TW202108603A - Ｍａｓｐ抑制性化合物及其用途 - Google Patents

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Abstract

本發明係有關新穎之甘露糖結合凝集素(MBL)-相關的絲胺酸蛋白酶(MASP)抑制性化合物，及其類似物與衍生物，製備其之方法、其單獨或組合於治療及/或預防疾病之用途、及其於製造供治療及/或預防疾病之醫藥上之用途，尤指治療及/或預防腎與心血管疾病及缺血-再灌流損傷。

Description

MASP抑制性化合物及其用途
本發明係有關新穎之甘露糖結合凝集素(MBL)-相關的絲胺酸蛋白酶(MASP)抑制性化合物，及其類似物與衍生物，製備其之方法、其單獨或組合於治療及/或預防疾病之用途、及其於製造供治療及/或預防疾病之醫藥上之用途，尤指治療及/或預防腎與心血管疾病及缺血-再灌流損傷。
補體系統係由許多在血液系統中循環之蛋白質、受體、及酵素之複雜級聯網絡所組成。補體系統為先天免疫力的重要組成，且係對抗入侵的病原體及清除死亡細胞及感染病毒的細胞的防禦作用所必需。其形成先天免疫與後天免疫反應之間的橋樑。補體系統之活化亦涉及例如：在心肌梗塞、缺血性腎臟損傷或器官移植之後之敗血病與缺血-再灌流損傷之病理學。已判別出補體系統的三個分支系統：凝集素途徑、典型及替代途徑(Dunkelberger 與 Song, Complement and its role in innate and adaptive immune responses. Cell Res. 2010; 20(1): 34-50 )。凝集素途徑係受到在血流中循環之凝集素沉積時所活化，在正常條件下，藉由分別辨識外來及改變的碳水化合物表面型態，並裝飾其表面，而具有對抗入侵的病原體與死細胞蛋白質之哨兵功能。甘露糖結合凝集素(MBL)、纖維蛋白膠凝素(ficolins)及膠原凝集素(collectins)為此等凝集素之主要代表，其等係由肝臟、腎臟及其他器官產生(Garred 等人，A journey through the lectin pathway of complement-MBL and beyond. Immunol Rev. 2016;274(1):74-97 )。其沉積之後進一步從血流募集兩種極相關之絲胺酸蛋白酶之酶原：甘露糖結合性凝集素-相關絲胺酸蛋白酶1及2(MASP-1及MASP-2)，形成複合物，其中酶原彼此接近。目前的觀念係在活體內條件下，募集後之MASP-1 酶原在自行活化後，經由裂解作用而活化MASP-2酶原。活化之MASP-1進一步裂解補體因子C2，成為C2a與及C2b。活化之MASP-2亦裂解C2與補體因子C4，成為C4a與C4b，其與C2a共同形成C4bC2a複合物，作為補體因子C3轉化酶。C3轉化酶活性的構成及構成性C3沉積在標靶細胞表面上代表所有三種補體途徑的匯合點，活化共通的下游級聯反應，造成產生發炎介質及標靶細胞瓦解。兩種MASP-酵素之完整人類血清活性係形成C3轉化酶不可或缺(Héja 等人，Revised mechanism of complement lectin-pathway activation revealing the role of serine protease MASP-1 as the exclusive activator of MASP-2. Proc Natl Acad Sci U S A. 2012;109(26):10498-503 )。
微血管系統在發炎及缺血性器官疾病期間扮演關鍵角色。障壁功能、白血球移行及凝血控制在小血管的管腔內皮細胞整體表面上極具相關性。管腔內皮表面有一層從膜固有醣蛋白、蛋白聚糖、及醣脂延伸的密集糖基化層，統稱為醣質包被(glycokalyx)。動物實驗與人類病理學的檢體電子顯微鏡分析已顯示，特別指內皮醣質包被在受到缺血挑戰及在如：敗血病之發炎條件下，會快速且完全瓦解。此等變化導致正常條件下不會被檢測到之碳水化合物殘基曝露在血流中(其概述可參見：Sieve 等人，Regulation and function of endothelial glycocalyx layer in vascular diseases. Vascul Pharmacol. 2018; 100: 26-33 )。此外，細胞表面之其他變化，特定言之改變的碳水化合物型態被視為會活化凝集素途徑，導致辨識凝集素之型態沉積，接著導致C3沉積及啟動細胞瓦解。MBL及C3沉積顯示發生在包括人類的物種之間的缺血及急性腎臟損傷之後。凝集素途徑活化與再灌流傷害特別相關，因為有目標地刪除MBL及MASP-2可以保護小鼠心腎及腸免於缺血再灌流傷害(Møller-Kristensen 等人，Mannan-binding lectin recognizes structures on ischaemic reperfused mouse kidneys and is implicated in tissue injury. Scand J Immunol. 2005; 61(5): 426-34 ； Schwaeble 等人，Targeting of mannan-binding lectin-associated serine protease-2 confers protection from myocardial and gastrointestinal ischemia/reperfusion injury. Proc Natl Acad Sci U S A. 2011; 108(18): 7523-8 )。此外刪除膠原凝集素11(其係主要表現在腎臟之另一種MASP活化凝集素)使得小鼠對缺血性急性腎臟損傷具有抗性(Farrar 等人，Collectin-11 detects stress-induced L-fucose pattern to trigger renal epithelial injury. J Clin Invest. 2016; 126(5): 1911–1925 )。已採用向日葵或蚱蜢之天然胰蛋白酶抑制劑作為起點，從噬菌體展示庫中判別MASP‑1及MASP‑2之選擇性肽抑制劑。此等肽已顯示可以於活體外抑制凝集素途徑依賴性C3轉化酶形成(Kocsis 等人，Selective inhibition of the lectin pathway of complement with phage display selected peptides against mannose-binding lectin-associated serine protease (MASP)-1 and -2: significant contribution of MASP-1 to lectin pathway activation. J Immunol. 2010; 185(7): 4169-78 ； Héja 等人，Monospecific inhibitors show that both mannan-binding lectin-associated serine protease-1 (MASP-1) and are essential for lectin pathway activation and reveal structural plasticity of MASP-2. J Biol Chem. 2012; 287(24): 20290-300 )。然而，尚沒有證據顯示可以使用彼等肽抑制劑之醫藥用途及活體內效力。同樣地，針對會干擾與MASP酶原交互作用之MASP‑2之抗體已判別出來，且已進入臨床發展針對非典型溶血性尿毒症候群及其他發炎腎臟疾病(ClinicalTrials.gov Identifier: NCT03205995; NCT02682407; NCT03608033 )。然而，仍然沒有用於預防或治療急性，特定言之缺血性器官傷害之臨床證據。
WO 2004/075837揭示抗-MASP抗體、其功能等效片段、及MASP結合性肽，藉由抑制補體系統，而降低因與缺血-再灌流損傷或TAAA修復相關之組織傷害所引起之罹病率及死亡率。用於治療補體系統(主要指凝集素途徑)相關疾病之小型肽，如：向日葵MASP抑制劑-1(SFMI-1)及向日葵MASP抑制劑-2(SFMI-2)及其衍生物首先說明於WO 2010/136831。
WO 2015/054298揭示藉由降低MASP-1、MASP-2或MASP-3之活性，為受試者保有視力或減輕視力喪失及為受試者供抑制或減少光受體細胞死亡之方法。WO 2004/106384、WO 2005/123128、WO 2007/117996及WO 2014/144542揭示以抗-MASP-2抗體治療與MASP-2-依賴性補體活化作用相關之疾病。
本發明之目的為提供一種新穎之肽，其具有針對MASP-1及/或MASP-2酵素之抑制效力及其他有利性質，使得其等適合作為預防及/或治療下文所定義MASP-1及/或MASP-2-相關疾病之有效且安全之替代物。另一個目的為提供一種新穎肽，其具有針對人類MASP-1及/或MASP-2酵素及/或大鼠MASP-1及/或MASP-2酵素之改良抑制效力。
本發明一般係有關作為MASP-1及/或MASP-2酵素之抑制劑之肽，及製造其之方法及使用其之方法
特定言之，本發明提供一種化合物，其包含可單離及/或純化，且包含、基本上組成為、或組成為下列結構式(I)之肽： (X0 )p (X1 )q (X2 )r X3 X4 X5 X6 X7 X8 X9 X10 X11 X12 (X13 )s (X14 )t (X15 )u (I)， 或衍生物、前藥、類似物、醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或鹽之溶劑合物，其中 X0 代表式(IIa)基團
Figure 02_image001
(IIa) 其中 *      標記與所連結胺基酸之末端胺基之鍵結， A     為鍵或C1 -C6 -伸烷基，其中C1 -C6 -伸烷基中一個CH2 基團可以交換成為-O-或-S-，及其中C1 -C6 -伸烷基經選自下列所組成之群組中之相同或相異基團至多三取代：羥基、甲氧基、乙氧基、羧基、胺基及鹵素， B     為不存在、芳基、雜芳基、C3 -C8 -環烷基或C3 -C7 -雜環烷基， 其中芳基、雜芳基、C3 -C8 -環烷基及C3 -C7 -雜環烷基可經選自下列所組成之群組中之相同或相異基團至多三取代：C1 -C4 -烷基、羥基、甲氧基、乙氧基、羰基、羧基、胺基及鹵素，及 R1 為氫、鹵素、胺基、羥基或C1 -C20 -烷基，其中C1 -C20 -烷基經選自下列所組成之群組中之相同或相異基團至多三取代：羥基、羧基、胺基及鹵素， p      代表整數0或1， X1 代表任何天然胺基酸或非天然胺基酸，其中任何天然胺基酸及/或非天然胺基酸可呈D-或L-立體組態， 且若p為0及q不為0時，X1 之末端胺基係未經取代、經乙醯基化或經C1 -C20 -烷基單取代或二取代， q     代表整數0至5， X2 代表選自下列所組成之列表中之天然胺基酸：I、L、M、V及A，或選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：L-N-甲基異白胺酸((N-Me)I)、別-L-異白胺酸(allo-I)、L-環丁基丙胺酸(Cba)、L-正纈胺酸(Nva)、L-2-胺基丁酸(Abu)、(2S,3S)-2-[(3R)-3-胺基-2-側氧基吡咯啶-1-基]-3-甲基戊酸、(2S,3S)-2-[2-側氧基哌𠯤-1-基]-3-甲基戊酸、(2S,3S)-2-[(3S)-2-側氧基哌𠯤-1-基]-3-甲基戊酸、L-甲硫胺酸-L-亞碸、L-甲硫胺酸-碸及L-第三丁基甘胺酸， 其中呈L-立體組態之各天然胺基酸及/或非天然胺基酸可被呈D-立體組態之立體異構物置換， 且若p及q均為0及r為1時，X2 之末端胺基係未經取代、經乙醯基化或經C1 -C20 -烷基單取代或二取代， r     代表整數0或1， X3 代表天然胺基酸 C，或選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：L‑青黴胺(Pen)及L-N-甲基半胱胺酸((N-Me)C)， 且若p及q及r均為0時，X3 之末端胺基係未經取代、經乙醯基化或經單C1 -C20 -烷基取代或二取代， X4 代表選自下列所組成之列表中之天然胺基酸：S、C、T、R或K，或選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：別-L-蘇胺酸(allo-T)、L-高碳絲胺酸(hSer)及L-鳥胺酸(Orn)， X5 代表天然胺基酸 R或N(5)-甲基-L-精胺酸((Me)R)， X6 代表選自下列所組成之列表中之天然胺基酸：S、C或T，或選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：別-L-蘇胺酸(allo-T)及L-2,3-二胺基丙酸(Dap)， X7 代表選自下列所組成之列表中之天然胺基酸：L、F或N，或選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：2,3,3a,4,5,6,7,7a-八氫吲哚-2-羧酸(Oic)、L-4-溴苯基丙胺酸((4-Bromo)F)、2,5-二氟-L-苯基丙胺酸((2,5-Difluoro)F)、L-第三丁基丙胺酸((tBu)A)、2-氯-L-苯基丙胺酸((2-Chloro)F)、L-2-溴苯基丙胺酸((2-Bromo)F)、(S)-2-(胺基)-1,6-己烷二酸(AAD)、(2S)-2-胺基-4,4,4-三氟丁酸、L-2-胺基-4-氰基丁酸(Cnba)、4-氟-白胺酸((4-Fluoro)L)、(S)-(三氟甲基)-L-半胱胺酸、(2S)-2-胺基-3-(1-甲基環丙基)丙酸、L-第三丁基甘胺酸((tBu)G)、3-(三甲基矽烷基)-L-丙胺酸、2,5-二氟-L-苯基丙胺酸、2-胺基-7-(第三丁氧基)-7-側氧基庚酸、5,5,5-三氟-L-白胺酸((Trifluoro)L)、2-甲基-L-苯基丙胺酸((2-Me)F)、L-環丁基丙胺酸(Cba)、L-環戊基丙胺酸(Cpa)、L-環丙基甲基丙胺酸、L-三氟甲基丙胺酸、L-二氟甲基丙胺酸、2-氟-L-苯基丙胺酸((2-氟)F)、(2S)-3-(2,3-二氟苯基)-2-胺基丙酸、(2S)-3-(3-氰基苯基)-2-胺基丙酸、及(2S)-3-(吲哚-4-基)-2-(胺基)丙酸， X8 代表天然胺基酸 P，或選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：(1S,2S,5R)-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-羧酸、L-羥基脯胺酸(Hyp)、(3S)-嗎福啉-3-羧酸(Morpholine-3-carboxylic)、L-哌啶甲酸(Pip)、(4aR,6aR,9S,11aS)-11-側氧基-2,3,4,4a,6a,7,8,9,11,11a-十氫-1H-吡啶并[3,2-e]吡咯并[1,2-a]氮雜環庚烯-9-羧酸、反式-4-氟脯胺酸((trans-4-Fluoro)P)及(1R,2S,5S)-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-羧酸， X9 代表天然胺基酸 P，或選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：2,3,3a,4,5,6,7,7a-八氫吲哚-2-羧酸(Oic)、L-羥基脯胺酸(Hyp)、(2S,4S)-4-三氟甲基-吡咯啶-2-羧酸((4-CF3)P)、(2S,4S)-4-氟脯胺酸((cis-4-Fluoro)P)、反式-4-氟脯胺酸((trans-4-Fluoro)P)、(2S)-2-胺基-4,4,4-三氟丁酸、L-反式-3-羥基脯胺酸((3S-OH)P、(1R,3S,5R)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-羧酸、(6S)-5-氮雜螺­[2.4]庚烷-6-羧酸、rel-(1R,3R,5R,6R)-6-(三氟甲基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-羧酸、(2S)-2-胺基-4,4,4-三氟丁酸、(2S,3aS,6aS)-八氫環戊并[b]­吡咯-2-羧酸、反式-4-氟脯胺酸((trans-4- luoro)P)、(2S,4S)-4-氟脯胺酸((cis-4-Fluoro)P)、L-4,4-二氟脯胺酸((Difluoro)P)、rel-(3R,6R)-1,1-二氟-5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-羧酸(對映異構物1)及rel-(3R,6R)-1,1-二氟-5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-羧酸(對映異構物2)， X10 代表天然胺基酸 I，或選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：L-環戊基甘胺酸(Cpg)、L-環己基甘胺酸(Chg)、(S)-2-胺基-3-乙基-戊酸、3-氯苯基甘胺酸((3-Chloro-Ph)G)、L-第三丁基甘胺酸、別-L-異白胺酸(allo-I)、L-環丁基甘胺酸、L-正纈胺酸(Nva)及(2S)-2-(胺基)-2-[(1S,3R)-3-羥基環己基]乙酸， X11 代表天然胺基酸 C，或選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：L‑N-甲基半胱胺酸((N-Me)C)及L-青黴胺(Pen)， X12 代表天然胺基酸 I，或選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：別-L-異白胺酸(allo-I)、(S)-2-胺基-2-環丁基乙酸(Cbg)、(2S,3S)-2-((胺基)甲基)-3-甲基戊酸、L-苯基甘胺酸(Phg)、2-[(1S,2S)-1-(胺基)-2-甲基丁基]-1,3-㗁唑-4-羧酸、2-甲基-D-別異白胺酸、L-正纈胺酸(Nva)、L-2-胺基丁酸(Abu)、L-第三丁基甘胺酸及胺基異丁酸(Aib)， 且若u及t及s均為0時，X12 之末端羧基係未經取代或經醯胺化， X13 代表選自下列所組成之列表中之天然胺基酸：P、A、S、T、G、D、E、Q或N，或選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：N-甲基-甘胺酸((N-Me)G)、5-氮雜螺­[2.4]庚烷-6-羧酸、L-2-胺基丁酸 (Abu)、2-胺基異丁酸(Aib)、2-甲基-L-脯胺酸(2-Me)P、羥基脯胺酸(Hyp)、2,3,3a,4,5,6,7,7a-八氫吲哚-2-羧酸(Oic)、反式-4-氟脯胺酸((trans-4-Fluoro)P)、(2S,4S)-4-氟脯胺酸((cis-4-Fluoro)P)、L-4,4-二氟脯胺酸((Difluoro)P)、L-環戊基甘胺酸(Cpg)、(S)-2-胺基-2-環丁基乙酸(Cbg)及(2S)-吡咯啶-2-基乙酸(β-homo-P)， 其中呈L-立體組態之各天然胺基酸及/或非天然胺基酸可被呈D-立體組態之立體異構物置換， 且若u及t均為0及s不為0時，X13 之末端羧基係未經取代或經醯胺化， s      代表整數0至3， X14 代表任何天然胺基酸或非天然胺基酸，其中任何天然胺基酸及/或非天然胺基酸可呈D-或L-立體組態， 且若u為0及t不為0時，X14 之末端羧基係未經取代或經醯胺化， t       代表整數0至4， X15 代表式(IIb)基團
Figure 02_image003
(IIb) 其中 *      標記與所連結胺基酸之末端羧基之鍵結， A1 為鍵或C1 -C6 -伸烷基，其中C1 -C6 -伸烷基中一個CH2 基團可以交換成為-O-或-S-，及其中C1 -C6 -伸烷基經選自下列所組成之群組中之相同或相異基團至多三取代：羥基、甲氧基、乙氧基、羧基、胺基及鹵素， B1 為不存在、芳基、雜芳基、C3 -C8 -環烷基或C3 -C7 -雜環烷基， 其中芳基、雜芳基、C3 -C8 -環烷基及C3 -C7 -雜環烷基可經選自下列所組成之群組中之相同或相異基團至多三取代：C1 -C4 -烷基、羥基、甲氧基、乙氧基、羰基、羧基、胺基及鹵素，及 R2 為氫、鹵素、胺基、羥基或C1 -C20 -烷基，其中C1 -C20 -烷基經選自下列所組成之群組中之相同或相異基團至多三取代：羥基、羧基、胺基及鹵素， u      代表整數0或1， 但其限制條件為X1 至X14 中至少一個為非天然胺基酸。
本發明進一步提供一種化合物，其包含下式(II)肽， (X1 )q (X2 )r X3 X4 X5 X6 X7 X8 X9 X10 X11 X12 (X13 )s (X14 )t (II)， 或衍生物、前藥、類似物、醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或鹽之溶劑合物，其中 X1 代表天然胺基酸或非天然胺基酸， q     代表整數0或1， X2 代表天然胺基酸 I， r     代表整數0或1， X3 代表天然胺基酸 C或非天然胺基酸 L-青黴胺(Pen)， X4 代表天然胺基酸 S， X5 代表天然胺基酸 R或非天然胺基酸 N(5)-甲基-L-精胺酸((Me)R)， X6 代表天然胺基酸 S， X7 代表天然胺基酸 L或非天然胺基酸 L-第三丁基丙胺酸((tBu)A)， X8 代表天然胺基酸 P或非天然胺基酸 L-脯胺酸(3,4-2 H)， X9 代表天然胺基酸 P或非天然胺基酸 2,3,3a,4,5,6,7,7a-八氫吲哚-2-羧酸(Oic)， X10 代表天然胺基酸 I， X11 代表選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：L-N-甲基半胱胺酸((N-Me)C)及L-青黴胺(Pen)， X12 代表天然胺基酸 I， X13 代表天然胺基酸 P， s     代表整數0或1， X14 代表選自下列所組成之列表中之天然胺基酸：D、Q及E， t     代表整數0或1， 其中肽之N-末端係未經取代、經乙醯基化或經C1 -C20 -烷基單取代或二取代， 其中肽之C-末端係未經取代或經醯胺化，及 其中肽已環化，較佳為利用連接X3 與X11 之鍵聯而環化。
除非本文中另有其他定義，否則本申請案採用之科學與技術術語均具有相關技藝中具有通常知識者習知之定義。一般而言，本文所說明之化學、分子生物學、細胞與癌症生物學、免疫學、微生物學、藥學、及蛋白質與核酸化學所採用之相關命名法及技術係相關技藝中熟知且常用者。
本說明書全文中，用語「包含」或其變化，如：「涵括」或「包括」咸了解意指包括所指示之整數(或組份)或一組整數(或組份)，但不排除任何其他整數(或組份)或一組整數(或組份)。單數型「一個」、「一種」及「該」包括複數型，除非文中另有其他說明。術語「包括」及「包含」係用於指「包括，但不限於」，該表示法可以交換使用。特定言之，表示法「包含肽之化合物」意指包含指定肽序列之化合物，其可視需要再包含與肽共價鍵結之化學基團或取代基，例如：胺基酸、脂肪酸、加強肽之藥物動力學或藥效學性質之化學基團、或任何其他化學基團。亦咸了解，表示法「包含肽之化合物」明確包括指定之肽序列，不含任何其他與肽共價鍵結之化學基團或取代基。
本文所採用下列術語具有其歸屬之定義，除非另有其他說明。「基本上其組成為」咸了解係指肽與其所比較之肽為至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、或至少99%相同。
術語「蛋白質」、「多肽」及「肽」可以交換使用，係廣義指兩個或更多個胺基酸(較佳為利用肽(醯胺))鍵鍵聯在一起的序列。當一個胺基酸之羧基與另一個胺基酸之胺基反應時，即形成肽(醯胺)鍵。亦應了解，術語「蛋白質」、「多肽」及「肽」不表示意指特定長度之胺基酸聚合物，亦無意暗示或區分該多肽是否採用重組技術、化學、或酵素合成法製造，或是否為天然發生。亦應了解，肽可包含一個或多個沒有本申請書所定義胺基酸之部份。此等部份較佳為出現在肽之N-及C-末端。
本文所採用術語「胺基酸」或「任何胺基酸」係指包含胺(-NH2 )與羧基(-COOH)官能基，並具有側鏈之有機化合物，且意指任何及所有胺基酸，包括天然發生之胺基酸(例如：α-L-胺基酸)、非天然胺基酸、經修飾胺基酸、及非天然胺基酸。「天然胺基酸」包括彼等出現在天然界者，如，例如：組合成肽鏈之23種胺基酸，其形成各種不同系列蛋白質之構成模塊。此等主要呈L立體異構物，但在細菌包膜及有些抗生素中會出現少數D-胺基酸。表2中列出20種蛋白質形成性天然胺基酸之標準遺傳密碼。「非標準」天然胺基酸為吡咯離基酸(出現在產生甲烷之生物體及其他真核細胞生物)、硒半胱氨酸(存在於許多非真核細胞生物及大多數真核細胞生物中)、及N-甲醯基甲硫胺酸(在細菌、粒線體及葉綠素中係由起始密碼子AUG編碼)。
「非天然」或「不為天然」胺基酸為天然發生或化學合成之非蛋白質形成性胺基酸(亦即彼等不是天然編碼或沒有遺傳密碼)。已知超過140種天然胺基酸，且可能有上千種組合。「非天然」胺基酸實例包括β-胺基酸(β3 及 β2 )、高碳-胺基酸、脯胺酸及丙酮酸衍生物、3-經取代之丙胺酸衍生物、甘胺酸衍生物、環經取代之苯基丙胺酸及酪胺酸衍生物、線性核心胺基酸、二胺基酸、D-胺基酸、及N-甲基胺基酸。非天然或不為天然胺基酸亦包括經修飾胺基酸。「經修飾」胺基酸包括已經過化學修飾之胺基酸(例如：天然胺基酸)，所以包括不會天然存在於胺基酸中之一個基團、多個基團、或化學部份體。 根據本發明，較佳非天然胺基酸列於表1。表1出示呈D-及/或L-立體異構物之非天然胺基酸，然而根據本發明較佳非天然胺基酸為表1所列出非天然胺基酸之D-與L-兩種立體異構物。 表1：較佳非天然胺基酸
(1R,2R)-2-胺基-1-環戊烷羧酸(R,R-ACPC)
(1R,3S)-3-(胺基)環戊烷羧酸
(1R,3S,5R)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-羧酸
(1S,2S)-2-胺基-1-環戊烷羧酸(S,S-ACPC)
(1S,2S,5R)-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-羧酸
(1R,2S,5S)-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-羧酸
(1S,3R)-3-(胺基)環戊烷羧酸
(1S,3R)-3-(胺基)環戊烷羧酸
(1S,3R,4R)-2-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-3-羧酸
(2S)-2-(胺基)-2-[(1S,3R)-3-羥基環己基]乙酸
(2S)-2-(胺基)-2-[(1S,3S)-3-羥基環己基]乙酸
(2R)-胺基-(1-甲基-1H-吲唑-5-基)乙酸
(2S)-2-胺基-5-甲基-己酸
(2S)-2-[(3R)-3-胺基-2-側氧基吡咯啶-1-基]-4-甲基戊酸
(2S)-2[(胺基)-2-(四氫-2H-吡喃-4-基)]乙酸
(2S)-2-胺基-3-(1-甲基環丙基)丙酸
(2S)-2-胺基-3-(2,3,4,5,6-五氟苯基)丙酸
(2S)-2-胺基-3-(4-第三丁基苯基)丙酸
(2S)-2-胺基-4-(苯甲基胺基)-4-側氧基丁烷羧酸
(2S)-2-胺基-4,4,4-三氟丁酸
(2S)-2-胺基-5-甲基-己酸
(2S)-3-(2,3-二氟苯基)-2-胺基丙酸
(2S)-3-(3-氰基苯基)-2-胺基丙酸
(2S)-3-(4-羧基苯基)-2-胺基丙酸
(2S)-3-(吲哚-4-基)-2-(胺基)丙酸
(2S)-3-(三唑-1-基)-2-(胺基)丙酸
(2S)-胺基-(1-甲基-1H-吲唑-5-基)乙酸
(2S)-胺基-2-[3-(三氟甲基)雙環[1.1.1]戊-1-基]乙酸
(2S)-吡咯啶-2-基乙酸(β-homo-P)
(2S,3aS,6aS)-八氫環戊并[b]吡咯-2-羧酸
(2S,3S)-2-((胺基)甲基)-3-甲基戊酸
(2S,3S)-2-[(3R)-3-胺基-2-側氧基吡咯啶-1-基]-3-甲基戊酸
(2S,3S)-2-[(3S)-2-側氧基哌𠯤-1-基]-3-甲基戊酸
(2S,4S)-4-氟脯胺酸((cis-4-Fluoro)P)
(2S,4S)-4-三氟甲基-吡咯啶-2-羧酸((4-CF3)P)
(3R,6R)-1,1-二氟-5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-羧酸(對映異構物1)
(3R,6R)-1,1-二氟-5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-羧酸(對映異構物2)
(4aR,6aR,9S,11aS)-11-側氧基-2,3,4,4a,6a,7,8,9,11,11a-十氫-1H-吡啶并[3,2-e]吡咯并[1,2-a]氮雜環庚烯-9-羧酸
(6S)-5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-羧酸
(R)-3-胺基己二酸
(R)-4-胺基-6-甲基庚酸
(R)-哌啶-3-羧酸
(R)-吡咯啶-3-羧酸
(S)-(1-哌啶-3-基)-乙酸
(S)-(三氟甲基)-L-半胱胺酸
(S)-2-(胺基)-1,6-己烷二酸(AAD)
(S)-2-胺基-2-環丁基乙酸(Cbg)
(S)-2-胺基-3-乙基-戊酸
(S)-3-(1-吡咯啶-2-基)-丙酸
(S)-4-哌𠯤-2-羧酸
(S)-哌啶-3-羧酸
(S)-吡咯啶-2-羧酸(β-P)
[(2R)-4,4-二氟吡咯啶-2-基]乙酸
1-(胺基甲基)-環丙基-1-羧酸
1,13-二胺基-4,7,10-三氧雜十三烷-琥珀醯胺酸
12-胺基-4,7,10-三氧雜十二烷酸
14-胺基-3,6,9,12-四氧雜十四烷酸
15-胺基-4,7,10,13-四氧雜十五烷酸((Pen)tadecanoic acid)
17-胺基-3,6,9,12,15-五氧雜((Pen)taoxa)十七烷酸
18-胺基-4,7,10,13,16-五氧雜((Pen)taoxa)十八烷酸
1-胺基-3,6,9,12,15,18,21,24,27-九氧雜三十烷-30-酸
1-胺基-3,6,9,12,15,18,21,24-八氧雜二十七烷-27-酸
1-胺基-3,6,9,12,15,18,21-七氧雜二十四烷-24-酸
1-胺基-3,6,9,12,15,18-六氧雜二十一烷-21-酸
1-胺基環丁烷-1-羧酸(ACBA)
1-苯甲基-L-組胺酸(H(1-Bn))
1-甲基-L-組胺酸(H(1-Me))
2-(環己基胺基)乙酸
2,3,3a,4,5,6,7,7a-八氫吲哚-2-羧酸(Oic)
2,5-二氟-L-苯基丙胺酸
2-[(1S,2S)-1-(胺基)-2-甲基丁基]-1,3-㗁唑-4-羧酸
2-胺基-1,7-庚烷二酸
2-胺基-5,5,5-三氟-4-甲基-戊酸
2-胺基-7-(第三丁氧基)-7-側氧基庚酸
2-胺基異丁酸(Aib)
2-氯-L-苯基丙胺酸((2-Chloro)F)
2-氟-L-苯基丙胺酸((2-Fluoro)F)
2-甲基-D-別異白胺酸
2-甲基-L-苯基丙胺酸((2-Me)F)
2-甲基-L-脯胺酸(2-Me)P
3-(1,3-苯并噻唑-2-基)-L-丙胺酸((Bth)A)
3-(胺基甲基)苯甲酸
3-(三甲基矽烷基)-L-丙胺酸
3-胺基-2,2-二甲基丙酸
3-胺基甲基苯基乙酸
3-疊氮基-L-丙胺酸
3-羧基苯基丙胺酸
3-氯-L-苯基丙胺酸
3-氯苯基甘胺酸((3-Chloro-Ph)G)
3-氰基-L-苯基丙胺酸
3-乙基-L-正纈胺酸
3-氟-L-苯基丙胺酸
3-甲基-L-苯基丙胺酸
4-(3,5-二甲基-1,2-㗁唑-4-基)-L-苯基丙胺酸
4-(胺基甲基)苯甲酸
4-胺基甲基苯基乙酸
4-乙基-L-正白胺酸
4-氟-白胺酸((4-Fluoro)L)
4-氟-L-苯基丙胺酸((4-Fluoro)F)
5,5,5-三氟-L-白胺酸((Trifluoro)L)
5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-羧酸
6-胺基己酸(Ahx)
8-胺基立方烷-1-羧酸
9-胺基-4,7-二氧雜壬酸
別-L-異白胺酸(allo-I)
別-L-蘇胺酸(allo-T)
胺基環丁烷羧酸(ACBC)
胺基異丁酸(Aib)
β-丙胺酸(β-A)
環己基丙胺酸(Cha)
D-2-氯苯基丙胺酸
D-β-脯胺酸
D-環己基丙胺酸
D-羥基脯胺酸
D-N-甲基丙胺酸
γ-胺基丁酸 (γ-Abu)
羥基脯胺酸(Hyp)
亞胺基二乙酸
L-高碳絲胺酸(hSer)
L-1-萘基丙胺酸(1-Nal)
L-2,3-二胺基丙酸(Dap)
L-2,4-二胺基丁酸(Dab)
L-2,6-二氟苯基丙胺酸
L-2-胺基-4-氰基丁酸
L-2-胺基丁酸 (Abu)
L-2-溴苯基丙胺酸((2-Bromo)F)
L-2-萘基丙胺酸(2-Nal)
L-2-吡啶基丙胺酸(2-Pal)
L-2-噻吩基丙胺酸
L-3-溴苯基丙胺酸((3-Bromo)F)
L-3-甲基組胺酸(H(3-Me))
L-3-吡啶基丙胺酸(3-Pal)
L-4,4-二氟脯胺酸((Difluoro)P)
L-4-胺基苯基丙胺酸((4-Amino)F)
L-4-溴苯基丙胺酸
L-4-吡啶基丙胺酸
L-瓜胺酸(Cit)
L-環丁基丙胺酸(Cba)
L-環丁基甘胺酸
L-環己基丙胺酸
L-環己基甘胺酸
L-環己基甘胺酸(Chg)
L-環戊基丙胺酸
L-環戊基丙胺酸(Cpa)
L-環戊基甘胺酸(Cpg)
L-環丙基甲基丙胺酸
L-二氟甲基丙胺酸
L-二氫乳清酸(Hoo)
L-高碳半胱胺酸
L-羥基脯胺酸(Hyp)
L-甲硫胺酸-L-亞碸
L-甲硫胺酸-碸
L-N,N-二甲基丙胺酸((N,N-diMe)A)
L-N-甲基丙胺酸
L-N-甲基半胱胺酸((N-Me)C)
L-N-甲基異白胺酸((N-Me)I)
L-N-甲基苯基丙胺酸((N-Me)F)
L-正白胺酸(Nle)
L-正纈胺酸(Nva)
L-鳥胺酸(Orn)
L-青黴胺(Pen)
L-苯基甘胺酸(Phg)
L-哌啶甲酸(Pip)
L-炔丙基甘胺酸
L-焦麩胺酸(Pyr)
L-第三丁基丙胺酸((tBu)A)
L-第三丁基甘胺酸((tBu)G)
L-反式-3-羥基脯胺酸((3S-OH)P)
L-三氟甲基丙胺酸
嗎福啉-3-羧酸
N(5)-甲基-L-精胺酸((Me)R)
N-e-異丙基-L-離胺酸
N-甲基-丙胺酸(N-Me)A
N-甲基-甘胺酸((N-Me)G)
N-苯基甘胺酸((N-Ph)G)
棕櫚酸(Palm)
rel-(1R,2S)-2-胺基-1-環戊烷羧酸(ACPC)
rel-(1R,3R,5R,6R)-6-(三氟甲基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-羧酸
rel-(1R,3S)-3-[(胺基)甲基]環己烷羧酸
rel-(3R,6R)-1,1-二氟-5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-羧酸(對映異構物1)
rel-(3R,6R)-1,1-二氟-5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-羧酸(對映異構物2)
S-2-胺基-3-乙基-戊酸
S-3-1-吡咯啶-2-基-丙酸
傳明酸(Tranexamic)
反式-2-(3-(胺基)環己基)乙酸
反式-4-氟脯胺酸((trans-4-Fluoro)P)
3-胺基-3-甲基丁酸
更佳非天然胺基酸係選自下列所組成之列表中：N-甲基-丙胺酸(N-Me)A、N-甲基-甘胺酸((N-Me)G)、(1R,3S,4S)-2-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-3-羧酸、L-3-溴苯基丙胺酸((3-Bromo)F)、L-N,N-二甲基丙胺酸((N,N-diMe)A)、N,N-二甲基甘胺酸((N,N-diMe)G)、N-苯基甘胺酸((N-Ph)G)、(R)-哌啶-3-羧酸、(S)-哌啶-3-羧酸、L-第三丁基丙胺酸((tBu)A)、L-2-吡啶基丙胺酸(2-Pal)、L-3-吡啶基丙胺酸(3-Pal)、L-4-吡啶基丙胺酸(4-Pal)、3-(胺基甲基)苯甲酸、3-胺基-2,2-二甲基丙酸、3-胺基-3-甲基丁酸、4-(胺基甲基)苯甲酸、L-2-胺基丁酸 (Abu)、1-胺基環丁烷-1-羧酸(ACBA)、6-胺基己酸(Ahx)、2-胺基異丁酸(Aib)、L-2-噻吩基丙胺酸(β-2-噻吩基丙胺酸)、β-丙胺酸(β-A)、β-脯胺酸(β-P)、L-瓜胺酸(Cit)、L-2,4-二胺基丁酸 (Dab)、L-2,3-二胺基丙酸(Dap)、γ-胺基丁酸 (γ-Abu)、L-3-甲基組胺酸(3-Me)H)、L-二氫乳清酸(Hoo)、L-正白胺酸(Nle)、N-甲基-L-脯胺酸((N-Me)P)、L-正纈胺酸(Nva)、L-鳥胺酸(Orn)、L-哌啶甲酸(Pip)、(2S)-2[(胺基)-2-(四氫-2H-吡喃-4-基)]乙酸；2,3,3a,4,5,6,7,7a-八氫吲哚-2-羧酸(Oic)、L-N-甲基半胱胺酸((N-Me)C)、N(5)-甲基-L-精胺酸((Me)R)、L-青黴胺(Pen)及傳明酸(Tranexamic)。
最佳非天然胺基酸係選自下列所組成之列表中：N-甲基-L-丙胺酸(N-Me)A、N-甲基-甘胺酸((N-Me)G)、L-正白胺酸(Nle)、L-正纈胺酸(Nva)、L-鳥胺酸(Orn)、N(5)-甲基-L-精胺酸((Me)R)、L-第三丁基丙胺酸((tBu)A)、2,3,3a,4,5,6,7,7a-八氫吲哚-2-羧酸(Oic)、L-N-甲基半胱胺酸((N-Me)C)及L-青黴胺(Pen)。
亦應了解，根據本發明肽可以包含一個或多個在本發明定義下不為胺基酸之化學基團。此等化學基團可以出現在肽之N-及/或C-末端，且係以式X0 及X15 代表。應咸了解，本發明肽之所有胺基酸及化學基團均藉由肽(醯胺)鍵連接。通常肽係由α-胺基酸之α-胺基與羧基鍵聯形成，其等再利用α-肽鍵鍵聯。根據本發明，肽鍵可由各天然或非天然胺基酸上之任何羧基-及胺基形成。例如：除了α-胺基以外再包含第二個胺基之α-胺基酸(例如：L-離胺酸)或除了α-羧基以外再包含第二個羧基之α-胺基酸(例如：L-天冬胺酸及L-麩胺酸)可以利用額外的胺基-或羧基連接。
依據相關技藝中具有通常知識者之了解，本文所揭示肽序列代表利用α-肽鍵連接之胺基酸序列。利用非α-肽鍵之肽鍵連接之胺基酸則標記「*」。「*」係在胺基酸的左邊或右邊，以說明該胺基酸之額外胺基或額外羧基是否利！肽鍵來連結胺基酸(例如：(*L)、(E*)、(*Dap)，等等)。
依據相關技藝中具有通常知識者之了解，本文所揭示肽序列係從左邊到右邊的順序表示，序列的左端為肽的「N-端」(「胺基端」、「N-末端」)，及序列的右端為肽的「C-端」(「羧基端」、「C-末端」) 。不論肽之N-端是否確實包含胺基，此術語「N-端(胺基端、N-末端)」均適用。不論肽之C-端是否確實包含羧基，此術語「C-端(羧基端、C-末端)」均適用。術語「末端胺基」係指出現在N-端之任何胺基。術語「末端羧基」係指出現在C-端之任何羧基。
根據本發明，若p代表1時，則可由X0 形成N-端。或者，若q代表至少1及p代表0時，則可由X1 形成N-端。或者，若r代表1及p與q二者均代表0時，則可由X2 形成N-端。若p、q與r者均代表0時，則由X3 形成線性肽之N-端。若本發明肽已利用連接X3 與X11 之鍵聯而環化及p、q與r均代表0時，則該肽不包含N-端。
根據本發明，若u代表1時，則由X15 形成C-端。或者，若t代表至少1之整數及u代表0時，則由X14 形成C-端。或者，若s代表1及t與u二者均代表0時，則可由X13 形成C-端。若s、t與u均代表0時，則可由X12 形成C-端。
本發明中，本文所採用天然發生及非天然發現胺基醯基殘基的名稱較佳為依據Nomenclature of α-Amino Acids (Recommendations, 1974), Biochemistry, 14(2), (1975) 中所制定之IUPAC學會有機化學命名法(IUPAC Commission on the Nomenclature of Organic Chemistry)及IUPAC-IUB學會生物化學命名法(IUPAC-IUB Commission on Biochemical Nomenclature)之建議規則命名。
本說明書中，天然發生之蛋白質形成性胺基酸通常以其慣用之單字母縮寫表示。或者，其等亦可以其三字母縮寫表示(例如：特別在序列表中)或以其全名表示，如下表2所示： 表2：天然胺基酸之標準縮寫
3- 字母 1- 字母 胺基酸   3- 字母 1- 字母 胺基酸
Ala A 丙胺酸   Leu L 白胺酸
Arg R 精胺酸   Lys K 離胺酸
Asn N 天冬醯胺   Met M 甲硫胺酸
Asp D 天冬胺酸   Phe F 苯基丙胺酸
Cys C 半胱胺酸   Pro P 脯胺酸
Glu E 麩胺酸   Ser S 絲胺酸
Gln Q 麩醯胺   Thr T 蘇胺酸
Gly G 甘胺酸   Trp W 色胺酸
His H 組胺酸   Tyr Y 酪胺酸
Ile I 異白胺酸   Val V 纈胺酸
在非蛋白質形成性或非天然發生之胺基酸中，除非另有其他說明，否則係以其全名說明(例如：鳥胺酸，等等)，其殘基經常使用三至六字母密碼，包括以下縮寫列表所列之彼等縮寫(表3)。
本文所採用術語「L-胺基酸」係指「L」異構型胺基酸，反之術語「D-胺基酸」係指「D」異構型胺基酸。另一種常用之方式為以大寫字母，如：Ala / A、Arg / R，等等表示L-胺基酸，及以小寫字母，如：ala / a、arg / r，等等表示D-胺基酸。
上表2所示，亦即Ala、Arg、Asn，等等及常用於本說明書之三字母密碼形式一般應包括D-及L型及高碳-及正型，除非另有明確說明。字首「正(nor-)」係指由母化合物脫除一個碳及附隨之氫原子所衍生之結構類似物。字首「高碳(homo)」係指同系物中次高的組員數。所提及之明確異構型將如上述，以大寫字首L-或D-表示(例如：D-Arg、L-Arg，等等)。因此明確提及之高碳-或正-型將分別以各字首說明(例如：homo-Arg、homo-R、nor-Arg、nor-R、homo-Cys、homo-C，等等)。
術語「C1 -C6 -烷基」意指具有1、2、3、4、5或6個碳原子之線性或分支之飽和單價烴基，例如：甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、第二丁基、異丁基、第三丁基、戊基、異戊基、2-甲基丁基、1-甲基丁基、1-乙基丙基、1,2-二甲基丙基、新戊基、1,1-二甲基丙基、己基、1-甲基戊基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、1-乙基丁基、2-乙基丁基、1,1-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、3,3-二甲基丁基、2,3-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基或1,3-二甲基丁基、或其異構物。特定言之，該基團具有1、2、3或4個碳原子(「C1 -C4 -烷基」)，例如：甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、第二丁基、異丁基、或第三丁基，更特定言之，1、2或3個碳原子(「C1 -C3 -烷基」)，例如：甲基、乙基、正丙基或異丙基。特別佳為甲基、乙基、正丙基。最佳為甲基。
術語「C1 -C20 -烷基」意指具有1至20個碳原子之線性或分支之飽和單價烴基，例如：甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、第二丁基、異丁基、第三丁基或戊基、異戊基、己基、異己基、庚基、異庚基、辛基與異辛基、壬基、癸基、十二烷基或二十烷基。
術語「C1 -C4 -伸烷基」意指具有1至4個碳原子之直鏈或分支烴橋基，例如：亞甲基、伸乙基、伸丙基、(α-甲基伸乙基、β-甲基伸乙基、α-乙基伸乙基、β-乙基伸乙基、伸丁基、α-甲基伸丙基、β-甲基伸丙基及γ-甲基伸丙基)。
術語「C1 -C6 -伸烷基」意指具有1至6個碳原子之直鏈或分支烴橋基，例如：亞甲基、伸乙基、伸丙基、(α-甲基伸乙基、β-甲基伸乙基、α-乙基伸乙基、β-乙基伸乙基、伸丁基、α-甲基伸丙基、β-甲基伸丙基、γ-甲基伸丙基、α-乙基伸丙基、β-乙基伸丙基、γ-乙基伸丙基、伸戊基及伸己基)。
術語「C3 -C8 -環烷基」意指包含3、4、5、6、7或8個碳原子之飽和烴環。該C3 -C8 -環烷基為例如：單環狀烴環，例如：環丙基、環丁基、環戊基、環己基、環庚基或環辛基；雙環狀烴環，例如：雙環[4.2.0]辛基或八氫并環戊二烯基，或橋連或籠形飽和環基，如：降冰片烷或金剛烷、及立方烷。
術語「C3 -C7 -雜環烷基」意指具有4、5、6或7個碳原子且包含一或兩個選自N、O及S系列之相同或不同雜原子之飽和雜環，該雜環烷基可能利用任何一個碳原子或可能存在之氮原子附接其餘分子。該C3 -C7 -雜環烷基在不受限制下，可為4-員環，如，例如：氮雜環丁烷基、氧雜環丁烷基或硫雜環丁烷基；或5-員環，如，例如：四氫呋喃基、1,3-二氧雜環戊烷基(dioxolanyl)、硫雜環戊烷基(thiolanyl)、吡咯啶基、咪唑啶基、吡唑啶基、1,1-二氧離子基(dioxido)硫雜環戊烷基、1,2-㗁唑啶基、1,3-㗁唑啶基或1,3-噻唑啶基；或6- 員環，如，例如：四氫吡喃基、四氫硫吡喃基、哌啶基、嗎福啉基、二硫雜環己烷基、硫嗎福啉基、哌𠯤基、六氫嘧啶基、1,3-二氧雜環己烷基、1,4-二氧雜環己烷基或1,2-氧氮雜環己烷基；或7-員環，如，例如：氮雜環庚烷基、1,4-二氮雜環庚烷基或1,4-氧氮雜環庚烷基。
術語「芳基」意指具有6至10個碳原子之不飽和或部份不飽和環。較佳芳基為苯基及萘基。
術語「雜芳基」意指具有5、6、8、9、10、11、12、13或14個環原子(「5至14員雜芳基」)，特定言之5、6、9或10個環原子，其包含至少一個環雜原子及視需要再包含1、2或3個選自：N、O與/或S系列之環雜原子且係利用環碳原子或視需要利用環氮原子(如果價數容許)鍵結之單價、單環、雙環、或三環狀芳香環。該雜芳基可為5-員雜芳基，如，例如：噻吩基、呋喃基、吡咯基、㗁唑基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、異㗁唑基、異噻唑基、㗁二唑基、三唑基、噻二唑基、或四唑基；或6-員雜芳基，如，例如：吡啶基、嗒𠯤基、嘧啶基、吡𠯤基或三𠯤基；或三環狀雜芳基，如，例如：咔唑基、吖啶基或吩𠯤基；或9-員雜芳基，如，例如：苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并㗁唑基、苯并異㗁唑基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、苯并三唑基、吲唑基、吲哚基、異吲哚基、吲哚𠯤基或嘌呤基；或10-員雜芳基，如，例如：喹啉基、喹唑啉基、異喹啉基、噌啉基、酞𠯤基、喹㗁啉基或蝶啶基。
一般且除非另有其他說明，否則雜芳基或伸雜芳基包括其所有可能異構型，例如：相對於與其餘分子鍵聯點之互變異構物及位置異構物。因此有些例示性之無限制實例中，術語吡啶基包括吡啶-2-基、吡啶-3-基及吡啶-4-基；或術語噻吩基包括噻吩-2-基與噻吩-3-基。
本文所揭示序列係在序列羧基端(C-端)納入「-OH」部份體或「-NH2 」部份體之序列。在序列C-端之「-OH」或「‑NH2 」部份體係指羥基或胺基，分別相當於C-端出現羧基或醯胺基(-(C=O)-NH2 )。本發明各序列中，C-端「-OH」部份體可經取代成C-端「-NH2 」部份體，其在本發明中亦稱為「經醯胺化 C-端」，反之亦然。然而，該等選項中，以C-端「-OH」部份體較佳。
術語「經乙醯基化」(亦縮寫為「Ac」)意指N-端部份體透過肽N-端之乙醯化(肽N-端經乙醯基化)而受乙醯基保護。
根據另一項實施例，本發明提供一種化合物，其包含可經過單離及/或純化，且包含、基本上組成為、或組成為式(I)之肽或衍生物、前藥、類似物、醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或鹽之溶劑合物，其中 X0 為選自下列所組成之列表中之化學基團：(1S,2S,4S)-雙環[2.2.1]庚-5-烯-2-基乙酸、(2,4-二側氧基咪唑啶-1-基)乙酸、2-(硫嗎福啉)乙酸((2-Thiomorpholine)acetyl)、2-(N-異丙基-N-甲基胺基)乙酸、(S)-3-甲基戊酸((S)-3-Methylpentanoic acid)、2-(3-吡啶基)乙酸、2-(環己基胺基)乙酸(2-(Cyclohexylamino)acetyl)、2-(二乙基胺基)乙酸(2-(Diethylamino)acetyl)、2-(嗎福啉)乙酸(2-(Morpholine)acetyl)、2-(N-甲基-N-環丙基胺基)乙酸(2-(N-Methyl-N-cyclopropylamino)acetyl)、2-(哌啶)乙酸(2-(Piperidin)acetyl)、2-(吡咯啶)乙酸(2-(Pyrrolidine)acetyl)、2-羥基乙酸(2-Hydroxyacetyl)、2-羥基異丁酸(2-hydroxyisobutyric)、3-(胺基甲基)苯甲酸、3-甲氧基丙酸、4-(胺基甲基)苯甲酸、4-甲基戊酸(4-methylvaleric)、5-氯噻吩-羧酸、1-(胺基甲基)-環丙基-1-羧酸(ACMP)、己二酸、(S)-氮雜環丁烷-2-羧酸、苯甲酸(Benzoic)、4-(3,5-二甲基-1,2-㗁唑-4-基)-L-苯基丙胺酸、環丁烷羧酸(Cyclobutylcarboxylic)、2-(環丁基)乙酸(Cyclobutylacetic)、環丁基乙酸(Cyclobutylacetic)、環己基乙酸(Cyclohexylacetic)、環己烷羧酸(Cyclohexylcarboxylic)、環戊烷羧酸、環戊基乙酸(Cyclopentylacetic)、環丙烷羧酸(Cyclopropanecarboxylic)、環丙基乙酸、D-(+)生物素、富馬酸、3-苯基丙酸(氫桂皮酸(Hydrocinnamic))、異丁酸、異戊酸(Isovaleric)、L-(+)-乳酸(Lactic)、苯基乙酸、哌啶-4-基乙酸、特戊酸(Pivalic)、辛二酸、第三丁基乙酸、四氫吡喃基-4-乙酸、四氫-2H-吡喃-3-基乙酸及反式-2-(3-((第三丁氧基)羰基胺基)環己基)乙酸)， p     代表整數0或1， X1 代表選自下列所組成之列表中之天然胺基酸：A、F、G、H、I、K、L、P、R、S、T、V、W及Y，或選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：N-甲基-丙胺酸((N-Me)A)、N-甲基-甘胺酸((N-Me)G)、(1R,3S,4S)-2-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-3-羧酸、L-3-溴苯基丙胺酸((3-Bromo)F)、L-N,N-二甲基丙胺酸((N,N-diMe)A)、N,N-二甲基甘胺酸((N,N-diMe)G)、N-苯基甘胺酸((N-Ph)G)、(R)-哌啶-3-羧酸、(S)-哌啶-3-羧酸、L-第三丁基丙胺酸((tBu)A)、L-2-吡啶基丙胺酸(2-Pal)、L-3-吡啶基丙胺酸(3-Pal)、L-4-吡啶基丙胺酸(4-Pal)、3-(胺基甲基)苯甲酸、3-胺基-2,2-二甲基丙酸、3-胺基-3-甲基­丁酸、4-(胺基甲基)苯甲酸、L-2-胺基丁酸(Abu)、1-胺基環丁烷-1-羧酸(ACBA)、6-胺基己酸(Ahx)、2-胺基異丁酸(Aib)、L-2-噻吩基丙胺酸(β-2-噻吩基丙胺酸)、β-丙胺酸(β-A)、β-脯胺酸(β-P)、L-瓜胺酸(Cit)、L-2,4-二胺基丁酸 (Dab)、L-2,3-二胺基丙酸(Dap)、γ-胺基丁酸 (γ-Abu)、L-3-甲基組胺酸(3-Me)H)、L-二氫乳清酸(Hoo)、L-正白胺酸(Nle)、N-甲基-L-脯胺酸((N-Me)P)、L-正纈胺酸(Nva)、L-鳥胺酸(Orn)、L-哌啶甲酸(Pip)、(2S)-2[(胺基)-2-(四氫-2H-吡喃-4-基)]乙酸、及傳明酸(Tranexamic)， 其中呈L-立體組態之各天然胺基酸及/或非天然胺基酸可被呈D-立體組態之立體異構物置換， q     代表整數0至5， X2 代表天然胺基酸 I或選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：L-N-甲基異白胺酸((N-Me)I)、別-L-異白胺酸(allo-I)、L-環丁基丙胺酸(Cba)、L-正纈胺酸(Nva)、L-2-胺基丁酸 (Abu)、(2S,3S)-2-[(3R)-3-胺基-2-側氧基吡咯啶-1-基]-3-甲基­戊酸、(2S,3S)-2-[2-側氧基哌𠯤-1-基]-3-甲基戊酸及(2S,3S)-2-[(3S)-2-側氧基哌𠯤-1-基]-3-甲基戊酸， 其中呈L-立體組態之各天然胺基酸及/或非天然胺基酸可被呈D-立體組態之立體異構物置換， r     代表整數0或1， X3 代表天然胺基酸 C或非天然胺基酸 L-青黴胺(Pen)， X4 代表選自下列所組成之列表中之天然胺基酸：S、C、T、R及K， X5 代表天然胺基酸 R或非天然胺基酸 N(5)-甲基-L-精胺酸((Me)R)， X6 代表天然胺基酸 S，或選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：別-L-蘇胺酸(allo-T)及L-2,3-二胺基丙酸(Dap)， X7 代表選自下列所組成之列表中之天然胺基酸：L及N，或選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：2,5-二氟-L-苯基丙胺酸((2,5-Difluoro)F)、L-2-溴苯基丙胺酸((2-Bromo)F)、2-氯-L-苯基丙胺酸((2-Chloro)F)、L-4-溴苯基丙胺酸((4-Bromo)F)、4-氟-L-白胺酸((4-Fluoro)L)、L-第三丁基丙胺酸((tBu)A)、L-第三丁基甘胺酸((tBu)G)、5,5,5-三氟-L-白胺酸((Trifluoro)L)、(S)-2-(胺基)-1,6-己烷二酸(AAD)、(2S)-2-胺基-4,4,4-三氟丁酸、L-2-胺基-4-氰基丁酸(Cnba)、(S)-(三氟甲基)-L-半胱胺酸、(2S)-2-胺基-3-(1-甲基環丙基)丙酸、(2S)-3-(2,3-二氟苯基)-2-胺基丙酸、2,3,3a,4,5,6,7,7a-八氫吲哚-2-羧酸(Oic)、3-(三甲基矽烷基)-L-丙胺酸及2-胺基-7-(第三丁氧基)-7-側氧基庚酸， X8 代表天然胺基酸 P，或選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：(1S,2S,5R)-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-羧酸、(1R,2S,5S)-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-羧酸、反式-4-氟脯胺酸((trans-4-Fluoro)P)、L-羥基脯胺酸(Hyp)、(3S)-嗎福啉-3-羧酸(Morpholine-3-carboxylic)、L-哌啶甲酸(Pip)及(4aR,6aR,9S,11aS)-11-側氧基-2,3,4,4a,6a,7,8,9,11,11a-十氫-1H-吡啶并[3,2-e]吡咯并[1,2-a]氮雜環庚烯-9-羧酸， X9 代表天然胺基酸 P，或選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：2,3,3a,4,5,6,7,7a-八氫吲哚-2-羧酸(Oic)、(6S)-5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-羧酸、rel-(1R,3R,5R,6R)-6-(三氟甲基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-羧酸、(2S,4S)-4-三氟甲基-吡咯啶-2-羧酸((4-CF3)P)、(2S,3aS,6aS)-八氫環戊并[b]吡咯-2-羧酸、(1R,3S,5R)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-羧酸、(2S)-2-胺基-4,4,4-三氟丁酸、L-反式-3-羥基脯胺酸((3S-OH)P、反式-4-氟脯胺酸((trans-4-Fluoro)P)、L-羥基脯胺酸(Hyp)、(2S,4S)-4-氟脯胺酸((cis-4-Fluoro)P)、(3R,6R)-1,1-二氟-5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-羧酸(對映異構物1)及(3R,6R)-1,1-二氟-5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-羧酸(對映異構物2), X10 代表天然胺基酸 I，或選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：(2S)-2-(胺基)-2-[(1S,3R)-3-羥基環己基]乙酸、3-氯苯基甘胺酸((3-Chloro-Ph)G)、(S)-2-胺基-3-乙基-戊酸、別-L-異白胺酸(allo-I)、L-環己基甘胺酸(Chg)、L-環戊基甘胺酸(Cpg)、L-環丁基甘胺酸及L-正纈胺酸(Nva)， X11 代表天然胺基酸 C，或選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：L-N-甲基半胱胺酸((N-Me)C)及L-青黴胺(Pen)， X12 代表天然胺基酸 I，或選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：2-[(1S,2S)-1-(胺基)-2-甲基丁基]-1,3-㗁唑-4-羧酸、(S)-2-胺基-2-環丁基乙酸(Cbg)、別-L-異白胺酸(allo-I)、L-苯基甘胺酸(Phg)、2-甲基-D-別異白胺酸及(2S,3S)-2-((胺基)甲基)-3-甲基戊酸， 且若u及t及s均為0時，X12 之末端羧基係未經取代或經醯胺化， X13 代表選自下列所組成之列表中之天然胺基酸：P、A及D，或選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：2-甲基-L-脯胺酸(2-Me)P、N-甲基-甘胺酸((N-Me)G)、反式-4-氟脯胺酸((trans-4-Fluoro)P)、L-2-胺基丁酸 (Abu)、2-胺基異丁酸(Aib)、羥基脯胺酸(Hyp)及2,3,3a,4,5,6,7,7a-八氫吲哚-2-羧酸(Oic)， 其中呈L-立體組態之各天然胺基酸及/或非天然胺基酸可被呈D-立體組態之立體異構物置換， 且若u及t均為0及s不為0時，X13 之末端羧基係未經取代或經醯胺化， s     代表整數0至3， X14 代表選自下列所組成之列表中之天然胺基酸：D、E、G、K、N、P及Q，或選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：3-羧基苯基丙胺酸((3-Carboxy)F)、(2S)-2-胺基-4-(苯甲基胺基)-4-側氧基丁烷羧酸((N-Benzyl)D)、N-甲基-甘胺酸((N-Me)G)、6-胺基己酸(Ahx)、(2S)-吡咯啶-2-基乙酸(β-homo-P)、L-2,3-二胺基丙酸(Dap)、L-鳥胺酸(Orn)及傳明酸(Tranexamic)， 且若u為0及t不為0時，X14 之末端羧基係未經取代或經醯胺化， 其中呈L-立體組態之各天然胺基酸及/或非天然胺基酸可被呈D-立體組態之立體異構物置換， t     代表整數0至4， X15 為選自下列所組成之列表中之化學基團：(1R,3S)-3-(胺基)環戊烷羧酸、(1S,3R)-3-(胺基)環戊烷羧酸、(R)-4-胺基-6-甲基庚酸、(S)-(1-哌啶-3-基)-乙酸、(S)-3-(1-吡咯啶-2-基)-丙酸、(S)-3-(2H-四唑-5-基)丙酸、(S)-吡咯啶-3-羧酸、5-氮雜螺[2.4]庚烷-1-羧酸及(2S)-3-(三唑-1-基)-2-(胺基)丙酸， u     代表整數0或1， 但其限制條件為該肽包含至少一個非天然胺基酸。
根據另一項實施例，本發明提供一種化合物，其包含可經單離及/或純化，且包含、基本上組成為、或組成為式(I)之肽或衍生物、前藥、類似物、醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或鹽之溶劑合物，其中 X0 為選自下列所組成之列表中之化學基團：(1R,3S,4S)-2-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-3-羧酸、(2-硫嗎福啉)乙酸、(N-異丙基-N-甲基胺基)乙酸、2-(3-吡啶基)乙酸、2-(環己基胺基)乙酸、2-(二乙基胺基)乙酸、2-(嗎福啉)乙酸、2-(哌啶)乙酸、2-(吡咯啶)乙酸、3-(胺基甲基)苯甲酸、4-(胺基甲基)苯甲酸、1-(胺基甲基)-環丙基-1-羧酸(ACMP)、氮雜環丁烷-2-羧酸、苯甲酸、環丁基乙酸、環丙基乙酸、苯基乙酸、哌啶-4-基乙酸、四氫-2H-吡喃-3-基乙酸、傳明酸及反式-2-(3-((第三丁氧基)羰基胺基)環己基)乙酸， p     代表整數0或1， X1 代表選自下列所組成之列表中之天然胺基酸：A、F、G、H、I、K、L、P、R、S、T、V、W及Y，或選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：L-N,N-二甲基丙胺酸((N,N-diMe)A)、N-甲基-丙胺酸(N-Me)A、N-甲基-甘胺酸((N-Me)G)、L-2-吡啶基丙胺酸(2-Pal)、L-3-吡啶基丙胺酸(3-Pal)、L-4-吡啶基丙胺酸(4-Pal)、L-2-胺基丁酸 (Abu)、6-胺基己酸(Ahx)、2-胺基異丁酸(Aib)、3-(胺基甲基)苯甲酸、3-胺基-2,2-二甲基丙酸、3-胺基-3-甲基丁酸、4-(胺基甲基)苯甲酸、β-2-噻吩基丙胺酸、(S)-吡咯啶-2-羧酸(β-P)、L-瓜胺酸(Cit)、L-2,4-二胺基丁酸 (Dab)、L-2,3-二胺基丙酸(Dap)、γ-胺基丁酸 (γ-Abu)、L-3-甲基組胺酸(H(3-Me))、L-二氫乳清酸(Hoo)、L-正白胺酸(Nle)、L-正纈胺酸(Nva)、L-鳥胺酸(Orn)、L-哌啶甲酸(Pip)、N-甲基-L-脯胺酸((N-Me)P)、傳明酸(Tranexamic)、(1R,3S,4S)-2-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-3-羧酸及(2S)-2[(胺基)-2-(四氫-2H-吡喃-4-基)]乙酸， 其中呈L-立體組態之各天然胺基酸及/或非天然胺基酸可被呈D-立體組態之立體異構物置換， q     代表整數0至5， X2 代表天然胺基酸 I，或選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：L-N-甲基異白胺酸((N-Me)I)、L-環丁基丙胺酸(Cba)、L-正纈胺酸(Nva)及L-2-胺基丁酸 (Abu)， 其中呈L-立體組態之各天然胺基酸及/或非天然胺基酸可被呈D-立體組態之立體異構物置換， r     代表整數0或1， X3 代表天然胺基酸 C或非天然胺基酸 L-青黴胺(Pen)， X4 代表選自下列所組成之列表中之天然胺基酸：S及T， X5 代表天然胺基酸 R， X6 代表天然胺基酸 S或非天然胺基酸別-L-蘇胺酸(allo-T)， X7 代表選自下列所組成之列表中之天然胺基酸：N及L，或選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：2,5-二氟-L-苯基丙胺酸((2,5-Difluoro)F)、L-2-溴苯基丙胺酸((2-Bromo)F)、2-氯-L-苯基丙胺酸((2-Chloro)F)、4-氟-L-白胺酸((4-Fluoro)L)、L-第三丁基丙胺酸((tBu)A)、(S)-(三氟甲基)-L-半胱胺酸、(2S)-2-胺基-3-(1-甲基環丙基)丙酸及2,3,3a,4,5,6,7,7a-八氫吲哚-2-羧酸(Oic)、3-(三甲基矽烷基)-L-丙胺酸， X8 代表天然胺基酸 P，或選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：(1S,2S,5R)-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-羧酸及(4aR,6aR,9S,11aS)-11-側氧基-2,3,4,4a,6a,7,8,9,11,11a-十氫-1H-吡啶并[3,2-e]吡咯并[1,2-a]氮雜環庚烯-9-羧酸， X9 代表天然胺基酸 P，或選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：2,3,3a,4,5,6,7,7a-八氫吲哚-2-羧酸(Oic)、(2S,4S)-4-三氟甲基-吡咯啶-2-羧酸((4-CF3)P)、(6S)-5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-羧酸、rel-(1R,3R,5R,6R)-6-(三氟甲基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-羧酸、(2S,3aS,6aS)-八氫環戊并[b]吡咯-2-羧酸、rel-(3R,6R)-1,1-二氟-5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-羧酸(對映異構物1)及rel-(3R,6R)-1,1-二氟-5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-羧酸(對映異構物2)， X10 代表天然胺基酸 I，或選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：(2S)-2-(胺基)-2-[(1S,3R)-3-羥基環己基]乙酸、(S)-2-胺基-3-乙基-戊酸、L-環己基甘胺酸(Chg)及L-環戊基甘胺酸(Cpg)， X11 代表天然胺基酸 C，或選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：L-N-甲基半胱胺酸((N-Me)C)及L-青黴胺(Pen)， X12 代表天然胺基酸 I，或選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：別-L-異白胺酸(allo-I)、(S)-2-胺基-2-環丁基乙酸(Cbg)及2-[(1S,2S)-1-(胺基)-2-甲基丁基]-1,3-㗁唑-4-羧酸， 且若u及t及s均為0時，X12 之末端羧基係未經取代或經醯胺化， X13 代表選自下列所組成之列表中之天然胺基酸：P及D，或選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：2-胺基異丁酸(Aib)、2-甲基-L-脯胺酸((2-Me)P)、及反式-4-氟脯胺酸((trans-4-Fluoro)P)， 其中呈L-立體組態之各天然胺基酸及/或非天然胺基酸可被呈D-立體組態之立體異構物置換， 且若u及t均為0及s不為0時，X13 之末端羧基係未經取代或經醯胺化， s      代表整數0至3， X14 代表選自下列所組成之列表中之天然胺基酸：D、Q、N、E及P，或選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：3-羧基苯基丙胺酸((3-Carboxy)F)、N-甲基-甘胺酸((N-Me)G)、(2S)-吡咯啶-2-基乙酸(β-homo-P)、L-2,3-二胺基丙酸(Dap)、L-鳥胺酸(Orn)及傳明酸(Tranexamic)， 其中呈L-立體組態之各天然胺基酸及/或非天然胺基酸可被呈D-立體組態之立體異構物置換， 且若u為0及t不為0時，X14 之末端羧基係未經取代或經醯胺化， t       代表整數0至4， X15 為選自下列所組成之列表中之化學基團：(1R,3S)-3-(胺基)環戊烷羧酸、(1S,3R)-3-(胺基)環戊烷羧酸、(R)-4-胺基-6-甲基庚酸、(S)-(1-哌啶-3-基)-乙酸、(S)-3-(1-吡咯啶-2-基)-丙酸、(S)-3-(2H-四唑-5-基)丙酸、(S)-吡咯啶-3-羧酸、5-氮雜螺[2.4]庚烷-1-羧酸及(2S)-3-(三唑-1-基)-2-(胺基)丙酸， u      代表整數0或1， 但其限制條件為該肽包含至少一個非天然胺基酸。
根據另一項實施例，本發明提供一種化合物，其包含可經過單離及/或純化，且包含、基本上組成為、或組成為式(I)之肽或衍生物、前藥、類似物、醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或鹽之溶劑合物，其中 p    代表整數0， X1 代表選自下列所組成之列表中之天然胺基酸：A及G，或選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：N-甲基-L-丙胺酸(N-Me)A、N-甲基-甘胺酸((N-Me)G)、L-正白胺酸(Nle)、L-正纈胺酸(Nva)及L-鳥胺酸(Orn)， q      代表整數0或1， X2 代表天然胺基酸 I， r      代表整數0或1， X3 代表天然胺基酸 C或非天然胺基酸 L-青黴胺(Pen)， X4 代表天然胺基酸 S， X5 代表天然胺基酸 R或非天然胺基酸 N(5)-甲基-L-精胺酸((Me)R)， X6 代表天然胺基酸 S， X7 代表天然胺基酸 L或非天然胺基酸 L-第三丁基丙胺酸((tBu)A)， X8 代表天然胺基酸 P， X9 代表天然胺基酸 P或非天然胺基酸 2,3,3a,4,5,6,7,7a-八氫吲哚-2-羧酸(Oic)， X10 代表天然胺基酸 I， X11 代表天然胺基酸 C，或選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：L‑N-甲基半胱胺酸((N-Me)C)及L-青黴胺(Pen)， X12 代表天然胺基酸 I， 且若u及t及s均為0時，X1 2 之末端羧基係未經取代或經醯胺化， X13 代表天然胺基酸 P， 且若u及t均為0及s不為0時，X13 之末端羧基係未經取代或經醯胺化， s      代表整數0或1， X14 代表選自下列所組成之列表中之天然胺基酸：D、 Q及E， 且若u為0及t不為0時，X14 之末端羧基係未經取代或經醯胺化， t       代表整數0或1， u      代表整數0， 但其限制條件為該肽包含至少一個非天然胺基酸。
根據另一項實施例，本發明提供一種化合物，其包含下式(II) 肽， (X1 )q (X2 )r X3 X4 X5 X6 X7 X8 X9 X10 X11 X12 (X13 )s (X14 )t (II)， 或衍生物、前藥、類似物、醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或鹽之溶劑合物，其中 X1 代表選自下列所組成之列表中之天然胺基酸：A及G，或選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：N-甲基-L-丙胺酸(N-Me)A、N-甲基-甘胺酸((N-Me)G)、L-正白胺酸(Nle)、L-正纈胺酸(Nva)及L-鳥胺酸(Orn)， q     代表整數0或1， X2 代表天然胺基酸 I， r     代表整數0或1， X3 代表天然胺基酸 C或非天然胺基酸 L-青黴胺(Pen)， X4 代表天然胺基酸 S， X5 代表天然胺基酸 R或非天然胺基酸 N(5)-甲基-L-精胺酸((Me)R)， X6 代表天然胺基酸 S， X7 代表天然胺基酸 L或非天然胺基酸 L-第三丁基丙胺酸((tBu)A)， X8 代表天然胺基酸 P或非天然胺基酸 L-脯胺酸(3,4-2 H)， X9 代表天然胺基酸 P或非天然胺基酸 2,3,3a,4,5,6,7,7a-八氫吲哚-2-羧酸(Oic)， X10 代表天然胺基酸 I， X11 代表選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：L-N-甲基半胱胺酸((N-Me)C)及L-青黴胺(Pen)， X12 代表天然胺基酸 I， X13 代表天然胺基酸 P， s     代表整數0或1， X14 代表選自下列所組成之列表中之天然胺基酸：D、Q及E， t     代表整數0或1， 其中肽之N-端係經取代、經乙醯基化或經C1 -C20 -烷基單取代或二取代， 其中肽之C-端係未經取代或經醯胺化，及 其中肽利用連接X3 與X11 之鍵聯而環化。
根據另一項實施例，本發明提供一種化合物，其包含式(II)肽或衍生物、前藥、類似物、醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或鹽之溶劑合物，其中 X1 代表天然胺基酸或非天然胺基酸， q     代表整數0或1， X2 代表天然胺基酸 I， r     代表整數0或1， X3 代表天然胺基酸 C或非天然胺基酸 L-青黴胺(Pen)， X4 代表天然胺基酸 S， X5 代表天然胺基酸 R或非天然胺基酸 N(5)-甲基-L-精胺酸((Me)R)， X6 代表天然胺基酸 S， X7 代表天然胺基酸 L或非天然胺基酸 L-第三丁基丙胺酸((tBu)A)， X8 代表天然胺基酸 P或非天然胺基酸 L-脯胺酸(3,4-2 H)， X9 代表非天然胺基酸 2,3,3a,4,5,6,7,7a-八氫吲哚-2-羧酸(Oic)， X10 代表天然胺基酸 I， X11 代表天然胺基酸 C，或選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：L-N-甲基半胱胺酸((N-Me)C)及L-青黴胺(Pen)， X12 代表天然胺基酸 I， X13 代表天然胺基酸 P， s     代表整數0或1， X14 代表選自下列所組成之列表中之天然胺基酸：D、Q及E， t     代表整數0或1， 其中肽之N-端係未經取代、經乙醯基化或經C1 -C20 -烷基單取代或二取代， 其中肽之C-端係未經取代或經醯胺化，及 其中肽已利用連接X3 與X11 之鍵聯而環化。
根據另一項實施例，本發明提供一種化合物，其包含式(II)肽或衍生物、前藥、類似物、醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或鹽之溶劑合物，其中 X1 代表選自下列所組成之列表中之天然胺基酸：A及G，或選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：N-甲基-L-丙胺酸(N-Me)A、N-甲基-甘胺酸((N-Me)G)、L-正白胺酸(Nle)、L-正纈胺酸(Nva)及L-鳥胺酸(Orn)， q     代表整數0或1， X2 代表天然胺基酸 I， r     代表整數0或1， X3 代表天然胺基酸 C或非天然胺基酸 L-青黴胺(Pen)， X4 代表天然胺基酸 S， X5 代表天然胺基酸 R或非天然胺基酸 N(5)-甲基-L-精胺酸((Me)R)， X6 代表天然胺基酸 S， X7 代表天然胺基酸 L或非天然胺基酸 L-第三丁基丙胺酸((tBu)A)， X8 代表天然胺基酸 P或非天然胺基酸 L-脯胺酸(3,4-2 H)， X9 代表非天然胺基酸 2,3,3a,4,5,6,7,7a-八氫吲哚-2-羧酸(Oic)， X10 代表天然胺基酸 I， X11 代表天然胺基酸 C，或選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：L-N-甲基半胱胺酸((N-Me)C)與L-青黴胺(Pen)， X12 代表天然胺基酸 I， X13 代表天然胺基酸 P， s     代表整數0或1， X14 代表選自下列所組成之列表中之天然胺基酸：D、Q及E， t     代表整數0或1， 其中肽之N-端係未經取代或經乙醯基化， 其中肽之C-端係未經取代或經醯胺化，及 其中肽利用連接X3 與X11 之鍵聯而環化。
特定言之，本發明提供包含式(I)肽之化合物或包含式(II)肽之化合物。
根據本發明，下列X1 至X14 之定義適用於式(I)肽及式(II)肽，位置X0 及X15 之定義適用於式(I)肽。
根據本發明，X0 若存在時，可為根據本文所定義之非胺基酸之化學基團。
根據本發明另一項實施例，X0 代表選自下列所組成之列表中之化學基團：2-氰基苯甲酸、(1S,2S,4S)-雙環[2.2.1]庚-5-烯-2-基乙酸、(2,4-二側氧基咪唑啶-1-基)乙酸、2-(硫嗎福啉)乙酸((2-Thiomorpholine)acetyl)、2-(N-異丙基-N-甲基胺基)乙酸、(S)-3-甲基戊酸((S)-3-Methylpentanoic acid)、2-(3-吡啶基)乙酸、2-(環己基胺基)乙酸(2-(Cyclohexylamino)acetyl)、2-(二乙基胺基)乙酸(2-(Diethylamino)acetyl)、2-(嗎福啉)乙酸(2-(Morpholine)acetyl)、2-(N-甲基-N-環丙基胺基)乙酸(2-(N-Methyl-N-cyclopropylamino)acetyl)、2-(哌啶)乙酸(2-(Piperidin)acetyl)、2-(吡咯啶)乙酸(2-(Pyrrolidine)acetyl)、2-羥基乙酸(2-Hydroxyacetyl)、2-羥基異丁酸(2-hydroxyisobutyric)、3-(胺基甲基)苯甲酸、3-甲氧基丙酸、4-(胺基甲基)苯甲酸、4-甲基戊酸(4-Methylvaleric)、5-氯噻吩-羧酸、1-(胺基甲基)-環丙基-1-羧酸(ACMP)、己二酸、(S)-氮雜環丁烷-2-羧酸、苯甲酸(Benzoic)、4-(3,5-二甲基-1,2-㗁唑-4-基)-L-苯基丙胺酸、環丁烷羧酸(Cyclobutylcarboxylic)、2-(環丁基)乙酸(Cyclobutylacetic)、環丁基乙酸(Cyclobutylacetic)、環己基乙酸(Cyclohexylacetic)、環己烷羧酸(Cyclohexylcarboxylic)、環戊烷羧酸、環戊基乙酸(Cyclopentylacetic)、環丙烷羧酸(Cyclopropanecarboxylic)、環丙基乙酸、D-(+)生物素、富馬酸、3-苯基丙酸(氫桂皮酸(Hydrocinnamic))、異丁酸、異戊酸(Isovaleric)、L-(+)-乳酸(Lactic)、苯基乙酸、哌啶-4-基乙酸、特戊酸(Pivalic)、辛二酸、第三丁基乙酸、四氫吡喃基-4-乙酸、四氫-2H-吡喃-3-基乙酸及反式-2-(3-((第三丁氧基)羰基胺基)環己基)乙酸)。
根據本發明另一項實施例，X0 代表選自下列所組成之列表中之化學基團：2-氰基苯甲酸、(1R,3S,4S)-2-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-3-羧酸、(2-硫嗎福啉)乙酸、(N-異丙基-N-甲基胺基)乙酸、2-(3-吡啶基)乙酸、2-(環己基胺基)乙酸、2-(二乙基胺基)乙酸、2-(嗎福啉)乙酸、2-(哌啶)乙酸、2-(吡咯啶)乙酸、3-(胺基甲基)苯甲酸、4-(胺基甲基)苯甲酸、1-(胺基甲基)-環丙基-1-羧酸(ACMP)、氮雜環丁烷-2-羧酸、苯甲酸、環丁基乙酸、環丙基乙酸、苯基乙酸、哌啶-4-基乙酸、四氫-2H-吡喃-3-基乙酸、傳明酸及反式-2-(3-((第三丁氧基)羰基胺基)環己基)乙酸。
根據本發明另一項實施例，X0 為選自下列之化學基團：如上述定義之非天然胺基酸、2-氰基苯甲酸、經取代之苯甲酸或苯基乙酸。
根據本發明另一項實施例，X0 為Hoo、ODD或Ahx。
根據本發明另一項實施例，p代表整數1。
根據本發明另一項實施例，p代表整數0。
根據另一項實施例，本發明提供一種化合物，其包含可經過單離及/或純化，且包含、基本上組成為、或組成為式(I)或式(II)之肽或衍生物、前藥、類似物、醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或鹽之溶劑合物，其中X1 代表任何天然胺基酸、或非天然胺基酸，較佳為選自表1列表中之非天然胺基酸，其中呈L-立體組態之各天然胺基酸及/或非天然胺基酸可被呈D-立體組態之立體異構物置換。
根據本發明另一項實施例，X1 代表選自下列所組成之列表中之天然胺基酸：A、F、G、H、I、K、L、P、R、S、T、V、W及Y，或選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：N-甲基-丙胺酸((N-Me)A)、N-甲基-甘胺酸((N-Me)G)、(1R,3S,4S)-2-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-3-羧酸、L-3-溴苯基丙胺酸((3-Bromo)F)、L-N,N-二甲基丙胺酸((N,N-diMe)A)、N,N-二甲基甘胺酸((N,N-diMe)G)、N-苯基甘胺酸((N-Ph)G)、(R)-哌啶-3-羧酸、(S)-哌啶-3-羧酸、L-第三丁基丙胺酸((tBu)A)、L-2-吡啶基丙胺酸(2-Pal)、L-3-吡啶基丙胺酸(3-Pal)、L-4-吡啶基丙胺酸(4-Pal)、3-(胺基甲基)苯甲酸、3-胺基-2,2-二甲基丙酸、3-胺基-3-甲基丁酸、4-(胺基甲基)苯甲酸、L-2-胺基丁酸(Abu)、1-胺基環丁烷-1-羧酸(ACBA)、6-胺基己酸(Ahx)、2-胺基異丁酸(Aib)、L-2-噻吩基丙胺酸(β-2-噻吩基丙胺酸)、β-丙胺酸(β-A)、β-脯胺酸(β-P)、L-瓜胺酸(Cit)、L-2,4-二胺基丁酸 (Dab)、L-2,3-二胺基丙酸(Dap)、γ-胺基丁酸 (γ-Abu)、L-3-甲基組胺酸(3-Me)H)、L-二氫乳清酸(Hoo)、L-正白胺酸(Nle)、N-甲基-L-脯胺酸((N-Me)P)、L-正纈胺酸(Nva)、L-鳥胺酸(Orn)、L-哌啶甲酸(Pip)、(2S)-2[(胺基)-2-(四氫-2H-吡喃-4-基)]乙酸及傳明酸(Tranexamic)，其中呈L-立體組態之各天然胺基酸及/或非天然胺基酸可被呈D-立體組態之立體異構物置換。
根據本發明另一項實施例，X1 代表選自下列所組成之列表中之天然胺基酸：A及G，或選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：N-甲基-L-丙胺酸(N-Me)A、N-甲基-甘胺酸((N-Me)G)、L-正白胺酸(Nle)、L-正纈胺酸(Nva)及L-鳥胺酸(Orn)，其中呈L-立體組態之各天然胺基酸及/或非天然胺基酸可被呈D-立體組態之立體異構物置換。
根據本發明另一項實施例，X1 代表選自下列所組成之列表中之天然胺基酸：A及G，或選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：N-甲基-L-丙胺酸((N-Me)A)、N-甲基-甘胺酸((N-Me)G)、L-正白胺酸(Nle)、L-正纈胺酸(Nva)及L-鳥胺酸(Orn)。
根據本發明另一項實施例，X1 代表天然胺基酸 A或非天然胺基酸 N-甲基-甘胺酸((N-Me)G)。
根據本發明另一項實施例，若p為0及q不為0時，X1 之末端胺基係未經取代、經乙醯基化或經C1 -C4 -烷基單取代或二取代，較佳為經C1 -C20 -烷基單取代。
根據本發明另一項實施例，X1 係經甲基化。
根據本發明另一項實施例，X1 係經乙醯基化。
根據本發明另一項實施例，q代表整數0。
根據本發明另一項實施例，q代表整數1。
根據另一項實施例，本發明提供一種化合物，其包含可經過單離及/或純化且包含、基本上組成為、或組成為式(I)或式(II)之肽或衍生物、前藥、類似物、醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或鹽之溶劑合物，其中X2 代表選自下列所組成之列表中之天然胺基酸：I、L、M、V及A，或選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：L-N-甲基異白胺酸((N-Me)I)、別-L-異白胺酸(allo-I)、L-環丁基丙胺酸(Cba)、L-正纈胺酸(Nva)、L-2-胺基丁酸 (Abu)、(2S,3S)-2-[(3R)-3-胺基-2-側氧基吡咯啶-1-基]-3-甲基戊酸、(2S,3S)-2-[2-側氧基哌𠯤-1-基]-3-甲基戊酸、(2S,3S)-2-[(3S)-2-側氧基哌𠯤-1-基]-3-甲基戊酸、L-甲硫胺酸-L-亞碸、L-甲硫胺酸-碸及L-第三丁基甘胺酸，其中呈L-立體組態之各天然胺基酸及/或非天然胺基酸可被呈D-立體組態之立體異構物置換。
根據本發明另一項實施例，X2 代表天然胺基酸 I或選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：L-N-甲基異白胺酸((N-Me)I)、別-L-異白胺酸(allo-I)、L-環丁基丙胺酸(Cba)、L-正纈胺酸(Nva)、L-2-胺基丁酸 (Abu)、(2S,3S)-2-[(3R)-3-胺基-2-側氧基吡咯啶-1-基]-3-甲基戊酸、(2S,3S)-2-[2-側氧基哌𠯤-1-基]-3-甲基戊酸及(2S,3S)-2-[(3S)-2-側氧基哌𠯤-1-基]-3-甲基戊酸，其中呈L-立體組態之各天然胺基酸及/或非天然胺基酸可被呈D-立體組態之立體異構物置換。
根據本發明另一項實施例，X2 代表天然胺基酸 I或選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：L-N-甲基異白胺酸((N-Me)I)、L-環丁基丙胺酸(Cba)、L-正纈胺酸(Nva)及L-2-胺基丁酸 (Abu)，其中呈L-立體組態之各天然胺基酸及/或非天然胺基酸可被呈D-立體組態之立體異構物置換。
根據本發明另一項實施例，X2 代表天然胺基酸 I。
根據本發明另一項實施例，若p及q二者均為0及r為1時，X2 之末端胺基係未經取代、經乙醯基化或經C1 -C20 -烷基單取代或二取代，較佳為經C1 -C4 -烷基單取代。
根據本發明另一項實施例，r代表整數0。
根據本發明另一項實施例，r代表整數1。
根據另一項實施例，本發明提供一種化合物，其包含可經過單離及/或純化且包含、基本上組成為、或組成為式(I)或式(II)之肽或衍生物、前藥、類似物、醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或鹽之溶劑合物，其中X3 代表天然胺基酸 C，或選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：L-青黴胺(Pen)及L-N-甲基半胱胺酸((N-Me)C)。
根據本發明另一項實施例，X3 代表天然胺基酸 C或非天然胺基酸 L-青黴胺(Pen)。
根據本發明另一項實施例，X3 代表天然胺基酸 C。
根據本發明另一項實施例，若p及q及r均為0時，X3 之末端胺基係未經取代、經乙醯基化或經C1 -C4 -烷基單取代或二取代，較佳為經C1 -C20 -烷基單取代。
根據另一項實施例，本發明提供一種化合物，其包含可經過單離及/或純化，且包含、基本上組成為、或組成為式(I)或式(II)之肽或衍生物、前藥、類似物、醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或鹽之溶劑合物，其中X4 代表選自下列所組成之列表中之天然胺基酸：S、C、T、R或K，或選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：別-L-蘇胺酸(allo-T)、L-高碳絲胺酸(hSer)及L-鳥胺酸(Orn)。
根據本發明另一項實施例，X4 代表選自下列所組成之列表中之天然胺基酸：S、C、T、R及K。
根據本發明另一項實施例，X4 代表選自下列所組成之列表中之天然胺基酸：S或T。
根據本發明另一項實施例，X4 代表天然胺基酸 S。
根據另一項實施例，本發明提供一種化合物，其包含可經過單離及/或純化且包含、基本上組成為、或組成為式(I)或式(II)之肽或衍生物、前藥、類似物、醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或鹽之溶劑合物，其中X5 代表天然胺基酸 R或非天然胺基酸 N(5)-甲基-L-精胺酸((Me)R)。
根據本發明另一項實施例，X5 代表天然胺基酸 R或非天然胺基酸 N(5)-甲基-L-精胺酸((Me)R)。
根據本發明另一項實施例，X5 代表天然胺基酸 R。
根據另一項實施例，本發明提供一種化合物，其包含可經過單離及/或純化且包含、基本上組成為、或組成為式(I)或式(II)之肽或衍生物、前藥、類似物、醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或鹽之溶劑合物，其中X6 代表選自下列所組成之列表中之天然胺基酸：S、C或T，或選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：別-L-蘇胺酸(allo-T)及L-2,3-二胺基丙酸(Dap)。
