JP2022507781A - Ｌｘｒアゴニストとしての使用のためのビス－オクタヒドロフェナントレンカルボキサミド誘導体及びそのタンパク質コンジュゲート - Google Patents

Ｌｘｒアゴニストとしての使用のためのビス－オクタヒドロフェナントレンカルボキサミド誘導体及びそのタンパク質コンジュゲート Download PDF

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Abstract

本明細書で提供されるのは、ビス-オクタヒドロフェナントレンカルボキサミド及びそのタンパク質(例えば、抗体)薬物コンジュゲートを含む、化合物又はペイロード、リンカー-ペイロード、抗体-薬物コンジュゲート、及び組成物、並びに肝臓X受容体に関連する疾患及び障害の治療のための方法である。【選択図】図１３

Description

(分野)
本明細書で提供されるのは、新規ビス-オクタヒドロフェナントレンカルボキサミド及びそのタンパク質コンジュゲート、並びに該ビス-オクタヒドロフェナントレンカルボキサミド及びそのタンパク質コンジュゲートを投与することを含む種々の疾患、障害、及び病態を治療するための方法である。
(背景)
抗体-薬物コンジュゲート(ADC)は、生理活性な低分子薬に結合しており、従って、抗体の標的特異性と低分子薬物の作用様式及び効力とを兼ね備えている抗体である。ADCの治療的有用性が、がんの治療で確認されており、これは、試験の現在進行中の主な焦点である。ADCETRIS(登録商標)(ブレンツキシマブ・ベドチン)及びKADCYLA(登録商標)(アド-トラスツズマブ・エムタンシン)は、特定の種類のがんの治療に承認されている2種類のADCであり、少なくとも40種のADCが、現在臨床開発中である。
肝臓X受容体(LXR)には、コレステロール、脂質、及びグルコース恒常性、炎症、並びに自然免疫に関与する遺伝子の発現を制御するリガンド依存的転写因子であるLXRα及びLXRβが含まれる。LXRαは、肝臓、腸、脂肪組織、及び分化したマクロファージで高度に発現されており;LXRβは広範に発現されている。LXRは、(i)コレステロール輸送体、例えば、ABCA1及びABCG1(これらは両方とも細胞性コレステロール流出を媒介する)の発現を刺激すること;並びに(ii)NF-kB活性化の抑制を介してマクロファージ炎症性遺伝子発現を負に調節することを含む、様々な生物学的機能を有する。LXRは、アテローム性動脈硬化症、増殖性障害、神経変性障害、及び炎症にも関係があるとされている。増殖性障害には、メラノーマ、肺がん、口腔扁平上皮癌、及び前立腺がんが含まれる(Penchevaらの文献、2004;Wuらの文献、2015;Kanekoらの文献、2015;Chuuらの文献、2006)。神経変性障害には、アルツハイマー病及びミエリン遺伝子発現が含まれる(Terwelらの文献、2011; Sandoval-Hernandezらの文献、2016;Meffreらの文献、2014)。炎症には、炎症性腸疾患、潰瘍性大腸炎、クローン病、及び関節炎が含まれる(Andersonらの文献、2011;Huangらの文献、2015;Cuiらの文献、2012)。マクロファージLXRは、抗アテローム形成活性を含むことが知られている。LXRアゴニストは、(i)アテローム性動脈硬化症の開始を阻害し、その進行を遅延させ;(ii)アテローム性動脈硬化症を緩和し、確立されたアテローム性動脈硬化病変を安定化し;かつ(iii)アポトーシスにより病変マクロファージ含量を低下させることができると考えられている。
低分子LXRモジュレーターの治療効力は、例えば、非標的細胞での望ましくないLXRの調節及び/又は低バイオアベイラビリティによって制限される。非標的細胞でのLXRの調節は、望ましくない副作用をもたらすことがあり、低バイオアベイラビリティは、限定されないが、治療の不十分な治療域をさらに悪化させる低溶解度を含む数多くの理由により現れ得る。LXRモジュレーターを含むADCが開発されれば、標的特異的なLXRの調節が可能になり、それにより、LXRのオフターゲット調節に起因する副作用が回避されるであろう。さらに、そのようなADCであれば、生物学的標的の調節の改善、バイオアベイラビリティの改善、及び治療域の改善をもたらすであろう。それゆえ、LXRモジュレーターの低分子ADCを用いる、例えば、代謝性疾患の効果的な治療が引き続き必要とされている。
(概要)
本明細書で提供されるのは、例えば、限定するものではないが、脂質異常症を含む代謝性疾患の治療に有用な化合物である。また、例えば、炎症又は神経変性疾患の治療に有用な化合物も本明細書で提供される。
一実施態様において、本明細書で提供されるのは、式Iの化合物、又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態である:
Figure 2022507781000002
 (式中、
Q1及びQ2のそれぞれは、独立に、-CH2-、-C(O)-、-C(H)(OH)-、-C(OH)2-、-SO2-、-SO-、-PO(OR3)-、-PO(NR3NR4)-、-NR3-、又は-N=であり;
Wは、-CH2-、-N(H)-、又は-O-であり;
R1は、-N(H)R4又は-N(R5)2であり;
R2は、-N(H)R4であり;
各R4は、各場合に独立に、水素、アミノ酸残基、N-アルキルアミノ酸残基、ペプチド残基、生分解性部位、アルキル、置換アルキル、アシル、又は置換アシルであり;
R5は、アルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロシクロアルキル、又は置換ヘテロシクロアルキルであり、ここで、各ヘテロシクロアルキル又は置換ヘテロシクロアルキルは、窒素及び酸素から選択される1、2、又は3個のヘテロ原子を含み、かつ置換されている場合には、少なくとも1つの-OH及び-CH2OH、又は少なくとも1つの一級もしくは二級窒素を含み;
各R6は、独立に、ハロ、C1-6アルキル、C1-6アルコキシ、-CN、O-グルコース、O-アミノ酸残基、又はO-PEGn1であり(ここで、各nは、0～14の整数であり、かつ各n1は、1～12の整数である);かつ
各R3は、独立に、水素、アルキル、又はアリールである)。
一実施態様において、本明細書で提供されるのは、式Iによる化合物、又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態である:
Figure 2022507781000003
 (式中、
Q1及びQ2のそれぞれは、独立に、-CH2-、-C(O)-、-C(H)(OH)-、-C(OH)2-、-SO2-、-SO-、-PO(OR3)-、-PO(NR3NR4)-、-NR3-、又は-N=であり;
Wは、-CH2-、-N(H)-、又は-O-であり;
R1は、-N(H)R4又は-N(R5)2であり;
R2は、-N(H)R4であり;
各R4は、各場合に独立に、水素、アミノ酸残基、N-アルキルアミノ酸残基、ペプチド残基、生分解性部位、又はアルキルであり;
R5は、アルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロシクロアルキル、又は置換ヘテロシクロアルキルであり、ここで、各ヘテロシクロアルキル又は置換ヘテロシクロアルキルは、窒素及び酸素から選択される1、2、又は3個のヘテロ原子を含み、かつ置換されている場合には、少なくとも1つの-OH及び-CH2OH、又は少なくとも1つの一級もしくは二級窒素を含み;
各R6は、独立に、ハロ、C1-6アルキル、C1-6アルコキシ、-CN、O-グルコース、O-アミノ酸残基、又はO-PEGn1であり(ここで、各nは、0～14の整数であり、かつ各n1は、1～12の整数である);かつ
各R3は、独立に、水素、アルキル、又はアリールである)。
別の実施態様において、本明細書で記載されるものは、リンカーに結合した上記式Iによる化合物を有するリンカー-ペイロードである。
別の実施態様において、本明細書で記載されるものは、抗体又はその抗原結合断片に結合した上記式Iの化合物又はリンカー-ペイロードを有する抗体-薬物コンジュゲートである。
一実施態様において、本明細書で記載されるものは、式A、式B、式C、又は式Dによる化合物、又はその医薬として許容し得る塩もしくは立体異性形態である:
Figure 2022507781000004
 (式中、
Lは、リンカーであり;
BAは、結合剤であり;
kは、1～30の整数であり;
Q1及びQ2のそれぞれは、独立に、-CH2-、-C(O)-、-C(H)(OH)-、-C(OH)2-、-SO2-、-SO-、-PO(OR3)-、-PO(NR3NR4)-、-NR3-、又は-N=であり;
Wは、-CH2-、-N(H)-、又は-O-であり;
R1は、-N(H)R4、-N(H)R4-、-N(H)-、-N(R5)2、又は-N(R5)2-であり;
R2は、-N(H)R4、-N(H)R4-、又は-N(H)-であり;
各R4は、各場合に独立に、水素、アミノ酸残基、N-アルキルアミノ酸残基、ペプチド残基、生分解性部位、アルキル、置換アルキル、アシル、置換アシル、又は-アルキレン-であり;
R5は、アルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロシクロアルキル、又は置換ヘテロシクロアルキルであり、ここで、各ヘテロシクロアルキル又は置換ヘテロシクロアルキルは、窒素及び酸素から選択される1、2、又は3個のヘテロ原子を含み、かつ置換されている場合には、少なくとも1つの-OH及び-CH2OH、又は少なくとも1つの一級もしくは二級窒素を含み;
各R6は、独立に、ハロ、C1-6アルキル、C1-6アルキレン、C1-6アルコキシ、-CN、O-グルコース、O-アミノ酸残基、又はO-PEGn1であり(ここで、各nは、0～14の整数であり、かつ各n1は、1～12の整数である);かつ
各R3は、独立に、水素、アルキル、又はアリールである)。
別の実施態様において、本明細書で記載されるものは、式A、式B、式C、又は式Dによる化合物、又はその医薬として許容し得る塩もしくは立体異性形態である:
Figure 2022507781000005
 (式中、
Lは、リンカーであり;
BAは、結合剤であり;
kは、1～30の整数であり;
Q1及びQ2のそれぞれは、独立に、-CH2-、-C(O)-、-C(H)(OH)-、-C(OH)2-、-SO2-、-SO-、-PO(OR3)-、-PO(NR3NR4)-、-NR3-、又は-N=であり;
Wは、-CH2-、-N(H)-、又は-O-であり;
R1は、-N(H)R4、-N(H)R4-、-N(H)-、-N(R5)2、又は-N(R5)2-であり;
R2は、-N(H)R4、-N(H)R4-、又は-N(H)-であり;
各R4は、各場合に独立に、水素、アミノ酸残基、N-アルキルアミノ酸残基、ペプチド残基、生分解性部位、アルキル、又は-アルキレン-であり;
R5は、アルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロシクロアルキル、又は置換ヘテロシクロアルキルであり、ここで、各ヘテロシクロアルキル又は置換ヘテロシクロアルキルは、窒素及び酸素から選択される1、2、又は3個のヘテロ原子を含み、かつ置換されている場合には、少なくとも1つの-OH及び-CH2OH、又は少なくとも1つの一級もしくは二級窒素を含み;
各R6は、独立に、ハロ、C1-6アルキル、C1-6アルキレン、C1-6アルコキシ、-CN、O-グルコース、O-アミノ酸残基、又はO-PEGn1であり(ここで、各nは、0～14の整数であり、かつ各n1は、1～12の整数である);かつ
各R3は、独立に、水素、アルキル、又はアリールである)。
別の実施態様において、本明細書で記載されるものは、本明細書に記載される化合物、リンカー-ペイロード、又は抗体-薬物コンジュゲート、及び医薬として許容し得る賦形剤、担体、又は希釈剤を含む医薬組成物である。
別の実施態様において、本明細書で記載されるものは、対象における脂質異常症、代謝性疾患、炎症、又は神経変性疾患の治療のための方法であって、該対象への有効治療量の本明細書に記載される化合物、リンカー-ペイロード、もしくは抗体-薬物コンジュゲート、又は医薬組成物の投与を含む前記方法である。
別の実施態様において、本明細書で記載されるものは、本明細書に記載される化合物、リンカー-ペイロード、又は抗体-薬物コンジュゲート、及び組成物を作るための方法である。
(図面の簡単な説明)
図1は、ペイロード、化合物、及びビス-オクタヒドロフェナントレンカルボキサミドの合成化学スキームを示す。 図2は、ペイロード、化合物、及びビス-オクタヒドロフェナントレンカルボキサミドの合成化学スキームを示す。
図3は、リンカー-ペイロード、シクロデキストリンベースのリンカー-ペイロード、PEG4-タウリンベースのリンカー-ペイロード、及びマルトースベースのリンカー-ペイロードの合成化学スキームを示す。 図4は、リンカー-ペイロード、シクロデキストリンベースのリンカー-ペイロード、PEG4-タウリンベースのリンカー-ペイロード、及びマルトースベースのリンカー-ペイロードの合成化学スキームを示す。 図5は、リンカー-ペイロード、シクロデキストリンベースのリンカー-ペイロード、PEG4-タウリンベースのリンカー-ペイロード、及びマルトースベースのリンカー-ペイロードの合成化学スキームを示す。 図6は、リンカー-ペイロード、シクロデキストリンベースのリンカー-ペイロード、PEG4-タウリンベースのリンカー-ペイロード、及びマルトースベースのリンカー-ペイロードの合成化学スキームを示す。 図7は、リンカー-ペイロード、シクロデキストリンベースのリンカー-ペイロード、PEG4-タウリンベースのリンカー-ペイロード、及びマルトースベースのリンカー-ペイロードの合成化学スキームを示す。 図8は、リンカー-ペイロード、シクロデキストリンベースのリンカー-ペイロード、PEG4-タウリンベースのリンカー-ペイロード、及びマルトースベースのリンカー-ペイロードの合成化学スキームを示す。 図9は、リンカー-ペイロード、シクロデキストリンベースのリンカー-ペイロード、PEG4-タウリンベースのリンカー-ペイロード、及びマルトースベースのリンカー-ペイロードの合成化学スキームを示す。
図10は、シクロデキストリン-アジド、アジド-PEG4-タウリン、及びマルトース-アジドの合成化学スキームを示す。 図11は、シクロデキストリン-アジド、アジド-PEG4-タウリン、及びマルトース-アジドの合成化学スキームを示す。 図12は、シクロデキストリン-アジド、アジド-PEG4-タウリン、及びマルトース-アジドの合成化学スキームを示す。
図13は、P2ペイロードを有する抗MSR1 ADCによるコレステロール流出の活性化のEC50プロットを示す。
(例示的な実施態様の説明)
本明細書で提供されるのは、化合物又はペイロード、リンカー-ペイロード、抗体-薬物コンジュゲート、組成物、及び対象において、例えば、脂質異常症、代謝性疾患、炎症、又は神経変性疾患を治療するのに有用な方法である。
別途定義されない限り、本明細書で使用される技術用語及び科学用語は全て、本発明が属する分野の当業者によって一般に理解されているのと同じ意味を有する。本明細書で使用される場合、「約」という用語は、特定の記載されている数値に関して使用されるとき、該値が、該記載されている値と1％以下異なり得ることを意味する。例えば、本明細書で使用される場合、「約100」という表現は、99及び101並びにその間の全ての値(例えば、99.1、99.2、99.3、99.4など)を含む。
本明細書に記載されるものと類似又は同等な任意の方法及び材料を本発明の実施又は試験において使用することができるが、好ましい方法及び材料をこれから記載する。本明細書で言及される特許、出願、及び非特許刊行物は全て、引用により本明細書中に完全に組み込まれる。
(定義)
本明細書で提供される化合物もしくはペイロード、リンカー-ペイロード(LP)、又は抗体-薬物コンジュゲートに言及する場合、以下の用語は、別途指示されない限り以下の意味を有する。別途定義されない限り、本明細書で使用される技術用語及び科学用語は全て、当業者によって一般に理解されるものと同じ意味を有する。本明細書に提供される用語について複数の定義がある場合には、別段の記載がない限り、これらの定義が優先される。
本明細書で使用される場合、「アルキル」は、一価の飽和炭化水素ラジカル部位を指す。アルキルは、任意に置換されており、線状、分岐状、又は環状、すなわち、シクロアルキルであってもよい。アルキルとしては、1～20個の炭素原子を有するラジカル、すなわち、C1-20アルキル;1～12個の炭素原子を有するラジカル、すなわち、C1-12アルキル;1～8個の炭素原子を有するラジカル、すなわち、C1-8アルキル;1～6個の炭素原子を有するラジカル、すなわち、C1-6アルキル;及び1～3個の炭素原子を有するラジカル、すなわち、C1-3アルキルが挙げられるが、これらに限定されない。アルキル部位の例としては、メチル、エチル、n-プロピル、i-プロピル、n-ブチル、s-ブチル、t-ブチル、i-ブチル、ペンチル部位、ヘキシル部位、及びそれらの構造異性体、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、並びにシクロヘキシルが挙げられるが、これらに限定されない。
本明細書で使用される場合、「構造異性体」は、同じ分子式を有するが、原子の配列のされ方に起因する異なる化学構造を有する化合物を指す。例示的な構造異性体としては、n-プロピル及びイソプロピル;n-ブチル、sec-ブチル、及びtert-ブチル;並びにn-ペンチル、イソペンチル、及びネオペンチルなどが挙げられる。
本明細書で使用される場合、「アルキレン」は、二価アルキル基を指す。別途指定されない限り、アルキレンは、1～20個の炭素原子を含むが、これらに限定されない。アルキレン基は、アルキルについて本明細書に記載されている通りに任意に置換されている。いくつかの実施態様において、アルキレンは、置換されていない。
本明細書で使用される場合、「O-アミノ酸」又は「HO-アミノ酸」という用語は、アミノ酸又はアミノ酸配列のN-末端の天然アミノ基が、それぞれ、酸素又はヒドロキシル基と置き換えられているアミノ酸を表す。例えば、「O-AAAA」又は「HO-AAAA」は、アミノ酸配列(AAAA)であって、N-末端の天然アミノ基が、それぞれ、酸素又はヒドロキシル基と置き換えられているもの(例えば、
Figure 2022507781000006
 ここで、各々のRは、アミノ酸側鎖である)を表すことが意図される。同様に、「O-アミノ酸残基」又は「HO-アミノ酸残基」という用語は、化学反応後に残る化合物内の化学的部位を指す。例えば、「O-アミノ酸残基」又は「HO-アミノ酸残基」は、O-アミノ酸又はHO-アミノ酸の好適なカップリングパートナーとのアミドカップリング又はペプチドカップリングの生成物を指し;ここで、例えば、水分子は、該O-アミノ酸又は該HO-アミノ酸のアミド又はペプチドカップリング後に追い出され、結果として、該O-アミノ酸残基又は該HO-アミノ酸残基がその中に取り込まれた生成物が生じる。
その立体化学を特定しないアミノ酸又はアミノ酸残基の表記は、L型の該アミノ酸、D型の該アミノ酸、又はそのラセミ混合物を包含することが意図される。
本明細書で使用される場合、「ハロアルキル」は、上で定義されているようなアルキルであって、該アルキルが、ハロゲン、例えば、フッ素(F)、塩素(Cl)、臭素(Br)、又はヨウ素(I)から選択される少なくとも1つの置換基を含む、前記アルキルを指す。ハロアルキルの例としては、-CF3、-CH2CF3、-CCl2F、及び-CCl3が挙げられるが、これらに限定されない。
本明細書で使用される場合、「アルケニル」は、少なくとも2つの炭素原子及び1つ以上の非芳香族炭素-炭素二重結合を含有する一価炭化水素ラジカル部位を指す。アルケニルは、任意に置換されており、線状、分岐状、又は環状とすることができる。アルケニルとしては、2～20個の炭素原子を有するラジカル、すなわち、C2-20アルケニル;2～12個の炭素原子を有するラジカル、すなわち、C2-12アルケニル;2～8個の炭素原子を有するラジカル、すなわち、C2-8アルケニル;2～6個の炭素原子を有するラジカル、すなわち、C2-6アルケニル;及び2～4個の炭素原子を有するラジカル、すなわち、C2-4アルケニルが挙げられるが、これらに限定されない。アルケニル部位の例としては、ビニル、プロペニル、ブテニル、及びシクロヘキセニルが挙げられるが、これらに限定されない。
本明細書で使用される場合、「アルキニル」は、少なくとも2つの炭素原子及び1つ以上の炭素-炭素三重結合を含有する一価炭化水素ラジカル部位を指す。アルキニルは、任意に置換されており、線状、分岐状、又は環状とすることができる。アルキニルとしては、2～20個の炭素原子を有するラジカル、すなわち、C2-20アルキニル;2～12個の炭素原子を有するラジカル、すなわち、C2-12アルキニル;2～8個の炭素原子を有するラジカル、すなわち、C2-8アルキニル;2～6個の炭素原子を有するラジカル、すなわち、C2-6アルキニル;及び2～4個の炭素原子を有するラジカル、すなわち、C2-4アルキニルが挙げられるが、これらに限定されない。アルキニル部位の例としては、エチニル、プロピニル、及びブチニルが挙げられるが、これらに限定されない。
本明細書で使用される場合、「アルコキシ」は、一価の飽和炭化水素ラジカル部位を指し、ここで、該炭化水素は酸素原子への単結合を含み、かつ該ラジカルは酸素原子上に位置し、例えば、エトキシの場合、CH3CH2-O・である。アルコキシ置換基は、それが置換する化合物に該アルコキシ置換基のこの酸素原子を介して結合する。アルコキシは、任意に置換されており、線状、分岐状、又は環状、すなわち、シクロアルコキシとすることができる。アルコキシとしては、1～20個の炭素原子を有するもの、すなわち、C1-20アルコキシ;1～12個の炭素原子を有するもの、すなわち、C1-12アルコキシ;1～8個の炭素原子を有するもの、すなわち、C1-8アルコキシ;1～6個の炭素原子を有するもの、すなわち、C1-6アルコキシ;及び1～3個の炭素原子を有するもの、すなわち、C1-3アルコキシが挙げられるが、これらに限定されない。アルコキシ部位の例としては、メトキシ、エトキシ、n-プロポキシ、i-プロポキシ、n-ブトキシ、s-ブトキシ、t-ブトキシ、i-ブトキシ、ペントキシ部位、ヘキソキシ部位、シクロプロポキシ、シクロブトキシ、シクロペントキシ、及びシクロヘキソキシ(すなわち、それぞれ
Figure 2022507781000007
 )が挙げられるが、これらに限定されない。
本明細書で使用される場合、「ハロアルコキシ」は、上で定義されているようなアルコキシであって、該アルコキシが、ハロゲン、例えば、F、Cl、Br、又はIから選択される少なくとも1つの置換基を含む、前記アルコキシを指す。
本明細書で使用される場合、「アリール」は、環原子が炭素原子である芳香族化合物のラジカルである一価の部位を指す。アリールは、任意に置換されており、単環式又は多環式、例えば、二環式もしくは三環式とすることができる。アリール部位の例としては、6～20個の環炭素原子を有するもの、すなわち、C6-20アリール;6～15個の環炭素原子を有するもの、すなわち、C6-15アリール、及び6～10個の環炭素原子を有するもの、すなわち、C6-10アリールが挙げられるが、これらに限定されない。アリール部位の例としては、フェニル、ナフチル、フルオレニル、アズレニル、アントリル、フェナントリル、及びピレニルが挙げられるが、これらに限定されない。
本明細書で使用される場合、「アリールアルキル」は、アルキル化合物のラジカルである一価の部位を指し、ここで、該アルキル化合物は芳香族置換基で置換されている、すなわち、芳香族化合物は、アルキル基への単結合を含み、かつ該ラジカルは該アルキル基上に位置する。アリールアルキル基は、アルキル基を介して、図示されている化学構造に結合する。アリールアルキルは、構造、例えば、
Figure 2022507781000008
 (式中、Bは、芳香族部位、例えば、フェニルである)によって表すことができる。アリールアルキルは任意に置換されている、すなわち、アリール基及び/又はアルキル基は、本明細書に開示されているように置換され得る。アリールアルキルの例としては、ベンジルが挙げられるが、これに限定されない。
本明細書で使用される場合、「アルキルアリール」は、アリール化合物のラジカルである一価の部位を指し、ここで、該アリール化合物はアルキル置換基で置換されている、すなわち、該アリール化合物はアルキル基への単結合を含み、かつ該ラジカルは該アリール基上に位置する。アルキルアリール基は、アリール基を介して、図示されている化学構造に結合する。アルキルアリールは、構造、例えば、
Figure 2022507781000009
 (式中、Bは、芳香族部位、例えば、フェニルである)によって表すことができる。アルキルアリールは任意に置換されている、すなわち、アリール基及び/又はアルキル基は、本明細書に開示されているように置換され得る。アルキルアリールの例としては、トルイルが挙げられるが、これに限定されない。
本明細書で使用される場合、「アリールオキシ」は、環原子が炭素原子であり、かつ該環が酸素ラジカルで置換されている芳香族化合物のラジカルである一価の部位を指す、すなわち、該芳香族化合物は酸素原子への単結合を含み、かつ該ラジカルは該酸素原子上に位置し、例えば、フェノキシの場合、
Figure 2022507781000010
 である。アリールオキシ置換基は、それが置換する化合物に、この酸素原子を介して結合する。アリールオキシは、任意に置換されている。アリールオキシとしては、6～20個の環炭素原子を有するラジカル、すなわち、C6-20アリールオキシ;6～15個の環炭素原子を有するもの、すなわち、C6-15アリールオキシ、及び6～10個の環炭素原子を有するもの、すなわち、C6-10アリールオキシが挙げられるが、これらに限定されない。アリールオキシ部位の例としては、フェノキシ、ナフトキシ、及びアントロキシが挙げられるが、これらに限定されない。
本明細書で使用される場合、「RaRbN-アリールオキシ」は、環原子が炭素原子であり、かつ該環が少なくとも1つのRaRbN-置換基及び少なくとも1つの酸素ラジカルで置換されている芳香族化合物のラジカルである一価の部位を指し、すなわち、該芳香族化合物は、RaRbN-置換基への単結合及び酸素原子への単結合を含み、かつ該ラジカルは該酸素原子上に位置し、例えば、
Figure 2022507781000011
 である。RaRbN-アリールオキシ置換基は、それが置換する化合物にこの酸素原子を介して結合する。RaRbN-アリールオキシは、任意に置換されている。RaRbN-アリールオキシとしては、6～20個の環炭素原子を有するもの、例えば、C6-20(RaRbN)nn-アリールオキシ、6～15個の環炭素原子を有するもの、例えば、C6-15(RaRbN)nn-アリールオキシ、及び6～10個の環炭素原子を有するもの、例えば、C6-10(RaRbN)nn-アリールオキシ(ここで、nnは、RaRbN-置換基の数を表す)が挙げられるが、これらに限定されない。RaRbN-アリールオキシ部位の例としては、4-(ジメチル-アミノ)-フェノキシ、
Figure 2022507781000012
 が挙げられるが、これに限定されない。
本明細書で使用される場合、「アリーレン」は、環原子が炭素原子のみである芳香族化合物の二価の部位を指す。アリーレンは、任意に置換されており、単環式又は多環式、例えば、二環式もしくは三環式とすることができる。アリーレン部位の例としては、6～20個の環炭素原子を有するもの、すなわち、C6-20アリーレン;6～15個の環炭素原子を有するもの、すなわち、C6-15アリーレン、及び6～10個の環炭素原子を有するもの、すなわち、C6-10アリーレンが挙げられるが、これらに限定されない。
本明細書で使用される場合、「ヘテロアルキル」は、1つ以上の炭素原子がヘテロ原子によって置換されているアルキルを指す。本明細書で使用される場合、「ヘテロアルケニル」は、1つ以上の炭素原子がヘテロ原子によって置換されているアルケニルを指す。本明細書で使用される場合、「ヘテロアルキニル」は、1つ以上の炭素原子がヘテロ原子によって置換されているアルケニルを指す。好適なヘテロ原子としては、窒素、酸素、及び硫黄原子が挙げられるが、これらに限定されない。ヘテロアルキルは、任意に置換されている。ヘテロアルキル部位の例としては、アミノアルキル、スルホニルアルキル、及びスルフィニルアルキルが挙げられるが、これらに限定されない。ヘテロアルキル部位の例としては、メチルアミノ、メチルスルホニル、及びメチルスルフィニルも挙げられるが、これらに限定されない。本明細書で使用される場合、「ヘテロアルキレン」、「ヘテロアルケニレン」、及び「ヘテロアルキニレン」は、それぞれ、ヘテロアルキル、ヘテロアルケニル、及びヘテロアルキニルの二価形態である。
本明細書で使用される場合、「ヘテロアリール」は、環原子が炭素原子及び少なくとも1つの酸素、硫黄、窒素、又はリン原子を含有する芳香族化合物のラジカルである一価の部位を指す。ヘテロアリール部位の例としては、5～20個の環原子;5～15個の環原子;及び5～10個の環原子を有するものが挙げられるが、これらに限定されない。ヘテロアリールは、任意に置換されている。
本明細書で使用される場合、「ヘテロアリーレン」は、芳香環の1つ以上の環原子が酸素、硫黄、窒素、又はリン原子と置換されているアリーレンを指す。ヘテロアリーレンは、任意に置換されている。
本明細書で使用される場合、「ヘテロシクロアルキル」は、1つ以上の炭素原子がヘテロ原子によって置換されているシクロアルキルを指す。好適なヘテロ原子としては、窒素、酸素、及び硫黄原子が挙げられるが、これらに限定されない。ヘテロシクロアルキルは、任意に置換されている。ヘテロシクロアルキルは、任意に置換されている。ヘテロシクロアルキル部位の例としては、モルホリニル、ピペリジニル、テトラヒドロピラニル、ピロリジニル、イミダゾリジニル、オキサゾリジニル、チアゾリジニル、ジオキソラニル、ジチオラニル、オキサニル、又はチアニルが挙げられるが、これらに限定されない。
本明細書で使用される場合、「Lewis酸」は、孤立電子対を受け入れる分子又はイオンを指す。本明細書に記載される方法で用いられるLewis酸は、プロトン以外のものである。Lewis酸としては、非金属酸、金属酸、硬いLewis酸、及び軟らかいLewis酸が挙げられるが、これらに限定されない。Lewis酸としては、アルミニウム、ホウ素、鉄、スズ、チタン、マグネシウム、銅、アンチモン、リン、銀、イッテルビウム、スカンジウム、ニッケル、及び亜鉛のLewis酸が挙げられるが、これらに限定されない。例示的なLewis酸としては、AlBr3、AlCl3、BCl3、三塩化ホウ素メチルスルフィド、BF3、三フッ化ホウ素メチルエーテラート、三フッ化ホウ素メチルスルフィド、三フッ化ホウ素テトラヒドロフラン、ジシクロヘキシルホウ素トリフルオロメタンスルホネート、臭化鉄(III)、塩化鉄(III)、塩化スズ(IV)、塩化チタン(IV)、チタン(IV)イソプロポキシド、Cu(OTf)2、CuCl2、CuBr2、塩化亜鉛、ハロゲン化アルキルアルミニウム(RnAlX3-n(式中、Rは、ヒドロカルビルである))、Zn(OTf)2、ZnCl2、Yb(OTf)3、Sc(OTf)3、MgBr2、NiCl2、Sn(OTf)2、Ni(OTf)2、及びMg(OTf)2が挙げられるが、これらに限定されない。
本明細書で使用される場合、「含Nヘテロシクロアルキル」は、1つ以上の炭素原子がヘテロ原子によって置換されており、かつ少なくとも1つのヘテロ原子が窒素原子であるシクロアルキルを指す。窒素の他に好適なヘテロ原子としては、酸素及び硫黄原子が挙げられるが、これらに限定されない。含Nヘテロシクロアルキルは、任意に置換されている。含Nヘテロシクロアルキル部位の例としては、モルホリニル、ピペリジニル、ピロリジニル、イミダゾリジニル、オキサゾリジニル、又はチアゾリジニルが挙げられるが、これらに限定されない。
本明細書で使用される場合、「O-グルコース」は、環外グルコース酸素原子を介して付加された一価の部位を指す。好適なO-グルコース部分には、限定されないが、
Figure 2022507781000013
 などが含まれる。
本明細書で使用される場合、「O-PEGn1」は、末端酸素原子を介して付加された一価の部位を指し、ここで、n1は、1～100である。例えば、n1が、1である場合、O-PEGn1は、-O-CH2CH2OHであり;n1が、2である場合、O-PEGn1は、-O-CH2CH2O-CH2CH2OHであり;n1が、3である場合、O-PEGn1は、-O-CH2CH2O-CH2CH2O-CH2CH2OHである。
本明細書で使用される場合、ラジカル部位を説明するのに用いられる「任意に置換された」、例えば、任意に置換されたアルキルは、そのような部位が、1つ以上の置換基に任意に結合していることを意味する。そのような置換基の例としては、ハロ、シアノ、ニトロ、任意に置換されたハロアルキル、アジド、エポキシ、任意に置換されたヘテロアリール、任意に置換されたヘテロシクロアルキル、
Figure 2022507781000014
 (式中、
RA、RB、及びRCは、出現する毎に独立に、水素原子、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アルキルアリール、アリールアルキル、ヘテロアルキル、ヘテロアリール、もしくはヘテロシクロアルキルであるか、又はRA及びRBは、それらが結合している原子と一緒に、飽和もしくは不飽和の炭素環を形成し、ここで、該環は、任意に置換されており、かつ1つ以上の環原子が、ヘテロ原子で任意に置換されている)が挙げられるが、これらに限定されない。ある実施態様において、ラジカル部位が、任意に置換されたヘテロアリール、任意に置換されたヘテロシクロアルキル、又は任意に置換された飽和もしくは不飽和の炭素環で任意に置換されている場合、該任意に置換されたヘテロアリール、任意に置換されたヘテロシクロアルキル、又は任意に置換された飽和もしくは不飽和の炭素環上の置換基は、それらが置換されている場合、さらなる置換基でさらに任意に置換されている置換基で置換されていることはない。いくつかの実施態様において、本明細書に記載される基が任意に置換されている場合、該基に結合している置換基は、別途規定されない限り、非置換のものである。
本明細書で使用される場合、「アシル」は、
Figure 2022507781000015
 (式中、RAは、アルキル又は任意に置換されたアルキルである)
を指す。また、本明細書で使用される場合、「任意に置換されたアシル」は、RAが、任意に置換されている場合を指す。
本明細書で使用される場合、「結合剤」は、所与の結合パートナー、例えば、抗原と特異性を伴って結合することができる任意の分子、例えば、タンパク質を指す。
本明細書で使用される場合、「リンカー」は、結合剤を、本明細書に記載される1つ以上の化合物に、例えば、ペイロード化合物及び強化剤に共有結合によって連結させる二価、三価、又は多価の部位を指す。
本明細書で使用される場合、「アミド合成条件」は、例えば、カルボン酸、活性化カルボン酸、又はアシルハライドとアミンとの反応によって、アミドの形成を達成するために好適な反応条件を指す。いくつかの例において、アミド合成条件は、カルボン酸とアミンとの間のアミド結合の形成を達成するために好適な反応条件を指す。これらの例のいくつかにおいて、カルボン酸は、まず、活性化カルボン酸に変換され、その後、該活性化カルボン酸がアミンと反応して、アミドを形成する。アミドの形成を達成するための好適な条件としては、限定されないが、ジシクロヘキシルカルボジイミド(DCC)、ジイソプロピルカルボジイミド(DIC)、(ベンゾトリアゾール-1-イルオキシ)トリス(ジメチルアミノ)ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート(BOP)、(ベンゾトリアゾール-1-イルオキシ)トリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェート(PyBOP)、(7-アザベンゾトリアゾール-1-イルオキシ)トリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェート(PyAOP)、ブロモトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェート(PyBrOP)、O-(ベンゾトリアゾール-1-イル)-N,N,N’,N’-テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート(HBTU)、O-(ベンゾトリアゾール-1-イル)-N,N,N’,N’-テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート(TBTU)、1-[ビス(ジメチルアミノ)メチレン]-1H-1,2,3-トリアゾロ[4,5-b]ピリジニウム 3-オキシド ヘキサフルオロホスフェート(HATU)、N-エトキシカルボニル-2-エトキシ-1,2-ジヒドロキノリン(EEDQ)、N-エチル-N′-(3-ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド(EDC)、2-クロロ-1,3-ジメチルイミダゾリジニウム ヘキサフルオロホスフェート(CIP)、2-クロロ-4,6-ジメトキシ-1,3,5-トリアジン(CDMT)、及びカルボニルジイミダゾール(CDI)を含む、カルボン酸とアミンとの反応を達成するための試薬を利用するものが挙げられるが、これらに限定されない。いくつかの例において、カルボン酸を、まず、活性化カルボン酸エステルに変換し、その後、該活性化カルボン酸エステルをアミンで処理して、アミド結合を形成させる。ある実施態様において、カルボン酸は、試薬で処理される。試薬は、カルボン酸を脱プロトン化し、その後、脱プロトン化されたカルボン酸によるプロトン化された試薬への求核攻撃の結果として、該脱プロトン化されたカルボン酸との生成物複合体を形成させることにより、カルボン酸を活性化する。その後、特定のカルボン酸の活性化カルボン酸エステルは、カルボン酸が活性化される前よりも、アミンによる求核攻撃に対して感受性が高い。この結果として、アミド結合形成が生じる。したがって、カルボン酸は、活性化されたと記載される。例示的な試薬としては、DCC及びDICが挙げられる。
本明細書で使用される場合、「位置異性体(単数)」、「位置異性体(複数)」、又は「位置異性体の混合物」は、適当なアルキンで処理された適当なアジド(例えば、-N3、又はPEG-N3誘導体化抗体)から誘導される1,3-環化付加又は歪み促進アルキン-アジド環化付加(SPAAC)－別名、クリック反応として知られる－の生成物を指す。ある実施態様において、例えば、位置異性体及び位置異性体の混合物は、下に示されるクリック反応生成物によって特徴付けられる:
Figure 2022507781000016
 ある実施態様において、2つ以上の適当なアジド及び2つ以上の適当なアルキンを、アジド-アルキンの各ペアが、1つ以上の独立のクリック反応に関与して位置異性体のクリック反応生成物の混合物を生じさせることができる生成物への途中の合成スキーム内で利用することができる。例えば、当業者は、生成物への途中で第1の適当なアジドが独立に、第1の適当なアルキンと反応し得、かつ第2の適当なアジドが独立に、第2の適当なアルキンと反応し得、本明細書に記載されるADCの試料中に、4種の可能なクリック反応位置異性体、又は該4種の可能なクリック反応位置異性体の混合物の生成をもたらすことを認識しているであろう。さらなる例として、当業者は、生成物への途中で、第1の適当なアジドが独立に、第1の適当なアルキンと反応し得、かつ第2の適当なアジドが独立に、第2の適当なアルキンと反応し得、本明細書に記載されるLPの試料中に4種の可能なクリック反応位置異性体、又は該4種の可能なクリック反応位置異性体の混合物の生成をもたらすことを認識しているであろう。
本明細書で使用される場合、「残基」という用語は、化学反応の後に残る化合物内の化学的部位を指す。例えば、「アミノ酸残基」又は「N-アルキルアミノ酸残基」という用語は、アミノ酸又はN-アルキルアミノ酸の適当なカップリングパートナーに対するアミドカップリング又はペプチドカップリングの生成物を指し;ここで、該アミノ酸又はN-アルキルアミノ酸アミドのペプチドカップリングの後に、例えば、水分子が排出されて、該アミノ酸残基又はN-アルキルアミノ酸残基がその中に組み込まれた生成物をもたらす。
本明細書で使用される場合、「治療有効量」は、疾患又は障害の治療又は管理において患者に治療的利益を提供するのに十分であるか、該疾患又は障害と関連する1種以上の症状を遅延させるもしくは最小化するのに十分である量(例えば、化合物又はペイロードのもの)を指す。
特定の基、部位、置換基、及び原子を、結合(単数又は複数)と交差する波線を用いて描き、それを介して該基、部位、置換基、原子が結合する原子を示す。例えば:
Figure 2022507781000017
 として描かれるプロピル基で置換されたフェニル基は、以下の構造を有する:
Figure 2022507781000018
 。本明細書で使用される場合、環原子の間の結合を介して環状基(例えば、芳香族、ヘテロ芳香族、縮合環、及び飽和又は不飽和のシクロアルキル又はヘテロシクロアルキル)に結合した置換基を示す図は、別途指定されない限り、本明細書で記載される技術又は本開示が関連する分野で公知の技術に従い、該環状基が、該環状基内の又は該縮合環基内の任意の環の上の任意の環位置においてその置換基で置換され得ることを示すことを意味する。例えば、以下の基
Figure 2022507781000019
 (式中、下付き文字qは、0～4の整数であり、置換基R1の位置は、一般的に記載されており、すなわち、結合線構造のいずれかの頂点、すなわち、特定の環炭素原子に直接結合させていない)は、該置換基R1が特定の環炭素原子に結合している以下の非限定的な基の例を含む
Figure 2022507781000020
 。
本明細書で使用される場合、「反応性リンカー」という句又は「RL」という略語は、例えば、
Figure 2022507781000021
 (式中、RGは、反応性基であり、かつSPは、スペーサー基である)
として図示される反応性基及びスペーサー基を含む一価の基を指す。本明細書に記載される反応性リンカーは、2つ以上の反応性基及び2つ以上のスペーサー基を含み得る。スペーサー基は、前記反応性基をペイロードなどの別の基へと架橋する任意の二価の部位である。反応性リンカー(RL)は、それが結合しているペイロードと共に、本明細書に記載される抗体コンジュゲートの調製のための合成前駆体として有用な中間体(「リンカー-ペイロード」)を提供する。反応性リンカーは、別の基、例えば、抗体、修飾抗体、もしくはその抗原結合断片、又は強化基の反応性部分と反応することができる官能基又は官能部位である反応性基(「RG」)を含む。抗体、修飾抗体、又はその抗原結合断片と反応性基の反応の結果生ずる部位は、連結基と共に、本明細書に記載されるコンジュゲートの「結合剤リンカー」(「BL」)部分を含む。ある実施態様において、「反応性基」は、抗体又はその抗原結合断片のシステイン又はリジン残基と反応する官能基又は官能部位(例えば、マレイミド又はN-ヒドロキシコハク酸イミド(NHS)エステル)である。ある実施態様において、「反応性基」は、クリックケミストリー反応を受けることができる官能基又は官能部位である(例えば、クリックケミストリー(click chemistry)、Huisgenの文献Proc. Chem. Soc. 1961、Wangらの文献J. Am. Chem. Soc. 2003、及びAgardらの文献J. Am. Chem. Soc. 2004を参照されたい)。該クリックケミストリー反応のいくつかの実施態様において、反応性基は、アジドとの1,3-環化付加反応を受けることができるアルキンである。そのような適当な反応性基としては、歪アルキン、例えば、歪み促進アルキン-アジド環化付加(SPAAC)に適したもの、シクロアルキン、例えば、シクロオクチン、芳香環化アルキン(benzannulated alkyne)、及び銅触媒の非存在下でアルキンと1,3-環化付加反応することができるアルキンが挙げられるが、これらに限定されない。適当なアルキンとしては、ジベンゾアザシクロオクチン又は
Figure 2022507781000022
 ジベンゾシクロオクチン又は
Figure 2022507781000023
 ビアリールアザシクロオクチノン又は
Figure 2022507781000024
 二フッ素化シクロオクチン又は
Figure 2022507781000025
 置換されたアルキン、例えば、フッ素化アルキン、アザ-シクロアルキン、ビサイクル[6.1.0]ノニン又は
Figure 2022507781000026
 (BCN(式中、Rは、アルキル、アルコキシ、又はアシルである)、及びそれらの誘導体も挙げられるが、これらに限定されない。特に有用なアルキンとしては、
Figure 2022507781000027
 が挙げられる。このような反応性基を含むリンカー-ペイロードは、アジド基で官能化させた抗体を複合化させるのに有用である。そのような官能化抗体としては、アジド-ポリエチレングリコール基で官能化された抗体が挙げられる。ある実施態様において、そのような官能化抗体は、酵素トランスグルタミナーゼの存在下で少なくとも1つのグルタミン残基、例えば、重鎖Gln295を有する抗体を、アミノ基及びアジド基を有する化合物で処理することによって誘導される。
いくつかの例において、反応性基は、アルキン、例えば、
Figure 2022507781000028
 であり、これは、クリックケミストリーによってアジド、例えば、
Figure 2022507781000029
 と反応して、クリックケミストリー生成物、例えば、
Figure 2022507781000030
 を形成することができる。いくつかの例において、該基は、修飾抗体又はその抗原結合断片上のアジドと反応する。いくつかの例において、反応性基は、アルキン、例えば、
Figure 2022507781000031
 であり、これは、クリックケミストリーによってアジド、例えば、
Figure 2022507781000032
 と反応して、クリックケミストリー生成物、例えば、
Figure 2022507781000033
 を形成することができる。いくつかの例において、反応性基は、アルキン、例えば、
Figure 2022507781000034
 であり、これは、クリックケミストリーによってアジド、例えば、
Figure 2022507781000035
 と反応して、クリックケミストリー生成物、例えば、
Figure 2022507781000036
 を形成することができる。いくつかの例において、反応性基は、官能基、例えば、
Figure 2022507781000037
 であり、これは、抗体又はその抗原結合断片上のシステイン残基と反応して、それへの結合、例えば、
Figure 2022507781000038
 (式中、Abは、抗体又はその抗原結合断片を示し、Sは、それを介して官能基が、Abに結合するシステイン残基上のS原子を示す)
を形成する。いくつかの例において、反応性基は、官能基、例えば、
Figure 2022507781000039
 であり、これは、抗体又はその抗原結合断片上のリジン残基と反応して、それへの結合、例えば、
Figure 2022507781000040
 (式中、Abは、抗体又はその抗原結合断片を示し、NHは、それを介して官能基がAbに結合するリジン側鎖残基上のNH原子を示す)
を形成する。
本明細書で使用される場合、「生分解性部位」という句は、インビボで分解して、通常の生物学的プロセスによって体から取り除かれることができる無毒性の生体適合性成分となる部位を指す。ある実施態様において、生分解性部位は、約90日以下、約60日以下、又は約30日以下の間にインビボで完全に又は実質的に分解し、ここで、分解の程度は、該生分解性部位のパーセント質量減少に基づくものであり、かつ完全な分解は、100％質量減少に対応する。例示的な生分解性部位としては、限定するものではないが、ポリ(ε-カプロラクトン)(PCL)、ポリ(3-ヒドロキシ酪酸塩)(PHB)、ポリ(グリコール酸)(PGA)、ポリ(乳酸)(PLA)、及びそのグリコール酸との共重合体(すなわち、ポリ(D,L-ラクチド-コグリコリド)(PLGA)などの脂肪族ポリエステルが挙げられる(Vert M, Schwach G, Engel R及びCoudane Jの文献、(1998) J Control Release 53(1-3):85-92; Jain R Aの文献、(2000) Biomaterials 21(23):2475-2490; Uhrich K E, Cannizzaro S M, Langer R S及びShakesheff K Mの文献、(1999) Chemical Reviews 99(11):3181-3198;及びPark T Gの文献、(1995) Biomaterials 16(15):1123-1130(それぞれの文献は、その全体が引用により本明細書に組み込まれている))。
本明細書で使用される場合、「有効量」、「生理学的有効量」、又は「予防的有効量」という句は、治療を必要とする対象に投与された場合に、そのような治療を達成するのに十分な化合物の量を指す。活性物質の「生理学的有効量」は、該活性物質が患者に対して有意な外部観察可能な作用を有するのに効果的な量(efficacious amount)を示す。従って、生理学的有効量は、該作用を測定するための特別の設備を必要とすることなく患者における特徴のうちの1つ以上(例えば、表現型)に影響を及ぼす。例えば、本明細書に開示される化合物の生理学的有効量は、治療されるべき病態の症状のうちの1つ以上を低下させることによって患者の挙動に対する有意な外部観察可能な作用を有する。従って、活性物質の効果的な量が投与されているか否かを、患者を観察すること、及び患者において該活性物質を原因とする変化が生じているか否かを観察することによって決定することができる。
本明細書で使用される場合、「結合剤リンカー」という句又は「BL」は、結合剤(例えば、抗体又はその抗原結合断片)を本明細書で記載されるペイロード化合物(例えば、ビス-オクタヒドロフェナントレンカルボキサミド)及び、任意に、1種以上の側鎖化合物と連結、接続、又は結合させる任意の二価、三価、もしくは多価の基又は部位を指す。一般に、本明細書に記載される抗体コンジュゲートに好適な結合剤リンカーは、抗体の循環半減期を活用するのに十分に安定であり、同時に、該コンジュゲートの抗原を介する内部移行(antigen-mediated internalization)の後にペイロードを放出することができるものである。リンカーは、切断可能なものあっても切断不可能なものであってもよい。切断可能なリンカーは、内部移行の後の細胞内代謝、例えば、加水分解、還元、又は酵素反応による切断によって切断されるリンカーである。切断不可能なリンカーは、内部移行の後に抗体のリソソーム分解によって、取り付けられたペイロードを放出するリンカーである。好適なリンカーとしては、酸に不安定なリンカー、加水分解に不安定なリンカー、酵素的に切断可能なリンカー、還元に不安定なリンカー、自壊性リンカー、及び切断不可能なリンカーが挙げられるが、これらに限定されない。好適なリンカーとしては、ペプチド、グルクロニド、コハク酸イミド-チオエーテル、ポリエチレングリコール(PEG)単位、ヒドラゾン、マル-カプロイル単位(mal-caproyl unit)、ジペプチド単位、バリン-シトルリン単位、及びpara-アミノベンジル(PAB)単位であるかそれらを含むものも挙げられるが、これらに限定されない。ある実施態様において、結合剤リンカー(BL)は、反応性リンカー(RL)の反応性基(RG)と結合剤、例えば、抗体、修飾抗体、又はその抗原結合断片の反応性部分との反応によって形成される部位を含む。
いくつかの例において、BLは、以下の部位:
Figure 2022507781000041
 (式中、
Figure 2022507781000042
 は、結合剤への結合である)、又はトリアゾリル位置異性体を含む。いくつかの例において、BLは、以下の部位:
Figure 2022507781000043
 (式中、
Figure 2022507781000044
 は、前記結合剤への結合である)
を含む。いくつかの例において、BLは、以下の部位:
Figure 2022507781000045
 (式中、
Figure 2022507781000046
 は、前記結合剤への結合である)、又はトリアゾリル位置異性体を含む。いくつかの例において、BLは、以下の部位:
Figure 2022507781000047
 (式中、
Figure 2022507781000048
 は、抗体又はその抗原結合断片のシステインへの結合である)を含む。いくつかの例において、BLは、以下の部位:
Figure 2022507781000049
 (式中、
Figure 2022507781000050
 は、抗体又はその抗原結合断片のリジンへの結合である)を含む。
(化合物又はペイロード)
ある実施態様において、本明細書で記載されるものは、式(I)の構造を有する化合物、又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態である:
Figure 2022507781000051
 (式中、
Q1及びQ2のそれぞれは、独立に、-CH2-、-C(O)-、-C(H)(OH)-、又は-C(OH)2-であり;
Wは、-CH2-、-N(H)-、又は-O-であり;
R1は、-N(H)R4又は-N(R5)2であり;
R2は、-N(H)R4であり;
各R4は、各場合に独立に、水素、アミノ酸残基、N-アルキルアミノ酸残基、ペプチド残基、生分解性部位、アルキル、置換アルキル、アシル、又は置換アシルであり;
R5は、アルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロシクロアルキル、又は置換ヘテロシクロアルキルであり、ここで、各ヘテロシクロアルキル又は置換ヘテロシクロアルキルは、窒素及び酸素から選択される1、2、又は3個のヘテロ原子を含み、かつ置換されている場合には、少なくとも1つの-OH及び-CH2OH、又は少なくとも1つの一級もしくは二級窒素を含み;かつ
各R6は、独立に、ハロ、C1-6アルキル、C1-6アルコキシ、-CN、O-グルコース、O-アミノ酸残基、又はO-PEGn1である(ここで、各nは、0～14の整数であり、かつ各n1は、1～12の整数である)。
