JP2021500324A - 治療に適するリポソームrna製剤の調製および保管 - Google Patents
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Abstract
Description
第1の態様では、本開示は、生物活性が改善されたRNAリポプレックス粒子を調製するための方法、本開示に従い調製されたRNAリポプレックス粒子、およびこのようなRNAリポプレックス粒子を含む組成物に関する。RNAリポプレックス粒子、およびRNAリポプレックス粒子を含む組成物は、非経口投与の後、特に、静脈内投与の後における、RNAの、標的組織への送達に有用である。RNAリポプレックス粒子は、エタノール中の脂質の濃度が高濃度の溶液を、水または適切な水性相へと注入することにより得られるリポソームを使用して調製される。一実施態様では、RNAリポプレックス製品は、約1nm−1における単一のブラッグピークが観察され、ピーク幅が0.2nm−1より小さい、x線散乱における特異的パターンにより特徴づけられる。
少なくとも1つのエピトープを含む、ペプチドまたはタンパク質をコードするRNAと、
少なくとも1つのカチオン性脂質と、少なくとも1つのさらなる脂質と
を含み、
RNAリポプレックス粒子内の、正の電荷の、負の電荷に対する比が、約1:2〜約1.9:2、または約1.3:2.0であり、
約1nm−1における単一のブラッグピークにより特徴づけられ、ここで、ピーク幅が、0.2nm−1より小さい、RNAリポプレックス粒子
を含む組成物にさらに関する。
第2の態様では、本開示は、産業的なGMPに準拠する形で、RNAリポプレックス粒子を調製することを可能とする方法に関する。
少なくとも1つのエピトープを含む、ペプチドまたはタンパク質をコードするRNAと、
少なくとも1つのカチオン性脂質と、少なくとも1つのさらなる脂質と
を含み、
RNAリポプレックス粒子内の、正の電荷の、負の電荷に対する比が、約1:2〜約1.9:2、または約1.3:2.0であり、
約1nm−1における単一のブラッグピークにより特徴づけられ、ここで、ピーク幅が、0.2nm−1より小さい、RNAリポプレックス粒子
を含む組成物にさらに関する。
第3の態様では、本開示は、製品の品質の実質的な喪失を伴わずに、特に、RNA活性の実質的な喪失を伴わずに、RNAリポプレックス粒子を保管するための方法および組成物に関する。特に、本開示は、RNAリポプレックス粒子の品質の実質的な喪失を伴わずに、特に、RNA活性の実質的な喪失を伴わずに、RNAリポプレックス粒子の凍結、凍結乾燥、または噴霧乾燥を可能とする製剤に関する。
少なくとも1つのエピトープを含む、ペプチドまたはタンパク質をコードするRNAと、
少なくとも1つのカチオン性脂質と、少なくとも1つのさらなる脂質と、
を含み、
RNAリポプレックス粒子内の、正の電荷の、負の電荷に対する比が、約1:2〜約1.9:2、または約1.3:2.0である、RNAリポプレックス粒子と、
0mM〜約40mMの濃度の塩化ナトリウムと、
安定剤と
を含む組成物にさらに関する。
約0.05mg/mLの濃度の、少なくとも1つのエピトープを含む、ペプチドまたはタンパク質をコードするRNAと、
約2:1のモル比の、DOTMAおよびDOPEと
を含み、
RNAリポプレックス粒子内の、正の電荷の、負の電荷に対する比が、約1.3:2.0である、RNAリポプレックス粒子と、
約20mMの濃度の塩化ナトリウムと、
約22%(w/v)の濃度のショ糖と、
pHが約6.2である、約7.5mMの濃度のHEPESと、
約2.5mMの濃度のEDTAと
を含む組成物にさらに関する。
少なくとも1つのエピトープを含む、ペプチドまたはタンパク質をコードするRNAと、
少なくとも1つのカチオン性脂質と、少なくとも1つのさらなる脂質と
を含み、
RNAリポプレックス粒子内の、正の電荷の、負の電荷に対する比が、約1:2〜約1.9:2、または約1.3:2.0である、RNAリポプレックス粒子と、
10mM〜約80mMの濃度の塩化ナトリウムと、
安定剤と
を含む組成物にさらに関する。
約0.05mg/mLの濃度の、少なくとも1つのエピトープを含む、ペプチドまたはタンパク質をコードするRNAと、
約2:1のモル比の、DOTMAおよびDOPEと
を含み、
RNAリポプレックス粒子内の、正の電荷の、負の電荷に対する比が、約1.3:2.0である、RNAリポプレックス粒子と、
約20mMの濃度の塩化ナトリウムと、
約10%(w/v)の濃度のトレハロースと、
pHが約6.2である、約7.5mMの濃度のHEPESと、
約2.5mMの濃度のEDTAと
を含む組成物にさらに関する。
以下では、本開示の全ての態様に当てはまる定義を提示する。別途指示がない限り、以下の用語は、以下の意味を有する。任意の、規定されていない用語は、当該技術分野で認知された、それらの意味を有する。
[式中、cは、特定のイオン性分子種のモル濃度であり、zは、その電荷の絶対値である。総和Σは、溶液中の、全ての異なる種類のイオン(i)について取る]により、数学的に表される。
[式中、ρは、流体の密度であり、νは、流体量であり、lは、特性長(ここでは、混合要素の内径)であり、ηは、粘度である]を使用して計算されうる、無次元数である。
本明細書で記載されるRNAリポプレックス粒子は、一実施態様では、約200nm〜約1000nm、約200nm〜約800nm、約250〜約700nm、約400〜約600nm、約300nm〜約500nm、または約350nm〜約400nmの範囲の平均直径を有する。具体的な実施態様では、RNAリポプレックス粒子は、約200nm、約225nm、約250nm、約275nm、約300nm、約325nm、約350nm、約375nm、約400nm、約425nm、約450nm、約475nm、約500nm、約525nm、約550nm、約575nm、約600nm、約625nm、約650nm、約700nm、約725nm、約750nm、約775nm、約800nm、約825nm、約850nm、約875nm、約900nm、約925nm、約950nm、約975nm、または約1000nmの平均直径を有する。ある実施態様では、RNAリポプレックス粒子は、約250nm〜約700nmの範囲の平均直径を有する。別の実施態様では、RNAリポプレックス粒子は、約300nm〜約500nmの範囲の平均直径を有する。例示的実施態様では、RNAリポプレックス粒子は、約400nmの平均直径を有する。
一実施態様では、脂質溶液、リポソームおよび本明細書で記載されるRNAリポプレックス粒子は、カチオン性脂質を含む。本明細書で使用される「カチオン性脂質」は、正味の正の電荷を有する脂質を指す。カチオン性脂質は、脂質マトリックスとの静電相互作用により、負に帯電したRNAに結合する。一般に、カチオン性脂質は、ステロール、アシル鎖またはジアシル鎖、および正の電荷を保有することが典型的な、脂質のヘッド基などの親油性部分を有する。カチオン性脂質の例は、1,2−ジ−O−オクタデセニル−3−トリメチルアンモニウムプロパン(DOTMA)、ジメチルジオクタデシルアンモニウム(DDAB);1,2−ジオレオイル−3−トリメチルアンモニウムプロパン(DOTAP);1,2−ジオレオイル−3−ジメチルアンモニウムプロパン(DODAP);1,2−ジアシルオキシ−3−ジメチルアンモニウムプロパン;1,2−ジアルキルオキシ−3−ジメチルアンモニウムプロパン;ジオクタデシルジメチル塩化アンモニウム(DODAC)、2,3−ジ(テトラデコキシ)プロピル−(2−ヒドロキシエチル)−ジメチルアザニウム(DMRIE)、1,2−ジミリストイル−sn−グリセロ−3−エチルホスホコリン(DMEPC)、1(l),2−ジミリストイル−3−トリメチルアンモニウムプロパン(DMTAP)、1,2−ジオレイルオキシプロピル−3−ジメチル−ヒドロキシエチルアンモニウム臭化物(DORIE)、および2,3−ジオレオイルオキシ−N−[2(スペルミンカルボキサミド)エチル]−N,N−ジメチル−1(l)−プロパナミウムトリフルオロ酢酸(DOSPA)を含むがこれらに限定されない。DOTMA、DOTAP、DODAC、およびDOSPAが好ましい。具体的な実施態様では、少なくとも1つのカチオン性脂質は、DOTMAおよび/またはDOTAPである。
