するフラグメントをコードするヒトＭＡＳＰ１の切断ｃＤＮＡ配列を、哺乳動物発現ベクターｐｃＤＮＡ３．１（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）にサブクローニングした。

ＭＡＳＰ１またはＭＡＳＰ２発現ベクターを、製造元の説明に従って、Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ ＬＴＸ（登録商標）試薬（Ｔｈｅｒｍｏ－Ｆｉｓｃｈｅｒ）を使用してＨＥＫ２９３（ＡＴＣＣ ＮｏＣＲＬ－１５７３）細胞株にトランスフェクトした。組換えヒトＭＡＳＰ１およびＭＡＳＰ２プロテアーゼの成熟型を培地中に分泌した。ＭＡＳＰ１およびＭＡＳＰ２タンパク質を、製造元の説明に従って、Ｎｉ－ＮＴＡ Ｓｕｐｅｒｆｌｏｗ樹脂（Ｑｉａｇｅｎ）上のアフィニティークロマトグラフィーによって、条件培地から精製した。

２．２ 生化学的ヒトＭＡＳＰ１アッセイ
ＨＥＫ２９３細胞中で産生された組換えヒトＭＡＳＰ１酵素を反応緩衝液（５０ｍＭ ＨＥＰＥＳ ｐＨ８，０；１００ｍＭ ＮａＣｌ；０，０１％ ＣＨＡＰＳ；０，５ｍＭ グルタチオン）中で２０ｎＭの濃度に希釈し、２５μｌを３８４ウェル白色マイクロタイタープレート（Ｇｒｅｉｎｅｒ Ｂｉｏ Ｏｎｅ ７８１０７５）の各シングルウェルに移した。１μｌの阻害剤化合物溶液（対応する濃度で、ＤＭＳＯに溶解）または対照として純粋なＤＭＳＯを同じウェルに添加した。酵素反応は、ＦＲＥＴ基質ＡＢＺ－ＭＹＧＧＡＲＲＬ－Ｌｙｓ（Ｄｎｐ）－ＮＨ２；（ＡＢＺ－２－アミノベンゾイル；ＤＮＰ－２，４－ジニトロフェニル；Ｊｅｒｉｎｉ Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ｂｅｒｌｉｎによる特注合成）の２０μＭ溶液の２５μｌを反応緩衝液に添加することによって開始した。マイクロタイタープレートを３２℃の温度で６０～１２０分間インキュベートした。蛍光強度の増加を、３２０ｎｍの励起波長（ｅｘｃｉｔａｔｉｏｎ ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ）および４２０ｎｍの発光波長（ｅｍｉｓｓｉｏｎ ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ）を使用して、適切な蛍光プレートリーダー（例えば、ＴＥＣＡＮ Ｕｌｔｒａ）において測定した。ＩＣ５０値は、試験化合物濃度の関数としてのヒトＭＡＳＰ１活性の阻害のパーセンテージから計算した。

２．３ 生化学的ヒトＭＡＳＰ２アッセイ
ＨＥＫ ２９３細胞中で産生された組換えヒトＭＡＳＰ２酵素を反応緩衝液（５０ｍＭ ＨＥＰＥＳ ｐＨ８，０；１００ｍＭ ＮａＣｌ；０，０１％ ＣＨＡＰＳ；０，５ｍＭ グルタチオン）中で２０ｎＭの濃度に希釈し、２５μｌを３８４ウェル白色マイクロタイタープレート（Ｇｒｅｉｎｅｒ Ｂｉｏ Ｏｎｅ ７８１０７５）の各シングルウェルに移した。１μｌの阻害剤化合物溶液（該当する濃度で、ＤＭＳＯに溶解）または対照として純粋なＤＭＳＯを同じウェルに添加した。酵素反応は、ＦＲＥＴ基質ＤＡＢＣＹＬ－ＫＩＳＰＱＧＹＧＲＲ－Ｇｌｕ（ＥＤＡＮＳ）－ＮＨ２；（Ｄａｂｃｙｌ－４－（（４－（ジメチルアミノ）フェニル）アゾ）安息香酸；Ｅｄａｎｓ－５－［（２－アミノエチル）アミノ］ナフタレン－１－スルホニル；Ｊｅｒｉｎｉ Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ｂｅｒｌｉｎによる特注合成）の６０μＭ溶液の２５μｌを反応緩衝液に添加することよって開始した。マイクロタイタープレートを３２℃の温度で６０～１２０分間インキュベートした。蛍光強度の増加を、３４０ｎｍの励起波長および４９０ｎｍの発光波長を使用して、適切な蛍光プレートリーダー（例えば、ＴＥＣＡＮ Ｕｌｔｒａ）において測定した。ＩＣ５０値は、試験化合物濃度の関数としてのヒトＭＡＳＰ２活性の阻害のパーセンテージから計算した。