式Iの一実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、かつWは、-CH2-である。式Iの一実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、かつWは、-O-である。式Iの一実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、かつWは、-NH-である。本段落の実施態様のいずれかにおいて、R1は、-N(H)R4又は-N(R5)2であり、かつR2は、-N(H)R4である。本段落の実施態様のいずれかにおいて、R1は、-N(H)R4であり、かつR2は、-N(H)R4である。本段落の実施態様のいずれかにおいて、R1は、-N(R5)2であり、かつR2は、-N(H)R4である。本段落の実施態様のいずれかにおいて、各R4は、各場合に独立に、水素、アミノ酸残基、N-アルキルアミノ酸残基、ペプチド残基、生分解性部位、アルキル、置換アルキル、アシル、又は置換アシルである。本段落の実施態様のいずれかにおいて、各R4は、各場合に独立に、水素、アミノ酸残基、N-アルキルアミノ酸残基、ペプチド残基、生分解性部位、又はアルキルである。本段落の実施態様のいずれかにおいて、各R4は、水素である。本段落の実施態様のいずれかにおいて、各R4は、各場合に独立に、アミノ酸残基である。本段落の実施態様のいずれかにおいて、各R4は、各場合に独立に、N-アルキルアミノ酸残基である。本段落の実施態様のいずれかにおいて、各R4は、各場合に独立に、ペプチド残基である。本段落の実施態様のいずれかにおいて、各R4は、各場合に独立に、生分解性部位である。本段落の実施態様のいずれかにおいて、各R4は、各場合に独立に、アルキルである。本段落の実施態様のいずれかにおいて、各R4は、各場合に独立に、置換アルキルである。本段落の実施態様のいずれかにおいて、各R4は、各場合に独立に、アシルである。本段落の実施態様のいずれかにおいて、各R4は、各場合に独立に、置換アシルである。本段落の任意の実施態様において、一方のR4は、水素であり、かつ他方のR4は、アミノ酸残基である。本段落の任意の実施態様において、一方のR4は、水素であり、かつ他方のR4は、ペプチド残基である。本段落の任意の実施態様において、一方のR4は、水素であり、かつ他方のR4は、置換アルキルである。本段落の任意の実施態様において、一方のR4は、水素であり、かつ他方のR4は、アシルである。本段落の任意の実施態様において、一方のR4は、水素であり、かつ他方のR4は、置換アシルである。本段落の実施態様のいずれかにおいて、R5は、アルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロシクロアルキル、又は置換ヘテロシクロアルキルであり、ここで、各ヘテロシクロアルキル又は置換ヘテロシクロアルキルは、窒素及び酸素から選択される1、2、又は3個のヘテロ原子を含み、かつ置換されている場合には、少なくとも1つの-OH及び-CH2OH、又は少なくとも1つの一級もしくは二級窒素を含む。本段落の実施態様のいずれかにおいて、R5は、アルキルである。本段落の実施態様のいずれかにおいて、R5は、アリールである。本段落の実施態様のいずれかにおいて、R5は、アリールアルキルである。本段落の実施態様のいずれかにおいて、R5は、ヘテロシクロアルキルである。本段落の実施態様のいずれかにおいて、R5は、置換ヘテロシクロアルキルである。本段落の実施態様のいずれかにおいて、R5は、ヘテロシクロアルキルであり、ヘテロシクロアルキルは、窒素及び酸素から選択される1個のヘテロ原子を含む。本段落の実施態様のいずれかにおいて、R5は、ヘテロシクロアルキルであり、ヘテロシクロアルキルは、1個の窒素を含む。本段落の実施態様のいずれかにおいて、R5は、ヘテロシクロアルキルであり、ヘテロシクロアルキルは、1個の酸素を含む。本段落の実施態様のいずれかにおいて、R5は、ヘテロシクロアルキルであり、ヘテロシクロアルキルは、窒素及び酸素から選択される2個のヘテロ原子を含む。本段落の実施態様のいずれかにおいて、R5は、ヘテロシクロアルキルであり、ヘテロシクロアルキルは、2個の窒素原子を含む。本段落の実施態様のいずれかにおいて、R5は、ヘテロシクロアルキルであり、ヘテロシクロアルキルは、2個の酸素原子を含む。本段落の実施態様のいずれかにおいて、R5は、ヘテロシクロアルキルであり、ヘテロシクロアルキルは、1個の窒素及び1個の酸素を含む。本段落の実施態様のいずれかにおいて、R5は、ヘテロシクロアルキルであり、ヘテロシクロアルキルは、窒素及び酸素から選択される3個のヘテロ原子を含む。本段落の実施態様のいずれかにおいて、R5は、ヘテロシクロアルキルであり、ヘテロシクロアルキルは、3個の窒素原子を含む。本段落の実施態様のいずれかにおいて、R5は、ヘテロシクロアルキルであり、ヘテロシクロアルキルは、2個の窒素原子及び1個の酸素原子を含む。本段落の実施態様のいずれかにおいて、R5は、置換ヘテロシクロアルキルであり、かつ窒素及び酸素から選択される1個のヘテロ原子を含む。本段落の実施態様のいずれかにおいて、R5は、置換ヘテロシクロアルキルであり、かつ1個の窒素を含む。本段落の実施態様のいずれかにおいて、R5は、置換ヘテロシクロアルキルであり、かつ1個の酸素を含む。本段落の実施態様のいずれかにおいて、R5は、置換ヘテロシクロアルキルであり、かつ窒素及び酸素から選択される2個のヘテロ原子を含む。本段落の実施態様のいずれかにおいて、R5は、置換ヘテロシクロアルキルであり、かつ2個の窒素原子を含む。本段落の実施態様のいずれかにおいて、R5は、置換ヘテロシクロアルキルであり、かつ2個の酸素原子を含む。本段落の実施態様のいずれかにおいて、R5は、置換ヘテロシクロアルキルあり、かつ1個の窒素及び1個の酸素を含む。本段落の実施態様のいずれかにおいて、R5は、置換ヘテロシクロアルキルであり、かつ窒素及び酸素から選択される3個のヘテロ原子を含む。本段落の実施態様のいずれかにおいて、R5は、置換ヘテロシクロアルキルであり、かつ3個の窒素原子を含む。本段落の実施態様のいずれかにおいて、R5は、置換ヘテロシクロアルキルであり、かつ2個の窒素原子及び1個の酸素原子を含む。本段落の実施態様のいずれかにおいて、R5は、置換ヘテロシクロアルキルであり、かつ上述のように窒素及び酸素から選択される1個のヘテロ原子を含み、かつ少なくとも1つの-OH及び-CH2OHを含む。本段落の実施態様のいずれかにおいて、R5は、置換ヘテロシクロアルキルであり、かつ上述のように窒素及び酸素から選択される2個のヘテロ原子を含み、かつ少なくとも1つの-OH及び-CH2OHを含む。本段落の実施態様のいずれかにおいて、R5は、置換ヘテロシクロアルキルであり、かつ上述のように窒素及び酸素から選択される3個のヘテロ原子を含み、かつ少なくとも1つの-OH及び-CH2OHを含む。本段落の実施態様のいずれかにおいて、R5は、置換ヘテロシクロアルキルであり、かつ上述のように窒素及び酸素から選択される1個のヘテロ原子を含み、かつ少なくとも1つの一級窒素を含む。本段落の実施態様のいずれかにおいて、R5は、置換ヘテロシクロアルキルであり、かつ上述のように窒素及び酸素から選択される2個のヘテロ原子を含み、かつ少なくとも1つの一級窒素を含む。本段落の実施態様のいずれかにおいて、R5は、置換ヘテロシクロアルキルであり、かつ上述のように窒素及び酸素から選択される3個のヘテロ原子を含み、かつ少なくとも1つの一級窒素を含む。本段落の実施態様のいずれかにおいて、R5は、置換ヘテロシクロアルキルであり、かつ上述のように窒素及び酸素から選択される1個のヘテロ原子を含み、かつ少なくとも1つの二級窒素を含む。本段落の実施態様のいずれかにおいて、R5は、置換ヘテロシクロアルキルであり、かつ上述のように窒素及び酸素から選択される2個のヘテロ原子を含み、かつ少なくとも1つの二級窒素を含む。本段落の実施態様のいずれかにおいて、R5は、置換ヘテロシクロアルキルであり、かつ上述のように窒素及び酸素から選択される3個のヘテロ原子を含み、かつ少なくとも1つの二級窒素を含む。本段落の実施態様のいずれかにおいて、各R6は、独立に、ハロ、C1-6アルキル、C1-6アルコキシ、-CN、O-グルコース、O-アミノ酸残基、又はO-PEGn1である(ここで、各nは、0～14の整数であり、かつ各n1は、1～12の整数である)。本段落の実施態様のいずれかにおいて、各R6は、独立に、ハロである。本段落の実施態様のいずれかにおいて、各R6は、独立に、C1-6アルキルである。本段落の実施態様のいずれかにおいて、各R6は、独立に、C1-6アルコキシである。本段落の実施態様のいずれかにおいて、各R6は、-CNである。本段落の実施態様のいずれかにおいて、各R6は、独立に、O-グルコースである。本段落の実施態様のいずれかにおいて、各R6は、独立に、O-アミノ酸残基である。本段落の任意の実施態様において、各R6は、独立に、O-PEGn1(式中、各n1は、1～12の整数である)である。本段落の任意の実施態様において、各R6は、独立に、O-PEGn1(式中、各n1は、1である)である。本段落の任意の実施態様において、各R6は、独立に、O-PEGn1(式中、各n1は、2である)である。本段落の任意の実施態様において、各R6は、独立に、O-PEGn1(式中、各n1は、3である)である。本段落の任意の実施態様において、各R6は、独立に、O-PEGn1(式中、各n1は、4である)である。本段落の任意の実施態様において、各R6は、独立に、O-PEGn1(式中、各n1は、5である)である。本段落の任意の実施態様において、各R6は、独立に、O-PEGn1(式中、各n1は、6である)である。本段落の任意の実施態様において、各R6は、独立に、O-PEGn1(式中、各n1は、7である)である。本段落の任意の実施態様において、各R6は、独立に、O-PEGn1(式中、各n1は、8である)である。本段落の任意の実施態様において、各R6は、独立に、O-PEGn1(式中、各n1は、9である)である。本段落の任意の実施態様において、各R6は、独立に、O-PEGn1(式中、各n1は、10である)である。本段落の任意の実施態様において、各R6は、独立に、O-PEGn1(式中、各n1は、11である)である。本段落の任意の実施態様において、各R6は、独立に、O-PEGn1(式中、各n1は、12である)である。本段落の実施態様のいずれかにおいて、各R6は、独立に、ハロ、C1-6アルキル、C1-6アルコキシ、-CN、O-グルコース、O-アミノ酸残基、又はO-PEGn1である(ここで、各nは、0～14の整数であり、かつ各n1は、1～12の整数である)、及びそれらの任意の組み合わせである。例えば、一実施態様において、一方のR6は、ハロであり、かつ他方のR6は、C1-6アルキルである。当業者によって認識されるであろうように、別の例示的なR6の組合せ実施態様が想定されている。本段落の実施態様のいず
れかにおいて、アミノ酸残基として好適なアミノ酸又はペプチド残基として組み合わされるべき好適なアミノ酸としては、当業者によって認識されるであろうように、アラニン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、トリプトファン、チロシン、バリン、セリン、トレオニン、アスパラギン、グルタミン、システイン、セレノシステイン、グリシン、プロリン、アルギニン、ヒスチジン、リジン、アスパラギン酸、及びグルタミン酸、並びにペプチド残基としてのそれらの任意の組み合わせが挙げられる。当業者は、アミノ酸残基が、アキラル又はキラルであり得ること、例えば、L-アミノ酸残基又はD-アミノ酸残基であり得ることを認識しているであろう。当業者は、ペプチド残基が、例えば、ラセミのDL-アミノ酸又はラセミではないD-又はL-アミノ酸、及びそれらのジアステレオ異性体混合物を含めて、アキラル又はキラルであり得ることを認識しているであろう。本段落の実施態様のいずれかにおいて、好適なアリールアルキル部位としては、ベンジル、フェネチル、フェニルプロピル、α-メチルベンジル及びその各立体異性体、並びに2-フェニルプロピル及びその各立体異性体が挙げられる。本段落の実施態様のいずれかにおいて、アリールアルキルは、ベンジルである。本段落の実施態様のいずれかにおいて、アリールアルキルは、フェネチルである。本段落の実施態様のいずれかにおいて、アリールアルキルは、フェニルプロピルである。本段落の実施態様のいずれかにおいて、アリールアルキルは、α-メチルベンジル及びその各立体異性体である。本段落の実施態様のいずれかにおいて、アリールアルキルは、(R)-α-メチルベンジルである。本段落の実施態様のいずれかにおいて、アリールアルキルは、(S)-α-メチルベンジルである。本段落の実施態様のいずれかにおいて、アリールアルキルは、2-フェニルプロピル(すなわち、CH3CH(Ph)CH2-)及びその各立体異性体である。本段落の実施態様のいずれかにおいて、アリールアルキルは、(R)-2-フェニルプロピルである。本段落の実施態様のいずれかにおいて、アリールアルキルは、(S)-2-フェニルプロピルである。本段落の実施態様のいずれかにおいて、ハロは、フルオロ、クロロ、ブロモ、及びヨードからなる群から選択される。本段落の実施態様のいずれかにおいて、ハロは、フルオロである。本段落の実施態様のいずれかにおいて、ハロは、クロロである。本段落の実施態様のいずれかにおいて、ハロは、ブロモである。本段落の実施態様のいずれかにおいて、ハロは、ヨードである。本段落の実施態様のいずれかにおいて、C1-6アルキルは、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、及びヘキシル、並びにそれらの構造異性体からなる群から選択される。本段落の実施態様のいずれかにおいて、C1-6アルキルは、メチル又は-CH3である。本段落の実施態様のいずれかにおいて、C1-6アルキルは、エチル又は-CH2CH3である。本段落の実施態様のいずれかにおいて、C1-6アルキルは、プロピル又はその構造異性体である。本段落の実施態様のいずれかにおいて、C1-6アルキルは、ブチル又はその構造異性体である。本段落の実施態様のいずれかにおいて、C1-6アルキルは、ペンチル又はその構造異性体である。本段落の実施態様のいずれかにおいて、C1-6アルキルは、ヘキシル又はその構造異性体である。本段落の実施態様のいずれかにおいて、C1-6アルコキシは、メトキシ、エトキシ、プロピルオキシ、ブチルオキシ、ペンチルオキシ、及びヘキシルオキシ、並びにその構造異性体からなる群から選択される。本段落の実施態様のいずれかにおいて、C1-6アルキルは、メトキシ又は-OCH3である。本段落の実施態様のいずれかにおいて、C1-6アルキルは、エトキシ又は-OCH2CH3である。本段落の実施態様のいずれかにおいて、C1-6アルキルは、プロピルオキシ又はその構造異性体である。本段落の実施態様のいずれかにおいて、C1-6アルキルは、ブチルオキシ又はその構造異性体である。本段落の実施態様のいずれかにおいて、C1-6アルキルは、ペンチルオキシ又はその構造異性体である。本段落の実施態様のいずれかにおいて、C1-6アルキルは、ヘキシルオキシ又はその構造異性体である。
式Iの一実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、かつWは、-CH2-である。式Iの一実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、かつWは、-O-である。式Iの一実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、かつWは、-NH-である。本段落の実施態様のいずれかにおいて、R1、R2、R4、R5、及びR6は、式Iとの関連において上述の通りである。
式Iの一実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、かつWは、-CH2-である。式Iの一実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、かつWは、-O-である。式Iの一実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、かつWは、-NH-である。本段落の実施態様のいずれかにおいて、R1、R2、R4、R5、及びR6は、式Iとの関連において上述の通りである。
式Iの一実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、かつWは、-CH2-である。式Iの一実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、かつWは、-O-である。式Iの一実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、かつWは、-NH-である。本段落の実施態様のいずれかにおいて、R1、R2、R4、R5、及びR6は、式Iとの関連において上述の通りである。
式Iの一実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、かつWは、-CH2-である。式Iの一実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、かつWは、-O-である。式Iの一実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、かつWは、-NH-である。本段落の実施態様のいずれかにおいて、R1、R2、R4、R5、及びR6は、式Iとの関連において上述の通りである。
ある実施態様において、本明細書で記載されるものは、式(II)の構造を有する化合物もしくはペイロード、又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態である:
Figure 2022507781000052
 。本段落の実施態様のいずれかにおいて、R1、R2、R4、R5、及びR6は、式Iとの関連において上述の通りである。
ある実施態様において、本明細書で記載されるものは、式(III)の構造を有する化合物もしくはペイロード、又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態である:
Figure 2022507781000053
 。本段落の実施態様のいずれかにおいて、R1、R2、R4、R5、及びR6は、式Iとの関連において上述の通りである。
ある実施態様において、本明細書で記載されるものは、R1が、-N(H)R4である式I、式II、又は式IIIの化合物又はペイロードである。ある実施態様において、本明細書で記載されるものは、R1が、-N(R5)2である式I、式II、又は式IIIの化合物又はペイロードである。本段落の実施態様のいずれかにおいて、R2、R4、R5、及びR6は、式Iとの関連において上述の通りである。
ある実施態様において、本明細書で記載されるものは、R1が、-NH2であり;かつR4が、アミノ酸残基、N-アルキルアミノ酸残基、ペプチド残基、生分解性部位、アルキル、置換アルキル、アシル、又は置換アシルである式I、式II、又は式IIIの化合物又はペイロードである。一実施態様において、本明細書で記載されるものは、R1が、-NH2であり;かつR4が、アミノ酸残基である式I、式II、又は式IIIの化合物又はペイロードである。一実施態様において、本明細書で記載されるものは、R1が、-NH2であり;かつR4が、N-アルキルアミノ酸残基である式I、式II、又は式IIIの化合物又はペイロードである。一実施態様において、本明細書で記載されるものは、R1が、-NH2であり;かつR4が、ペプチド残基である式I、式II、又は式IIIの化合物又はペイロードである。一実施態様において、本明細書で記載されるものは、R1が、-NH2であり;かつR4が、生分解性部位である式I、式II、又は式IIIの化合物又はペイロードである。一実施態様において、本明細書で記載されるものは、R1が、-NH2であり;かつR4が、アルキルである式I、式II、又は式IIIの化合物又はペイロードである。一実施態様において、本明細書で記載されるものは、R1が、-NH2であり;かつR4が、置換アルキルである式I、式II、又は式IIIの化合物又はペイロードである。一実施態様において、本明細書で記載されるものは、R1が、-NH2であり;かつR4が、アシルである式I、式II、又は式IIIの化合物又はペイロードである。一実施態様において、本明細書で記載されるものは、R1が、-NH2であり;かつR4が、置換アシルである式I、式II、又は式IIIの化合物又はペイロードである。本段落の実施態様のいずれかにおいて、好適なアミノ酸残基は、式Iとの関連において上述の通りである。本段落の実施態様のいずれかにおいて、好適なペプチド残基は、式Iとの関連において上述の通りである。一実施態様において、本明細書で記載されるものは、R1が、-NH2であり;かつR4が、アミノ酸残基であり、かつ該アミノ酸残基が、アラニン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、トリプトファン、チロシン、バリン、セリン、トレオニン、アスパラギン、グルタミン、システイン、セレノシステイン、グリシン、プロリン、アルギニン、ヒスチジン、リジン、アスパラギン酸、及びグルタミン酸からなる群から選択される化合物又はペイロードである。一実施態様において、本明細書で記載されるものは、R1が、-NH2であり;かつR4が、ペプチド残基であり、ここで、該ペプチド残基が、アラニン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、トリプトファン、チロシン、バリン、セリン、トレオニン、アスパラギン、グルタミン、システイン、セレノシステイン、グリシン、プロリン、アルギニン、ヒスチジン、リジン、アスパラギン酸、及びグルタミン酸からなる群から選択されるアミノ酸残基を含む化合物又はペイロードである。本段落の実施態様のいずれかにおいて、R6は、式Iとの関連において上述の通りである。
ある実施態様において、本明細書で記載されるものは、R1及びR2が、-N(H)R4である化合物又はペイロードである。一実施態様において、本明細書で記載されるものは、R1及びR2が、-N(H)R4であり、かつR4が、各場合に独立に、アミノ酸残基であり;かつ該アミノ酸残基が、アラニン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、トリプトファン、チロシン、バリン、セリン、トレオニン、アスパラギン、グルタミン、システイン、セレノシステイン、グリシン、プロリン、アルギニン、ヒスチジン、リジン、アスパラギン酸、及びグルタミン酸からなる群から選択される化合物又はペイロードである。
ある実施態様において、本明細書で提供されるのは、以下:
Figure 2022507781000054
Figure 2022507781000055
Figure 2022507781000056
Figure 2022507781000057
からなる群から選択される化合物又はペイロード;又はその医薬として許容し得る塩もしくは溶媒和物である。
一実施態様において、本明細書で提供されるのは、以下の構造
Figure 2022507781000058
 を有する化合物;又はその医薬として許容し得る塩もしくは溶媒和物である。
さらに本明細書で提供されるのは、以下:
Figure 2022507781000059
Figure 2022507781000060
からなる群から選択される化合物又はペイロードである。
(結合剤)
本開示で提供されるコンジュゲートのいずれかに適した結合剤としては、抗体、リンホカイン、ホルモン、成長因子、ウイルス受容体、インターロイキン、又は任意の他の細胞結合性もしくはペプチド結合性の分子もしくは物質が挙げられるが、これらに限定されない。
ある実施態様において、結合剤は、抗体又はその抗原結合断片である。抗体は、当業者に公知の任意の形態とすることができる。本明細書で使用される「抗体」という用語は、特定の抗原に特異的に結合するか又はそれと特異的に相互作用する少なくとも1つの相補性決定領域(CDR)を含む任意の抗原結合分子又は分子複合体を意味する。「抗体」という用語は、ジスルフィド結合によって相互に接続された、2本の重(H)鎖と2本の軽(L)鎖の4本のポリペプチド鎖を含む免疫グロブリン分子、及びその多量体(例えば、IgM)を含む。各重鎖は、重鎖可変領域(本明細書ではHCVR又はVHと略す)及び重鎖定常領域を含む。重鎖定常領域は、3つのドメイン、CH1、CH2、及びCH3を含む。各軽鎖は、軽鎖可変領域(本明細書ではLCVR又はVLと略す)及び軽鎖定常領域を含む。軽鎖定常領域は、1つのドメイン(CL1)を含む。VH及びVL領域は、フレームワーク領域(FR)と呼ばれるより保存された領域が散在する、相補性決定領域(CDR)と呼ばれる超可変領域にさらに細かく分けることができる。各VH及びVLは、3つのCDR及び4つのFRから構成され、アミノ末端からカルボキシ末端にかけて、以下の順序:FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3、FR4で配置されている。本件開示の様々な実施態様において、本明細書の化合物又はペイロードに適した抗体(又はその抗原結合性部分)のFRは、ヒト生殖系列配列と同一であってもよく、又は自然にもしくは人為的に修飾されていてもよい。アミノ酸コンセンサス配列は、2つ以上のCDRの対比分析に基づいて定義することができる。明細書で使用される「抗体」という用語は、完全な抗体分子の抗原結合断片も含む。本明細書で使用される、抗体の「抗原結合部分」、抗体の「抗原結合断片」などの用語は、抗原に特異的に結合して複合体を形成する、任意の天然に存在する、酵素的に得られる、合成された、又は遺伝子改変されたポリペプチド又は糖タンパク質を含む。抗体の抗原結合断片は、任意の適当な標準的技法、例えば、タンパク分解的消化又は抗体可変ドメイン及び任意に定常ドメインをコードするDNAの操作及び発現を伴う組換え遺伝子工学技法を用いて完全な抗体分子から得ることができる。そのようなDNAは、公知であり、かつ/又は例えば、商業的供給源、DNAライブラリー(例えば、ファージ-抗体ライブラリーを含む)から容易に入手可能であるか、又は合成することができる。DNAをシークエンシングし、化学的に又は分子生物学的技法を用いることにより操作して、例えば、1以上の可変及び/もしくは定常ドメインを好適な配置に配置すること、又はコドンを導入し、システイン残基を生成させ、アミノ酸を修飾し、付加し、もしくは欠失させることなどができる。抗原結合断片の非限定的な例としては:(i)Fab断片;(ii)F(ab')2断片;(iii)Fd断片;(iv)Fv断片;(v)単鎖Fv(scFv)分子;(vi)dAb断片;及び(vii)抗体の超可変領域を模倣するアミノ酸残基からなる最小認識単位(例えば、CDR3ペプチドなどの単離されたCDR)、又は拘束性FR3-CDR3-FR4ペプチドが挙げられる。他の改変分子、例えば、ドメイン特異的抗体、単一ドメイン抗体、ドメイン欠失抗体、キメラ抗体、CDR移植抗体、ダイアボディ、トリアボディ、テトラボディ、ミニボディ、ナノボディ(例えば、一価のナノボディ、二価のナノボディなど)、小モジュラー免疫医薬(SMIP)、及びサメ可変IgNARドメインも、本明細書で使用される「抗原結合断片」という表現に包含される。抗体の抗原結合断片は、通常、少なくとも1つの可変ドメインを含む。可変ドメインは、任意のサイズ又はアミノ酸組成のものであってもよく、通常、1つ以上のフレームワーク配列に隣接しているか、又はそれとインフレームになっている少なくとも1つのCDRを含む。VHドメインがVLドメインと会合している抗原結合断片において、VHドメインとVLドメインは、互いに対して任意の好適な配置にあってもよい。例えば、可変領域は二量体であり、かつVH-VH、VH-VL、又はVL-VL二量体を含有していてもよい。或いは、抗体の抗原結合断片は、単量体のVH又はVLドメインを含有していてもよい。ある実施態様において、抗体の抗原結合断片は、少なくとも1つの定常ドメインに共有結合で連結された少なくとも1つの可変ドメインを含有していてもよい。本発明の抗体の抗原結合断片内に見出し得る可変及び定常ドメインの非限定的で例示的な配置としては:(i)VH-CH1;(ii)VH-CH2;(iii)VH-CH3;(iv)VH-CH1-CH2;(v)VH-CH1-CH2-CH3;(vi)VH-CH2-CH3;(vii)VH-CL;(viii)VL-CH1;(ix)VL-CH2;(x)VL-CH3;(xi)VL-CH1-CH2;(xii)VL-CH1-CH2-CH3;(xiii)VL-CH2-CH3;及び(xiv)VL-CLが挙げられる。上記の例示的な配置のいずれかを含む、可変ドメインと定常ドメインの任意の配置において、可変ドメインと定常ドメインは、互いに直接連結されていてもよく、又は完全なもしくは部分的なヒンジもしくはリンカー領域によって連結されていてもよい。ヒンジ領域は、単一ポリペプチド分子中の隣接する可変ドメイン及び/又は定常ドメイン間に柔軟な又は半ば柔軟な連結を生じさせる少なくとも2個(例えば、5個、10個、15個、20個、40個、60個、又はそれより多く)のアミノ酸からなっていてもよい。完全な抗体分子と同様、抗原結合断片は、単一特異性又は多重特異性(例えば、二重特異性)であってもよい。抗体の多重特異性抗原結合断片は、通常、少なくとも2つの異なる可変ドメインを含み、ここで、各可変ドメインは、別々の抗原に又は同じ抗原上の異なるエピトープに特異的に結合することができる。本明細書に開示される例示的な二重特異性抗体フォーマットを含む、任意の多重特異性抗体フォーマットは、当技術分野で利用可能なルーチンの技法を用いて、本開示の抗体の抗原結合断片と関連した使用に適合させることができる。本明細書に記載されるある実施態様において、本明細書に記載される抗体は、ヒト抗体である。本明細書で使用される「ヒト抗体」という用語は、ヒト生殖系列免疫グロブリン配列に由来する可変領域及び定常領域を有する抗体を含むことが意図される。本件開示のヒト抗体は、例えば、CDR中、特にCDR3中に、ヒト生殖系列免疫グロブリン配列によってコードされていないアミノ酸残基(例えば、インビトロでのランダムなもしくは部位特異的な変異誘発によるか、又はインビボでの体細胞変異によって導入される変異)を含み得る。しかしながら、本明細書で使用される「ヒト抗体」という用語が、マウスなどの別の哺乳動物種の生殖系列に由来するCDR配列が、ヒトフレームワーク配列に移植されている抗体を含むことは意図されない。「ヒト抗体」という用語は、天然に存在する非修飾生物において修飾やヒトによる介入/操作を伴わずに通常存在する天然に存在する分子を含まない。本件開示の抗体は、ある実施態様において、組換えヒト抗体であってもよい。本明細書で使用される「組換えヒト抗体」という用語は、組換え手段によって調製され、発現され、作出され、又は単離される全てのヒト抗体、例えば、宿主細胞内にトランスフェクトされた組換え発現ベクターを用いて発現される抗体(以下でさらに説明する)、組換えコンビナトリアルヒト抗体ライブラリーから単離される抗体(以下でさらに説明する)、ヒト免疫グロブリン遺伝子についてトランスジェニックである動物(例えば、マウス)から単離される抗体(例えば、Taylorらの文献、(1992) Nucl. Acids Res. 20:6287-6295を参照されたい)、又はヒト免疫グロブリン遺伝子配列の他のDNA配列へのスプライシングを伴う任意の他の手段によって調製され、発現され、作出され、もしくは単離される抗体などを含むことが意図される。そのような組換えヒト抗体は、ヒト生殖系列免疫グロブリン配列に由来する可変及び定常領域を有する。しかしながら、ある実施態様において、そのような組換えヒト抗体は、インビトロでの変異誘発(又はヒトIg配列についてトランスジェニックな動物を使用する場合、インビボでの体細胞変異誘発)を受け、したがって、該組換え抗体のVH及びVL領域のアミノ酸配列は、ヒト生殖系列VH及びVL配列に由来し、かつそれに関連するが、インビボでヒト抗体生殖系列レパートリー内に天然に存在していなくてもよい配列である。ヒト抗体は、ヒンジの不均一性と関連する2つの形態で存在することができる。ある形態では、免疫グロブリン分子は、二量体が鎖間重鎖ジスルフィド結合によって結合している、約150～160kDaの安定な4鎖構築物を含む。第二の形態では、二量体が鎖間ジスルフィド結合によって連結されず、共有結合で連結された軽鎖及び重鎖(半分の抗体)から構成された、約75～80kDaの分子が形成される。これらの形態は、親和性精製後でさえも、分離するのが極めて難しい。様々なインタクトのIgGアイソタイプにおける第二の形態の出現頻度は、限定されないが、抗体のヒンジ領域アイソタイプと関連する構造上の違いによるものである。ヒトIgG4ヒンジのヒンジ領域における単一アミノ酸置換は、ヒトIgG1ヒンジを用いて通常観察されるレベルにまで第二の形態の出現を有意に低下させることができる(Angalらの文献(1993) Molecular Immunology 30:105)。本開示は、ヒンジ領域、CH2領域、又はCH3領域に、例えば、製造に好適であり所望の抗体形態の収量を向上させ得る1つ以上の変異を有する抗体を包含する。本明細書に記載される抗体は、単離された抗体であってもよい。本明細書で使用される「単離された抗体」は、同定され、かつその天然環境の少なくとも1つの構成要素から分離及び/又は回収された抗体を意味する。例えば、生物の少なくとも1つの構成要素から、又は抗体が天然に存在しもしくは天然に産生される組織もしくは細胞から分離又は除去された抗体は、本開示の目的のための「単離された抗体」である。単離された抗体は、組換え細胞内のインサイチュの抗体も含む。単離された抗体は、少なくとも1つの精製又は単離工程にかけられた抗体である。ある実施態様によれば、単離された抗体は、他の細胞物質及び/又は化学物質を実質的に含まないものであってもよい。本明細書で使用される抗体は、該抗体が由来した対応する生殖系列配列と比較して、重鎖及び軽鎖可変ドメインのフレームワーク及び/又はCDR領域中に1つ以上のアミノ酸置換、挿入、及び/又は欠失を含むことができる。そのような変異は、本明細書に開示されるアミノ酸配列を、例えば、公的な抗体配列データベースから入手可能な生殖系列配列と比較することにより、容易に確認することができる。本開示は、本明細書に開示されるアミノ酸配列のいずれかに由来する抗体及びその抗原結合断片を含み、ここで、1つ以上のフレームワーク及び/又はCDR領域内の1つ以上のアミノ酸が、該抗体が由来する生殖系列配列の対応する残基(複数可)に、又は別のヒト生殖系列配列の対応する残基(複数可)に、又は対応する生殖系列残基(複数可)の保存的アミノ酸置換に変異している(そのような配列の変化は、本明細書においては、「生殖系列変異」と総称される)。当業者は、本明細書に開示される重鎖及び軽鎖可変領域配列から始めて、1つ以上の個々の生殖系列変異又はそれらの組合せを含む多数の抗体及び抗原結合断片を生じさせることができる。ある実施態様において、VH及び/又はVLドメイン内の全てのフレームワーク及び/又はCDR残基を変異させて、抗体が由来したもとの生殖系列配列中に見出される残基に戻す。別の実施態様において、特定の残基のみ、例えば、FR1の最初の8つのアミノ酸もしくはFR4の最後の8つのアミノ酸に見出される変異残基
のみ、又はCDR1、CDR2、もしくはCDR3に見出される変異残基のみを変異させて、もとの生殖系列配列に戻す。別の実施態様において、該フレームワーク及び/又はCDR残基の1つ以上を、異なる生殖系列配列(すなわち、抗体がもともと由来した生殖系列配列と異なる生殖系列配列)の対応する残基に変異させる。さらに、本開示の抗体は、フレームワーク及び/又はCDR領域内に、例えば、特定の個々の残基が特定の生殖系列配列の対応する残基に変異させられている一方で、もとの生殖系列配列と異なる特定の他の残基が維持されているか又は異なる生殖系列配列の対応する残基に変異させられている2以上の生殖系列変異の任意の組合せを含有し得る。ひとたび取得してしまえば、1つ以上の生殖系列変異を含有する抗体及び抗原結合断片を、例えば、改善された結合特異性、増大した結合親和性、改善又は増強された拮抗的又は作動的生体特性(場合による)、及び低下した免疫原性などの1つ以上の所望の特性について試験することができる。この一般的な方法で得られる抗体及び抗原結合断片は、本開示の範囲内に包含される。また、本明細書の化合物又はペイロードに有用な抗体としては、1つ以上の保存的な置換を有する本明細書に開示されるHCVR、LCVR、及び/又はCDRアミノ酸配列のうちのいずれかの変異体を含む抗体も挙げられる。「エピトープ」という用語は、パラトープとして知られる抗体分子の可変領域中の特異的抗原結合部位と相互作用する抗原性決定基を指す。単一の抗原は、2つ以上のエピトープを有し得る。したがって、異なる抗体が抗原上の異なる部分に結合し得、かつ異なる生物学的効果を有し得る。エピトープは、立体構造的又は線状のいずれかであり得る。立体構造エピトープは、線状ポリペプチド鎖の異なるセグメント由来の空間的に並置されたアミノ酸により生じる。線状エピトープは、ポリペプチド鎖中の隣接するアミノ酸残基により生じるものである。ある実施態様において、エピトープは、抗原上のサッカライド、ホスホリル基、又はスルホニル基の部位を含み得る。
ある実施態様において、抗体は、軽鎖を含む。ある実施態様において、軽鎖は、カッパ軽鎖である。ある実施態様において、軽鎖は、ラムダ軽鎖である。ある実施態様において、抗体は、重鎖を含む。ある実施態様において、重鎖は、IgAである。ある実施態様において、重鎖は、IgDである。ある実施態様において、重鎖は、IgEである。ある実施態様において、重鎖は、IgGである。ある実施態様において、重鎖は、IgMである。ある実施態様において、重鎖は、IgG1である。ある実施態様において、重鎖は、IgG2である。ある実施態様において、重鎖は、IgG3である。ある実施態様において、重鎖は、IgG4である。ある実施態様において、重鎖は、IgA1である。ある実施態様において、重鎖は、IgA2である。
ある実施態様において、抗体は、抗体断片である。ある実施態様において、抗体断片は、Fv断片である。ある実施態様において、抗体断片は、Fab断片である。ある実施態様において、抗体断片は、F(ab′)2断片である。ある実施態様において、抗体断片は、Fab′断片である。ある実施態様において、抗体断片は、scFv(sFv)断片である。ある実施態様において、抗体断片は、scFv-Fc断片である。
ある実施態様において、抗体は、モノクローナル抗体である。ある実施態様において、抗体は、ポリクローナル抗体である。
ある実施態様において、抗体は、キメラ抗体である。ある実施態様において、抗体は、ヒト化抗体である。ある実施態様において、抗体は、ヒト抗体である。
抗体は、当業者にとって適したものであるとみなされる任意の抗原に対する結合特異性を有し得る。ある実施態様において、抗原は、膜貫通型分子(例えば、受容体)又は成長因子である。例示的な抗原としては、スカベンジャー受容体A(SR-A、又はMSR1)、コラーゲン様の構造を有するマクロファージ受容体(MARCO)、C型レクチンを有するスカベンジャー受容体(SRCL)、及びスカベンジャー受容体A-5(SCARA5)を含むクラスAスカベンジャー受容体、COLEC12、CD36、LIMPII、SRBI、SRBIIを含むクラスBマクロファージスカベンジャー受容体、クラスDスカベンジャー受容体CD68、及びリソソーム膜糖タンパク質(LAMP)、レクチン様酸化低密度リポタンパク質受容体1 LOX-1及びデクチン-1を含むクラスEスカベンジャー受容体、内皮細胞により発現されるスカベンジャー受容体-I(SREC-I)及びSREC-II、及び多上皮成長因子(EGF)様ドメイン(MEGF)10(multiple epidermal growth factor (EGF)-like domains (MEGF)10)を含むクラスFスカベンジャー受容体、クラスGスカベンジャー受容体CXCケモカインリガンド16(CXCL16)、ファシクリン、EGF様、ラミン型EGF様及びリンクドメイン含有スカベンジャー受容体-1(FEEL-1)及び-2(FEEL-2)を含むクラスHスカベンジャー受容体、クラスIスカベンジャー受容体CD163、及び終末糖化産物受容体(RAGE)に対するクラスJスカベンジャー受容体、DEC205、CD206、デクチン-2、ミンクル、DC-SIGN、及びDNGR-1を含む他のC型レクチンスーパーファミリーメンバー、並びにV-セット及びIgドメイン含有4(VSIG4)を含むB7ファミリー関連メンバー、コロニー刺激因子1受容体(CSF1R)、アシアロ糖タンパク質受容体(ASGPR)、並びにアミロイドベータ前駆体様タンパク質2(APLP-2)などの他の膜タンパク質などの分子が挙げられるが、これらに限定されない。ある実施態様において、抗原は、PRLR又はHER2である。ある実施態様において、抗体は、抗PRLR又は抗HER2抗体である。ある実施態様において、抗体は、抗MSR1抗体である。例示的な抗MSR1抗体が、本明細書に記載される。
結合剤リンカーを、結合剤、例えば、抗体又は抗原結合性分子に、該抗体又は抗原結合性分子内の特定のアミノ酸での付着によって結合させることができる。本開示のこの態様との関連で使用することができる例示的なアミノ酸付着としては、例えば、リジン(例えば、US 5,208,020; US 2010/0129314; Hollanderらの文献、Bioconjugate Chem., 2008, 19:358-361; WO 2005/089808; US 5,714,586; US 2013/0101546;及びUS 2012/0585592を参照されたい)、システイン(例えば、US 2007/0258987; WO 2013/055993; WO 2013/055990; WO 2013/053873; WO 2013/053872; WO 2011/130598; US 2013/0101546;及びUS 7,750,116を参照されたい)、セレノシステイン(例えば、WO 2008/122039; 及びHoferらの文献, Proc. Natl. Acad. Sci., USA, 2008, 105:12451-12456を参照されたい)、ホルミルグリシン(例えば、Carricoらの文献, Nat. Chem. Biol., 2007, 3:321-322; Agarwalらの文献, Proc. Natl. Acad. Sci., USA, 2013, 110:46-51、及びRabukaらの文献, Nat. Protocols, 2012, 10:1052-1067を参照されたい)、非天然アミノ酸(例えば、WO 2013/068874、及びWO 2012/166559を参照されたい)、並びに酸性アミノ酸(例えば、WO 2012/05982を参照されたい)が挙げられる。リンカーは、炭水化物への付着を介して抗原結合タンパク質にコンジュゲートさせることもできる(例えば、US 2008/0305497、WO 2014/065661、及びRyanらの文献, Food & Agriculture Immunol., 2001, 13:127-130を参照されたい)。
いくつかの例において、結合剤は、抗体又は抗原結合性分子であり、かつ該抗体は、リジン残基を介してリンカーに結合している。ある実施態様において、抗体又は抗原結合性分子は、システイン残基を介してリンカーに結合している。
また、リンカーを、トランスグルタミナーゼベースの化学酵素的なコンジュゲーションを介して1つ以上のグルタミン残基にコンジュゲートさせることもできる(例えば、Dennlerらの文献, Bioconjugate Chem. 2014, 25, 569-578及びWO 2017/147542を参照されたい)。例えば、トランスグルタミナーゼの存在下において、抗体の1つ以上のグルタミン残基を、一級アミン化合物にカップリングさせることができる。簡潔に述べると、いくつかの実施態様において、グルタミン残基(例えば、Gln295残基)を有する抗体を、酵素トランスグルタミナーゼの存在下において、以下でより詳細に記載される一級アミン化合物で処理する。一級アミン化合物には、例えば、トランスグルタミナーゼ媒介カップリングを介して抗体薬物コンジュゲートを直接的に提供する、ペイロード又はリンカー-ペイロードが含まれる。一級アミン化合物には、抗体薬物コンジュゲートの合成に向けて後にさらなる化合物で処理することができる反応性基で官能化されているリンカー及びスペーサーも含まれる。グルタミン残基を含む抗体は、天然源から単離するか又は1つ以上のグルタミン残基を含むように改変することができる。抗体ポリペプチド鎖中にグルタミン残基(グルタミニル修飾抗体又は抗原結合分子)を人為作製する技法は、当業者の技術の範囲内である。ある実施態様において、該抗体は、アグリコシル化されたものである。
ある実施態様において、抗体は、EU付番体系(EU numbering system)において295の番号が付けられる1つ以上の重鎖位置にグルタミン残基を含む。本開示において、この位置は、グルタミン295、又はGln295、又はQ295と呼ばれる。当業者は、これが、多くの抗体の野生型配列で保存されているグルタミン残基であることを認識しているであろう。別の有用な実施態様において、抗体を、グルタミン残基を含むように改変することができる。抗体配列をグルタミン残基を含むように修飾するための技術は、当業者の技術の範囲内である(例えば、Ausubelらの文献, Current Protoc. Mol. Biol.を参照されたい)。
ある実施態様において、前記抗体又はグルタミニル修飾抗体もしくは抗原結合性分子は、少なくとも1つのポリペプチド鎖配列に少なくとも1つのグルタミン残基を含む。ある実施態様において、抗体又はグルタミニル修飾抗体もしくは抗原結合分子は、各々1つのGln295残基を有する2つの重鎖ポリペプチドを含む。さらなる実施態様において、前記抗体又はグルタミニル修飾抗体もしくは抗原結合分子は、重鎖295以外の部位に1つ以上のグルタミン残基を含む。本明細書に含まれるものは、本明細書に記載されるAsn297Gln(N297Q)変異(複数可)を有するこのセクションの抗体である。本明細書に含まれるものは、Gln55(Q55)残基を有するこのセクションの抗体である。本明細書に記載される、残基付番は、EU付番体系によるものである。
(一級アミン化合物)
ある実施態様において、グルタミンを含む抗体(又は抗原結合化合物)のトランスグルタミナーゼ媒介カップリングに有用な一級アミン化合物は、当業者によって有用であるとみなされる任意の一級アミン化合物とすることができる。通常、一級アミン化合物は、式H2N-Rを有し、式中、Rは、抗体及び反応条件と適合する任意の基とすることができる。ある実施態様において、Rは、アルキル、置換アルキル、ヘテロアルキル、又は置換ヘテロアルキルである。
ある実施態様において、一級アミン化合物は、反応性基又は保護された反応性基を含む。有用な反応性基としては、アジド、アルキン、シクロアルキン、チオール、アルコール、ケトン、アルデヒド、酸、エステル、ヒドラジド、アニリン、及びアミンが挙げられる。ある実施態様において、反応性基は、アジド、アルキン、スルフヒドリル、シクロアルキン、アルデヒド、及びカルボキシルからなる群から選択される。
ある実施態様において、一級アミン化合物は、式H2N-LL-Xによるものであり、式中、LLは、二価のスペーサーであり、かつXは、反応性基又は保護された反応性基である。特定の実施態様において、LLは、二価のポリエチレングリコール(PEG)基である。ある実施態様において、Xは、-SH、-N3、アルキン、アルデヒド、及びテトラゾールからなる群から選択される。特定の実施態様において、Xは、-N3である。
ある実施態様において、一級アミン化合物は、以下の式のうちの1つによるものである:
H2N-(CH2)n-X;
H2N-(CH2CH2O)n-(CH2)p-X;
H2N-(CH2)n-N(H)C(O)-(CH2)m-X;
H2N-(CH2CH2O)n-N(H)C(O)-(CH2CH2O)m-(CH2)p-X;
H2N-(CH2)n-C(O)N(H)-(CH2)m-X;
H2N-(CH2CH2O)n-C(O)N(H)-(CH2CH2O)m-(CH2)p-X;
H2N-(CH2)n-N(H)C(O)-(CH2CH2O)m-(CH2)p-X;
H2N-(CH2CH2O)n-N(H)C(O)-(CH2)m-X;
H2N-(CH2)n-C(O)N(H)-(CH2CH2O)m-(CH2)p-X;かつ
H2N-(CH2CH2O)n-C(O)N(H)-(CH2)m-X;
(式中、
nは、1～12から選択される整数であり;
mは、0～12から選択される整数であり;
pは、0～2から選択される整数であり;かつ
Xは、
-SH、-N3、-C≡CH、-C(O)H、テトラゾール、及び
Figure 2022507781000061
 のいずれかからなる群から選択される)。
上記のものにおいて、アルキル(すなわち、-CH2-)基はいずれかも、例えば、C1-8アルキル、メチルホルミル、又は-SO3Hで任意に置換することができる。ある実施態様において、アルキル基は、置換されていない。
ある実施態様において、一級アミン化合物は:
Figure 2022507781000062
 からなる群から選択される。
特定の実施態様において、一級アミン化合物は、
Figure 2022507781000063
 である。
上記の反応のための例示的な条件を、後述の実施例で提供する。
(リンカー)
ある実施態様において、本明細書に記載されるコンジュゲートのリンカーL部分は、結合剤を本明細書に記載されるペイロード化合物へと共有結合によって連結する部位、例えば、二価の部位である。別の例において、リンカーLは、結合剤を本明細書に記載されるペイロード化合物へと共有結合によって連結する三価又は多価の部位である。好適なリンカーは、例えば、各々の内容が引用により本明細書中に完全に組み込まれる、抗体-薬物コンジュゲート及び免疫毒素(Antibody-Drug Conjugates and Immunotoxins); Phillips, G. L.編; Springer Verlag: New York, 2013;抗体-薬物コンジュゲート(Antibody-Drug Conjugates); Ducry, L.編; Humana Press, 2013;抗体-薬物コンジュゲート(Antibody-Drug Conjugates); Wang, J., Shen, W.-C., 及びZaro, J. L.編; Springer International Publishing, 2015に見出すことができる。ペイロード化合物としては、上記式I、式II、及び式IIIの化合物、並びにリンカーLとの結合又は組み入れ後のそれらの残基が挙げられ、ここで、リンカーLと化合物又はペイロードの組合せは、リンカー-ペイロード(LP)である。当業者は、化合物又はペイロード部位の特定の官能基が、リンカー及び/又は結合剤への連結に好都合であることを認識しているであろう。これらの基としては、アミン、ヒドロキシル、ホスフェート、及び糖類が挙げられる。
ある実施態様において、リンカーは、生理的条件で安定である。ある実施態様において、リンカーは切断可能であり、例えば、酵素の存在下で又は特定のpH範囲もしくは値で、少なくともペイロード部分を放出することができる。いくつかの実施態様において、リンカーは、酵素で切断可能な部位を含む。例示的な酵素で切断可能な部位としては、ペプチド結合、エステル連結、ヒドラゾン、及びジスルフィド連結が挙げられるが、これらに限定されない。いくつかの実施態様において、リンカーは、カテプシンで切断可能なリンカーを含む。
ある実施態様において、リンカーは、切断不可能な部位を含む。ある実施態様において、切断不可能なリンカーは、
Figure 2022507781000064
 又はその残基から誘導される。ある実施態様において、切断不可能なリンカー-ペイロードは、
Figure 2022507781000065
 又はその位置異性体である。ある実施態様において、切断不可能なリンカーは、
Figure 2022507781000066
 又はその残基から誘導される。ある実施態様において、切断不可能なリンカー-ペイロードは、
Figure 2022507781000067
 又はその位置異性体である。一実施態様において、リンカーは、マレイミドシクロヘキサンカルボキシレート又は4-(N-マレイミドメチル)シクロヘキサンカルボン酸(MCC)である。この構造において、
Figure 2022507781000068
 は、結合剤への結合を示す。この構造において、いくつかの例では、
Figure 2022507781000069
 は、例えば、結合剤とリンカーペイロードとの反応の結果として生じるクリックケミストリー残基を示す。
いくつかの実施態様において、好適なリンカーとしては、単一の結合剤、例えば、抗体の2つのシステイン残基に化学的に結合しているものが挙げられるが、これらに限定されない。そのようなリンカーは、コンジュゲーションプロセスの結果として破壊される抗体のジスルフィド結合を模倣する働きをすることができる。
いくつかの実施態様において、リンカーは、1つ以上のアミノ酸を含む。好適なアミノ酸としては、天然、非天然、標準的、非標準的、タンパク質構成性、非タンパク質構成性、及びL-又はD-α-アミノ酸が挙げられる。いくつかの実施態様において、リンカーは、アラニン、バリン、グリシン、ロイシン、イソロイシン、メチオニン、トリプトファン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、システイン、チロシン、アスパラギン、グルタミン、アスパラギン酸、グルタミン酸、リジン、アルギニン、ヒスチジン、もしくはシトルリン、その誘導体、又はその組合せを含む。ある実施態様において、該アミノ酸の1つ以上の側鎖は、後述の側鎖基に連結される。いくつかの実施態様において、リンカーは、バリン及びシトルリンを含む。いくつかの実施態様において、リンカーは、リジン、バリン、及びシトルリンを含む。いくつかの実施態様において、リンカーは、リジン、バリン、及びアラニンを含む。いくつかの実施態様において、リンカーは、バリン及びアラニンを含む。
いくつかの実施態様において、リンカーは、自壊基を含む。該自壊基は、当業者に公知の任意のそのような基とすることができる。特定の実施態様において、自壊基は、p-アミノベンジル(PAB)又はその誘導体である。有用な誘導体としては、p-アミノベンジルオキシカルボニル(PABC)が挙げられる。当業者は、自壊基がペイロードからリンカーの残りの原子を放出する化学反応を行うことができることを認識しているであろう。
ある実施態様において、リンカーは:
Figure 2022507781000070
 である
(式中:
SP1は、スペーサーであり;
SP2は、スペーサーであり;
Figure 2022507781000071
 は、結合剤への1つ以上の結合であり;
Figure 2022507781000072
 は、ペイロードへの1つ以上の結合であり;
各AAは、アミノ酸であり;かつ
p1は、0～10の整数である)。
SP1スペーサーは、(AA)p1部位を結合剤(BA)へ又はBAに結合している反応性基残基へと接続する部位である。好適なSP1スペーサーとしては、アルキレンもしくはポリエーテル、又は双方を含むものが挙げられるが、これらに限定されない。該スペーサーの末端、例えば、該スペーサーの結合剤又はAAに結合した部分は、コンジュゲートの化学合成の間に抗体又はAAを該スペーサーにカップリングさせる目的で用いられる反応性部位由来の部位であり得る。ある実施態様において、p1は、0、1、2、3、又は4である。特定の実施態様において、p1は、0である。特定の実施態様において、p1は、2である。特定の実施態様において、p1は、3である。特定の実施態様において、p1は、4である。
いくつかの実施態様において、SP1スペーサーは、アルキレンを含む。いくつかの実施態様において、SP1スペーサーは、C5-7アルキレンを含む。いくつかの実施態様において、SP1スペーサーは、ポリエーテルを含む。いくつかの実施態様において、SP1スペーサーは、ポリエチレングリコールなどのエチレンオキシドのポリマーを含む。
ある実施態様において、SP1スペーサーは:
Figure 2022507781000073
 である
(式中、
RG′は、反応性基RGの結合剤との反応の結果として生じる反応性基残基であり;
Figure 2022507781000074
 は、結合剤への結合であり;
Figure 2022507781000075
 は、(AA)p1への結合であり;
bは、2～8の整数であり;かつ
p1は、0～4の整数である)。
反応性基RGは、結合剤に対して1つ以上の結合を形成することができることが当業者に公知である任意の反応性基とすることができる。反応性基RGは、その構造内に、結合剤と反応して(例えば、抗体とそのシステインもしくはリジン残基で、又はアジド部位で、例えば、PEG-N3官能化抗体と1つ以上のグルタミン残基で反応して)式A、式B、式C、式D、式A′、式B′、式C′、式D′、又は式A′′の化合物を形成することができる部分を含む部位である。結合剤へのコンジュゲーション後に、反応性基は、反応性基残基(RG′)となる。例示的な反応性基としては、結合剤と反応することができるハロアセチル、イソチオシアネート、コハク酸イミド、N-ヒドロキシコハク酸イミド、又はマレイミド部分を含むものが挙げられるが、これらに限定されない。