根據本發明另一項實施例，X6 代表天然胺基酸 S，或選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：別-L-蘇胺酸(allo-T)及L-2,3-二胺基丙酸(Dap)。
根據本發明另一項實施例，X6 代表天然胺基酸 S或非天然胺基酸別-L-蘇胺酸(allo-T)。
根據本發明另一項實施例，X6 代表天然胺基酸 S。
根據另一項實施例，本發明提供一種化合物，其包含可經過單離及/或純化且包含、基本上組成為、或組成為式(I)或式(II)之肽或衍生物、前藥、類似物、醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或鹽之溶劑合物，其中X7 代表選自下列所組成之列表中之天然胺基酸：L、F或N，或選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：2,3,3a,4,5,6,7,7a-八氫吲哚-2-羧酸(Oic)、L-4-溴苯基丙胺酸((4-Bromo)F)、2,5-二氟-L-苯基丙胺酸((2,5-Difluoro)F)、L-第三丁基丙胺酸((tBu)A)、2-氯-L-苯基丙胺酸((2-Chloro)F)、L-2-溴苯基丙胺酸((2-Bromo)F)、(S)-2-(胺基)-1,6-己烷二酸(AAD)、(2S)-2-胺基-4,4,4-三氟丁酸、L-2-胺基-4-氰基丁酸 (Cnba)、4-氟-白胺酸((4-Fluoro)L)、(S)-(三氟甲基)-L-半胱胺酸、(2S)-2-胺基-3-(1-甲基環丙基)丙酸、L-第三丁基甘胺酸((tBu)G)、3-(三甲基矽烷基)-L-丙胺酸、2,5-二氟-L-苯基丙胺酸、2-胺基-7-(第三丁氧基)-7-側氧基庚酸、5,5,5-三氟-L-白胺酸((Trifluoro)L)、2-甲基-L-苯基丙胺酸((2-Me)F)、L-環丁基丙胺酸(Cba)、L-環戊基丙胺酸(Cpa)、L-環丙基甲基丙胺酸、L-三氟甲基丙胺酸、L-二氟甲基丙胺酸、2-氟-L-苯基丙胺酸((2-氟)F)、(2S)-3-(2,3-二氟苯基)-2-胺基丙酸、(2S)-3-(3-氰基苯基)-2-胺基丙酸、2-胺基-5,5,5-三氟-4-甲基-戊酸、(2S)-2-胺基-5-甲基-己酸及(2S)-3-(吲哚-4-基)-2-(胺基)丙酸。
根據本發明另一項實施例，X7 代表選自下列所組成之列表中之天然胺基酸：L及N，或選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：2,5-二氟-L-苯基丙胺酸((2,5-Difluoro)F)、L-2-溴苯基丙胺酸((2-Bromo)F)、2-氯-L-苯基丙胺酸((2-Chloro)F)、L-4-溴苯基丙胺酸((4-Bromo)F)、4-氟-L-白胺酸((4-Fluoro)L)、L-第三丁基丙胺酸((tBu)A)、L-第三丁基甘胺酸((tBu)G)、5,5,5-三氟-L-白胺酸((Trifluoro)L)、(S)-2-(胺基)-1,6-己烷二酸(AAD)、(2S)-2-胺基-4,4,4-三氟丁酸、L-2-胺基-4-氰基丁酸 (Cnba)、(S)-(三氟甲基)-L-半胱胺酸、(2S)-2-胺基-3-(1-甲基環丙基)丙酸、(2S)-3-(2,3-二氟苯基)-2-胺基丙酸、2,3,3a,4,5,6,7,7a-八氫吲哚-2-羧酸(Oic)、3-(三甲基矽烷基)-L-丙胺酸及2-胺基-7-(第三丁氧基)-7-側氧基庚酸。
根據本發明另一項實施例，X7 代表選自下列所組成之列表中之天然胺基酸：N或L，或選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：2,5-二氟-L-苯基丙胺酸((2,5-Difluoro)F)、L-2-溴苯基丙胺酸((2-Bromo)F)、2-氯-L-苯基丙胺酸((2-Chloro)F)、4-氟-L-白胺酸((4-Fluoro)L)、L-第三丁基丙胺酸((tBu)A)、(S)-(三氟甲基)-L-半胱胺酸、(2S)-2-胺基-3-(1-甲基環丙基)丙酸及2,3,3a,4,5,6,7,7a-八氫吲哚-2-羧酸(Oic)、3-(三甲基矽烷基)-L-丙胺酸。
根據本發明另一項實施例，X7 代表天然胺基酸 L或非天然胺基酸 L-第三丁基丙胺酸((tBu)A)。
根據本發明另一項實施例，X7 代表非天然胺基酸 L-第三丁基丙胺酸((tBu)A)。
根據本發明另一項實施例，X7 代表天然胺基酸 L。
根據另一項實施例，本發明提供一種化合物，其包含可經過單離及/或純化且包含、基本上組成為、或組成為式(I)或式(II)之肽或衍生物、前藥、類似物、醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或鹽之溶劑合物，其中X8 代表天然胺基酸 P，或選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：L-脯胺酸(3,4-2 H)、(1S,2S,5R)-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-羧酸、(1R,2S,5S)-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-羧酸、L-羥基脯胺酸(Hyp)、(3S)-嗎福啉-3-羧酸(Morpholine-3-carboxylic)、L-哌啶甲酸(Pip)、(4aR,6aR,9S,11aS)-11-側氧基-2,3,4,4a,6a,7,8,9,11,11a-十氫-1H-吡啶并[3,2-e]吡咯并[1,2-a]氮雜環庚烯-9-羧酸、反式-4-氟脯胺酸((trans-4-Fluoro)P)及(1R,2S,5S)-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-羧酸。
根據本發明另一項實施例，X8 代表天然胺基酸 P，或選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：L-脯胺酸(3,4-2 H)、(1S,2S,5R)-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-羧酸、反式-4-氟脯胺酸((trans-4-Fluoro)P)、L-羥基脯胺酸(Hyp)、(3S)-嗎福啉-3-羧酸(Morpholine-3-carboxylic)、L-哌啶甲酸(Pip)及(4aR,6aR,9S,11aS)-11-側氧基-2,3,4,4a,6a,7,8,9,11,11a-十氫-1H-吡啶并[3,2-e]吡咯并[1,2-a]氮雜環庚烯-9-羧酸。
根據本發明另一項實施例，X8 代表天然胺基酸 P，或選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：L-脯胺酸(3,4-2 H)、(1S,2S,5R)-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-羧酸及(4aR,6aR,9S,11aS)-11-側氧基-2,3,4,4a,6a,7,8,9,11,11a-十氫-1H-吡啶并[3,2-e]吡咯并[1,2-a]氮雜環庚烯-9-羧酸。
根據本發明另一項實施例，X8 代表天然胺基酸 P或非天然胺基酸 L-脯胺酸(3,4-2 H)。
根據本發明另一項實施例，X8 代表天然胺基酸 P。
根據另一項實施例，本發明提供一種化合物，其包含可經過單離及/或純化且包含、基本上組成為、或組成為式(I)或式(II)之肽或衍生物、前藥、類似物、醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或鹽之溶劑合物，其中X9 代表天然胺基酸 P，或選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：2,3,3a,4,5,6,7,7a-八氫吲哚-2-羧酸(Oic)、L-羥基脯胺酸(Hyp)、(2S,4S)-4-三氟甲基-吡咯啶-2-羧酸((4-CF3)P)、(2S,4S)-4-氟脯胺酸((cis-4-Fluoro)P)、反式-4-氟脯胺酸((trans-4-Fluoro)P)、(2S)-2-胺基-4,4,4-三氟丁酸、L-反式-3-羥基脯胺酸((3S-OH)P、(1R,3S,5R)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-羧酸、(6S)-5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-羧酸、rel-(1R,3R,5R,6R)-6-(三氟甲基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-羧酸、(2S)-2-胺基-4,4,4-三氟丁酸、(2S,3aS,6aS)-八氫環戊并[b]吡咯-2-羧酸、反式-4-氟脯胺酸((trans-4-Fluoro)P)、(2S,4S)-4-氟脯胺酸((cis-4-Fluoro)P)、L-4,4-二氟脯胺酸((Difluoro)P)、rel-(3R,6R)-1,1-二氟-5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-羧酸(對映異構物1)及rel-(3R,6R)-1,1-二氟-5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-羧酸(對映異構物2)。
根據本發明另一項實施例，X9 代表天然胺基酸 P，或選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：2,3,3a,4,5,6,7,7a-八氫吲哚-2-羧酸(Oic)、(6S)-5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-羧酸、rel-(1R,3R,5R,6R)-6-(三氟甲基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-羧酸、(2S,4S)-4-三氟甲基-吡咯啶-2-羧酸((4-CF3)P)、(2S,3aS,6aS)-八氫環戊并[b]吡咯-2-羧酸、(1R,3S,5R)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-羧酸、(2S)-2-胺基-4,4,4-三氟丁酸、L-反式-3-羥基脯胺酸((3S-OH)P、反式-4-氟脯胺酸((trans-4-Fluoro)P)、L-羥基脯胺酸(Hyp)、(2S,4S)-4-氟脯胺酸((cis-4-Fluoro)P)、(3R,6R)-1,1-二氟-5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-羧酸(對映異構物1)及(3R,6R)-1,1-二氟-5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-羧酸(對映異構物2)。
根據本發明另一項實施例，X9 代表天然胺基酸 P，或選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：2,3,3a,4,5,6,7,7a-八氫吲哚-2-羧酸(Oic)、(2S,4S)-4-三氟甲基-吡咯啶-2-羧酸((4-CF3)P)、(6S)-5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-羧酸、rel-(1R,3R,5R,6R)-6-(三氟甲基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-羧酸、(2S,3aS,6aS)-八氫環戊并[b]吡咯-2-羧酸、rel-(3R,6R)-1,1-二氟-5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-羧酸(對映異構物1)及rel-(3R,6R)-1,1-二氟-5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-羧酸(對映異構物2)。
根據本發明另一項實施例，X9 代表天然胺基酸 P或非天然胺基酸 2,3,3a,4,5,6,7,7a-八氫吲哚-2-羧酸(Oic)。
根據本發明另一項實施例，X9 代表非天然胺基酸 2,3,3a,4,5,6,7,7a-八氫吲哚-2-羧酸(Oic)。
根據另一項實施例，本發明提供一種化合物，其包含可經過單離及/或純化且包含、基本上組成為、或組成為式(I)或式(II)之肽或衍生物、前藥、類似物、醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或鹽之溶劑合物，其中X10 代表天然胺基酸 I，或選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：L-環戊基甘胺酸(Cpg)、L-環己基甘胺酸(Chg)、(S)-2-胺基-3-乙基-戊酸、3-氯苯基甘胺酸((3-Chloro-Ph)G)、L-第三丁基甘胺酸、別-L-異白胺酸(allo-I)、L-環丁基甘胺酸、L-正纈胺酸(Nva)及(2S)-2-(胺基)-2-[(1S,3R)-3-羥基環己基]乙酸。
根據本發明另一項實施例，X10 代表天然胺基酸 I，或選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：(2S)-2-(胺基)-2-[(1S,3R)-3-羥基環己基]乙酸、3-氯苯基甘胺酸((3-Chloro-Ph)G)、(S)-2-胺基-3-乙基-戊酸、別-L-異白胺酸(allo-I)、L-環己基甘胺酸(Chg)、L-環戊基甘胺酸(Cpg)、L-環丁基甘胺酸及L-正纈胺酸(Nva)。
根據本發明另一項實施例，X10 代表天然胺基酸 I，或選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：(2S)-2-(胺基)-2-[(1S,3R)-3-羥基環己基]乙酸、(S)-2-胺基-3-乙基-戊酸、L-環己基甘胺酸(Chg)及L-環戊基甘胺酸(Cpg)。
根據本發明另一項實施例，X10 代表天然胺基酸 I。
根據另一項實施例，本發明提供一種化合物，其包含可經過單離及/或純化且包含、基本上組成為、或組成為式(I)或式(II)之肽或衍生物、前藥、類似物、醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或鹽之溶劑合物，其中X11 代表天然胺基酸 C，或選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：L-N-甲基半胱胺酸((N-Me)C)及L-青黴胺(Pen)。
根據本發明另一項實施例，X11 代表天然胺基酸 C，或選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：L-N-甲基半胱胺酸((N-Me)C)及L-青黴胺(Pen)。
根據本發明另一項實施例，X11 代表選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：L-N-甲基半胱胺酸((N-Me)C)及L-青黴胺(Pen)。
根據本發明另一項實施例，X11 代表非天然胺基酸 L-青黴胺(Pen)。
根據另一項實施例，本發明提供一種化合物，其包含可經過單離及/或純化且包含、基本上組成為、或組成為式(I)或式(II)之肽或衍生物、前藥、類似物、醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或鹽之溶劑合物，其中X9 代表非天然胺基酸 2,3,3a,4,5,6,7,7a-八氫吲哚-2-羧酸(Oic)及X11 代表非天然胺基酸 L-N-甲基半胱胺酸((N-Me)C)或非天然胺基酸 L-青黴胺(Pen)。
根據本發明另一項實施例，X9 代表非天然胺基酸 2,3,3a,4,5,6,7,7a-八氫吲哚-2-羧酸(Oic)及X11 代表非天然胺基酸 L-青黴胺(Pen)。
根據本發明另一項實施例，X9 代表非天然胺基酸 2,3,3a,4,5,6,7,7a-八氫吲哚-2-羧酸(Oic)及X11 代表選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：L-N-甲基半胱胺酸((N-Me)C)及L-青黴胺(Pen)。
根據另一項實施例，本發明提供一種化合物，其包含可經過單離及/或純化且包含、基本上組成為、或組成為式(I)或式(II)之肽或衍生物、前藥、類似物、醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或鹽之溶劑合物，其中X12 代表天然胺基酸 I，或選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：別-L-異白胺酸(allo-I)、(S)-2-胺基-2-環丁基乙酸(Cbg)、(2S,3S)-2-((胺基)甲基)-3-甲基戊酸、L-苯基甘胺酸(Phg)、2-[(1S,2S)-1-(胺基)-2-甲基丁基]-1,3-㗁唑-4-羧酸、2-甲基-D-別異白胺酸、L-正纈胺酸(Nva)、L-2-胺基丁酸 (Abu)、L-第三丁基甘胺酸及胺基異丁酸(Aib)。
根據本發明另一項實施例，X12 代表天然胺基酸 I，或選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：2-[(1S,2S)-1-(胺基)-2-甲基丁基]-1,3-㗁唑-4-羧酸、(S)-2-胺基-2-環丁基乙酸(Cbg)、別-L-異白胺酸(allo-I)、L-苯基甘胺酸(Phg)、2-甲基-D-別異白胺酸及(2S,3S)-2-((胺基)甲基)-3-甲基戊酸。
根據本發明另一項實施例，X12 代表天然胺基酸 I，或選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：別-L-異白胺酸(allo-I)、(S)-2-胺基-2-環丁基乙酸(Cbg)及2-[(1S,2S)-1-(胺基)-2-甲基丁基]-1,3-㗁唑-4-羧酸。
根據本發明另一項實施例，X12 代表天然胺基酸 I。
根據本發明另一項實施例，若u及t及s均為0時，X12 之末端羧基係未經取代或經醯胺化。
根據另一項實施例，本發明提供一種化合物，其包含可經過單離及/或純化且包含、基本上組成為、或組成為式(I)或式(II)之肽或衍生物、前藥、類似物、醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或鹽之溶劑合物，其中X13 代表選自下列所組成之列表中之天然胺基酸：P、A、S、T、G、D、E、Q或N，或選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：N-甲基-甘胺酸((N-Me)G)、5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-羧酸、L-2-胺基丁酸 (Abu)、2-胺基異丁酸(Aib)、2-甲基-L-脯胺酸((2-Me)P)、羥基脯胺酸(Hyp)、2,3,3a,4,5,6,7,7a-八氫吲哚-2-羧酸(Oic)、反式-4-氟脯胺酸((trans-4-Fluoro)P)、(2S,4S)-4-氟脯胺酸((cis-4-Fluoro)P)、L-4,4-二氟脯胺酸((Difluoro)P)、L-環戊基甘胺酸(Cpg)、(S)-2-胺基-2-環丁基乙酸(Cbg)及(2S)-吡咯啶-2-基乙酸(β-homo-P)，其中呈L-立體組態之各天然胺基酸及/或非天然胺基酸可被呈D-立體組態之立體異構物置換。
根據本發明另一項實施例，X13 代表選自下列所組成之列表中之天然胺基酸：P、A及D，或選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：2-甲基-L-脯胺酸((2-Me)P)、N-甲基-甘胺酸((N-Me)G)、反式-4-氟脯胺酸((trans-4-Fluoro)P)、L-2-胺基丁酸 (Abu)、2-胺基異丁酸(Aib)、羥基脯胺酸(Hyp)及2,3,3a,4,5,6,7,7a-八氫吲哚-2-羧酸(Oic)，其中呈L-立體組態之各天然胺基酸及/或非天然胺基酸可被呈D-立體組態之立體異構物置換。
根據本發明另一項實施例，X13 代表選自下列所組成之列表中之天然胺基酸：P或D，或選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：2-胺基異丁酸(Aib)、2-甲基-L-脯胺酸((2-Me)P)及反式-4-氟脯胺酸((trans-4-Fluoro)P)，其中呈L-立體組態之各天然胺基酸及/或非天然胺基酸可被呈D-立體組態之立體異構物置換。
根據本發明另一項實施例，X13 代表天然胺基酸 P。
根據本發明另一項實施例，s代表整數0。
根據本發明另一項實施例，s代表整數1。
根據本發明另一項實施例，若u及t二者均為0及s不為0時，X13 之末端羧基係未經取代或經醯胺化。
根據本發明另一項實施例，若t為0及s為1時，X13 之末端羧基係未經取代或經醯胺化。
根據另一項實施例，本發明提供一種化合物，其包含可經過單離及/或純化且包含、基本上組成為、或組成為式(I)或式(II)之肽或衍生物、前藥、類似物、醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或鹽之溶劑合物，其中X14 代表任何天然胺基酸或非天然胺基酸，其中任何天然胺基酸及/或非天然胺基酸可呈D-或L-立體組態。
根據本發明另一項實施例，X14 代表選自下列所組成之列表中之天然胺基酸：D、E、G、K、N、P及Q，或選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：3-羧基苯基丙胺酸((3-Carboxy)F)、(2S)-2-胺基-4-(苯甲基胺基)-4-側氧基丁烷羧酸((N-Benzyl)D)、N-甲基-甘胺酸((N-Me)G)、6-胺基己酸(Ahx)、(2S)-吡咯啶-2-基乙酸(β-homo-P)、L-2,3-二胺基丙酸(Dap)、L-鳥胺酸(Orn)及傳明酸(Tranexamic)，其中呈L-立體組態之各天然胺基酸及/或非天然胺基酸可被呈D-立體組態之立體異構物置換。
根據本發明另一項實施例，X14 代表選自下列所組成之列表中之天然胺基酸：D、Q、N、E及P，或選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：3-羧基苯基丙胺酸((3-Carboxy)F)、N-甲基-甘胺酸((N-Me)G)、(2S)-吡咯啶-2-基乙酸(β-homo-P)、L-2,3-二胺基丙酸(Dap)、L-鳥胺酸(Orn)及傳明酸(Tranexamic)，其中呈L-立體組態之各天然胺基酸及/或非天然胺基酸可被呈D-立體組態之立體異構物置換。
根據本發明另一項實施例，X14 代表選自下列所組成之列表中之天然胺基酸：D、Q或I。
根據本發明另一項實施例，X14 代表天然胺基酸 D。
根據本發明另一項實施例，X14 之C-端「-OH」部份體係經取代成C-端「-NH2 」部份體。
根據本發明另一項實施例，q代表整數0。
根據本發明另一項實施例，q代表整數1。
根據本發明另一項實施例，若s及t代表整數1時，X14 之末端羧基係未經取代或經醯胺化。
根據本發明另一項實施例，若s及t代表整數1時，X14 之末端羧基未經取代。
根據本發明，X15 若存在時可為非胺基酸之化學基團。
根據本發明另一項實施例，X15 為選自下列所組成之群組中之化學基團：-NH­2 、-NH-C1 -C6 -烷基、(1R,3S)-3-(胺基)環戊烷羧酸、(1S,3R)-3-(胺基)環戊烷羧酸、(R)-4-胺基-6-甲基庚酸、(S)-(1-哌啶-3-基)-乙酸、(S)-3-(1-吡咯啶-2-基)-丙酸、(S)-3-(2H-四唑-5-基)丙酸、(S)-吡咯啶-3-羧酸、5-氮雜螺[2.4]庚烷-1-羧酸及(2S)-3-(三唑-1-基)-2-(胺基)丙酸。
根據本發明另一項實施例，X15 為選自：-NH­2 或-NH-C1 -C6 -烷基之化學基團，較佳為-NH2 。
根據本發明另一項實施例，q代表整數0。
根據本發明另一項實施例，q代表整數1。
根據本發明另一項實施例，肽之N-端係未經取代、經乙醯基化或經C1 -C20 -烷基單取代或二取代。
根據本發明另一項實施例，肽之N-端係未經取代、經乙醯基化或經C1 -C4 -烷基單取代或二取代。
根據本發明另一項實施例，肽之N-端係未經取代或經乙醯基化。
根據本發明另一項實施例，C-端係未經取代或經醯胺化。
根據本發明另一項實施例，N-端及C-端係未經取代。
根據另一項實施例，本發明提供一種化合物，其包含可經過單離及/或純化且包含、基本上組成為、或組成為式(I)或式(II)之肽或衍生物、前藥、類似物、醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或鹽之溶劑合物，其係選自：實例29、44、45、67、75、109、166、185、443及466所組成群中，或其係選自：實例29、44、45、67、75、109、166、185、443、466及499所組成群中。
式(I)或(II)肽可為線性或環化。本文所採用術語「環化」係指反應中一部份多肽分子(例如：Cys、(N-Me)Cys或Pen)成為與另一部份多肽分鍵聯(例如：另一個Cys、(N-Me)Cys或Pen)，形成封閉環，如：形成二硫橋基(-S-S-)或其他類似鍵，如：碳–硫鍵(例如：(-CH2 -S-)或(-(CH2 )2 -S-))、硫-碳鍵(例如：(-S-CH2 -)或(-S-(CH2 )2 -))、碳-硫-碳鍵(-CH2 -S-CH2 -)或碳-碳鍵(例如：(-CH2 -CH2 -)。根據本發明，以肽之位置X3 及X11 之間有鍵結較佳。根據本發明肽序列中，在「+」之前之胺基酸係指環狀肽中，該胺基酸利用二硫橋基與在「+」之前的另一個胺基酸鍵聯，形成封閉環。或者，多肽分子之兩個鏈0結化學基團可以採用連接線表示。
根據另一項實施例，本發明提供一種化合物，其包含可經過單離及/或純化且包含、基本上組成為、或組成為式(I)或式(II)之肽或衍生物、前藥、類似物、醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或鹽之溶劑合物，其中肽已環化。
根據本發明另一項實施例，式(I)或式(II)肽已利用連接X3 與X11 之鍵聯而環化。
根據本發明另一項實施例，式(I)或式(II)肽已利用連接X3 與X11 之鍵聯而環化，且其中X3 及X11 係利用式-S-S-、-CH2 -S-、-S-CH2 -、-CH2 -CH2 -、-S-(CH2 )2 -、-(CH2 )2 -S-或-CH2 -S-CH2 -之鍵聯基連接。
根據本發明另一項實施例，式(I)或式(II)肽已利用連接X3 與X11 之鍵聯而環化，且其中X3 及X11 係利用式-S-S-二硫鍵連接。
本發明肽可經特徵在於重複單位之合適水溶性聚合物取代。合適之聚合物可選自下列所組成之群組中：聚烷基氧聚合物、玻尿酸及其衍生物、聚乙烯醇、聚㗁唑啉、聚酸酐、聚(原酸酯)、聚碳酸酯、聚胺基甲酸酯、聚丙烯酸、聚丙烯醯胺、聚丙烯酸酯、聚甲基丙烯酸酯、聚有機磷腈、聚矽氧烷、聚乙烯吡咯烷酮、聚氰基丙烯酸酯、及聚酯類。
本發明肽可經至少一個聚伸乙基(PEG基團)取代。該至少一個PEG基團較佳為與N-端及/或C-端結合。PEG基團可與肽之化學基團及/或胺基酸之任何合適官能基結合，例如：羥基、羧基、胺基、硫醇基，較佳為胺基或羧基。根據本發明較佳肽包含一個與N-端結合之PEG基團或一個與C-端結合之PEG基團。更佳係一個PEG基團利用醯胺鍵與N-端或C-端結合。.
肽之PEG基化可以加強其溶解性、降低免疫原性、改善安定性、及/或藉由降低腎清除率而延長其半衰期，其係早在1980年代已知的觀念(Caliceti P.,Veronese F.M., Adv. Drug Deliv. Rev.2003, 55, 1261-1277)。已有數種藥物使用成功，但許多實例中，PEG基化會降低藥物效力程度的觀念已不再適當(T. Peleg-Shulman等人，J. Med.Chem., 2004, 47, 4897-4904)。
根據本發明PEG基團為包含至少兩個環氧乙烷單位之任何基團，可以形成環氧乙烷寡聚物或聚合物。PEG基團係共價接合本發明肽(PEG基化)，因此稱為PEG基化肽。通常，分子之此修飾型態係相關技藝習知者。
PEG基團可由交互相連之部份體(moiety)、聚合部份體、及終端基團組成。交互相連之部份體可由C1 -C20 烷基組成，其可視需要穿插或末端為選自下列所組成之群組中之雜原子或官能基：-O-、-S-、N(RX )、C(O)、C(O)RX 、C(O)N(RX )、N(RX )C(O)、一或多個C3 -C8 -環烷基、C3 -C7 -雜環烷基、芳基或雜芳基，其中RX 為氫或C1 -C6 -烷基，其可視需要穿插或末端為一或多個上述原子或基團，其進一步具有氫作為末端原子。聚合物部份體係由至少兩個環氧乙烷單位，其可視需要穿插或末端為一或多個選自下列所組成之群組中之雜原子或官能基：-O-、-S-、N(RX )、C(O)、C(O)RX 、C(O)N(RX )、N(RX )C(O)、C1 -C6 -烷基、C3 -C8 -環烷基、C3 -C7 -雜環烷基、芳基或雜芳基，其中RX 為氫或C1 -C6 -烷基。末端基團可由選自下列所組成之群組中之雜原子或官能基組成：OH、SH、N(RX )2 、C(O)RX ; CORX 、COORX 、C(O)N(RX )、N(RX )C(O)NH2 ，其中RX 為氫或C1 -C6 -烷基。較佳末端基團為COOH及C(O)NH2 。
根據本發明PEG間隔基實例包括具有1個乙二醇單位之PEG1(10個原子) (n=1；10個原子)、具有2個乙二醇單位之PEG2(13個原子)(n=2；13個原子)、具有3個乙二醇單位之PEG3(16個原子)(n=3；16個原子)、具有4個乙二醇單位之PEG4(19個原子) (n=4；19個原子)、具有5個乙二醇單位之PEG5(22個原子) (n=5；22個原子)、具有6個乙二醇單位之PEG6(25個原子)(n=6；25個原子)，等等。
應注意，如本文所定義PEG基團可由商品供需商的不同名稱指示，其不應排除名稱與本發明不同的此等相同化合物。
根據另一項實施例，本發明提供一種化合物，其包含可經過單離及/或純化且包含、基本上組成為、或組成為式(I)或式(II)之肽或衍生物、前藥、類似物、醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或鹽之溶劑合物，其中肽係經至少一個PEG基團取代。
根據本發明另一項實施例，肽係經一個PEG基團取代。
根據本發明另一項實施例，肽係經一個PEG基團取代，其中該PEG基團係與C-端結合，較佳為利用醯胺鍵結合。
根據本發明另一項實施例，肽係經至少一個PEG基團取代，其中該至少一或多個PEG基團為式(IIIa)基團。
Figure 02_image005
(IIIa)， 其中 *   標示與氮或氧原子之附接點， D  為C1 -C4 -伸烷基， Y  係選自：羥基、甲氧基、乙氧基、羧基、羧醯胺或胺基所組成群中，及 n   代表整數2至15， 或式(IIIb)基團
Figure 02_image007
(IIIb)， 其中 *   標示與羰基之鍵結， D1 為C1 -C4 -伸烷基， Y1 係選自羥基、甲氧基、乙氧基、羧基、羧醯胺或胺基所組成群中，及 m  代表整數2至15， 或TTDS。
根據本發明另一項實施例，肽係經至少一個PEG基團取代，其中該至少一或多個PEG基團係選自下列所組成之列表中：PEG1(10個原子)、PEG2(13個原子)、PEG3(16個原子)、PEG4(19個原子)、PEG4-CH2 CO2 H (15個原子)、PEG5(22個原子)、PEG5-CH2 CO2 H (18個原子)、PEG7(25個原子)、PEG8(28個原子)、PEG9(31個原子)及TTDS。
本發明肽包含至少一個C8 -C20 脂肪酸。通常，此等脂肪酸可為分支或環狀。該至少一個C8 -C20 脂肪酸較佳為與N-端及/或C-端結合。C8 -C20 脂肪酸可與肽之化學基團及/或胺基酸之任何合適官能基結合，例如：羥基、羧基、胺基、硫醇基，較佳為胺基或羧基。根據本發明肽較佳包含一個與N-端結合之C8 -C20 脂肪酸或一個與C-端結合之C8 -C20 脂肪酸。更佳係一個C8 -C20 脂肪酸利用醯胺鍵與N-端或C-端結合。較佳為由X0 或X15 形成之脂肪酸側鏈為＞ C8 之脂肪酸，更佳係 ≥ C12 之脂肪酸，更佳係≥ C14 之脂肪酸。亦較佳為由X0 或X15 形成之脂肪酸側鏈為C12 -C18 脂肪酸，較佳為C12 -C16 脂肪酸、或C14 -C18 脂肪酸、或C14 -C16 脂肪酸。最佳為C16 脂肪酸，如：棕櫚酸(palmitoyl、Palm)及C18 脂肪酸，如：1,18-十八烷二酸(ODD)。
亦咸了解，N-端或C-端之部份體可為鍵，例如：共價鍵，特別當胺基端或羧基端與鍵聯基或與另一個化學部份體結合時。
化學基團、非天然胺基酸或部份體在本文中之縮寫示於表3。 表3：序列中化學基團、非天然胺基酸或其他部份體所採用縮寫/表示法及命名法
縮寫 / 表示法 縮寫 / 表示法定義
Cyclohexylcarboxylic 環己烷羧酸
(2S)-Amino-2-[3-(Trifluoromethyl)bicyclo[1.1.1]pent-1-yl]acetic acid (2S)-胺基-2-[3-(三氟甲基)雙環[1.1.1]戊-1-基]乙酸
(S)-3-(2H-tetrazol-5-yl)propanoic acid (S)-3-(2H-四唑-5-基)丙酸
(1R,3S)-3-(Amino)cyclopentanecarboxylic acid (1R,3S)-3-(胺基)環戊烷羧酸
(1R,3S,4S)-2-azabicyclo[2.2.1]heptane-3-carboxylic acid (1R,3S,4S)-2-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-3-羧酸
(1R,3S,5R)-2-Azabicyclo[3.1.0]己烷e-3-carboxylic acid (1R,3S,5R)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-羧酸
(1S,2S,4S)-Bicyclo[2.2.1]hept-5-en-2-ylacetic acid (1S,2S,4S)-雙環[2.2.1]庚-5-烯-2-基乙酸
(1R,2S,5S)-3-Azabicyclo[3.1.0]己烷e-2-carboxylic acid (1R,2S,5S)-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-羧酸
(1S,3R)-3-(Amino)cyclopentanecarboxylic acid (1S,3R)-3-(胺基)環戊烷羧酸
(1S,3R,4R)-2-Azabicyclo[2.2.1]heptane-3-carboxylic acid (1S,3R,4R)-2-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-3-羧酸
(2,4-Dioxoimidazolidin-1-yl)acetic acid (2,4-二側氧基咪唑啶-1-基)乙酸
(2-CN)F 2-氰基-L-苯基丙胺酸
(2-Fluoro)F 2-氟-L-苯基丙胺酸
(2-Me)F 2-甲基-L-苯基丙胺酸
(4-Pyranoyl)G (2S)-(四氫-2H-吡喃-4-基)乙酸
(4-CF3)P (2S,4S)-4-三氟甲基-吡咯啶-2-羧酸
(3,3-Difluorocyclobutyl)acetic acid (3,3-二氟環丁基)乙酸
(3-CN)F 3-氰基-L-苯基丙胺酸
(3-Fluoro)F 3-氟-L-苯基丙胺酸
(4-Fluoro)F 4-氟-L-苯基丙胺酸
5-Azaspiro[2.4]heptane-1-carboxylic acid 5-氮雜螺[2.4]庚烷-1-羧酸
D-(+)Biotin D-(+)生物素
(N,N-diMe)A L-N,N-二甲基丙胺酸
(N,N-diMe)G N,N-二甲基甘胺酸
(N-Isopropyl-N-methylamino)acetyl 2-(N-異丙基-N-甲基胺基)乙酸
((N-Me)A) L-N-甲基丙胺酸
((N-Me)a) D-N-甲基丙胺酸
((N-Me)C) L-N-甲基半胱胺酸
(N-Me)F L-N-甲基苯基丙胺酸
(N-Me)G N-甲基-甘胺酸
(N-Me)I L-N-甲基異白胺酸
(N-Ph)G N-苯基甘胺酸
(R)-3-Aminoadipic acid (R)-3-胺基己二酸
(R)-4-Amino-6-methylheptanoic acid (R)-4-胺基-6-甲基庚酸
(R)-Piperidine-3-Carboxylic Acid (R)-哌啶-3-羧酸
(R)-Pyrrolidine-3-Carboxylic Acid (R)-吡咯啶-3-羧酸
(S)-(1-Piperidin-3-yl)-acetic acid (S)-(1-哌啶-3-基)-乙酸
(S)-2-Amino-3-ethyl-pentanoic acid (S)-2-胺基-3-乙基-戊酸
(S)-3-(1-Pyrrolidine-2-yl)-propionic acid (S)-3-(1-吡咯啶-2-基)-丙酸
(S)-3-(2H-Tetrazol-5-yl)propionic acid (S)-3-(2H-四唑-5-基)丙酸
(S)-3-Methylpentanoic acid (S)-3-甲基戊酸
(S)-4-Piperazine-2-carboxylic acid (S)-4-哌𠯤-2-羧酸
(S)-Piperidine-3-carboxylic acid (S)-哌啶-3-羧酸
(S)-Pyrrolidine-3-carboxylic acid (S)-吡咯啶-3-羧酸
[(2R)-4,4-Difluoropyrrolidin-2-yl]acetic acid [(2R)-4,4-二氟吡咯啶-2-基]乙酸
[(6S)-5-Azaspiro[2.4]hept-6-yl]acetic [(6S)-5-氮雜螺[2.4庚-6-基]乙酸
1,1-Dioxidotetrahydro-2H-thiopyran-4-yl)acetic acid 1,1-二氧離子基四氫-2H-硫吡喃-4-基)乙酸
1-Nal L-1-萘基丙胺酸
2-(3-Pyridyl)acetic acid 2-(3-吡啶基)乙酸
2-(Aminomethyl)benzoic acid 2-(胺基甲基)苯甲酸
2-(Cyclohexylamino)acetyl 2-(環己基胺基)乙酸
2-(Diethylamino)acetyl 2-(二乙基胺基)乙酸
2-(Morpholine)acetyl 2-(嗎福啉)乙酸
2-(N-Methyl-N-cyclopropylamino)acetyl 2-(N-甲基-N-環丙基胺基)乙酸
2-(Piperidin)acetyl 2-(哌啶)乙酸
2-(Pyrrolidine)acetyl 2-(吡咯啶)乙酸
2-(Thian-4-yl)acetic acid 2-(硫雜環己烷-4-基)乙酸
2-(Thiomorpholine)acetyl 2-(硫嗎福啉)乙酸
(2,3-Difluoro)F 2,3-二氟-L-苯基丙胺酸
2-aminobenzoic acid 2-胺基苯甲酸
2-Azaspiro[3.3]heptane-6-carboxylic acid 2-氮雜螺[3.3]庚烷-6-羧酸
(2-Bromo)F L-2-溴苯基丙胺酸
(2-Chloro)F 2-氯-L-苯基丙胺酸
2-Cyanobenzoic acid 2-氰基苯甲酸
2-Fluorobenzoic acid 2-氟苯甲酸
2-Hydroxyacetyl 2-羥基乙酸
2-Hydroxyisobutyric 2-羥基異丁酸
2-Methylbenzoic acid 2-甲基苯甲酸
(2-Me)F 2-甲基-L-苯基丙胺酸
2-Nal L-2-萘基丙胺酸
2-Pal L-2-吡啶基丙胺酸
beta-homo-P (2S)-吡咯啶-2-基乙酸
3-(2-Oxoimidazolidin-1-yl)benzoic acid 3-(2-側氧基咪唑啶-1-基)苯甲酸
3-(3-Oxo-1,3,4,5,6,7-hexahydro-2H-indazol-2-yl)benzoic acid 3-(3-側氧基-1,3,4,5,6,7-六氫-2H-吲唑-2-基)苯甲酸
3-(Aminomethyl)benzoic acid 3-(胺基甲基)苯甲酸
3-(Isobutyrylamino)benzoic acid 3-(異丁醯基胺基)苯甲酸
3-(Trifluoromethyl)bicyclo[1.1.1]pent-1-yl]acetic acid 3-(三氟甲基)雙環[1.1.1]戊-1-基]乙酸
3-[(E)-(2-carboxycyclohexen-1-yl)azo]benzoic acid 3-[(E)-(2-羧基環己烯1-基)偶氮]苯甲酸
3-Acetamidobenzoic acid 3-乙醯胺基苯甲酸
3-Amino-2,2-dimethylpropionic acid 3-胺基-2,2-二甲基丙酸
3-Amino-3-methylbutyric acid 3-胺基-3-甲基丁酸
3-Aminobenzoic acid 3-胺基苯甲酸
3-Aminomethylphenylacetic acid 3-胺基甲基苯基乙酸
(3-Bromo)F L-3-溴苯基丙胺酸
3-Carboxybenzoic acid 3-羧基苯甲酸
(3-Chloro)F 3-氯-L-苯基丙胺酸
(3-Chloro-Ph)G 3-氯苯基甘胺酸
3-Cyanobenzoic acid 3-氰基苯甲酸
3-Fluorobenzoic acid 3-氟苯甲酸
(3-Me)F 3-甲基-L-苯基丙胺酸
3-Methoxypropionic acid 3-甲氧基丙酸
3-methylbenzoic acid 3-甲基苯甲酸
3-Pal L-3-吡啶基丙胺酸
4-(Aminomethyl)benzoic acid 4-(胺基甲基)苯甲酸
4-Aminobenzoic acid 4-胺基苯甲酸
4-Aminomethylphenylacetic acid 4-胺基甲基苯基乙酸
(4-Amino)F L-4-胺基苯基丙胺酸
(4-Bromo)F L-4-溴苯基丙胺酸
4-Carboxybenzoic acid 4-羧基苯甲酸
4-Cyanobenzoic acid 4-氰基苯甲酸
4-Fluorobenzoic acid 4-氟苯甲酸
(4-Fluoro)L 4-氟-L-白胺酸
4-Methyl-3-oxo-3,4-dihydro-2H-1,4-benzoxazine-8-carboxylic acid 4-甲基-3-側氧基-3,4-二氫-2H-1,4-苯并㗁𠯤-8-羧酸
4-methylbenzoic acid 4-甲基苯甲酸
4-Methylvaleric 4-甲基戊酸
4-Pal L-4-吡啶基丙胺酸
4-Piperidinepropanoic acid 4-哌啶丙酸
4-Tetrahydropyranoyl 4-四氫吡喃甲醯基
5-Chloro噻吩e-2-carboxylic acid 5-氯噻吩-2-羧酸
8-aminocubane-1-carboxylic acid 8-胺基立方烷-1-羧酸
AAD (S)-2-(胺基)-1,6-己烷二酸
Abu L-2-胺基丁酸
ACBA 1-胺基環丁烷-1-羧酸
ACBC 胺基環丁烷羧酸
ACMP 1-(胺基甲基)-環丙基-1-羧酸
S,S-ACPC (1S,2S)-2-胺基-1-環戊烷羧酸
R,R-ACPC (1R,2R)-2-胺基-1-環戊烷羧酸
ACPC rel-(1R,2S)-2-胺基-1-環戊烷羧酸
Adipic acid 己二酸
Ahx 6-胺基己酸
Aib 2-胺基異丁酸
(tBu)A L-第三丁基丙胺酸
allo-I 別-L-異白胺酸
allo-T 別-L-蘇胺酸
(2-Me)P 2-甲基-L-脯胺酸
(Me)R N(5)-甲基-L-精胺酸
Azetidine-2-carboxylic acid (S)-氮雜環丁烷-2-羧酸
Benzoic 苯甲酸
beta-2-thienylalanine L-2-噻吩基丙胺酸
beta-A β-丙胺酸
4-(3,5-Dimethyl-1,2-oxazol-4-yl)-L-phenylalanine 4-(3,5-二甲基-1,2-㗁唑-4-基)-L-苯基丙胺酸
(2S)-2-amino-3-(4-tert-butylphenyl)propanoic acid (2S)-2-胺基-3-(4-第三丁基苯基)丙酸
(2S)-2-Amino-5-methyl-己烷oic acid (2S)-2-胺基-5-甲基-己酸
(2S)-2-Amino-4,4,4-trifluorobutanoic acid (2S)-2-胺基-4,4,4-三氟丁酸
(2S)-3-(4-carboxyphenyl)-2-aminopropanoic acid (2S)-3-(4-羧基苯基)-2-胺基丙酸
(2S)-2-amino-3-(4-carbamoylphenyl)propanoic acid (2S)-2-胺基-3-(4-胺甲醯基苯基)丙酸
(2S)-2-Amino-3-(2,3,4,5,6-(pentafluorophenyl)propanoic acid (2S)-2-胺基-3-(2,3,4,5,6-(五氟苯基)丙酸
(2S)-3-(3-Cyanophenyl)-2-aminopropanoic acid (2S)-3-(3-氰基苯基)-2-胺基丙酸
3-Azido-L-Alanine 3-疊氮基-L-丙胺酸
2-Amino-5,5,5-trifluoro-4-methyl-pentanoic acid 2-胺基-5,5,5-三氟-4-甲基-戊酸
(1S,2S,5R)-3-azabicyclo[3.1.0]己烷e-2-carboxylic acid (1S,2S,5R)-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-羧酸
Cba L-環丁基丙胺酸
Cbg (S)-2-胺基-2-環丁基乙酸
Cha L-環己基丙胺酸
Cha D-環己基丙胺酸
Chg L-環己基甘胺酸
(Difluoro)P L-4,4-二氟脯胺酸
(cis-Fluoro)P (2S,4S)-4-氟脯胺酸
Cit L-瓜胺酸
Cnba L-2-胺基-4-氰基丁酸
3,3-dimethyl-1,3-azasilolidine-5-carboxylic acid 3,3-二甲基-1,3-氮雜矽雜環戊烷-5-羧酸
(S)-(trifluoromethyl)-L-cysteine (S)-(三氟甲基)-L-半胱胺酸
 (2S)-2-amino-3-(1-methylcyclopropyl)propanoic acid (2S)-2-胺基-3-(1-甲基環丙基)丙酸
(2S)-3-(indol-4-yl)-2-(amino)propanoic acid (2S)-3-(吲哚-4-基)-2-(胺基)丙酸
(2S)-3-(2,3-difluorophenyl)-2-aminopropanoic acid (2S)-3-(2,3-二氟苯基)-2-胺基丙酸
CpA L-環戊基丙胺酸
Cpg L-環戊基甘胺酸
Cyclobutanecarboxylic 環丁烷羧酸
Cyclobutylacetic 2-(環丁基)乙酸
Cyclobutylglycine L-環丁基甘胺酸
Cyclohexylacetic 環己基乙酸
Cyclopentanecarboxylic acid 環戊烷羧酸
Cyclopentylacetic 環戊基乙酸
Cyclopropanecarboxylic 環丙烷羧酸
Cyclopropylacetic acid 環丙基乙酸
(2-Chloro)f D-2-氯苯基丙胺酸
Dab L-2,4-二胺基丁酸
Dap L-2,3-二胺基丙酸
beta-p D-β-脯胺酸
hyp D-羥基脯胺酸
(N-Benzyl)D (2S)-2-胺基-4-(苯甲基胺基)-4-側氧基丁烷羧酸
弗瑞丁格氏內醯胺(Freidinger’s Lactam) (2S)-2-[(3R)-3-胺基-2-側氧基吡咯啶-1-基]-4-甲基戊酸
Fumaric acid 富馬酸
Gamma-Abu γ-胺基丁酸
(tBu)G L-第三丁基甘胺酸
(1-Bn)H 1-苯甲基-L-組胺酸
(1-Me)H 1-甲基-L-組胺酸
(3-Me)H L-3-甲基組胺酸
Homo-C L-高碳半胱胺酸
Hoo L-二氫乳清酸
Hydrocinnamic 3-苯基丙酸
Hyp L-羥基脯胺酸
Ida 亞胺基二乙酸
Isobutyric acid 異丁酸
Isonipecotic acid 異哌啶酸
Isovaleric 異戊酸
K(ISP) N-e-異丙基-L-離胺酸
(3-Et)Nva 3-乙基-L-正纈胺酸
Lactic L-(+)-乳酸
(Bth)A 3-(1,3-苯并噻唑-2-基)-L-丙胺酸
beta-P (S)-吡咯啶-2-羧酸
L-Propargylglycine L-炔丙基甘胺酸
Morpholine-3-carboxylic (3S)-嗎福啉-3-羧酸
Nicotinic acid 菸酸
Nle L-正白胺酸
(N-Me)P N-甲基-L-脯胺酸
Nva L-正纈胺酸
ODD 1,18-十八烷二酸
Oic  2,3,3a,4,5,6,7,7a-八氫吲哚-2-羧酸
Orn L-鳥胺酸
Palm 棕櫚酸
PEG1(10個原子) 9-胺基-4,7-二氧雜壬酸
PEG2(13個原子) 12-胺基-4,7,10-三氧雜十二烷酸
PEG3(16個原子) 15-胺基-4,7,10,13-四氧雜十五烷酸
PEG4(19個原子) 18-胺基-4,7,10,13,16-五氧雜((Pen)taoxa)十八烷酸
PEG4-CH2CO2H (15個原子) 14-胺基-3,6,9,12-四氧雜十四烷酸
PEG5(22個原子) 1-胺基-3,6,9,12,15,18-六氧雜二十一烷-21-酸
PEG5-CH2CO2H (18個原子) 17-胺基-3,6,9,12,15-五氧雜十七烷酸
PEG7(25個原子) 1-胺基-3,6,9,12,15,18,21-七氧雜二十四烷-24-酸
PEG8(28個原子) 1-胺基-3,6,9,12,15,18,21,24-八氧雜二十七烷-27-酸
PEG9(31個原子) 1-胺基-3,6,9,12,15,18,21,24,27-九氧雜三十烷-30-酸
Pen L-青黴胺
Phenylacetic acid 苯基乙酸
Phg L-苯基甘胺酸
Picolinic acid 吡啶甲酸
Pip L-哌啶甲酸
Piperidin-4-ylacetic acid 哌啶-4-基乙酸
Pivalic 特戊酸
(3S-OH)P L-反式-3-羥基脯胺酸
Pyr L-焦麩胺酸
S-2-amino-3-ethyl-pentanoic acid S-2-胺基-3-乙基-戊酸
Pyrrolidineacetyl 2-(吡咯啶-1-基)乙酸
S-3-1-Pyrrolidin-2-yl-propionic acid S-3-1-吡咯啶-2-基-丙酸
Suberic acid 辛二酸
tert-Butylacetic acid 第三丁基乙酸
Tetrahydropyranyl-4-acetic acid 四氫吡喃基-4-乙酸
TFA 三氟乙酸
Thi L-2-噻吩基丙胺酸
(2S,3S)-2-[(3R)-3-Amino-2-oxopyrrolidin-1-yl]-3-methylpentanoic acid (2S,3S)-2-[(3R)-3-胺基-2-側氧基吡咯啶-1-基]-3-甲基戊酸
(2S,3S)-2-[2-Oxopiperazin-1-yl]-3-methylpentanoic acid (2S,3S)-2-[2-側氧基哌𠯤-1-基]-3-甲基戊酸
(2S,3S)-2-[(3S)-2-oxopiperazin-1-yl]-3-methylpentanoic acid (2S,3S)-2-[(3S)-2-側氧基哌𠯤-1-基]-3-甲基戊酸
(1R,3S,5R)-2-Azabicyclo[3.1.0]己烷e-3-carboxylic acid (1R,3S,5R)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-羧酸
3-(Trimethylsilyl)-L-alanine 3-(三甲基矽烷基)-L-丙胺酸
(6S)-5-Azaspiro[2.4]heptane-6-carboxylic acid (6S)-5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-羧酸
rel-(1R,3R,5R,6R)-6-(Trifluoromethyl)-2-azabicyclo[3.1.0]己烷e-3-carboxylic acid rel-(1R,3R,5R,6R)-6-(三氟甲基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-羧酸
(4aR,6aR,9S,11aS)-11-Oxo-2,3,4,4a,6a,7,8,9,11,11a-decahydro-1H-pyrido[3,2-e]pyrrolo[1,2-a]azepine-9-carboxylic acid (4aR,6aR,9S,11aS)-11-側氧基-2,3,4,4a,6a,7,8,9,11,11a-十氫-1H-吡啶并[3,2-e]吡咯并[1,2-a]氮雜環庚烯-9-羧酸
(2S)-2[(Amino)-2-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)]acetic acid (2S)-2[(胺基)-2-(四氫-2H-吡喃-4-基)]乙酸
(2S,3S)-2-((Amino)methyl)-3-methylpentanoic acid (2S,3S)-2-((胺基)甲基)-3-甲基戊酸
2-[(1S,2S)-1-(Amino)-2-methylbutyl]-1,3-oxazole-4-carboxylic acid 2-[(1S,2S)-1-(胺基)-2-甲基丁基]-1,3-㗁唑-4-羧酸
(2S)-Amino-(1-methyl-1H-indazol-5-yl)acetic acid (2S)-胺基-(1-甲基-1H-吲唑-5-基)乙酸
(2R)-Amino-(1-methyl-1H-indazol-5-yl)acetic acid (2R)-胺基-(1-甲基-1H-吲唑-5-基)乙酸
(3-Carboxy)F 3-羧基苯基丙胺酸
2-Methyl-D-alloisoleucine 2-甲基-D-別異白胺酸
4-Ethyl-L-norleucine 4-乙基-L-正白胺酸
L-2,6-Difluorophenylalanine L-2,6-二氟苯基丙胺酸
(2,5-Difluoro)F 2,5-二氟-L-苯基丙胺酸
(2S,3aS,6aS)-Octahydrocyclopenta[b]pyrrole-2-carboxylic acid (2S,3aS,6aS)-八氫環戊并[b]吡咯-2-羧酸
(2S)-2-(Amino)-2-[(1S,3R)-3-hydroxycyclohexyl]acetic acid (2S)-2-(胺基)-2-[(1S,3R)-3-羥基環己基]乙酸
(2S)-2-(Amino)-2-[(1S,3S)-3-hydroxycyclohexyl]acetic acid (2S)-2-(胺基)-2-[(1S,3S)-3-羥基環己基]乙酸
2-Amino-7-(tert-butoxy)-7-oxoheptanoic acid 2-胺基-7-(第三丁氧基)-7-側氧基庚酸
(2S)-3-(Triazol-1-yl)-2-(amino)propanoic acid (2S)-3-(三唑-1-基)-2-(胺基)丙酸
Tetrahydro-2H-pyran-3-ylacetic acid 四氫-2H-吡喃-3-基乙酸
rel-(1R,3S)-3-[(Amino)methyl]cyclo己烷ecarboxylic acid rel-(1R,3S)-3-[(胺基)甲基]環己烷羧酸
(3R,6R)-1,1-Difluoro-5-azaspiro[2.4]heptane-6-carboxylic acid (對映異構物 1) (3R,6R)-1,1-二氟-5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-羧酸(對映異構物1)
(3R,6R)-1,1-Difluoro-5-azaspiro[2.4]heptane-6-carboxylic acid (對映異構物 2) (3R,6R)-1,1-二氟-5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-羧酸(對映異構物2)
Tranexamic 傳明酸
trans-2-(3-(Amino)cyclohexyl)acetic acid 反式-2-(3-(胺基)環己基)乙酸
(trans-4-Fluoro)P 反式-4-氟脯胺酸
(Trifluoro)l/L 5,5,5-三氟-DL-白胺酸
TTDS 1,13-二胺基-4,7,10-三氧雜十三烷-琥珀醯胺酸
(R)-Pyrrolidine-3-acetic acid (R)-吡咯啶-3-乙酸
Pro-D2 L-脯胺酸(3,4-2 H) (氘化)
(2S)-2-(morpholin-4-yl)propanoic acid (2S)-2-(嗎福啉-4-基)丙酸
L-脫氫proline 3,4-去氫-L-脯胺酸
(3S)-2-azaspiro[4.4]nonane-3-carboxylic acid (3S)-2-氮雜螺[4.4]壬烷-3-羧酸
(2R)-2-amino-3-(trifluoromethylsulfanyl)propanoic acid (2R)-2-胺基-3-(三氟甲基硫烷基)丙酸
Arg(13C6,15N4) L-精胺酸-N-Fmoc，Pbf-OH (13C6, 15N4)
本文在本發明根據式(I)或式(II)肽之有些部份體之定義中，有些胺基酸所採用術語「擬似物」代表個別胺基酸擬似物，如，例如：精胺酸擬似物、異白胺酸擬似物或 脯胺酸擬似物。通常，「蛋白質擬似物」係指諸如：在生化上擬似有些其他蛋白質之作用或活性之肽、經修飾肽或任何其他分子。在某些胺基酸相關內容中使用術語「擬似物」時，該術語「擬似物」同樣係指在生化上擬似個别胺基酸之作用或活性之任何其他胺基酸、胺基酸類似物、胺基酸衍生物、胺基酸接合物，等等。
根據本發明脯胺酸擬似物特定言之包括(1S,2S,5R)-3-氮雜雙環­[3.1.0]己烷-2-羧酸、Hyp、嗎福啉-3-羧酸、Pip、(4aR,6aR,9S,11aS)-11-側氧基-2,3,4,4a,6a,7,8,9,11,11a-十氫-1H-吡啶并[3,2-e]吡咯并[1,2-a]氮雜環庚烯-9-羧酸或(trans-4-Fluoro)P、(1R,2S,5S)-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-羧酸、Oic、Hyp、(4-CF3)P、(cis-4-Fluoro)P、3,3-二甲基-1,3-氮雜矽雜環戊烷-5-羧酸、(3S-OH)P、(1R,3S,5R)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-羧酸、(6S)-5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-羧酸、rel-(1R,3R,5R,6R)-6-(三氟甲基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-羧酸、(2S,3aS,6aS)-八氫環戊并[b]吡咯-2-羧酸或二氟脯胺酸、(3R,6R)-1,1-二氟-5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-羧酸(對映異構物1)、(3R,6R)-1,1-二氟-5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-羧酸(對映異構物2)及經取代之脯胺酸。
根據本發明異白胺酸擬似物特定言之包括(N-甲基)-I、allo-Ile、Cba、Nva、Abu、Leu、Cpg、環己基-Gly、(S)-2-胺基-3-乙基-戊酸、3-Chloro-Ile、Chg、環丁基甘胺酸、allo-Ile、Cbg、(2S,3S)-2-((胺基)甲基)-3-甲基戊酸、Phg、2-[(1S,2S)-1-(胺基)-2-甲基丁基]-1,3-㗁唑-4-羧酸、2-甲基-D-別異白胺酸、Nva、Abu或Ala。
根據本發明白胺酸擬似物特定言之包括(tBu)A、(2-Chloro)F、(2-Bromo)F、AAD、(2S)-2-胺基-4,4,4-三氟丁酸、Cnba、(4-Fluoro)L、(S)-(三氟甲基)-L-半胱胺酸、(2S)-2-胺基-3-(1-甲基環丙基)丙酸、Gly(tBu)、3-(三甲基矽烷基)-L-丙胺酸、2,5-二氟-L-苯基丙胺酸、2-胺基-7-(第三丁氧基)-7-側氧基庚酸、5,5,5-三氟-L-白胺酸((Trifluoro)L)、(2-Me)F、Cba、Cpa、環丙基甲基丙胺酸、三氟甲基丙胺酸或二氟甲基丙胺酸、(2-氟)F、(2S)-3-(2,3-二氟苯基)-2-胺基丙酸、(2S)-3-(3-氰基苯基)-2-胺基丙酸、2-胺基-5,5,5-三氟-4-甲基-戊酸、(2S)-2-胺基-5-甲基-己酸或(2S)-3-(吲哚-4-基)-2-(胺基)丙酸。
本發明進一步包括所說明肽之類似物及衍生物。術語根據本發明肽或胺基酸序列之「類似物」或「衍生物」特定言之包括與該序列具有至少80%或至少85%，較佳為至少90%序列一致性，更佳係至少95%，及甚至更佳係至少99%一致性且具有相同或可比擬之性質或活性之任何胺基酸序列。序列一致性可採用常見技術決定，如：目視比對或採用此領域常用之任何電腦工具。其實例包括使用預設參數之BLAST程式。
本發明肽或胺基酸序列之類似物或衍生物可能來自本發明肽之序列因突變或變異所衍生的變化，包括缺失或插入一個或多個胺基酸或取代一個或多個胺基酸，或甚至交替剪接。可能組合數種此等修飾。較佳者，本發明胺基酸序列之類似物包含相對於胺基酸序列之保留性取代。
本文所採用術語「保留性取代」係指一或多個胺基酸被另一個生物上類似之殘基置換。其實例包括利用類似特徵之胺基酸殘基取代，例如：小型胺基酸、酸性胺基酸、極性胺基酸、鹼性胺基酸、疏水性胺基酸及芳香系胺基酸。參見例如：下表4之列表，其中胺基酸之保留性取代係利用物化特性分類。I：中性，親水性；II：酸類及醯胺類；III：鹼性；IV：疏水性；V：芳香系，大型胺基酸；VI：中性或疏水性；VII：酸性；VIII：極性。 表4：根據其物化特性分類之胺基酸
I II III IV V VI VII VIII
Ala Asn His Met Phe Ala Glu Met
Ser Asp Arg Leu Tyr Leu Asp Ser
Thr Glu Lys Ile Trp Ile   Thr
Pro Gln   Val   Pro   Cys
Gly     Cys   Gly   Asn
          Val   Gln
肽類似物或衍生物亦可包含一或多種額外修飾，如，例如：接合另一種化合物，形成胺基酸接合物。
此等修飾可能改由或額外由與本發明肽中一或多個胺基酸殘基之側鏈接合產生，例如：化學基團 X0 之相關說明中之如上述定義之化學基團或聚合性部份體，如： PEG基團。此等修飾可能例如：提高溶解性及/或延長活體內(例如：血漿中)半衰期及/或肽之生體可用率，且亦已知會降低醫療性蛋白質與肽之清除率(例如：腎清除率)。合適之修飾係相關技藝中具有通常知識者已知，且特定言之包括(但不限於)：本發明肽之一或多個側鏈之PEG基化。其中「PEG基化」代表聚乙二醇(PEG)結構與本發明肽之偶合(例如：共價)。相關技藝中具有通常知識者從例如：WO 2015/200916 A1中得知可能與小型肽之胺基酸側鏈接合形成個別接合物之PEG，其內容已以引用方式併入本文中。
本發明所有肽除非另有其他說明，否則為TFA鹽。本發明進一步包含如本文所定義肽之醫藥上可接受之鹽及鹽游離型。其中，醫藥上可接受之鹽代表可溶解或勻散於水或油中之本發明肽或化合物之鹽型或兩性離子型，其等適合治療疾病，沒有不當毒性、刺激性、與過敏反應；符合合理之效益/風險比值，且其等可有效用於計畫用途。該鹽可在化合物最終單離及純化期間製備，或可另外由胺基與合適酸反應製備。代表性酸加成鹽包括乙酸鹽、己二酸鹽、藻酸鹽、檸檬酸鹽、天冬胺酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、硫酸氫鹽、丁酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽、碳酸鹽、二葡糖酸鹽、甘油磷酸鹽、半硫酸鹽、庚酸鹽、己酸鹽、甲酸鹽、富馬酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、2-羥基乙磺酸鹽(isethionate)、乳酸鹽、馬來酸鹽、均三甲苯基磺酸鹽、甲磺酸鹽、萘磺酸鹽、菸酸鹽、2-萘磺酸鹽、草酸鹽、羥基萘酸鹽、果膠酸鹽、過硫酸鹽、3-苯基丙酸鹽、苦味酸鹽、特戊酸鹽、丙酸鹽、琥珀酸鹽、硫酸鹽、酒石酸鹽、三氯乙酸鹽、三氟乙酸鹽、磷酸鹽、麩胺酸鹽、碳酸氫鹽、對甲苯磺酸鹽、及十一烷酸鹽。較佳酸加成鹽包括三氟乙酸鹽、甲酸鹽、鹽酸鹽、及乙酸鹽。
此外，本發明化合物之胺基可經過甲基、乙基、丙基、與丁基之氯化物、溴化物及碘化物；二甲基、二乙基、二丁基、與二戊基之硫酸酯；癸基、月桂基、肉豆蔻基、與硬脂基之氯化物、溴化物及碘化物；及苯甲基與苯乙基之溴化物進行四級化。可用於形成醫療上可接受之加成鹽之酸類實例包括無機酸，如：鹽酸、氫溴酸、硫酸、與磷酸，及有機酸，如：草酸、馬來酸、琥珀酸、與檸檬酸。醫藥上可接受之鹽適合為選自例如：酸加成鹽與鹼性鹽中之鹽。酸加成鹽實例包括氯化物鹽、檸檬酸鹽及乙酸鹽。
鹼性鹽實例包括其中陽離子選自鹼金屬陽離子之鹽，如：鈉或鉀離子，鹼土金屬陽離子之鹽，如：鈣或鎂離子，及經取代之銨離子之鹽，如：N(R1 )(R2 )(R3 )(R4 )+ 型離子，其中R1 、R2 、R3 及R4 彼此分別獨立為氫、視需要經取代之C1-6 -烷基、或視需要經取代之C2‑6 -烯基。相關C1-6 -烷基實例包括甲基、乙基、1-丙基及2-丙基。可能相關之C2-6 -烯基實例包括乙烯基、1-丙烯基、及2-丙烯基。其中以選自鈉、鉀及鈣之陽離子之鹽較佳。
其他醫藥上可接受之鹽類實例說明於「Remington's Pharmaceutical Sciences 」，第17版， Alfonso R. Gennaro ( 編輯 ), Mark Publishing Company, Easton, PA, USA, 1985 (及其較新版本)、「Encyclopaedia of Pharmaceutical Technology 」，第3版， James Swarbrick ( 編輯 ), Informa Healthcare USA (Inc.), NY, USA, 2007 中。此外，有關合適鹽類之概述可參見Stahl與Wermuth之Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use (Wiley- VCH, 2002) 。其他合適鹼鹽為由鹼類形成之無毒性鹽。代表性實例包括鋁、精胺酸、芐乙二胺(benzathine)、鈣、膽鹼、二乙基胺、二乙醇胺、甘胺酸、離胺酸、鎂、葡甲胺、乙醇胺(olamine)、鉀、鈉、三羥甲基胺(tromethamine)、與鋅等鹽類，較佳為膽鹼。亦可能形成酸與鹼之半鹽類，例如：半硫酸鹽與半鈣鹽。
本發明進一步包括如本文所定義肽之溶劑合物。其中術語「溶劑合物」係指溶質(例如：根據本發明肽或其醫藥上可接受之鹽)與溶劑之間形成之限定化學計量之複合物。此相關溶劑可能為例如：水、乙醇或另一種醫藥上接受，通常為小分子之有機物質，如(但不限於)：乙酸或乳酸。當該溶劑為水時，此等溶劑合物通常稱為水合物。
根據本發明化合物具有適用之藥理性質，可用於預防及治療人類與動物之疾病。
本發明內容中，術語「治療」或「處理」包括抑制、延遲、遏止、減輕、減弱、限制、降低、壓制、逆轉或治癒疾病、病症、疾病、損傷或健康衰弱、或此等狀態與/或此等狀態之症狀之發展、過程或演進。咸了解，術語「療法」係術語「治療」之同義字。
本發明內容中，術語「預防」、「防止」或「防範」係以同義字使用，並意指避免或降低染上、經歷、罹患或患有疾病、病症、疾病、損傷或健康衰弱、或此等狀態與/或此等狀態之症狀之發展、過程或演進之風險。
可能部份或完全治療或預防疾病、病症、疾病、損傷或健康衰弱。
根據本發明化合物特別適合治療及/或預防心血管、心肺、腎、肺部、纖維化、血栓性栓塞、及發炎疾病。
因此，據本發明化合物可用於治療及/或預防下列心血管與心肺疾病及其後遺症之醫藥，如，例如：發炎心臟疾病、心肌炎、心內膜炎、心包膜炎、涉及心臟及未涉及心臟之風濕熱、急性風濕性心包膜炎、急性風濕性心內膜炎、急性風濕性心肌炎、出現及未出現心內膜炎之慢性風濕性心臟疾病、心臟瓣膜炎、心包膜炎、缺血性心臟疾病(如：不穩定狹心症及急性心肌梗塞)、心房及心室心律不整及傳導受阻，如，例如：第 I-III級房室傳導阻滯、心室以上心跳過快、心房纖維性顫動、心房撲動、心室纖維性顫動、心室撲動、心室心跳過快、尖端扭轉型室速心跳過快、心房及心室期外收縮、AV-聯結性期外收縮、病竇症候群、因腦動脈阻塞及狹窄造成之中風(繼例如：血栓性栓塞、動脈粥樣硬化、感染及發炎血管病灶之後之腦梗塞)，治療及/或預防腦內或臚內出血造成之中風、因動脈、小動脈及毛血管疾病(例如：血栓性栓塞、動脈粥樣硬化、感染及發炎血管病灶、變形性或閉塞性動脈內膜炎、及動脈瘤剝離)造成之末梢缺血性組織傷害(例如：動脈粥樣硬化壞疽)、靜脈炎及血栓性靜脈炎，供預防循環系統之手術後疾病，例如：全身性發炎反應症候群、手術後血管麻痺、心臟切開術後症候群、手術後高血壓及心臟衰竭，供預防治療在例如：血栓溶解療法、經皮穿腔血管成形術(PTA)、經皮穿腔冠狀動脈血管成形術(PTCA)、繞道手術及心、肺、肝及腎臟移植後之缺血再灌流損傷及器官功能障礙，及供預防及治療腎臟移植後之移植物功能延遲。
根據本發明化合物亦可藉由預防MASP所介導最終器官傷害，而適合治療休克，如：心因性休克、敗血性休克及過敏性休克。
此外，根據本發明化合物具有抗發炎作用，因此可用為消炎劑，供治療及/或預防敗血病(SIRS)、多重器官衰竭(MODS、MOF)、腎臟病之發炎疾病、慢性腸部發炎(IBD，克隆氏症(Crohn´s Disease)，UC)、胰臟炎、腹膜炎、類風濕疾病、發炎性皮膚疾病及發炎性眼睛疾病。
根據本發明化合物基於其活性型態，特別適合治療及/或預防敗血病及全身性發炎反應症候群之心血管、肺、腦及腎臟之後遺症。
根據本發明化合物特別適合在復甦及手術干預 ，如(但不限於)：繞道手術、心臟辦膜手術、及主動脈瘤手術上，治療及/或預防心臟及腎臟及其他器官之與缺血及/或再灌流相關之傷害。
根據本發明化合物亦可用於預防器官或組織之缺血及/或再灌流相關傷害，亦可在手術干預及移植醫學領域上，作為來自人類或動物之器官、部份器官、組織或部份組織之灌流及保存溶液。
此外，根據本發明化合物適合治療及/或預防血液與血液形成器官及免疫系統之疾病 ，包括(但不限於)：後天溶血性貧血、溶血性-尿毒症症候群、陣發性夜間血紅素尿症[爾基亞法-米凱利症(Marchiafava-Micheli)]、凝血缺陷、紫斑症及其他出血病症、瀰漫性血管內凝血[脫纖維蛋白化症候群]、本態性(出血性)血小板增多症、猛爆性紫斑症、血栓性血小板減少紫斑症、過敏性紫斑症、過敏性脈管炎、淋巴球減少症及粒性白細胞增多症、及類肉瘤病。
此外，根據本發明化合物適合治療及/或預防糖尿病後遺症，如：糖尿病之腎併發症、糖尿病性腎病變、毛細血管內腎絲球腎病、糖尿病之眼睛併發症、糖尿病性視網膜病變、神經併發症、糖尿病性多發性神經病變、及循環併發症，如：微血管病變及壞疽。
此外，根據本發明化合物適合治療及/或預防神經系統發炎疾病 ，如：多發性硬化、腦膜炎及腦炎、細菌性與病毒性腦膜炎及腦炎、免疫接種後腦炎、發炎性多發性神經病變、及感染與寄生蟲疾病之多發性神經病變。
根據本發明化合物進一步適合治療及/或預防眼睛及其附屬器之疾病，如：急性與亞急性虹膜睫狀體炎、脈絡膜退化、脈絡膜視網膜發炎、感染與寄生蟲疾病之脈絡膜視網膜發炎、背景視網膜病變及視網膜血管變化、增生性視網膜病變、黃斑部與後眼極部退化、周邊視網膜退化、老年性黃斑部退化(AMD)，包括乾性(非滲液性)與濕性(滲液性、新生血管)AMD、脈絡膜新生血管(CNV)、脈絡膜新生血管膜(CNVM)、黃斑囊樣水腫(CME)、視網膜前膜(ERM)及黃斑部裂孔、近視相關之脈絡膜新生血管、血管樣與血管條紋、視網膜剝離、糖尿病性視網膜病變、糖尿病性黃斑部水腫(DME)、視網膜色素上皮中之萎縮及肥大病灶、視網膜靜脈阻塞、脈絡膜視網膜靜脈阻塞、黃斑部水腫、與視網膜靜脈阻塞相關之黃斑部水腫、眼睛與附屬器之手術後疾病，例如：白內障手術後之角膜病變。
此外，根據本發明化合物適合治療及/或預防呼吸系統疾病，包括(但不限於)：病毒、細菌、及真菌性肺炎、放射性肺炎腫、塵肺症、過敏性肺泡炎、因特定有機塵灰造成之呼吸道疾病，例如：農夫肺、支氣管炎、因化學物質、氣體、燻煙與蒸氣造成之肺炎腫及肺水腫、藥物誘發之間質性肺疾病、成人呼吸窘迫症候群(ARDS)及急性肺損傷(ALI)、急性肺水腫、出現纖維化之間質性肺病、類風濕肺病、其他瀰漫性結締組織疾病之呼吸疾病，如：與全身紅斑性狼瘡、硬皮症及韋格納肉芽腫(Wegener granulomatosis)相關者。
此外，根據本發明化合物適合治療及/或預防消化系統疾病，包括(但不限於)：非感染性腸炎及結腸炎，如：克隆氏症(Crohn disease)及潰瘍性結腸炎、胰臟炎(包括急性酒精-及藥物誘發之胰臟炎)、膽囊炎、發炎性肝病、肝腎症候群、肝臟之手術後疾病，例如：肝臟手術後。
根據本發明化合物基於其活性型態，特別適合治療及/或預防泌尿系統疾病，包括(但不限於)：急性腎衰竭、急性腎臟損傷(AKI)、手術相關之AKI、敗血病相關之AKI、顯影劑與化療法誘發之AKI、腎臟之缺血與梗塞、如：血液透析及血液透析過濾背景下之過敏之併發症、膀胱炎、放射線性膀胱炎、攝護腺之發炎疾病、及子宮內膜異位症。
根據本發明化合物亦適合治療及/或預防燒傷及受傷之後遺症，包括(但不限於)：創傷之早期併發症、創傷性無尿、擠壓傷症候群、擠壓傷後之腎衰竭、肌肉之創傷性缺血、創傷性腦損傷、曝露到電流、放射線及極度環境空氣溫度與壓力後、曝露到煙霧、火、與火焰後、接觸到有毒動物與植物後之器官傷害。
根據本發明化合物基於其活性型態，進一步適合治療發炎性皮膚疾病，例如：皮膚紅斑狼瘡、水皰疾病及表皮崩解性皮膚疾病，如： 天疱瘡亞型、丘疹鱗屑性疾病，如：乾癬、皮膚炎與疹、蕁麻疹及紅斑。
根據另一項實施例，本發明提供一種化合物，其包含可經過單離及/或純化且包含、基本上組成為、或組成為式(I)或式(II)之肽或衍生物、前藥、類似物或醫藥上可接受之鹽或溶劑合物，用於預防及/或治療疾病。
根據另一項實施例，本發明提供一種化合物，其包含可經過單離及/或純化且包含、基本上組成為、或組成為式(I)或式(II)之肽或衍生物、前藥、類似物或醫藥上可接受之鹽或溶劑合物，用於預防及/或治療MASP-相關之疾病。
根據另一項實施例，本發明提供一種化合物，其包含可經過單離及/或純化且包含、基本上組成為、或組成為式(I)或式(II)之肽或衍生物、前藥、類似物、醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或鹽之溶劑合物，其作用係作為MASP-1及/或MASP-2抑制劑及/或其抑制C3沉積，用於預防及/或治療MASP-相關之疾病。
根據另一項實施例，本發明提供一種化合物，其包含可經過單離及/或純化且包含、基本上組成為、或組成為式(I)或式(II)之肽或其衍生物、前藥、類似物或醫藥上可接受之鹽或溶劑合物，用於預防及/或治療心血管及心肺疾病、休克、發炎疾病、敗血病之心血管、肺、腦及腎後遺症、缺血及/或再灌流相關傷害、急性腎損傷、保護移植物及移植物功能延遲、血液與血液形成器官及免疫系統之疾病、糖尿病後遺症、神經系統發炎疾病、眼睛疾病、皮膚疾病、呼吸、消化道或生殖泌尿系統疾病、及燒傷與受傷之後遺症。
根據另一項實施例，本發明提供一種化合物，其包含可經過單離及/或純化且包含、基本上組成為、或組成為式(I)或式(II)之肽或其衍生物、前藥、類似物或醫藥上可接受之鹽或溶劑合物，其係用於預防及/或治療泌尿系統疾病系統，包括(但不限於)：急性腎衰竭、急性腎臟損傷(AKI)、手術相關之AKI、敗血病相關之AKI、顯影劑與化療法誘發之AKI、腎臟之缺血與梗塞、如：血液透析及血液透析過濾背景下之過敏之併發症、膀胱炎、放射線性膀胱炎、攝護腺之發炎疾病、及子宮內膜異位症。
本發明進一步有關一種治療或緩解受試者或患者之如上述定義MASP-相關之疾病之方法，其係對該有需要之受試者或患者投與至少一種本文所定義之肽、衍生物或類似物或其醫藥上可接受之鹽或溶劑合物、如上述定義之複合物、或醫藥組成物。
本文所採用術語「患者」、「受試者」或「個體」可能交換使用，且係指人類或非人類動物。此等術語包括哺乳動物，如：人類、靈長類、牲畜動物(例如：牛、豬)、寵物動物(例如：狗、貓)及囓齒類(例如：小鼠及大鼠)。術語「哺乳動物」係指任何哺乳動物物種，如：人類、小鼠、大鼠、狗、貓、倉鼠、天竺鼠、兔、牲畜，及類似物。
根據本發明至少一種如本文所定義之肽、衍生物或類似物或其醫藥上可接受之鹽或溶劑合物、或如上述定義之複合物係以醫療有效量投與患者或受試者，其中本發明化合物之「醫療有效量」意在說明足以治療如本文所定義MASP-相關之疾病時之本發明化合物用量。特定實施例中，醫療有效量將可以達成適用於任何醫學處理之所需效益/風險比值。
本發明特別包括下列實施例，其中根據下文所定義式(I)或式(II)之肽之取代基或部份體可以分別獨立具有下文說明之定義。
如本文所定義之肽或包含肽、或其衍生物或類似物之化合物或其醫藥上可接受之鹽或溶劑合物或複合物或醫藥組成物(如下文定義)在下文中亦統稱為「本發明MASP抑制性肽」。
有些實施例中，本發明MASP抑制性肽會結合MASP-1及/或MASP-2，例如：人類MASP-1及/或MASP-2。某些實施例中，本發明MASP抑制性肽特異性結合人類MASP-1及/或MASP-2。本文所採用「特異性結合」係指特異性結合劑會比其他製劑優先與樣本中指定配體交互作用。例如：特異性結合指定配體之特異性結合劑會在適當條件下與指定配體結合，其可觀察到之結合量或結合程度高於與樣本中其他組份之任何非特異性交互作用。合適之條件為彼等容許指定之特異性結合劑與指定之配體之間交互作用之條件。此等條件包括pH、溫度、濃度、溶劑、培養時間、及類似條件，且可能隨指定特異性結合劑及配對配體之間不同，但很容易由彼等相關技藝中具有通常知識者決定。有些實施例中，本發明MASP抑制性肽與MASP-1及/或MASP-2結合之特異性高於MASP抑制性肽參考化合物(例如：本文所提供任何一種MASP抑制性肽參考化合物)。
因此本發明進一步有關一種複合物，其包含會與MASP-1或MASP-2結合之如本文所定義至少一種肽或包含肽、衍生物或類似物之化合物。
有些實施例中，本發明MASP抑制性肽對MASP-1及/或MASP-2，尤指人類MASP-1及/或MASP-2之特異結合性比所選擇MASP抑制性肽參考化合物提高至少約10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、100%、200%、300%、400%、500%、700%、1000%、或10000%。
有些實施例中，本發明MASP抑制性肽對MASP-1及/或MASP-2，尤指人類MASP-1及/或MASP-2之特異結合性比所選擇MASP抑制性肽參考化合物提高至少約1、2、3、4、5倍，或至少約10、20、50、或100倍。
有些實施例中，本發明MASP抑制性肽對MASP-1及/或MASP-2之結合親和性比所選擇MASP抑制性肽參考化合物提高至少約10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、100%、200%、300%、400%、500%、700%、1000%、或10000%。
有些實施例中，本發明MASP抑制性肽對MASP-1及/或MASP-2之結合親和性比所選擇MASP抑制性肽參考化合物提高至少約1、2、3、4、5倍，或至少約10、20、50、100或1000倍。
有些實施例中，本發明MASP抑制性肽具有抑制 MASP-1及/或MASP-2 (例如：大鼠或人類MASP-1及/或MASP-2)之活性。有些實施例中，該活性為活體外或活體內活性，例如：本文所說明活體外或活體內活性。有些實施例中，本發明MASP抑制性肽對MASP-1及/或MASP-2 活性之抑制性為所選擇MASP抑制性肽參考化合物之至少約10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、100%、200%、300%、400%、500%、700%、1000%、或10000%。
某些實施例中，本發明MASP抑制性肽對MASP-1及/或MASP-2 之抑制性比所選擇MASP抑制性肽參考化合物高1.5、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、30、40、50、60、70、80、90、100、120、140、160、180、或200倍。
另一項特別實施例中，根據本發明MASP抑制性肽之MASP-1及/或MASP-2抑制性活性係藉由測定期對MASP-1及/或MASP-2 (例如：大鼠或人類MASP-1及/或MASP-2)之IC50 來決定。可採用本文所示生化分析法決定對MASP-1及/或MASP-2之IC50 。特別佳係本發明MASP抑制性肽對MASP-1及/或MASP-2之IC50 為＜ 1,000 nM，較佳為≤ 500 nM，更佳為≤ 300 nM，更佳為≤ 250 nM，更佳為≤ 200 nM，更佳為≤ 150 nM，更佳為≤ 100 nM，更佳為≤ 75 nM，更佳為≤ 50 nM，更佳為≤ 45 nM，更佳為≤ 40nM，更佳為≤ 35nM，更佳為≤ 30 nM。
有些實施例中，本發明MASP抑制性肽對MASP-1及/或MASP-2(例如：大鼠或人類MASP-1及/或MASP-2)之IC50 低於所選擇MASP抑制性肽參考化合物 (亦即較高結合親和性)。有些實施例中，根據本發明MASP抑制性肽在MASP-1及/或MASP-2競爭結合分析中之IC50 比所選擇MASP抑制性肽參考化合物降低至少約5%、10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、100%、200%、300%、400%、500%、700%、1000%或10000%。
有些實施例中，本發明MASP抑制性肽於活體外對人類MASP-1及/或MASP-2 活性之抑制性比所選擇MASP抑制性肽參考化合物提高至少約5%、10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95%、97%、98%、99%，或高於99%、100%、200%、300%、400%、500%、700%、1000%或10000%。
有些實施例中，本發明MASP抑制性肽於活體內對人類MASP-1及/或MASP-2 活性之抑制性比所選擇MASP抑制性肽參考化合物提高至少約5%、10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95%、97%、98%、99%，或高於99%、100%、200%、300%、400%、500%、700%、1000%或10000%。
某些實施例中，本文所採用具有「MASP-1及/或MASP-2抑制性活性」之MASP抑制性肽意指當投與該化合物(例如：採用非經腸式途徑，例如：注射)，或採用經肺部、鼻、舌下、舌部、頰內、皮膚、穿皮式、結膜、眼睛途徑或呈植入物或人工支架、經口投與)時，其會隨劑量及隨時間變化，在活體外或在受試者內(例如：小鼠或人類)中有能力抑制C3沉積。
有些實施例中，本發明MASP抑制性肽具有C3沉積(例如：人類C3沉積)抑制性。有些實施例中，C3沉積抑制性係採用活體外或於活體內抑制性決定。有些實施例中，本發明MASP抑制性肽對C3沉積之抑制性為所選擇MASP抑制性肽參考化合物之至少約10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、100%、200%、300%、400%、500%、700%、1000%、或10000%。
某些實施例中，本發明MASP抑制性肽對C3沉積之抑制性比所選擇MASP抑制性肽參考化合物提高1.5、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、30、40、50、60、70、80、90、100、120、140、160、180、或200倍 。
另一項特別實施例中，根據本發明 MASP抑制性肽之MASP-1及/或MASP-2抑制性活性係於活體外或在受試者(例如：小鼠或人類)中測定抑制C3沉積之IC50 來決定。可採用本文所示之C3人類沉積分析法決定對C3-沉積之IC50 。特別佳為本發明MASP抑制性肽對C3沉積之IC50 為 ＜ 1,000 nM，較佳為≤ 500 nM，更佳為≤ 300 nM，更佳為≤ 250 nM，更佳為≤ 200 nM，更佳為≤ 150 nM，更佳為≤ 100 nM，更佳為≤ 75 nM，更佳為≤ 50 nM，更佳為≤ 45 nM，更佳為≤ 40nM，更佳為≤ 35nM，更佳為≤ 30 nM。
有些實施例中，本發明MASP抑制性肽於活體外對C3-沉積之抑制性比所選擇MASP抑制性肽參考化合物提高至少約5%、10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95%、97%、98%、99%，或高於99%、100%、200% 300%、400%、500%、700%、1000%或10000%。
有些實施例中，本發明MASP抑制性肽於活體內對C3-沉積之抑制性比所選擇MASP抑制性肽參考化合物提高至少約5%、10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95%、97%、98%、99%，或高於99%、100%、200% 300%、400%、500%、700%、1000%或10000%。
特別佳係根據本發明肽作為MASP抑制性肽，其活性係依據根據本發明實例之至少一種特異分析法及/或活體內試驗決定。
基於其上述MASP-1及/或MASP-2抑制性活性及C3-沉積之抑制活性，一種包含本發明肽之化合物或本發明肽(包括其類似物、衍生物、及醫藥上可接受之鹽或溶劑合物，及上述複合物)適用於預防及/或治療MASP-1及/或MASP-2-相關疾病。
根據另一項實施例，本發明提供一種化合物，其包含可經過單離及/或純化且包含、基本上組成為、或組成為式(I)或式(II)之肽或衍生物、前藥、類似物、醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或鹽之溶劑合物，其作用為作為MASP-1及/或MASP-2抑制劑及/或其抑制C3沉積。