本開示では、「RNA」という用語は、リボヌクレオチド残基を含む核酸分子に関する。好ましい実施態様では、RNAは、リボヌクレオチド残基の全てまたは大部分を含有する。本明細書で使用される「リボヌクレオチド」は、β−D−リボフラノシル基の2’位において、ヒドロキシル基を伴うヌクレオチドを指す。RNAは、限定せずに述べると、二本鎖RNA、一本鎖RNA、単離RNAなど、部分精製RNA、本質的に純粋なRNA、合成RNA、組換え作製RNAのほか、1つまたは複数のヌクレオチドの、付加、欠失、置換、および/または変更により、天然に存在するRNAと異なる、修飾RNAを包摂する。このような変更は、非ヌクレオチド素材の、内部RNAヌクレオチドまたはRNAの末端への付加を指す場合がある。本明細書ではまた、RNA内のヌクレオチドが、化学合成されたヌクレオチドまたはデオキシヌクレオチドなど、非標準ヌクレオチドでありうることも想定される。本開示のために、これらの変更されたRNAは、天然に存在するRNAのアナログであると考えられる。
本開示のRNAリポプレックス粒子の電荷は、少なくとも1つのカチオン性脂質内に存在する電荷と、RNA内に存在する電荷との総和である。電荷比は、少なくとも1つのカチオン性脂質内に存在する正の電荷の、RNA内に存在する負の電荷に対する比である。少なくとも1つのカチオン性脂質内に存在する正の電荷の、RNA内に存在する負の電荷に対する電荷比は、以下の式:電荷比=[(カチオン性脂質濃度(モル))×(カチオン性脂質内の、正の電荷の総数)]/[(RNA濃度(モル))×(RNA内の、負の電荷の総数)]により計算される。RNAの濃度、および少なくとも1つのカチオン性脂質量は、当業者が、常套的方法を使用して決定することができる。
A.塩強度およびイオン強度
本開示に従い、本明細書で記載される組成物は、塩化ナトリウムなどの塩を含みうる。理論に束縛されることを望まないが、塩化ナトリウムは、少なくとも1つのカチオン性脂質と混合する前に、RNAを前処理するためのイオン性オスモル濃度剤として機能する。ある特定の実施態様は、本開示における塩化ナトリウムに対する、代替的な有機塩または無機塩を想定する。代替的な塩は、限定せずに述べると、塩化カリウム、リン酸二カリウム、リン酸一カリウム、酢酸カリウム、重炭酸カリウム、硫酸カリウム、酢酸カリウム、リン酸二ナトリウム、リン酸一ナトリウム、酢酸ナトリウム、重炭酸ナトリウム、硫酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、塩化リチウム、塩化マグネシウム、リン酸マグネシウム、塩化カルシウム、およびエチレンジアミン四酢酸(EDTA)のナトリウム塩を含む。
本明細書で記載される組成物は、凍結組成物、凍結乾燥組成物、または噴霧乾燥組成物の、凍結、凍結乾燥、または噴霧乾燥、および保管時における、製品の品質の実質的な喪失を回避し、特に、RNA活性の実質的な喪失を回避するための安定剤を含みうる。本明細書では、このような組成物はまた、安定とも称する。典型的に、安定剤は、凍結工程、凍結乾燥工程、または噴霧乾燥工程の前に存在し、結果として得られる凍結調製物中、凍結乾燥(lyophilizedまたはfreeze−dried)調製物中に存続する。本明細書で記載される組成物を使用して、凍結調製物、凍結乾燥(lyophilizedまたはfreeze−dried)調製物の、凍結、凍結乾燥、または噴霧乾燥、および保管時に、RNAリポプレックス粒子を保護する、例えば、凝集、粒子崩壊、RNA分解、および/または他の種類の損傷を低減または防止することができる。
本開示に従い、本明細書で記載されるRNAリポプレックス粒子組成物は、RNAリポプレックス粒子の安定性に適し、特に、RNAの安定性に適するpHを有する。一実施態様では、本明細書で記載されるRNAリポプレックス粒子組成物は、約5.7〜約6.7のpHを有する。具体的な実施態様では、組成物は、約5.7、約5.8、約5.9、約6.0、約6.1、約6.2、約6.3、約6.4、約6.5、約6.6、または約6.7のpHを有する。
本開示のある特定の実施態様は、キレート剤の使用を想定する。キレート剤とは、金属イオンとの、少なくとも2つの配位共有結合を形成し、これにより、安定的な、水溶性の複合体を発生させることが可能な化合物を指す。理論に束縛されることを望まないが、キレート剤は、そうしなければ、本開示における、加速RNA分解を誘導しうる、遊離二価イオンの濃度を低減する。適切なキレート剤の例は、限定せずに述べると、エチレンジアミン四酢酸(EDTA)、EDTAの塩、デスフェリオキサミンB、デフェロキサミン、ジチオカルブナトリウム、ペニシラミン、ペントテト酸カルシウム、ペンテト酸のナトリウム塩、スクシマー、トリエンチン、ニトリロ三酢酸、trans−ジアミノシクロヘキサンテトラ酢酸(DCTA)、ジエチレントリアミン五酢酸(DTPA)、ビス(アミノエチル)グリコールエーテル−N,N,N’,N’−テトラ酢酸、イミノ二酢酸、クエン酸、酒石酸、フマル酸、またはこれらの塩を含む。ある特定の実施態様では、キレート剤は、EDTAまたはEDTAの塩である。例示的実施態様では、キレート剤は、EDTA二ナトリウム二水和物である。
例示的な一実施態様では、RNAリポプレックス粒子の組成物は、約2:1〜約1:1のモル比の、DOTMAおよびDOPEと、少なくとも1つのエピトープをコードする、約0.05mg/mLの濃度のRNAとを含み、この場合、生理的pHにおいて、RNAリポプレックス粒子内の、正の電荷の、負の電荷に対する電荷比が、約1.3:2.0であり;約20mMの濃度の塩化ナトリウムと;約22%(w/v)の濃度のショ糖と;pHが約6.2である、約7.5mMの濃度のHEPESと;約2.5mMの濃度のEDTAとを含む。さらなる具体的実施態様では、RNAは、5つのエピトープまたは10のエピトープをコードする。
本明細書で使用される「安定な」とは、多様な生理化学的パラメータについての測定値が、規定された範囲内にある組成物を指す。一実施態様では、多様なパラメータに従い、安定性について評価するように、組成物を解析する。本開示に従い、安定性パラメータは、限定せずに述べると、RNAリポプレックス粒子の平均直径、多分散指数、RNAの完全性、RNA含有量、pH、オスモル濃度、および目視できない粒子の数を含む。当業者は、常套的な実験室法および測定器を使用して、このようなパラメータを測定することが可能であろう。例えば、安定性パラメータは、動的光散乱(DLS)、光掩蔽、分光光度法法、アガロースゲル電気泳動、バイオアナライザー、または他の任意の適切な技法を使用して評価することができる。一実施態様では、バイオアナライザーは、RNAの完全性およびRNAの含有量の両方を測定することが可能な、Agilent 2100 Bioanalyzer(Agilent Technologies)である。一実施態様では、バイオアナライザーは、Advanced Analytical製の、Fragment Analyzerである。