３．Ｃ３沈着試験（ヒト、ラット、マウス、イヌ、ミニブタ）
Ｃ３沈着アッセイは、本質的に記載されたように行った（参考文献）。マルチウェルプレート（Ｇｒｅｉｎｅｒ－Ｎｕｎｃ ３８４ Ｍａｘｉ Ｓｏｒｐ ＃４６４７１８）を、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ（Ｓｉｇｍａ Ｍ７５０４、０．０５Ｍ炭酸塩－重炭酸塩緩衝液中１０μｇ／ｍＬ、ｐＨ９．６）からのＭａｎｎａｎで、４℃で一晩コーティングした。非特異的結合をブロックするために、ウェルをＴＢＳで３回洗浄し、続いて、Ｔｒｉｓ緩衝生理食塩水（ＴＢＳ）中の１％ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）５０μＬと共に３７℃で２時間インキュベートした。この工程および次のインキュベーション工程の各々の後、ウェルをＣ３洗浄緩衝液（ＴＢＳ；０．０５％ Ｔｗｅｅｎ２０；５ｍＭ ＣａＣｌ_２）で３回洗浄した。次に、ウェルを、Ｖｅｒｏｎａｌ緩衝液（Ｖｅｒｏｎａｌ Ｐｕｆｆｅｒ（Ｌｏｎｚａ １２６２４Ｅ））で希釈した血清と試験化合物の混合物５０μＬと共に３７℃で３０分間インキュベートした。血清は、プレテストにおいて、コーティングされていないプレートへの検出可能なＣ３沈着を示さなかった濃度で使用した。適切な希釈率はヒト、ラット、マウスおよびイヌの血清についてはそれぞれ１：１００～１：２００の範囲であり、ミニブタの血清についてはそれぞれ１：２０～１：１００の範囲であることが見出された。典型的な実験では、化合物を１×１０^－９～５×１０^－５ｍｏｌ／Ｌの濃度範囲で試験した。洗浄後、ポリクローナルウサギ抗ヒトＣ３抗体（Ｄａｋｏ（Ｂｉｏｚｏｌ）Ａ００６２）と１時間インキュベートし、続いて洗浄し、ペルオキシダーゼ結合抗ウサギＩｇＧ（Ｓｉｇｍａ Ａ１９４９）と３７℃で３０分間インキュベートし、続いて洗浄し、暗所でＴＭＢ基質溶液とインキュベートすることによって、Ｃ３沈着を検出した。適切に発色したら、２５μＬの停止溶液（Ｓｉｇｍａ Ｓ５８１４）を添加することによって発色反応を停止させ、４５０ｎｍの波長での吸収を測定することによって光度計で定量した。抗体を、０．５％ＢＳＡを補充したＣ３洗浄緩衝液で希釈した。

４．生化学的ラットＭＡＳＰ－１およびＭＡＳＰ－２アッセイ
４．１ 組換えヒトおよびラットＭＡＳＰ１およびＭＡＳＰ２活性プロテアーゼの組換え発現および蛋白質産生。
Ｃ末端ＨｉｓタグおよびＮ末端Ｉｇカッパ分泌シグナル（配列番号４）を有するアミノ酸３０２～７０４に対応するフラグメントをコードするラットＭＡＳＰ１の切断ｃＤＮＡ配列を、哺乳動物発現ベクターｐｃＤＮＡ３．１（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）にサブクローニングした。

Ｃ末端ＨｉｓタグおよびＮ末端Ｉｇカッパ分泌シグナル（配列番号５）を有するアミノ酸２９６～６８５に対応するフラグメントをコードするラットＭＡＳＰ２の切断ｃＤＮＡ配列を、哺乳動物発現ベクターｐｃＤＮＡ３．１（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）にサブクローニングした。

ＭＡＳＰ１またはＭＡＳＰ２発現ベクターを、製造元の説明に従って、Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ ＬＴＸ（登録商標）試薬（Ｔｈｅｒｍｏ－Ｆｉｓｃｈｅｒ）を使用して、ＨＥＫ２９３（ＡＴＣＣ Ｎｏ．ＣＲＬ－１５７３）細胞株にトランスフェクトした。組換えラットＭＡＳＰ１およびＭＡＳＰ２プロテアーゼの成熟型を培地中に分泌した。ＭＡＳＰ１およびＭＡＳＰ２タンパク質を、製造元の説明に従って、Ｎｉ－ＮＴＡ Ｓｕｐｅｒｆｌｏｗ樹脂（Ｑｉａｇｅｎ）上のアフィニティークロマトグラフィーによって、条件培地から精製した。

４．２ 生化学的ラットＭＡＳＰ１アッセイ。
ＨＥＫ ２９３細胞で産生された組換えラットＭＡＳＰ１酵素を反応緩衝液（５０ｍＭ ＨＥＰＥＳ ｐＨ８，０；１００ｍＭ ＮａＣｌ；０，０１％ ＣＨＡＰＳ；０，５ｍＭ グルタチオン）で４ｎＭの濃度に希釈し、２５μｌを３８４ウェル白色マイクロタイタープレート（Ｇｒｅｉｎｅｒ Ｂｉｏ Ｏｎｅ ７８１０７５）の各シングルウェルに移した。１μｌの阻害剤化合物溶液（対応する濃度で、ＤＭＳＯに溶解）または対照として純粋なＤＭＳＯを同じウェルに添加した。酵素反応は、ＦＲＥＴ基質Ｄａｂｃｙｌ－ＭＹＧＧＡＲＲＬ－Ｇｌｕ（Ｅｄａｎｓ）－ＮＨ２；（Ｄａｂｃｙｌ－４－（（４－（ジメチルアミノ）フェニル）アゾ）安息香酸；Ｅｄａｎｓ－５－［（２－アミノエチル）アミノ］ナフタレン－１－スルホニル；Ｊｅｒｉｎｉ Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ｂｅｒｌｉｎによる特注合成）の４０μＭ溶液の２５μｌを反応緩衝液に添加することによって開始した。マイクロタイタープレートを３２℃の温度で６０～１２０分間インキュベートした。蛍光強度の増加を、３４０ｎｍの励起波長および４９０ｎｍの発光波長を使用して、適切な蛍光プレートリーダー（例えば、ＴＥＣＡＮ Ｕｌｔｒａ）において測定した。ＩＣ５０値は、試験化合物濃度の関数としてラットＭＡＳＰ２活性の阻害のパーセンテージから計算した。

