JP2021113191A

JP2021113191A - メイタンシノイド誘導体、そのコンジュゲート、及び使用方法

Info

Publication number: JP2021113191A
Application number: JP2021044152A
Authority: JP
Inventors: ニトリトマス; Nittoli Thomas; パトリックマーコタントマス; Markotan Thomas Patrick
Original assignee: Regeneron Pharmaceuticals Inc
Current assignee: Regeneron Pharmaceuticals Inc
Priority date: 2015-03-27
Filing date: 2021-03-17
Publication date: 2021-08-05
Also published as: WO2016160615A1; BR112017020149A2; EP3273998B1; CA2978340A1; SG11201707148PA; JP2018516851A; EA034950B1; PH12017501780A1; KR20170131587A; JP6948950B2; CO2017010890A2; CL2017002422A1; US20220259225A1; CN107995912A; IL254267A; AU2016243527B2; EP3273998A1; ZA201706040B; IL254267B; BR112017020149A8

Abstract

【課題】メイタンシノイド誘導体、そのコンジュゲート、及び、それを用いて増殖性疾患を治療又は予防する方法を提供する。【解決手段】式（Ｉ）の化合物又はその医薬として許容し得る塩：（式中、Ａは、アリーレン又はヘテロアリーレンであり；Ｌは、リンカーであり；ＢＡは、結合剤であり；かつ、ｋは、１〜３０の整数である）。【選択図】図２

Description

本出願は、2015年3月27日に出願された、メイタンシノイド誘導体、そのコンジュゲー
ト、及びそれを用いて増殖性疾患を治療する方法という題の米国仮特許出願第62/139,044
号に対する優先権、及びその恩典を主張し、また、2015年11月6日に出願された、メイタ
ンシノイド誘導体、そのコンジュゲート、及びそれを用いて増殖性疾患を治療する方法と
いう題の米国仮特許出願第62/252,239号に対する優先権、及びその恩典を主張する。これ
らの仮特許出願の各々の内容は、あらゆる目的のために引用により完全に本明細書中に組
み込まれている。

(分野)
本開示は、メイタンシノイド誘導体、そのコンジュゲート、及びそれを用いて増殖性疾
患を治療又は予防する方法に関する。

(背景)
増殖性疾患、例えば、癌は、異常な細胞の無制御な成長を特徴とする。増殖性疾患の現
在の治療には、手術、放射線、化学療法、ホルモンベースの療法、及び/又は免疫療法が
含まれる。これらの治療のうちのいくつか、特に、化学療法は、異常な細胞の拡大を制限
する抗増殖性薬物を利用している。しかしながら、これらの薬物は、通常、細胞を死滅さ
せるその能力に関して無差別的であり、正常な細胞と異常な細胞の両方に影響を及ぼす。
この問題に対処するために、異常な細胞を選択的に標的化するための、腫瘍標的化プロー
ブ(例えば、抗体又は成長因子)と毒素とのコンジュゲートの使用を含む、標的化薬物送達
への様々なアプローチが探索されてきた。抗体薬物コンジュゲート(ADC)は、化学的リン
カーを介して細胞毒性剤に連結されている抗体から構成された化合物である。そのような
化合物は、抗体のその標的に対する結合特異性を利用して、細胞毒性剤を異常な細胞に送
達する。したがって、抗増殖性化合物及びそのコンジュゲートが必要とされている。

(概要)
本明細書に提供されるのは、式(I)の化合物又はその医薬として許容し得る塩である:

(式中:
Aは、アリーレン又はヘテロアリーレンであり;
Lは、リンカーであり;
BAは、結合剤であり;かつ
kは、1〜30の整数である)。また本明細書に提供されるのは、式(I)の化合物の立体異性
体である。

本明細書に提供されるのは、式(II)の化合物又はその医薬として許容し得る塩でもある
:

(式中、Aは、アリーレン又はヘテロアリーレンである)。また本明細書に提供されるのは
、式(II)の化合物の立体異性体である。

本明細書に提供されるのは、式PP5の化合物又はその塩でもある:

(式中、Aは、アリーレン又はヘテロアリーレンである)。また本明細書に提供されるのは
、式PP5の化合物の立体異性体である。

本明細書に提供されるのは、式PT1の化合物又はその塩でもある:

(式中、Aは、アリーレン又はヘテロアリーレンであり、かつLはリンカーである)。また本
明細書に提供されるのは、式PT1の化合物の立体異性体である。

さらに、本明細書に提供されるのは、増殖性疾患を治療する方法であって、本明細書に
記載される化合物を投与することを含む、方法である。

さらに、本明細書に提供されるのは、増殖性疾患を治療する方法であって、本明細書に
記載されるコンジュゲートを投与することを含む、方法である。

さらに、本明細書に提供されるのは、式(I)の化合物を調製する方法であって、脱グリ
コシル化抗体又は非グリコシル化抗体を、式(PT1)の化合物と、トランスグルタミナーゼ
の存在下で反応させることを含む、方法である。

(図面の簡単な説明)
メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-4-アミノベンズアミド-シトルリン-バリン-カプロリル-6-マレイミジルを調製するための合成順序を示している。

実施例41で試験された特定の化合物の％細胞生存対Log₁₀[M]のプロットを示している。

メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(4-アミノ-2-フルオロ)ベンズアミド-Cit-Val-Cap-Malを調製するための合成順序を示している。

メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(4-アミノ-2-トリフルオロメチル)ベンズアミド-Cit-Val-Cap-Malを調製するための合成順序を示している。

メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(4-アミノ-2-メトキシ)ベンズアミド-Cit-Val-Cap-Malを調製するための合成順序を示している。

メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-4-アミノベンズアミドを調製するための合成順序を示している。

メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(2-フルオロ-4-アミノ)ベンズアミドを調製するための合成順序を示している。

メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(2-トリフルオロメチル-4-アミノ)ベンズアミドを調製するための合成順序を示している。

メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(2-メトキシ-4-アミノ)ベンズアミドを調製するための合成順序を示している。

メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(3-トリフルオロメチル-4-アミノ)ベンズアミドを調製するための合成順序を示している。

メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(2-クロロ-4-アミノ-5-フルオロ)ベンズアミドを調製するための合成順序を示している。

置換基Rが本明細書中で以下に定義されている式(II)の化合物を調製するための一般的な合成順序を示している。

メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(2,5-ジフルオロ-4-アミノ)ベンズアミドを調製するための合成順序を示している。

メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(3-フルオロ-4-アミノ)ベンズアミドを調製するための合成順序を示している。

メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(3-クロロ-4-アミノ)ベンズアミドを調製するための合成順序を示している。

メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(5-アミノ-8-カルボキシキノリン)カルボキサミドを調製するための合成順序を示している。

メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(3-ブロモ-4-アミノ)ベンズアミドを調製するための合成順序を示している。

メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(3-メトキシ-4-アミノ)ベンズアミドを調製するための合成順序を示している。

メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(2-メチル-4-アミノ)ベンズアミドを調製するための合成順序を示している。

メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(3-メチル-4-アミノ)ベンズアミドを調製するための合成順序を示している。

メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(8-アミノ-5-カルボキシキノリン)カルボキサミドを調製するための合成順序を示している。

メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(3-メトキシ-4-アミノ)ベンズアミド-Cit-Val-Cap-Malを調製するための合成順序を示している。

メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(2-フルオロ-4-アミノ)ベンズアミド-Cit-Val-Cap-6-アミンを調製するための合成順序を示している。

メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(2-メトキシ-5-アミノ)ベンズアミドを調製するための合成順序を示している。

メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(3-アミノ-4-メトキシ)ベンズアミドを調製するための合成順序を示している。

メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(3-アミノ-5-フルオロ)ベンズアミドを調製するための合成順序を示している。

メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(2-フルオロ-5-アミノ)ベンズアミドを調製するための合成順序を示している。

メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(3-アミノ)ベンズアミドを調製するための合成順序を示している。

メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(3-アミノ-4-フルオロ)ベンズアミドを調製するための合成順序を示している。

メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-4-アミノベンズアミド-アジピン酸-NHSを調製するための合成順序を示している。

メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-4-アミノベンズアミド-Cap-Malを調製するための合成順序を示している。

メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(3-メチルスルホニル-4-アミノ)ベンズアミドを調製するための合成順序を示している。

メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(3-ヒドロキシ-4-アミノ)ベンズアミドを調製するための合成順序を示している。

メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(2-アミノ)ベンズアミドを調製するための合成順序を示している。

メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(4-メトキシ-2-アミノ)ベンズアミドを調製するための合成順序を示している。

メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(3-モルホリノ-4-アミノ)ベンズアミドを調製するための合成順序を示している。

メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(3-アセトアミド-4-アミノ)ベンズアミドを調製するための合成順序を示している。

メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-4-アミノベンズアミド-Cit-Val-cap-ジブロモメチルアクリルを調製するための合成順序を示している。

抗体薬物コンジュゲートである、実施例43のPRLR-Q-63コンジュゲートのデコンボリューションされた質量分光(MS)スペクトルを示している。

実施例43のアイソタイプ対照-Q-63コンジュゲートのデコンボリューションされたMSスペクトルを示している。

実施例45で試験された特定の化合物の％細胞生存対Log₁₀[M]のプロットを示している。

(詳細な説明)
(A.定義)
本明細書で使用される場合、「アルキル」は、一価及び飽和炭素水素ラジカル部分を指
す。アルキルは任意に置換されており、線状、分岐状、又は環状、すなわち、シクロアル
キルであることができる。アルキルとしては、1〜20個の炭素原子を有するもの、すなわ
ち、C_1-20アルキル; 1〜12個の炭素原子を有するもの、すなわち、C_1-12アルキル; 1〜8
個の炭素原子を有するもの、すなわち、C_1-8アルキル; 1〜6個の炭素原子を有するもの、
すなわち、C_1-6アルキル;及び1〜3個の炭素原子を有するもの、すなわち、C_1-3アルキル
が挙げられるが、これらに限定されない。アルキル部分の例としては、メチル、エチル、
n-プロピル、i-プロピル、n-ブチル、s-ブチル、t-ブチル、i-ブチル、ペンチル部分、ヘ
キシル部分、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、及びシクロヘキシルが挙
げられるが、これらに限定されない。

本明細書で使用される場合、「ハロアルキル」は、アルキルが、ハロゲン、例えば、F
、Cl、Br、又はIから選択される少なくとも1つの置換基を含む、上に定義されているよう
なアルキルを指す。

本明細書で使用される場合、「アルケニル」は、少なくとも2つの炭素原子及び1以上の
非芳香族炭素-炭素二重結合を含有する一価炭素水素ラジカル部分を指す。アルケニルは
任意に置換されており、線状、分岐状、又は環状であることができる。アルケニルとして
は、2〜20個の炭素原子を有するもの、すなわち、C_2-20アルケニル; 2〜12個の炭素原子
を有するもの、すなわち、C_2-12アルケニル; 2〜8個の炭素原子を有するもの、すなわち
、C_2-8アルケニル; 2〜6個の炭素原子を有するもの、すなわち、C_2-6アルケニル;及び2〜
4個の炭素原子を有するもの、すなわち、C_2-4アルケニルが挙げられるが、これらに限定
されない。アルケニル部分の例としては、ビニル、プロペニル、ブテニル、及びシクロヘ
キセニルが挙げられるが、これらに限定されない。

本明細書で使用される場合、「アルキニル」は、少なくとも2つの炭素原子及び1以上の
炭素-炭素三重結合を含有する一価炭素水素ラジカル部分を指す。アルキニルは任意に置
換されており、線状、分岐状、又は環状であることができる。アルキニルとしては、2〜2
0個の炭素原子を有するもの、すなわち、C_2-20アルキニル; 2〜12個の炭素原子を有する
もの、すなわち、C_2-12アルキニル; 2〜8個の炭素原子を有するもの、すなわち、C_2-8ア
ルキニル; 2〜6個の炭素原子を有するもの、すなわち、C_2-6アルキニル;及び2〜4個の炭
素原子を有するもの、すなわち、C_2-4アルキニルが挙げられるが、これらに限定されない
。アルキニル部分の例としては、エチニル、プロピニル、及びブチニルが挙げられるが、
これらに限定されない。

本明細書で使用される場合、「アルコキシ」は、一価及び飽和炭素水素ラジカル部分を
指し、ここで、該炭化水素は、酸素原子との単結合を含み、かつ該ラジカルは、酸素原子
上に位置し、例えば、エトキシの場合、CH₃CH₂-O・である。アルコキシ置換基は、それが
該アルコキシ置換基のこの酸素原子を介して置換する化合物に結合する。アルコキシは任
意に置換されており、線状、分岐状、又は環状、すなわち、シクロアルコキシであること
ができる。アルコキシとしては、1〜20個の炭素原子を有するもの、すなわち、C_1-20アル
コキシ; 1〜12個の炭素原子を有するもの、すなわち、C_1-12アルコキシ; 1〜8個の炭素原
子を有するもの、すなわち、C_1-8アルコキシ; 1〜6個の炭素原子を有するもの、すなわち
、C_1-6アルコキシ;及び1〜3個の炭素原子を有するもの、すなわち、C_1-3アルコキシが挙
げられるが、これらに限定されない。アルコキシ部分の例としては、メトキシ、エトキシ
、n-プロポキシ、i-プロポキシ、n-ブトキシ、s-ブトキシ、t-ブトキシ、i-ブトキシ、ペ
ントキシ部分、ヘキソキシ部分、シクロプロポキシ、シクロブトキシ、シクロペントキシ
、及びシクロヘキソキシが挙げられるが、これらに限定されない。

本明細書で使用される場合、「ハロアルコキシ」は、アルコキシが、ハロゲン、例えば
、F、Cl、Br、又はIから選択される少なくとも1つの置換基を含む、上に定義されている
ようなアルコキシを指す。

本明細書で使用される場合、「アリール」は、環原子が炭素原子である芳香族化合物の
ラジカルである一価部分を指す。アリールは任意に置換されており、単環式又は多環式、
例えば、二環式もしくは三環式であることができる。アリール部分の例としては、6〜20
個の環炭素原子を有するもの、すなわち、C_6-20アリール; 6〜15個の環炭素原子を有する
もの、すなわち、C_6-15アリール、及び6〜10個の環炭素原子を有するもの、すなわち、C₆
_-10アリールが挙げられるが、これらに限定されない。アリール部分の例としては、フェ
ニル、ナフチル、フルオレニル、アズレニル、アントリル、フェナントリル、及びピレニ
ルが挙げられるが、これらに限定されない。

本明細書で使用される場合、「アリーレン」は、環原子が炭素原子のみである芳香族化
合物の二価部分を指す。アリーレンは任意に置換されており、単環式又は多環式、例えば
、二環式もしくは三環式であることができる。アリール部分の例としては、6〜20個の環
炭素原子を有するもの、すなわち、C_6-20アリーレン; 6〜15個の環炭素原子を有するもの
、すなわち、C_6-15アリーレン、及び6〜10個の環炭素原子を有するもの、すなわち、C_6-1
₀アリーレンが挙げられるが、これらに限定されない。

本明細書で使用される場合、「アルカリール」は、少なくとも1つのアルキルで置換さ
れているアリールを指す。アルカリールは、任意に置換されている。

本明細書で使用される場合、「ヘテロアルキル」は、1以上の炭素原子がヘテロ原子に
置換されているアルキルを指す。本明細書で使用される場合、「ヘテロアルケニル」は、
1以上の炭素原子がヘテロ原子に置換されているアルケニルを指す。本明細書で使用され
る場合、「ヘテロアルキニル」は、1以上の炭素原子がヘテロ原子に置換されているアル
ケニルを指す。好適なヘテロ原子としては、窒素、酸素、及び硫黄原子が挙げられるが、
これらに限定されない。ヘテロアルキルは、任意に置換されている。ヘテロアルキル部分
の例としては、アミノアルキル、スルホニルアルキル、スルフィニルアルキルが挙げられ
るが、これらに限定されない。ヘテロアルキル部分の例としては、メチルアミノ、メチル
スルホニル、及びメチルスルフィニルも挙げられるが、これらに限定されない。

本明細書で使用される場合、「ヘテロアリール」は、環原子が炭素原子及び少なくとも
1つの酸素、硫黄、窒素、又はリン原子を含有する芳香族化合物のラジカルである一価部
分を指す。ヘテロアリール部分の例としては、5〜20個の環原子; 5〜15個の環原子;及び5
〜10個の環原子を有するものが挙げられるが、これらに限定されない。ヘテロアリールは
、任意に置換されている。

本明細書で使用される場合、「ヘテロアリーレン」は、芳香環の1以上の環原子が酸素
、硫黄、窒素、又はリン原子で置換されているアリーレンを指す。ヘテロアリーレンは、
任意に置換されている。

本明細書で使用される場合、「ヘテロシクロアルキル」は、1以上の炭素原子がヘテロ
原子に置換されているシクロアルキルを指す。好適なヘテロ原子としては、窒素、酸素、
及び硫黄原子が挙げられるが、これらに限定されない。ヘテロシクロアルキルは、任意に
置換されている。ヘテロシクロアルキル部分の例としては、モルホリニル、ピペリジニル
、テトラヒドロピラニル、ピロリジニル、イミダゾリジニル、オキサゾリジニル、チアゾ
リジニル、ジオキソラニル、ジチオラニル、オキサニル、又はチアニルが挙げられるが、
これらに限定されない。

本明細書で使用される場合、ラジカル部分を説明するために使用されるときの「任意に
置換された」、例えば、任意に置換されたアルキルは、そのような部分が任意に1以上の
置換基に結合していることを意味する。そのような置換基の例としては、ハロ、シアノ、
ニトロ、ハロアルキル、アジド、エポキシ、任意に置換されたヘテロアリール、任意に置
換されたヘテロシクロアルキル、

(ここで、R^A、R^B、及びR^Cは、出現する毎に独立に、水素原子、アルキル、アルケニル、
アルキニル、アリール、アルカリール、アラルキル、ヘテロアルキル、ヘテロアリール、
もしくはヘテロシクロアルキルであるか、又はR^A及びR^Bは、それらが結合している原子と
一緒に、飽和もしくは不飽和炭素環を形成し、ここで、該環は任意に置換されており、か
つ1以上の環原子はヘテロ原子と任意に置換されている)が挙げられるが、これらに限定さ
れない。いくつかの実施態様において、R^A、R^B、及びR^Cは、水素原子ではない。いくつか
の例において、R^Aは、メチルである。いくつかの例において、R^Aは、メチルアミノ、メチ
ルスルホニル、及びメチルスルフィニルである。いくつかの例において、R^Aは、メチルア
ミノである。ある実施態様において、ラジカル部分が、任意に置換されたヘテロアリール
、任意に置換されたヘテロシクロアルキル、又は任意に置換された飽和もしくは不飽和炭
素環と任意に置換されているとき、該任意に置換されたヘテロアリール、任意に置換され
たヘテロシクロアルキル、又は任意に置換された飽和もしくは不飽和炭素環上の置換基は
、それらが置換されている場合、追加の置換基でさらに任意に置換されている置換基で置
換されない。いくつかの実施態様において、本明細書に記載される基が任意に置換されて
いるとき、該基に結合している置換基は、別途規定されない限り、非置換である。

本明細書で使用される場合、「結合剤」は、所与の結合パートナーと特異性を伴って結
合することができる任意の分子を指す。

本明細書で使用される場合、「リンカー」は、結合剤を本明細書に記載されるメイタン
シノイド誘導体と共有結合させる二価部分を指す。

本明細書で使用される場合、「アミド合成条件」は、例えば、カルボン酸、活性化カル
ボン酸、又はアシルハライドとアミンとの反応によって、アミドの形成を達成するために
好適な反応条件を指す。いくつかの例において、アミド合成条件は、カルボン酸とアミン
の間のアミド結合の形成を達成するために好適な反応条件を指す。これらの例のいくつか
において、カルボン酸は、まず、活性化カルボン酸に変換され、その後、該活性化カルボ
ン酸がアミンと反応して、アミドを形成する。アミドの形成を達成するための好適な条件
としては、限定されないが、ジシクロヘキシルカルボジイミド(DCC)、ジイソプロピルカ
ルボジイミド(DIC)、(ベンゾトリアゾール-1-イルオキシ)トリス(ジメチルアミノ)ホスホ
ニウムヘキサフルオロホスフェート(BOP)、(ベンゾトリアゾール-1-イルオキシ)トリピロ
リジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェート(PyBOP)、(7-アザベンゾトリアゾール-1
-イルオキシ)トリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェート(PyAOP)、ブロモ
トリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェート(PyBrOP)、O-(ベンゾトリアゾ
ール-1-イル)-N,N,N',N'-テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート(HBTU)、O
-(ベンゾトリアゾール-1-イル)-N,N,N',N'-テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレ
ート(TBTU)、1-[ビス(ジメチルアミノ)メチレン]-1H-1,2,3-トリアゾロ[4,5-b]ピリジニ
ウム 3-オキシドヘキサフルオロホスフェート(HATU)、2-エトキシ-1-エトキシカルボニル
-1,2-ジヒドロキノリン(EEDQ)、1-エチル-3-(3-ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド
(EDC)、2-クロロ-1,3-ジメチルイミダゾリジニウムヘキサフルオロホスフェート(CIP)、2
-クロロ-4,6-ジメトキシ-1,3,5-トリアジン(CDMT)、及びカルボニルジイミダゾール(CDI)
を含む、カルボン酸とアミンの反応を達成するための試薬を利用するものが挙げられるが
、これらに限定されない。いくつかの例において、カルボン酸は、まず、活性化カルボン
酸エステルに変換され、その後、アミンと反応して、アミド結合を形成する。ある実施態
様において、カルボン酸を試薬と反応させる。試薬は、カルボン酸を脱プロトン化し、そ
の後、脱プロトン化されたカルボン酸によるプロトン化された試薬への求核攻撃の結果と
して、脱プロトン化されたカルボン酸との生成物複合体を形成させることにより、カルボ
ン酸を活性化させる。特定のカルボン酸については、この活性化エステルの方が、変換さ
れる前のカルボン酸よりも、アミンによる求核攻撃の影響を後に受けやすい。この結果と
して、アミド結合形成が生じる。したがって、カルボン酸は、活性化されたと記載されて
いる。例示的な試薬としては、DCC及びDICが挙げられる。

本明細書で使用される場合、「治療有効量」は、疾患もしくは障害の治療もしくは管理
における患者への治療的利益を提供するのに又は疾患もしくは障害と関連する1以上の症
状を遅延もしくは最小化させるのに十分である(化合物の)量を指す。

特定の基、部分、置換基、及び原子は、該基、部分、置換基、原子が結合している原子
を示すために、結合(単数)又は結合(複数)を交差する波線で示されている。例えば、以下
のように示されるプロピル基で置換されるフェニル基:

は、以下の構造:

を有する。本明細書で使用される場合、環原子間の結合を介して環状基(例えば、芳香族
、ヘテロ芳香族、縮合環、及び飽和もしくは不飽和シクロアルキル又はヘテロシクロアル
キル)に結合した置換基を示す図は、別途規定されない限り、該環状基が、本明細書に示
されるか又は本開示が関係する分野で公知である技法に従って、環状基中の任意の環位置
で又は縮合環基中の任意の環上で、その置換基で置換され得ることを示すことが意図され
る。例えば、下付き文字qが0〜4の整数であり、かつ置換基R¹の位置が一般的に記載され
ている基

は、置換基R¹の位置が具体的に記載されている以下の基:

を含む。さらに、例えば、環原子間の結合を介して環状基に結合しているR¹以外の置換基
の位置が一般的に記載されている基

は、R¹以外のこれらの置換基の位置が具体的に記載されている以下の基:

を含む。また、例えば、環原子間の結合を介して環状基に結合しているR¹以外の置換基の
位置が一般的に記載されている基

を含む。R¹以外の置換基の位置が具体的に記載されているこれらの構造の各々において、
置換基R¹は、環状基中の任意の環位置に又はR¹以外のこれらの置換基のうちの1つによっ
て占められていない縮合環基中の任意の環上で結合していてもよい。以下の非限定的な代
表図は、環状基が、任意の環位置で又は縮合環基中のいずれかの基上で、示された置換基
:

で置換され得ることを示している。

(B.コンジュゲート)
本明細書に提供されるのは、式(I)の化合物又はその医薬として許容し得る塩である:

(式中:
Aは、アリーレン又はヘテロアリーレンであり;
Lは、リンカーであり;
BAは、結合剤であり;かつ
kは、1〜30の整数である)。

(1.「A」部分)
いくつかの実施態様において、Aは、アリーレンである。いくつかの実施態様において
、Aは、ヘテロアリーレンである。いくつかの実施態様において、アリーレン又はヘテロ
アリーレンは、1以上の電子求引性基及び/又は1以上の電子供与性基で置換されている。

いくつかの実施態様において、Aは、任意に置換されている、ベンゼン、ピリジン、ナ
フタレン、又はキノロンの二価ラジカルである。

いくつかの実施態様において、Aは、アミノ、アミド、アルキル、ハロ、ハロアルキル
、アルコキシ、及びハロアルコキシからなる群から選択されるメンバーで任意に置換され
ているベンゼンの二価ラジカルである。

いくつかの実施態様において、Aは:

であり、
ここで:
R¹は、出現する毎に独立に、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アルカリ
ール、アラルキル、ハロ、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキル、ヒドロキシル、シア
ノ、ニトロ、

又はアジドであり、
ここで、R^Aは、アルキル又はヘテロアルキルであり;
nは、0〜4の整数であり;
mは、0〜3の整数であり;
pは、0〜6の整数であり;かつ
qは、0〜5の整数である。

いくつかの実施態様において、Aは:

であり、
ここで:
R¹は、出現する毎に独立に、ハロ、ハロアルキル、ハロアルコキシ、ヒドロキシル、ア
ルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、ハロアルコキシ、アリール、アルカリー
ル、アラルキル、ヘテロアリール、ヘテロアルキル、ヘテロシクロアルキル、シアノ、ニ
トロ、

いくつかの実施態様において、Aは:

であり、
ここで:
R¹は、出現する毎に独立に、ハロ、ハロアルキル、ヒドロキシル、アルキル、アルケニ
ル、アルキニル、アルコキシ、アリール、アルカリール、アラルキル、ヘテロアリール、
ヘテロアルキル、ヘテロシクロアルキル、シアノ、ニトロ、

いくつかの実施態様において、R¹は、C_1-6アルキル又はC_1-6アルコキシである。これら
の実施態様のいくつかにおいて、R¹は、メチル、エチル、メトキシ、又はエトキシである
。これらの実施態様のいくつかにおいて、R¹は、メトキシである。

いくつかの実施態様において、R¹は、独立に、アルキル又はハロである。いくつかの実
施態様において、R¹は、独立に、C_1-6アルキル、C_1-6ハロアルキル、又はハロである。い
くつかの実施態様において、R¹は、独立に、ハロである。いくつかの実施態様において、
R¹は、独立に、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード、又はトリフルオロメチルである。い
くつかの実施態様において、n、m、p、又はqは、0、1、又は2である。いくつかの実施態
様において、n、m、p、又はqは、0又は1である。いくつかの実施態様において、n、m、p
、又はqは、0である。

いくつかの実施態様において、R¹は、

である。いくつかの実施態様において、R¹は、

であり、ここで、R^Aは、メチルである。いくつかの実施態様において、R¹は、ヒドロキシ
ルである。いくつかの実施態様において、R¹は、N-メチルホルムアミドである。いくつか
の実施態様において、R¹は、モルホリニルである。

いくつかの実施態様において、R¹は、独立に、アルキル、アルコキシ、又はハロである
。いくつかの実施態様において、R¹は、独立に、C_1-6アルキル、C_1-6アルコキシ、C_1-6ハ
ロアルキル、C_1-6ハロアルコキシ、又はハロである。いくつかの実施態様において、R¹は
、独立に、ハロである。いくつかの実施態様において、R¹は、独立に、フルオロ、クロロ
、ブロモ、ヨード、又はトリフルオロメチルである。いくつかの実施態様において、n、m
、p、又はqは、0、1、又は2である。いくつかの実施態様において、n、m、p、又はqは、0
又は1である。いくつかの実施態様において、n、m、p、又はqは、0である。

いくつかの実施態様において、Aは:

である。

いくつかの実施態様において、Aは:

である。

いくつかの実施態様において、Aは:

である。

いくつかの実施態様において、Aは:

であり、
ここで、nは、0、1、又は2である。

いくつかの実施態様において、Aは:

であり、
ここで、nは、0、1、又は2である。

いくつかの実施態様において、Aは:

であり、
ここで、nは、0又は1であり;かつR¹は、アルコキシ、ハロ、又はハロアルキルである。

いくつかの実施態様において、Aは:

であり、
ここで、nは、0又は1であり;かつR¹は、アルコキシ、ハロ、又はハロアルキルである。
いくつかの例において、R¹は、アルコキシである。

いくつかの実施態様において、Aは:

であり、
ここで、nは、0又は1であり;かつR¹は、C_1-6アルコキシ、ハロ、又はC_1-6ハロアルキル
である。

いくつかの実施態様において、Aは:

であり、
ここで、nは、0又は1であり;かつR¹は、C_1-6アルコキシ、ハロ、又はC_1-6ハロアルキル
である。いくつかの例において、R¹は、C_1-6アルコキシである。

いくつかの実施態様において、Aは:

であり、
ここで、nは、0又は1であり; R¹は、C_1-6アルコキシ、ハロ、又はC_1-6ハロアルキルで
あり;かつLは、

であり、ここで、bは、2〜8の整数であり、かつ

は、結合剤との結合である。

いくつかの実施態様において、Aは:

であり、ここで、bは、2〜8の整数であり、かつ

は、結合剤との結合である。

いくつかの実施態様において、Aは:

であり、
ここで、nは、0、1、2、3、又は4である。

いくつかの実施態様において、Aは:

であり、
ここで、nは、0、1、2、3、又は4である。

いくつかの実施態様において、Aは:

であり、
ここで:
R¹は、C_1-6アルキル、ハロ、又はC_1-6ハロアルキルであり;かつ
nは、0、1、又は2である。

いくつかの実施態様において、Aは:

である。

ここで:

R¹は、C_1-6アルキル、ハロ、又はC_1-6ハロアルキルであり;かつ

nは、0、1、又は2である。

いくつかの実施態様において、Aは:

であり、
ここで:
R¹は、C_1-6アルキル、C_1-6アルコキシ、ハロ、C_1-6ハロアルキル、又はC_1-6ハロアルコ
キシであり;かつ
nは、0、1、2、3、又は4である。

いくつかの実施態様において、Aは:

であり、
ここで、R¹は、C_1-6アルキル、C_1-6アルコキシ、ハロ、又はC_1-6ハロアルキルである。
これらの実施態様のいくつかにおいて、R¹は、メトキシ又はメチルである。いくつかの具
体的な実施態様において、R¹は、メトキシである。

いくつかの実施態様において、Aは:

である。

いくつかの実施態様において、Aは:

であり、
ここで:
R¹は、ハロ又はトリフルオロメチルであり;かつ
nは、0、1、又は2である。

いくつかの実施態様において、Aは:

である。

いくつかの実施態様において、Aは:

であり、
ここで:
Xは、水素原子、ハロ、又はトリフルオロメチルである。

いくつかの実施態様において、Aは:

であり、
ここで:
Xは、水素原子、ハロ、又はトリフルオロメチルであり;

は、窒素原子との結合であり;かつ

は、カルボニルとの結合である。

いくつかの実施態様において、Aは:

であり、
ここで:
R¹は、出現する毎に独立に、水素原子、アルキル、アルコキシ、アリール、ヘテロアル
キル、ハロ、ハロアルキル、ハロアルコキシ、又はヒドロキシルであり;

は、窒素原子との結合であり;かつ

は、カルボニルとの結合である。いくつかの実施態様において、R¹は、1-メチルエチル-
チオール、フェニル、2-フルオロフェニル、ピリジニル、4-ピリジニル、ピロリジニル、
又は1-ピロリジニルである。いくつかの実施態様において、R¹は、トリフルオロメチルで
ある。いくつかの実施態様において、R¹は、メトキシである。いくつかの実施態様におい
て、R¹は、フルオロである。いくつかの実施態様において、R¹は、水素である。いくつか
の実施態様において、Aは:

は、窒素原子との結合であり;かつ

は、カルボニルとの結合である。いくつかの実施態様において、R¹は、1-メチルエチル-
チオール、フェニル、2-フルオロフェニル、ピリジニル、4-ピリジニル、ピロリジニル、
又は1-ピロリジニルである。いくつかの実施態様において、R¹は、トリフルオロメチルで
ある。いくつかの実施態様において、R¹は、メトキシである。いくつかの実施態様におい
て、R¹は、フルオロである。いくつかの実施態様において、R¹は、水素である。

いくつかの実施態様において、R¹は、スルホニルである。いくつかの実施態様において
、R¹は、N-メチルホルムアミドである。いくつかの実施態様において、R¹は、ヒドロキシ
ルである。いくつかの実施態様において、R¹は、モルホリニルである。

いくつかの実施態様において、Aは:

であり、
ここで:
R¹は、出現する毎に独立に、水素原子、アルキル、アルコキシ、アリール、ヘテロアル
キル、ハロ、ハロアルキル、又はハロアルコキシであり;

は、窒素原子との結合であり;かつ

は、カルボニルとの結合である。いくつかの実施態様において、R¹は、アルキル又はアル
コキシである。いくつかの具体的な実施態様において、R¹は、プロピルアミノ、ジフルオ
ロ-メトキシ、フェニル、2-フルオロフェニルである。いくつかの実施態様において、R¹
は、トリフルオロメチルである。いくつかの実施態様において、R¹は、メトキシである。
いくつかの実施態様において、R¹は、フルオロである。いくつかの実施態様において、R¹
は、水素である。

いくつかの実施態様において、Aは:

であり;

は、窒素原子との結合であり;かつ

は、カルボニルとの結合である。

いくつかの実施態様において、Aは:

であり;

は、窒素原子との結合であり;かつ

は、カルボニルとの結合である。

いくつかの実施態様において、Aは:

であり;

は、窒素原子との結合であり;かつ

は、カルボニルとの結合である。

いくつかの実施態様において、Aは:

であり;

は、窒素原子との結合であり;かつ

は、カルボニルとの結合である。

いくつかの実施態様において、Aは:

であり、ここで、Xは、F、Cl、Br、CN、メトキシ、ジメチルアミノ、又はシクロプロピル
であり;

は、窒素原子との結合であり;かつ

は、カルボニルとの結合である。

いくつかの実施態様において、Aは:

であり、ここで、Xは、F、Cl、Br、CN、メトキシ、ジメチルアミノ、1-メチル-エチル-チ
オ、又はシクロプロピルであり;

は、窒素原子との結合であり;かつ

は、カルボニルとの結合である。

いくつかの実施態様において、Aは:

であり、
ここで、各々のR¹は、出現する毎に独立に、水素原子、アルキル、アルコキシ、ハロ、
ハロアルキル、又はハロアルコキシであり;

は、窒素原子との結合であり;かつ

は、カルボニルとの結合である。いくつかの実施態様において、R¹は、水素、フルオロ、
トリフルオロメチル、又はメトキシである。いくつかの実施態様において、R¹は、フルオ
ロ、クロロ、ブロモ、又はヨードである。

いくつかの実施態様において、Aは:

であり、
ここで

は、窒素原子との結合であり;かつ

は、カルボニルとの結合である。

いくつかの実施態様において、Aは:

であり、
ここで、各々のR¹は、出現する毎に独立に、水素原子、アルキル、アルコキシ、ハロ、
ハロアルキル、又はハロアルコキシであり、

は、窒素原子との結合であり;かつ

は、カルボニルとの結合である。

いくつかの実施態様において、Aは:

であり;

は、窒素原子との結合であり;かつ

は、カルボニルとの結合である。

いくつかの実施態様において、Aは:

であり;

は、窒素原子との結合であり;かつ

は、カルボニルとの結合である。

いくつかの実施態様において、Aは:

であり;

は、窒素原子との結合であり;かつ

は、カルボニルとの結合である。

いくつかの実施態様において、Aは:

であり;

は、窒素原子との結合であり;かつ

は、カルボニルとの結合である。

いくつかの実施態様において、Aは:

であり;

は、窒素原子との結合であり;かつ

は、カルボニルとの結合である。

いくつかの実施態様において、Aは:

であり;

は、窒素原子との結合であり;かつ

は、カルボニルとの結合である。

いくつかの実施態様において、Aは:

であり;

は、窒素原子との結合であり;かつ

は、カルボニルとの結合である。

いくつかの実施態様において、Aは:

である。

いくつかの実施態様において、Aは:

である。

いくつかの実施態様において、Aは:

である。

いくつかの実施態様において、Aは:

であり、
ここで:

は、窒素原子との結合であり;かつ

は、カルボニルとの結合である。

いくつかの実施態様において、Aは:

であり、
ここで:

は、窒素原子との結合であり;かつ

は、カルボニルとの結合である。

いくつかの実施態様において、Aは:

であり、
ここで:

は、窒素原子との結合であり;かつ

は、カルボニルとの結合である。

いくつかの実施態様において、Aは:

であり、
ここで:

は、窒素原子との結合であり;かつ

は、カルボニルとの結合である。

いくつかの実施態様において、Aは:

である。

いくつかの実施態様において、Aは:

であり、
ここで、nは、0、1、2、又は3である。

いくつかの実施態様において、Aは:

であり、
ここで:
R¹は、C_1-6アルキル、C_1-6アルコキシ、ハロ、C_1-6ハロアルキル、C_1-6ハロアルコキシ
、C_1-6ヘテロアルキルであり;かつ
nは、0、1、2、3、又は4である。

いくつかの実施態様において、Aは:

である。

いくつかの実施態様において、Aは:

である。

いくつかの実施態様において、Aは:

であり、
ここで:
Xは、出現する毎に独立に、水素原子、アルキル、アルコキシ、ハロ、ハロアルコキシ
、ハロアルキル、ヘテロアルキルである。いくつかの実施態様において、Xは、フルオロ
、クロロ、ブロモ、ヨード、ジメチルアミノ、メチルアミノ、メトキシ、エトキシ、又は
トリフルオロメチルである。

いくつかの実施態様において、Aは:

であり、
ここで:
Xは、出現する毎に独立に、水素原子、アルキル、アルコキシ、ハロ、ハロアルコキシ
、ハロアルキル、ヘテロアルキルである。いくつかの実施態様において、Xは、フルオロ
、クロロ、ブロモ、ヨード、ジメチルアミノ、メチルアミノ、メトキシ、エトキシ、トリ
フルオロメチル、又はメトキシであり;

は、窒素原子との結合であり;かつ

は、カルボニルとの結合である。

(2.リンカー)
本明細書に記載されるコンジュゲートのリンカー部分は、結合剤を本明細書に記載され
るメイタンシノイド誘導体と共有結合させる二価部分である。好適なリンカーとしては、
酵素の存在下、又は特定のpH範囲もしくは値で、メイタンシノイド部分を遊離させるもの
が挙げられる。

いくつかの実施態様において、リンカーは、酵素切断可能部分を含む。例示的な酵素切
断可能部分としては、ペプチド結合、エステル結合、ヒドラゾン、及びジスルフィド結合
が挙げられるが、これらに限定されない。いくつかの実施態様において、リンカーは、カ
テプシン切断可能リンカーを含む。

いくつかの実施態様において、リンカーは、非切断可能部分を含む。いくつかの実施態
様において、非切断可能リンカーは、

又はその残基である。いくつかの実施態様において、非切断可能リンカーは、

又はその残基である。

好適なリンカーとしては、単一の結合剤、例えば、抗体の2つのシステイン残基に化学
的に結合されるものも挙げられるが、これらに限定されない。そのようなリンカーは、コ
ンジュゲーションプロセスの結果として破壊される抗体のジスルフィド結合を模倣する役
割を果たすことができる。

いくつかの実施態様において、リンカーは、1以上のアミノ酸を含む。好適なアミノ酸
としては、天然、非天然、標準的、非標準的、タンパク質構成性、非タンパク質構成性、
及びL-又はD-α-アミノ酸が挙げられる。いくつかの実施態様において、リンカーは、ア
ラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、メチオニン、トリプトファン、フェニルアラ
ニン、プロリン、セリン、トレオニン、システイン、チロシン、アスパラギン、グルタミ
ン、アスパラギン酸、グルタミン酸、リジン、アルギニン、ヒスチジン、もしくはシトル
リン、又はこれらの誘導体を含む。

いくつかの実施態様において、リンカーは、バリン及びシトルリンを含む。

いくつかの実施態様において、リンカーは:

であり、
ここで:
SPは、スペーサーであり;

は、結合剤との1以上の結合であり;
AA¹は、アミノ酸であり;かつ
AA²は、アミノ酸である。

スペーサーは、AA¹-AA²部分を結合剤(BA)に接続する二価部分である。好適なスペーサ
ーとしては、アルキレン又はポリエチレングリコールを含むものが挙げられるが、これら
に限定されない。スペーサーの末端、すなわち、結合剤又はAA¹に直接結合されるスペー
サーの部分は、コンジュゲートの化学合成時に裸の抗体又はAA¹をスペーサーとカップリ
ングさせる目的で使用される反応性部分に由来する部分であることができる。

いくつかの例において、好適なスペーサーとしては、1級アミン終端アルキレン又は1級
アミン終端ポリエチレングリコールが挙げられるが、これらに限定されない。スペーサー
の1級アミン終端は、トランスグルタミナーゼの存在下で、脱グリコシル化抗体又は非グ
リコシル化抗体に直接結合させることができる。

いくつかの実施態様において、スペーサーは、アルキレンを含む。いくつかの実施態様
において、スペーサーは、C_5-7アルキレンを含む。いくつかの実施態様において、スペー
サーは:

であり、
ここで:

は、結合剤との結合であり;かつ
bは、2〜8の整数である。

いくつかの実施態様において、スペーサーは、1級アミン終端アルキレンを含む。いく
つかの実施態様において、スペーサーは、NH₂-C_5-7アルキレンを含む。いくつかの実施態
様において、スペーサーは:

であり、
ここで:

は、結合剤との結合であり;かつ
bは、2〜8の整数である。

いくつかの実施態様において、スペーサーは:

であり、
ここで:

は、結合剤との結合である。

いくつかの実施態様において、スペーサーは:

であり、
ここで:

は、結合剤との結合である。

いくつかの実施態様において、スペーサーは:

であり、
ここで:
R^Nは、水素原子又はアルキルであり;
R^Mは、アルキルであり;

によって表される2つの結合は、結合剤のシステインとの結合であり;かつ
bは、2〜8の整数である。

いくつかの実施態様において、スペーサーは:

であり、
ここで:

は、結合剤との結合であり;かつ
bは、2〜8の整数である。

いくつかの実施態様において、スペーサーは:

であり、
ここで:

は、結合剤との結合であり;かつ
gは、2〜20の整数である。いくつかの実施態様において、gは、2〜8である。いくつか
の実施態様において、gは、2、4、6、又は8である。

いくつかの実施態様において、スペーサーは、

であり、ここで、nは、4〜10の整数である。いくつかの実施態様において、nは、4、5、6
、7、8、9、又は10である。

いくつかの実施態様において、スペーサーは:

である。

いくつかの実施態様において、スペーサーは、

である。

いくつかの実施態様において、スペーサーは:

である。

いくつかの実施態様において、スペーサーは:

である。

いくつかの実施態様において、スペーサーは:

である。

いくつかの実施態様において、スペーサーは:

である。

いくつかの実施態様において、スペーサーは:

である。

いくつかの実施態様において、スペーサーは:

である。

いくつかの実施態様において、スペーサーは:

である。

いくつかの実施態様において、スペーサーは:

である。

ここで、

は、結合剤との結合であり;
Xは、N又はOであり; R^N及びR^Mは、各々独立に、水素又はアルキルであり;かつbは、1〜
8の整数である。

いくつかの実施態様において、AA¹-AA²は:バリン-シトルリン、シトルリン-バリン、リ
ジン-フェニルアラニン、フェニルアラニン-リジン、バリン-アスパラギン、アスパラギ
ン-バリン、トレオニン-アスパラギン、アスパラギン-トレオニン、セリン-アスパラギン
、アスパラギン-セリン、フェニルアラニン-アスパラギン、アスパラギン-フェニルアラ
ニン、ロイシン-アスパラギン、アスパラギン-ロイシン、イソロイシン-アスパラギン、
アスパラギン-イソロイシン、グリシン-アスパラギン、アスパラギン-グリシン、グルタ
ミン酸-アスパラギン、アスパラギン-グルタミン酸、シトルリン-アスパラギン、アスパ
ラギン-シトルリン、アラニン-アスパラギン、又はアスパラギン-アラニンである。

いくつかの実施態様において、AA¹-AA²は:バリン-シトルリン又はシトルリン-バリンで
ある。いくつかの実施態様において、AA¹-AA²は:バリン-シトルリンである。

いくつかの実施態様において、リンカーは:

であり、
ここで:
SPは、スペーサーであり;

は、結合剤との1以上の結合であり;
R^AA1は、アミノ酸側鎖であり;かつ
R^AA2は、アミノ酸側鎖である。

本明細書で使用される場合、「アミノ酸側鎖」は、天然及び非天然アミノ酸を含む、α
-アミノ酸のα-炭素に結合した一価非水素置換基を指す。例示的なアミノ酸側鎖としては
、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、メチオニン、トリプトファン、フェニル
アラニン、プロリン、セリン、トレオニン、システイン、チロシン、アスパラギン、グル
タミン、アスパラギン酸、グルタミン酸、リジン、アルギニン、ヒスチジン、及びシトル
リンのα-炭素置換基が挙げられるが、これらに限定されない。

いくつかの実施態様において、リンカーは:

であり、
ここで:
SPは、スペーサーであり;かつ

は、結合剤との1以上の結合である。

いくつかの実施態様において、リンカーは:

であり、
ここで:

は、結合剤との結合であり;かつ
bは、2〜8の整数である。

いくつかの実施態様において、リンカーは:

であり、
ここで:

は、結合剤との結合であり;かつ
bは、2〜8の整数である。

いくつかの実施態様において、BAは抗体であり、かつリンカーは:

であり、
ここで:

によって表される2つの結合は、該抗体のシステインとの結合であり;かつ
bは、2〜8の整数である。

であり、
ここで:

いくつかの実施態様において、リンカーは:

であり、
ここで:

は、結合剤との結合であり;かつ
bは、2〜8の整数である。

いくつかの実施態様において、リンカーは:

であり、
ここで:

いくつかの実施態様において、リンカーは:

である。

いくつかの実施態様において、リンカーは:

である。

いくつかの実施態様において、リンカーは:

である。

いくつかの実施態様において、リンカーは:

である。

いくつかの実施態様において、リンカーは:

である。

いくつかの実施態様において、リンカーは:

である。

いくつかの実施態様において、リンカーは:

である。

いくつかの実施態様において、リンカーは:

である。

(3.結合剤)
好適な結合剤としては、抗体、リンホカイン、ホルモン、成長因子、ウイルス受容体、
インターロイキン、又は任意の他の細胞結合性もしくはペプチド結合性の分子もしくは物
質が挙げられるが、これらに限定されない。

いくつかの実施態様において、結合剤は抗体である。いくつかの実施態様において、抗
体は、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、抗体断片(Fab、Fab'、及びF(ab)2、ミ
ニボディ、ダイアボディ、トリボディなど)、又は二重特異性抗体である。本明細書にお
ける抗体は、各々引用により完全に組み込まれる、米国特許第6,596,541号及び米国公開
第2012/0096572号に記載されている方法を用いてヒト化することができる。

結合剤が抗体である場合、それは、ポリペプチドであり、かつグリコシル化又はリン酸
化されている可能性がある膜貫通分子(例えば、受容体)又は成長因子であり得る、抗原結
合パートナーに結合する。例示的な抗原としては、レニンなどの分子;ヒト成長ホルモン
及びウシ成長ホルモンを含む成長ホルモン;成長ホルモン放出因子;副甲状腺ホルモン;甲
状腺刺激ホルモン;リポタンパク質;α1-アンチトリプシン;インスリンA鎖;インスリンB鎖
;プロインスリン;濾胞刺激ホルモン;カルシトニン;黄体形成ホルモン;グルカゴン;凝固因
子、例えば、vmc因子、IX因子、組織因子(TF)、及びフォンビルブランド因子;抗凝固因子
、例えば、プロテインC;心房性ナトリウム利尿因子;肺サーファクタント;プラスミノゲン
活性化因子、例えば、ウロキナーゼ又はヒト尿もしくは組織型プラスミノゲン活性化因子
(t-PA);ボンベシン;トロンビン;造血成長因子;腫瘍壊死因子-α及び-β;エンケファリナ
ーゼ; RANTES(活性化時に調節される、正常T細胞による発現及び分泌);ヒトマクロファー
ジ炎症性タンパク質(MlP-I-α);血清アルブミン、例えば、ヒト血清アルブミン;ミュラー
管(Muellerian)阻害物質;リラクシンA鎖;リラクシンB鎖;プロリラクシン;マウスゴナドト
ロピン関連ペプチド;微生物タンパク質、例えば、βラクタマーゼ; DNアーゼ; 19E;細胞
傷害性Tリンパ球関連抗原(CTLA)、例えば、CTLA-4;インヒビン;アクチビン;血管内皮成長
因子(VEGF);ホルモン又は成長因子の受容体;プロテインA又はD;リウマトイド因子;神経栄
養因子、例えば、骨由来神経栄養因子(BDNF)、ニューロトロフィン-3、-4、-5、もしくは
-6(NT-3、NT4、NT-5、もしくはNT-6)、又は神経成長因子、例えば、NGF-β;血小板由来成
長因子(PDGF);線維芽細胞成長因子、例えば、aFGF及びbFGF;線維芽細胞成長因子受容体2(
FGFR2)、上皮成長因子(EGF);形質転換成長因子(TGF)、例えば、TGF-α及びTGF-β1、TGF-
β2、TGF-β3、TGF-β4、又はTGF-β5を含むTGF-β;インスリン様成長因子-I及び-II(IGF
-I及びIGF-II); des(I-3)-IGF-1(脳IGF-1)、インスリン様成長因子結合タンパク質、EpCA
M、GD3、FLT3、PSMA、PSCA、MUC1、MUC16、STEAP、CEA、TENB2、EphA受容体、EphB受容体
、葉酸受容体、FOLRI、メソテリン、クリプト、αvβ6、インテグリン、VEGF、VEGFR、EG
FR、トランスフェリン受容体、IRTA1、IRTA2、IRTA3、IRTA4、IRTA5; CDタンパク質、例
えば、CD2、CD3、CD4、CD5、CD6、CD8、CD11、CD14、CD19、CD20、CD21、CD22、CD25、CD
26、CD28、CD30、CD33、CD36、CD37、CD38、CD40、CD44、CD52、CD55、CD56、CD59、CD70
、CD79、CD80、CD81、CD103、CD105、CD134、CD137、CD138、CD152、又は米国公開第2008
/0171040号もしくは米国公開第2008/0305044号に開示されており、かつ引用により完全に
開示されている1以上の腫瘍関連抗原もしくは細胞表面受容体に結合する抗体;エリスロポ
エチン;骨誘導因子;免疫毒素;骨形成タンパク質(BMP);インターフェロン、例えば、イン
ターフェロン-α、-β、及び-γ;コロニー刺激因子(CSF)、例えば、M-CSF、GM-CSF、及び
G-CSF;インターロイキン(IL)、例えば、IL-1〜IL-10;スーパーオキシドジスムターゼ; T
細胞受容体;表面膜タンパク質;崩壊促進因子;例えば、HIVエンベロープの部分などのウイ
ルス抗原;輸送タンパク質;ホーミング受容体;アドレシン;調節タンパク質;インテグリン
、例えば、CD11a、CD11b、CD11c、CD18、ICAM、VLA-4、及びVCAM;腫瘍関連抗原、例えば
、AFP、ALK、B7H4、BAGEタンパク質、β-カテニン、brc-abl、BRCA1、BORIS、CA9(カルボ
ニックアンンヒドラーゼIX)、カスパーゼ-8、CD20、CD40、CD123、CDK4、CEA、CLEC12A、
c-kit、cMET、CTLA4、サイクリン-B1、CYP1B1、EGFR、EGFRvIII、エンドグリン、Epcam、
EphA2、ErbB2/Her2、ErbB3/Her3、ErbB4/Her4、ETV6-AML、Fra-1、FOLR1、GAGEタンパク
質(例えば、GAGE-1、-2)、GD2、GD3、グロボH、グリピカン-3、GM3、gp100、Her2、HLA/B
-raf、HLA/EBNA1、HLA/k-ras、HLA/MAGE-A3、hTERT、IGF1R、LGR5、LMP2、MAGEタンパク
質(例えば、MAGE-1、-2、-3、-4、-6、及び-12)、MART-1、メソテリン、ML-IAP、Muc1、M
uc16(CA-125)、MUM1、NA17、NGEP、NY-BR1、NY-BR62、NY-BR85、NY-ESO1、OX40、p15、p5
3、PAP、PAX3、PAX5、PCTA-1、PDGFR-α、PDGFR-β、PDGF-A、PDGF-B、PDGF-C、PDGF-D、
PLAC1、PRLR、PRAME、PSCA、PSGR、PSMA(FOLH1)、RAGEタンパク質、Ras、RGS5、Rho、SAR
T-1、SART-3、Steap-1、Steap-2、STn、サバイビン、TAG-72、TGF-β、TMPRSS2、Tn、TNF
RSF17、TRP-1、TRP-2、チロシナーゼ、及びウロプラキン-3、並びに上記のポリペプチド
のいずれかの断片が挙げられるが、これらに限定されない。