ある実施態様では、本開示の組成物は、液体または固体である。非限定的な固体の例は、凍結形態または凍結乾燥形態を含む。好ましい実施態様では、組成物は、液体である。
本明細書で記載されるRNAリポプレックス粒子を含む組成物は、治療処置または予防処置のための、薬学的組成物または医薬として有用であるか、またはこれらを調製するために有用である。
一実施態様では、本明細書で記載される薬学的組成物は、静脈内投与、動脈内投与、皮下投与、皮内投与、または筋肉内投与される。ある特定の実施態様では、薬学的組成物は、局所投与または全身投与のために製剤化される。全身投与は、消化管を介する吸収を伴う経腸投与、または非経口投与を含みうる。本明細書で使用される「非経口投与」は、静脈内注射など、消化管を介する投与以外の、任意の形の投与を指す。好ましい実施態様では、薬学的組成物は、全身投与のために製剤化される。別の好ましい実施態様では、全身投与は、静脈内投与による。
一態様では、本明細書で記載されるRNAリポプレックス粒子は、薬学的組成物中に存在する。別の態様では、本明細書で記載される組成物は、薬学的組成物である。
本明細書で記載されるRNAリポプレックス粒子は、多様な疾患、特に、ペプチドまたはタンパク質の、対象への提供が、治療効果または予防効果を結果としてもたらす疾患の、治療処置または予防処置において使用することができる。例えば、ウイルスに由来する抗原またはエピトープの提供は、前記ウイルスにより引き起こされるウイルス性疾患の処置において有用でありうる。腫瘍抗原またはエピトープの提供は、がん細胞が、前記腫瘍抗原を発現させるがん疾患の処置において有用でありうる。
材料
本明細書の後出で記載される実験のために使用される、重要な材料は、
であった。
脂質混合物の調製
DOTMA/DOPE脂質混合物を、それぞれ、脂質モル比を2:1として、異なる、エタノール中の脂質の濃度で調製する。溶液を、以下の通りに調製する:
・DOPE脂質を秤量する。
・DOTMA/DOPEの、%によるモル比を、2:1に保つ、DOTMAの量を計算する。
・DOTMA脂質を秤量する。
・脂質を溶解させるのに必要な無水エタノールの量を計算する。
・無水エタノールを秤量する。
・37℃の水浴(bad)を用いて、脂質を、エタノール中に溶解させる。
リポソームの調製
リポソームは、以下の通りに、エタノール注入により調製した:0.9×40mmの注射針を装備した、1mLのシリンジを用いて、エタノール中に0.2mLのDOTM/DOPE(または他の脂質溶液)を、120rpmの攪拌下で、9.8mLの水へと注入した。リポソームコロイドを、30分間攪拌した。リポソームは、0.45もしくは1.2もしくは5μmのCAシリンジフィルターを介するか、またはこれらを介さずに濾過した。リポソームコロイドは、4〜8℃で保管した。DOTMA/DOPE脂質溶液は、50mMずつの中間段階を伴う、100〜400mMにわたる、異なる総脂質濃度の、66:33の%によるモル比で調製した。
RNAリポプレックスの調製
RNAリポプレックス製剤は、以下の通り、まず、RNA溶液(例えば、luc−RNA溶液)を、NaCl溶液と混合し、luc−RNAをあらかじめ濃縮することにより調製した。この後で、リポソームコロイドと、luc−RNA−NaCl溶液とを混合して、RNAリポプレックスを形成した。RNAリポプレックス製剤は、室温で、10分間インキュベートし、4〜8℃で保管した。異なるRNAリポプレックス製剤を、例えば、0.65のN/P比で調製した。RNAの、これらの異なるRNAリポプレックス製剤中の濃度は、0.1mg/mLであり、NaCl濃度は、50mMであった。RNAリポプレックスを調製するために、異なるリポソーム前駆体(異なるサイズ)を使用した。
動的光散乱
リポソームサイズおよびRNAリポプレックスサイズは、Nicomp測定器(PSS、Santa Barbara、USA)を使用する、公知の動的光散乱(DLS)法により測定した。リポソーム試料は、水により、1mMの全脂質濃度へと希釈した。RNAリポプレックス試料は、0.9%のNaCl溶液により、1対5に希釈した。試料は、5×50mmの培養チューブ(Kimble、USA)内で測定した。
光掩蔽:動的光散乱
0.5〜5μmの間のサイズ範囲内の、異なるリポソーム製剤およびRNAリポプレックス製剤についての、粒子の計数/測定は、Accusizer A7000測定器(PSS、Santa Barbara、USA)を使用して実施した。5mLの体積(2.5μLの試料/20mLの遊離粒子水)について、3回の測定を実施した。得られた結果は、3回の測定による粒子の量の平均値を表した。
小角度X線散乱
異なるリポソーム前駆体により調製される、異なるRNAリポプレックス製剤の内部構造パラメータは、小角度X線散乱(SAXS)により測定した。SAXSとは、材料を通過する場合の、X線の弾性散乱挙動を解析し、それらの小角度の散乱を記録することにより、試料中のナノスケールの密度差を定量しうる技法である。あらゆる被験RNA製剤について、長さパラメータと、d間隔パラメータとの相関を計算した。RNAリポプレックス製剤は、0.65のN/P比、0.1mg/mLのRNA、および112mMのNaClにより調製した。
アガロースゲル電気泳動
遊離RNAの、異なるRNAリポプレックス試料中の量は、ゲル電気泳動により測定した。次亜塩素酸ナトリウムを含有する、1%のアガロースゲルを使用して、測定を実施した。RNAリポプレックス試料は、DNAローディングダイにより、1:6に希釈した。12μLの、希釈RNAリポプレックス試料を、アガロースゲルへと、注意深くロードした。電気泳動を、80V、40分間の試行時間で実施した。
HPLC
異なるリポソーム製剤中の脂質濃度は、Sunfire C18 2.5μm 4.6×75mmカラム(Waters、Massachusetts、USA)と、205nmの波長とを使用する、HPLC(Agilent technologies、Santa Clara、USA)により測定した。移動相Aは、70%のメタノール/30%のイソプロパノール/0.1%のTFAの混合物であり、移動相Bは、55%のメタノール/15%のイソプロパノール/30%の水/0.1%のTFAの混合物であった。リポソーム試料は、水により、3mMの全脂質濃度へと希釈するか、または希釈しないでおいた。
細胞培養物:インビトロにおける、樹状細胞内のRNAトランスフェクション
RNAリポプレックス製剤は、異なるリポソーム前駆体およびluc−RNAにより調製した。RNAリポプレックスは、細胞培養実験のために、0.9%のNaCl溶液により、0.01mg/mLのRNAへと希釈した。異なるRNAリポプレックス製剤の、RNAトランスフェクション効率は、培地中または全血中に播種された、ヒト樹状細胞内で探索した。
動物モデル:脾臓のターゲティングおよび樹状細胞内のRNAトランスフェクション