４．３ 生化学ラットＭＡＳＰ２アッセイ。
ＨＥＫ ２９３細胞で産生された組換えラットＭＡＳＰ２酵素を反応緩衝液（５０ｍＭ ＨＥＰＥＳ ｐＨ８，０；１００ｍＭ ＮａＣｌ；０，０１％ ＣＨＡＰＳ；０，５ｍＭ グルタチオン）で２０ ｎＭの濃度に希釈し、２５μｌを３８４ウェル白色マイクロタイタープレート（Ｇｒｅｉｎｅｒ Ｂｉｏ Ｏｎｅ ７８１０７５）の各シングルウェルに移した。１μｌの阻害剤化合物溶液（対応する濃度で、ＤＭＳＯに溶解）または対照として純粋なＤＭＳＯを同じウェルに添加した。酵素反応は、ＦＲＥＴ基質Ａｂｚ－ＩＥＧＲＴＳＥＤ－（Ｌｙｓ）Ｄｎｐ－ＮＨ２；（ＡＢＺ－２－アミノベンゾイル；ＤＮＰ－２，４－ジニトロフェニル；Ｊｅｒｉｎｉ Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ｂｅｒｌｉｎによる特注合成）の３０μＭ溶液の２５μｌを反応緩衝液に添加することによって開始した。マイクロタイタープレートを３２℃の温度で６０～１２０分間インキュベートした。蛍光強度の増加を、３２０ｎｍの励起波長および４２０ｎｍの発光波長を使用して、適切な蛍光プレートリーダー（例えば、ＴＥＣＡＮ Ｕｌｔｒａ）において測定した。ＩＣ５０値は、試験化合物濃度の関数としてラットＭＡＳＰ２活性の阻害のパーセンテージから計算した。

表１８：参照ペプチドの平均ＩＣ５０

表１９：本発明のペプチドの平均ＩＣ５０

表２０：参照ペプチドの平均ＩＣ５０

表２１：本発明のペプチドの平均ＩＣ５０

４． 片側腎摘出後のラットにおける腎虚血再灌流傷害（Ｋｉｄｎｅｙ ｉｓｃｈｅｍｉａ ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ ｉｎｊｕｒｙ）（ＩＲＩ）
すべての手続きは、科学的目的で動物を使用するための国内法（Ｔｉｅｒｓｃｈｕｔｚｇｅｓｅｔｚ）およびＥＵ指令に準拠し、Ｂａｙｅｒ ＡＧの施設内動物管理事務所および所管の地域当局（ＬＡＮＵＶ Ｒｅｃｋｌｉｎｇｈａｕｓｅｎ）によって承認された。標準的な実験室用食餌および水道水は、自由に摂取可能であった。典型的な実験では、使用した動物の数はｎ＝６～１２であった。動物を無作為に実験群に割り付けた。腎虚血再灌流傷害（ＩＲＩ）を、２５０～３５０ｇの範囲の好ましい体重のオスの片側腎摘出Ｗｉｓｔａｒラットにおいて行った。片側腎摘出術では、ラットを空気中２％イソフルランの吸入下で麻酔し続けた。鎮痛は、０．９ＮａＣｌ中の２５％Ｋｅｔａｖｅｔおよび８％Ｒｏｍｐｕｎの混合物４００μｌ／ｋｇの皮下注射として提供した。右腎を背側腹壁の小切開で突出させ、その腎脚を結さつした後、片側腎摘除術を施行した。片側腎摘出後、腹部切開を外科的縫合により層状に閉じ、動物をＩＲＩ前に７～８日間回復させた。ＩＲＩは上記のように、麻酔および鎮痛下で行った。残存左腎を腹壁の小切開から突出させ、典型的な設定で４５分間非外傷性微小血管クランプで腎脚の血管をクランプした。この間、腎臓をその場でクランプと一緒に腹腔内に再配置し、温かい虚血を確実にした。４５分後、クランプを開いて取り除き、切開部を上記のように縫合糸で閉じた。試験化合物またはビヒクルを、外科手術の前に頸静脈に配置されたポリエチレンカテーテルを介して静脈内投与した。

化合物を適切なビヒクルに溶解し、ＩＲＩの前に予防的に、またはＩＲＩの完了後に治療的に投与した。投与された典型的な用量範囲は、０．１～３０ｍｇ／ｋｇ静脈内であった。化合物を含まないビヒクルを、対照として役立つ動物に投与した。偽対照動物は、虚血の誘導のためにクランプを閉鎖することなく、上記の全手順を受けた。

ＩＲＩ後１日目と８日目に麻酔下で血液サンプルを採取した。典型的な設定では、ＩＲＩの８日後に動物を屠殺し、腎臓をサンプリングし、液体窒素中で凍結した。別の典型的な設定では、ＩＲＩの１日後に動物を屠殺した。

腎機能を評価するために血漿試料で測定した典型的な臨床検査パラメータはクレアチニンと尿素であった。クレアチニンクリアランス測定のため、動物を代謝ケージに入れ、少なくとも１６時間尿を採取した。尿量流量（Ｖ_Ｕ）測定後、尿中および血漿中クレアチニン濃度（それぞれ［Ｃｒｅａ］_Ｕおよび［Ｃｒｅａ］_Ｐｌ）の測定後、クレアチニンクリアランス（Ｃｌ_Ｃｒｅａ）を標準式：Ｃｌ_Ｃｒｅａ＝Ｖ_Ｕ＊［Ｃｒｅａ］_Ｕ／［Ｃｒｅａ］_Ｐｌに従って計算した。

ＲＮＡ抽出および定量的リアルタイムポリメラーゼ連鎖反応：Ｔｒｉｚｏｌ法によって組織サンプルから全ＲＮＡを抽出した。得られたＲＮＡの完全性をＢｉｏａｎａｌｙｚｅｒ（Ａｇｉｌｅｎｔ）でチェックした。逆転写のために、１μｇの全ＲＮＡを、最初に、ＲＮａｓｅを含まないＤＮａｓｅ Ｉ（Ｇｉｂｃｏ）で１５分間室温で消化し、次いで、Ｐｒｏｍｉｓｃｒｉｐｔ（Ｐｒｏｍｅｇａ）を用いて、キット供給者の標準プロトコルに従って４０μｌの全反応容量で逆転写した。１５分間６５℃に加熱することによって酵素を不活性化した後、得られたｃＤＮＡを、手（ｂｉｄｅｓｔ）で最終容量１５０μｌに希釈した。ＰＣＲ反応ごとに水および４μｌを選択した。ハウスキーピング遺伝子としてのサイトゾルベータアクチンへの生データのノーマライゼーションを含むリアルタイムＰＣＲを、記載されているように実施した（Ｅｌｌｉｎｇｈａｕｓら、２００５）。結果として得られる式は、任意の単位で与えられる。使用したオリゴヌクレオチドプライマーおよびプローブの配列を表１に示す。