根據本發明化合物可以單獨使用或若必要時，可與其他活性化合物組合使用。本發明進一步有關一種醫藥，其包含至少一種根據本發明化合物及一或多種其他活性化合物，特定言之，供治療及/或預防上述疾病。適合組合之活性化合物可述及例如及較佳為： ˙抑制環狀鳥苷單磷酸(cGMP)及/或環狀腺苷單磷酸(cAMP)降解之化合物，例如：磷酸二酯酶(PDE)之抑制劑 1、2、3、4與/或5，特定言之PDE 4抑制劑，如：羅氟司特(roflumilast)或利瓦司特(revamilast)，及PDE 5抑制劑 ，如：昔多芬(sildenafil)、伐地那非(vardenafil)、他達拉非(tadalafil)、烏地那非(udenafil)、達生他非(dasantafil)、阿伐那菲(avanafil)、米羅那非(mirodenafil)或羅地那非(lodenafil)； ˙不依賴NO，但依賴血色素之鳥苷酸環化酶刺激劑，特定言之利奥西呱(riociguat)、尼樂西呱(nelociguat)、菲利西呱(vericiguat)，及WO 00/06568, WO 00/06569、WO 02/42301、WO 03/095451、WO 2011/147809、WO 2012/004258、WO 2012/028647與WO 2012/059549中說明之化合物； ˙不依賴NO且不依賴血色素之鳥苷酸環化酶活化劑，特定言之魯卡西呱(Runcaciguat)、BI 703704及WO2012/139888、WO 2001/019780與WO2014/012934中說明之化合物； ˙前列環素類似物與IP受體促效劑，例如及較佳為：伊洛前列素(iloprost)、貝前列素(beraprost)、曲前列素(treprostinil)、依前列醇(epoprostenol)、NS-304、希樂普(selexipag)、或拉寧納帕(ralinepag)； ˙內皮肽受體拮抗劑，例如及較佳為：波生坦(bosentan)、達盧生坦(darusentan)、安倍生坦(ambrisentan)、馬西替坦(macicentan)、或希塔生坦(sitaxsentan)； ˙血管加壓素受體拮抗劑，例如：托伐普坦(tolvaptan)、考尼伐坦(conivaptan)、瑞伐普坦(relcovaptan)； ˙人類嗜中性球彈性蛋白酶(HNE)抑制劑，例如及較佳為：西維來斯他(sivelestat)或DX-890(利他(Reltran))； ˙抑制訊號轉導級聯之化合物，特定言之選自酪胺酸激酶抑制劑之群中，例如及較佳為：達沙替尼(dasatinib)、尼祿替尼(nilotinib)、波舒替尼(bosutinib)、瑞格拉非尼(regorafenib)、蕾莎瓦(sorafenib)、紓癌特(sunitinib)、西地尼布(cediranib)、阿西替尼(axitinib)、替拉替尼(telatinib)、伊馬替尼(imatinib)、布立尼布(brivanib)、帕唑帕尼(pazopanib)、瓦他拉尼(vatalanib)、吉非替尼(gefitinib)、厄洛替尼(erlotinib)、拉帕替尼(lapatinib)、卡紐替尼(canertinib)、來他替尼(lestaurtinib)、培利替尼(pelitinib)、舒馬賽尼(semaxanib)、馬西替尼(masitinib)、或坦度替尼(tandutinib)； ˙選自ASK1激酶抑制劑群中之訊號轉導調控劑，例如：希樂色提(selonsertib)； ˙Rho激酶抑制性化合物，例如及較佳為：法舒地爾(fasudil)、Y‑27632、SLx-2119、BF-66851、BF-66852、BF-66853、KI-23095或BA-1049； ˙降低血管壁通透性(水腫形成)之活性成份，例如及較佳為：ALK1-Smad1/5 訊號傳導途徑之抑制劑、VEGF及/或PDGF訊號傳導途徑之抑制劑、環氧合酶抑制劑、血漿激肽釋放酶-激肽系統(kallikrein-kinin system)之抑制劑、或鞘胺醇-1-磷酸訊號傳導途徑之抑制劑； ˙皮質類固醇，例如：可體松(cortisone)、皮質醇(cortisol)、潑尼松龍(prednisolone)、甲基潑尼松龍、去炎松(triamcinolone)、或地塞米松(dexamethasone)； ˙降低氧化壓力下之器官傷害之活性成份，例如及較佳為：補體系統之抑制劑，尤指補體C5a受體之拮抗劑、抗C5抗體或5-HT1A受體之促效劑； ˙轉錄因子Nrf2之調控劑、刺激劑及加強劑，例如：CXA-10、奥替普拉(Oltipraz)、富馬酸二甲酯或巴多索隆(Bardoxolone)； ˙腎上腺髓素及腎上腺髓素衍生物，例如：PEG基化腎上腺髓素，及腎上腺髓素安定劑，例如：阿德瑞珠單抗(adrecizumab)； ˙抑制缺氧誘發因子脯胺醯基羥化酶之化合物(HIF-PH抑制劑)，例如：莫立司他(molidustat)、韋達司他(vadadustat)、洛達司他(roxadustat)、達普司他(daprodustat)或達希司他(daprodustat)； ˙抑制誘發細胞死亡及細胞凋亡途徑之化合物，例如：QPI-1002； ˙C-Met促效劑及肝細胞生長因子擬似物，例如：利發靈(refanalin)； ˙鹼性磷酸酶及重組鹼性磷酸酶； ˙抑制發炎反應及T 細胞增生之化合物，例如：CD28拮抗化合物，如： 瑞替莫德(Reltecimod)； ˙調控Th17 T細胞活化作用之化合物，例如：RORc/ROR-γ轉錄因子之調控劑； ˙拮抗Th17 T 細胞反應之化合物例如：抗IL-17與抗IL-23抗體，例如：抑希克單抗(Ixekizumab)、希庫克單抗(Secukinumab)、布洛達單抗(Brodalumab)、優特齊單抗(Ustekinumab)、古希克單抗(Guselkumab)、或PTG-200； ˙抗血栓劑，例如及較佳為：選自血小板凝集抑制劑、抗凝血劑與促纖維蛋白分解物質之群中； ˙本發明較佳實施例中，根據本發明化合物係與血小板凝集抑制劑組合投藥，例如及較佳為：阿斯匹靈(aspirin)、氯吡格雷(clopidogrel)、噻氯匹定(ticlopidin)或雙嘧達莫(dipyridamol)； ˙本發明較佳實施例中，根據本發明化合物係與凝血酶抑制劑組合投藥，例如及較佳為：希美加群(ximelagatran)、美拉加群(melagatran)、達比加群(dabigatran)、比伐盧定(bivalirudin)或克立生(Clexane)。 ˙本發明較佳實施例中，根據本發明化合物係與GPIIb/IIIa拮抗劑組合投藥，例如及較佳為：替羅非班(tirofiban)或阿昔單抗(abciximab)。 ˙本發明較佳實施例中，根據本發明化合物係與Xa因子抑制劑組合投藥，例如及較佳為：利伐沙班(rivaroxaban)、阿哌沙班(apixaban)、菲得沙班(fidexaban)、雷扎沙班(razaxaban)、磺達肝素(fondaparinux)、抑達肝素(idraparinux)、DU-176b、PMD-3112、YM-150、KFA-1982、EMD-503982、MCM-17、MLN-1021、DX 9065a、DPC 906、JTV 803、SSR-126512或SSR-128428。 ˙本發明較佳實施例中，根據本發明化合物係與肝素或低分子量(LMW)肝素衍生物組合投藥。 ˙本發明較佳實施例中，根據本發明化合物係與凝血因子XI之直接抑制劑、凝血因子XI 表現之抑制劑、及抗凝血因子XI抗體(如：Xisomab 3G3)組合投藥； ˙本發明較佳實施例中，根據本發明化合物係與礦物皮質酮受體拮抗劑組合投藥，例如及較佳為：螺旋內酯固醇(spironolactone)、依普利酮(eplerenon)或吩瑞酮(finerenone)。 ˙本發明較佳實施例中，根據本發明化合物係與利尿劑組合投藥，例如及較佳為：服樂泄麥(furosemide)、布美他尼(bumetanide)、托拉塞米(Torsemide)、芐氟噻𠯤(bendroflumethiazide)、氯噻𠯤(chlorthiazide)、氫氯噻𠯤(hydrochlorothiazide)、氫氟噻𠯤(hydroflumethiazide)、甲氯噻𠯤(methyclothiazide)、泊利噻𠯤(polythiazide)、三氯噻𠯤(trichlormethiazide)、氯噻酮(chlorthalidone)、吲達帕胺(indapamide)、甲苯喹唑酮(metolazone)、喹噻酮(quinethazone)、乙醯唑胺(acetazolamide)、二氯磺胺(dichlorphenamide)、甲醋唑胺(methazolamide)、甘油、異山梨醇酯(isosorbide)、甘露糖醇、阿米洛利(amiloride)或三胺蝶呤(triamterene)。 ˙本發明較佳實施例中，根據本發明化合物係與PPAR-ɤ促效劑組合投藥，例如及較佳為：皮利酮(pioglitazone)或羅格列酮(rosiglitazone)。 ˙本發明較佳實施例中，根據本發明化合物係與PPAR-δ促效劑組合投藥，例如及較佳為：GW 501516或BAY 68-5042。
根據另一項實施例，本發明提供一種醫藥組成物，其包含至少一種化合物，其包含可經過單離及/或純化且包含、基本上組成為、或組成為式(I)或式(II)之肽或衍生物、前藥、類似物、醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或鹽之溶劑合物，與一或多種選自下列所組成之群組中之其他活性成份組合：磷酸二酯酶之抑制劑、鳥苷酸環化酶之刺激劑或活化劑、IP受體促效劑、礦物皮質酮受體拮抗劑、利尿劑、PPAR-γ促效劑、PPAR-δ促效劑、皮質類固醇、降低氧化壓力下之器官傷害之活性成份、抑制誘發細胞死亡及細胞凋亡途徑之化合物、抑制發炎反應及T 細胞增生之化合物、抗血栓劑、血小板凝集抑制劑、凝血酶抑制劑、GPIIb/IIIa拮抗劑、因子Xa抑制劑、肝素或低分子量(LMW)肝素衍生物、及凝血因子XI之抑制劑。
本發明進一步有關一種部件套組(kit-of-parts)組合，其包含至少一種如本文所定義之肽、衍生物或類似物或其醫藥上可接受之鹽或溶劑合物、如上述定義之複合物或醫藥組成物，及至少一種選自試劑、醫學裝置、說明書、或其任何組合。
本發明進一步有關一種醫學裝置，其包含至少一種如本文所定義之肽、衍生物或類似物或其醫藥上可接受之鹽或溶劑合物、如上述定義之複合物或醫藥組成物，供傳遞肽、其衍生物、類似物或複合物或醫藥組成物給受試者。
如上述定義之醫藥組成物、部件套組或醫學裝置係特別用於預防及/或治療如本文所定義之疾病或疾病。
本發明MASP抑制性肽可能具有全身作用及/或局部作用。基於此目的，其等可依合適方式投藥，如，例如：經口、非經腸式、經肺、鼻、舌下、舌部、頰內、直腸、陰道、皮膚、穿皮式、經結膜、經耳朵途徑，或呈植入物或人工支架投藥。
針對此等投藥途徑，可呈合適之投藥劑型投藥。
經口投藥時，根據本發明化合物可調配成相關技藝已知可快速及/或依修飾方式傳遞本發明化合物之劑型，如，例如：錠劑(無包衣或有包衣錠劑，例如：包覆可延緩溶解或不溶解之腸溶性包衣或控制釋放之包衣)、可於口中崩解之錠劑、膜衣錠/嚼錠、膜衣錠/凍乾物、膠囊(例如：硬式或軟式明膠囊)、糖衣錠、粒劑、丸劑、粉劑、乳液、懸浮液、氣霧劑或溶液。根據本發明化合物可能呈結晶及/或非晶型及/或溶解型，納入該劑型中。
非經腸式投藥法可避過吸收步驟進行(例如：經靜脈內、經動脈內、經心臟內、經脊柱內或經腰椎內途徑)，或包括吸收作用進行(例如：經肌內、皮下、皮內、經皮膚、或經腹膜內、眼內)。適合非經腸式投藥之投藥型式特別為呈溶液、懸浮液、乳液、凍乾物或無菌粉末之注射及輸液製劑。
適合其他投藥途徑之實例為供吸入之醫藥型式[特別指粉劑吸入器、噴霧劑]、鼻用滴劑、鼻用溶液或鼻用噴液；供經舌部、舌下或頰內投藥之錠劑、膜衣錠/嚼錠/膠囊；栓劑；眼滴劑、眼藥膏、洗眼液、眼用插入劑、滴耳藥、耳用噴液、耳用粉劑、耳用沖洗液、或耳用棉條；陰道用膠囊、局部用水性懸浮液(洗液、搖溶混合物)、親脂性懸浮液、乳液、油膏、乳霜、穿皮式醫療系統(如，例如：貼布)、乳劑、糊劑、泡沫劑、灑粉劑、植入物或人工支架。
根據另一項實施例，本發明提供一種醫藥組成物，其包含至少一種化合物，其包含可經過單離及/或純化且包含、基本上組成為、或組成為式(I)或式(II)之肽或衍生物、前藥、類似物、醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或鹽之溶劑合物，與一或多種惰性、無毒之醫藥上合適之賦形劑組合。
根據本發明化合物可納入上述投藥型式中。其可依本身已知方式，與醫藥上合適之賦形劑混合來達成。醫藥上合適之賦形劑特別包括： ˙填料與載劑(例如：纖維素、微晶纖維素(如，例如：Avicel® )、乳糖、甘露糖醇、澱粉、磷酸鈣(如，例如：Di-Cafos® ))， ˙油膏基質(例如：凡士林、石蠟、三酸甘油酯、蠟類、羊毛蠟、羊毛蠟醇、羊毛脂、親水性油膏、聚乙二醇)， ˙栓劑基質(例如：聚乙二醇、可可脂、硬脂)， ˙溶劑(例如：水、乙醇、異丙醇、甘油、丙二醇、中鏈三酸甘油酯脂肪油、液態聚乙二醇、石蠟)， ˙界面活性劑、乳化劑、勻散劑或濕化劑(例如：十二烷基硫酸鈉)、卵磷脂、磷脂類、脂肪醇(如，例如：Lanette® )、山梨糖醇酐脂肪酸酯類(如，例如：Span® )、聚氧乙烯山梨糖醇酐脂肪酸酯類(如，例如：Tween®)、聚氧乙烯脂肪酸甘油酯類(如，例如：Cremophor®)、聚氧乙烯脂肪酸酯類、聚氧乙烯脂肪醇醚類、甘油脂肪酸酯類、泊洛沙姆(poloxamer)( 如，例如：Pluronic® ))， ˙緩衝劑、酸類及鹼類(例如：磷酸鹽、碳酸鹽、檸檬酸、乙酸、鹽酸、氫氧化鈉溶液、碳酸銨、三羥基胺基甲烷、三乙醇胺)， ˙等滲劑(例如：葡萄糖、氯化鈉)， ˙吸附劑(例如：細粒矽石)， ˙提高黏度劑、凝膠形成劑、增稠劑及/或結合劑(例如：聚乙烯吡咯烷酮、甲基纖維素、羥基丙基甲基纖維素、羥基丙基纖維素、羧甲基纖維素-鈉、澱粉、卡波姆(carbomer)、聚丙烯酸(如，例如：Carbopol® )、藻酸鹽、明膠)， ˙崩解劑(例如：改質澱粉、羧甲基纖維素-鈉、澱粉乙醇酸鈉(例如：Explotab® )、交聯聚乙烯吡咯烷酮、交聯羧甲纖維素-鈉(如，例如：AcDiSol® ))， ˙流動調節劑、潤滑劑、助滑劑與釋模劑(例如：硬脂酸鎂、硬脂酸、滑石、細粒矽石(如，例如：Aerosil® ))， ˙包衣劑(例如：糖、蟲膠)及可以快速溶解或以修飾方式溶解之膜片或擴散膜之膜形成劑(例如：聚乙烯吡咯烷酮(如，例如：Kollidon® )、聚乙烯醇、羥基丙基甲基纖維素、羥基丙基纖維素、乙基纖維素、羥基丙基甲基纖維素酞酸酯、纖維素乙酸酯、纖維素乙酸酯酞酸酯、聚丙烯酸酯、聚甲基丙烯酸酯，如，如：Eudragit® )， ˙膠囊材料(例如：明膠、羥基丙基甲基纖維素)， ˙合成性聚合物(例如：聚丙交酯、聚乙交酯、聚丙烯酸酯、聚甲基丙烯酸酯(如，例如：Eudragit® )，聚乙烯吡咯烷酮(如，例如：Kollidon® )、聚乙烯醇、聚乙酸乙烯酯、聚環氧乙烷、聚乙二醇及其共聚物與嵌段共聚物)， ˙增塑劑(例如：聚乙二醇、丙二醇、甘油、三乙酸甘油酯、三乙醯基檸檬酸酯、酞酸二丁酯)， ˙滲透加強劑， ˙安定劑(例如：抗氧化劑，如，例如：抗壞血酸、棕櫚酸抗壞血基酯、抗壞血酸鈉、丁基羥基苯甲醚、丁基羥基甲苯、沒食子酸丙基酯)， ˙防腐劑(例如：對羥基苯甲酸酯、山梨酸、硫柳汞(thiomersal)、氯化烷基二甲基苄基銨(benzalkonium chloride)、醋酸氯己定(chlorhexidine acetate)、苯甲酸鈉)， ˙著色劑(例如：無機色素，如，例如：氧化鐵、二氧化鈦)， ˙風味劑、甜味劑、調味劑與/或氣味遮蔽劑，
本發明進一步有關一種醫藥組成物，其包含至少一種如本文所定義之肽、衍生物或類似物或其醫藥上可接受之鹽或溶劑合物、或如上述定義之複合物。
特定言之，本發明係有關一種醫藥組成物，其包含至少一種如本文所定義之肽、衍生物或類似物或其醫藥上可接受之鹽或溶劑合物、或如上述定義之複合物，通常與一或多種醫藥上合適之賦形劑(群)共同使用，並有關其根據本發明之用途。
根據本發明醫藥組成物可包含至少一種額外活性成份，如： 較佳係具有預防及/或治療如上述所定義疾病或疾病之活性之額外活性成份。
該至少一種如本文所定義之肽、衍生物或類似物或其醫藥上可接受之鹽或溶劑合物、或如上述定義之複合物或醫藥組成物可依經腸式或非經腸式投藥，包括經靜脈內、肌內、腹膜內、胸骨內、皮下、皮內及關節內注射及輸注、經口、陰道內、腹膜內、直腸內、局部或頰內。用於個別投藥途徑之合適調配物係相關技藝中具有通常知識者習知，且包括(但不限於)：丸劑、錠劑、腸衣錠、膜衣錠、層壓錠、用於經口投藥之持續釋放或延長釋放調配物、膏藥、局部用延長釋放調配物、糖衣錠、陰道栓劑、凝膠、油膏、糖漿、粒劑、栓劑、乳液、勻散液、微膠囊、微米調配物、奈米調配物、脂質體調配物、膠囊、腸衣膠囊、粉劑、吸入性粉劑、微晶調配物、吸入性噴液、粉劑、滴劑、鼻滴劑、鼻噴液、氣霧劑、安瓿、溶液、果汁、懸浮液、輸注液或注射液，等等。
根據另一項實施例，本發明提供一種醫藥組成物，其包含至少一種化合物，其包含可經過單離及/或純化且包含、基本上組成為、或組成為式(I)或式(II)之肽或衍生物、前藥、類似物、醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或鹽之溶劑合物，組合使用一或多種惰性、無毒性、醫藥上合適之賦形劑，用於預防及/或治療心血管及心肺疾病、休克、發炎疾病、敗血病之心血管、肺、腦及腎後遺症、缺血及/或再灌流相關傷害、急性腎損傷、保護移植物及移植物功能延遲、血液與血液形成器官及免疫系統之疾病、糖尿病後遺症、神經系統發炎疾病、眼睛疾病、皮膚疾病、呼吸、消化道或生殖泌尿系統疾病、及燒傷與受傷之後遺症。
根據另一項實施例，本發明提供一種醫藥組成物，其包含至少一種化合物，其包含可經過單離及/或純化且包含、基本上組成為、或組成為式(I)或式(II)之肽或衍生物、前藥、類似物、醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或鹽之溶劑合物，組合使用一或多種選自下列所組成之群組中之其他活性成份：磷酸二酯酶之抑制劑、鳥苷酸環化酶之刺激劑或活化劑、IP受體促效劑、礦物皮質酮受體拮抗劑、利尿劑、PPAR-γ促效劑、PPAR-δ促效劑、皮質類固醇、降低氧化壓力下之器官傷害之活性成份、抑制誘發細胞死亡及細胞凋亡途徑之化合物、抑制發炎反應及T 細胞增生之化合物、抗血栓劑、血小板凝集抑制劑、凝血酶抑制劑、GPIIb/IIIa拮抗劑、因子Xa抑制劑、肝素或低分子量(LMW)肝素衍生物、及凝血因子XI之抑制劑，用於預防及/或治療心血管及心肺疾病、休克、發炎疾病、敗血病之心血管、肺、腦及腎後遺症、缺血及/或再灌流相關傷害、急性腎損傷、保護移植物及移植物功能延遲、血液與血液形成器官及免疫系統之疾病、糖尿病後遺症、神經系統發炎疾病、眼睛疾病、皮膚疾病、呼吸、消化道或生殖泌尿系統疾病、及燒傷與受傷之後遺症。
根據另一項實施例，本發明提供一種治療及/或預防人類與動物之心血管及心肺疾病、休克、發炎疾病、敗血病之心血管、肺、腦及腎後遺症、缺血及/或再灌流相關傷害、急性腎損傷、保護移植物及移植物功能延遲、血液與血液形成器官及免疫系統之疾病、糖尿病後遺症、神經系統發炎疾病、眼睛疾病、皮膚疾病、呼吸、消化道或生殖泌尿系統疾病、及燒傷與受傷之後遺症之方法，其係投與有效量之包含至少一種化合物之醫藥組成物，該化合物包含可經過單離及/或純化且包含、基本上組成為、或組成為式(I)或式(II)之肽或衍生物、前藥、類似物、醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或鹽之溶劑合物，或投與包含至少一種化合物之醫藥組成物，該化合物包含可經過單離及/或純化且包含、基本上組成為、或組成為式(I)或式(II)之肽或衍生物、前藥、類似物、醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或鹽之溶劑合物，與一或多種惰性、無毒性、醫藥上合適之賦形劑、及/或一或多種其他活性成份組合使用。
本發明MASP抑制性肽之合適劑量可以由具有完整醫學判斷能力之參與醫師決定。對任何特定受試者之明確醫療有效劑量將隨各種不同因素而定，包括：a)所治療疾病及疾病之嚴重性；b)所採用特定化合物之活性；c)所採用特定組成物、患者之年齡、體重、一般健康、性別及飲食；d)投藥時間、途徑、所採用特定鐵調素(hepcidin)類似物之排除速率；e)治療持續時間；f)與所採用MASP抑制性肽組合或併行之藥物，及醫學技藝上習知之類似因素。
特定實施例中，呈單一劑量或分割劑量投與受試者或患者之本發明MASP抑制性肽之每日總劑量可為例如：每天0.0001至300 mg/kg體重或每天1至300 mg/kg體重，或每天約0.0001至約100 mg/kg體重 ，如：每天約0.0005至約50 mg/kg體重，如：每天約0.001至約10 mg/kg體重，例如：每天約0.01至約1 mg/kg體重，其係投與一劑或多劑，如：一至三劑。通常，本發明MASP抑制性肽可以連續投藥(例如：靜脈內投藥或另一種連續投藥方法)，或可依間隔，通常依規律時間間隔投與受試者，端賴習此相關技藝操作者針對特定受試者所需劑量及所選擇醫藥組成物而定。規律投藥劑量間隔包括例如：一天一次、一天兩次、每隔2、3、4、5或6天一次、每周一或兩次、每月一或兩次，及類似間隔。
本發明進一步包括以如本文所說明MASP抑制性肽於製造醫藥上之用途，特定言之用於製造供預防及/或治療如本文所定義疾病或疾病之醫藥。
本發明進一步包括一種製造分別如本發明所說明之本發明肽、其衍生物或類似物或醫藥上可接受之鹽或溶劑合物、或複合物之製程。該製造過程包括本發明實例所示之步驟。
通常，本發明MASP抑制性肽可依合成法或半重組法製造。
根據另一項實施例，本發明提供一種採用固相肽合成法，製備一種包含可經過單離及/或純化且包含、基本上組成為、或組成為式(I)或式(II)之肽或衍生物、前藥、類似物或醫藥上可接受之鹽或溶劑合物之化合物之方法。
根據另一項實施例，本發明提供一種製備包含可經過單離及/或純化且包含、基本上組成為、或組成為式(I)或式(II)之肽或衍生物、前藥、類似物、醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或鹽之溶劑合物之化合物之方法，其包括以下步驟： 1.       使用2-氯三苯甲基型樹脂，加載量為0.2 – 1.0 mmol/g，或Wang型樹脂，加載量為0.2 – 1.0 mmol/ g， 2.       加載序列之c-端胺基酸至樹脂上， 3.       使用含於DMF或NMP中之15-25%哌啶溶液脫除保護基， 4.       使用偶合試劑，如：HBTU、HATU或DIC/Oxyma，使用3-8當量之間之化學計量，與序列中下一個胺基酸偶合， 5.       重覆步驟3及4，直到序列完成為止， 6.       使用包含TFA與硫醇清除劑之裂解混合液，從固體擔體上裂解肽， 7.       序列中兩個半胱胺酸在氧化條件(空氣或I2 )環化， 8.       使用逆相HPLC純化已裂解之肽。
根據另一項實施例，本發明提供一種製備包含可經過單離及/或純化且包含、基本上組成為、或組成為式(I)或式(II)之肽或衍生物、前藥、類似物、醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或鹽之溶劑合物之化合物之方法，其包括以下步驟： 1.           使用2-氯三苯甲基型樹脂，加載量為0.2 – 1.0 mmol/g，或Wang型樹脂，加載量為0.2 – 1.0 mmol/ g， 2.           加載序列之c-端胺基酸至樹脂上， 3.           使用含於DMF或NMP中之15-25%哌啶溶液脫除保護基， 4.           使用偶合試劑，如：HBTU、HATU或DIC/Oxyma，使用3-8當量之間之化學計量，與序列中下一個胺基酸偶合， 5.           重覆步驟3及4，直到序列完成為止， 6.           使用包含TFA與硫醇清除劑之裂解混合液，從固體擔體上裂解肽， 7.           序列中兩個半胱胺酸在氧化條件下(空氣或I2 )環化， 8.           使用逆相HPLC純化已裂解之肽， 9.           轉化成HCl 鹽。
如本文所定義至少一種肽、衍生物或類似物、或其醫藥上可接受之鹽或溶劑合物或如本文所定義複合物亦可作為生化製劑，用於生化分析法中，如： 例如：診斷分析法，供測定對MASP抑制劑之反應性，或用於基於MASP抑制劑結合性之任何生化分析法中。
本發明亦包括一種聚核苷酸，其包含編碼根據本發明MASP抑制性肽之序列，及一種載體，其包含編碼根據本發明MASP抑制性肽之序列之聚核苷酸。
本發明進一步利用下列與本發明某些明確實施例相關之實例說明。該等實例係利用相關技藝中具有通常知識者之例行習知標準技術進行，除非另有其他說明。下列實例僅供說明，並無意限制本發明之條件或範圍。因此，不應構成以任何方式限制本發明範圍。實例
實驗部份所採用縮寫列表 Å            埃 aq.           水性、水溶液 bar          壓力單位 BPR        背壓壓力調整器 conc        濃縮 d             雙裂峰(NMR) dd           雙重雙裂峰(NMR) DCM       二氯甲烷 DEA       二乙基胺 DIPEA    N,N,-二異丙基乙基胺(亨尼氏鹼(Hünig`s base)) DMAP    4-二甲基胺基吡啶 DMF       N,N-二甲基甲醯胺 DMSO    二甲亞碸 dt            雙重參裂峰 (NMR) EA          乙酸乙酯 ee            對映異構性超量 ent           對映異構性 eq            當量 equiv       當量(離子層析法) ESI          電噴灑-電離化(質譜) Fmoc-OSu   1-{[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]氧}吡咯啶-2,5-二酮 GC-MS   氣相層析法偶聯質譜儀 h             小時 HATU     O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽 HPLC      高壓液相層析法 IC            離子層析法 ID           內直徑 L             升 LC-MS    液相層析法偶聯質譜儀 LiHMDS 雙(三甲基矽烷基)胺化鋰 lit.           文獻 m            多裂峰(NMR) MALDI   基質輔助雷射脫附/電離(質譜儀) Me          甲基 min         分鐘 mm         毫升 μm         微米(micron) M            莫耳濃度 MPLC     中壓液相層析法 MS          質譜 MTBE     第三丁基甲基醚 MTP       微滴定盤 m/z          質量-電荷比(質譜儀) nm          奈米 NMP       N-甲基-2-吡咯烷酮 NMR       核磁共振光譜 PBS         磷酸鹽緩衝生理食鹽水 PE           石油醚 PEG        聚乙二醇 pos          正電荷 ppm         每百萬分之一 Pr            丙基 Psi           每平方吋之磅數(壓力) q / quart   肆裂峰(NMR) qd           四重雙峰(NMR) quint        五裂峰(NMR) rac          消旋性 Rf           滯留因數(TLC) RP           逆相(液相層析法) Rt            滯留時間(層析法) s              單峰(NMR) s              秒(時間) SPPS       固相肽合成法 t              參裂峰(NMR) TBTU     O (苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲鎓四氟硼酸鹽 tBu          第三丁基 TEA        三乙基胺 THF        四氫呋喃 TLC        薄層層析法 UPLC      超效液相層析法 UV          紫外光 其他縮寫可參見表2與3。
分析性 LC-MS 方法 方法1 設備機型MS：ThermoFisherScientific LTQ-Orbitrap-XL；設備機型HPLC：Agilent 1200SL；管柱：Agilent，POROSHELL 120；3 x 150 mm，SB – C18 2.7 µm；溶離液A：1 L 水+ 0.1% 三氟乙酸；溶離液B：1 L 乙腈+ 0.1% 三氟乙酸；梯度：0.0 min 2% B → 1.5 min 2% B → 15.5 min 98% B → 18.0 min 98% B；烘箱：40°C；流速：0.75 mL/min；UV-檢測：210 nm 方法2 設備機型MS：ThermoFisherScientific LTQ-Orbitrap-XL；設備機型HPLC：Agilent 1200SL；管柱：Agilent，POROSHELL 120；3 x 150 mm，SB – C18 2.7 µm；溶離液A：1 L 水+ 0.1% 三氟乙酸；溶離液B：1 L 乙腈+ 0.1% 三氟乙酸；梯度：0.0 min 5% B → 0.3 min 5% B → 7.0 min 98% B → 10 min 98% B；烘箱：40°C；流速：0.75 mL/min；UV-檢測：210 nm 方法3 設備機型MS：Waters TOF儀器；設備機型UPLC：Waters Acquity I-CLASS；管柱：YMC，TRIART C18，75 x 1 mm，3.0 µm x 12nm；溶離液A：1 L 水+ 0.01%甲酸；溶離液B：1 L 乙腈+ 0.01%甲酸；梯度：0.0 min 1% B → 2.0 min 1% B →8.0 min 95% B → 10.0 min 95% B；烘箱：50°C；流速：0.63 mL/min；UV-檢測：210 nm 方法4 設備機型MS：Waters TOF儀器；設備機型UPLC：Waters Acquity I-CLASS；管柱：YMC，TRIART C18，75 x 1 mm，3.0 µm 12nm；溶離液A：1 L 水+ 0.01%甲酸；溶離液B：1 L 乙腈+ 0.01%甲酸；梯度：0.0 min 1% B → 1.0 min 1% B →15.0 min 50% B → 18.0 min 95% B；烘箱：50°C；流速：0.63 mL/min；UV-檢測：210 nm 方法5 設備機型MS：Waters TOF儀器；設備機型UPLC：Waters Acquity I-CLASS；管柱：Waters，HSST3，2.1 x 50 mm，C18 1.8 µm；溶離液A：1 L 水+ 0.01%甲酸；溶離液B：1 L 乙腈+ 0.01%甲酸；梯度：0.0 min 2% B → 0.5 min 2% B → 7.5 min 95% B → 10.0 min 95% B；烘箱：50°C；流速：1.00 mL/min；UV-檢測：210 nm 方法6 設備機型MS：Waters Synapt G2S；設備機型UPLC：Waters Acquity I-CLASS；管柱：Waters，BEH300，2.1 x 150 mm，C18 1.7 µm；溶離液A：1 L 水+ 0.01%甲酸；溶離液B：1 L 乙腈+ 0.01%甲酸；梯度：0.0 min 2% B → 1.5 min 2% B → 8.5 min 95% B → 10.0 min 95% B；烘箱：50°C；流速：0.50 mL/min；UV-檢測：220 nm 方法7 儀器機型MS：Agilent 6410 Triple Quad；儀器機型HPLC：Agilent 1200；管柱：Gemini-NX C18 5 μm 110Å 150 x 4.6 mm；溶離液A：0.1%TFA之H2 O溶液；溶離液B：0.1%TFA之ACN溶液；梯度：0.0 min 20% B → 20 min 50% B → 20.1 min 90% B → 23 min 90% B；烘箱溫度：50°C；流速：1.0 mL/min；UV-檢測：220 nm 方法8 儀器機型MS：Agilent 6410 Triple Quad；儀器機型HPLC：Agilent 1200；管柱：Discovery BIO Wide Pore C18 5 μm 300Å x 4.6 mm；溶離液A：0.1%TFA之H2 O溶液；溶離液B：0.1%TFA之ACN溶液；梯度：0.0 min 10% B → 20 min 80% B → 20.1 min 90% B → 23 min 90% B；烘箱溫度：50°C；流速：1.0 mL/min；UV-檢測：220 nm 方法9 儀器：Waters ACQUITY SQD UPLC 系統；管柱：Waters Acquity UPLC HSS T3 1.8 µm 50 x 1 mm；溶離液A：1 L 水+ 0.25 mL 99%甲酸，溶離液B：1 L 乙腈+ 0.25 mL 99%甲酸；梯度：0.0 min 90% A → 1.2 min 5% A → 2.0 min 5% A；烘箱：50 °C；flow：0.40 mL/min；UV-檢測：210 nm 方法10 儀器 MS：Thermo Scientific FT-MS；儀器 UHPLC：Thermo Scientific UltiMate 3000；管柱：Waters，HSST3，2.1 x 75 mm，C18 1.8 µm；溶離液A：1 L 水 + 0.01%甲酸；溶離液B：1 L 乙腈+ 0.01%甲酸；梯度：0.0 min 10% B → 2.5 min 95% B → 3.5 min 95% B；烘箱：50°C；流速：0.90 mL/min；UV-檢測：210 nm/ 最佳積分路徑210-300 nm 方法11 MS儀器：Agilent MS Quad 6150；HPLC：Agilent 1290；管柱：Waters Acquity UPLC HSS T3 1.8 µm 50 x 2.1 mm；溶離液A：1 L 水+ 0.25 mL甲酸，溶離液B：1 L 乙腈+ 0.25 mL甲酸；梯度：0.0 min 90% A → 0.3 min 90% A → 1.7 min 5% A → 3.0 min 5% A 烘箱：50°C；流速：1.20 mL/min；UV-檢測：205 – 305 nm. 方法12 儀器：Waters ACQUITY SQD UPLC系統；管柱：Waters Acquity UPLC HSST3 1.8 µm 50 x 1 mm；溶離液A：1 L 水+ 0.25 mL 99%甲酸，溶離液B：1 L 乙腈+ 0.25 mL 99%甲酸；梯度：0.0 min 95% A → 6.0 min 5% A → 7.5 min 5% A 烘箱：50°C；流速：0.35 mL/min；UV-檢測：210 nm. 方法13 儀器：Waters Single Quad MS 系統；儀器 Waters UPLC Acquity；管柱：Waters BEH C18 1.7 µm 50 x 2.1 mm；溶離液A：1 L 水+ 1.0 mL (25%氨水)/L，溶離液B：1 L 乙腈；梯度：0.0 min 92% A → 0.1 min 92% A → 1.8 min 5% A → 3.5 min 5% A；烘箱：50°C；流速：0.45 mL/min；UV-檢測：210 nm. 方法14 系統 MS：Waters TOF儀器；系統 UPLC：Waters Acquity I-CLASS；管柱：Waters Acquity UPLC Peptide BEH C18 300Å，1.7 µm 150 x 2.1 mm；溶離液A：1 L 水+ 0.100 ml 99%甲酸，溶離液B：1 L 乙腈+ 0.100 ml 99%甲酸；梯度：0.0 min 90% A →0.25 min 90% A → 8.0 min 45% A → 10.0 min 2% → 12.0 min 2% A 烘箱：50°C；流速：0.475 ml/min；UV-檢測：210 nm。 方法15 MS儀器機型：Agilent G6110A；HPLC儀器機型：Agilent 1200系列LC；UV DAD；管柱：Chromolith Flash RP-18e 25 x 2.0mm；移動相A：0.0375% TFA之水溶液(v/v)，移動相B：0.01875% TFA之乙腈溶液(V/V)；梯度：0.01 min 5% B → 0.80 min 95% B → 1.20 min 95% B → 1.21 min 5% B → 1.5 min 5% B；流速：1.50 mL/min；烘箱溫度：50 °C；UV 檢測：220 nm & 254 nm。
MALDI方法 精確之質量測定係在所選擇肽上，利用基質輔助雷射脫附/電離(MALDI)質譜儀方法，在Bruker autoflex maX LRF MALDI MS 飛時測距(Time-of-Flight)(ToF-MS)系統上進行。樣本係在Bruker MALDI靶盤上，使用α-氰基-4-羥基肉桂酸(CAS 28166-41-8)作為基質來製備。製備0.1至1.0 mg肽樣本含於1.0 mL 乙腈-水(50/50或30/70)中之溶液及含於50%乙腈之水(包含 0.05%三氟乙酸)溶液中之基質母液(10 mg/mL)。各取1.0 uL溶液置入MALDI靶盤上，乾燥。隨即可以準備分析樣本。有關MALDI靶盤之建議樣本製法可參見Bruker所提供之文獻。
分析性離子層析法 方法：IC – 定量 採用外標準物定量測定陽離子與陰離子；儀器: Thermo Scientific ICS 5000+；毛細IC管柱：IonPac AS11-HC與IonPac CS16；溶離液：梯度溶離液[H]+ [OH]-；檢測器：傳導性檢測；可能之例行陰離子：乙酸根、溴離子、檸檬酸根、氯離子、氟離子、甲酸根、乳酸根、甲磺酸根、磷酸根、硫酸根、酒石酸根、三氟乙酸根；可能之例行陽離子：銨、鋇、鈣、鉀、鋰、鈉、鎂、膽鹼。
分析性氣相層析質譜方法 GC-MS 方法1 儀器：Thermo Scientific DSQII，Thermo Scientific Trace GC Ultra；管柱：Restek RTX-35MS，15 m x 200 µm x 0.33 µm；恆定氦氣流速：1.20 mL/min；烘箱：60°C；入口：220°C；梯度：60°C，30°C/min → 300°C (保持3.33 min).NMR
所選定化合物之1 H-NMR數據係以1 H-NMR波峰列表型式出示。其中，每個訊號峰先以δ(ppm)數值表示，然後訊號強度則列於圓括號中。不同波峰之每對δ值-訊號強度數字之間以分號分隔。因此說明波峰列表型式之一般型式為：δ1(強度1)，δ2(強度2)，... ，δi(強度i)，... ，δn(強度n)。
陡峰訊號強度係與印出之NMR光譜中訊號高度(以cm計)呈相關性。當與其他訊號比較時，此數據可與訊號強度之真實比例呈相關性。在寬峰訊號中，則可出示超過一個峰或訊號中心及其相較於光譜中所顯示最高強度訊號之相對強度。1 H-NMR波峰列表類似印出之典型1 H-NMR圖，因此通常包含列於典型NMR解讀中之所有波峰。此外，類似印出之典型1 H-NMR圖，波峰列表可顯示溶劑訊號、來自特定目標化合物之立體異構物之訊號、13C衛星訊號、及/或旋轉邊帶。立體異構物之波峰與/或雜質之波峰通常顯示低於目標化合物(例如：純度＞90%)之波峰強度。此等立體異構物與/或雜質係典型出現在特定製法中。因此其波峰有助於藉由「副產物指印」辨識製造過程之再現性。採用已知方法(MestReC，ACD-模擬法，或採用實驗性分析之預期數值)計算目標化合物波峰之專家若需要時，可以視需要另外選用其他強度濾波器，單離出目標化合物之波峰。此單離法即類似典型1H-NMR解讀中相關波峰挑選法。有關以波峰列表型式報告NMR數據之進一步詳細說明可參見公開文獻：「Citation of NMR Peaklist Data within Patent Applications」(參見 http://www.researchdisclosure.com/searching-disclosures, Research Disclosure Database Number 605005, 2014, 01 Aug 2014)。在Research Disclosure Database Number 605005中說明之例行波峰挑選法中，「最小高度」參數可設在1%至4%之間。然而，依所測定化合物之化學結構及/或濃度而定，合理的「最小高度」參數可設定在＜ 1%。製備實例 一般合成法
固相肽合成法 (SPPS)係採用自動化肽合成儀進行，或手動進行。肽合成法的規模通常在0.1至1.0 mmol之範圍內進行。當肽合成法以手動進行時，採用下文說明之一般製程方法C、D與E。自動化肽合成法係於Symphony X肽合成儀(Gyros Protein Technologies)上進行。
受Fmoc保護之胺基酸(或用於製備Fmoc胺基酸之中間物胺基酸)係購自Novabiochem、Bachem、Iris Biotech、Sigma-Aldrich、Alfa、Enamine、Amatek、Anichem、ACBR、ABC Laboratory、AP Bioscience、Combiblocks、ArZa Bioscience、Ark Pharm、Acroteinchem、Apollo Scientific、Biofine、Broadpharm、VWR、或Gyros Protein Technologies(芴基甲氧基羰基 = Fmoc)、GL Biochem (Shanghai) Ltd、Chengdu Aminotp Pharmaceutical Technology Ltd、Suzhou Highfine Biotech Co.、Ltd、WuXi AppTec，或透過其他中國供應商提供。有些特殊之受fmoc保護之胺基酸係由內部合成，且此等合成方法已說明於本文中。有些內部合成之fmoc 胺基酸亦可自商品取得。若無法自商品取得Fmoc保護之胺基酸，但可自商品取得Boc保護(第三丁氧羰基 = Boc)之非天然胺基酸時，可由Boc保護之胺基酸採用相關技藝常用之方法脫除保護基及再度保護，製成fmoc保護之胺基酸。本發明肽合成法所採用非天然胺基酸商品之CAS編號大部份已包括在表5中。若購買消旋性胺基酸(Fmoc或Boc)時，相關技藝中具有通常知識者應了解可以採用對掌性層析法分離對映異構物，且事實上有時候可以在肽合成法之前先得到純對映異構性胺基酸。
下列非天然胺基酸已用於製備本發明肽。Fmoc-或Boc-保護之胺基酸係得自商品來源(可取得CAS編號)，或在內部採用本文說明之方法合成。表5出示用於肽合成法之化學基團/胺基酸之CAS編號(右欄)及出現在肽中之對應化學基團/胺基酸(左欄)。 表5：本發明可採用之非天然胺基酸與化學基團
縮寫 / 表示法定義 用於肽合成法之 Fmoc-/Boc 保護之胺基酸、化學基團或構成嵌段之 CAS 編號
環己烷羧酸 98-89-5
(2S)-胺基-2-[3-(三氟甲基)雙環[1.1.1]戊-1-基]乙酸 914082-67-0
(S)-3-(2H-四唑-5-基)丙酸 954147-35-4
(1R,3S)-3-(胺基)環戊烷羧酸 220497-67-6
(1R,3S,4S)-2-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-3-羧酸 291775-59-2
(1R,3S,5R)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-羧酸 1932624-93-5
(1S,2S,4S)-雙環[2.2.1]庚-5-烯-2-基乙酸 14734-13-5
(1S,2S,5R)-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-羧酸 400720-05-0 (Boc)；854113-43-2
(1S,3R)-3-(胺基)環戊烷羧酸 220497-66-5
(1S,3R,4R)-2-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-3-羧酸 291775-53-6；291775-53-6 (Boc)
(2,4-二側氧基咪唑啶-1-基)乙酸 94738-31-5；94738-31-5 (NH)
2-氰基-L-苯基丙胺酸 401933-16-2
2-氟-L-苯基丙胺酸 205526-26-7
2-甲基-L-苯基丙胺酸 211637-75-1
(2S)-(四氫-2H-吡喃-4-基)乙酸 368866-31-3
(2S,4S)-4-三氟甲基-吡咯啶-2-羧酸 1242934-32-2
(3,3-二氟環丁基)乙酸 1373503-48-0
3-氰基-L-苯基丙胺酸 205526-36-9
3-氟-L-苯基丙胺酸 8560-68-8
4-氟-L-苯基丙胺酸 169243-86-1
5-氮雜螺[2.4]庚烷-1-羧酸 150543-61-6
D-(+)生物素 58-85-5
L-N,N-二甲基丙胺酸 2812-31-9
N,N-二甲基甘胺酸 1118-68-9
2-(N-異丙基-N-甲基胺基)乙酸 4747-21-1
L-N-甲基丙胺酸 84000-07-7
D-N-甲基丙胺酸 138774-92-2
L-N-甲基半胱胺酸 944797-51-7
L-N-甲基苯基丙胺酸 77128-73-5
N-甲基-甘胺酸 77128-70-2
L-N-甲基異白胺酸 138775-22-1
N-苯基甘胺酸 103-01-5
(R)-3-胺基己二酸 197006-18-1
(R)-4-胺基-6-甲基庚酸 269078-75-3
(R)-哌啶-3-羧酸 193693-67-3；163438-09-3 (Boc)
(R)-吡咯啶-3-羧酸 68464-02-8
(S)-(1-哌啶-3-基)-乙酸 1217646-18-8
(S)-2-胺基-3-乙基-戊酸  1310680-47-7 
(S)-3-(1-吡咯啶-2-基)-丙酸 1013997-51-7
(S)-3-(2H-四唑-5-基)丙酸 954147-35-4
(S)-3-甲基戊酸 1730-92-3
(S)-4-哌𠯤-2-羧酸 1217628-46-0
(S)-哌啶-3-羧酸 193693-68-4
(S)-吡咯啶-3-羧酸 193693-66-2；140148-70-5 (Boc)
[(2R)-4,4-二氟吡咯啶-2-基]乙酸 1402687-79-9
[(6S)-5-氮雜螺[2.4庚-6-基]乙酸 Omegachem (OC-0701)
1,1-二氧離子基四氫-2H-硫吡喃-4-基)乙酸 1224869-02-6
L-1-萘基丙胺酸 96402-49-2
2-(3-吡啶基)乙酸 501-81-5
2-(胺基甲基)苯甲酸 219640-94-5
2-(環己基胺基)乙酸 108-91-8
2-(二乙基胺基)乙酸 109-89-7
2-(嗎福啉)乙酸 110-91-8
2-(N-甲基-N-環丙基胺基)乙酸 5163-20-2
2-(哌啶)乙酸 110-89-4
2-(吡咯啶)乙酸 123-75-1
2-(硫雜環己烷-4-基)乙酸 137103-09-4
2-(硫嗎福啉)乙酸 123-90-0
2,3-二氟-L-苯基丙胺酸 1260605-30-8
2-胺基苯甲酸 150256-42-1
2-氮雜螺[3.3]庚烷-6-羧酸 2138525-84-3
L-2-溴苯基丙胺酸 220497-47-2
2-氯-L-苯基丙胺酸 198560-41-7
2-氰基苯甲酸 3839-22-3
2-氟苯甲酸 445-29-4
2-羥基乙酸 7732-18-5
2-羥基異丁酸 594-61-6
2-甲基苯甲酸 118-90-1
2-甲基-L-苯基丙胺酸 211637-75-1
L-2-萘基丙胺酸 112883-43-9
L-2-吡啶基丙胺酸 185379-40-2
(2S)-吡咯啶-2-基乙酸 19693-60-6
3-(2-側氧基咪唑啶-1-基)苯甲酸 884504-86-3
3-(3-側氧基-1,3,4,5,6,7-六氫-2H-吲唑-2-基)苯甲酸 885949-86-0
3-(胺基甲基)苯甲酸 117445-22-4
3-(異丁醯基胺基)苯甲酸 28533-44-0
3-(三氟甲基)雙環[1.1.1]戊-1-基]乙酸 914082-67-0
3-[(E)-(2-羧基環己烯-1-基)偶氮]苯甲酸 885949-86-0
3-乙醯胺基苯甲酸 587-48-4
3-胺基-2,2-二甲基丙酸 1076197-00-6
3-胺基-3-甲基丁酸 244031-65-0；129765-95-3 (Boc)
3-胺基苯甲酸 185116-42-1
3-胺基甲基苯基乙酸 631915-50-9
L-3-溴苯基丙胺酸 220497-48-3
3-羧基苯甲酸 121-91-5
3-氯-L-苯基丙胺酸 198560-44-0
3-氯苯基甘胺酸 10242-05-4
3-氰基苯甲酸 1877-72-1
3-氟苯甲酸 455-38-9
3-甲基-L-苯基丙胺酸 211637-74-0
3-甲氧基丙酸 2544-06-1
3-甲基苯甲酸 99-04-7
L-3-吡啶基丙胺酸 175453-07-3
4-(胺基甲基)苯甲酸 33233-67-9
4-胺基苯甲酸 185116-43-2
4-胺基甲基苯基乙酸 176504-01-1；71420-92-3 (Boc)
L-4-胺基苯基丙胺酸 95753-56-3
L-4-溴苯基丙胺酸 198561-04-5
4-羧基苯甲酸 100-21-0
4-氰基苯甲酸 619-65-8
4-氟苯甲酸 456-22-4
4-氟-L-白胺酸 1643928-01-1
4-甲基-3-側氧基-3,4-二氫-2H-1,4-苯并㗁𠯤-8-羧酸 141762-02-9
4-甲基苯甲酸 99-94-5
4-甲基戊酸 646-07-1
L-4-吡啶基丙胺酸 169555-95-7
4-哌啶丙酸 154938-68-8
4-四氫吡喃甲醯基 368866-31-3
5-氯噻吩-2-羧酸 24065-33-6
8-胺基立方烷-1-羧酸  Enamine EN300-88072 (MFCD09971721)
(S)-2-(胺基)-1,6-己烷二酸 159751-47-0
L-2-胺基丁酸 135112-27-5
1-胺基環丁烷-1-羧酸 885951-77-9
胺基環丁烷羧酸  885951-77-9
1-(胺基甲基)-環丙基-1-羧酸 1263045-62-0
(1S,2S)-2-胺基-1-環戊烷羧酸  359586-64-4
(1R,2R)-2-胺基-1-環戊烷羧酸  359586-69-9
rel-(1R,2S)-2-胺基-1-環戊烷羧酸  352707-76-7
己二酸 124-04-9
6-胺基己酸 88574-06-5
2-胺基異丁酸 94744-50-0
L-第三丁基丙胺酸 139551-74-9
別-L-異白胺酸 251316-98-0
別-L-蘇胺酸 201481-37-0
2-甲基-L-脯胺酸 167275-47-0
N(5)-甲基-L-精胺酸 1135616-49-7
(S)-氮雜環丁烷-2-羧酸 136552-06-2；51077-14-6 (Boc)
苯甲酸 65-85-0
L-2-噻吩基丙胺酸 130309-35-2
β-丙胺酸 35737-10-1
溴乙醯基  79-08-3
4-(3,5-二甲基-1,2-㗁唑-4-基)-L-苯基丙胺酸 1381790-25-5
(2S)-2-胺基-3-(4-第三丁基苯基)丙酸 143415-62-7
(2S)-2-胺基-5-甲基-己酸 180414-94-2
(2S)-2-胺基-4,4,4-三氟丁酸 181128-48-3
(2S)-3-(4-羧基苯基)-2-胺基丙酸 183070-44-2
(2S)-2-胺基-3-(4-胺甲醯基苯基)丙酸 205126-71-2
(2S)-2-胺基-3-(2,3,4,5,6-(五氟苯基)丙酸 205526-32-5
(2S)-3-(3-氰基苯基)-2-胺基丙酸 205526-36-9
3-疊氮基-L-丙胺酸 684270-46-0
2-胺基-5,5,5-三氟-4-甲基-戊酸 777946-04-0
(1R,2S,5S)-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-羧酸  167611-99-6 (Boc)；1219181-14-2 (rac)
L-環丁基丙胺酸 478183-62-9
(S)-2-胺基-2-環丁基乙酸 1391630-31-1
L-環己基丙胺酸 135673-97-1
D-環己基丙胺酸 144701-25-7
L-環己基甘胺酸 161321-36-4
L-4,4-二氟脯胺酸  
(2S,4S)-4-氟脯胺酸 203866-19-7
L-瓜胺酸 133174-15-9
L-2-胺基-4-氰基丁酸 913253-24-4
3,3-二甲基-1,3-氮雜矽雜環戊烷-5-羧酸 268224-29-9 (Boc)
(S)-(三氟甲基)-L-半胱胺酸 1994331-25-7
(2S)-2-胺基-3-(1-甲基環丙基)丙酸 2350203-57-3
(2S)-3-(吲哚-4-基)-2-(胺基)丙酸 220499-20-7
(2S)-3-(2,3-二氟苯基)-2-胺基丙酸 266360-64-9
L-環戊基丙胺酸 371770-32-0
L-環戊基甘胺酸 220497-61-0
環丁烷羧酸 3721-95-7
2-(環丁基)乙酸 6540-33-6
L-環丁基甘胺酸 49607-08-1
環己基乙酸 5292-21-7
環戊烷羧酸 3400-45-1
環戊基乙酸 1123-00-8
環丙烷羧酸 1759-53-1
環丙基乙酸 5239-82-7
D-2-氯苯基丙胺酸 205526-22-3
L-2,4-二胺基丁酸 125238-99-5；607366-21-2 (ivDde)；851392-68-2 (MTT)
L-2,3-二胺基丙酸 162558-25-0；607366-20-1 (ivDde)；654670-89-0 (MTT)
D-β-脯胺酸 193693-61-7
D-羥基脯胺酸 464193-92-8
(2S)-2-胺基-4-(苯甲基胺基)-4-側氧基丁烷羧酸  100-46-9 
(2S)-2-[(3R)-3-胺基-2-側氧基吡咯啶-1-基]-4-甲基戊酸 957507-85-6
富馬酸 110-17-8
γ-胺基丁酸 116821-47-7；57294-38-9 (Boc)
L-第三丁基甘胺酸 132684-60-7
1-苯甲基-L-組胺酸 84030-19-3
1-甲基-L-組胺酸 202920-22-7
L-3-甲基組胺酸 84030-19-3
L-高碳半胱胺酸 167015-23-8
L-二氫乳清酸 5988-19-2
3-苯基丙酸 501-52-0
L-羥基脯胺酸 122996-47-8
亞胺基二乙酸 142-73-4
異丁酸 79-31-2
異哌啶酸 148928-15-8
異戊酸 503-74-2
N-e-異丙基-L-離胺酸 201003-48-7
3-乙基-L-正纈胺酸 1310680-47-7
L-(+)-乳酸 79-33-4
3-(1,3-苯并噻唑-2-基)-L-丙胺酸 959583-56-3
(S)-吡咯啶-2-羧酸 193693-60-6
L-炔丙基甘胺酸 1435854-95-7
(3S)-嗎福啉-3-羧酸 281655-37-6
菸酸 59-67-6
L-正白胺酸 77284-32-3
N-甲基-L-脯胺酸 475-11-6
L-正纈胺酸 135112-28-6
1,18-十八烷二酸 871-70-5
 2,3,3a,4,5,6,7,7a-八氫吲哚-2-羧酸 130309-37-4
L-鳥胺酸 109425-55-0；269062-80-8 (DDE)；1198321-33-3 (ivDDE)；147290-11-7 (Alloc)
棕櫚酸 57-10-3
9-胺基-4,7-二氧雜壬酸 872679-70-4
12-胺基-4,7,10-三氧雜十二烷酸 867062-95-1
15-胺基-4,7,10,13-四氧雜十五烷酸 557756-85-1
18-胺基-4,7,10,13,16-五氧雜十八烷酸 882847-32-7
14-胺基-3,6,9,12-四氧雜十四烷酸 437655-95-3
1-胺基-3,6,9,12,15,18-六氧雜二十一烷-21-酸 882847-34-9
17-胺基-3,6,9,12,15-五氧雜十七烷酸 635287-26-2
1-胺基-3,6,9,12,15,18,21-七氧雜二十四烷-24-酸 1863885-74-8
1-胺基-3,6,9,12,15,18,21,24-八氧雜二十七烷-27-酸 756526-02-0
1-胺基-3,6,9,12,15,18,21,24,27-九氧雜三十烷-30-酸 1191064-81-9
L-青黴胺 201531-88-6
苯基乙酸 103-82-2
L-苯基甘胺酸 102410-65-1
吡啶甲酸 98-98-6
L-哌啶甲酸 86069-86-5
哌啶-4-基乙酸 157688-46-5 (Boc)；180181-05-9
特戊酸 75-98-9
L-反式-3-羥基脯胺酸 4298-08-2
L-焦麩胺酸 53100-44-0
S-2-胺基-3-乙基-戊酸 1310680-47-7
S-3-1-吡咯啶-2-基-丙酸 MFCD09952617
辛二酸 505-48-6
第三丁基乙酸 1070-83-3
四氫吡喃基-4-乙酸 85064-61-5
三氟乙酸  76-05-1 
L-2-噻吩基丙胺酸 130309-35-2
(2S,3S)-2-[(3R)-3-胺基-2-側氧基吡咯啶-1-基]-3-甲基戊酸 301840-23-3
(2S,3S)-2-[2-側氧基哌𠯤-1-基]-3-甲基戊酸 -
(2S,3S)-2-[(3S)-2-側氧基哌𠯤-1-基]-3-甲基戊酸 -
(1R,3S,5R)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-羧酸 1932624-93-5
3-(三甲基矽烷基)-L-丙胺酸 359766-59-9
(6S)-5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-羧酸 2170726-27-7
rel-(1R,3R,5R,6R)-6-(三氟甲基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-羧酸 1986905-54-7
(4aR,6aR,9S,11aS)-11-側氧基-2,3,4,4a,6a,7,8,9,11,11a-十氫-1H-吡啶并[3,2-e]吡咯并[1,2-a]氮雜環庚烯-9-羧酸 1637768-88-7
(2S)-2[(胺基)-2-(四氫-2H-吡喃-4-基)]乙酸 368866-31-3
(2S,3S)-2-((胺基)甲基)-3-甲基戊酸 671233-52-6
2-[(1S,2S)-1-(胺基)-2-甲基丁基]-1,3-㗁唑-4-羧酸 1238864-23-7
(2S)-胺基-(1-甲基-1H-吲唑-5-基)乙酸 -
(2R)-胺基-(1-甲基-1H-吲唑-5-基)乙酸 -
3-羧基苯基丙胺酸 -
2-甲基-D-別異白胺酸 118904-37-3
4-乙基-L-正白胺酸 1998613-43-6
L-2,6-二氟苯基丙胺酸 1235005-44-3
2,5-二氟-L-苯基丙胺酸 1004959-90-3
(2S,3aS,6aS)-八氫環戊并[b]吡咯-2-羧酸 87269-87-2
(2S)-2-(胺基)-2-[(1S,3R)-3-羥基環己基]乙酸 -
(2S)-2-(胺基)-2-[(1S,3S)-3-羥基環己基]乙酸 -
2-胺基-7-(第三丁氧基)-7-側氧基庚酸 159751-46-9
(2S)-3-(三唑-1-基)-2-(胺基)丙酸 -
四氫-2H-吡喃-3-基乙酸 1395922-27-6
rel-(1R,3S)-3-[(胺基)甲基]環己烷羧酸 2138238-33-0
(3R,6R)-1,1-二氟-5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-羧酸(對映異構物1) -
(3R,6R)-1,1-二氟-5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-羧酸(對映異構物2) -
傳明酸 167690-53-1；27687-14-5 (Boc)
反式-2-(3-(胺基)環己基)乙酸 347185-01-7
反式-4-氟脯胺酸 203866-20-0
1,13-二胺基-4,7,10-三氧雜十三烷-琥珀醯胺酸 172089-14-4
4-哌𠯤-2-羧酸 1034574-30-5
(2-吡咯啶-1-基) 乙酸 37386-15-5
(S)-2-(胺基)-1,6-己烷二酸(AAD) 159751-47-0
弗瑞丁格氏內醯胺(Freidinger’s Lactam) 145484-45-3
(R)-吡咯啶-3-乙酸 2137100-59-3
(2S)-2-(嗎福啉-4-基)丙酸 110582-65-5
L-脫氫脯胺酸 135837-63-7
(3S)-2-氮雜螺[4.4]壬烷-3-羧酸 394734-78-2
(2R)-2-胺基-3-(三氟甲基硫烷基)丙酸 1994331-25-7
Arg(13C6,15N4) 1217461-89-6
固相樹脂係購自Novabiochem、Bachem、Iris Biotech、Pcas Biomatrix、GL Biochem (Shanghai) Ltd、CEM、或Protein Technologies。樹脂加載量為0.3 – 1.0 mmol/g。肽係於2-氯三苯甲基樹脂、Wang樹脂、或Rink 醯胺型樹脂上合成，端賴所需C-端而定。於室溫下，使用20%哌啶之二甲基甲醯胺溶液裂解芴基甲氧基羰基(Fmoc)保護基。每個Fmoc 裂解步驟均進行2次。胺基酸係在自動化合成儀上(Symphony X)，使用8當量Fmoc-胺基酸、8當量 DIC (二異丙基碳化二亞胺) (0.5 M DMF溶液)及8當量 Oxyma (氰基羥基亞胺基乙酸乙酯) (0.5M DMF溶液)偶合。使用Symphony X時，胺基酸偶合法係於室溫下及氮蒙氣下進行，當使用高價或自家製備之fmoc-胺基酸時，則使用3當量Fmoc-胺基酸、3當量DIC (0.5 M DMF溶液)及3當量 Oxyma (0.5M DMF溶液)進行手動偶合。每個胺基酸偶合步驟均進行兩次(雙重偶合)。或者，使用3當量Fmoc-胺基酸、2.85當量HBTU ((2-(1H-苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽，六氟磷酸鹽苯并三唑四甲基脲鎓(H exafluorophosphateB enzotriazoleT etramethylU ronium)) (0.5 M DMF溶液)及6當量DIPEA (0.5 M DMF溶液)，採用SPPS手動製備肽。該偶合反應係採用茚三酮(ninhydrin)試驗追蹤。
使用三氟乙酸(TFA)/硫苯甲醚(TA)/1,2-乙二硫醇(EDT) (90：7：3)或使用92.5%TFA/2.5%EDT/2.5%TIS (三異丙基矽烷)/2.5%H2 O完全脫除肽之保護基。針對包含甲硫胺酸之肽，使用1.6% EDT及1.2% 三甲基矽烷基溴之TFA溶液，於室溫下處理該肽 2 h，還原已氧化之甲硫胺酸。二硫化物環化法：
由肽於0.1 M碳酸氫銨緩衝液(pH 7.83)中(濃度為0.5 mg/mL)振盪一夜後，溶液冷凍乾燥，形成二硫化物橋連。或者，由肽於已使用固體碳酸氫銨緩衝劑調整至 pH 9.0之乙腈/水混合物(經常為3：7)中(濃度為1-3 mg/mL)振盪一夜，形成二硫化物橋連。或者，使用碘(I2 ) (0.1 M MeOH溶液)，濃度為1 – 1.3 mg/mL之乙腈/水(1：1)溶液於20°C下氧化2min後，使用硫代硫酸鈉(0.1 M水溶液)處理後，冷凍乾燥，製成二硫化物橋連。視需要進行之乙醯基化：
N-端乙醯基化係使用10當量乙酸酐之DMF溶液(2 mL)及2.5當量 DIPEA進行，懸浮液於於室溫下，於環繞式振盪器上振盪1 h。排除溶劑，使用DMF (5x)及DCM (5x) 洗滌樹脂。再次重覆製程。或者，N-端乙醯基化係使用10 mL封端溶液(由乙酸酐/N-甲基嗎福啉(NMM)/DMF (10：5：85)組成)進行，懸浮液於於室溫下，於環繞式振盪器上振盪30 min。肽裂解：
製備包含TFA/EDT/硫代苯甲醚(90：3：7)之裂解混合液。添加該裂解混合液(2 mL)至包含肽之樹脂中，懸浮液於環繞式振盪器上振盪2.5小時。添加冷的醚(-20°C)，使肽沉澱。所得溶液於氮氣下離心(Sigma 2-16KL)，傾析後所得固體再使用冷的醚，經過離心及傾析洗滌3次。所得固體採用製備性HPLC純化。
或者，製備包含 TFA/EDT/TIS/H2 O (92.5：2.5：2.5：2.5)之裂解混合液。添加該裂解混合液(6 mL (0.3 mmol規模))至包含肽之樹脂中，懸浮液於環繞式振盪器上振盪2.5小時。添加冷的第三丁基甲基醚(-20°C)，使肽沉澱。所得溶液於3000 rpm下離心3 min，傾析後所得固體再使用冷的第三丁基甲基醚(20 mL x 3)，經過離心及傾析洗滌3次。所得粗製肽真空乾燥2小時後，採用製備性HPLC純化。製備性 HPLC ：
採用Agilent 1260製備性逆相HPLC或Knauer AZURA製備性逆相HPLC進行純化。依據管柱篩選結果選擇管柱。肽溶於10 – 30% ACN/水(通常為梯度起點)。水與乙腈二者均包含0.1% TFA。通常採用流速20 mL/min，10-30% ACN/水至85-90% ACN/水。溶出份係利用HPLC(Agilent 1260 Infinity)(使用Chromolith Speedrod管柱，5-95%ACN/水梯度，歷時8 min)及採用以下一或多種LC-MS方法分析：方法1、方法2、方法3、方法4、方法5、方法6。
或者，採用Gilson GX-281製備性逆相HPLC進行純化。依據管柱篩選結果選擇管柱。肽溶於10 – 30% ACN/水(通常為梯度起點)。水包含0.075%TFA。通常採用Luna管柱 (25 x 200 mm, C18 10  μm, 110 Å)或Gemini管柱 (30 x 150 mm, C18 5  μm,110 Å)。製備性HPLC之條件：流速20 mL/min，10-30% ACN/水至85-90% ACN/水，波長214/254 nm，烘箱溫度30o C。溶出份利用HPLC(Agilent 1260 Infinity)，使用方法W1或方法7分析。隨後採用以下一或多種方法分析肽：方法1、方法2、方法3、方法4、方法5、方法6。
其中-S-S-二硫鍵被-CH2 -S-、-S-CH2 -、-CH2 -CH2 -、-S-(CH2 )2 -、-(CH2 )2 -S-或 -CH2 -S-CH2 -置換之二硫化物擬似物可依據下列參考文獻說明之製程，組合本文說明之方法製備：(1) Hong-Kui Cui, Ye Guo, Yao He, Feng-Liang Wang, Hao-Nan Chang, Yu-Jia Wang, Fang-Ming Wu, Chang-Lin Tian, Lei LiuAngew. Chem. Int. Ed .2013 ,52 , 9558–9562；(2) Ye Guo, De-Meng Sun, Feng-Liang Wang, Yao He, Lei Liu, Chang-Lin TianAngew. Chem. Int. Ed. 2015, 54 , 14276–14281；(3) Yang Xu, Tao Wang, Chao-Jian Guan, Yi-Ming Li, Lei Liu, Jing Shi, Donald BiererTetrahedron Letters 2017 ,58 , 1677–1680；(4) Tao Wang, Yi-Fu Kong, Yang Xu, Jian Fan, Hua-Jian Xu, Donald Bierer, Jun Wang, Jing Shi, Yi-Ming LiTetrahedron Letters 2017 ,58 , 3970–3973；(5) Tao Wang, Jian Fan, Xiao-Xu Chen, Rui Zhao, Yang Xu, Donald Bierer, Lei Liu, Yi-Ming Li, Jing Shi, Ge-Min FangOrg. Lett. 2018 ,20 , 6074−6078；(6) Jan‐Patrick Fischer, Ria Schönauer, Sylvia Els‐Heindl, Donald Bierer, Johannes Koebberling, Bernd Riedl, Annette G. Beck‐SickingerJ Pep Sci. 2019 ；e3147；(7) Dong-Liang Huang, Jing-Si Bai, Meng Wu, Xia Wang, Bernd Riedl, Elisabeth Pook, Carsten Alt, Marion Erny, Yi-Ming Li, Donald Bierer, Jing Shi, Ge-Min FangChem. Commun. ,2019 ,55 , 2821−2824；(8) Shuai-Shuai Sun, Junyou Chen, Rui Zhao, Donald Bierer, Jun Wang, Ge-Min Fang, Yi-Ming LiTetrahedron Letters 2019 ,60 , 1197–1201；(9) C. M. B. K. Kourra及N. CramerChem. Sci .,2016 ,7 , 7007–7012。
本發明所有肽除非另有其他說明，否則均為TFA鹽。
Masp肽之自動化SPPS之通用方法(方法A)
以((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPD-NH2 (實例165)之合成法為代表。
採用標準Fmoc化學法合成該肽。
自動化SPPS係於Symphony X肽合成儀(Protein Technologies)上進行。通常採用ChemMatrix Rink 醯胺樹脂(加載0.5 mmol/g) ，0.1 mmol規模。取樹脂置入反應瓶中，置入儀器上。製備下列溶液及用於合成法中： 1)    Fmoc 胺基酸：0.2 M (8 eq) 2)    活化劑1：0.5 M DIC之DMF溶液(7.5 eq) 3)    活化劑2：0.5 M Oxyma之DMF溶液(7.5 eq) 4)    脫除Fmoc保護基：20%哌啶之DMF溶液 5)    乙酸酐(10當量)之2 mL DMF溶液
各胺基酸通常進行雙重偶合法。針對高價的非天然Fmoc或Boc 胺基酸、自家合成之Fmoc 胺基酸、或N-甲基化胺基酸，則穿插在序列中，並手動偶合此胺基酸(雙重偶合，但通常使用較少試劑(3-5當量)。此偶合完成時，通常繼續在合成儀上進行合成。若在序列上增加N-甲基胺基酸時，通常亦手動偶合下一個胺基酸。所有步驟均在室溫及氮氣下進行。Fmoc-Pen及Fmoc-Oic通常使用自動化SPPS偶合。Fmoc(N-Me)G通常手動偶合。Ahx則總是手動偶合。
使樹脂膨脹及使用DMF洗滌(3 x 3 mL, 10 min)。若樹脂包含Fmoc時，則使用20%哌啶溶液(2 x 3 mL, 10 min)脫除Fmoc。樹脂係使用DMF洗滌(6 x 3 mL, 30 sec)。
偶合： 添加Fmoc-Asp(t-Bu) (4.0 mL)。添加活化劑1溶液(DIC, 1.5 mL)及活化劑2溶液(Oxyma, 1.5 mL)，在氮氣鼓泡下進行偶合2小時。溶液瀝乾，及使用DMF洗滌(1 x 3 mL, 30 sec)。重覆偶合步驟。添加Fmoc-Asp(Ot-Bu) (4.0 mL)。添加活化劑1溶液(DIC, 1.5 mL)及活化劑2溶液(Oxyma, 1.5 mL)，在氮氣鼓泡下進行偶合2小時。溶液瀝乾，及使用DMF洗滌(6 x 3 mL, 30 sec)。
裂解Fmoc： 添加20%哌啶溶液(2 x 3 mL, 10 min)來脫除Fmoc保護基。樹脂係使用DMF洗滌(6 x 3 mL, 30 sec)。
偶合： 添加Fmoc-Pro (4.0 mL)。添加活化劑1溶液(DIC, 1.5 mL)及活化劑2溶液(Oxyma, 1.5 mL)，在氮氣鼓泡下進行偶合2小時。溶液瀝乾，及使用DMF洗滌(1 x 3 mL, 30 sec)。重覆偶合步驟。添加Fmoc-Pro (4.0 mL)。添加活化劑1溶液(DIC, 1.5 mL)及活化劑2溶液(Oxyma, 1.5 mL)，在氮氣鼓泡下進行偶合2小時。溶液瀝乾，及使用DMF洗滌(6 x 3 mL, 30 sec)。
裂解Fmoc： 添加20%哌啶溶液(2 x 3 mL, 10 min)來脫除Fmoc保護基。樹脂係使用DMF洗滌(6 x 3 mL, 30 sec)。
偶合： 添加Fmoc-Ile (4.0 mL)。添加活化劑1溶液(DIC, 1.5 mL)及活化劑2溶液(Oxyma, 1.5 mL)，在氮氣鼓泡下進行偶合2小時。溶液瀝乾，及使用DMF洗滌(1 x 3 mL, 30 sec)。重覆偶合步驟。添加Fmoc-Ile (4.0 mL)。添加活化劑1溶液(DIC, 1.5 mL)及活化劑2溶液(Oxyma, 1.5 mL)，在氮氣鼓泡下進行偶合2小時。溶液瀝乾，及使用DMF洗滌(6 x 3 mL, 30 sec)。
裂解Fmoc： 添加20%哌啶溶液(2 x 3 mL, 10 min)來脫除Fmoc保護基。樹脂係使用DMF洗滌(6 x 3 mL, 30 sec)。
偶合： 添加Fmoc-Pen(Trt) (4.0 mL)。添加活化劑1溶液(DIC, 1.5 mL)及活化劑2溶液(Oxyma, 1.5 mL)，在氮氣鼓泡下進行偶合2小時。溶液瀝乾，及使用DMF洗滌(1 x 3 mL, 30 sec)。重覆偶合步驟。添加Fmoc-Pen(Trt) (4.0 mL)。添加活化劑1溶液(DIC, 1.5 mL)及活化劑2溶液(Oxyma, 1.5 mL)，在氮氣鼓泡下進行偶合2小時。溶液瀝乾，及使用DMF洗滌(6 x 3 mL, 30 sec)。
裂解Fmoc： 添加20%哌啶溶液(2 x 3 mL, 10 min)來脫除Fmoc保護基。樹脂係使用DMF洗滌(6 x 3 mL, 30 sec)。
偶合： 添加Fmoc-Ile (4.0 mL)。添加活化劑1溶液(DIC, 1.5 mL)及活化劑2溶液(Oxyma, 1.5 mL)，在氮氣鼓泡下進行偶合2小時。溶液瀝乾，及使用DMF洗滌(1 x 3 mL, 30 sec)。重覆偶合步驟。添加Fmoc-Ile (4.0 mL)。添加活化劑1溶液(DIC, 1.5 mL)及活化劑2溶液(Oxyma, 1.5 mL)，在氮氣鼓泡下進行偶合2小時。溶液瀝乾，及使用DMF洗滌(6 x 3 mL, 30 sec)。
裂解Fmoc： 添加20%哌啶溶液(2 x 3 mL, 10 min)來脫除Fmoc保護基。樹脂係使用DMF洗滌(6 x 3 mL, 30 sec)。
偶合： 添加Fmoc-Oic (4.0 mL)。添加活化劑1溶液(DIC, 1.5 mL)及活化劑2溶液(Oxyma, 1.5 mL)，在氮氣鼓泡下進行偶合2小時。溶液瀝乾，及使用DMF洗滌(1 x 3 mL, 30 sec)。重覆偶合步驟。添加Fmoc-Oic (4.0 mL)。添加活化劑1溶液(DIC, 1.5 mL)及活化劑2溶液(Oxyma, 1.5 mL)，在氮氣鼓泡下進行偶合2小時。溶液瀝乾，及使用DMF洗滌(6 x 3 mL, 30 sec)。
裂解Fmoc： 添加20%哌啶溶液(2 x 3 mL, 10 min)來脫除Fmoc保護基。樹脂係使用DMF洗滌(6 x 3 mL, 30 sec)。
偶合： 添加Fmoc-Pro (4.0 mL)。添加活化劑1溶液(DIC, 1.5 mL)及活化劑2溶液(Oxyma, 1.5 mL)，在氮氣鼓泡下進行偶合2小時。溶液瀝乾，及使用DMF洗滌(1 x 3 mL, 30 sec)。重覆偶合步驟。添加Fmoc-Pro (4.0 mL)。添加活化劑1溶液(DIC, 1.5 mL)及活化劑2溶液(Oxyma, 1.5 mL)，在氮氣鼓泡下進行偶合2小時。溶液瀝乾，及使用DMF洗滌(6 x 3 mL, 30 sec)。
裂解Fmoc： 添加20%哌啶溶液(2 x 3 mL, 10 min)來脫除Fmoc保護基。樹脂係使用DMF洗滌(6 x 3 mL, 30 sec)。
偶合： 添加Fmoc-Leu (4.0 mL)。添加活化劑1溶液(DIC, 1.5 mL)及活化劑2溶液(Oxyma, 1.5 mL)，在氮氣鼓泡下進行偶合2小時。溶液瀝乾，及使用DMF洗滌(1 x 3 mL, 30 sec)。重覆偶合步驟。添加Fmoc-Leu (4.0 mL)。添加活化劑1溶液(DIC, 1.5 mL)及活化劑2溶液(Oxyma, 1.5 mL)，在氮氣鼓泡下進行偶合2小時。溶液瀝乾，及使用DMF洗滌(6 x 3 mL, 30 sec)。
裂解Fmoc： 添加20%哌啶溶液(2 x 3 mL, 10 min)來脫除Fmoc保護基。樹脂係使用DMF洗滌(6 x 3 mL, 30 sec)。
偶合： 添加Fmoc-Ser(t-Bu) (4.0 mL)。添加活化劑1溶液(DIC, 1.5 mL)及活化劑2溶液(Oxyma, 1.5 mL)，在氮氣鼓泡下進行偶合2小時。溶液瀝乾，及使用DMF洗滌(1 x 3 mL, 30 sec)。重覆偶合步驟。添加Fmoc-Ser(t-Bu) (4.0 mL)。添加活化劑1溶液(DIC, 1.5 mL)及活化劑2溶液(Oxyma, 1.5 mL)，在氮氣鼓泡下進行偶合2小時。溶液瀝乾，及使用DMF洗滌(6 x 3 mL, 30 sec)。
裂解Fmoc： 添加20%哌啶溶液(2 x 3 mL, 10 min)來脫除Fmoc保護基。樹脂係使用DMF洗滌(6 x 3 mL, 30 sec)。
偶合： 添加Fmoc-Arg(Pbf) (4.0 mL)。添加活化劑1溶液(DIC, 1.5 mL)及活化劑2溶液(Oxyma, 1.5 mL)，在氮氣鼓泡下進行偶合2小時。溶液瀝乾，及使用DMF洗滌(1 x 3 mL, 30 sec)。重覆偶合步驟。添加Fmoc-Arg(Pbf) (4.0 mL)。添加活化劑1溶液(DIC, 1.5 mL)及活化劑2溶液(Oxyma, 1.5 mL)，在氮氣鼓泡下進行偶合2小時。溶液瀝乾，及使用DMF洗滌(6 x 3 mL, 30 sec)。
裂解Fmoc： 添加20%哌啶溶液(2 x 3 mL, 10 min)來脫除Fmoc保護基。樹脂係使用DMF洗滌(6 x 3 mL, 30 sec)。
偶合： 添加Fmoc-Ser(t-Bu) (4.0 mL)。添加活化劑1溶液(DIC, 1.5 mL)及活化劑2溶液(Oxyma, 1.5 mL)，在氮氣鼓泡下進行偶合2小時。溶液瀝乾，及使用DMF洗滌(1 x 3 mL, 30 sec)。重覆偶合步驟。添加Fmoc-Ser(t-Bu) (4.0 mL)。添加活化劑1溶液(DIC, 1.5 mL)及活化劑2溶液(Oxyma, 1.5 mL)，在氮氣鼓泡下進行偶合2小時。溶液瀝乾，及使用DMF洗滌(6 x 3 mL, 30 sec)。
裂解Fmoc： 添加20%哌啶溶液(2 x 3 mL, 10 min)來脫除Fmoc保護基。樹脂係使用DMF洗滌(6 x 3 mL, 30 sec)。
偶合： 添加Fmoc-Cys(Trt) (4.0 mL)。添加活化劑1溶液(DIC, 1.5 mL)及活化劑2溶液(Oxyma, 1.5 mL)，在氮氣鼓泡下進行偶合2小時。溶液瀝乾，及使用DMF洗滌(1 x 3 mL, 30 sec)。重覆偶合步驟。添加Fmoc-Cys(Trt) (4.0 mL)。添加活化劑1溶液(DIC, 1.5 mL)及活化劑2溶液(Oxyma, 1.5 mL)，在氮氣鼓泡下進行偶合2小時。溶液瀝乾，及使用DMF洗滌(6 x 3 mL, 30 sec)。
裂解Fmoc： 添加20%哌啶溶液(2 x 3 mL, 10 min)來脫除Fmoc保護基。樹脂係使用DMF洗滌(6 x 3 mL, 30 sec)。
偶合： 添加Fmoc-Ile (4.0 mL)。添加活化劑1溶液(DIC, 1.5 mL)及活化劑2溶液(Oxyma, 1.5 mL)，在氮氣鼓泡下進行偶合2小時。溶液瀝乾，及使用DMF洗滌(1 x 3 mL, 30 sec)。重覆偶合步驟。添加Fmoc-Ile (4.0 mL)。添加活化劑1溶液(DIC, 1.5 mL)及活化劑2溶液(Oxyma, 1.5 mL)，在氮氣鼓泡下進行偶合2小時。溶液瀝乾，及使用DMF洗滌(6 x 3 mL, 30 sec)。
裂解Fmoc： 添加20%哌啶溶液(2 x 3 mL, 10 min)來脫除Fmoc保護基。樹脂係使用DMF洗滌(6 x 3 mL, 30 sec)。
自動化SPPS期間進行手動偶合： 添加Fmoc-(N-Me)G (0.2 M DMF溶液，5當量)至樹脂中。添加活化劑1溶液(DIC, 1.5 mL)及活化劑2溶液(Oxyma, 1.5 mL)，及在振盪下進行偶合(溫度調控混合器，室溫) 2小時。溶液過濾，及使用DMF洗滌(1 x 3 mL, 30 sec)。重覆偶合步驟。添加Fmoc-(N-Me)G (0.2 M DMF溶液，5當量)。添加活化劑1溶液(DIC, 1.5 mL)及活化劑2溶液(Oxyma, 1.5 mL)，及在振盪下進行偶合(溫度調控混合器，室溫) 2小時。溶液過濾，及使用DMF洗滌(6 x 3 mL, 30 sec)。
裂解Fmoc： 添加20%哌啶溶液(2 x 3 mL, 10 min)來脫除Fmoc保護基。樹脂係使用DMF洗滌(6 x 3 mL, 30 sec)。 若序列中含有其他胺基酸時，則採用上述步驟進行偶合。
試驗裂解： 當進行手動偶合時，通常進行試驗裂解來追蹤反應。試驗裂解混合液為TFA/EDT/硫代苯甲醚(90：3：7)；於溫度調控混合器上，於室溫及750 rpm下振盪1.5 h。採用上述其中一種方法，進行LC-MS分析。
完全裂解： 取包含肽之樹脂置入針筒中，添加3.0 mL裂解緩衝液TFA/EDT/硫代苯甲醚(90：3：7)至樹脂中。混合物於室溫下振盪2.5小時。過濾收集溶液，添加冷的乙醚(-20o C)使肽沉澱。溶液於Falcon離心管(60 mL)中，於氮蒙氣下離心(3000 rpm)。傾析醚，固體殘質使用冷的乙醚重覆洗滌(5 x 10 mL)。然後取固體殘質乾燥。
二硫化物環化法： 取粗製肽溶於0.1M碳酸氫銨(pH 7.8-8.2)，濃度為1 mg/2 mL。讓溶液於圓底燒瓶中，在開放空氣下，於環繞式振盪器上振盪一夜後。然後溶液冷凍乾燥，得到白色粉末。
篩選用於HPLC純化法之管柱： 取肽溶於5% CH3 CN及95%水中。每一種肽均進行管柱篩選，以決定可用於純化之製備性HPLC 方法。篩選下列分析性管柱。 有兩種方法可用於篩選管柱： 1)    5-60% ACN_8 Min_1 mL/min_25°C 2)    30-85% ACN_8 Min_1 mL/min_25°C
可採用之管柱(50 mm x ID 4.6 mm) (亦可作為製備性管柱)： 1)    Aeris C18 (Phenomenex) 2)    X-Bridge C18 (Waters) 3)    Kinetex C18 (Coreshell Material) (Phenomenex) 4)    YMC Triart C18 (可能使用100%水溶離) 5)    Kinetix Biphenyl (Phenomenex) 6)    X-Select C18 (positive charge) 7)    Jupiter Proteo C18 (Phenomenex) 8)    Luna C18 (Phenomenex)
本發明肽採用下列5種製備性管柱其中一種： 1)    管柱：Phenomenex，Aeris Peptide 5µ XB-C18，AXIA Packed，21.2x250mm + 卡管 5µ 2)    管柱：Phenomenex，Kinetex C18 5µ 21.5x250mm + 卡管 5µ 3)    管柱：Phenomenex，Kinetex 5µ Biphenyl 100A，AXIA Packed，21,2x250mm + 卡管 5µ 4)    管柱：YMC Actus Triart Prep. C18 12nm，S-10µm 250x20mm + 卡管 3µm (10x4mm) 5)    管柱：Waters，X-Bridge Prep.C18 5µ OBD 19x250mm + 卡管 10µ
一旦選定管柱，即可採用下列其中一種方法： 1)    方法：梯度5-60% ACN之水溶液(0.10% TFA) 2)    方法：梯度30-85% ACN之水溶液(0.10% TFA) 3)    聚焦梯度依據管柱篩選結果。 流速20 mL/min
合併之溶出份係採用HPLC(5-95 in 8in，Chromolith SpeedROD & YMC C18 5-95歷經18 min)及上述其中一種LC-MS方法分析。
對於實例165，取粗製肽溶於CH3 CN/水(1：1)，於Phenomenex Kinetex管柱 C18 5µ，21.5 x 250 mm + 5µ卡管，流速：20 mL/min，方法：5-60% ACN之水溶液(分別包含 0.10% TFA)上純化48 min。合併之溶出份經過凍乾，產生39 mg實例165 (95%純度)。 表6：所使用材料及條件之說明
# 材料 偶合試劑 偶合時間
1 Rink 醯胺 ChemMatrix 樹脂，加載0.5mmol/g (0.1 mmol) ---  
2 Fmoc-Asp(t-Bu)-OH (8.0 eq) DIC (7.5 eq) Oxyma (7.5 eq) 120 min
3 Fmoc-Pro-OH (8.0 eq) DIC (7.5 eq) Oxyma (7.5 eq) 120 min
4 Fmoc-Ile-OH (8.0 eq) DIC (7.5 eq) Oxyma (7.5 eq) 120 min
5 Fmoc-Pen(Trt)-OH (8.0 eq) DIC (7.5 eq) Oxyma (7.5 eq) 120 min
6 Fmoc-Ile-OH (8.0 eq) DIC (7.5 eq) Oxyma (7.5 eq) 120 min
7 Fmoc-Oic-OH (8.0 eq) DIC (7.5 eq) Oxyma (7.5 eq) 120 min
8 Fmoc-Pro-OH (8.0 eq) DIC (7.5 eq) Oxyma (7.5 eq) 120 min
9 Fmoc-Leu-OH (8.0 eq) DIC (7.5 eq) Oxyma (7.5 eq) 120 min
10 Fmoc-Ser(tBu)-OH (8.0 eq) DIC (7.5 eq) Oxyma (7.5 eq) 120 min
11 Fmoc-Arg(Pbf)-OH (8.0 eq) DIC (7.5 eq) Oxyma (7.5 eq) 120 min
12 Fmoc-Ser(t-Bu)-OH (8.0 eq) DIC (7.5 eq) Oxyma (7.5 eq) 120 min
13 Fmoc-Cys(Trt)-OH (8.0 eq) DIC (7.5 eq) Oxyma (7.5 eq) 120 min
14 Fmoc-Ile-OH (3.0 eq) DIC (7.5 eq) Oxyma (7.5 eq) 120 min
15 Fmoc-(N-Me)G-OH (8 eq) DIC (7.5 eq) Oxyma (7.5 eq) 120 min
Masp 肽之自動化SPPS 之通用方法(方法B)
以((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+I-((5-氮雜螺[2.4]庚烷-1-羧酸)-OH (實例164)之合成法為代表。
採用標準Fmoc化學法合成該肽。
若可行時，在Wang 樹脂預先加載第一胺基酸 (例如：採用預先加載之Fmoc-Asp(t-Bu)-OH、Fmoc-Pro-OH，等等，典型加載量為0.55 – 0.7 mmol/g。當無法取得第一胺基酸時，則手動添加。
當無法取得第一胺基酸作為預先加載樹脂時，則手動添加，及在合成法中使用氯三苯甲基樹脂。
加載第一胺基酸至2-氯三苯甲基樹脂上： 取2-氯三苯甲基樹脂(500 mg, 0.775 mmol)，於50 mL Falcon離心管中，使用10 mL DCM膨脹15 min。取5-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]-5-氮雜螺[2.4]庚烷-1-羧酸(281 mg, 0.775 mmol)溶於DCM，添加DIEA (6當量, 0.81 mL) ，及添加該溶液至樹脂中。溶液使用氬氣春吹掃，及於室溫下振盪一夜。混合物過濾及使用DMF (3 x 5 mL)與DCM(3 x 5 mL)洗滌。添加甲醇(5 mL)，混合物振盪30分鐘後，過濾。樹脂使用DMF(3 x 5 mL)與DCM (3 x 5 mL)洗滌。再度添加甲醇(5 mL)，混合物振盪30分鐘後，過濾。樹脂使用DMF(3 x 5 mL)與DCM(3 x 5 mL)洗滌。依據下文說明之加載製程測得之加載量為0.42 mmol/g。 該樹脂接著以0.1 mmol規模用於來自Protein Technologies 之 Symphony X合成儀上，進行自動化SPPS。
樹脂加載量之測定： 測定樹脂加載量時，從指定量之樹脂上裂解FMOC保護基，然後在301nm之光度計下測定裂解溶液上清液，決定所得芴基化合物濃度。此濃度與樹脂上之胺基酸加載量呈正相關性。 1)    稱取1-3 mg樹脂加至2 mL Eppendorf離心管或類似離心管中(注意確實添加量) 2)    添加1000 µL 20%哌啶之DMF溶液。 3)    混合物攪拌30分鐘，以裂解FMOC基團。 4)    然後取100 µL上清液移至石英玻璃測光管中，使用900µL 20%哌啶/ DMF稀釋。 5)    在第二個測光管中製備空白樣本1000µl 哌啶/DMF 。 6)    測定參考樣本中之空白值後，於UV-Vis光度計(Thermo Scientific Evolution 201)中測定試驗樣本在λ = 301nm之消光度。 7)    為了提高準確度，可準備多重試驗樣本(通常為兩個)；然後計算所測得消光度之算術平均值。.