ある実施態様において、反応性基としては、アルキンが挙げられるが、これに限定されない。ある実施態様において、アルキンは、歪アルキンなどの銅触媒の非存在下でアジドとの1,3-環化付加反応を受けることができるアルキンである。歪アルキンは、歪み促進アルキン-アジド環化付加(SPAAC)に適しており、シクロアルキン、例えば、シクロオクチン、及び芳香環化アルキンである。好適なアルキンとしては、ジベンゾアザシクロオクチン又は
Figure 2022507781000076
 ジベンゾシクロオクチン又は
Figure 2022507781000077
 ビアリールアザシクロオクチノン又は
Figure 2022507781000078
 二フッ素化シクロオクチン
又は
Figure 2022507781000079
 置換された、例えば、フッ素化されたアルキン、アザ-シクロアルキン、ビサイクル[6.1.0]ノニン又は
Figure 2022507781000080
 及びそれらの誘導体が挙げられるが、これらに限定されない。特に有用なアルキンとしては、
Figure 2022507781000081
 が挙げられる。
ある実施態様において、結合剤は、RG′に直接結合している。ある実施態様において、結合剤は、スペーサー、例えば、下記SP4を介してRG′に結合している。特定の実施態様において、結合剤は、PEGスペーサーを介してRG′に結合している。以下で詳細に述べるように、ある実施態様において、結合剤は、1つ以上のアジド基で官能化することによって調製される。各アジド基は、RGと反応してRG′を形成することができる。特定の実施態様において、結合剤は、グルタミン残基に連結された-PEG-N3を用いて誘導体化される。例示的な-N3誘導体化結合剤、それらの調製のための方法、及びRGとの反応におけるそれらの使用のための方法が、本明細書で提供される。ある実施態様において、RGは、1,3-環化付加への参加に適したアルキンであり、RG′は、RGのアジド官能化結合剤との反応で形成される1,2,3-トリアゾリル部位である。さらなる例として、ある実施態様において、RG′は、
Figure 2022507781000082
 に示されるような結合剤、又は各位置異性体の混合物に連結される。各R及びR′は、本明細書に記載される通りである。
SP2スペーサーは、(AA)p1部位をペイロードに接続する部位である。好適なスペーサーとしては、SP1スペーサーとして上で述べたものが挙げられるが、これらに限定されない。さらに好適なSP2スペーサーとしては、アルキレンもしくはポリエーテル、又は双方を含むものが挙げられるが、これらに限定されない。SP2スペーサーの末端、例えば、該スペーサーのペイロード又はAAに直接結合した部分は、コンジュゲートの化学合成の間に該ペイロード又はAAを該SP2スペーサーにカップリングさせる目的で用いられる反応性部位由来の部位であり得る。いくつかの例において、SP2スペーサーの末端、例えば、該SP2スペーサーのペイロード又はAAに直接結合した部分は、コンジュゲートの化学合成の間に該ペイロード又はAAを該スペーサーにカップリングさせる目的で用いられる反応性部位の残基であり得る。
ある実施態様において、SP2スペーサーは、-O-、-N(R6′)-、-R4′-、-R5′-、-OR5′-、及び-OP(O)(OR6′)O-からなる群から選択される:
(式中、
R4′は、-Z′-Y-X-であり;
Xは、-O-及び-N(H)-からなる群から選択され;
Yは、アルキレン、置換アルキレン(限定するものではないが、オキソ置換、すなわち、=Oを含む)、ヘテロアルキレン、及び置換ヘテロアルキレンからなる群から選択され;
Z′は、-O-及び-N(H)-からなる群から選択され;
R5′は、ヘテロシクロアルキレン又は置換ヘテロシクロアルキレンであり、ここで、各ヘテロシクロアルキレン又は置換ヘテロシクロアルキレンは、分子の残りへの結合に有用な-O-、-N(H)-、及び
Figure 2022507781000083
 からなる群から選択される少なくとも2つの部位を含んで、窒素及び酸素から選択される1、2、又は3個のヘテロ原子を含み;かつ
各R6′は、-H、アミノ酸残基、ペプチド、又はアルキルである)。
ある実施態様において、SP2スペーサーは、-O-、-N(H)-、
Figure 2022507781000084
 からなる群から選択される。ある実施態様において、各
Figure 2022507781000085
 は、ペイロードへの結合であり、かつ各
Figure 2022507781000086
 は、(AA)p1への結合である。
上記の式において、各AAは、アミノ酸であるか、又は任意に、p-アミノベンジルオキシカルボニル残基(PABC)もしくは
Figure 2022507781000087
 である(式中、cは、1、2、3、4、5、又は6である)。PABCが、存在する場合、好ましくは、1つのみのPABCが、存在する。好ましくは、PABC残基は、存在するのであれば、ペイロードに近い方の(AA)p1基中の末端AAに結合している。
Figure 2022507781000088
 が、存在する場合には、好ましくはcは、2である。好ましくは、
Figure 2022507781000089
 残基は、それが存在し、かつcが、2である場合には、ペイロードから遠い方の(AA)p1基中の末端AAに結合している。各AAに適したアミノ酸としては、天然、非天然、標準的、非標準的、タンパク質構成性、非タンパク質構成性、及びL-又はD-α-アミノ酸が挙げられる。いくつかの実施態様において、リンカーAAは、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、メチオニン、トリプトファン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、システイン、チロシン、アスパラギン、グルタミン、アスパラギン酸、グルタミン酸、リジン、アルギニン、ヒスチジン、もしくはシトルリン、その誘導体、又はその組合せを含む。ある実施態様において、該アミノ酸の1つ以上の側鎖は、後述の側鎖基に連結される。いくつかの実施態様において、p1は、ゼロである。いくつかの実施態様において、p1は、2である。いくつかの実施態様において、(AA)p1は、バリン-シトルリンである。いくつかの実施態様において、(AA)p1は、シトルリン-バリンである。いくつかの実施態様において、(AA)p1は、バリン-アラニンである。いくつかの実施態様において、(AA)p1は、アラニン-バリンである。いくつかの実施態様において、(AA)p1は、バリン-グリシンである。いくつかの実施態様において、(AA)p1は、グリシン-バリンである。いくつかの実施態様において、p1は、3である。いくつかの実施態様において、(AA)p1は、バリン-シトルリン-PABCである。いくつかの実施態様において、(AA)p1は、シトルリン-バリン-PABCである。いくつかの実施態様において、(AA)p1は、リジン-バリン-シトルリン-PABCである。いくつかの実施態様において、(AA)p1は、グルタミン酸-バリン-シトルリンである。いくつかの実施態様において、(AA)p1は、グルタミン-バリン-シトルリンである。いくつかの実施態様において、(AA)p1は、リジン-バリン-アラニンである。いくつかの実施態様において、(AA)p1は、リジン-バリン-シトルリンである。いくつかの実施態様において、p1は、4である。いくつかの実施態様において、(AA)p1は、グルタミン酸-バリン-シトルリン-PABである。いくつかの実施態様において、(AA)p1は、グルタミン-バリン-シトルリン-PABCである。当業者は、PABCを、以下の例示的な構造:
Figure 2022507781000090
 を有するp-アミノベンジルオキシカルボニルの残基として認識するであろう。
PABC残基が、インビトロ及びインビボである特定のリンカーの切断を促進することが示されている。
ある実施態様において、リンカーは:
Figure 2022507781000091
Figure 2022507781000092
である
(式中:
各
Figure 2022507781000093
 は、結合剤への結合であり;
各
Figure 2022507781000094
 は、ペイロードへの結合であり;
各R9は、-CH3又は-(CH2)3N(H)C(O)NH2であり;かつ
各Aは、-O-、-N(H)-、
Figure 2022507781000095
 (式中、ZZは、水素、又は本明細書の別の場所に記載されるアミノ酸の側鎖である)である)。例えば、一実施態様において、ZZは、C1-6アルキルである。さらなる例として、一実施態様において、ZZは、C1-6ヘテロアルキルである。上述のように、結合剤への結合は、直接のものとすることも、スペーサーを介してのものとすることもできる。ある実施態様において、結合剤への結合は、PEGスペーサーを介しての該結合剤のグルタミン残基へのものである。
いくつかの実施態様において、リンカーは:
Figure 2022507781000096
 である
(式中:
各
Figure 2022507781000097
 は、結合剤への結合であり;
各
Figure 2022507781000098
 は、ペイロードへの結合であり;
各R9は、-CH3、-CH(CH3)2、又は-(CH2)3N(H)C(O)NH2であり;
qは、1～3の整数であり;かつ
各Aは、-O-、-N(H)-、
Figure 2022507781000099
 (式中、ZZは、水素、又は本明細書の別の場所に記載されるアミノ酸の側鎖であり;q1は、1～5の整数であり;かつHは、-O-又は-NH-である)である)。例えば、一実施態様において、ZZは、C1-6アルキルである。さらなる例として、一実施態様において、ZZは、C1-6ヘテロアルキルである。一実施態様において、Hは、-O-である。一実施態様において、Hは、-NH-である。上述のように、結合剤への結合は、直接のものとすることも、スペーサーを介してのものとすることもできる。ある実施態様において、結合剤への結合は、PEGスペーサーを介しての該結合剤のグルタミン残基へのものである。
ある実施態様において、リンカーは:
Figure 2022507781000100
 である
(式中:
各
Figure 2022507781000101
 は、結合剤への結合であり;
各
Figure 2022507781000102
 は、ペイロードへの結合であり;
各R9は、-CH3又は-(CH2)3N(H)C(O)NH2であり;かつ
各Aは、-O-、-N(H)-、
Figure 2022507781000103
 (式中、ZZは、水素、又は本明細書の別の場所に記載されるアミノ酸の側鎖である)である)。例えば、一実施態様において、ZZは、C1-6アルキルである。さらなる例として、一実施態様において、ZZは、C1-6ヘテロアルキルである。上述のように、結合剤への結合は、直接のものとすることも、スペーサーを介してのものとすることもできる。ある実施態様において、結合剤への結合は、PEGスペーサーを介しての該結合剤のグルタミン残基へのものである。
ある実施態様において、リンカーは:
Figure 2022507781000104
 である
(式中:
各
Figure 2022507781000105
 は、結合剤への結合であり;
各
Figure 2022507781000106
 は、ペイロードへの結合であり;
各R9は、-CH3、-CH(CH3)2、又は-(CH2)3N(H)C(O)NH2であり;
qは、1～3の整数であり;かつ
各Aは、-O-、-N(H)-、
Figure 2022507781000107
 (式中、ZZは、水素、又は本明細書の別の場所に記載されるアミノ酸の側鎖であり;q1は、1～5の整数であり;かつHは、-O-又は-NH-である)である)。例えば、一実施態様において、ZZは、C1-6アルキルである。さらなる例として、一実施態様において、ZZは、C1-6ヘテロアルキルである。一実施態様において、Hは、-O-である。一実施態様において、Hは、-NH-である。上述のように、結合剤への結合は、直接のものとすることも、スペーサーを介してのものとすることもできる。ある実施態様において、結合剤への結合は、PEGスペーサーを介しての該結合剤のグルタミン残基へのものである。
上記実施態様のいずれかにおいて、(AA)p1基を、1つ以上の強化基で修飾することができる。有利には、該強化基を、(AA)p1内の任意のアミノ酸の側鎖に連結することができる。強化基を連結させるのに有用なアミノ酸としては、リジン、アスパラギン、アスパラギン酸、グルタミン、グルタミン酸、及びシトルリンが挙げられる。強化基への連結を、アミノ酸側鎖への直接の結合とすることができ、又は該連結を、スペーサー及び/又は反応性基を介する間接的なものとすることができる。有用なスペーサー及び反応性基としては、上述の任意のものが挙げられる。強化基は、当業者によって有用であるとみなされる任意の基とすることができる。例えば、強化基を、これらに限定されないが、生物学的作用、生化学的作用、合成作用、可溶化作用、イメージング作用、検出作用、及び反応性作用などを含む有益な作用を、化合物、ペイロード、リンカーペイロード、又は抗体コンジュゲートに付与する任意の基とすることができる。ある実施態様において、強化基は、親水性基である。ある実施態様において、強化基は、シクロデキストリンである。ある実施態様において、強化基は、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸である。シクロデキストリンは、当業者に公知の任意のシクロデキストリンとすることができる。ある実施態様において、シクロデキストリンは、アルファシクロデキストリン、ベータシクロデキストリン、もしくはガンマシクロデキストリン、又はそれらの混合物である。ある実施態様において、シクロデキストリンは、アルファシクロデキストリンである。ある実施態様において、シクロデキストリンは、ベータシクロデキストリンである。ある実施態様において、シクロデキストリンは、ガンマシクロデキストリンである。ある実施態様において、強化基は、コンジュゲートの残りの溶解性(solublity)を向上させることができる。ある実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、置換型又は無置換型である。ある実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n2-NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n2-C(O)NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2CH2O)m2-C(O)NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n2-N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2、-(CH2)n2-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2、又は-(CH2CH2O)m2-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2(式中、n2は、1、2、3、4、又は5であり、かつm2は、1、2、3、4、又は5である)である。一実施態様において、アルキル又はアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)1-5SO3Hである。別の実施態様において、ヘテロアルキル又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n2-NH-(CH2)1-5SO3H(式中、n2は、1、2、3、4、又は5である)である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n2-C(O)NH-(CH2)1-5SO3H(式中、n2は、1、2、3、4、又は5である)である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2CH2O)m2-C(O)NH-(CH2)1-5SO3H(式中、m2は、1、2、3、4、又は5である)である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n2-N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2(式中、n2は、1、2、3、4、又は5である)である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n2-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2(式中、n2は、1、2、3、4、又は5である)である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2CH2O)m2-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2(式中、m2は、1、2、3、4、又は5である)である。ある実施態様において、リンカーは:
Figure 2022507781000108
 である
(式中:
SP1は、スペーサーであり;
SP2は、スペーサーであり;
SP3は、(AA)p1のうちの1つのAAに連結されたスペーサーであり;
Figure 2022507781000109
 は、結合剤への1つ以上の結合であり;
Figure 2022507781000110
 は、ペイロードへの1つ以上の結合であり;
Figure 2022507781000111
 は、強化基EGに対する1つ以上の結合であり;
各AAは、アミノ酸であり;かつ
p1は、1～10の整数である)。上述のように、結合剤への結合は、直接のものとすることも、スペーサーを介してのものとすることもできる。ある実施態様において、結合剤への結合は、PEGスペーサーを介しての該結合剤のグルタミン残基へのものである。
SP1スペーサー基は、上述の通りである。SP2スペーサー基は、上述の通りである。各(AA)p1基は、上述の通りである。
SP3スペーサーは、(AA)p1部位を強化基(EG)に接続する部位である。好適なSP3スペーサーとしては、アルキレンもしくはポリエーテル、又は双方を含むものが挙げられるが、これらに限定されない。SP3スペーサーの末端、すなわち、該SP3スペーサーの強化基又はAAに直接結合した部分は、コンジュゲートの化学合成の間に該強化基又はAAを該SP3スペーサーにカップリングさせる目的で用いられる反応性部位由来の部位であり得る。いくつかの例において、SP3スペーサーの末端、すなわち、該スペーサーの強化基又はAAに直接結合した部分は、コンジュゲートの化学合成の間に該強化基又はAAを該スペーサーにカップリングさせる目的で用いられる反応性部位の残基であり得る。ある実施態様において、SP3は、(AA)p1のうちの1つのみのAAに連結されたスペーサーである。ある実施態様において、SP3スペーサーは、(AA)p1のリジン残基の側鎖に連結される。
ある実施態様において、SP3スペーサーは:
Figure 2022507781000112
 である
(式中:
RG′は、反応性基RGの強化剤EGとの反応の結果として生じる反応性基残基であり;
Figure 2022507781000113
 は、該強化剤への結合であり;
Figure 2022507781000114
 は、(AA)p1への結合であり;
aは、2～8の整数であり;かつ
p1は、1～4の整数である)。
反応性基RGは、強化剤に対して1つ以上の結合を形成することができることが当業者に公知である任意の反応性基とすることができる。反応性基RGは、強化基と反応して式LPa、式LPb、式LPc、式LPd、式LPa′、式LPb′、式LPc′、式LPd′、式A、式B、式C、式D、式A′、式B′、式C′、式D′、又は式A′′の化合物を形成することができる部分をその構造に含む部位である。強化基へのコンジュゲーション後に、反応性基は、反応性基残基(RG′)となる。反応性基RGは、上述の任意の反応性基とすることができる。例示的な反応性基としては、結合剤と反応することができるハロアセチル、イソチオシアネート、コハク酸イミド、N-ヒドロキシコハク酸イミド、又はマレイミド部分を含むものが挙げられるが、これらに限定されない。
ある実施態様において、反応性基としては、アルキンが挙げられるが、これに限定されない。ある実施態様において、該アルキンは、歪アルキンなどの銅触媒の非存在下でアジドとの1,3-環化付加反応を受けることができるアルキンである。歪アルキンは、歪み促進アルキン-アジド環化付加(SPAAC)に適しており、シクロアルキン、例えば、シクロオクチン、及び芳香環化アルキンである。好適なアルキンとしては、ジベンゾアザシクロオクチン又は
Figure 2022507781000115
 ジベンゾシクロオクチン又は
Figure 2022507781000116
 ビアリールアザシクロオクチノン又は
Figure 2022507781000117
 二フッ素化シクロオクチン又は
Figure 2022507781000118
 置換された、例えば、フッ素化アルキン、アザ-シクロアルキン、ビサイクル[6.1.0]ノニン又は
Figure 2022507781000119
 及びそれらの誘導体が挙げられるが、これらに限定されない。特に有用なアルキンとしては、
Figure 2022507781000120
 が挙げられる。
いくつかの実施態様において、リンカーは:
Figure 2022507781000121
 である
(式中:
RG'は、反応性基RGの結合剤との反応の結果として生じる反応性基残基であり;
PEGは、-NH-PEG4-C(O)-であり;
SP2は、スペーサーであり;
SP3は、(AA)p1のうちの1つのAA残基に連結されたスペーサーであり;
Figure 2022507781000122
 は、結合剤への1つ以上の結合であり;
Figure 2022507781000123
 は、ペイロードへの1つ以上の結合であり;
Figure 2022507781000124
 は、強化基EGに対する1つ以上の結合であり;
各AAは、アミノ酸残基であり;かつ
p1は、1～10の整数である)。上述のように、結合剤への結合は、直接のものとすることも、スペーサーを介してのものとすることもできる。ある実施態様において、結合剤への結合は、PEGスペーサーを介しての該結合剤のグルタミン残基へのものである。
ある実施態様において、リンカーは:
Figure 2022507781000125
 又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態、又はその位置異性体、もしくはその位置異性体の混合物である
(式中:
各
Figure 2022507781000126
 は、結合剤への結合であり;
各
Figure 2022507781000127
 は、ペイロードへの結合であり;
各
Figure 2022507781000128
 は、該強化剤への結合であり;
各R9は、-CH3又は-(CH2)3N(H)C(O)NH2であり;かつ
各Aは、-O-、-N(H)-、
Figure 2022507781000129
 (式中、ZZは、水素、又は本明細書の別の場所に記載されるアミノ酸の側鎖である)である)。例えば、一実施態様において、ZZは、C1-6アルキルである。さらなる例として、一実施態様において、ZZは、C1-6ヘテロアルキルである。ある実施態様において、1,3-環化付加もしくはSPAACの位置異性体又は位置異性体の混合物は、適当なアルキンで処理されたPEG-N3誘導体化抗体から誘導される。例えば、一実施態様において、リンカーは:
Figure 2022507781000130
 又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態、又はその位置異性体、もしくはその位置異性体の混合物である。さらなる例として、一実施態様において、リンカーは:
Figure 2022507781000131
 又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態、又はその位置異性体、もしくはその位置異性体の混合物である。
さらなる例として、リンカーは:
Figure 2022507781000132
 又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態、又はその位置異性体、もしくはその位置異性体の混合物である。さらなる例として、一実施態様において、リンカーは:
Figure 2022507781000133
 又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態、又はその位置異性体、もしくはその位置異性体の混合物である。上述のように、結合剤への結合は、直接のものとすることも、スペーサーを介してのものとすることもできる。ある実施態様において、結合剤への結合は、PEGスペーサーを介しての該結合剤のグルタミン残基へのものである。ある実施態様において、強化剤は、親水性基である。ある実施態様において、強化剤は、シクロデキストリンである。ある実施態様において、強化基は、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸である。前記シクロデキストリンは、当業者に公知の任意のシクロデキストリンとすることができる。ある実施態様において、シクロデキストリンは、アルファシクロデキストリン、ベータシクロデキストリン、もしくはガンマシクロデキストリン、又はそれらの混合物である。ある実施態様において、シクロデキストリンは、アルファシクロデキストリンである。ある実施態様において、シクロデキストリンは、ベータシクロデキストリンである。ある実施態様において、シクロデキストリンは、ガンマシクロデキストリンである。ある実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n2-NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n2-C(O)NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2CH2O)m2-C(O)NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n2-N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2、-(CH2)n2-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2、又は-(CH2CH2O)m2-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2(式中、n2は、1、2、3、4、又は5であり、かつm2は、1、2、3、4、又は5である)である。一実施態様において、アルキル又はアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)1-5SO3Hである。別の実施態様において、ヘテロアルキル又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n2-NH-(CH2)1-5SO3H(式中、n2は、1、2、3、4、又は5である)である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n2-C(O)NH-(CH2)1-5SO3H(式中、n2は、1、2、3、4、又は5である)である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2CH2O)m2-C(O)NH-(CH2)1-5SO3H(式中、m2は、1、2、3、4、又は5である)である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n2-N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2(式中、n2は、1、2、3、4、又は5である)である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n2-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2(式中、n2は、1、2、3、4、又は5である)である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2CH2O)m2-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2(式中、m2は、1、2、3、4、又は5である)である。
ある実施態様において、リンカーは:
Figure 2022507781000134
 又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態、又はその位置異性体、もしくはその位置異性体の混合物である
(式中:
各
Figure 2022507781000135
 は、結合剤への結合であり;
各
Figure 2022507781000136
 は、該強化剤への結合であり;
各
Figure 2022507781000137
 は、ペイロードへの結合であり;
各R9は、-CH3又は-(CH2)3N(H)C(O)NH2であり;かつ
各Aは、-O-、-N(H)-、
Figure 2022507781000138
 (式中、ZZは、水素、又は本明細書の別の場所に記載されるアミノ酸の側鎖である)である)。例えば、一実施態様において、ZZは、C1-6アルキルである。さらなる例として、一実施態様において、ZZは、C1-6ヘテロアルキルである。上述のように、結合剤への結合は、直接のものとすることも、スペーサーを介してのものとすることもできる。ある実施態様において、結合剤への結合は、PEGスペーサーを介しての該結合剤のグルタミン残基へのものである。ある実施態様において、強化剤は、親水性基である。ある実施態様において、強化剤は、シクロデキストリンである。ある実施態様において、強化基は、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸である。シクロデキストリンは、当業者に公知の任意のシクロデキストリンとすることができる。ある実施態様において、シクロデキストリンは、アルファシクロデキストリン、ベータシクロデキストリン、もしくはガンマシクロデキストリン、又はそれらの混合物である。ある実施態様において、シクロデキストリンは、アルファシクロデキストリンである。ある実施態様において、シクロデキストリンは、ベータシクロデキストリンである。ある実施態様において、シクロデキストリンは、ガンマシクロデキストリンである。ある実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n2-NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n2-C(O)NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2CH2O)m2-C(O)NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n2-N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2、-(CH2)n2-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2、又は-(CH2CH2O)m2-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2(式中、n2は、1、2、3、4、又は5であり、かつm2は、1、2、3、4、又は5である)である。一実施態様において、アルキル又はアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)1-5SO3Hである。別の実施態様において、ヘテロアルキル又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n2-NH-(CH2)1-5SO3H(式中、n2は、1、2、3、4、又は5である)である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n2-C(O)NH-(CH2)1-5SO3H(式中、n2は、1、2、3、4、又は5である)である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2CH2O)m2-C(O)NH-(CH2)1-5SO3H(式中、m2は、1、2、3、4、又は5である)である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n2-N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2(式中、n2は、1、2、3、4、又は5である)である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n2-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2(式中、n2は、1、2、3、4、又は5である)である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2CH2O)m2-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2(式中、m2は、1、2、3、4、又は5である)である。
ある実施態様において、リンカーは:
Figure 2022507781000139
Figure 2022507781000140
又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態、又はその位置異性体、もしくはその位置異性体の混合物である
(式中:
各
Figure 2022507781000141
 は、結合剤への結合であり;
各
Figure 2022507781000142
 は、ペイロードへの結合であり;
R9は、-CH3又は-(CH2)3N(H)C(O)NH2であり;かつ
Aは、-O-、-N(H)-、
Figure 2022507781000143
 (式中、ZZは、水素、又は本明細書の別の場所に記載されるアミノ酸の側鎖である)である)。例えば、一実施態様において、ZZは、C1-6アルキルである。さらなる例として、一実施態様において、ZZは、C1-6ヘテロアルキルである。上述のように、結合剤への結合は、直接のものとすることも、スペーサーを介してのものとすることもできる。ある実施態様において、結合剤への結合は、PEGスペーサーを介しての該結合剤のグルタミン残基へのものである。
ある実施態様において、リンカーは:
Figure 2022507781000144
Figure 2022507781000145
又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態、又はその位置異性体、もしくはその位置異性体の混合物である
(式中:
各
Figure 2022507781000146
 は、結合剤への結合であり;
各
Figure 2022507781000147
 は、ペイロードへの結合であり;
R9は、-CH3又は-(CH2)3N(H)C(O)NH2であり;かつ
Aは、-O-、-N(H)-、
Figure 2022507781000148
 (式中、ZZは、水素、又は本明細書の別の場所に記載されるアミノ酸の側鎖である)である)。例えば、一実施態様において、ZZは、C1-6アルキルである。さらなる例として、一実施態様において、ZZは、C1-6ヘテロアルキルである。上述のように、結合剤への結合は、直接のものとすることも、スペーサーを介してのものとすることもできる。ある実施態様において、結合剤への結合は、PEGスペーサーを介しての該結合剤のグルタミン残基へのものである。
ある実施態様において、リンカーは:
Figure 2022507781000149
 又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態、又はその位置異性体、もしくはその位置異性体の混合物である
(式中:
各
Figure 2022507781000150
 は、結合剤への結合であり;
各
Figure 2022507781000151
 は、ペイロードへの結合であり;
各
Figure 2022507781000152
 は、強化基への結合であり;
各R9は、-CH3又は-(CH2)3N(H)C(O)NH2であり;かつ
各Aは、-O-、-N(H)-、
Figure 2022507781000153
 (式中、ZZは、水素、又は本明細書の別の場所に記載されるアミノ酸の側鎖である)である)。例えば、一実施態様において、ZZは、C1-6アルキルである。さらなる例として、一実施態様において、ZZは、C1-6ヘテロアルキルである。上述のように、結合剤への結合は、直接のものとすることも、スペーサーを介してのものとすることもできる。ある実施態様において、結合剤への結合は、PEGスペーサーを介しての該結合剤のグルタミン残基へのものである。ある実施態様において、強化剤は、親水性基である。ある実施態様において、強化剤は、シクロデキストリンである。ある実施態様において、強化基は、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸である。シクロデキストリンは、当業者に公知の任意のシクロデキストリンとすることができる。ある実施態様において、シクロデキストリンは、アルファシクロデキストリン、ベータシクロデキストリン、もしくはガンマシクロデキストリン、又はそれらの混合物である。ある実施態様において、シクロデキストリンは、アルファシクロデキストリンである。ある実施態様において、シクロデキストリンは、ベータシクロデキストリンである。ある実施態様において、シクロデキストリンは、ガンマシクロデキストリンである。ある実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n2-NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n2-C(O)NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2CH2O)m2-C(O)NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n2-N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2、-(CH2)n2-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2、又は-(CH2CH2O)m2-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2(式中、n2は、1、2、3、4、又は5であり、かつm2は、1、2、3、4、又は5である)である。一実施態様において、アルキル又はアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)1-5SO3Hである。別の実施態様において、ヘテロアルキル又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n2-NH-(CH2)1-5SO3H(式中、n2は、1、2、3、4、又は5である)である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n2-C(O)NH-(CH2)1-5SO3H(式中、n2は、1、2、3、4、又は5である)である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2CH2O)m2-C(O)NH-(CH2)1-5SO3H(式中、m2は、1、2、3、4、又は5である)である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n2-N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2(式中、n2は、1、2、3、4、又は5である)である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n2-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2(式中、n2は、1、2、3、4、又は5である)である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2CH2O)m2-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2(式中、m2は、1、2、3、4、又は5である)である。
ある実施態様において、リンカーは:
Figure 2022507781000154
 又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態、又はその位置異性体、もしくはその位置異性体の混合物である
(式中:
各
Figure 2022507781000155
 は、結合剤への結合であり;
各
Figure 2022507781000156
 は、ペイロードへの結合であり;
各R9は、-CH3又は-(CH2)3N(H)C(O)NH2であり;かつ
各Aは、-O-、-N(H)-、
Figure 2022507781000157
 (式中、ZZは、水素、又は本明細書の別の場所に記載されるアミノ酸の側鎖である)である)。例えば、一実施態様において、ZZは、C1-6アルキルである。さらなる例として、一実施態様において、ZZは、C1-6ヘテロアルキルである。上述のように、結合剤への結合は、直接のものとすることも、スペーサーを介してのものとすることもできる。ある実施態様において、結合剤への結合は、PEGスペーサーを介しての該結合剤のグルタミン残基へのものである。ある実施態様において、強化剤は、親水性基である。ある実施態様において、強化剤は、シクロデキストリンである。ある実施態様において、強化基は、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸である。シクロデキストリンは、当業者に公知の任意のシクロデキストリンとすることができる。ある実施態様において、シクロデキストリンは、アルファシクロデキストリン、ベータシクロデキストリン、もしくはガンマシクロデキストリン、又はそれらの混合物である。ある実施態様において、シクロデキストリンは、アルファシクロデキストリンである。ある実施態様において、シクロデキストリンは、ベータシクロデキストリンである。ある実施態様において、シクロデキストリンは、ガンマシクロデキストリンである。ある実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n2-NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n2-C(O)NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2CH2O)m2-C(O)NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n2-N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2、-(CH2)n2-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2、又は-(CH2CH2O)m2-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2(式中、n2は、1、2、3、4、又は5であり、かつm2は、1、2、3、4、又は5である)である。一実施態様において、アルキル又はアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)1-5SO3Hである。別の実施態様において、ヘテロアルキル又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n2-NH-(CH2)1-5SO3H(式中、n2は、1、2、3、4、又は5である)である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n2-C(O)NH-(CH2)1-5SO3H(式中、n2は、1、2、3、4、又は5である)である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2CH2O)m2-C(O)NH-(CH2)1-5SO3H(式中、m2は、1、2、3、4、又は5である)である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n2-N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2(式中、n2は、1、2、3、4、又は5である)である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n2-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2(式中、n2は、1、2、3、4、又は5である)である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2CH2O)m2-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2(式中、m2は、1、2、3、4、又は5である)である。
ある実施態様において、リンカーは:
Figure 2022507781000158
Figure 2022507781000159
であるか;又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態、又はその位置異性体、もしくはその位置異性体の混合物である
(式中:
各
Figure 2022507781000160
 は、結合剤への結合であり;
各
Figure 2022507781000161
 は、ペイロードへの結合であり;かつ
Hは、-O-又は-NH-である)。
ある実施態様において、リンカーは:
Figure 2022507781000162
 である
(式中:
各
Figure 2022507781000163
 は、結合剤への結合であり;
各
Figure 2022507781000164
 は、ペイロードへの結合であり;かつ
Hは、-O-又は-NH-である)。
ある実施態様において、リンカーは:
Figure 2022507781000165
Figure 2022507781000166
又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態、又はその位置異性体、もしくはその位置異性体の混合物である
(式中:
各
Figure 2022507781000167
 は、結合剤への結合であり;
各
Figure 2022507781000168
 は、ペイロードへの結合であり;
R9は、-CH3又は-(CH2)3N(H)C(O)NH2であり;かつ
Aは、-O-、-N(H)-、
Figure 2022507781000169
 (式中、ZZは、水素、又は本明細書の別の場所に記載されるアミノ酸の側鎖である)である)。例えば、一実施態様において、ZZは、C1-6アルキルである。さらなる例として、一実施態様において、ZZは、C1-6ヘテロアルキルである。上述のように、結合剤への結合は、直接のものとすることも、スペーサーを介してのものとすることもできる。ある実施態様において、結合剤への結合は、PEGスペーサーを介しての該結合剤のグルタミン残基へのものである。
ある実施態様において、リンカーは:
Figure 2022507781000170
Figure 2022507781000171
又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態、又はその位置異性体、もしくはその位置異性体の混合物である
(式中:
各
Figure 2022507781000172
 は、結合剤への結合であり;
各
Figure 2022507781000173
 は、ペイロードへの結合であり;
R9は、-CH3又は-(CH2)3N(H)C(O)NH2であり;かつ
Aは、-O-、-N(H)-、
Figure 2022507781000174
 (式中、ZZは、水素、又は本明細書の別の場所に記載されるアミノ酸の側鎖である)である)。例えば、一実施態様において、ZZは、C1-6アルキルである。さらなる例として、一実施態様において、ZZは、C1-6ヘテロアルキルである。上述のように、結合剤への結合は、直接のものとすることも、スペーサーを介してのものとすることもできる。ある実施態様において、結合剤への結合は、PEGスペーサーを介しての該結合剤のグルタミン残基へのものである。
(リンカー-ペイロード又は反応性リンカー-ペイロード)
提供されるものは、本明細書に記載される化合物又はペイロード(例えば、式I、式II、又は式IIIの化合物又はペイロード)及びリンカーのいずれかから誘導されるリンカー-ペイロード又は反応性リンカー-ペイロードである。以下で記載されるある実施態様において、本明細書で提供されるコンジュゲートは、上述のような反応性基RGを有するリンカー-ペイロード又は反応性リンカー-ペイロードから調製することができる。リンカー-ペイロード又は反応性リンカー-ペイロードを、以下に記載される方法により強化基及び/又は結合剤に連結することができる。
ある実施態様において、リンカー-ペイロードは、リンカー(複数可)に結合した上記式I、式II、又は式IIIのうちの任意の1つ以上によって包含される任意の特定のペイロードを含み、ここで、本明細書に記載されるリンカー(複数可)は、本明細書に記載される結合剤、抗体もしくはその抗原結合断片、及び/又は強化基と反応性の部位を含む。特定の実施態様において、リンカーは、上記ペイロードの式I、式II、又は式IIIのうちの任意の1つ以上の場合と同様に、R1、R2、もしくはR6、又はR1、R2、もしくR6の二価形態に結合している。一実施態様において、リンカー-ペイロードは、式LPaの構造を有する:
Figure 2022507781000175
 (式中、Lは、上述のようなリンカーであり、かつQ1、Q2、W、-R1-、R2、R4、R5、及びR6は、式Iとの関連で上述した通りである)。一実施態様において、リンカー-ペイロードは、式LPbの構造を有する:
Figure 2022507781000176
 (式中、Lは、上述のようなリンカーであり、かつQ1、Q2、W、R1、-R2-、R4、R5、及びR6は、式Iとの関連で上述した通りである)。一実施態様において、リンカー-ペイロードは、式LPcの構造を有する:
Figure 2022507781000177
 (式中、Lは、上述のようなリンカーであり、かつQ1、Q2、W、R1、R2、R4、R5、及び-R6-は、式Iとの関連で上述した通りである)。一実施態様において、リンカー-ペイロードは、式LPdの構造を有する:
Figure 2022507781000178
 (式中、Lは、上述のようなリンカーであり、かつQ1、Q2、W、R1、R2、R4、R5、及び-R6-は、式Iとの関連で上述した通りである)。一実施態様において、リンカー-ペイロードは、式LPa′の構造を有する:
Figure 2022507781000179
 (式中、SP1及びSP2は、上述のようなスペーサーであり、各AAは、上述のようなアミノ酸残基であり、Q1、Q2、W、-R1-、R2、R4、R5、及びR6は、式Iとの関連において上述した通りであり、かつp1は、1～10の整数である)。一実施態様において、リンカー-ペイロードは、式LPb′の構造を有する:
Figure 2022507781000180
 (式中、SP1及びSP2は、上述のようなスペーサーであり、各AAは、上述のようなアミノ酸残基であり、Q1、Q2、W、R1、-R2-、R4、R5、及びR6は、式Iとの関連において上述した通りであり、かつp1は、1～10の整数である)。一実施態様において、リンカー-ペイロードは、式LPc′の構造を有する:
Figure 2022507781000181
 (式中、SP1及びSP2は、上述のようなスペーサーであり、各AAは、上述のようなアミノ酸残基であり、Q1、Q2、W、R1、R2、R4、R5、及び-R6-は、式Iとの関連において上述した通りであり、かつp1は、1～10の整数である)。一実施態様において、リンカー-ペイロードは、式LPd′の構造を有する:
Figure 2022507781000182
 (式中、SP1及びSP2は、上述のようなスペーサーであり、各AAは、上述のようなアミノ酸残基であり、Q1、Q2、W、R1、R2、R4、R5、及び-R6-は、式Iとの関連において上述した通りであり、かつp1は、1～10の整数である)。本段落の実施態様のいずれかにおいて、p1は、1、2、3、4、5、6、7、8、9、又は10である。本段落の実施態様のいずれかにおいて、リンカーL又はスペーサーSP2は、アリール窒素、又は単独のもしくはペプチド内のアミノ酸残基に結合している。本段落の実施態様のいずれかにおいて、各R4は、各場合に独立に、水素、アミノ酸残基、N-アルキルアミノ酸残基、ペプチド残基、生分解性部位、アルキル、置換アルキル、アシル、又は置換アシルである。本段落の実施態様のいずれかにおいて、各R4は、各場合に独立に、水素、アミノ酸残基、N-アルキルアミノ酸残基、ペプチド残基、生分解性部位、又はアルキルである。
ある実施態様において、リンカー-ペイロード又は反応性リンカー-ペイロードは:
Figure 2022507781000183
 又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態である
(式中:
各RGは、本明細書に記載されるような反応性基であり;
Q1、Q2、W、R1、R2、R4、R5、及びR6は、式Iとの関連において上述した通りであり;
各R9は、-CH3又は-(CH2)3N(H)C(O)NH2であり;かつ
各Aは、-O-、-N(H)-、
Figure 2022507781000184
 (式中、ZZは、水素、又は本明細書の別の場所に記載されるアミノ酸の側鎖である)である)。例えば、一実施態様において、ZZは、C1-6アルキルである。さらなる例として、一実施態様において、ZZは、C1-6ヘテロアルキルである。
ある実施態様において、リンカー-ペイロード又は反応性リンカー-ペイロードは:
Figure 2022507781000185
 又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態である
(式中:
各RGは、本明細書に記載されるような反応性基であり;
Q1、Q2、W、R1、R2、R4、R5、及びR6は、式Iとの関連において上述した通りであり;
各R9は、-CH3又は-(CH2)3N(H)C(O)NH2であり;かつ
各Aは、-O-、-N(H)-、
Figure 2022507781000186
 (式中、ZZは、水素、又は本明細書の別の場所に記載されるアミノ酸の側鎖である)である)。例えば、一実施態様において、ZZは、C1-6アルキルである。さらなる例として、一実施態様において、ZZは、C1-6ヘテロアルキルである。
ある実施態様において、リンカー-ペイロード又は反応性リンカー-ペイロードは:
Figure 2022507781000187
 又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態である