５．大動脈バルーン閉塞後のブタの腎虚血再灌流傷害（ＩＲＩ）
すべての手続きは、科学的目的で動物を使用するための国内法（Ｔｉｅｒｓｃｈｕｔｚｇｅｓｅｔｚ）およびＥＵ指令に準拠し、Ｂａｙｅｒ ＡＧの施設動物管理事務所および所管の地域当局（ＬＡＮＵＶ Ｒｅｃｋｌｉｎｇｈａｕｓｅｎ）によって承認された。好ましくは１２～１６ｋｇの範囲の体重の雌性ゲチンゲンミニブタ（Ｅｌｌｅｇａａｒｄ、Ｄｅｎｍａｒｋ）を実験に使用した。動物を無作為に実験群に割り付けた。

軽微な侵襲的方法は、記載されているように変更して適用した（Ｓｉｍｏｎら、ブタ大動脈閉塞誘発性腎虚血／再灌流傷害時の静脈内硫化物の効果、Ｓｈｏｃｋ、２０１１；３５：１５６－１６３；Ｍａｔｅｊｋｏｖａら、ブタ腎臓虚血/再灌流傷害時のカルバミル化エリスロポエチン-FC融合タンパク質および組換えヒトエリスロポエチン、Ｉｎｔｅｎｓｉｖｅ Ｃａｒｅ Ｍｅｄ、２０１１；３９： ４９７－５１０）。簡単に述べると、ブタは、Ｋｅｔａｖｅｔ（登録商標）／Ｓｔｒｅｓｎｉｌ（登録商標）の筋肉内注射による前投薬の後、Ｋｅｔａｖｅｔ（登録商標）、Ｄｏｒｍｉｃｕｍ（登録商標）およびＰａｎｃｕｒｏｎｉｕｍ（登録商標）の連続静脈内注入によって麻酔されたままであった。気管内挿管後、小児用レスピレーター（Ａｖａｎｃｅ ＣＳ²， ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）を用いて、６～８ｍＬ／ｋｇの１回換気量で、Ｈ_２Ｏ３～４ｃｍの一定の呼気終末陽圧（ＰＥＥＰ）および１３～２０分^－１の頻度で、動物に人工換気を行った。換気は、動脈ＰａＣＯ２をベースラインで約４０ｍｍＨｇに保つように調整した。薬物および流体投与のために、カテーテルを右頸静脈に配置した。乳酸リンゲル液を１０ｍＬ／ｋｇ／ｈの一定速度で静脈内に注入した。動物は５０ｉ．Ｅ．/ｋｇヘパリン静脈内を受けた。適切な圧力トランスデューサーおよび記録装置に取り付けられた必要なプローブおよびカテーテルを配置した後、通常に以下の心拍出量および呼吸パラメータを測定した：中心静脈圧（左頸静脈経由）、動脈血圧および心拍数（ＢＰおよびＨＲ；左頸動脈経由）および心拍出量（ＣＯ）ならびに右頸動脈に留置したＰｕｌｓｉｏｎ ４Ｆ熱希釈カテーテル（ＰＶ２０１４Ｌ０８Ｎ）に接続したＰｉＣＣＯ（登録商標）システム（Ｐｕｌｓｉｏｎ、ドイツ）を使用した全身血管抵抗（ＳＶＲ）。ＣＶＰ、ＢＰおよびＨＲを測定するためのカテーテルを、Ｃｏｍｂｉｔｒａｎｓトランスデューサー（Ｂｒａｕｎ、ＲＥＦ ５２０３６６０）を介してＰｏｎｅｍａｈ記録システムに取り付けた。Ｆｏｇａｒｔｙ閉塞カテーテル（８Ｆ／１４Ｆ、Ｅｄｗａｒｄｓ Ｌｉｆｅｓｉｅｎｃｅｓ、ＲＥＦ ６２０８０１４Ｆ）を左大腿動脈を介して腹部大動脈に挿入し、膨張可能なバルーンを備えた先端を腎動脈の上流に配置した。小腹部切開によりカテーテルを膀胱内に導入し、尿を継続的に採取した。クレアチニン、尿素、肝酵素、血液細胞および化合物濃度を測定する一定間隔で、動脈血サンプルを採取した。動脈血試料中の動脈ｐＯ_２Ａ、ｐＣＯ_２ＡおよびｐＨを、Ｓｔａｔ Ｐｒｏｆｉｌｅ（登録商標）ＰＲＩＭＥ（登録商標）（Ｎｏｖａ Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ）血液ガス分析器で、一定間隔で測定した。腎臓灌流を、２，０～５，０ＭＨｚの広域スペクトル凸型トランスデューサー（Ｃ１－５－ＲＳ、ＲＥＦ ５３８４８７４）を取り付けたＬＯＧＩＱ ｅ獣医用超音波装置（Ｇｅｎｅｒａｌ Ｅｌｅｃｔｒｉｃｓ）を使用して、抵抗指数のドップラー超音波測定によって、規則的な間隔で評価した。腎抵抗性指数（ＲＲＩ）は患者における急性腎障害の重症度を評価するのに適したパラメータである（Ｄａｒｍｏｎら、重症患者の急性腎障害の可逆性に対するドップラー腎抵抗指数の診断精度、Ｉｎｔｅｎｓｉｖｅ Ｃａｒｅ Ｍｅｄ．２０１１；３７（１）：６８－７６）。

心血管系パラメータが安定したベースラインを示したとき（通常は手術後６０分）、記録を開始し、ベースラインパラメータのサンプルを採取した。ＨＲおよびＭＡＢＰを継続的に測定し、記録のために２分間隔で平均した。実験終了時、放血により豚を屠殺した。