計算樹脂加載量： 樹脂加載量L301 (以mmol/g計)係採用下列公式計算：
Figure 02_image009
E = 消光度 ε=在301nm波長下之消光係數(7800 L/mol*cm) m =樹脂用量(g) V =樣本體積(L) D = 測光管層厚度 (cm) VF = 稀釋因數( = 10)
裂解Fmoc： 添加20%哌啶溶液(2 x 3 mL, 10 min)來脫除Fmoc保護基。樹脂係使用DMF洗滌(6 x 3 mL, 30 sec)。 依方法A之說明，繼續與下一個Fmoc 胺基酸偶合。
製備下列溶液，及用於合成法中： 1)    Fmoc 胺基酸：0.2 M (8 eq) 2)    活化劑1：0.5 M DIC之DMF溶液(7.5 eq) 3)    活化劑2：0.5 M Oxyma之DMF溶液(7.5 eq) 4)    脫除Fmoc保護：20%哌啶之DMF溶液 5)    乙酸酐(10當量)含於2 mL DMF
各胺基酸通常進行雙重偶合法。針對高價的非天然Fmoc或Boc 胺基酸、自家合成之Fmoc 胺基酸、或N-甲基化胺基酸，係插入序列中，手動偶合此胺基酸(雙重偶合，但通常使用較少試劑(3-5當量)。完成此偶合後，通常繼續在合成儀上進行合成。若在序列上增加N-甲基胺基酸時，通常亦手動偶合下一個胺基酸。所有步驟均在室溫及氮氣下進行。Fmoc-Pen及Fmoc-Oic通常使用自動化SPPS偶合。Fmoc(N-Me)G通常手動偶合。Ahx係則總是通常手動偶合。
裂解Fmoc： 使樹脂膨脹及使用DMF洗滌(3 x 3 mL, 10 min)。若樹脂含有Fmoc，則使用20%哌啶溶液(2 x 3 mL, 10 min)脫除Fmoc。樹脂係使用DMF洗滌(6 x 3 mL, 30 sec)。
偶合： 添加Fmoc-Ile (4.0 mL)。添加活化劑1溶液(DIC, 1.5 mL)及活化劑2溶液(Oxyma, 1.5 mL)，在氮氣鼓泡下進行在氮氣鼓泡下進行偶合2小時。溶液瀝乾，及使用DMF洗滌(1 x 3 mL, 30 sec)。重覆偶合步驟。添加Fmoc-Ile (4.0 mL)。添加活化劑1溶液(DIC, 1.5 mL)及活化劑2溶液(Oxyma, 1.5 mL)，在氮氣鼓泡下進行偶合2小時。溶液瀝乾，及使用DMF洗滌(6 x 3 mL, 30 sec)。
裂解Fmoc： 添加20%哌啶溶液(2 x 3 mL, 10 min)來脫除Fmoc保護基。樹脂係使用DMF洗滌(6 x 3 mL, 30 sec)。
偶合： 添加Fmoc-Pen(Trt) (4.0 mL)。添加活化劑1溶液(DIC, 1.5 mL)及活化劑2溶液(Oxyma, 1.5 mL)，在氮氣鼓泡下進行偶合2小時。溶液瀝乾，及使用DMF洗滌(1 x 3 mL, 30 sec)。重覆偶合步驟。添加Fmoc-Pen(Trt) (4.0 mL)。添加活化劑1溶液(DIC, 1.5 mL)及活化劑2溶液(Oxyma, 1.5 mL)，在氮氣鼓泡下進行偶合2小時。溶液瀝乾，及使用DMF洗滌(6 x 3 mL, 30 sec)。
裂解Fmoc： 添加20%哌啶溶液(2 x 3 mL, 10 min)來脫除Fmoc保護基。樹脂係使用DMF洗滌(6 x 3 mL, 30 sec)。
偶合： 添加Fmoc-Ile (4.0 mL)。添加活化劑1溶液(DIC, 1.5 mL)及活化劑2溶液(Oxyma, 1.5 mL)，在氮氣鼓泡下進行偶合2小時。溶液瀝乾，及使用DMF洗滌(1 x 3 mL, 30 sec)。重覆偶合步驟。添加Fmoc-Ile (4.0 mL)。添加活化劑1溶液(DIC, 1.5 mL)及活化劑2溶液(Oxyma, 1.5 mL)，在氮氣鼓泡下進行偶合2小時。溶液瀝乾，及使用DMF洗滌(6 x 3 mL, 30 sec)。
裂解Fmoc： 添加20%哌啶溶液(2 x 3 mL, 10 min)來脫除Fmoc保護基。樹脂係使用DMF洗滌(6 x 3 mL, 30 sec)。
偶合： 添加Fmoc-Oic (4.0 mL)。添加活化劑1溶液(DIC, 1.5 mL)及活化劑2溶液(Oxyma, 1.5 mL)，在氮氣鼓泡下進行偶合2小時。溶液瀝乾，及使用DMF洗滌(1 x 3 mL, 30 sec)。重覆偶合步驟。添加Fmoc-Oic (4.0 mL)。添加活化劑1溶液(DIC, 1.5 mL)及活化劑2溶液(Oxyma, 1.5 mL)，在氮氣鼓泡下進行偶合2小時。溶液瀝乾，及使用DMF洗滌(6 x 3 mL, 30 sec)。
裂解Fmoc： 添加20%哌啶溶液(2 x 3 mL, 10 min)來脫除Fmoc保護基。樹脂係使用DMF洗滌(6 x 3 mL, 30 sec)。
偶合： 添加Fmoc-Pro (4.0 mL)。添加活化劑1溶液(DIC, 1.5 mL)及活化劑2溶液(Oxyma, 1.5 mL)，在氮氣鼓泡下進行偶合2小時。溶液瀝乾，及使用DMF洗滌(1 x 3 mL, 30 sec)。重覆偶合步驟。添加Fmoc-Pro (4.0 mL)。添加活化劑1溶液(DIC, 1.5 mL)及活化劑2溶液(Oxyma, 1.5 mL)，在氮氣鼓泡下進行偶合2小時。溶液瀝乾，及使用DMF洗滌(6 x 3 mL, 30 sec)。
裂解Fmoc： 添加20%哌啶溶液(2 x 3 mL, 10 min)來脫除Fmoc保護基。樹脂係使用DMF洗滌(6 x 3 mL, 30 sec)。
偶合： 添加Fmoc-Leu (4.0 mL)。添加活化劑1溶液(DIC, 1.5 mL)及活化劑2溶液(Oxyma, 1.5 mL)，在氮氣鼓泡下進行偶合2小時。溶液瀝乾，及使用DMF洗滌(1 x 3 mL, 30 sec)。重覆偶合步驟。添加Fmoc-Leu (4.0 mL)。添加活化劑1溶液(DIC, 1.5 mL)及活化劑2溶液(Oxyma, 1.5 mL)，在氮氣鼓泡下進行偶合2小時。溶液瀝乾，及使用DMF洗滌(6 x 3 mL, 30 sec)。
裂解Fmoc： 添加20%哌啶溶液(2 x 3 mL, 10 min)來脫除Fmoc保護基。樹脂係使用DMF洗滌(6 x 3 mL, 30 sec)。
偶合： Fmoc-Ser(t-Bu) (4.0 mL)。添加活化劑1溶液(DIC, 1.5 mL)及活化劑2溶液(Oxyma, 1.5 mL)，在氮氣鼓泡下進行偶合2小時。溶液瀝乾，及使用DMF洗滌(1 x 3 mL, 30 sec)。重覆偶合步驟。添加Fmoc-Ser(t-Bu) (4.0 mL)。添加活化劑1溶液(DIC, 1.5 mL)及活化劑2溶液(Oxyma, 1.5 mL)，在氮氣鼓泡下進行偶合2小時。溶液瀝乾，及使用DMF洗滌(6 x 3 mL, 30 sec)。
裂解Fmoc： 添加20%哌啶溶液(2 x 3 mL, 10 min)來脫除Fmoc保護基。樹脂係使用DMF洗滌(6 x 3 mL, 30 sec)。
偶合： 添加Fmoc-Arg(Pbf) (4.0 mL)。添加活化劑1溶液(DIC, 1.5 mL)及活化劑2溶液(Oxyma, 1.5 mL)，在氮氣鼓泡下進行偶合2小時。溶液瀝乾，及使用DMF洗滌(1 x 3 mL, 30 sec)。重覆偶合步驟。添加Fmoc-Arg(Pbf) (4.0 mL)。添加活化劑1溶液(DIC, 1.5 mL)及活化劑2溶液(Oxyma, 1.5 mL)，在氮氣鼓泡下進行偶合2小時。溶液瀝乾，及使用DMF洗滌(6 x 3 mL, 30 sec)。
裂解Fmoc： 添加20%哌啶溶液(2 x 3 mL, 10 min)來脫除Fmoc保護基。樹脂係使用DMF洗滌(6 x 3 mL, 30 sec)。
偶合： 添加Fmoc-Ser(t-Bu) (4.0 mL)。添加活化劑1溶液(DIC, 1.5 mL)及活化劑2溶液(Oxyma, 1.5 mL)，在氮氣鼓泡下進行偶合2小時。溶液瀝乾，及使用DMF洗滌(1 x 3 mL, 30 sec)。重覆偶合步驟。添加Fmoc-Ser(t-Bu) (4.0 mL)。添加活化劑1溶液(DIC, 1.5 mL)及活化劑2溶液(Oxyma, 1.5 mL)，在氮氣鼓泡下進行偶合2小時。溶液瀝乾，及使用DMF洗滌(6 x 3 mL, 30 sec)。
裂解Fmoc： 添加20%哌啶溶液(2 x 3 mL, 10 min)來脫除Fmoc保護基。樹脂係使用DMF洗滌(6 x 3 mL, 30 sec)。
偶合： 添加Fmoc-Cys(Trt) (4.0 mL)。添加活化劑1溶液(DIC, 1.5 mL)及活化劑2溶液(Oxyma, 1.5 mL)，在氮氣鼓泡下進行偶合2小時。溶液瀝乾，及使用DMF洗滌(1 x 3 mL, 30 sec)。重覆偶合步驟。添加Fmoc-Cys(Trt) (4.0 mL)。添加活化劑1溶液(DIC, 1.5 mL)及活化劑2溶液(Oxyma, 1.5 mL)，在氮氣鼓泡下進行偶合2小時。溶液瀝乾，及使用DMF洗滌(6 x 3 mL, 30 sec)。
裂解Fmoc： 添加20%哌啶溶液(2 x 3 mL, 10 min)來脫除Fmoc保護基。樹脂係使用DMF洗滌(6 x 3 mL, 30 sec)。
偶合： 添加Fmoc-Ile (4.0 mL)。添加活化劑1溶液(DIC, 1.5 mL)及活化劑2溶液(Oxyma, 1.5 mL)，及在氮氣鼓泡下進行偶合2小時。溶液瀝乾，及使用DMF洗滌(1 x 3 mL, 30 sec)。重覆偶合步驟。添加Fmoc-Ile (4.0 mL)。添加活化劑1溶液(DIC, 1.5 mL)及活化劑2溶液(Oxyma, 1.5 mL)，在氮氣鼓泡下進行偶合2小時。溶液瀝乾，及使用DMF洗滌(6 x 3 mL, 30 sec)。
裂解Fmoc： 添加20%哌啶溶液(2 x 3 mL, 10 min)來脫除Fmoc保護基。樹脂係使用DMF洗滌(6 x 3 mL, 30 sec)。
在自動化SPPS期間進行手動偶合： 添加Fmoc-(N-Me)G (0.2 M DMF溶液，5當量)至樹脂中。添加活化劑1溶液(DIC, 1.5 mL)及活化劑2溶液(Oxyma, 1.5 mL)，在振盪下進行偶合(溫度調控混合器，室溫)2小時。溶液過濾，及使用DMF洗滌(1 x 3 mL, 30 sec)。重覆偶合步驟。添加Fmoc-(N-Me)G (0.2 M DMF溶液，5當量)。添加活化劑1溶液(DIC, 1.5 mL)及活化劑2溶液(Oxyma, 1.5 mL)，及在振盪下進行偶合(溫度調控混合器，室溫)2小時。溶液過濾及使用DMF洗滌(6 x 3 mL, 30 sec)。
裂解Fmoc： 添加20%哌啶溶液(2 x 3 mL, 10 min)來脫除Fmoc保護基。樹脂係使用DMF洗滌(6 x 3 mL, 30 sec)。
若序列中出現額外胺基酸時，其等可採用上述步驟偶合。
試驗裂解： 當進行手動偶合時，通常進行試驗裂解來追蹤反應。試驗裂解混合液為TFA/EDT/硫代苯甲醚(90：3：7)；於溫度調控混合器上，於室溫及750 rpm下振盪1.5 h。採用上述其中一種方法，進行LC-MS分析。
完全裂解： 取包含肽之樹脂置入針筒中，添加3.0 mL裂解緩衝液TFA/EDT/硫代苯甲醚(90：3：7)至樹脂中。混合物於室溫下振盪2.5小時。過濾收集溶液，添加冷的乙醚(-20o C)使肽沉澱。溶液於Falcon離心管(60 mL)中，於氮蒙氣下離心(3000 rpm)。傾析醚，固體殘質使用冷的乙醚重覆洗滌(5 x 10 mL)。然後取固體殘質乾燥。
二硫化物環化法： 取粗製肽溶於0.1M碳酸氫銨(pH 7.8-8.2)，濃度為1 mg/2 mL。讓溶液於圓底燒瓶中，在開放空氣下，於環繞式振盪器上振盪一夜後，冷凍乾燥，得到白色粉末。
篩選用於HPLC純化之管柱： 取肽溶於5% CH3 CN及95%水。每一種肽均進行管柱篩選，以決定可用於純化之製備性HPLC 方法。篩選下列分析性管柱。
有兩種方法可用於篩選管柱： 1)    5-60% ACN_8 Min_1 mL/min_25°C 2)    30-85% ACN_8 Min_1 mL/min_25°C
可採用之管柱(50mm x ID 4.6 mm) (亦可作為製備性管柱)： 1)    Aeris C18 (Phenomenex) 2)    X-Bridge C18 (Waters) 3)    Kinetex C18 (Coreshell Material) (Phenomenex) 4)    YMC Triart C18 (可能使用100%水溶離) 5)    Kinetix Biphenyl (Phenomenex) 6)    X-Select C18 (帶正電荷) 7)    Jupiter Proteo C18 (Phenomenex) 8)    Luna C18 (Phenomenex)
本發明之肽採用下列5種製備性管柱其中一種： 1)    管柱：Phenomenex，Aeris Peptide 5µ XB-C18，AXIA Packed，21.2 x 250mm +卡管 5µ 2)    管柱：Phenomenex，Kinetex C18 5µ 21,5x250mm +卡管 5µ 3)    管柱：Phenomenex，Kinetex 5µ Biphenyl 100A，AXIA Packed，21.2 x 250mm +卡管 5µ 4)    管柱：YMC Actus Triart Prep. C18 12nm，S-10µm 250 x 20mm +卡管 3µm (10x4mm) 5)    管柱：Waters，Xbridge Prep.C18 5µ OBD 19 x 250mm +卡管 10µ
一旦選定管柱，即可採用下列其中一種方法： 1)    方法：梯度5-60% ACN之水溶液(0.10% TFA) 2)    方法：梯度30-85% ACN之水溶液(0.10% TFA) 3)    聚焦梯度依據管柱篩選結果 流速20 mL/min
合併之溶出份係採用HPLC(5-95 in 8in, Chromolith SpeedROD & YMC C18 5-95歷經18 min)及上述其中一種LC-MS方法分析。
實例164中，取粗製肽溶於CH3 CN/水(1：1)，於Phenomenex Kinetex管柱 C18 5µ，21.5 x 250 mm + 5µ卡管，流速：20 mL/min，方法：5-60% ACN之水溶液(分別包含 0.10% TFA)上純化48 min。合併之溶出份經過凍乾，產生29.8 mg實例164 (98.3%純度)。 表7：所使用材料及條件之說明
# 材料 偶合試劑 偶合時間
1 Rink 醯胺 ChemMatrix 樹脂，加載0.5mmol/g (0.1 mmol) ---  
2 5-Fmoc-5-氮雜螺[2.4]庚烷-1-羧酸 DIPEA (6 eq) 過夜
3 Fmoc-Ile-OH (8.0 eq) DIC (7.5 eq) Oxyma (7.5 eq) 120 min
4 Fmoc-Pen(Trt)-OH (8.0 eq) DIC (7.5 eq) Oxyma (7.5 eq) 120 min
5 Fmoc-Ile-OH (8.0 eq) DIC (7.5 eq) Oxyma (7.5 eq) 120 min
6 Fmoc-Oic-OH (8.0 eq) DIC (7.5 eq) Oxyma (7.5 eq) 120 min
7 Fmoc-Pro-OH (8.0 eq) DIC (7.5 eq) Oxyma (7.5 eq) 120 min
8 Fmoc-Leu-OH (8.0 eq) DIC (7.5 eq) Oxyma (7.5 eq) 120 min
9 Fmoc-Ser(tBu)-OH (8.0 eq) DIC (7.5 eq) Oxyma (7.5 eq) 120 min
10 Fmoc-Arg(Pbf)-OH (8.0 eq) DIC (7.5 eq) Oxyma (7.5 eq) 120 min
11 Fmoc-Ser(t-Bu)-OH (8.0 eq) DIC (7.5 eq) Oxyma (7.5 eq) 120 min
12 Fmoc-Cys(Trt)-OH (8.0 eq) DIC (7.5 eq) Oxyma (7.5 eq) 120 min
13 Fmoc-Ile-OH (3.0 eq) DIC (7.5 eq) Oxyma (7.5 eq) 120 min
14 Fmoc-(N-Me)G-OH (8 eq) DIC (7.5 eq) Oxyma (7.5 eq) 120 min
Masp 肽之手動SPPS之通用方法(方法C)
以序列 AIC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPN-OH (實例418)之合成法為代表。
肽合成法：
採用標準Fmoc化學法合成該肽。 1）     樹脂製法：在氯三苯甲基樹脂(CTC 樹脂) (0.3 mmol, 0.3 g, 1.0 mmol/g)中添加Fmoc-Asn(Trt)-OH (0.3 mmol, 0.18 g, 1.0 eq)及DIEA (0.21 mL, 1.2 mmol, 4.0 eq)之DCM溶液(6.0 mL)。混合物於20°C下使用N2 攪動2 h。然後添加MeOH (0.3 mL)，及使用N2 再攪拌30 min。樹脂使用DMF洗滌(6.0 mL x 3)。然後添加20%哌啶之DMF溶液(6.0 mL)，及混合物於20°C下使用N2 攪動20 min。然後過濾混合物，得到樹脂。樹脂使用DMF洗滌(6.0 mL x 3)及過濾，得到樹脂。 2）     偶合：添加Fmoc-Pro-OH (0.30 g, 0.9 mmol, 3.0 eq)、HBTU (0.32 g, 0.85 mmol, 2.85 eq)及DIEA (1.80 mmol, 0.32 mL, 6.00 eq)之DMF溶液(3.0 mL)至樹脂中，及於20°C下使用N2 攪動30 min。樹脂隨後使用DMF洗滌(6.0 mL x 5)。 3）     脫除保護：添加20%哌啶之DMF溶液(6.0 mL)至樹脂中，及混合物於20°C下使用N2 攪動20 min。 4）     所有其他胺基酸重覆步驟2至3。 表8：所使用材料及條件之說明
# 材料 偶合試劑 偶合時間
1 Fmoc-Asn(Trt)-OH (1.0 eq) DIEA(4.0 eq) 2.0 h
2 Fmoc-Pro-OH (3.0 eq) HBTU(2.85 eq) DIEA(6.0 eq) 30 min
3 Fmoc-Ile-OH (3.0 eq) HBTU(2.85 eq) DIEA(6.0 eq) 30 min
4 Fmoc-Pen(Trt)-OH (3.0 eq)  HBTU(2.85 eq) DIEA(6.0 eq) 30 min
5 Fmoc-Ile-OH (3.0 eq) HBTU(2.85 eq) DIEA(6.0 eq) 30 min
6 Fmoc-Oic-OH (3.0 eq) HBTU(2.85 eq) DIEA(6.0 eq) 30 min
7 Fmoc-Pro-OH (3.0 eq) HBTU(2.85 eq) DIEA(6.0 eq) 30 min
8 Fmoc-Leu-OH (3.0 eq) HBTU(2.85 eq) DIEA(6.0 eq) 30 min
9 Fmoc-Ser(tBu)-OH (3.0 eq) HBTU(2.85 eq) DIEA(6.0 eq) 30 min
10 Fmoc-Arg(Pbf)-OH (3.0 eq) HBTU(2.85 eq) DIEA(6.0 eq) 30 min
11 Fmoc-Ser(tBu)-OH (3.0 eq) HBTU(2.85 eq) DIEA(6.0 eq) 30 min
12 Fmoc-Cys(Trt)-OH (3.0 eq) HBTU(2.85 eq) DIEA(6.0 eq) 30 min
13 Fmoc-Ile-OH (3.0 eq) HBTU(2.85 eq) DIEA(6.0 eq) 30 min
14 Fmoc-Ala-OH (3.0 eq) HBTU(2.85 eq) DIEA(6.0 eq) 30 min
使用20%哌啶之DMF溶液脫除Fmoc保護基30 min。採用茚三酮(除了Pro以外之所有胺基酸)及四氯苯醌試驗(chloranil test)(Pro)追蹤偶合反應，及使用DMF(5.0 mL)洗滌樹脂 5次。
肽裂解及純化： 1)           取樹脂使用MeOH (6.0 mL x 5)洗滌及真空乾燥，得到0.62 g肽樹脂。然後添加6.0 mL裂解緩衝液(92.5%TFA/2.5%EDT/2.5%TIS/2.5%H2 O)至20°C之包含側鏈已受保護之肽樹脂之燒瓶中，及攪拌混合物2.5 h。 2)           肽使用冷的第三丁基甲基醚(50 mL)沉澱，及離心(3000 rpm下3 min)，得到粗製固體。再使用第三丁基甲基醚洗滌粗製肽2次(20.0 mL x 3)。該粗製肽真空乾燥2.0 h，產生0.4 g粗產物肽。 3)           取粗產物(0.4 g)溶於CH3 CN (150 mL)及水(150 mL)中。於20°C下添加碘(I2 )(0.1 M MeOH溶液，1.5 mL)，直到黃色持久不變為止。然後於20°C下攪拌混合物2 min。然後滴加硫代硫酸鈉(0.1 M水溶液，0.05 mL)，直到黃色消失。混合物冷凍乾燥，產生粗產物粉末(0.41 g)。 4)           粗製肽係採用備製性-HPLC純化(條件：A：0.075% TFA之水溶液，B：CH3 CN)，並冷凍乾燥，得到所需肽(實例418) (108.1 mg, 23.0%產率，採用方法W1之純度為97.3%；方法7之純度為97.4%)之白色固體及TFA鹽。純化條件：取肽溶於TFA/H2 O (7：3)；流速20 mL/min；梯度12-42%，歷時60 min；滯留時間 = 42 min；經Luna 25 x 200 mm，C18 10 um，110 Å管柱純化，然後再經Gemini 150 x 30 mm，C18 5 um，110 Å管柱純化，達到所需純度。
若根據此方法製備C-端醯胺時，該合成法從使用Rink醯胺 MBHA樹脂(通常加載約0.4-0.6 mmol/g)開始，依上述相同步驟。
Masp 肽之手動 SPPS 之通用方法 ( 方法 D)
若製備C-端醯胺時，該合成法從使用Rink 醯胺 MBHA 樹脂(通常加載約0.4-0.6 mmol/g)開始。以序列 PIC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-NH2 (實例9)之合成法為代表。
若製備C-端酸時，該合成法從使用2-氯三苯甲基樹脂開始，根據方法C說明之方法，添加第一Fmoc胺基酸。
肽合成法：
採用標準Fmoc化學法合成該肽。 1)           樹脂製法：取Rink 醯胺 MBHA 樹脂(0.66 g, 0.30 mmol，加載= 0.45 mmol/g)之DMF溶液(10.0 mL)於N2 於20°C下攪動0.5 h。然後添加20%哌啶之DMF溶液(10 mL)，混合物於20°C下使用N2 攪動20 min。然後過濾混合物，得到樹脂。樹脂使用DMF洗滌(10 x 5 mL)及過濾，得到樹脂。 2)           偶合：添加Fmoc-Asn(Trt)-OH (0.9 mmol, 0.37 g, 3.0 eq)、HBTU (0.32 g, 0.85 mmol, 2.95 eq)及DIEA (1.80 mmol, 0.32 mL, 6.00 eq)之DMF溶液(3.0 mL)至樹脂中，及於N2 與20°C下攪動30 min。樹脂隨後使用DMF洗滌(10.0 mL x 3)。 3)           脫除保護：添加20%哌啶之DMF溶液(10.0 mL)至樹脂中，混合物使用N2 及20°C下攪動20 min。 4)           所有其他胺基酸重覆步驟2至3。 表9：所使用材料與條件之說明
# 材料 偶合試劑 偶合時間
1 Fmoc-Asn(Trt)-OH (1.0 eq) HBTU(2.85 eq) DIEA(6.0 eq) 30 min
2 Fmoc-Pro-OH (3.0 eq) HBTU(2.85 eq) DIEA(6.0 eq) 30 min
3 Fmoc-Ile-OH (3.0 eq) HBTU(2.85 eq) DIEA(6.0 eq) 30 min
4 Fmoc-Pen(Trt)-OH (3.0 eq) HBTU(2.85 eq) DIEA(6.0 eq) 30 min
5 Fmoc-Ile-OH (3.0 eq) HBTU(2.85 eq) DIEA(6.0 eq) 30 min
6 Fmoc-Pro-OH (3.0 eq) HBTU(2.85 eq) DIEA(6.0 eq) 30 min
7 Fmoc-Pro-OH (3.0 eq) HBTU(2.85 eq) DIEA(6.0 eq) 30 min
8 Fmoc-Ala(t-Bu)-OH (3.0 eq) HBTU(2.85 eq) DIEA(6.0 eq) 30 min
9 Fmoc-Ser(tBu)-OH (3.0 eq) HBTU(2.85 eq) DIEA(6.0 eq) 30 min
10 Fmoc-Arg(Pbf)-OH (3.0 eq) HBTU(2.85 eq) DIEA(6.0 eq) 30 min
11 Fmoc-Ser(tBu)-OH (3.0 eq) HBTU(2.85 eq) DIEA(6.0 eq) 30 min
12 Fmoc-Cys(Trt)-OH (3.0 eq) HBTU(2.85 eq) DIEA(6.0 eq) 30 min
13 Fmoc-Ile-OH (3.0 eq) HBTU(2.85 eq) DIEA(6.0 eq) 30 min
14 Fmoc-Pro-OH (3.0 eq) HBTU(2.85 eq) DIEA(6.0 eq) 30 min
使用20%哌啶之DMF溶液脫除Fmoc保護基30 min。採用茚三酮(除了Pro以外之所有胺基酸)及四氯苯醌試驗(Pro)追蹤偶合反應，及使用DMF(5.0 mL)洗滌樹脂 5次。
肽裂解及純化： 1）     樹脂使用MeOH洗滌(6.0 mL x 5)及真空乾燥，得到0.66 g肽樹脂。然後添加6.0 mL裂解緩衝液(90%TFA/5%EDT/2.5%TIS/2.5%H2 O)至20°C之包含側鏈已受保護之肽樹脂之燒瓶中，及攪拌混合物2.5 h。 2）     肽使用冷的第三丁基甲基醚(50 mL)沉澱，及離心(3000 rpm下3 min)，得到粗製固體。再使用第三丁基甲基醚洗滌粗製肽3次(20.0 mL x 3)。該粗製肽真空乾燥2.0 h，產生0.4 g粗產物肽。 3）     粗產物(0.4 g)溶於CH3 CN (15 mL)及水(15 mL)，達到 0.1 mM濃度。添加NH4 HCO3 溶液(1M)，調整pH至約8-9。讓溶液於室溫下振盪約8小時。採用HPLC追蹤反應。反應完成後，使用乙酸調整pH至約6而淬滅反應。反應混合物隨後冷凍乾燥，所得固體經逆相HPLC純化。 4）     採用製備性HPLC純化粗製肽(條件：A：0.075% TFA之水溶液，B：CH3 CN)及冷凍乾燥，得到所需肽(實例9) (202.40 mg, 41.4.0%產率，採用方法W1測得93.7%純度；方法7測得95.1%純度)，呈白色固體及TFA鹽。純化條件：肽溶於TFA/H2 O (7:3)；流速20 mL/min；梯度12-42%歷時60 min；滯留時間 = 42 min；經Luna 25 x 200 mm，C18 10  μm，110 Å管柱純化。肽之手動 SPPS 之另一種 通用方法 ( 方法 E)
以序列((2S)-2[(胺基)-2-(四氫-2H-吡喃-4-基)]乙酸)-IC+SRSLP-(Oic)-IC+I-OH (實例184)之合成法為代表。
肽 合成法：
採用標準Fmoc化學法合成該肽。
以下化學結構中之黑球係表示用於固相肽合成法(SPPS)之固體聚合物擔體，例如：2-氯三苯甲基樹脂、Rink醯胺樹脂，等等。
實例 1 A (2S)-({[(9H-芴-9-基)甲氧基]羰基}胺基)(氧雜環己烷-4-基)乙酸(單一立體異構物)
Figure 02_image011
在含(2S)-胺基(氧雜環己烷-4-基)乙酸(950 mg, 5.97 mmol)之丙酮/水(15 mL / 10 mL)中添加碳酸氫鈉(5.01 g, 59.7 mmol)及1-({[(9H-芴-9-基)甲氧基]羰基}氧)吡咯啶-2,5-二酮(2.11 g, 6.27 mmol)。混合物於室溫下攪拌一個週末。懸浮液加水處理，及再使用MBTE萃取2次。水相使用1 M鹽酸水溶液酸化，及再使用二氯甲烷萃取3次。有機相使用飽和氯化鈉水溶液洗，經硫酸鎂乾燥，過濾，及蒸發。殘質經矽膠層析法純化(Isolera；50 g SNAP Ultra；梯度：環己烷50% / 乙酸乙酯50% + 1% 乙酸至環己烷 20% / 乙酸乙酯80% + 1% 乙酸)。合併適當溶出份，及蒸發。殘質溶於甲苯，及再蒸發 2次後，殘質真空乾燥，產生1.08 g (100%純度，47%產率)目標化合物。 LC-MS (方法9)：Rt = 0.90 min；MS(ESIpos): m/z = 382 [M+H]+ ¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.150 (0.43), -0.008 (4.33), 0.008 (3.74), 0.146 (0.43), 1.280 (1.03), 1.300 (2.26), 1.309 (2.36), 1.331 (2.75), 1.341 (2.92), 1.371 (2.77), 1.401 (2.54), 1.411 (2.32), 1.430 (1.49), 1.464 (6.34), 1.496 (3.49), 1.932 (1.76), 1.942 (2.14), 1.951 (1.93), 1.960 (2.08), 2.327 (0.64), 2.366 (0.64), 2.670 (0.64), 2.710 (0.65), 3.169 (2.11), 3.212 (2.67), 3.237 (6.32), 3.265 (6.90), 3.704 (0.49), 3.715 (0.49), 3.840 (4.66), 3.854 (5.62), 3.867 (4.30), 3.879 (6.28), 3.899 (5.14), 3.918 (3.56), 4.201 (2.11), 4.218 (5.83), 4.237 (9.07), 4.263 (8.42), 4.274 (9.80), 4.293 (5.14), 4.318 (1.05), 7.309 (6.35), 7.328 (15.12), 7.347 (9.86), 7.400 (9.65), 7.419 (15.88), 7.437 (7.02), 7.652 (5.77), 7.674 (5.52), 7.735 (8.21), 7.740 (8.28), 7.754 (7.63), 7.883 (16.00), 7.902 (14.80), 12.609 (0.56).
實例2A
Figure 02_image013
該反應係於氬蒙氣下進行。在含N-{[(9H-芴-9-基)甲氧基]羰基}-L-異白胺酸(9.40 g, 26.6 mmol)之53 mL二氯甲烷中添加N,N-二異丙基乙基胺(19 mL, 110 mmol)及2-氯三苯甲基氯樹脂(10.0 g, 13.3 mmol)。反應混合物於室溫下振盪一夜。過濾收集沉澱，及使用DMF洗滌三次。所收集之樹脂使用二氯甲烷/甲醇1：1振盪30 min。過濾收集樹脂，及使用甲醇及二氯甲烷輪流洗滌3次。所收集之樹脂經過真空乾燥以用於下一個步驟。
實例3A
Figure 02_image015
取實例2A (15.2 g, 6.82 mmol)於200 mL DMF/哌啶4：1中，於室溫下振盪15 min.。過濾收集樹脂，及使用DMF洗滌三次。重覆這兩個步驟，使用200 mL甲醇及200 mL二氯甲烷輪流洗滌3次。所收集之樹脂經過真空乾燥以用於下一個步驟。
實例4A
Figure 02_image017
取實例3A (11.4 g, 5.13 mmol)於室溫之100 mL DMF中膨脹5 min。添加含N-{[(9H-芴-9-基)甲氧基]羰基}-S-(三苯基甲基)-L-半胱胺酸(6.01 g, 10.3 mmol)之 50 mL DMF、DIC (1.5 mL, 10 mmol)及Oxyma (1.42 g, 10.0 mmol) 混合物，反應混合物於室溫下振盪2 h。過濾收集樹脂，及使用DMF洗滌三次。重覆偶合步驟一夜。過濾收集樹脂，及使用150 mL DMF洗滌三次後，再使用150 mL甲醇及150 mL二氯甲烷輪流洗滌3次。所收集之樹脂經過真空乾燥，以用於下一個步驟。
實例5A
Figure 02_image019
取實例4A (18.9 g, 8.51 mmol)於200 mL DMF/哌啶4：1中，於室溫下振盪15 min。過濾收集樹脂，及使用DMF洗滌三次。重覆這兩個步驟，所收集之樹脂使用200 mL甲醇與200 mL二氯甲烷輪流洗滌三次。所收集之樹脂經過真空乾燥以用於下一個步驟。
實例6A
Figure 02_image021
取實例5A (16.3 g, 7.32 mmol)於室溫下，在150 mL DMF中膨脹5 min。添加含N-{[(9H-芴-9-基)甲氧基]羰基}-L-異白胺酸(5.18 g, 14.6 mmol)之50 mL DMF、DIC (2.2 mL, 14 mmol)及Oxyma (2.03 g, 14.3 mmol)混合物，反應混合物於室溫下振盪2 h。過濾收集樹脂，及使用DMF洗滌三次。重覆偶合步驟一夜。過濾收集樹脂，及使用200 mL DMF洗滌三次後，再使用200 mL甲醇與200 mL二氯甲烷輪流洗滌三次。所收集之樹脂經過真空乾燥以用於下一個步驟。
實例7A
Figure 02_image023
取實例6A (20.0 g, 8.98 mmol)於200 mL DMF/哌啶4：1中，於室溫下振盪15 min。過濾收集樹脂，及使用DMF洗滌三次。重覆這兩個步驟，所收集之樹脂使用200 mL甲醇與200 mL二氯甲烷輪流洗滌三次。所收集之樹脂經過真空乾燥以用於下一個步驟。
實例8A
Figure 02_image025
取實例7A (17.8 g, 7.99 mmol)於室溫下，在150 mL DMF中膨脹5 min。添加含(2S,3aS,7aS)-1-{[(9H-芴-9-基)甲氧基]羰基}八氫-1H-吲哚-2-羧酸(6.25 g, 16.0 mmol)之50 mL DMF、DIC (2.4 mL, 16 mmol)及Oxyma (2.21 g, 15.6 mmol)混合物，反應混合物於室溫下振盪2 h。過濾收集樹脂，及使用DMF洗滌三次。重覆偶合步驟一個週末。過濾收集樹脂，及使用200 mL DMF洗滌三次，然後再使用200 mL甲醇與200 mL二氯甲烷輪流洗滌三次。所收集之樹脂經過真空乾燥以用於下一個步驟。
實例9A
Figure 02_image027
取實例8A (21.5 g, 9.68 mmol)於200 mL DMF/哌啶4：1中，於室溫下振盪30分鐘。過濾收集樹脂，使用DMF洗滌三次，然後再使用200 mL甲醇與200 mL二氯甲烷輪流洗滌三次。在所收集之樹脂中添加200 mL DMF/哌啶 4：1，及於室溫下振盪1 h。過濾收集樹脂，使用DMF洗滌三次，然後再使用200 mL甲醇與200 mL二氯甲烷輪流洗滌三次。所收集之樹脂經過真空乾燥以用於下一個步驟。
實例10A
Figure 02_image029
取實例9A (18.1 g, 8.13 mmol)於室溫下，在150 mL DMF中膨脹5 min。添加含1-{[(9H-芴-9-基)甲氧基]羰基}-L-脯胺酸(11.0 g, 32.5 mmol)之50 mL DMF、DIC (4.9 mL, 32 mmol)及Oxyma (4.51 g, 31.7 mmol)混合物，反應混合物於室溫下振盪一個週末。過濾收集樹脂，使用200 mL DMF洗滌三次，然後再使用200 mL甲醇與200 mL二氯甲烷輪流洗滌三次。所收集之樹脂經過真空乾燥以用於下一個步驟。
實例11A
Figure 02_image031
取實例10A (20.4 g, 9.16 mmol)於150 mL DMF/哌啶 4：1中，於室溫下振盪30分鐘。過濾收集樹脂，及使用DMF洗滌三次。重覆這兩個步驟，所收集之樹脂使用200 mL甲醇與200 mL二氯甲烷輪流洗滌三次。所收集之樹脂經過真空乾燥以用於下一個步驟。
實例12A
Figure 02_image033
取實例11A (18.2 g, 8.18 mmol)於室溫下，在150 mL DMF中膨脹5 min。添加含N-{[(9H-芴-9-基)甲氧基]羰基}-L-白胺酸(11.6 g, 32.7 mmol)之50 mL DMF、DIC (4.9 mL, 32 mmol)及Oxyma (4.53 g, 31.9 mmol)混合物，及反應混合物於室溫下振盪一夜。過濾收集樹脂，使用200 mL DMF洗滌三次，然後再使用200 mL甲醇與200 mL二氯甲烷輪流洗滌三次。所收集之樹脂經過真空乾燥以用於下一個步驟。
實例13A
Figure 02_image035
取實例12A (20.9 g, 9.42 mmol)於150 mL DMF/哌啶 4：1中，於室溫下振盪30分鐘。過濾收集樹脂，及使用DMF洗滌三次。重覆這兩個步驟，所收集之樹脂使用200 mL甲醇與200 mL二氯甲烷輪流洗滌三次。所收集之樹脂經過真空乾燥以用於下一個步驟。
實例14 A
Figure 02_image037
取實例13A (18.0 g, 8.11 mmol)於室溫下，在150 mL DMF中膨脹5 min。添加含O-第三丁基-N-{[(9H-芴-9-基)甲氧基]羰基}-L-絲胺酸(12.4 g, 32.4 mmol)之50 mL DMF、DIC (4.9 mL, 32 mmol)及Oxyma (4.49 g, 31.6 mmol)混合物，及反應混合物於室溫下振盪一夜。過濾收集樹脂，使用200 mL DMF洗滌三次，然後再使用200 mL甲醇與200 mL二氯甲烷輪流洗滌三次。所收集之樹脂經過真空乾燥以用於下一個步驟。
實例15 A
Figure 02_image039
取實例14A (21.4 g, 9.64 mmol)於200 mL DMF/哌啶4：1中，於室溫下振盪30分鐘。過濾收集樹脂，及使用DMF洗滌三次。重覆這兩個步驟，所收集之樹脂使用200 mL甲醇與200 mL二氯甲烷輪流洗滌三次。所收集之樹脂經過真空乾燥以用於下一個步驟。
實例16A
Figure 02_image041
取實例15A (18.9 g, 8.51 mmol)於室溫下，在150 mL DMF中膨脹5 min。添加含N2 -{[(9H-芴-9-基)甲氧基]羰基}-N5 -[N-(2,2,4,6,7-五甲基-2,3-二氫-1-苯并呋喃-5-磺醯基)甲脒基]-L-鳥胺酸(22.1 g, 34.0 mmol)之50 mL DMF、DIC (5.1 mL, 33 mmol)及Oxyma (4.72 g, 33.2 mmol)混合物，反應混合物於室溫下振盪一夜。過濾收集樹脂，使用200 mL DMF洗滌三次，然後再使用200 mL甲醇與200 mL二氯甲烷輪流洗滌三次。所收集之樹脂經過真空乾燥以用於下一個步驟。
實例17A
Figure 02_image043
取實例16A (23.8 g, 10.7 mmol)於200 mL DMF/哌啶4：1中，於室溫下振盪30分鐘。過濾收集樹脂，及使用DMF洗滌三次。重覆這兩個步驟，所收集之樹脂使用200 mL甲醇與200 mL二氯甲烷輪流洗滌三次。所收集之樹脂經過真空乾燥以用於下一個步驟。
實例18 A
Figure 02_image045
取實例17A (22.1 g, 9.95 mmol)於室溫下，在150 mL DMF中膨脹5 min。添加含O-第三丁基-N-{[(9H-芴-9-基)甲氧基]羰基}-L-絲胺酸(15.3 g, 39.8 mmol)之50 mL DMF、DIC (6.0 mL, 39 mmol)及Oxyma (5.51 g, 38.8 mmol)混合物，及反應混合物於室溫下振盪一夜。過濾收集樹脂，使用200 mL DMF洗滌三次，然後再使用200 mL甲醇與200 mL二氯甲烷輪流洗滌三次。所收集之樹脂經過真空乾燥以用於下一個步驟。
實例19 A
Figure 02_image047
取實例18A (24.7 g, 11.1 mmol)於200 mL DMF/哌啶4：1中，於室溫下振盪30分鐘。過濾收集樹脂，及使用DMF洗滌三次。重覆這兩個步驟，所收集之樹脂使用200 mL甲醇與200 mL二氯甲烷輪流洗滌三次。所收集之樹脂經過真空乾燥以用於下一個步驟。
實例20 A
Figure 02_image049
取實例19A (22.2 g, 9.99 mmol)於室溫下，在150 mL DMF中膨脹5 min。添加含N-{[(9H-芴-9-基)甲氧基]羰基}-S-(三苯基甲基)-L-半胱胺酸(23.4 g, 40.0 mmol)之50 mL DMF、DIC (6.0 mL, 39 mmol)及Oxyma (5.54 g, 39.0 mmol)混合物，及反應混合物於室溫下振盪一夜。過濾收集樹脂，使用200 mL DMF洗滌三次，然後再使用200 mL甲醇與200 mL二氯甲烷輪流洗滌三次。所收集之樹脂經過真空乾燥以用於下一個步驟。
實例21 A
Figure 02_image051
取實例20A (24.5 g, 11.0 mmol)於200 mL DMF/哌啶4：1中，於室溫下振盪30分鐘。過濾收集樹脂，及使用DMF洗滌三次。重覆這兩個步驟，所收集之樹脂使用200 mL甲醇與200 mL二氯甲烷輪流洗滌三次。所收集之樹脂經過真空乾燥以用於下一個步驟。
實例22A
Figure 02_image053
取實例21A (22.3 g, 10.0 mmol)於室溫下，在150 mL DMF中膨脹5 min。添加含N-{[(9H-芴-9-基)甲氧基]羰基}-L-異白胺酸(14.2 g, 40.1 mmol)之50 mL DMF、DIC (6.0 mL, 39 mmol)及Oxyma (5.55 g, 39.0 mmol)混合物，反應混合物於室溫下振盪一個週末。過濾收集樹脂，使用200 mL DMF洗滌三次，然後再使用200 mL甲醇與200 mL二氯甲烷輪流洗滌三次。所收集之樹脂經過真空乾燥以用於下一個步驟。
實例23A
Figure 02_image055
取實例22A (1.00 g, 250 µmol)於7.5 mL DMF/哌啶4：1中，於室溫下振盪30分鐘。過濾收集樹脂，及使用DMF洗滌三次。重覆這兩個步驟，所收集之樹脂使用甲醇與二氯甲烷輪流洗滌三次。所收集之樹脂經過真空乾燥以用於下一個步驟。
實例24 A
Figure 02_image057
取實例23A (1.00 g, 250 µmol)於室溫下，在5 mL DMF中膨脹5 min。添加含(2S)-({[(9H-芴-9-基)甲氧基]羰基}胺基)(氧雜環己烷-4-基)乙酸(381 mg, 1.00 mmol) in 1 mL DMF, DIC (150 µL, 980 µmol)及Oxyma (139 mg, 975 µmol)混合物，反應混合物於室溫下振盪一個週末。過濾收集樹脂，使用DMF洗滌三次，然後再使用甲醇與二氯甲烷輪流洗滌三次。所收集之樹脂經過真空乾燥以用於下一個步驟。
實例25A
Figure 02_image059
取實例24A (1.00 g, 250 µmol)於7.5 mL DMF/哌啶4：1中，於室溫下振盪30分鐘。過濾收集樹脂，及使用DMF洗滌三次。重覆這兩個步驟，所收集之樹脂使用甲醇與二氯甲烷輪流洗滌三次。所收集之樹脂經過真空乾燥以用於下一個步驟。
實例26A (2S,3S)-2-{[(2R)-2-{[(2S,3S)-2-{[(2S,3aS,7aS)-1-{(2S)-1-[(2S,5S,8S,11S,14R,17S,20S)-20-胺基-17-[(2S)-丁烷-2-基]-8-(3-甲脒丙基)-5,11-雙(羥基甲基)-2-(2-甲基丙基)-20-(氧雜環己烷-4-基)-4,7,10,13,16,19-六側氧基-14-(硫烷基甲基)-3,6,9,12,15,18-六氮雜二十烷-1-醯基]吡咯啶-2-羰基}八氫-1H-吲哚-2-羰基]胺基}-3-甲基戊醯基]胺基}-3-硫烷基丙醯基]胺基}-3-甲基戊酸(單一立體異構物)
Figure 02_image061
在實例25A (1.00 g, 250 µmol)中添加裂解混合液TFA/EDT/硫代苯甲醚(90：3：7)，混合物於室溫下振盪2 h。收集濾液，使用二氯甲烷洗滌樹脂。合併之濾液蒸發。殘質與乙醚攪拌，及過濾收集固體。使用乙醚洗滌固體數次，及真空乾燥，以用於下一個步驟。
實例184 ((2S)-2[(胺基)-2-(四氫-2H-吡喃-4-基)]乙酸)-IC+SRSLP-(Oic)-IC+I-OH (實例184) N-[(6S,9S,12S,15S,18R,23R,26S,28aS,29aS,33aS,35aS)-18-({N-[(2S)-2-胺基-2-(氧雜環己烷-4-基)乙醯基]-L-異白胺醯基}胺基)-26-[(2S)-丁烷-2-基]-12-(3-甲脒丙基)-9,15-雙(羥基甲基)-6-(2-甲基丙基)-5,8,11,14,17,25,28,35-八側氧基三十二氫-1H,5H,22H-吡咯并[2',1':13,14][1,2,5,8,11,14,17,20,23,26]二硫雜八氮雜環二十九并[11,10-a]吲哚-23-羰基]-L-異白胺酸(單一立體異構物)
Figure 02_image063
在實例26A (425 mg, 304 µmol)中添加850 mL 0.1 M碳酸氫銨水溶液(pH 7.86)。讓空氣鼓泡通過反應混合物 5 min。反應混合物於開口燒瓶中，於室溫下攪拌一夜。溶劑冷凍乾燥，產生580 mg白色固體。如上述，使用逆相HPLC純化 (方法B)，產生三份溶出份7.4 mg (＞ 99%)、24.5 mg (98%)及15 mg (95%)，為所需實例184。 步驟。
通用方法F：肽TFA鹽轉化成HCl鹽 以AIC+SRS-((tBu)A)-PPI-((N-Me)C)+IPD-NH2 (HCl鹽) (實例30)之合成法為代表。
自動化離子交換台之程序： Hirschmann公司之蠕動式幫浦 (Rotarus體積 50)，管子：Tygon 2001 (ID 0.64mm) 設定： 使用H2 O洗滌：運轉時間1200 s；80 min-1 ；1次循環(為35 mL體積) 使用肽之樣本循環：運轉時間 1200 s；80 min-1 ；1次循環(為70 mL體積) 使用H2 O洗滌(或%ACN之H2 O溶液：運轉時間1200 s；80 min-1 ；1次循環(為35 mL體積) 採用Amberlite IRA 410 (HCl型)。取1500 mg樹脂置入2支濾筒中，使用去離子水洗滌(10次)。 取肽溶於3 mL 5% ACN/H2 O溶液，加載至管柱上，通過管柱循環10次。管柱使用水洗滌，收集溶液至Falcon離心管中，及冷凍乾燥。 得到72.83 mg所需肽，呈HCl鹽：LC-MS (＞ 99%)；離子層析分析法：3.7 wt% Cl- (1.57 eq Cl-) ，＜1 wt % TFA。
亦可採用下列規程進行離子交換法： 取Amberlite IRA 410 樹脂(HCl型) (1-2 g)置入10 mL 濾筒中(100 mg肽需要1g IRA 410 樹脂) 1)    使用水洗滌樹脂(10次x 3 mL) 2)    使用5% ACN之水溶液洗滌樹脂(1次 x 3 mL) 3)    肽溶於5% ACN之水溶液中 4)    添加肽至濾筒中，溶液通過管柱循環 10-20次。收集溶出液至Falcon離心管中。 5)    使用5%ACN之水溶液洗滌樹脂(10次x 3 mL)；取此溶液加至Falcon離心管之溶液中。 6)    合併之溶液冷凍乾燥。
通用方法FA：肽TFA鹽轉化成其他鹽 其他鹽型： 可以藉由讓所需鹽型(例如：乙酸鈉)之溶液重覆通過管柱，將氯抗衡離子交換成其他抗衡離子，然後使用水重覆洗滌管柱。然後加載肽，依循上述製程。依此製備肽乙酸鹽、酒石酸鹽、檸檬酸鹽、及乳酸鹽。以下列三個實例為代表：
實例249 序列：((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IP-NH2 (乙酸鹽) (實例249) N-[(6S,9S,12S,15S,18R,23R,26S,28aS,29aS,33aS,35aS)-26-[(2S)-丁烷-2-基]-12-(3-甲脒丙基)-9,15-雙(羥基甲基)-22,22-二甲基-18-[(N-甲基甘胺醯基-L-異白胺醯基)胺基]-6-(2-甲基丙基)-5,8,11,14,17,25,28,35-八側氧基三十二氫-1H,5H,22H-吡咯并[2',1':13,14][1,2,5,8,11,14,17,20,23,26]二硫雜八氮雜環二十九并[11,10-a]吲哚-23-羰基]-L-異白胺醯基-L-脯胺醯胺，乙酸鹽 取IRA 410 氯化物樹脂(12 g)置入一個空的20 mL Biotage管柱中，使用5% ACN-水之溶液洗滌樹脂(10次)。卡管附接在自動化離子交換台上。使用20份管柱體積之1M NaOH溶液洗滌樹脂(2x 1800s轉速80 min-1 )。使用水洗滌管柱直到溶出液之pH ＜ 9 (10份管柱體積)。然後使用1 M 乙酸溶液(10份管柱體積)溶離管柱，然後使用水洗滌，直到溶出液之pH ＞ 5 (約10份管柱體積)。取肽(N-Me)GIC+SRSLP-(Oic)-I-Pen+IP-NH2 (TFA鹽) (1200 mg)含在12 mL5% ACN/水中，加載至管柱上，根據通用方法F通過管柱循環10次。然後使用5% ACN/水溶液洗滌樹脂10次，收集溶出液至50 mL Falcon離心管中。此規模所採用之參數設定為： 使用H2 O洗滌：運轉時間 3085 s；80 min-1；1次循環(為90 mL體積) 使用肽之樣本循環：運轉時間 3085 s；80 min-1；1次循環(為180 mL體積) 使用H2 O洗滌(或使用%ACN之H2 O溶液：運轉時間 3085 s；80 min-1；1次循環(為90 mL體積) 合併之溶出液冷凍乾燥，產生1120 mg (100 %純度，97%產率)之目標乙酸鹽。 離子層析法(氯化物含量)：＜ 1% 氯化物 離子層析法(TFA 含量)： ＜ 1% TFA 離子層析法(乙酸鹽含量)：7.1% 乙酸鹽= 1.84當量 LC-MS (MCW-TOF-AQ-YMC-18min)：Rt = 7.74 min；MS(ESIpos)：m/z = 725 [M+2H]+
實例264 序列：((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IP-NH2 (L-酒石酸鹽) (實例264) N-[(6S,9S,12S,15S,18R,23R,26S,28aS,29aS,33aS,35aS)-26-[(2S)-丁烷-2-基]-12-(3-甲脒丙基)-9,15-雙(羥基甲基)-22,22-二甲基-18-[(N-甲基甘胺醯基-L-異白胺醯基)胺基]-6-(2-甲基丙基)-5,8,11,14,17,25,28,35-八側氧基三十二氫-1H,5H,22H-吡咯并[2',1':13,14][1,2,5,8,11,14,17,20,23,26]二硫雜八氮雜環二十九并[11,10-a]吲哚-23-羰基]-L-異白胺醯基-L-脯胺醯胺 (2R,3R)-2,3-二羥基丁烷二酸(L-(+)酒石酸)鹽 取IRA 410 氯化物樹脂(12.5 g)置入一個空的20 mL Biotage管柱中，使用5%ACN-水之溶液洗滌樹脂(10次)。卡管附接自動化離子交換台。使用20份管柱體積之1M NaOH溶液洗滌樹脂(2x 1800s轉速80 min-1 )。使用水洗滌管柱直到溶出液之pH ＜ 9 (10份管柱體積)。然後使用1 M 酒石酸溶液(10份管柱體積)溶離管柱，然後使用水洗滌，直到溶出液之pH ＞ 5 (約10份管柱體積)。取肽((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IP-NH2 (TFA鹽) (1200 mg)含在12 mL 5% ACN/水中，加載至管柱上，根據通用方法F通過管柱循環10次。然後使用5% ACN/水溶液洗滌樹脂10次，收集溶出液至50 mL Falcon離心管中。此規模所採用之參數設定為： 使用H2 O洗滌：運轉時間 3085 s；80 min-1 ；1次循環(為90 mL體積) 使用肽之樣本循環：運轉時間 3085 s；80 min-1 ；1次循環(為180 mL體積) 使用H2 O洗滌(或%ACN之H2 O溶液：運轉時間 3085 s；80 min-1 ；1次循環(為90 mL體積) 合併之溶出液冷凍乾燥，產生1170 mg (100%純度，91%產率)之目標L-酒石酸鹽. 離子層析法(氯化物含量): ＜1% 氯化物 離子層析法(TFA 含量): ＜1% TFA 離子層析法(乙酸鹽含量): 13.4% 乙酸鹽= 1.49當量 LC-MS (MCW-TOF-AQ-YMC-18min)：Rt = 7.62 min；MS(ESIpos)：m/z = 725 [M+2H]+
實例376 序列：((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IP-NH2 (檸檬酸鹽) (實例376) N-[(6S,9S,12S,15S,18R,23R,26S,28aS,29aS,33aS,35aS)-26-[(2S)-丁烷-2-基]-12-(3-甲脒丙基)-9,15-雙(羥基甲基)-22,22-二甲基-18-[(N-甲基甘胺醯基-L-異白胺醯基)胺基]-6-(2-甲基丙基)-5,8,11,14,17,25,28,35-八側氧基三十二氫-1H,5H,22H-吡咯并[2',1':13,14][1,2,5,8,11,14,17,20,23,26]二硫雜八氮雜環二十九并[11,10-a]吲哚-23-羰基]-L-異白胺醯基-L-脯胺醯胺，2-羥基丙烷-1,2,3-三羧酸(檸檬酸)鹽
Figure 02_image065
取IRA 410 氯化物樹脂(26 g)置入一個空的20 mL Biotage管柱，使用5%ACN-水之溶液洗滌樹脂(10次)。卡管附接自動化離子交換台。使用20份管柱體積之1M NaOH溶液洗滌樹脂(2x 1800s轉速80 min-1 )。使用水洗滌管柱直到溶出液之pH ＜ 9 (10份管柱體積)。然後使用1 M 檸檬酸溶液(10份管柱體積)溶離管柱，然後使用水洗滌，直到溶出液之pH ＞ 5 (約10份管柱體積)。取肽(N-Me)GIC+SRSLP-(Oic)-I-Pen+IP-NH2 (TFA鹽) (1200 mg)含在12 mL 5% ACN/水中，加載至管柱上，根據通用方法F通過管柱循環10次。然後使用5% ACN/水溶液洗滌樹脂10次，收集溶出液至50 mL Falcon離心管中。此規模所採用之參數設定為： 使用H2 O洗滌：運轉時間3085 s；80 min-1 ；1次循環(為90 mL體積) 使用肽之樣本循環：運轉時間 3085 s；80 min-1 ；1次循環(為180 mL體積) 使用H2 O洗滌(或%ACN之H2 O溶液：運轉時間3085 s；80 min-1 ；1次循環(為90 mL體積) 合併之溶出液冷凍乾燥，產生1370 mg (100 %純度，97 %產率)之目標L-酒石酸鹽。 離子層析法(氯化物含量)：＜1% 氯化物 離子層析法(TFA 含量)：＜1% TFA 離子層析法(乙酸鹽含量)：19.0% 乙酸鹽= 1.77當量 LC-MS (MCW-TOF-AQ-YMC-18min)：Rt = 7.6 min；MS(ESIpos)：m/z = 725 [M+2H]+
相關技藝中具有通常知識者咸了解，雖然採用離子層析法之化學計量不一定是化學計量(例如：1：2或1：1)，但均不考慮水含量，有些例子中會測定水含量，可在8-15%之間。
通用方法G：游離鹽型製法 以AIC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPD-NH2 (游離鹽型) (實例27)製法為代表。 取5克TFA鹽(實例75)採用逆相HPLC，於70o C下，使用乙腈水梯度，不使用酸改質劑下純化。合併所需溶出份，及冷凍乾燥。得到2.2克游離鹽型(實例27)；LC-MS (＞ 99%純度)；離子層析法(＜ 1% TFA)
通用方法H：大規模合成法 以AIC+SRS-((tBu)A)-PPI-((N-Me)C)+IPD-NH2 (實例48)之合成法為代表
Figure 02_image067
採用標準Fmoc化學法合成該肽。 1)    添加DMF至包含 MBHA樹脂(180 mmol)的容器中，讓樹脂膨脹2小時。 2)    添加Fmoc-Rink醯胺鍵聯劑，混合30秒後，添加活化緩衝液。使用N2 鼓泡混合約1小時。 3)    瀝乾樹脂中之溶液，及使用DMF洗滌樹脂(30 sec x 3次)。 4)    添加20%哌啶/DMF溶液，使用氮氣鼓泡混合30 min。 5)    溶液瀝乾，及使用DMF洗滌樹脂(5次)。 6)    添加Fmoc-胺基酸溶液，混合30秒，然後添加活化緩衝液。使用N2 鼓泡混合約1小時。 7)    各胺基酸偶合重覆步驟3至6。 表10：所採用材料及條件之說明
# 材料 偶合試劑 偶合時間
1 Fmoc-Asp(OtBu)-OH HBTU (3.0 eq)及DIEA (6.0 eq) 1 h
2 Fmoc-Pro-OH HBTU (3.0 eq)及DIEA (6.0 eq) 1 h
3 Fmoc-Ile-OH HBTU (3.0 eq)及DIEA (6.0 eq) 1 h
4 Fmoc-NMe-Cys(Trt)-OH HATU (2.0 eq)及DIEA (4.0 eq) 1 h
5 Fmoc-Ile-OH HBTU (3.0 eq)及DIEA (6.0 eq) 1 h
6 Fmoc-Pro-OH HBTU (3.0 eq)及DIEA (6.0 eq) 1 h
7 Fmoc-Pro-OH HBTU (3.0 eq)及DIEA (6.0 eq) 1 h
8 Fmoc-tBuAla-OH HATU (2.0 eq)及DIEA (4.0 eq) 1 h
9 Fmoc-Ser(tBu)-OH HBTU (3.0 eq)及DIEA (6.0 eq) 1 h
10 Fmoc-Arg(pbf)-OH HBTU (3.0 eq)及DIEA (6.0 eq) 1 h
11 Fmoc-Ser(tBu)-OH HBTU (3.0 eq)及DIEA (6.0 eq) 1 h
12 Fmoc-Cys(Trt)-OH HBTU (3.0 eq)及DIEA (6.0 eq) 1 h
13 Fmoc-Ile-OH HBTU (3.0 eq)及DIEA (6.0 eq) 1 h
14 Fmoc-Ala-OH HBTU (3.0 eq)及DIEA (6.0 eq) 1 h
使用20%哌啶之DMF溶液脫除Fmoc保護基30 min。採用茚三酮試驗追蹤偶合反應，及使用DMF(5.0 mL)洗滌樹脂 5次。
肽裂解及純化： 1)    添加裂解緩衝液(92.5% TFA：2.5% EDT：2.5% TIS：2.5% H2 O)至室溫下之包含側鏈受保護之肽之燒瓶中，及攪拌混合物2小時。 2)    肽使用冷的異丙基醚沉澱，及離心(5000 rpm下2 min)。 3)    再使用異丙基醚洗滌肽2次。 4)    粗製肽經過真空乾燥2小時。
形成二硫化物 在含粗產物線性肽(15 g, 9.92 mmol, 1.0 eq) (20批次)之H2 O /I溶液(3 L 2：1)中添加NH4 HCO3 (7.84 g, 99.2 mmol, 10 eq)。混合物於30°C下攪拌16 h，添加HCl至PH~6淬滅反應後，混合物冷凍乾燥。凍乾物經過Prep-HPLC純化，產生所需實例48 (41.8 g, 95.8%, 13.3%產率)之白色固體，共156.8克。
純化條件 儀器：Shimadzu 10A；肽溶於DMF/H2 O。移動相：A：H2 O (0.075% TFA之H2 O溶液)，B：EtOH；梯度：10-50%-60 min。滯留時間：47 min；管柱：Luna，C18，10  μm,100A，25 cm x 50 mm；流速：80 mL/min；波長：220/254 nm；烘箱溫度：室溫。
方法I：((N-Me)A)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IP-((N-苯甲基)D)-NH2 (實例462)製法 N-[(6S,9S,12S,15S,18R,23R,26S,28aS,29aS,33aS,35aS)-26-[(2S)-丁烷-2-基]-12-(3-甲脒丙基)-9,15-雙(羥基甲基)-22,22-二甲基-18-[(N-甲基-L-丙胺醯基-L-異白胺醯基)胺基]-6-(2-甲基丙基)-5,8,11,14,17,25,28,35-八側氧基三十二氫-1H,5H,22H-吡咯并[2’,1’:13,14][1,2,5,8,11,14,17,20,23,26]二硫雜八氮雜環二十九并[11,10-a]吲哚-23-羰基]-L-異白胺醯基-L-脯胺醯基-N4 -苯甲基-L-天冬醯胺
Figure 02_image069
於Rink 醯胺 MBHA 樹脂上製備肽(通常加載約0.4-0.6 mmol/g)，規模為0.3 mmol。採用方法C說明之方法，添加第一胺基酸 Fmoc-Asp(2-苯基異丙基酯)-OH (CAS 200336-86-3)至樹脂中。採用方法C說明之步驟建構肽序列。當序列完成時，使用1%TFA之DCM溶液脫除2-OPP保護基30分鐘。添加N-苯甲基胺(3當量)、DIC (3當量)及Oxyma (3當量)，及混合物振盪2小時。肽已裂解，形成二硫鍵，及根據方法C純化該肽。
通用方法J.((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IP-(*Dap)-OH(實例467)製法 N-[(6S,9S,12S,15S,18R,23R,26S,28aS,29aS,33aS,35aS)-26-[(2S)-丁烷-2-基]-12-(3-甲脒丙基)-9,15-雙(羥基甲基)-22,22-二甲基-18-[(N-甲基甘胺醯基-L-異白胺醯基)胺基]-6-(2-甲基丙基)-5,8,11,14,17,25,28,35-八側氧基三十二氫-1H,5H,22H-吡咯并[2',1':13,14][1,2,5,8,11,14,17,20,23,26]二硫雜八氮雜環二十九并[11,10-a]吲哚-23-羰基]-L-異白胺醯基-N-[(2S)-2-胺基-2-羧基乙基]-L-脯胺醯胺製法
Figure 02_image071
該肽係於2-氯三苯甲基樹脂上，根據方法C製備。根據方法C添加BOC-Dap(Fmoc)-OH (CAS 122235-70-5)至樹脂上。根據方法C建構該肽及純化。
通用方法K. (2-(嗎福啉)乙醯基)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-NH2 (實例283)製法
實例27A N-(溴乙醯基)-L-異白胺醯基-L-半胱胺醯基-L-絲胺醯基-L-精胺醯基-L-絲胺醯基-4-甲基-L-白胺醯基-L-脯胺醯基-L-脯胺醯基-L-異白胺醯基-3-硫烷基-L-纈胺醯基-L-異白胺醯基-L-脯胺醯基-L-α-精胺酸
Figure 02_image073
於Rink醯胺 ChemMatrix 樹脂上，依0.1 mmol規模，根據方法A製備序列 IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-NH2 12次。在包含肽之樹脂 (200 mg 100 µmol)中添加N,N'-二異丙基碳化二亞胺(31 µL, 200 µmol)、(羥基亞胺基)氰基乙酸乙酯 (28.4 mg, 200 µmol)及溴乙酸(14 µL, 200µmol)，混合物於室溫之溫度調控混合振盪器上，在5 mL DMF中振盪一夜。樹脂過濾，使用DMF洗滌(6 x 5 mL)，使用DCM洗滌(6 x 5 mL)後，真空乾燥，以用於下一個步驟。
實例283 N-[(5aS,11S,14S,17S,20S,23R,28R,31S,33aS)-31-[(2S)-丁烷-2-基]-17-(3-甲脒丙基)-11-(2,2-二甲基丙基)-14,20-雙(羥基甲基)-27,27-二甲基-23-({N-[(嗎福啉-4-基)乙醯基]-L-異白胺醯基}胺基)-5,10,13,16,19,22,30,33-八側氧基二十八氫-1H,5H,10H-二吡咯并[2,1-j:2',1'-m][1,2,5,8,11,14,17,20,23,26]二硫雜八氮雜環二十九烷-28-羰基]-L-異白胺醯基-L-脯胺醯基-L-α-精胺酸
Figure 02_image075
在含實例27a (200 mg, 74%純度，77.7 µmol)之NMP(10 mL)中添加嗎福啉 (34 µl, 390 µmol)，懸浮液於 37°C之溫度調控混合器上振盪。過濾收集樹脂固體，使用10 mL DMF及10 mL 二氯甲烷分別洗滌2次。殘質使用TFA/EDT/硫代苯甲醚(90：3：7)處理，及於室溫下振盪2 h。反應混合物使用冷的乙醚(-10o C)處理後，懸浮液於氮氣下離心，及使用冷的乙醚洗滌三次 (3 x 30 mL)。在殘質中添加0.1 M碳酸氫銨水溶液(400 mL)，反應混合物於開口圓底燒瓶中，於開放空氣下振盪一夜。溶劑冷凍乾燥，凍乾粉末根據方法A純化，產生20.4 mg (98%純度，16%產率)之實例283。 單離出實例300 (2-Hydroxyacetyl)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-NH2 為副產物。
通用方法L. 鈉鹽及膽鹼鹽型製法 此等鹽係由游離鹽型肽製備。以下列兩種實例作為一般方法之代表：
實例431 N-[(6S,9S,12S,15S,18R,23R,26S,28aS,29aS,33aS,35aS)-18-[(L-丙胺醯基-L-異白胺醯基)胺基]-26-[(2S)-丁烷-2-基]-12-(3-甲脒丙基)-9,15-雙(羥基甲基)-22,22-二甲基-6-(2-甲基丙基)-5,8,11,14,17,25,28,35-八側氧基三十二氫-1H,5H,22H-吡咯并[2',1':13,14][1,2,5,8,11,14,17,20,23,26]二硫雜八氮雜環二十九并[11,10-a]吲哚-23-羰基]-L-異白胺醯基-N-[(1S)-1,2-二羧醯基(dicarboxylato)乙基]-L-脯胺醯胺，鈉鹽
Figure 02_image077
序列：AIC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPD-OH (鈉鹽) (實例431) 在含AIC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPD-OH (游離鹽型) (100 mg)之20 mL 乙腈/水1：1溶液中添加1.3 mL 0.1 M氫氧化鈉溶液。混合物真空乾燥，產生109 mg (104%產率，99%純度)目標化合物。 LC-MS (MCW-TOF-AQ-YMC-18min)：Rt = 8.62 min；MS(ESIpos): m/z = 783 [M+2H]2+ 離子層析法(鈉含量): 2.9% 鈉 = 2.03當量
實例432 N-[(6S,9S,12S,15S,18R,23R,26S,28aS,29aS,33aS,35aS)-18-[(L-丙胺醯基-L-異白胺醯基)胺基]-26-[(2S)-丁烷-2-基]-12-(3-甲脒丙基)-9,15-雙(羥基甲基)-22,22-二甲基-6-(2-甲基丙基)-5,8,11,14,17,25,28,35-八側氧基三十二氫-1H,5H,22H-吡咯并[2',1':13,14][1,2,5,8,11,14,17,20,23,26]二硫雜八氮雜環二十九并[11,10-a]吲哚-23-羰基]-L-異白胺醯基-N-[(1S)-1,2-二羧醯基(dicarboxylato)乙基]-L-脯胺醯胺，2-羥基-N,N,N-三甲基乙烷-1-銨) (膽鹼)鹽
Figure 02_image079
在含AIC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPD-OH (游離鹽型) (100 mg) 之20 mL 乙腈/水1：1溶液中添加511  μL 0.25 M 膽鹼氫氧化物溶液。混合物真空乾燥，產生122 mg (105%產率，99%純度)目標化合物。 LC-MS (MCW-TOF-AQ-YMC-18min)：Rt = 8.65 min；MS(ESIpos): m/z = 783 [M+2H]2+ 離子層析法(膽鹼含量)：11.7% 膽鹼 = 1.97當量
實例13 AIC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPD-OH (實例13) (3S)-4-胺基-3-({(2S)-1-[(2S,3S)-2-{[(2R)-2-{[(2S,3S)-2-{[(2S,3aS,7aS)-1-{(2S)-1-[(2S,5S,8S,11S,14R,17S,20S)-20-胺基-17-[(2S)-丁烷-2-基]-8-(3-甲脒丙基)-5,11-雙(羥基甲基)-2-(2-甲基丙基)-4,7,10,13,16,19-六側氧基-14-(硫烷基甲基)-3,6,9,12,15,18-六氮雜二十一烷-1-醯基]吡咯啶-2-羰基}八氫-1H-吲哚-2-羰基]胺基}-3-甲基戊醯基]胺基}-3-甲基-3-硫烷基丁醯基]胺基}-3-甲基戊醯基]吡咯啶-2-羰基}胺基)-4-側氧基丁酸
Figure 02_image081
肽合成法 採用標準Fmoc化學法合成該肽。 1）      樹脂製法：在CTC 樹脂(15.0 mmol, 15.0 g, 1.0 mmol/g)中添加Fmoc-Asp(OtBu)-OH (15.0 mmol, 6.17 g, 1.0 eq)及DIEA (10.4 mL, 60.0 mmol, 4.0 eq)之DCM溶液 (300 mL)。混合物於20°C下使用N2 攪動2 h。然後添加甲醇(15.0 mL)，及樹脂使用N2 再攪動30 min。樹脂使用DMF洗滌(300 mL x 3)。然後添加20%哌啶之DMF溶液(300 mL)，混合物於20°C下使用N2 攪動20 min。然後混合物過濾，產生樹脂。樹脂使用DMF洗滌(300 mL x 3)及過濾，產生樹脂。 2）      偶合：添加Fmoc-Pro-OH (15.2 g, 45.0 mmol, 3.0 eq)、HBTU (16.2 g, 42.8 mmol, 2.85 eq)及DIEA (90.0 mmol, 15.6 mL, 6.00 eq)之DMF溶液(100 mL)至樹脂中，及於20°C下使用N2 攪動樹脂30 min。樹脂隨後使用DMF洗滌(300 mL x 5)。 3）      脫除保護：添加20%哌啶之DMF溶液(300 mL)至樹脂中，及於20°C下，使用N2 攪動混合物20 min。 4）      所有其他胺基酸重覆步驟2與3。 表11：實例13使用之試劑
# 材料 偶合試劑 偶合時間 供應商
1 Fmoc-Asp(OtBu)-OH (1.0 eq) DIEA (4.0 eq) 2.0 h GL Biochem (shanghai) Ltd
2 Fmoc-Pro-OH (3.0 eq) HBTU (2.85 eq) DIEA (6.0 eq) 30 min GL Biochem (shanghai) Ltd
3 Fmoc-Ile-OH (3.0 eq) HBTU (2.85 eq) DIEA (6.0 eq) 30 min GL Biochem (shanghai) Ltd
4 Fmoc-Pen(Trt)-OH (3.0 eq) HBTU (2.85 eq) DIEA (6.0 eq) 30 min GL Biochem (shanghai) Ltd
5 Fmoc-Ile-OH (3.0 eq) HBTU (2.85 eq) DIEA (6.0 eq) 30 min GL Biochem (shanghai) Ltd
6 Fmoc-Oic-OH (3.0 eq) HBTU (2.85 eq) DIEA (6.0 eq) 30 min GL Biochem (shanghai) Ltd
7 Fmoc-Pro-OH (3.0 eq) HBTU (2.85 eq) DIEA (6.0 eq) 30 min GL Biochem (shanghai) Ltd
8 Fmoc-Leu-OH (3.0 eq) HBTU (2.85 eq) DIEA (6.0 eq) 30 min GL Biochem (shanghai) Ltd
9 Fmoc-Ser(tBu)-OH (3.0 eq) HBTU (2.85 eq) DIEA (6.0 eq) 30 min GL Biochem (shanghai) Ltd
10 Fmoc-Arg(Pbf)-OH (3.0 eq) HBTU (2.85 eq) DIEA (6.0 eq) 30 min Chengdu 胺基tp Pharmaceutical Technology Ltd
11 Fmoc-Ser(tBu)-OH (3.0 eq) HBTU (2.85 eq) DIEA (6.0 eq) 30 min GL Biochem (shanghai) Ltd
12 Fmoc-Cys(Trt)-OH (3.0 eq) HBTU (2.85 eq) DIEA (6.0 eq) 30 min GL Biochem (shanghai) Ltd
13 Fmoc-Ile-OH (3.0 eq) HBTU (2.85 eq) DIEA (6.0 eq) 30 min GL Biochem (shanghai) Ltd
14 Fmoc-Ala-OH (3.0 eq) HBTU (2.85 eq) DIEA (6.0 eq) 30 min GL Biochem (shanghai) Ltd
使用20%哌啶之DMF溶液脫除Fmoc保護基30 min。採用茚三酮(除了Pro以外之所有胺基酸)及四氯苯醌試驗(Pro)追蹤偶合反應，及使用DMF(5.0 mL)洗滌樹脂 5次。 HBTU、DIEA供需商：Suzhou Highfine Biotech Co.,Ltd
肽裂解及純化 5)      樹脂使用MeOH洗滌(300 mL x 5)及真空乾燥，得到41.5 g肽樹脂。然後添加400 mL裂解緩衝液(92.5%TFA/2.5% 3-氫硫基丙酸/2.5%TIS/2.5%H2 O)至20°C之包含側鏈已受保護之肽樹脂之燒瓶中，及攪拌混合物2.5 h後，過濾。 6)      肽使用冷的第三丁基甲基醚(4000 mL)沉澱，及離心(3000 rpm下3 min)，得到粗產物固體肽。再使用第三丁基甲基醚洗滌粗製肽3次(1000 mL x 3)。該粗製肽真空乾燥2.0 h，產生21.8 g粗製肽。 7)      取粗製肽(21.8 g)溶於CH3 CN (6.5 L)及水(6.5 L)。於20°C下添加I2 (0.1 M MeOH溶液, 55 mL)，直到黃色持久不變為止。然後於20°C下攪拌混合物2 min。然後滴加硫代硫酸鈉(0.1 M水溶液，15 mL)，直到黃色消失。混合物冷凍乾燥，產生粗產物粉末(22.7 g)。 8)      粗製肽採用備製性-HPLC純化(條件：A：0.075% TFA之水溶液，B：CH3 CN)，收集包含產物之溶出份，及冷凍乾燥，產生目標肽(序列ID 13)；(4305.1 mg, 18.3%產率，採用110 Å C18 RP-HPLC管柱(Gemini C18 5 μm 110 Å 150 x 4.6 mm)測得99.1%；採用300 Å C18 RP-HPLC管柱 (Discovery BIO Wide Pore C18 5 μm 300 Å 150 x 4.6 mm)測得97.8%，TFA鹽)，呈白色固體。 表12：純化條件
純化條件
溶解條件 TFA/H2 O = 7/3
儀器 Gilson GX-281
移動相 A：H2 O (A:0.075%TFA之H2 O溶液，B：ACN)
B：CH3 CN
梯度 13-43%-60 min 滯留時間：40 min
管柱 Luna 25 x 200 mm, C18 10  μm,110 Å + Gemini 150 x 30 mm, C18 5  μm,110 Å
流速 20 mL/Min
波長 214/254 nm
烘箱溫度 30o C
LC-MS：Rt = 1.369 min; 1564 [M+2H]+ Rt = 8.72 min (99.1%純度) Gemini C18 5 μm 110Å 150 x 4.6 mm Rt = 9.42 min (97.8%) Discovery BIO Wide Porei C18 5 μm 300Å 150 x 4.6 mm 可以從實例13 (TFA鹽)採用通用方法F，製備實例29(HCl鹽)；實例5(游離鹽型)可採用通用方法G製備。由實例5製備實例431 (鈉鹽)及實例432 (膽鹼鹽)之方法分別示於實例431及實例432。
實例237 AIC+SRSL-(L-脫氫脯胺酸)-(Oic)-I-(Pen)+IPD-OH (實例237) N-[(6S,9S,12S,15S,18R,23R,26S,28aS,35aS)-18-[(L-丙胺醯基-L-異白胺醯基)胺基]-26-[(2S)-丁烷-2-基]-12-(3-甲脒丙基)-9,15-雙(羥基甲基)-22,22-二甲基-6-(2-甲基丙基)-5,8,11,14,17,25,28,35-八側氧基-6,7,8,9,10,11,12,13,14,15,16,17,18,19,23,24,25,26,27,28,28a,29,29a,30,31,32,33,33a,35,35a-三十氫-3H,5H,22H-吡咯并[2',1':13,14][1,2,5,8,11,14,17,20,23,26]二硫雜八氮雜環二十九并[11,10-a]吲哚-23-羰基]-L-異白胺醯基-L-脯胺醯基-L-天冬胺酸
Figure 02_image083
肽係根據方法C製備(3.12 g)。此肽之分析數據示於表16及表17。
實例142 AIC+SRSL-(Pro-D2)-(Oic)-I-(Pen)+IPD-OH (實例142) N-[(1R,2S,6S,9S,12S,15S,18R,23R,26S,28aS,35aS)-18-[(L-丙胺醯基-L-異白胺醯基)胺基]-26-[(2S)-丁烷-2-基]-12-(3-甲脒丙基)-9,15-雙(羥基甲基)-22,22-二甲基-6-(2-甲基丙基)-5,8,11,14,17,25,28,35-八側氧基(1,2-2 H2 )三十二氫-1H,5H,22H-吡咯并[2',1':13,14][1,2,5,8,11,14,17,20,23,26]二硫雜八氮雜環二十九并[11,10-a]吲哚-23-羰基]-L-異白胺醯基-L-脯胺醯基-L-天冬胺酸
Figure 02_image085
取來自實例237之肽(30 mg, 19.2 µmol)溶於甲醇-d4 (3 mL) (D 為99.8%純度)。添加銠黑(CAS 7440-16-6，ACBR，物品編列AB25746) (10 mol%、1.9 µmol)至M-Braun Glovebox手套箱內氬氣下之溶液中。取8 mL反應瓶混合物置入位在Chemspeed Swing XL平台上之MTP加壓塊反應器中，封閉在M-Braun手套箱內(Chemspeed Technologies AG, Wölferstrasse 8, 4414 Füllinsdorf, Switzerland, chemspeed@chemspeed.com)。反應在環繞速度650 rpm下，於室溫及3 bar氘氣下振盪16 h過夜。使用氬氣吹掃加壓塊，從加壓塊中移出小瓶。使用旋轉蒸發器蒸發甲醇-d4 ，所得固體溶於水(2 mL)，及攪拌1小時，讓氫氣與可交換之氘原子交換。1小時後，添加乙腈，產物使用逆相 HPLC純化[管柱：Phenomenex Aeris Peptide 5µ XB-C18，AXIA Packed，21.2 x 250 mm +卡管 5µ，流速：20 mL/min，聚焦梯度使用H2 O / CAN(含0.1% TFA作為酸改質劑)。FOK30-40：0 min 5%ACN，0-13 min漸升至30% ACN，13-39 min平緩漸升至40% ACN，39-46 min等濃度40% ACN]。取包含產物之層析溶出份採用分析性HPLC (聚焦梯度)及採用LC-MS分析後，集中所產生之兩份純產物溶出份：11.4 mg (90%純度，34%產率)及4.2 mg (99%純度，14%產率)。此肽之分析數據示於表16。 肽產物經過胰蛋白酶消解後，與二硫代蘇硫醇反應，使用TOF-MS-MS分析所得片段。使用胰蛋白酶消解法裂解精胺酸與絲胺酸之間之肽(真正質量1583.8384，實測質量1583.852 [M+2H]2+)。與硫代蘇硫醇反應產生兩個片段：AICSR-OH (真正質量548.2741，實測質量548.283 [M+H]+)及SL-(Pro-D2)-(Oic)-I-(Pen)+IPD-OH (真正質量1037.5800，實測質量1038.587 [M+H]+)，依氘原子位置驗證：838.47 amu之片段為((Pro-D2)-(Oic)-I-(Pen)+IPD-OH)及738.40 amu之片段為SL-((Oic)-I-(Pen)+IPD-OH)。
實例28A (2S,3aS,6aS)-八氫環戊并[b]吡咯-2-羧酸-鹽酸鹽(1/1) (單一立體異構物)
Figure 02_image087
該反應係在氬蒙氣下進行。在鈀/碳(200 mg, 10%)中添加20 mL甲醇及 (2S,3aS,6aS)-八氫環戊并[b]吡咯-2-羧酸苯甲基酯-鹽酸鹽(1/1) (1.00 g, 3.55 mmol)。在反應燒瓶中填充氫氣(1 atm)，反應混合物於室溫及氫蒙氣下攪拌一夜。反應混合物通過矽藻土過濾，及使用甲醇洗滌濾餅。濾液蒸發及真空乾燥，產生698 mg目標化合物。 (2S,3aS,6aS)-八氫環戊并[b]吡咯-2-羧酸亦可自商品取得游離鹽型。
實例29A (2S,3aS,6aS)-1-{[(9H-芴-9-基)甲氧基]羰基}八氫環戊并[b]吡咯-2-羧酸(單一立體異構物)
Figure 02_image089
在含(2S,3aS,6aS)-八氫環戊并[b]吡咯-2-羧酸-鹽酸鹽(1/1) (680 mg, 3.55 mmol)之12 mL水中添加碳酸氫鈉(2.98 g, 35.5 mmol)及含1-({[(9H-芴-9-基)甲氧基]羰基}氧)吡咯啶-2,5-二酮(Fmoc-OSu) (1.26 g, 3.73 mmol)之18 mL丙酮溶液。反應混合物於室溫下攪拌一夜。反應混合物加水處理，使用1 M 鹽酸酸化及使用乙酸乙酯萃取2次。有機相使用飽和氯化鈉水溶液洗滌，經硫酸鎂乾燥，過濾後，蒸發。殘質經由矽膠層析法分離(Biotage Isolera，管柱：50 g SNAP Ultra; 溶離液：二氯甲烷/甲醇100：2 – 100：5)。合併適當溶出份，蒸發及真空乾燥，產生1.27 g (99%純度，94%產率)目標化合物。 LC-MS (方法10)：Rt = 2.08 min；MS(ESI pos): m/z = 378 [M+H]+ ¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.260 (1.76), 1.274 (1.85), 1.299 (1.78), 1.321 (2.09), 1.335 (2.38), 1.440 (0.92), 1.455 (1.10), 1.473 (0.87), 1.521 (3.61), 1.537 (3.86), 1.551 (2.28), 1.607 (4.53), 1.620 (3.68), 1.640 (3.08), 1.653 (1.66), 1.712 (2.02), 1.781 (1.38), 1.816 (2.30), 1.827 (2.26), 1.839 (2.37), 1.855 (1.68), 2.073 (1.20), 2.305 (0.83), 2.328 (1.99), 2.351 (1.35), 2.360 (1.64), 2.384 (0.92), 2.468 (0.60), 2.606 (1.50), 2.670 (1.11), 3.860 (0.94), 3.874 (1.94), 3.893 (1.95), 3.907 (0.92), 4.143 (2.61), 4.156 (3.68), 4.167 (5.16), 4.186 (5.89), 4.266 (1.43), 4.280 (3.20), 4.294 (2.11), 4.345 (1.31), 4.371 (3.19), 4.386 (3.83), 4.396 (4.39), 4.411 (3.74), 4.422 (2.40), 4.437 (0.98), 7.292 (0.97), 7.311 (3.89), 7.329 (6.99), 7.346 (6.08), 7.363 (2.49), 7.395 (9.91), 7.414 (16.00), 7.432 (6.98), 7.663 (9.73), 7.680 (6.46), 7.879 (12.31), 7.897 (11.49), 12.586 (0.80).