(式中:
Q1、Q2、W、R1、R2、R4、R5、及びR6は、式Iとの関連において上述した通りであり;
各R9は、-CH3又は-(CH2)3N(H)C(O)NH2であり;かつ
各Aは、-O-、-N(H)-
Figure 2022507781000188
 (式中、ZZは、水素、又は本明細書の別の場所に記載されるアミノ酸の側鎖である)である)。例えば、一実施態様において、ZZは、C1-6アルキルである。さらなる例として、一実施態様において、ZZは、C1-6ヘテロアルキルである。
ある実施態様において、リンカー-ペイロード又は反応性リンカー-ペイロードは:
Figure 2022507781000189
 又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態である
(式中:
Q1、Q2、W、R1、R2、R4、R5、及びR6は、式Iとの関連において上述した通りであり;
各R9は、-CH3又は-(CH2)3N(H)C(O)NH2であり;かつ
各Aは、-O-、-N(H)-、
Figure 2022507781000190
 (式中、ZZは、水素、又は本明細書の別の場所に記載されるアミノ酸の側鎖である)である)。例えば、一実施態様において、ZZは、C1-6アルキルである。さらなる例として、一実施態様において、ZZは、C1-6ヘテロアルキルである。
ある実施態様において、反応性リンカー-ペイロードは:
Figure 2022507781000191
Figure 2022507781000192
又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態、又はその位置異性体である
(式中:
Q1、Q2、W、R1、R2、R4、R5、及びR6は、式Iとの関連において上述した通りであり;
各R9は、-CH3又は-(CH2)3N(H)C(O)NH2であり;かつ
各Aは、-O-、-N(H)-、
Figure 2022507781000193
 (式中、ZZは、水素、又は本明細書の別の場所に記載されるアミノ酸の側鎖である)である)。例えば、一実施態様において、ZZは、C1-6アルキルである。さらなる例として、一実施態様において、ZZは、C1-6ヘテロアルキルである。
ある実施態様において、反応性リンカー-ペイロードは:
Figure 2022507781000194
Figure 2022507781000195
又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態、又はその位置異性体である
(式中:
Q1、Q2、W、R1、R2、R4、R5、及びR6は、式Iとの関連において上述した通りであり;
各R9は、-CH3又は-(CH2)3N(H)C(O)NH2であり;かつ
各Aは、-O-、-N(H)-、
Figure 2022507781000196
 (式中、ZZは、水素、又は本明細書の別の場所に記載されるアミノ酸の側鎖である)である)。例えば、一実施態様において、ZZは、C1-6アルキルである。さらなる例として、一実施態様において、ZZは、C1-6ヘテロアルキルである。
ある実施態様において、リンカー-ペイロード又は反応性リンカー-ペイロードは:
Figure 2022507781000197
 又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態である
(式中:
Q1、Q2、W、R1、R2、R4、R5、及びR6は、式Iとの関連において上述した通りであり;
各R9は、-CH3又は-(CH2)3N(H)C(O)NH2であり;かつ
各Aは、-O-、-N(H)-、
Figure 2022507781000198
 (式中、ZZは、水素、又は本明細書の別の場所に記載されるアミノ酸の側鎖である)である)。例えば、一実施態様において、ZZは、C1-6アルキルである。さらなる例として、一実施態様において、ZZは、C1-6ヘテロアルキルである。
ある実施態様において、リンカー-ペイロード又は反応性リンカー-ペイロードは:
Figure 2022507781000199
 又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態である
(式中:
Q1、Q2、W、R1、R2、R4、R5、及びR6は、式Iとの関連において上述した通りであり;
各R9は、-CH3又は-(CH2)3N(H)C(O)NH2であり;かつ
各Aは、-O-、-N(H)-、
Figure 2022507781000200
 (式中、ZZは、水素、又は本明細書の別の場所に記載されるアミノ酸の側鎖である)である)。例えば、一実施態様において、ZZは、C1-6アルキルである。さらなる例として、一実施態様において、ZZは、C1-6ヘテロアルキルである。
ある実施態様において、リンカー-ペイロード又は反応性リンカー-ペイロードは:
Figure 2022507781000201
Figure 2022507781000202
又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態、又はその位置異性体である
(式中:
Q1、Q2、W、R1、R2、R4、R5、及びR6は、式Iとの関連において上述した通りであり;
各R9は、-CH3又は-(CH2)3N(H)C(O)NH2であり;かつ
各Aは、-O-、-N(H)-、
Figure 2022507781000203
 (式中、ZZは、水素、又は本明細書の別の場所に記載されるアミノ酸の側鎖である)である)。例えば、一実施態様において、ZZは、C1-6アルキルである。さらなる例として、一実施態様において、ZZは、C1-6ヘテロアルキルである。
ある実施態様において、リンカー-ペイロード又は反応性リンカー-ペイロードは:
Figure 2022507781000204
Figure 2022507781000205
又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態、又はその位置異性体である
(式中:
Q1、Q2、W、R1、R2、R4、R5、及びR6は、式Iとの関連において上述した通りであり;
各R9は、-CH3又は-(CH2)3N(H)C(O)NH2であり;かつ
各Aは、-O-、-N(H)-、
Figure 2022507781000206
 (式中、ZZは、水素、又は本明細書の別の場所に記載されるアミノ酸の側鎖である)である)。例えば、一実施態様において、ZZは、C1-6アルキルである。さらなる例として、一実施態様において、ZZは、C1-6ヘテロアルキルである。
ある実施態様において、リンカー-ペイロード又は反応性リンカー-ペイロードは:
Figure 2022507781000207
Figure 2022507781000208
Figure 2022507781000209
Figure 2022507781000210
Figure 2022507781000211
Figure 2022507781000212
から選択されるか;又はその医薬として許容し得る塩もしくは溶媒和物である。
さらに本明細書で提供されるものは:
Figure 2022507781000213
Figure 2022507781000214
及びその医薬として許容し得る塩又は溶媒和物からなる群から選択されるリンカー-ペイロードである。
上記のリンカー、リンカー-ペイロード、又は反応性リンカー-ペイロードは、以下のコンジュゲートを提供するのに有用である。
(コンジュゲート/抗体薬物コンジュゲート(ADC)
本明細書で提供されるのは、抗体、又はその抗原結合断片であり、ここで、該抗体は、本明細書に記載される式I、式II、又は式IIIの1つ以上の化合物にコンジュゲートされている。
本明細書で提供されるのは、式Aの化合物もしくはコンジュゲート、又はその医薬として許容し得る塩もしくは立体異性形態である:
Figure 2022507781000215
 (式中、BAは、結合剤であり、Lは、リンカーであり、Q1、Q2、W、-R1-、R2、R4、R5、及びR6は、式Iとの関連において上述した通りであり、かつkは、1、2、3、4、5、6、7、8、9、又は10である)。ある実施態様において、式Aにおいて-L-BAにコンジュゲートされている化合物又はペイロードは、上述の式I、式II、及び/又は式IIIの1つ以上の化合物を含み、ここで、BAは、結合剤であり;Lは、リンカーであり;かつkは、1、2、3、4、5、6、7、8、9、又は10である。本段落の任意の実施態様において、BAは、抗体、又はその抗原結合断片であり、ここで、該抗体は、上述のように、式Iの化合物にコンジュゲートされている。本段落の任意の実施態様において、BAは、抗体、又はその抗原結合断片であり、ここで、該抗体は、上述の通り、式IIの化合物にコンジュゲートされている。本段落の任意の実施態様において、BAは、抗体、又はその抗原結合断片であり、ここで、該抗体は、上述の通り、式IIIの化合物にコンジュゲートされている。本段落の実施態様のいずれかにおいて、kは、1～2、1～3、2～3、2～4、3～4、又は1～4の範囲である。本段落の実施態様のいずれかにおいて、kは、1である。本段落の実施態様のいずれかにおいて、kは、2である。本段落の実施態様のいずれかにおいて、kは、3である。本段落の実施態様のいずれかにおいて、kは、4である。本段落の実施態様のいずれかにおいて、各R4は、各場合に独立に、水素、アミノ酸残基、N-アルキルアミノ酸残基、ペプチド残基、生分解性部位、アルキル、置換アルキル、アシル、又は置換アシルである。本段落の実施態様のいずれかにおいて、各R4は、各場合に独立に、水素、アミノ酸残基、N-アルキルアミノ酸残基、ペプチド残基、生分解性部位、又はアルキルである。
本明細書で提供されるのは、式Bの化合物もしくはコンジュゲート、又はその医薬として許容し得る塩もしくは立体異性形態である:
Figure 2022507781000216
 (式中、BAは、結合剤であり、Lは、リンカーであり、Q1、Q2、W、R1、-R2-、R4、R5、及びR6は、式Iとの関連において上述した通りであり、かつkは、1、2、3、4、5、6、7、8、9、又は10である)。ある実施態様において、式Bにおける-L-BAにコンジュゲートされている化合物又はペイロードは、上述の式I、式II、及び/又は式IIIの1つ以上の化合物を含み、ここで、BAは、結合剤であり;Lは、リンカーであり;かつkは、1、2、3、4、5、6、7、8、9、又は10である。本段落の任意の実施態様において、BAは、抗体、又はその抗原結合断片であり、ここで、該抗体は、上述のように、式Iの化合物にコンジュゲートされている。本段落の任意の実施態様において、BAは、抗体、又はその抗原結合断片であり、ここで、該抗体は、上述の通り、式IIの化合物にコンジュゲートされている。本段落の任意の実施態様において、BAは、抗体、又はその抗原結合断片であり、ここで、該抗体は、上述の通り、式IIIの化合物にコンジュゲートされている。本段落の実施態様のいずれかにおいて、kは、1～2、1～3、2～3、2～4、3～4、又は1～4の範囲である。本段落の実施態様のいずれかにおいて、kは、1である。本段落の実施態様のいずれかにおいて、kは、2である。本段落の実施態様のいずれかにおいて、kは、3である。本段落の実施態様のいずれかにおいて、kは、4である。本段落の実施態様のいずれかにおいて、各R4は、各場合に独立に、水素、アミノ酸残基、N-アルキルアミノ酸残基、ペプチド残基、生分解性部位、アルキル、置換アルキル、アシル、又は置換アシルである。本段落の実施態様のいずれかにおいて、各R4は、各場合に独立に、水素、アミノ酸残基、N-アルキルアミノ酸残基、ペプチド残基、生分解性部位、又はアルキルである。
本明細書で提供されるのは、式Cの化合物もしくはコンジュゲート、又はその医薬として許容し得る塩もしくは立体異性形態である:
Figure 2022507781000217
 (式中、BAは、結合剤であり、Lは、リンカーであり、Q1、Q2、W、R1、R2、R4、R5、及び-R6-は、式Iとの関連において上述した通りであり、かつkは、1、2、3、4、5、6、7、8、9、又は10である)。ある実施態様において、式Cにおける-L-BAにコンジュゲートされている化合物又はペイロードは、上述の式I、式II、及び/又は式IIIの1つ以上の化合物を含み、ここで、BAは、結合剤であり;Lは、リンカーであり;かつkは、1、2、3、4、5、6、7、8、9、又は10である。本段落の任意の実施態様において、BAは、抗体、又はその抗原結合断片であり、ここで、該抗体は、上述のように、式Iの化合物にコンジュゲートされている。本段落の任意の実施態様において、BAは、抗体、又はその抗原結合断片であり、ここで、該抗体は、上述の通り、式IIの化合物にコンジュゲートされている。本段落の任意の実施態様において、BAは、抗体、又はその抗原結合断片であり、ここで、該抗体は、上述の通り、式IIIの化合物にコンジュゲートされている。本段落の実施態様のいずれかにおいて、kは、1～2、1～3、2～3、2～4、3～4、又は1～4の範囲である。本段落の実施態様のいずれかにおいて、kは、1である。本段落の実施態様のいずれかにおいて、kは、2である。本段落の実施態様のいずれかにおいて、kは、3である。本段落の実施態様のいずれかにおいて、kは、4である。本段落の実施態様のいずれかにおいて、各R4は、各場合に独立に、水素、アミノ酸残基、N-アルキルアミノ酸残基、ペプチド残基、生分解性部位、アルキル、置換アルキル、アシル、又は置換アシルである。本段落の実施態様のいずれかにおいて、各R4は、各場合に独立に、水素、アミノ酸残基、N-アルキルアミノ酸残基、ペプチド残基、生分解性部位、又はアルキルである。
本明細書で提供されるのは、式Dの化合物もしくはコンジュゲート、又はその医薬として許容し得る塩もしくは立体異性形態である:
Figure 2022507781000218
 (式中、BAは、結合剤であり、Lは、リンカーであり、Q1、Q2、W、R1、R2、R4、R5、及び-R6-は、式Iとの関連において上述した通りであり、かつkは、1、2、3、4、5、6、7、8、9、又は10である)。ある実施態様において、式Dにおける-L-BAにコンジュゲートされている化合物又はペイロードは、上述の式I、式II、及び/又は式IIIの1つ以上の化合物を含み、ここで、BAは、結合剤であり;Lは、リンカーであり;かつkは、1、2、3、4、5、6、7、8、9、又は10である。本段落の任意の実施態様において、BAは、抗体、又はその抗原結合断片であり、ここで、該抗体は、上述のように、式Iの化合物にコンジュゲートされている。本段落の任意の実施態様において、BAは、抗体、又はその抗原結合断片であり、ここで、該抗体は、上述の通り、式IIの化合物にコンジュゲートされている。本段落の任意の実施態様において、BAは、抗体、又はその抗原結合断片であり、ここで、該抗体は、上述の通り、式IIIの化合物にコンジュゲートされている。本段落の実施態様のいずれかにおいて、kは、1～2、1～3、2～3、2～4、3～4、又は1～4の範囲である。本段落の実施態様のいずれかにおいて、kは、1である。本段落の実施態様のいずれかにおいて、kは、2である。本段落の実施態様のいずれかにおいて、kは、3である。本段落の実施態様のいずれかにおいて、kは、4である。本段落の実施態様のいずれかにおいて、各R4は、各場合に独立に、水素、アミノ酸残基、N-アルキルアミノ酸残基、ペプチド残基、生分解性部位、アルキル、置換アルキル、アシル、又は置換アシルである。本段落の実施態様のいずれかにおいて、各R4は、各場合に独立に、水素、アミノ酸残基、N-アルキルアミノ酸残基、ペプチド残基、生分解性部位、又はアルキルである。
直前の4段落の実施態様のうちのいずれかにおいて、Lは、リンカー又はX-Y-Z(式中、Xは、-NH-又は-O-であり;Yは、酵素的に切断可能な部位、自壊基、酸に不安定な部位、PEGn1、糖部位、又は強化基であり;かつZは、結合剤リンカー(BL)であり、ここで、Zは、BAに共有結合している)である。例示的な酵素的に切断可能な部位としては、任意のジ-又はトリ-ペプチド(例えば、本明細書の別の場所に記載されるようなVC-PAB及びVA)が挙げられるが、これらに限定されない。例示的な自壊基は、本明細書の別の場所に記載される。例示的な酸に不安定な部位としては、アルコキサミン(alkoxamine)、ケトキサミン(ketoxamine)、カーボネート、又はホスホネートが挙げられるが、これらに限定されない。例示的な強化基は、本明細書の別の場所に記載される。例示的な反応性部位は、本明細書の別の場所に記載される。ある実施態様において、Yは、n1が、1、2、3、4、又は5であるPEGn1を含まない。ある実施態様において、アミノ酸を用いて、本明細書の別の場所に記載され明らかとなるように、ペイロード、強化基、及び抗体(それぞれ、本明細書の別の場所に記載されるとおりである)を互いに接続してもよい。該アミノ酸を介するペイロード、強化基、及び抗体の接続は、当業者によって認識されるであろうように、アミドカップリング反応、チオ-マイケル付加、又はアニリン-NH-アルキル化によって実施し得る。例えば、ペイロード、強化基、及び抗体を接続するアミノ酸は、リジンである。さらなる例として、一実施態様において、ペイロード、強化基、及び抗体を接続するアミノ酸は、D-リジンである。さらなる例として、一実施態様において、ペイロード、強化基、及び抗体を接続するアミノ酸は、アスパラギン酸である。さらなる例として、一実施態様において、ペイロード、強化基、及び抗体を接続するアミノ酸は、グルタミン酸である。さらなる例として、一実施態様において、ペイロード、強化基、及び抗体を接続するアミノ酸は、セリンである。さらなる例として、一実施態様において、ペイロード、強化基、及び抗体を接続するアミノ酸は、システインである。さらなる例として、一実施態様において、ペイロード、強化基、及び抗体を接続するアミノ酸は、チロシンである。
本明細書で提供されるのは、式A′、式B′、式C′、又は式D′を有する化合物もしくはコンジュゲート、又はその医薬として許容し得る塩もしくは立体異性形態である:
Figure 2022507781000219
 (式中、BAは、結合剤であり、Q1、Q2、W、R1、-R1-、R2、R2-、R4、R5、及びR6又は-R6-は、式Iとの関連において上述した通りであり、SP1及びSP2は、存在する場合には、スペーサー基であり、各AAは、アミノ酸残基であり、かつp1は、1～10の整数である)。一実施態様において、化合物又はコンジュゲートは、BAが、結合剤であり、Q1、Q2、W、-R1-、R2、R4、R5、及びR6が、式Iとの関連において上述した通りであり、SP1及びSP2が、存在する場合には、スペーサー基であり、各AAが、アミノ酸残基であり、かつp1が、1～10の整数である、式A′、又はその医薬として許容し得る塩もしくは立体異性形態である。一実施態様において、化合物又はコンジュゲートは、BAが、結合剤であり、Q1、Q2、W、R1、-R2-、R4、R5、及びR6が、式Iとの関連において上述した通りであり、SP1及びSP2が、存在する場合には、スペーサー基であり、各AAが、アミノ酸残基であり、かつp1が、1～10の整数である、式B′、又はその医薬として許容し得る塩もしくは立体異性形態である。一実施態様において、化合物又はコンジュゲートは、BAが、結合剤であり、Q1、Q2、W、R1、R2、R4、R5、及び-R6-が、式Iとの関連において上述した通りであり、SP1及びSP2が、存在する場合には、スペーサー基であり、各AAが、アミノ酸残基であり、かつp1が、1～10の整数である、式C′、又はその医薬として許容し得る塩もしくは立体異性形態である。一実施態様において、化合物又はコンジュゲートは、BAが、結合剤であり、Q1、Q2、W、R1、R2、R4、R5、及び-R6-が、式Iとの関連において上述した通りであり、SP1及びSP2が、存在する場合には、スペーサー基であり、各AAが、アミノ酸残基であり、かつp1が、1～10の整数である、式D′、又はその医薬として許容し得る塩もしくは立体異性形態である。本段落の任意の実施態様において、BAは、抗体、又はその抗原結合断片であり、ここで、該抗体は、上述のように、式Iの化合物にコンジュゲートされている。本段落の任意の実施態様において、BAは、抗体、又はその抗原結合断片であり、ここで、該抗体は、上述の通り、式IIの化合物にコンジュゲートされている。本段落の任意の実施態様において、BAは、抗体、又はその抗原結合断片であり、ここで、該抗体は、上述の通り、式IIIの化合物にコンジュゲートされている。本段落の実施態様のいずれかにおいて、p1は、1、2、3、4、又は5である。本段落の実施態様のいずれかにおいて、kは、1、2、3、4、5、6、7、8、9、又は10である。本段落の実施態様のいずれかにおいて、kは、1～2、1～3、2～3、2～4、3～4、又は1～4の範囲である。本段落の実施態様のいずれかにおいて、kは、1である。本段落の実施態様のいずれかにおいて、kは、2である。本段落の実施態様のいずれかにおいて、kは、3である。本段落の実施態様のいずれかにおいて、kは、4である。
ある実施態様において、化合物又はコンジュゲートは、式A′′、又はその医薬として許容し得る塩もしくは立体異性形態、又はその位置異性体である:
Figure 2022507781000220
 (式中:
BAは、結合剤であり;
各SP1、SP2、及びSP3は、上述のようなスペーサー基であり、ここでSP3は、(AA)p1のうちの1つのアミノ酸残基AAに連結されており;
p1は、1～10の整数であり;
EGは、強化剤であり;
kは、1～30の整数であり;
Q1、Q2、W、-R1-、R2、R4、R5、及びR6は、式Iとの関連において上述した通りである)。
上述のように、結合剤への結合は、直接のものとすることも、スペーサーを介してのものとすることもできる。ある実施態様において、結合剤への結合は、PEGスペーサーを介しての該結合剤のグルタミン残基へのものである。ある実施態様において、強化剤は、親水性基である。ある実施態様において、強化剤は、シクロデキストリンである。ある実施態様において、強化基は、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸である。シクロデキストリンは、当業者に公知の任意のシクロデキストリンとすることができる。ある実施態様において、シクロデキストリンは、アルファシクロデキストリン、ベータシクロデキストリン、もしくはガンマシクロデキストリン、又はそれらの混合物である。ある実施態様において、シクロデキストリンは、アルファシクロデキストリンである。ある実施態様において、シクロデキストリンは、ベータシクロデキストリンである。ある実施態様において、シクロデキストリンは、ガンマシクロデキストリンである。ある実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n2-NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n2-C(O)NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2CH2O)m2-C(O)NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n2-N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2、-(CH2)n2-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2、又は-(CH2CH2O)m2-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2(式中、n2は、1、2、3、4、又は5であり、かつm2は、1、2、3、4、又は5である)である。一実施態様において、アルキル又はアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)1-5SO3Hである。別の実施態様において、ヘテロアルキル又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n2-NH-(CH2)1-5SO3H(式中、n2は、1、2、3、4、又は5である)である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n2-C(O)NH-(CH2)1-5SO3H(式中、n2は、1、2、3、4、又は5である)である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2CH2O)m2-C(O)NH-(CH2)1-5SO3H(式中、m2は、1、2、3、4、又は5である)である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n2-N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2(式中、n2は、1、2、3、4、又は5である)である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n2-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2(式中、n2は、1、2、3、4、又は5である)である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2CH2O)m2-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2(式中、m2は、1、2、3、4、又は5である)である。一実施態様において、SP1スペーサーは:
Figure 2022507781000221
 であり
(式中、RG′は、反応性基RGの結合剤との反応の結果として生じる反応性基残基であり;
Figure 2022507781000222
 は、該結合剤への直接又は間接の結合であり;かつbは、1～4の整数である);(AA)p1-SP2-は、-NH-リジン-バリン-アラニン-、-NH-リジン-バリン-シトルリン-、又は-NH-リジン-バリン-シトルリン-PABC-であり;SP3スペーサーは:
Figure 2022507781000223
 である
(式中、RG′は、反応性基RGの強化剤EGとの反応の結果として生じる反応性基残基であり;
Figure 2022507781000224
 は、該強化剤への結合であり;かつ
Figure 2022507781000225
 は、(AA)p1への結合である)。本段落の任意の実施態様において、BAは、抗体、又はその抗原結合断片であり、ここで、該抗体は、上述のように、式Iの化合物にコンジュゲートされている。本段落の任意の実施態様において、BAは、抗体、又はその抗原結合断片であり、ここで、該抗体は、上述の通り、式IIの化合物にコンジュゲートされている。本段落の任意の実施態様において、BAは、抗体、又はその抗原結合断片であり、ここで、該抗体は、上述の通り、式IIIの化合物にコンジュゲートされている。本段落の実施態様のいずれかにおいて、p1は、1、2、3、4、又は5である。本段落の実施態様のいずれかにおいて、kは、1、2、3、4、5、6、7、8、9、又は10である。本段落の実施態様のいずれかにおいて、kは、1～2、1～3、2～3、2～4、3～4、又は1～4の範囲である。本段落の実施態様のいずれかにおいて、kは、1である。本段落の実施態様のいずれかにおいて、kは、2である。本段落の実施態様のいずれかにおいて、kは、3である。本段落の実施態様のいずれかにおいて、kは、4である。
ある実施態様において、化合物又はコンジュゲートは:
Figure 2022507781000226
 又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態、又はその位置異性体である
(式中:
BAは、結合剤であり;
各RG′は、本明細書に記載されるような反応性基の残基であり;
EGは、強化剤であり;
kは、1～30の整数であり;
Q1、Q2、W、R1、R2、R4、R5、及びR6は、式Iとの関連において上述した通りであり;
各R9は、-CH3又は-(CH2)3N(H)C(O)NH2であり;かつ
各Aは、-O-、-N(H)-、
Figure 2022507781000227
 (式中、ZZは、水素、又は本明細書の別の場所に記載されるアミノ酸の側鎖である)である)。例えば、一実施態様において、ZZは、C1-6アルキルである。さらなる例として、一実施態様において、ZZは、C1-6ヘテロアルキルである。上述のように、結合剤への結合は、直接のものとすることも、スペーサーを介してのものとすることもできる。ある実施態様において、結合剤への結合は、PEGスペーサーを介しての該結合剤のグルタミン残基へのものである。ある実施態様において、強化剤は、親水性基である。ある実施態様において、強化剤は、シクロデキストリンである。ある実施態様において、強化基は、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸である。シクロデキストリンは、当業者に公知の任意のシクロデキストリンとすることができる。ある実施態様において、シクロデキストリンは、アルファシクロデキストリン、ベータシクロデキストリン、もしくはガンマシクロデキストリン、又はそれらの混合物である。ある実施態様において、シクロデキストリンは、アルファシクロデキストリンである。ある実施態様において、シクロデキストリンは、ベータシクロデキストリンである。ある実施態様において、シクロデキストリンは、ガンマシクロデキストリンである。ある実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n2-NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n2-C(O)NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2CH2O)m2-C(O)NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n2-N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2、-(CH2)n2-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2、又は-(CH2CH2O)m2-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2(式中、n2は、1、2、3、4、又は5であり、かつm2は、1、2、3、4、又は5である)である。一実施態様において、アルキル又はアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)1-5SO3Hである。別の実施態様において、ヘテロアルキル又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n2-NH-(CH2)1-5SO3H(式中、n2は、1、2、3、4、又は5である)である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n2-C(O)NH-(CH2)1-5SO3H(式中、n2は、1、2、3、4、又は5である)である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2CH2O)m2-C(O)NH-(CH2)1-5SO3H(式中、m2は、1、2、3、4、又は5である)である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n2-N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2(式中、n2は、1、2、3、4、又は5である)である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n2-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2(式中、n2は、1、2、3、4、又は5である)である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2CH2O)m2-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2(式中、m2は、1、2、3、4、又は5である)である。
ある実施態様において、化合物又はコンジュゲートは:
Figure 2022507781000228
 又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態、又はその位置異性体である
(式中:
BAは、結合剤であり;
各RG′は、本明細書に記載されるような反応性基の残基であり;
EGは、強化剤であり;
kは、1～30の整数であり;
Q1、Q2、W、R1、R2、R4、R5、及びR6は、式Iとの関連において上述した通りであり;
各R9は、-CH3又は-(CH2)3N(H)C(O)NH2であり;かつ
各Aは、-O-、-N(H)-、
Figure 2022507781000229
 (式中、ZZは、水素、又は本明細書の別の場所に記載されるアミノ酸の側鎖である)である)。例えば、一実施態様において、ZZは、C1-6アルキルである。さらなる例として、一実施態様において、ZZは、C1-6ヘテロアルキルである。上述のように、結合剤への結合は、直接のものとすることも、スペーサーを介してのものとすることもできる。ある実施態様において、結合剤への結合は、PEGスペーサーを介しての該結合剤のグルタミン残基へのものである。ある実施態様において、強化剤は、親水性基である。ある実施態様において、強化剤は、シクロデキストリンである。ある実施態様において、強化基は、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸である。シクロデキストリンは、当業者に公知の任意のシクロデキストリンとすることができる。ある実施態様において、シクロデキストリンは、アルファシクロデキストリン、ベータシクロデキストリン、もしくはガンマシクロデキストリン、又はそれらの混合物である。ある実施態様において、シクロデキストリンは、アルファシクロデキストリンである。ある実施態様において、シクロデキストリンは、ベータシクロデキストリンである。ある実施態様において、シクロデキストリンは、ガンマシクロデキストリンである。ある実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n2-NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n2-C(O)NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2CH2O)m2-C(O)NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n2-N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2、-(CH2)n2-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2、又は-(CH2CH2O)m2-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2(式中、n2は、1、2、3、4、又は5であり、かつm2は、1、2、3、4、又は5である)である。一実施態様において、アルキル又はアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)1-5SO3Hである。別の実施態様において、ヘテロアルキル又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n2-NH-(CH2)1-5SO3H(式中、n2は、1、2、3、4、又は5である)である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n2-C(O)NH-(CH2)1-5SO3H(式中、n2は、1、2、3、4、又は5である)である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2CH2O)m2-C(O)NH-(CH2)1-5SO3H(式中、m2は、1、2、3、4、又は5である)である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n2-N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2(式中、n2は、1、2、3、4、又は5である)である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n2-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2(式中、n2は、1、2、3、4、又は5である)である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2CH2O)m2-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2(式中、m2は、1、2、3、4、又は5である)である。
ある実施態様において、化合物又はコンジュゲートは:
Figure 2022507781000230
 又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態、又はその位置異性体である
(式中:
BAは、結合剤であり;
kは、1～30の整数であり;
Q1、Q2、W、R1、R2、R4、R5、及びR6は、式Iとの関連において上述した通りであり;
各
Figure 2022507781000231
 は、強化基への結合であり;
各R9は、-CH3又は-(CH2)3N(H)C(O)NH2であり;かつ
各Aは、-O-、-N(H)-、
Figure 2022507781000232
 (式中、ZZは、水素、又は本明細書の別の場所に記載されるアミノ酸の側鎖である)である)。例えば、一実施態様において、ZZは、C1-6アルキルである。さらなる例として、一実施態様において、ZZは、C1-6ヘテロアルキルである。ある実施態様において、強化剤は、親水性基である。ある実施態様において、強化剤は、シクロデキストリンである。ある実施態様において、強化基は、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸である。シクロデキストリンは、当業者に公知の任意のシクロデキストリンとすることができる。ある実施態様において、シクロデキストリンは、アルファシクロデキストリン、ベータシクロデキストリン、もしくはガンマシクロデキストリン、又はそれらの混合物である。ある実施態様において、シクロデキストリンは、アルファシクロデキストリンである。ある実施態様において、シクロデキストリンは、ベータシクロデキストリンである。ある実施態様において、シクロデキストリンは、ガンマシクロデキストリンである。ある実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n2-NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n2-C(O)NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2CH2O)m2-C(O)NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n2-N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2、-(CH2)n2-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2、又は-(CH2CH2O)m2-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2(式中、n2は、1、2、3、4、又は5であり、かつm2は、1、2、3、4、又は5である)である。一実施態様において、アルキル又はアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)1-5SO3Hである。別の実施態様において、ヘテロアルキル又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n2-NH-(CH2)1-5SO3H(式中、n2は、1、2、3、4、又は5である)である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n2-C(O)NH-(CH2)1-5SO3H(式中、n2は、1、2、3、4、又は5である)である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2CH2O)m2-C(O)NH-(CH2)1-5SO3H(式中、m2は、1、2、3、4、又は5である)である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n2-N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2(式中、n2は、1、2、3、4、又は5である)である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n2-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2(式中、n2は、1、2、3、4、又は5である)である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2CH2O)m2-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2(式中、m2は、1、2、3、4、又は5である)である。
ある実施態様において、コンジュゲートは:
Figure 2022507781000233
 又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態、又はその位置異性体である
(式中:
BAは、結合剤であり;
kは、1～30の整数であり;
Q1、Q2、W、R1、R2、R4、R5、及びR6は、式Iとの関連において上述した通りであり;
各
Figure 2022507781000234
 は、該強化基への結合であり;
各R9は、-CH3又は-(CH2)3N(H)C(O)NH2であり;かつ
各Aは、-O-、-N(H)-、
Figure 2022507781000235
 (式中、ZZは、水素、又は本明細書の別の場所に記載されるアミノ酸の側鎖である)である)。例えば、一実施態様において、ZZは、C1-6アルキルである。さらなる例として、一実施態様において、ZZは、C1-6ヘテロアルキルである。
ある実施態様において、強化剤は、親水性基である。ある実施態様において、強化剤は、シクロデキストリンである。ある実施態様において、強化基は、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸である。シクロデキストリンは、当業者に公知の任意のシクロデキストリンとすることができる。ある実施態様において、シクロデキストリンは、アルファシクロデキストリン、ベータシクロデキストリン、もしくはガンマシクロデキストリン、又はそれらの混合物である。ある実施態様において、シクロデキストリンは、アルファシクロデキストリンである。ある実施態様において、シクロデキストリンは、ベータシクロデキストリンである。ある実施態様において、シクロデキストリンは、ガンマシクロデキストリンである。ある実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n2-NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n2-C(O)NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2CH2O)m2-C(O)NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n2-N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2、-(CH2)n2-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2、又は-(CH2CH2O)m2-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2(式中、n2は、1、2、3、4、又は5であり、かつm2は、1、2、3、4、又は5である)である。一実施態様において、アルキル又はアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)1-5SO3Hである。別の実施態様において、ヘテロアルキル又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n2-NH-(CH2)1-5SO3H(式中、n2は、1、2、3、4、又は5である)である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n2-C(O)NH-(CH2)1-5SO3H(式中、n2は、1、2、3、4、又は5である)である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2CH2O)m2-C(O)NH-(CH2)1-5SO3H(式中、m2は、1、2、3、4、又は5である)である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n2-N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2(式中、n2は、1、2、3、4、又は5である)である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n2-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2(式中、n2は、1、2、3、4、又は5である)である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2CH2O)m2-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2(式中、m2は、1、2、3、4、又は5である)である。
ある実施態様において、化合物又はコンジュゲートは:
Figure 2022507781000236
Figure 2022507781000237
又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態、又はその位置異性体である
(式中:
BAは、結合剤であり;
kは、1～30の整数であり;
Q1、Q2、W、R1、R2、R4、R5、及びR6は、式Iとの関連において上述した通りであり;
各R9は、-CH3又は-(CH2)3N(H)C(O)NH2であり;かつ
各Aは、-O-、-N(H)-、
Figure 2022507781000238
 (式中、ZZは、水素、又は本明細書の別の場所に記載されるアミノ酸の側鎖である)である)。例えば、一実施態様において、ZZは、C1-6アルキルである。さらなる例として、一実施態様において、ZZは、C1-6ヘテロアルキルである。
ある実施態様において、化合物又はコンジュゲートは:
Figure 2022507781000239
Figure 2022507781000240
又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態、又はその位置異性体である
(式中:
BAは、結合剤であり;
kは、1～30の整数であり;
Q1、Q2、W、R1、R2、R4、R5、及びR6は、式Iとの関連において上述した通りであり;
各R9は、-CH3又は-(CH2)3N(H)C(O)NH2であり;かつ
各Aは、-O-、-N(H)-、
Figure 2022507781000241
 (式中、ZZは、水素、又は本明細書の別の場所に記載されるアミノ酸の側鎖である)である)。例えば、一実施態様において、ZZは、C1-6アルキルである。さらなる例として、一実施態様において、ZZは、C1-6ヘテロアルキルである。
ある実施態様において、化合物又はコンジュゲートは:
Figure 2022507781000242
 又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態、又はその位置異性体である
(式中:
BAは、結合剤であり;
kは、1～30の整数であり;
Q1、Q2、W、R1、R2、R4、R5、及びR6は、式Iとの関連において上述した通りであり;
各
Figure 2022507781000243
 は、強化基への結合であり;
各R9は、-CH3又は-(CH2)3N(H)C(O)NH2であり;かつ
各Aは、-O-、-N(H)-、
Figure 2022507781000244
 (式中、ZZは、水素、又は本明細書の別の場所に記載されるアミノ酸の側鎖である)である)。例えば、一実施態様において、ZZは、C1-6アルキルである。さらなる例として、一実施態様において、ZZは、C1-6ヘテロアルキルである。ある実施態様において、強化剤は、親水性基である。ある実施態様において、強化剤は、シクロデキストリンである。ある実施態様において、強化基は、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸である。シクロデキストリンは、当業者に公知の任意のシクロデキストリンとすることができる。ある実施態様において、シクロデキストリンは、アルファシクロデキストリン、ベータシクロデキストリン、もしくはガンマシクロデキストリン、又はそれらの混合物である。ある実施態様において、シクロデキストリンは、アルファシクロデキストリンである。ある実施態様において、シクロデキストリンは、ベータシクロデキストリンである。ある実施態様において、シクロデキストリンは、ガンマシクロデキストリンである。ある実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n2-NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n2-C(O)NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2CH2O)m2-C(O)NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n2-N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2、-(CH2)n2-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2、又は-(CH2CH2O)m2-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2(式中、n2は、1、2、3、4、又は5であり、かつm2は、1、2、3、4、又は5である)である。一実施態様において、アルキル又はアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)1-5SO3Hである。別の実施態様において、ヘテロアルキル又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n2-NH-(CH2)1-5SO3H(式中、n2は、1、2、3、4、又は5である)である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n2-C(O)NH-(CH2)1-5SO3H(式中、n2は、1、2、3、4、又は5である)である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2CH2O)m2-C(O)NH-(CH2)1-5SO3H(式中、m2は、1、2、3、4、又は5である)である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n2-N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2(式中、n2は、1、2、3、4、又は5である)である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n2-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2(式中、n2は、1、2、3、4、又は5である)である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2CH2O)m2-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2(式中、m2は、1、2、3、4、又は5である)である。
ある実施態様において、化合物又はコンジュゲートは:
Figure 2022507781000245
 又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態、又はその位置異性体である
(式中:
BAは、結合剤であり;
kは、1～30の整数であり;
Q1、Q2、W、R1、R2、R4、R5、及びR6は、式Iとの関連において上述した通りであり;
各
Figure 2022507781000246
 は、強化基への結合であり;
各R9は、-CH3又は-(CH2)3N(H)C(O)NH2であり;かつ
各Aは、-O-、-N(H)-、
Figure 2022507781000247