例示的な抗原としては、BCMA、SLAMF7、B7H4、GPNMB、UPK3A、及びLGR5も挙げられるが
、これらに限定されない。

いくつかの実施態様において、抗原としては、プロラクチン受容体(PRLR)又は前立腺特
異的膜抗原(PSMA)が挙げられる。

結合剤としては、アンキリンリピートタンパク質、インターフェロン、リンホカイン、
例えば、IL-2又はIL-3、ホルモン様インスリン及びグルココルチコイド、成長因子、例え
ば、EGF、トランスフェリン、並びにフィブロネクチンタイプIIIも挙げられるが、これら
に限定されない。

いくつかの実施態様において、結合剤は、腫瘍のタイプに特異的な抗原又は特定のタイ
プの腫瘍上で共有されるか、過剰発現されるか、もしくは修飾される抗原を含む、腫瘍抗
原と相互作用するか又は結合する。例としては:肺癌に関するα-アクチニン-4、メラノー
マに関するARTC1、慢性骨髄性白血病に関するBCR-ABL融合タンパク質、メラノーマに関す
るB-RAF、CLPP、又はCdc27、扁平上皮細胞癌に関するCASP-8、及び腎細胞癌に関するhsp7
0-2、並びに以下の共通の腫瘍特異的抗原、例えば: BAGE-1、GAGE、GnTV、KK-LC-1、MAGE
-A2、NA88-A、TRP2-INT2が挙げられるが、これらに限定されない。

いくつかの実施態様において、結合剤は、抗体である。いくつかの実施態様において、
結合剤は、モノクローナル抗体である。いくつかの実施態様において、結合剤は、ポリク
ローナル抗体である。いくつかの実施態様において、抗体は、抗PSMA、抗MUC16、もしく
は抗EGFRvIII、又は抗STEAP-2抗体である。

リンカーは、抗体又は抗原結合分子内の特定のアミノ酸での結合を介して、結合剤、例
えば、抗体又は抗原結合分子に結合させることができる。本開示のこの態様との関連で使
用することができる例示的なアミノ酸結合としては、例えば、リジン(例えば、US 5,208,
020号; US 2010/0129314号; Hollanderらの文献、Bioconjugate Chem., 2008, 19:358-36
1; WO 2005/089808号; US 5,714,586号; US 2013/0101546号;及びUS 2012/0585592号を参
照)、システイン(例えば、US 2007/0258987号; WO 2013/055993号; WO 2013/055990号; W
O 2013/053873号; WO 2013/053872号; WO 2011/130598号; US 2013/0101546号;及びUS 7,
750,116号を参照)、セレノシステイン(例えば、WO 2008/122039号;及びHoferらの文献、P
roc. Natl. Acad. Sci., USA, 2008, 105:12451-12456を参照)、ホルミルグリシン(例え
ば、Carricoらの文献、Nat. Chem. Biol., 2007, 3:321-322; Agarwalらの文献、Proc. N
atl. Acad. Sci., USA, 2013, 110:46-51、及びRabukaらの文献、Nat. Protocols, 2012,
10:1052-1067を参照)、非天然アミノ酸(例えば、WO 2013/068874号及びWO 2012/166559
号を参照)、並びに酸性アミノ酸(例えば、WO 2012/05982号を参照)が挙げられる。リンカ
ーは、トランスグルタミナーゼベースの化学酵素コンジュゲーションにより、グルタミン
を介してコンジュゲートすることができる(例えば、Dennlerらの文献、Bioconjugate Che
m. 2014, 25, 569-578を参照)。リンカーは、炭水化物(例えば、US 2008/0305497号、WO
2014/065661、及びRyanらの文献、Food & Agriculture Immunol., 2001, 13:127-130を参
照)並びにジスルフィドリンカー(例えば、WO 2013/085925号、WO 2010/010324号、WO 201
1/018611号、WO 2014/197854号、及びShaunakらの文献、Nat. Chem. Biol., 2006, 2:312
-313を参照)との結合を介して抗原結合タンパク質にコンジュゲートすることもできる。

いくつかの実施態様において、結合剤は抗体であり、抗体は、リジン残基を介してリン
カーに結合される。いくつかの実施態様において、抗体は、システイン残基を介してリン
カーに結合される。

(4.例示的実施態様)
いくつかの実施態様において、
Aは:

又はアジドであり、
ここで、R^Aは、アルキル又はヘテロアルキルであり;
nは、0〜4の整数であり;
mは、0〜3の整数であり;
pは、0〜6の整数であり;かつ
qは、0〜5の整数であり;かつ
Lは:

であり、
ここで:
SPは、スペーサーであり;

いくつかの実施態様において、
Aは:

であり、
ここで:
R¹は、出現する毎に独立に、C_1-6アルキル、C_1-6ハロアルキル、又はハロであり;
nは、0〜4の整数であり;
mは、0〜3の整数であり;
pは、0〜6の整数であり;かつ
qは、0〜5の整数であり;かつ
Lは:

であり、
ここで:
SPは、スペーサーであり;

いくつかの実施態様において、Aは:

であり、
ここで:
R¹は、出現する毎に独立に、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アリー
ル、アルカリール、アラルキル、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、ハロアルコキシ
、ヘテロアリール、ヘテロアルキル、ヘテロシクロアルキル、ヒドロキシル、シアノ、ニ
トロ、

であり、
ここで:
SPは、スペーサーであり;

は、結合剤との1以上の結合であり;
AA¹は、アミノ酸であり;かつAA²は、アミノ酸である。

いくつかの実施態様において、
Aは:

であり、
ここで:
SPは:

であり、
ここで:

は、結合剤との結合であり;かつ
bは、2〜8の整数であり;かつ
AA¹は、アミノ酸であり;かつ
AA²は、アミノ酸である。

いくつかの実施態様において、Aは:

であり、
ここで:
R¹は、出現する毎に独立に、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アリー
ル、アルカリール、アラルキル、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、ヘテロアリール
、ヘテロアルキル、ヘテロシクロアルキル、ヒドロキシル、シアノ、ニトロ、

であり、
ここで:
SPは:

であり、
ここで:

いくつかの実施態様において、
Aは:

であり、
ここで:
SPは、スペーサーであり;

いくつかの実施態様において、Aは:

又はアジドであり、
ここで、R^Aは、アルキル又はヘテロアルキルであり、nは、0〜4の整数であり;
mは、0〜3の整数であり;
pは、0〜6の整数であり;かつ
qは、0〜5の整数であり;かつ
Lは:

であり、
ここで:
SPは、スペーサーであり;

いくつかの実施態様において、
Aは:

であり、
ここで:
SPは、スペーサーであり;かつ

は、結合剤との1以上の結合である。

いくつかの実施態様において、Aは:

であり、
ここで:
R¹は、出現する毎に独立に、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アリー
ル、アルカリール、アラルキル、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、ヘテロアリール
、ヘテロアルキル、ヘテロシクロアルキル、シアノ、ニトロ、

又はアジドであり、
ここで、R^Aは、アルキルであり;
nは、0〜4の整数であり;
mは、0〜3の整数であり;
pは、0〜6の整数であり;かつ
qは、0〜5の整数であり;かつ
Lは:

であり、
ここで:
SPは、スペーサーであり;かつ

は、結合剤との1以上の結合である。

いくつかの実施態様において、
Aは:

であり、
ここで:
SPは:

であり、
ここで:

は、結合剤との結合であり;かつ
bは、2〜8の整数である。

いくつかの実施態様において、Aは:

であり、
ここで:
SPは:

であり、
ここで:

は、結合剤との結合であり;かつ
bは、2〜8の整数である。

いくつかの実施態様において、
Aは:

であり、
ここで:
R¹は、出現する毎に独立に、C_1-6アルキル、C_1-6ハロアルキル、又はハロであり;かつ
n、m、p、及びqは、0、1、又は2であり;かつ
Lは、

であり、
ここで:

は、結合剤との結合であり;かつ
bは、2〜8の整数である。

いくつかの実施態様において、Aは:

又はアジドであり、
ここで、R^Aは、アルキルであり;
nは、0〜4の整数であり;
mは、0〜3の整数であり;
pは、0〜6の整数であり;かつ
qは、0〜5の整数であり;かつ
Lは、

であり、
ここで:

は、結合剤との結合であり;かつ
bは、2〜8の整数である。

いくつかの実施態様において、
Aは:

であり;
ここで、
R¹は、出現する毎に独立に、C_1-6ハロアルキル又はハロであり;かつ
nは、0、1、又は2であり;かつ
Lは:

であり、
ここで:
SPは、スペーサーであり;

いくつかの実施態様において、Aは:

又はアジドであり、
ここで、R^Aは、アルキル又はヘテロアルキルであり;
ここで、nは、0〜4の整数であり;
Lは:

であり、
ここで:
SPは、スペーサーであり;

いくつかの実施態様において、
Aは:

であり;
ここで、
R¹は、出現する毎に独立に、ハロであり;かつ
nは、0、1、又は2であり;かつ
Lは:

であり、
ここで:

は、結合剤との結合であり;かつ
bは、2〜8の整数である。

いくつかの実施態様において、Aは:

又はアジドであり、
ここで、R^Aは、アルキル又はヘテロアルキルであり;
Lは:

であり、
ここで:

は、結合剤との結合であり;
ここで、nは、0〜4の整数であり;かつ
bは、2〜8の整数である。

いくつかの実施態様において、
Aは:

であり、
ここで、

は、結合剤との結合である。

いくつかの実施態様において、Aは:

であり、
ここで、

は、結合剤との結合である。

いくつかの実施態様において、
Aは:

であり;かつ
Lは、

である。

いくつかの実施態様において、Aは:

であり、
ここで:
R¹は、出現する毎に独立に、水素原子、アルキル、アルコキシ、アリール、ヘテロアル
キル、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、又はハロアルコキシであり;

は、窒素原子との結合であり;かつ

いくつかの実施態様において、Aは:

であり、
ここで:
R¹は、出現する毎に独立に、水素原子、アルキル、アルコキシ、アリール、ヘテロアル
キル、ハロ、ハロアルキル、ハロアルコキシであり;

は、窒素原子との結合であり;かつ

いくつかの実施態様において、
Aは:

であり;かつ
Lは、

である。

いくつかの実施態様において、
BAは、抗体であり、
Aは:

であり、
ここで、

は、結合剤との結合である。

いくつかの実施態様において、
Aは:

であり;
ここで、
R¹は、出現する毎に独立に、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アリー
ル、アルカリール、アラルキル、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、ヘテロアリール
、ヘテロアルキル、ヘテロシクロアルキル、シアノ、ニトロ、

又はアジドであり;かつ
qは、0〜5の整数であり;かつ
Lは:

であり、
ここで:
SPは、スペーサーであり;

いくつかの実施態様において、Aは:

であり;
ここで:
R¹は、出現する毎に独立に、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アリー
ル、アルカリール、アラルキル、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、ヘテロアリール
、ヘテロアルキル、ヘテロシクロアルキル、シアノ、ニトロ、

又はアジドであり;
ここで、qは、0〜5の整数であり;
Lは:

であり、
ここで:
SPは、スペーサーであり;

いくつかの実施態様において、
Aは:

又はアジドであり;
ここで、qは、0〜5の整数であり;かつ
Lは:

であり、
ここで:

は、結合剤との結合であり;かつ
bは、2〜8の整数である。

いくつかの実施態様において、
Aは:

又はアジドであり;かつ
qは、0〜5の整数であり;かつ
Lは:

であり、
ここで、

は、結合剤との結合である。

いくつかの実施態様において、Aは:

又はアジドであり;
ここで、qは、0〜5の整数である;
Lは:

であり、
ここで、

は、結合剤との結合である。

いくつかの実施態様において、
Aは:

であり;かつ
Lは、

である。

いくつかの実施態様において、式Iの化合物は:

であり、式中、Aは、アリーレン又はヘテロアリーレンであり、L¹及びL²はリンカーであ
り、BAは結合剤であり、kは、0〜30の整数であり、かつtは、0〜8の整数である。これら
の実施態様のいくつかにおいて、L¹は、リジン残基を介してBAに結合するリンカーである
。これらの実施態様のいくつかにおいて、下付き文字kは、BA上のリジン残基を介してBA
に結合しているリンカーL¹の数を表す。これらの実施態様のいくつかにおいて、L²は、シ
ステイン残基を介してBAに結合するリンカーである。これらの実施態様のいくつかにおい
て、下付き文字tは、BA上のシステイン残基を介してBAに結合しているリンカーL²の数を
表す。いくつかの実施態様において、リンカーL²が単座リンカーであるとき、tは、0〜8
の整数である。いくつかの実施態様において、リンカーL²が二座リンカーであるとき、t
は、0〜4の整数である。これらの例のいくつかにおいて、k＋tの合計は、1〜8に等しい。

いくつかの実施態様において、式Iの化合物は:

であり、ここで、Aは、アリーレン又はヘテロアリーレンであり、L¹及びL²はリンカーで
あり、かつBAは結合剤である。これらの実施態様のいくつかにおいて、L¹は、リジン残基
を介してBAに結合するリンカーである。これらの実施態様のいくつかにおいて、L²は、シ
ステイン残基を介してBAに結合するリンカーである。

いくつかの実施態様において、式Iの化合物は:

いくつかの実施態様において、Aは:

いくつかの実施態様において、リンカーは:

であり、
ここで:
SPは、スペーサーであり;

スペーサーは、AA¹-AA²部分を結合剤(BA)に接続する二価部分である。好適なスペーサ
ーとしては、アルキレン又はポリエチレングリコールを含むものが挙げられるが、これら
に限定されない。スペーサーの末端、すなわち、結合剤又はAA¹に直接結合されるスペー
サーの部分は、コンジュゲートの化学合成時に、抗体又はAA¹をスペーサーにカップリン
グさせる目的で使用される反応性部分に由来する部分であることができる。

であり、
ここで:

は、結合剤との結合であり;かつ
bは、2〜8の整数である。

いくつかの実施態様において、スペーサーは:

であり、
ここで:

は、結合剤との結合である。

いくつかの実施態様において、スペーサーは:

であり、
ここで:

は、結合剤との結合であり;かつ
bは、2〜8の整数である。

いくつかの実施態様において、スペーサーは:

であり、
ここで:

いくつかの実施態様において、スペーサーは:

である。

いくつかの実施態様において、スペーサーは:

である。

いくつかの実施態様において、スペーサーは:

である。

いくつかの実施態様において、スペーサーは:

である。

いくつかの実施態様において、スペーサーは:

である。

いくつかの実施態様において、スペーサーは:

である。

いくつかの実施態様において、スペーサーは:

である。

いくつかの実施態様において、スペーサーは:

である。

いくつかの実施態様において、スペーサーは:

である。

ここで、

いくつかの実施態様において、式Iの化合物は:

であり、
式中、Xは、N又はOであり、
R^N及びR^Mは、各々独立に、水素又はアリールであり、
bは、1〜8の整数であり、
Aは、アリール又はヘテロアリールであり、かつ
tは、1〜8の整数である。

いくつかの実施態様において、式Iの化合物は以下である:

式中:
Abは、抗体であり;

は、該抗体のシステインとの結合であり;

は、該抗体のリジンとの結合であり;
kは、1〜30の整数であり;かつ
tは、1〜8の整数である。いくつかの例において、kは、1〜8の整数である。いくつかの
例において、tは、1〜4の整数である。いくつかの例において、

が抗体のシステインとの結合であるとき、本明細書に示される最大8種のコンジュゲート
を抗体に結合させることができる。いくつかの例において、

が抗体のリジンとの結合であるとき、本明細書に示される最大30種のコンジュゲートを抗
体に結合させることができる。

いくつかの実施態様において、式Iの化合物は以下である:

。

いくつかの実施態様において、kは、1〜30の整数である。いくつかの実施態様において
、kは、1〜8の整数である。いくつかの実施態様において、kは、1〜6の整数である。いく
つかの実施態様において、kは、1〜4の整数である。いくつかの実施態様において、kは、
1〜3の整数である。いくつかの実施態様において、コンジュゲートの薬物-抗体比(DAR)は
、1.0〜3.0である。

(C.メイタンシノイド誘導体)
本明細書に提供されるのは、式(II)の化合物又はその医薬として許容し得る塩である:

(式中、Aは、アリーレン又はヘテロアリーレンである)。

ある実施態様において、これらの化合物は、本明細書に記載されるコンジュゲートのペ
イロード部分を表し、細胞内へのコンジュゲートの内在化の後、例えば、酵素によるタン
パク質分解によって放出される。本明細書に提供される方法は、増殖性疾患、例えば、癌
を治療する方法であって、患者に、該患者の細胞内への該コンジュゲートの内在化の後、
式(II)の化合物を放出するコンジュゲート、例えば、抗体-薬物コンジュゲートの治療有
効量を投与することを含む、方法を含む。

いくつかの実施態様において、これらの化合物は、本明細書に記載されるコンジュゲー
トの代謝産物、例えば、酵素によるタンパク質分解産物を表す。いくつかの実施態様にお
いて、これらの化合物は、本明細書に記載されるコンジュゲートの異化産物を表す。いく
つかの実施態様において、これらの化合物は、本明細書に記載されるコンジュゲートの細
胞産物を表す。

いくつかの実施態様において、Aは、アリーレンである。

いくつかの実施態様において、Aは:

いくつかの実施態様において、式(II)の化合物は、式(IIA)の化合物:

であり、式中、R¹及びnは、本明細書に定義されている通りである。

いくつかの実施態様において、式(II)の化合物は、式(IIB)の化合物:

であり、式中、R¹及びqは、本明細書に定義されている通りである。

いくつかの実施態様において、式(II)の化合物は、式(IIB2)の化合物:

いくつかの実施態様において、式(II)の化合物は、式(IIB3)の化合物:

いくつかの実施態様において、式(II)の化合物は、式(IIC)の化合物:

いくつかの実施態様において、式(II)の化合物は、式(IID)の化合物:

いくつかの実施態様において、式(II)の化合物は、式(IIE)の化合物:

いくつかの実施態様において、式(II)の化合物は、式(IIF)の化合物:

いくつかの実施態様において、式(II)の化合物は、式(IIG)の化合物:

いくつかの実施態様において、R¹は、独立に、アルキル又はハロである。いくつかの実
施態様において、R¹は、独立に、C_1-6アルキル、C_1-6ハロアルキル、又はハロである。い
くつかの実施態様において、R¹は、独立に、C_1-6ハロアルキル又はハロである。いくつか
の実施態様において、R¹は、独立に、ハロである。いくつかの実施態様において、R¹は、
独立に、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード、又はトリフルオロメチルである。いくつか
の実施態様において、n、m、p、又はqは、0、1、又は2である。いくつかの実施態様にお
いて、n、m、p、又はqは、0又は1である。いくつかの実施態様において、n、m、p、又はq
は、0である。

いくつかの実施態様において、R¹は、独立に、アルキル、アルコキシ、ヘテロアルキル
、ハロ、ハロアルキル、又はハロアルコキシである。いくつかの実施態様において、R¹は
、独立に、C_1-6アルキル、C_1-6アルコキシ、C_1-6ハロアルキル、C_1-6ハロアルコキシ、又
はハロである。いくつかの実施態様において、R¹は、独立に、C_1-6アルキル又はC_1-6アル
コキシである。いくつかの実施態様において、R¹は、独立に、アルコキシである。いくつ
かの実施態様において、R¹は、独立に、メトキシ、エトキシ、プロポキシである。いくつ
かの実施態様において、n、m、p、又はqは、0、1、又は2である。いくつかの実施態様に
おいて、n、m、p、又はqは、0又は1である。いくつかの実施態様において、n、m、p、又
はqは、0である。いくつかの実施態様において、式(II)の化合物は、式(IIA)の化合物:

であり、
ここで:
R¹は、出現する毎に独立に、ハロ又はトリフルオロメチルであり;かつ
nは、0、1、又は2である。

であり、
ここで:
R¹は、出現する毎に独立に、ハロ又はトリフルオロメチルであり;かつ
qは、0、1、又は2である。

いくつかの実施態様において、式(II)の化合物は:

である。

いくつかの実施態様において、式(II)の化合物は、

から選択される化合物である。

いくつかの実施態様において、式(II)の化合物は:

である。

いくつかの実施態様において、これらの化合物は、本明細書に記載されるコンジュゲー
トの代謝産物、例えば、酵素によるタンパク質分解産物を表す。

いくつかの実施態様において、Aは、アリーレンである。

いくつかの実施態様において、Aは:

であり、
ここで:
R¹は、出現する毎に独立に、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アルカリ
ール、アラルキル、ハロ、ハロアルコキシ、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキル、ヒ
ドロキシル、シアノ、ニトロ、

であり、式中、R¹は、出現する毎に独立に、メトキシ、ハロ、又はトリフルオロメチルで
あり;かつ
nは、0、1、又は2である。

であり、式中、R¹は、出現する毎に独立に、メトキシ、ハロ、又はトリフルオロメチルで
あり;かつqは、0、1、又は2である。

である。

式中、R¹は、出現する毎に独立に、メトキシ、ハロ、又はトリフルオロメチルであり;
かつqは、0、1、又は2である。いくつかの実施態様において、R¹は、独立に、アルキル又
はハロである。いくつかの実施態様において、R¹は、独立に、C_1-6アルキル、C_1-6ハロア
ルキル、又はハロである。いくつかの実施態様において、R¹は、独立に、C_1-6ハロアルキ
ル又はハロである。いくつかの実施態様において、R¹は、独立に、ハロである。いくつか
の実施態様において、R¹は、独立に、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード、又はトリフル
オロメチルである。いくつかの実施態様において、n、m、p、又はqは、0、1、又は2であ
る。いくつかの実施態様において、n、m、p、又はqは、0又は1である。いくつかの実施態
様において、n、m、p、又はqは、0である。

いくつかの実施態様において、R¹は、独立に、アルキル、アルコキシ、ヘテロアルキル
、ハロ、ハロアルキル、又はハロアルコキシである。いくつかの実施態様において、R¹は
、独立に、C_1-6アルキル、C_1-6アルコキシ、C_1-6ハロアルキル、C_1-6ハロアルコキシ、又
はハロである。いくつかの実施態様において、R¹は、独立に、C_1-6アルキル又はC_1-6アル
コキシである。いくつかの実施態様において、R¹は、独立に、アルコキシである。いくつ
かの実施態様において、R¹は、独立に、メトキシ、エトキシ、プロポキシである。いくつ
かの実施態様において、n、m、p、又はqは、0、1、又は2である。いくつかの実施態様に
おいて、n、m、p、又はqは、0又は1である。いくつかの実施態様において、n、m、p、又
はqは、0である。

いくつかの実施態様において、式(II)の化合物は:

である。

いくつかの実施態様において、式(II)の化合物は、式(IIH)の化合物:

いくつかの実施態様において、式(II)の化合物は、

から選択される化合物である。

いくつかの実施態様において、式(II)の化合物は、

から選択される化合物である。

(D.化合物の調製)
式Iの化合物は、式P1の化合物を、結合剤、例えば、抗体と、標準的なコンジュゲーシ
ョン条件下でカップリングさせることにより合成することができる(例えば、引用により
本明細書中に組み込まれるDoroninaらの文献、Nature Biotechnology 2003, 21, 7, 778
を参照)。結合剤が抗体であるとき、該抗体は、該抗体の1以上のシステイン又はリジン残
基を介して式P1の化合物にカップリングさせることができる。式P1の化合物は、例えば、
抗体を、還元剤、例えば、ジチオスエリトール(dithiotheritol)にさらして、該抗体のジ
スルフィド結合を切断し、還元された抗体を、例えば、ゲル濾過によって精製し、その後
、該抗体を、反応性部分、例えば、マレイミド基を含む式P1の化合物と反応させることに
より、システイン残基にカップリングさせることができる。好適な溶媒としては、水、DM
A、DMF、及びDMSOが挙げられるが、これらに限定されない。反応性部分、例えば、活性化
エステル又は酸ハライド基を含む式P1の化合物は、リジン残基にカップリングさせること
ができる。好適な溶媒としては、水、DMA、DMF、及びDMSOが挙げられるが、これらに限定
されない。式Iの化合物は、例えば、サイズ排除クロマトグラフィー、透析、及び限外濾
過/透析濾過を含む、既知のタンパク質技法を用いて精製することができる。

(ここで、RLは反応性リンカーであり、Aは、アリーレン又はヘテロアリーレンであり、L
はリンカーであり、かつBAは結合剤である。)

いくつかの実施態様において、式P1の化合物はAを含み、ここで、Aは:

であり、ここで、nは、0又は1であり、かつR¹は、アルコキシ、ハロ、又はハロアルキル
である。

であり、ここで、nは、0又は1であり、かつR¹は、C_1-6アルコキシ、ハロ、又はC_1-6ハロ
アルキルである。

であり、ここで、nは、0又は1であり; R¹は、C_1-6アルコキシ、ハロ、又はC_1-6ハロアル
キルであり;かつRLは、

であり、ここで、bは、2〜8の整数であり、かつ

は、結合剤との結合である。

反応性リンカーは、その構造中に、結合剤と反応して(例えば、そのシステイン又はリ
ジン残基で抗体と反応して)式Iの化合物を形成させることができる部分(portion)を含む
部分(moiety)である。結合剤とのコンジュゲーションの後、反応性リンカーは、式Iの化
合物のリンカー(L)部分になる。例示的な反応性リンカーとしては、結合剤と反応するこ
とができるハロアセチル、イソチオシアネート、又はマレイミド部分を含むものが挙げら
れるが、これらに限定されない。反応性部分には、以下の構造を有する部分も含まれる:

(ここで、Xは、-O-又は-NH-であり、かつLGは、脱離基、例えば、Brである)。

いくつかの実施態様において、反応性リンカーは:

であり、
ここで:
SP^Rは、反応性スペーサーであり;
AA¹は、アミノ酸であり;かつ
AA²は、アミノ酸である。

反応性スペーサーは、結合剤と反応することができる上記の反応性リンカー部分(porti
on)を含み、かつこの部分(portion)をAA¹に接続する部分(moiety)である。好適なスペー
サーとしては、AA¹を結合剤と反応することができる部分(例えば、ハロアセチル、イソチ
オシアネート、又はマレイミド)に接続するアルキレン又はポリエチレングリコールを含
むものが挙げられるが、これらに限定されない。

いくつかの実施態様において、反応性スペーサーは、

から選択される非切断可能部分を含む。

ここで、

は、メイタンシノイド誘導体との1以上の結合を表し;かつnは、4〜10の整数である。いく
つかの例において、nは、4、5、6、7、8、9、又は10である。いくつかの実施態様におい
て、反応性スペーサーは、

である。いくつかの実施態様において、反応性スペーサーは、

である。

いくつかの実施態様において、反応性スペーサーは:

であり、ここで、bは、2〜8の整数である。

いくつかの実施態様において、反応性スペーサーは:

である。

いくつかの実施態様において、スペーサーは、

である。

いくつかの実施態様において、スペーサーは、

であり、ここで、gは、1〜24の整数である。

いくつかの実施態様において、反応性スペーサーは:

であり、ここで、bは、2〜8の整数であり、かつgは、2〜20の整数である。

いくつかの実施態様において、反応性スペーサーは:

である。

いくつかの実施態様において、反応性リンカーは:

であり、
ここで:
SP^Rは、反応性スペーサーであり;
R^AA1は、アミノ酸側鎖であり;かつ
R^AA2は、アミノ酸側鎖である。

いくつかの実施態様において、反応性リンカーは:

であり、
ここで:
SPは、反応性スペーサーである。

いくつかの実施態様において、反応性リンカーは:

であり、ここで、bは、2〜8の整数である。

いくつかの実施態様において、反応性リンカーは:

であり、ここで、bは、2〜8の整数である。

いくつかの実施態様において、反応性リンカーは:

であり、ここで、bは、2〜8の整数である。

いくつかの実施態様において、反応性リンカーは:

であり、ここで、bは、2〜8の整数である。

いくつかの実施態様において、反応性リンカーは:

であり、ここで、bは、2〜8の整数であり、R^Nは、水素原子又はアルキルであり、かつR^M
はアルキルである。

いくつかの実施態様において、反応性リンカーは:

であり、ここで、bは、2〜8の整数である。

いくつかの実施態様において、反応性リンカーは:

であり、ここで、bは、2〜8の整数である。

いくつかの実施態様において、反応性リンカーは:

であり、ここで、bは、2〜8の整数であり; R^Nは、水素原子又はアルキルであり;かつR^Mは
アルキルである。

いくつかの実施態様において、反応性リンカーは:

であり、ここで、bは、2〜8の整数である。

いくつかの実施態様において、反応性リンカーは:

であり、ここで、gは、2〜8の整数である。

いくつかの実施態様において、反応性リンカーは:

である。

いくつかの実施態様において、反応性リンカーは:

である。

いくつかの実施態様において、反応性リンカーは:

である。

いくつかの実施態様において、反応性リンカーは:

である。

いくつかの実施態様において、反応性リンカーは:

である。

いくつかの実施態様において、反応性リンカーは:

である。

いくつかの実施態様において、反応性リンカーは:

である。

いくつかの実施態様において、反応性リンカーは:

である。

いくつかの実施態様において、反応性リンカーは:

である。

いくつかの実施態様において、反応性リンカーは:

である。

いくつかの実施態様において、反応性リンカーは:

である。

いくつかの実施態様において、反応性リンカーは:

である。

いくつかの実施態様において、式P1の化合物は、式P1Aの化合物:

であり、
ここで:
Aは:

であり、
ここで:
R¹は、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アリール、アルカリール、ア
ラルキル、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキ
ル、ヒドロキシル、シアノ、ニトロ、

又はアジドであり、ここで、
R^Aは、アルキル又はヘテロアルキルであり;
nは、0〜4の整数であり;
mは、0〜3の整数であり;
pは、0〜6の整数であり;かつ
qは、0〜5の整数である;
SP^Rは、反応性スペーサーであり;
AA¹は、アミノ酸であり;かつ
AA²は、アミノ酸である。

いくつかの実施態様において、式P1Aの化合物は、Aを含む化合物であり、ここで、Aは:

であり、ここで、nは、0又は1であり;かつR¹は、アルコキシ、ハロ、又はハロアルキルで
ある。いくつかの例において、R¹は、メチルスルホニル、N-メチルホルムアミド、ヒドロ
キシル、又はモルホリニルである。

であり、ここで、nは、0又は1であり;かつR¹は、C_1-6アルコキシ、ハロ、又はC_1-6ハロア
ルキルである。

であり、qは、0〜5の整数であり;かつR¹は、C_1-6アルコキシ、ハロ、又はC_1-6ハロアルキ
ルである。

いくつかの実施態様において、式P1の化合物は、式P1Bの化合物:

であり、
式中、
Aは:

又はアジドであり、ここで、
R^Aは、アルキル又はヘテロアルキルであり;
nは、0〜4の整数であり;
mは、0〜3の整数であり;
pは、0〜6の整数であり;かつ
qは、0〜5の整数であり;かつ
SP^Rは、反応性スペーサーである。

いくつかの実施態様において、式P1の化合物は、式P1Cの化合物:

であり、
式中:
SP^Rは、反応性スペーサーであり;
AA¹は、アミノ酸であり;
AA²は、アミノ酸であり;
R¹は、出現する毎に独立に、アルキル、アルコキシ、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアル
キル、又はトリフルオロメチルであり、かつ
nは、0、1、又は2である。

いくつかの実施態様において、式P1の化合物は、式P1Dの化合物:

であり、
式中:
SP^Rは、反応性スペーサーであり;
AA¹は、アミノ酸であり;
AA²は、アミノ酸であり;
R¹は、出現する毎に独立に、アルキル、アルコキシ、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアル
キル、又はトリフルオロメチルであり、かつ
nは、0、1、又は2である。いくつかの実施態様において、nは0である。いくつかの実施
態様において、nは1である。いくつかの実施態様において、nは2である。

いくつかの実施態様において、式P1の化合物は、式P1Dの化合物であり、式中、R¹は、
アルコキシ、ハロ、又はハロアルキルである。いくつかの実施態様において、R¹は、C_1-6
アルコキシ、ハロ、又はC_1-6ハロアルキルである。いくつかの実施態様において、nは0で
ある。いくつかの実施態様において、nは1である。いくつかの実施態様において、nは2で
ある。

いくつかの実施態様において、式P1の化合物は、式P1Dの化合物であり、式中、R¹は、C
_1-6アルコキシ、ハロ、又はC_1-6ハロアルキルであり;かつSP^R-AA¹-AA²は、

であり、ここで、bは、2〜8の整数であり、かつ

は、結合剤との結合である。いくつかの実施態様において、nは0である。いくつかの実施
態様において、nは1である。いくつかの実施態様において、nは2である。いくつかの実施
態様において、bは2である。いくつかの実施態様において、bは3である。いくつかの実施
態様において、bは4である。いくつかの実施態様において、bは5である。いくつかの実施
態様において、bは6である。いくつかの実施態様において、bは7である。いくつかの実施
態様において、bは8である。

いくつかの実施態様において、式P1の化合物は、式P1Eの化合物:

であり、
式中:
SP^Rは、反応性スペーサーであり;
R^AA1は、アミノ酸側鎖であり;
R^AA2は、アミノ酸側鎖であり;
R¹は、出現する毎に独立に、アルキル、アルコキシ、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアル
キル、又はトリフルオロメチルであり、かつ
nは、0、1、又は2である。

いくつかの実施態様において、式P1の化合物は、式P1Fの化合物:

であり、
式中:
SP^Rは、反応性スペーサーであり;
R¹は、出現する毎に独立に、アルキル、アルコキシ、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアル
キル、又はトリフルオロメチルであり、かつ
nは、0、1、又は2である。

いくつかの実施態様において、式P1の化合物は、式P1Gの化合物:

であり、
式中:
SP^Rは、反応性スペーサーであり;かつ
R¹は、水素原子、アルキル、アルコキシ、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、又は
トリフルオロメチルである。

いくつかの実施態様において、式P1の化合物は、式P1Hの化合物:

であり、
式中:
R¹は、水素原子、アルキル、アルコキシ、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、又は
トリフルオロメチルであり;かつ
bは、2〜8の整数である。

いくつかの実施態様において、式P1の化合物は、式P1Iの化合物:

いくつかの実施態様において、式P1の化合物は、式P1Jの化合物:

いくつかの実施態様において、式P1の化合物は、式P1Kの化合物:

であり、式中、R¹は、水素原子、アルキル、アルコキシ、ハロ、ハロアルコキシ、ハロア
ルキル、又はトリフルオロメチルである。

いくつかの実施態様において、式P1の化合物は、式P1Lの化合物:

いくつかの実施態様において、式P1の化合物は、式P1Mの化合物:

いくつかの実施態様において、式P1の化合物は、式P1Nの化合物:

であり、式中、R¹は、水素原子、アルキル、アルコキシ、ハロ、ハロアルコキシ、ハロア
ルキル、又はトリフルオロメチルであり、かつbは、2〜8の整数である。

いくつかの実施態様において、式P1の化合物は、式P1Oの化合物:

いくつかの実施態様において、式P1の化合物は、式P1Pの化合物:

いくつかの実施態様において、式P1の化合物は、式P1Qの化合物:

いくつかの実施態様において、式P1の化合物は、式P1Rの化合物:

いくつかの実施態様において、式P1の化合物は、式P1Sの化合物:

いくつかの実施態様において、式P1の化合物は、式P1Tの化合物:

であり、式中、R^Nは、水素原子又はアルキルであり、R^Mはアルキルであり、R¹は、水素原
子、アルキル、アルコキシ、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、又はトリフルオロメ
チルであり、かつbは、2〜8の整数である。

いくつかの実施態様において、式P1の化合物は、式P1Uの化合物:

いくつかの実施態様において、式P1の化合物は、式P1Vの化合物:

いくつかの実施態様において、式P1の化合物は、式P1Wの化合物:

であり、式中、R¹は、水素原子、アルキル、アルコキシ、ハロ、ハロアルコキシ、ハロア
ルキル、又はトリフルオロメチルであり、gは、2〜20の整数であり;かつbは、2〜8の整数
である。

いくつかの実施態様において、式P1の化合物は、式P1Xの化合物:

であり、
式中:
R¹は、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、ヘテロアルキル、ハロ、ハロ
アルキル、又はハロアルコキシであり;かつbは、2〜8の整数である。いくつかの実施態様
において、R¹は、メチル、エチル、メトキシ、又はエトキシである。これらの実施態様の
いくつかにおいて、R¹は、メトキシである。いくつかの実施態様において、R¹は、1-メチ
ルエチル-チオール、フェニル、2-フルオロフェニル、ピリジニル、4-ピリジニル、ピロ
リジニル、又は1-ピロリジニルである。いくつかの実施態様において、R¹は、トリフルオ
ロメチルである。いくつかの実施態様において、R¹は、フルオロである。いくつかの実施
態様において、R¹は、水素である。

いくつかの実施態様において、式P1の化合物は、式P1Yの化合物:

であり、式中、R¹は、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、ヘテロアルキル
、ハロ、ハロアルキル、ハロアルコキシである。いくつかの実施態様において、R¹は、メ
チル、エチル、メトキシ、又はエトキシである。これらの実施態様のいくつかにおいて、
R¹は、メトキシである。いくつかの実施態様において、R¹は、1-メチルエチル-チオール
、フェニル、2-フルオロフェニル、ピリジニル、4-ピリジニル、ピロリジニル、又は1-ピ
ロリジニルである。いくつかの実施態様において、R¹は、トリフルオロメチルである。い
くつかの実施態様において、R¹は、フルオロである。いくつかの実施態様において、R¹は
、水素である。

いくつかの実施態様において、式P1の化合物は、式P1Zの化合物:

であり、式中、R^cは、アルキル又はハロアルキルから選択され、ここで、該アルキル又は
ハロアルキルは、線状、分岐状、又は環状である。

いくつかの実施態様において、式P1の化合物は、以下の構造のうちの１つを有する化合
物である:

。

いくつかの実施態様において、式P1の化合物は、以下の構造のうちの1つを有する化合
物である:

。

式P1の化合物は、式P2の化合物を、式P3の化合物と、アミド合成条件下で反応させるこ
とにより合成することができる。好適なアミド合成条件としては、式P2の化合物をカルボ
ン酸活性化剤及び塩基の存在下で接触させることが挙げられるが、これに限定されない。
好適な活性化剤としては、EDC、HATU、HBTU、DCC、BOP、及びEEDQが挙げられるが、これ
らに限定されない。好適な塩基としては、DIEA、DBU、トリブチルアミン、及び2,6-ルチ
ジンが挙げられるが、これらに限定されない。

式P2の化合物は、既知の技法を用いて、メイタンシノール及びアラニンから直接合成す
ることができる(例えば、引用により本明細書中に組み込まれる米国特許第4,308,269号を
参照)。

式Iの化合物は、式PP3の化合物:

を、式PP4の化合物:

(式中:
BAは、結合剤であり;
SPは、スペーサーであり;
R^AA1は、アミノ酸側鎖であり;
R^AA2は、アミノ酸側鎖であり;
Aは、アリーレン又はヘテロアリーレンであり;かつ
kは、1〜10の整数である)
と、アミド合成条件下でカップリングさせることにより合成することができる。

式PP3の化合物は、式PP5の化合物:

(式中、Aは、アリーレン又はヘテロアリーレンである)を好適な還元剤と接触させること
により合成することができる。

いくつかの実施態様において、好適な還元剤としては、金属、金属箔、金属粉、金属ア
マルガム、又は金属の削り屑が挙げられる。ある実施態様において、金属は、亜鉛、鉄、
アルミニウム、パラジウム、又はラネーニッケルから選択される。

例えば、いくつかの実施態様において、以下の還元剤条件を利用する。化合物PP5の量
に関して、例えば、本明細書における方法のいくつかにおいて、約20(20)当量の亜鉛末と
40(40)当量の酢酸を合わせた。いくつかの例において、還元反応を室温で約1〜20時間実
施した。これらの例のいくつかにおいて、前述の酢酸を別の好適な弱酸又はプロトン供与
体と置き換える。好適な弱酸又はプロトン供与体の例としては、ギ酸、pTsOH、及びNH₄Cl
が挙げられるが、これらに限定されない。これらの例のいくつかにおいて、還元金属を、
鉄、アルミニウム、パラジウム、又はラネーニッケルから選択される好適な還元剤と置き
換える。これらの例のいくつかにおいて、好適な溶媒としては、混和性有機溶媒中に(体
積で)10〜50％の水を有する溶媒が挙げられる。混和性有機溶媒の例としては、THF、ジオ
キサン、及びジエチルエーテルが挙げられるが、これらに限定されない。いくつかの例に
おいて、本明細書に示される還元反応は、0〜50℃の範囲に及ぶ反応温度で実施される。
いくつかの例において、本明細書に示される還元反応は、1〜40時間の範囲に及ぶ反応時
間で実施される。

好適な酸としては、酢酸が挙げられるが、これに限定されない。

いくつかの実施態様において、Aは:

いくつかの実施態様において、式PP5の化合物は、式PP5Aの化合物:

であり、
式中:
R¹は、出現する毎に独立に、ハロ又はトリフルオロメチルであり;かつ
nは、0、1、又は2である。

いくつかの実施態様において、式PP5の化合物は、式PP5A2の化合物:

であり、
ここで:
R¹は、出現する毎に独立に、ハロ又はトリフルオロメチルであり;かつ
qは、0〜5の整数である

いくつかの実施態様において、式PP5の化合物は、式PP5A3の化合物:

であり、
ここで:
R¹は、出現する毎に独立に、ハロ又はトリフルオロメチルであり;かつ
qは、0〜5の整数である。いくつかの実施態様において、R¹は、1-メチルエチル-チオー
ル、フェニル、2-フルオロフェニル、ピリジニル、4-ピリジニル、ピロリジニル、又は1-
ピロリジニルである。いくつかの実施態様において、R¹は、トリフルオロメチルである。
いくつかの実施態様において、R¹は、メトキシである。いくつかの実施態様において、R¹
は、フルオロである。いくつかの実施態様において、R¹は、水素である。

いくつかの実施態様において、式PP5の化合物は、式PP5A4の化合物:

式PP5の化合物は、式P2の化合物を、式PP6の化合物:

とアミド合成条件下で接触させることにより合成することができる。

好適な式PP6の化合物としては、3-ニトロ-安息香酸、3-クロロ-5-ニトロ-安息香酸、3-
フルオロ-5-ニトロ-安息香酸、3-ニトロ-1-ナフタレンカルボン酸、2-フルオロ-5-ニトロ
-安息香酸、3-(ジメチルアミノ)-5-ニトロ-安息香酸、3-エトキシ-5-ニトロ-安息香酸、2
-メトキシ-5-ニトロ-安息香酸、4-メトキシ-3-ニトロ-安息香酸、2,6-ジフルオロ-3-ニト
ロ-安息香酸、2-クロロ-6-フルオロ-3-ニトロ-安息香酸、6-クロロ-2-フルオロ-3-ニトロ
-安息香酸、2-クロロ-4-フルオロ-5-ニトロ-安息香酸、4-クロロ-2-フルオロ-5-ニトロ-
安息香酸、2-エトキシ-5-ニトロ-安息香酸、2-(メチルアミノ)-3-ニトロ-安息香酸、6-ニ
トロ-8-キノリンカルボン酸、4-(ジメチルアミノ)-3-ニトロ-安息香酸塩酸塩(1:1)、2-メ
チル-ニトロ-安息香酸、3-メチル-4-ニトロ-安息香酸、4-ニトロ-1-ナフタレンカルボン
酸、4-ニトロ-1-ナフタレンカルボン酸、2,6-ジメチル-4-ニトロ-安息香酸、3-フルオロ-
4-ニトロ-安息香酸、3-クロロ-4-ニトロ-安息香酸、3-ブロモ-4-ニトロ-安息香酸、3-シ
アノ-4-ニトロ-安息香酸、3-シクロプロピル-4-ニトロ-安息香酸、3-メトキシ-4-ニトロ-
安息香酸、2-メトキシ-4-ニトロ-安息香酸、5-クロロ-2-メチル-4-ニトロ-安息香酸、8-
ニトロ-5-イソキノリンカルボン酸、5-ニトロ-8-キノリンカルボン酸、8-ニトロ-5-キノ
リンカルボン酸、2,5-ジフルオロ-4-ニトロ-安息香酸、2-(ジメチルアミノ)-4-ニトロ-安
息香酸、2-クロロ-5-フルオロ-4-ニトロ-安息香酸、3-(ジメチルアミノ)-4-ニトロ-安息
香酸、2-[(1-メチルエチル)チオ]-4-ニトロ-安息香酸、4-ニトロ-3-(トリフルオロメチル
)-安息香酸、4-ニトロ-2-(トリフルオロメチル)-安息香酸、3,5-ジメトキシ-4-ニトロ-安
息香酸、4-ニトロ-2-(プロピルアミノ)-安息香酸、3-(ジフルオロメトキシ)-4-ニトロ-安
息香酸、2-(2-フルオロ-フェニル)-4-ニトロ-安息香酸、4-ニトロ-2-(4-ピリジニル)-安
息香酸、4-ニトロ-3-(4-ピリジニル)-安息香酸、又は4-ニトロ-2-(1-ピロリジニル)-安息
香酸が挙げられるが、これらに限定されない。

好適な式PP6の化合物には、以下の式:

(式中、R¹は、出現する毎に独立に、C_1-6アルキル、C_1-6アルコキシ、ハロ、C_1-6ハロア
ルキル、又はC_1-6ハロアルコキシであり、ここで、nは、0、1、2、3、又は4である)のい
ずれか1つを有する化合物が含まれる。これらの実施態様のいくつかにおいて、R¹は、メ
トキシ又はメチルである。いくつかの具体的な実施態様において、R¹は、メトキシ、フル
オロ、又はトリフルオロメチルである。ある実施態様において、nは、1又は2である。こ
れらの実施態様のいくつかにおいて、nは1である。いくつかの実施態様において、R¹は、
フルオロ、クロロ、ブロモ、又はヨードである。

いくつかの実施態様において、R¹は、1-メチルエチル-チオール、フェニル、2-フルオ
ロフェニル、ピリジニル、4-ピリジニル、ピロリジニル、又は1-ピロリジニルである。い
くつかの実施態様において、R¹は、トリフルオロメチルである。いくつかの実施態様にお
いて、R¹は、メトキシである。いくつかの実施態様において、R¹は、フルオロである。い
くつかの実施態様において、R¹は、水素である。

いくつかの実施態様において、本明細書に提供されるのは、式PP5の化合物:

であり、式中、Aは、アリーレン又はヘテロアリーレンである。

いくつかの実施態様において、式PP5の化合物は、

から選択される化合物である。

いくつかの実施態様において、式PP5の化合物は:

である。

式IIIの化合物:

は、式PP1の化合物:

を、結合剤と、コンジュゲーション条件下で接触させることにより合成することができ、
ここで:
BAは、結合剤であり;
SPは、スペーサーであり;
SP^Rは、反応性スペーサーであり;
R^AA1は、アミノ酸側鎖であり;
R^AA2は、アミノ酸側鎖であり;
Aは、アリーレン又はヘテロアリーレンであり;かつ
kは、1〜30の整数である。

式PP1の化合物は、式PP2の化合物を式P2の化合物と接触させることにより調製すること
ができる:

(ここで:
SP^Rは反応性リンカーであり;
R^AA1は、アミノ酸側鎖であり;
R^AA1は、アミノ酸側鎖であり;かつ
Aは、アリーレン又はヘテロアリーレンである)。

式PP1の化合物は、式PP3の化合物を式PP7の化合物と接触させることにより調製するこ
とができる:

式PP2の化合物は、式PP8の化合物を二官能性スペーサーと接触させることにより調製す
ることができる:

。

式PP7の化合物は、式PP9の化合物を二官能性スペーサーと接触させることにより調製す
ることができる:

。

二官能性スペーサーは、式PP3の化合物と反応して、式PP2の化合物中に存在するSP^R部
分を付加する化合物である。例示的な二官能性スペーサーとしては:

が挙げられるが、これらに限定されない。

式PP8の化合物は、式PP10の化合物を式PP11の化合物と接触させ、その後、保護基を除
去することにより調製することができる:

(ここで、PGはアミン保護基であり、かつYは、それが結合しているカルボニルを求電子性
にする部分である)。式PP10の化合物は、例えば、HATU、BOP/HOBt、又はEDC/N-ヒドロキ
シスクシンアミドをDIEA、DBU、又はトリブチルアミンの存在下で用いる活性エステル形
成を含む、標準的なアミノ酸カップリング技法を用いて、その対応するアミノ酸をカップ
リングさせることにより調製することができる。

二官能性スペーサーは、式PP9の化合物と反応して、式PP7の化合物中に存在するSP^R部
分を付加する化合物である。例示的な二官能性スペーサーとしては:

が挙げられるが、これらに限定されない。

式(I)の抗体-薬物-コンジュゲート化合物は、好適な抗体、例えば、脱グリコシル化抗
体又は非グリコシル化抗体を、式(PT1)の化合物:

(ここで:
Aは、アリーレン又はヘテロアリーレンであり;かつ
Lはリンカーである)
と、トランスグルタミナーゼの存在下で反応させることにより調製することもできる。

いくつかの実施態様において、Aは:

いくつかの実施態様において、R¹は、

である。いくつかの実施態様において、R¹は、

いくつかの実施態様において、リンカーは、1以上のアミノ酸を含む。好適なアミノ酸
としては、天然、非天然、標準的、非標準的、タンパク質構成性、非タンパク質構成性、
及びL-又はD-α-アミノ酸が挙げられる。いくつかの実施態様において、リンカーは、ア
ラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、メチオニン、トリプトファン、フェニルアラ
ニン、プロリン、セリン、トレオニン、システイン、チロシン、アスパラギン、グルタミ
ン、アスパラギン酸、グルタミン酸、リジン,アルギニン、ヒスチジン、もしくはシトル
リン、又はこれらの誘導体を含む。

いくつかの実施態様において、リンカーは:

であり、
ここで:
一方の

は、ペイロードとの1以上の結合であり;
もう一方の

は、PT1の-NH₂との1以上の結合であり;
AA¹は、アミノ酸であり;かつ
AA²は、アミノ酸である。

リンカーは、AA¹-AA²部分をPT1の-NH₂に接続する二価部分をさらに含むことができる。
好適な二価部分としては、アルキレン又はポリエチレングリコールを含むものが挙げられ
るが、これらに限定されない。二価部分は、化合物の残りの部分との結合を容易にする1
以上の反応性基、又はそのような反応性基の1以上の残基を含むことができる。

PT1としては、1級アミン終端アルキレン又は1級アミン終端ポリエチレングリコールが
挙げられる。1級アミン終端部分は、トランスグルタミナーゼの存在下で、脱グリコシル
化抗体又は非グリコシル化抗体に直接結合させることができる。

いくつかの実施態様において、化合物は、1級アミン終端アルキレンを含む。いくつか
の実施態様において、化合物は、NH₂-C_5-7アルキレンを含む。いくつかの実施態様におい
て、化合物は:

を含み、
ここで:

は、ペイロードとの結合であり;かつ
bは、2〜8の整数である。

いくつかの実施態様において、化合物は:

を含み、
ここで:

は、ペイロードとの結合である。

いくつかの実施態様において、PT1の化合物は、

である。

いくつかの実施態様において、式(I)の化合物は、結合剤を、PT1と、トランスグルタミ
ナーゼの存在下、トランスグルタミネーション反応に好適な条件下で接触させることによ
り調製される。いくつかの実施態様において、トランスグルタミナーゼ反応は、約7〜約8
のpHで、少なくとも4時間行われる。いくつかの例において、pHは、7.2、7.3、7.4、7.5
、7.6、7.8、又は8である。

いくつかの実施態様において、式(I)の化合物は、式(PT1)の化合物の濃度が脱グリコシ
ル化抗体又は非グリコシル化抗体と比較して少なくとも30モル濃度当量であるトランスグ
ルタミナーゼ反応によって調製される。いくつかの実施態様において、式(I)の化合物は
、式(PT1)の化合物の濃度が脱グリコシル化抗体又は非グリコシル化抗体と比較して30〜1
50モル濃度当量であるトランスグルタミナーゼ反応によって調製される。

いくつかの実施態様において、式(I)の化合物は、式(PT1)の化合物の濃度が脱グリコシ
ル化抗体又は非グリコシル化抗体のミリグラム当たり1〜30Uであるトランスグルタミナー
ゼ反応によって調製される。

いくつかの実施態様において、抗体は、トランスグルタミナーゼ反応の前に、ペプチド
N-グリコシダーゼF(PNGアーゼF)で脱グリコシル化されている。

いくつかの実施態様において、抗体は、非グリコシル化されている。非グリコシル化抗
体は、抗体のグリコシル化に必要となる1以上のアミノ酸配列を除去するための突然変異
生成技法によって調製することができる。ある実施態様において、抗体は、別のアミノ酸
をN180に代用する突然変異を有する重鎖を含む。ある実施態様において、非グリコシル化
抗体は、1以上のN180Q重鎖ポリペプチドを含む。

いくつかの実施態様において、式(I)の化合物は、水、緩衝水、食塩水、緩衝食塩水、
及び有機化合物からなる群から選択される1以上の溶媒中で実施されるトランスグルタミ
ナーゼ反応によって調製される。

いくつかの実施態様において、式(I)の化合物は、リン酸塩、HEPES、又はMOPSで緩衝化
された水の中で実施されるトランスグルタミナーゼ反応によって調製される。

いくつかの実施態様において、式(I)の化合物は、グルタミニル修飾抗体を反応性スペ
ーサー化合物と反応させて、抗体-スペーサーコンジュゲートを形成させること;及びその
後、該抗体-スペーサーコンジュゲートを反応性ペイロード化合物と反応させて、抗体-ス
ペーサー-ペイロードコンジュゲートを形成させることを含む、トランスグルタミナーゼ
反応によって調製される。

いくつかの実施態様において、本明細書に提供されるのは、本明細書に示される方法に
よって産生されるグルタミニル修飾抗体である。

いくつかの実施態様において、本明細書に提供されるのは、本明細書に示される方法に
よって産生されるグルタミニル修飾抗体を含む医薬組成物である。

いくつかの実施態様において、本明細書に提供されるのは、それを必要としている対象
の状態を治療する方法であって、該対象に、本明細書に提供される抗体又は抗体-薬物-コ
ンジュゲートの医薬として許容し得る量を投与することを含む、方法である。

いくつかの実施態様において、本明細書に提供されるのは、治療のための本明細書に記
載される抗体又は抗体-薬物-コンジュゲートである。

いくつかの実施態様において、本明細書に提供されるのは、癌の治療のための本明細書
に記載される抗体又は抗体-薬物-コンジュゲートである。

(E.使用方法及び医薬組成物)
本開示は、疾患、疾病、又は障害、例えば、増殖性疾患、例えば、癌を治療又は予防す
る方法であって、本明細書に開示される化合物のうちの1つ又は複数、例えば、式(I)又は
(II)の化合物のうちの1つ又は複数の治療有効量を投与することを含む、方法を含む。疾
患、障害、及び/又は疾病としては、本明細書に記載されている抗原と関連するものが挙
げられるが、これらに限定されない。いくつかの実施態様において、抗原は、PSMA、MUC1
6、又はEGFRvIIIである。

本明細書に開示される化合物は、脳及び髄膜、中咽頭、肺及び気管支樹、消化管、雄雌
生殖器、筋肉、骨、皮膚及び付属器、結合組織、脾臓、免疫系、造血細胞及び骨髄、肝臓
及び尿路、並びに特殊感覚器官、例えば、目に発生する原発性及び/又は転移性腫瘍を治
療するために使用することができる。ある実施態様において、本明細書に提供される化合
物は、以下の癌:腎細胞癌、膵臓癌、頭頸部癌、前立腺癌、悪性神経膠腫、骨肉腫、結腸
直腸癌、胃癌(例えば、MET増幅を伴う胃癌)、悪性中皮腫、多発性骨髄腫、卵巣癌、小細
胞肺癌、非小細胞肺癌、滑膜肉腫、甲状腺癌、乳癌、又は黒色腫のうちの1つ又は複数を
治療するために使用される。いくつかの実施態様において、癌は乳癌である。

本明細書に記載される化合物は、単独で又は1以上の追加の治療剤と一緒に投与するこ
とができる。1以上の追加の治療剤は、本明細書に記載される化合物の投与の直前、それ
と同時、又はその直後に投与することができる。本開示は、1以上の追加の治療剤と組み
合わせた本明細書に記載される化合物のいずれかを含む医薬組成物、及びそのような組合
せをそれを必要としている対象に投与することを含む治療方法も含む。

好適な追加の治療剤としては: EGFRアンタゴニスト(例えば、抗EGFR抗体[例えば、セツ
キシマブもしくはパニツムマブ]又はEGFRの小分子阻害剤[例えば、ゲフィチニブもしくは
エルロチニブ])、別のEGFRファミリーメンバー、例えば、Her2/ErbB2、ErbB3、又はErbB4
のアンタゴニスト(例えば、抗ErbB2[例えば、トラスツズマブもしくはT-DM1{KADCYLA(登
録商標)}]、抗ErbB3もしくは抗ErbB4抗体、又はErbB2、ErbB3、もしくはErbB4活性の小分
子阻害剤)、EGFRvIIIのアンタゴニスト(例えば、EGFRvIIIに特異的に結合する抗体)、cME
Tアンタゴニスト(例えば、抗cMET抗体)、IGF1Rアンタゴニスト(例えば、抗IGF1R抗体)、B
-raf阻害剤(例えば、ベムラフェニブ、ソラフェニブ、GDC-0879、PLX-4720)、PDGFR-α阻
害剤(例えば、抗PDGFR-α抗体)、PDGFR-β阻害剤(例えば、抗PDGFR-β抗体、又は例えば
、メシル酸イマチニブもしくはリンゴ酸スニチニブなどの小分子キナーゼ阻害剤)、PDGF
リガンド阻害剤(例えば、抗PDGF-A、-B、-C、又は-D抗体、アプタマー、siRNAなど)、VEG
Fアンタゴニスト(例えば、VEGF-Trap、例えば、アフリベルセプト、例えば、US 7,087,41
1号を参照(本明細書において「VEGF阻害融合タンパク質」とも称される)、抗VEGF抗体(例
えば、ベバシズマブ)、VEGF受容体の小分子キナーゼ阻害剤(例えば、スニチニブ、ソラフ
ェニブ、又はパゾパニブ))、DLL4アンタゴニスト(例えば、US 2009/0142354号に開示され
ている抗DLL4抗体、例えば、REGN421)、Ang2アンタゴニスト(例えば、US 2011/0027286号
に開示されている抗Ang2抗体、例えば、H1H685P)、FOLH1アンタゴニスト(例えば、抗FOLH
1抗体)、STEAP1又はSTEAP2アンタゴニスト(例えば、抗STEAP1抗体又は抗STEAP2抗体)、TM
PRSS2アンタゴニスト(例えば、抗TMPRSS2抗体)、MSLNアンタゴニスト(例えば、抗MSLN抗
体)、CA9アンタゴニスト(例えば、抗CA9抗体)、ウロプラキンアンタゴニスト(例えば、抗
ウロプラキン[例えば、抗UPK3A]抗体)、MUC16アンタゴニスト(例えば、抗MUC16抗体)、Tn
抗原アンタゴニスト(例えば、抗Tn抗体)、CLEC12Aアンタゴニスト(例えば、抗CLEC12A抗
体)、TNFRSF17アンタゴニスト(例えば、抗TNFRSF17抗体)、LGR5アンタゴニスト(例えば、
抗LGR5抗体)、一価CD20アンタゴニスト(例えば、一価抗CD20抗体、例えば、リツキシマブ
)などが挙げられるが、これらに限定されない。本開示の化合物と組み合わせて有益に投
与し得る他の薬剤としては、例えば、タモキシフェン、アロマターゼ阻害剤、並びにサイ
トカイン、例えば、IL-1、IL-2、IL-3、IL-4、IL-5、IL-6、IL-8、IL-9、IL-11、IL-12、
IL-13、IL-17、IL-18、又はそのそれぞれの受容体に結合する小分子サイトカイン阻害剤
及び抗体を含む、サイトカイン阻害剤が挙げられる。

好適な治療剤としては、アルキル化剤、例えば、チオテパ及びシクロホスファミド(Cyt
oxan(商標));アルキルスルホネート、例えば、ブスルファン、インプロスルファン、及び
ピポスルファン;アジリジン、例えば、ベンゾドーパ、カルボコン、メツレドーパ、及び
ウレドーパ;エチレンイミン並びにアルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエチレ
ンホスホラミド(trietylenephosphoramide)、トリエチレンチオホスホラミド、及びトリ
メチローロメラミン(trimethylolomelamine)を含むメチラメラミン(methylamelamine);窒
素マスタード、例えば、クロラムブシル、クロロナファジン、コロホスファミド(choloph
osphamide）、エストラムスチン、イホスファミド、メクロレタミン、塩酸メクロレタミ
ンオキシド、メルファラン、ノブエンビキン、フェネステリン、プレドニムスチン、トロ
ホスファミド、ウラシルマスタード;ニトロソ尿素、例えば、カルムスチン、クロロゾト
シン、ホテムスチン、ロムスチン、ニムスチン、ラニムスチン;抗生物質、例えば、アク
ラシノマイシン、アクチノマイシン、オースラマイシン、アザセリン、ブレオマイシン、
カクチノマイシン、カリケアマイシン、カラビシン、カルミノマイシン、カルジノフィリ
ン、クロモマイシン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デトルビシン、6-ジアゾ-5-
オキソ-L-ノルロイシン、ドキソルビシン、エピルビシン、エソルビシン、イダルビシン
、マルセロマイシン、マイトマイシン、ミコフェノール酸、ノガラマイシン、オリボマイ
シン、ペプロマイシン、ポトフィロマイシン(potfiromycin)、ピューロマイシン、ケラマ
イシン、ロドルビシン、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、ツベルシジン、ウベニ
メクス、ジノスタチン、ゾルビシン;代謝拮抗薬、例えば、メトトレキセート及び5-フル
オロウラシル(5-FU);葉酸類似体、例えば、デノプテリン、メトトレキセート、プテロプ
テリン、トリメトレキセート;プリン類似体、例えば、フルダラビン、6-メルカプトプリ
ン、チアミプリン、チオグアニン;ピリミジン類似体、例えば、アンシタビン、アザシチ
ジン、6-アザウリジン、カルモフール、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリ
ジン、エノシタビン、フロクスウリジン;アンドロゲン、例えば、カルステロン、プロピ
オン酸ドロモスタノロン、エピチオスタノール、メピチオスタン、テストラクトン;抗副
腎薬(抗副腎薬)、例えば、アミノグルテチミド、ミトタン、トリロスタン;葉酸補給剤、
例えば、フォリン酸(frolinic acid);アセグラトン;アルドホスファミドグリコシド;アミ
ノレブリン酸;アムサクリン;ベストラブシル;ビサントレン;エダトラキセート;デホファ
ミン;デメコルシン;ジアジコン;エルフォルニチン(elfornithine);酢酸エリプチニウム;
エトグルシド;硝酸ガリウム;ヒドロキシウレア;レンチナン;ロニダミン;ミトグアゾン;ミ
トキサントロン;モピダモール;ニトラクリン;ペントスタチン;フェナメット;ピラルビシ
ン;ポドフィリン酸;2-エチルヒドラジド;プロカルバジン;PSK(商標);ラゾキサン;シゾフ
ィラン;スピロゲルマニウム;テヌアゾン酸;トリアジコン;2,2',2''-トリクロロトリエチ
ルアミン;ウレタン;ビンデシン;ダカルバジン;マンノムスチン;ミトブロニトール;ミトラ
クトール;ピポブロマン;ガシトシン;アラビノシド(「Ara-C」);シクロホスファミド;チオ
テパ;タキサン、例えば、パクリタキセル(Taxol(商標)、Bristol-Myers Squibb Oncology
, Princeton、N.J.)及びドセタキセル(Taxotere(商標);Aventis Antony, France);クロラ
ムブシル;ゲムシタビン;6-チオグアニン;メルカプトプリン;メトトレキセート;白金類似
体、例えば、シスプラチン及びカルボプラチン;ビンブラスチン;白金;エトポシド(VP-16)
;イホスファミド;マイトマイシンC;ミトキサントロン;ビンクリスチン;ビノレルビン;ナ
ベルビン;ノバントロン;テニポシド;ダウノマイシン;アミノプテリン;ゼローダ;イバンド
ロネート;CPT-11;トポイソメラーゼ阻害剤RFS 2000;ジフルオロメチルオルニチン(DMFO);
レチノイン酸;エスペラマイシン;カペシタビンを含む化学療法剤;並びに上記のいずれか
の医薬として許容し得る塩、酸、又は誘導体も挙げられるが、これらに限定されない。ま
た本定義に含まれるのは、腫瘍に対するホルモン作用を調節又は阻害するように働く抗ホ
ルモン剤、例えば、タモキシフェン、ラロキシフェン、アロマターゼ阻害性4(5)-イミダ
ゾール、4-ヒドロキシタモキシフェン、トリオキシフェン、ケトキシフェン、LY 117018
、オナプリストン、及びトレミフェン(Fareston)などを含む抗エストロゲン薬;並びにフ
ルタミド、ニルタミド、ビカルタミド、ロイプロリド、及びゴセレリンなどの抗アンドロ
ゲン薬;並びに上記のいずれかの医薬として許容し得る塩、酸、又は誘導体である。

本明細書に記載される化合物を、抗ウイルス薬、抗生物質、鎮痛薬、コルチコステロイ
ド、ステロイド、酸素、抗酸化剤、COX阻害剤、心臓保護薬、金属キレート剤、IFN-γ、
及び/又はNSAIDsと組み合わせて投与及び/又は共製剤化することもできる。

本明細書に記載される方法のいくつかの実施態様において、複数用量の本明細書に記載
される化合物(又は本明細書に記載される化合物と本明細書で言及される追加の治療剤の
いずれかの組合せを含む医薬組成物)を規定のタイムコースで対象に投与することができ
る。本開示のこの態様による方法は、複数用量の本明細書に記載される化合物を対象に連
続的に投与することを含む。本明細書で使用される場合、「連続的に投与すること」は、
各々の用量の該化合物を、異なる時点で、例えば、所定の間隔(例えば、時間、日、週、
又は月)だけ隔てられた異なる日に対象に投与することを意味する。本開示は、単一の初
回用量の本明細書に記載される化合物、その後、1以上の二次用量の該化合物、任意にそ
の後、1以上の三次用量の該化合物を患者に連続的に投与することを含む方法を含む。

「初回用量」、「二次用量」、及び「三次用量」という用語は、本明細書に記載される
化合物の投与の時系列を指す。したがって、「初回用量」は、治療レジメンの開始時に投
与される用量(「ベースライン用量」とも称される)であり;「二次用量」は、初回用量の
後に投与される用量であり;「三次用量」は、二次用量の後に投与される用量である。初
回、二次、及び三次用量は全て、同じ量の本明細書に記載される化合物を含むことができ
るが、通常、投与の頻度に関して互いに異なることができる。ある実施態様において、初
回、二次、及び/又は三次用量に含まれる化合物の量は、治療経過中、互いに異なる(例え
ば、適宜上方又は下方調節される)。ある実施態様において、2以上の(例えば、2、3、4、
又は5)用量を治療レジメンの開始時に「ローディング用量」として投与した後、より少な
い頻度で投与される後続用量(例えば、「維持用量」)が続く。

本開示のある例示的な実施態様において、各々の二次及び/又は三次用量を、直前の用
量から1〜26週間後(例えば、1、1 1/2、2、2 1/2、3、3 1/2、4、4 1/2、5、5 1/2、6、6
1/2、7、7 1/2、8、8 1/2、9、9 1/2、10、10 1/2、11、11 1/2、12、12 1/2、13、13 1
/2、14、14 1/2、15、15 1/2、16、16 1/2、17、17 1/2、18、18 1/2、19、19 1/2、20、
20 1/2、21、21 1/2、22、22 1/2、23、23 1/2、24、24 1/2、25、25 1/2、26、26 1/2週
間後、又はそれより後)に投与する。本明細書で使用される「直前の用量」という語句は
、一連の複数の投与において、順序に関してまさにその次の用量の投与の前に介入用量な
しで患者に投与される化合物の用量を意味する。

本開示のこの態様による方法は、任意の数の二次及び/又は三次用量の該化合物を患者
に投与することを含むことができる。例えば、ある実施態様において、単一の二次用量し
か患者に投与されない。他の実施態様において、2以上(例えば、2、3、4、5、6、7、8、
又はそれより多く)の二次用量が患者に投与される。同様に、ある実施態様において、単
一の三次用量しか患者に投与されない。他の実施態様において、2以上(例えば、2、3、4
、5、6、7、8、又はそれより多く)の三次用量が患者に投与される。投与レジメンは、特
定の対象の生涯にわたって無制限に、又はそのような治療がもはや治療上必要でも有利で
もなくなるまで実施することができる。

複数の二次用量を含む実施態様において、各々の二次用量は、他の二次用量と同じ頻度
で投与することができる。例えば、各々の二次用量は、直前の用量から1〜2週間又は1〜2
カ月後に患者に投与することができる。同様に、複数の三次用量を含む実施態様において
、各々の三次用量は、他の三次用量と同じ頻度で投与することができる。例えば、各々の
三次用量は、直前の用量から2〜12週間後に患者に投与することができる。本開示のある
実施態様において、二次及び/又は三次用量が患者に投与される頻度は、治療レジメンの
間に変わることができる。投与の頻度は、臨床検査後の個々の患者の必要に応じて、治療
経過中、医師により調整されることもできる。

本開示は、2〜6ローディング用量が第一の頻度(例えば、1週間に1回、2週間に1回、3週
間に1回、1カ月に1回、2カ月に1回など)で患者に投与され、その後、2以上の維持用量が
より少ない頻度で患者に投与される投与レジメンを含む。例えば、本開示のこの態様によ
れば、ローディング用量が1カ月に1回の頻度で投与される場合、維持用量は、6週間に1回
、2カ月に1回、3カ月に1回などで患者に投与されることができる。

本開示は、本明細書に記載される化合物及び/又はコンジュゲート、例えば、式(I)及び
(II)の化合物の医薬組成物、例えば、本明細書に記載される化合物、その塩、立体異性体
、多形体、並びに医薬として許容し得る担体、希釈剤、及び/又は賦形剤を含む組成物を
含む。好適な担体、希釈剤、及び賦形剤の例としては:適切な組成物pHの維持のための緩
衝剤(例えば、クエン酸塩緩衝剤、コハク酸塩緩衝剤、酢酸塩緩衝剤、リン酸塩緩衝剤、
乳酸塩緩衝剤、シュウ酸塩緩衝剤など)、キャリアタンパク質(例えば、ヒト血清アルブミ
ン)、食塩水、ポリオール(例えば、トレハロース、スクロース、キシリトール、ソルビト
ールなど)、界面活性剤(例えば、ポリソルベート20、ポリソルベート80、ポリオキソレー
トなど)、抗菌薬、及び抗酸化剤が挙げられるが、これらに限定されない。

(F.実施例)
プロトンNMRスペクトルは、Varian Inova 300又は500 MHz機器で獲得し、一方、質量ス
ペクトルは、エレクトロスプレーイオン化源及び単一四重極分析計又はイオントラップ分
析計のいずれかを備えたAgilent 1100又は1200シリーズLC/MSDで収集した。酵素アッセイ
における特定のリンカーペイロードは、Waters Xevo TQ-S質量分析計によって分析した。
出発材料及び溶媒は全て、別途注記されない限り、市販で購入し、精製しないで使用した
。

(実施例1)
化合物10を、下記のように及び図1に示されているように、化合物1から合成した。

(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-4-アミノベンズアミド-Cit-Val-Cap-Mal(10))
(工程A:)丸底フラスコに、Boc-L-バリン(1.03g、4.74mmol)、N-ヒドロキシスクシンイミ
ド(1.22g、10.6mmol)、及びEDC(1.60g、8.35mmol)を量り入れた。試薬を無水DCM(30mL)に
溶解させ、フラスコをラバーセプタムで密閉し、アルゴンでパージし、反応液を周囲温度
で撹拌した。3日後、(ニンヒドリンで染色した後の)TLCにより、Boc-バリンが残存してい
なかったので、反応液を水及び飽和水性NaHCO₃で洗浄し、水層をDCMで抽出し、合わせた
有機層をブラインで洗浄し、Na₂SO₄上で乾燥させ、濾過した。その後、濾液を蒸発させ、
真空中で乾燥させると、Boc-L-バリン-スクシネートが白色の固体(1.52g、100％)として
得られた。

(Boc-L-バリン-L-シトルリン(3):)
前工程のBoc-L-バリン-スクシネート(1)(1.50g、4.77mmol)をアセトニトリル(MeCN、15
mL)に溶解させ、L-シトルリン(2、1.07g、6.11mmol)の水(9mL)溶液及び飽和水性NaHCO₃(6
mL)で処理し、フラスコを通気式セプタムで密閉し、反応液を周囲温度で撹拌した。反応
が18時間後に終了していなかったため、さらなる飽和水性NaHCO₃(3mL)を添加して、pHを
約7に至らせ、反応液をもう36時間撹拌した。該反応液を真空中で一部濃縮して、MeCNを
除去し、酢酸エチル(EtOAc)で1回洗浄して、非極性不純物を除去した。その後、水層を10
％v/vのHClでpH 3に酸性化し、NaClで飽和させ、9:1のEtOAc/イソプロパノールで4回抽出
した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、Na₂SO₄上で乾燥させ、濾過した。その後
、濾液を蒸発させ、真空中で乾燥させると、表題化合物が白色の固体(1.56g、87％)とし
て得られた。MS(ESI、ポジティブ): C₁₆H₃₀N₄O₆の計算値、374.2;実測値、375.2(M+H)、3
97.2(M+Na)。