實例30A (1R,3S,5R)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-羧酸(單一立體異構物)
Figure 02_image091
取(1R,3S,5R)-2-(第三丁氧基羰基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-羧酸(CAS RN：197142-34-0, 500 mg)溶於4M HCl-二㗁烷溶液(3 mL)及於室溫下攪拌8 h。溶劑蒸發，及粗產物直接用於下一個步驟。
實例31A (1R,3S,5R)-2-{[(9H-芴-9-基)甲氧基]羰基}-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-羧酸(單一立體異構物)
Figure 02_image093
在含(1R,3S,5R)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-羧酸(實例30A, 280 mg, 2.20 mmol)之3 mL水溶液中添加碳酸氫鈉(1.85 g, 22.0 mmol)及含1-({[(9H-芴-9-基)甲氧基]羰基}氧)吡咯啶-2,5-二酮(0.78 g, 2.31 mmol)之4.5 mL丙酮溶液。反應混合物於室溫下攪拌一夜。反應混合物加水處理，及使用乙酸乙酯萃取2次。有機相使用飽和氯化鈉水溶液洗滌，經硫酸鎂乾燥，過濾後，濃縮。粗產物經製備性逆相HPLC純化(管柱：Reprosil；C18；10 µm；125 x 30 mm；溶離液 A：CAN，溶離液 B：水，含0.1%甲酸)，合併含產物之溶出份，及冷凍乾燥，產生88.0 mg (96%純度，11%產率)目標化合物。 LC-MS (方法11)：Rt = 1.32 min；MS(ESI pos): m/z = 372 [M+Na]+ ¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.15), -0.008 (10.73), 0.008 (9.13), 0.146 (1.21), 0.468 (1.54), 0.534 (3.66), 0.803 (4.38), 1.682 (2.68), 2.072 (0.75), 2.128 (2.19), 2.142 (2.32), 2.223 (1.05), 2.293 (2.19), 2.327 (4.45), 2.349 (2.68), 2.366 (2.75), 2.523 (3.89), 2.670 (1.44), 2.710 (1.31), 2.816 (0.82), 3.413 (3.93), 3.757 (1.83), 4.010 (2.91), 4.140 (2.39), 4.211 (3.11), 4.285 (12.30), 6.929 (0.43), 6.950 (0.43), 7.340 (9.91), 7.358 (6.02), 7.406 (10.08), 7.425 (16.00), 7.443 (7.10), 7.650 (2.85), 7.702 (4.52), 7.724 (5.53), 7.746 (3.40), 7.892 (12.40), 7.910 (9.85), 12.680 (0.65). 此胺基酸用於Fmoc SPPS。此fmoc 胺基酸亦可自商品取得。
實例32A  (2R,4R)-4-[(2S)-丁烷-2-基]-2-第三丁基-5-側氧基-1,3-㗁唑啶-3-羧酸苯甲基酯 (單一立體異構物)
Figure 02_image095
在含D-別異白胺酸(8.06 g, 61.4 mmol)之120 mL乙醇懸浮液中添加氫氧化鈉 溶液(由2.45 g氫氧化鈉於11 mL水中製成)。反應混合物於室溫下攪拌90 min後，蒸發。殘質使用195 mL戊烷處理後，添加2,2-二甲基丙醛(10 mL, 92 mmol)。反應混合物於45°C下，使用附接迪安-斯達克分水器(Dean-Stark trap)圓底燒瓶攪拌24 h。冷卻後，溶劑蒸發，殘質使用甲苯(共沸蒸餾)脫水數次。殘質使用165 mL 二氯甲烷處理，及冷卻至0°C。添加氯甲酸苯甲基酯(13 mL, 92 mmol)，反應混合物於0-4°C下攪拌攪拌一週。添加4-二甲基胺基吡啶 (375 mg, 3.1 mmol)及65 mL水至反應混合物中，讓反應混合物回升至室溫後，於室溫下攪拌一夜。反應混合物使用乙酸乙酯處理數次及萃取。合併之有機相使用10%檸檬酸水溶液洗滌2次後，使用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌2次。水相再使用乙酸乙酯萃取。合併之有機相使用飽和氯化鈉水溶液洗滌，經硫酸鎂乾燥，過濾後，蒸發。殘質經矽膠層析法純化 (Isolera；溶離液：環己烷/乙酸乙酯100：3 – 100：7)。合併含產物之溶出份，蒸發後，真空乾燥，產生8.71 g目標化合物。
實例33A (2R,4R)-4-[(2S)-丁烷-2-基]-2-第三丁基-4-甲基-5-側氧基-1,3-㗁唑啶-3-羧酸苯甲基酯 (單一立體異構物)
Figure 02_image097
該反應係在氬蒙氣下進行。取含(2R,4R)-4-[(2S)-丁烷-2-基]-2-第三丁基-5-側氧基-1,3-㗁唑啶-3-羧酸苯甲基酯(實例32A, 8.12 g, 24.4 mmol) 之100 mL無水THF冷卻至-78°C。滴加六甲基二矽烷胺化鉀 (44 mL, 29 mmol)，反應混合物於-78°C下攪拌2 h。滴加碘甲烷(2.3 mL, 37 mmol)至反應混合物中，反應混合物於室溫下攪拌2.5 h。添加飽和氯化銨水溶液(20 mL)至反應混合物，反應混合物回到室溫後，使用乙酸乙酯萃取產物。 合併之有機相使用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌，經硫酸鎂乾燥，過濾後，濃縮。殘質經矽膠層析法純化 (Isolera，管柱：100 g SNAP Ultra；溶離液：環己烷/乙酸乙酯100：3 – 100：7)。合併含產物之溶出份，蒸發後，真空乾燥，產生3.2 g目標化合物。
實例34A N-[(苯甲基氧)羰基]-2-甲基-D-別異白胺酸(單一立體異構物)
Figure 02_image099
在含(2R,4R)-4-[(2S)-丁烷-2-基]-2-第三丁基-4-甲基-5-側氧基-1,3-㗁唑啶-3-羧酸苯甲基酯(實例33A, 3.20 g, 9.21 mmol)之甲醇(40 mL)溶液中添加1 M氫氧化鈉溶液(40 mL)。反應混合物於回流下攪拌2 h。冷卻後，蒸發甲醇。殘質使用10%檸檬酸溶液處理，使用乙酸乙酯萃取產物。使用乙酸乙酯再萃取水相2次。合併之有機相使用飽和氯化鈉水溶液洗滌，經硫酸鎂乾燥，過濾，蒸發後，真空乾燥，產生2.77 g目標化合物。
實例35A 2-甲基-D-別異白胺酸(單一立體異構物)
Figure 02_image101
該反應係在氬蒙氣下進行。在含N-[(苯甲基氧)羰基]-2-甲基-D-別異白胺酸(實例34A, 2.57 g, 9.20 mmol)之 190 mL甲醇中添加鈀/碳(390 mg, 10%)。反應混合物於氫蒙氣下與室溫及常壓下攪拌4 h。反應混合物通過矽藻土過濾，取濾液濃縮後，真空乾燥，產生1.32 g (98%產率)目標化合物。
實例36A N-{[(9H-芴-9-基)甲氧基]羰基}-2-甲基-D-別異白胺酸(單一立體異構物)
Figure 02_image103
在含2-甲基-D-別異白胺酸(實例35 A, 1.32 g, 9.09 mmol)之水(20 mL)及丙酮(29 mL)混合物中添加碳酸氫鈉(7.64 g, 90.9 mmol)後，添加含1-({[(9H-芴-9-基)甲氧基]羰基}氧)吡咯啶-2,5-二酮(3.22 g, 9.55 mmol)之丙酮(20 mL)溶液。反應混合物於室溫下攪拌一夜。反應混合物使用MTBE處理及萃取。水相使用濃鹽酸酸化(pH 1)及使用乙酸乙酯再萃取三次。合併之有機相經硫酸鎂乾燥，過濾及蒸發。殘質經由矽膠層析法分離(Isolera，管柱：50 g SNAP Ultra；溶離液：二氯甲烷/甲醇100：3 – 100：5)。合併適當溶出份，蒸發後，真空乾燥。 MTBE相接著使用5%碳酸氫鈉溶液處理，及使用乙酸乙酯(600 mL)萃取。水相使用濃鹽酸化(pH 1)酸化，及每次使用乙酸乙酯萃取。合併之有機相經硫酸鎂乾燥，過濾，蒸發後，真空乾燥。合併之粗產物產量為2.53 g。 殘質經矽膠層析法純化(Isolera，管柱：50 g SNAP Ultra；溶離液：二氯甲烷/甲醇97:3 – 97:5)。合併含產物之溶出份，蒸發後，真空乾燥，產生967.4 mg目標化合物。產物進一步溶於水/乙腈及冷凍乾燥後，才使用。 LC-MS (方法10)：Rt = 2.10 min；MS(ESI pos): m/z = 368.1857 [M+H]+ 此胺基酸用於Fmoc SPPS。 目標化合物。
實例37A (6S)-1,1-二氟-5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-羧酸(立體異構物之混合物)
Figure 02_image105
在含(6S)-5-(第三丁氧基羰基)-1,1-二氟-5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-羧酸(Omega, CAS 1357482-03-1) (2.50 g, 9.02 mmol)之85 mL二氯甲烷中添加三氟乙酸(15 mL, 250 mmol)。反應混合物於室溫下攪拌2 h。反應混合物濃縮及真空乾燥，以用於下一個步驟。
實例38A (6S)-5-{[(9H-芴-9-基)甲氧基]羰基}-1,1-二氟-5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-羧酸(立體異構物之混合物)
Figure 02_image107
在含(6S)-1,1-二氟-5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-羧酸(立體異構物之混合物)(實例37A, 1.60 g, 9.03 mmol)之水(13 mL)溶液中添加碳酸氫鈉(7.59 g, 90.3 mmol)後，添加1-({[(9H-芴-9-基)甲氧基]羰基}氧)吡咯啶-2,5-二酮(3.20 g, 9.48 mmol)之丙酮(20 mL)溶液。反應混合物於室溫下攪拌一夜。反應混合物使用水處理，及使用MTBE萃取2次。水相使用鹽酸酸化至pH 3，及使用二氯甲烷萃取三次。有機相使用飽和氯化鈉水溶液洗滌，經硫酸鎂乾燥，過濾，蒸發及真空乾燥，產生3.31 g (92%產率)目標化合物。 LC-MS (方法10)：Rt = 1.99 min；MS(ESI pos): m/z = 400 [M+H]+ ¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.106 (16.00), 1.589 (0.92), 1.605 (1.39), 1.619 (1.06), 1.627 (1.11), 1.655 (0.62), 1.682 (1.25), 1.703 (1.21), 1.916 (0.49), 1.949 (0.86), 1.978 (0.91), 2.012 (0.85), 2.042 (0.52), 2.086 (11.35), 2.558 (0.83), 2.568 (0.67), 2.591 (0.67), 2.645 (0.52), 2.670 (0.56), 3.077 (5.29), 3.442 (0.43), 3.452 (0.50), 3.471 (1.17), 3.479 (1.13), 3.500 (1.39), 3.527 (0.51), 3.562 (1.21), 3.627 (1.20), 3.652 (1.65), 3.677 (0.78), 4.186 (1.02), 4.200 (2.72), 4.223 (2.09), 4.238 (2.18), 4.257 (1.63), 4.279 (2.63), 4.294 (2.46), 4.306 (1.36), 4.322 (1.56), 4.348 (2.13), 4.359 (1.17), 4.372 (1.33), 4.382 (0.84), 4.477 (0.57), 4.499 (0.61), 4.510 (0.69), 4.518 (0.72), 4.533 (0.73), 4.541 (0.64), 5.754 (0.94), 7.300 (0.77), 7.316 (3.26), 7.334 (5.65), 7.353 (3.32), 7.406 (4.71), 7.425 (7.78), 7.443 (3.45), 7.640 (4.69), 7.659 (4.35), 7.683 (0.73), 7.884 (5.08), 7.903 (4.79).
實例39A (6S)-5-{[(9H-芴-9-基)甲氧基]羰基}-1,1-二氟-5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-羧酸(對映異構物1)及(對映異構物2)
Figure 02_image109
非對映異構性混合物係採用THAR超臨界流體層析法Prep 200儀器分離，其使用Chiralpcel AD-H (SFC) 5µm，250 x 30 mm管柱；溶離液：CO2 /異丙醇(83：17)；壓力：135巴；溶離液溫度：38°C；溫度(temperatur zyklon)：40°C；壓力(pressure zyklon)：24 bar；流速：100 g/min；檢測：UV 210nm；注射體積 0.4 mL/注射；在一般操作條件下，1g/min CO2 約等於1 mL/min。 順序設定：循環時間= 11.2 min 收集5.85 min至8.0 min之間之溶出份1 (對映異構物1) 收集8.4 min至10.25 min之間之溶出份2 (對映異構物2) 取溶出份濃縮。 溶出份使用分析性SFC-MS分析(Agilent，管柱：Chiralpak AD-3 3 µm 100 x 4.6 mm，溶離液：CO2 /異丙醇(85：15)；BPR壓力：130巴；BPR溫度：60°C；管柱溫度：40°C；流速：3 mL/min；UV 210 nm。 溶出份1 (rt = 2.081 min)指定為增加「(對映異構物1)」。 溶出份2 (rt = 2.838 min)指定為增加「(對映異構物2)」。 未指定兩種對映異構物之立體化學。
實例40A (3R*,6S)-5-{[(9H-芴-9-基)甲氧基]羰基}-1,1-二氟-5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-羧酸(單一對映異構物，對映異構物1，未指定3位置之立體化學)
Figure 02_image111
由對掌性SFC 製備性純化得到 2.015 g標題化合物，100% ee LC-MS (方法10)：Rt = 1.99 min；MS(ESI pos): m/z = 400 [M+H]+ ¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (0.70), 0.008 (0.74), 1.032 (15.85), 1.047 (16.00), 1.285 (1.59), 1.568 (0.69), 1.589 (1.52), 1.617 (1.57), 1.635 (0.96), 1.656 (0.63), 1.686 (1.36), 1.702 (1.37), 1.941 (0.90), 1.974 (1.05), 2.008 (0.87), 2.041 (0.90), 2.073 (1.11), 2.557 (1.08), 2.566 (0.95), 2.591 (0.80), 2.645 (0.71), 2.670 (0.95), 2.701 (0.65), 3.451 (0.87), 3.468 (1.64), 3.479 (1.88), 3.495 (1.12), 3.505 (1.17), 3.626 (2.11), 3.651 (2.91), 3.677 (1.38), 3.770 (0.41), 3.778 (0.42), 4.169 (0.43), 4.186 (1.17), 4.200 (3.11), 4.221 (2.05), 4.238 (1.40), 4.256 (1.57), 4.279 (3.79), 4.293 (3.74), 4.304 (1.62), 4.322 (2.70), 4.336 (1.12), 4.348 (2.93), 4.358 (1.92), 4.371 (1.64), 4.381 (1.52), 4.509 (1.14), 4.517 (1.25), 4.531 (1.28), 4.540 (1.12), 7.300 (0.91), 7.315 (3.87), 7.334 (7.04), 7.350 (3.82), 7.352 (4.21), 7.406 (5.88), 7.424 (9.76), 7.443 (4.35), 7.640 (7.54), 7.658 (6.74), 7.885 (6.80), 7.904 (6.34), 10.194 (0.55), 10.991 (0.42). 此胺基酸用於Fmoc SPPS。
實例41A (3S*,6S)-5-{[(9H-芴-9-基)甲氧基]羰基}-1,1-二氟-5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-羧酸(單一對映異構物，對映異構物2，未指示環丙基中心之立體化學)
Figure 02_image113
由對掌性SFC 製備性純化法得到1.041 g標題化合物，94.58% ee LC-MS (方法10)：Rt = 1.93 min；MS(ESI pos): m/z = 400 [M+H]+ ¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.19), 0.008 (1.31), 1.031 (0.55), 1.047 (0.56), 1.285 (0.60), 1.583 (1.53), 1.604 (4.87), 1.627 (5.45), 1.650 (3.25), 1.673 (2.78), 1.682 (3.76), 1.704 (3.11), 1.718 (0.95), 1.915 (3.17), 1.949 (3.55), 1.979 (3.13), 2.012 (3.33), 2.073 (3.85), 2.526 (1.60), 2.590 (1.44), 2.626 (1.61), 2.649 (0.89), 2.659 (0.80), 3.471 (2.04), 3.498 (5.50), 3.527 (3.26), 3.561 (7.96), 3.570 (4.68), 3.598 (0.84), 4.167 (0.94), 4.183 (2.75), 4.199 (6.46), 4.223 (7.75), 4.238 (9.60), 4.258 (5.95), 4.277 (4.06), 4.290 (3.98), 4.306 (3.80), 4.319 (4.63), 4.340 (4.17), 4.346 (4.47), 4.354 (2.34), 4.367 (3.96), 4.477 (3.66), 4.497 (3.66), 7.300 (1.97), 7.318 (8.34), 7.334 (11.70), 7.337 (12.42), 7.352 (6.35), 7.355 (6.41), 7.407 (9.62), 7.425 (16.00), 7.444 (7.11), 7.633 (6.46), 7.651 (10.65), 7.666 (6.62), 7.683 (4.36), 7.883 (9.71), 7.893 (10.32), 7.901 (9.57), 7.912 (8.99), 12.802 (0.79), 12.984 (0.67). 此胺基酸用於Fmoc SPPS。
實例42A 3-[4-(第三丁氧基羰基)-1H-1,2,3-三唑-1-基]-N-{[(9H-芴-9-基)甲氧基]羰基}-L-丙胺酸(單一立體異構物)
Figure 02_image115
在含3-疊氮基-N-{[(9H-芴-9-基)甲氧基]羰基}-L-丙胺酸(1.00 g, 2.84 mmol)之27 mL水/第三丁醇/二氯甲烷(1：1：1)混合物中添加丙-2-炔酸第三丁基酯(580 µL, 4.3 mmol)、硫酸銅(II)五水合物(709 mg, 2.84 mmol)及抗壞血酸鈉(1.41 g, 7.10 mmol)之14 mL水溶液。反應混合物於室溫下攪拌一夜。反應混合物加水處理，使用稀釋之檸檬酸酸化，及使用二氯甲烷萃取三次。有機相經硫酸鈉脫水，過濾後，蒸發。殘質溶於乙腈/水，分成2份經由製備性HPLC分離(管柱：Chromatorex C18 10µm 125 x 40mm；水-乙腈-梯度(含0.05% TFA：0-2 min 25%乙腈，2-22 min 25-75%乙腈，23-26min 75%乙腈，26-28 min，回到25% 乙腈；流速100 mL/min)。合併含產物之溶出份，蒸發及真空乾燥，產生1.02 g (100%純度，75%產率)目標化合物。 LC-MS (方法11)：Rt = 1.30 min；MS(ESI neg): m/z = 477 [M-H]- 此胺基酸用於Fmoc SPPS。
實例43A 5-氮雜螺[2.4]庚烷-1-羧酸 - 三氟乙酸(1/1)
Figure 02_image117
在含5-(第三丁氧基羰基)-5-氮雜螺[2.4]庚烷-1-羧酸(1.00 g, 4.14 mmol)之25 mL 二氯甲烷溶液中添加TFA (960 µL, 12 mmol)。反應混合物於室溫下攪拌2 h。反應混合物蒸發及真空乾燥，產生0.80 g (76%產率)目標化合物。 LC-MS (方法9)：Rt = 0.18 min；MS(ESI pos): m/z = 142 [M+H]+
實例44A 5-{[(9H-芴-9-基)甲氧基]羰基}-5-氮雜螺[2.4]庚烷-1-羧酸
Figure 02_image119
在含5-氮雜螺[2.4]庚烷-1-羧酸 - 三氟乙酸(1/1) (實例43A, 994 mg, 3.90 mmol)之5 mL 乙腈與5 mL 水混合物之溶液中添加1-({[(9H-芴-9-基)甲氧基]羰基}氧)吡咯啶-2,5-二酮(2.63 g, 7.79 mmol)及三乙胺(2.2 mL, 16 mmol)。反應混合物於室溫下攪拌一夜。反應混合物加水處理，使用1 M鹽酸酸化至pH 4後，使用二氯甲烷萃取三次。合併之有機相經硫酸鈉脫水，過濾及蒸發。殘質與乙腈磨製後，過濾收集沉澱，及使用乙腈洗滌。濾液分成3份，經過製備性HPLC純化(管柱：Chromatorex C18 10µm 125x40mm；水-乙腈-梯度(含0.05% TFA)：0-2 min 25%乙腈，2-22 min 25-75%乙腈，23-26 min 75%乙腈，26-28min恢復至25% 乙腈；流速100 mL/min)。合併適當溶出份，蒸發及真空乾燥，產生1.16 g (95%純度，78%產率)目標化合物。 LC-MS (方法9)：Rt = 0.99 min；MS(ESI pos): m/z = 364 [M+H]+ 此胺基酸用於Fmoc SPPS。
實例45A  (3S,5S,6R)-3-(2-甲基烯丙基)-2-側氧基-5,6-二苯基-嗎福啉-4-羧酸第三丁基酯
Figure 02_image121
平行操作兩批次：於-70°C及氮蒙氣下，以60分鐘時間，在含 (2R,3S)-6-側氧基-2,3-二苯基-嗎福啉-4-羧酸第三丁基酯 (90.0 g, 255 mmol)及3-溴-2-甲基-丙-1-烯(37.0 g, 27.6 mL, 274 mmol)之THF (1.8 L)與HMPA (180 mL)溶液中滴加雙(三甲基矽烷基)胺化鈉(279 mL, 1 M THF溶液)。然後於-70°C下攪拌溶液30 mins。反應合併，及使用飽和氯化銨水溶液(2.5 L)淬滅反應，使用乙酸乙酯(2.0 L x 2)萃取。合併之有機相使用飽和氯化鈉水溶液(1.5 L x 2)洗滌，經硫酸鈉脫水，過濾，及真空濃縮。殘質經矽膠層析法純化(石油醚/乙酸乙酯= 1/0，10/1)，產生殘質，殘質與石油醚/EtOAc (2.0 L/0.2 L)之混合物於25°C下攪拌0.5 h後，過濾，產生145 g (89%純度，62%產率)目標化合物。 LC-MS：Rt = 1.027 min, MS+Na = 430.21 H NMR: CDCl3 : 7.35–7.00 (m, 8H), 6.52 (m, 2H), 6.35–6.28 (m, 1H), 5.15–4.82 (m, 4H), 2.95–2.70 (m, 2H), 1.87 (s, 3H), 1.41 (s, 3H), 1.03 (s, 6H)
實例46A (3S,5S,6R)-3-[(1-甲基環丙基)甲基]-5,6-二苯基-嗎福啉-2-酮
Figure 02_image123
平行操作三批次。於0°C下，以30 min時間，在含(3S,5S,6R)-3-(2-甲基烯丙基)-2-側氧基-5,6-二苯基-嗎福啉-4-羧酸第三丁基酯(實例45A, 35.0 g, 76 mmol)之1.3 L 二氯甲烷溶液添加二乙基鋅(400 mL, 1M甲苯溶液) ，然後於0°C下，以30 min時間，添加氯(碘)甲烷(140 g, 793 mmol, 57.6 mL)。於0°C下攪拌反應1.5 h。反應合併，倒至2.0 L飽和碳酸氫鈉水溶液中，溶液過濾後，使用二氯甲烷(1.0 L x 2)萃取濾液。合併之有機相使用1.5 L飽和氯化鈉水溶液洗滌，經硫酸鈉脫水，通過短的矽石管過濾。然後濃縮濾液，產生殘質。取含殘質與石油醚/乙酸乙酯/二氯甲烷(10/1/1，400 mL)之混合物於25°C下攪拌0.5 h，及過濾。濾液濃縮至約120 mL後，過濾，產生20 g (92%純度，25%產率)目標化合物。 LC/MS：Rt = 0.909 min, M+H+ = 322.2
實例47A (2S)-2-(第三丁氧基羰基胺基)-3-(1-甲基環丙基)丙酸
Figure 02_image125
在已冷卻至-70°C之包含乙醇 (50 mL)、氨水(600 mL)、THF (500 mL)及(3S,5S,6R)-3-[(1-甲基環丙基)甲基]-5,6-二苯基-嗎福啉-2-酮(實例46A, 57.4 g)之攪拌溶液中，於-70 °C下，以0.5 h時間，分小份添加鋰(8 g, 1.15 mol)，直到深藍色在-70°C下持續10 min為止。在反應中小心添加50 mL 20%氯化銨水溶液淬滅反應，離開冷卻槽，加溫反應至25°C。反應混合物使用300 mL水稀釋，使用MTBE (200 mL x 2)萃取。水相於冰中冷卻，使用1 M鹽酸水溶液酸化至pH= 1，立即使用乙酸乙酯(800 mL x 2)萃取。合併之乙酸乙酯相使用300 mL飽和氯化鈉水溶液洗滌，經硫酸鈉脫水，及減壓濃縮，產生24 g (99 mmol)目標化合物。
實例48A (2S)-2-胺基-3-(1-甲基環丙基)丙酸鹽酸鹽
Figure 02_image127
在25°C下，以15 min時間，在含(2S)-2-(第三丁氧基羰基胺基)-3-(1-甲基環丙基)丙酸 (實例47A, 24.0 g, 99 mmol)之二氯甲烷(60 mL)溶液中添加鹽酸/二㗁烷(200 mL, 4M)，然後於25°C下攪拌溶液0.5 h。反應濃縮，產生殘質。殘質使用150 mL MTBE處理，及於25°C下攪拌15 min後，過濾，產生16 g (90%產率)目標化合物。1 H NMR: DMSO-d6: 0.21-0.33 (3 H, m), 0.37-0.51 (1 H, m), 1.64-1.81 (2 H, d), 3.88-3.92 (1 H, t), 8.41 (3 H, s), 13.73 (1 H, s)
實例49A (2S)-2-(9H-芴-9-基甲氧基羰基胺基)-3-(1-甲基環丙基)丙酸
Figure 02_image129
以30 min時間，在0°C下，在含((2S)-2-胺基-3-(1-甲基環丙基)丙酸鹽酸鹽 (實例48A, 14 g, 77.9 mmol)及碳酸鈉(25 g, 236 mmol)之THF (200 mL)及水(200 mL)溶液中添加1-({[(9H-芴-9-基)甲氧基]羰基}氧)吡咯啶-2,5-二酮(25 g, 74.1 mmol)，然後於0°C下攪拌溶液2 h。添加100 mL水。使用MTBE (300 mL x 2)萃溶液後，使用2 M鹽酸水溶液調整水相pH至2。合併之有機相使用150 mL飽和氯化鈉水溶液洗滌，經硫酸鈉脫水，及通過小型矽石管柱過濾。濾液濃縮，產生殘質。合併之殘質(來自前一次操作)經矽膠層析法純化(石油醚/乙酸乙酯(10：1，3：1)，產生半純殘質。殘質進一步經製備性HPLC純化(管柱：Phenomenex Luna C18 250 x 50mm，10  μm；移動相：[水(0.05% HCl)-ACN]；B%；38% - 68%，31min，50% min)，產生24.4 g (97%純度，74%產率)目標化合物。 LC-MS：Rt = 0.914 min, [M+H]+ = 366.11 H NMR: CDCl3 : δ ppm 0.23- 0.40 (4 H, m), 1.02- 1.20 (3 H, m), 1.48- 1.95 (2 H, m), 4.22- 4.33 (1 H, m), 4.39 - 4.61 (3 H, m), 5.26- 5.33 (1 H, m), 7.31- 7.49 (4 H, m), 7.56- 7.81 (4 H, m). 此胺基酸用於Fmoc SPPS。
實例50AN -(第三丁氧基羰基)-D -甲硫胺醯基-L -異白胺酸甲基酯
Figure 02_image131
取N -(第三丁氧基羰基)-D-甲硫胺酸 (2.42 g, 9.71 mmol)、L -異白胺酸甲基酯 - 鹽酸鹽(1/1) (1.76 g, 9.71 mmol)、1H -苯并三唑-1-醇(1.78 g, 11.6 mmol), 3-{[(乙基亞胺基)亞甲基]胺基}-N ,N -二甲基丙烷-1-胺鹽酸鹽(1：1) (2.23 g, 11.6 mmol)及N,N-二異丙基乙基胺(3.5 mL, 20 mmol)溶於DMF (30 mL)。混合物於環境溫度下攪拌16 h。然後加水(100 mL)，混合物使用兩份乙酸乙酯萃取。合併之有機萃液依序使用鹽酸、水(10 mL)、飽和碳酸氫鈉水溶液(10 mL)及鹽水洗滌後，經無水硫酸鈉脫水。有機層過濾，及取濾液濃縮。殘質溶於醚中，產物結晶。過濾固體，及依序使用醚及戊烷洗滌。得到3.13 g (99 %純度，86 %產率)標題化合物。
實例51A  (2S , 3S )-2-{(3R )-3-[(第三丁氧基羰基)胺基]-2-側氧基吡咯啶-1-基}-3-甲基戊酸甲基酯
Figure 02_image133
取N -(第三丁氧基羰基)-D -甲硫胺醯基-L -異白胺酸甲基酯(實例50A, 2.85 g, 7.57 mmol)溶於二氯甲烷(40 mL)，及冷卻溶液至0°C。添加三甲基氧鎓四氟硼酸鹽(1.12 g, 7.57 mmol)，混合物 於室溫下攪拌3 h。添加碳酸鉀 (3.13 g, 22.71 mmol)。然後加熱混合物至回流16 h。反應混合物倒至50 mL二氯甲烷中，及使用五份水洗滌。有機層 使用鹽水洗滌，經無水硫酸鎂脫水後，過濾。濾液濃縮，及自己烷中結晶，產生2.01 g (100 %純度，81 %產率)標題化合物。
實例52A (2S , 3S )-2-{(3R )-3-[(第三丁氧基羰基)胺基]-2-側氧基吡咯啶-1-基}-3-甲基戊酸
Figure 02_image135
取(2S ,3S )-2-{(3R )-3-[(第三丁氧基羰基)胺基]-2-側氧基吡咯啶-1-基}-3-甲基戊酸甲基酯(實例51A, 1.96 g, 5.97 mmol)溶於THF (7.8 mL)及甲醇(7.8 mL)中。添加含氫氧化鋰(300 mg, 12.5 mmol)之8 mL水溶液，混合物於室溫下攪拌1 h。反應混合物濃縮後，白色殘質溶於水(40 mL)，使用DCM (6 mL)洗滌後，使用1 M 鹽酸(12 mL)酸化。混合物使用三份乙酸乙酯萃取。合併之有機萃液經無水硫酸鈉脫水，過濾後，濃縮。殘質自乙酸乙酯及己烷中結晶，產生1.3 g (100 %純度，67%產率)標題化合物。 LC-MS (方法11)：Rt = 1.09 min；MS(ESI neg): m/z = 313 [M-H]- ¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.810 (0.96), 0.829 (2.41), 0.847 (1.25), 0.889 (2.53), 0.906 (2.59), 1.387 (16.00), 3.260 (0.71), 3.274 (0.56), 3.283 (0.75), 3.298 (0.64), 4.200 (0.97), 4.225 (0.94).
實例53AN -(第三丁氧基羰基)甘胺醯基-L -異白胺酸甲基酯
Figure 02_image137
取L -異白胺酸甲基酯(3.00 g, 20.7 mmol)及N-(第三丁氧基羰基)甘胺酸(3.98 g, 22.7 mmol)溶於DMF (20 mL)。此溶液於冰浴中冷卻至0-5°C。添加N,N-二異丙基乙基胺(3.6 mL, 21 mmol)、1H -苯并三唑-1-醇水合物(316 mg, 2.07 mmol)及1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳化二亞胺二鹽酸鹽(4.36 g, 22.7 mmol)，於室溫下攪拌混合物。反應混合物使用濃縮氯化銨水溶液淬滅反應，及使用三份乙酸乙酯萃取。合併之有機萃液經無水硫酸鎂脫水，及濃縮。粗產物經矽膠層析法純化(環己烷 / 乙酸乙酯0 %至10 %)，產生5.40 g (90 %純度，78 %產率)標題化合物。 LC-MS (方法11)：Rt = 1.13 min；MS(ESI pos): m/z = 247 [M-tBu]+ ¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.819 (4.90), 0.835 (8.09), 0.853 (2.63), 1.152 (0.40), 1.174 (0.45), 1.354 (1.52), 1.375 (16.00), 1.459 (0.46), 3.561 (0.84), 3.571 (0.98), 3.577 (1.45), 3.594 (0.81), 3.630 (11.35), 4.220 (0.63), 4.237 (0.78), 4.240 (0.82), 4.257
實例54A 甘胺醯基-L -異白胺甲基酸酯
Figure 02_image139
取N -(第三丁氧基羰基)甘胺醯基-L -異白胺酸甲基酯(實例53A, 1.50 g, 4.96 mmol)溶於DCM (27 mL)。添加三氟乙酸(3.0 mL, 39 mmol)，反應混合物於室溫下攪拌30 min。反應混合物濃縮，產生粗產物，直接用於下一個步驟。
實例55AN -(4-硝基苯-1-磺醯基)甘胺醯基-L -異白胺酸甲基酯
Figure 02_image141
取甘胺醯基-L -異白胺酸甲基酯(實例54A, 1.00 g, 4.96 mmol)溶於二氯甲烷(40 mL, 620 mmol)，添加三乙胺(2.4 mL, 17 mmol)後，溶液冷卻至0°C。添加4-硝基苯-1-磺醯基氯(1.21 g, 5.46 mmol)，反應混合物攪拌1 h。接著使用濃縮氯化銨水溶液淬滅反應，及使用三份乙酸乙酯萃取。 合併之有機萃液經無水硫酸鎂脫水，過濾後，濃縮，產生1.70 g (71 %產率)標題化合物。產物直接用於下一個步驟。
實例56A  (2S , 3S )-3-甲基-2-[4-(4-硝基苯-1-磺醯基)-2-側氧基哌𠯤-1-基]戊酸甲基酯
Figure 02_image143
N -(4-硝基苯-1-磺醯基)甘胺醯基-L -異白胺酸甲基酯(實例55A, 1.92 g, 4.96 mmol)及1,2-二溴乙烷(4.3 mL, 50 mmol)溶於DMF。添加碳酸鉀(6.86 g, 49.6 mmol)，及混合物加熱至60°C 3 h。接著使用濃縮氯化銨水溶液淬滅反應，及使用三份醚萃取。合併之有機萃液經無水硫酸鎂脫水，過濾後，蒸發。粗產物經矽膠管柱層析法純化(環己烷 / 乙酸乙酯6：1)，產生標題化合物 1.40 g (97 %純度，66 %產率)。 LC-MS (方法11)：Rt = 1.30 min；MS(ESI pos): m/z = 414 [M+H]+
實例57A  (2S , 3S )-3-甲基-2-(2-側氧基哌𠯤-1-基)戊酸甲基酯
Figure 02_image145
取(2S , 3S )-3-甲基-2-[4-(4-硝基苯-1-磺醯基)-2-側氧基哌𠯤-1-基]戊酸甲基酯 (實例56A, 1.40 g, 3.39 mmol)及苯硫醇(1.0 mL, 10 mmol)溶於乙腈(20 mL)。添加碳酸鉀(936 mg, 6.77 mmol)，於室溫下攪拌混合物。混合物過濾及蒸發。殘質經矽膠快速層析法純化(梯度二氯甲烷/甲醇100：0至95：5)，產生310 mg (40 %產率)標題化合物，其直接用於下一個步驟。
實例58A 4-[(2S ,3S )-1-甲氧基-3-甲基-1-側氧基戊烷-2-基]-3-側氧基哌𠯤-1-羧酸第三丁基酯
Figure 02_image147
取(2S , 3S )-3-甲基-2-(2-側氧基哌𠯤-1-基)戊酸甲基酯 (實例57A, 310 mg, 1.36 mmol)溶於二氯甲烷(1.7 mL, 26 mmol)。添加二碳酸二-第三丁基酯(370 µL, 1.6 mmol)，混合物於室溫下攪拌1 h。接著使用濃縮氯化銨水溶液淬滅反應後，使用三份DCM(20 mL)萃取。合併之有機萃液經無水硫酸鎂脫水，過濾後，濃縮，產生440 mg (99 %純度，98 %產率)標題化合物。 LC-MS (§方法11)：Rt = 1.27 min；MS(ESI pos): m/z = 273 [M+H-tBu]+ ¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.807 (0.86), 0.826 (2.27), 0.844 (1.20), 0.870 (2.25), 0.887 (2.30), 1.410 (16.00), 3.645 (6.00), 3.963 (0.63), 3.970 (0.62), 4.766 (0.82), 4.792 (0.80), 5.754 (0.87).
實例59A (2S , 3S )-2-[4-(第三丁氧基羰基)-2-側氧基哌𠯤-1-基]-3-甲基戊酸
Figure 02_image149
取4-[(2S , 3S )-1-甲氧基-3-甲基-1-側氧基戊烷-2-基]-3-側氧基哌𠯤-1-羧酸第三丁基酯 (實例58A, 440 mg, 80 %純度，1.07 mmol)溶於THF (1.4 mL)及甲醇(1.4 mL)中。添加氫氧化鋰(53.9 mg, 2.25 mmol)之水溶液(1.4 mL)，及混合物於室溫下攪拌1 h。反應混合物濃縮，及殘質溶於水後，使用DCM洗滌。分離水層，使用1M鹽酸酸化至pH 3-4後，使用乙酸乙酯萃取三次。合併之有機層經無水硫酸鎂脫水，過濾後，減壓濃縮，產生310 mg (95%純度，87%產率)標題化合物之無色油狀物。 LC-MS (方法11)：Rt = 1.11 min；MS(ESI neg): m/z = 313 [M-H]- ¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.809 (0.81), 0.827 (2.06), 0.845 (1.12), 0.908 (2.11), 0.924 (2.09), 1.411 (16.00), 3.438 (0.43), 3.968 (0.78), 4.688 (0.79), 4.713 (0.77).
實例60AN -(第三丁氧基羰基)-L -丙胺醯基-L -異白胺酸甲基酯
Figure 02_image151
取N -(第三丁氧基羰基)-L -丙胺酸(1.50 g, 7.93 mmol)及L -異白胺酸甲基酯 - 鹽酸鹽(1/1) (1.58 g, 8.72 mmol)溶於DMF (7.7 mL)。此溶液於冰浴中冷卻至0-5°C。添加N,N-二異丙基乙基胺(1.4 mL, 7.9 mmol)、1H -苯并三唑-1-醇水合物(121 mg, 793 µmol)及1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳化二亞胺二鹽酸鹽(1.67 g, 8.72 mmol)，於室溫下攪拌混合物。接著使用濃縮氯化銨水溶液淬滅反應，及使用三份乙酸乙酯萃取。 合併之有機萃液經無水硫酸鎂脫水，過濾後，濃縮。粗產物經矽膠層析法純化(環己烷 / 乙酸乙酯0%至15%)，產生2.12 g (100 %純度，84 %產率)標題化合物。 LC LC-MS (方法10)：Rt = 1.70 min；MS(ESI pos): m/z = 317 [M+H]+ ¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.00), 0.008 (0.77), 0.818 (3.17), 0.825 (4.25), 0.836 (7.51), 0.842 (4.72), 0.855 (3.30), 1.144 (4.07), 1.161 (4.10), 1.179 (0.54), 1.200 (0.53), 1.371 (16.00), 1.398 (13.44), 1.775 (0.49), 2.523 (0.85), 3.621 (15.73), 4.021 (0.46), 4.039 (0.60), 4.207 (1.06), 4.223 (1.19), 4.228 (1.22), 4.244 (1.06), 6.908 (0.61), 6.928 (0.58), 7.886 (0.57), 7.907 (0.60).
實例61AL -丙胺醯基-L -異白胺酸甲基酯
Figure 02_image153
取N -(第三丁氧基羰基)-L -丙胺醯基-L -異白胺酸甲基酯(實例60A, 2.10 g, 6.64 mmol)溶於DCM (20 mL)。添加三氟乙酸(20 mL, 260 mmol)，反應混合物於室溫下攪拌30 min。反應混合物濃縮，二肽粗產物直接用於下一個步驟。
實例62AN -(4-硝基苯-1-磺醯基)-L -丙胺醯基-L -異白胺酸甲基酯
Figure 02_image155
取L -丙胺醯基-L -異白胺酸甲基酯(實例61A, 1.44 g, 6.64 mmol)溶於二氯甲烷(54 mL)，添加三乙胺(3.2 mL, 23 mmol)後，溶液冷卻至0°C。添加4-硝基苯-1-磺醯基氯(1.62 g, 7.30 mmol)，攪拌反應混合物。接著使用濃縮氯化銨水溶液淬滅反應，及使用兩份二氯甲烷萃取。合併之有機萃液使用飽和氯化鈉水溶液洗滌，經無水硫酸鎂脫水，過濾及濃縮，產生1.65g (95 %純度，59 %產率)標題化合物。 LC-MS (方法11)：Rt = 1.18 min；MS(ESI neg): m/z = 400 [M-H]- ¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.008 (0.40), 0.676 (6.59), 0.693 (6.80), 0.740 (2.79), 0.758 (6.99), 0.777 (3.46), 1.013 (0.52), 1.025 (0.62), 1.047 (0.69), 1.066 (0.50), 1.117 (6.09), 1.135 (6.12), 1.175 (0.51), 1.192 (0.64), 1.203 (0.60), 1.210 (0.56), 1.222 (0.67), 1.237 (0.48), 1.243 (0.42), 1.551 (0.53), 1.568 (0.61), 1.578 (0.45), 1.584 (0.47), 1.988 (0.64), 3.577 (16.00), 3.933 (1.14), 3.948 (1.32), 3.953 (1.31), 3.968 (1.12), 4.056 (0.61), 4.073 (0.82), 4.091 (0.54), 7.994 (4.08), 7.999 (1.44), 8.012 (1.63), 8.016 (4.58), 8.135 (1.41), 8.155 (1.39), 8.365 (4.39), 8.383 (1.48), 8.388 (3.90), 8.463 (1.04), 8.482 (0.99).
實例63A  (2S , 3S )-3-甲基-2-[(3S )-3-甲基-4-(4-硝基苯-1-磺醯基)-2-側氧基哌𠯤-1-基]戊酸甲基酯
Figure 02_image157
取N -(4-硝基苯-1-磺醯基)-L -丙胺醯基-L -異白胺酸甲基酯(實例62A, 1.65 g, 4.11 mmol)及1,2-二溴乙烷(3.5 mL, 41 mmol)溶於DMF (35 mL)。添加碳酸鉀(5.68 g, 41.1 mmol)，反應混合物加熱至60°C 3 h。接著使用濃縮氯化銨水溶液淬滅反應，及使用三份醚萃取。合併之有機萃液經無水硫酸鎂脫水，過濾後，濃縮。粗產物經矽膠層析法純化(環己烷 / 乙酸乙酯6：1)，產生1.60 g (70 %純度，64 %產率)標題化合物。 LC-MS (方法11)：Rt = 1.30 min；MS(ESI pos): m/z = 428 [M+H]+
實例64A (2S ,3S )-3-甲基-2-[(3S )-3-甲基-2-側氧基哌𠯤-1-基]戊酸甲基酯
Figure 02_image159
取(2S , 3S )-3-甲基-2-[(3S )-3-甲基-4-(4-硝基苯-1-磺醯基)-2-側氧基哌𠯤-1-基]戊酸甲基酯(實例63A, 900 mg, 2.11 mmol)及苯硫醇(650 µL, 6.3 mmol)溶於乙腈(12 mL)。添加碳酸鉀(582 mg, 4.21 mmol)，反應混合物於室溫下攪拌一夜。混合物過濾及濃縮。殘質經矽膠快速層析法純化(梯度二氯甲烷/甲醇100：0至95：5)，產生336mg (100 %純度，66 %產率)標題化合物。 LC-MS (方法13)：Rt = 1.09 min；MS(ESI pos): m/z = 243 [M+H]+
實例65A  (2S )-4-[(2S , 3S )-1-甲氧基-3-甲基-1-側氧基戊烷-2-基]-2-甲基-3-側氧基哌𠯤-1-羧酸第三丁基酯
Figure 02_image161
取 (2S , 3S )-3-甲基-2-[(3S )-3-甲基-2-側氧基哌𠯤-1-基]戊酸甲基酯 (實例64A, 736 mg, 3.04 mmol)溶於二氯甲烷(8 mL)。添加二碳酸二-第三丁基酯(1.0 mL, 4.6 mmol)，反應混合物於室溫下攪拌一個週末。接著使用濃縮氯化銨水溶液淬滅反應，使用兩份DCM萃取。 合併之有機萃液使用氯化鈉溶液洗滌，經無水硫酸鎂脫水，過濾後，濃縮。粗產物經矽膠層析法純化(環己烷 / 乙酸乙酯3：1)，產生1.08 g (100 %純度，104 %產率)標題化合物。 LC-MS (方法10)：Rt = 1.98 min；MS(ESI pos): m/z = 343 [M+H]+ ¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.800 (0.95), 0.818 (2.41), 0.837 (1.25), 0.875 (2.38), 0.892 (2.43), 1.305 (2.02), 1.323 (2.06), 1.414 (16.00), 3.645 (6.08), 4.769 (0.88), 4.795 (0.86).
實例66A  (2S , 3S )-2-[(3S )-4-(第三丁氧基羰基)-3-甲基-2-側氧基哌𠯤-1-基]-3-甲基戊酸
Figure 02_image163
取(2S )-4-[(2S ,3S )-1-甲氧基-3-甲基-1-側氧基戊烷-2-基]-2-甲基-3-側氧基哌𠯤-1-羧酸第三丁基酯(實例65A, 1.08 g, 3.15 mmol)溶於THF (4.5 mL)與甲醇(4.5 mL)之混合物中。添加氫氧化鋰(159 mg, 6.62 mmol)之水溶液(4.5 mL)，反應混合物於室溫下攪拌1 h。反應混合物濃縮，殘質溶於濃縮氯化銨水溶液中。水層使用1M鹽酸酸化至pH 3-4，及使用DCM萃取3次。合併之有機層經無水硫酸鎂脫水，過濾後，濃縮，產生952 mg (100 %純度，92 %產率)標題化合物。 LC-MS (方法9)：Rt = 0.87 min；MS(ESI pos): m/z = 329 [M+H]+ ¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.802 (1.09), 0.820 (2.24), 0.838 (1.18), 0.911 (2.22), 0.927 (2.28), 1.295 (0.50), 1.308 (2.03), 1.326 (1.99), 1.415 (16.00), 3.342 (0.65), 4.691 (0.84), 4.717 (0.82).
實例67A  (2R , 5R )-3,6-二甲氧基-2-(丙烷-2-基)-5-[(三甲基矽烷基)甲基]-2,5-二氫吡𠯤
Figure 02_image165
取(2R )-3,6-二甲氧基-2-(丙烷-2-基)-2,5-二氫吡𠯤 (2.9 mL, 16 mmol)溶於THF (58 mL)，溶液冷卻至-78°C。攪拌滴加正丁基鋰(10 mL, 1.6 M, 16 mmol)。繼續於-78°C下攪拌15 min。添加 (氯甲基)(三甲基)矽烷(5.0 mL, 36 mmol)，所得混合物於環境溫度下攪拌一夜。反應混合物加水稀釋，及使用乙醚萃取。合併之有機層經無水硫酸鈉脫水，過濾後，濃縮。粗產物經矽膠層析法純化(環己烷 / 乙酸乙酯2%)，產生3.0 g (87 %純度，60 %產率)標題化合物。 LC-MS (方法9)：Rt = 1.47 min；MS(ESI pos): m/z = 271 [M+H]+ ¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.036 (0.45), -0.028 (9.14), -0.020 (0.46), -0.008 (1.38), 0.580 (3.69), 0.597 (3.75), 0.737 (0.61), 0.762 (0.63), 0.773 (0.73), 0.798 (0.73), 0.959 (3.60), 0.977 (3.69), 1.107 (0.73), 1.119 (0.75), 1.143 (0.66), 1.148 (0.47), 1.155 (0.63), 1.370 (1.30), 2.512 (16.00), 3.574 (8.95), 3.582 (8.85), 3.885 (0.64), 3.894 (1.26), 3.903 (0.72), 3.999 (0.49), 4.023 (0.47).
實例68A 3-(三甲基矽烷基)-L -丙胺酸甲基酯
Figure 02_image167
取(2R , 5R )-3,6-二甲氧基-2-(丙烷-2-基)-5-[(三甲基矽烷基)甲基]-2,5-二氫吡𠯤 (實例67A, 3.00 g, 11.1 mmol)溶於甲醇(30 mL, 740 mmol)，及冷卻溶液至0°C。添加鹽酸(10 mL, 10%)，及攪拌溶液2 h。溶液蒸發及殘質溶於DCM與碳酸鈉溶液(100 mL, 2.0 M, 200 mmol)中。水層使用2份DCM萃取。DCM萃液經無水硫酸鎂脫水，過濾後，濃縮。粗產物經矽膠層析法純化(2%甲醇：(1% N,N-二乙基乙胺之DCM溶液))，產生2.83g (68 %純度，99 %產率)標題化合物。1 H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ[ppm]: -0.010 (3.10), 0.008 (1.81), 0.736 (0.85), 0.759 (0.89), 0.772 (1.48), 0.795 (1.56), 0.803 (1.89), 0.820 (1.90), 0.841 (1.84), 0.858 (2.43), 0.875 (1.64), 0.900 (4.19), 0.911 (1.07), 0.918 (8.65), 0.936 (4.28), 1.682 (1.42), 2.384 (1.35), 2.402 (4.11), 2.420 (4.02), 2.438 (1.25), 3.088 (0.55), 3.102 (0.54), 3.302 (1.19), 3.306 (1.81), 3.321 (1.27), 3.330 (1.15), 3.345 (1.03), 3.583 (16.00), 3.591 (0.48), 3.605 (4.33), 5.742 (4.37).
實例69AN -{[(9H -芴-9-基)甲氧基]羰基}-3-(三甲基矽烷基)-L -丙胺酸
Figure 02_image169
取3-(三甲基矽烷基)-L -丙胺酸甲基酯 (實例68A, 2.83 g, 68 %純度，11.0 mmol)溶於甲醇(44 mL)，溶液冷卻至0°C。添加氫氧化鈉溶液(11 mL, 1.0 M, 11 mmol)，反應混合物於室溫下攪拌一夜。添加水(40 mL)、碳酸氫鈉(922 mg, 11.0 mmol)及碳酸鈉(1.53 g, 14.4 mmol)。減壓排除甲醇後，添加1,4-二㗁烷(32 mL)至水溶液中。此溶液於冰浴中冷卻至0°C。然後添加氯甲酸(9H -芴-9-基)甲基酯(Fmoc-Cl) (4.26 g, 16.5 mmol)，反應混合物於室溫下攪拌5 h。再添加Fmoc-Cl (1.42 g, 5.5 mmol)，反應混合物再攪拌2 h。添加等份水與第三丁基甲基醚至反應混合物中。分離水相，再使用第三丁基甲基醚洗滌後，使用1 M鹽酸酸化(pH 3-4)。酸化之混合物使用三份MTBE萃取。合併之有機層經無水硫酸鎂脫水，過濾後，濃縮。粗產物經製備性HPLC純化(管柱：Reprosil；C18；10 µm；125 x 40 mm；溶離液：AcCN/H2 O，含0.1% HCOOH；流速：100 mL/min；梯度：0 - 5.50 min 10：90；在3.00 min時注射樣本；5.50 - 17.65 min達到95：5；17.65 - 19.48 min 95：5；19.48 - 19.66 min達到10：90；19.66 - 20.72 min 10：90)，產生1.65 g (99 %純度，39 %產率)標題化合物。 LC-MS (方法10)：Rt = 2.20 min；MS(ESI pos): m/z = 384 [M+H]+ ¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.006 (16.00), 0.987 (3.81), 1.006 (3.64), 3.309 (2.95), 3.950 (0.67), 3.970 (1.71), 3.991 (1.59), 4.010 (0.53), 4.182 (0.67), 4.199 (1.66), 4.217 (1.67), 4.228 (1.08), 4.253 (2.79), 4.268 (3.86), 4.287 (1.60), 4.293 (0.85), 4.313 (0.41), 7.286 (1.24), 7.291 (1.27), 7.293 (1.31), 7.302 (2.68), 7.304 (2.70), 7.309 (2.55), 7.321 (1.75), 7.323 (1.70), 7.328 (1.57), 7.389 (2.90), 7.408 (4.73), 7.426 (2.11), 7.566 (1.81), 7.587 (1.74), 7.697 (2.14), 7.714 (3.62), 7.731 (1.81), 7.872 (4.43), 7.891 (4.02), 12.451 (0.54). 此胺基酸用於Fmoc SPPS。
實例70A (2S)-5-羥基吡咯啶-1,2-二羧酸二-第三丁基酯(異構物之混合物)
Figure 02_image171
取(2S )-5-側氧基吡咯啶-1,2-二羧酸二-第三丁基酯(CAS-RN：91229-91-3, 21.0 g, 73.6 mmol)溶於250 mL THF，及冷卻溶液至-78°C。滴加二異丁基氫化鋁(160 mL, 1.0 M, 160 mmol)，混合物於-78°C下攪拌1 h。接著使用2-丙醇(25 mL) 淬滅反應。添加(2R,3R)-2,3-二羥基丁烷二酸鉀鈉溶液(200 mL)，混合物於室溫下攪拌後，反應混合物使用MTBE及水稀釋。分離水層，再使用兩份MTBE萃取。合併之有機萃液經無水硫酸鎂脫水，過濾，及殘質減壓濃縮，產生19.53 g (79%純度，73%產率)標題化合物之無色油狀物。
實例71A (2S)-5-甲氧基吡咯啶-1,2-二羧酸二-第三丁基酯(異構物之混合物)
Figure 02_image173
取(2S)-5-羥基吡咯啶-1,2-二羧酸二-第三丁基酯(實例70A ,19.5 g, 67.9 mmol)溶於甲醇(160 mL)。添加吡啶鎓對甲苯磺酸鹽(341 mg, 1.36 mmol)至溶液中，反應混合物於室溫下攪拌一夜。反應混合物濃縮，粗產物經矽膠快速層析法純化(梯度環己烷 - 環己烷 乙酸乙酯7：3)，產生14.4 g (90 %純度，64 %產率)標題化合物。1 H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.363 (9.51), 1.375 (8.10), 1.393 (2.67), 1.419 (16.00), 1.756 (0.58), 1.775 (0.93), 1.781 (0.88), 1.807 (0.46), 3.225 (3.77), 3.240 (1.93), 3.261 (2.02), 3.307 (4.01), 4.059 (0.64), 4.081 (0.82), 5.128 (0.56).
實例72A (2S )-5-氰基吡咯啶-1,2-二羧酸二-第三丁基酯(異構物之混合物)
Figure 02_image175
取(2S )-5-甲氧基吡咯啶-1,2-二羧酸二-第三丁基酯(實例71A, 14.4 g, 47.8 mmol)溶於DCM (125 mL)，及冷卻溶液至-40°C。添加三氟甲磺酸三甲基矽烷基酯(1.3 mL) (1 vol%)，然後以40 min時間滴加三甲基矽烷甲腈(7.0 mL, 53 mmol)，混合物繼續於-40°C下再攪拌1.5 h。反應混合物使用甲醇(19 mL) 淬滅反應後，濃縮，單離出14.87 g (86 %產率)標題化合物。 GC-MS (GC-MS 方法1): 195.2 (M+-Boc), 139.1 (-Boc, -t-Bu)
實例73A (2S )-5-甲醯基吡咯啶-1,2-二羧酸二-第三丁基酯(異構物之混合物)
Figure 02_image177
取(2S )-5-氰基吡咯啶-1,2-二羧酸二-第三丁基酯(實例72A, 14.0 g, 47.2 mmol)溶於吡啶 (250 mL)、乙酸(130 mL)及水(130 mL)之混合物中。添加阮來鎳(Raney-Nickel)-水懸浮液(70.0 g, 50 %純度)，混合物於環境壓力及80°C下氫化7 h。通過矽藻土層過濾排除觸媒，使用250 mL水洗滌溶劑。水相使用MTBE (650 mL)萃取三次。合併之有機層使用水洗滌三次，使用鹽水洗滌，經無水硫酸鎂脫水後，過濾。減壓蒸發濾液，殘質經矽膠快速層析法純化(梯度環己烷 – 環己烷/乙酸乙酯7:3)，產生7.40 g (85 %純度，44 %產率)之黏性油狀物。 GC-MS (GC-MS 方法1): (M+ - CO); (M+ - CO, - Boc)
實例74A  (2S)-5-乙烯基吡咯啶-1,2-二羧酸二-第三丁基酯(異構物之混合物)
Figure 02_image179
取甲基(三苯基)鏻溴化物(17.7 g, 49.4 mmol)懸浮於180 mL THF。於室溫下滴加雙(三甲基矽烷基)胺化鉀溶液(1M甲苯溶液，75 mL，15 %溶液，49 mmol)，及攪拌1 h。混合物冷卻至-78°C。取(2S )-5-甲醯基吡咯啶-1,2-二羧酸二-第三丁基酯(實例73A, 7.40 g, 24.7 mmol)溶於THF (60 mL)。添加該溶液，及於室溫下攪拌2 h。反應混合物倒至含(2R,3R)-2,3-二羥基丁烷二酸鉀鈉(140 mL)及水(85 mL)之溶液中，及使用三份MTBE(210 mL)萃取。合併之有機萃液使用氯化鈉溶液洗滌，經無水硫酸鈉脫水，過濾後，濃縮。粗產物經矽膠快速層析法純化(梯度環己烷 - 環己烷  乙酸乙酯(9：1))，單離出4.25 g (100 %純度，58 %產率)標題化合物。 GC-MS (GC-MS 方法1)：Rt = 5.07 min, 5.17 min; 197.3 (M+-Boc)
實例75A 5-乙烯基-L-脯胺酸第三丁基酯(異構物之混合物)
Figure 02_image181
取(2S)-5-乙烯基吡咯啶-1,2-二羧酸二-第三丁基酯(實例74A, 4.25 g, 14.3 mmol)溶於45 mL DCM，及冷卻溶液至0°C。滴加三氟甲磺酸三甲基矽烷基酯(2.6 mL, 14 mmol)，所得混合物於0°C下攪拌5 min。接著使用濃縮碳酸氫鈉水溶液 (21 mL)淬滅反應，及使用兩份DCM萃取。合併之有機層經硫酸鎂乾燥，過濾後，濃縮。粗產物經矽膠快速層析法純化(梯度甲醇- 二氯甲烷(100：2))，產生2.09 g (100 %純度，74 %產率)標題化合物。 GC-MS (GC-MS 方法1)：Rt = 3.37 min, 3.50 min; 197.3 (M+)
實例76A (5R )-5-乙烯基-L- 脯胺酸第三丁基酯(單一立體異構物)
Figure 02_image183
取5-乙烯基-L -脯胺酸第三丁基酯(非對映異構性混合物) (實例75A, 2.55 g, 12.9 mmol)經矽膠快速層析法(梯度環己烷 - 乙酸乙酯- 三甲基胺(70：30：1))分離異構物，產生1.35 g (100%純度，53 %產率)標題化合物。 GC-MS (GC-MS 方法1)：Rt = 3.50 min; 197.3 (M+) ¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.3-1.4 (1H), 1.40 (9H), 2.4 (1H), 3.5 (2H), 4.9 (1H), 5.15 (1H), 5.8 (1H).
實例77A 3-乙烯基哌啶-1,2-二羧酸1-第三丁基酯2-甲基酯(異構物之混合物)
Figure 02_image185
取含乙烯基鎂化溴(39 mL, 0.70 M, 27 mmol)之無水THF (20 mL)溶液冷卻至-35°C後，添加溴化亞銅(I)– 二甲亞碸(1：1) (741 mg, 3.61 mmol)溶液。反應混合物於-35°C下攪拌1 h。添加含5,6-二氫吡啶-1,2(4H )-二羧酸1-第三丁基酯 2-甲基酯(CAS-RN：155905-80-9, 4.35 g, 18.0 mmol)之THF (10 mL)溶液至混合物中後，反應混合物於-35°C下攪拌6 h。混合物使用氯化銨水溶液(85 mL)及氨水(85 mL)混合物淬滅反應，及使用兩份MTBE (285 mL) 萃取。合併之有機層依序使用氯化銨水溶液(570 mL)及鹽水(570 mL)洗滌，經硫酸鎂乾燥，過濾後，濃縮。粗產物經矽膠層析法純化(梯度：環己烷- 乙酸乙酯(2%-20%))，產生1.59 g (100%純度，33 %產率)標題化合物。 LC-MS (方法12)：Rt = 3.33 min；MS(ESI pos): m/z = 270 [M+H]+ ¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.038 (0.51), 1.087 (0.77), 1.382 (16.00), 1.419 (0.83), 1.429 (0.59), 1.448 (0.73), 1.459 (0.80), 1.466 (0.54), 1.479 (1.01), 1.485 (1.09), 1.496 (0.73), 1.502 (0.66), 1.506 (0.59), 1.514 (0.47), 1.532 (0.47), 1.544 (0.42), 1.600 (0.64), 1.627 (0.61), 2.899 (0.88), 3.690 (13.11), 3.817 (0.47), 3.849 (0.45), 5.120 (2.03), 5.148 (0.90), 5.164 (1.49), 5.869 (0.57).
實例78A 1-(第三丁氧基羰基)-3-乙烯基哌啶-2-羧酸(異構物之混合物)
Figure 02_image187
取3-乙烯基哌啶-1,2-二羧酸1-第三丁基酯 2-甲基酯(實例77A,1.59 g, 5.90 mmol)溶於甲醇(5.9 mL)與THF(17.7 mL) 混合物中。添加氫氧化鋰溶液(5.9 mL, 2.0 M, 12 mmol)，混合物於50°C下攪拌5 h後，冷卻至室溫。反應混合物使用MTBE (7.5 Ml洗滌，冷卻至0°C，使用1 M 鹽酸(14.5 mL)酸化後，使用 DCM(15 mL)萃取5次。合併之有機萃液經硫酸鎂乾燥，過濾後，濃縮，產生1.39 g (100 %純度，92%產率)標題化合物。 ¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.381 (16.00), 1.423 (0.70), 1.434 (0.57), 1.455 (0.77), 1.465 (1.32), 1.473 (0.93), 1.488 (1.66), 1.495 (1.29), 1.519 (0.46), 1.530 (0.40), 1.608 (0.80), 1.632 (0.75), 2.911 (0.96), 3.815 (0.50), 3.842 (0.47), 5.113 (1.95), 5.140 (0.73), 5.156 (1.59), 5.753 (0.50), 5.874 (0.51), 12.910 (0.69).
實例79A 2-{[(2S , 5R )-2-(第三丁氧基羰基)-5-乙烯基吡咯啶-1-基]羰基}-3-乙烯基哌啶-羧酸第三丁基酯 (異構物之混合物)
Figure 02_image189
取1-(第三丁氧基羰基)-3-乙烯基哌啶-2-羧酸(消旋物) (實例78A, 1.35 g, 5.30 mmol)及(5R )-5-乙烯基-L- 脯胺酸第三丁基酯 (實例76A, 950 mg, 4.82 mmol)溶於乙腈(60 mL)。添加N,N-二異丙基乙基胺(2.5 mL, 14 mmol)，反應混合物冷卻至0°C。添加含1H -苯并三唑-1-基氧)(三吡咯啶-1-基)鏻六氟磷酸鹽(3.26 g, 6.26 mmol)之乙腈溶液(30 mL)至混合物中，反應混合物於室溫下攪拌20 h。反應混合物濃縮，再溶於MTBE，及使用水洗滌。水相使用MTBE再萃取。合併之有機層使用鹽水洗滌，經硫酸鎂乾燥，過濾後，濃縮。粗產物經矽膠層析法純化(環己烷 / 乙酸乙酯(85：15))，產生2.03 g (88 %產率)標題化合物。 ¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (0.60), 1.373 (10.15), 1.392 (16.00), 1.396 (14.53), 1.458 (0.57), 1.489 (0.46), 1.763 (0.46), 1.780 (0.56), 2.105 (0.42), 2.122 (0.42), 2.524 (0.41), 5.050 (0.44), 5.090 (0.70), 5.116 (0.79), 5.754 (1.04).
實例80A (4aR ,6aR ,9S ,11aS )-11-側氧基-2,3,4,4a,6a,7,8,9,11,11a-十氫-1H -吡啶并[3,2-e]吡咯并[1,2-a]氮雜環庚烯-1,9-二羧酸二-第三丁基酯(單一立體異構物)
Figure 02_image191
取2-{[(2S ,5R )-2-(第三丁氧基羰基)-5-乙烯基吡咯啶-1-基]羰基}-3-乙烯基哌啶-羧酸第三丁基酯 (實例79A, 2.00 g, 4.60 mmol)溶於DCM (100 mL)，及添加[1,3-雙(2,4,6-三甲基苯基)咪唑啶-2-亞基](二氯)(苯基亞甲基)釕-三環己基磷烷(1：1) (781 mg, 920 µmol)。反應混合物於回流下攪拌48 h，然後冷卻至室溫。添加DMSO(2.0 mL)，反應混合物於室溫下攪拌一夜。反應混合物濃縮，粗產物經矽膠層析法純化(環己烷 / 乙酸乙酯(25%-50%))，產生標題805 mg (99 %純度，42 %產率)標題化合物。 LC-MS (方法9)：Rt = 1.12 min；MS(ESI pos): m/z = 407 [M+H]+ ¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.296 (5.30), 1.361 (16.00), 1.378 (2.93), 5.540 (0.72), 5.562 (0.51).
實例81A (4aR ,6aR ,9S ,11aS )-1-{[(9H -芴-9-基)甲氧基]羰基}-11-側氧基-2,3,4,4a,6a,7,8,9,11,11a-十氫-1H-吡啶并[3,2-e ]吡咯并[1,2-a ]氮雜環庚烯-9-羧酸(單一立體異構物)
Figure 02_image193
取(4aR ,6aR ,9S ,11aS )-11-側氧基-2,3,4,4a,6a,7,8,9,11,11a-十氫-1H -吡啶并[3,2-e]吡咯并[1,2-a]氮雜環庚烯-1,9-二羧酸二-第三丁基酯(實例80A,800 mg, 1.97 mmol)溶於8 mL DCM，溶液冷卻至0°C。添加三氟乙酸(8.0 mL, 100 mmol)，反應混合物於室溫下攪拌1 h。反應混合物濃縮，殘質使用碳酸氫鈉溶液(20 mL, pH=8)稀釋。添加含氯甲酸(9H -芴-9-基)甲基酯(CAS-RN：28920-43-6 ,764 mg, 2.95 mmol)之THF(24 mL)溶液，反應混合物於室溫下攪拌16 h。反應混合物使用DCM(100 mL)稀釋，及使用1 M 鹽酸 (40 mL)酸化(pH=1)。使用DCM (50 mL)萃取溶液2次，及合併之有機萃液經硫酸鎂乾燥，過濾後，濃縮。粗產物經矽膠管柱層析法純化(DCM/MeOH 95/5)，產生676 mg (100%純度，73 %產率)標題化合物。 LC-MS (方法10)：Rt = 1.86 min；MS(ESI pos): m/z = 473 [M+H]+ ¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (2.87), 0.008 (2.54), 0.778 (0.66), 0.800 (1.51), 0.808 (1.58), 0.832 (2.85), 0.856 (1.93), 0.865 (2.01), 0.889 (0.79), 1.125 (0.77), 1.157 (1.38), 1.182 (0.90), 1.215 (0.50), 1.235 (1.06), 1.517 (2.61), 1.538 (3.44), 1.563 (6.49), 1.593 (6.17), 1.610 (5.67), 1.636 (4.98), 1.660 (3.92), 1.684 (2.46), 1.719 (2.25), 1.747 (2.01), 1.846 (4.49), 1.858 (7.62), 1.868 (6.96), 1.901 (3.19), 2.010 (0.57), 2.073 (9.83), 2.189 (2.95), 2.200 (3.74), 2.241 (3.30), 2.276 (2.71), 2.307 (1.21), 2.327 (1.10), 2.366 (0.52), 2.398 (0.80), 2.428 (1.41), 2.456 (0.84), 2.670 (0.63), 2.710 (0.50), 2.816 (1.60), 2.833 (1.66), 2.849 (2.51), 2.862 (2.28), 2.877 (2.34), 2.895 (1.47), 3.040 (0.69), 3.075 (1.10), 3.086 (1.04), 3.101 (1.03), 3.121 (0.69), 3.690 (1.24), 3.724 (4.64), 3.744 (6.62), 3.756 (6.47), 3.777 (4.44), 3.823 (8.20), 3.852 (7.84), 4.120 (4.36), 4.137 (4.86), 4.148 (4.24), 4.191 (3.57), 4.202 (7.64), 4.212 (4.19), 4.261 (1.02), 4.276 (2.33), 4.291 (4.52), 4.316 (4.20), 4.328 (5.37), 4.346 (4.61), 4.370 (3.31), 4.383 (5.08), 4.395 (4.54), 4.411 (5.53), 4.422 (5.83), 4.456 (3.22), 4.595 (1.63), 4.761 (4.95), 4.773 (5.04), 4.788 (4.59), 4.800 (4.19), 5.364 (2.72), 5.393 (7.67), 5.422 (7.48), 5.451 (2.73), 5.510 (0.98), 5.540 (4.23), 5.553 (4.14), 5.585 (0.91), 7.282 (3.12), 7.300 (7.84), 7.319 (10.54), 7.337 (13.57), 7.355 (9.71), 7.366 (2.95), 7.377 (5.06), 7.399 (12.17), 7.420 (16.00), 7.438 (6.68), 7.521 (8.10), 7.539 (6.98), 7.613 (12.53), 7.631 (11.16), 7.646 (3.71), 7.665 (3.16), 7.847 (8.31), 7.865 (15.04), 7.884 (10.42), 7.908 (4.87), 12.429 (2.52). 此胺基酸用於Fmoc SPPS。
實例82A (6S )-5-{[(9H -芴-9-基)甲氧基]羰基}-5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-羧酸
Figure 02_image195
取(6S )-5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-羧酸(CAS-RN：152723-57-4, 1.38 g, 9.79 mmol)溶於水(14 mL)，及添加碳酸氫鈉(8.23 g, 97.9 mmol)。然後添加含1-({[(9H -芴-9-基)甲氧基]羰基}氧)吡咯啶-2,5-二酮(CAS-RN：82911-69-1, 3.47 g, 10.3 mmol)之丙酮(21 mL)溶液，混合物於室溫下攪拌一夜。反應混合物加水稀釋，及使用MTBE萃取2次。水層使用1M鹽酸酸化至pH 3-4，及使用DCM萃取3次。合併之有機相經無水硫酸鎂脫水，過濾後，濃縮，產生3.3 g (100 %純度，93 %產率)標題化合物。 LC-MS (方法9)：Rt = 1.04 min；MS(ESI pos): m/z = 364 [M+H]+ ¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.497 (1.67), 0.510 (2.34), 0.527 (5.55), 0.559 (3.82), 0.567 (5.51), 0.590 (9.33), 0.598 (11.21), 0.619 (1.87), 0.636 (0.58), 1.106 (9.23), 1.714 (2.14), 1.723 (2.15), 1.745 (2.40), 1.755 (2.50), 1.764 (1.94), 1.772 (1.85), 1.796 (2.02), 1.804 (1.93), 2.086 (7.36), 2.280 (2.12), 2.301 (2.47), 2.311 (2.21), 2.333 (2.24), 2.390 (1.75), 2.412 (2.07), 2.421 (1.87), 2.443 (1.71), 2.524 (0.88), 2.594 (3.10), 3.076 (2.73), 3.219 (3.24), 3.245 (4.13), 3.283 (3.41), 3.309 (5.19), 3.385 (5.05), 3.403 (4.32), 3.410 (3.56), 3.429 (3.16), 3.747 (1.01), 4.160 (0.68), 4.175 (1.57), 4.187 (3.09), 4.192 (3.69), 4.209 (6.08), 4.218 (4.18), 4.224 (3.09), 4.237 (2.43), 4.247 (1.22), 4.254 (2.15), 4.272 (16.00), 4.284 (3.83), 4.297 (4.75), 4.306 (2.72), 4.427 (2.10), 4.435 (2.31), 4.449 (2.34), 4.457 (2.02), 5.754 (0.45), 7.301 (1.47), 7.318 (5.18), 7.320 (5.43), 7.325 (2.74), 7.336 (7.24), 7.339 (7.37), 7.344 (4.81), 7.348 (3.25), 7.352 (3.50), 7.354 (3.84), 7.357 (3.67), 7.403 (9.03), 7.422 (14.80), 7.440 (6.64), 7.640 (8.10), 7.647 (7.82), 7.658 (7.43), 7.666 (6.87), 7.884 (10.09), 7.902 (9.58). 此胺基酸用於Fmoc SPPS。 此Fmoc 胺基酸亦可從實例124A所製備之(6S)-5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-羧酸製備。
實例83A (1S ,3S ,5S ,6S )-2-{[(9H -芴-9-基)甲氧基]羰基}-6-(三氟甲基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-羧酸及rel-(1R ,3R ,5R ,6R )-2-{[(9H -芴-9-基)甲氧基]羰基}-6-(三氟甲基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-羧酸
Figure 02_image197
Figure 02_image199
取(1S , 3S , 5S , 6S )-6-(三氟甲基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-羧酸(450 mg, 2.31 mmol)溶於水(6 mL)，及添加碳酸氫鈉(1.94 g, 23.1 mmol)。然後添加來自含1-({[(9H -芴-9-基)甲氧基]羰基}氧)吡咯啶-2,5-二酮(CAS-RN：82911-69-1, 817 mg, 2.42 mmol)之丙酮(9 mL)溶液，所得懸浮液於室溫下攪拌一夜。反應混合物加水稀釋，及使用MTBE萃取2次。水層使用1M鹽酸酸化至pH 3-4，及使用DCM萃取3次。合併之有機相經無水硫酸鎂脫水，過濾後，濃縮。粗產物經製備性HPLC純化(管柱：Reprosil；C18；10 µm；125 x 40 mm；溶劑：AcCN/H2 O，包含0.1% HCOOH；流速：100 mL/min；梯度：0 - 5.50 min 10：90；在3.00 min時注射樣本；5.50 - 17.65 min 梯度達到95：5；17.65 - 19.48 min保持95：5；19.48 - 19.66 min達到10：90；19.66 - 20.72 min 10：90)，產生571 mg (96 %純度，57 %產率)標題化合物。 LC-MS (方法9)：Rt = 1.06 min；MS(ESI pos): m/z = 418 [M+H]+ ¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 2.073 (0.99), 2.203 (4.88), 2.345 (2.00), 2.366 (1.94), 3.755 (2.94), 4.078 (1.74), 4.221 (1.50), 4.253 (4.04), 4.270 (5.55), 4.290 (4.95), 4.337 (2.21), 7.293 (3.93), 7.301 (4.07), 7.312 (9.32), 7.319 (8.88), 7.330 (6.19), 7.337 (5.57), 7.407 (9.40), 7.425 (16.00), 7.444 (7.29), 7.695 (5.70), 7.887 (13.98), 7.906 (12.87), 12.866 (0.63). 該物質亦可自商品取得(CAS RN：1986905-54-7) 該消旋性胺基酸係使用rel-(1R , 3R , 5R , 6R )-6-(三氟甲基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-羧酸(Enamine)依類似方式製備。 此等胺基酸係用於SPPS。
實例84AN -(第三丁氧基羰基)-L -異白胺醯基絲胺酸甲基酯(非對映異構物之混合物)
Figure 02_image201
取N -(第三丁氧基羰基)-L- 異白胺酸(7.50 g, 32.4 mmol)及DL -絲胺酸甲基酯 - 鹽酸鹽(1/1) (5.05 g, 32.4 mmol)溶於二氯甲烷(65 mL)。添加(苯并三唑-1-基氧)參(二甲基胺基)鏻六氟磷酸鹽(14.9 g, 33.6 mmol)及N,N-二異丙基乙基胺(11 mL, 65 mmol)，反應混合物於室溫下攪拌一夜。添加二氯甲烷(250 mL)，反應混合物依序使用水、鹽酸水溶液(1M)及碳酸氫鈉水溶液洗滌。合併之有機萃液經硫酸鎂乾燥，過濾後，濃縮。粗產物溶於DCM，及使用水徹底洗滌，再使用鹽酸水溶液(1M)洗滌2次後，再使用碳酸氫鈉水溶液洗滌2次。隨後取合併之有機相經硫酸鎂乾燥，過濾後，濃縮。粗產物直接用於下一個步驟。 LC-MS (方法11): 355.2 (M+ Na+ )
實例85A 2-{(1S ,2S )-1-[(第三丁氧基羰基)胺基]-2-甲基丁基}-4,5-二氫-1,3-㗁唑-4-羧酸甲基酯 (非對映異構物之混合物)
Figure 02_image203
取N -(第三丁氧基羰基)-L -異白胺醯基絲胺酸甲基酯(實例84A, 4.62 g, 13.9 mmol)溶於二氯甲烷(51 mL)，溶液冷卻至-78°C。添加N -乙基-N -(三氟-λ4 -硫烷基)乙胺(2.2 mL, 17 mmol)，反應混合物於-78°C下攪拌1.5 h。使用碳酸鉀(7.68 g, 55.6 mmol)淬滅反應，然後讓其冷卻至室溫。於室溫下攪拌溶液1 h。然後使用DCM (50 mL)稀釋溶液，及使用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌3次。水相再使用DCM萃取。合併之有機相使用鹽水洗滌，經無水硫酸鎂脫水，過濾後，濃縮，產生5.75 g所需產物。 LC-MS (方法11): 315.2 (M+ H+ ), 337.2 (M+ Na+ )
實例86A 2-{(1S ,2S )-1-[(第三丁氧基羰基)胺基]-2-甲基丁基}-1,3-㗁唑-4-羧酸甲基酯
Figure 02_image205
取2-{(1S ,2S )-1-[(第三丁氧基羰基)胺基]-2-甲基丁基}-4,5-二氫-1,3-㗁唑-4-羧酸甲基酯 (實例85A, 4.37 g, 13.9 mmol)溶於二氯甲烷(35 mL, 540 mmol)及溶液於-40°C下冷卻。添加溴(三氯)甲烷(2.7 mL, 27 mmol)後，亦添加2,3,4,6,7,8,9,10-八氫嘧啶并[1,2-a]氮雜環庚烯(4.6 mL, 31 mmol)。反應溶液於0°C下攪拌2.5 h，然後使用DCM稀釋。反應混合物使用10%檸檬酸溶液洗滌5次。合併之水層使用DCM萃取。合併之有機層使用鹽水洗滌，經無水硫酸鎂脫水，過濾，及濃縮。粗產物經矽膠層析法純化(梯度：環己烷 / 乙酸乙酯(4：1))，產生2.2 g (50.7%產率)標題化合物。 LC-MS (方法10)：335.15 (M+ Na+ )
實例87A 2-{(1S ,2S )-1-[(第三丁氧基羰基)胺基]-2-甲基丁基}-1,3-㗁唑-4-羧酸
Figure 02_image207
取2-{(1S ,2S )-1-[(第三丁氧基羰基)胺基]-2-甲基丁基}-1,3-㗁唑-4-羧酸甲基酯 (實例86A, 2.21 g, 7.06 mmol)溶於甲醇(13.5 mL)。添加氫氧化鈉水溶液(4.3 mL, 3M)，反應混合物攪拌40 min後，濃縮排除甲醇。水溶液使用1M鹽酸水溶液(14 mL)酸化，及使用乙酸乙酯萃取。合併之有機層經無水硫酸鎂脫水，過濾後，減壓濃縮，產生12.0 g (95%純度，51%產率)標題化合物。 LC-MS (MCW_OA_S1)：Rt = 1.13 min；MS(ESI neg): m/z = 297 [M+H]-
實例88A (4R)-3-[(3S)-3-甲基戊醯基]-5,5-二苯基-4-(丙烷-2-基)-1,3-㗁唑啶-2-酮
Figure 02_image209
取含(3S)-3-甲基戊酸 (867 mg, 7.46 mmol)之無水THF (50 mL)溶液冷卻至-30°C。滴加2,2-二甲基丙醯氯(920 µl, 7.5 mmol)，反應混合物於-30°C下攪拌1.5 h。依序添加無水氯化鋰(347 mg, 8.17 mmol)及(4R)-5,5-二苯基-4-(丙烷-2-基)-1,3-㗁唑啶-2-酮(2.00 g, 7.11 mmol) ((R)-DIOZ)，讓反應混合物慢慢回升至室溫，及攪拌一夜。反應混合物使用乙酸乙酯及水稀釋。分離水層，及使用乙酸乙酯萃取。合併之乙酸乙酯層使用氯化鈉水溶液洗滌，經硫酸鎂乾燥，過濾後，濃縮，產生2.87 g白色固體。粗產物溶於含少量甲醇之DCM 中，經矽膠管柱層析法(Biotage Isolera，50 g卡管)，使用環己烷/乙酸乙酯(80：20)為溶離液純化。合併含產物之溶出份，濃縮及乾燥，產生2.25 g (98 %純度，82 %產率)目標化合物。 LC-MS (方法10)：Rt = 2.69 min；MS(ESI pos): m/z = 380 [M+H]+ ¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.616 (13.33), 0.633 (13.58), 0.650 (7.84), 0.660 (16.00), 0.668 (15.61), 0.676 (15.27), 0.686 (7.40), 0.719 (0.40), 0.875 (12.87), 0.893 (12.59), 0.940 (0.92), 0.958 (1.50), 0.975 (2.08), 0.993 (2.23), 1.011 (1.38), 1.028 (0.84), 1.045 (1.41), 1.061 (1.93), 1.079 (1.89), 1.095 (1.16), 1.112 (0.62), 1.541 (0.55), 1.557 (1.29), 1.574 (1.91), 1.590 (1.82), 1.607 (1.10), 1.623 (0.40), 2.020 (0.71), 2.036 (1.44), 2.049 (1.78), 2.065 (1.28), 2.082 (0.50), 2.449 (2.60), 2.468 (2.84), 2.755 (2.63), 2.771 (2.50), 2.793 (2.05), 2.808 (1.92), 5.557 (5.98), 5.563 (5.64), 7.271 (2.61), 7.289 (6.37), 7.307 (5.02), 7.352 (5.04), 7.368 (10.74), 7.385 (9.60), 7.403 (3.47), 7.557 (8.45), 7.577 (6.54), 7.639 (8.45), 7.659 (6.92).