異なるRNAリポプレックス製剤のトランスフェクション効率は、BALB/cマウスにおいて探索した。20μgの製剤化RNAリポプレックスを、眼窩後注射し、樹状細胞(脾臓標的)内のルシフェラーゼ発現を、6時間後に測定した。RNAリポプレックスは、luc−RNAおよび異なるリポソーム前駆体、生コロイドから得られた、小型または大型のリポソーム、ならびに0.45μmの濾過の後における小型および大型のリポソーム、0.65のN/P比、ならびに112mMのNaClにより調製した。
溶解度試験
高濃度(過飽和状態)のDOPE含有溶液を調製し、リポソームを製造するためのエタノール注入(次節)に使用しうるのかどうかを調べた。この溶解度試験シリーズにおいて得られる結果を、表1および2に示す。
異なるサイズのリポソームの製造
リポソームは、実施例3で記載したプロトコールを使用する、エタノール注入により製造した。エタノール注入後に、濾過法は実施しなかった。他の全てのパラメータを固定したまま、エタノール中の脂質の濃度を変動させた。リポソームサイズおよびは、実施例5および6に記載した、動的光散乱(DLS)により測定した。
異なるサイズのリポソームからの、RNAリポプレックスの製造
RNAリポプレックスは、他の全てのパラメータを固定したまま、それらの形成のためのリポソームのサイズを変動させる、異なるリポソーム前駆体を使用して、実施例4に記載される通りに製造した。リポソームサイズ(z平均)および多分散指数(PDI)は、実施例5および6に記載される、動的光散乱(DLS)実験の経過において決定した。
異なるリポプレックスによる小角度X線散乱(SAXS)
小角度のX線散乱実験は、異なる濃度の原液に由来するリポソームから得られたRNAリポプレックスにより、記載される通りに実施した。例えば、RNAリポプレックスは、DOTMA/DOPEを、2/1(モル/モル)とするリポソーム、および電荷比を1.3対2とするRNAから形成した。リポソームは、エタノール中の脂質の濃度を、100mM、300mM、および400mMとして、記載される通りに、エタノール注入により製造した。
[式中、qは、n次とし、qmaxを、それぞれのブラッグピークが最大となる位置とし、λを波長とし、θを角度とする、
による運動量移行である]
としてのピーク位置から与えられることを指し示す。ブラッグピークに由来しうるd間隔は、6.5nmのオーダーである。
として与えられうる。本明細書におけるリポプレックス生成物では、散乱パターンの、前述の、リポソームを製造するための、エタノール中の脂質の濃度、および生物活性との明らかな相関を導出することができる。ピーク位置は、不変であるが、ピーク幅は、適用されたエタノール中の脂質の濃度と共に、単調に変化する。エタノール中の脂質の濃度の増大(リポソームサイズの増大をもたらす)は、ピーク幅の減少に対応し、したがって、大きな相関長に対応する。同時に、生物活性も、相関長の増大と共に増大する。したがって、活性を改善した、記載されるリポプレックスであって、その製造のためにエタノール中に高濃度の脂質原液を使用し、使用したリポソームから製造されるリポプレックスは、明らかな構造的特徴により、区別することができる。加えて、非対称場流動分画(AF4)のような、他の方法によってもまた、活性を改善した、記載されるリポプレックスを、低活性のリポプレックスから区別することができる。
ヒト樹状細胞内の、RNAリポプレックスのトランスフェクション効率
luc−RNAリポプレックスは、他の全てのパラメータを固定したまま、それらの形成のためのリポソームのサイズを変動させる(それらの形成のための出発脂質濃度を変動させることにより)、異なるリポソーム前駆体を使用して、記載される通りに製造した。その後、異なるRNAリポプレックス製剤の、RNAトランスフェクション効率は、培地中または全血中に播種された、ヒト樹状細胞内で探索した。
異なるリポプレックスの、非対称流動場流動分画
懸濁液中の粒子を、分画および分離するための、今日の、一般的かつ最新の方法である、非対称流動場流動分画(AF4)を使用して、RNAリポプレックスの、さらなる差違を決定した。AF4理論に従えば、同様の特性および同等のサイズを伴う粒子は、同時に溶出するとされる。
インビトロにおけるRNAリポプレックスの生物活性
記載される通りに、リポソーム、異なる脂質原液、および/または異なる脂質濃度から調製された、異なるサイズの、ルシフェラーゼをコードするRNAリポプレックスの、細胞培養物へのトランスフェクション実験(樹状細胞)により決定される通り、ルシフェラーゼシグナルは、したがって、生物活性は、脂質の出発濃度と共に、単調に増大し、したがって、RNAリポプレックス形成のために使用されたリポソームサイズと共に、単調に増大する。対応する結果を、図6、8、および9に示す。
インビボにおけるRNAリポプレックスの生物活性
異なるサイズのリポソームから調製された、ルシフェラーゼをコードするRNAリポプレックスの、細胞培養物へのトランスフェクション実験(樹状細胞)により決定される通り、大型のリポソームにより調製されたRNAリポプレックスは、著明な高ルシフェラーゼの発現と、対応する生物活性とを結果としてもたらす。
RNAリポプレックスの自動式製造
RNAリポプレックスの自動式バッチ製造のために、図12に示される、一般に適用可能な手順を開発した。全ての工程は、材料の、安全な無菌操作を可能とする、あらかじめ滅菌した、単回使用の流路を使用して実施する。まず、RNAの濃度を、リポソーム濃度に照らして調整し、RNAを濃縮するために、NaClを添加する。これにより、RNA溶液を、RNA濃度に照らして調整することから、同一体積のRNAと、リポソームとの混合を可能とする。RNAおよびリポソーム溶液の両方を、大容量シリンジへと移し、両方のシリンジを、単一のシリンジポンプへと取り付け、シリンジの2つのピストンを、同時に駆動する。RNAリポプレックス形成の後、低温保護剤溶液を添加し、薬物生成物の最終濃度を調整する。薬物生成物を、ガラス製のボトルへと充填した後で、薬物生成物を、長期保管のための濃縮物として凍結させる。
RNA濃度の影響
RNAリポプレックスは、代表的な寸法(2.4mm)を伴う、y字型混合要素により調製した。現行の設定で、RNAリポプレックスを調製しうる濃度範囲を同定するために、RNA濃度を、0.05mg/mL〜0.5mg/mLにおいて、体系的に変動させた。形成されたリポプレックスの安定性を探索するために、最終的な製剤を、0.05mg/mLのRNA、22%のショ糖、および20mMのNaClへと調整し、製剤を、3回にわたり凍結させた。
RNAリポプレックス形成時における塩濃度
高生物活性を含むRNAリポプレックスの自動式製造のためには、RNAリポプレックス形成時における、イオン条件の制御が要求される。生物活性を確保するために、RNAリポプレックスの形成は、45〜300mMのNaClの存在下で実施しなければならない。他のイオン性化合物、例えば、EDTA、HEPESなどは、イオン強度に寄与し、要求される、NaClの最小濃度を低減しうる。
RNAリポプレックスの安定化
低温保護剤の存在下および非存在下の両方における、RNAリポプレックス内のRNAを安定化させるために、リポプレックス内のRNAを、pH5.5〜6.7のpH範囲内に安定化させるための、HEPES、酢酸/酢酸ナトリウム、およびリン酸ナトリウムとしてのバッファーシステムを使用することができる。炭酸ナトリウムシステムは、同等な安定化の有効性を結果としてもたらさないことが見出された。
NaClおよび低温保護剤の含有量の最適化