(Boc-L-バリン-L-シトルリン-p-アミノ安息香酸 t-ブチルエステル(5):)
(工程B:)前工程の生成物(3、152mg、0.406mmol)、tert-ブチル-4-アミノベンゾエート(4
、150mg、0.776mmol)、及び1-[ビス(ジメチルアミノ)メチレン]-1H-1,2,3-トリアゾロ[4,
5-b]ピリジニウム 3-オキシドヘキサフルオロホスフェート(HATU、488mg、1.28mmol)を丸
底フラスコに量り入れ、無水N,N-ジメチルホルムアミド(DMF、3mL)に溶解させた。N,N-ジ
イソプロピルエチルアミン(DIEA、0.25mL、1.44mmol)を反応液に添加し、フラスコをラバ
ーセプタムで密閉し、アルゴンでパージし、反応液を周囲温度で撹拌した。18時間後、該
反応液をISCOシステムにより100g C18 RediSep Goldカラムで直接精製した(勾配溶出:水
中20〜80％MeCN、両方に0.05％酢酸、20分間)。生成物を含む画分を合わせ、真空中で一
部濃縮し、ドライアイス上で凍結させ、一晩凍結乾燥させると、不純な白色の固体(115mg
)が得られた。これをDCMに溶解させ、ISCOにより12gシリカゲルRediSepカラムで再精製し
(勾配溶出: DCM中0〜10％メタノール、12分間)、よりゆっくりと泳動する生成物画分を蒸
発させ、真空中で乾燥させると、表題化合物が淡黄色の固体(65mg、29％)として得られた
。MS(ESI、ポジティブ): C₂₇H₄₃N₅O₇の計算値、549.3;実測値、450.3(M-Boc+H)、572.3(M
+Na)、1099.5(2M+H)、1121.5(2M+Na)。

(L-バリン-L-シトルリン-p-アミノ安息香酸(6):)
(工程C:)表題化合物をMehtaらの方法を用いて調製した(Tet. Lett. 1992, 33, 5441-5444
)。前工程の生成物(5、61mg、0.111mmol)を丸底フラスコ中の無水DCM(3mL)に溶解させ、
トリフルオロ酢酸(TFA、110uL、1.44mmol)及びトリエチルシラン[TES(Et₃SiH)、50uL、0.
313mmol]で処理した。フラスコをセプタムで密閉し、アルゴンでパージし、周囲温度で18
時間撹拌した。反応がLCMSにより終了していなかったため、さらなるTFA(90uL)及びTES(2
5uL)を添加し、反応液をもう6時間撹拌した。反応がまだ終了していなかったため、これ
に蓋をし、-20℃で3日間保存した。周囲温度に温め、もう24時間撹拌した後、これを真空
中で濃縮して油状物にし、ジエチルエーテルで2回研和し、高真空下で乾燥させると、表
題化合物がオフホワイト色の固体(55mg、98％)として得られた。MS(ESI、ポジティブ): C
₁₈H₂₇N₅O₅の計算値、393.2;実測値、394.0(M+H)、787.2(2M+H)。¹H-NMR(500MHz、DMSO-d₆
)は、アミド回転異性体の混合物を示した：

(6-(マレイミジル-カプロリル)-L-バリン-L-シトルリン-p-アミノ安息香酸(8):)
(工程D:)前工程の生成物(6、55mg、0.108mmol)を水(3mL)に溶解させ、飽和水性NaHCO₃で
処理し、その後、6-マレイミジル-カプロン酸スクシネートエステル(56mg、0.182mmol)の
MeCN(3mL)溶液で処理した。フラスコにアルゴン下で蓋をし、反応液を周囲温度で22時間
撹拌した。反応がLCMSにより終了していたため、これを真空中で一部濃縮し、ISCOにより
30g C18 Aq RediSep Goldカラムで直接精製した(勾配溶出:水中20〜80％MeCN、両方に0.0
5％酢酸、12分間)。主要な生成物画分を合わせ、真空中で一部濃縮し、ドライアイス上で
凍結させ、一晩凍結乾燥させると、不純な淡黄色の固体(92mg)が得られた。これは、LCMS
により不純であることが分かったため、これをMeCN/水に溶解させ、100g C18 Aq Goldカ
ラムで再精製した(勾配溶出:水中0〜50％MeCN、両方に0.05％酢酸、20分間)。最もきれい
な生成物画分を合わせ、真空中で一部濃縮し、ドライアイス上で凍結させ、凍結乾燥させ
ると、表題化合物が白色の固体(34mg、53％)として得られた。MS(ESI、ポジティブ): C₂₈
H₃₈N₆O₈の計算値、586.3;実測値、587.3(M+H)、609.3(M+Na)。¹H-NMR(500MHz、DMSO-d₆)
は、アミド回転異性体の混合物を示した：

(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-4-アミノベンズアミド-シトルリン-バリン-カプロ
リル-6-マレイミジル(10):)
(工程E:)前工程の生成物(8、33mg、0.056mmol)、HATU(33mg、0.087mmol)、及びメイタン
シン-N-メチル-L-アラニン(9、米国特許出願第2007/0037972 A1号に記載されている方法
を用いてメイタンシノールから金色の固体として調製されたもの、25mg、0.038mmol)を丸
底フラスコに量り入れ、無水DMF(2mL)に溶解させ、DIEA(20uL、0.115mmol)で処理した。
フラスコをラバーセプタムで密閉し、アルゴンでパージし、反応液を周囲温度で20時間撹
拌した。該反応液を水(1mL)で希釈し、ISCOにより50g C18 Aq RediSep Goldカラムで直接
精製した(勾配溶出:水中20〜80％MeCN、両方に0.05％酢酸、12分間)。生成物画分を合わ
せ、真空中で一部濃縮し、ドライアイス上で凍結させ、一晩凍結乾燥させると、表題化合
物が白色の固体(8mg、17％)として得られた。MS(ESI、ポジティブ): C₆₀H₈₀N₉O₁₆Clの計
算値、1217.5;実測値、1218.6(M+H)、1200.7(M-H₂O+H)、1240.7(M+Na)。

(実施例2)
化合物15を下記のように及び図6に示されているように合成した。

(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(4-アミノ-2-フルオロ)ベンズアミド-Cit-Val-Cap-
Mal(15))
(Boc-L-バリン-L-シトルリン-(4-アミノ-2-フルオロ)安息香酸 t-ブチルエステル(12):)
(工程A:) Wipf及びHeimgartnerの文献(Helv. Chim. Acta, 1998, 71, 140-154)の手順に
従って、Boc-L-バリン-L-シトルリン(3、155mg、0.414mmol)及びジシクロヘキシルカルボ
ジイミド(DCC、95mg、0.460mmol)を無水ジクロロメタン(DCM、3mL)に溶解させ、0℃に冷
却し、5分間撹拌した。その後、(+)-カンファー-10-スルホン酸(CSA、15mg、0.065mmol)
及びtert-ブチル-4-アミノ-2-フルオロベンゾエート(99mg、0.469mmol)を無水物に添加し
、反応液を、3日間撹拌しながら、周囲温度までゆっくりと温めておいた。LCMS分析によ
り、m/z 566(ESI、ネガティブ)の大きな新しいピークが示された。反応液をDCMで希釈し
、10％v/vのHCl、水、及び飽和NaHCO₃で洗浄した。水層をDCMで各々1回抽出し、合わせた
有機層をブラインで洗浄し、Na₂SO₄上で乾燥させ、濾過した。その後、濾液を蒸発させ、
真空中で乾燥させると、淡い金色の固体が得られ、これをISCOにより24g RediSep Goldカ
ラムで精製した(勾配溶出:酢酸エチル-5:5:1 EtOAc/DCM/メタノール、12分間)。最もきれ
いな生成物画分を合わせ、真空中で濃縮し、高真空下で乾燥させると、表題化合物が白色
の固体(95mg、40％)として得られた。MS(ESI、ポジティブ): C₂₇H₄₂N₅O₇Fの計算値、567.
3;実測値、568.3(M+H)、590.4(M+Na)。

(L-バリン-L-シトルリン-(4-アミノ-2-フルオロ)安息香酸トリフルオロ酢酸塩(13):)
(工程B:)表題化合物を、実施例1の工程Cを用いて、前工程の生成物(12、94mg、0.166)か
ら調製すると、オフホワイト色の固体(112mg)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C₁₈H₂₆
N₅O₅Fの計算値、411.2;実測値、412.2(M+H)、395.2(M-H₂O+H)。

(6-(マレイミド)-カプロアミジル-L-バリン-L-シトルリン-(4-アミノ-2-フルオロ)安息香
酸(14):)
(工程C:)表題化合物を、実施例1の工程Dを用いて、前工程の生成物(13、106mg、0.166mmo
l)から調製すると、白色の固体(92mg)が得られた。これは、LCMSにより70％しか純粋でな
かったが、それ以上精製することなく使用された。MS(ESI、ポジティブ): C₂₈H₃₇N₆O₈Fの
計算値、604.3;実測値、605.2(M+H)、627.2(M+Na)。

(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(4-アミノ-2-フルオロ)ベンズアミド-Cit-Val-Cap-
Mal(15):)
(工程D:)表題化合物を、実施例1の工程Eを用いて、前工程の生成物(14、50mg、0.077mmol
)及びメイタンシン-N-メチル-L-アラニン(9、50mg、0.077mmol)から調製すると、白色の
固体(18mg)が得られ、これは、LCMSにより55％しか純粋でなかった。Phenomenex Gemini
C18 5u、30×150mmカラム(20〜80％、その後、40〜60％の水中MeCN、どちらの相も0.1％H
OAc、20分間、30mL/分)を用いるHPLCにより2回精製すると、表題化合物が白色の固体(3mg
、3％)として得られた。MS(ESI、ポジティブ): C₆₀H₇₉N₉O₁₆ClFの計算値、1235.5;実測値
、1236.5(M+H)、1258.5(M+Na)。

(実施例3)
化合物20を下記のように及び図7に示されているように合成した。

(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(4-アミノ-2-トリフルオロメチル)ベンズアミド-Ci
t-Val-Cap-Mal(20))
(Boc-L-バリン-L-シトルリン-(4-アミノ-2-トリフルオロメチル)安息香酸 t-ブチルエス
テル(17):)
(工程A:)表題化合物を、Wipf及びHeimgartnerの文献(Helv. Chim. Acta, 1998, 71, 140-
154)の方法を用いて、Boc-L-バリン-L-シトルリン(3、175mg、0.467mmol)及びtert-ブチ
ル-4-アミノ-2-トリフルオロメチルベンゾエート(150mg、0.574mmol)から調製すると、白
色の固体(77mg、27％)が得られた。MS(ESI、ネガティブ): C₂₈H₄₂N₅O₇F₃の計算値、617.3
;実測値、616.4(M-H)。

(L-バリン-L-シトルリン-(4-アミノ-2-トリフルオロメチル)安息香酸トリフルオロ酢酸塩
(18):)
(工程B:)表題化合物を、実施例1の工程Cを用いて、前工程の生成物(17、67mg、0.108)か
ら調製すると、オフホワイト色の固体(77mg)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C₁₉H₂₆N
₅O₅F₃の計算値、461.2;実測値、462.3(M+H)、445.2(M-H₂O+H)。

(6-(マレイミド)-カプロアミジル-L-バリン-L-シトルリン-(4-アミノ-2-トリフルオロメ
チル)安息香酸(19):)
(工程C:)表題化合物を、実施例1の工程Dを用いて、前工程の生成物(18、75mg、0.108mmol
)から調製すると、白色の固体(47mg、66％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C₂₉H₃₇N₆
O₈F₃の計算値、654.3;実測値、655.3(M+H)。

(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(4-アミノ-2-トリフルオロメチル)ベンズアミド-Ci
t-Val-Cap-Mal(20):)
(工程D:)表題化合物を、実施例1の工程Eを用いて、前工程の生成物(19、34mg、0.052mmol
)及びメイタンシン-N-メチル-L-アラニン(9、34mg、0.052mmol)から調製すると、2回目の
ISCO精製(100g C18 Aq Goldカラム、水中30〜70％MeCN、どちらも0.05％HOAc、15分間、5
0mL/分)の後、白色の固体(11mg、16％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C₆₁H₇₉N₉O₁₆C
lF₃の計算値、1285.5;実測値、1287.4(M+H)、1268.4(M-H₂O+H)、1308.4(M+Na)。

(実施例4)
化合物25を下記のように及び図8に示されているように合成した。

(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(4-アミノ-2-メトキシ)ベンズアミド-Cit-Val-Cap-
Mal(25))
(Boc-L-バリン-L-シトルリン-(4-アミノ-2-メトキシ)安息香酸 t-ブチルエステル(22):)
(工程A:)表題化合物を、Wipf及びHeimgartnerの文献(Helv. Chim. Acta, 1998, 71, 140-
154)の方法を用いて、Boc-L-バリン-L-シトルリン(3、143mg、0.382mmol)及びtert-ブチ
ル-4-アミノ-2-メトキシベンゾエート(109mg、0.488mmol)から調製すると、白色の固体(9
2mg、42％)が得られた。MS(ESI、ネガティブ): C₂₈H₄₅N₅O₈の計算値、579.3;実測値、580
.3(M-H)、602.3(M+Na)。

(L-バリン-L-シトルリン-(4-アミノ-2-メトキシ)安息香酸トリフルオロ酢酸塩(23):)
(工程B:)表題化合物を、実施例1の工程Cを用いて、前工程の生成物(22、90mg、0.155)か
ら調製すると、淡い色の固体(99mg)が得られ、これをDCMで2回粉砕し、MeCN及びTHFに溶
解させ、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させると、表題化合物がオフホワイト色の固体(79m
g、95％)として得られた。MS(ESI、ポジティブ): C₁₉H₂₉N₅O₆の計算値、423.2;実測値、4
24.2(M+H)、407.2(M-H₂O+H)、446.2(M+Na)。

(6-(マレイミド)-カプロアミジル-L-バリン-L-シトルリン-(4-アミノ-2-メトキシ)安息香
酸(24):)
(工程C:)表題化合物を、実施例1の工程Dを用いて、前工程の生成物(23、76mg、0.141mmol
)から調製すると、白色の固体(50mg、57％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C₂₉H₄₀N₆
O₉の計算値、616.3;実測値、617.2(M+H)。

(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(4-アミノ-2-メトキシ)ベンズアミド-Cit-Val-Cap-
Mal(25):)
(工程D:)表題化合物を、実施例1の工程Eを用いて、前工程の生成物(24、49mg、0.079mmol
)及びメイタンシン-N-メチル-L-アラニン(9、34mg、0.052mmol)から調製すると、白色の
固体(34mg、34％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C₆₁H₈₂N₉O₁₇Clの計算値、1247.6;
実測値、1248.5(M+H)、1230.5(M-H₂O+H)、1270.5(M+Na)。

(実施例5)
化合物27を、下記のように及び図9に示されているように、化合物26から合成した。

(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-4-アミノベンズアミド(27))
(工程A:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(4-ニトロ)ベンズアミド:)
乾燥した丸底フラスコに、メイタンシン-N-メチル-L-アラニン(9、96mg、0.15mmol)、4
-ニトロ安息香酸(26)(42mg、0.25mmol)、及びHATU(0.12g、0.31mmol)を量り入れた。試薬
を無水DMF(3.0mL)に溶解させ、DIEA(0.10mL、0.57mmol)で処理し、フラスコをアルゴンで
パージし、ラバーセプタムで密閉した。反応液を周囲温度で3日間撹拌し、その後、LCMS
により、メイタン-NMAの完全な変換が示されたため、これを数mLの水で希釈し、100g C18
Aq Goldカラムで直接精製した(勾配溶出:水中20〜80％MeCN、両方に0.05％酢酸、15分間
)。最もきれいな生成物画分を合わせ、真空中で一部濃縮し、ドライアイス上で凍結させ
、一晩凍結乾燥させると、表題化合物が黄色の固体(64mg、54％)として得られた。MS(ESI
、ポジティブ): C₃₉H₄₇N₄O₁₂Clの計算値、798.3;実測値、798.4(M+H)。

(工程B:メイタン-NMA-(4-アミノ)ベンズアミド(27):)
前工程の生成物(63mg、0.079mmol)及び亜鉛末(＜10um、98+％純粋、108mg、1.65mmol)
をTHF(4mL)と水(1mL)の混合物に溶解/懸濁させた。酢酸(0.180mL、3.14mmol)を該混合物
に添加し、フラスコをラバーセプタムで密閉し、反応液を周囲温度で1時間撹拌した。粗
混合物のLCMSにより完全な変換が示されたため、反応液をCelite上で濾過し、MeCNで洗い
流し、濾液を真空中で濃縮した。粗生成物を50g C18 Aq Goldカラムで直接精製した(勾配
溶出:水中20〜80％MeCN、両方に0.05％酢酸、12分間)。最もきれいな生成物画分を合わせ
、真空中で一部濃縮し、ドライアイス上で凍結させ、一晩凍結乾燥させると、46mgの白色
の固体が得られ、これは、LCMSにより88％純粋でしかなかった。これを1:1のMeCN/水(3mL
)に溶解させ、2回注入でPhenomenex Gemini C18 5u、30×150mmカラムを用いるHPLCによ
り再精製し(水中40〜80％及び30〜70％MeCN、どちらの相も0.05％HOAc、20分間、30mL/分
)、最もきれいな画分を濃縮し、凍結させ、上記のように凍結乾燥させると、表題化合物
が白色の固体(31mg、48％)として得られた。MS(ESI、ポジティブ): C₄₁H₅₃N₄O₁₂Clの計算
値、768.3;実測値、751.2(M-H₂O+H)、769.2(M+H)。

(実施例6)
化合物29を、下記のように及び図10に示されているように、化合物28から合成した。

(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(2-フルオロ-4-アミノ)ベンズアミド(29))
(工程A:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(2-フルオロ-4-ニトロ)ベンズアミド:)
表題化合物を、実施例5の工程Aを用いて、メイタンシン-N-メチル-L-アラニン(9、40mg
、0.056mmol)及び2-フルオロ-4-ニトロ安息香酸(28)(26mg、0.140mmol)から調製すると、
薄黄色の固体(16mg、35％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C₃₉H₄₆N₄O₁₂ClFの計算値
、816.3;実測値、817.2(M+H)、839.2(M+Na)。

(工程B:メイタン-NMA-(2-フルオロ-4-アミノ)ベンズアミド(29):)
表題化合物を、実施例5の工程Bを用いて、前工程の生成物(15mg、0.018mmol)から調製
すると、白色の固体(8mg、50％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C₃₉H₄₈N₄O₁₀ClFの計
算値、786.3;実測値、769.2(M-H₂O+H)、787.2(M+H)、809.3(M+Na)。

(実施例7)
化合物31を下記のように及び図11に示されているように合成した。

(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(2-トリフルオロメチル-4-アミノ)ベンズアミド(31
))
(工程A:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(2-トリフルオロメチル-4-ニトロ)ベンズア
ミド:)
表題化合物を、実施例5の工程Aを用いて、メイタンシン-N-メチル-L-アラニン(9、68mg
、0.105mmol)及び2-トリフルオロメチル-4-ニトロ安息香酸(30)(37mg、0.157mmol)から調
製すると、淡黄色の固体(82mg、90％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C₄₀H₄₆N₄O₁₂Cl
F₃の計算値、866.3;実測値、867.1(M+H)、889.1(M+Na)。

(工程B:メイタン-NMA-(2-トリフルオロメチル-4-アミノ)ベンズアミド(31):)
表題化合物を、実施例5の工程Bを用いて、前工程の生成物(79mg、0.091mmol)から調製
すると、白色の固体(29mg、35％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C₄₀H₄₈N₄O₁₀ClF₃の
計算値、836.3;実測値、818.8(M-H₂O+H)、836.8(M+H)、858.0(M+Na)。

(実施例8)
化合物33を下記のように及び図12に示されているように合成した。

(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(2-メトキシ-4-アミノ)ベンズアミド(33))
(工程A:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(2-メトキシ-4-ニトロ)ベンズアミド:)
表題化合物を、実施例5の工程Aを用いて、メイタンシン-N-メチル-L-アラニン(9、68mg
、0.105mmol)及び2-メトキシ-4-ニトロ安息香酸(32)(32mg、0.162mmol)から調製すると、
淡黄色の固体(78mg、90％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C₄₀H₄₉N₄O₁₃Clの計算値、
828.3;実測値、811.1(M-H₂O+H)、829.2(M+H)、851.2(M+Na)。

(工程B:メイタン-NMA-(2-メトキシ-4-アミノ)ベンズアミド(33):)
表題化合物を、実施例5の工程Bを用いて、前工程の生成物(75mg、0.090mmol)から調製
すると、白色の固体(62mg、79％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C₄₀H₅₁N₄O₁₁Clの計
算値、798.3;実測値、781.2(M-H₂O+H)、799.2(M+H)、821.2(M+Na)。

(実施例9)
化合物35を下記のように及び図13に示されているように合成した。

(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(3-トリフルオロメチル-4-アミノ)ベンズアミド(
35))
(工程A:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(3-トリフルオロメチル-4-ニトロ)ベンズア
ミド:)
表題化合物を、実施例5の工程Aの方法を用いて、メイタンシン-N-メチル-L-アラニン(9
、46mg、0.071mmol)及び3-トリフルオロメチル-4-ニトロ安息香酸(34)(25mg、0.106mmol)
から調製すると、薄黄色の固体(37mg、61％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C₄₀H₄₆N
₄O₁₂ClF₃の計算値、866.3;実測値、849.2(M-H₂O+H)、867.2(M+H)、889.2(M+Na)。

(工程B:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(3-トリフルオロメチル-4-アミノ)ベンズ
アミド(35):)
表題化合物を、実施例5の工程Bの方法を用いて、前工程の生成物(36mg、0.042mmol)か
ら調製すると、白色の固体(17mg、46％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C₄₀H₄₈N₄O₁₀
ClF₃の計算値、836.3;実測値、819.2(M-H₂O+H)、837.2(M+H)、859.2(M+Na)。

(実施例10)
化合物37を下記のように及び図14に示されているように合成した。

(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(2-クロロ-4-アミノ-5-フルオロ)ベンズアミド(3
7))
(工程A:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(2-クロロ-4-ニトロ-5-フルオロ)ベンズアミ
ド:)
表題化合物を、実施例5の工程Aの方法を用いて、メイタンシン-N-メチル-L-アラニン(9
、46mg、0.071mmol)及び3-トリフルオロメチル-4-ニトロ安息香酸(36、26mg、0.118mmol)
から調製すると、白色の固体(33mg、55％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C₃₉H₄₅N₄O
₁₂Cl₂Fの計算値、850.2;実測値、833.1(M-H₂O+H)、851.1(M+H)、873.1(M+Na)。

(工程B:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(2-クロロ-4-アミノ-5-フルオロ)ベンズア
ミド(37):)
表題化合物を、実施例5の工程Bの方法を用いて、前工程の生成物(36mg、0.042mmol)か
ら調製すると、白色の固体(17mg、46％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C₃₉H₄₇N₄O₁₀
Cl₂Fの計算値、820.3;実測値、803.2(M-H₂O+H)、821.2(M+H)、843.2(M+Na)。

(実施例11)
化合物39を下記のように及び図16に示されているように合成した。

(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(2,5-ジフルオロ-4-アミノ)ベンズアミド(39))
(工程A:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(2,5-ジフルオロ-4-ニトロ)ベンズアミド:)
表題化合物を、実施例5の工程Aの方法を用いて、メイタンシン-N-メチル-L-アラニン(9
、48mg、0.074mmol)及び2,5-ジフルオロ-4-ニトロ安息香酸(38、27mg、0.133mmol)から調
製すると、黄色の固体(37mg、60％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C₃₉H₄₅N₄O₁₂ClF₂
の計算値、834.3;実測値、817.2(M-H₂O+H)、835.2(M+H)、857.2(M+Na)。

(工程B:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(2,5-ジフルオロ-4-アミノ)ベンズアミド(39
):)
表題化合物を、実施例5の工程Bの方法を用いて、前工程の生成物(36mg、0.043mmol)か
ら調製すると、白色の固体(22mg、59％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C₃₉H₄₇N₄O₁₀
ClF₂の計算値、804.3;実測値、787.3(M-H₂O+H)、805.3(M+H)、827.3(M+Na)。

(実施例12)
化合物41を下記のように及び図17に示されているように合成した。

(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(3-フルオロ-4-アミノ)ベンズアミド(41))
(工程A:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(3-フルオロ-4-ニトロ)ベンズアミド:)
表題化合物を、実施例5の工程Aの方法を用いて、メイタンシン-N-メチル-L-アラニン(9
、47mg、0.072mmol)及び3-フルオロ-4-ニトロ安息香酸(40)(24mg、0.130mmol)から調製す
ると、黄色の固体(40mg、68％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C₃₉H₄₆N₄O₁₂ClFの計
算値、816.3;実測値、799.2(M-H₂O+H)、817.2(M+H)、839.2(M+Na)。

(工程B:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(3-フルオロ-4-アミノ)ベンズアミド(41):)
表題化合物を、実施例5の工程Bの方法を用いて、前工程の生成物(39mg、0.048mmol)か
ら調製すると、白色の固体(24mg、60％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C₃₉H₄₈N₄O₁₀
ClFの計算値、786.3;実測値、769.2(M-H₂O+H)、787.2(M+H)、809.2(M+Na)。

(実施例13)
化合物43を下記のように及び図18に示されているように合成した。

(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(3-クロロ-4-アミノ)ベンズアミド(43))
(工程A:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(3-クロロ-4-アミノ)ベンズアミド:)
表題化合物を、実施例5の工程Aの方法を用いて、メイタンシン-N-メチル-L-アラニン(9
、45mg、0.069mmol)及び3-クロロ-4-ニトロ安息香酸(42)(26mg、0.129mmol)から調製する
と、黄色の固体(36mg、62％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C₃₉H₄₆N₄O₁₂Cl₂の計算
値、832.2;実測値、815.2(M-H₂O+H)、833.2(M+H)、855.2(M+Na)。