實例89A {(2S,3S)-3-甲基-2-[(4R)-2-側氧基-5,5-二苯基-4-(丙烷-2-基)-1,3-㗁唑啶-3-羰基]戊基}胺甲酸苯甲基酯
Figure 02_image211
依據文獻製程(Sebesta及Seebach,Helv. Chim. Acta 2003 ,86 , 4061-4072)。取(4R)-3-[(3S)-3-甲基戊醯基]-5,5-二苯基-4-(丙烷-2-基)-1,3-㗁唑啶-2-酮(實例88A, 2.20 g, 5.80 mmol)溶於DCM (20 mL)，及冷卻溶液至-15°C。滴加氯化鈦(IV)溶液(6.1 mL, 1.0 M DCM溶液, 6.1 mmol)，同時保持溫度在-15o C。然後添加三乙胺(890 µl, 6.4 mmol)，反應混合物於-15℃下攪拌30 min。 在另一個圓底燒瓶中，使含(甲氧基甲基)胺甲酸苯甲基酯(1.24 g, 6.38 mmol, CAS RN：94471-35-9)之DCM溶液(10 mL)冷卻至0o C。滴加氯化鈦(IV)溶液(6.4 mL, 1.0 M DCM溶液, 6.4 mmol)後，取整個溶液滴加至包含 (4R)-3-[(3S)-3-甲基戊醯基]-5,5-二苯基-4-(丙烷-2-基)-1,3-㗁唑啶-2-酮之燒瓶中。反應混合物於0o C下攪拌4 h後，於室溫下攪拌一夜。添加氯化銨水溶液淬滅反應後，再使用 DCM 稀釋。分離之有機層使用1M HCl水溶液、1M NaOH水溶液洗滌後，使用氯化鈉水溶液洗滌。有機層過濾後，濃縮，產生3.39 g黃色油狀物。粗產物經矽膠管柱層析法(Biotage Isolera 100g卡管)，使用環己烷/乙酸乙酯(85：15)溶離液純化。合併含產物之溶出份，濃縮後，乾燥，產生1.50 g (96 %純度，46 %產率，選擇性)標題化合物，其非對映構構性為96.3%(文獻值96%)。 LC-MS (方法10)：Rt = 2.63 min；MS(ESI pos): m/z = 543 [M+H]+ ¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.429 (3.22), 0.446 (3.32), 0.480 (1.44), 0.498 (3.18), 0.516 (1.79), 0.595 (4.27), 0.611 (4.65), 0.643 (0.49), 0.663 (0.46), 0.768 (0.45), 0.786 (0.46), 0.874 (3.86), 0.891 (4.01), 1.098 (0.48), 1.397 (16.00), 1.993 (0.45), 2.010 (0.57), 2.023 (0.45), 3.146 (0.44), 3.169 (0.66), 3.180 (1.02), 3.192 (0.63), 3.206 (0.44), 3.222 (0.53), 3.243 (0.48), 3.816 (0.57), 4.920 (0.59), 4.952 (1.85), 4.978 (2.04), 5.010 (0.65), 5.539 (1.70), 5.544 (1.73), 7.187 (0.53), 7.201 (0.87), 7.282 (3.41), 7.289 (5.28), 7.306 (4.14), 7.322 (1.84), 7.342 (2.69), 7.362 (3.73), 7.385 (3.47), 7.405 (1.52), 7.566 (3.08), 7.584 (2.46), 7.662 (2.88), 7.681 (2.48).
實例90A (2S,3S)-2-({[(苯甲基氧)羰基]胺基}甲基)-3-甲基戊酸
Figure 02_image213
製備含{(2S,3S)-3-甲基-2-[(4R)-2-側氧基-5,5-二苯基-4-(丙烷-2-基)-1,3-㗁唑啶-3-羰基]戊基}胺甲酸苯甲基酯 (實例89A, 1.49 g, 2.75 mmol)之THF(15 mL)溶液。添加含LiOH (105 mg, 4.39 mmol)之水溶液(5 mL)，反應混合物於室溫下攪拌24 h。HPLC分析顯示反應未完成，因此再添加一當量LiOH (65.8 mg, 2.75 mmol)之水溶液(3 mL)。反應混合物於室溫下攪拌一夜。反應混合物使用乙醚稀釋，混合物攪拌5分鐘後，過濾。濾餅使用水及醚洗滌後，分層。水層使用1M HCl水溶液酸化至pH 1，及使用乙醚萃取三次。合併之醚相使用氯化鈉溶液洗滌，經硫酸鎂乾燥，過濾後，濃縮。於高度真空下乾燥後，得到715 mg (100 %純度，93 %產率)標題化合物。 LC-MS (方法10)：Rt = 1.71 min；MS(ESI pos): m/z = 280 [M+H]+ ¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.837 (6.34), 0.856 (14.23), 0.863 (13.72), 0.880 (12.65), 1.098 (0.91), 1.117 (1.35), 1.133 (1.47), 1.151 (1.49), 1.170 (0.95), 1.348 (0.42), 1.367 (1.02), 1.380 (1.33), 1.398 (1.53), 1.414 (1.09), 1.431 (0.72), 1.596 (0.82), 1.611 (1.42), 1.627 (1.61), 1.644 (1.16), 1.660 (0.53), 1.908 (3.41), 2.396 (1.17), 2.413 (2.79), 2.429 (2.67), 2.445 (1.07), 2.501 (16.00), 3.139 (4.27), 3.155 (7.41), 3.171 (4.60), 5.000 (15.52), 7.221 (1.46), 7.234 (2.66), 7.248 (1.41), 7.283 (0.89), 7.290 (0.97), 7.300 (2.98), 7.318 (5.22), 7.332 (11.34), 7.339 (12.29), 7.356 (5.30), 7.375 (1.45), 12.135 (3.58).
實例91A (2S,3S)-2-(胺基甲基)-3-甲基戊酸
Figure 02_image215
稱取10%鈀/碳(100 mg)加至圓底燒瓶中，使用氬氣吹掃燒瓶。添加含 (2S,3S)-2-({[(苯甲基氧)羰基]胺基}甲基)-3-甲基戊酸 (實例90A, 710 mg, 2.54 mmol)之甲醇溶液(40 mL)，反應混合物於室溫及正壓H2 氣體下攪拌。HPLC分析顯示，在室溫下2小時後，反應已完成。反應混合物通過矽膠填料過濾，及使用甲醇洗滌濾餅數次。合併之濾液減壓濃縮，產生345 mg (93%)標題化合物。該化合物直接用於下一個步驟。
實例92A (2S ,3S )-2-[({[(9H -芴-9-基)甲氧基]羰基}胺基)甲基]-3-甲基戊酸
Figure 02_image217
取(2S ,3S )-2-(胺基甲基)-3-甲基戊酸(實例91A, 344 mg, 2.37 mmol)溶於碳酸鈉水溶液(32 mL, 0.15 M, 4.7 mmol)中。取1-({[(9H -芴-9-基)甲氧基]羰基}氧)吡咯啶-2,5-二酮(959 mg, 2.84 mmol)溶於丙酮(30 mL)，及添加此溶液至前一份溶液中，反應混合物於室溫下攪拌2 h。反應混合物濃縮排除丙酮。水溶液加水稀釋，及使用乙酸乙酯萃取。水層使用1M鹽酸水溶液酸化至pH 3-4，及使用乙酸乙酯萃取。合併之有機層使用鹽水洗滌，經無水硫酸鎂脫水，過濾後，濃縮。粗產物經製備性HPLC純化(管柱：Reprosil；C18；10 µm；125 x 30 mm；溶劑：AcCN/H2 O，包含0.1% HCOOH；流速：75 mL/min；梯度：0 - 5.50 min (10：90)；在3.00 min時注射樣本；5.50 - 17.65 min 梯度達到95:5；17.65 - 19.48 min (95:5)；19.48 - 19.66 min 梯度達到10：90；19.66 - 20.72 min (10：90))，產生795 mg (96 %純度，88 %產率)標題化合物。 LC-MS (方法9)：Rt = 1.06 min；MS(ESI pos): m/z = 368 [M+H]+ ¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.04), 0.008 (0.54), 0.752 (0.73), 0.841 (7.69), 0.860 (16.00), 0.870 (15.28), 0.878 (10.54), 0.887 (13.22), 1.085 (0.41), 1.103 (0.99), 1.123 (1.45), 1.139 (1.58), 1.157 (1.60), 1.176 (1.00), 1.371 (1.16), 1.384 (1.50), 1.403 (1.71), 1.418 (1.23), 1.435 (0.83), 1.604 (0.88), 1.619 (1.50), 1.636 (1.70), 1.651 (1.23), 2.408 (1.27), 2.425 (2.91), 2.441 (3.13), 2.458 (1.88), 2.524 (0.87), 2.749 (0.82), 3.143 (4.18), 3.158 (6.08), 3.174 (3.40), 4.176 (1.25), 4.194 (3.04), 4.211 (4.04), 4.241 (8.74), 4.255 (4.27), 4.263 (3.35), 7.303 (5.42), 7.322 (12.94), 7.340 (10.81), 7.353 (1.98), 7.394 (7.49), 7.413 (11.83), 7.431 (5.34), 7.673 (5.88), 7.683 (5.84), 7.691 (5.19), 7.701 (4.30), 7.876 (12.54), 7.895 (11.30), 12.176 (1.21). 此胺基酸用於SPPS中。
實例93A 2-[(1S ,2S )-1-({[(9H -芴-9-基)甲氧基]羰基}胺基)-2-甲基丁基]-1,3-㗁唑-4-羧酸
Figure 02_image219
取2-{(1S ,2S )-1-[(第三丁氧基羰基)胺基]-2-甲基丁基}-1,3-㗁唑-4-羧酸(實例87A, 1.85 g, 6.21 mmol)溶於三氟乙酸(7.6 mL, 99 mmol)，及攪拌溶液15 min。然後使用甲苯稀釋溶液，及蒸發。再次重覆此步驟。粗產物溶於1,4-二㗁烷(20 mL, 230 mmol)及水(20 mL)中。添加碳酸鉀(1.60 g, 11.6 mmol)及1-{[(9H- 芴-9-基甲氧基)羰基]氧}吡咯啶-2,5-二酮(2.35 g, 6.96 mmol)，反應混合物於室溫下攪拌一夜。反應混合物加水(65 mL)稀釋，及使用10%檸檬酸水溶液酸化至pH 2-3。反應混合物使用乙酸乙酯萃取(三次)，合併之有機層使用鹽水洗滌，經硫酸鎂乾燥，過濾後，減壓濃縮。殘質經矽膠層析法純化(二氯甲烷-甲醇(3-7% + 1% 乙酸)，及合併含產物之溶出份，使用甲苯稀釋後，濃縮。再次添加甲苯後，溶液濃縮，產生2.09 g (100%純度，80 %產率)標題化合物。 LC-MS (MCW_FT_MS_M1)：Rt = 2.01 min；MS(ESI pos): m/z = 421 [M+H]+ 此胺基酸用於SPPS中。
實例94A 二(丙-2-烯-1-基)胺基](1-甲基-1H -吲唑-5-基)乙酸(消旋物)
Figure 02_image221
取(1-甲基-1H -吲唑-5-基)二羥硼酸(CAS-RN：590418-08-9, 500 mg, 2.84 mmol)、乙醛酸(CAS-RN：298-12-4, 310 µl，50 %純度，2.8 mmol)及N -(丙-2-烯-1-基)丙-2-烯-1-胺(CAS-RN：124-02-7, 350 µl, 2.8 mmol)溶於乙腈(7.5 mL)，反應混合物於60°C下 攪拌40 h。冷卻後，過濾所得固體，使用乙酸乙酯洗滌及乾燥，產生740 mg (100 %純度，91 %產率)標題化合物。 LC-MS (方法9)：Rt = 0.44 min；MS(ESI neg): m/z = 284 [M-H]- ¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.008 (1.87), 2.073 (0.51), 3.110 (0.68), 3.125 (0.77), 3.147 (2.14), 3.161 (2.16), 3.176 (2.32), 3.193 (2.28), 3.213 (0.90), 3.230 (0.96), 4.030 (16.00), 4.531 (3.61), 5.110 (2.47), 5.134 (4.58), 5.174 (2.56), 5.752 (0.60), 5.768 (1.07), 5.778 (0.73), 5.783 (0.73), 5.794 (1.49), 5.810 (1.35), 5.820 (0.63), 5.826 (0.67), 5.837 (0.87), 5.852 (0.49), 6.514 (1.52), 7.432 (1.39), 7.435 (1.47), 7.454 (1.77), 7.457 (1.87), 7.602 (2.26), 7.624 (1.75), 7.699 (3.10), 8.041 (4.18).
實例95A ({[(9H -芴-9-基)甲氧基]羰基}胺基)(1-甲基-1H -吲唑-5-基)乙酸(消旋物)
Figure 02_image223
取1,3-二甲基-1,3-二氮雜環己烷-2,4,6-三酮(CAS-RN：769-42-6,1.97 g, 12.6 mmol)及肆(三苯基膦)鈀(0) (48.6 mg, 42.1 µmol)置入氬氣下之圓底燒瓶中。然後添加含[二(丙-2-烯-1-基)胺基](1-甲基-1H -吲唑-5-基)乙酸(實例94A, 600 mg, 2.10 mmol)之無水DCM溶液，反應混合物於35°C下攪拌2 h。懸浮液使用水丙酮及水稀釋後，反應混合物濃縮排除 DCM。添加碳酸氫鈉(2.65 g, 31.5 mmol)(小心氣體形成)。添加1-({[(9H-芴-9-基)甲氧基]羰基}氧)吡咯啶-2,5-二酮(780 mg, 2.31 mmol)至懸浮液中，反應混合物於室溫下攪拌一夜。添加水及碳酸鈉水溶液(10%)，及溶液使用MTBE萃取2次。水相使用檸檬酸水溶液酸化後，使用DCM萃取3次。合併之有機層使用鹽水洗滌，經硫酸鎂乾燥，過濾後，濃縮。殘質經製備性HPLC純化(管柱：Reprosil；C18；10 µm；125 x 40 mm；溶劑：AcCN/H2 O(包含 0.1% HCOOH)；流速：100 mL/min；梯度：0 - 5.50 min (10：90)；在3.00 min時注射樣本；5.50 - 17.65 min 梯度達到95：5；17.65 - 19.48 min (95：5)；19.48 - 19.66 min 梯度達到10：90；19.66 - 20.72 min (10：90))，產生422 mg (100 %純度，47 %產率)標題化合物。 LC-MS (方法9)：Rt = 0.94 min；MS(ESI pos): m/z = 428 [M+H]+ ¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 2.073 (0.59), 4.041 (16.00), 4.198 (0.63), 4.215 (1.87), 4.231 (3.51), 4.253 (1.84), 4.269 (1.50), 4.280 (1.92), 4.298 (1.70), 4.319 (0.59), 5.256 (1.81), 5.276 (1.80), 7.275 (0.90), 7.293 (2.03), 7.320 (2.08), 7.339 (1.26), 7.388 (1.98), 7.406 (3.38), 7.424 (1.73), 7.445 (1.60), 7.467 (1.96), 7.621 (2.30), 7.643 (1.76), 7.744 (3.56), 7.763 (3.31), 7.792 (3.19), 7.875 (4.81), 7.893 (4.48), 8.063 (4.53), 8.213 (1.70), 8.232 (1.65), 12.835 (1.03).
實例96A ({[(9H -芴-9-基)甲氧基]羰基}胺基)(1-甲基-1H-吲唑-5-基)乙酸(對映異構物1)
Figure 02_image225
取非對映異構性混合物(實例95A, 600 mg)溶於甲醇/乙腈(60 mL)，及採用THAR超臨界流體層析法Prep 200儀器分離，其係使用Chiralpak AD-H (SFC) 5µm，250 x 30 mm管柱；溶離液：CO2/異丙醇(80：20)；壓力：135巴；溶離液溫度：38°C；流速：100 g/min；檢測：UV 210 nm；注射體積 0.4 mL/注射；在一般操作條件下，1g/min CO2約等於1 mL/min。 順序設定：循環時間= 11.2 min 於5.8 min時收集溶出份1 (對映異構物1)；在7.7 min之間收集溶出份2 (對映異構物2)。取溶出份濃縮。 溶出份使用分析性SFC-MS分析(Agilent，管柱：Daicel AD-3 3 µm 100 x 4.6 mm，溶離液：CO2/甲醇(80：20)；BPR壓力：130巴；BPR溫度：60°C；管柱溫度：40°C；流速：3 mL/min；UV 210 nm。 未指定兩種對映異構物之立體化學。 得到185 mg對映異構物1 (100%純度，99.5% ee)(未測定立體化學) LC-MS (方法10)：Rt = 1.80 min；MS(ESI pos): m/z = 428 [M+H]+ ¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 4.040 (16.00), 4.197 (0.54), 4.214 (1.44), 4.230 (2.80), 4.251 (1.59), 4.268 (1.38), 4.278 (1.68), 4.295 (1.46), 4.316 (0.48), 5.241 (1.20), 5.261 (1.19), 7.275 (0.78), 7.294 (1.73), 7.321 (1.78), 7.339 (1.11), 7.386 (1.77), 7.394 (1.54), 7.405 (2.97), 7.412 (2.26), 7.423 (1.63), 7.444 (1.36), 7.466 (1.53), 7.617 (1.85), 7.638 (1.42), 7.742 (3.01), 7.761 (2.84), 7.787 (2.53), 7.874 (4.50), 7.893 (4.19), 8.058 (4.56), 8.183 (0.93), 8.201 (0.92). 此胺基酸用於SPPS中。
實例97A ({[(9H -芴-9-基)甲氧基]羰基}胺基)(1-甲基-1H-吲唑-5-基)乙酸(對映異構物2)
Figure 02_image227
採用實例96A說明之對掌性分離法，得到145 mg (100 %純度，94.3%)對映異構物2(未測定立體化學)。 LC-MS (方法10)：Rt = 1.80 min；MS(ESI pos): m/z = 428 [M+H]+ ¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (0.78), 0.008 (0.70), 4.040 (16.00), 4.198 (0.41), 4.214 (1.16), 4.230 (2.33), 4.252 (1.27), 4.268 (1.03), 4.278 (1.36), 4.295 (1.14), 4.300 (0.99), 5.243 (0.98), 5.262 (0.98), 7.276 (0.59), 7.294 (1.34), 7.313 (1.11), 7.321 (1.38), 7.340 (0.86), 7.387 (1.36), 7.394 (1.12), 7.406 (2.32), 7.413 (1.70), 7.424 (1.22), 7.431 (0.89), 7.444 (1.06), 7.466 (1.21), 7.618 (1.52), 7.640 (1.16), 7.743 (2.38), 7.762 (2.23), 7.787 (2.02), 7.875 (3.68), 7.894 (3.45), 8.059 (3.94), 8.188 (0.73), 8.207 (0.72). 此胺基酸用於SPPS中。
實例98AN -[(苯甲基氧)羰基]-3-溴-L-苯基丙胺酸苯甲基酯
Figure 02_image229
取N -[(苯甲基氧)羰基]-3-溴-L -苯基丙胺酸(15.3 g, 40.5 mmol)溶於甲醇(113 mL)。添加碳酸銫(6.59 g, 20.2 mmol)，及攪拌混合物直到不再有氣體釋出為止 。溶液蒸發至乾。殘質溶於DMF (140 mL, 1.8 mol)，及滴加(溴甲基)苯(5.3 mL, 44 mmol)。短時間後即有固體沉澱。懸浮液使用醚及水稀釋。分離有機相，使用乙醚萃取水相2次。合併之有機層使用水洗滌，使用鹽水洗滌後，經硫酸鎂乾燥。結晶之殘質溶於醚中，添加戊烷後，形成沉澱。過濾固體，及乾燥。蒸發醚/戊烷溶液，溶於醚中；添加戊烷後，形成沉澱。固體過濾，及乾燥，產生16.0 g (100 %純度，84 %產率)標題化合物。 LC-MS (方法10)：Rt = 2.42 min；MS(ESI pos): m/z = 468 [M+H]+ ¹H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 2.874 (2.41), 2.895 (2.86), 2.902 (3.10), 2.923 (2.76), 3.071 (2.84), 3.082 (2.96), 3.099 (2.26), 3.109 (2.09), 3.636 (0.82), 4.336 (1.73), 4.347 (2.20), 4.353 (2.43), 4.357 (2.48), 4.363 (2.48), 4.373 (1.83), 4.383 (1.37), 4.921 (0.55), 4.963 (1.81), 4.989 (12.84), 4.994 (11.01), 5.020 (1.18), 5.043 (0.96), 5.093 (1.11), 5.119 (12.74), 5.139 (0.55), 5.147 (0.97), 7.174 (0.85), 7.211 (3.13), 7.226 (9.23), 7.241 (11.35), 7.248 (16.00), 7.263 (11.82), 7.298 (10.22), 7.313 (14.37), 7.316 (14.35), 7.321 (12.62), 7.332 (10.08), 7.336 (11.10), 7.344 (8.08), 7.351 (11.64), 7.366 (7.19), 7.379 (2.35), 7.414 (5.80), 7.429 (4.73), 7.499 (7.87), 7.880 (4.47), 7.896 (4.30).
實例99A 3-[(2S )-3-(苯甲基氧)-2-{[(苯甲基氧)羰基]胺基}-3-側氧基丙基]苯甲酸
Figure 02_image231
該反應係設定在氬氣下。在2L高壓釜(攪拌速度750 rpm)中添加乙酸鈀(II)(2.16 g, 9.61 mmol)、1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵(10.63 g, 19.22 mmol)及乙酸鉀(47.1 g, 480 mmol)。使用氬氣吹掃高壓釜，添加無水DMF (450 mL)溶解試劑。添加含N -[(苯甲基氧)羰基]-3-溴-L -苯基丙胺酸苯甲基酯 (實例98A, 45.0 g, 96.1 mmol)之無水DMF(930 mL)溶液至高壓釜中，然後添加水(18 mL)。密封高壓釜，使用氮氣重覆吹掃，及短暫攪拌。使用一氧化碳(3 bar)加壓高壓釜後，加熱至80°C及3bar歷時960 min。反應完成後，吹掃高壓釜，開封後，內含物溶於水(13 L)。反應混合物使用乙酸乙酯(7 L)萃取 3次，合併之有機層使用鹽水洗滌後，濃縮。粗產物經製備性正相層析法(10 kg矽膠)，使用DCM/MeOH (95/5)純化後，進一步經製備性層析法純化(DCM/MeOH梯度，Biotage Isolera)，產生10.7 g (92%純度)標題化合物。 LC-MS (方法10)：Rt = 1.92 min；MS(ESI neg): m/z = 432.14 [M-H]-
實例100AN -[(苯甲基氧)羰基]-3-(第三丁氧基羰基)-L -苯基丙胺酸苯甲基酯
Figure 02_image233
在3-[(2S )-3-(苯甲基氧)-2-{[(苯甲基氧)羰基]胺基}-3-側氧基丙基]苯甲酸 (實例99A,18.0 g, 41.5 mmol)中添加二氯甲烷(280 mL, 4.4 mol)。添加環己烷 (140 mL, 1.3 mol)、2,2,2-三氯乙烷亞胺酸第三丁基酯(36.3 g, 166 mmol)及(乙醚)(三氟)硼(1.6 mL, 12 mmol)，反應混合物於室溫下攪拌。1 h後，再添加(乙醚)(三氟)硼(1.6 mL, 12 mmol)，反應混合物於室溫下攪拌一夜。添加(乙醚)(三氟)硼(1 mL, 7.5 mmol)，反應混合物於室溫下攪拌2 h。再添加2,2,2-三氯乙烷亞胺酸第三丁基酯(9.0 g, 40.5 mmol)及再添加(乙醚)(三氟)硼(1 mL, 7.5 mmol)，反應混合物於室溫下攪拌一夜。懸浮液過濾，使用DCM：環己烷 (2：1)洗滌沉澱。使用濃縮碳酸氫鈉水溶液稀釋溶液。合併之水層使用DCM萃取 2次。合併之有機層接著經硫酸鎂乾燥，過濾後，蒸發。所得黑色油狀物與環己烷及乙酸乙酯(2%)攪拌，濾出沉澱物，及蒸發濾液。所得黑色油狀物經矽膠管柱層析法純化(環己烷 – 乙酸乙酯(9 ：1))，產生12.1 g (100 %純度，60 %產率)標題化合物。 LC-MS (方法9)：Rt = 1.34 min；MS(ESI pos): m/z = [M+H]+ 490
實例101A 3-(第三丁氧基羰基)-L -苯基丙胺酸
Figure 02_image235
取N -[(苯甲基氧)羰基]-3-(第三丁氧基羰基)-L -苯基丙胺酸苯甲基酯 (實例100A, 13.0 g, 26.6 mmol)溶於甲醇(250 mL)。添加10%鈀/炭(1.54 g)，混合物於室溫及環境溫度下氫化4小時。形成沉澱。懸浮液溶於甲醇，於回流下攪拌。溫熱溶液通過矽藻土層過濾，及使用甲醇(約1L)洗滌濾餅。合併之濾液濃縮及乾燥，產生6.10 g (94%純度，81%產率)標題化合物。 LC-MS (方法9)：Rt = 0.59 min；MS(ESI neg): m/z = 264 [M-H]- ¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.525 (5.74), 1.546 (16.00), 2.326 (0.50), 2.366 (0.48), 2.670 (0.50), 2.709 (0.48), 3.169 (0.57), 7.400 (0.89), 7.419 (0.66), 7.501 (0.76), 7.739 (0.84), 7.759 (0.85), 7.796 (1.02).
實例102A 3-(第三丁氧基羰基)-N -{[(9H -芴-9-基)甲氧基]羰基}-L -苯基丙胺酸
Figure 02_image237
取3-(第三丁氧基羰基)-L -苯基丙胺酸(實例101A, 6.10 g, 23.0 mmol)溶於水(100 mL)及丙酮(100 mL)。添加碳酸氫鈉(19.3 g, 230 mmol)。添加1-({[(9H -芴-9-基)甲氧基]羰基}氧)吡咯啶-2,5-二酮(8.14 g, 24.1 mmol)溶於丙酮(100 mL)之溶液，反應混合物於室溫下攪拌一夜。混合物加水稀釋，及使用一份MTBE萃取。水層使用1M鹽酸酸化，及使用DCM萃取。合併之有機層使用鹽水洗滌，經無水硫酸鎂脫水，過濾後，濃縮，產生8.90 g (100%純度，79%產率)標題化合物。產物亦含在有機層中。有機層濃縮。添加DCM及1M鹽酸至殘質中，攪拌混合物5 min。殘質過濾及使用水與DCM洗滌。分層，水層使用DCM萃取。合併之有機層隨後經無水硫酸鎂脫水，過濾後，濃縮。粗產物經矽膠快速層析法純化(梯度DCM：甲醇(0-10%))。殘質溶於乙腈，及經製備性HPLC純化(管柱：Reprosil；C18；10 µm；125 x 40 mm；溶劑：AcCN/H2 O，包含0.1% HCOOH；流速：100 mL/min；梯度：0 - 5.50 min (10：90)；在3.00 min時注射樣本；5.50 - 17.65 min 梯度達到95：5；17.65 - 19.48 min (95：5)；19.48 - 19.66 min 梯度達到10：90；19.66 - 20.72 min (10：90))。共得到1.58 g (100 %純度，14 %產率)標題化合物。 LC-MS (方法10)：Rt = 2.27 min；MS(ESI neg): m/z = 486 [M-H]- ¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.106 (1.34), 1.144 (4.63), 1.519 (16.00), 1.544 (0.64), 2.086 (1.34), 2.119 (1.97), 2.483 (1.16), 2.595 (0.68), 3.077 (0.43), 3.319 (1.89), 4.158 (0.42), 4.169 (0.81), 4.181 (2.03), 4.195 (0.76), 4.203 (0.48), 4.541 (0.43), 7.259 (0.80), 7.277 (0.76), 7.293 (0.68), 7.312 (0.44), 7.378 (0.62), 7.384 (0.86), 7.397 (1.11), 7.403 (1.62), 7.415 (0.62), 7.422 (0.90), 7.521 (0.63), 7.540 (0.45), 7.583 (0.68), 7.605 (0.86), 7.626 (0.62), 7.747 (0.59), 7.766 (0.57), 7.784 (0.68), 7.806 (0.63), 7.847 (1.02), 7.864 (1.58), 7.883 (1.42). 此胺基酸用於SPPS中。
實例103A  (2S ,5R )-2-(2-乙基丁基)-3,6-二甲氧基-5-(丙烷-2-基)-2,5-二氫吡𠯤
Figure 02_image239
取(2R )-3,6-二甲氧基-2-(丙烷-2-基)-2,5-二氫吡𠯤 (CAS-RN：109838-859, 2.9 mL, 16 mmol)溶於無水THF (60 mL, 740 mmol)，及冷卻溶液至-78°C。以15分鐘時間慢慢滴加正丁基鋰(10 mL, 1.6 M, 16 mmol)，同時在-78°C下攪拌。添加3-(溴甲基)戊烷 (5.91 g, 35.8 mmol)，反應混合物於-78°C下攪拌2 h後，讓其回升至室溫一夜。溶液冷卻至0o C，及慢慢加水淬滅反應。添加乙醚及攪拌幾分鐘後，分離有機層。使用乙醚萃取水相2次。合併之有機層使用鹽水洗滌，經硫酸鎂乾燥，過濾，及蒸發。粗產物經矽膠層析法純化(環己烷 / 乙酸乙酯2%)，產生2.60 g (95 %純度，57 %產率)標題化合物。 LC-MS (方法10)：Rt = 2.90 min；MS(ESI pos): m/z = 269 [M+H]+ ¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (0.51), 0.008 (0.45), 0.608 (6.77), 0.624 (6.91), 0.771 (3.04), 0.790 (7.57), 0.796 (3.51), 0.808 (4.20), 0.815 (7.45), 0.833 (3.54), 0.999 (6.56), 1.016 (6.71), 1.179 (0.65), 1.197 (0.97), 1.215 (0.95), 1.223 (0.51), 1.232 (0.73), 1.240 (0.81), 1.257 (1.26), 1.275 (1.64), 1.294 (1.28), 1.310 (0.57), 1.343 (0.55), 1.356 (1.67), 1.364 (0.66), 1.369 (0.83), 1.376 (1.52), 1.388 (1.40), 1.398 (0.66), 1.403 (0.63), 1.409 (1.04), 1.422 (0.43), 1.459 (0.56), 1.474 (0.63), 1.489 (0.45), 1.637 (0.66), 1.647 (0.68), 1.656 (0.56), 1.667 (0.69), 1.670 (0.69), 1.681 (0.54), 1.690 (0.48), 1.700 (0.44), 2.191 (0.54), 2.199 (0.55), 2.208 (0.71), 2.216 (0.71), 2.225 (0.52), 2.233 (0.51), 3.597 (16.00), 3.616 (15.85), 3.916 (1.08), 3.925 (2.24), 3.933 (1.46), 3.959 (0.67), 3.969 (1.06), 3.980 (0.99), 3.990 (1.00), 4.000 (0.49).
實例104A 4-乙基-L -正白胺酸甲基酯
Figure 02_image241
取含(2S ,5R )-2-(2-乙基丁基)-3,6-二甲氧基-5-(丙烷-2-基)-2,5-二氫吡𠯤 (實例103A, 2.60 g, 9.69 mmol)之甲醇(30 mL)溶液冷卻至0°C，及添加10%鹽酸水溶液(10 mL)後，攪拌反應混合物2 h。溶液蒸發，及使用DCM與碳酸鈉溶液(100 mL, 2.0 M)稀釋殘質。使用DCM萃取分離之水層2次。合併之有機層經硫酸鎂乾燥，過濾後，濃縮，產生3.49 g (48%純度，100%產率)標題化合物。 GC-MS (GC-MS 方法1)：Rt = 3.18 min, m/z = 173 [M+]
實例105A 4-乙基-N -{[(9H -芴-9-基)甲氧基]羰基}-L -正白胺酸
Figure 02_image243
在4-乙基-L -正白胺酸甲基酯 (實例104A, 3.97 g, 48%純度，11.0 mmol)中添加甲醇(100 mL)，所得溶液冷卻至0°C。添加氫氧化鈉溶液(24 mL, 1.0 M)，反應混合物於0°C下攪拌1 h，然後回溫至室溫，再攪拌4 h。依序添加水(80 mL)、碳酸氫鈉(2.03 g, 24.2 mmol)及碳酸鈉(4.00 g, 37.7 mmol)至溶液中。經由旋轉蒸發法排除反應混合物中之甲醇，水溶液使用1,4-二㗁烷(60 mL)稀釋。懸浮液冷卻至0°C，添加氯甲酸(9H -芴-9-基)甲基酯(CAS-RN：28920-43-6, 8.54 g, 33.0 mmol)。反應混合物於室溫下攪拌一夜。添加水及MTBE，短暫攪拌後，分離有機層。使用MTBE萃取水層後，合併之有機層使用5%碳酸鈉溶液洗滌。合併之水層使用硫酸氫鉀酸化至pH 1，使用DCM萃取水性懸浮液3次。合併之有機層使用鹽水洗滌，經無水硫酸鎂脫水，過濾後，濃縮。粗產物經製備性HPLC純化(管柱：Reprosil；C18；10 µm；125 x 40 mm；溶劑：AcCN/H2 O，包含0.1% HCOOH；流速：100 mL/min；梯度：0 - 5.50 min (10：90)；在3.00 min時注射樣本；5.50 - 17.65 min 梯度達到95：5；17.65 - 19.48 min (95：5)；19.48 - 19.66 min 梯度達到10：90；19.66 - 20.72 min (10：90))，產生1.57 g (100 %純度，37 %產率)標題化合物。 LC-MS (方法11)：Rt = 1.49 min；MS(ESI pos): m/z = 404 [M+Na]+ ¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (3.19), 0.008 (3.01), 0.774 (6.73), 0.792 (16.00), 0.809 (13.36), 0.826 (14.04), 0.844 (7.32), 1.181 (0.92), 1.197 (1.90), 1.216 (3.12), 1.234 (3.84), 1.253 (2.82), 1.273 (1.79), 1.293 (2.23), 1.308 (3.41), 1.331 (4.60), 1.339 (4.12), 1.505 (0.45), 1.557 (3.55), 1.575 (5.01), 1.590 (3.09), 3.950 (1.22), 3.970 (2.67), 3.989 (2.69), 4.009 (1.11), 4.204 (1.35), 4.220 (3.90), 4.238 (7.46), 4.263 (5.22), 4.279 (3.57), 4.286 (5.10), 4.304 (3.43), 4.310 (2.32), 4.328 (1.06), 7.299 (2.60), 7.306 (2.93), 7.317 (5.73), 7.322 (5.59), 7.336 (3.69), 7.341 (3.48), 7.400 (6.17), 7.419 (10.33), 7.437 (4.62), 7.626 (4.21), 7.647 (3.80), 7.711 (8.98), 7.729 (8.16), 7.884 (9.94), 7.903 (9.15), 12.540 (0.98). 此胺基酸用於SPPS中。
實例106AN -{[(9H -芴-9-基)甲氧基]羰基}-2,6-二氟-L -苯基丙胺酸
Figure 02_image245
在2,6-二氟-L-苯基丙胺酸甲基酯(CAS-RN：1192057-28-5, 1.03 g, 4.79 mmol)中添加甲醇(18.5 mL)，及冷卻溶液至0°C。添加氫氧化鈉溶液(4.8 mL, 1.0 M)，反應混合物於室溫下攪拌1 h。添加水(17 mL)、碳酸氫鈉(402 mg, 4.79 mmol)及碳酸鈉(667 mg, 6.29 mmol)至溶液中。經由旋轉蒸發法排除甲醇，及使用1,4-二㗁烷(14 mL)稀釋水層。懸浮液冷卻至0°C，添加氯甲酸(9H -芴-9-基)甲基酯(CAS-RN：28920-43-6, 1.86 g, 7.18 mmol)。混合物於室溫下攪拌2 h。反應混合物加水稀釋，及使用MTBE洗滌。水層使用1 M 鹽酸酸化至pH 1及使用乙酸乙酯萃取3次。合併之有機層使用鹽水洗滌，經無水硫酸鎂脫水，過濾，及濃縮，產生1.74 g (100%純度，86%產率)標題化合物。 LC-MS (方法10)：Rt = 2.00 min；MS(ESI pos): m/z = 424 [M+H]+ ¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.157 (0.74), 1.175 (1.50), 1.193 (0.76), 1.988 (2.79), 2.992 (0.74), 3.014 (0.87), 3.025 (1.22), 3.048 (1.17), 3.118 (1.24), 3.134 (1.32), 3.153 (0.81), 3.169 (0.76), 3.316 (16.00), 4.021 (0.71), 4.039 (0.70), 4.131 (0.95), 4.149 (1.39), 4.166 (2.72), 4.194 (4.15), 4.213 (2.65), 4.235 (0.72), 7.013 (1.71), 7.033 (3.28), 7.053 (2.07), 7.290 (1.33), 7.307 (3.44), 7.323 (4.18), 7.341 (2.36), 7.357 (0.48), 7.397 (2.41), 7.415 (4.00), 7.434 (1.83), 7.639 (2.22), 7.659 (3.87), 7.679 (1.99), 7.818 (1.97), 7.839 (1.95), 7.876 (4.80), 7.894 (4.40), 12.793 (0.81). 此胺基酸用於SPPS中。
實例107AN -{[(9H -芴-9-基)甲氧基]羰基}-2,5-二氟-L-苯基丙胺酸
Figure 02_image247
在2,5-二氟-L -苯基丙胺酸甲基酯 (CAS-RN：1213491-95-2) (2.27 g, 10.5 mmol)中添加甲醇(40 mL)，所得溶液冷卻至0°C。添加氫氧化鈉溶液(11 mL, 1.0 M)，反應混合物於室溫下攪拌1.5 h。添加水(35 mL)、碳酸氫鈉(886 mg, 10.5 mmol)及碳酸鈉(1.47 g, 13.9 mmol)至溶液中。經由旋轉蒸發法排除甲醇，及使用1,4-二㗁烷(30 mL)稀釋水層。懸浮液冷卻至0°C，及添加氯甲酸(9H -芴-9-基)甲基酯(CAS-RN：28920-43-6, 4.09 g, 15.8 mmol)，反應混合物於室溫下攪拌2 h。混合物加水稀釋，及使用MTBE洗滌。使用1 M 鹽酸溶液酸化水層pH 1，及使用乙酸乙酯萃取三次。合併之有機層使用鹽水洗滌，經無水硫酸鎂脫水，過濾，及濃縮。粗產物經矽膠快速層析法純化(梯度DCM：甲醇0-5%)後，殘質溶於乙腈，及再度經製備性HPLC純化(管柱：Reprosil；C18；10 µm；125 x 40 mm；溶劑：AcCN/H2 O，包含0.1% HCOOH；流速：100 mL/min；梯度：0 - 5.50 min (10：90)；在3.00 min時注射樣本；5.50 - 17.65 min 梯度達到95：5；17.65 - 19.48 min (95：5)；19.48 - 19.66 min達到10：90；19.66 - 20.72 min (10：90))，產生1.82 g (100 %純度，41 %產率)標題化合物。 LC-MS (方法9)：Rt = 1.04 min；MS(ESI pos): m/z = 424 [M+H]+ ¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (2.88), 0.008 (2.75), 1.234 (0.68), 2.329 (0.47), 2.671 (0.46), 2.843 (2.48), 2.870 (3.13), 2.877 (3.47), 2.904 (3.10), 3.166 (3.44), 3.177 (3.74), 3.200 (2.97), 3.212 (2.73), 4.141 (1.90), 4.158 (5.16), 4.173 (9.08), 4.196 (12.08), 4.201 (12.22), 4.211 (8.55), 4.221 (7.38), 4.233 (3.76), 4.246 (2.97), 4.259 (2.15), 7.084 (0.87), 7.093 (1.61), 7.106 (2.33), 7.114 (3.81), 7.124 (3.21), 7.135 (2.97), 7.144 (2.17), 7.175 (3.13), 7.187 (4.77), 7.197 (6.58), 7.210 (7.69), 7.220 (4.45), 7.232 (3.61), 7.263 (4.47), 7.282 (9.79), 7.301 (7.22), 7.305 (7.95), 7.325 (4.82), 7.349 (0.45), 7.389 (6.78), 7.408 (11.73), 7.426 (5.46), 7.489 (0.48), 7.509 (0.67), 7.532 (0.46), 7.610 (7.40), 7.628 (12.92), 7.646 (6.48), 7.791 (6.23), 7.812 (6.10), 7.871 (16.00), 7.890 (14.50), 12.862 (3.43). 此胺基酸用於SPPS中。 此胺基酸亦可由實例126A 所製備之2,5-二氟-L -苯基丙胺酸甲基酯製備。該胺基酸亦可由2,5-二氟-L -苯基丙胺酸酯 (CAS RN：31105-92-7)採用實例106A說明之製程製備。
實例108A 四氫-2H -吡喃-3-基乙酸苯甲基酯(消旋物)
Figure 02_image249
取四氫-2H -吡喃-3-基乙酸(1.00 g, 6.94 mmol)溶於甲醇(10 mL, 250 mmol)，添加碳酸銫(1.13 g, 3.47 mmol)，反應混合物於室溫下攪拌，直到氣體停止釋出為止。隨後蒸發溶液。殘質溶於DMF (10 mL)，添加(溴甲基)苯(1.3 mL, 11 mmol)，反應混合物於室溫下攪拌一夜。再添加(溴甲基)苯(325 µL, 2.75 mmol)，於室溫下攪拌反應混合物3 h。隨後使用水與醚稀釋懸浮液。攪拌幾分鐘後，分離有機層。使用乙醚萃取水層三次。合併之有機層使用鹽水洗滌，經無水硫酸鎂脫水，過濾後，濃縮。粗產物經矽膠層析法純化(環己烷 / 乙酸乙酯(85/15))，產生1.50 g (100 %純度，92 %產率)標題化合物。 LC-MS (方法10)：Rt = 1.84 min；MS(ESI pos): m/z = 235 [M+H]+ ¹H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.161 (0.45), 1.170 (0.51), 1.183 (0.89), 1.187 (0.68), 1.191 (0.98), 1.196 (0.60), 1.204 (0.68), 1.208 (1.03), 1.212 (0.77), 1.217 (1.00), 1.229 (0.62), 1.238 (0.63), 1.428 (0.47), 1.447 (0.62), 1.449 (0.74), 1.455 (0.95), 1.463 (0.63), 1.468 (0.83), 1.476 (1.42), 1.484 (0.80), 1.489 (0.56), 1.498 (0.98), 1.501 (0.53), 1.506 (1.11), 1.509 (1.00), 1.516 (1.65), 1.523 (1.08), 1.532 (0.56), 1.543 (0.70), 1.550 (0.40), 1.747 (0.90), 1.751 (0.77), 1.755 (0.89), 1.764 (0.62), 1.773 (0.82), 1.777 (0.69), 1.781 (0.77), 1.887 (0.41), 1.894 (0.68), 1.901 (0.68), 1.908 (0.76), 1.914 (0.90), 1.921 (0.74), 1.927 (0.68), 1.934 (0.63), 2.194 (1.30), 2.208 (1.18), 2.225 (3.67), 2.239 (3.41), 2.255 (3.55), 2.270 (3.23), 2.286 (1.23), 2.301 (1.12), 3.018 (2.02), 3.038 (2.30), 3.041 (2.34), 3.059 (2.06), 3.246 (1.05), 3.252 (1.07), 3.267 (1.61), 3.273 (1.61), 3.289 (1.21), 3.295 (1.19), 3.685 (0.75), 3.692 (1.34), 3.705 (1.77), 3.708 (1.89), 3.713 (2.24), 3.716 (2.16), 3.726 (1.17), 3.730 (1.14), 3.734 (1.08), 3.738 (0.97), 5.089 (16.00), 7.310 (0.41), 7.315 (0.73), 7.320 (0.71), 7.327 (2.21), 7.334 (1.16), 7.339 (1.36), 7.342 (1.95), 7.345 (2.49), 7.348 (2.36), 7.351 (1.63), 7.360 (9.48), 7.364 (11.33), 7.371 (1.08), 7.376 (3.55), 7.378 (3.74), 7.382 (1.62), 7.390 (0.55), 7.393 (1.20), 7.395 (0.74).
實例109A 四氫-2H -吡喃-3-基乙酸苯甲基酯
Figure 02_image251
取非對映異構性混合物(實例108A, 1.5 g)溶於甲醇/ 乙腈(30 mL)，及使用THAR超臨界流體層析法Prep 200儀器分離，其使用Chiralpak AZ-H (SFC) 5µm，250 x 30 mm管柱；溶離液：CO2/乙醇(90：10)；壓力：135巴；溶離液溫度：35°C；流速：100 g/min；檢測：UV 210 nm；注射體積 0.4 mL/次注射；在一般操作條件下，1g/min CO2約等於1 mL/min。 順序設定：循環時間= 11.2 min 在1.48 min時收集溶出份1 (對映異構物1) 在1.89 min之間收集溶出份2 (對映異構物2) 合併包含產物之溶出份及濃縮。 溶出份使用分析性SFC-MS分析(Agilent，管柱：Daicel AZ-3 3 µm 100 x 4.6 mm，溶離液：CO2/乙醇(90：10)；BPR壓力：130巴；BPR溫度：60°C；管柱溫度：40°C；流速：3 mL/min；UV 210 nm. 未指定兩種對映異構物之立體化學。 得到四氫-2H -吡喃-3-基乙酸苯甲基酯(對映異構物1)，99.5% ee (641 mg (100 %純度)。 LC-MS (方法9)：Rt = 0.98 min；MS(ESI pos): m/z = 235 [M+H]+ ¹H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.161 (0.45), 1.170 (0.51), 1.183 (0.89), 1.187 (0.67), 1.191 (0.98), 1.196 (0.61), 1.204 (0.67), 1.209 (1.03), 1.213 (0.77), 1.217 (1.00), 1.230 (0.61), 1.238 (0.62), 1.428 (0.48), 1.447 (0.61), 1.449 (0.75), 1.455 (0.95), 1.463 (0.64), 1.468 (0.82), 1.476 (1.41), 1.484 (0.79), 1.489 (0.56), 1.498 (0.98), 1.501 (0.52), 1.507 (1.05), 1.510 (1.00), 1.516 (1.65), 1.523 (1.07), 1.532 (0.55), 1.543 (0.70), 1.747 (0.90), 1.751 (0.78), 1.755 (0.89), 1.764 (0.63), 1.773 (0.81), 1.777 (0.69), 1.781 (0.78), 1.887 (0.40), 1.894 (0.69), 1.901 (0.68), 1.908 (0.76), 1.914 (0.91), 1.921 (0.74), 1.927 (0.67), 1.934 (0.64), 2.194 (1.30), 2.208 (1.18), 2.225 (3.69), 2.239 (3.42), 2.255 (3.56), 2.270 (3.24), 2.286 (1.23), 2.301 (1.12), 3.019 (2.02), 3.038 (2.29), 3.041 (2.36), 3.060 (2.07), 3.246 (1.05), 3.252 (1.08), 3.268 (1.63), 3.273 (1.63), 3.289 (1.24), 3.295 (1.23), 3.686 (0.75), 3.692 (1.34), 3.705 (1.73), 3.708 (1.90), 3.713 (2.19), 3.715 (2.20), 3.726 (1.19), 3.730 (1.13), 3.734 (1.08), 3.738 (0.97), 5.089 (16.00), 7.310 (0.40), 7.315 (0.74), 7.321 (0.69), 7.328 (2.23), 7.334 (1.13), 7.339 (1.36), 7.342 (1.99), 7.345 (2.52), 7.347 (2.34), 7.350 (1.66), 7.360 (9.33), 7.364 (11.16), 7.371 (1.09), 7.376 (3.58), 7.378 (3.72), 7.382 (1.63), 7.390 (0.54), 7.393 (1.20), 7.396 (0.75). 亦得到四氫-2H -吡喃-3-基乙酸苯甲基酯(對映異構物2)，99.5% ee (611 mg (100 %純度)。
實例110A 四氫-2H -吡喃-3-基乙酸(對映異構物1)
Figure 02_image252
於氬氣下，使用甲醇濕化10% 鈀/炭(84.0 mg)。添加四氫-2H -吡喃-3-基乙酸苯甲基酯(實例109A, 641 mg, 2.74 mmol)溶液。反應混合物接著於常壓及室溫下氫化2 h。經矽藻土層過濾排除觸媒。使用甲醇洗滌濾餅，及採用旋轉蒸餾法排除溶劑，產生364 mg (100 %純度，92 %產率)標題化合物。 GC-MS (GC-MS 方法1)：Rt = 3.57 min, m/z = 144 [M+] ¹H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.145 (1.98), 1.154 (2.21), 1.166 (4.03), 1.171 (3.11), 1.175 (4.45), 1.180 (2.85), 1.188 (3.11), 1.192 (4.69), 1.196 (3.55), 1.201 (4.57), 1.213 (2.68), 1.222 (2.75), 1.428 (1.03), 1.436 (1.93), 1.445 (1.35), 1.449 (1.65), 1.455 (2.72), 1.458 (3.25), 1.463 (4.18), 1.471 (2.92), 1.476 (3.82), 1.484 (6.50), 1.493 (3.67), 1.498 (2.58), 1.506 (5.73), 1.514 (6.62), 1.521 (7.99), 1.528 (5.13), 1.537 (2.67), 1.548 (3.18), 1.554 (1.80), 1.563 (0.64), 1.759 (1.78), 1.767 (4.22), 1.771 (3.85), 1.775 (4.26), 1.784 (2.89), 1.793 (3.85), 1.797 (3.49), 1.801 (3.85), 1.809 (1.56), 1.824 (0.81), 1.832 (1.31), 1.839 (1.87), 1.846 (3.17), 1.853 (3.16), 1.859 (3.72), 1.866 (4.34), 1.873 (3.58), 1.879 (3.34), 1.886 (3.00), 1.893 (1.65), 1.900 (1.44), 1.908 (0.69), 2.023 (6.18), 2.036 (5.11), 2.054 (16.00), 2.068 (14.33), 2.087 (15.54), 2.101 (13.64), 2.118 (5.69), 2.133 (5.09), 2.999 (9.23), 3.018 (10.90), 3.021 (11.02), 3.040 (9.47), 3.134 (0.64), 3.247 (6.14), 3.253 (6.29), 3.269 (9.57), 3.275 (9.49), 3.291 (7.06), 3.297 (6.90), 3.586 (0.59), 3.696 (3.77), 3.703 (6.42), 3.709 (4.14), 3.717 (8.63), 3.725 (11.12), 3.739 (5.37), 3.743 (5.40), 3.747 (5.21), 3.750 (4.68). 此物質用於SPPS中。
實例111A  (3S )-3-[(2S ,5R )-3,6-二甲氧基-5-(丙烷-2-基)-2,5-二氫吡𠯤-2-基]環己烷-1-酮
Figure 02_image254
取(2R )-3,6-二甲氧基-2-(丙烷-2-基)-2,5-二氫吡𠯤 (4.61 g, 25.0 mmol)溶於THF (20 mL)，及冷卻至-78°C。攪拌滴加丁基鋰(16 mL, 1.6 M, 25 mmol)。繼續於-78°C下攪拌15 min。添加鋰(偶氮二亞基甲基)(噻吩-2-基)銅(100 mL, 0.25 M, 25 mmol)，混合物於-78°C下攪拌15 min。添加含環己-2-烯-1-酮(2.4 mL, 25 mmol)之THF(10 mL)溶液，反應混合物於-78°C下攪拌10 min後，進一步於環境溫度下攪拌2 h。加水淬滅反應，及使用乙酸乙酯萃取2次。合併之有機層使用碳酸氫鈉溶液及鹽水洗滌，經無水硫酸鎂脫水，過濾後，殘質減壓濃縮，產生6.8 g無色油狀物。粗產物經矽膠快速層析法純化(梯度環己烷 - 乙酸乙酯85-15)，產生5.7 g (90 %純度，64 %產率)標題化合物。 LC-MS (方法12)：Rt = 3.14 min；MS(ESI pos): m/z = 281.2 [M+H]+ 1 H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.587 (0.94), 0.604 (1.17), 0.617 (6.04), 0.634 (6.04), 0.971 (0.51), 0.988 (5.87), 0.995 (1.32), 1.005 (5.67), 1.012 (0.98), 1.032 (0.88), 1.049 (0.91), 1.575 (0.55), 1.596 (0.42), 1.607 (0.61), 1.750 (0.61), 1.760 (0.78), 1.784 (1.05), 1.794 (1.28), 1.816 (0.50), 1.837 (0.50), 1.843 (0.57), 1.874 (0.43), 1.979 (0.82), 2.012 (1.26), 2.024 (0.52), 2.032 (0.55), 2.044 (0.95), 2.057 (0.40), 2.122 (0.46), 2.148 (0.80), 2.156 (1.00), 2.164 (1.00), 2.173 (0.67), 2.181 (0.70), 2.190 (0.69), 2.199 (0.54), 2.207 (0.59), 2.225 (0.71), 2.242 (0.64), 2.259 (0.74), 2.275 (0.64), 2.294 (0.45), 2.310 (0.65), 2.319 (0.47), 2.329 (0.48), 2.338 (0.58), 2.348 (0.54), 3.602 (0.89), 3.631 (16.00), 3.642 (4.12), 3.652 (14.26), 3.902 (1.14), 3.911 (2.10), 3.920 (1.33), 3.943 (0.45), 4.069 (1.14), 4.078 (1.82), 4.086 (0.98), 4.492 (0.55), 5.674 (0.91).
實例112A  (1R ,3S )-3-[(2S ,5R )-3,6-二甲氧基-5-(丙烷-2-基)-2,5-二氫吡𠯤-2-基]環己烷-1-醇(出現2種立體異構物)
Figure 02_image256
取(3S )-3-[(2S ,5R )-3,6-二甲氧基-5-(丙烷-2-基)-2,5-二氫吡𠯤-2-基]環己烷-1-酮(實例111A, 5.70 g, 20.3 mmol)溶於甲醇(50 mL)及冷卻至0°C。添加四氫硼酸鈉 (769 mg, 20.3 mmol)，反應混合物於室溫下攪拌一夜。再添加四氫硼酸鈉(769 mg, 20.3 mmol)，繼續於室溫下攪拌，再使用0.5 eq四氫硼酸鈉重覆此步驟2次。蒸發甲醇，及加水與乙酸乙酯稀釋殘質。攪拌幾分鐘後，分層。水層使用乙酸乙酯萃取。合併之有機層使用鹽水洗滌，經無水硫酸鎂脫水，過濾，及殘質減壓濃縮，產生5.7 g黃色油狀物。粗產物經矽膠快速層析法純化(梯度環己烷 - 環己烷 乙酸乙酯5%-30%)，產生4.95 g (86 %產率)標題化合物。 LC-MS (方法10)：Rt = 1.87 min；MS(ESI pos): m/z = 283.2 [M+H]+ ; Rt = 1.91 min；MS(ESI pos): m/z = 283.2 [M+H]+ 1 H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.589 (1.83), 0.600 (6.10), 0.605 (2.52), 0.617 (6.02), 0.739 (0.91), 0.768 (0.96), 0.798 (0.42), 0.898 (0.47), 0.934 (0.50), 0.997 (6.80), 1.014 (7.00), 1.157 (0.53), 1.175 (0.92), 1.193 (0.73), 1.203 (0.72), 1.211 (0.59), 1.227 (0.47), 1.235 (0.72), 1.243 (0.51), 1.313 (0.52), 1.321 (0.63), 1.352 (0.99), 1.398 (2.43), 1.485 (0.59), 1.515 (0.56), 1.668 (0.44), 1.676 (0.56), 1.684 (0.44), 1.708 (0.51), 1.745 (0.57), 1.774 (0.54), 1.879 (0.58), 1.887 (0.56), 1.988 (1.39), 2.185 (0.54), 2.193 (0.57), 2.202 (0.73), 2.210 (0.75), 2.219 (0.55), 2.227 (0.55), 3.611 (7.06), 3.617 (3.03), 3.622 (16.00), 3.629 (14.28), 3.845 (0.55), 3.854 (0.50), 3.862 (1.17), 3.871 (2.39), 3.880 (1.79), 3.933 (1.11), 3.942 (1.74), 3.951 (0.86), 4.215 (0.59), 4.223 (0.57), 4.431 (2.16), 4.443 (2.10).
實例113A  (2S )-胺基[(1S )-3-羥基環己基]乙酸甲基酯(出現2種立體異構物)
Figure 02_image258
取(3S )-3-[(2S ,5R )-5-異丙基-3,6-二甲氧基-2,5-二氫吡𠯤-2-基]環己醇(實例112A, 4.95 g, 17.5 mmol)溶於甲醇(45 mL)，及冷卻溶液至0°C。添加10% 鹽酸水溶液(15 mL)，反應混合物於0°C下攪拌短時間後，於室溫下攪拌3 h。反應混合物濃縮，殘質使用DCM稀釋後，添加碳酸鈉水溶液(150 mL, 2.0 M, 300 mmol)。攪拌混合物後，分層。使用DCM萃取水層2次。合併之有機層經無水硫酸鎂脫水，過濾後，濃縮。粗產物經矽膠快速層析法純化(DCM：甲醇95+5)，產生1.92 g (58 %產率)標題化合物。 ¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.04), 0.008 (0.93), 0.760 (0.69), 0.777 (0.71), 0.834 (0.61), 0.867 (1.92), 0.875 (1.16), 0.885 (1.54), 0.892 (1.18), 0.910 (0.45), 0.922 (0.61), 0.942 (1.05), 0.951 (0.95), 0.973 (1.17), 0.981 (1.06), 1.003 (0.54), 1.012 (0.50), 1.157 (0.67), 1.165 (0.41), 1.190 (0.65), 1.198 (0.44), 1.223 (0.42), 1.375 (0.69), 1.407 (0.79), 1.498 (0.52), 1.513 (0.89), 1.519 (0.95), 1.527 (0.74), 1.549 (0.69), 1.633 (2.72), 1.671 (0.69), 1.680 (0.78), 1.753 (1.26), 1.783 (1.67), 1.959 (0.49), 2.086 (0.85), 3.096 (0.46), 3.110 (0.48), 3.138 (1.12), 3.151 (1.10), 3.162 (1.07), 3.175 (1.02), 3.276 (0.43), 3.288 (0.55), 3.593 (0.71), 3.603 (4.85), 3.612 (16.00), 3.626 (1.87), 3.633 (0.96), 3.637 (1.57), 4.232 (0.60), 4.240 (0.55), 4.481 (1.83), 4.492 (1.73), 5.754 (0.68). 2.10).
實例114 (2S )-2-{[(9H -芴-9-基甲氧基)羰基]胺基}-2-[(1S )-3-羥基環己基]乙酸(存在2種立體異構物)
Figure 02_image260
添加(2S )-胺基[(1S )-3-羥基環己基]乙酸甲基酯(實例113A, 1.92 g, 10.3 mmol)至甲醇(40 mL)中，及冷卻溶液至0°C。添加氫氧化鈉溶液(10 mL, 1.0 M, 10 mmol)，反應混合物於室溫下攪拌1.5 h後，於50°C下1 h。添加水(37 mL)、碳酸氫鈉(861 mg, 10.3 mmol)、及碳酸鈉(1.43 g, 13.5 mmol)至溶液中。蒸發甲醇，使用1,4-二㗁烷(30 mL)稀釋水層。懸浮液冷卻至0°C，及添加氯甲酸(9H -芴-9-基)甲基酯(CAS-RN：28920-43-6, 3.98 g, 15.4 mmol)。混合物於室溫下攪拌一夜。添加水與MTBE，分離有機層。酸化水層，及使用DCM萃取3次。合併之有機層使用鹽水洗滌，經無水硫酸鎂脫水，及過濾。 粗產物經矽膠快速層析法純化(DCM：甲醇/HOAc 95+5+1)，產生2.22 g (55 %產率)標題化合物。 LC-MS (方法10)：Rt = 1.62 min；MS(ESI pos): m/z = 396.18 [M+H]+ ; Rt = 1.67 min；MS(ESI pos): m/z = 396.18 [M+H]+
實例115A (2S )-2-({[(9H -芴-9-基)甲氧基]羰基}胺基)-2-[(1S ,3R )-3-羥基環己基]乙酸(非對映異構物1)
Figure 02_image262
非對映異構物1 取(2S )-{[(9H -芴-9-基甲氧基)羰基]胺基}[(1S )-3-羥基環己基]乙酸(實例114A, 2.22 g)採用實例96 A說明之方法，利用對掌性層析法純化 ，產生890 mg (100 %純度，40 %產率，99% ee)非對映異構物1。 LC-MS (方法10)：Rt = 1.62 min；MS(ESI pos): m/z = 396.2 [M+H]+ H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.878 (0.88), 0.909 (1.80), 0.940 (2.23), 0.962 (1.87), 0.986 (2.99), 1.025 (4.63), 1.053 (3.69), 1.083 (1.14), 1.151 (1.18), 1.184 (2.16), 1.217 (1.71), 1.249 (0.53), 1.492 (2.55), 1.523 (2.32), 1.668 (2.86), 1.701 (2.42), 1.779 (6.54), 1.802 (4.90), 2.073 (4.22), 3.875 (0.46), 3.900 (3.08), 3.916 (3.51), 3.921 (3.52), 3.936 (2.67), 4.197 (1.31), 4.211 (3.35), 4.223 (9.23), 4.238 (12.01), 4.242 (10.59), 4.253 (6.34), 4.270 (3.91), 4.296 (0.72), 4.563 (2.04), 7.312 (6.21), 7.331 (14.61), 7.349 (9.50), 7.402 (9.30), 7.420 (15.31), 7.439 (6.83), 7.603 (4.81), 7.624 (4.95), 7.752 (11.74), 7.770 (10.65), 7.884 (16.00), 7.903 (14.82), 8.155 (0.69). 此胺基酸用於SPPS中。
實例116A (2S )-2-({[(9H-芴-9-基)甲氧基]羰基}胺基)-2-[(1S ,3S )-3-羥基環己基]乙酸(非對映異構物2)
Figure 02_image264
亦在(2S )-({[(9H-芴-9-基)甲氧基]羰基}胺基)[(1S ,3S )-3-羥基環己基]乙酸(實例114A)之非對映異構性混合物之對掌性層析期間，單離出280 mg (95 %純度，12 %產率)非對映異構物2。 LC-MS (方法10)：Rt = 1.67 min；MS(ESI pos): m/z = 396.2 [M+H]+ ¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.862 (0.81), 0.879 (0.71), 1.024 (0.76), 1.055 (1.68), 1.084 (1.84), 1.113 (1.00), 1.274 (1.39), 1.308 (2.53), 1.339 (1.79), 1.404 (4.60), 1.430 (3.90), 1.498 (3.23), 1.531 (6.31), 1.566 (4.20), 1.609 (2.04), 1.640 (1.55), 2.179 (1.80), 2.328 (0.51), 2.670 (0.47), 3.820 (0.62), 3.839 (0.86), 3.858 (0.76), 3.904 (4.71), 3.920 (3.46), 3.925 (3.34), 3.941 (2.46), 4.195 (1.38), 4.210 (3.69), 4.223 (9.20), 4.238 (10.72), 4.244 (8.66), 4.254 (7.18), 4.272 (6.16), 7.309 (5.80), 7.328 (13.47), 7.346 (8.67), 7.400 (9.17), 7.419 (15.07), 7.437 (6.77), 7.487 (3.68), 7.508 (3.60), 7.546 (0.67), 7.637 (0.61), 7.748 (11.33), 7.767 (10.18), 7.883 (16.00), 7.901 (14.74). 此胺基酸用於SPPS中。
實例117A 3-({[(9H -芴-9-基甲氧基)羰基]胺基}甲基)環己烷羧酸(消旋物)
Figure 02_image266
取3-{[(第三丁氧基羰基)胺基]甲基}環己烷羧酸(消旋物) (CAS RN：145149-55-9, 1.00 g, 3.89 mmol)溶於二氯甲烷(20 mL, 310 mmol)，添加三氟乙酸(20 mL, 260 mmol)，於室溫下攪拌反應混合物30 min。溶液蒸發，及殘質溶於丙酮(15 mL)。添加水(10 mL)、碳酸氫鈉(6.53 g, 77.7 mmol)及1-({[(9H-芴-9-基)甲氧基]羰基}氧)吡咯啶-2,5-二酮(CAS-RN：82911-69-11.38 g, 4.08 mmol)。懸浮液於室溫下攪拌一夜。添加碳酸氫鈉(6.53 g, 77.7 mmol)，於室溫下攪拌反應混合物1 h。懸浮液加水稀釋，及使用MTBE萃取。水層使用鹽酸水溶液(1M)酸化後，使用乙酸乙酯萃取三次。合併之有機層使用鹽水洗滌，經硫酸鎂乾燥，過濾後，濃縮及蒸發，產生三份含產物溶出份：130 mg (96 %純度，8 %產率)、127 mg (96 %純度，8 %產率)、51.0 mg (3 %產率)。 LC-MS (方法9)：Rt = 1.01 min；MS(ESI pos): m/z = 380 [M+H]+ ¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.736 (0.49), 0.759 (1.44), 0.790 (1.73), 0.821 (0.80), 0.851 (0.96), 0.882 (2.75), 0.913 (2.99), 0.944 (1.23), 1.083 (0.45), 1.120 (0.52), 1.153 (1.38), 1.182 (3.81), 1.206 (3.18), 1.235 (1.28), 1.418 (1.48), 1.598 (1.97), 1.630 (2.23), 1.717 (2.24), 1.739 (1.48), 1.747 (1.53), 1.835 (1.93), 1.862 (3.95), 1.897 (2.04), 2.074 (2.00), 2.123 (1.19), 2.130 (1.10), 2.152 (2.02), 2.174 (0.85), 2.181 (0.95), 2.524 (1.06), 2.785 (0.60), 2.801 (1.06), 2.818 (2.22), 2.835 (3.08), 2.849 (2.89), 2.862 (3.29), 2.878 (2.21), 2.895 (1.16), 2.911 (0.57), 4.188 (1.46), 4.206 (3.84), 4.223 (3.22), 4.238 (0.88), 4.253 (0.91), 4.287 (11.07), 4.304 (6.87), 4.333 (0.64), 4.351 (0.40), 4.451 (0.68), 7.306 (6.09), 7.324 (16.00), 7.341 (10.19), 7.392 (6.85), 7.410 (10.96), 7.429 (4.86), 7.459 (0.43), 7.626 (0.73), 7.643 (0.75), 7.683 (9.67), 7.702 (8.66), 7.875 (11.34), 7.894 (10.10), 12.028 (1.95). 此胺基酸用於SPPS中。
實例118A  (2S)-2-(嗎福啉-4-基)丙酸苯甲基酯
Figure 02_image268
取L-丙胺酸(589 mg, 6.61 mmol)、1-溴-2-(2-溴乙氧基)乙烷(910 µL, 7.3 mmol)及碳酸鈉溶於乙醇，及溶液回流2天。讓懸浮液回升至室溫，及懸浮液過濾。濾液蒸發，懸浮於乙醇(30 mL)中，及添加3M鹽酸調整pH (至pH = 3)。懸浮液過濾，及蒸發濾液。殘質溶於DMF(20 mL)。添加碳酸銫(1.08 g, 3.30 mmol)及(溴甲基)苯(1.6 mL, 13 mmol)，混合物於室溫下攪拌2天。加水後，溶液經逆相 HPLC純化(管柱：Reprosil；C18；10 µm；125 x 30 mm;溶離液ACN/H2 O(含0.1% HCOOH改質劑)；流速：75 mL/min；梯度：0-5.50 min 10/ 90；直到3.00 min時注射樣本；5.50-17.65 min 梯度達到95/5；17.65-19.48 min 95/5；19.48-19.66 min 梯度達到10/90；19.66-20.72 min 10/90)。合併所需溶出份及冷凍乾燥，產生800 mg (98 %純度，48 %產率)標題化合物之無色油狀物；ee ＞99%。 LC-MS (方法9)：Rt = 0.51 min；MS(ESI pos): m/z = 250 [M+H]+ ¹H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.191 (10.46), 1.205 (10.52), 2.462 (0.66), 2.469 (0.77), 2.473 (0.76), 2.485 (1.55), 2.521 (1.43), 2.562 (0.63), 3.330 (0.93), 3.344 (2.66), 3.358 (2.62), 3.372 (0.86), 3.499 (0.46), 3.506 (0.63), 3.511 (0.45), 3.521 (2.34), 3.530 (3.52), 3.532 (3.50), 3.538 (3.54), 3.549 (2.18), 3.564 (0.56), 5.101 (0.60), 5.126 (5.99), 5.131 (5.75), 5.156 (0.57), 7.323 (0.69), 7.327 (0.52), 7.332 (1.27), 7.341 (1.23), 7.343 (0.94), 7.350 (1.14), 7.358 (0.50), 7.369 (1.15), 7.377 (16.00), 7.386 (6.48), 7.392 (0.46).
實例119A (2S)-2-(嗎福啉-4-基)丙酸
Figure 02_image270
於氬氣下，使用甲醇濕化鈀(10%於活性碳上) (100 mg)。然後，取 (2S)-2-(嗎福啉-4-基)丙酸苯甲基酯 (實例118A, 800 mg, 3.21 mmol)溶於甲醇(100 mL)，及在氬氣下，添加已濕化之活性碳載鈀至溶液中。懸浮液接著於環境溫度及氫蒙氣下氫化2小時。使用氬氣吹掃容器中之氫氣，懸浮液通過寅氏鹽(celite)過濾。濾液蒸發，殘質溶於MeCN/H2 O及冷凍乾燥，產生501 mg (＞99 %純度，98 %產率)標題化合物之淡褐色固體。 LC-MS (方法9)：Rt = 0.16 min；MS(ESI pos): m/z = 160 [M+H]+ ¹H-NMR (500 MHz, 氘 oxide) δ [ppm]: 1.519 (16.00), 1.534 (15.96), 3.695 (1.39), 3.709 (4.02), 3.724 (3.89), 3.738 (1.30).
實例120A 1-(第三丁氧基羰基)-4-亞乙基-L-脯胺酸
Figure 02_image272
取甲基(三苯基)鏻溴化物(34.7 g, 97.1 mmol)懸浮於400 mL THF中。於室溫下滴加含KHMDS之甲苯溶液(146.6 mL, 15% w/v, 97.1 mmol)，及於室溫下攪拌一小時。然後，冷卻溶液至0°C，及一次添加全量1-(第三丁氧基羰基)-4-側氧基-L-脯胺酸(11.1 g, 48.6 mmol)。於室溫下攪拌混合物 2.5小時。加水至反應混合物中。混合物使用10%檸檬酸溶液稍微酸化，及使用乙酸乙酯萃取三次。合併之乙酸乙酯層使用飽和氯化鈉水溶液洗滌，經硫酸鎂乾燥後，真空乾燥，產生深橙色樹脂。粗產物未進一步純化即用於下一個步驟。
實例121A  (2S)-4-亞甲基吡咯啶-1,2-二羧酸1-第三丁基酯2-甲基酯
Figure 02_image274
取粗產物1-(第三丁氧基羰基)-4-亞乙基-L-脯胺酸(實例120A) (11.0 g, 48.6 mmol)溶於DMF (60 mL)。添加碳酸鉀(10.1 g, 72.9 mmol)後，添加碘甲烷(4.5 ml, 73 mmol)，然後於室溫下攪拌混合物一夜。採用旋轉蒸發器排除DMF，添加乙酸乙酯後，使用水洗滌混合物一次。再使用乙酸乙酯萃取水相一次。合併之有機相使用飽和氯化鈉水溶液洗滌，經硫酸鎂乾燥後，真空乾燥，產生粗產物。粗產物溶於DCM，及經正相層析法，使用Biotage Isolara 快速層析系統，使用環己烷–乙酸乙酯(85/15)溶離液純化，產生10.2 g (80%)標題化合物之黃色油狀物。 LC-MS (方法10)：Rt = 1.77 min；MS(ESI pos): m/z = 186 M-C4H8+ ¹H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.339 (16.00), 1.405 (10.53), 3.313 (10.02), 3.627 (3.90), 3.938 (2.21), 3.967 (0.60), 4.331 (0.51), 4.337 (0.54), 4.350 (0.57), 4.356 (0.59), 4.363 (0.47), 4.367 (0.42), 4.992 (1.33), 5.019 (1.17).
實例122A  (6S)-5-氮雜螺[2.4]庚烷-5,6-二羧酸5-第三丁基酯6-甲基酯
Figure 02_image276
於氬氣下，取二乙基鋅(22 mL, 1.0 M己烷溶液, 22 mmol)溶於無水DCM (27 mL)。溶液冷卻至5°C後，以1小時時間滴加TFA (1.7 ml, 22 mmol)之DCM溶液 (17 mL)。於5°C下再攪拌溶液30 min。快速滴加含二碘甲烷(1.8 mL, 22 mmol)之無水DCM溶液(5 mL)，所得溶液於5°C 下攪拌30 min。然後添加含(2S)-4-亞甲基吡咯啶-1,2-二羧酸1-第三丁基酯 2-甲基酯(實例121A) (2.70 g, 11.2 mmol) 之無水DCM (5 mL)溶液至反應混合物中。反應混合物於解凍冰浴中攪拌90小時後，使用飽和氯化銨水溶液淬滅反應。分相，使用DCM再萃取水相一次。合併有機相，經硫酸鎂乾燥後，蒸發，產生1.57 g 粗產物之黃色油狀物。該油狀物溶於乙酸乙酯(54 mL)，依序添加二碳酸二-第三丁基酯(2.6 mL, 11 mmol)及三乙胺(3.1 mL, 22 mmol)後，於室溫下攪拌反應混合物一夜。使用TLC監控反應(石油醚/乙酸乙酯10/1；使用茚三酮染色)。粗產物經正相層析法，使用Biotage Isolara快速層析系統 (100 g Biotage卡管 Ultra)，使用石油醚– 乙酸乙酯(EA) (2%至18% EA)溶離液梯度純化，產生1.02 g標題化合物之無色油狀物。
實例123A (6S)-5-(第三丁氧基羰基)-5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-羧酸
Figure 02_image278
取(6S)-5-氮雜螺[2.4]庚烷-5,6-二羧酸5-第三丁基酯6-甲基酯(實例122A) (2.50 g, 9.79 mmol)溶於50% THF/水(40 mL)、添加氫氧化鋰(703 mg, 29.4 mmol)，於室溫下攪拌反應混合物一夜。利用旋轉蒸發器排除THF，再使用水(20 mL)稀釋水溶液，及使用MTBE洗滌一次。分離之水相使用1M鹽酸(30 mL)酸化後，使用DCM萃取2次。合併之有機相經硫酸鎂乾燥，過濾後，濃縮，產生2.4 g標題化合物之無色油狀物。
實例124A (6S)-5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-羧酸
Figure 02_image280
取(6S)-5-(第三丁氧基羰基)-5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-羧酸(實例123A) (2.36 g, 9.79 mmol)溶於DCM (50 mL)。添加三氟乙酸(10 mL, 250 mmol)，於室溫下攪拌反應混合物2小時。使用TLC(DCM/MeOH 9/1)監控反應。蒸發溶液，及粗產物真空乾燥，產生標題化合物之褐色殘質，此產物直接用於下一個步驟(Fmoc保護，參見實例82A)。
實例15A (2S,5R)-2-[(2,5-二氟苯基)甲基]-3,6-二甲氧基-5-(丙烷-2-基)-2,5-二氫吡𠯤
Figure 02_image282
該反應係於氬氣下進行。取(2R)-3,6-二甲氧基-2-(丙烷-2-基)-2,5-二氫吡𠯤 (CAS-RN：109838-85-9) (2.9 ml, 16 mmol)溶於無水THF (40 mL)，及冷卻溶液至-78°C。於此溫度下慢慢滴加正丁基鋰溶液(10 mL, 1.6 M己烷溶液, 16 mmol)，於-78°C下攪拌所得溶液15 min。然後添加含2-(溴甲基)-1,4-二氟苯(4.05 g, 19.5 mmol)之無水THF(15 mL)溶液，並繼續攪拌，直到反應回到室溫。再於室溫下攪拌反應混合物1小時，同時利用HPLC追蹤反應進度。加水淬滅混合物之反應，及使用乙酸乙酯萃取2次。合併之有機相使用飽和氯化鈉水溶液洗滌一次，經硫酸鎂乾燥後，濃縮，產生5.46 g粗產物之黃色油狀物。該油狀物經正相層析法，使用Biotage Isolara快速層析系統(100 g Biotage卡管 Ultra)，使用環己烷 – 乙酸乙酯(EA)(95/5)溶離液純化，產生4.16 g (82%)標題化合物之油狀物。 LC-MS (方法10)：Rt = 2.44 min；MS(ESI pos): m/z = 311 [M+H]+ ¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.563 (6.79), 0.580 (6.97), 0.933 (6.65), 0.951 (6.88), 2.103 (0.58), 2.111 (0.61), 2.120 (0.78), 2.129 (0.79), 2.137 (0.59), 2.145 (0.57), 2.864 (0.79), 2.882 (0.83), 2.898 (1.08), 2.915 (1.09), 3.089 (1.06), 3.101 (1.10), 3.123 (0.82), 3.134 (0.81), 3.313 (7.20), 3.518 (1.28), 3.527 (2.46), 3.535 (1.37), 3.566 (16.00), 4.293 (0.58), 4.304 (1.07), 4.313 (1.08), 4.321 (1.01), 4.330 (0.58), 6.992 (0.47), 7.000 (0.66), 7.005 (0.63), 7.015 (1.06), 7.023 (0.71), 7.028 (0.64), 7.037 (0.63), 7.075 (0.63), 7.084 (0.91), 7.095 (0.74), 7.105 (0.66), 7.131 (0.68), 7.143 (0.73), 7.154 (1.05), 7.166 (1.04), 7.177 (0.45), 7.189 (0.40).
實例126A 2,5-二氟-L-苯基丙胺酸甲基酯
Figure 02_image284
取(2S,5R)-2-[(2,5-二氟苯基)甲基]-3,6-二甲氧基-5-(丙烷-2-基)-2,5-二氫吡𠯤 (實例125A) (4.15 g, 13.4 mmol)溶於甲醇(35 mL)，及冷卻溶液至0°C。添加 10%鹽酸水溶液(12 mL)，於0°C下攪拌溶液幾分鐘。然後讓反應溶液回升至室溫後，於此溫度下攪拌三小時。蒸發甲醇。殘質使用DCM稀釋，添加2M碳酸鈉水溶液(120 mL)，激烈攪拌所得混合物幾分鐘。分層，使用DCM萃取水相2次。合併之有機相經硫酸鎂乾燥，過濾後，濃縮，產生3.97 g無色液體。粗產物液體經正相層析法，使用Biotage Isolara快速層析系統(100 g Biotage卡管 Ultra)，使用環己烷 – 乙酸乙酯(EA)梯度溶離液(10%至75% EA)純化，產生2.27 g (79%)標題化合物之無色液體。 LC-MS (方法13)：Rt = 1.20 min；MS(ESI pos): m/z = 216 [M+H]+ ¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.833 (16.00), 2.733 (3.07), 2.753 (3.26), 2.767 (4.81), 2.787 (5.01), 2.889 (4.71), 2.904 (4.91), 2.923 (3.10), 2.938 (3.19), 3.315 (15.20), 3.401 (0.42), 3.553 (5.22), 3.568 (6.29), 3.572 (6.60), 3.768 (0.41), 7.060 (0.89), 7.069 (1.71), 7.081 (2.21), 7.090 (4.07), 7.101 (3.20), 7.111 (2.84), 7.120 (1.89), 7.151 (5.97), 7.163 (5.82), 7.174 (9.84), 7.186 (7.52), 7.196 (4.42), 7.208 (2.10).
實例127A (2R)-2-胺基-3-[[(2R)-2-胺基-3-第三丁氧基-3-側氧基-丙基]二硫烷基]丙酸第三丁基酯
Figure 02_image286
於0°C下，以0.5 h時間，在含L-胱胺酸(CAS RN：56-89-3) (10.00 g, 41.61 mmol)之乙酸第三丁基酯(63.22 g, 544.24 mmol, 73 mL)懸浮液中滴加HClO4 (18.26 g, 127.23 mmol, 11 mL, 70%純度) (70%之H2 O溶液)後，於20°C下攪拌溶液17 h。添加冰，溶液未進一步純化即直接用於下一個步驟(理論值14.67 g)。
實例128A  (2R)-3-[[(2R)-3-第三丁氧基-2-(第三丁氧基羰基胺基)-3-側氧基-丙基]二硫烷基]-2-(第三丁氧基羰基胺基)丙酸第三丁基酯
Figure 02_image288
在含(2R)-2-胺基-3-[[(2R)-2-胺基-3-第三丁氧基-3-側氧基-丙基]二硫烷基]丙酸第三丁基酯 (理論值14.67 g，來自實例127A)之水(200 mL)及EA(200 mL)混合物中，於0°C下添加Na2 CO3 (30.00 g, 283.08 mmol)及Boc2 O (27.25 g, 124.85 mmol)，混合物(pH 8-9)於20°C下攪拌17 h。使用EA (100 mL)及水(200 mL)稀釋混合物。分離有機層，使用EA(200 mL)萃取水層。合併之有機層使用鹽水(200 mL)洗滌，濃縮，產生殘質，殘質經矽膠層析法純化(PE/EA=1/0至1/1)，產生兩批標題化合物：8.5 g粗產物之淺褐色油狀物及6.5 g淺褐色油狀物。 ¹H-NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ [ppm]: 1.51, 1.61, 1.62. 1.64, 3.11, 3.12, 3.14, 3.16, 3.19, 3.203, 3.23, 3.24, 4.44, 4.46, 4.48, 4.49, 5.35, 5.37.
實例129A  (2R)-2-(第三丁氧基羰基胺基)-3-硫烷基-丙酸第三丁基酯
Figure 02_image290
於0°C下，以0.5 h時間，在含(2R)-3-[[(2R)-3-第三丁氧基-2-(第三丁氧基羰基胺基)-3-側氧基-丙基]二硫烷基]-2-(第三丁氧基羰基胺基)丙酸第三丁基酯(8.5 g，粗產物，來自實例128A)之THF(150 mL)與水(15 mL)之溶液中添加三丁基磷烷(3.77 g, 4.6 mL)，然後於20°C下攪拌溶液2 h。再操作另一批由6.5 g原料(來自實例128A)製備之混合物。兩份反應混合物均倒至水(300 mL)中，使用乙酸乙酯(150 mL x 2)萃取。合併之有機相使用鹽水(300 mL)洗滌，經無水Na2 SO4 脫水，過濾，及真空濃縮。殘質經矽膠層析法純化(PE/EA = 40/1至10/1)，產生12.5 g標題化合物之無色油狀物，其呈純物質使用。亦得到另一批包含殘留之三丁基膦之6.5 g不純產物，但棄置不要。 ¹H-NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ [ppm]: 1.45, 2.94, 2.95, 2.96, 2.97, 4.46, 4.47, 4.48, 4.49, 5.39, 5.41
實例130A (2R)-2-(第三丁氧基羰基胺基)-3-(三氟甲基硫烷基)丙酸第三丁基酯
Figure 02_image292
於-78°C及N2 下，以30 min時間，在3,3-二甲基-1-(三氟甲基)-1,2-苯并碘氧雜戊環 (18 g, 54.53 mmol)之MeOH(150 mL)溶液中添加 (2R)-2-(第三丁氧基羰基胺基)-3-硫烷基-丙酸第三丁基酯 (14 g, 50.47 mmol，來自實例129A)之 MeOH (20 mL)溶液，於此溫度下攪拌反應1 h，此時轉呈無色溶液。反應混合物回溫至20°C，攪拌1 h，及濃縮，產生之殘質經矽膠層析法純化(PE/EA=1/0至40/1)2次，產生13.2 g標題化合物之無色油狀物。 ¹H-NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ [ppm]: 1.47, 3.26, 3.28, 3.30, 3.31, 3.45, 3.46, 3.48, 3.50, 4.47, 4.48, 5.34, 5.35.