 (式中、ZZは、水素、又は本明細書の別の場所に記載されるアミノ酸の側鎖である)である)。例えば、一実施態様において、ZZは、C1-6アルキルである。さらなる例として、一実施態様において、ZZは、C1-6ヘテロアルキルである。ある実施態様において、強化剤は、親水性基である。ある実施態様において、強化剤は、シクロデキストリンである。ある実施態様において、強化基は、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸である。シクロデキストリンは、当業者に公知の任意のシクロデキストリンとすることができる。ある実施態様において、シクロデキストリンは、アルファシクロデキストリン、ベータシクロデキストリン、もしくはガンマシクロデキストリン、又はそれらの混合物である。ある実施態様において、シクロデキストリンは、アルファシクロデキストリンである。ある実施態様において、シクロデキストリンは、ベータシクロデキストリンである。ある実施態様において、シクロデキストリンは、ガンマシクロデキストリンである。ある実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n2-NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n2-C(O)NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2CH2O)m2-C(O)NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n2-N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2、-(CH2)n2-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2、又は-(CH2CH2O)m2-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2(式中、n2は、1、2、3、4、又は5であり、かつm2は、1、2、3、4、又は5である)である。一実施態様において、アルキル又はアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)1-5SO3Hである。別の実施態様において、ヘテロアルキル又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n2-NH-(CH2)1-5SO3H(式中、n2は、1、2、3、4、又は5である)である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n2-C(O)NH-(CH2)1-5SO3H(式中、n2は、1、2、3、4、又は5である)である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2CH2O)m2-C(O)NH-(CH2)1-5SO3H(式中、m2は、1、2、3、4、又は5である)である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n2-N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2(式中、n2は、1、2、3、4、又は5である)である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n2-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2(式中、n2は、1、2、3、4、又は5である)である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2CH2O)m2-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2(式中、m2は、1、2、3、4、又は5である)である。
ある実施態様において、化合物又はコンジュゲートは:
Figure 2022507781000248
Figure 2022507781000249
又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態、又はその位置異性体である
(式中:
BAは、結合剤であり;
kは、1～30の整数であり;
Q1、Q2、W、R1、R2、R4、R5、及びR6は、式Iとの関連において上述した通りであり;
各R9は、-CH3又は-(CH2)3N(H)C(O)NH2であり;かつ
各Aは、-O-、-N(H)-、
Figure 2022507781000250
 (式中、ZZは、水素、又は本明細書の別の場所に記載されるアミノ酸の側鎖である)である)。例えば、一実施態様において、ZZは、C1-6アルキルである。さらなる例として、一実施態様において、ZZは、C1-6ヘテロアルキルである。
ある実施態様において、化合物又はコンジュゲートは:
Figure 2022507781000251
Figure 2022507781000252
又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態、又はその位置異性体である
(式中:
BAは、結合剤であり;
kは、1～30の整数であり;
Q1、Q2、W、R1、R2、R4、R5、R6は、式Iとの関連において上述した通りであり;
各R9は、-CH3又は-(CH2)3N(H)C(O)NH2であり;かつ
各Aは、-O-、-N(H)-、
Figure 2022507781000253
 (式中、ZZは、水素、又は本明細書の別の場所に記載されるアミノ酸の側鎖である)である)。例えば、一実施態様において、ZZは、C1-6アルキルである。さらなる例として、一実施態様において、ZZは、C1-6ヘテロアルキルである。
上記実施態様のそれぞれにおいて、コンジュゲートは、以下のセクションで記載されるように、アジド基で官能化させた結合剤、及びその残基から調製することができる。便宜上、上記いくつかの構造のトリアゾール残基は、括弧内に図示されている。当業者は、トリアゾールを、アジド誘導体化結合剤のアジド基及びリンカー-ペイロードLPのアルキンから形成することができることを認識しているであろう。
ある実施態様において、化合物又はコンジュゲートは、以下:
Figure 2022507781000254
Figure 2022507781000255
Figure 2022507781000256
Figure 2022507781000257
Figure 2022507781000258
Figure 2022507781000259
Figure 2022507781000260
Figure 2022507781000261
Figure 2022507781000262
Figure 2022507781000263
Figure 2022507781000264
Figure 2022507781000265
Figure 2022507781000266
から選択されるか;又はその位置異性体もしくは立体異性形態である。本段落の任意の実施態様において、BAは、結合剤である。本段落の任意の実施態様において、BAは、抗体、又はその抗原結合断片である。本段落の実施態様のいずれかにおいて、kは、1～30の整数である。本段落の実施態様のいずれかにおいて、kは、1、2、3、4、5、6、7、8、9、又は10である。本段落の実施態様のいずれかにおいて、kは、1～2、1～3、2～3、2～4、3～4、又は1～4の範囲である。本段落の実施態様のいずれかにおいて、kは、1である。本段落の実施態様のいずれかにおいて、kは、2である。本段落の実施態様のいずれかにおいて、kは、3である。本段落の実施態様のいずれかにおいて、kは、4である。
さらに本明細書で提供されるのは、以下:
Figure 2022507781000267
Figure 2022507781000268
Figure 2022507781000269
Figure 2022507781000270
からなる群から選択されるADCである。
提供される化合物又はコンジュゲートの実施態様のいずれかにおいて、BAは、HER2に結合する抗体又はその抗原結合断片である。提供される化合物又はコンジュゲートの実施態様のいずれかにおいて、BAは、PRLRに結合する抗体又はその抗原結合断片である。提供される化合物又はコンジュゲートの実施態様のいずれかにおいて、BAは、抗体又はその抗原結合断片であり、かつコンジュゲーションは、少なくとも1つのQ295残基を介するものである。提供される化合物又はコンジュゲートの実施態様のいずれかにおいて、BAは、抗体又はその抗原結合断片であり、かつコンジュゲーションは、2つのQ295残基を介するものである。提供される化合物又はコンジュゲートの実施態様のいずれかにおいて、BAは、N297Q抗体又はその抗原結合断片である。提供される化合物又はコンジュゲートの実施態様のいずれかにおいて、BAは、N297Q抗体又はその抗原結合断片であり、かつコンジュゲーションは、少なくとも1つのQ295及び少なくとも1つのQ297残基を介するものである。提供される化合物又はコンジュゲートの実施態様のいずれかにおいて、BAは、N297Q抗体又はその抗原結合断片であり、かつコンジュゲーションは、2つのQ295残基及び2つのQ297残基を介するものである。特定の実施態様において、付番は、EU付番体系によるものである。
上記実施態様のいずれかにおいて、BAは、抗MSR1抗体である。ある実施態様において、BAは、後述の実施例に記載される抗MSR1抗体H1H21234Nである。ある実施態様において、BAは、後述の実施例に記載される抗MSR1抗体H1H21234N N297Qである。ある実施態様において、BAは、配列番号:2によるHCVR及び配列番号:10によるLCVRを含む抗MSR1抗体である。ある実施態様において、BAは、それぞれ、配列番号:4、6、8、12、14、及び16によるHCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2、及びLCDR3のうちの1つ、2つ、3つ、4つ、5つ、又は6つを含む抗MSR1抗体である。ある実施態様において、HCVRは、配列番号:1によってコードされる。ある実施態様において、LCVRは、配列番号:9によってコードされる。ある実施態様において、HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2、及びLCDR3のうちの1つ、2つ、3つ、4つ、5つ、又は6つは、それぞれ、ポリヌクレオチド配列の配列番号:3、5、7、11、13、及び15によってコードされる。N297Qは、1つ以上の残基297が、アスパラギン(N)からグルタミン(Q)に変異していることを示す。好ましくは、各残基(reasidue)297は、Qに変異したものである。好適な実施態様において、付番は、EU付番体系によるものである。本段落のある実施態様において、kは、1～4である。ある実施態様において、kは、1、2、3、又は4である。ある実施態様において、kは、4である。ある実施態様において、BAは、その全内容が、引用により本明細書に組み込まれている、2019年5月8日に出願されたWO 2019/217591に記載される抗MSR1抗体である。
(化合物を調製する方法)
本明細書で提供される化合物は、当業者にとって明白な任意の方法によって調製、単離、又は入手することができる。例示的な調製方法は、以下の例において詳細に記載される。ある実施態様において、本明細書で提供される化合物は、スキームA及びBにより調製することができる。
(スキームA 例示的な調製スキーム)
Figure 2022507781000271
 例示的な調製スキームAにおいて、Q1、Q2、W、R1、R2、R6、及びnは、式(I)との関連で記載されたのと同様に定義される。最初のエステル化の後に、R1の保護及び/又はR2Pを生じさせるR1のアミノ化のいずれかを行う。R1の保護の後に、例えば、カルボン酸部位のけん化及び活性化を行うと、Q1を有する第1のカップリングパートナーが生じる。アミノ化後に、例えば、カルボン酸部位のけん化及びアミド化を行うと、Q2を有する第2のカップリングパートナーが生じる。それぞれQ1及びQ2を有するカップリングパートナーを一体化させ、それに続き、R1及びR2をそれぞれ脱保護すると、式Iの化合物が生じる。例示的な調製方法は、後述の実施例において詳細に記載される。
ある実施態様において、1つ以上の保護又は脱保護工程が、上のスキームAに記載される調製方法に含まれ得る。
本明細書に記載されるリンカー-ペイロードは、一連のカップリング工程によって合成することができる。例えば、右側のペイロードを、1種以上の標準的なカップリング反応によってSP2に連結することができる。有利な実施態様において、本明細書に記載されるペイロード化合物は、本明細書に記載されるアミド合成条件によるカップリングに利用可能な遊離のアミノ基を含む。(AA)p1のアミノ酸を、アミド合成条件、例えば、ペプチド合成条件によって付加させることができる。スペーサーSP2は、1種以上の標準的なカップリング反応によって(AA)p1に連結することができる。有利な実施態様において、本明細書に記載されるSP2及び(AA)p1基は、本明細書に記載されるアミド合成条件によるカップリングに利用可能な遊離のアミノ基又はカルボキシル基を含む。存在する場合、スペーサーSP3は、1種以上の標準的なカップリング反応によって(AA)p1に連結することができる。有利な実施態様において、本明細書に記載されるSP3及び(AA)p1基は、本明細書に記載されるアミド合成条件によるカップリングに利用可能な遊離のアミノ基又はカルボキシル基を含む。
(スキームB1 例示的な調製スキーム)
Figure 2022507781000272
 例示的な調製スキームB1においては、B1が酸化的に脱炭酸されて、B2が生じ、その後、B2が、ペイロード(HO-ペイロード又はH2N-ペイロード)で置換されて、B3又はB4を与える。あるいは、B5が、ペイロード(それぞれ、HO-ペイロード又はH2N-ペイロード)を用いてエステル化又はペプチドカップリングされて、B6又はB7を与える。
(スキームB2 例示的な調製スキーム)
Figure 2022507781000273
 例示的な調製スキームB2においては、B3、B4、B6、又はB7が、BBとペプチドカップリングされ、その後、脱保護されて、B8、B9、B10、又はB11を与える。B8～B11は、独立に、保護されたグルタミン酸のいずれかの対掌体とペプチドカップリングされて、B12～B19を与える。B20又はB21カルボキシレートを活性化すると、B22又はB23が得られ、その後、それを、独立に、B12～B19のうちの1つに連結して、B24～B27が得られる。
スペーサーSP3は、存在する場合には、反応性基RGで終端する。この反応性基を、当業者にとって適したものであるとみなされるカップリング条件によって強化剤EGに連結することができる。ある実施態様において、スペーサーSP3は、アミド合成条件によって強化剤EGに連結される。ある実施態様において、スペーサーSP3は、クリックケミストリーによって強化剤EGに連結される。これらの実施態様において、スペーサーSP3は、クリック反応に適した反応性基、例えば、アジド又はアルキンで終端し、強化剤EGは、クリック反応に適した相補的な反応性基、例えば、アルキン又はアジドを含む。好適な実施態様において、SP3は、歪アルキンで終端し、EGは、アジドを含むか;又はSP3は、カルボン酸で終端し、EGは、アミンを含む。EGが、シクロデキストリン部位である場合、シクロデキストリンは、アジドを含み得る。アジドシクロデキストリンは、合成的に調製することができるか、又は商業的供給源から得られる。EGが、スルホン酸部位である場合、EGの一方の端(複数可)は、スルホン酸基(複数可)で終端し、他方の端は、一級又は二級アミンで終端する。
本明細書に記載されるコンジュゲートは、本明細書に記載されるリンカー-ペイロードを、結合剤、例えば、抗体と、標準的なコンジュゲーション条件下でカップリングすることによって合成することができる(例えば、その全体が引用により本明細書に組み込まれているDoroninaらの文献、Nature Biotechnology 2003, 21, 7, 778を参照されたい)。結合剤が、抗体である場合、該抗体を、該抗体の1つ以上のシステイン又はリジン残基を介してリンカー-ペイロードに連結してもよい。リンカー-ペイロードは、例えば、抗体を還元剤、例えば、ジチオテリトール(dithiotheritol)に曝して該抗体のジスルフィド結合を切断し、還元された抗体を、例えば、ゲル濾過によって精製し、それに続き、該抗体を、適当な反応性部位、例えば、マレイミド基を含有するリンカー-ペイロードで処理することによってシステイン残基に連結することができる。適当な溶媒としては、水、DMA、DMF、及びDMSOが挙げられるが、これらに限定されない。反応性基、例えば、活性化エステル又は酸ハロゲン化物基を含有するリンカー-ペイロードを、抗体のリジン残基に連結することができる。適当な溶媒としては、水、DMA、DMF、及びDMSOが挙げられるが、これらに限定されない。コンジュゲートは、例えば、サイズ排除クロマトグラフィー、透析、及び限外濾過/透析濾過を含む公知のタンパク質技術を用いて精製することができる。
結合剤、例えば、抗体を、クリックケミストリー反応によってコンジュゲートすることもできる。該クリックケミストリー反応のいくつかの実施態様において、リンカー-ペイロードは、アジドとの1,3-環化付加反応を受けることができる反応性基、例えば、アルキンを含む。そのような適当な反応性基は、上で述べられている。抗体は、1つ以上のアジド基を含む。そのような抗体としては、例えば、アジド-ポリエチレングリコール基で官能化された抗体が挙げられる。ある実施態様において、そのような官能化抗体は、酵素トランスグルタミナーゼの存在下で、少なくとも1つのグルタミン残基、例えば、重鎖Gln295又はGln55を有する抗体を、一級アミン化合物で処理することによって誘導される。ある実施態様において、そのような官能化抗体は、酵素トランスグルタミナーゼの存在下で、少なくとも1つのグルタミン残基、例えば、重鎖Gln297を有する抗体を、一級アミン化合物で処理することによって誘導される。そのような抗体としては、Asn297Gln(N297Q)変異体が挙げられる。ある実施態様において、そのような官能化抗体は、酵素トランスグルタミナーゼの存在下で、少なくとも2つのグルタミン残基、例えば、重鎖Gln295及び重鎖Gln297を有する抗体を、一級アミン化合物で処理することによって誘導される。そのような抗体としては、Asn297Gln(N297Q)変異体が挙げられる。ある実施態様において、抗体は、合計で2つ又は合計で4つのグルタミン残基に対して本段落に記載されているように2本の重鎖を有する。
ある実施態様において、抗体は、各重鎖に1つである2つのグルタミン残基を含む。特定の実施態様において、抗体は、各重鎖にQ295残基を含む。さらなる実施態様において、抗体は、1つ、2つ、3つ、4つ、5つ、6つ、7つ、8つ、又はそれを超えるグルタミン残基を含む。これらのグルタミン残基は、重鎖、軽鎖、又は重鎖及び軽鎖の双方に存在することができる。例示的なグルタミン残基としては、Q55が挙げられる。これらのグルタミン残基は、野生型の残基、又は改変された残基とすることができる。該抗体は、標準的な技術により調製することができる。
当業者は、抗体が、多くの場合、重鎖配列における残基Q295の近くの残基N297でグリコシル化されていることを認識しているであろう。残基N297でのグリコシル化は、残基Q295でトランスグルタミナーゼと干渉することがある(Dennlerらの文献、上記)。従って、有利な実施態様において、抗体は、グリコシル化されていない。ある実施態様において、抗体は、脱グリコシル化型又はアグリコシル化型である。特定の実施態様において、抗体重鎖は、N297変異を有する。換言すれば、抗体は、もはや297位にアスパラギン残基を有しないように変異している。特定の実施態様において、抗体重鎖は、N297Q変異を有する。そのような抗体は、グリコシル化配列を除去又は無効化する部位特異的変異誘発によってか、又は抗体の機能又は結合無効化をもたらすことがない部位にグルタミン残基を挿入する部位特異的変異誘発によって調製することができる。ある実施態様において、Q295残基及び/又はN297Q変異を有する抗体は、トランスグルタミナーゼに近づくことができ、従って、リンカー又はリンカー-ペイロードにコンジュゲーションすることができる1つ以上の追加の天然グルタミン残基を、それらの可変領域に含有する。例示的な天然グルタミン残基は、例えば、軽鎖のQ55に見出すことができる。そのような例において、トランスグルタミナーゼによってコンジュゲートされる抗体は、予想されるよりも高い薬物:抗体比(DAR)の値(例えば、4よりも高いDAR)を有し得る。任意のそのような抗体は、天然起源又は人工起源より単離することができる。
その後、グリコシル化を妨害しない抗体を、一級アミン化合物と反応させる。ある実施態様において、アグリコシル化された抗体を、一級アミン化合物と反応させて、グルタミニル修飾抗体を生じさせる。ある実施態様において、脱グリコシル化された抗体を、一級アミン化合物と反応させて、グルタミニル修飾抗体を生じさせる。
Kabatらの文献(「Kabat」付番スキーム);Al-Lazikaniらの文献、1997、J. Mol. Biol., 273:927-948(「Chothia」付番スキーム);MacCallumらの文献、1996、J. Mol. Biol. 262:732-745(「Contact」付番スキーム);Lefrancらの文献、Dev. Comp. Immunol., 2003、27:55-77(「IMGT」付番スキーム);並びにHonegge及びPluckthunの文献、J. Mol. Biol., 2001、309:657-70(「AHo」付番スキーム)によって記載されるものを含む任意の公知の付番スキームを用いて、抗体のアミノ酸配列に番号を付けることができる。特に明記されない限り、本明細書で使用される付番スキームは、Kabat付番スキームである。しかしながら、付番スキームの選択が、それらが存在しない配列の差を暗示することは意図されない。当業者は、1つ以上の抗体のアミノ酸配列を調査することによって配列位置を容易に確認することができる。抗体重鎖定常領域中の残基に言及する場合、別段の記載がない限り、「EU付番スキーム」が一般に用いられる(例えば、上記Kabatらの文献で報告されるように)。
「アグリコシル化抗体」という用語は、トランスグルタミネーション反応と干渉する可能性のあるグリコシル化配列を含まない抗体、例えば、1つ以上の重鎖のN297にサッカライド基を有しない抗体を指す。特定の実施態様において、抗体重鎖は、N297変異を有する。言い換えれば、該抗体は、Kabatらの文献に開示されるようなEU付番体系による297位にもはやアスパラギン残基を有しないよう変異している。特定の実施態様において、抗体重鎖は、N297Q又はN297D変異を有する。そのような抗体は、グリコシル化配列を除去又は無効化する部位特異的変異誘発によってか、又は干渉グリコシル化部位や他の干渉構造以外の部位にグルタミン残基を挿入する部位特異的変異誘発によって調製することができる。また、そのような抗体は、天然起源又は人工の起源から単離することもできる。
「脱グリコシル化抗体」という用語は、N297のサッカライド基が除去され、それにより、Q295がトランスグルタミネーションに解放されている抗体を指す。特定の実施態様において、本明細書で提供されるのは、抗体、例えば、N297抗体を脱グリコシル化する追加の工程を含むプロセスである。
前記一級アミンは、トランスグルタミナーゼの存在下でグルタミン残基と共有結合を形成することができる任意の一級アミンとすることができる。有用な一級アミンは、上で述べられている。トランスグルタミナーゼは、当業者によって適当であるとみなされる任意のトランスグルタミナーゼとすることができる。ある実施態様において、トランスグルタミナーゼは、一級アミン化合物上の遊離のアミン基とグルタミン残基の側鎖上のアシル基との間のイソペプチド結合の形成を触媒する酵素である。トランスグルタミナーゼは、タンパク質-グルタミン-γ-グルタミルトランスフェラーゼとしても知られる。特定の実施態様において、トランスグルタミナーゼは、EC 2.3.2.13として分類される。トランスグルタミナーゼは、適当であるとみなされる任意の起源由来のものとすることができる。ある実施態様において、トランスグルタミナーゼは、微生物のものである。有用なトランスグルタミナーゼが、ストレプトマイセス・モバラエンス(Streptomyces mobaraense)、ストレプトマイセス・シナモネウム(Streptomyces cinnamoneum)、ストレプトマイセス・グリセオカルネウム(Streptomyces griseo-carneum)、ストレプトマイセス・ラベンデュラエ(Streptomyces lavendulae)、及びバチルス・スブチリス(Bacillus subtilis)から単離されている。哺乳動物のトランスグルタミナーゼを含む非微生物由来のトランスグルタミナーゼも、使用することができる。ある実施態様において、トランスグルタミナーゼを、熟練した専門家によって適当であるとみなされる任意の技術によって生産することができ、又は任意の起源から入手することができる。特定の実施態様において、トランスグルタミナーゼは、商業的な供給源から入手される。
特定の実施態様において、前記一級アミン化合物は、トランスグルタミネーション後にさらなる反応をすることができる反応性基を含む。これらの実施態様において、グルタミニル修飾抗体を、反応性ペイロード化合物、リンカー-ペイロード、又は反応性リンカー-ペイロード化合物と反応させ又はそれで処理して、抗体-ペイロードコンジュゲートを生成させることができる。ある実施態様において、一級アミン化合物は、アジドを含む。
ある実施態様において、グルタミニル修飾抗体を、リンカー-ペイロード又は反応性リンカー-ペイロードと反応させ又はそれで処理して、抗体-ペイロードコンジュゲートを生成させる。該反応は、当業者によって適当であるとみなされる条件下で進行することができる。ある実施態様において、グルタミニル修飾抗体とリンカー-ペイロード化合物との間に結合を形成させるのに適した条件下で、グルタミニル修飾抗体を、リンカー-ペイロード又は反応性リンカー-ペイロード化合物と接触させる。適当な反応条件は、当業者に周知である。
例示的な反応は、後述の実施例において提供される。
(医薬組成物及び治療の方法)
本明細書で提供されるのは、治療的又は予防的有効量又は本明細書に開示される化合物又はペイロードのうちの1種以上、例えば、本明細書で提供される式の化合物のうちの1種以上を投与することを含む、疾患、病態、又は障害を治療及び予防する方法である。疾患、障害、及び/又は病態としては、本明細書に列記される抗原に関連するものが挙げられるが、これらに限定されない。
本明細書に記載される化合物は、単独で又は1種以上の追加の治療薬剤と一緒に投与することができる。1種以上の追加の治療薬剤は、本明細書に記載される化合物の投与の直前に、それと同時に、又はその直後に投与することができる。また、本開示は、本明細書に記載される化合物のいずれかを、1種以上の追加の治療薬剤と組み合わせて含む医薬組成物、及びそのような組合せを、それを必要としている対象に投与することを含む治療の方法を含む。
適当な追加の治療薬剤としては:第2のグルココルチコイド、自己免疫性治療薬剤、ホルモン、生物製剤、又はモノクローナル抗体が挙げられるが、これらに限定されない。また、適当な治療薬剤としては、本明細書で記載される化合物の任意の医薬として許容し得る塩、酸、又は誘導体も挙げられるが、これらに限定されない。
本明細書に記載される方法のいくつかの実施態様において、複数用量の本明細書に記載される化合物(又は本明細書に記載される化合物と本明細書において触れられた追加の治療薬剤のうちのいずれかとの組合せを含む医薬組成物)を、規定の時間経過にわたって対象に投与し得る。本開示のこの態様による方法は、対象に、複数用量の本明細書に記載される化合物を順次投与することを含む。本明細書で使用される場合、「順次投与すること」は、各用量の化合物が、異なる時点で、例えば、所定の間隔(例えば、数時間、数日、数週、又は数か月)で区切られた異なる日に、対象に投与されることを意味する。本開示は、患者に、本明細書に記載される化合物の単回の初期用量、それに続く、1回以上の該化合物の第2用量、及び任意に、それに続く1回以上の該化合物の第3用量を順次投与することを含む方法を含む。
「初期用量」、「第2用量」、及び「第3用量」という用語は、本明細書に記載される化合物の投与の時系列を指す。従って、「初期用量」は、治療レジメンの開始時に投与される用量(別名、「ベースライン用量」)であり;「第2用量」は、初期用量の後に投与される用量であり;「第3用量」は、第2用量の後に投与される用量である。初期、第2、及び第3用量は全て、同じ量の本明細書に記載される化合物を含有してもよいが、通常、投与の頻度の観点から互いに異なり得る。ある実施態様において、初期、第2、及び/又は第3用量に含まれる化合物の量は、治療の過程で互いに異なる(例えば、必要に応じて上方又は下方調整される)。ある実施態様において、2回以上(例えば、2、3、4、又は5回)の用量が、治療レジメンの初めに「ローディング用量」として投与され、それに続き、より低い頻度で投与される後続用量(例えば、「維持用量」)が投与される。
本開示のある例示的な実施態様において、各第2及び/又は第3用量は、直前の用量の1～26週間(例えば、1、11/2、2、21/2、3、31/2、4、41/2、5、51/2、6、61/2、7、71/2、8、81/2、9、91/2、10、101/2、11、111/2、12、121/2、13、131/2、14、141/2、15、151/2、16、161/2、17、171/2、18、181/2、19、191/2、20、201/2、21、211/2、22、221/2、23、231/2、24、241/2、25、251/2、26、261/2週間、又はそれより長い期間)後に投与される。本明細書で使用される「直前の用量」という語句は、複数回の投与の連続において、間に別の用量を挟むことなく該連続においてそのまさに次の用量の投与の前に患者に投与される化合物の用量を意味する。
本開示のこの態様による方法は、患者に、任意の数の第2及び/又は第3用量の化合物を投与することを含み得る。例えば、ある実施態様において、単一の第2用量のみが患者に投与される。別の実施態様において、2回以上(例えば、2、3、4、5、6、7、8回、又はそれより多く)の第2用量が患者に投与される。同様に、ある実施態様において、単一の第3用量のみが患者に投与される。別の実施態様において、2回以上(例えば、2、3、4、5、6、7、8回、又はそれより多く)の第3用量が患者に投与される。投与レジメンは、特定の対象の生涯にわたって無期限に、又はそのような治療がもはや治療的に必要でなくなるかもしくは有益でなくなるまで実施することができる。
複数の第2用量を含む実施態様において、各第2用量は、他の第2用量と同じ頻度で投与されてもよい。例えば、各第2用量は、患者に、直前の用量から1～2週間後又は1～2カ月後に投与されてもよい。同様に、複数の第3用量を含む実施態様において、各々の第3用量は、他の第3用量と同じ頻度で投与されてもよい。例えば、各々の第3用量は、患者に、直前の用量から2～12週間後に投与されてもよい。本開示のある実施態様において、第2及び/又は第3用量が患者に投与される頻度は、治療レジメンの間で異なり得る。投与の頻度はまた、臨床検査後の個々の患者の必要性に応じて、医師により、治療の過程で調整されてもよい。
本開示には、2～6回のローディング用量が、第1の頻度(例えば、週に1回、2週間毎に1回、3週間毎に1回、月に1回、2カ月毎に1回など)で患者に投与され、それに続き、2回以上の維持用量がより低い頻度で患者に投与される投与レジメンが含まれる。例えば、本発明のこの態様によれば、ローディング用量が月に1回の頻度で投与される場合、維持用量は、6週間毎に1回、2カ月毎に1回、3カ月毎に1回などで、患者に投与されてもよい。
本開示は、本明細書に記載される化合物、ペイロード、リンカー-ペイロード、及び/又はコンジュゲート、例えば、式I、式II、及び/又は式IIIの化合物の医薬組成物、例えば、本明細書に記載される化合物、その塩、立体異性体、多形、並びに医薬として許容し得る担体、希釈剤、及び/又は賦形剤を含む組成物を含む。適当な担体、希釈剤、及び賦形剤の例としては、適切な組成物pHの維持のためのバッファー(例えば、クエン酸バッファー、コハク酸バッファー、酢酸バッファー、リン酸バッファー、乳酸バッファー、シュウ酸バッファーなど)、キャリアタンパク質(例えば、ヒト血清アルブミン)、生理食塩水、ポリオール(例えば、トレハロース、スクロース、キシリトール、ソルビトールなど)、界面活性剤(例えば、ポリソルベート20、ポリソルベート80、ポリオキソレートなど)、抗微生物剤、及び抗酸化剤が挙げられるが、これらに限定されない。
いくつかの例において、本明細書で記載されるものは、疾患、障害、又は病態を治療する方法であって、該障害を有する患者に、治療的有効量の式I、式II、及び/もしくは式IIIの化合物又はその医薬組成物を投与することを含む、前記方法である。
いくつかの例において、本明細書で記載されるものは、疾患、障害、又は病態を予防する方法であって、該障害を有する患者に、予防的有効量の式I、式II、及び/もしくは式IIIの化合物又はその医薬組成物を投与することを含む、前記方法である。
いくつかの例において、本明細書で記載されるのは、LXRシグナル伝達の調節に応答性の任意の疾患、障害、又は病態を治療又は予防するための方法である。いくつかの例において、該疾患又は障害は、LXR機能、LXR多型、LXRアゴニスト活性、又はLXRアンタゴニスト活性と関連する。いくつかの例において、本明細書で記載されるのは、増殖性障害、神経変性障害、免疫学的障害、自己免疫疾患、炎症性障害、皮膚疾患、代謝性疾患、心血管系疾患、及び胃腸疾患からなる群から選択される疾患、障害、又は病態を治療又は予防する方法である。
増殖性障害は、当業者に公知の任意の増殖性障害とすることができる。ある実施態様において、増殖性障害には、限定するものではないが、腫瘍学的障害(oncology disorder)が含まれ、ここで、該腫瘍学的障害は、当業者に公知の任意のがん障害とすることができる。ある実施態様において、本明細書で提供されるのは、メラノーマを治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書で提供されるのは、転移性メラノーマを治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書で提供されるのは、肺がんを治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書で提供されるのは、EGFR-チロシンキナーゼ阻害剤抵抗性肺がんを治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書で提供されるのは、口腔がんを治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書で提供されるのは、口腔扁平上皮細胞癌を治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書で提供されるのは、前立腺がんを治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書で提供されるのは、ホジキンリンパ腫を治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書で提供されるのは、乳がんを治療又は予防する方法である。
神経変性障害は、当業者に公知の任意の神経変性障害とすることができる。ある実施態様において、本明細書で提供されるのは、アルツハイマー病を治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書で提供されるのは、パーキンソン病を治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書で提供されるのは、ハンチントン病を治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書で提供されるのは、筋萎縮性側索硬化症を治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書で提供されるのは、ミエリン遺伝子発現を治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書で提供されるのは、ミエリン形成及び再ミエリン化の病態、疾患、又は障害を治療又は予防する方法である。
免疫学的障害は、当業者に公知の任意の免疫学的障害とすることができる。ある実施態様において、本明細書で提供されるのは、炎症性腸疾患を治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書で提供されるのは、潰瘍性大腸炎を治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書で提供されるのは、クローン病を治療又は予防する方法である。
炎症性障害は、当業者に公知の任意の炎症性障害とすることができる。ある実施態様において、本明細書で提供されるのは、関節炎を治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書で提供されるのは、関節リウマチを治療又は予防する方法である。
代謝性疾患は、当業者に公知の任意の代謝性疾患とすることができる。ある実施態様において、代謝性疾患は、脂質異常症である。脂質異常症は、当業者に公知の任意の脂質異常症とすることができる。ある実施態様において、脂質異常症は、高脂血症、高コレステロール血症、高トリグリセリド血症、高リポ蛋白血症、HDL欠乏症、ApoA-I欠乏症、並びに心血管系疾患、例えば、冠動脈疾患(例えば、狭心症、心筋梗塞、及び心臓性突然死の治療及び予防を含む);アテローム性動脈硬化症(例えば、アテローム性動脈硬化症の治療及び予防を含む);並びに再狭窄(例えば、バルーン血管形成術などの医療処置の結果として生じるアテローム性動脈硬化性プラークの治療又は予防を含む)からなる群から選択される。ある実施態様において、本明細書で提供されるのは、糖尿病を治療又は予防する方法である。
心血管系疾患は、当業者に公知の任意の心血管系疾患とすることができる。ある実施態様において、本明細書で提供されるのは、アテローム性動脈硬化症を治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書で提供されるのは、異常なマクロファージプロセシングから生じるアテローム性動脈硬化症を治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書で提供されるのは、マクロファージがoxLDLをプロセシングすることができない酸化低密度リポタンパク質(oxLDL)の形成から生じるアテローム性動脈硬化症を治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書で提供されるのは、虚血性心疾患を治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書で提供されるのは、卒中を治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書で提供されるのは、高血圧性心疾患を治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書で提供されるのは、大動脈瘤を治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書で提供されるのは、心内膜炎を治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書で提供されるのは、末梢動脈疾患を治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書で提供されるのは、本段落において提示される疾患のうちのいずれかの組合せを治療又は予防する方法である。
いくつかの例において、本明細書で記載されるのは、核内受容体の機能を調節するための方法である。非限定的な例として、該機能は、炎症性メディエーター(例えば、サイトカイン、ケモカイン)の発現/分泌、コレステロール調節、コレステロール摂取、コレステロール流出、コレステロール酸化、遊走、走化性、アポトーシス及び壊死、炎症活性、脂質調節、アポトーシス、遊走、走化性、遺伝子転写、並びにタンパク質発現から選択され得る。
(実施例)
本明細書で提供されるのは、新規ビス-オクタヒドロフェナントレンカルボキサミド、そのタンパク質コンジュゲート、並びに該ビス-オクタヒドロフェナントレンカルボキサミド及びコンジュゲートを投与することを含む疾患、障害、及び病態を治療するための方法である。
いくつかの例において、式(I)の化合物は、表1で特定される化合物である。
(表1. ペイロードのリスト)
Figure 2022507781000274
Figure 2022507781000275
Figure 2022507781000276
本開示のリンカー-ペイロードの例としては、以下の表2に記載されるものが挙げられるが、これらに限定されない。
(表2. リンカー-ペイロードのリスト)
Figure 2022507781000277
Figure 2022507781000278
Figure 2022507781000279
発明のある実施態様が、以下の非限定例によって例示される。
別途明示的に記載されない限り、試薬及び溶媒は、Sinopharm Chemical Reagent Co.(SCRC)、Sigma-Aldrich、Alfa、又は他の供給業者などの商業的供給源から得た。
1H NMR及び他のNMRスペクトルは、Bruker AVIII 400又はBruker AVIII 500で記録した。データを、Nutsソフトウェア又はMestReNovaソフトウェアで処理し、プロトンシフトを内部標準のテトラメチルシランから低磁場側の百万分率(ppm)で測定した。
HPLC-MS測定は、以下の条件を用いてAgilent 1200 HPLC/6100 SQシステムで実施した。
HPLC-MS測定のための方法Aには、移動相として:A:水(0.01％ TFA)及びB:アセトニトリル(0.01％ TFA)を含めた。グラジエント相は、1.0mL/分で15分(min)かけて5％のBを95％のBまで増加させるものであった。用いられたカラムは、SunFire C18、4.6×50mm、3.5μmであった。カラム温度は、50℃であった。検出器には、アナログ・デジタル変換器蒸発光散乱検出器(以下、「ADC ELSD」)、ダイオードアレイ検出器(DAD、214nm及び254nm)、及びエレクトロスプレーイオン化-大気圧イオン化(ES-API)を含めた。
HPLC-MS測定のための方法Bには、移動相として:A:水(10mM NH4HCO3)及びB:アセトニトリルを含めた。グラジエント相は、1.0mL/分で15分かけて5％のBを95％のBまで増加させるものであった。用いられたカラムは、XBridge C18、4.6×50mm、3.5μmであった。カラム温度は、50℃であった。検出器には、ADC ELSD、DAD(214nm及び254nm)、及び質量選択検出器(MSD ES-API)を含めた。
LC-MS測定は、以下の条件を用いてAgilent 1200 HPLC/6100 SQシステムで実施した。
LC-MS測定のための方法Aは、WATERS 2767機器で行った。カラムは、Shimadzu Shim-Pack、PRC-ODS、20×250mm、15μm(2本を直列に接続)であった。移動相は、A:水(0.01％ TFA)及びB:アセトニトリル(0.01％ TFA)であった。グラジエント相は、1.8～2.3mL/分で3分かけて5％のBを95％のBまで増加させるものであった。用いられたカラムは、SunFire C18、4.6×50mm、3.5μmであった。カラム温度は、50℃であった。検出器には、ADC ELSD、DAD(214nm及び254nm)、及びMSD ES-APIを含めた。
LC-MS測定のための方法Bは、Gilson GX-281機器で行った。カラムは、Xbridge Prep C18 10μm OBD、19×250mmであった。移動相は、A:水(10mM NH4HCO3) B:アセトニトリルであった。グラジエント相は、1.8～2.3mL/分で3分かけて5％のBを95％のBまで増加させるものであった。用いられたカラムは、XBridge C18、4.6×50mm、3.5μmであった。カラム温度は、50℃であった。検出器には、ADC ELSD、DAD(214nm及び254nm)、及びMSD ES-APIを含めた。
分取高圧液体クロマトグラフィー(分取HPLC)は、Gilson GX-281機器で行った。一方が酸性でもう一方が塩基性の2種類の溶媒系を用いた。酸性溶媒系(方法A)には、Waters Sunfire 10μm C18 カラム(100Å、250×19mm)を含めた。分取HPLC用の溶媒Aは、水中0.05％のTFAであり、溶媒Bは、アセトニトリルであった。溶出条件は、30mL/分で20分かけて溶媒Bを5％から100％まで増加させた直線的なグラジエントであった。塩基性溶媒系(方法B)には、Waters Xbridge 10μm C18カラム(100Å、250×19mm)を含めた。分取HPLC用の溶媒Aは、水中10mMの重炭酸アンモニウム(NH4HCO3)であり、溶媒Bは、アセトニトリルであった。溶出条件は、30mL/分で20分かけて溶媒Bを5％から100％まで増加させた直線的なグラジエントであった。
フラッシュクロマトグラフィーは、Agela Flashカラムシリカ-CSを用いてBiotageの装置で実施された。逆相フラッシュクロマトグラフィーは、別の方法が明示的に示されている場合を除き、Boston ODS又はAgela C18を用いてBiotageの装置で実施された。
本明細書で使用される場合、これらのプロセス、スキーム、及び実施例で使用される記号及び規約は、特定の略語が具体的に定義されているかどうかにかかわらず、現代の科学文献、例えば、the Journal of the American Chemical Society又はthe Journal of Biological Chemistryで使用されているものと一致する。限定するものではないが、具体的には、以下の略語を、実施例及び明細書の全体で用いることがある:
Figure 2022507781000280
Figure 2022507781000281
(調製方法)
(実施例1)
本実施例は、上記表1におけるポドカルピン酸誘導体P1、P15、及びP2の合成のための一般方法を示す。本実施例では、図1において1～12a-b並びにP1、P15、及びP2の番号が付けられた化合物に言及する。
(メチル (1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキシレート(2))
Figure 2022507781000282
 メタノール(200mL)及びトルエン(600mL)中のポドカルピン酸(1、90g、0.33mol)の溶液に、(トリメチルシリル)ジアゾメタン(ヘキサン中2M、200mL)を添加した。反応混合物を、室温で2時間撹拌した。LCMSによると、ポドカルピン酸が完全に消費された。揮発性物質を真空中で除去し、残渣を石油エーテル(2L)からトリチュレートすると、化合物2(91g、96％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 289 (M + H)+。
Figure 2022507781000283
(メチル (1S,4aS,10aR)-1,4a-ジメチル-6-(トリフルオロメタンスルホニルオキシ)-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキシレート(3))
Figure 2022507781000284
 化合物2(10g、35mmol)の塩化メチレン(200mL)溶液に、ピリジン(3.3g、42mmol)及びDMAP(0.84g、6.9mmol)を、窒素下で添加した。混合物を、-78℃に冷却し、トリフルオロメタンスルホン酸無水物(12g、42mmol)を添加した。得られた混合物を、25℃まで昇温し、25℃でさらに4時間撹拌した。反応混合物を、DCM(500mL)で希釈し、水(100mL)、水性塩酸塩(1N、150mL)、及びブライン(100mL)で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空下濃縮すると、粗化合物3(14g、粗収率97％)が粘稠な油状物として得られ、これは、次の工程のために十分純粋であった。粗化合物3を、フラッシュクロマトグラフィー(石油エーテル中0～10％の酢酸エチル)によって精製すると、純粋な3を粘稠な油状物として得ることができた。ESI m/z: 421.2 (M + 1)+。
Figure 2022507781000285
(メチル (1S,4aS,10aR)-6-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキシレート(4))
Figure 2022507781000286
 化合物3(14g、34mmol)及びtert-ブチル カルバメート(BocNH2、7.9g、68mmol)のtert-ブタノール(100mL)溶液に、炭酸セシウム(22g、68mmol)、トリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(0)(Pd2(dba)3、1.8g、2.0mmol)、及びX-Phos(1.8g、4.0mmol)を、室温で順次添加した。混合物を脱気し、アルゴンで3回パージし、その後、TLCによりモニタリングして化合物3が完全に消費されるまで、アルゴン風船下80℃で1晩撹拌した。室温まで冷却後、反応混合物を、酢酸エチルで希釈し、セライトに通して濾過した。固体を、酢酸エチルで3回洗浄した。合わせた濾液を、真空下濃縮し、残渣を、シリカゲルカラムクロマトグラフィー(石油エーテル中0～6.25％の酢酸エチル)によって精製すると、化合物4(11g、収率80％)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 410 (M + 23)+。
Figure 2022507781000287
((1S,4aS,10aR)-6-{[(tert-ブトキシ)カルボニル]アミノ}-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボン酸(5))
Figure 2022507781000288
 化合物4(4.9g、13mmol)のDMSO溶液に、カリウムtert-ブトキシド(15g、0.13mol)を室温で一度に添加した。LCMSに照らして反応が完結するまで、反応混合物を、アルゴン下、60℃で3時間撹拌した。室温まで冷却後、反応混合物を、氷に注ぎ入れ、水性塩酸塩(0.5M)でゆっくりとpH 5まで酸性化し、その間、温度が、25℃を超えないようにした。沈殿物を、濾過によって回収し、水で数回洗浄した。粗生成物を、シリカゲルカラムクロマトグラフィー(石油エーテル中0～20％の酢酸エチル)によってさらに精製すると、化合物5(4.5g、収率93％)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 318 (M - 55)+。
Figure 2022507781000289
(tert-ブチル N-[(4bS,8S,8aR)-8-カルバモイル-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバメート(6))
Figure 2022507781000290
 5(4.5g、12mmol)及びHATU(4.9g、13mmol)のDMF(50mL)溶液に、ジイソプロピルエチルアミン(20mL、0.12mol)を添加し、混合物を、25℃で1時間撹拌した。その後、該混合物に、塩化アンモニウム(16g、0.30mol)を添加し、混合物を、室温で1晩撹拌した。得られた混合物を、酢酸エチルで希釈し、水及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空下濃縮した。残渣を、フラッシュクロマトグラフィー(石油エーテル中0～20％の酢酸エチル)によって精製すると、化合物6(4.2g、収率94％)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 373.3 (M + 1)+。
Figure 2022507781000291
(メチル (1S,4aS,10aR)-6-アミノ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキシレートトリフルオロ酢酸塩(7))
Figure 2022507781000292
 化合物4(6.0g、15mmol)のDCM(60mL)溶液に、TFA(12mL)を室温で添加した。TLCによりモニタリングして、Bocが完全に除去されるまで、得られた混合物を、室温で2時間撹拌した。反応混合物を真空下濃縮すると、粗化合物7がTFA塩として得られ、これを、さらに精製することなく次の工程で用いた。ESI m/z: 288 (M+1)+。
(メチル (1S,4aS,10aR)-6-(ベンジルオキシ)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキシレート(8a))
Figure 2022507781000293
 DMF(100mL)中の化合物2(12g、40mmol)及び炭酸セシウム(14g、44mmol)の混合物を、20～25℃で15分間撹拌した。該混合物に、臭化ベンジル(7.1mL、60mmol)を室温で添加した。室温で4時間撹拌後、得られた混合物を、冷水に注ぎ入れ、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機溶液を、水及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空下濃縮した。粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー(石油エーテル中0～10％の酢酸エチル)によって精製すると、表題化合物8a(13g、収率89％)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 379 (M + H)+。
Figure 2022507781000294
(メチル (1S,4aS,10aR)-6-(ジベンゾイルアミノ)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキシレート(8b))
Figure 2022507781000295
 上で得られた粗化合物7(計算量15mmol)のDMF(60mL)溶液に、炭酸カリウム(6.4g、46mmol)及び臭化ベンジル(5.8g、34mmol)を室温で添加した。TLCによりモニタリングして、反応が完了するまで、反応混合物を、80℃で1晩撹拌した。室温まで冷却後、混合物を、冷水(300mL)に注ぎ入れ、酢酸エチル(×3)で抽出した。合わせた有機溶液を、水及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空下濃縮すると、粗生成物8bが得られ、これを、さらに精製することなく次の工程で用いた。ESI m/z: 468 (M + 1)+。
((1S,4aS,10aR)-6-(ベンジルオキシ)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボン酸(9a))
Figure 2022507781000296
 LCMS及びTLCによりモニタリングして、エステルが完全に消費されるまで、DMSO(0.19L)中の化合物8a(11g、29mmol)及びカリウムtert-ブトキシド(33g、0.29mol)の混合物を、100℃で1時間撹拌した。25℃まで冷却後、混合物を、水性塩酸塩(1N)でクエンチし、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機溶液を、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空下濃縮した。残渣を、シリカゲルカラムクロマトグラフィー(石油エーテル中0～24％の酢酸エチル)によって精製すると、化合物9a(7.5g、収率71％)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 365 (M + H)+。
Figure 2022507781000297
((1S,4aS,10aR)-6-(ジベンゾイルアミノ)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボン酸(9b))
Figure 2022507781000298
 上で得られた粗化合物8b(計算量15mmol)のDMSO(100mL)溶液に、カリウムtert-ブトキシド(17g、0.15mol)を室温で一度に添加した。LCMSに照らして反応が完結するまで、反応混合物を、アルゴン下、100℃で2時間撹拌した。室温まで冷却後、反応混合物を、氷に注ぎ入れ、水性塩酸塩(4M)でpH 5までゆっくりと酸性化し、その間、温度が、25℃を超えないようにした。混合物を、酢酸エチルで抽出し、合わせた有機溶液を、水及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空下濃縮した。粗生成物を、シリカゲルカラムクロマトグラフィー(石油エーテル中0～20％の酢酸エチル)によって精製すると、化合物9b(6.8g、化合物4から3工程で99％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 454 (M + 1)+。