調整されるイオン条件は、RNAリポプレックスの製造時、長期にわたる保管時、および患者への適用時に調整する必要がある(図24)。NaClの濃度は、RNAリポプレックスの形成時に、45〜300mMであることが可能であり;凍結状態にあるRNAリポプレックスの、長期にわたる保管時に、10〜50mMであることが可能であり;融解および生理食塩水による希釈の後において、80〜150mMでありうる。
長期の保管のための、塩と低温保護剤との組合せ
所与の温度における、長期にわたる保管のためには、表9に列挙された、NaClと、低温保護剤との組合せを使用すべきである。
異なる低温保護剤による、長期にわたる保管
22%(w:v)の、単分子または二分子の糖類の存在下における、9カ月間にわたる安定化は、10〜40mMのNaClにより可能である。これらの製剤は、−15〜−40℃で凍結させ、長期にわたる保管のために、それぞれの温度に保つことができる。12.6〜16.8%(w:v)のデキストランの存在下では、10〜30mMのNaClが使用可能である。
凍結乾燥
a)凍結融解
最も有効な低温/凍結乾燥保護剤濃度を決定するために、凍結融解研究を実施した。RNAリポプレックス製剤を、10%、15%、20%、25%、および30%のトレハロースを添加した、5mMのHEPES、80mMのNaCl、2.6mMのEDTA中で凍結融解させた。粒子サイズは、−20℃での保管の前および後において決定した。トレハロースの非存在下で凍結させた製剤中では、粒子の凝集が観察されたので、それらの粒子サイズを決定しなかった。図41に従い、低温/凍結乾燥保護剤と共に凍結させた製剤は、濃度依存性の低温保護を示し、粒子サイズは、低凍結乾燥/低温保護剤濃度で増大した。22%w/vのトレハロースでは、Sf/Siを1.04とし、1.3未満であるので、なおも許容可能であると考えられる(Sf=最終サイズ、Si=初期サイズ)、粒子サイズの、最小限の増大だけが観察された。低トレハロース濃度では、Sf/Si比が増大した。凍結融解研究から得られたSf/Si比は、凍結乾燥および再構成の後で、同じ製剤から得られたSf/Si比と相関する。
5mMのHEPES、2.6mMのEDTA、0mM、10mM、20mM、30mM、40mM、50mM、60mM、80mMのNaCl、ならびに5%、10%、15%、および22%のトレハロース中で調製された、RNAリポプレックス製剤を凍結乾燥させた。全ての凍結乾燥試料は、良好なケーキ様外観を呈した。試料は、0.9%のNaCl溶液により、元の体積で再構成した。全ての凍結乾燥RNAリポプレックス製剤は、0.9%のNaCl溶液またはWFIによる再構成時に、速やかに溶解させた。0.9%のNaCl溶液または水による再構成の後における、22%のトレハロース中で調製された、凍結乾燥RNAリポプレックス製剤中の、粒子サイズの変化を決定した。
22%のトレハロース中、異なるNaCl濃度で調製された、凍結乾燥させた、ルシフェラーゼをコードするRNAリポプレックス製剤についての、インビトロにおけるトランスフェクション実験を実施した。凍結乾燥試料は、0.9%のNaCl溶液により再構成した。
10%のトレハロース、22%のトレハロース、ならびに0mM、20mM,40mM、60mM、および80mMのNaClを含有する、凍結乾燥RNAリポプレックス製剤を、安定性研究のために、4℃、25℃、および40℃で(1カ月間および6カ月間)探索した。0.9%のNaCl溶液による、元の体積における再構成の後、粒子サイズおよびRNAの完全性(完全長RNA%)について、試料の特徴を明らかにした。
Claims (115)
- リポソームコロイドを作製する方法であって、エタノール中の脂質溶液を、水性相へと注入して、リポソームコロイドを作製することを含み、脂質溶液中の脂質のうちの少なくとも1つの濃度が、エタノール中の少なくとも1つの脂質の平衡溶解度に対応するか、またはこれより高い、方法。
- 脂質溶液が、2つまたはこれを超える、異なる脂質の混合物の溶液である、請求項1に記載の方法。
- 脂質溶液中の1つの脂質の濃度が、室温における、エタノール中の脂質の平衡溶解度に対応するか、またはこれより高い、請求項1または2に記載の方法。
- 脂質溶液中の総脂質濃度が、約180mM〜約600mM、約300mM〜約600mM、または約330mMである、請求項1から3のいずれか一項に記載の方法。
- 脂質溶液が、少なくとも1つのカチオン性脂質と、少なくとも1つのさらなる脂質とを含む、請求項1から4のいずれか一項に記載の方法。
- 脂質溶液中のさらなる脂質の濃度が、エタノール中のさらなる脂質の平衡溶解度に対応するか、またはこれより高い、請求項5に記載の方法。
- 少なくとも1つのカチオン性脂質が、1,2−ジ−O−オクタデセニル−3−トリメチルアンモニウムプロパン(DOTMA)、および/または1,2−ジオレオイル−3−トリメチルアンモニウムプロパン(DOTAP)を含む、請求項5または6に記載の方法。
- 少なくとも1つのさらなる脂質が、1,2−ジ−(9Z−オクタデセノイル)−sn−グリセロ−3−ホスホエタノールアミン(DOPE)、コレステロール(Chol)、および/または1,2−ジオレオイル−sn−グリセロ−3−ホスホコリン(DOPC)を含む、請求項5から7のいずれか一項に記載の方法。
- 少なくとも1つのカチオン性脂質が、1,2−ジ−O−オクタデセニル−3−トリメチルアンモニウムプロパン(DOTMA)を含み、少なくとも1つのさらなる脂質が、1,2−ジ−(9Z−オクタデセノイル)−sn−グリセロ−3−ホスホエタノールアミン(DOPE)を含む、請求項5から8のいずれか一項に記載の方法。
- 少なくとも1つのカチオン性脂質の、少なくとも1つのさらなる脂質に対するモル比が、約10:0〜約1:9、約4:1〜約1:2、約3:1〜約1:1、または約2:1である、請求項5から9のいずれか一項に記載の方法。
- 脂質溶液が、DOTMAと、DOPEとを、約10:0〜約1:9、約4:1〜約1:2、約3:1〜約1:1、または約2:1のモル比で含む、請求項1から10のいずれか一項に記載の方法。
- 脂質溶液中のDOPEの濃度が、少なくとも約60mM、または少なくとも約90mMである、請求項8から11のいずれか一項に記載の方法。
- 脂質溶液が、約50rpm〜約150rpmの、水性相の攪拌速度で、水性相へと注入される、請求項1から12のいずれか一項に記載の方法。
- 水性相が、水である、請求項1から13のいずれか一項に記載の方法。
- リポソームコロイドを攪拌することをさらに含む、請求項1から14のいずれか一項に記載の方法。
- リポソームコロイドが、約15分間〜約60分間、または約30分間攪拌される、請求項1から15のいずれか一項に記載の方法。
- リポソームコロイドを作製する方法であって、DOTMAと、DOPEとを、エタノール中に、約2:1のモル比で含む脂質溶液を、約150rpmの攪拌速度で攪拌される水へと注入して、リポソームコロイドを作製することを含み、脂質溶液中のDOTMAおよびDOPEの濃度が約330mMである、方法。
- 請求項1から17のいずれか一項に記載の方法により得られるリポソームコロイド。
- リポソームが、少なくとも約250nmの平均直径を有する、請求項18に記載のリポソームコロイド。
- リポソームが、約250nm〜約800nmの範囲の平均直径を有する、請求項18または19に記載のリポソームコロイド。
- リポソームが、カチオン性リポソームである、請求項18から20のいずれか一項に記載のリポソームコロイド。