實例131A  (2R)-2-胺基-3-(三氟甲基硫烷基)丙酸第三丁基酯鹽酸鹽
Figure 02_image294
在含 (2R)-2-(第三丁氧基羰基胺基)-3-(三氟甲基硫烷基)-丙酸第三丁基酯 (12.20 g, 35.32 mmol，來自實例130A)之DCM(10 mL)溶液中添加HCl/二㗁烷溶液 (4 M, 50 mL)，於10°C攪拌反應3 h。混合物濃縮，產生白色玻璃狀固體，其直接用於下一個步驟。
實例132A  (2R)-2-(9H-芴-9-基甲氧基羰基胺基)-3-(三氟甲基硫烷基)-丙酸第三丁基酯
Figure 02_image296
在含(2R)-2-胺基-3-(三氟甲基硫烷基)丙酸第三丁基酯鹽酸鹽 (來自實例131A之粗產物)之二㗁烷(80 mL)混合物中添加飽和NaHCO3 (80 mL)及Fmoc-OSu (19 g, 56.33 mmol)，於10°C下攪拌反應(pH ~7-8) 17 h。混合物濃縮，使用水(100 mL)稀釋殘質後，使用EA(100 mL x 2)萃取。有機層使用鹽水(100 mL)洗滌，濃縮後，經矽膠層析法(PE/EA=40/1~10/1)純化，產生13 g標題化合物之無色油狀物。 LC-MS (方法15)：Rt = 1.028 min；MS(ESI pos): m/z = 490.2 [M+Na]+ ¹H-NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ [ppm]: 1.45, 3.32, 3.47, 3.36, 3,49, 3.50, 4.16, 4.22, 4.24, 4.26, 4.37, 4.44, 4.46, 4.58, 5.62, 5.64, 7.33, 7.35, 7.40, 7.42, 7.44, 7.56, 7.61, 7.77, 7.79.19 F-NMR: (376 MHz, CDCl3 ) δ [ppm]: -40.85.
實例133A (2R)-2-(9H-芴-9-基甲氧基羰基胺基)-3-(三氟甲基硫烷基)丙酸
Figure 02_image298
在含(2R)-2-(9H-芴-9-基甲氧基羰基胺基)-3-(三氟甲基硫烷基)-丙酸第三丁基酯(13 g, 27.81 mmol)之DCM溶液(15 mL)中添加TFA (30 mL)及硫苯甲醚(15.75 g, 126.81 mmol, 15 mL)，反應混合物於10°C下攪拌17 h。混合物濃縮，產生殘質，其使用飽和NaHCO3 溶液(100 mL)稀釋後，使用EA萃取(50 mL x 2)。有機層使用1M HCl (50 mL)洗滌，濃縮後，經矽膠層析法純化(PE/EA=10/1，然後DCM/MeOH=40/1至5/1)，產生10 g標題化合物之白色玻璃狀固體，純度：98.8%。¹H-NMR顯示產物含有乙酸乙酯，因此取固體再溶於DCM(80 mL)中，濃縮後，真空乾燥，產生9.67 g (23.22 mmol, 83.5%產率，98.8%純度)標題化合物之白色玻璃狀固體。 LC-MS (方法15)：Rt = 0.895 min；MS(ESI pos): m/z = 434.1 [M+Na]+ ¹H-NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ [ppm]: 3.25, 3.26, 3.32, 3.33, 3.93, 3.95, 4.22, 4.24, 4.26, 4.28, 4.30, 4.31, 6.95, 6.98, 7.31, 7.32, 7.33, 7.34, 7.39, 7,41, 7.42, 7.68, 7.70, 7.87, 7.89.19 F-NMR：(376 MHz, CDCl3 ) δ [ppm]: -40.89 對掌性SFC：Rt = 2.49 min, 99% ee 對掌性SFC條件：AD-3_5CM_IPA (DEA)_10_20_3ML_T35管柱：Chiralpak AD-3 50 x 4.6 mm I.D.，3  μm。移動相：異丙醇(0.05% DEA)於CO2 中，從10%至20%。流速：3 mL/min。波長：220 nm。 此胺基酸用於SPPS中。此胺基酸亦可自商品取得(CAS-RN：1994331-25-7)。
實例134A (2S)-5-側氧基吡咯啶-1,2-二羧酸二-第三丁基酯
Figure 02_image300
於5°C下，在含化合物(2S)-5-側氧基吡咯啶-1,2-二羧酸第三丁基酯(CAS-RN：35418-16-7) (290 g, 1.57 mol, 1.00 eq)及DMAP (1.91 g, 15.66 mmol, 0.01 eq)之CH3 CN溶液(2.00 L)中添加Boc2 O (341 g, 1.57 mol, 359 mL, 1.00 eq)。添加後，混合物於20°C下攪拌12 h。TLC顯示起始物已完全消耗，新出現兩個點(TLC)(PE/EA = 3/1，Rf = 0.43，Rf = 0.9)。反應混合物減壓濃縮排除CH3 CN，殘質分溶於DCM(1000 mL)與水(1000 mL)之間。有機層使用鹽水(300 mL)洗滌，經Na2 SO4 脫水，過濾，及減壓濃縮，產生粗產物。殘質經管柱層析法純化(SiO2 , PE/EA=100/1至10/1)，產生標題化合物(260.00 g, 874.75 mmol, 55.72%產率，96%純度)之灰白色固體。 LC-MS (方法15)：Rt = 0.873 min；MS(ESI pos): m/z = 308.0 [M+Na]+ , 331 [M+2Na]+ ¹H-NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ [ppm]: 1.44-1.42 (d, J=8.4, 8H), 1.97-1.92 (m, 1H), 2.22-2.19 (m, 1H), 2.43-2.40 (m, 1H), 2.58-2.49 (m, 1H), 4.42-4.39 (m, 1H).
實例135A  (2S)-4,4-二烯丙基-5-側氧基-吡咯啶-1,2-二羧酸二-第三丁基酯
Figure 02_image302
於-73°C下，在含(2S)-5-側氧基吡咯啶-1,2-二羧酸二-第三丁基酯(61.9 g, 208 mmol, 1.00 eq，來自實例134A)之THF (40.0 mL)溶液中滴加LiHMDS (1 M, 437 mL, 2.10 eq)後，於-73°C下攪拌1 h。在混合物中滴加化合物烯丙基溴(50.4 g, 416 mmol, 2.00 eq)。添加後，混合物於15°C下攪拌2 h。TLC顯示化合物起始物已完全消耗，及形成四個新的點(PE/EA = 3/1，Rf = 0.9，Rf = 0.8，Rf = 0.7，Rf = 0.1)。反應混合物使用飽和氯化銨水溶液(1000 mL)淬滅反應，使用DCM萃取(500 mL x 3)，經硫酸鈉脫水，過濾後，減壓濃縮，產生粗製殘質。殘質經管柱層析法純化(SiO2 ，PE/EA = 100/1至30/1)，產生標題化合物(100 g, 38%產率，86%純度)之無色油狀物。 LC-MS (方法15)：Rt = 1.044 min；MS(ESI pos): m/z = 411.4 [M+2Na]+ ¹H-NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ [ppm]: 1.49-1.43 (d, J=8.4, 8H), 1.87-1.82 (m, 1H), 2.22-2.18 (m,3H),
實例136A  (2S)-4,4-二烯丙基吡咯啶-1,2-二羧酸二-第三丁基酯 7
Figure 02_image304
於-78°C下，在含(2S)-4,4-二烯丙基-5-側氧基-吡咯啶-1,2-二羧酸二-第三丁基酯(80.0 g, 188 mmol, 1.00 eq，來自實例135A)之THF(300 mL)溶液中添加LiBHEt3 (1 M, 225 mL, 1.20 eq)。添加後，混合物於-78°C下攪拌3 h。LCMS顯示檢測到所需MS。TLC顯示形成兩個新的點(PE/EA = 3/1，Rf = 0.65，Rf = 0.8)。反應混合物使用0°C之飽和碳酸鈉水溶液(50 mL)淬滅反應後，於0°C下滴加30% H2 O2 (1 mL)。混合物減壓濃縮排除THF後，殘質使用水(1000 mL)及DCM (1000 mL)稀釋。水相使用DCM(300 mL x 3) 萃取。合併之有機層經硫酸鈉脫水，過濾後，減壓濃縮，產生粗產物。粗製殘質經管柱層析法純化(SiO2 ，PE/EA = 80/1 至30/1)，產生標題化合物(56.0 g, 69%產率，85%純度)之無色油狀物。 LC-MS (方法15)：Rt = 1.192 min；MS(ESI pos): m/z = 390.3 [M+K]+ ¹H-NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ [ppm]: 1.53-1.47 (m, 18H), 2.13-1.98 (m, 2H), 2.22-2.15 (m,3H), 2.39-2.24 (m, 1H), 2.92-2.91 (m, 1H), 4.22-4.08 (m, 1H), 5.18-5.06 (m, 5H), 5.85-5.77 (m, 2H).
實例137A  (3S)-2-氮雜螺[4.4]壬-7-烯-2,3-二羧酸二-第三丁基酯
Figure 02_image306
於34°C下，在含葛氏第一代觸媒(Grubb’s 1st generation catalyst)(CAS RN：172222-30-9) (2.85 g, 3.47 mmol, 0.05 eq)之DCM(400.00 mL)溶液中添加(2S)-4,4-二烯丙基吡咯啶-1,2-二羧酸二-第三丁基酯(25.0 g, 69.4 mmol, 1.00 eq，來自實例136A)。添加完畢後，混合物於34°C與N2 下攪拌1 h。TLC顯示形成兩個新的點(PE/EA = 5/1，Rf = 0.6，Rf = 0.7)。反應混合物過濾及減壓濃縮，產生粗產物。殘質經管柱層析法純化(SiO2 ，PE/EA = 1/0至80/1)，產生標題化合物(12.0 g)之無色油狀物。 ¹H-NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ [ppm]: 1.46-1.43 (m, 18H), 1.92-1.87 (m, 1H), 2.45-2.22 (m, 5H), 3.49-3.29 (m, 2H), 4.21-4.19 (m, 1H), 5.64 (s, 2H).
實例138A  (3S)-2-氮雜螺[4.4]壬烷-2,3-二羧酸二-第三丁基酯
Figure 02_image308
於N2 蒙氣下，在(3S)-2-氮雜螺[4.4]壬-7-烯-2,3-二羧酸二-第三丁基酯(12.0 g, 37.1 mmol, 1.0 eq，來自實例137A)之EtOH(100 mL)溶液中添加Pd/C (10%、0.1 g)。懸浮液脫氣，及使用H2 氣體吹掃3次。混合物在H2 (15 Psi)及25°C下攪拌16 h。取一部份懸浮液過濾，濾液濃縮，取得質子NMR，其顯示形成所需產物。反應混合物過濾，及取濾液濃縮，產生10.0 g (粗製)標題化合物之白色固體。 ¹H-NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ [ppm]: 4.12-4.02 (m, 1H), 3.65-3.60 (m, 2H), 3.12-3.38 (m, 5H), 2.11-2.06 (m, 1H), 1.80-1.77 (m, 1H), 1.57-1.56 (m, 6H), 1.40-1.36 (m, 18H).
實例139A (3S)-2-氮雜螺[4.4]壬烷-3-羧酸
Figure 02_image310
添加化合物(3S)-2-氮雜螺[4.4]壬烷-2,3-二羧酸二-第三丁基酯(12 g, 36.8 mmol, 1 eq，來自實例138A)至HCl/EtOAc (150 mL)溶液中後，於15°C下攪拌混合物1 h。LC-MS分析法顯示起始物已消耗，及測得所需目標質量。反應混合物真空濃縮排除溶劑，產生7.5 g (36.4 mmol, 99%產率)標題化合物粗產物，呈鹽酸鹽之白色固體。 ¹H-NMR (400 MHz, DMSO) δ [ppm]: 10.07 (s, 1H), 8.81 (s, 1H), 4.38-4.27 (m, 1H), 3.16-3.02 (m, 2H), 2.22-2.21 (m, 1H), 1.96-1.90 (m, 1H), 1.63-1.56 (m, 8H).
實例140A (3S)-2-{[(9H-芴-9-基)甲氧基]羰基}-2-氮雜螺[4.4]壬烷-3-羧酸
Figure 02_image312
在含(3S)-2-氮雜螺[4.4]壬烷-3-羧酸(5.1 g, 24.8 mmol，來自實例139A)及Fmoc-OSu (10.0 g, 29.7 mmol, 1.2 eq)之THF (70 mL)及H2 O (70 mL)溶液中添加NaHCO3 (8.5 g, 101 mmol, 3.94, 4.08 eq)。混合物於15°C下攪拌1 h。LCMS分析法顯示起始物已消耗，並得到所需目標質量。添加水(200 ml)後，使用DCM(200 mL x 2)萃取混合物。合併之有機層使用鹽水(100 mL)洗滌，經Na2 SO4 脫水，過濾後，濃縮。粗產物經逆相 MPLC(EA)純化，產生6.9 g (17.5 mmol, 70 %產率，99%純度)標題化合物之黃色固體。 LC-MS (方法15)：Rt = 2.501 min；MS(ESI pos): m/z = 392.2 [M+H]+ ¹H-NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ [ppm]: 7.80-7.79 (d,J = 7.2, 2H), 7.59-7.54 (m, 2H), 7.44-7.42 (m, 2H), 7.36-7.35(m, 2H), 4.55-4.52 (m, 2H), 4.42-4.38 (m, 1H), 4.31-4.20(m, 1H), 3.34-3.17(m,2H), 2.33-2.28 (m, 1H), 2.13-2.08 (m, 1H), 1.73-1.50 (m, 8H). 此胺基酸用於SPPS中。此胺基酸亦可自商品取得(CAS-RN：394734-78-2)。
實例141A (2S,4R)-4-(三氟甲基)吡咯啶-2-羧酸
Figure 02_image314
在含(2S,4R)-1-第三丁氧基羰基-4-(三氟甲基)吡咯啶-2-羧酸(7 g, 24.7 mmol, 1 eq)之DCM溶液(70 mL)中添加TFA (8.00 mL, 108 mmol, 4.37 eq)。混合物於10°C下攪拌4 h。LCMS分析法顯示起始物已消耗，且已測得所需目標質量。反應混合物真空濃縮，粗產物直接用於下一個步驟。得到標題化合物(7.34 g, 24.7 mmol, 100%產率，TFA鹽)之白色固體。 LC-MS (方法15)：Rt = 0.18 min；MS(ESI pos): m/z = 184.1 [M+H]+ ¹H-NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ [ppm]: 4.51-4.48 (m, 1H), 3.82 (m, 1H), 3.57-3.55 (m, 1H), 2.65-2.62 (m, 2H), 2.53-2.49 (m, 1H).
實例142A (2S,4R)-1-(9H-芴-9-基甲氧基羰基)-4-(三氟甲基)吡咯啶-2-羧酸
Figure 02_image316
在含粗產物(2S,4R)-4-(三氟甲基)吡咯啶-2-羧酸(2 g, 6.73 mmol, 1 eq, TFA鹽，來自實例141A)之H2 O(70 mL)及丙酮(70 mL)溶液中添加Na2 CO3 (2.85 g, 26.9 mmol, 4 eq)及Fmoc-OSu (2.72 g, 8.08 mmol, 1.2eq )。混合物於10°C下攪拌12 h。LCMS分析顯示僅有一個峰，並測得所需之質量。TLC分析法(DCM/MeOH = 10/1)顯示起始物已消耗，且出現一個主峰(Rf = 0.4)。添加HCl溶液(1M, 30 mL)至混合物中，直到pH = 2。使用DCM (70 mL x 2)萃取混合物，合併之有機層使用鹽水(70 ml)洗滌，經Na2 SO4 脫水，過濾後，濃縮。殘質經管柱層析法純化(SiO2 ，PE/ EA = 10/1至5/1)，產生1.7g (61%，97%純度)標題化合物之黃色固體。 LC-MS (方法15)：Rt = 2.425 min；MS(ESI pos): m/z = 406.2 [M+H]+ , 406.2 [M+Na]+ ¹H-NMR (400 MHz, DMSO) δ [ppm]: 7.92-7.89 (m, 2H), 7.66-7.64 (m, 2H), 7.42-7.41 (m, 2H), 7.35-7.32 (m, 2H), 4.16-4.19 (m, 4H), 3.72-3.50 (m, 3H), 2.38-2.30 (m, 2H), 2.18 (s, 1H).19 F-NMR (400 MHz, DMSO) δ [ppm]: -70.128, -70.275. 對掌性SFC：Rt = 2.33 min, 99% ee 對掌性SFC條件：AD-3_5CM_IPA (DEA)_10_20_3ML_T35管柱：Chiralpak AD-3 50 x 4.6 mm I.D.，3  μm，移動相：含異丙醇(0.05% DEA)之CO2 ，10%至20%，流速：3 mL/min ，波長：220 nm。 此胺基酸用於SPPS。 表13：參考肽
參考編號 名稱 序列 製備方法
1 SFMI-1 GIC+SRSLPPIC+IPD-OH 方法B
2 SFMI-1 HCl GIC+SRSLPPIC+IPD-OH (HCl鹽) 方法B、F
3 SFMI-1 醯胺 GIC+SRSLPPIC+IPD-NH2 方法A
A Ala-1 SFMI-1 AIC+SRSLPPIC+IPD-OH 方法B
B Ala-1 SFMI-1 醯胺 AIC+SRSLPPIC+IPD-NH2 方法A
C Ala-1 SFMI-1 HCl 醯胺 AIC+SRSLPPIC+IPD-NH2 (HCl鹽) 方法A、F
表14：根據本發明肽
實例編號 序列 製備方法
4 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPD-(PEG1(10個原子))-NH2 方法A
5 AIC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPD-OH (鹽游離型) 方法B、C、G
6 (Nva)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(((N-Me)C))+I-NH2 方法D
7 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IP-(PEG2(13個原子))-NH2 方法A
8 (β-P)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IP-NH2 方法A
9 PIC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-NH2 方法D
10 (Aib)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-NH2 方法D
11 A-((N-Me)I)-C+SRS-((tBu)A)-PPI-((N-Me)C)+IPD-NH2 方法A
12 AIC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-OH 方法B
13 AIC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPD-OH 方法B、C、D
14 AIC+SRS-((tBu)A)-P-(Oic)-I-(Pen)+IPD-OH 方法B
15 (2-(Pyrrolidine)acetyl)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-NH2 方法K
16 ((N-Me)G)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IP-(PEG3(16個原子))-NH2 方法A
17 AIC+SRSLP-((6S)-5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-羧酸)-I-(Pen)+IPD-NH2 方法A
18 (Orn)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-OH 方法B
19 RIC+SRS-((tBu)A)-PPI-((N-Me)C)+IPD-NH2 方法A
20 AIC+SRS-((tBu)A)-PPI-((N-Me)C)+(2-[(1S,2S)-1-(胺基)-2-甲基丁基]-1,3-㗁唑-4-羧酸)-D-NH2 方法A
21 AIC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPe-NH2 方法D
22 AIC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPn-NH2 方法D
23 ((N-Me)A)-IC+SRS-((tBu)A)-P-(Oic)-I-(Pen)+IP-NH2 方法C
24 ((N-Me)A)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-NH2 方法D
25 AIC+SRS-((tBu)A)-PPI-((N-Me)C)+I-NH2 方法A
26 AIC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPD-NH2 (HCl鹽) 方法A、F
27 AIC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPD-NH2 (鹽游離型) 方法A、G
28 (Nle)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-((N-Me)C)+I-NH2 方法D
29 AIC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPD-OH (HCl鹽) 方法B、C、F
30 AIC+SRS-((tBu)A)-PPI-((N-Me)C)+IPD-NH2 (HCl鹽) 方法A、F
31 AIC+SRS-((tBu)A)-P-((6S)-5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-羧酸)-I-(Pen)+IPD-OH 方法B
32 (ACMP)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-NH2 方法D
33 ((1R,3S,4S)-2-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-3-羧酸)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IP-NH2 方法A
34 ((N-Me)G)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IP-(PEG7(25個原子))-NH2 方法A
35 KIC+SRS-((tBu)A)-PPI-((N-Me)C)+IPD-NH2 方法A
36 AIC+SRSLP-((6S)-5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-羧酸)-I-(Pen)+IPD-OH 方法B
37 AIC+SRS-((tBu)A)-PPIC+I-NH2 方法A
38 RIC+SRS-((tBu)A)-PPI-((N-Me)C)+I-NH2 方法A
39 ((N-Me)G)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IP-(PEG1(10個原子))-NH2 (HCl鹽) 方法A、F
40 (Cit)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-NH2 方法D
41 AIC+SRS-((tBu)A)-P-((6S)-5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-羧酸)-I-((N-Me)C)+IPD-NH2 方法A
42 ((N-Me)G)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IP-((S)-3-(2H-四唑-5-基)丙酸)-NH2 方法D
43 ((N-Me)A)-IC+SRS-((tBu)A)-P-(Oic)-I-(Pen)+I-NH2 方法C
44 ((N-Me)G)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IP-(PEG9(31個原子))-NH2 方法A
45 AIC+SRS-((tBu)A)-P-((6S)-5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-羧酸)-I-(Pen)+IPD-NH2 方法A
46 (Pip)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-((N-Me)C)+IPD-NH2 方法A
47 (3-胺基-3-甲基丁酸)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-NH2 方法D
48 AIC+SRS-((tBu)A)-PPI-((N-Me)C)+IPD-NH2 方法A
49 (Orn)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-NH2 方法A
50 (Orn)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPD-NH2 方法A
51 aIC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-NH2 方法D
52 A-(Cba)-C+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-NH2 方法D
53 TIC+SRS-((tBu)A)-PPI-((N-Me)C)+I-NH2 方法D
54 VIC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-NH2 方法D
55 ((N-Me)G)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IP-(PEG5-CH2CO2H (18個原子))-NH2 方法A
56 ((N-Me)G)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-(Orn)-(Orn)-(Orn)-NH2 方法A
57 ((N-Me)G)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IP-((N-Me)G)-((N-Me)G)-((N-Me)G)-NH2 方法A
58 ((N-Me)G)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IP-((3-Carboxy)F)-NH2 方法A
59 Ac-G-((N-Me)I)-C+SRSLPPIC+IPD-OH 方法B
60 IIC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-NH2 方法D
61 AIC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+I-NH2 方法D
62 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPD-(PEG2(13個原子))-NH2 方法A
63 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPD-(PEG5-CH2CO2H (18個原子))-NH2 方法A
64 ((N-Me)G)-IC+SRSL-((1S,2S,5R)-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-羧酸)-PI-(Pen)+IP-NH2 方法A
65 LIC+SRS-((tBu)A)-PPI-((N-Me)C)+I-NH2 方法A
66 (Abu)-IC+SRS-((tBu)A)-PPIC+IPD-NH2 方法A
67 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IP-NH2 (HCl鹽) 方法A、F
68 LIC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-NH2 方法D
69 (Nva)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-NH2 方法D
70 (Cit)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-OH 方法D
71 AIC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IP-NH2 方法D
72 ((N-Me)G)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IP-(PEG2(13個原子))-NH2 方法A
73 ((N-Me)G)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IP-(PEG4-CH2CO2H (15個原子)) -NH2 方法A
74 ((N-Me)G)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IP-(PEG8(28個原子))-NH2 方法A
75 AIC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPD-NH2 方法A、H
76 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IP-(PEG1(10個原子))-NH2 方法A
77 (Orn)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-((N-Me)C)+IPD-NH2 方法A
78 (Orn)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-((N-Me)C)+IPD-NH2 (HCl鹽) 方法A、F
79 KIC+SRS-((tBu)A)-PPI-((N-Me)C)+I-NH2 方法A
80 ((N-Isopropyl-N-methylamino)acetyl)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-NH2 方法K
81 WIC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-NH2 方法D
82 (氮雜環丁烷-2-羧酸)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-NH2 方法D
83 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IP-(PEG5-CH2CO2H (18個原子))-NH2 方法A
84 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPD-(PEG4(19個原子))-NH2 方法A
85 ((N-Me)G)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IP-(TTDS)-NH2 方法A
86 AIC+SRS-((tBu)A)-PPI-((N-Me)C)+IPD-OH 方法B
87 AIC+SRS-((tBu)A)-P-(Oic)-IC+IPD-NH2 (HCl鹽) 方法A、F
88 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPD-OH 方法D
89 ((N-Me)G)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IP-(PEG5(22個原子))-NH2 方法A
90 ((N-Me)G)-IC+SRSL-((1S,2S,5R)-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-羧酸)-PI-(Pen)+IPE-NH2 方法A
91 (Orn)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-((N-Me)C)+I-NH2 方法A
92 (ACMP)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-((N-Me)C)+I-NH2 方法A
93 (3-Pal)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-NH2 方法D
94 (β-2-噻吩基丙胺酸)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-NH2 方法D
95 (Nle)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-NH2 方法D
96 aIC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+I-OH 方法D
97 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IP-(PEG4(19個原子))-NH2 方法A
98 AIC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-NH2 方法A
99 AIC+SRS-((tBu)A)-P-(Oic)-IC+I-NH2 方法A
100 ((N-Me)G)-((N-Me)I)-C+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+I-NH2 方法D
101 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPD-(PEG3(16個原子))-NH2 方法A
102 AIC+SRSLP-(rel-(1R,3R,5R,6R)-6-(三氟甲基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-羧酸)-IC+IPD-NH2 方法A
103 SIC+SRS-((tBu)A)-PPI-((N-Me)C)+I-NH2 方法A
104 AIC+SRS-((2-Bromo)F)-PPI-(Pen)+IPD-NH2 方法A
105 AIC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPE-NH2 方法D
106 ((N-Me)A)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPD-NH2 方法A
107 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPD-(PEG7(25個原子))-NH2 方法A
108 AIC+SRS-((tBu)A)-P-(Oic)-I-(Pen)+IPD-NH2 方法A
109 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IP-NH2 方法A、H
110 ((N-Me)A)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IP-OH 方法D
111 AIC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IP-OH 方法D
112 AIC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPE-OH 方法D
113 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IP-(PEG4-CH2CO2H (15個原子))-NH2 方法A
114 AIC+SRS-((tBu)A)-PP-((2S)-2-(胺基)-2-[(1S,3R)-3-羥基環己基]乙酸)-((N-Me)C)+IPD-NH2 方法A
115 (Hoo)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-NH2 方法D
116 (γ-Abu)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-NH2 方法D
117 AIC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+I-OH 方法D
118 AIC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPQ-OH 方法D
119 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPD-(TTDS)-NH2 方法A
120 A-((N-Me)I)-C+SRS-((tBu)A)-P-(Oic)-I-((N-Me)C)+IPD-NH2 方法A
121 AIC+SRS-((t-Bu)A)-PPIC+ID-OH 方法B
122 AIC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPE-NH2 方法D
123 AIC+SRSLP-(Oic)-I-((N-Me)C)+IP-NH2 方法A
124 HIC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-NH2 方法D
125 (Orn)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IP-NH2 方法D
126 ((N-Me)A)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IP-NH2 方法D
127 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IP-(PEG3(16個原子))-NH2 方法A
128 AIC+SRS-((tBu)A)-P-((4-CF3)P)-I-((N-Me)C)+IPD-NH2 方法A
129 AIC+SRS-((tBu)A)-P-(Oic)-IC+I-NH2 方法A
130 (2-(Piperidin)acetyl)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-NH2 方法K
131 ((N-Me)A)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPE-NH2 方法D
132 AIC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPQ-NH2 方法D
133 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPD-(PEG4-CH2CO2H (15個原子))-NH2 方法A
134 ((N-Me)A)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+I-OH 方法D
135 ((N-Me)A)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IP-NH2 方法A
136 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IP-(TTDS)-NH2 方法A
137 (2-(Diethylamino)acetyl)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-NH2 方法K
138 AIC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPE-OH 方法D
139 ((N-Me)A)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPQ-NH2 方法D
140 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IP-(PEG5(22個原子))-NH2 方法A
141 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPD-(PEG8(28個原子))-NH2 方法A
142 AIC+SRSL-(Pro-D2)-(Oic)-I-(Pen)+IPD-OH 氘
143 TIC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-NH2 方法D
144 (Orn)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IP-OH 方法D
145 ((N-Me)G)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IP-(PEG4(19個原子))-NH2 方法A
146 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPD-(PEG5(22個原子))-NH2 方法A
147 A-(Abu)-C+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-NH2 方法D
148 TIC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-OH 方法D
149 ((N-Me)G)-((N-Me)I)-C+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IP-NH2 方法D
150 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IP-(PEG7(25個原子))-NH2 方法A
151 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IP-(PEG9(31個原子))-NH2 方法A
152 ((N-Me)A)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+I-NH2 方法A
153 AIC+SRSLP-(Oic)-IC+IPD-OH 方法B
154 HIC+SRS-((tBu)A)-PPI-((N-Me)C)+I-NH2 方法A
155 AIC+SRS-((tBu)A)-P-(Oic)-I-((N-Me)C)+IPD-OH (HCl鹽) 方法B、F
156 ((N-Me)G)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IP-NH2 方法D
157 ((N-Me)G)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPP-NH2 方法D
158 AIC+SRS-((tBu)A)-P-((4-CF3)P)-IC+IPD-NH2 方法A、C
159 AIC+SRSLP-(Oic)-I-((N-Me)C)+I-NH2 方法A
160 aIC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+I-NH2 方法D
161 ((N-Me)A)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPE-OH 方法D
162 ((N-Me)A)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPD-OH 方法D
163 (Dab)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IP-NH2 方法A
164 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+I-((5-氮雜螺[2.4]庚烷-1-羧酸)-OH 方法B
165 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPD-NH2 方法A,D
166 (3-胺基-2,2-二甲基丙酸)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-NH2 方法A
167 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IP-OH 方法D
168 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IP-(PEG8(28個原子))-NH2 方法A
169 (Abu)-IC+SRSLPP-(Chg)-C+IPD-NH2 方法A
170 AIC+SRSLPPI-(Pen)+IPD-NH2 方法A
171 AIC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IP-(Tranexamic)-NH2 方法A
172 aIC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IP-NH2 方法A
173 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPE-NH2 方法D
174 ((N-Me)G)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IP-(PEG3(16個原子))-NH2 方法A、D
175 ((N-Me)A)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-((N-Me)C)+IPD-NH2 方法A
176 AIC+SRS-((tBu)A)-P-((2S,3aS,6aS)-八氫環戊并[b]吡咯-2-羧酸)-I-((N-Me)C)+IPD-NH2 方法A
177 AIC+SRS-((tBu)A)-P-(Oic)-I-((N-Me)C)+I-OH 方法B
178 (2-Pal)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-NH2 方法D
179 ((N-Me)A)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPQ-OH 方法D
180 AIC+SRSLP-(Oic)-I-((N-Me)C)+IPD-OH 方法B
181 FIC+SRS-((tBu)A)-PPI-((N-Me)C)+I-NH2 方法A
182 YIC+SRS-((tBu)A)-PPI-((N-Me)C)+I-NH2 方法A
183 AIC+SRS-((tBu)A)-PP-((2S)-2-(胺基)-2-[(1S,3S)-3-羥基環己基]乙酸)-((N-Me)C)+IPD-NH2 方法A
184 ((2S)-2[(胺基)-2-(四氫-2H-吡喃-4-基)]乙酸)-IC+SRSLP-(Oic)-IC+I-OH 方法E
185 AIC+SRSLP-(Oic)-I-((N-Me)C)+IPD-NH2 方法A
186 (Orn)-IC+SRS-((tBu)A)-PPIC+I-NH2 方法A
187 (4-(胺基甲基)苯甲酸)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-NH2 方法D
188 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+I-OH 方法D
189 aIC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPQ-OH 方法D
190 aIC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IP-OH 方法D
191 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPE-NH2 方法D
192 aIC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPE-NH2 方法D
193 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IP-((3-Carboxy)F)-NH2 方法A
194 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+I-((5-氮雜螺[2.4]庚烷-1-羧酸)-OH 方法B
195 (Dap)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+I-NH2 方法D
196 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPE-OH 方法D
197 ((N-Me)G)-IC+SRS-((2S)-2-胺基-3-(1-甲基環丙基)丙酸)-PPI-(Pen)+IP-NH2 方法A
198 AIC+SRS-((tBu)A)-P-(Oic)-I-((N-Me)C)+I-NH2 方法A
199 A-(Nva)-C+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-NH2 方法D
200 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPQ-NH2 方法D
201 aIC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPE-OH 方法D
202 aIC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPQ-NH2 方法D
203 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPQ-OH 方法D
204 (3-(胺基甲基)苯甲酸)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IP-NH2 方法D
205 G-((N-Me)I)-C+SRSLPPIC+IPD-NH2 (HCl鹽) 方法A、F
206 AIC+SRSLPP-(Chg)-(Pen)+IPD-NH2 方法D
207 ((N-Me)G)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IP-(PEG1(10個原子))-NH2 方法D
208 (ACBA)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+I-NH2 方法D
209 AIC+SRSLPP-((S)-2-胺基-3-乙基-戊酸)-C+IPD-NH2 方法A
210 AIC+SRS-((tBu)A)-PPIC+IDD-OH 方法B
211 FIC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-NH2 方法D
212 GIC+SRS-((tBu)A)-P-(Oic)-I-((N-Me)C)+IPD-NH2 方法A
213 ((N-Me)G)-GIC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-NH2 方法D
214 ((N-Me)G)-IC+SRS-((S)-(三氟甲基)-L-半胱胺酸)-PPI-(Pen)+IP-NH2 方法A
215 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPE-OH 方法D
216 (Nva)-IC+SRSLPPIC+IPD-NH2 方法A
217 aIC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPD-NH2 方法D
218 (4-Pal)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-NH2 方法D
219 (3-(胺基甲基)苯甲酸)-IC+SRS-((tBu)A)-PP-(Pen)+IP-NH2 方法D
220 AIC+SRSLPPIC+(Cbg)-PD-NH2 方法A
221 (Tranexamic)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IP-(PEG1(10個原子))-NH2 方法A
222 AIC+SRSLPP-(Chg)-C+IPD-OH 方法B
223 WIC+SRS-((tBu)A)-PPI-((N-Me)C)+I-NH2 方法A
224 AIC+SRSLP-(Oic)-IC+IPD-NH2 方法A
225 (Orn)-IC+SRSLPP-(Chg)-C+IPD-OH 方法B
226 (2-(3-吡啶基)乙酸)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IP-NH2 方法D
227 aIC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPD-OH 方法D
228 ((N-Me)G)-IC+SRSLPPIC+IPD-NH2 (HCl鹽) 方法A、F
229 (2-(Cyclohexylamino)acetyl)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-NH2 方法K
230 (Abu)-IC+SRSLPPIC+IPD-NH2 方法A
231 AIC+SRS-((tBu)A)-P-(Oic)-I-((N-Me)C)+IPD-OH 方法B
232 ((N-Me)G)-IC+SRSLPPI-((N-Me)C)+IPD-OH 方法B、C
233 aIC+SRS-((S)-(三氟甲基)-L-半胱胺酸)-PPI-(Pen)+IP-NH2 方法A
234 AIC+SRS-((tBu)A)-P-(Oic)-I-C+IPD-NH2 方法A
235 AIC+SRS-((2,5-Difluoro)F)-PPI-((N-Me)C)+IPD-NH2 方法A
236 (Orn)-IC+SRSLPPIC+I-NH2 方法A
237 AIC+SRSL-(L-脫氫脯胺酸)-(Oic)-I-(Pen)+IPD-OH 方法C
238 AIC+SRS-((2-Chloro)F)-PPI-((N-Me)C)+IPD-NH2 方法A
239 (4-(胺基甲基)苯甲酸)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-((N-Me)C)+IPD-NH2 方法A
240 (Orn)-IC+SRS-((S)-(三氟甲基)-L-半胱胺酸)-PPI-(Pen)+IP-NH2 方法A
241 AIC+SRSL-((4aR,6aR,9S,11aS)-11-側氧基-2,3,4,4a,6a,7,8,9,11,11a-十氫-1H-吡啶并[3,2-e]吡咯并[1,2-a]氮雜環庚烯-9-羧酸)-IC+IPD-NH2 方法A
242 (反式-2-(3-(胺基)環己基)乙酸)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IP-NH2 (非對映異構物#2) 方法A
243 ((N,N-diMe)A)-IC+SRS-((tBu)A)-PPIC+IPD-NH2 方法A
244 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+I-NH2 方法A、D
245 AIC+SRSLP-((6S)-5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-羧酸)-IC+IPD-NH2 方法A
246 ((N-Me)G)-IC+SRS-((tBu)A)-PPIC+IPD-OH 方法B
247 AIC+SRSLPP-(Chg)-C+I-NH2 方法A
248 AIC+SRS-((4-Fluoro)L)-PPIC+IPD-NH2 方法A
249 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IP-NH2 (乙酸鹽) 方法FA
250 ((N-Me)P)-IC+SRS-((tBu)A)-PPIC+IPD-NH2 方法A
251 (反式-2-(3-(胺基)環己基)乙酸)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IP-NH2 (非對映異構物#1) 方法A
252 AIC+SRSNPPI-(Pen)+IPD-NH2 方法D
253 ((N-Me)A)-IC+SRS-((tBu)A)-PPIC+IPD-NH2 方法A
254 AIC+SRSLPP-(Chg)-C+IPD-NH2 方法A
255 (Ahx)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IP-NH2 方法D
256 IC+SRS-((tBu)A)-PP-I-((N-Me)C)+IPD-NH2 方法A
257 kIC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+I-NH2 方法D
258 IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IP-OH 方法D
259 (哌啶-4-基乙酸)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-((N-Me)C)+I-NH2 方法K
260 A-((N-Me)I)-C+SRSLPPIC+IPD-NH2 方法A
261 G-((N-Me)I)-C+SRSLPPIC+IPD-NH2 方法A
262 AIC+SRSLPP-(Cpg)-C+IPD-NH2 方法A
263 (γ-Abu)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-((N-Me)C)+IPD-NH2 方法D
264 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IP-NH2 (酒石酸鹽) 方法FA
265 IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IP-OH 方法D
266 ((N-Me)G)-((N-Me)G)-((N-Me)G)-((N-Me)G)-((N-Me)G)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IP-NH2 方法A
267 ((N-Me)G)-IC+SRS-((2S)-2-胺基-3-(1-甲基環丙基)丙酸)-P-(Oic)-I-(Pen)+IP-NH2 方法A
268 AIC+SRS-((tBu)A)-P-(Oic)-I-((N-Me)C)+IPD-NH2 方法A
269 (Tranexamic)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IP-NH2 方法D
270 AIC+SRSLP-(Oic)-(Chg)-C+IPD-NH2 方法A
271 ((N-Me)G)-IC+SRSLPPIC+IPD-NH2 方法A
272 ((2-硫嗎福啉)乙醯基)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-NH2 方法K
273 (環丙基乙酸)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-NH2 方法D
274 (環丙基乙酸)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-((N-Me)C)+I-NH2 方法A
275 G-((N-Me)I)-C+SRSLPPIC+IPD-OH 方法B
276 G-((N-Me)I)-C+SRSLPPIC+IPd-OH 方法B
277 ((N-Me)G)-IC+SRSLPPIC+(allo-I)-PD-NH2 方法A
278 AIC+SR-(allo-T)-LPPIC+IPD-NH2 方法A
279 AIC+SRS-(3-(三甲基矽烷基)-L-丙胺酸)-P-(Oic)-I-((N-Me)C)+IPD-NH2 方法A
280 Ac-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-((N-Me)C)+I-NH2 方法D
281 ((N-Me)G)-IC+SRSLPPIC+IPD-OH 方法B、C
282 ((N-Me)G)-IC+SRSLPP-(Chg)-C+IPD-NH2 方法A
283 (2-(Morpholine)acetyl)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-NH2 方法K
284 (Cyclobutylacetic)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IP-NH2 方法D
285 (Tranexamic)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-((N-Me)C)+I-NH2 方法A
286 GIC+SRSLPPIC+I-(Aib)-D-OH 方法B
287 ((N-Me)G)-IC+SRSLPPIC+I-((trans-4-Fluoro)P)-D-OH 方法B
288 ((N-Me)G)-IC+TRSLPPIC+IPD-OH 方法B
289 ((N-Me)G)-IC+SRSLPP-IC+I-((2-Me)P)-D-OH 方法B
290 Ac-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-NH2 方法D
291 FIC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IP-NH2 方法C
292 AIC+SRSLP-(Oic)-IC+I-OH 方法E
293 IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPD-NH2 方法A、D
294 (Benzoic)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-NH2 方法D
295 (苯基乙酸)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-NH2 方法D
296 (四氫-2H-吡喃-3-基乙酸)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IP-NH2 方法A
297 ((N-Me)A)-IC+SRSLPPIC+IPD-NH2 方法A
298 ((N-Ph)G)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-((N-Me)C)+I-NH2 方法A
299 (Orn)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-((N-Me)C)+(2-[(1S,2S)-1-(胺基)-2-甲基丁基]-1,3-㗁唑-4-羧酸)-D-NH2 方法A
300 (2-Hydroxyacetyl)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-NH2 方法K
301 (Cyclobutanecarboxylic)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-((N-Me)C)+I-NH2 方法A
302 AIC+SRSLPP-((3-Chloro-Ph)G)-C+IPD-NH2 方法A
303 IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPP-NH2 方法D
304 (四氫-2H-吡喃-3-基乙酸)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IP-NH2 方法A
305 (四氫吡喃基-4-乙酸)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-((N-Me)C)+I-NH2 方法A
306 (β-A)-IC+SRSLPPIC+IPD-OH 方法B
307 (2-(N-Methyl-N-cyclopropylamino)acetyl)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-NH2 方法K
308 (Cyclobutanecarboxylic)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-NH2 方法D
309 (Isovaleric)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-NH2 方法D
310 ((N-Me)G)-I-(Pen)+SRS-((tBu)A)-PPI-C+IP-NH2 方法D
311 ((N-Ph)G)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IP-NH2 方法D
312 ((N-Me)G)-IC+SRSLPPIC+IPd-OH 方法B
313 ((N-Me)G)-IC+SRSLPPIC+I-(Abu)-D-OH 方法B
314 AIC+SRS-(AAD)-PP-I-((N-Me)C)+IPD-NH2 方法A
315 (Cyclopropanecarboxylic)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-NH2 方法D
316 IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IP-NH2 方法D
317 ((N-Me)G)-IC+SRSLPPIC+ID-NH2 方法A
318 ((N-Me)G)-IC+SRSLPPIC+IPD-OH (HCl-鹽) 方法B、F
319 (Tranexamic)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-((N-Me)C)+IPD-NH2 方法A
320 (PEG1(10個原子))-AIC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-NH2 方法D
321 ((N-Me)G)-IC+SRS-(Cnba)-PPI-(Pen)+IPD-NH2 方法D
322 ((tBu)A)-GIC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IP-NH2 方法D
323 GIC+SRSLP-(Oic)-IC+IPD-OH 方法B
324 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-((1R,3S,5R)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-羧酸)-IC+IPD-OH 方法B
325 ((N-Me)G)-IC+SRSLPPIC+(Phg)-PD-OH 方法B
326 AIC+SRSLP-(3,3-二甲基-1,3-氮雜矽雜環戊烷-5-羧酸)-IC+IPD-NH2 方法A
327 (3-甲氧基丙酸)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-NH2 方法D
328 ((1S,2S,4S)-雙環[2.2.1]庚-5-烯-2-基乙酸)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-NH2 (未知之羥基化副產物) 方法D
329 ((N-Me)G)-IC+SRSLPPIC+I-((N-Me)G)-D-OH 方法B
330 ((3-Bromo)F)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-NH2 方法D
331 A-(allo-I)C+SRSLPPIC+IPD-NH2 方法A
332 (Ahx)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-((N-Me)C)+IPD-NH2 方法A
333 (第三丁基乙酸)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-((N-Me)C)+I-NH2 方法A
334 (環戊烷羧酸)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-NH2 方法A
335 ((tBu)A)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IP-OH 方法D
336 IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IP-NH2 方法D
337 AIC+SRS-((2S)-2-胺基-4,4,4-三氟丁酸)-PPI-((N-Me)C)+IPD-NH2 方法A
338 ((2S,3S)-2-[(3R)-3-胺基-2-側氧基吡咯啶-1-基]-3-甲基戊酸)-C+SRSLPPIC+IAD-OH 方法B
339 ((N-Me)G)-IC+SRSLPPIC+IPE-OH 方法B
340 ((N-Me)G)-((N-Me)I)-C+SRSLPPIC+IPD-NH2 方法A
341 IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+I-NH2 方法D
342 (四氫吡喃基-4-乙酸)-IC+SRS-((tBu)A)-PPIC+IPD-NH2 方法D
343 (Cyclopentylacetic)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-NH2 方法A
344 AIC+SRS-(2-胺基-7-(第三丁氧基)-7-側氧基庚酸)-PPI-(Pen)+IPD-NH2 方法A
345 IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+I-NH2 方法D
346 AIC+SRSLPP-(allo-I)-C+IPD-NH2 方法A
347 IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPD-OH 方法B、D
348 GIC+SRSLPPIC+I-(Hyp)-D-OH 方法B
349 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-IC+IPD-OH 方法B
350 ((N,N-diMe)G)-IC+SRSLPPIC+IPD-NH2 方法A
351 (Cyclobutylacetic)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-NH2 方法D
352 (D-(+)生物素)-(Ahx)-AIC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-OH 方法D
353 (Cyclopropanecarboxylic)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-((N-Me)C)+I-NH2 方法A
354 ((N-Me)G)-IC+SRSL-((trans-4-Fluoro)P)-PIC+IPD-OH 方法B
355 AIC+SRSLP-((3S-OH)P)-IC+IPD-NH2 方法A
356 ((S)-3-甲基戊酸)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-NH2 方法A
357 GIC+SRSL-(Morpholine-3-carboxylic)-PIC+IPD-OH 方法B
358 (Isovaleric)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-((N-Me)C)+I-NH2 方法D
359 (第三丁基乙酸)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IP-NH2 方法D
360 (4-(3,5-二甲基-1,2-㗁唑-4-基)-L-苯基丙胺酸)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IP-NH2 方法C
361 ((N-Me)G)-PIC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IP-NH2 方法D
362 (4-(胺基甲基)苯甲酸)-IC+SRSLPPI-((N-Me)C)+IPD-NH2 方法A
363 (D-(+)生物素)-(Ahx)-AIC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-NH2 方法D
364 (Tranexamic)-IC+SRSLPPI-((N-Me)C)+IPD-NH2 方法A
365 (4-Methylvaleric)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-NH2 方法D
366 (5-氯噻吩-2-羧酸)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-NH2 方法D
367 ((N-Me)G)-IC+SRSLPPIC+I-(Oic)-D-OH 方法B
368 IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+I-OH 方法D
369 IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPE-OH 方法D
370 fIC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IP-NH2 方法C
371 PPIC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+I-NH2 方法D
372 IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPE-NH2 方法D
373 (Aib)-IC+SRSLPPIC+IPD-NH2 方法A
374 AIC+SRSLPPIC+(2-甲基-D-別異白胺酸)-PD-NH2 方法A
375 (4-Methylvaleric)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-OH 方法D
376 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IP-NH2 (檸檬酸鹽) 方法FA
377 IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPQ-NH2 方法D
378 PPIC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IP-NH2 方法D
379 ((N-Me)I)-C+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IP-NH2 方法D
380 GIC+SRSL-(Hyp)-PIC+IPD-OH 方法B
381 ((N-Me)G)-(Orn)-(Orn)-(Orn)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IP-NH2 方法C
382 (Cyclobutylacetic)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-((N-Me)C)+I-NH2 方法A
383 (Ahx)-IC+SRSLP-(Oic)-IC+I-OH 方法E
384 GIC+SRS-((Trifluoro)l/L)-PPIC+IPD-OH 方法B
385 (Hydrocinnamic)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-NH2 方法D
386 ((N-Me)G)-IC+SRSLPPIC+IpD-OH 方法B
387 (Lactic)-IC+SRS-((tBu)A)-PPIC+IPD-NH2 方法A
388 IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPQ-OH 方法D
389 AIC+SRSLPP-(環丁基甘胺酸)-C+IPD-NH2 方法A
390 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-((trans-4-Fluoro)P)-IC+IPD-OH 方法B
391 (Cyclohexylcarboxylic)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-((N-Me)C)+IPD-NH2 方法A
392 (2-hydroxyisobutyric)-IC+SRS-((tBu)A)-PPIC+IPD-NH2 方法A
393 ((2S,3S)-2-[(3S)-2-側氧基哌𠯤-1-基]-3-甲基戊酸)-C+SRSLPPIC+IAD-OH 方法B
394 ((N-Me)G)-IC+SRSLPPIC+IPN-OH 方法B
395 (己二酸)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-NH2 方法D
396 (第三丁基乙酸)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+I-NH2 方法D
397 ((2S,3S)-2-[2-側氧基哌𠯤-1-基]-3-甲基戊酸)-C+SRSLPPIC+IPD-OH 方法B
398 (Pivalic)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-((N-Me)C)+I-NH2 方法A
399 (Orn)-AIC+SRS-((tBu)A)-PPI-((N-Me)C)+IPD-NH2 方法A
400 (富馬酸)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-NH2 方法D
401 GIC+SRSL-(Pip)-PIC+ID-OH 方法B
402 ((N-Me)G)-I-(Pen)+SRSLPPIC+IPD-OH 方法B
403 AIC+S-((Me)R)-S-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-NH2 方法A
404 (異丁酸)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-((N-Me)C)+IPD-NH2 方法A
405 ((N-Me)G)-(Orn)-(Orn)-(Orn)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IP-NH2 方法C
406 (Hydrocinnamic)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-OH 方法D
407 (辛二酸)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-NH2 方法D
408 (環戊烷羧酸)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-((N-Me)C)+I-NH2 方法A
409 (PEG1(10個原子))-GIC+SRSLPPIC+IPD-OH 方法B
410 GIC+SRSLP-(Hyp)-IC+IPD-OH 方法B
411 AIC+SRS-((tBu)G)-PPI-C+IPD-NH2 方法A
412 ((N-Me)G)-IC+KRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IP-NH2 方法D
413 ((N-Me)G)-IC+SR-(Dap)-LPPIC+IPD-OH 方法B
414 GIC+SRSLP-((cis-Fluoro)P)-IC+IPD-OH 方法B
415 (Cyclohexylacetic)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-NH2 方法A
416 GIC+SRS-((4-Bromo)F)-PPIC+IPD-OH 方法B
417 AIC+SRSLPPIC+((2S,3S)-2-((胺基)甲基)-3-甲基戊酸)-PD-NH2 方法A
418 AIC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPN-OH 方法C
419 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+I-((5-氮雜螺[2.4]庚烷-1-羧酸)-OH 方法B
420 AIC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPD-NH2 (乙酸鹽) 方法FA
421 (Tranexamic)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IP-(PEG2(13個原子))-NH2 方法A
422 (Tranexamic)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IP-(PEG4-CH2CO2H (15個原子))-NH2 方法A
423 (Tranexamic)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IP-(PEG3(16個原子))-NH2 方法A
424 (Tranexamic)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IP-(PEG5-CH2CO2H (18個原子))-NH2 方法A
425 (Tranexamic)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IP-(PEG5(22個原子))-NH2 方法A
426 (Tranexamic)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IP-(PEG7(25個原子))-NH2 方法A
427 (Tranexamic)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IP-(PEG8(28個原子))-NH2 方法A
428 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPD-(PEG9(31個原子))-NH2 方法A
429 (Tranexamic)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IP-(TTDS)-NH2 方法A
430 ((N-Me)G)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IP-(Orn)-(Orn)-(Orn)-NH2 方法A
431 AIC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPD-OH (鈉鹽) 方法B、L
432 AIC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPD-OH (膽鹼鹽) 方法B、L
433 ((N-Me)G)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-((N-Me)G)-((N-Me)G)-((N-Me)G)-NH2 方法A
434 (ODD)-AIC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPD-OH 方法B
435 (Tranexamic)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IP-(PEG4(19個原子))-NH2 方法A
436 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPP-((2S)-3-(三唑-1-基)-2-(胺基)丙酸)-NH2 方法A
437 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IP-((2S)-3-(三唑-1-基)-2-(胺基)丙酸)-NH2 方法A
438 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IP-((5-氮雜螺[2.4]庚烷-1-羧酸)-OH 方法B
439 ((N-Me)G)-IC+SRS-((tBu)A)-P-((6S)-5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-羧酸)-I-(Pen)+IP-NH2 方法A
440 ((N-Me)G)-IC+SRS-((2S)-3-(2,3-二氟苯基)-2-胺基丙酸)-PPI-(Pen)+IP-NH2 方法A
441 ((N-Me)G)-IC+SRS-((2S)-3-(2,3-二氟苯基)-2-胺基丙酸)-P-(Oic)-I-(Pen)+IP-NH2 方法A
442 ((N-Me)G)-IC+SRS-((tBu)A)-P-((1S,2S,5R)-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-羧酸)-I-(Pen)+IPD-OH 方法C
443 ((N-Me)A)-IC+SRS-((tBu)A)-P-((3R,6R)-1,1-二氟-5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-羧酸(對映異構物1))-I-(Pen)+IP-NH2 方法A
444 ((3-Me)H)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IP-NH2 方法A
445 ((N-Me)A)-IC+SRS-((tBu)A)-P-((3R,6R)-1,1-二氟-5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-羧酸(對映異構物2))-I-(Pen)+IP-NH2 方法A
446 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IP-(Ida)-OH 方法C
447 ((N-Me)G)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IP-((1-Bn)H)-OH 方法C
448 ((N-Me)G)-IC+RRS-((tBu)A)-PP-(Nva)-(Pen)+IP-NH2 方法D
449 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IP-((1R,3S)-3-(胺基)環戊烷羧酸)-OH 方法B
450 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IP-((R)-4-胺基-6-甲基庚酸)-OH 方法B
451 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IP-((S)-(1-哌啶-3-基)-乙酸)-OH 方法B
452 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IP-((1S,3R)-3-(胺基)環戊烷羧酸)-OH 方法B
453 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IP-((S)-3-(1-吡咯啶-2-基)-丙酸)-OH 方法B
454  ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPN-OH 方法B、C
455 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IP-(β-homo-P)-OH 方法B
456 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IP-((S)-吡咯啶-3-羧酸)-OH 方法B
457 ((2,4-二側氧基咪唑啶-1-基)乙酸)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPD-OH 方法B
458 AIC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IP-(*Dap)-OH 方法C
459 ((R)-哌啶-3-羧酸)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+I-OH 方法C
460 ((S)-哌啶-3-羧酸)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+I-OH 方法C
461 (8-胺基立方烷-1-羧酸)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-OH 方法B
462 ((N-Me)A)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IP-((N-Benzyl)D)-NH2 方法I
463 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPDK-OH 方法C
464 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPGD-OH 方法C
465 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPD-(Ahx)-OH 方法C
466 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPDD-OH 方法C
467 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IP-(*Dap)-OH 方法J
468 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IP-(PEG2(13個原子))-OH 方法C
469 (Orn)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPD-OH 方法C
470 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IP-(PEG4-CH2CO2H (15個原子))-OH 方法C
471 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPD-(PEG4-CH2CO2H (15個原子))-OH 方法C
472 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IP-(PEG5(22個原子))-OH 方法C
473 AIC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPD-OH (乙酸鹽) 方法FA
474 ((N-Me))-GIC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+I-((S)-4-哌𠯤-2-羧酸)-OH 方法B
475 (哌啶-4-基乙酸)-IC+SRS-((tBu)A)-PPIC+IPD-OH 方法C
476 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IP-(4-胺基甲基苯基乙酸)-OH 方法C
477 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IP-(3-胺基甲基苯基乙酸)-OH 方法C
478 aIC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)-+IP-(3-胺基甲基苯基乙酸)-OH 方法C
479 (Orn)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-((N-Me)C)+IPD-OH 方法C
480 (β-P)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-OH 方法C
481 (β-p)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-OH 方法C
482 ((N-Me)G)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IP-((3-Carboxy)F)-OH 方法C
483 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IP-((3-Carboxy)F)-OH 方法C
484 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPD-(PEG2(13個原子))-OH 方法C
485 ((N-Me)G)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IP-(PEG3(16個原子))-OH 方法C
486 ((N-Me)G)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IP-(Orn)-D-OH 方法C
487 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPR-OH 方法C
488 ((R)-哌啶-3-羧酸)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPD-OH 方法C
489 ((S)-哌啶-3-羧酸)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPD-OH 方法C
490 (4-羧基苯甲酸)-GIC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPD-OH 方法C
491 (3-羧基苯甲酸)-GIC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPD-OH 方法C
492 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPT-OH 方法C
493 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPY-OH 方法C
494 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPDA-OH 方法C
495 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPGd-OH 方法C
496 ((N-Me)G)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IP-(PEG5-CH2CO2H(18個原子))-OH 方法C
497 ((N-Me)G)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IP-((N-Me)G)-((N-Me)G)-((N-Me)G)-OH 方法C
498 ((N-Me)G)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IP-(PEG1(10個原子))-OH 方法C
499 AIC+S-(Arg(13C6,15N4))-SLP-(Oic)-I-(Pen)+IPD-OH (HCl鹽) 方法B、F
500 ((N-Me)G)IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPD-(PEG1(10個原子))-OH 方法C
501 ((N-Me)G)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-(PEG3(16個原子))-OH 方法C
502 (Pyrrolidineacetyl)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-OH 方法C
503 ((N-Me)G)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IP-(PEG9(31個原子))-OH 方法C
504 ((N-Me)G)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-(PEG9(31個原子))-OH 方法C
505 ((N-Me)G)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IP-(PEG8(28個原子))-OH 方法C
506 ((N-Me)G)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IP-(PEG4-CH2CO2H(15個原子))-OH 方法C
507 AIC+SRSL-((1S,2S,5R)-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-羧酸)-PI-(Pen)+IPD-OH 方法B
508 ((N-Me)G)-IC+SRS-(2-胺基-5,5,5-三氟-4-甲基-戊酸)-PPI-(Pen)+IPD-OH 方法B
509 ((N-Me)G)-IC+SRS-((2S)-2-胺基-5-甲基-己酸)-PPI-(Pen)+IPD-OH 方法B
510 ((2S)-2-(嗎福啉-4-基)丙酸)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPD-OH 方法B
511 AIC+SRSLPP-((3-Chloro-Ph)G)-C+IPD-OH 方法C
512 (ODD)-AIC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPD-(Orn)-OH 方法C
513 (ODD)-(Orn)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPD-OH 方法C
514 ((N-Me)G)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IP-(PEG2(13個原子))-OH 方法C
515 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IP-(AAD)-OH 方法C
516 AIC+SRSLP-((4-CF3)P)-IC+IPD-OH 方法C
517 AIC+SRS-((tBu)A)-P-((4-CF3)P)-I-(Pen)+IPD-OH 方法C
518 ((N-Me)G)-FC+TRK-((tBu)A)-(Pen)+YPD-OH 方法C
519 ((N-Me)G)-IC+SRS-((2,5-Difluoro)F)-PPI-(Pen)+IPD-OH 方法C
520 ((N-Me)G)-IC+SRS-((2,5-Difluoro)F)-PPI-(Pen)+IPe-OH 方法C
521 ((N-Me)G)-IC+SRS-((2,5-Difluoro)F)-PPI-(Pen)+IPDd-OH 方法C
522 aIC+SRS-((tBu)A)-P-((6S)-5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-羧酸)-I-(Pen)+IPD-OH 方法C
523 aIC+SRS-((tBu)A)-P-((6S)-5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-羧酸)-I-(Pen)+IPe-OH 方法C
524 AIC+SRS-((tBu)A)-P-((4-CF3)P)-IC+IPD-OH 方法C
525 ((N-Me)G)-IC+SRS-((2S)-2-胺基-3-(1-甲基環丙基)丙酸)-P-(Oic)-I-(Pen)+IPD-OH 方法B
526 ((N-Me)G)-IC+SRS-((tBu)A)-P-((1S,2S,5R)-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-羧酸)-I-(Pen)+IPD-OH 方法C
527 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IP-(Freidinger's Lactam)-OH 方法C
528 pIC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IP-(Ida)-OH (HCl鹽) 方法C
529 (Orn)-IC+SRS-((2R)-2-胺基-3-(三氟甲基硫烷基)丙酸)-PPI-(Pen)+IPD-OH 方法C
530 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IP-((R)-吡咯啶-3-乙酸)-OH 方法C
531 ((N-Me)G)-IC+SRS-((tBu)A)-P-((3S)-2-氮雜螺[4.4]壬烷-3-羧酸)-I-(Pen)+IPD-OH 方法C
532 ((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IP-((R)-吡咯啶-3-羧酸)-OH 方法C
表15：參考肽之分析數據
參考編號 滯留時間 (min) LC-MS 方法 1 純度 (%) 確實質量計算值 (g/mol) 確實質量實測值 (g/mol) 電離化 LC-MS 純度 (%) 方法 W2 LC-MS 純度 (%) 方法 W3
1 8.68 方法1 ＞ 99 1467.7214 1467.7344 [M+2H]2+    
2 8.75 方法1 ＞ 99 1467.7200 1467.7400 [M+2H]2+    
3 4.37 方法2 94.79 1466.7374 1466.7408 [M+2H]2+    
A 4.66 方法6 ＞ 99 1481.7371 1481.7600 [M+2H]2+    
ˊ 8.59 方法1 ＞ 99 1480.7500 1480.7600 [M+2H]2+    
C 8.88 方法1 95.00 1480.7530 1480.7632 [M+2H]2+    
表16：根據本發明所製備肽之分析數據
實例 編號 滯留時間 (min) LC-MS 方法 1 純度 (%) 確實質量 計算值 (g/mol) 確實質量實測值 (g/mol) 電離 化 LC-MS 純度 (%) 方法 W2 LC-MS 純度 (%) 方法 W3
4 7.98 方法4 93.11 1721.9208 1721.9344 [M+2H]2+    
5 8.61 方法4 96.38 1563.8153 1563.8286 [M+2H]2+    
6 9.69 方法1 ＞ 99 1324.7359 1325.7380 [M+H]+ 98.49 98.16
7 7.92 方法4 96.55 1650.9201 1650.9384 [M+2H]2+    
8 6.90 方法4 100 1433.7887 1433.807 [M+2H]2+    
9 7.78 方法4 97.50 1548.8156 1548.8322 [M+2H]2+ 93.70 95.10
10 9.22 方法1 82.28 1536.8156 1536.8320 [M+2H]2+ 91.50 90.10
11 9.26 方法1 93.15 1522.8000 1522.8258 [M+2H]2+    
12 9.41 方法1 ＞ 99 1523.7840 1523.8060 [M+2H]2+    
13 8.52 方法4 ＞ 99 1563.8153 1563.8346 [M+2H]2+ 98.68 97.99
14 9.97 方法1 99.07 1577.8310 1577.8558 [M+2H]2+    
15 9.33 方法1 92.48 1562.8313 1562.8476 [M+2H]2+    
16 7.67 方法4 95.58 1654.915 1654.9296 [M+2H]2+    
17 9.21 方法1 95.00 1534.8000 1534.8246 [M+2H]2+    
18 8.8 方法1 ＞ 99 1566.8262 1566.8502 [M+2H]2+    
19 8.94 方法1 90.00 1593.8483 1593.8616 [M+2H]2+    
20 9.71 方法1 95.90 1478.7374 1478.7458 [M+2H]2+    
21 9.3 方法1 95.59 1537.7997 1536.8342 [M+2H]2+ 97.00 95.80
22 9.14 方法1 94.83 1521.8160 1521.8338 [M+2H]2+ 96.30 95.60
23 8.09 方法4 ＞ 99 1475.8356 1475.8488 [M+2H]2+ 88.40 89.20
24 9.21 方法1 92.48 1536.8156 1536.8304 [M+2H]2+ 97.40 93.20
25 9.48 方法1 98.21 1296.7046 1297.7152 [M+H]+    
26 9.72 方法1 ＞ 99 1562.8313 1562.8562 [M+2H]2+    
27 4.00 方法3 ＞ 99 1562.8313 1562.8518 [M+2H]2+    
28 9.87 方法1 ＞ 99 1338.7516 1338.7530 [M+H]+ 98.77 97.66
29 8.56 方法4 ＞ 99 1563.8153 1563.82 [M+2H]2+    
30 4.71 方法2 ＞ 99 1508.7843 1508.7874 [M+2H]2+    
31 9.64 方法1 ＞ 99 1549.7997 1549.8095 [M+H]+    
32 9.2 方法1 86.00 1548.8156 1548.8232 [M+2H]2+ 92.70 90.10
33 7.28 方法4 100 1459.8043 1459.8218 [M+2H]2+    
34 8.08 方法4 100 1786.9937 1788.024 [M+2H]2+    
35 8.87 方法1 95.00 1565.8422 1565.8538 [M+2H]2+    
36 9.29 方法1 95.00 1535.7840 1535.8108 [M+2H]2+    
37 9.14 方法1 ＞ 99 1282.6890 1282.7012 [M+2H]2+    
38 8.9 方法1 ＞ 99 1381.7686 1381.7800 [M+H]+    
39 7.70 方法4 97.08 1566.8626 1566.8794 [M+2H]2+    
40 9.01 方法1 83.81 1608.8480 1608.8640 [M+2H]2+ 96.30 92.40
41 9.64 方法1 95.00 1534.8000 1534.9346 [M+2H]2+    
42 7.23 方法4 ＞ 99 1546.8225 1546.8388 [M+2H]2+ 96.40 96.10
43 7.9 方法4 ＞ 99 1378.7829 1378.8 [M+2H]2+ 96.27 97.01
44 8.10 方法4 96.58 1875.0461 1876.06 [lM+2H]2+    
45 9.49 方法1 88.00 1548.8156 1548.8380 [M+2H]2+    
46 9.59 方法1 91.55 1548.8156 1548.8286 [M+2H]2+    
47 9.24 方法1 80.00 1550.8313 1550.8442 [M+2H]2+ 96.50 93.60
48 9.57 方法1 ＞ 99 1508.7843 1508.7916 [M+2H]2+    
49 8.67 方法1 ＞ 99 1565.8422 1565.8560 [M+2H]2+    
50 9.08 方法1 ＞ 99 1605.8735 1605.8984 [M+2H]2+    
51 9.16 方法1 71.28 1522.8000 1522.8128 [M+2H]2+ 95.10 94.50
52 9.28 方法1 78/21 1534.8000 1534.8128 [M+2H]2+ 95.76 92.92
53 9.41 方法1 ＞ 99 1326.7152 1326.7209 [M+H]+ 98.66 97.12
54 9.45 方法1 91.46 1550.8313 1550.8464 [M+2H]2+ 94.20 94.70
55 7.83 方法4 94.68 1684.9256 1685.9558 [M+2H]2+    
56 4.60 方法4 90.76 1865.0379 1866.0744 [M+4H]4+    
57 7.15 方法4 98.44 1620.8844 1620.8984 [M+2H]2+    
58 8.21 方法4 100 1598.8313 1598.8554 [M+2H]2+    
59 9.07 方法1 ＞ 99 1523.7476 1523.7686 [M+2H]2+    
60 9.63 方法1 94.50 1564.8469 1564.8598 [M+2H]2+ 93.30 92.20
61 7.50 方法4 ＞ 99 1350.7516 1350.7642 [M+2H]2+ 96.00 97.10
62 8.23 方法4 100 1765.947 1765.9622 [M+2H]2+    
63 8.59 方法4 100 1839.9838 1841.0094 [M+2H]2+    
64 7.12 方法4 100 1405.7574 1405.7800 [M+2H]2+    
65 9.75 方法1 ＞ 99 1338.7516 1338.7650 [M+H]+    
66 9.11 方法1 95.21 1508.7843 1508.8020 [M+2H]2+    
67 7.72 方法4 ＞ 99 1447.8043 1447.8184 [M+2H]2+    
68 9.62 方法1 84.01 1564.8469 1564.8638 [M+2H]2+ 95.30 95.80
69 9.5 方法1 85.69 1550.8313 1550.8490 [M+2H]2+ 93.00 93.90
70 7.58 方法4 ＞ 99 1609.832 1609.8478 [M+2H]2+    
71 5.06 方法4 99.17 1447.8043 1447.7710 [M+2H]2+ 98.10 96.30
72 7.34 方法4 97.29 1610.8888 1610.9054 [M+2H]2+    
73 7.5 方法4 94.66 1640.8994 1640.913 [M+2H]2+    
74 7.94 方法4 95.69 1831.0199 1831.04 [M+2H]2+    
75 8.19 方法4 ＞ 99 1562.8313 1562.842 [M+2H]2+    
76 7.78/7.80 方法4 100/100 1606.8939 1606.9108/1606.9078 [M+2H]2+    
77 8.96 方法1 ＞ 99 1551.8265 1551.8418 [M+2H]2+    
78 8.92 方法1 ＞ 99 1551.8265 1551.8382 [M+2H]2+    
79 8.79 方法1 ＞ 99 1353.7625 1353.7738 [M+2H]2+    
80 9.41 方法1 98.76 1564.8469 1564.8612 [M+2H]2+    
81 9.9 方法1 87.34 1637.8422 1637.8578 [M+2H]2+ 94.30 94.50
82 9.25 方法1 87.40 1534.8000 1534.8166 [M+2H]2+ 94.40 93.10
83 8.22 方法4 100 1724.9569 1724.9722 [M+2H]2+    
84 8.37 方法4 100 1853.9995 1854.0168 [M+2H]2+    
85 7.64 方法4 100 1709.9572 1709.98 [M+2H]2+    
86 9.56 方法1 ＞ 99 1509.7684 1509.7790 [M+2H]2+    
87 9.71 方法1 88.65 1548.8156 1548.8324 [M+2H]2+    
88 8.56 方法4 ＞ 99 1563.8153 1563.8338 [M+2H]2+ 99.49 98.88
89 7.71 方法4 94.93 1742.9674 1742.9808 [M+2H]2+    
90 7.25 方法4 100 1534.8 1534.8136 [M+2H]2+    
91 8.93 方法1 92.60 1339.7468 1339.7460 [M+2H]2+    
92 9.59 方法1 98.22 1322.7203 1322.7270 [M+2H]2+    
93 8.92 方法1 79.37 1599.8265 1599.8390 [M+2H]2+ 97.20 94.40
94 9.69 方法1 91.51 1604.7877 1604.7942 [M+2H]2+ 92.80 92.70
95 9.71 方法1 85.46 1564.8469 1564.8626 [M+2H]2+ 93.20 91.60
96 7.53 方法4 ＞ 99 1351.7356 1351.7356 [M+2H]2+ 95.30 96.20
97 8.19 方法4 96.25 1738.9725 1739.98 [M+2H]2+    
98 9.19 方法1 97.50 1522.8000 1522.8170 [M+2H]2+    
99 9.75 方法1 ＞ 99 1336.7359 1337.7410 [M+H]+    
100 6.83 方法4 ＞ 99 1324.7359 1324.7552 [M+2H]2+ 99.60 99.50
101 8.25 方法4 99.42 1809.9733 1810.9926 [M+2H]2+    
102 9.59 方法1 92.37 1560.7404 1560.7566 [M+2H]2+    
103 9.31 方法1 ＞ 99 1312.6995 1312.7116 [M+2H]2+    
104 9.44 方法1 ＞ 99 1620.6792 1622.6874 [M+2H]2+    
105 7.82 方法4 96.96 1576.8469 1576.8664 [M+2H]2+ 96.10 97.20
106 8.12 方法4 96.29 1576.8469 1576.8624 [M+2H]2+ 91.60 93.40
107 8.74 方法4 93.03 1942.0519 1943.0778 [M+2H]2+    
108 9.87 方法1 98.00 1576.8469 1576.8632 [M+2H]2+    
109 8.05 方法4 ＞ 99 1447.8043 1447.8228 [M+2H]2+ 99.50 99.30
110 8.57 方法4 ＞ 99 1462.8040 1462.8150 [M+2H]2+ 97.30 96.70
111 8.5 方法4 ＞ 99 1448.7884 1448.8082 [M+2H]2+ 99.00 99.20
112 8.34 方法4 ＞ 99 1577.8310 1577.8388 [M+2H]2+ 97.20 95.20
113 8.22 方法4 91.92 1680.9307 1680.9486 [M+2H]2+    
114 8.76 方法1 97.00 1550.7949 1550.8186 [M+2H]2+    