(ペンタフルオロフェニル (1S,4aS,10aR)-6-(ベンジルオキシ)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキシレート(10a))
Figure 2022507781000299
 9a(9.6g、26mmol)のDMF(100mL)溶液に、DIPEA(14mL、79mmol)及びパーフルオロフェニル 2,2,2-トリフルオロアセテート(15g、53mmol)を添加した。この混合物を、室温で1晩撹拌し、LCMSによりモニタリングした。その後、反応混合物を、エーテル(200mL)で希釈し、水(300mL)及びブライン(200mL)で洗浄した。有機溶液を、硫酸ナトリウムで乾燥した、真空下濃縮した。残渣を、フラッシュクロマトグラフィー(石油エーテル中0～10％の酢酸エチル)によって精製すると、化合物10a(12g、収率88％)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 531 (M + H)+。
Figure 2022507781000300
(ペンタフルオロフェニル (1S,4aS,10aR)-6-(ジベンゾイルアミノ)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキシレート(10b))
Figure 2022507781000301
 9b(6.8g、15mmol)のDMF(100mL)溶液に、DIPEA(10mL、0.61mol)及びパーフルオロフェニル 2,2,2-トリフルオロアセテート(10mL、58mmol)を添加した。この混合物を、窒素下、25℃で1晩撹拌し、その後、エーテルで希釈した。有機物を、水及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空下濃縮した。残渣を、シリカゲルカラムクロマトグラフィー(石油エーテル中0～10％の酢酸エチル)によって精製すると、化合物10b(7.5g、収率81％)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 620 (M + 1)+。
Figure 2022507781000302
(tert-ブチル N-[(4bS,8S,8aR)-8-({[(1S,4aS,10aR)-6-(ベンジルオキシ)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-イル]ホルムアミド}カルボニル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバメート(11a))
Figure 2022507781000303
 化合物6(2.3g、6.2mmol)のTHF(20mL)溶液に、n-BuLi(ヘキサン中2.5M、5.5mL、14mmol)を-78℃で滴下した。反応を、-78℃で1時間撹拌した。混合物に、10a(3.0g、5.6mmol)のTHF(20mL)溶液を添加し、その後、LCMSによりモニタリングして、化合物10aが消費されるまで、得られた混合物10～20℃で1晩撹拌した。反応液を、飽和塩化アンモニウム水でクエンチし、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機溶液を、水及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空下濃縮した。残渣を、フラッシュクロマトグラフィー(石油エーテル中0～30％の酢酸エチル)によって精製すると、化合物11a(1.59g、収率51％)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 719 (M + 1)+。
(下記11bの手順と比較して、n-BuLiを、LiHMDSの代わりにここで使用した。6は、完全には消費されなかったが、この手順は、より少ない副生成物を生じさせ、11aの収率は、約40％から51％に増加した。未反応の化合物6を回収した(回収された収率10～20％)。
(tert-ブチル N-[(4bS,8S,8aR)-8-({[(1S,4aS,10aR)-6-(ジベンゾイルアミノ)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-イル]ホルムアミド}カルボニル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバメート(11b))
Figure 2022507781000304
 化合物6(1g、2.7mmol)のTHF(15mL)溶液に、リチウムビス(トリメチルシリル)アミド(ヘキサン中1M、8.0mL)を0℃で滴下した。反応を、0℃で1時間撹拌した。混合物に、化合物10b(2.5g、4.0mmol)のTHF(10mL)溶液を添加し、その後、得られた混合物を、室温で1晩撹拌した。その後、反応を、飽和塩化アンモニウム水でクエンチし、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機溶液を、水及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空下濃縮した。残渣を、フラッシュクロマトグラフィー(石油エーテル中0～35％の酢酸エチル)によって精製すると、化合物11b(0.95g、収率44％)が白色の固体として得られ;かつ回収された化合物6(回収収率37％)が得られた。ESI m/z: 808 (M + 1)+。
Figure 2022507781000305
(tert-ブチル N-[(4bS,8S,8aR)-8-({[(1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-イル]ホルムアミド}カルボニル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバメート(12a)(P15))
Figure 2022507781000306
 11a(2.0g、2.78mmol)の酢酸エチル(40mL)溶液に、湿潤パラジウム-炭素(10％ Pd、0.9g)を窒素下で添加した。混合物を脱気し、水素でパージし、LCMSによりモニタリングして、11aが完全に消費されるまで、水素風船下、室温で1晩撹拌した。混合物を、セライトに通して濾過し、濾液を真空下濃縮した。残渣を、シリカゲルカラムクロマトグラフィー(石油エーテル中0～55％の酢酸エチル)によって精製すると、12a(P15;1.06g、収率61％)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 629 (M + H)+。
Figure 2022507781000307
(tert-ブチル N-[(4bS,8S,8aR)-8-({[(1S,4aS,10aR)-6-アミノ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-イル]ホルムアミド}カルボニル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバメート(12b))
Figure 2022507781000308
 11b(0.45g、0.56mmol)の酢酸エチル(5mL)溶液に、湿潤パラジウム-炭素(10％Pd、50mg)を窒素下で添加した。混合物を脱気し、水素で3回パージし、水素風船下、室温で1晩撹拌した。混合物を、セライトに通して濾過し、濾液を真空下濃縮すると、化合物12b(0.33g、収率94％)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 628 (M + 1)+。
((1S,4aS,10aR)-N-[(1S,4aS,10aR)-6-アミノ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル]-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキサミド(P1))
Figure 2022507781000309
 化合物12a(0.17g、0.27mmol)のDCM(10mL)溶液に、TFA(3mL)を室温で滴下した。LCMSに照らしてBocが除去されるまで、反応混合物を、室温で1時間撹拌した。揮発性物質を真空中で除去し、残渣を、分取HPLC(方法B)によって精製すると、P1(0.10g、収率70％)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 529.3 (M + 1)+。旋光度(α): +2.53°(1.7g/100mL THF、25℃)。
Figure 2022507781000310
Figure 2022507781000311
Figure 2022507781000312
HPLC(方法B):保持時間:8.92分、純度:99.4％。キラルHPLC:＞99.9％(カラムAD、AS、OD、及びOJ中)。
((1S,4aS,10aR)-6-アミノ-N-((1S,4aS,10aR)-6-アミノ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキサミド(P2))
Figure 2022507781000313
 化合物12b(0.63g、1.0mmol)のDCM(10mL)溶液に、TFA(3mL)を室温で滴下した。LCMSに照らしてBocが除去されるまで、反応混合物を、室温で4時間撹拌した。混合物を、分取HPLC(方法B)によって直接精製すると、P2(0.42g、収率79％)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 528.2 (M + 1)+。
Figure 2022507781000314
(実施例2)
本実施例は、上記表1のポドカルピン酸誘導体P3の合成のための一般的な方法を示している。本実施例は、図2Aにおいて11bからP3の番号が付けられた化合物に言及する。
((3S,8R,9S,10R,13S,14S)-17-イミノ-10,13-ジメチル-2,3,4,7,8,9,10,11,12,13,14,15,16,17-テトラデカヒドロ-1H-シクロペンタ[a]フェナントレン-3-オール、トリフルオロ酢酸塩(P3))
Figure 2022507781000315
 化合物11b(10mg、12μmol)のDCM(2mL)溶液に、TFA(1mL)を添加した。LCMSに照らしてBocが除去されるまで、反応混合物を室温で2時間撹拌した。揮発性物質を真空中で除去し、残渣を、水中5％のアセトニトリルに溶解させた。溶液を、凍結乾燥させると、化合物P3(7mg、収率80％)が淡黄色固体として得られた。ESI m/z: 354.8 (M/2 + H)+。
Figure 2022507781000316
(実施例3)
本実施例は、上記表1におけるポドカルピン酸誘導体P4～P8の合成のための一般的な方法を示す。本実施例は、図2Aにおいて12bからP4～P9、P13、P14、及びP17の番号が付けられた化合物に言及する。
(実施例3a)
（中間体13a～e)
Figure 2022507781000317
 化合物12b(1.0当量)のDMF又はDCM溶液に、Fmoc-アミノ酸(1.1～1.2当量)、HATU(1.2～1.5当量)、及びDIPEA(2.0～3.0当量)を順次添加した。反応混合物を、室温で4時間撹拌した、これを、LCMSによってモニタリングした。混合物を真空下濃縮し(DCMが溶媒である場合)、残渣を、シリカゲルカラムクロマトグラフィー(石油エーテル中0～90％の酢酸エチル)によって精製するか;又は反応混合物(DMFが溶媒である場合)を、逆相フラッシュクロマトグラフィー(重炭酸アンモニウム水(10mM)中50～90％のアセトニトリル)によって直接精製すると、化合物13が白色の固体として得られた。
Figure 2022507781000318
(9H-フルオレン-9-イルメチル N-({[(4bS,8S,8aR)-8-({[(1S,4aS,10aR)-6-{[(tert-ブトキシ)カルボニル]アミノ}-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-イル]ホルムアミド}カルボニル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}メチル)カルバメート(13a))
Figure 2022507781000319
 中間体13a～eのための一般手順に従い、化合物13a(0.14g、収率78％)を、白色の固体として得た。ESI m/z: 907 (M + H)+。
(9H-フルオレン-9-イルメチル N-[(1S)-1-{[(4bS,8S,8aR)-8-({[(1S,4aS,10aR)-6-{[(tert-ブトキシ)カルボニル]アミノ}-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-イル]ホルムアミド}カルボニル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}-2-ヒドロキシエチル]カルバメート(13b))
Figure 2022507781000320
 中間体13a～eのための一般手順に従い、化合物13b(0.39g、収率83％)を、白色の固体として得た。ESI m/z: 938 (M + H)+。
(9H-フルオレン-9-イルメチル N-[(5S)-5-{[(4bS,8S,8aR)-8-({[(1S,4aS,10aR)-6-{[(tert-ブトキシ)カルボニル]アミノ}-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-イル]ホルムアミド}カルボニル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}-5-{[(9H-フルオレン-9-イルメトキシ)カルボニル]アミノ}ペンチル]カルバメート(13c))
Figure 2022507781000321
 中間体13a～eのための一般手順に従い、化合物13c(0.30g、収率78％)を、白色の固体として得た。ESI m/z: 1201 (M + H)+。
((S)-tert-ブチル 3-(((9H-フルオレン-9-イル)メトキシ)カルボニルアミノ)-4-((4bS,8S,8aR)-8-((1S,4aS,10aR)-6-(tert-ブトキシカルボニルアミノ)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニルカルバモイル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イルアミノ)-4-オキソブタノエート(13d))
Figure 2022507781000322
 中間体13a～eのための一般手順に従い、化合物13d(0.43g、収率85％)を、白色の固体として得た。ESI m/z: 1021 (M + H)+。
((S)-tert-ブチル 4-(((9H-フルオレン-9-イル)メトキシ)カルボニルアミノ)-5-((4bS,8S,8aR)-8-((1S,4aS,10aR)-6-(tert-ブトキシカルボニルアミノ)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニルカルバモイル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イルアミノ)-5-オキソペンタノエート(13e))
Figure 2022507781000323
 中間体13a～eのための一般手順に従い、化合物13e(0.42g、収率82％)を、白色の固体として得た。ESI m/z: 1036 (M + H)+。
(実施例3b)
(中間体14a～e)
Figure 2022507781000324
 化合物13(1.0当量)のDCM溶液に、室温でTFAを添加した。反応混合物を室温で1時間撹拌し、真空下濃縮すると、粗生成物14が無色の油状物として得られ、それを、さらに精製することなく次の工程に使用した。
Figure 2022507781000325
(9H-フルオレン-9-イルメチル N-({[(4bS,8S,8aR)-8-({[(1S,4aS,10aR)-6-アミノ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-イル]ホルムアミド}カルボニル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}メチル)カルバメート、トリフルオロ酢酸塩(14a))
Figure 2022507781000326
 中間体14a～eのための一般手順に従い、粗化合物14a(0.14g、収率99％、TFA塩)を、無色の油状物として得た。ESI m/z: 807 (M + 1)+。
(9H-フルオレン-9-イルメチル (S)-1-((4bS,8S,8aR)-8-((1S,4aS,10aR)-6-アミノ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニルカルバモイル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イルアミノ)-3-ヒドロキシ-1-オキソプロパン-2-イルカルバメート、トリフルオロ酢酸塩(14b))
Figure 2022507781000327
 中間体14a～eのための一般手順に従い、粗化合物14b(0.14g、収率99％、TFA塩)を、無色の油状物として得た。ESI m/z: 837 (M + 1)+。
(9H-フルオレン-9-イルメチル N-[(5S)-5-{[(4bS,8S,8aR)-8-({[(1S,4aS,10aR)-6-アミノ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-イル]ホルムアミド}カルボニル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}-5-{[(9H-フルオレン-9-イルメトキシ)カルボニル]アミノ}ペンチル]カルバメート、トリフルオロ酢酸塩(14c))
Figure 2022507781000328
 中間体14a～eのための一般手順に従い、粗化合物14c(0.22g、収率92％、TFA塩)を、無色の油状物として得た。ESI m/z: 1101 (M + 1)+。
((S)-3-(((9H-フルオレン-9-イル)メトキシ)カルボニルアミノ)-4-((4bS,8S,8aR)-8-((1S,4aS,10aR)-6-アミノ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニルカルバモイル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イルアミノ)-4-オキソブタン酸、トリフルオロ酢酸塩(14d))
Figure 2022507781000329
 中間体14a～eのための一般手順に従い、粗化合物14d(0.10g、収率87％、TFA塩)を、無色の油状物として得た。ESI m/z: 866 (M + 1)+。
((S)-4-(((9H-フルオレン-9-イル)メトキシ)カルボニルアミノ)-5-((4bS,8S,8aR)-8-((1S,4aS,10aR)-6-アミノ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニルカルバモイル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イルアミノ)-5-オキソペンタン酸、トリフルオロ酢酸塩(14e))
Figure 2022507781000330
 中間体14a～eのための一般手順に従い、粗化合物14e(84mg、収率86％、TFA塩)を、無色の油状物として得た。ESI m/z: 880 (M + 1)+。
(実施例3c)
(ペイロードP4～9、13、14、及び17)
Figure 2022507781000331
 上で得られた粗生成物14のDMF溶液に、ピペリジンを添加した。混合物を、室温で30分撹拌し、これを、LCMSによってモニタリングした。混合物を、分取HPLC(方法B)によって直接精製すると、ペイロードP4～8が白色の固体として得られた。
Figure 2022507781000332
((1S,4aS,10aR)-N-[(1S,4aS,10aR)-6-(2-アミノアセトアミド)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル]-6-アミノ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキサミド(P4))
Figure 2022507781000333
 ペイロードP4～8のための一般手順に従い、化合物P4(12mg、収率28％)を、白色の固体として得た。ESI m/z: 585 (M + 1)+。
Figure 2022507781000334
((1S,4aS,10aR)-6-アミノ-N-((1S,4aS,10aR)-6-((S)-2-アミノ-3-ヒドロキシプロパンアミド)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキサミド(P5))
Figure 2022507781000335
 ペイロードP4～8のための一般手順に従い、化合物P5 (41mg、収率67％)を、白色の固体として得た。ESI m/z: 615 (M + 1)+。
Figure 2022507781000336
((1S,4aS,10aR)-6-アミノ-N-((1S,4aS,10aR)-6-((S)-2,6-ジアミノヘキサンアミド)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキサミド(P6))
Figure 2022507781000337
 ペイロードP4～8のための一般手順に従い、化合物P6(5mg、収率17％)を、白色の固体として得た。ESI m/z: 656 (M + 1)+。
Figure 2022507781000338
((S)-3-アミノ-4-((4bS,8S,8aR)-8-((1S,4aS,10aR)-6-アミノ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニルカルバモイル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イルアミノ)-4-オキソブタン酸(P7))
Figure 2022507781000339
 ペイロードP4～8のための一般手順に従い、化合物P7(39mg、収率51％)を、白色の固体として得た。ESI m/z: 643 (M + 1)+。
Figure 2022507781000340
((S)-4-アミノ-5-((4bS,8S,8aR)-8-((1S,4aS,10aR)-6-アミノ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニルカルバモイル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イルアミノ)-5-オキソペンタン酸(P8))
Figure 2022507781000341
 ペイロードP4～8のための一般手順に従い、化合物P8(44mg、収率58％)を、白色の固体として得た。ESI m/z: 657 (M + 1)+。
Figure 2022507781000342
((1S,4aS,10aR)-6-アミノ-N-((1S,4aS,10aR)-6-((S)-2-アミノ-3-(1H-イミダゾール-4-イル)プロパンアミド)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキサミド(P9))
Figure 2022507781000343
 Fmoc-His-OH(0.38g、1.0mmol)のDCM(5mL)溶液に、Fmoc-OSu(0.37g、1.1mmol)及びDIPEA(0.26g、2.0mmol)を添加した。反応混合物を、室温で1晩撹拌した。揮発性物質を真空中で除去し、残渣を、フラッシュクロマトグラフィー(DCM中5～10％のメタノール)によって精製して、Fmoc-His(Fmoc)-OH(0.50g、収率84％、ESI m/z: 600 (M + 1)+)を白色の固体として得た。
化合物12b(0.31g、0.50mmol)のDCM(20mL)溶液に、上で得られたFmoc-His(Fmoc)-OH(0.33g、0.55mmol)、HATU(0.23g、0.60mmol)、及びDIPEA(0.19g、1.5mmol)を順次添加した。得られた混合物を、室温で4時間撹拌し、これを、LCMSによってモニタリングした。この反応混合物に、ピペリジン(0.5mL)を添加し、LCMSによりモニタリングして、Fmocが、完全に除去されるまで、混合物を室温で1時間撹拌した。混合物を真空下濃縮し、残渣を、逆相フラッシュクロマトグラフィー(水中50～80％のアセトニトリル)によって精製して、Boc-P9(0.15g)を白色の固体として得て、そのうちの半分を、DCM(20mL)に溶解させた。この溶液に、TFA(3mL)を添加した。LCMSに照らしてBocが除去されるまで、混合物を室温で1時間撹拌した。揮発性物質を真空中で除去し、残渣を、分取HPLC(方法B)によって精製すると、化合物P9(17mg、収率12％)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 665 (M + 1)+。
Figure 2022507781000344
((1S,4aS,10aR)-N-[(1S,4aS,10aR)-6-アミノ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル]-6-[(2S)-2-アミノプロパンアミド]-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキサミド(P13))
Figure 2022507781000345
 Fmoc-His(Fmoc)-OHの代わりにFmoc-Ala-OHを用いたことを除いてP9と類似の手順に従い、ペイロードP13(12mg、収率59％)を、白色の固体として得た。
Figure 2022507781000346
((1S,4aS,10aR)-N-[(1S,4aS,10aR)-6-(2-ヒドロキシアセトアミド)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル]-6-アミノ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキサミド(P14))
Figure 2022507781000347
 DMF(2.0mL)中のグリコール酸(2.2mg、29μmol)及びHATU(18.2mg、48μmol)の混合物に、DIPEA(12μL、72μmol)及び化合物12b(15mg、24μmol)を添加した。反応混合物を室温で2時間撹拌し、これを、LCMSによってモニタリングした。得られた混合物を、逆相フラッシュクロマトグラフィー(重炭酸アンモニウム水(10mM)中0～100％のアセトニトリル)によって直接精製すると、Boc-P14が得られ、これを、DCM(2mL)中に溶解させた。この溶液に、TFA(0.5mL)を添加し、LCMSによってモニタリングしてBocが完全に除去されるまで、混合物を室温で2時間撹拌した。得られた混合物を真空下濃縮し、残渣を、分取HPLC(方法B)によって精製すると、ペイロードP14(4.3mg、収率31％)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 686.5 (M + 1)+。
Figure 2022507781000348
((1S,4aS,10aR)-N-[(1S,4aS,10aR)-6-(2-ヒドロキシアセトアミド)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル]-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキサミド(P17))
Figure 2022507781000349
 ペイロードP1(10mg、0.019mmol)のDMF(2mL)溶液に、HATU(14mg、0.038mmol)及びDIPEA(9.8mg、0.076mmol)を室温で添加した。混合物を、室温で15分間撹拌してから、グリコール酸(1.73mg、0.0228mmol)を添加した。反応混合物を室温で撹拌し、これを、LCMSによってモニタリングした。得られた混合物を、分取HPLC(方法B)によって直接精製すると、P17(5.7mg、収率51％)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 587.4 (M + 1)+。
Figure 2022507781000350
(実施例4)
本実施例は、上記表1におけるポドカルピン酸誘導体P10及びP11の合成のための一般的な方法を示す。本実施例は、図2Bにおいて14a、15a-b、並びにP10及びP11の番号が付けられた化合物に言及する。
((S)-tert-ブチル 4-アミノ-5-((4bS,8S,8aR)-8-((1S,4aS,10aR)-6-(2-アミノアセトアミド)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニルカルバモイル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イルアミノ)-5-オキソペンタノエート、ジ-トリフルオロ酢酸塩(15a))
Figure 2022507781000351
 Fmoc-Glu(OtBu)-OH(74mg、0.17mmol)及びDIPEA(55μL、0.32mmol)のDMF(5.0mL)溶液に、HATU(91mg、0.24mmol)を添加した。混合物を、室温で15分間撹拌してから、化合物14a(0.14g、0.16mmol)を添加した。反応混合物を、室温で1晩撹拌し、これを、LCMSによってモニタリングした。その後、反応混合物に、ピペリジン(1mL)を滴加した。LCMSに照らしてFmocが完全に除去されるまで、反応混合物を室温で1時間撹拌した得られた混合物を、逆相フラッシュクロマトグラフィー(TFA水(0.01％)中0～100％のアセトニトリル)によって直接分離すると、化合物15a(0.13g、収率80％)が黄色の固体として得られた。ESI m/z: 770.5 (M + 1)+。
((4S,4'S)-tert-ブチル 5,5'-(4bS,4b'S,8S,8aR,8'S,8a'R)-8,8'-(アザンジイルビス(オキソメチレン))ビス(4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-8,3-ジイル)ビス(アザンジイル)ビス(4-アミノ-5-オキソペンタノエート)ジ-トリフルオロ酢酸塩(15b))
Figure 2022507781000352
 Fmoc-Glu(OtBu)-OH(0.15g、0.35mmol)及びDIPEA(83μL、0.48mmol)のDMF(5.0mL)溶液に、HATU(0.15g、0.40mmol)を添加した。混合物を、室温で30分間撹拌してから、化合物P2(0.10g、0.16mmol)を添加した。反応混合物を、室温で1晩撹拌し、これを、LCMSによってモニタリングした。その後、反応混合物に、ピペリジン(1mL)を滴加した。LCMSに照らしてFmocが完全に除去されるまで、反応混合物を室温で3時間撹拌した。得られた混合物を、逆相フラッシュクロマトグラフィー(TFA水(0.01％)中0～100％のアセトニトリル)によって直接分離すると、化合物15b(0.14g、収率78％)が黄色の固体として得られた。ESI m/z: 899 (M + 1)+。
((S)-4-アミノ-5-((4bS,8S,8aR)-8-((1S,4aS,10aR)-6-(2-アミノアセトアミド)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニルカルバモイル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イルアミノ)-5-オキソペンタン酸(P10))
Figure 2022507781000353
 ニートのTFA(2.0mL)中の化合物15a(0.13g、0.13mmol)の混合物を、室温で1時間撹拌し、これを、LCMSによってモニタリングした。得られた混合物を、DCM(20mL)で希釈し、真空下濃縮した。残渣を、逆相フラッシュクロマトグラフィー(重炭酸ナトリウム水(10mM)中0～100％のアセトニトリル)によって精製すると、P10(20mg、収率22％)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 358 (M/2 + 1)+; 714.5 (M + 1)+。
Figure 2022507781000354
((4S,4'S)-5,5'-(4bS,4b'S,8S,8aR,8'S,8a'R)-8,8'-(アザンジイルビス(オキソメチレン))ビス(4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-8,3-ジイル)ビス(アザンジイル)ビス(4-アミノ-5-オキソペンタン酸)(P11))
Figure 2022507781000355
 ニートのTFA(3.0mL)中の化合物15b(0.14g、0.14mmol)の混合物を、室温で1時間撹拌し、これを、LCMSによってモニタリングした。得られた混合物を、DCM(30mL)で希釈し、真空下濃縮した。残渣を、逆相フラッシュクロマトグラフィー(重炭酸ナトリウム水(10mM)中0～100％のアセトニトリル)によって精製すると、P11(20mg、収率18％)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 394 (M/2 + 1)+。
Figure 2022507781000356
(実施例4a)
本実施例は、上記表1におけるポドカルピン酸誘導体P19の合成のための一般的な方法を示す。本実施例は、図2Cの化合物に言及する。
((4bS,8S,8aR)-8-{[(1S,4aS,10aR)-6-{[(tert-ブトキシ)カルボニル]アミノ}-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル]カルバモイル}-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル tert-ブチル カーボネート(16))
Figure 2022507781000357
 tert-ブタノール(2mL)中のペイロードP1(0.10g、0.19mmol)の混合物に、炭酸カリウム(78mg、0.57mmol)及びBoc無水物(0.12g、0.57mmol)を室温で添加し、反応混合物を60℃で3時間撹拌し、これを、LCMSによってモニタリングした。その後、得られた混合物を冷却し、真空下濃縮した。残渣を、DCM(100mL)中に溶解させ、溶液を、水及びブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空下濃縮すると、粗生成物16(0.14g、粗体)が白色の固体として得られ、それを、さらに精製することなく次の工程に使用した。ESI m/z: 729.4 (M + 1)+。
((4bS,8S,8aR)-8-{[(1S,4aS,10aR)-7-ブロモ-6-{[(tert-ブトキシ)カルボニル]アミノ}-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル]カルバモイル}-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル tert-ブチル カーボネート(17))
Figure 2022507781000358
 DMF(4mL)中の粗化合物16(0.14g、上で得られたもの)の溶液に、NBS(50mg、0.28mmol)を添加し、反応混合物を室温で1晩撹拌し、これを、LCMSによってモニタリングした。得られた混合物を、逆相フラッシュクロマトグラフィー(TFA水(0.01％)中0～100％のアセトニトリル)によって直接精製すると、化合物17(40mg、2工程で収率26％)が黄色の固体として得られた。ESI m/z: 807.3 (M + 1)+。
((4bS,8S,8aR)-8-{[(1S,4aS,10aR)-6-{[(tert-ブトキシ)カルボニル]アミノ}-7-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル]カルバモイル}-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル tert-ブチル カーボネート(19))
Figure 2022507781000359
 乾燥ジオキサン(5mL)中の化合物17(40mg、50μmol)、酢酸カリウム(12mg、0.12mmol)、及びビス(ピナコラト)ジボロン18(50mg、0.20mmol)の混合物を、脱気し、窒素で3回パージした。該混合物に、Pd(dppf)Cl2(1.8mg、2.5μmol)を窒素下で添加した。得られた懸濁液を、窒素下、90℃で30分間撹拌し、これを、LCMSによってモニタリングした。その後、混合物を、RTまで冷却し、セライトに通して濾過した。濾液に、過酸化水素(30％水溶液、2.0mL)を、0℃で10分かけて滴加した。反応混合物を、0℃でさらに30分間撹拌し、これを、LCMSによってモニタリングした。その後、得られた混合物を、逆相フラッシュクロマトグラフィー(TFA水(0.01％)中0～100％のアセトニトリル)によって直接精製すると、粗化合物19(35mg、50％純度、粗収率95％)が黄色の固体として得られ、それを、さらに精製することなく次の工程に使用した。ESI m/z: 745.5 (M + 1)+。
((1S,4aS,10aR)-N-[(1S,4aS,10aR)-6-アミノ-7-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル]-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキサミド(P19))
Figure 2022507781000360
 粗化合物19(35mg、上で得られたもの)のDCM(5mL)溶液に、TFA(2mL)0℃で5分かけて滴加した。反応混合物を、Bocが完全に除去されるまで、室温で30分間撹拌した(これは、LCMSによってモニタリングされた)。揮発性物質を真空中で除去し、残渣を、分取HPLC(方法A)によって精製すると、ペイロードP19(6.5mg、化合物17からの収率24％)がオフホワイトの固体として得られた。ESI m/z: 545.3 (M + 1)+。
Figure 2022507781000361
(実施例5)
本実施例は、上記表2におけるリンカー-ペイロードLP1～LP5、及びLP20の合成のための方法を示す。本実施例は、図3の12b及び102a～b～106a～eの番号が付けられた化合物並びにリンカー-ペイロードLP1～LP5に言及する。
(実施例5a)
(中間体102a～b)
Figure 2022507781000362
 酸(Fmoc-Val-Ala-OH(101a、1.2当量)又はFmoc-Val-Cit-OH(101b、1.2当量)のDMF溶液に、HATU(1.2当量)及びDIPEA(2.0～3.0当量)を室温で添加した。混合物を室温で5分間撹拌した後に、化合物12b(1.0当量)を添加した。LCMSに照らしてアミンが消費されるまで、得られた混合物を室温で4～20時間撹拌した。その後、該混合物に、ピペリジン(過剰)を添加し、LCMSによりモニタリングして、Fmocが完全に除去されるまで、混合物を室温で1～6時間撹拌した。反応混合物を、膜に通して濾過し、濾液を分取HPLC(方法B)又は逆相フラッシュクロマトグラフィーによって直接精製すると、化合物102(収率38～72％)が白色の固体として得られた。
Figure 2022507781000363
(tert-ブチル N-[(4bS,8S,8aR)-8-({[(1S,4aS,10aR)-6-[(2S)-2-[(2S)-2-アミノ-3-メチルブタンアミド]プロパンアミド]-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-イル]カルボニル}カルバモイル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバメート(102a))
Figure 2022507781000364
 中間体102a、bのための一般手順に従い、化合物102a(0.29g、収率72％)を、白色の固体として得た。ESI m/z: 799 (M + 1)+。
(tert-ブチル N-[(4bS,8S,8aR)-8-({[(1S,4aS,10aR)-6-[(2S)-2-[(2S)-2-アミノ-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-イル]カルボニル}カルバモイル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバメート(102b))
Figure 2022507781000365
 中間体102a、bのための一般手順に従い、化合物102b(0.27g、収率38％)を、白色の固体として得た。ESI m/z: 885 (M + 1)+。
(実施例5b)
(中間体104a～b)
(tert-ブチル N-[(4bS,8S,8aR)-8-({[(1S,4aS,10aR)-6-[(2S)-2-[(2S)-2-{2-アミノ-6-[2-(シクロオクタ-2-イン-1-イルオキシ)アセトアミド]ヘキサンアミド}-3-メチルブタンアミド]プロパンアミド]-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-イル]カルボニル}カルバモイル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバメート(104a))
Figure 2022507781000366
 化合物103(70mg、0.13mmol)のDMF(2mL)溶液に、HATU(68mg、0.18mmol)及びDIPEA(44μL、0.24mmol)を室温で添加した。混合物を室温で5分間撹拌してから、化合物102a(95mg、0.12mmol)を添加した。その後、LCMSによりモニタリングして化合物102aが完全に消費されるまで、反応混合物を室温で3時間撹拌した。その後、反応混合物に、ピペリジン(0.5mL、過剰)を添加した。混合物を、室温で2時間撹拌した。その後、混合物を濾過し、濾液を濃縮した。残渣を、逆相フラッシュクロマトグラフィー(重炭酸アンモニウム水(10mM)中0～100％のアセトニトリル)によって精製すると、化合物104a(0.13g、収率96％)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 518.0 ((M-55)/2)+。
(tert-ブチル N-[(4bS,8S,8aR)-8-({[(1S,4aS,10aR)-6-[(2S)-2-[(2S)-2-{2-アミノ-6-[2-(シクロオクタ-2-イン-1-イルオキシ)アセトアミド]ヘキサンアミド}-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-イル]カルボニル}カルバモイル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバメート(104b))
Figure 2022507781000367
 化合物103(0.27g、0.31mmol)及びDIPEA(0.11mL、0.61mmol)のDMF(6mL)溶液に、化合物102b(0.18g、0.34mmol)を添加し、それに続き、HATU(0.14g、0.37mmol)を添加した。反応混合物を室温で3時間撹拌し、これを、LCMSによってモニタリングした。得られた溶液を、逆相フラッシュクロマトグラフィーによって直接精製すると、化合物Fmoc-104b(0.30g、ESI m/z: 711 ((M + Na)/2 +1)+)が淡黄色の固体として得られ、これを、DCM(6.0mL)に溶解させた。この溶液に、ピペリジン(0.5mL)を添加し、LCMSに照らしてFmocが完全に除去されるまで、反応混合物を室温で2時間撹拌した。揮発性物質を真空中で除去し、残渣を石油エーテルでトリチュレートすると、化合物104b(0.26g、収率65％)が淡黄色固体として得られた。ESI m/z: 1177.6 ((M + H)+。
(実施例5c)
(中間体105a～c)
アジド中間体α-CD-N3(105a)を、J. Am. Chem. Soc., 2012, 134(46), 19108-19117に従って合成した(図10)。
(アジド-15-オキソ-3,6,9,12-テトラオキサ-16-アザオクタデカン-18-スルホン酸(105b)(図11))
2,5-ジオキソピロリジン-1-イル 1-アジド-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-オエート(N3-PEG4-OSu、0.10g、0.26mmol)及びタウリン105b-A(39mg、0.31mmol)の無水DMF(4mL)溶液に、DIPEA(15mg、0.52mmol)を添加した。混合物を、室温で1晩撹拌した。反応混合物を濾過し、溶液を、分取HPLC(方法A)によって精製すると、中間体105b(0.80g、収率78％)が無色の油状物として得られた。ESI m/z: 399.1 (M + H)+。
Figure 2022507781000368
([2-(1-アジド-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド)エチル]トリメチルアザニウムクロリド(105d)))
105b-Aの代わりに105d-Aを用いたことを除き上記105bのためのものと類似の手順に従い、トリメチルアンモニウムクロリド105d(0.13g、収率64％)を、無色の油状物として得た。ESI m/z: 376 (M + H)+。
Figure 2022507781000369
アジド中間体マルトース-N3(105c)を、Tetrahedron Letters, 2001, 42 (7), 1325-1328に従って合成した(図12)。
(実施例5d)
(中間体106a～f)
Figure 2022507781000370
 化合物104のDMF溶液に、アジド中間体105を室温で添加した。LCMSにより完全な反応が示されるまで、反応を、室温で3～48時間撹拌した。反応混合物を、分取HPLCによって直接精製すると、化合物Boc-106が白色の固体として得られ、これを、TFA溶液(又はニートのTFA)に溶解させた。LCMSに照らしてBocが除去されるまで、該溶液を室温で0.5～20時間撹拌した。該溶液を濃縮すると、106が(TFA塩として)得られた。
Figure 2022507781000371
 *全てのBoc-106aを、脱Bocに使用したわけではない。
((1S,4aS,10aR)-N-[(1S,4aS,10aR)-6-アミノ-1,4a-ジメチル-2,3,4,9,10,10a-ヘキサヒドロフェナントレン-1-カルボニル]-6-[(2S)-2-[(2S)-2-[(2R)-2-アミノ-6-{2-[(1-{[31,32,33,34,35,36,37,38,39,40,41,42-ドデカヒドロキシ-10,15,20,25,30-ペンタキス(ヒドロキシメチル)-2,4,7,9,12,14,17,19,22,24,27,29-ドデカオキサヘプタシクロ[26.2.2.23,6.28,11.213,16.218,21.223,26]ドテトラコンタン-5-イル]メチル}-4H,5H,6H,7H,8H,9H-シクロオクタ[d][1,2,3]トリアゾール-4-イル)オキシ]アセトアミド}ヘキサンアミド]-3-メチルブタンアミド]プロパンアミド]-1,4a-ジメチル-2,3,4,9,10,10a-ヘキサヒドロフェナントレン-1-カルボキサミドトリフルオロ酢酸塩(106a))
Figure 2022507781000372
 中間体106a～eのための一般手順に従い、化合物Boc-106a(72mg、収率76％、トリアゾール位置異性体の混合物として)を白色の固体として得た(ESI m/z: 1045 (M/2 + 1)+)。逆相フラッシュクロマトグラフィー(TFA水(0.01％)中0～60％のアセトニトリル)によるさらなる精製の後、少量の純粋な主要異性体(7mg)を得ることができ、これを1H NMR(500MHz、DMSOd6)により決定した。
Figure 2022507781000373
 DCM(3mL)中のBoc-106a(位置異性体の混合物として)(20mg、9.6μmol)の混合物に、TFA(1mL)を添加した。LCMSによりモニタリングして、Bocが除去されるまで、得られた混合物を室温で1時間撹拌した。揮発性物質を真空中で除去すると、化合物106a(19mg、104aからの収率69％)が淡黄色の固体として得られ、それを、さらに精製することなく次の工程に使用した。ESI m/z: 995 (M/2 + 1)+。
((1S,4aS,10aR)-N-{[(1S,4aS,10aR)-6-[(2S)-2-[(2S)-2-[(2R)-2-アミノ-6-{2-[(1-{[31,32,33,34,35,36,37,38,39,40,41,42-ドデカヒドロキシ-10,15,20,25,30-ペンタキス(ヒドロキシメチル)-2,4,7,9,12,14,17,19,22,24,27,29-ドデカオキサヘプタシクロ[26.2.2.23,6.28,11.213,16.218,21.223,26]ドテトラコンタン-5-イル]メチル}-1H,4H,5H,6H,7H,8H,9H-シクロオクタ[d][1,2,3]トリアゾール-4-イル)オキシ]アセトアミド}ヘキサンアミド]-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-イル]カルボニル}-6-アミノ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキサミドトリフルオロ酢酸塩(106b))
Figure 2022507781000374
 中間体106a～eのための一般手順に従い、化合物106b(76mg、104bからの収率87％)を、黄色の固体として得た。ESI m/z: 692 (M/3 + 1)+。
((1-(4-(2-(((R)-5-アミノ-6-(((S)-1-(((S)-1-(((4bS,8S,8aR)-8-(((1S,4aS,10aR)-6-アミノ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル)カルバモイル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)アミノ)-3-メチル-1-オキソブタン-2-イル)アミノ)-6-オキソヘキシル)アミノ)-2-オキソエトキシ)-4,5,6,7,8,9-ヘキサヒドロ-1H-シクロオクタ[d][1,2,3]トリアゾール-1-イル)-15-オキソ-3,6,9,12-テトラオキサ-16-アザオクタデカン-18-スルホン酸(106c))
Figure 2022507781000375
 中間体106a～eのための一般手順に従い、化合物106c(90mg、104cからの収率39％)を、黄色の固体として得た。ESI m/z: 463.8 (M/3 + 1)+。
(1-(4-(((6S,9S,12R)-1,12-ジアミノ-6-(((4bS,8S,8aR)-8-(((1S,4aS,10aR)-6-アミノ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル)カルバモイル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル)カルバモイル)-9-イソプロピル-1,8,11,18-テトラオキソ-2,7,10,17-テトラアザノナデカン-19-イル)オキシ)-4,5,6,7,8,9-ヘキサヒドロ-1H-シクロオクタ[d][1,2,3]トリアゾール-1-イル)-15-オキソ-3,6,9,12-テトラオキサ-16-アザオクタデカン-18-スルホン酸(106d))
Figure 2022507781000376
 中間体106a～eのための一般手順に従い、逆相フラッシュクロマトグラフィー(水中0～80％のアセトニトリル、25分間)による精製の後に、そのTFA塩としての化合物106d(22mg、収率36％)を白色の固体として得た。ESI m/z: 788 (M/2 + H)+。
((1S,4aS,10aR)-6-アミノ-N-((1S,4aS,10aR)-6-((2S)-2-((2S)-2-((2R)-2-アミノ-6-(2-((1-((2S,3R,4R,5S,6R)-3,4-ジヒドロキシ-6-(ヒドロキシメチル)-5-(((2R,3R,4S,5S,6R)-3,4,5-トリヒドロキシ-6-(ヒドロキシメチル)テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)オキシ)テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-3a,4,5,6,7,8,9,9a-オクタヒドロ-1H-シクロオクタ[d][1,2,3]トリアゾール-4-イル)オキシ)アセトアミド)ヘキサンアミド)-3-メチルブタンアミド)プロパンアミド)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキサミド(106e))
Figure 2022507781000377
 中間体106a～eのための一般手順に従い、そのTFA塩としての化合物106e(34mg、収率77％)を、無色の油状物として得た。ESI m/z: 1358 (M + H)+。
((2-{1-[4-({[(5R)-5-アミノ-5-{[(1S)-1-{[(1S)-1-{[(4bS,8S,8aR)-8-({[(1S,4aS,10aR)-6-アミノ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-イル]ホルムアミド}カルボニル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}エチル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]カルバモイル}ペンチル]カルバモイル}メトキシ)-1H,4H,5H,6H,7H,8H,9H-シクロオクタ[d][1,2,3]トリアゾール-1-イル]-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド}エチル)トリメチルアザニウム トリフルオロアセテート(106f))
Figure 2022507781000378
 一般手順に従い、化合物106f(20mg、104aからの収率42％)を、白色の固体として得た。ESI m/z: 455.8 (M/3)+。
(実施例5e)
(リンカー-ペイロードLP1～LP5及びLP20)
Figure 2022507781000379
 化合物106のDMF溶液に、化合物DIBAC-PEG4-NHS 107及びDIPEAを室温で添加した。反応混合物を、室温で3時間撹拌した。反応混合物を、分取HPLC(方法B)又は逆相フラッシュクロマトグラフィー(方法B)によって直接精製すると、化合物LP1～5及びLP20が得られた。