腎臓損傷は、Ｆｏｇａｒｔｙバルーンカテーテルのバルーンを生理食塩水で膨張させることによって誘発され、これは腎臓および腹部器官への血流を直ちに遮断し、バルーンの上流の大動脈血圧の急激な上昇をもたらした。血流の停止は、腎血管のドップラー超音波検査でさらに確認した。典型的な実験では、バルーンを収縮させることによって再灌流するまで、大動脈を９０～１２０分間閉塞状態に保つ。再灌流後、血圧を安定させ、利尿を可能にするために、乳酸リンゲル液注入速度を２０ｍＬ／ｋｇ／時に倍増する。全てのパラメーターを、再灌流後６時間までモニターした。

化合物を適切なビヒクルに溶解し、ＩＲＩの前に予防的に、またはＩＲＩの完了後に治療的に投与した。投与された典型的な用量範囲は、０．１～１０ｍｇ／ｋｇ静脈内であった。典型的な実験では、１用量群あたり最大６匹の動物で３用量までの試験が行われた。化合物を含まないビヒクルを、対照として役立つ動物に投与した。偽対照動物は、虚血を誘発することなく、上記の全手順を受けた。

再灌流後の腎機能の尺度として、好ましくは、しかし排他的にではなく、利尿、血清クレアチニン、血清カリウム、血清重炭酸塩およびドップラー超音波検査により測定した抵抗指数の変化を用いた。