- リポソームが、少なくとも1つのカチオン性脂質と、少なくとも1つのさらなる脂質とを含む、請求項18から21のいずれか一項に記載のリポソームコロイド。
- 少なくとも1つのカチオン性脂質が、1,2−ジ−O−オクタデセニル−3−トリメチルアンモニウムプロパン(DOTMA)、および/または1,2−ジオレオイル−3−トリメチルアンモニウムプロパン(DOTAP)を含む、請求項22に記載のリポソームコロイド。
- 少なくとも1つのさらなる脂質が、1,2−ジ−(9Z−オクタデセノイル)−sn−グリセロ−3−ホスホエタノールアミン(DOPE)、コレステロール(Chol)、および/または1,2−ジオレオイル−sn−グリセロ−3−ホスホコリン(DOPC)を含む、請求項22または23に記載のリポソームコロイド。
- 少なくとも1つのカチオン性脂質が、1,2−ジ−O−オクタデセニル−3−トリメチルアンモニウムプロパン(DOTMA)を含み、少なくとも1つのさらなる脂質が、1,2−ジ−(9Z−オクタデセノイル)−sn−グリセロ−3−ホスホエタノールアミン(DOPE)を含む、請求項22から24のいずれか一項に記載のリポソームコロイド。
- 少なくとも1つのカチオン性脂質の、少なくとも1つのさらなる脂質に対するモル比が、約10:0〜約1:9、約4:1〜約1:2、約3:1〜約1:1、または約2:1である、請求項22から25のいずれか一項に記載のリポソームコロイド。
- リポソームが、DOTMAと、DOPEとを、約10:0〜約1:9、約4:1〜約1:2、約3:1〜約1:1、または約2:1のモル比で含む、請求項18から26のいずれか一項に記載のリポソームコロイド。
- RNAリポプレックス粒子を調製する方法であって、請求項18から27のいずれか一項に記載のリポソームコロイドを、RNAを含む溶液へと添加することを含む、方法。
- RNAリポプレックス粒子の連続フロー製造のための方法であって、RNAを含む溶液と、カチオン性リポソームを含む溶液とを、RNAおよびカチオン性リポソームの制御された混合条件下で混合することを含む、方法。
- カチオン性リポソームを含む溶液が、請求項18から27のいずれか一項に記載のリポソームコロイドである、請求項29に記載の方法。
- RNAを含む溶液およびカチオン性リポソームを含む溶液が、水溶液である、請求項29または30に記載の方法。
- RNAを含む溶液と、カチオン性リポソームを含む溶液との混合を可能とする流速が使用される、請求項29から31のいずれか一項に記載の方法。
- 流動が、300を超えるか、または約500〜約2100のレイノルズ数により特徴づけられる、請求項29から32のいずれか一項に記載の方法。
- 制御された混合条件が、RNAを含む溶液と、カチオン性リポソームを含む溶液との混合比を制御することを含む、請求項29から33のいずれか一項に記載の方法。
- 制御された混合条件が、混合される、RNAを含む溶液と、カチオン性リポソームを含む溶液との相対体積を制御することを含む、請求項29から34のいずれか一項に記載の方法。
- RNAと、カチオン性リポソームとの混合比が、RNAを含む溶液およびカチオン性リポソームを含む溶液の、同一の混合体積(v/v)を使用し、それぞれの溶液中のRNAおよびカチオン性リポソームの濃度を調整することにより制御される、請求項29から35のいずれか一項に記載の方法。
- 制御された混合条件が、目詰まりを回避しながら、RNAリポプレックス粒子の特性を維持するように選択される、請求項29から36のいずれか一項に記載の方法。
- Y字型混合要素またはT字型混合要素を使用することを含む、請求項29から37のいずれか一項に記載の方法。
- Y字型混合要素またはT字型混合要素が、約1.2mm〜約50mmの直径を有する、請求項29から38のいずれか一項に記載の方法。
- 1つがカチオン性リポソームを含む溶液を含み、1つがRNAを含む溶液を含む、2つのシリンジが、同じポンプへと、並列に挿入されたシリンジポンプを使用することを含む、請求項29から39のいずれか一項に記載の方法。
- 加圧容器、膜ポンプ、ギアポンプ、磁気浮揚ポンプ、または蠕動ポンプを、任意選択で、流速のオンライン制御およびリアルタイム調整のためのフィードバックループを伴う流速センサーと組み合わせて使用することを含む、請求項29から40のいずれか一項に記載の方法。
- RNAを含む溶液と、リポソームを含む溶液との混合物が、約45mM〜約300mMの濃度の塩化ナトリウムを含むか、または約45mM〜約300mMの濃度の塩化ナトリウムに対応するイオン強度を含む、請求項29から41のいずれか一項に記載の方法。
- RNAを含む溶液と、リポソームを含む溶液との混合物が、少なくとも約50mMのイオン強度を有する、請求項29から42のいずれか一項に記載の方法。
- X線散乱パターンにおいて、RNAリポプレックスが、約1nm−1における単一のブラッグピークにより特徴づけられ、ここで、ピーク幅が、0.2nm−1より小さい、請求項28から43のいずれか一項に記載の方法。
- RNAリポプレックス粒子が、約200〜約800nm、約250〜約700nm、約400〜約600nm、約300nm〜約500nm、または約350nm〜約400nmの範囲の平均直径を有する、請求項28から44のいずれか一項に記載の方法。
- RNAリポプレックス粒子を含む凍結組成物を調製する方法であって、(i)RNAリポプレックス粒子と、安定剤とを含む水性組成物を用意することと、(ii)組成物を凍結させることとを含む、方法。
- 凍結させることが、約−15℃〜約−40℃、または約−30℃の温度である、請求項46に記載の方法。
- 安定剤が、単糖、二糖類、三糖類、糖アルコール、オリゴ糖またはその対応する糖アルコール、および直鎖ポリアルコールから選択される炭水化物である、請求項47に記載の方法。
- RNAリポプレックス粒子と、安定剤とを含む水性組成物を用意することが、RNAリポプレックス粒子を含む水性組成物を用意することと、安定剤を、RNAリポプレックス粒子を含む水性組成物へと添加することとを含む、請求項46から48のいずれか一項に記載の方法。
- 安定剤を、RNAリポプレックス粒子を含む水性組成物へと添加することが、RNAリポプレックス粒子を含む水性組成物のイオン強度を低減する、請求項46から49のいずれか一項に記載の方法。
- RNAリポプレックス粒子と、安定剤とを含む水性組成物中の、安定剤の濃度が、生理的オスモル濃度に要求される値より高い、請求項46から50のいずれか一項に記載の方法。
- RNAリポプレックスと、安定剤とを含む水性組成物中の、安定剤の濃度が、RNAリポプレックス粒子の品質を維持し、特に、約−15℃〜約−40℃の温度で、少なくとも1カ月間、少なくとも6カ月間、少なくとも12カ月間、少なくとも24カ月間、または少なくとも36カ月間にわたる、組成物の保管の後で、RNA活性の実質的な喪失を回避するのに十分である、請求項46から51のいずれか一項に記載の方法。
- RNAリポプレックスと、安定剤とを含む水性組成物中のpHが、RNAを保管するための、通常のpH最適値より低い、請求項46から52のいずれか一項に記載の方法。
- RNAリポプレックスと、安定剤とを含む水性組成物が、約10mM〜約50mMの濃度の塩化ナトリウムを含むか、または約10mM〜約50mMの濃度の塩化ナトリウムに対応するイオン強度を含む、請求項46から53のいずれか一項に記載の方法。
- RNAリポプレックスと、安定剤とを含む水性組成物が、約20mMの濃度の塩化ナトリウムに対応するイオン強度を有する、請求項46から54のいずれか一項に記載の方法。