Figure 2022507781000380
 *遊離塩基としての7mgの化合物106aを、再利用した。
(1-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4(9),5,7,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)-N-[(1R)-1-{[(1S)-1-{[(1S)-1-{[(4bS,8S,8aR)-8-{[(1S,4aS,10aR)-6-アミノ-1,4a-ジメチル-2,3,4,9,10,10a-ヘキサヒドロフェナントレン-1-カルボニル]カルバモイル}-4b,8-ジメチル-5,6,7,8a,9,10-ヘキサヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}エチル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]カルバモイル}-5-{2-[(1-{[31,32,33,34,35,36,37,38,39,40,41,42-ドデカヒドロキシ-10,15,20,25,30-ペンタキス(ヒドロキシメチル)-2,4,7,9,12,14,17,19,22,24,27,29-ドデカオキサヘプタシクロ[26.2.2.23,6.28,11.213,16.218,21.223,26]ドテトラコンタン-5-イル]メチル}-4H,5H,6H,7H,8H,9H-シクロオクタ[d][1,2,3]トリアゾール-4-イル)オキシ]アセトアミド}ペンチル]-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド(LP1))
Figure 2022507781000381
 リンカー-ペイロードLP1～5のための一般手順に従い、リンカー-ペイロードLP1(8mg、収率36％)を、白色の固体として得た。ESI m/z: 842 (M/3 + 1)+; 1262 (M/2 + 1)+。
Figure 2022507781000382
分析的HPLC: 95％、保持時間: 7.93分(方法B)。
(1-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4(9),5,7,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)-N-[(1R)-1-{[(1S)-1-{[(1S)-1-{[(4bS,8S,8aR)-8-({[(1S,4aS,10aR)-6-アミノ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-イル]ホルムアミド}カルボニル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}-4-(カルバモイルアミノ)ブチル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]カルバモイル}-5-{2-[(1-{[31,32,33,34,35,36,37,38,39,40,41,42-ドデカヒドロキシ-10,15,20,25,30-ペンタキス(ヒドロキシメチル)-2,4,7,9,12,14,17,19,22,24,27,29-ドデカオキサヘプタシクロ[26.2.2.23,6.28,11.213,16.218,21.223,26]ドテトラコンタン-5-イル]メチル}-1H,4H,5H,6H,7H,8H,9H-シクロオクタ[d][1,2,3]トリアゾール-4-イル)オキシ]アセトアミド}ペンチル]-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド(LP2))
Figure 2022507781000383
 リンカー-ペイロードLP1～5のための一般手順に従い、リンカー-ペイロードLP2 (20mg、収率21％)を、白色の固体として得た。ESI m/z: 870 (M/3 + H)+。
Figure 2022507781000384
 分析的HPLC: 100％、保持時間: 7.35分(方法B)。溶解度:＜0.1mg/mL 水。
(2-{1-[4-({[(5R)-5-[1-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4(9),5,7,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド]-5-{[(1S)-1-{[(1S)-1-{[(4bS,8S,8aR)-8-({[(1S,4aS,10aR)-6-アミノ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-イル]カルボニル}カルバモイル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}エチル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]カルバモイル}ペンチル]カルバモイル}メトキシ)-1H,4H,5H,6H,7H,8H,9H-シクロオクタ[d][1,2,3]トリアゾール-1-イル]-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド}エタン-1-スルホン酸(LP3))
Figure 2022507781000385
 リンカー-ペイロードLP1～5のための一般手順に従い、リンカー-ペイロードLP3(60mg、収率52％)を、白色の固体として得た。ESI m/z: 642 (M/3 + H)+。
Figure 2022507781000386
(2-{1-[4-({[(5R)-5-[1-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4(9),5,7,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド]-5-{[(1S)-1-{[(1S)-1-{[(4bS,8S,8aR)-8-({[(1S,4aS,10aR)-6-アミノ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-イル]カルボニル}カルバモイル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}-4-(カルバモイルアミノ)ブチル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]カルバモイル}ペンチル]カルバモイル}メトキシ)-1H,4H,5H,6H,7H,8H,9H-シクロオクタ[d][1,2,3]トリアゾール-1-イル]-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド}エタン-1-スルホン酸(LP4))
Figure 2022507781000387
 リンカー-ペイロードLP1～5のための一般手順に従い、化合物LP4(6.0mg、収率20％)を、白色の固体として得た。ESI m/z: 671 (M/3 + H)+。
Figure 2022507781000388
(1-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4(9),5,7,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)-N-[(1R)-1-{[(1S)-1-{[(1S)-1-{[(4bS,8S,8aR)-8-{[(1S,4aS,10aR)-6-アミノ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル]カルバモイル}-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}エチル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]カルバモイル}-5-[2-({1-[(2S,3R,4R,5S,6R)-3,4-ジヒドロキシ-6-(ヒドロキシメチル)-5-{[(2R,3R,4S,5S,6R)-3,4,5-トリヒドロキシ-6-(ヒドロキシメチル)オキサン-2-イル]オキシ}オキサン-2-イル]-1H,4H,5H,6H,7H,8H,9H-シクロオクタ[d][1,2,3]トリアゾール-4-イル}オキシ)アセトアミド]ペンチル]-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド(LP5))
Figure 2022507781000389
 リンカー-ペイロードLP1～5のための一般手順に従い、化合物LP5(15mg、収率27％)を、白色の固体として得た。ESI m/z: 947 (M/2 + H)+。
Figure 2022507781000390
((2-{1-[4-({[(5R)-5-[1-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4(9),5,7,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド]-5-{[(1S)-1-{[(1S)-1-{[(4bS,8S,8aR)-8-({[(1S,4aS,10aR)-6-アミノ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-イル]ホルムアミド}カルボニル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}エチル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]カルバモイル}ペンチル]カルバモイル}メトキシ)-1H,4H,5H,6H,7H,8H,9H-シクロオクタ[d][1,2,3]トリアゾール-1-イル]-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド}エチル)トリメチルアザニウム トリフルオロアセテート(LP20))
Figure 2022507781000391
 リンカー-ペイロードLP1～5のための一般手順に従い、化合物LP20(7mg、収率24％)を、白色の固体として得た。ESI m/z: 950.8 (M/2)+。
(実施例6)
(リンカー-ペイロードLP6)
本実施例は、上記表2におけるリンカー-ペイロードLP6の合成のための方法を示す。本実施例は、図4において109～113及びリンカー-ペイロードLP6の番号が付けられた化合物に言及する。
(1-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4(9),5,7,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)-N-[(1S)-1-{[(1S)-4-(カルバモイルアミノ)-1-{[4-(ヒドロキシメチル)フェニル]カルバモイル}ブチル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド(110))
Figure 2022507781000392
 化合物108(0.30g、0.54mmol)のDMF(10mL)溶液に、HATU(0.31g、0.81mmol)及びDIPEA(0.14g、1.1mmol)を室温で順次添加した。混合物を、室温で15分間撹拌した。その後、反応溶液に、VC-PAB-OH 109(CAS:159857-79-1、0.21g、0.54mmol)を室温で添加し、LCMSによりモニタリングして、108又は109が消費されるまで、得られた混合物を室温で3時間撹拌した。その後、反応混合物を、濾過膜に通して濾過し、濾液を濃縮し、逆相フラッシュクロマトグラフィー(水(10mmol/Lの重炭酸アンモニウムを含有)中0～100％のアセトニトリル)によって直接精製すると、化合物110(0.30g、収率60％)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 617 (M + H)+。
({4-[(2S)-2-[(2S)-2-[1-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4(9),5,7,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド]-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メチル 4-ニトロフェニル カーボネート(112))
Figure 2022507781000393
 化合物110(0.15g、0.16mmol)のDMF(10mL)溶液に、ビス(4-ニトロフェニル) カーボネート111(0.15g、0.49mmol)及びDIPEA(63mg、0.49mmol)を0℃で順次添加した。その後、LCMSによりモニタリングして、110が消費されるまで、混合物を室温で3時間撹拌した。反応混合物を、濾過膜に通して濾過し、濾液を濃縮し、逆相フラッシュクロマトグラフィー(水(10mmol/Lの重炭酸アンモニウムを含む)中0～100％のアセトニトリル)によって直接精製すると、化合物112(50mg、収率28％)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 1079 (M + H)+。
(9H-フルオレン-9-イルメチル N-({[(4bS,8S,8aR)-8-({[(1S,4aS,10aR)-6-{[({4-[(2S)-2-[(2S)-2-[1-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4(9),5,7,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド]-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メトキシ)カルボニル]アミノ}-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-イル]ホルムアミド}カルボニル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}メチル)カルバメート(113))
Figure 2022507781000394
 DMF(5mL)中の化合物14a(0.10g、0.12mmol)及び化合物112(0.15g、0.14mmol)の混合物に、HOBt(20mg、0.15mmol)及びDIPEA(48mg、0.37mmol)を添加し、混合物を室温で4時間撹拌し、これを、LCMSによってモニタリングした。反応混合物を、分取HPLC(方法B)によって精製すると、化合物113(0.16g、収率72％)が淡黄色固体として得られた。ESI m/z: 874 (M/2 + 1)+。
({4-[(2S)-2-[(2S)-2-[1-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4(9),5,7,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド]-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メチル N-[(4bS,8S,8aR)-8-{[(1S,4aS,10aR)-6-(2-アミノアセトアミド)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル]カルバモイル}-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバメート(LP6))
Figure 2022507781000395
 化合物113(0.10g、0.057mmol)のDMF(5mL)溶液に、ピペリジン(1mL)を添加し、LCMSに照らしてFmocが完全に除去されるまで、混合物を、室温で30分間撹拌した。反応混合物を、分取HPLC(方法B)によって直接精製すると、化合物LP6(35mg、収率23％)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 763 (M/2 + 1)+。
Figure 2022507781000396
(実施例7)
(リンカー-ペイロードLP7)
本実施例は、上記表2におけるリンカー-ペイロードLP7の合成のための方法を示す。本実施例は、図5において14a、107、114、及び115、並びにリンカー-ペイロードLP7の番号が付けられた化合物に言及する。
(9H-フルオレン-9-イルメチル N-({[(4bS,8S,8aR)-8-({[(1S,4aS,10aR)-6-[(2S)-2-[(2S)-2-{[(tert-ブトキシ)カルボニル]アミノ}-3-メチルブタンアミド]プロパンアミド]-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-イル]ホルムアミド}カルボニル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}メチル)カルバメート(114))
Figure 2022507781000397
 化合物14a(66mg、0.082mmol)のDMF(10mL)溶液に、Boc-Val-Ala-OH 101c(28mg、0.098mmol)、DIPEA(32mg、0.25mmol)、及びHATU(47mg、0.12mmol)を添加した。反応混合物を、室温で4時間撹拌し、LCMSによりモニタリングした。混合物を、逆相フラッシュクロマトグラフィー(重炭酸アンモニウム水(10mM)中50～90％のアセトニトリル)によって直接精製すると、化合物114(74mg、収率84％)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 978 (M - Boc + 1)+。
(9H-フルオレン-9-イルメチル N-({[(4bS,8S,8aR)-8-({[(1S,4aS,10aR)-6-[(2S)-2-[(2S)-2-アミノ-3-メチルブタンアミド]プロパンアミド]-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-イル]ホルムアミド}カルボニル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}メチル)カルバメートトリフルオロ酢酸塩(115))
Figure 2022507781000398
 化合物114(74mg、0.069mmol)のDCM(3mL)溶液に、TFA(1mL)を添加した。LCMSに照らしてBocが完全に除去されるまで、反応混合物を室温で1時間撹拌した。揮発性物質を真空中で除去すると、粗生成物115(66mg、TFA塩として収率97％)が無色の油状物として得られた。 ESI m/z: 978 (M + 1)+。
(1-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4(9),5,7,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)-N-[(1S)-1-{[(1S)-1-{[(4bS,8S,8aR)-8-{[(1S,4aS,10aR)-6-(2-アミノアセトアミド)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル]カルバモイル}-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}エチル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド(LP7))
Figure 2022507781000399
 化合物115(60mg、61μmol)のDMF(5mL)溶液に、DIBAC-suc-PEG4-OSu 107(48mg、74μmol)及びDIPEA(24mg、0.18mmol)を添加した。反応混合物を、室温で4時間撹拌し、LCMSによってモニタリングした。その後、該反応に、ピペリジン(0.2mL、過剰)を添加した。LCMSに照らしてFmocが完全に除去されるまで、反応混合物を室温で30分間撹拌した。反応混合物を、分取HPLC(方法B)によって直接精製すると、LP7(22mg、収率28％)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 1292 (M + H)+。
Figure 2022507781000400
(実施例8)
(リンカー-ペイロードLP8)
本実施例は、上記表2におけるリンカー-ペイロードLP8の合成のための方法を示す。本実施例は、図6におけるP4、117～120及びリンカー-ペイロードLP8の番号が付けられた化合物に言及する。
({4-[(2S)-2-[(2S)-2-アミノ-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メチル N-({[(4bS,8S,8aR)-8-{[(1S,4aS,10aR)-6-アミノ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル]カルバモイル}-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}メチル)カルバメート(117))
Figure 2022507781000401
 Fmoc-vc-PAB-PNP 116(0.14g、0.18mmol)及びペイロードP4(0.11g、0.18mmol)のDMF(2mL)溶液に、HOBt(24mg、0.18mmol)及びDIPEA(70mg、0.54mmol)を室温でシリンジによって添加した。混合物を室温で2時間撹拌し、LCMSによると化合物P4が消費された。得られた混合物に、ピペリジン(42mg、0.50mmol)を添加し、LCMSによりモニタリングして、Fmocが、完全に除去されるまで、反応を室温で2時間撹拌した。膜に通して濾過した後、濾液を濃縮し、分取HPLC(方法B)によって直接精製すると、化合物117(45mg、収率27％)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 991 (M + 1)+。
Figure 2022507781000402
(2,5-ジオキソピロリジン-1-イル (2R)-6-[2-(シクロオクタ-2-イン-1-イルオキシ)アセトアミド]-2-{[(9H-フルオレン-9-イルメトキシ)カルボニル]アミノ}ヘキサノエート(118))
Figure 2022507781000403
 DCM(3mL)中の化合物103(0.10g、0.19mmol)、EDCI(72mg、0.38mmol)、及びHOSu(43mg、0.38mmol)の混合物を、室温で3時間撹拌した。反応混合物を濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(石油エーテル中70％の酢酸エチル)によって精製すると、中間体118(55mg、収率47％)が白色の固体として得られ、それを、精製することなく次の工程で用いた。ESI m/z: 630 (M + 1)+。
({4-[(2S)-2-[(2S)-2-[(2R)-2-アミノ-6-[2-(シクロオクタ-2-イン-1-イルオキシ)アセトアミド]ヘキサンアミド]-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メチル N-({[(4bS,8S,8aR)-8-{[(1S,4aS,10aR)-6-アミノ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル]カルバモイル}-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}メチル)カルバメート(119))
Figure 2022507781000404
 化合物117(55mg、56μmol)及びDIPEA(24mg、0.19mmol)のDMF(1.5mL)溶液に、粗中間体118(40mg、63μmol)を添加した。LCMSに照らして118が消費されるまで、反応混合物を室温で2時間撹拌した。反応混合物を、逆相フラッシュクロマトグラフィー(水中0～100％のアセトニトリル)によって直接精製すると、Fmoc-119(60mg、ESI m/z: 753 (M/2 + 1)+)が白色の固体として得られ、それを、DMF(1.5mL)に溶解させた。この溶液に、ジエチルアミン(24mg、0.33mmol)を添加し、LCMSに照らしてFmocが完全に除去されるまで、溶液を室温で2時間撹拌した。反応混合物を、逆相フラッシュクロマトグラフィー(重炭酸アンモニウム水中0～100％のアセトニトリル)によって直接精製すると、化合物119(35mg、化合物117からの収率50％)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 1282 (M + H)+。
({4-[(2S)-2-[(2S)-2-[(2R)-2-アミノ-6-{2-[(1-{[31,32,33,34,35,36,37,38,39,40,41,42-ドデカヒドロキシ-10,15,20,25,30-ペンタキス(ヒドロキシメチル)-2,4,7,9,12,14,17,19,22,24,27,29-ドデカオキサヘプタシクロ[26.2.2.23,6.28,11.213,16.218,21.223,26]ドテトラコンタン-5-イル]メチル}-1H,4H,5H,6H,7H,8H,9H-シクロオクタ[d][1,2,3]トリアゾール-4-イル)オキシ]アセトアミド}ヘキサンアミド]-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メチル N-({[(4bS,8S,8aR)-8-{[(1S,4aS,10aR)-6-アミノ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル]カルバモイル}-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}メチル)カルバメート(120))
Figure 2022507781000405
 化合物119(70mg、54μmol)のDMF(3mL)溶液に、α-CD-N3 105a(0.16g、0.16mmol)を添加した。反応混合物を50℃で3日間撹拌し、これを、LCMSによってモニタリングした。その後、得られた混合物を逆相フラッシュクロマトグラフィー(重炭酸アンモニウム水(10mM)中0～100％のアセトニトリル)によって直接精製すると、化合物120(20mg、収率16％)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 1141 (M/2 + 1)+。
({4-[(2S)-2-[(2S)-2-[(2R)-2-[1-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4(9),5,7,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド]-6-{2-[(1-{[31,32,33,34,35,36,37,38,39,40,41,42-ドデカヒドロキシ-10,15,20,25,30-ペンタキス(ヒドロキシメチル)-2,4,7,9,12,14,17,19,22,24,27,29-ドデカオキサヘプタシクロ[26.2.2.23,6.28,11.213,16.218,21.223,26]ドテトラコンタン-5-イル]メチル}-1H,4H,5H,6H,7H,8H,9H-シクロオクタ[d][1,2,3]トリアゾール-4-イル)オキシ]アセトアミド}ヘキサンアミド]-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メチル N-({[(4bS,8S,8aR)-8-{[(1S,4aS,10aR)-6-アミノ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル]カルバモイル}-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}メチル)カルバメート(LP8))
Figure 2022507781000406
 化合物120(10mg、4.4μmol)及び中間体107(5mg、7.7μmol)のDMF(2mL)溶液に、DIPEA(16mg、0.12mmol)を添加し、混合物を、室温で16時間撹拌した。反応混合物を、分取HPLC(方法B)によって直接2回精製すると、LP8(1.5mg、収率12％)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 939 (M/3 + H)+。
Figure 2022507781000407
 分析的HPLC(トリアゾール位置異性体の混合物として):63％、保持時間:6.03分;36％、保持時間:6.13分(方法B)。
(実施例9)
(リンカー-ペイロードLP9)
本実施例は、上記表2におけるリンカー-ペイロードLP9の合成のための方法を示す。本実施例は、図7において12b、15、112、121、及び122、並びにリンカー-ペイロードLP9の番号が付けられた化合物に言及する。
(9H-フルオレン-9-イルメチル N-[(4bS,8S,8aR)-8-({[(1S,4aS,10aR)-6-アミノ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-イル]ホルムアミド}カルボニル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバメート、トリフルオロ酢酸塩(15))
Figure 2022507781000408
 化合物12b(0.63g、1.0mmol)のDCM(50mL)溶液に、Fmoc-OSu(0.40g、1.2mmol)及びDIPEA(0.26g、2.0mmol)を添加した。混合物を室温で16時間撹拌し、これを、LCMSによってモニタリングした。混合物を真空下濃縮し、残渣を、シリカゲルカラムクロマトグラフィー(石油エーテル中50～80％の酢酸エチル)によって精製すると、Boc-15(0.71g)が白色の固体として得られ、これを、DCM(10mL)に溶解させた。この溶液に、TFA(3mL)を室温で添加した。LCMSに照らしてBocが完全に除去されるまで、反応混合物を室温で4時間撹拌した。揮発性物質を真空中で除去すると、TFA塩としての化合物15(0.62g、収率74％)及び無色の油状物が得られた。ESI m/z: 751 (M + H)+。
(9H-フルオレン-9-イルメチル N-[(4bS,8S,8aR)-8-({[(1S,4aS,10aR)-6-[(2S)-6-アミノ-2-{[(9H-フルオレン-9-イルメトキシ)カルボニル]アミノ}ヘキサンアミド]-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-イル]ホルムアミド}カルボニル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバメート、トリフルオロ酢酸塩(122))
Figure 2022507781000409
 化合物15(0.30g、0.40mmol)のDMF(20mL)溶液に、Fmoc-Lys(Boc)-OH 121(0.23g、0.48mmol)、HATU(228mg、0.60mmol)、及びDIPEA(0.16g、1.2mmol)を室温で順次添加した。反応混合物を室温で4時間撹拌し、LCMSによってモニタリングした。得られた混合物を、逆相フラッシュクロマトグラフィー(重炭酸アンモニウム水(10mM)中50～90％のアセトニトリル)によって直接精製すると、Boc-122(0.41g)が白色の固体として得られ、そのうちの0.24gを、DCM(20mL)に溶解させた。この溶液に、TFA(3mL)を添加し、LCMSに照らしてBocが完全に除去されるまで、反応混合物を室温で1時間撹拌した。揮発性物質を真空中で除去すると、TFA塩としての化合物122(0.22g、収率79％)及び無色の油状物が得られた。ESI m/z: 1101 (M + H)+。
({4-[(2S)-2-[(2S)-2-[1-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4(9),5,7,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド]-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メチル N-[(5S)-5-アミノ-5-{[(4bS,8S,8aR)-8-{[(1S,4aS,10aR)-6-アミノ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル]カルバモイル}-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}ペンチル]カルバメート(LP9))
Figure 2022507781000410
 DMF(5mL)中の化合物122(14mg、12μmol)及び化合物112(15mg、14μmol)の混合物に、HOBt(2mg、15μmol)及びDIPEA(5mg、37μmol)を添加し、混合物を室温で4時間撹拌し、これを、LCMSによってモニタリングした。その後、反応混合物に、ピペリジン(0.5mL)を添加し、LCMSに照らしてFmocが完全に除去されるまで、混合物を室温で0.5時間撹拌した。その後、反応混合物を膜に通して濾過し、濾液を濃縮し、分取HPLC(方法B)によって直接精製すると、LP9(6mg、収率31％)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 798 (M/2 + H)+。
Figure 2022507781000411
(実施例10)
(リンカー-ペイロードLP10及びLP11)
本実施例は、上記表2におけるリンカー-ペイロードLP10～LP11の合成のための方法を示す。本実施例は、図8においてP7、P8、116、123a-b、リンカー-ペイロードLP10及びLP11の番号が付けられた化合物に言及する。
((S)-4-((4bS,8S,8aR)-8-((1S,4aS,10aR)-6-アミノ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニルカルバモイル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イルアミノ)-3-((4-((S)-2-((S)-2-アミノ-3-メチルブタンアミド)-5-ウレイドペンタンアミド)ベンジルオキシ)カルボニルアミノ)-4-オキソブタン酸(123a))
Figure 2022507781000412
 ペイロードP7(64mg、0.10mmol)のDMF(5mL)溶液に、中間体116(92mg、0.12mmol)及びDIPEA(26mg、0.20mmol)を室温で順次添加した。反応混合物を室温で4時間撹拌し、LCMSによりモニタリングした。その後、該混合物に、ピペリジン(0.5mL)を添加し、LCMSに照らしてFmocが完全に除去されるまで、反応混合物を室温で10分間撹拌した。混合物を逆相フラッシュクロマトグラフィー(重炭酸アンモニウム水(10mM)中40～70％のアセトニトリル)によって直接精製すると、化合物123a(41mg、収率39％)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 1049 (M + H)+。
((S)-5-((4bS,8S,8aR)-8-((1S,4aS,10aR)-6-アミノ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニルカルバモイル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イルアミノ)-4-((4-((S)-2-((S)-2-アミノ-3-メチルブタンアミド)-5-ウレイドペンタンアミド)ベンジルオキシ)カルボニルアミノ)-5-オキソペンタン酸(123b))
Figure 2022507781000413
 P7の代わりにP8(0.53g、0.81mmol)を用いたことを除き123aためのものと類似の手順に従い、化合物123b(0.61g、収率71％)を白色の固体として得た。ESI m/z: 1063 (M + H)+。
((3S)-3-{[({4-[(2S)-2-[(2S)-2-[1-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4(9),5,7,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド]-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メトキシ)カルボニル]アミノ}-3-{[(4bS,8S,8aR)-8-{[(1S,4aS,10aR)-6-アミノ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル]カルバモイル}-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}プロパン酸(LP10))
Figure 2022507781000414
 化合物123(21mg、20μmol)のDMF(2mL)溶液に、中間体107(16mg、24μmol)及びDIPEA(5mg、40μmol)を室温で順次添加した。反応混合物を、室温で4時間撹拌し、LCMSによりモニタリングした。得られた混合物を、分取HPLC(方法B)によって直接精製すると、化合物LP10(12mg、収率38％)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 792 (M/2 + H)+。
Figure 2022507781000415
(4S)-4-{[({4-[(2S)-2-[(2S)-2-[1-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4(9),5,7,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド]-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メトキシ)カルボニル]アミノ}-4-{[(4bS,8S,8aR)-8-{[(1S,4aS,10aR)-6-アミノ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル]カルバモイル}-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}ブタン酸(LP11)
Figure 2022507781000416
 123aの代わりに123b(0.10g、94μmol)を用いたことを除きLP10のためのものと類似の手順に従い、化合物LP11(50mg、収率33％)を白色の固体として得た。ESI m/z: 799 (M/2 + H)+。
Figure 2022507781000417
(実施例11)
(ペイロードP12及びP16;並びにリンカー-ペイロードLP12及びLP16)
本実施例は、上記表1におけるペイロードP12及びP16、並びに上記表2におけるリンカー-ペイロードLP12及びLP16の合成のための方法を示す。本実施例は、図9において12b、107、124、125、及び126;並びにペイロードP12及びP16;並びにリンカー-ペイロードLP12及びLP16の番号が付けられた化合物に言及する。
(((S)-2-((((9H-フルオレン-9-イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)-5-(tert-ブトキシ)-5-オキソペンタノイル)-L-アラニン(125))
Figure 2022507781000418
 Fmoc-Glu(OtBu)-OH(6.0g、14mmol)のDCM(300mL)溶液に、HOSu(3.2g、28mmol)及びEDCI(5.4g、28mmol)を添加した。反応混合物を室温で1晩撹拌し、LCMSによりモニタリングした。得られた混合物をDCM(200mL)で希釈し、水(100mL×2)及びブライン(100mL)で洗浄した。有機溶液を、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、真空下濃縮すると、粗化合物124(8.5g、ESI m/z: 545 (M + 23)+)が得られ、これを、DMF(10mL)中に溶解させた。この溶液に、アラニン(4.2g、48mmol)及びDIPEA(6.2g、48mmol)を添加した。反応混合物を、室温で1晩撹拌し、LCMSによりモニタリングした。得られた混合物を、水(100mL)に注ぎ入れ、酢酸でpH 5～6に酸性化させた。混合物を酢酸エチルで抽出し、合わせた有機溶液を真空下濃縮した。粗生成物を、逆相フラッシュクロマトグラフィー(TFA水(0.01％)中0～60％のアセトニトリル)によって精製すると、化合物125(1g、収率15％)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 497 (M + H)+。
((S)-tert-ブチル 4-アミノ-5-((S)-1-((4bS,8S,8aR)-8-((1S,4aS,10aR)-6-(tert-ブトキシカルボニルアミノ)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニルカルバモイル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イルアミノ)-1-オキソプロパン-2-イルアミノ)-5-オキソペンタノエート(126a))
Figure 2022507781000419
 化合物125(42mg、84μmol)及びDIPEA(28μl、0.16mmol)のDMF(3.0mL)溶液に、HATU(36mg、95μmol)を添加した。反応混合物を室温で10分間撹拌してから、化合物12b(50mg、80μmol)を添加し、混合物を室温で1晩撹拌し、これを、LCMSによってモニタリングした。その後、反応混合物に、ピペリジン(1.0mL)を添加し、LCMSに照らしてFmocが完全に除去されるまで、混合物を室温で3時間撹拌した。得られた混合物を、逆相フラッシュクロマトグラフィー(TFA水(0.01％)中0～100％のアセトニトリル)によって直接精製すると、化合物126a(20mg、収率28％)が黄色の固体として得られた。ESI m/z: 885 (M + H)+。
(tert-ブチル (4S)-4-アミノ-4-{[(1S)-1-{[(4bS,8S,8aR)-8-({[(1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-イル]ホルムアミド}カルボニル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}エチル]カルバモイル}ブタノエート(126b))
Figure 2022507781000420
 12bの代わりにP1を用いたことを除き126aのためのものと類似の手順に従い、化合物126b(37mg、収率47％)を、白色の固体として得た。ESI m/z: 393.4 (M/2 + 1)+。
((S)-4-アミノ-5-((S)-1-((4bS,8S,8aR)-8-((1S,4aS,10aR)-6-アミノ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニルカルバモイル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イルアミノ)-1-オキソプロパン-2-イルアミノ)-5-オキソペンタン酸(P12))
Figure 2022507781000421
 ニートのTFA(2.0mL)中の化合物126a(57mg、64μmol)の混合物を、室温で1時間撹拌し、LCMSによりモニタリングした。得られた混合物を、DCM(20mL)で希釈し、真空下濃縮した。残渣を、逆相フラッシュクロマトグラフィー(重炭酸ナトリウム水(10mM)中0～100％のアセトニトリル)によって精製すると、P12(20mg、収率43％)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 365 (M/2 + H)+。
Figure 2022507781000422
((4S)-4-アミノ-4-{[(1S)-1-{[(4bS,8S,8aR)-8-({[(1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-イル]ホルムアミド}カルボニル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}エチル]カルバモイル}ブタン酸(P16))
Figure 2022507781000423
 126aの代わりに126bを用いたことを除きP12のためのものと類似の手順に従い、ペイロードP16(18mg、収率53％)を、黄色の固体として得た。ESI m/z: 729.5 (M + 1)+。
Figure 2022507781000424
((4S)-4-[1-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4(9),5,7,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド]-4-{[(1S)-1-{[(4bS,8S,8aR)-8-({[(1S,4aS,10aR)-6-アミノ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-イル]ホルムアミド}カルボニル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}エチル]カルバモイル}ブタン酸(LP12))
Figure 2022507781000425
 化合物P12(10mg、14μmol)のDMF(2.0ml)溶液に、DIPEA(6μl、21μmol)及び化合物107(11mg、16μmol)を添加した。反応混合物を、室温で3時間撹拌し、LCMSによりモニタリングした。得られた混合物を、分取HPLC(方法B)によって直接精製すると、化合物LP12(3.5mg、収率20％)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 632 (M/2 + H)+。
Figure 2022507781000426
((4S)-4-[1-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4(9),5,7,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド]-4-{[(1S)-1-{[(4bS,8S,8aR)-8-({[(1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-イル]ホルムアミド}カルボニル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}エチル]カルバモイル}ブタン酸(LP16))
Figure 2022507781000427
 P12の代わりにP16を用いたことを除きLP12ためのものと類似の手順に従い、リンカー-ペイロードLP16(12mg、収率69％)を、白色の固体として得た。ESI m/z: 632.5 (M/2 + 1)+。
Figure 2022507781000428
(実施例12)
(リンカー-ペイロードLP13及びLP14)
本実施例は、上記表2におけるリンカー-ペイロードLP13及びLP14の合成のための方法を示す。本実施例は、図9Aにおいて102a、127a/b、128a/b、107、並びにリンカー-ペイロードLP13及びLP14の番号が付けられた化合物に言及する。
((4S)-4-アミノ-4-{[(1S)-1-{[(1S)-1-{[(4bS,8S,8aR)-8-({[(1S,4aS,10aR)-6-アミノ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-イル]ホルムアミド}カルボニル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}エチル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]カルバモイル}ブタン酸(128a))
Figure 2022507781000429
 化合物127a(6.4mg、21μmol)及びHATU(8.0mg、21μmol)のDMF(2.0mL)溶液を室温で15分間撹拌してから、化合物102a(14mg、17.5μmol)を添加し、DIPEA(6.8mg、52.5μmol)を添加した。反応混合物を室温で1時間撹拌し、これを、LCMSによってモニタリングした。混合物を逆相フラッシュクロマトグラフィー(水中0～100％のアセトニトリル)によって直接精製すると、保護された128a(12mg)が白色の固体として得られ、これを、DCM(4mL)中に溶解させた。この撹拌溶液に対してTFA(0.5mL)を添加し、混合物を室温で1時間撹拌し、これを、LCMSによってモニタリングした。得られた混合物を、逆相フラッシュクロマトグラフィー(重炭酸アンモニウム水(10mM)中0～100％のアセトニトリル)によって直接精製すると、化合物128a(7.1mg、収率49％)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 827.5 (M + 1)+。
((4R)-4-アミノ-4-{[(1S)-1-{[(1S)-1-{[(4bS,8S,8aR)-8-({[(1S,4aS,10aR)-6-アミノ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-イル]ホルムアミド}カルボニル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}エチル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]カルバモイル}ブタン酸(128b))
Figure 2022507781000430
 化合物127aの代わりに化合物127bを用いたことを除き128aのためのものと類似の手順に従い、化合物128b(16mg、収率56％)を、白色の固体として得た。ESI m/z: 827.5 (M + 1)+。
((4S)-4-[1-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4(9),5,7,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド]-4-{[(1S)-1-{[(1S)-1-{[(4bS,8S,8aR)-8-({[(1S,4aS,10aR)-6-アミノ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-イル]ホルムアミド}カルボニル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}エチル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]カルバモイル}ブタン酸(LP13))
Figure 2022507781000431
 DMF(2.0mL)中の化合物128a(7.1mg、8.6μmol)の混合物に、化合物107(5.6mg、8.6μmol)及びDIPEA(3.3mg、26μmol)を添加し、反応混合物を室温で1時間撹拌し、これを、LCMSによってモニタリングした。得られた混合物を、逆相フラッシュクロマトグラフィー(重炭酸アンモニウム水(10mM)中0～100％のアセトニトリル)によって直接精製すると、リンカー-ペイロードLP13(5.5mg、収率47％)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 681.6 (M/2 + 1)+。
Figure 2022507781000432
((4R)-4-[1-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4(9),5,7,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド]-4-{[(1S)-1-{[(1S)-1-{[(4bS,8S,8aR)-8-({[(1S,4aS,10aR)-6-アミノ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-イル]ホルムアミド}カルボニル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}エチル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]カルバモイル}ブタン酸(LP14))
Figure 2022507781000433
 128aの代わりに128bを用いたことを除きLP13ためのものと類似の手順に従い、リンカー-ペイロードLP14(10mg、収率76％)を、白色の固体として得た。ESI m/z: 681.5 (M/2 + 1)+。
Figure 2022507781000434
(実施例12A)
(リンカー-ペイロードLP15)
本実施例は、上記表2におけるリンカー-ペイロードLP15の合成のための方法を示す。本実施例は、図9Bにおいて129、130、131、132、133、Ser-P1、及びリンカー-ペイロードLP15の番号が付けられた化合物に言及する。化合物129は、WO 2015/095124 A1に従って合成した。
(1-N-(2-{2-[2-(2-アジドエトキシ)エトキシ]エトキシ}エチル)-1-N'-[(1S)-4-(カルバモイルアミノ)-1-{[4-(ヒドロキシメチル)フェニル]カルバモイル}ブチル]シクロブタン-1,1-ジカルボキサミド(130))
Figure 2022507781000435
 化合物129(0.18g、0.44mmol)の乾燥DMF(6mL)溶液に、アミノ-PEG3-アジド(0.10g、0.46mmol)及びEDCI(0.13g、0.65mmol)を添加し、混合物を室温で20時間撹拌した。得られた混合物を、逆相フラッシュクロマトグラフィー(水中0～100％のアセトニトリル)によって直接精製すると、化合物130(0.19g、収率70％)がオフホワイトの固体として得られた。ESI m/z: 607.3 (M + 1)+。
(1-N-(2-{2-[2-(2-アミノエトキシ)エトキシ]エトキシ}エチル)-1-N'-[(1S)-4-(カルバモイルアミノ)-1-{[4-(ヒドロキシメチル)フェニル]カルバモイル}ブチル]シクロブタン-1,1-ジカルボキサミド(131))
Figure 2022507781000436
 化合物130(0.18g、0.30mmol)のメタノール(10mL)溶液に、窒素下で、10％パラジウム-炭素(20mg)を添加した。混合物を脱気し、水素で3回パージし、その後、水素下で、室温で20時間撹拌した。得られた混合物をセライトに通して濾過した。濾液を、真空下濃縮すると、粗化合物131(0.16g、収率92％)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 581.4 (M + 1)+。