表２２：配列表

参考文献
・ Ｃａｌｉｃｅｔｉ Ｐ、Ｖｅｒｏｎｅｓｅ Ｆ．Ｍ、Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖ．Ｒｅｖ．２００３、５５、１２６１－１２７７、
・ Ｄａｒｍｏｎら、重症患者における急性腎障害の可逆性に関するドップラー腎抵抗指数の診断精度。Ｉｎｔｅｎｓｉｖｅ Ｃａｒｅ Ｍｅｄ．２０１１；３７（１）：６８－７６、
・ Ｄｏｎｇ－Ｌｉａｎｇ Ｈｕａｎｇ、Ｊｉｎｇ－Ｓｉ Ｂａｉ、Ｍｅｎｇ Ｗｕ、Ｘｉａ Ｗａｎｇ、Ｂｅｒｎｄ Ｒｉｅｄｌ、Ｅｌｉｓａｂｅｔｈ Ｐｏｏｋ、Ｃａｒｓｔｅｎ Ａｌｔ、Ｍａｒｉｏｎ Ｅｒｎｙ、Ｙｉ－Ｍｉｎｇ Ｌｉ、Ｄｏｎａｌｄ Ｂｉｅｒｅｒ、Ｊｉｎｇ Ｓｈｉ、Ｇｅ－Ｍｉｎ Ｆａｎｇ ＣｈｅｍＣｏｍｍｕｎ．、２０１９、５５、２８２１－２８２４、
・ ＤｕｎｋｅｌｂｅｒｇｅｒおよびＳｏｎｇ、自然免疫応答および獲得免疫応答における補体とその役割、Ｃｅｌｌ Ｒｅｓ． ２０１０；２０（１）：３４－５０、
・ Ｅｌｌｉｎｇｈａｕｓら、Ｊ Ｔｈｏｒａｃ Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ Ｓｕｒｇ．２００５ ６月；１２９（６）：１３８３－９０、
・ Ｅｎｃｙｃｌｏｐａｅｄｉａ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ”第３版、Ｊａｍｅｓ Ｓｗａｒｂｒｉｃｋ（編）、３１７７－３１８７ページ、
・ Ｆａｒｒａｒら、Ｃｏｌｌｅｃｔｉｎ－１１は、ストレス誘発Ｌ－フコースパターンを検出して、腎臓上皮損傷を誘発する、Ｊ Ｃｌｉｎ Ｉｎｖｅｓｔ．２０１６；１２６（５）：１９１１－１９２５、
・ Ｇａｒｒｅｄら、補体－ＭＢＬおよびそれ以降のマンノース結合レクチン経路を通る旅、Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｒｅｖ．２０１６；２７４（１）：７４－９７、
・ Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓａｌｔｓ：ＳｔａｈｌおよびＷｅｒｍｕｔｈによる特性、選択および使用（ＷｉｌｅｙＶＣＨ，２００２）
・ Ｈｅｊａら、ＭＡＳＰ－２の排他的活性化因子としてのセリンプロテアーゼＭＡＳＰ－１の役割を明らかにする補体レクチン経路活性化の改訂されたメカニズム、Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ、２０１２；１０９（２６）：１０４９８－５０３、
・ Ｈｅｊａら、単一特異性阻害剤は、マンナン結合レクチン関連セリンプロテアーゼ－１（ＭＡＳＰ－１）の両方がレクチン経路の活性化に不可欠であり、ＭＡＳＰ－２の構造的可塑性を明らかにすることを示す、Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ、２０１２；２８７（２４）：２０２９０－３００、
・ Ｈｏｎｇ－Ｋｕｉ Ｃｕｉ、Ｙｅ Ｇｕｏ、Ｙａｏ Ｈｅ、Ｆｅｎｇ－Ｌｉａｎｇ Ｗａｎｇ、Ｈａｏ－Ｎａｎ Ｃｈａｎｇ、Ｙｕ－Ｊｉａ Ｗａｎｇ、Ｆａｎｇ－Ｍｉｎｇ Ｗｕ、Ｃｈａｎｇ－Ｌｉｎ Ｔｉａｎ、Ｌｅｉ Ｌｉｕ Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．２０１３年版、５２、９５５８－９５６２、
・ ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｒｅｓｅａｒｃｈｄｉｓｃｌｏｓｕｒｅ．ｃｏｍ／ｓｅａｒｃｈｉｎｇ－ｄｉｓｃｌｏｓｕｒｅｓ，Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｄｉｓｃｌｏｓｕｒｅ Ｄａｔａｂａｓｅ Ｎｕｍｂｅｒ ６０５００５， ２０１４， ０１ Ａｕｇ ２０１４
・ Ｊａｎ－Ｐａｔｒｉｃｋ Ｆｉｓｃｈｅｒ、Ｒｉａ Ｓｃｈｏｅｎａｕｅｒ、Ｓｙｌｖｉａ Ｅｌｓ－Ｈｅｉｎｄｌ、Ｄｏｎａｌｄ Ｂｉｅｒｅｒ、Ｊｏｈａｎｎｅｓ Ｋｏｅｂｂｅｒｌｉｎｇ、Ｂｅｒｎｄ Ｒｉｅｄｌ、Ａｎｎｅｔｔｅ Ｇ．Ｂｅｃｋ－Ｓｉｃｋｉｎｇｅｒ Ｊ Ｐｅｐ Ｓｃｉ、２０１９；ｅ３１４７、
・ Ｋｏｃｓｉｓら、ファージディスプレイによる補体のレクチン経路の選択的阻害は、マンノース結合レクチン関連セリンプロテアーゼ（ＭＡＳＰ）－１および－２に対する選択されたペプチドを表示します：レクチン経路活性化へのＭＡＳＰ－１の有意な寄与、Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ．２０１０；１８５（７）：４１６９－７８、
・ Ｋｏｕｒｒａ ＣＭＢＫおよびＣｒａｍｅｒ Ｎ；Ｃｈｅｍ．Ｓｃｉ．、２０１６、７、７００７－７０１２、
・ Ｍａｔｅｊｋｏｖａら、ブタ腎臓虚血／再灌流傷害時のカルバミル化エリスロポエチン－ＦＣ融合タンパク質および組換えヒトエリスロポエチン、Ｉｎｔｅｎｓｉｖｅ Ｃａｒｅ Ｍｅｄ．２０１１；３９：４９７－５１０、
・ Ｍｏｌｌｅｒ－Ｋｒｉｓｔｅｎｓｅｎら、マンナン結合レクチンは虚血性再灌流マウス腎臓上の構造を認識し、組織損傷に関与している、Ｓｃａｎｄ Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ．２００５；６１（５）：４２６－３４、
・ α－アミノ酸の命名法（Ｒｅｃｏｍｍｅｎｄａｔｉｏｎｓ、１９７４）、Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、１４（２）、（１９７５）、
・ Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、第１７版、Ａｌｆｏｎｓｏ Ｒ．Ｇｅｎｎａｒｏ（編）、Ｍａｒｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ、Ｅａｓｔｏｎ、ＰＡ、ＵＳＡ、１９８５、
・ Ｓｃｈｗａｅｂｌｅら、マンナン結合レクチン関連セリンプロテアーゼ－２の標的化は、心筋および消化管の虚血／再灌流傷害からの保護をもたらす、Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ。２０１１；１０８（１８）：７５２３－８、
・ ＳｅｂｅｓｔａおよびＳｅｅｂａｃｈ、Ｈｅｌｖ．Ｃｈｉｍ．Ａｃｔａ ２００３、８６、４０６１－４０７２、
・ Ｓｈｕａｉ－Ｓｈｕａｉ Ｓｕｎ、Ｊｕｎｙｏｕ Ｃｈｅｎ、Ｒｕｉ Ｚｈａｏ、Ｄｏｎａｌｄ Ｂｉｅｒｅｒ、Ｊｕｎ Ｗａｎｇ、Ｇｅ－Ｍｉｎ Ｆａｎｇ、Ｙｉ－Ｍｉｎｇ Ｌｉ Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔｅｒｓ ２０１９、６０、１１９７－１２０１、
・ Ｓｉｅｖｅら、血管疾患における内皮糖衣層の調節と機能、Ｖａｓｃｕｌ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．２０１８；１００：２６－３３、
・ Ｓｉｍｏｎら、ブタ大動脈閉塞誘発性腎虚血/再灌流傷害中の静脈内硫化物の影響、Ｓｈｏｃｋ．２０１１；３５：１５６－１６３、
・ Ｔ．Ｐｅｌｅｇ－Ｓｈｕｌｍａｎら、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、２００４、４７、４８９７－４９０４、
・ Ｔａｏ Ｗａｎｇ、Ｊｉａｎ Ｆａｎ、Ｘｉａｏ－Ｘｕ Ｃｈｅｎ、Ｒｕｉ Ｚｈａｏ、Ｙａｎｇ Ｘｕ、Ｄｏｎａｌｄ Ｂｉｅｒｅｒ、Ｌｅｉ Ｌｉｕ、Ｙｉ－Ｍｉｎｇ Ｌｉ、Ｊｉｎｇ Ｓｈｉ、Ｇｅ－Ｍｉｎ Ｆａｎｇ Ｏｒｇ．Ｌｅｔｔ．２０１８，２０，６０７４－６０７８、
・ Ｔａｏ Ｗａｎｇ、Ｙｉ－Ｆｕ Ｋｏｎｇ、Ｙａｎｇ Ｘｕ、Ｊｉａｎ Ｆａｎ、Ｈｕａ－Ｊｉａｎ Ｘｕ、Ｄｏｎａｌｄ Ｂｉｅｒｅｒ、Ｊｕｎ Ｗａｎｇ、Ｊｉｎｇ Ｓｈｉ、Ｙｉ－Ｍｉｎｇ Ｌｉ Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔｅｒｓ ２０１７、５８、３９７０－３９７３；
・ Ｙａｎｇ Ｘｕ、Ｔａｏ Ｗａｎｇ、Ｃｈａｏ－Ｊｉａｎ Ｇｕａｎ、Ｙｉ－Ｍｉｎｇ Ｌｉ、Ｌｅｉ Ｌｉｕ、Ｊｉｎｇ Ｓｈｉ、Ｄｏｎａｌｄ Ｂｉｅｒｅｒ Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔｅｒｓ ２０１７、５８、１６７７－１６８０、
・ Ｙｅ Ｇｕｏ、Ｄｅ－Ｍｅｎｇ Ｓｕｎ、Ｆｅｎｇ－Ｌｉａｎｇ Ｗａｎｇ、Ｙａｏ Ｈｅ、Ｌｅｉ Ｌｉｕ、Ｃｈａｎｇ－Ｌｉｎ Ｔｉａｎ Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．２０１５年版、５４、１４２７６－１４２８１