- RNAリポプレックス粒子が、請求項28から44のいずれか一項に記載の方法により得られる、請求項46から55のいずれか一項に記載の方法。
- 請求項28から45のいずれか一項に記載の方法により得られる、RNAリポプレックス粒子を含む組成物。
- RNAリポプレックス粒子が、少なくとも1つのカチオン性脂質と、少なくとも1つのさらなる脂質とを含む、請求項57に記載の組成物。
- RNAが、少なくとも1つのエピトープを含む、ペプチドまたはタンパク質をコードし、RNAリポプレックス粒子内の、正の電荷の、負の電荷に対する比が、約1:2〜約1.9:2、または約1.3:2.0である、請求項57または58に記載の組成物。
- 少なくとも1つのエピトープを含む、ペプチドまたはタンパク質をコードするRNAと、
少なくとも1つのカチオン性脂質と、少なくとも1つのさらなる脂質と
を含み、
RNAリポプレックス粒子内の、正の電荷の、負の電荷に対する比が、約1:2〜約1.9:2、または約1.3:2.0であり、
約1nm−1における単一のブラッグピークにより特徴づけられ、ここで、ピーク幅が、0.2nm−1より小さい、RNAリポプレックス粒子
を含む組成物。 - 約10〜約300mM、約45mM〜約300mM、約10mM〜約50mM、または約80mM〜約150mMの濃度の塩化ナトリウムを、さらに含む、請求項57から60のいずれか一項に記載の組成物。
- バッファーをさらに含む、請求項57から61のいずれか一項に記載の組成物。
- キレート剤をさらに含む、請求項57から62のいずれか一項に記載の組成物。
- 請求項46から56のいずれか一項に記載の方法により得られるRNAリポプレックス粒子を含む組成物。
- RNAリポプレックス粒子が、少なくとも1つのカチオン性脂質と、少なくとも1つのさらなる脂質とを含む、請求項64に記載の組成物。
- RNAが、少なくとも1つのエピトープを含む、ペプチドまたはタンパク質をコードし、RNAリポプレックス粒子内の、正の電荷の、負の電荷に対する比が、約1:2〜約1.9:2、または約1.3:2.0である、請求項64または65に記載の組成物。
- 約10mM〜約50mMの濃度の塩化ナトリウムをさらに含む、請求項64から66のいずれか一項に記載の組成物。
- 少なくとも1つのエピトープを含む、ペプチドまたはタンパク質をコードするRNAと、
少なくとも1つのカチオン性脂質と、少なくとも1つのさらなる脂質と、
を含み、
RNAリポプレックス粒子内の、正の電荷の、負の電荷に対する比が、約1:2〜約1.9:2、または約1.3:2.0である、RNAリポプレックス粒子と、
0mM〜約40mMの濃度の塩化ナトリウムと、
安定剤と
を含む組成物。 - バッファーをさらに含む、請求項64から68のいずれか一項に記載の組成物。
- 組成物中のRNAの量が、約0.01mg/mL〜約1mg/mL、約0.05mg/mL〜約0.5mg/mL、または約0.05mg/mLである、請求項64から69のいずれか一項に記載の組成物。
- 塩化ナトリウムが、約20mM〜約30mMの濃度である、請求項67から70のいずれか一項に記載の組成物。
- 塩化ナトリウムが、約20mMの濃度である、請求項67から71のいずれか一項に記載の組成物。
- 塩化ナトリウムが、約30mMの濃度である、請求項67から71のいずれか一項に記載の組成物。
- 組成物中の安定剤の濃度が、生理的オスモル濃度に要求される値より高い、請求項64から73のいずれか一項に記載の組成物。
- 組成物中の安定剤の濃度が、約5〜約35重量/体積パーセント(%w/v)、または約12.5〜約25重量/体積パーセント(%w/v)である、請求項64から74のいずれか一項に記載の組成物。
- 安定剤が、単糖、二糖類、三糖類、糖アルコール、オリゴ糖またはその対応する糖アルコール、および直鎖ポリアルコールから選択される炭水化物である、請求項64から75のいずれか一項に記載の組成物。
- 安定剤が、約5〜約25重量/体積パーセント(%w/v)の濃度のショ糖である、請求項64から76のいずれか一項に記載の組成物。
- ショ糖が、約15%(w/v)〜約25%(w/v)の濃度である、請求項77に記載の組成物。
- ショ糖が、約20%(w/v)〜約25%(w/v)の濃度である、請求項77に記載の組成物。
- ショ糖が、約22%(w/v)の濃度である、請求項77に記載の組成物。
- ショ糖が、約20%(w/v)の濃度である、請求項77に記載の組成物。
- RNAを保管するための、通常のpH最適値より低いpHを有する、請求項64から81のいずれか一項に記載の組成物。
- 約5.7〜約6.7、または約6.2のpHを有する、請求項64から82のいずれか一項に記載の組成物。
- バッファーが、2−[4−(2−ヒドロキシエチル)ピペラジン−1−イル]エタンスルホン酸(HEPES)である、請求項68から83のいずれか一項に記載の組成物。
- HEPESが、約2.5mM〜約10mM、または約7.5mMの濃度である、請求項84に記載の組成物。
- キレート剤をさらに含む、請求項64から85のいずれか一項に記載の組成物。
- 約0.05mg/mLの濃度の、少なくとも1つのエピトープを含む、ペプチドまたはタンパク質をコードするRNAと、
約2:1のモル比の、DOTMAおよびDOPEと
を含み、
RNAリポプレックス粒子内の、正の電荷の、負の電荷に対する比が、約1.3:2.0である、RNAリポプレックス粒子と、
約20mMの濃度の塩化ナトリウムと、
約22%(w/v)の濃度のショ糖と、
pHが約6.2である、約7.5mMの濃度のHEPESと、
約2.5mMの濃度のEDTAと
を含む組成物。 - 液体状態または凍結状態である、請求項64から87のいずれか一項に記載の組成物。
- 約−15℃〜約−40℃の温度で、少なくとも1カ月間安定である、請求項88に記載の凍結組成物。
- 約−15℃の温度で、少なくとも1カ月間安定である、請求項88に記載の凍結組成物。
- 約−15℃の温度で、少なくとも2カ月間安定である、請求項88に記載の凍結組成物。
- 約−20℃の温度で、少なくとも1カ月間安定である、請求項88に記載の凍結組成物。
- 約−20℃の温度で、少なくとも2カ月間安定である、請求項88に記載の凍結組成物。
- 約−30℃の温度で、少なくとも1カ月間安定である、請求項88に記載の凍結組成物。
- 約−30℃の温度で、少なくとも2カ月間安定である、請求項88に記載の凍結組成物。
- 請求項88から95のいずれか一項に記載の凍結組成物を融解させ、任意選択で、水性液体を添加することにより、オスモル濃度およびイオン強度を調整することにより得られる、RNAリポプレックス粒子を含む水性組成物。
- 組成物のオスモル濃度が、約200ミリオスモル〜約450ミリオスモルである、請求項96に記載の組成物。
- 約80mM〜約150mMの濃度の塩化ナトリウムを含む、請求項96または97に記載の組成物。
- RNAリポプレックス粒子が、請求項28から45のいずれか一項に記載の方法により得られる、請求項64から98のいずれか一項に記載の組成物。
- RNAリポプレックス粒子が、約1nm−1における単一のブラッグピークにより特徴づけられ、ここで、ピーク幅が、0.2nm−1より小さい、請求項64から99のいずれか一項に記載の組成物。