(工程B:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(3-クロロ-4-アミノ)ベンズアミド(43):)
表題化合物を、実施例5の工程Bの方法を用いて、前工程の生成物(35mg、0.042mmol)か
ら調製すると、白色の固体(24mg、67％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C₃₉H₄₈N₄O₁₀
Cl₂の計算値、802.3;実測値、785.2(M-H₂O+H)、803.2(M+H)、825.1(M+Na)。

(実施例14)
化合物45を下記のように及び図19に示されているように合成した。

(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(5-アミノ-8-カルボキシキノリン)カルボキサミド(
45))
(工程A:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(5-ニトロ-8-カルボキシキノリン)カルボキ
サミド:)
表題化合物を、実施例5の工程Aの方法を用いて、メイタンシン-N-メチル-L-アラニン(9
、45mg、0.069mmol)及び5-ニトロ-8-カルボキシキノリン(44)(24mg、0.110mmol)から調製
すると、淡黄色の固体(26mg、44％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C₄₂H₄₈N₅O₁₂Clの
計算値、849.3;実測値、832.2(M-H₂O+H)、850.2(M+H)、872.2(M+Na)。

(工程B:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(5-アミノ-8-カルボキシキノリン)カルボキ
サミド(45):)
表題化合物を、実施例5の工程Bの方法を用いて、前工程の生成物(25mg、0.029mmol)か
ら調製すると、淡黄色の固体(8mg、31％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C₄₂H₅₀N₅O₁
₀Clの計算値、819.3;実測値、802.3(M-H₂O+H)、820.3(M+H)。

(実施例15)
化合物47を下記のように及び図20に示されているように合成した。

(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(3-ブロモ-4-アミノ)ベンズアミド(47))
(工程A:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(3-ブロモ-4-ニトロ)ベンズアミド:)
表題化合物を、実施例5の工程Aの方法を用いて、メイタンシン-N-メチル-L-アラニン(9
、49mg、0.075mmol)及び3-ブロモ-4-ニトロ安息香酸(46)(30mg、0.122mmol)から調製する
と、黄色の固体(38mg、58％)が得られた。最も多く存在する同位体について、MS(ESI、ポ
ジティブ): C₃₉H₄₆N₄O₁₂BrClの計算値、876.2/878.2;実測値、861.1(M-H₂O+H)、879.1(M+
H)、901.1(M+Na)。

(工程B:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(3-ブロモ-4-アミノ)ベンズアミド(47):)
表題化合物を、実施例5の工程Bの方法を用いて、前工程の生成物(37mg、0.042mmol)か
ら調製すると、白色の固体(28mg、74％)が得られた。最も多く存在する同位体について、
MS(ESI、ポジティブ): C₃₉H₄₈N₄O₁₀BrClの計算値、846.2/848.2;実測値、831.1(M-H₂O+H)
、849.1(M+H)、871.2(M+Na)。

(実施例16)
化合物49を下記のように及び図21に示されているように合成した。

(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(3-メトキシ-4-アミノ)ベンズアミド(49))
(工程A:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(3-メトキシ-4-ニトロ)ベンズアミド:)
表題化合物を、実施例5の工程Aの方法を用いて、メイタンシン-N-メチル-L-アラニン(9
、49mg、0.075mmol)及び3-メトキシ-4-ニトロ安息香酸(48)(23mg、0.117mmol)から調製す
ると、黄色の固体(34mg、55％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C₄₀H₄₉N₄O₁₃Clの計算
値、828.3;実測値、811.2(M-H₂O+H)、829.3(M+H)、851.3(M+Na)。

(工程B:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(3-メトキシ-4-アミノ)ベンズアミド(49):)
表題化合物を、実施例5の工程Bの方法を用いて、前工程の生成物(33mg、0.040mmol)か
ら調製すると、白色の固体(25mg、74％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C₄₀H₅₁N₄O₁₁
Clの計算値、798.3;実測値、781.2(M-H₂O+H)、799.2(M+H)。

(実施例17)
化合物51を下記のように及び図22に示されているように合成した。

(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(2-メチル-4-アミノ)ベンズアミド(51))
(工程A:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(2-メチル-4-ニトロ)ベンズアミド:)
表題化合物を、実施例5の工程Aの方法を用いて、メイタンシン-N-メチル-L-アラニン(9
、49mg、0.075mmol)及び2-メチル-4-ニトロ安息香酸(50)(24mg、0.132mmol)から調製する
と、淡黄色の固体(32mg、52％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C₄₀H₄₉N₄O₁₂Clの計算
値、812.3;実測値、795.3(M-H₂O+H)、813.3(M+H)、835.3(M+Na)。

(工程B:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(2-メチル-4-アミノ)ベンズアミド(51):)
表題化合物を、実施例5の工程Bの方法を用いて、前工程の生成物(30mg、0.037mmol)か
ら調製すると、白色の固体(17mg、55％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C₄₀H₅₁N₄O₁₀
Clの計算値、782.3;実測値、765.2(M-H₂O+H)、783.2(M+H)。

(実施例18)
化合物53を下記のように及び図23に示されているように合成した。

(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(3-メチル-4-アミノ)ベンズアミド(53))
(工程A:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(3-メチル-4-ニトロ)ベンズアミド:)
表題化合物を、実施例5の工程Aの方法を用いて、メイタンシン-N-メチル-L-アラニン(9
、49mg、0.075mmol)及び3-メチル-4-ニトロ安息香酸(52)(26mg、0.143mmol)から調製する
と、黄色の固体(34mg、56％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C₄₀H₄₉N₄O₁₂Clの計算値
、812.3;実測値、795.2(M-H₂O+H)、813.2(M+H)。

(工程B:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(3-メチル-4-アミノ)ベンズアミド(53):)
表題化合物を、実施例5の工程Bの方法を用いて、前工程の生成物(33mg、0.041mmol)か
ら調製すると、白色の固体(24mg、71％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C₄₀H₅₁N₄O₁₀
Clの計算値、782.3;実測値、765.2(M-H₂O+H)、783.2(M+H)。

(実施例19)
化合物55を下記のように及び図24に示されているように合成した。

(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(8-アミノ-5-カルボキシキノリン)カルボキサミド(
55))
(工程A:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(8-ニトロ-5-カルボキシキノリン)カルボキ
サミド:)
表題化合物を、実施例5の工程Aの方法を用いて、メイタンシン-N-メチル-L-アラニン(9
、47mg、0.072mmol)及び8-ニトロ-5-カルボキシキノリン(54)(35mg、0.160mmol)から調製
すると、淡黄色の固体(30mg、49％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C₄₂H₄₈N₅O₁₂Clの
計算値、849.3;実測値、832.6(M-H₂O+H)、850.7(M+H)。

(工程B:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(8-アミノ-5-カルボキシキノリン)カルボキ
サミド(55):)
表題化合物を、実施例5の工程Bの方法を用いて、前工程の生成物(29mg、0.034mmol)か
ら調製すると、淡黄色の固体(18mg、60％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C₄₂H₅₀N₅O
₁₀Clの計算値、819.3;実測値、802.0(M-H₂O+H)、820.0(M+H)。

(実施例20)
化合物60を下記のように及び図25に示されているように合成した。

(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(3-メトキシ-4-アミノ)ベンズアミド-Cit-Val-Cap-
Mal(60))
(工程A:Boc-L-バリン-L-シトルリン-(3-メトキシ-4-アミノ)安息香酸 t-ブチルエステル(
57):)
表題化合物を、実施例2の工程Aの方法を用いて、Boc-L-バリン-L-シトルリン(3、100mg
、0.267mmol)及び4-アミノ-3-メトキシ安息香酸 tert-ブチルエステル(56、61mg、0.273m
mol)から調製すると、白色の固体(74mg、48％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C₂₈H₄
₅N₅O₈の計算値、579.3;実測値、580.4(M+H)、602.6(M+Na)。

(工程B:L-バリン-L-シトルリン-(3-メトキシ-4-アミノ)安息香酸(58):)
表題化合物を、実施例1の工程Cの方法を用いて、前工程の生成物(57、72mg、0.124mmol
)から調製すると、オフホワイト色の固体(68mg、100％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ
): C₁₉H₂₉N₅O₆の計算値、423.2;実測値、424.4(M+H)、847.4(2M+H)。

(工程C: 6-(マレイミジル-カプロリル)-L-バリン-L-シトルリン-(3-メトキシ-4-アミノ)
安息香酸(59):)
表題化合物を、実施例1の工程Dの方法を用いて、前工程の生成物(58、67mg、0.124mmol
)から調製すると、白色の固体(45mg、59％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C₂₉H₄₀N₆
O₉の計算値、616.3;実測値、617.5(M+H)、639.6(M+Na)。

(工程D:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(3-メトキシ-4-アミノ)ベンズアミド-Cit-Va
l-Cap-Mal(60):)
表題化合物を、実施例1の工程Eの方法を用いて、前工程の生成物(59、44mg、0.071mmol
)及びメイタンシン-N-メチル-L-アラニン(9、49mg、0.075mmol)から調製すると、白色の
固体(14mg、16％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C₆₁H₈₂N₉O₁₇Clの計算値、1247.6;
実測値、1231.1(M-H₂O+H)、1249.1(M+H)、1271.1(M+Na)。

(実施例21)
化合物63を下記のように及び図26に示されているように合成した。

(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(2-フルオロ-4-アミノ)ベンズアミド-Cit-Val-Cap-
6-アミン(63))
(工程A: Boc-6-アミノヘキサン酸スクシネートエステル:)
表題化合物を、実施例1の工程Aの方法を用いて、Boc-6-アミノヘキサン酸(64、502mg、
2.17mmol)から調製すると、白色の固体(712mg、99％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ):
C₁₅H₂₄N₂O₆の計算値、328.2;実測値、351.2(M+Na)。

(工程B: Boc-(6-アミノ-カプロリル)-L-バリン-L-シトルリン(62):)
表題化合物を、実施例1の工程Dの方法を用いて、前工程の生成物(710mg、2.16mmol)及
びL-バリン-L-シトルリンTFA塩(970mg、2.51mmol)から調製すると、淡い金色の固体(720m
g、69％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C₂₂H₄₁N₅O₇の計算値、487.3;実測値、488.3
(M+H)、(M+H)。

(工程C:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(2-フルオロ-4-アミノ)ベンズアミド-Cit-Va
l-Cap-6-Boc-アミン:)
表題化合物を、実施例2の工程Aの方法を用いて、前工程の生成物(62、25mg、0.051mmol
)及びメイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(2-フルオロ-4-アミノ)ベンズアミド(29、35mg
、0.041mmol)から調製すると、白色の固体(17mg、33％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ
): C₆₁H₈₇N₉O₁₆ClFの計算値、1255.6;実測値、1238.5(M-H₂O+H)、1256.6(M+H)、1278.6(M
+Na)。

(工程D:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(2-フルオロ-4-アミノ)ベンズアミド-Cit-Va
l-Cap-6-アミン(63):)
前工程の生成物(16mg、0.013mmol)をアセトニトリル(MeCN、3mL)及び水(1mL)に溶解さ
せ、トリフルオロ酢酸(TFA、1.0mL、13.0mmol)で処理し、フラスコをラバーセプタムで密
閉し、アルゴンでパージし、反応液を周囲温度で撹拌した。24時間後、該反応液を、真空
中、周囲温度で一部濃縮し、水(約1mL)で希釈し、ISCOシステムによりC18 Aq RediSep Go
ldカラムで2回精製した(水中20〜80％MeCN、どちらの相も0.1％TFA)。LCMSによる最も純
粋な画分を合わせ、真空中、周囲温度で一部濃縮し、-78℃で凍結させ、凍結乾燥させる
と、表題化合物が白色の固体(9mg、56％)として得られた。MS(ESI、ポジティブ): C₅₆H₇₉
N₉O₁₄ClFの計算値、1155.5;実測値、1156.6(M+H)、1178.6(M+Na)。

(実施例22)

化合物65を下記のように及び図27に示されているように合成した。

(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(2-メトキシ-5-アミノ)ベンズアミド(65))
(工程A:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(2-メトキシ-5-ニトロ)ベンズアミド:)
表題化合物を、実施例5の工程Aの方法を用いて、メイタンシン-N-メチル-L-アラニン(9
、50mg、0.077mmol)及び2-メトキシ-5-ニトロ安息香酸(64)(25mg、0.127mmol)から調製す
ると、白色の固体(51mg、80％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C₄₀H₄₉ClN₄O₁₃の計算
値、829.3;実測値、812.0(M-H2O+H)、830.0(M+H)、852.0(M+Na)。

(工程B:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(2-メトキシ-5-アミノ)ベンズアミド(65):
)
表題化合物を、実施例5の工程Bの方法を用いて、前工程の生成物(50mg、0.060mmol)か
ら調製すると、白色の固体(19mg、40％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C₄₀H₅₁ClN₄O
₁₁の計算値、798.3;実測値、781.3(M-H₂O)、799.3(M+H)、822.3(M+Na)。

(実施例23)
化合物67を下記のように及び図28に示されているように合成した。

(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(3-アミノ-4-メトキシ)ベンズアミド(67))
(工程A:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(3-ニトロ-4-メトキシ)ベンズアミド:)
表題化合物を、実施例5の工程Aの方法を用いて、メイタンシン-N-メチル-L-アラニン(9
、50mg、0.077mmol)及び3-ニトロ-4-メトキシ安息香酸(66)(25mg、0.127mmol)から調製す
ると、白色の固体(46mg、72％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C₄₀H₄₉ClN₄O₁₃の計算
値、829.3;実測値、812.0(M-H2O+H)、830.0(M+H)、852.0(M+Na)。

(工程B:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(3-アミノ-4-メトキシ)ベンズアミド(67):
)
表題化合物を、実施例5の工程Bの方法を用いて、前工程の生成物(45mg、0.054mmol)か
ら調製すると、白色の固体(23mg、53％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C₄₀H₅₁ClN₄O
₁₁の計算値、798.3;実測値、781.3(M-H₂O)、799.3(M+H)、822.3(M+Na)。

(実施例24)
化合物69を下記のように及び図29に示されているように合成した。

(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(3-アミノ-5-フルオロ)ベンズアミド(69))
(工程A:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(3-ニトロ-5-フルオロ)ベンズアミド:)
表題化合物を、実施例5の工程Aの方法を用いて、メイタンシン-N-メチル-L-アラニン(9
、50mg、0.077mmol)及び3-ニトロ-5-フルオロ安息香酸(68)(24mg、0.127mmol)から調製す
ると、黄色の固体(37mg、59％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C₃₉H₄₆ClFN₄O₁₂の計
算値、816.3;実測値、817.2(M+H)。

(工程B:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(3-アミノ-5-フルオロ)ベンズアミド(69):
)
表題化合物を、実施例5の工程Bの方法を用いて、前工程の生成物(37mg、0.045mmol)か
ら調製すると、白色の固体(9.1mg、24％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C₃₉H₄₈ClFN
₄O₁₀の計算値、786.3;実測値、769.3(M-H₂O)、787.3(M+H)。

(実施例25)
化合物71を下記のように及び図30に示されているように合成した。

(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(2-フルオロ-5-アミノ)ベンズアミド(71))
(工程A:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(2-フルオロ-5-ニトロ)ベンズアミド:)
表題化合物を、実施例5の工程Aの方法を用いて、メイタンシン-N-メチル-L-アラニン(9
、50mg、0.077mmol)及び2-フロウロ(flouro)-5-ニトロ安息香酸(70)(24mg、0.127mmol)か
ら調製すると、黄色の固体(37mg、59％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C₃₉H₄₆ClFN₄
O₁₂の計算値、816.3;実測値、799.3(M-H₂O)、817.2(M+H)。

(工程B:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(2-フルオロ-5-アミノ)ベンズアミド(71):
)
表題化合物を、実施例5の工程Bの方法を用いて、前工程の生成物(37mg、0.045mmol)か
ら調製すると、白色の固体(2.2mg、6％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C₃₉H₄₈ClFN₄
O₁₀の計算値、786.3;実測値、769.3(M-H₂O)、787.3(M+H)。

(実施例26)
化合物73を下記のように及び図31に示されているように合成した。

(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(3-アミノ)ベンズアミド(73))
(工程A:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(3-ニトロ)ベンズアミド:)
表題化合物を、実施例5の工程Aの方法を用いて、メイタンシン-N-メチル-L-アラニン(9
、50mg、0.077mmol)及び3-ニトロ安息香酸(72)(21mg、0.127mmol)から調製すると、白色
の固体(34mg、56％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C₃₉H₄₇ClN₄O₁₂の計算値、798.3;
実測値、781.2(M-H₂O)、799.3(M+H)。

(工程B:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(3-アミノ)ベンズアミド(73):)

表題化合物を、実施例5の工程Bの方法を用いて、前工程の生成物(34mg、0.043mmol)か
ら調製すると、白色の固体(9.3mg、27％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C₃₉H₄₉ClN₄
O₁₀の計算値、768.3;実測値、751.2(M-H₂O)、769.2(M+H)。

(実施例27)
化合物75を下記のように及び図32に示されているように合成した。

(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(3-アミノ-4-フルオロ)ベンズアミド(75))
(工程A:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(3-ニトロ-4-フルオロ)ベンズアミド:)
表題化合物を、実施例5の工程Aの方法を用いて、メイタンシン-N-メチル-L-アラニン(9
、50mg、0.077mmol)及び3-ニトロ-4-フルオロ安息香酸(74)(24mg、0.127mmol)から調製す
ると、白色の固体(34mg、54％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C₃₉H₄₆ClFN₄O₁₂の計
算値、816.3;実測値、799.3(M-H₂O)、817.2(M+H)。

(工程B:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(3-アミノ-4-フルオロ)ベンズアミド(75):
)

表題化合物を、実施例5の工程Bの方法を用いて、前工程の生成物(34mg、0.042mmol)か
ら調製すると、白色の固体(12mg、37％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C₃₉H₄₈ClFN₄
O₁₀の計算値、786.3;実測値、769.3(M-H₂O)、787.3(M+H)。

(実施例28)
化合物77を下記のように及び図33に示されているように合成した。

(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-4-アミノベンズアミド-アジピン酸-NHS(77))
(工程A:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(4-アミノ)ベンズアミド-アジピン酸(76):
)
表題化合物を27(20mg、0.026mmol)及びアジピン酸無水物(17mg、0.133mmol)から調製し
、丸底フラスコに量り入れ、ピリジン(1.5mL)に溶解させた。フラスコをラバーセプタム
で密閉し、窒素でパージし、反応液を周囲温度で撹拌した。4時間後、該反応液をISCOシ
ステムにより30g C18 RediSep Gold Aqカラムで直接精製した(勾配溶出:水中20〜90％MeC
N、両方に0.05％酢酸、20分間)。生成物を含む画分を合わせ、真空中で一部濃縮し、ドラ
イアイス上で凍結させ、凍結乾燥させると、オフホワイト色の固体(16mg、67％)が得られ
た。MS(ESI、ポジティブ): C₄₅H₅₇ClN₄O₁₃の計算値、896.4;実測値、879.4(M-H₂O)、897.
4(M+H)。

(工程B:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(4-アミノ)ベンズアミド-アジピン酸-NHS(
77):)

表題化合物を、実施例1の工程Aの方法を用いて、前工程の生成物(76、16mg、0.017mmol
)から調製すると、白色の固体(10mg、58％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C₄₉H₆₀Cl
N₅O₁₅の計算値、993.5;実測値、976.0(M-H₂O)、994.0(M+H)。

(実施例29)
化合物78を下記のように及び図34に示されているように合成した。

(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-4-アミノベンズアミド-Cap-Mal(78))
表題化合物を、実施例5の工程Aの方法を用いて、27(15mg、0.019mmol)及び6-マレイミ
ドヘキサン酸(6mg、0.029mmol)から調製すると、オフホワイト色の固体(9.8mg、52％)が
得られた。MS(ESI、ポジティブ): C₄₉H₆₀ClN₅O₁₃の計算値、962.5;実測値、944.8(M-H₂O)
、962.8(M+H)。

(実施例30)
化合物80を下記のように及び図35に示されているように合成した。

(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(3-メチルスルホニル-4-アミノ)ベンズアミド(80
))
(工程A:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(3-メチルスルホニル-4-ニトロ)ベンズアミ
ド:)
表題化合物を、実施例5の工程Aの方法を用いて、メイタンシン-N-メチル-L-アラニン(9
、40mg、0.062mmol)及び3-メチルスルホニル-4-ニトロ安息香酸(79)(25mg、0.102mmol)か
ら調製すると、黄色の固体(37mg、69％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C₅₀H₄₉N₄O₁₄
ClSの計算値、876.3;実測値、857.6(M-H₂O+H)、875.6(M+H)、897.6(M+Na)。

(工程B:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(3-メチルスルホニル-4-アミノ)ベンズアミ
ド(80):)
表題化合物を、実施例5の工程Bの方法を用いて、前工程の生成物(36mg、0.041mmol)か
ら調製すると、白色の固体(28mg、76％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C₄₀H₅₁N₄O₁₂
ClSの計算値、846.3;実測値、829.1(M-H₂O+H)、847.1(M+H)、869.1(M+Na)。

(実施例31)
化合物82を下記のように及び図36に示されているように合成した。

(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(3-ヒドロキシ-4-アミノ)ベンズアミド(82))
(工程A:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(3-ヒドロキシ-4-ニトロ)ベンズアミド:)
表題化合物を、実施例5の工程Aの方法を用いて、メイタンシン-N-メチル-L-アラニン(9
、47mg、0.072mmol)及び3-ヒドロキシ-4-ニトロ安息香酸(81)(20mg、0.109mmol)から調製
すると、黄色の固体(29mg、49％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C₃₉H₄₇N₄O₁₃Clの計
算値、814.3;実測値、796.8(M-H₂O+H)、814.8(M+H)、836.8(M+Na)。

(工程B:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(3-ヒドロキシ-4-アミノ)ベンズアミド(82):
)
表題化合物を、実施例5の工程Bの方法を用いて、前工程の生成物(28mg、0.034mmol)か
ら調製すると、淡黄色の固体(20mg、69％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C₄₀H₅₁N₄O
₁₂ClSの計算値、784.3;実測値、767.7(M-H₂O+H)、785.7(M+H)。

(実施例32)
化合物84を下記のように及び図37に示されているように合成した。

(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(2-アミノ)ベンズアミド(84))
(工程A:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(2-ニトロ)ベンズアミド:)
表題化合物を、実施例5の工程Aの方法を用いて、メイタンシン-N-メチル-L-アラニン(9
、30mg、0.046mmol)及び2-ニトロ安息香酸(83)(15mg、0.092mmol)から調製すると、黄色
の固体(26mg、71％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C₃₉H₄₇N₄O₁₂Clの計算値、798.3;
実測値、799.3(M+H)、821.3(M+Na)。

(工程B:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(2-アミノ)ベンズアミド(84):)
表題化合物を、実施例5の工程Bの方法を用いて、前工程の生成物(24mg、0.038mmol)か
ら調製すると、白色の固体(13mg、54％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C₃₉H₄₉N₄O₁₀
Clの計算値、768.3;実測値、769.0(M+H)。

(実施例33)
化合物86を下記のように及び図38に示されているように合成した。

(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(4-メトキシ-2-アミノ)ベンズアミド(86))
(工程A:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(4-メトキシ-2-ニトロ)ベンズアミド:)
表題化合物を、実施例5の工程Aの方法を用いて、メイタンシン-N-メチル-L-アラニン(9
、30mg、0.046mmol)及び4-メトキシ-2-ニトロ安息香酸(85)(18mg、0.092mmol)から調製す
ると、黄色の固体(18mg、47％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C₄₀H₄₉N₄O₁₃Clの計算
値、828.3;実測値、829.4(M+H)、851.3(M+Na)。

(工程B:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(4-メトキシ-2-アミノ)ベンズアミド(86):)
表題化合物を、実施例5の工程Bの方法を用いて、前工程の生成物(18mg、0.022mmol)か
ら調製すると、白色の固体(15mg、84％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C₄₀H₅₁N₄O₁₁
Clの計算値、798.3;実測値、799.1(M+H)。

(実施例34)
化合物88を下記のように及び図39に示されているように合成した。

(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(3-モルホリノ-4-アミノ)ベンズアミド(88))
(工程A:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(3-モルホリノ-4-ニトロ)ベンズアミド:)
表題化合物を、実施例5の工程Aの方法を用いて、メイタンシン-N-メチル-L-アラニン(9
、30mg、0.046mmol)及び3-モルホリノ-4-ニトロ安息香酸(87)(23mg、0.092mmol)から調製
すると、黄色の固体(28mg、70％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C₄₃H₅₄N₅O₁₃Clの計
算値、883.3;実測値、884.5(M+H)、906.3(M+Na)。

(工程B:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(3-モルホリノ-4-アミノ)ベンズアミド(88):
)
表題化合物を、実施例5の工程Bの方法を用いて、前工程の生成物(28mg、0.032mmol)か
ら調製すると、オフホワイト色の固体(12mg、52％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C
₄₃H₅₆N₅O₁₁Clの計算値、853.4;実測値、853.9(M+H)、875.9(M+Na)。

(実施例35)
化合物90を下記のように及び図40に示されているように合成した。

(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(3-アセトアミド-4-アミノ)ベンズアミド(90))
(工程A:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(3-アセトアミド-4-ニトロ)ベンズアミド:)
表題化合物を、実施例5の工程Aの方法を用いて、メイタンシン-N-メチル-L-アラニン(9
、50mg、0.077mmol)及び3-アセトアミド-4-ニトロ安息香酸(89)(29mg、0.129mmol)から調
製すると、ふわふわした淡黄色の固体(36mg、54％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C
₄₁H₅₀N₅O₁₃Clの計算値、855.3;実測値、839.1(M-H₂O)、857.1(M+H)、879.1(M+Na)。