Claims (15)

1. 下記式（ＩＩ）
   

   

   〔式中、
   Ｘ^１は、天然アミノ酸または非天然アミノ酸を表し、
   ｑは、０または１の整数を表し、
   Ｘ^２は、天然アミノ酸Ｉを表し、
   ｒは、０または１の整数を表し、
   Ｘ^３は、天然アミノ酸Ｃまたは非天然アミノ酸Ｌ－ペニシラミン（Ｐｅｎ）を表し、
   Ｘ^４は、天然アミノ酸Ｓを表し、
   Ｘ^５は、天然アミノ酸Ｒまたは非天然アミノ酸Ｎ（５）－メチル－Ｌ－アルギニン（（Ｍｅ）Ｒ）を表し、
   Ｘ^６は、天然アミノ酸Ｓを表し、
   Ｘ^７は、天然アミノ酸Ｌまたは非天然アミノ酸Ｌ－ｔｅｒｔ－ブチルアラニン（（ｔＢｕ）Ａ）を表し、
   Ｘ^８は、天然アミノ酸Ｐまたは非天然アミノ酸Ｌ－プロリン（３，４－_２Ｈ）を表し、
   Ｘ^９は、天然アミノ酸Ｐまたは非天然アミノ酸２，３，３ａ，４，５，６，７，７ａ－オクタヒドロインドール－２－カルボン酸（Ｏｉｃ）を表し、
   Ｘ^１０は、天然アミノ酸Ｉを表し、
   Ｘ^１１は、Ｌ－Ｎ－メチルシステイン（（Ｎ－Ｍｅ）Ｃ）およびＬ－ペニシラミン（Ｐｅｎ）からなるリストから選択される非天然アミノ酸を表し、
   Ｘ^１２は、天然アミノ酸Ｉを表し、
   Ｘ^１３は、天然アミノ酸Ｐを表し、
   ｓは、０または１の整数を表し、
   Ｘ^１４は、Ｄ、ＱおよびＥからなるリストから選択される天然アミノ酸を表し、
   ｔは、０または１の整数を表し、
   ここで、ペプチドのＮ末端は、置換されていないか、アセチル化されているか、またはＣ_１－Ｃ_２０－アルキルで一置換もしくは二置換されており、
   ペプチドのＣ末端は、置換されていないか、またはアミド化されており、および
   ペプチドは、Ｘ^３およびＸ^１１を結合する連結を介して環化されている〕
   のペプチドまたは誘導体、プロドラッグ、類似体、薬学的に許容される塩、溶媒和物またはその塩の溶媒和物を含有する化合物。
2. 式（ＩＩ）
   

   