- RNAリポプレックス粒子が、約200〜約800nm、約250〜約700nm、約400〜約600nm、約300nm〜約500nm、または約350nm〜約400nmの範囲の平均直径を有する、請求項57から100のいずれか一項に記載の組成物。
- 少なくとも1つのカチオン性脂質が、1,2−ジ−O−オクタデセニル−3−トリメチルアンモニウムプロパン(DOTMA)、および/または1,2−ジオレオイル−3−トリメチルアンモニウムプロパン(DOTAP)を含む、請求項58から63、65から86、および88から101のいずれか一項に記載の組成物。
- 少なくとも1つのさらなる脂質が、1,2−ジ−(9Z−オクタデセノイル)−sn−グリセロ−3−ホスホエタノールアミン(DOPE)、コレステロール(Chol)、および/または1,2−ジオレオイル−sn−グリセロ−3−ホスホコリン(DOPC)を含む、請求項58から63、65から86、および88から102のいずれか一項に記載の組成物。
- 少なくとも1つのカチオン性脂質が、1,2−ジ−O−オクタデセニル−3−トリメチルアンモニウムプロパン(DOTMA)を含み、少なくとも1つのさらなる脂質が、1,2−ジ−(9Z−オクタデセノイル)−sn−グリセロ−3−ホスホエタノールアミン(DOPE)を含む、請求項58から63、65から86、および88から103のいずれか一項に記載の組成物。
- 少なくとも1つのカチオン性脂質の、少なくとも1つのさらなる脂質に対するモル比が、約10:0〜約1:9、約4:1〜約1:2、約3:1〜約1:1、または約2:1である、請求項58から63、65から86、および88から104のいずれか一項に記載の組成物。
- RNAリポプレックス粒子が、DOTMAおよびDOPEを、約10:0〜1:9、約4:1〜1:2、約3:1〜約1:1、または約2:1のモル比で含み、DOTMA内の正の電荷の、RNA内の負の電荷に対する電荷比が、約1:2〜1.9:2である、請求項58から63、65から86、および88から105のいずれか一項に記載の組成物。
- キレート剤が、エチレンジアミン四酢酸(EDTA)である、請求項63、86、および88から106のいずれか一項に記載の組成物。
- EDTAが、約0.25mM〜約5mM、または約2.5mMの濃度である、請求項107に記載の組成物。
- アジュバントをさらに含む、請求項57から108のいずれか一項に記載の組成物。
- 全身投与のために製剤化される、請求項57から109のいずれか一項に記載の組成物。
- 全身投与が、静脈内投与による、請求項110に記載の組成物。
- 治療的使用のための、請求項57から111のいずれか一項に記載の組成物。
- RNAリポプレックス粒子を含む水性組成物を調製する方法であって、請求項88から112のいずれか一項に記載の凍結組成物を融解させることと、任意選択で、水性液体を添加することにより、オスモル濃度およびイオン強度を調整することとを含む、方法。
- 水性液体を添加して、約200ミリオスモル〜約450ミリオスモルのオスモル濃度の組成物を得る、請求項113に記載の方法。
- 水性液体を添加して、約80mM〜約150mMの濃度の塩化ナトリウムを得る、請求項113または114に記載の方法。
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Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2015514076A (ja) * | 2012-03-26 | 2015-05-18 | バイオンテック アーゲー | 免疫療法のためのrna製剤 |
WO2016046060A1 (en) * | 2014-09-25 | 2016-03-31 | Biontech Rna Pharmaceuticals Gmbh | Stable formulations of lipids and liposomes |
WO2016156398A1 (en) * | 2015-03-31 | 2016-10-06 | Biontech Rna Pharmaceuticals Gmbh | Lipid particle formulations for delivery of rna and water-soluble therapeutically effective compounds to a target cell |
Family Cites Families (21)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2001005374A1 (en) * | 1999-07-15 | 2001-01-25 | Inex Pharmaceuticals Corp. | Methods for preparation of lipid-encapsulated therapeutic agents |
DE10109897A1 (de) | 2001-02-21 | 2002-11-07 | Novosom Ag | Fakultativ kationische Liposomen und Verwendung dieser |
JP2005517394A (ja) * | 2001-12-12 | 2005-06-16 | エフ エイチ フォールディング アンド カンパニー リミテッド | ウイルス保存のための組成物 |
US7008403B1 (en) | 2002-07-19 | 2006-03-07 | Cognitive Ventures Corporation | Infusion pump and method for use |
PL1633327T3 (pl) * | 2003-06-04 | 2011-02-28 | Univ Georgetown | Sposób poprawienia stabilności i okresu trwałości kompleksów liposomowych |
EP1512393A1 (de) * | 2003-09-08 | 2005-03-09 | BOEHRINGER INGELHEIM PHARMA GMBH & CO. KG | Verfahren zur Herstellung von homogenen Liposomen und Lipoplexen |
WO2009111088A2 (en) * | 2008-01-02 | 2009-09-11 | The Johns Hopkins University | Antitumor immunization by liposomal delivery of vaccine to the spleen |
KR20110074850A (ko) | 2008-08-25 | 2011-07-04 | 앰플리뮨, 인크. | Pd-1 길항제 및 그의 사용 방법 |
WO2011066342A2 (en) | 2009-11-24 | 2011-06-03 | Amplimmune, Inc. | Simultaneous inhibition of pd-l1/pd-l2 |
WO2011127255A1 (en) * | 2010-04-08 | 2011-10-13 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Preparation of lipid nanoparticles |
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