115 9.43 方法1 85.65 1591.7851 1591.8010 [M+2H]2+ 95.50 93.70
116 9.13 方法1 85.75 1536.8156 1536.8316 [M+2H]2+ 95.90 92.90
117 8.12 方法4 ＞ 99 1351.7356 1351.7492 [M+2H]2+ 99.10 98.90
118 5.19 方法4 ＞ 99 1576.8469 1576.8658 [M+2H]2+ 98.00 98.00
119 8.32 方法4 100 1865.0155 1866.0304 [M+2H]2+    
120 9.9 方法1 97.00 1576.8469 1576.8738 [M+2H]2+    
121 8.95 方法1 ＞ 99 1398.6999 1398.7090 [M+H]+    
122 7.77 方法4 ＞ 99 1576.8469 1576.8580 [M+2H]2+ 96.70 96.70
123 10 方法1 ＞ 99 1433.7887 1433.7986 [M+2H]2+    
124 8.84 方法1 88.44 1588. 8218 1588.8398 [M+2H]2+ 96.90 94.40
125 5.83 方法4 ＞ 99 1450.8152 1450.8322 [M+2H]2+ 99.60 98.60
126 7.35 方法4 ＞ 99 1421.7887 1421.8074 [M+2H]2+ 99.30 98.24
127 8.04 方法4 94.16 1694.9463 1694.9594 [M+2H]2+    
128 9.87 方法1 ＞ 99 1576.7717 1576.7832 [M+2H]2+    
129 9.79 方法1 ＞ 99 1336.7359 1336.7440 [M+H]+    
130 7.76 方法4 ＞ 99 1576.8469 1576.8588 [M+2H]2+    
131 7.98 方法4 ＞ 99 1590.8626 1590.8774 [M+2H]2+ 98.50 98.20
132 7.63 方法4 98.57 1575.8620 1575.8764 [M+2H]2+ 92.10 98.00
133 8.41 方法4 100 1795.9576 1796.9876 [M+2H]2+    
134 8.24 方法4 ＞ 99 1365.7512 1365.7660 [M+2H]2+ 99.60 98.90
135 8.00 方法4 ＞ 99 1461.8200 1461.8346 [M+2H]2+ 95.70 95.31
136 8.36 方法4 100 1749.9885 1751.0162 [M+2H]2+    
137 7.68 方法4 ＞ 99 1564.8469 1564.8598 [M+2H]2+    
138 8.39 方法4 ＞ 99 1577.8310 1577.9858 [M+2H]2+ 98.90 98.80
139 7.91 方法4 ＞ 99 1589.8786 1589.8942 [M+2H]2+ 96.50 98.40
140 7.91 方法4 94.59 1782.9987 1783.02 [M+2H]2+    
141 8.78 方法4 100 1986.0781 1987.1064 [M+2H]2+    
142 2.95 方法14 90.10 1565.7997 1565.8520 [M+2H]2+    
143 7.42 方法4 94.92 1552.8106 1552.8338 [M+2H]2+ 95.10 93.50
144 6.45 方法4 ＞ 99 1451.7993 1451.8158 [M+2H]2+ 96.00 96.00
145 7.92 方法4 93.08 1698.9412 1699.9666 [M+2H]2+    
146 8.54 方法4 98.92 1898.0257 1899.0438 [M+2H]2+    
147 9.03 方法1 82.90 1494.7687 1494.7820 [M+2H]2+ 96.98 95.66
148 7.95 方法4 ＞ 99 1553.7946 1553.8008 [M+2H]2+ 95.10 93.50
149 7.15 方法4 ＞ 99 1421.7887 1421.8082 [M+2H]2+ 98.50 98.90
150 8.30 方法4 96.95 1827.025 1827.04 [M+2H]2+    
151 8.75 方法4 90.85 1915.0774 1916.1114 [M+2H]2+    
152 7.63 方法4 ＞ 99 1364.7672 1364.7830 [M+2H]2+ 99.30 98.10
153 9.6 方法1 ＞ 99 1535.7840 1535.7904 [M+2H]2+    
154 8.94 方法1 ＞ 99 1362.7264 1362.7502 [M+2H]2+    
155 10.26 方法1 ＞ 99 1563.8153 1563.8318 [M+2H]2+    
156 7.06 方法4 ＞ 99 1407.7730 1407.7902 [M+2H]2+ 99.30 98.40
157 7.85 方法4 ＞ 99 1504.8258 1504.8416 [M+2H]2+ 98.20 99.30
158 9.49 方法1 96.07 1562.7561 1562.7722 [M+2H]2+    
159 9.93 方法1 ＞ 99 1336.7359 1336.7485 [M+H]+    
160 7.63 方法4 ＞ 99 1350.7516 1350.7670 [M+2H]2+ 95.20 96.10
161 8.27 方法4 ＞ 99 1591.8466 1591.8658 [M+2H]2+ 98.20 98.50
162 8.52 方法4 ＞ 99 1577.8310 1577.8426 [M+2H]2+ 96.50 97.00
163 8.98 方法1 ＞ 99 1436.7996 1436.8210 [M+2H]2+    
164 7.99 方法4 98.33 1474.804 1476.84 [M+2H]2+    
165 7.93 方法4 96.48 1562.8313 1562.8510 [M+2H]2+ 96.70 96.70
166 7.37 方法4 79.60 1550.8313 1550.8446 [M+2H]2+ 94.20 92.20
167 8.5 方法4 ＞ 99 1448.7884 1448.8034 [M+2H]2+ 96.60 98.20
168 8.45 方法4 100 1871.0512 1871.06 [M+2H]2+    
169 9.22 方法1 ＞ 99 1520.7843 1520.7968 [M+2H]2+    
170 8.98 方法1 91.66 1508.7843 1508.7936 [M+2H]2+    
171 7.51 方法4 ＞ 99 1546.8728 1546.8896 [M+2H]2+ 97.10 96.20
172 5.14 方法4 ＞ 99 1447.8043 1447.8228 [M+2H]2+ 97.00 97.90
173 7.77 方法4 ＞ 99 1576.8469 1576.8678 [M+2H]2+ 98.00 97.30
174 7.54 方法4 95.17 1654.9150 1654.9334 [M+2H]2+ 98.00 98.00
175 9.4 方法1 93.13 1522.8000 1522.8092 [M+2H]2+    
176 10.05 方法1 ＞ 99 1548.8156 1548.8388 [M+2H]2+    
177 10.55 方法1 ＞ 99 1351.7356 1351.7490 [M+H]+    
178 9.44 方法1 87.65 1598.8313 1598.8368 [M+2H]2+ 92.00 95.40
179 8.11 方法4 ＞ 99 1590.8626 1590.8774 [M+2H]2+ 97.70 98.00
180 10 方法1 ＞ 99 1549.7997 1549.8112 [M+2H]2+    
181 9.86 方法1 99.00 1372.7359 1373.7382 [M+H]+    
182 9.57 方法1 ＞ 99 1388.7308 1388.7400 [M+H]+    
183 8.95 方法1 ＞ 99 1550.7949 1551.8000 [M+H]+    
184 9.89 方法1 ＞ 99 1393.7462 1393.7700 [M+2H]2+    
185 9.83 方法1 ＞ 99 1548.8156 1548.8244 [M+2H]2+    
186 8.76 方法1 ＞ 99 1325.7312 1325.7359 [M+H]+    
187 9.2 方法1 85.96 1584.8156 1584.8334 [M+2H]2+ 97.10 95.00
188 7.97 方法4 ＞ 99 1351.7356 1351.7524 [M+2H]2+ 99.30 99.80
189 7.97 方法4 ＞ 99 1576.8469 1576.8658 [M+2H]2+ 97.60 98.50
190 8.42 方法4 ＞ 99 1448.7884 1448.8150 [M+2H]2+ 98.00 98.60
191 7.78 方法4 ＞ 99 1576.8469 1576.8650 [M+2H]2+ 98.40 96.60
192 8.07 方法4 88.36 1576.8469 1576.8638 [M+2H]2+ 99.20 98.20
193 8.58 方法4 95.98 1638.8626 1638.88 [M+2H]2+    
194 4.08 方法3 100 1474.804 1474.8212 [M+2H]2+    
195 6.52 方法4 ＞ 99 1325.7312 1325.7488 [M+2H]2+ 99.10 95.10
196 8.11 方法4 ＞ 99 1577.8310 1577.8456 [M+2H]2+ 95.60 95.20
197 7.06 方法4 100 1405.7574 1405.78 [M+2H]2+    
198 10.17 方法1 ＞ 99 1350.7516 1350.7656 [M+H]+    
199 9.16 方法1 81.04 1508.7843 1508.7950 [M+2H]2+ 94.25 92.02
200 7.55 方法4 ＞ 99 1575.8629 1575.8758 [M+2H]2+ 91.60 95.90
201 8.14 方法4 ＞ 99 1577.8310 1577.8466 [M+2H]2+ 98.80 99.10
202 7.62 方法4 ＞ 99 1575.8629 1575.9792 [M+2H]2+ 98.60 99.10
203 7.95 方法4 ＞ 99 1576.8469 1576.8588 [M+2H]2+ 98.80 97.50
204 7.57 方法4 ＞ 99 1469.7887 1469.8062 [M+2H]2+ 95.90 96.20
205 8.81 方法1 95.10 1480.7530 1480.7638 [M+2H]2+    
206 7.55 方法4 84.01 1534.8000 1534.8172 [M+2H]2+ 96.70 95.80
207 7.18 方法4 97.74 1566.8626 1566.8881 [M+2H]2+ 98.30 98.10
208 7.16 方法4 ＞ 99 1336.7359 1336.7542 [M+2H]2+ 98.50 97.50
209 9.17 方法1 94.43 1494.7687 1494.7826 [M+2H]2+    
210 8.78 方法1 ＞ 99 1513.7269 1513.7372 [M+2H]2+    
211 9.79 方法1 86.55 1598.8313 1598.8430 [M+2H]2+ 96.39 97.13
212 10.07 方法1 ＞ 99 1548.8156 1548.8266 [M+2H]2+    
213 9.14 方法1 84.10 1579.8215 1579.8394 [M+2H]2+ 97.50 94.80
214 6.82 方法4 94.98 1451.6699 1451.6876 [M+2H]2+    
215 8.17 方法4 ＞ 99 1577.8310 1577.8580 [M+2H]2+ 98.70 98.20
216 9.02 方法1 95.47 1508.7843 1508.8030 [M+2H]2+    
217 8.00 方法4 94.67 1562.8313 1562.8420 [M+2H]2+ 90.20 94.10
218 7.38 方法4 83.21 1599.8265 1599.8452 [M+2H]2+ 95.50 95.40
219 7.29 方法4 98.29 1469.7887 1469.8074 [M+2H]2+ 91.60 92.60
220 8.75 方法1 91.37 1478.7374 1478.8566 [M+2H]2+    
221 7.37 方法4 98.49 1634.9252 1634.9396 [M+2H]2+    
222 9.36 方法1 ＞ 99 1507.7527 1507.7598 [M+2H]2+    
223 10.02 方法1 ＞ 99 1411.7500 1411.7640 [M+2H]2+    
224 9.49 方法1 ＞ 99 1534.8000 1534.8034 [M+2H]2+    
225 8.92 方法1 98.52 1550.7949 1550.8112 [M+2H]2+    
226 8.52 方法4 ＞ 99 1455.7730 1455.7904 [M+2H]2+ 98.90 98.80
227 8.32 方法4 98.31 1563.8153 1563.8276 [M+2H]2+ 93.90 92.60
228 8.86 方法1 94.17 1480.7530 1480.7624 [M+2H]2+    
229 8.26 方法4 97.70 1590.8626 1590.8782 [M+2H]2+    
230 4.54 方法2 94.53 1494.7687 1494.7734 [M+2H]2+    
231 10.19 方法1 ＞ 99 1563.8153 1563.8254 [M+2H]2+    
232 9.27 方法1 ＞ 99 1495.7527 1495.7612 [M+2H]2+    
233 7.05 方法4 100 1451.6699 1451.69 [M+2H]2+    
234 9.66 方法1 ＞ 99 1548.8156 1548.8260 [M+2H]2+    
235 9.52 方法1 92.00 1564.7342 1564.7572 [M+2H]2+    
236 8.62 方法1 ＞ 99 1311.7155 1311.7100 [M+H]+    
237 8.30 方法4 ＞ 99 1561.7997 1561.8138 [M+2H]2+ 97.11 96.94
238 9.52 方法1 99.00 1562.7141 1562.7204 [M+2H]2+    
239 9.37 方法1 96.86 1570.8190 1570.8000 [M+2H]2+    
240 5.43 方法4 98.27 1494.7121 1494.7317 [M+3H]3+    
241 9.15 方法1 ＞ 99 1518.7687 1518.7814 [M+2H]2+    
242 7.41 方法4 100 1475.8356 1475.8544 [M+2H]2+    
243 9.08 方法1 ＞ 99 1522.8000 1522.8114 [M+2H]2+    
244 7.58 方法4 ＞ 99 1350.7516 1350.7668 [M+2H]2+ 96.10 96.70
245 9.28 方法1 ＞ 99 1506.7687 1506.7754 [M+2H]2+    
246 9.14 方法1 ＞ 99 1495.7527 1495.7622 [M+2H]2+    
247 9.33 方法1 ＞ 99 1294.6890 1294.7038 [M+2H]2+    
248 8.77 方法1 97.35 1498.7436 1498.7550 [M+2H]2+    
249 7.81 方法1 ＞ 99 1447.8043 1447.8232 [M+2H]2+    
250 9.16 方法1 96.08 1534.8000 1534.8168 [M+2H]2+    
251 7.55 方法4 87.23 1475.8356 1475.849 [M+2H]2+    
252 8.3 方法1 85.87 1509.7432 1509.7608 [M+2H]2+ 96.30 96.70
253 9.04 方法1 95.92 1508.7843 1508.7908 [M+2H]2+    
254 9.18 方法1 95.70 1506.7687 1506.7768 [M+2H]2+    
255 7.26 方法4 ＞ 99 1449.8200 1449.8404 [M+2H]2+ 97.70 96.50
256 9.45 方法1 94.64 1437.7472 1437.7622 [M+2H]2+    
257 5.48 方法4 ＞ 99 1367.7781 1367.7956 [M+2H]2+ 95.40 97.30
258 7.51 方法4 ＞ 99 1337.7199 1337.7416 [M+2H]2+ 98.79 99.40
259 9.36 方法1 ＞ 99 1350.7516 1350.7566 [M+H]+    
260 8.85 方法1 ＞ 99 1494.7687 1494.7762 [M+2H]2+    
261 8.69 方法1 ＞ 99 1480.7530 1480.7618 [M+2H]2+    
262 8.97 方法1 94.47 1492.7530 1492.7622 [M+2H]2+    
263 7.63 方法4 86.77 1522.8000 1522.8100 [M+2H]2+ 97.20 93.30
264 8.07 方法1 ＞ 99 1447.8043 1447.8224 [M+2H]2+    
265 8.26 方法4 ＞ 99 1377.7512 1377.7666 [M+2H]2+ 97.60 96.50
266 7.17 方法4 100 1691.9215 1691.9382 [M+2H]2+    
267 7.84 方法4 100 1459.8043 1459.8176 [M+2H]2+    
268 10.3 方法1 ＞ 99 1562.8313 1562.8400 [M+2H]2+    
269 7.32 方法4 ＞ 99 1475.8356 1475.8540 [M+2H]2+ 98.50 98.50
270 9.77 方法1 ＞ 99 1560.8156 1560.8218 [M+2H]2+    
271 8.7 方法1 97.00 1480.7530 1480.7600 [M+2H]2+    
272 9.47 方法1 97.47 1594.8034 1594.8198 [M+2H]2+    
273 10.12 方法1 84.96 1533.8047 1533.8212 [M+2H]2+ 93.10 91.60
274 10.75 方法1 ＞ 99 1307.7094 1307.7134 [M+H]+    
275 4.62 方法6 92.32 1481.7371 1481.74 [M+H]+    
276 4.43 方法2 ＞ 99 1481.7371 1481.7500 [M+2H]2+    
277 8.83 方法1 96.32 1480.7530 1480.7588 [M+2H]2+    
278 4.56 方法2 93.63 1494.7687 1494.7814 [M+2H]2+    
279 10.29 方法1 98.00 1578.8082 1578.8230 [M+2H]2+    
280 10.19 方法1 98.00 1267.6781 1267.6785 [M+H]+ 99.10 95.80
281 4.39 方法2 ＞ 99 1481.7371 1481.7378 [M+2H]2+    
282 9.11 方法1 93.00 1506.7687 1506.7738 [M+2H]2+    
283 9.28 方法1 ＞ 99 1578.8262 1578.8412 [M+2H]2+    
284 10.26 方法4 ＞ 99 1432.7934 1432.8096 [M+2H]2+ 99.40 99.10
285 9.45 方法1 ＞ 99 1364.7672 1364.7725 [M+H]+    
286 4.43 方法2 95.85 1455.7214 1455.7370 [M+2H]2+    
287 8.81 方法1 ＞ 99 1499.7276 1499.7358 [M+2H]2+    
288 8.94 方法1 ＞ 99 1495.7527 1495.7644 [M+2H]2+    
289 9.01 方法1 ＞ 99 1495.7527 1495.7592 [M+2H]2+    
290 9.66 方法1 84.19 1493.7734 1493.7802 [M+H]+ 93.60 90.80
291 8.86 方法4 93.41 1523.8356 1523.85 [M+2H]2+    
292 4.85 方法2 ＞ 99 1323.7043 1323.7204 [M+2H]2+    
293 9.8 方法1 95.00 1491.7942 1491.8200 [M+2H]2+    
294 10.33 方法1 78.00 1555.7891 1555.8006 [M+2H]2+ 95.19 92.10
295 10.4 方法1 86.71 1569.8047 1569.8000 [M+H]+ 93.00 90.90
296 10.43 方法4 100 1502.8353 1502.8522 [M+2H]2+    
297 8.91 方法1 95.00 1494.7687 1494.7766 [M+2H]2+    
298 11.01 方法1 ＞ 99 1358.7203 1358.7314 [M+2H]2+    
299 9.01 方法1 ＞ 99 1521.7796 1521.7836 [M+2H]2+    
300 9.51 方法1 ＞ 99 1509.7684 1509.7814 [M+2H]2+    
301 10.82 方法1 ＞ 99 1307.7094 1307.7118 [M+H]+    
302 9.26 方法1 ＞ 99 1534.6828 1534.6974 [M+2H]2+    
303 7.31 方法4 ＞ 99 1433.7887 1433.8066 [M+2H]2+ 96.50 96.30
304 10.30 方法4 98.25 1502.8353 1502.8516 [M+2H]2+    
305 10.41 方法1 ＞ 99 1351.7400 1351.7415 [M+H]+    
306 8.8 方法1 ＞ 99 1481.7371 1481.7496 [M+2H]2+    
307 7.79 方法4 ＞ 99 1562.8313 1562.8488 [M+2H]2+    
308 10.14 方法1 87.08 1533.8047 1533.8218 [M+2H]2+ 96.70 95.10
309 10.3 方法1 86.87 1535.8204 1535.8376 [M+2H]2+ 96.90 90.20
310 7.09 方法4 ＞ 99 1407.7730 1407.7906 [M+2H]2+ 99.20 99.20
311 10.27 方法4 ＞ 99 1469.7887 1469.8040 [M+2H]2+ 99.00 99.40
312 4.46 方法2 ＞ 99 1481.7371 1481.7504 [M+2H]2+    
313 8.7 方法1 ＞ 99 1469.7371 1469.7474 [M+2H]2+    
314 8.75 方法1 91.20 1524.7429 1524.7560 [M+2H]2+    
315 9.91 方法1 83.68 1519.7891 1519.8056 [M+2H]2+ 95.10 93.60
316 7.06 方法4 ＞ 99 1336.7359 1336.7536 [M+2H]2+ 99.60 99.90
317 8.66 方法1 93.96 1383.7003 1383.7078 [M+2H]2+    
318 8.96 方法1 ＞ 99 1481.7371 1481.7454 [M+2H]2+    
319 9.35 方法1 89.58 1576.8469 1576.8584 [M+2H]2+    
320 9.31 方法1 89.56 1610.8524 1681.9082 [M+2H]2+ 97.20 95.40
321 6.48 方法4 92.95 1505.7483 1505.7668 [M+2H]2+ 92.90 88.80
322 9.00 方法4 98.26 1503.8669 1503.8840 [M+2H]2+ 96.60 95.10
323 9.35 方法1 ＞ 99 1521.7684 1521.7868 [M+2H]2+    
324 9.09 方法1 ＞ 99 1493.7371 1493.7424 [M+2H]2+    
325 8.9 方法1 97.47 1501.7058 1501.7144 [M+2H]2+    
326 4.71 方法2 ＞ 99 1524.7613 1524.7768 [M+2H]2+    
327 9.77 方法1 87.14 1537.7997 1537.8162 [M+2H]2+ 96.70 92.20
328 8.99 方法4 94.93 1603.8466 1603.8682 [M+2H]2+ 98.50 97.80
329 8.74 方法1 99.70 1455.7214 1455.7486 [M+2H]2+    
330 9.05 方法4 85.36 1676.7418 1676.7586 [M+2H]2+ 91.30 91.40
331 9.01 方法1 82.76 1480.7530 1480.7602 [M+2H]2+    
332 9.35 方法1 92.34 1550.8313 1550.8400 [M+2H]2+    
333 11.32 方法1 ＞ 99 1323.7407 1323.7457 [M+H]+    
334 10.37 方法1 85.11 1547.8204 1547.8366 [M+2H]2+ 95.80 93.90
335 10.04 方法4 ＞ 99 1504.8510 1504.8710 [M+2H]2+ 95.80 96.80
336 7.75 方法4 ＞ 99 1376.7672 1376.7836 [M+2H]2+ 98.00 98.50
337 9.06 方法1 96.83 1520.7091 1520.7232 [M+2H]2+    
338 8.42 方法1 99.32 1467.7214 1467.7260 [M+2H]2+    
339 8.81 方法1 ＞ 99 1495.7527 1495.7684 [M+2H]2+    
340 8.87 方法1 ＞ 99 1494.7687 1494.7724 [M+2H]2+    
341 7.26 方法4 ＞ 99 1279.7145 1279.7288 [M+2H]2+ 96.50 96.60
342 8.71 方法4 89.03 1549.7997 1549.8172 [M+2H]2+ 90.40 89.40
343 10.63 方法1 92.89 1561.8360 1561.8516 [M+2H]2+    
344 8.6 方法1 94.15 1552.7742 1552.7908 [M+2H]2+    
345 6.62 方法4 94.45 1239.6832 1239.6998 [M+2H]2+ 97.10 95.30
346 8.95 方法1 ＞ 99 1480.7530 1480.7568 [M+2H]2+    
347 8.59 方法4 ＞ 99 1492.7782 1492.7972 [M+2H]2+ 98.80 98.90
348 8.48 方法1 97.31 1483.7163 1483.7342 [M+2H]2+    
349 9.6 方法1 ＞ 99 1535.7840 1535.7942 [M+2H]2+    
350 8.88 方法1 95.86 1494.7687 1494.7754 [M+2H]2+    
351 10.41 方法1 84.00 1547.8204 1547.8358 [M+2H]2+ 96.10 94.10
352 9.51 方法4 ＞ 99 1862.9457 1862.9551 [M+2H]2+ 97.70 95.00
353 10.54 方法1 ＞ 99 1293.6937 1293.6958 [M+H]+    
354 8.97 方法1 ＞ 99 1499.7276 1499.7348 [M+2H]2+    
355 4.52 方法2 90.00 1496.7480 1496.7520 [M+2H]2+    
356 10.58 方法1 93.20 1549.8360 1549.8502 [M+2H]2+    
357 8.82 方法1 ＞ 99 1483.7163 1483.7282 [M+2H]2+    
358 11.05 方法1 ＞ 99 1309.7250 1309.6000 [M+2H]2+ 98.30 97.50
359 10.49 方法4 ＞ 99 1434.8091 1434.8240 [M+2H]2+ 98.60 98.90
360 9.22 方法4 96.98 1618.8728 1618.8882 [M+2H]2+ 96.18 97.30
361 7.43 方法4 95.37 1504.8258 1504.8430 [M+2H]2+ 98.20 97.20
362 9.2 方法1 94.52 1556.7843 1556.8050 [M+2H]2+    
363 9.35 方法4 85.07 1861.9617 1861.9685 [M+H]+ 97.70 95.00
364 9.21 方法1 97.74 1562.8313 1562.8390 [M+2H]2+    
365 10.56 方法1 80.41 1549.8360 1549.8518 [M+2H]2+ 94.70 92.90
366 10.82 方法1 ＞ 99 1595.7065 1595.7192 [M+2H]2+ 97.30 94.40
367 9.64 方法1 99.58 1535.7840 1535.8040 [M+2H]2+    
368 7.84 方法4 ＞ 99 1280.6985 1280.7178 [M+2H]2+ 99.60 99.70
369 8.24 方法4 ＞ 99 1506.7938 1506.8094 [M+2H]2+ 95.40 95.80
370 8.98 方法4 ＞ 99 1523.8356 1523.8492 [M+2H]2+ 97.12 97.08
371 7.10 方法4 ＞ 99 1433.7887 1433.8050 [M+2H]2+ 93.50 91.70
372 8.07 方法4 ＞ 99 1505.8098 1505.9486 [M+2H]2+ 99.40 98.80
373 4.37 方法2 ＞ 99 1494.7687 1494.7726 [M+2H]2+    
374 9.06 方法1 92.43 1494.7700 1494.7854 [M+2H]2+    
375 10.32 方法4 95.26 1550.8201 1550.8392 [M+2H]2+    
376 7.60 方法1 ＞ 99 1447.8043 1447.8248 [M+2H]2+    
377 7.50 方法4 ＞ 99 1504.8258 1504.8388 [M+2H]2+ 93.50 96.90
378 7.51 方法4 ＞ 99 1530.8415 1530.8574 [M+2H]2+ 99.10 99.70
379 7.20 方法4 ＞ 99 1350.7516 1350.7680 [M+2H]2+ 97.30 99.00
380 8.26/ 8.34 方法1 70/29 1483.7163 1483.7374 [M+2H]2+    
381 3.9 方法4 ＞ 99 1750.011 1750.0326 [M+3H]3+ 99.37 98.66
382 11.06 方法1 ＞ 99 1321.7250 1321.7286 [M+H]+    
383 9.91 方法1 ＞ 99 1365.7500 1365.7630 [M+2H]2+    
384 9.15 方法1 87.43 1521.6931 1521.6976 [M+2H]2+    
385 10.68 方法1 83.28 1583.8204 1583.8368 [M+2H]2+ 96.30 91.20
386 4.55 方法2 ＞ 99 1481.7371 1481.7494 [M+2H]2+    
387 9.46 方法1 93.47 1495.7527 1495.7636 [M+2H]2+    
388 8.07 方法4 ＞ 99 1505.8098 1505.8246 [M+2H]2+ 97.80 97.10
389 8.75 方法1 93.22 1478.7374 1478.7462 [M+2H]2+    
390 8.89 方法1 ＞ 99 1499.7276 1499.7360 [M+2H]2+    
391 10.75 方法1 91.00 1547.8204 1547.8280 [M+2H]2+    
392 9.55 方法1 88.42 1509.7684 1509.7812 [M+2H]2+    
393 8.73 方法1 ＞ 99 1481.7371 1481.7432 [M+2H]2+    
394 4.39 方法2 95.41 1480.7530 1480.7642 [M+2H]2+    
395 9.64 方法1 84.41 1579.8102 1579.8260 [M+2H]2+ 93.40 90.50
396 10.54 方法4 ＞ 99 1337.7563 1337.7660 [M+H]+ 99.30 98.20
397 8.79 方法1 ＞ 99 1493.7371 1493.7510 [M+2H]2+    
398 11.13 方法1 ＞ 99 1309.7250 1309.7295 [M+H]+    
399 9.16 方法1 88.00 1622.8637 1622.8866 [M+2H]2+    
400 9.66 方法1 85.00 1549.7633 1549.7778 [M+2H]2+ 95.50 93.80
401 4.54 方法2 94.46 1384.6843 1384.7002 [M+2H]2+    
402 8.86 方法1 ＞ 99 1509.7684 1509.7802 [M+2H]2+    
403 9.29 方法1 93.30 1536.8156 1536.8306 [M+2H]2+    
404 10.21 方法1 ＞ 99 1507.7891 1507.7944 [M+2H]2+    
405 4.24 方法4 ＞ 99 1790.0423 1791.0678 [M+3H]3+ 99.08 98.69
406 10.45 方法4 98.71 1584.8044 1584.8186 [M+2H]2+    
407 9.21 方法4 83.34 1607.8415 1607.8578 [M+2H]2+ 96.00 94.40
408 11.12 方法1 ＞ 99 1321.7250 1321.7258 [M+H]+    
409 8.77 方法1 97.00 1626.8109 1626.8200 [M+2H]2+    
410 8.59/ 8.66 方法1 59/40 1483.7163 1483.7370 [M+2H]2+    
411 8.95 方法1 94.75 1480.7530 1480.7630 [M+2H]2+    
412 5.62 方法4 97.66 1448.836 1448.8554 [M+3H]3+ 96.30 97.40
413 4.36 方法2 ＞ 99 1480.7530 1480.7612 [M+2H]2+    
414 8.7 方法1 ＞ 99 1485.7120 1485.7238 [M+2H]2+    
415 10.87 方法1 91.80 1575.8517 1575.8652 [M+2H]2+    
416 9.36 方法1 ＞ 99 1579.6163 1579.6200 [M+2H]2+    
417 9.15 方法1 ＞ 99 1494.7687 1494.7736 [M+2H]2+    
418 8.39 方法4 ＞ 99 1562.8313 1562.9000 [M+2H]2+ 97.31 97.42
419 8.44 方法4 ＞99 1474.8040 1476.8178 [M+2H]2+    
420 4.01 方法3 ＞ 99 1562.8313 1562.8422 [M+2H]2+    
421 7.57 方法4 98.63 1678.9514 1680.9710 [M+2H]2+    
422 7.67 方法4 95.55 1708.9620 1710.9742 [M+2H]2+    
423 7.72 方法4 ＞ 99 1722.9776 1724.9942 [M+2H]2+    
424 7.85 方法4 94.30 1752.9882 1755.0024 [M+2H]2+    
425 7.80 方法4 97.93 1811.0300 1814.0484 [M+2H]2+    
426 7.96 方法4 98.96 1855.0563 1858.0758 [M+2H]2+    
427 8.19 方法4 ＞ 99 1899.0825 1902.1006 [M+2H]2+    
428 8.73 方法4 94.64 2030.1043 2032.1148 [M+2H]2+    
429 7.84 方法4 ＞ 99 1778.0198 1780.0348 [M+2H]2+    
430 4.37 方法4 ＞ 99 1750.0110 1753.0326 [M+3H]3+    
431 8.62 方法4 ＞ 99 1561.7997 1565.8452 [M+2H]2+    
432 8.65 方法4 ＞ 99 1561.7997 1565.4816 [M+2H]2+    
433 2.85 方法5 85.05 1735.9113 1737.9288 [M+2H]2+    
435 2.70 方法5 94.14 1767.0038 1770.0200 [M+2H]2+    
436 8.33 方法4 98.11 1726.9011 1728.9172 [M+2H]2+    
437 8.43 方法4 ＞ 99 1629.8483 1631.8630 [M+2H]2+    
438 8.54 方法4 97.07 1571.8568 1573.8716 [M+2H]2+    
439 7.58 方法4 ＞ 99 1433.7887 1435.8152 [M+2H]2+    
440 7.43 方法4 ＞ 99 1463.7229 1465.7404 [M+2H]2+    
441 8.34 方法4 ＞ 99 1517.7699 1519.7886 [M+2H]2+    
443 7.73 方法4 ＞ 99 1483.7855 1485.8006 [M+2H]2+    
444 6.79 方法4 ＞ 99 1527.8418 1529.8576 [M+2H]2+    
445 7.63 方法4 ＞ 99 1483.7855 1485.8018 [M+2H]2+    
446 8.65 方法4 91.93 1563.8153 1563.8272 [M+2H]2+ 95.35 98.58
447 2.65 方法5 ＞ 99 1635.8629 1635.8760 [M+2H]2+ 98.66 99.22
448 5.44 方法4 97.04 1462.8265 1465.8501 [M+3H]3+ 95.79% 97.26%
449 8.33 方法4 86.83 1559.8568 1561.8714 [M+2H]2+    
450 9.24 方法4 90.97 1589.9037 1591.9208 [M+2H]2+    
451 8.61 方法4 95.66 1573.8724 1575.8884 [M+2H]2+    
452 8.24 方法4 96.26 1559.8568 1561.8714 [M+2H]2+    
453 8.53 方法4 94.00 1573.8724 1575.8874 [M+2H]2+    
454 7.96 方法4 ＞ 99 1562.8313 1564.8458 [M+2H]2+    
455 8.47 方法4 ＞ 99 1559.8568 1561.8710 [M+2H]2+    
456 8.28 方法4 ＞ 99 1545.8411 1547.8552 [M+2H]2+    
457 9.44 方法4 ＞ 99 1632.8004 1634.8240 [M+2H]2+    
458 2.61 方法5 ＞ 99 1534.8364 1536.8654 [M+2H]2+ 96.68% 96.99%
459 2.85 方法5 ＞ 99 1391.7669 1393.7826 [M+2H]2+ 89.95% 99.44%
460 2.84 方法5 ＞ 99 1391.7669 1393.7810 [M+2H]2+ 97.71% 98.46%
462 8.76 方法4 78.21 1665.9099 1667.9238 [M+2H]2+ 95.17% 93.69%
463 7.12 方法4 94.14 1691.9103 1694.9349 [M+3H]3+ 97.30% 90.79%
464 8.26 方法4 ＞ 99 1620.8368 1622.8530 [M+2H]2+ 97.37% 94.11%
465 8.39 方法4 ＞ 99 1676.8994 1678.9132 [M+2H]2+ 98.76% 99.20%
466 8.11 方法4 ＞ 99 1678.8422 1680.8566 [M+2H]2+ 99.18% 98.78%
467 6.96 方法4 ＞ 99 1534.8364 1537.8579 [M+3H]3+ 99.05% 99.51%
468 8.26 方法4 94.77 1651.9041 1653.9234 [M+2H]2+ 96.08% 96.72%
469 6.87 方法4 ＞ 99 1606.8575 1609.8813 [M+3H]3+ 97.93% 96.22%
470 8.71 方法4 ＞ 99 1681.9147 1683.9302 [M+2H]2+ 96.68% 92.70%
471 8.40 方法4 ＞ 99 1796.9416 1798.9566 [M+2H]2+ 97.03% 95.29%
472 8.56 方法4 ＞ 99 1783.9828 1785.9958 [M+2H]2+ 97.03% 95.29%
473 8.39 方法4 ＞ 99 1563.8153 1563.8244 [M+2H]2+    
474 6.65 方法4 95.2 1463.7993 1463.816 [M+2H]2+    
475 7.74 方法4 ＞ 99 1549.7997 1549.8134 [M+2H]2+ 97.03 95.07
476 9.69 方法4 ＞ 99 1595..8568 1595.8710 [M+2H]2+ 95.68 96.16
477 9.87 方法4 ＞ 99 1595.8568 1595.8712 [M+2H]2+ 96.85 97.09
478 9.84 方法4 ＞ 99 1595.8568 1595.8668 [M+2H]2+ 96.50 94.73
479 6.83 方法4 ＞ 99 1552.8106 1552.8284 [M+2H]2+ 96.16 94.86
480 7.51 方法4 99.0 1549.7997 1549.8132 [M+2H]2+ 94.8 96.2
481 7.59 方法4 ＞ 99 1549.7997 1549.8206 [M+2H]2+ 97.55 97.23
482 8.32 方法4 ＞ 99 1599.8153 1599.8326 [M+2H]2+ 98.99 98.86
483 8.85 方法4 94.52 1639.8466 1639.8596 [M+2H]2+ 98.56 98.33
484 8.50 方法4 ＞ 99 1766.9311 1766.9468 [M+2H]2+ 98.65 97.21
485 7.77 方法4 ＞ 99 1655.8990 1655.9152 [M+2H]2+ 98.60 99.16
486 2.31 方法5 97.6 1637.8633 1637.8754 [M+2H]2+ 95.81 96.13
487 2.52 方法5 ＞ 99 1604.8895 1604.9038 [M+2H]2+ 99.01 98.81
488 2.95 方法5 ＞ 99 1603.8466 1603.8610 [M+2H]2+ 98.08 98.25
489 2.84 方法5 ＞ 99 1603.8466 1603.8684 [M+2H]2+ 99.49 98.23
490 3.40 方法5 ＞ 99 1697.8157 1697.8294 [M+2H]2+ 99.38 99.17
491 3.43 方法5 ＞ 99 1697.8157 1697.8316 [M+2H]2+ 96.36 96.84
492 2.86 方法5 ＞ 99 1549.8360 1549.8488 [M+2H]2+ 98.14 98.16
493 2.93 方法5 97.60 1611.8517 1611.8664 [M+2H]2+ 97.58 97.80
494 2.88 方法5 97.96 1634.8524 1634.8662 [M+2H]2+ 97.13 97.02
495 2.97 方法5 ＞ 99 1620.8368 1620.8538 [M+2H]2+ 98.60 98.29
496 8.11 方法4 ＞ 99 1685.9096 1685.9238 [M+2H]2+ 95.64 96.06
497 7.90 方法4 95.72 1621.8684 1621.8810 [M+2H]2+ 92.88 92.81
498 7.49 方法4 ＞ 99 1567.8466 1567.8568 [M+2H]2+ 98.13 98.05
499 8.47 方法4 ＞ 99 1573.8030 1573.8528 [M+2H]2+    
500 8.40 方法4 ＞ 99 1722.9048 1722.9200 [M+2H]2+ 98.10 99.55
501 7.86 方法4 98.44 1770.9260 1770.9408 [M+2H]2+ 97.32 96.25
502 7.70 方法4 99.09 1563.8153 1563.8320 [M+2H]2+ 97.46 96.62
503 8.29 方法4 ＞ 99 1876.0301 1876.0302 [M+2H]2+ 95.23 94.54
504 8.41 方法4 ＞ 99 1991.0571 1991.0740 [M+2H]2+ 96.55 96.43
505 8.23 方法4 ＞ 99 1832.0039 1832.0216 [M+2H]2+ 95.43 96.86
506 7.98 方法4 98.67 1641.8834 1641.8986 [M+2H]2+ 97.81 97.21
507 7.86 方法4 ＞ 99 1521.7684 1521.7926 [M+2H]2+    
508 7.63 方法4 ＞ 99 1563.7401 1563.7564 [M+2H]2+    
509 7.75 方法4 ＞ 99 1523.7840 1523.8000 [M+2H]2+    
510 8.35 方法4 ＞ 99 1633.8572 1633.8688 [M+2H]2+    
511 2.58 方法5 ＞ 99 1535.6668 1535.6802 [M+2H]2+ 87.38 89.08
512 4.12 方法5 ＞ 99 1974.1298 1974.1506 [M+2H]2+ 95.15 95.33
513 3.96 方法5 ＞ 99 1903.0927 1903.1106 [M+2H]2+ 96.44 95.38
514 2.65 方法5 ＞ 99 1611.8728 1611.8852 [M+2H]2+ 95.68 95.22
515 2.79 方法5 ＞ 99 1591.8466 1591.8600 [M+2H]2+ 97.20 97.37
516 2.73 方法5 ＞ 99 1549.7244 1549.7380 [M+2H]2+ 93.87 95.17
517 2.90 方法5 ＞ 99 1591.7714 1591.7908 [M+2H]2+ 91.59 93.39
518 1.75 方法5 ＞ 99 1355.6366 1355.6494 [M+2H]2+ 97.11 98.05
519 2.67 方法5 ＞ 99 1579.7339 1579.7548 [M+2H]2+ 95.69 96.40
520 2.68 方法5 ＞ 99 1593.7495 1595.7636 [M+2H]2+ 97.27 96.99
521 2.66 方法5 ＞ 99 1694.7608 1694.7798 [M+2H]2+ 95.48 95.35
522 2.79 方法5 ＞ 99 1549.7997 1549.8140 [M+2H]2+ 97.12 96.45
523 2.82 方法5 ＞ 99 1563.8153 1563.8312 [M+2H]2+ 95.87 96.34
524 2.82 方法5 ＞ 99 1563.7401 1573.7518 [M+2H]2+ 91.95 92.65
525 8.24 方法4 84.39 1575.8153 1575.8416 [M+2H]2+    
526 2.70 方法5 ＞ 99 1535.7840 1535.7966 [M+2H]2+ 96.07 95.73
527 3.11 方法5 98.08 1644.9095 1644.9230 [M+2H]2+ 98.01 96.26
528 2.99 方法5 95.62 1589.8310 1589.8490 [M+2H]2+ 75.28 75.57
529 6.47 方法4 95.44 1610.7231 1610.7386 [M+2H]2+ 84.42 82.86
530 2.89 方法5 ＞ 99 1559.8568 1559.8754 [M+2H]2+ 97.07 96.79
531 2.94 方法5 ＞ 99 1577.8310 1577.8492 [M+2H]2+ 95.26 97.20
532 2.89 方法5 ＞ 99 1545.8411 1545.8590 [M+2H]2+ 97.87 96.49
表17：所選定肽之Maldi質譜數據
實例 編號 方法 MALDI (Amu+1)
512 1975.223
526 1536.827
527 1645.817
529 1611.761
530 1560.875
531 1578.866
532 1546.821
142 1566.863
237 1562.785
下文中，例舉實例29、44、45、67、75、109、166、185、347、443、466及499之化學結構。本發明包括此等實例之醫藥上可接受之鹽、溶劑合物、或鹽之溶劑合物。化學結構係以鹽游離型表示。
實例29，序列：AIC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPD-OH (HCl鹽)
Figure 02_image318
實例44，序列：((N-Me)G)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IP-(PEG9(31個原子))-NH2
Figure 02_image320
實例45，序列：AI-C+SRS-((tBu)A)-P-((6S)-5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-羧酸)-I-(Pen)+IPD-NH2
Figure 02_image322
實例67，序列：((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IP-NH2 (HCl鹽)
Figure 02_image324
實例75，序列：AIC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPD-NH2
Figure 02_image326
實例109，序列：((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IP-NH2
Figure 02_image328
實例166，序列：(3-胺基-2,2-二甲基丙酸)-IC+SRS-((tBu)A)-PPI-(Pen)+IPD-NH2
Figure 02_image330
實例185，序列：AIC+SRSLP-(Oic)-I-((N-Me)C)+IPD-NH2
Figure 02_image332
實例347，序列：IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPD-OH
Figure 02_image334
實例443，序列：((N-Me)A)-IC+SRS-((tBu)A)-P-((3R,6R)-1,1-二氟-5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-羧酸(對映異構物1))-I-(Pen)+IP-NH2
Figure 02_image336
實例466，序列：((N-Me)G)-IC+SRSLP-(Oic)-I-(Pen)+IPDD-OH
Figure 02_image338
實例499，序列：AIC+S-(Arg(13C6,15N4))-SLP-(Oic)-I-(Pen)+IPD-OH
Figure 02_image340
活體外生物試驗 1. 試驗化合物之絲胺酸蛋白酶型態分析
在由不同人類絲胺酸蛋白酶組成之蛋白酶群組中測試試驗化合物，其等蛋白酶包括血漿激肽釋放酶、血纖維蛋白溶解酶、FXIa、凝血酶、因子Xa、tPA、與胰蛋白酶。
試驗說明
測定試驗化合物之抑制效力及/或選擇性。該分析法係依據產生螢光之肽蛋白酶受質受到蛋白酶催化裂解時所釋出胺基甲基香豆素(AMC)之螢光檢測。活性蛋白酶或酶原通常從人類血漿中純化，或胰蛋白酶係從人類胰臟中純化，及對應受質則自商品取得。
絲胺酸蛋白酶分析法包括下列酵素及受質。所有酵素及受質均於分析緩衝液(50 mM Tris/HCl pH7.4，100 mM NaCl，5 mM CaCl2，0.1% BSA)中稀釋。最終分析濃度為： ˙血漿激肽釋放酶 (Kordia；0.2 nM)，H-Pro-Phe-Arg-AMC (Bachem I-1295；5 µM) ˙血纖維蛋白溶解酶 (Kordia；0.1 µg/mL，1.2 nM)，MeOSuc-Ala-Phe-Lys-AMC (Bachem I-1275；50 µM) ˙因子XIa (Kordia；0.15 nM)，Boc-Glu(OBzl)-Ala-Arg-AMC (Bachem I-1575；5 µM) ˙凝血酶 (Kordia；0.02 nM)，Boc-Asp(OBzl)-Pro-Arg-AMC (Bachem I-1560；5 µM) ˙因子Xa (Kordia；1.3 nM)，Boc-Ile-Glu-Gly-Arg-AMC (Bachem I-1100；5 µM) ˙組織血纖維蛋白溶酶原活化劑(tPA，Loxo；2 nM)，CH3SO2-D-Phe-Gly-Arg-AMC (Pentapharm 091-06；5 µM) ˙胰蛋白酶 (Sigma；0.042 U/mL)，受質Boc-Ile-Glu-Gly-Arg-AMC (Bachem I-1100；5 µM)
測定試驗化合物效力時，採用酵素及對應受質稀釋液進行蛋白酶分析法： 在包含 1 µL/孔之試驗化合物或參考化合物連續稀釋液之384孔微滴定盤(白色，Greiner)中添加20 µL分析緩衝液、20 µl酵素稀釋液、及20 µl 受質。對照反應不包含試驗化合物(僅含DMSO)。通常於室溫下培養30 min(線性反應動力學)後，於微滴定盤螢光測定儀(例如：Tecan Safire II)中測定螢光(激發光360 nm，發射光465 nm)。由log 試驗化合物濃度相對於蛋白酶活性百分比作圖，決定IC50 值。
2. 生化人類MASP-1及MASP-2分析法 2.1重組人類MASP1及MASP2 活性蛋白酶之重組表現及蛋白質生產
取編碼對應於胺基酸297-699且具有C-端His標記及N-端Ig-κ分泌訊號之片段之人類MASP1之截短cDNA 序列(SEQ ID No: 2)次選殖至哺乳動物表現載體pcDNA3.1 (Invitrogen)中。
取編碼對應於胺基酸297-686且具有C-端His標記及N-端Ig-κ分泌訊號之片段之人類MASP1之截短cDNA 序列(SEQ ID No: 3)次選殖至哺乳動物表現載體pcDNA3.1 (Invitrogen)中。
取MASP1或MASP2表現載體，使用脂染胺試劑(Lipofectamine LTX® Reagent)(Thermo-Fischer)，依製造商之說明，轉染至HEK293 (ATCC No. CRL-1573)細胞株中。重組人類MASP1及MASP2 蛋白酶之成熟型分泌至培養基中。採用親和性層析法，於Ni-NTA Superflow 樹脂(Qiagen)上，依製造商說明，從條件培養基中純化MASP1及MASP2 蛋白質。 2.2  生化人類MASP1分析法
取在HEK 293細胞中產生之重組人類MASP1酵素於反應緩衝液(50 mM HEPES pH 8.0；100 mM NaCl；0.01% CHAPS；0.5 mM 穀胱甘肽)中稀釋成濃度20 nM，及取25 µl移至384-孔白色微滴定盤(Greiner Bio One 781075)之每一個孔中。取1 µl抑制劑化合物溶液(溶於DMSO，依對應濃度)或作為對照之純DMSO添加至同一個孔中。添加25 µl之20 µM FRET 受質ABZ-MYGGARRL-Lys (Dnp)-NH2溶液；(ABZ - 2-胺基苯甲醯基；DNP - 2,4-二硝基苯基；由Jerini Peptide Technologies, Berlin訂製合成法)至反應緩衝液中，啟動酵素反應。微滴定盤於32℃溫度下培養60-120 min。於適當螢光盤測定儀(例如：TECAN Ultra)，使用激發波長320 nm及發射波長420 nm，測定所增加之螢光強度。以試驗化合物濃度為函數，由抑制人類MASP1活性百分比計算IC50值。 2.3  生化人類MASP2分析法
取在HEK 293細胞中產生之重組人類MASP2酵素於反應緩衝液(50 mM HEPES pH 8.0；100 mM NaCl；0.01% CHAPS；0.5 mM 穀胱甘肽)中稀釋成濃度20 nM，及取25 µl移至384-孔白色微滴定盤(Greiner Bio One 781075)之每一個孔中。取1 µl抑制劑化合物溶液(溶於DMSO，依對應濃度)或作為對照之純DMSO添加至同一個孔中。添加25 µl之60 µM FRET 受質DABCYL-KISPQGYGRR-Glu(EDANS)-NH2溶液；(Dabcyl - 4 - ((4 - (二甲基胺基)苯基)偶氮)苯甲酸；Edans - 5-[(2-胺基乙基) 胺基]萘-1-磺醯基；由Jerini Peptide Technologies, Berlin訂製合成)至反應緩衝液中，啟動酵素反應。微滴定盤於32℃溫度下培養60-120 min。於適當螢光盤測定儀(例如：TECAN Ultra)，使用激發波長340 nm及發射波長490 nm，測定所增加之螢光強度。以試驗化合物濃度為函數，由抑制 人類MASP2活性百分比計算IC50值。 3. C3沉積分析法(人類、大鼠、小鼠、狗、迷你豬)
基本上依文獻(參考文獻)說明進行C3沉積分析法。在多孔分析盤(Greiner-Nunc 384 Maxi Sorp #464718)上塗佈來自釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)之甘露聚醣(Sigma M7504，10 µg/mL之0.05 M 碳酸鹽-碳酸氫鹽緩衝液，pH 9.6)，於4°C下一夜。使用TBS洗滌孔三次，接著與50 µL含1%牛血清白蛋白(BSA)之Tris-緩衝生理食鹽水(TBS)，於37°C下培養2小時，以阻斷非特異結合性。此步驟之後及每個培養步驟之後，使用C3洗滌緩衝液(TBS；0.05% Tween 20；5 mM CaCl2 )洗滌孔三次。分析孔接著與50 µL含試驗化合物及在Veronal緩衝液(Veronal Puffer (Lonza 12624E))中稀釋之血清之混合物於37°C下培養30 min。在預備試驗中不會對未塗佈之分析盤顯示可檢測之C3沉積之濃度即為所使用之血清濃度。已發現人類、大鼠、小鼠及狗血清之適當稀釋液在1：100 – 1：200範圍內，及對迷你豬血清則在1：20 – 1：100之範圍內。典型實驗中，化合物之試驗濃度在1x10-9 至5x10-5 mol/L之範圍內。洗滌後檢測 C3沉積，其係與多株兔子抗人類C3抗體(Dako (Biozol) A0062)培養1小時後，洗滌，及與接合過氧化酶之抗兔子IgG (Sigma A1949)於37°C下培養30 min，隨後洗滌，及與TMB 受質溶液於黑暗中培養。當發展出適當顏色時，添加 25 µL中止溶液(Sigma S5814)停止反應，並於光度計上，測定450 nm波長之吸光度進行定量。抗體係於補充0.5% BSA之C3洗滌緩衝液中稀釋。 4. 生化大鼠 MASP-1及MASP-2分析法 4.1 重組人類及大鼠MASP1及MASP2 活性蛋白酶之重組表現及蛋白質生產
取編碼對應於胺基酸302-704且具有C-端His標記及N-端Ig-κ分泌訊號之片段之大鼠 MASP1之截短cDNA 序列(SEQ ID No: 4)次選殖至哺乳動物表現載體pcDNA3.1 (Invitrogen)中。
取編碼對應於胺基酸296-685且具有C-端His標記及N-端Ig-κ分泌訊號之片段之大鼠 MASP2之截短cDNA 序列(SEQ ID No: 5)次選殖至哺乳動物表現載體pcDNA3.1 (Invitrogen)中。
取MASP1或MASP2表現載體，使用脂染胺試劑(Lipofectamine LTX® Reagent)(Thermo-Fischer)，依製造商之說明，轉染至HEK293 (ATCC No. CRL-1573)細胞株中。重組大鼠MASP1及MASP2 蛋白酶之成熟型分泌至培養基中。採用親和性層析法，於Ni-NTA Superflow 樹脂(Qiagen)上，依製造商說明，從條件培養基中純化MASP1及MASP2 蛋白質。 4.2 生化大鼠 MASP1分析法
取在HEK 293細胞中產生之重組大鼠MASP1酵素於反應緩衝液(50 mM HEPES pH 8.0；100 mM NaCl；0.01% CHAPS；0.5 mM 穀胱甘肽)中稀釋成濃度4 nM，及取25 µl移至384-孔白色微滴定盤(Greiner Bio One 781075)之每一個孔中。取1 µl抑制劑化合物溶液(溶於DMSO，依對應濃度)或作為對照之純DMSO添加至同一個孔中。添加25 µl之40 µM FRET 受質Dabcyl-MYGGARRL-Glu(Edans)-NH2; (Dabcyl - 4 - ((4 - (二甲基胺基)苯基)偶氮)苯甲酸；Edans - 5-[(2-胺基乙基) 胺基]萘-1-磺醯基；由Jerini Peptide Technologies, Berlin訂製合成)至反應緩衝液中，啟動酵素反應。微滴定盤於32℃溫度下培養60-120 min。於適當螢光盤測定儀(例如：TECAN Ultra)，使用激發波長340 nm及發射波長490 nm，測定所增加之螢光強度。以試驗化合物濃度為函數，由抑制大鼠 MASP2 活性百分比計算IC50值。 4.3 生化大鼠 MASP2分析法.
取在HEK 293細胞中產生之重組大鼠MASP2酵素於反應緩衝液(50 mM HEPES pH 8.0；100 mM NaCl；0.01% CHAPS；0.5 mM 穀胱甘肽)中稀釋成濃度20 nM，及取25 µl移至384-孔白色微滴定盤(Greiner Bio One 781075)之每一個孔中。取1 µl抑制劑化合物溶液(溶於DMSO，依對應濃度)或作為對照之純DMSO添加至同一個孔中。添加25 µl之30 µM FRET受質Abz-IEGRTSED-(Lys)Dnp-NH2；(ABZ - 2-胺基苯甲醯基；DNP - 2,4-二硝基苯基；由Jerini Peptide Technologies, Berlin訂製合成)至反應緩衝液中，啟動酵素反應。微滴定盤於32℃溫度下培養60-120 min。於適當螢光盤測定儀(例如：TECAN Ultra)，使用激發波長320 nm及發射波長420 nm，測定所增加之螢光強度。以試驗化合物濃度為函數，由抑制大鼠 MASP2 活性百分比計算IC50值。 表18：參考肽之平均IC50
參考編號 人類 MASP1 IC50 [mol/L] 人類 MASP2 |IC50 [mol/L] 人類 C3- 沉積 血清 | IC50 [mol/L]
1 1.56E-08 1.09 E-06 1.52E-07
2 1.80E-08 6.10E-07 1.85E-07
3 1.80E-08 6.10E-07 5.10E-08
A 7.45E-09 9.14 E-07 3.94 E-08
B 8.00E-09 3.90 E-07 2.82E-08
C 3.60E-09 3.00E-06 2.57E-08
表19：本發明肽之平均IC50
實例 編號 人類 MASP1 IC50 [mol/L] 人類 MASP2 |IC50 [mol/L] 人類 C3- 沉積 血清 | IC50 [mol/L]
4 9.30E-10 6.80E-08 8.11E-09
5 9.60E-10 9.70E-08 1.03E-08
6 1.10E-09 5.00E-08 1.39E-08
7 1.10E-09 2.30E-08 8.71 E-08
8 1.10E-09   1.45E-08
9 1.14E-09 5.00E-08 2.85E-08
10 1.19E-09 3.60E-08 2.75E-08
11 1.20E-09 6.20E-07 3.86E-08
12 1.20E-09 3.70E-08 1.42E-07
13 1.85E-09 1.00E-07 6.62E-09
14 1.30E-09 6.20E-08 1.18E-07
15 1.30E-09 8.70E-08 1.56E-08
16 1.30E-09 2.80E-08 5.01E-09
17 1.33E-09 1.80E-08 3.82E-07
18 1.35E-09 4.00E-08 2.09E-07
19 1.36E-09 1.00E-07 1.24E-07
20 1.40E-09 7.20E-07 3.65E-08
21 1.40E-09 6.20E-08 1.63E-08
22 1.40E-09 5.30E-08 1.39E-08
23 1.40E-09 4.00E-08 6.25E-09
24 1.43E-09 9.80E-08 2.83E-08
25 1.50E-09 1.00E-07 1.28E-08
26 1.50E-09 9.30E-08 1.04E-08
27 1.50E-09 1.40E-07 8.50E-09
28 1.50E-09 5.60E-08 1.31E-08
29 2.45E-09 4.20 E-08 6.99E-09
30 1.53E-09 1.40E-07 3.61E-08
31 1.57E-09 1.77E-08 4.28E-08
32 1.60E-09 1.10E-07 2.93E-08
33 1.60E-09   1.02E-08
34 1.60E-09 4.50E-08 3.92 E-08
35 1.65E-09 1.20E-07 1.57E-07
36 1.65E-09 2.60E-08 4.51E-07
37 1.70E-09 1.20E-07 1.46E-08
38 1.70E-09 8.70E-08 7.26E-08
39 1.70E-09 3.10E-08 1.08E-08
40 1.70E-09 5.90E-08 1.21E-08
41 1.80E-09 4.00E-08 1.21E-08
42 1.80E-09 3.60E-08 1.41E-08
43 1.80E-09 7.60E-08 2.73E-08
44 1.80E-09 7.30E-08 6.85E-08
45 1.83E-09 2.45E-08 1.86E-08
46 1.90E-09 4.30E-07 2.57E-08
47 1.90E-09 1.20E-07 4.34E-08
48 1.95E-09 2.25E-07 1.02E-07
49 2.00E-09 1.10E-07 3.56E-07
50 2.00E-09 7.60E-08 3.19E-08
51 2.00E-09 4.40E-08 3.95E-08
52 2.00E-09 2.40E-08 2.30E-08
53 2.00E-09 8.00E-08 3.03E-08
54 2.00E-09 7.30E-08 8.81E-09
55 2.00E-09 4.20E-08 5.40E-08
56 2.00E-09 1.30E-07 6.97E-09
57 2.00E-09 4.70E-08 1.17E-08
58 2.00E-09 4.20E-08 2.13E-08
59 2.09E-09   2.38E-07
60 2.10E-09 7.20E-08 1.15E-08
61 2.10E-09 9.80E-08 3.94 E-08
62 2.10E-09 9.60E-08 5.91 E-08
63 2.10E-09 1.30E-07 7.91 E-08
64 2.10E-09 2.00E-08 2.98 E-08
65 2.20E-09 9.80E-08 9.82E-08
66 2.20E-09 1.20E-07 3.60E-07
67 2.20E-09 4.30E-08 1.21E-07
68 2.20E-09 7.00E-08 1.40E-08
69 2.20E-09 5.10E-08 1.31E-08
70 2.20E-09 6.50E-08 4.84E-08
71 2.20E-09 6.30E-08 7.11 E-08
72 2.20E-09 4.20E-08 5.98 E-08
73 2.20E-09 3.00E-08 7.04 E-08
74 2.20E-09 5.20E-08 5.20E-08
75 2.23E-09 1.50E-07 3.20 E-08
76 2.30E-09 8.70E-08 1.18E-08
77 2.40E-09 1.50E-07 5.33E-08
78 2.40E-09 1.70E-07 1.46E-08
79 2.40E-09 1.10E-07 2.59E-07
80 2.40E-09 5.70E-08 2.00E-08
81 2.40E-09 6.40E-08 1.62E-08
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327 2.30E-08 2.50E-08 1.94E-08
328 2.30E-08 1.30E-08 3.16E-08
329 2.40E-08 2.60E-07 6.86E-06
330 2.40E-08 1.30E-07 3.30E-08
331 2.40E-08 6.10E-07 1.81E-07
332 2.50E-08 2.30E-08 2.43E-08
333 2.50E-08 8.40E-09 1.40E-08
334 2.50E-08 5.50E-09 7.97E-09
335 2.50E-08 1.80E-07 5.66E-08
336 2.50E-08 6.90E-07 2.72E-07
337 2.50E-08 2.00E-06 2.51E-05
338 2.60E-08 3.60E-07 3.35E-07
339 2.60E-08 6.40E-07 4.73E-07
340 2.60E-08 3.00E-07 8.69E-07
341 2.60E-08 4.30E-07 2.89E-07
342 2.60E-08 1.70E-08 4.06E-08
343 2.70E-08 1.20E-08 1.60E-08
344 2.70E-08 5.10E-08 4.43E-08
345 2.70E-08 3.90E-07 1.93E-07
346 2.70E-08 1.90E-07 6.84E-08
347 2.75E-08 8.55E-07 1.51E-07
348 2.80E-08 6.90E-07 4.91E-06
349 9.60E-09 4.20E-07 7.06E-08
350 2.80E-08 3.70E-07 1.68E-07
351 2.80E-08 1.20E-08 7.74E-09
352 2.80E-08 7.10E-08 2.85E-07
353 2.80E-08 5.00E-08 4.47E-07
354 2.90E-08 5.10E-07 5.94E-07
355 2.90E-08 9.30E-07 1.62E-07
356 2.90E-08 1.60E-08 2.88E-08
357 3.10E-08 1.30E-06 1.15E-05
358 3.10E-08 1.90E-08 4.38E-08
359 3.10E-08 3.40E-08 3.26E-08
360 3.10E-08 5.50E-08 9.13E-08
361 3.20E-08 1.00E-06 2.30E-07
362 3.30E-08 6.50E-08 3.94E-08
363 3.30E-08 1.20E-07 1.30E-07
364 3.30E-08 9.80E-08 2.28E-08
365 3.40E-08 1.04E-08 4.57E-08
366 3.40E-08 9.00E-09 4.71E-09
367 3.50E-08 6.00E-07 1.31E-06
368 3.50E-08 1.20E-06 5.58E-07
369 3.50E-08 4.20E-07 6.06E-08
370 3.50E-08 9.35E-08 1.30E-08
371 3.60E-08 8.10E-07 3.15E-07
372 3.60E-08 6.60E-07 4.55E-07
373 3.70E-08 4.50E-07 5.24E-07
374 3.70E-08 1.40E-05 6.70E-05
375 3.70E-08 9.60E-09 1.13E-07
376 1.10E-09 3.50E-08 1.38E-08
377 3.70E-08 8.10E-07 2.67E-07
378 3.80E-08 1.10E-06 3.10E-07
379 3.90E-08 3.60E-07 1.92E-07
380 4.00E-08 8.10E-07 9.47E-07
381 4.00E-08 5.50E-07 5.47E-08
382 4.00E-08 4.10E-08 1.27E-07
383 4.00E-08 8.00E-07 1.53E-05
384 4.20E-08 2.60E-07 8.12E-07
385 4.25E-08 8.95E-09 5.64E-08
386 4.30E-08 7.50E-07 3.05E-07
387 4.40E-08 2.20E-06 8.76E-08
388 4.50E-08 7.50E-07 4.33E-07
389 4.60E-08 3.30E-07 6.03E-08
390 4.70E-08 1.30E-06 1.15E-06
391 4.70E-08 9.50E-09 2.57E-08
392 4.70E-08 8.00E-08 6.24E-08
393 4.90E-08 3.80E-06 5.45E-07
394 5.20E-08   1.12 E-07
395 5.20E-08 1.20E-08 4.59E-08
396 5.30E-08 2.80E-08 2.55E-08
397 5.40E-08 3.80E-06 7.20E-07
398 5.40E-08 2.20E-08 1.92E-08
399 5.50E-08 5.20E-07 3.42E-07
400 5.50E-08 9.00E-09 5.26E-08
401 5.60E-08   4.48E-07
402 5.80E-08 2.10E-06 2.55E-05
403 5.90E-08 7.40E-07 6.59E-07
404 6.20E-08 1.70E-08 3.51E-08
405 6.30E-08 9.80E-07 8.69E-08
406 6.40E-08 1.30E-08 6.13E-08
407 6.40E-08 1.20E-08 1.54E-08
408 6.90E-08 3.20E-08 2.86E-07
409 7.10E-08 5.70E-07 1.53E-05
410 7.60E-08 2.70E-06 4.32E-06
411 7.60E-08 2.50E-06 2.84E-07
412 7.70E-08 5.00E-06 1.83E-07
413 7.80E-08 2.00E-06 1.05E-05
414 8.60E-08 4.00E-06 2.38E-05
415 8.60E-08 2.00E-08 1.86E-08
416 8.70E-08 1.90E-07 4.14E-05
417 8.90E-08 1.70E-05 2.07E-07
418 1.80E-09 1.30E-07 5.39E-08
419 5.10E-09 1.00E-07 8.29E-08
421 5.00E-09 9.80E-09 5.22E-08
422 8.10E-09 1.20E-08 5.91E-08
423 5.70E-09 1.20E-08 4.77E-08
424 6.60E-09 1.10E-08 5.26E-08
425 7.70E-09 1.30E-08 4.78E-08
426 9.10E-09 1.50E-08 4.60E-08
427 1.00E-08 1.50E-08 6.39E-08
428 3.70E-09 3.20E-07 6.03E-08
429 6.90E-09 1.20E-08 4.72E-08
430 1.40E-09 9.10E-08 4.05E-08
431 2.00E-09 1.70E-07 8.64E-08
432 2.70E-09 3.70E-07 1.73E-07
433 1.70E-09 1.20E-07 8.02E-08
434 1.00 E-06 1.00 E-06  
435 9.20E-09 1.70E-08 5.82E-08
436 2.30E-09 4.40E-08 5.19E-08
437 2.20E-09 7.60E-08 5.61E-08
438 2.90E-09 8.30E-08 5.08E-08
439 3.20E-09 1.50E-08 2.84E-08
440 1.80E-08 2.60E-08 2.15E-07
441 6.50E-08 2.20E-07 2.53E-07
443 7.80E-10 7.40E-08 2.52E-08
444 2.80E-09 6.10E-08 2.95E-08
445 3.00E-09 3.00E-07 4.99E-08
446 2.70 E-09 7.20 E-08  
447 4.70 E-09 6.55 E-08  
448 4.40E-07 1.00E-06 3.45E-06
449 1.80E-09 9.30E-08 5.58E-08
450 5.80E-09 2.30E-07 7.34E-08
451 2.60E-09 6.10E-08 5.69E-08
452 2.00E-09 1.00E-07 3.78E-08
453 2.50E-09 5.60E-08 5.98E-08
454 2.00E-09 9.90E-08 6.57E-08
455 2.90E-09 8.50E-08  
456 1.90E-09 1.10E-07 5.55E-08
457 1.70E-08 4.50E-08 5.06E-08
458 5.10E-09 2.10E-07 1.07E-07
459 4.30 E-09 2.00 E-07 1.04E-07
460 8.20 E-09 1.40 E-07 6.20E-08
462 1.20 E-08 1.30 E-07 6.10E-08
463 3.80 E-09 2.60 E-07 6.39E-08
464 1.00 E-09 4.50 E-08 7.76E-08
465 4.10 E-10 1.20 E-07 9.94E-08
466 7.20 E-10 4.00 E-08 7.16E-08
467 6.60 E-09 5.50 E-08 4.15E-08
468 4.50 E-09 9.70 E-08 5.77E-08
469 1.90 E-09 1.10 E-07 4.00E-08
470 1.80 E-09 5.80 E-08 4.12E-08
471 2.60 E-09 8.20 E-08 4.49E-08
472 4.00 E-09 5.10 E-08 4.39E-08
474 2.40E-09 7.80E-08  
475 2.60E-08 1.80E-08  
476 3.80E-09 6.10E-08  
477 9.60E-09 1.72E-07  
478 3.70E-09 3.70E-08  
479 5.85E-09 1.75E-07  
480 3.00E-09 3.50E-08  
481 2.50E-09 5.50E-08  
482 2.80E-09 2.50E-08  
483 5.40E-09 6.40E-08  
484 5.50E-09 1.20E-07  
485 2.10E-09 3.50E-08  
486 3.80E-09 3.20E-08  
487 2.35E-09 4.80E-08  
488 5.20E-09 1.10E-07  
489 2.40E-09 3.20E-08  
490 1.95E-08 2.10E-08 4.64E-08
491 5.80E-08 4.30E-08  
492 3.00E-09 1.80E-07  
493 3.20E-09 1.20E-07  
494 2.60E-09 8.40E-08  
495 3.40E-09 3.70E-08  
496 2.00E-09 3.10E-08  
497 2.30E-09 4.70E-08  
498 2.30E-09 3.90E-08  
500 7.70E-09 1.50E-07  
501 4.80E-09 5.90E-08  
502 6.50E-09 1.10E-07  
503 6.30E-09 6.20E-08  
504 6.80E-09 1.20E-07  
505 7.90E-09 7.60E-08  
506 6.20E-09 7.60E-08  
507 1.70E-09 2.70E-08  
508 1.40E-08 3.30E-07  
509 6.50E-08 7.00E-08  
510 7.00E-08 1.70E-07  
511 5.26E-07 1.00E-06  
512 1.00E-06 1.00E-06  
513 7.40E-07 1.00E-06  
514 5.30E-09 4.60E-08  
515 7.00E-09 1.50E-07  
516 7.50E-09 1.00E-06  
517 3.10E-09 5.10E-07  
518 1.00E-06 1.00E-06  
519 1.80E-08 4.70E-08  
520 2.10E-08 6.40E-08  
521 1.70E-08 2.00E-08  
522 4.40E-09 2.20E-08  
523 4.40E-09 2.40E-08  
524 7.80E-09 1.00E-06  
525 2.00E-08 2.30E-07  
526 6.60E-09 1.04E-07 4.85E-08
527 2.30E-08 9.60E-08 1.54E-08
528 7.50E-09 6.50E-08 2.03E-08
529 3.10E-09 5.40E-08 3.95E-08
530 6.78 E-09 1.16 E-07 2.14 E-08
531 1.71 E-08 2.61 E-07 3.41E-08
532 2.80 E-08 1.66 E-07 2.03E-08
表20：參考肽之平均IC50
參考編號 大鼠 MASP1 IC50 [mol/L] 大鼠 MASP2 |IC50 [mol/L] 大鼠 C3- 沉積 血清 | IC50 [mol/L]
1 6.86 E-08 6.80 E-08 1.70E-06
3     1.14E-06
A 5.02 E-08 6.84 E-08 1.41E-06
B 8.34 E-08 5.42 E-08 6.49E-07
C 2.10 E-07   5.79E-07
表21：本發明肽之平均IC50
實例 No 大鼠 MASP1 IC50 [mol/L] 大鼠 MASP2 |IC50 [mol/L] 大鼠 C3- 沉積 血清 | IC50 [mol/L]
5 2.80 E-08 4.90 E-08 2.14E-07
7 3.00E-08 1.60E-08  
12 1.30E-08    
13 9.32 E-09 1.64 E-08 2.42E-07
14 2.30E-08    
17 3.10E-08    
18 2.60E-08    
19 2.30E-08    
20 1.30E-08    
21 6.70E-08 4.00E-08  
26 5.50E-08 5.34E-08 1.50E-07
27 9.81 E-09 9.10 E-09 1.46E-07
29 1.05 E-08 1.74 E-08 1.96E-07
30 2.80E-08    
31 2.20E-08    
32 5.60E-08 4.80E-08  
35 4.60E-08    
36 2.40E-08    
37 1.40E-07    
38 1.20E-08    
39 4.90E-08 3.70E-08  
41 2.80E-08 1.30E-08  
44 8.70E-08 3.50E-08  
45 4.00E-08    
48 5.15E-08    
49 6.00E-08    
54 1.60E-07 4.80E-08  
55 6.50E-08 2.70E-08  
59 2.50E-07    
62 5.50E-08 5.00E-08  
65 7.20E-09    
66 7.00E-08    
67 7.20E-08 3.60E-08  
72 4.30E-08 2.70E-08  
73 4.30E-08 2.80E-08  
74 7.10E-08 2.80E-08  
75 3.50E-08 3.49E-08 1.83E-07
77 6.60E-08    
78 4.80E-08    
79 8.50E-08    
83 1.20E-07 4.80E-08  
85 7.50E-08 3.70E-08  
86 1.60E-08    
88 3.60E-08 6.80E-08  
90 6.70E-08 5.50E-08  
97 1.20E-07 5.10E-08  
98 1.70E-08    
99 2.20E-07    
101 7.60E-08 5.00E-08  
102 1.40E-07    
103 1.10E-07    
104 7.70E-08    
108 1.10E-08    
109 7.60E-08 4.20E-08  
119 1.30E-07 7.00E-08  
123 5.90E-08    
126 1.10E-08 1.00E-08  
128 3.50E-08    
133 9.80E-08 6.70E-08  
140 1.00E-07 5.00E-08  
141 1.40E-07 9.50E-08  
142 1.09 E-08 1.71 E-08 4.72E-07
146 1.10E-07 6.80E-08  
150 1.20E-07 5.30E-08  
153 4.00 E-08 5.03 E-08 8.00E-07
154 7.20E-08    
156 2.10E-08 1.60E-08  
158 2.47E-07 4.20E-07  
164 7.90E-08 2.80E-08  
168 1.40E-07 5.30E-08  
169 3.70E-07    
170 5.40E-08 9.82 E-09 2.36E-07
171 4.20E-08 2.10E-08  
174 6.56E-08 3.51E-08  
175 2.80E-08    
180 4.20E-08    
181 1.30E-07    
182 1.30E-08    
185 5.70E-08 1.09 E-08 2.36E-07
186 3.80E-07    
187 7.70E-08 3.70E-09  
194 7.00 E-08 4.20 E-08  
197 1.00E-07 1.50E-08  
199 1.80E-07 4.90E-08  
205 3.00E-07    
207 4.30E-08 3.36E-08  
208 6.10E-08 8.60E-09  
209 3.30E-07    
210 1.90E-08    
211 7.50E-08 2.30E-08  
212 2.46 E-08 3.45 E-08 2.31E-07
216 2.40E-07    
222 2.40E-07    
223 1.20E-07    
224 6.04 E-08 4.24 E-08 7.83E-07
225 2.30E-07    
226 2.90E-08 2.90E-09  
228 2.60E-07    
230 3.70E-07    
231 3.80E-08    
232 6.73E-08 1.25E-07  
234 7.80E-08    
235 3.80E-07 2.90E-08  
236 8.90E-07    
237 1.00 E-06 1.00 E-06  
238 1.50E-07    
241 1.30E-07    
243 1.40E-07    
246 7.80E-08    
247 7.00E-07    
248 2.60E-07    
250 7.70E-08    
253 1.30E-07    
254 3.20E-07    
259 2.70E-08    
260 1.60E-07    
261 3.00E-07    
262 4.90E-07    
267 1.30E-07 4.20E-08  
268 1.00E-07    
269 1.20E-07 9.60E-09  
270 1.70E-07    
271 8.87 E-08 5.52 E-08 1.06E-06
274 8.90E-08    
275 1.50E-07    
276 2.00E-07    
277 1.90E-07    
278 8.30E-08    
281 2.70E-07 3.08E-07 1.41E-06
282 4.70E-07    
284 6.00E-08 9.70E-09  
286 2.30E-07    
287 2.50E-07    
289 1.80E-07    
294 9.70E-08 9.60E-09  
305 7.60E-08 5.30E-09  
313 2.20E-07    
323 5.18 E-08 6.01 E-08 1.14E-06
343 1.40E-07 1.90E-08  
347 1.00 E-06 1.00 E-06  
348 3.50E-07    
360 1.20E-07 7.30E-08  
367 1.20E-07    
370 2.35E-07 1.70E-07  
381 6.00E-07 4.70E-07  
400 4.50E-08 1.10E-08  
405 6.50E-07 5.10E-07  
419 7.00E-08 4.20E-08  
436 3.90E-08 3.10E-08  
437 4.60E-08 4.00E-08  
438 3.10E-08 2.20E-08  
439 3.60E-08 9.40E-09  
440 6.10E-07 1.40E-08  
441 4.10E-07 1.20E-07  
443 2.90E-08 4.70E-09  
444 1.30E-07 9.80E-09  
445 1.50E-07 9.40E-08  
447 2.10 E-08 3.50 E-08  
448 5.00E-06 5.00E-06  
449 4.50E-08 4.45E-08  
450 3.10E-08 5.20E-08  
451 4.60E-08 4.60E-08  
452 3.60E-08 3.70E-08  
453 3.80E-08 3.20E-08  
454 1.27E-07 7.90E-08  
455 4.10E-08 3.20E-08  
456 3.90E-08 3.00E-08  
457 2.00E-08 5.00E-09 2.34E-07
458 2.50E-07 1.00E-07  
459 1.80E-07 5.10E-08  
460 2.10E-07 6.90E-08  
462 1.60E-07 1.50E-07  
463 1.90E-07 1.00E-07  
464 9.40E-08 1.20E-07  
465 7.20E-08 1.40E-07  
466 1.76E-08 7.20E-08  
467 1.70E-07 7.00E-08  
468 1.30E-07 8.00E-08  
469 1.20E-07 3.40E-08  
470 1.00E-07 5.40E-08  
471 7.80E-08 7.10E-08  
472 1.00E-07 4.90E-08  
474 8.70E-08 2.60E-08  
475 2.50E-07 2.50E-08  
476 5.30E-08 6.10E-08  
477 1.54E-07 1.23E-07  
478 6.80E-08 4.90E-08  
479 8.40E-08 4.50E-08  
480 2.40E-08 4.10E-08  
481 2.00E-08 3.60E-08  
482 1.80E-08 3.30E-08  
483 3.40E-08 5.00E-08  
484 6.30E-08 8.80E-08  
485 3.60E-08 3.20E-08  
486 6.90E-08 6.80E-08  
487 6.70E-08 3.80E-08  
488 4.10E-08 3.60E-08  
489 4.20E-08 2.20E-08  
490 1.25E-08 1.50E-08 3.66E-07
491 2.00E-08 2.30E-08  
492 6.50E-08 8.10E-08  
493 4.40E-08 4.90E-08  
494 3.80E-08 6.20E-08  
495 4.50E-08 6.60E-08  
496 3.10E-08 3.10E-08  
497 5.80E-08 3.90E-08  
498 4.40E-08 4.20E-08  
526 4.85E-07 2.53E-07  
527 2.40E-07 4.20E-08  
528 4.20E-07 8.20E-09  
529 7.30E-07 1.00E-07  
530 2.33 E-08 1.84 E-08 2.82E-07
531 2.60 E-08 7.41 E-08  
532 2.42 E-08 1.76 E-08  
4. 單側腎臟切除後之大鼠腎臟缺血再灌流損傷(IRI)
所有過程均符合用於科學目的的動物之國家法規(dt. Tierschutzgesetz)及EU指令，並經過Bayer AG的動物保護辦公室及適格的區域管理部門(LANUV Recklinghausen)核准。可以自由取用標準實驗室飼料及自來水。典型實驗中，動物之使用數量為n = 6至12。動物隨機分配至實驗組別。在較佳體重在250至350 g範圍內之雄性單側腎臟切除威斯塔(Wistar)大鼠中進行腎臟缺血再灌流損傷 (IRI)。單側腎臟切除之大鼠吸入含2%異氟烷(isoflurane)之空氣而維持麻醉。經皮下注射400 µl/kg之含25% Ketavet與8% Rompun之0.9 NaCl提供止痛效果。透過背外側腹壁中的小切口讓右腎突出後，切除單側腎臟並結紮腎臟腳部。切除單側腎臟後，利用手術縫線逐層縫合腹部切口，讓動物恢復7至8天後才進行IRI。IRI係在麻醉下進行，並如上述提供止痛效果。透過腹壁小切口讓剩餘的左腎突出，並利用防止創傷之微血管夾，在典型設定下夾住腎臟腳血管45分鐘，此期間，腎臟連同原位的血管夾一起重新置入腹腔內，以確保溫熱的缺血。45 min後，打開夾子並移除，如上述利用縫線縫合切口。利用手術前即置入頸靜脈內之聚乙烯導管，經靜脈內投與試驗化合物或媒劑。
化合物溶於適當媒劑中，在IRI之前預防性投藥或在完成IRI之後醫療性投藥。採用之典型劑量範圍為0.1 – 30 mg/kg i.v.。對動物投與不含化合物之媒劑作為對照組。偽處理對照組動物則如上述進行完整手術過程，但不閉合用於誘發缺血之夾子。
在IRI之後第1天及第8天，在麻醉下取得血樣。在典型設定下，在IRI之後8天殺死動物，取出腎臟樣本，於液態氮中冷凍。在另一個典型設定下，在IRI之後1天殺死動物。
為了分析腎臟功能所測定血漿樣本之典型實驗室參數為肌酸酐及尿素。測定肌酸酐清除率時，動物保持在代謝籠中，收集尿液至少16小時。測定尿液體積流(VU )及測定尿與血漿肌酸酐濃度(分別為[Crea]U 及[Crea]Pl )後，根據標準公式：ClCrea = VU * [Crea]U / [Crea]Pl 計算肌酸酐清除率(ClCrea )。
RNA萃取及定量性實時聚合酶鏈反應：採用Trizol法，從組織樣本中萃取總RNA。於生物分析儀(Bioanalyzer)(Agilent)上檢測所得RNA之完整性。進行逆轉錄時，取1 μg總RNA先使用無RNase之DNase I (Gibco)於室溫下消解15 min後，使用 Promiscript (Promega)，在總反應體積40 μl下，根據套組供需商之標準製程進行逆轉錄。加熱酵素至65 °C滅活15 min後，使用雙蒸餾水稀釋所得cDNA 至最終體積150 μl，每次PCR反應選用4 μl。依文獻說明(Ellinghaus等人，2005)進行之實時 PCR包括相對於作為管家基因之胞質β-肌動蛋白校正原始數據。所得表現係以任意單位表示，所採用寡核苷酸引子與探針之序列示於表1。 5. 豬之主動脈內氣球阻塞後之腎臟缺血再灌流損傷 (IRI)
所有過程均符合用於科學目的的動物之國家法規(dt. Tierschutzgesetz)及EU指令，並經過Bayer AG的動物保護辦公室及適格的區域管理部門(LANUV Recklinghausen)核准。採用較佳體重在12至16 kg範圍內之雌性哥廷根(Göttingen)迷你豬(Ellegaard, Denmark)進行實驗。動物隨機分配至實驗組別。
採用文獻說明，修改最低侵入性方法(Simon等人，Effects of intravenous sulfide during porcine aortic occlusion-induced kidney ischemia/reperfusion injury. Shock. 2011;35:156-163；Matejkova等人， Carbamylated erythropoietin-FC fusion protein and recombinant human erythropoietin during porcine kidney ischemia/reperfusion injury. Intensive Care Med. 2011;39:497–510)。簡言之，讓豬預先接受肌內注射Ketavet® / Stresnil®投藥後，藉由連續i.v.輸注 Ketavet®、Dormicum®及Pancuronium®，保持麻醉。氣管內插管的動物使用兒童呼吸器 (Avance CS², GE Healthcare)進行人工呼吸，氧氣-空氣混合物之潮氣體積為6至8 mL/kg，恆定吐氣末正壓(PEEP)為3 - 4 cm H2 O及頻率為13至20 min-1 。調整通氣，保持基線時之動脈PaCO2為約40 mmHg。將導管置入右頸靜脈，供投與藥物與流體。林格氏(Ringer) -乳酸鹽溶液則經靜脈內，依恆定速率10 mL/kg/h輸注。動物接受50 i.E./kg肝素i.v.。採用已連接置入右頸動脈內之Pulsion 4F 熱稀釋導管(Thermodilution-catheter)(PV2014L08N)之PiCCO® 系統 (Pulsion, Germany)，在置入必要探針及加裝導管至適當壓力傳感器及記錄儀器後，例行測定下列心血管及呼吸參數：中樞靜脈壓(經由左頸靜脈)、動脈血壓及心跳速率(BP及HR；經由左頸動脈)及心輸出量(CO)與全身性血管阻力(SVR)。用於測定CVP、BP及HR之導管係利用Combitrans傳感器(Braun, REF 5203660)附接Ponemah記錄系統。取Fogarty 閉鎖導管(8F/14F, Edwards Lifesiences, REF 6208014F)經由左股動脈插入腹主動脈，因此讓帶有可膨脹球囊的尖端位在腎臟動脈上游。經由腹部小切口插入導管至膀胱，供連續收集尿液。依規律間隔收集動脈血樣，測定其中肌酸酐、尿素、肝酵素、血球、及化合物濃度。在Stat Profile® PRIME® (Nova Biomedical)血液氣體分析儀上，依規律間隔測定動脈血樣之動脈pO2 、pCO2 及pH。採用加裝2.0至5.0 MHz廣譜弧型傳感器(C1-5-RS, REF 5384874)之LOGIQ e獸醫超音波裝置(General Electrics)，依規律間隔，利用杜普勒(Doppler)超音波測定血流阻力指數，評估腎臟灌流。腎血流阻力指數(RRI)為評估患者中急性腎臟損傷嚴重性之合適參數(Darmon等人，Diagnostic accuracy of Doppler renal resistive index for reversibility of acute kidney injury in critically ill patients. Intensive Care Med. 2011;37(1):68-76)。
當心血管參數顯示穩定基線時(其通常為手術後60 min)時，即開始記錄，並收集樣本的基線參數。連續測定HR及MABP，並記錄2分鐘間隔的平均值。實驗結束時，放血殺死豬。
使用生理食鹽水充滿Fogarty球囊導管球囊，立即中斷流向腎臟及腹部器官的血流，並造成球囊上游主動脈血壓陡然上升，而誘發腎臟損傷。進一步利用杜普勒超音波檢查腎臟血管，證實血流已中斷。典型實驗中，主動脈保持閉鎖90至120 min，直到球囊洩氣後再灌流。再灌流後，加倍林格氏-乳酸鹽溶液輸注速率至20 mL/kg/h，以穩定血壓，並可以利尿。再灌流後，追蹤所有參數至長6小時。
化合物溶於適當媒劑中，在IRI 之前進行預防性投藥或在IRI完成後進行醫療性投藥。所採用之典型劑量範圍為0.1 – 10 mg/kg i.v.。典型實驗中，每組至多6隻動物，測試至多3個劑量。對動物投與不含化合物之媒劑作為對照組。偽處理對照組動物除了不誘發缺血外，其餘如上述進行完整過程。
再灌流後之腎臟功能測定較佳係(但不限於)利尿性、血清肌酸酐、血清鉀、血清碳酸氫鹽、及利用杜普勒超音波檢測之血流阻力指數。 表22：序列表
SEQ ID No 序列
SEQ ID 1 GIC+SRSLPPIC+IPD-OH
SEQ ID 2 METDTLLLWVLLLWVPGSTGDAGNECPELQPPVHGKIEPSQAKYFFKDQVLVSCDTGYKVLKDNVEMDTFQIECLKDGTWSNKIPTCKIVDCRAPGELEHGLITFSTRNNLTTYKSEIKYSCQEPYYKMLNNNTGIYTCSAQGVWMNKVLGRSLPTCLPVCGLPKFSRKLMARIFNGRPAQKGTTPWIAMLSHLNGQPFCGGSLLGSSWIVTAAHCLHQSLDPEDPTLRDSDLLSPSDFKIILGKHWRLRSDENEQHLGVKHTTLHPQYDPNTFENDVALVELLESPVLNAFVMPICLPEGPQQEGAMVIVSGWGKQFLQRFPETLMEIEIPIVDHSTCQKAYAPLKKKVTRDMICAGEKEGGKDACAGDSGGPMVTLNRERGQWYLVGTVSWGDDCGKKDRYGVYSYIHHNKDWIQRVTGVRNHHHHHH
SEQ ID 3 METDTLLLWVLLLWVPGSTGDAQPCPYPMAPPNGHVSPVQAKYILKDSFSIFCETGYELLQGHLPLKSFTAVCQKDGSWDRPMPACSIVDCGPPDDLPSGRVEYITGPGVTTYKAVIQYSCEETFYTMKVNDGKYVCEADGFWTSSKGEKSLPVCEPVCGLSARTTGGRIYGGQKAKPGDFPWQVLILGGTTAAGALLYDNWVLTAAHAVYEQKHDASALDIRMGTLKRLSPHYTQAWSEAVFIHEGYTHDAGFDNDIALIKLNNKVVINSNITPICLPRKEAESFMRTDDIGTASGWGLTQRGFLARNLMYVDIPIVDHQKCTAAYEKPPYPRGSVTANMLCAGLESGGKDSCRGDSGGALVFLDSETERWFVGGIVSWGSMNCGEAGQYGVYTKVINYIPWIENIISDFHHHHHH
SEQ ID 4 METDTLLLWVLLLWVPGSTGDAGNECPKLQPPVYGKIEPSQAVYSFKDQVLISCDTGYKVLKDNEVMDTFQIECLKDGAWSNKIPTCKIVDCGVPAVLKHGLVTFSTRNNLTTYKSEIRYSCQQPYYKMLHNTTGVYTCSAHGTWTNEVLKRSLPTCLPVCGLPKFSRKHISRIFNGRPAQKGTTPWIAMLSQLNGQPFCGGSLLGSNWVLTAAHCLHHPLDPEEPILHNSHLLSPSDFKIIMGKHWRRRSDEDEQHLHVKHIMLHPLYNPSTFENDLGLVELSESPRLNDFVMPVCLPEHPSTEGTMVIVSGWGKQFLQRLPENLMEIEIPIVNYHTCQEAYTPLGKKVTQDMICAGEKEGGKDACAGDSGGPMVTKDAERDQWYLVGVVSWGEDCGKKDRYGVYSYIYPNKDWIQRVTGVRNHHHHHH
SEQ ID 5 METDTLLLWVLLLWVPGSTGDTAQPCPDPTAPPNGHISPVQATYVLKDSFSVFCKTGFELLQGSVPLKSFTAVCQKDGSWDRPIPECSIIDCGPPDDLPNGHVDYITGPEVTTYKAVIQYSCEETFYTMSSNGKYVCEADGFWTSSKGEKSLPVCKPVCGLSTHTSGGRIIGGQPAKPGDFPWQVLLLGETTAAGALIHDDWVLTAAHAVYGKTEAMSSLDIRMGILKRLSLIYTQAWPEAVFIHEGYTHGAGFDNDIALIKLKNKVTINRNIMPICLPRKEAASLMKTDFVGTVAGWGLTQKGFLARNLMFVDIPIVDHQKCATAYTKQPYPGAKVTVNMLCAGLDRGGKDSCRGDSGGALVFLDNETQRWFVGGIVSWGSINCGGSEQYGVYTKVTNYIPWIENIINNFHHHHHH
SEQ ID 6 ABZ-MYGGARRL-Lys (Dnp)-NH2
SEQ ID 7 DABCYL-KISPQGYGRR-Glu(EDANS)-NH2
SEQ ID 8 Dabcyl-MYGGARRL-Glu(Edans)-NH2
SEQ ID 9 Abz-IEGRTSED-(Lys)Dnp-NH2
SEQ ID 10 AIC+SRSLPPIC+IPD-OH
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無
無
無
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Figure 12_A0101_SEQ_0002
Figure 12_A0101_SEQ_0003
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Figure 12_A0101_SEQ_0014
Figure 109114859-11-0001

Claims (15)

  1. 或衍生物、前藥、類似物、醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或鹽之溶劑合物，其包含下式(II)肽 (X1 )q (X2 )r X3 X4 X5 X6 X7 X8 X9 X10 X11 X12 (X13 )s (X14 )t (II)， 其中 X1 代表天然胺基酸或非天然胺基酸， q     代表整數0或1， X2 代表天然胺基酸 I， r     代表整數0或1， X3 代表天然胺基酸 C或非天然胺基酸 L-青黴胺(Pen)， X4 代表天然胺基酸 S， X5 代表天然胺基酸 R或非天然胺基酸 N(5)-甲基-L-精胺酸((Me)R)， X6 代表天然胺基酸 S， X7 代表天然胺基酸 L或非天然胺基酸 L-第三丁基丙胺酸((tBu)A)， X8 代表天然胺基酸 P或非天然胺基酸 L-脯胺酸(3,4-2 H)， X9 代表天然胺基酸 P或非天然胺基酸 2,3,3a,4,5,6,7,7a-八氫吲哚-2-羧酸(Oic)， X10 代表天然胺基酸 I， X11 代表選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：L-N-甲基半胱胺酸((N-Me)C)及L-青黴胺(Pen)， X12 代表天然胺基酸 I， X13 代表天然胺基酸 P， s     代表整數0或1， X14 代表選自下列所組成之列表中之天然胺基酸：D、Q及E， t     代表整數0或1， 其中肽之N-端係未經取代、經乙醯基化或經C1 -C20 -烷基單取代或二取代， 其中肽之C-端係未經取代或經醯胺化，及 其中肽已利用連接X3 與X11 之鍵聯而環化。
  2. 或衍生物、前藥、類似物、醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或鹽之溶劑合物，其包含式(II)肽 (X1 )q (X2 )r X3 X4 X5 X6 X7 X8 X9 X10 X11 X12 (X13 )s (X14 )t (II)， 其中 X1 代表天然胺基酸或非天然胺基酸， q     代表整數0或1， X2 代表天然胺基酸 I， r     代表整數0或1， X3 代表天然胺基酸 C或非天然胺基酸 L-青黴胺(Pen)， X4 代表天然胺基酸 S， X5 代表天然胺基酸 R或非天然胺基酸 N(5)-甲基-L-精胺酸((Me)R)， X6 代表天然胺基酸 S， X7 代表天然胺基酸 L或非天然胺基酸 L-第三丁基丙胺酸((tBu)A)， X8 代表天然胺基酸 P或非天然胺基酸 L-脯胺酸(3,4-2 H)， X9 代表非天然胺基酸 2,3,3a,4,5,6,7,7a-八氫吲哚-2-羧酸(Oic)， X10 代表天然胺基酸 I， X11 代表天然胺基酸 C，或選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：L-N-甲基半胱胺酸((N-Me)C)及L-青黴胺(Pen)， X12 代表天然胺基酸 I， X13 代表天然胺基酸 P， s     代表整數0或1， X14 代表選自下列所組成之列表中之天然胺基酸：D、Q及E， t     代表整數0或1， 其中肽之N-端係未經取代、經乙醯基化或經C1 -C20 -烷基單取代或二取代， 其中肽之C-端係未經取代或經醯胺化，及 其中肽已利用連接X3 與X11 之鍵聯而環化。
  3. 或衍生物、前藥、類似物、醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或鹽之溶劑合物，其包含如請求項1之肽，其中 X9 代表非天然胺基酸 2,3,3a,4,5,6,7,7a-八氫吲哚-2-羧酸(Oic)。
  4. 或衍生物、前藥、類似物、醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或鹽之溶劑合物，其包含如請求項1至3中任一項之肽，其中 X1 代表選自下列所組成之列表中之天然胺基酸：A及G，或選自下列所組成之列表中之非天然胺基酸：N-甲基-L-丙胺酸(N-Me)A、N-甲基-甘胺酸((N-Me)G)、L-正白胺酸(Nle)、L-正纈胺酸(Nva)及L-鳥胺酸(Orn)。
  5. 或衍生物、前藥、類似物、醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或鹽之溶劑合物，其包含如請求項1至 4中任一項之肽，其中該肽之N-端及C-端係未經取代。
  6. 或衍生物、前藥、類似物、醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或鹽之溶劑合物，其包含如請求項1至5中任一項之肽，其中該肽已利用連接X3 與X11 之二硫鍵環化。
  7. 或衍生物、前藥、類似物、醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或鹽之溶劑合物，其包含如請求項1至6中任一項之肽，其中該肽係經至少一個PEG基團取代。
  8. 或衍生物、前藥、類似物、醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或鹽之溶劑合物，其包含如請求項1至7中任一項之肽，其作用係作為MASP-1及/或MASP-2抑制劑及/或其抑制C3沉積。
  9. 一種採用固相肽合成法製備包含如請求項1至8中任一項之肽的化合物或衍生物、前藥、類似物、醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或鹽之溶劑合物之方法。
  10. 或衍生物、前藥、類似物、醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或鹽之溶劑合物，其包含如請求項1至8中任一項之肽，其用於預防及/或治療疾病。
  11. 或衍生物、前藥、類似物、醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或鹽之溶劑合物，其包含如請求項1至8中任一項之肽，用於預防及/或治療心血管及心肺疾病、休克、發炎疾病、敗血病之心血管、肺、腦及腎後遺症、缺血及/或再灌流相關傷害、急性腎損傷、保護移植物及移植物功能延遲、血液與血液形成器官及免疫系統之疾病、糖尿病後遺症、神經系統發炎疾病、眼睛疾病、皮膚疾病、呼吸、消化道或生殖泌尿系統疾病、及燒傷與受傷之後遺症。
  12. 一種醫藥組成物，其包含至少一種包含如請求項1至8中任一項之肽的化合物、或衍生物、前藥、類似物、醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或鹽之溶劑合物，與一或多種惰性、無毒、醫療上合適之賦形劑組合。
  13. 一種醫藥組成物，其包含至少一種包含如請求項1至8中任一項之肽的化合物、或衍生物、前藥、類似物、醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或鹽之溶劑合物，與一或多種選自下列所組成之群組中之其他活性成份組合：磷酸二酯酶之抑制劑、鳥苷酸環化酶之刺激劑或活化劑、IP受體促效劑、礦物皮質酮-受體拮抗劑、利尿劑、PPAR-γ促效劑、PPAR-δ促效劑、皮質類固醇、降低氧化壓力下之器官傷害之活性成份、抑制誘發細胞死亡及細胞凋亡途徑之化合物、抑制發炎反應及T 細胞增生之化合物、抗血栓劑、血小板凝集抑制劑、凝血酶抑制劑、GPIIb/IIIa拮抗劑、因子Xa抑制劑、肝素或低分子量(LMW)肝素衍生物、及凝血因子XI之抑制劑。
  14. 如請求項12或13之醫藥組成物，其係用於預防及/或治療心血管及心肺疾病、休克、發炎疾病、敗血病之心血管、肺、腦及腎後遺症、缺血及/或再灌流相關傷害、急性腎損傷、保護移植物及移植物功能延遲、血液與血液形成器官及免疫系統之疾病、糖尿病後遺症、神經系統發炎疾病、眼睛疾病、皮膚疾病、呼吸、消化道或生殖泌尿系統疾病、及燒傷與受傷之後遺症。
  15. 一種治療及/或預防人類與動物之心血管及心肺疾病、休克、發炎疾病、敗血病之心血管、肺、腦及腎後遺症、缺血及/或再灌流相關傷害、急性腎損傷、保護移植物及移植物功能延遲、血液與血液形成器官及免疫系統之疾病、糖尿病後遺症、神經系統發炎疾病、眼睛疾病、皮膚疾病、呼吸、消化道或生殖泌尿系統疾病、及燒傷與受傷之後遺症之方法，其係投與有效量之至少一種如請求項1至8中任一項所定義之化合物，或如請求項12或13之醫藥組成物。
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