   〔式中、
   Ｘ^１は、天然アミノ酸または非天然アミノ酸を表し、
   ｑは、０または１の整数を表し、
   Ｘ^２は、天然アミノ酸Ｉを表し、
   ｒは、０または１の整数を表し、
   Ｘ^３は、天然アミノ酸Ｃまたは非天然アミノ酸Ｌ－ペニシラミン（Ｐｅｎ）を表し、
   Ｘ^４は、天然アミノ酸Ｓを表し、
   Ｘ^５は、天然アミノ酸Ｒまたは非天然アミノ酸Ｎ（５）－メチル－Ｌ－アルギニン（（Ｍｅ）Ｒ）を表し、
   Ｘ^６は、天然アミノ酸Ｓを表し、
   Ｘ^７は、天然アミノ酸Ｌまたは非天然アミノ酸Ｌ－ｔｅｒｔ－ブチルアラニン（（ｔＢｕ）Ａ）を表し、
   Ｘ^８は、天然アミノ酸Ｐまたは非天然アミノ酸Ｌ－プロリン（３，４－_２Ｈ）を表し、
   Ｘ^９は、非天然アミノ酸２，３，３ａ，４，５，６，７，７ａ－オクタヒドロインドール－２－カルボン酸（Ｏｉｃ）を表し、
   Ｘ^１０は、天然アミノ酸Ｉを表し、
   Ｘ^１１は、天然アミノ酸Ｃ、またはＬ－Ｎ－メチルシステイン（（Ｎ－Ｍｅ）Ｃ）およびＬ－ペニシラミン（Ｐｅｎ）からなりリストから選択される非天然アミノ酸を表し、
   Ｘ^１２は、天然アミノ酸Ｉを表し、
   Ｘ^１３は、天然アミノ酸Ｐを表し、
   ｓは、０または１の整数を表し、
   Ｘ^１４は、Ｄ、ＱおよびＥからなるリストから選択される天然アミノ酸を表し、
   ｔは、０または１の整数を表し、
   ここで、ペプチドのＮ末端は、置換されていないか、アセチル化されているか、またはＣ_１－Ｃ_２０－アルキルで一置換もしくは二置換されており、
   ペプチドのＣ末端は、置換されていないか、またはアミド化されており、および
   ペプチドは、Ｘ^３およびＸ^１１を結合する連結を介して環化されている〕
   のペプチドまたは誘導体、プロドラッグ、類似体、薬学的に許容される塩、溶媒和物またはその塩の溶媒和物を含有する化合物。
3. Ｘ^９が、非天然アミノ酸２，３，３ａ，４，５，６，７，７ａ－オクタヒドロインドール－２－カルボン酸（Ｏｉｃ）を表す
   請求項１に記載のペプチド、または誘導体、プロドラッグ、類似体、薬学的に許容される塩、溶媒和物またはその塩の溶媒和物を含有する化合物。
4. Ｘ^１が、ＡおよびＧからなるリストから選択される天然アミノ酸、またはＮ－メチル－Ｌ－アラニン （Ｎ－Ｍｅ）Ａ、Ｎ－メチル－グリシン（（Ｎ－Ｍｅ）Ｇ）、Ｌ－ノルロイシン（Ｎｌｅ）、Ｌ－ノルバリン（Ｎｖａ）およびＬ－オルニチン（Ｏｒｎ）からなるリストから選択される非天然アミノ酸を表す
   請求項１～３のいずれかに記載のペプチド、または誘導体、プロドラッグ、類似体、薬学的に許容される塩、溶媒和物またはその塩の溶媒和物を含有する化合物。
5. ペプチドのＮ末端およびＣ末端が置換されていない、請求項１～４のいずれかに記載のペプチド、または誘導体、プロドラッグ、類似体、薬学的に許容される塩、溶媒和物またはその塩の溶媒和物を含有する化合物。
6. ペプチドが、Ｘ^３およびＸ^１１を結合するジスルフィド結合を介して環化されている、請求項１～５のいずれかに記載のペプチドまたは誘導体、プロドラッグ、類似体、薬学的に許容される塩、溶媒和物またはその塩の溶媒和物を含有する化合物。
7. ペプチドが少なくとも１つのＰＥＧ基によって置換されている、請求項１～６のいずれかに記載のペプチドまたは誘導体、プロドラッグ、類似体、薬学的に許容される塩、溶媒和物またはその塩の溶媒和物を含有する化合物。
8. ＭＡＳＰ－１および／またはＭＡＳＰ－２阻害剤として作用し、および／またはＣ３沈着を阻害する、請求項１～７のいずれかに記載のペプチドまたは誘導体、プロドラッグ、類似体、薬学的に許容される塩、溶媒和物もしくはその塩の溶媒和物を含有する化合物。
9. 請求項１～８のいずれかに記載のペプチドまたは誘導体、プロドラッグ、類似体、薬学的に許容される塩、溶媒和物またはその塩の溶媒和物を含有する化合物を調製する方法であって、固相ペプチド合成を用いる前記方法。
10. 疾患の予防および／または治療における使用のための、請求項１～８のいずれかに記載のペプチドまたは誘導体、プロドラッグ、類似体、薬学的に許容される塩、溶媒和物またはその塩の溶媒和物を含有する化合物。
11. 心臓血管および心臓肺障害、挫滅、炎症性障害、心臓血管、肺、脳および腎臓の敗血症の後遺症、虚血および／または再灌流関連の損傷、急性腎臓損傷、移植片保護および遅延した移植片機能、血液および血液形成器官および免疫系の疾患、糖尿病の後遺症、神経系の炎症性疾患、眼の疾患、皮膚の疾患、呼吸器系、消化器系または泌尿生殖器系の疾患、熱傷および外傷の後遺症の予防および／または治療における使用のための、請求項１～８のいずれかに記載のペプチドまたは誘導体、プロドラッグ、類似体、薬学的に許容される塩、溶媒和物またはその塩の溶媒和物を含有する化合物。
12. 請求項１～８のいずれかに記載のペプチドまたは誘導体、プロドラッグ、類似体、薬学的に許容される塩、溶媒和物またはその塩の溶媒和物を含有する少なくとも１つの化合物を、１つ以上の不活性な、非毒性の、薬学的に適切な賦形剤と組み合わせて含有する医薬組成物。
13. 請求項１～８のいずれかに記載のペプチドまたは誘導体、プロドラッグ、類似体、薬学的に許容される塩、溶媒和物またはその塩の溶媒和物を含有する少なくとも１つの化合物を、ホスホジエステラーゼの阻害剤、グアニル酸シクラーゼの刺激剤または活性化剤、ＩＰ受容体アゴニスト、ミネラルコルチコイド受容体アンタゴニスト、利尿薬、ＰＰＡＲ－ガンマアゴニスト、ＰＰＡＲ－デルタアゴニスト、コルチコステロイド、酸化ストレス下で器官への損傷を低減する活性成分、細胞死およびアポトーシス経路の誘導を阻害する化合物、炎症反応およびＴ細胞増殖を阻害する化合物、抗血栓剤、血小板凝集阻害剤、トロンビン阻害剤、ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａアンタゴニスト、第Ｘａ因子阻害剤、ヘパリンまたは低分子量（ＬＭＷ）ヘパリン誘導体および凝固第ＸＩ因子の阻害剤からなる群より選択される１つ以上のさらなる活性成分と組み合わせて含有する医薬組成物。
14. 心臓血管および心臓肺障害、挫滅、炎症性障害、心臓血管、肺、脳および腎臓の敗血症の後遺症、虚血および／または再灌流関連の損傷、急性腎臓損傷、移植片保護および遅延した移植片機能、血液および血液形成器官および免疫系の疾患、糖尿病の後遺症、神経系の炎症性疾患、眼の疾患、皮膚の疾患、呼吸器系、消化器系または泌尿生殖器系の疾患、熱傷および外傷の後遺症の予防および／または治療のための請求項１２または１３に記載の医薬組成物。
15. 請求項１～８のいずれかに定義されている少なくとも１つの化合物または請求項１２または１３に記載の医薬組成物の有効量を投与することにより、ヒトおよび動物における心臓血管および心臓肺障害、挫滅、炎症性障害、心臓血管、肺、脳および腎臓の敗血症の後遺症、虚血および／または再灌流関連の損傷、急性腎臓損傷、移植片保護および遅延した移植片機能、血液および血液形成器官および免疫系の疾患、糖尿病の後遺症、神経系の炎症性疾患、眼の疾患、皮膚の疾患、呼吸器系、消化器系または泌尿生殖器系の疾患、熱傷および外傷の後遺症の予防および／または治療のための方法。