((2S)-2-[(1-{[2-(2-{2-[2-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4(9),5,7,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)エトキシ]エトキシ}エトキシ)エチル]カルバモイル}シクロブチル)ホルムアミド]-5-(カルバモイルアミノ)-N-[4-(ヒドロキシメチル)フェニル]ペンタンアミド(133))
Figure 2022507781000437
 粗化合物131(0.16g、0.28mmol)のDMF(4mL)溶液に、DIBAC-suc-OSu 132 (0.12g、0.30mmol)及びDIPEA(0.2mL、0.83mmol)を添加し、反応混合物を室温で2時間撹拌し、これを、LCMSによってモニタリングした。得られた混合物を、逆相フラッシュクロマトグラフィー(重炭酸アンモニウム水(10mM)中0～100％のアセトニトリル)によって直接精製すると、化合物133(50mg、収率21％)が黄色の固体として得られた。ESI m/z: 434.8 (M/2 + 1)+。
({4-[(2S)-2-[(1-{[2-(2-{2-[2-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4(9),5,7,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)エトキシ]エトキシ}エトキシ)エチル]カルバモイル}シクロブチル)ホルムアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メチル N-[(1S)-1-{[(4bS,8S,8aR)-8-({[(1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-イル]ホルムアミド}カルボニル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}-2-ヒドロキシエチル]カルバメート(LP15))
Figure 2022507781000438
 化合物133(50mg、58μmol)の乾燥DMF(3mL)溶液に、ビス(4-ニトロフェニル) カーボネート(PNPC)(35mg、0.12mmol)及びDIPEA(45μL、0.17mmol)を順次添加し、反応混合物を室温で1晩撹拌した。混合物を、逆相フラッシュクロマトグラフィー(水中0～100％のアセトニトリル)によって精製した。溶液を、凍結乾燥させると、黄色の固体が得られ、そのうちの16mg(16μmol)を、DMF(5mL)に溶解させた。この溶液に、Px2(Ser-P1、これは、引用により本明細書に組み込まれているWO 2018/213082 A1に報告されている)(10mg、16μmol)及びDIPEA(10μL、64μmol)を添加した。得られた混合物を、室温で1晩撹拌し、これを、LCMSによってモニタリングした。混合物を、分取HPLC(方法B)によって直接精製すると、リンカー-ペイロードLP15(4.0mg、Px2からの収率16％)が橙色の固体として得られた。ESI m/z: 755.5 (M/2 + 1)+。
Figure 2022507781000439
(実施例12B)
(ペイロードP18;並びにリンカー-ペイロードLP17及びLP18)
本実施例は、上記表1におけるペイロードP18、並びに上記表2におけるリンカー-ペイロードLP17及びLP18の合成のための方法を示す。本実施例は、図9Cにおいて134、P1、P18、112、135、並びにリンカー-ペイロードLP17及びLP18の番号が付けられた化合物に言及する。化合物134は、WO 2015/155998 A1に従って合成した。
((1S,4aS,10aR)-N-[(1S,4aS,10aR)-6-{2-[(2-アミノアセトアミド)メトキシ]アセトアミド}-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル]-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキサミド(P18))
Figure 2022507781000440
 化合物134(42mg、0.11mmol)のDMF(5mL)溶液に、HATU(79mg、0.21mmol)及びDIPEA(54mg、0.44mmol)を添加し、混合物を室温で15分間撹拌してから、ペイロードP1(63mg、0.12mmol)を添加した。反応混合物を室温で2時間撹拌し、これを、LCMSによってモニタリングした。得られた混合物を、分取HPLC(方法B)によって直接精製すると、Fmoc-P18(47mg、ESI m/z: 895.4 (M + 1)+)が得られ、これを、DMF(5mL)に溶解させた。この溶液に、ピペリジン(13mg、0.15mmol)を添加し、LCMSによってモニタリングしてFmocが完全に除去されるまで、混合物を室温で1時間撹拌した。得られた混合物を、分取HPLC(方法B)によって直接精製すると、化合物P18(34mg、収率47％)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 673.5 (M + 1)+。
Figure 2022507781000441
({4-[(2S)-2-[(2S)-2-[1-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4(9),5,7,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド]-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メチル N-({[({[(4bS,8S,8aR)-8-{[(1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル]カルバモイル}-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}メトキシ)メチル]カルバモイル}メチル)カルバメート(LP17))
Figure 2022507781000442
 化合物P18(16mg、24μmol)のDMF(5mL)溶液に、化合物112(26mg、24μmol)及びDIPEA(6.2mg、0.048mmol)を25℃で添加した。混合物を25℃で1晩撹拌し、これを、LCMSによってモニタリングした。得られた混合物を、分取HPLC(方法B)によって直接精製すると、リンカー-ペイロードLP17(20mg、収率53％)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 807 (M/2 + 1)+。
Figure 2022507781000443
((2S)-2-{2-[2-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4(9),5,7,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)アセトアミド]アセトアミド}-3-フェニルプロパン酸(135))
Figure 2022507781000444
 ペプチドGly-Gly-Phe(65mg、0.16mmol)のDMF(5mL)溶液に、化合物132(56mg、0.16mmol)及びDIPEA(63mg、0.49mmol)を添加し、反応混合物を室温で2時間撹拌し、これを、LCMSによってモニタリングした。混合物を、分取HPLC(方法B)によって直接精製すると、化合物135(58mg、収率64％)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 567 (M + 1)+。
((1S,4aS,10aR)-N-[(1S,4aS,10aR)-6-[2-({2-[(2S)-2-{2-[2-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4(9),5,7,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)アセトアミド]アセトアミド}-3-フェニルプロパンアミド]アセトアミド}メトキシ)アセトアミド]-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル]-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキサミド(LP18))
Figure 2022507781000445
 化合物135(8.5mg、15μmol)のDMF(5mL)溶液に、HATU(11mg、30μmol)及びDIPEA(7.7mg、60μmol)を添加し、混合物を室温で15分間撹拌してから、化合物P18(10mg、15μmol)を添加した。反応混合物を室温で2時間撹拌し、これを、LCMSによってモニタリングした。得られた混合物を、分取HPLC(方法B)によって直接精製すると、リンカー-ペイロードLP18(8.4mg、収率46％)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 635 (M - MP17)+。
Figure 2022507781000446
(実施例12C)
(リンカー-ペイロードLP19)
本実施例は、上記表2におけるリンカー-ペイロードLP19の合成のための方法を示す。本実施例は、図9Dにおいて136～138、140、P15、141～143、106、116、及びリンカー-ペイロードLP19の番号が付けられた化合物に言及する。
(tert-ブチル 2-ヒドロキシエチル(メチル)カルバメート(137))
Figure 2022507781000447
 DCM(90mL)中の化合物136(3.8g、50mmol)の混合物に、Boc2O(11g、52mmol)のDCM(10mL)溶液を0℃で滴下した。混合物を、室温で1晩撹拌した。混合物を、ブラインで2回洗浄し、有機溶液を真空下濃縮すると、化合物137(8.5g、収率97％)が無色の油状物として得られた。ESI m/z: 198 (M + Na)+。
(tert-ブチル メチル(2-オキソエチル)カルバメート(138))
Figure 2022507781000448
 化合物137(4.4g、25mmol)の乾燥DCM(50mL)溶液に、デス・マーチンペルオキシド(12g、25mmol)を、0℃で分割添加した。反応混合物を、室温で1晩撹拌し、飽和重炭酸ナトリウム水及び飽和チオ硫酸ナトリウム水でクエンチした。クエンチした混合物を、室温で0.5時間撹拌した。有機溶液を回収し、飽和重炭酸ナトリウム水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、真空下濃縮すると、粗体138が得られ、これを、フラッシュクロマトグラフィー(石油エーテル中12～18％の酢酸塩、PMAを用いるTLCによって検出)によって精製すると、化合物138(2.6g、収率60％)が淡黄色の油状物として得られた。
Figure 2022507781000449
(tert-ブチル 2-(2-(2-ヒドロキシエトキシ)エチルアミノ)エチル(メチル)カルバメート(140))
Figure 2022507781000450
 乾燥メタノール(20mL)中の化合物138(2.6g、15mmol)及び化合物139(1.7g、16mmol)の混合物を、室温で4時間撹拌してから、水素化ホウ素ナトリウム(1.1g、30mmol)を、混合物に0℃で分割添加した。混合物を、室温までゆっくりと温め、室温で1晩撹拌した。混合物を、冷水でクエンチし、真空下濃縮した。残渣を、フラッシュクロマトグラフィー(DCM中0～100％のメタノール)によって精製すると、化合物140(2.4g、収率61％)が黄色の油状物として得られた。ESI m/z: 263.1 (M + H)+。
Figure 2022507781000451
(tert-ブチル N-[(4bS,8S,8aR)-8-({[(1S,4aS,10aR)-6-{[(2-{[(tert-ブトキシ)カルボニル](メチル)アミノ}エチル)[2-(2-ヒドロキシエトキシ)エチル]カルバモイル]オキシ}-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-イル]ホルムアミド}カルボニル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバメート(141))
Figure 2022507781000452
 ペイロードP15(0.44g、0.70mmol)の乾燥DCM(15mL)溶液に、トリエチルアミン(0.21g、2.1mmol)、及び4-ニトロフェニルクロロフォーメート(0.15g、0.74mmol)の乾燥DCM(5mL)溶液を添加した。反応混合物を、室温で1.5時間撹拌し、これを、LCMSによってモニタリングした。混合物を真空下濃縮すると、粗PNPエステル(0.58g)が得られ、これを、DCM(15mL)に溶解させた。この溶液に、HOBt(19mg、0.14mmol)、及び化合物140(0.32g、1.2mmol)のDCM(5mL)溶液を添加した。LCMSに照らして反応が完了するまで、反応混合物を室温で18時間撹拌した。反応混合物を、DCMで希釈し、水及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空下濃縮した。残渣を、逆相フラッシュクロマトグラフィー(TFA水(0.01％)中0～100％のアセトニトリル)によって精製すると、化合物141(0.50g、収率78％)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 940.5 (M + Na)+。
((4bS,8S,8aR)-8-((1S,4aS,10aR)-6-アミノ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニルカルバモイル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル 2-(2-ヒドロキシエトキシ)エチル(2-(メチルアミノ)エチル)カルバメート(142))
Figure 2022507781000453
 化合物141(0.30g、0.33mmol)のアセトニトリル(5mL)溶液に、HClのジオキサン溶液(4N、3mL)を添加した。LCMSに照らしてBocが完全に除去されるまで、反応混合物を室温で3時間撹拌した。揮発性物質を除去し、残渣を、逆相フラッシュクロマトグラフィー(水中0～100％のアセトニトリル)によって精製すると、化合物142がHCl塩(0.19g、収率73％)として、白色の固体として得られ、これは、塩基性バッファー(pH＞7)下でも安定ではなかった。ESI m/z: 717.2 (M + H)+。
((4bS,8S,8aR)-8-(((1S,4aS,10aR)-6-アミノ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル)カルバモイル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル (2-((((4-((S)-2-((S)-2-アミノ-3-メチルブタンアミド)-5-ウレイドペンタンアミド)ベンジル)オキシ)カルボニル)(メチル)アミノ)エチル)(2-(2-ヒドロキシエトキシ)エチル)カルバメート(143))
Figure 2022507781000454
 新たに合成した化合物142(35mg、49μmol)の乾燥DMF混合物に、トリエチルアミン(15mg、0.15mmol)、HOBt(7.0mg、49μmol)、及びFmoc-vcPAB-PNP(116、35mg、45μmol)の乾燥DMF(5mL)溶液を室温で順次添加した。混合物を、室温で1晩撹拌した。この反応混合物に、ピペリジン(13mg、0.15mmol)を添加した。LCMSに照らしてFmocが完全に除去されるまで、混合物を室温で3時間撹拌した。反応混合物を、逆相フラッシュクロマトグラフィー(重炭酸アンモニウム水(10mM)中5～95％のアセトニトリル)によって直接精製すると、化合物143(62mg、収率58％)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 1145.6 (M + Na)+。
((4bS,8S,8aR)-8-{[(1S,4aS,10aR)-6-アミノ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル]カルバモイル}-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル N-(2-{[({4-[(2S)-2-[(2S)-2-[1-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4(9),5,7,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド]-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メトキシ)カルボニル](メチル)アミノ}エチル)-N-[2-(2-ヒドロキシエトキシ)エチル]カルバメート(LP19))
Figure 2022507781000455
 化合物143(30mg、27μmol)の乾燥DMF(5mL)溶液に、DIBAC-suc-PEG4-OSu(107、21mg、30μmol)及びDIPEA(10mg、78μmol)を室温で順次添加した。反応混合物を、室温で1晩撹拌した。反応混合物を、分取HPLC(方法B)によって直接精製すると、化合物LP19(15mg、収率34％)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 829.0 (M/2 + H)+。
Figure 2022507781000456
（分析実施例)
(実施例13)
上記ペイロード化合物の構造、LogPの計算値、MSの結果、及びHPLCの結果を、表3にまとめた。
(表3 ペイロードの化学的-物理的性質)
Figure 2022507781000457
Figure 2022507781000458
 6 ＜+++ ＜12; 4 ＜++ ≦6; 0 ＜+ ＜4
(実施例14)
上記のリンカー-ペイロード化合物の分子式、分子量、LogPの計算値、MSの結果、及びHPLCの結果を、表4にまとめた。
(表4 ペイロードの化学的-物理的性質)
Figure 2022507781000459
Figure 2022507781000460
6 ＜+++ ＜12; 4 ＜++ ＜6; -2 ＜+ ≦ 4
(実施例15)
本明細書に記載される特定のLXRアゴニストペイロードの活性を、細胞ベースのLXR応答性ルシフェラーゼレポーターアッセイで評価した。アッセイ細胞株を作製するために、LXR調節型ルシフェラーゼレポーター遺伝子(Cignal Lenti LXRレポーター(luc)キット(Qiagen、カタログ番号CLS-001L))をTHP1細胞に形質導入し、細胞をピューロマイシン中で2週間選択した。レンチウイルスは、最小CMVプロモーター及びLXR転写応答エレメントのタンデムリピートの制御下でホタルルシフェラーゼ遺伝子を発現する。得られる細胞株は、THP1/LXR-Luc細胞と呼ばれる。本アッセイのために、THP1/LXR-Luc細胞を、10％FBS及びペニシリン/ストレプトマイシンが補充されたRPMIを含有する培地中、96ウェルプレートに40,000細胞/ウェルで播種し、その後、200nMホルボールミリステート酢酸塩(PMA)で、3日間分化させた。その後、培地を除去し、PMAを含まない80uLの新鮮な培地と交換した。遊離ペイロードの3倍連続希釈物を100％DMSO中に調製し、新鮮な培地に移し、20uLを0.2％の最終一定DMSO濃度で、及び遊離ペイロードを100nM～0.015nMの範囲の最終濃度で細胞に添加した。プレート中の最後のウェルは、培地及び0.2％DMSOのみを含有するブランク対照(未処置のウェル)としての役割を果たし、3倍連続希釈の延長としてプロットされた。48時間後、One-Glo(商標)試薬(Promega、カタログ番号E6130)を各ウェルに添加した後に、ルシフェラーゼ活性を決定した。相対発光単位(RLU)をVictorルミノメーター(PerkinElmer)で測定し、EC50値を10点用量応答曲線(GraphPad Prism)に対する4パラメータロジスティック方程式を用いて決定した。試験した各の分子のEC50値を、表1に示す。用量応答曲線上の最大のRLUの未処置のウェルにおけるRLUに対する比を取ることにより、シグナル対ノイズ(S/N)を決定した。表5に示されているように、全ての被験ペイロード化合物は、112pM～3.51nMの範囲のEC50値及び10.4～13.8の範囲のS/N値で、THP1/LXR-Luc細胞におけるLXR依存的ルシフェラーゼ活性を増大させた。
(表5: 分化したTHP-1/LXR-Luc 細胞におけるペイロード化合物によるLXRレポーター活性)
Figure 2022507781000461
(実施例16)
抗体システインを介するコンジュゲーションは、Mol. Pharm. 2015, 12(6), 1863-71に記載されている方法と類似の方法を用いて2工程で実施する。例示的な手順において、モノクローナル抗体(mAb)をジチオスレイトール又はTCEPで還元する。ゲル濾過後、DMSO溶液中の適切なリンカー-ペイロードを還元抗体に添加し、混合物を適切なpHに調整する。反応液を撹拌させておく。得られるコンジュゲートをSECにより精製する。DAR(UV)値は、ADCの測定された吸光度及び抗体リンカー-ペイロードの減衰係数を用いて決定する。
部位特異的な抗体コンジュゲーションは、例えば、2工程で:(1)部位特異的変異抗体に対するアジド-PEG-アミンの微生物トランスグルタミナーゼ、例えば、(MTG EC 2.3.2.13, Zedira, Darmstadt, Germany)ベースの酵素的付加(enzymatic attachment)、及び(2)[2+3]環化付加、例えば官能化抗体のアジド部位とリンカー-ペイロードの適当なシクロオクチン部位の間の1,3双極子環化付加、例えば、銅フリーのクリックケミストリーによるアジド-PEG-アミン官能化抗体への適当なリンカー-ペイロードの付加で実施することができる。Baskin, J. M.; Prescher, J. A.; Laughlin, S. T.; Agard, N. J.; Chang, P. V.; Miller, I. A.; Lo, A.; Codelli, J. A.; Bertozzi, C. R.の文献、PNAS 2007, 104(43), 16793-7を参照されたい。例えば、BupH(商標)(pH 6.5～8.0)中のアグリコシル化ヒト抗体IgG(IgG1、IgG4など)又はヒトIgG1アイソタイプを≧200モル当量のアジド-dPEG3-アミン(MW＝218.26g/mol)と混合する。得られた溶液をトランスグルタミナーゼ(25U/mL;抗体1mg当たり5U MTG、Zedira、Darmstadt、Germany、又はAjinomoto, Japan製)と混合すると、0.5～5mg/mLの最終濃度の抗体が得られ、該溶液をpH 6.5～8.0で保持し、その後、穏やかに振盪させながら、37℃で4～24時間インキュベートする。反応をESI-MSによりモニタリングする。反応の完結後、余分なアミン及びMTGを、酸性バッファーで溶出させるSEC又はプロテインAカラムにより除去し、その後、Trisバッファー(pH 8)で中性化して、アジド官能化抗体を生成させる。この生成物をSDS-PAGE及びESIにより解析する。アジド-dPEG3-アミンは、抗体の2つの部位－Q295及びQ297－に付加し、4DARアグリコシル化抗体-PEG3-アジドコンジュゲートについて、804Daの増加をもたらす。コンジュゲーション部位を、トリプシン消化された重鎖のペプチド配列マッピングにより、4DARアジド官能化抗体について、EEQリンカーYQリンカーSTYRで同定し、確認する。
別の例において、N297Q変異(EU付番)を含有するヒトIgG(IgG1、IgG4など)を有する部位特異的アグリコシル化抗体薬物コンジュゲートを、アジド官能化抗体とアルキン含有リンカー-ペイロードとの間の[2+3]クリック反応により調製する。具体的には、アジド官能化アグリコシル化ヒトIgG1抗体(mAb-PEG3-N3)を、水性媒体(例えば、PBS、5％グリセロールを含有するPBS、HBS)中のmAb-PEG3-N3(1～3mg/mL)を、DMSO、DMF、又はDMAなどの好適な有機溶媒に溶解させた≧6モル当量のリンカーペイロードとともに24℃～37℃で6時間超インキュベートすることにより、適当なリンカーペイロードにコンジュゲートする(すなわち、反応混合物は、5～20％有機溶媒、v/vを含有する)。反応の進行をESI-MSによりモニタリングし、mAb-PEG3-N3の非存在により、コンジュゲーションの完了が示された。余分な量のリンカーペイロード及び有機溶媒を、PBSを用いる溶出によるSECによってか、又は酸性バッファーを用いて溶出させ、その後のトリス(pH 8.0)で中和するプロテインAカラムにより除去する。精製されたコンジュゲートを、SEC、SDS-PAGE、及びESI-MSにより分析する。
抗体及び抗体-薬物コンジュゲートは、SDS-PAGE、SEC、及びMS(ESI)により特性評価することができる。1つの方法において、BenchMarkプレステインドタンパク質ラダー(Invitrogen、カタログ番号10748-010;ロット番号1671922)とともに非還元及び還元試料(2～4μg)を含むSDS-PAGE条件のものを、レーン毎に、(1.0mm×10ウェル)のNovex 4～20％Tris-グリシンゲル中にローディングし、180V、300mAで80分間泳動させる。分析用試料をNovex Tris-グリシンSDSバッファー(2×)(Invitrogen、カタログ番号LC2676)を用いて調製し、還元試料を10％の2-メカプトエタノール(mecaptoethanol)を含有するSDS試料バッファー(2×)を用いて調製する。
(実施例16a)
(細胞ベースのLXR ルシフェラーゼレポーターアッセイ)
本明細書に記載されるLXRアゴニストを、細胞ベースのLXR応答性ルシフェラーゼレポーターアッセイで評価した。アッセイ細胞株を作製するために、LXR調節型ルシフェラーゼレポーター遺伝子[Cignal Lenti LXRレポーター(luc)キット(Qiagen、カタログ番号CLS-001L)]をTHP1細胞に形質導入し、細胞をピューロマイシン中で2週間選択した。レンチウイルスは、基本プロモーター及びLXR転写応答エレメントのタンデムリピートの制御下でホタルルシフェラーゼ遺伝子を発現する。得られる細胞株は、THP1/LXR-Luc細胞と呼ばれる。本アッセイのために、THP1/LXR-Luc細胞を、10％ FBS及びペニシリン/ストレプトマイシンが補充されたRPMIを含有する培地中、96ウェルプレートに40,000細胞/ウェルで播種し、その後、200nMホルボールミリステート酢酸塩(PMA)で、3日間分化させた。その後、培地を除去し、PMAを含まない80μLの新鮮な培地と交換した。遊離のペイロードの3倍連続希釈物を、100％DMSO中に調製し、新鮮な培地に移し、20μLを0.2％の最終一定DMSO濃度で、及び遊離ペイロードを100nM～0.015nMの範囲の最終濃度で細胞に添加した。プレート中の最後のウェルは、培地及び0.2％ DMSOのみを含有するブランク対照(未処理のウェル)としての役割を果たし、3倍連続希釈の延長としてプロットされた。48時間後、One-Glo(商標)試薬(Promega、カタログ番号E6130)を各ウェルに添加した後に、ルシフェラーゼ活性を決定した。相対発光単位(RLU)を、Envisionルミノメーター(PerkinElmer)で測定し、EC50値を、10点用量応答曲線(GraphPad Prism)に対する4パラメータロジスティック方程式用いて決定した。試験した各分子のEC50値を、表5aに示す。用量応答曲線上の最大のRLUの未処理のウェルにおけるRLUに対する比を取ることにより、シグナル対ノイズ(S/N)を決定した。表5aに示されているように、LXRアゴニストは、78.8 pM～72.9nMの範囲のEC50値及び8.8～13.1の範囲のS/N値で、THP1/LXR-Luc細胞におけるLXR-依存的ルシフェラーゼ活性を増大させた。
(表5a: 分化したTHP-1/LXR-Luc細胞におけるLXRアゴニストによるLXR-レポーター活性)
Figure 2022507781000462
(実施例17)
いくつかのリンカー-ペイロード(LP)を表1のペイロード化合物から誘導し、先の実施例に記載されている技法を用いて、抗MSR1抗体(H1H21234N-N297Q)又は非結合対照にコンジュゲートした。得られた抗MSR1 LXRアゴニスト抗体薬物コンジュゲート(ADC)を、ペイロード化合物について上記のTHP1/LXRLucレポーターアッセイにおける活性について試験した。表6に示されているように、試験された抗MSR1 LXRアゴニストADCは全て、414pM～2.11nMの範囲のEC50値及び9.4～13.7の範囲のS/N値で、THP1/LXR-Luc細胞の刺激を示した。コンジュゲートされていない抗MSR1は、LXR-Luc活性に対する影響を有さず、LP1にコンジュゲートされた非結合対照抗体(対照ADC-LP1)は、＞100nMのEC50値及び＜5.0の最大S/N値を有していた。
抗MSR1抗体H1H21234Nは、配列番号:2によるHCVR及び配列番号:10によるLCVRを有する。これは、それぞれ、配列番号:4、6、8、12、14、及び16によるHCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2、及びLCDR3を含む。ポリペプチド配列は、ポリヌクレオチド配列の配列番号:1、3、5、7、9、11、13、及び15によってコードされ得る。N297Qは、残基297が、アスパラギン(N)からグルタミン(Q)に変異していることを示す。全ての付番は、EU付番体系によるものである。
(表6: 分化したTHP-1/LXR-Luc細胞における抗MSR1-LXRアゴニストコンジュゲート活性)
Figure 2022507781000463
(実施例18)
(LC-ESI-MSによるADCの特性評価)
ADC試料のLC-ESI-MSによるインタクト質量の測定を行って、薬物-ペイロード分布プロファイルを決定し、平均DARを算出した。各被験試料(20～50ng、5μL)を、Acquity UPLC Protein BEH C4カラム(10Kpsi(69MPa)、300Å、1.7μm、75μm×100mm;カタログ番号186003810)にローディングした。3分間の脱塩後、タンパク質を溶出させ、マススペクトルを、Waters Synapt G2-Si質量分析計で取得した。表7にまとめたように、大部分の部位特異的ADCは、部位特異的なコンジュゲートについて3.9 DARを有していた。
(表7. ADCの性質)
Figure 2022507781000464
Figure 2022507781000465
(実施例19)
(LXRアゴニスト抗体-薬物コンジュゲートによる分化したTHP1 マクロファージにおけるコレステロール流出の活性化)
ヒトマクロファージ細胞株(THP-1; ATTCカタログ番号TIB-202)における抗MSR1-LXRアゴニストADCのコレステロール流出を活性化させる能力を、蛍光コレステロール類似体を用いて評価した。本アッセイのために、THP-1 細胞を、96ウェルポリリジン被覆プレート(Corning、カタログ番号354640)上に100,000細胞/ウェルで、5％ CO2中37℃の10％ FBS(Gibco、カタログ番号1043010)、10μg/mLペニシリン-ストレプトマイシン(Gibco、カタログ番号15140122)を含有するRPMI 1640培地(Irvine Scientific、カタログ番号9160)中に播種した。細胞を、培地(上述のもの)に添加された100nMのホルボール-12ミリステート13-アセテート(Sigma、カタログ番号P8139)での処理によって、96時間マクロファージに分化させた。その後、分化させたマクロファージを、25μM BODIPY-コレステロール(Avanti Polar Lipids、カタログ番号810255P)、0.2％ウシ血清アルブミン(BSA; Sigma カタログ番号A7211)、及び10μg/mL ペニシリン-ストレプトマイシンを含有するフェノールレッド不含RPMI 1640培地(Gibco、カタログ番号32404-014)中で24時間インキュベートし、それに続き、0.2％BSAを含有するフェノールレッド不含RPMI 1640培地中の遊離ペイロード(P1又はP2)、抗MSR1 Ab-LXRアゴニストncADC(H1H21234N-N297Q-29d1及びH1H21234N-N297Q-LP1)、又はアイソタイプ対照-LXRアゴニストncADC(アイソタイプ対照-N297Q-LP1)のいずれかの1×10-7M～5×10-17Mの範囲の連続希釈物で24時間の処理を行った。細胞をフェノールレッド不含RPMI 1640培地で洗浄し、フェノールレッド不含RPMI1640培地中に50μg/mLの高密度リポタンパク質(Milliporeカタログ番号437641)、10μg/mLのアポリポプロテインA1(Millipore、カタログ番号ALP10)を含有する100μLのアクセプター培地と5時間インキュベートし、その後、アクセプター培地を回収し、細胞を、100μLのRIPAバッファー(Millipore、カタログ番号20-188)中で室温で穏やかに攪拌しながら2時間溶解させた。蛍光を、SpectraMax i3プレートリーダー(Molecular Devices)で、励起482nm、発光515nmでこれらの画分において測定した。以下の式:[アクセプター培地中での蛍光/(アクセプター培地での蛍光＋細胞可溶化物での蛍光)]×100を用いて、BODIPY-コレステロール流出のパーセンテージを計算した。
表8及び図13に示されるように、24時間後、遊離のペイロードP1及びP2は、それぞれ、20pM及び14pMの同様な量のコレステロール流出EC50値を示した。H1H21234N-N297Q-29d1 ncADCは、12 pMのEC50値を示し、H1H21234N-N297Q-LP1 ncADCは、98pMのEC50値を示した。アイソタイプ対照-N297Q-LP1 ncADCは、EC50値が13nMである最小のコレステロール流出を示した。
(表8: LXRアゴニスト及びLXRアゴニスト抗体-薬物コンジュゲートによるコレステロール流出の活性化)
Figure 2022507781000466

Claims (56)

  1. 式Iの化合物、又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態:
    Figure 2022507781000467
     (式中、
    Q1及びQ2のそれぞれは、独立に、-CH2-、-C(O)-、-C(H)(OH)-、-C(OH)2-、-SO2-、-SO-、-PO(OR3)-、-PO(NR3NR4)-、-NR3-、又は-N=であり;
    Wは、-CH2-、-N(H)-、又は-O-であり;
    R1は、-N(H)R4又は-N(R5)2であり;
    R2は、-N(H)R4であり;
    各R4は、各場合に独立に、水素、アミノ酸残基、N-アルキルアミノ酸残基、ペプチド残基、生分解性部位、アルキル、置換アルキル、アシル、又は置換アシルであり;
    R5は、アルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロシクロアルキル、又は置換ヘテロシクロアルキルであり、ここで、各ヘテロシクロアルキル又は置換ヘテロシクロアルキルは、窒素及び酸素から選択される1、2、又は3個のヘテロ原子を含み、かつ置換されている場合には、少なくとも1つの-OH及び-CH2OHを含むか、又は少なくとも1つの一級もしくは二級窒素を含み;
    各R6は、独立に、ハロ、C1-6アルキル、C1-6アルコキシ、-CN、O-グルコース、O-アミノ酸残基、又はO-PEGn1であり(ここで、各nは、0～14の整数であり、かつ各n1は、1～12の整数である);かつ
    各R3は、独立に、水素、アルキル、又はアリールである)。
  2. 式Iによる請求項1記載の化合物、又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態:
    Figure 2022507781000468
     (式中、
    Q1及びQ2のそれぞれは、独立に、-CH2-、-C(O)-、-C(H)(OH)-、-C(OH)2-、-SO2-、-SO-、-PO(OR3)-、-PO(NR3NR4)-、-NR3-、又は-N=であり;
    Wは、-CH2-、-N(H)-、又は-O-であり;
    R1は、-N(H)R4又は-N(R5)2であり;
    R2は、-N(H)R4であり;
    各R4は、各場合に独立に、水素、アミノ酸残基、N-アルキルアミノ酸残基、ペプチド残基、生分解性部位、又はアルキルであり;
    R5は、アルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロシクロアルキル、又は置換ヘテロシクロアルキルであり、ここで、各ヘテロシクロアルキル又は置換ヘテロシクロアルキルは、窒素及び酸素から選択される1、2、又は3個のヘテロ原子を含み、かつ置換されている場合には、少なくとも1つの-OH及び-CH2OHを含むか、又は少なくとも1つの一級もしくは二級窒素を含み;
    各R6は、独立に、ハロ、C1-6アルキル、C1-6アルコキシ、-CN、O-グルコース、O-アミノ酸残基、又はO-PEGn1であり(ここで、各nは、0～14の整数であり、かつ各n1は、1～12の整数である);かつ
    各R3は、独立に、水素、アルキル、又はアリールである)。
  3. 式Iによる請求項1記載の化合物、又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態:
    Figure 2022507781000469
     (式中、
    Q1及びQ2のそれぞれは、独立に、-CH2-、-C(O)-、-C(H)(OH)-、又は-C(OH)2-であり;
    Wは、-CH2-、-N(H)-、又は-O-であり;
    R1は、-N(H)R4又は-N(R5)2であり;
    R2は、-N(H)R4であり;
    各R4は、各場合に独立に、水素、アミノ酸残基、N-アルキルアミノ酸残基、ペプチド残基、生分解性部位、又はアルキルであり;
    R5は、アルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロシクロアルキル、又は置換ヘテロシクロアルキルであり、ここで、各ヘテロシクロアルキル又は置換ヘテロシクロアルキルは、窒素及び酸素から選択される1、2、又は3個のヘテロ原子を含み、かつ置換されている場合には、少なくとも1つの-OH及び-CH2OHを含むか、又は少なくとも1つの一級もしくは二級窒素を含み;かつ
    各R6は、独立に、ハロ、C1-6アルキル、C1-6アルコキシ、-CN、O-グルコース、O-アミノ酸残基、又はO-PEGn1である(ここで、各nは、0～14の整数であり、かつ各n1は、1～12の整数である)。
  4. 式IIによる請求項3記載の化合物、又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態:
    Figure 2022507781000470
     。
  5. Q1が、-CH2-であり、かつQ2が、-C(O)-である、請求項1～4のいずれか1項記載の化合物。
  6. Q1が、-C(H)(OH)-であり、かつQ2が、-C(O)-である、請求項1～5のいずれか1項記載の化合物。
  7. Q1が、-C(O)-であり、かつQ2が、-C(O)-である、請求項1～6のいずれか1項記載の化合物。
  8. Q1が、-C(O)-であり、かつQ2が、-CH2-である、請求項1～7のいずれか1項記載の化合物。
  9. Q1が、-C(O)-であり、かつQ2が、-C(H)(OH)-である、請求項1～8のいずれか1項記載の化合物。
  10. Wが、-CH2-である、請求項1～9のいずれか1項記載の化合物。
  11. Wが、-O-である、請求項1～10のいずれか1項記載の化合物。
  12. Wが、-NH-である、請求項1～11のいずれか1項記載の化合物。
  13. 式IIIによる、請求項1～記載の化合物、又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態:
    Figure 2022507781000471
     。
  14. R1が、-N(H)R4である、請求項1～13のいずれか1項記載の化合物。
  15. R1が、-N(R5)2である、請求項1～13のいずれか1項記載の化合物。
  16. R1が、-NH2であり;かつ
    各R4が、各場合に独立に、アミノ酸残基、N-アルキルアミノ酸残基、ペプチド残基、生分解性部位、又はアルキルである、
    請求項14記載の化合物。
  17. 各R4が、各場合に独立に、アミノ酸残基であり;かつ
    該アミノ酸残基が、アラニン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、トリプトファン、チロシン、バリン、セリン、トレオニン、アスパラギン、グルタミン、システイン、セレノシステイン、グリシン、プロリン、アルギニン、ヒスチジン、リジン、アスパラギン酸、及びグルタミン酸からなる群から選択される、
    請求項16記載の化合物。
  18. 以下
    Figure 2022507781000472
    Figure 2022507781000473
    Figure 2022507781000474
    からなる群から選択される請求項17記載の化合物、又はその医薬として許容し得る塩もしくは溶媒和物。
  19. 各R4が、各場合に独立に、ペプチド残基であり、ここで該ペプチド残基が、アラニン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、トリプトファン、チロシン、バリン、セリン、トレオニン、アスパラギン、グルタミン、システイン、セレノシステイン、グリシン、プロリン、アルギニン、ヒスチジン、リジン、アスパラギン酸、及びグルタミン酸、並びにそれらの残基からなる群から選択されるアミノ酸を含む、
    請求項16記載の化合物。
  20. 以下のもの
    Figure 2022507781000475
     である、請求項19記載の化合物;又はその医薬として許容し得る塩もしくは溶媒和物。
  21. 以下のもの
    Figure 2022507781000476
     である、請求項14記載の化合物;又はその医薬として許容し得る塩もしくは溶媒和物。
  22. R1及びR2が、-N(H)R4である、請求項1～13のいずれか1項記載の化合物。
  23. 各R4が、各場合に独立に、アミノ酸残基であり;ここで
    該アミノ酸が、アラニン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、トリプトファン、チロシン、バリン、セリン、トレオニン、アスパラギン、グルタミン、システイン、セレノシステイン、グリシン、プロリン、アルギニン、ヒスチジン、リジン、アスパラギン酸、及びグルタミン酸、並びにそれらの残基からなる群から選択される、
    請求項22記載の化合物。
  24. 以下
    Figure 2022507781000477
     からなる群から選択される、請求項23記載の化合物;又はその医薬として許容し得る塩もしくは溶媒和物。
  25. 以下のもの
    Figure 2022507781000478
     である、請求項15記載の化合物;又はその医薬として許容し得る塩もしくは溶媒和物。
  26. 以下のもの
    Figure 2022507781000479
     である、請求項22記載の化合物;又はその医薬として許容し得る塩もしくは溶媒和物。
  27. リンカーに結合した請求項1～26のいずれか1項記載の化合物を含むリンカー-ペイロード。
  28. 式LPa、式LPb、式LPc、又は式LPdを有する、請求項1～27のいずれか1項記載のリンカー-ペイロード、又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態:
    Figure 2022507781000480
     (式中
    Lは、リンカーであり;
    Q1及びQ2のそれぞれは、独立に、-CH2-、-C(O)-、-C(H)(OH)-、-C(OH)2-、-SO2-、-SO-、-PO(OR3)-、-PO(NR3NR4)-、-NR3-、又は-N=であり;
    Wは、-CH2-、-N(H)-、又は-O-であり;
    R1は、-N(H)R4、-N(H)R4-、-N(H)-、-N(R5)2、又は-N(R5)2-であり;
    R2は、-N(H)R4、-N(H)R4-、又は-N(H)-であり;
    各R4は、各場合に独立に、水素、アミノ酸残基、N-アルキルアミノ酸残基、ペプチド残基、生分解性部位、アルキル、置換アルキル、アシル、置換アシル、又は-アルキレン-であり;
    R5は、アルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロシクロアルキル、又は置換ヘテロシクロアルキルであり、ここで、各ヘテロシクロアルキル又は置換ヘテロシクロアルキルは、窒素及び酸素から選択される1、2、又は3個のヘテロ原子を含み、かつ置換されている場合には、少なくとも1つの-OH及び-CH2OHを含むか、又は少なくとも1つの一級もしくは二級窒素を含み;
    各R6は、独立に、ハロ、C1-6アルキル、C1-6アルキレン、C1-6アルコキシ、-CN、O-グルコース、O-アミノ酸残基、又はO-PEGn1であり(ここで、各nは、0～14の整数であり、かつ各n1は、1～12の整数である);かつ
    各R3は、独立に、水素、アルキル、又はアリールである)。
  29. 各R4が、各場合に独立に、水素、アミノ酸残基、N-アルキルアミノ酸残基、ペプチド残基、生分解性部位、アルキル、又は-アルキレン-である、請求項28記載のリンカー-ペイロード。
  30. 式LPa′、式LPb′、式LPc′、又は式LPd′を有する、請求項28記載のリンカー-ペイロード:
    Figure 2022507781000481
     (式中、
    SP1及びSP2は、存在する場合には、スペーサー基であり;
    各AAは、アミノ酸残基であり;かつ
    p1は、1～10の整数である)。
  31. 前記リンカーL又はスペーサーSP2が、アリール窒素、又は単独のもしくはペプチド内のアミノ酸残基に結合している、請求項1～30のいずれか1項記載のリンカー-ペイロード。
  32. 以下
    Figure 2022507781000482
    Figure 2022507781000483
    Figure 2022507781000484
    Figure 2022507781000485
    Figure 2022507781000486
    からなる群から選択される、請求項27～31のいずれか1項記載のリンカー-ペイロード、又はその医薬として許容し得る塩もしくは溶媒和物。
  33. 抗体、又はその抗原結合断片に結合した請求項1～32のいずれか1項記載の化合物又はリンカー-ペイロードを含む、抗体-薬物-コンジュゲート。
  34. 式A、式B、式C、又は式Dの化合物、又はその医薬として許容し得る塩もしくは立体異性形態:
    Figure 2022507781000487
     (式中、
    Lは、リンカーであり;
    BAは、結合剤であり;
    kは、1～30の整数であり;
    Q1及びQ2のそれぞれは、独立に、-CH2-、-C(O)-、-C(H)(OH)-、-C(OH)2-、-SO2-、-SO-、-PO(OR3)-、-PO(NR3NR4)-、-NR3-、又は-N=であり;
    Wは、-CH2-、-N(H)-、又は-O-であり;
    R1は、-N(H)R4、-N(H)R4-、-N(H)-、-N(R5)2、又は-N(R5)2-であり;
    R2は、-N(H)R4、-N(H)R4-、又は-N(H)-であり;
    各R4は、各場合に独立に、水素、アミノ酸残基、N-アルキルアミノ酸残基、ペプチド残基、生分解性部位、アルキル、置換アルキル、アシル、置換アシル、又は-アルキレン-であり;
    R5は、アルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロシクロアルキル、又は置換ヘテロシクロアルキルであり、ここで、各ヘテロシクロアルキル又は置換ヘテロシクロアルキルは、窒素及び酸素から選択される1、2、又は3個のヘテロ原子を含み、かつ置換されている場合には、少なくとも1つの-OH及び-CH2OHを含むか、又は少なくとも1つの一級もしくは二級窒素を含み;
    各R6は、独立に、ハロ、C1-6アルキル、C1-6アルキレン、C1-6アルコキシ、-CN、O-グルコース、O-アミノ酸残基、又はO-PEGn1であり(ここで、各nは、0～14の整数であり、かつ各n1は、1～12の整数である);かつ
    各R3は、独立に、水素、アルキル、又はアリールである)。
  35. 各R4が、各場合に独立に、水素、アミノ酸残基、N-アルキルアミノ酸残基、ペプチド残基、生分解性部位、アルキル、又は-アルキレン-である、請求項34記載の化合物。
  36. 式A′、式B′、式C′、又は式D′を有する、請求項34記載の化合物:
    Figure 2022507781000488
     (式中、
    SP1及びSP2は、存在する場合には、スペーサー基であり;
    各AAは、アミノ酸残基であり;かつ
    p1は、1～10の整数である)。
  37. 以下
    Figure 2022507781000489
    Figure 2022507781000490
    Figure 2022507781000491
    Figure 2022507781000492
    Figure 2022507781000493
    からなる群から選択される、請求項36記載の化合物。
  38. 式(A′′)の請求項34記載の化合物、又はその医薬として許容し得る塩、もしくは立体異性形態、もしくはその位置異性体
    Figure 2022507781000494
     (式中、
    SP1、SP2、及びSP3はそれぞれ、スペーサー基であり、ここで、SP3は、(AA)p1のうちの1つのAAに連結され;
    各AAは、アミノ酸残基であり;
    p1は、1～10の整数であり;かつ
    EGは、強化剤である)。
  39. 前記SP1スペーサーが:
    Figure 2022507781000495
     であり
    (式中、
    RG′は、反応性基RGの結合剤との反応の結果として生じる反応性基残基であり;
    Figure 2022507781000496
     は、該結合剤への直接又は間接の結合であり;かつ
    bは、1～4の整数である);
    前記(AA)p1-SP2-が、-NH-リジン-バリン-アラニン-、-NH-リジン-バリン-シトルリン-、又は-NH-リジン-バリン-シトルリン-PABC-であり;
    前記SP3スペーサーが:
    Figure 2022507781000497
     である
    (式中、
    RG′は、反応性基RGの強化剤EGとの反応の結果として生じる反応性基残基であり;
    Figure 2022507781000498
     は、該強化剤への結合であり;かつ
    Figure 2022507781000499
     は、(AA)p1への結合である)、請求項38記載の化合物。
  40. 以下
    Figure 2022507781000500
    Figure 2022507781000501
    Figure 2022507781000502
    Figure 2022507781000503
    Figure 2022507781000504
    Figure 2022507781000505
    Figure 2022507781000506
    Figure 2022507781000507
    からなる群から選択される、請求項38又は39記載の化合物。
  41. BAが、抗体又はその抗原結合断片である、請求項34～40のいずれか1項記載の化合物。
  42. kが、1～4の整数である、請求項34～41のいずれか1項記載の化合物。
  43. BAが、HER2に結合する抗体又はその抗原結合断片である、請求項34～42のいずれか1項記載の化合物。
  44. BAが、PRLRに結合する抗体又はその抗原結合断片である、請求項34～42のいずれか1項記載の化合物。
  45. BAが、MSR1に結合する抗体又はその抗原結合断片である、請求項34～42のいずれか1項記載の化合物。
  46. BAが、抗体又はその抗原結合断片であり、かつコンジュゲーションが、少なくとも1つのQ295残基を介するものである、請求項34～45のいずれか1項記載の化合物。
  47. BAが、抗体又はその抗原結合断片であり、かつコンジュゲーションが、2つのQ295残基を介するものである、請求項34～45のいずれか1項記載の化合物。
  48. BAが、N297Q抗体又はその抗原結合断片である、請求項34～47のいずれか1項記載の化合物。
  49. BAが、N297Q抗体又はその抗原結合断片であり、かつコンジュゲーションが、少なくとも1つのQ295及び少なくとも1つのQ297残基を介するものである、請求項34～48のいずれか1項記載の化合物。
  50. BAが、N297Q抗体又はその抗原結合断片であり、かつコンジュゲーションが、2つのQ295残基及び2つのQ297残基を介するものである、請求項34～49のいずれか1項記載の化合物。
  51. 請求項1～50のいずれか1項記載の化合物、リンカー-ペイロード、又は抗体-薬物-コンジュゲート、及び医薬として許容し得る賦形剤、担体、又は希釈剤を含む医薬組成物。
  52. 対象における脂質異常症、代謝性疾患、炎症、又は神経変性疾患の治療のための方法であって、該対象への有効治療量の請求項1～51のいずれか1項記載の化合物又は医薬組成物の投与を含む、前記方法。
  53. 対象における脂質異常症の治療のための方法であって、該対象への有効治療量の請求項1～52のいずれか1項記載の化合物又は医薬組成物の投与を含む、前記方法。
  54. 対象における代謝性疾患の治療のための方法であって、該対象への有効治療量の請求項1～53のいずれか1項記載の化合物又は医薬組成物の投与を含む、前記方法。
  55. 対象における炎症の治療のための方法であって、該対象への有効治療量の請求項1～54のいずれか1項記載の化合物又は医薬組成物の投与を含む、前記方法。
  56. 対象における神経変性疾患の治療のための方法であって、該対象への有効治療量の請求項1～55のいずれか1項記載の化合物又は医薬組成物の投与を含む、前記方法。
JP2021527836A 2018-11-20 2019-11-19 Ｌｘｒアゴニストとしての使用のためのビス－オクタヒドロフェナントレンカルボキサミド誘導体及びそのタンパク質コンジュゲート Pending JP2022507781A (ja)

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