(工程B:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(3-アセトアミド-4-アミノ)ベンズアミド(90
):)
表題化合物を、実施例5の工程Bの方法を用いて、前工程の生成物(35mg、0.042mmol)か
ら調製すると、白色の固体(19mg、57％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C₄₁H₅₂N₅O₁₁
Clの計算値、825.3;実測値、808.4(M-H₂O)、826.4(M+H)。

(実施例36)
化合物100を下記のように及び図41に示されているように合成した。

(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-4-アミノベンズアミド-Cit-Val-cap-ジブロモメ
チルアクリル(100))
(工程A: 3-ブロモ-2-ブロモメチル-プロピオニルクロリド(92):)
磁気撹拌子及び窒素注入口を備えた10mLの丸底フラスコに、3-ロモ(romo)-2-ブロモメ
チル-プロピオン酸(91、1.0g; 4.1mmol)及び塩化チオニル(3.0mL)を仕込んだ。この溶液
を3時間加熱還流させ、濃縮すると、0.90g(84％収率)が褐色の油状物として得られた。

(工程B: 6-アミノ-ヘキサン酸 tert-ブチルエステル(94):)
磁気撹拌子及び窒素注入口を備えた50mLの丸底フラスコに、6-アミノヘキサン酸(93、2
.0g; 15mmol)及び塩化チオニル(5.0mL; 69mmol; 4.5当量)を仕込んだ。この溶液を30℃以
下で2時間撹拌し、真空中で濃縮乾固させた。褐色の半固体に、t-BuOH(5.0mL; 87mmol; 5
.7当量)中の重炭酸ナトリウム(2.6g; 30mmol; 2.0当量)のスラリーを添加し、スラリーを
周囲温度でもう2時間撹拌した。ブタノールを、真空中、40℃で除去した。粘度が高い白
色のスラリーを酢酸エチルで希釈し、4部の1N NaOH、3部のH₂O、1部のブラインで洗浄し
た。有機化合物をNa₂SO₄上で乾燥させ、濾過し、濃縮すると、2.2g(77％収率)が無色の油
状物として得られた。MS(ESI、ポジティブ): C₁₀H₂₁NO₂の計算値、187.3;実測値、188.4(
M+H)。

(工程C: 6-(3-ブロモ-2-ブロモメチル-プロピオニルアミノ)-ヘキサン酸 tert-ブチルエ
ステル(95):)
磁気撹拌子及び窒素注入口を備えた50mLの丸底フラスコに、DCM(5.0mL)中の6-アミノヘ
キサン酸 tert-ブチルエステル(94、0.50g; 2.7mmol)及びジメチルアミノピリジン(0.03g
; 0.27mmol; 0.10当量)を仕込んだ。この溶液を氷浴で0℃に冷却した。3-ブロモ-2-ブロ
モメチル-プロピオニルクロリド(92、0.90g; 3.4mmol; 1.2当量)をDCM(5mL)に溶解させ、
反応混合物に0℃でゆっくりと添加した。撹拌し、周囲温度まで一晩ゆっくりと温めた。
反応混合物を酢酸エチルで希釈し、有機混合物をH₂O、5％NaHCO₃、及びブラインで洗浄し
た。有機物をNa₂SO₄上で乾燥させ、濾過し、濃縮し、ヘキサン中の0〜100％酢酸エチルで
溶出させるシリカゲルカラムで精製すると0.49g(42％収率)が透明な黄色の油状物として
得られた。

(工程D: 6-(3-ブロモ-2-ブロモメチル-プロピオニルアミノ)-ヘキサン酸(96):)
磁気撹拌子及び窒素注入口を備えた50mLの丸底フラスコに、DCM(10mL)中の6-(3-ブロモ
-2-ブロモメチル-プロピオニルアミノ)-ヘキサン酸 tert-ブチルエステル(95、0.26g; 0.
62mmol)及びトリフルオロ酢酸(0.70mL; 9.3mmol; 15当量)を仕込んだ。この溶液を周囲温
度で一晩撹拌し、濃縮乾固させ、アセトニトリル及びH₂O(各々1.0mL)に溶解させ、凍結さ
せ、凍結乾燥させると、0.22g(100％)が固体として得られた。MS(ESI、ポジティブ): C₁₀
H₁₇Br₂NO₃の計算値、359.0、実測値358.0、360.0、362.0(M+H)、380.0、382.0、384.0(M+
Na)、356.0、358.0、360.0(M-H)。

(工程E: Boc-Val-Cit-4-アミノ安息香酸(97):)
表題化合物を実施例1の工程Dの生成物(6、100mg、0.254mmol)及びジ-tert-ブチルジカ
ルボネート(61mg、0.279mmol)から調製し、これを丸底フラスコに量り入れ、THF(3mL)及
びH₂O(1.5mL)中の1M NaOH(2mL)で処理した。フラスコをラバーセプタムで密閉し、反応液
を周囲温度で一晩撹拌し、真空中で濃縮し、1M HCl(2mL)を滴加してpH 7に中和した。水
性反応液を酢酸エチルで、有機層をNa₂SO₄上で乾燥させ、濾過し、濃縮すると、オフホワ
イト色の固体(93mg、74％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C₂₃H₃₅N₅O₇の計算値、493
.5;実測値、394.2(M+1-Boc)、494.2(M+H)、516.2(M+Na)。

(工程F:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-4-アミノベンズアミド-Cit-Val-Boc(98):)
表題化合物を、実施例5の工程Aの方法を用いて、前工程の生成物であるBoc-Val-Cit-4-
アミノ安息香酸(97、76mg、0.154mmol)及びメイタンシン-N-メチル-L-アラニン(9、50mg
、0.077mmol)から調製すると、白色の固体(22mg、26％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ
): C₅₅H₇₇ClN₈O₁₅の計算値、1124.5;実測値、1107.2(M-H₂O)、1125.3(M+H)、1147.2(M+Na
)。

(工程G:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-4-アミノベンズアミド-Cit-Val(99):)
表題化合物を前工程の生成物(98、20mg、0.018mmol)から調製し、丸底フラスコに量り
入れ、ACN(3mL)及びH₂O(1mL)に溶解させ、TFA(1mL)で処理した。フラスコをラバーセプタ
ムで密閉し、窒素でパージし、反応液を周囲温度で撹拌した。48時間後、該反応液をISCO
システムにより30g C18 RediSep Gold Aqカラムで直接精製した(勾配溶出:水中10〜65％M
eCN、両方に0.05％酢酸、20分間)。生成物を含む画分を合わせ、真空中で一部濃縮し、ド
ライアイス上で凍結させ、凍結乾燥させると、オフホワイト色の固体(8mg、46％)が得ら
れた。MS(ESI、ポジティブ): C₅₀H₆₉ClN₈O₁₃の計算値、1024.5;実測値、1007.2(M-H₂O)、
1026.2(M+H)。

(工程H:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-4-アミノベンズアミド-Cit-Val-カプリル-
ビス(BrMe)アクリルアミド(100):)
表題化合物を、実施例5の工程Aの方法を用いて、前工程の生成物(99、8mg、0.008mmol)
及び6-(3-ブロモ-2-ブロモメチル-プロピオニルアミノ)-ヘキサン酸(96)から調製すると
、白色の固体(8mg、75％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C₆₀H₈₄Br₂ClN₉O₁₅の計算値
、1363.4;実測値、1363.1(M+H)。

(実施例37)
(コンジュゲートの調製及び特徴解析)
下記の手順を用いて、5つの抗体を本開示のリンカー-ペイロード化合物にコンジュゲー
トさせた。これらの実験で使用される4つの標的化抗体は:(1)WO2007002222A2号に示され
ているようなクローンAB-PG1-XG1-006の重鎖及び軽鎖可変ドメインを有するPSMA抗体、(2
)WO2007001851号のクローン3A5に由来する可変領域を有する抗MUC16抗体、並びに(3)WO20
15026907A1号に示されているようなクローンH1H6765P及びH1H6958N2の重鎖及び軽鎖可変
ドメインを有する2つのPRLR抗体であった。全てのモノクローナル抗体をCHO細胞で発現さ
せ、プロテインAにより精製した。癌研究と全く関係のない抗原に由来する非結合アイソ
タイプ対照も使用した。

(実施例38)
(化合物10のコンジュゲーション方法)
(マレイミドのコンジュゲーション方法)
50mM HEPES、150mM NaCl、pH 7.5中の抗体(1〜10mg/ml)を、1mMジチオスレイトールで
、37℃で30分間で処理した。ゲル濾過(G-25、pH 4.5の酢酸ナトリウム)後、DMSO(10mg/ml
)中のマレイミドリンカーペイロード誘導体10、15、20、25、60、及び78(1.2当量/SH基)
を還元された抗体に添加し、混合物を1M HEPES(pH 7.4)でpH 7.0に調整した。1時間後、
反応を過剰のN-エチルマレイミドでクエンチした。コンジュゲートをサイズ排除クロマト
グラフィーにより精製し、滅菌濾過した。タンパク質濃度及びペイロード対抗体比をUVス
ペクトル分析により決定した。サイズ排除HPLCにより、使用した全てのコンジュゲートが
95％を超えて単量体であることが立証され、RP-HPLCにより、0.5％未満のコンジュゲート
されていないリンカーペイロードが存在することが立証された。全てのコンジュゲート抗
体を、Hamblettらの文献、Cancer Res 2004 10 7063に従って、リンカーペイロードロー
ディング値について、UVにより分析した。収率及びペイロード対抗体比は、表1に報告さ
れている。

(実施例39)
(活性エステルのコンジュゲーション方法)
50mM HEPES、150mM NaCl、pH 8.0、及び15％(v/v)DMA中の抗体(1〜10mg/ml)を、6倍過
剰の化合物77と、周囲温度で1〜2時間コンジュゲートさせた。コンジュゲートをサイズ排
除クロマトグラフィーにより精製し、滅菌濾過した。タンパク質及びリンカーペイロード
濃度をUVスペクトル分析により決定した。サイズ排除HPLCにより、使用した全てのコンジ
ュゲートが95％を超えて単量体であることが立証され、RP-HPLCにより、0.5％未満のコン
ジュゲートされていないリンカーペイロードが存在することが立証された。収率は、タン
パク質に基づいて、表1に報告されている。全てのコンジュゲート抗体を、Hamblettらの
文献、Cancer Res 2004 10 7063に従って、リンカーペイロードローディング値について
、UVにより分析した。収率及びペイロード対抗体比は、表1に報告されている。

(実施例40)
(インビトロのリンカー-ペイロード無細胞酵素アッセイ)
(カテプシンBのインキュベーション)
インビトロの無細胞酵素アッセイ手順をDubowchikらの文献、Bioconjugate Chem. 2002
13 855から取り入れた。リンカーペイロード10を、25mM酢酸ナトリウムバッファー、1mM
EDTA、pH 5.0中に、最終100μg/mLで準備し、37℃でプレインキュベートした。カテプシ
ンB(Sigma # C8571)を、2当量のカテプシンBストックに対して1当量の30mM DTT、15mM ED
TAで、室温で15分間活性化させた。活性化カテプシンB溶液を基質溶液に1:20のモル比で
添加した(対照試料については、精製H₂Oを活性化カテプシンBの代わりに添加した)。試料
を37℃で一晩インキュベートした。得られた試料をQ1スキャンに通してLC-MSにより検出
する。

(LC-MS検出)
試料を12,000gで5分間遠心分離する。上清を回収し、上清から20μl/分で、0.3ml/分の
30:70の移動相B:A(移動A: H₂O中の0.1％FA;移動相B:アセトニトリル中の0.1％FA)の注入
の組合せによって、液体クロマトグラフィー-質量分析(Thermo Quantiva)により分析した
。MS1をリンカーペイロード又はペイロードのいずれかの分子イオンの検出のための適切
な範囲に設定する。上清は、791.27 M+Naの質量(C₃₉H₄₉ClN₄O₁₀のモノアイソトピック質
量の計算値、768.31)を有する予測されたペイロードのp-アミノ-ベンズアミドメイタンシ
ノイド(27)を含有し、カテプシンBを含まない対照試料は、1240.50 M+Naの質量(C₆₀H₈₀Cl
N₉O₁₆のモノアイソトピック質量の計算値、1217.54)を有する10を含有していた。予測さ
れたペイロード分子イオンは、対照試料中に検出されなかった。

本実施例の結果は重要であり、それは、1つには、カテプシンBによる10のタンパク質分
解が、酵素が存在する細胞でのADCの内在化の後にしか起こらないからである。抗体が細
胞傷害性ペイロードを標的細胞に直接送達するので、オフターゲット効果は軽減されるは
ずである。

(実施例41)
(インビトロでの細胞傷害性アッセイ)
本実施例では、抗原を発現する腫瘍細胞をインビトロで死滅させる様々な抗体-薬物コ
ンジュゲート又はその関連ペイロードの能力を評価した。

Ovcar3(Muc16+)又はC4-2(PSMA+)細胞を、完全成長培地中、1ウェル当たり3000(C42)細
胞で96ウェルプレートに播種し、一晩成長させた。細胞生存曲線については、連続希釈し
たコンジュゲート又はペイロードを300nM〜5pMの範囲の最終濃度で細胞に添加し、3日間
インキュベートした。生存を測定するために、細胞をCCK8(Dojindo)とともに最後の1〜3
時間インキュベートし、450nmでの吸光度(OD₄₅₀)をVictor(Perkin Elmer)で決定した。ジ
ギトニン(40nM)処理細胞から決定されたバックグラウンドOD₄₅₀レベルを全てのウェルか
ら差し引いた。生存は、未処理対照のパーセンテージとして表される。IC₅₀値は、10点応
答曲線(GraphPad Prism)に対する4パラメータロジスティック方程式から決定した。全て
のコンジュゲート曲線及びIC₅₀値をペイロード当量について補正する。

アイソタイプ対照結合の271倍のPSMAを天然に発現しているC4-2細胞(前立腺癌株)では
、メイタンシノイドコンジュゲートPSMA-10及びPSMA-25は、それぞれ、0.11及び0.59nMの
IC₅₀値を有していた(図2〜5)。ペイロード27及び33は単独で、それぞれ、0.20及び0.55nM
のIC₅₀値を有していた。裸のPSMA抗体及びアイソタイプ対照は、アッセイされた濃度で抗
増殖活性を欠いていた。

アイソタイプ対照結合の320倍のMUC16を天然に発現しているOvcar-3細胞(卵巣癌株)で
は、メイタンシノイドコンジュゲートMUC16-10及びMUC16-25は、それぞれ、0.74及び0.63
nMのIC₅₀値を有していた(図2〜5)。ペイロード27及び33は単独で、それぞれ、0.06及び0.
11nMのIC₅₀値を有していた。裸のMUC16抗体及びアイソタイプ対照は、アッセイされた濃
度で抗増殖活性を欠いていた。

表2は、Ovcar3(Muc16+)又はC4-2(PSMA+)細胞の両方におけるペイロードのみの抗増殖能
を掲載している。化合物は全て、ナノモル濃度未満の活性を保有し、化合物35及び37は1
桁のピコモル濃度のIC₅₀又はそれに近かった。

(実施例42)
(抗体発現)
アッセイ/実験の種類:部位特異的コンジュゲーションモチーフを含有するように修飾さ
れた抗体のクローニング、発現、及び精製。

本実施例は、トランスグルタミナーゼ反応による部位特異的コンジュゲーションを可能
にするアミノ酸配列を有する抗体の作製を提供する。

抗体を作製するために、ヒトIgG1のCH1、CH2、及びCH3ドメイン(UniprotKBアクセッシ
ョン番号P01857のアミノ酸1〜330)をコードするプラスミドで突然変異生成を行い、QuikC
hange Lightning多部位特異的突然変異生成キット(Agilent, # 210516)を用いて、位置18
0におけるNからQへの突然変異を生じさせた。2つの抗体可変領域重(VH)断片(1つは、抗ヒ
トPRLR抗体のVHをコードする断片、H1H6958N2(国際特許出願WO 2015026907 A1号)、もう1
つは、外因性抗原を認識するアイソタイプ対照抗体のVHをコードする断片)を選択した。
プライマーを設計し(idtdna.com)、Kapa HiFi DNAポリメラーゼ(Kapa Biosciences; # KK
2102)を用いて、これら2つの抗体のVH領域を増幅させた。PCR増幅が進行している間に、
ヒトIgG1 N180Q突然変異を含むプラスミドを、LguI酵素(Fermentas, # FD1934)で、37℃
で30分間消化した。増幅が終了したら、消化されたヒトIgG1プラスミド及び両方のPCR産
物を、SYBR Safe染料(Life Technologies, # S33102)を含む1％アガロースゲル上で泳動
させた。適切なサイズのバンドを同定し、きれいなカミソリの刃を用いてゲルから切り出
した。切り出された産物は全て、ゲル抽出キット(Qiagen, #28704)を用いて精製した。そ
の後、3:1の比の消化されたヒトIgG1ベクターとVH PCR産物を用いて、In-Fusionクローニ
ング反応(Clontech, # 638911)を行い、その後、50℃で15分間インキュベートした。イン
キュベーション後、各々の反応液をミックス・アンド・ゴー(Mix and Go)コンピテント細
胞(Zymo, # T3007)に形質転換し、氷上で5分間インキュベートし、コンピテント細胞をLB
＋カルベニシリンプレート(Teknova, VWR, # 101320-126)にプレーティングし、これを37
℃で一晩インキュベートした。

翌日、単一のコロニーをプレートから100μg/mLカルベニシリンを含むLBブロスに播種
し、37℃の卓上式インキュベーター中で振盪させて、一晩成長させた。その後、細胞を遠
心分離によりペレット化し、PureLink HiPureプラスミドミニプレップキット(Thermo Fis
her, #K210003)を用いて、Hamilton Starletロボットでミニプレップ処理した。精製DNA
をシークエンシングし、結果をSequencherソフトウェア(GeneCodes)を用いて解析した。
各々のライゲーション反応からのクローンをミックス・アンド・ゴー(Mix and Go)コンピ
テント細胞への再形質転換用に選択し、氷上で5分間インキュベートし、コンピテント細
胞を、カルベニシリンを含むLBプレートにプレーティングし、これを37℃で一晩インキュ
ベートした。

翌日、単一のコロニーを各々のプレートから取り、100μg/mLカルベニシリンを含むLB
ブロス中で3〜4時間成長させた。その後、試料を、100μg/mlカルベニシリンを含むLBブ
ロス中に希釈し、37℃の振盪式インキュベーターに移して、一晩成長させた。その後、マ
キシプレップDNA抽出を両方のプラスミドに対して行い、全DNAオープンリーディングフレ
ームをシークエンシングした。配列が確認されれば、重鎖DNAを、先にクローニングされ
ていた関連のある軽鎖DNAと一緒に、CHO細胞株に安定にトランスフェクトして、各々の抗
体を産生させた。

N180Q Fc突然変異を含むH1H6958N2(国際特許出願WO 2015026907 A1号)はPRLR-Qと称さ
れ、N180Q Fc突然変異も含む外因性抗原を認識するアイソタイプ対照抗体はアイソタイプ
対照-Qと称される。

(実施例43)
(細菌トランスグルタミナーゼコンジュゲーション)

PRLR-Q(MW 145438Da)抗体及びアイソタイプ対照-Q(MW 144602Da)抗体を、PBS pH 7.4中
、1〜10mg/mLでコンジュゲートさせた。リンカーペイロード63を抗体よりも10〜25倍モル
濃度過剰で添加し、抗体1mg当たり1〜5ユニットの細菌トランスグルタミナーゼ(Zedira,
T1001)を添加することにより酵素反応を開始させ、振盪させながら、37℃で4〜16時間イ
ンキュベートした。コンジュゲートをサイズ排除クロマトグラフィーにより精製し、滅菌
濾過した。タンパク質及びリンカーペイロード濃度をUVスペクトル分析により決定した。
サイズ排除HPLCにより、使用した全てのコンジュゲートが95％を超えて単量体であること
が立証された。収率は、タンパク質に基づいて、表1に報告されている。全てのコンジュ
ゲート抗体を、Hamblettらの文献、Cancer Res 2004 10 7063に従って、リンカーペイロ
ードローディング値について、UVにより分析した。さらに、コンジュゲートを、Acquity
UPLCと連動したWaters Synapt G2-Si QTOF質量分析を用いて、リンカーペイロードローデ
ィングについて、ESI-MSにより分析した。クロマトグラフィーによる分離を、C4カラム(W
aters protein BEH C4、50mm×1mm、1.7μm)で、25分の勾配(分:移動相Bのパーセンテー
ジ; 0:20％、1:20％、18:40％、18.1:90、20:95％、20.8:95％、20.9:20％25:20％)で達
成した。移動相Aは、水中の0.1％ギ酸であり、移動相Bは、アセトニトリル中の0.1％ギ酸
であった。流速は、100μl/分に設定した。検出器TOFスキャンは、m/z 700〜5000、25分
間から設定し、主なパラメータは掲載されている通りであった(キャピラリー電圧 3.2kV
;サンプリングコーン 150;ソースオフセット 80;ソース温度 120℃;脱溶媒和温度 50
0℃;トラップ衝突エネルギー 30;移動衝突エネルギーオフ;ガスコントロールオフ;
分解四重極: LM分解 4.7)。合わせたスペクトルを、MassLynxソフトウェアのMaxEnt関
数を用いてデコンボリューション処理した。得られる分子イオンは、強度に従って加重し
たとき、表3に掲載されているローディングに対応した。実際の質量分析(mass spec)スペ
クトルは、図42及び43に掲載されている。

表3.化合物63のPRLR-Q及びアイソタイプ対照-Qコンジュゲートにおける強度加重平均リン
カー-ペイロードローディングのまとめ

(実施例44)
未修飾H1H6958N2、PRLR-Q、及びPRLR-Q-63のいずれかである精製抗PRLR抗体に対するヒ
トPRLR結合の平衡解離定数(K_D値)を、Biacore 3000機器を用いるリアルタイム表面プラズ
モン共鳴バイオセンサーを用いて決定した。Biacoreセンサー表面を、モノクローナルマ
ウス抗ヒトFc抗体(GE, # BR-1008-39)とのアミンカップリングによってまず誘導体化して
、抗PRLRモノクローナル抗体を捕捉した。結合試験は全て、0.01M HEPES pH 7.4、0.15M
NaCl、3mM EDTA、及び0.05％v/v界面活性剤Tween-20(HBS-ETランニングバッファー)中、2
5℃及び37℃で行った。HBS-ETランニングバッファー(40nM〜3.33nMの範囲)中の、C-末端m
yc-myc-ヘキサヒスチジンタグを有する発現された様々な濃度のヒトPRLR細胞外ドメイン(
hPRLR-MMH;特許出願WO 2015026907 A1号に記載されている配列番号401)を、抗PRLR抗体が
捕捉された表面の上に、50μL/分の流速で4分間注入し、HBS-ETランニングバッファー中
でのその解離を8分間モニタリングした。Scrubber 2.0c曲線フィッティングソフトウェア
を用いて、リアルタイムセンサーグラムを1:1結合モデルにフィッティングさせることに
より、反応速度論的会合速度定数(k_a)及び解離速度定数(k_d)を決定した。結合解離平衡定
数(K_D)及び解離半減期(t 1/2)を以下のような反応速度論的速度定数から計算した:

。

25℃での様々な抗PRLR抗体に対するhPRLR-MMH結合の結合反応速度パラメータを表4に示
す。25℃で、hPRLR-MMHは、1.09nMのK_D値で親抗体H1H6958N2に結合した。ヒトPRLR-MMHは
、850pMのK_D値でPRLR-Qに結合し、1.50nMのK_D値でPRLR-Q-63に結合した。
表4: 25℃でのhPRLR-MMHに対する抗PRLR抗体結合の結合反応速度パラメータ。

(実施例45)
本実施例は、本明細書に提供されるコンジュゲートのための細胞傷害性アッセイを提供
する。63、60、77、及び78とコンジュゲートされた抗PRLR抗体がPRLR発現細胞株を死滅さ
せる能力を評価するために、その細胞表面に27,000コピーを超えるヒトPRLRを発現するこ
とが以前に明らかにされているT47D腺管癌株(ATCC, # HTB-133)を用いたインビトロの細
胞傷害性アッセイを利用した。

本アッセイのために、T47D細胞を、10％FBS、NEAA、及びペニシリン/ストレプトマイシ
ンが補充されたDMEMを含む培地(完全培地)中、2,000細胞/ウェルで、白色の96ウェルプレ
ートに播種した。これらを、37℃、5％CO₂で一晩成長させた。細胞生存曲線を決定するた
めに、翌日、抗体薬物コンジュゲート、コンジュゲートされていない抗体、又は遊離のペ
イロードを、完全培地中、100nM〜0.01nMの範囲の最終連続希釈で細胞に添加し、その後
、さらに5日間インキュベートした。残存する生細胞を溶解させて、そのATPを放出させる
試薬、ATPの分解を妨げるATPアーゼ阻害剤、並びにルシフェリン及び発光反応を触媒する
ルシフェラーゼを含む、CellTiter-Glo(商標)試薬(Promega, G7571)を各々のウェルに添
加した後、ルシフェラーゼ活性を検出した。培養物中の死細胞はATPを合成せず、その放
出されたATPはいずれも内在性ATPアーゼによって破壊されるので、CellTiter-Gloを添加
する前の生細胞がATPの唯一の供給源となる。相対光単位(RLU)をVictorルミノメーター(P
erkinElmer)で測定し、結果を10点応答曲線(GraphPad Prism)に対する4パラメータロジス
ティック方程式を用いて決定した。全ての測定値及び計算IC₅₀値をペイロード当量につい
て補正した。IC₅₀値は全てnM濃度で表され、死滅率は、試験した最高濃度について報告さ
れている。結果は、図45〜48にまとめられている。

図44に示すように、63と部位特異的にコンジュゲートされた抗PRLR抗体(PRLR-Q-63)は
、T47D細胞の細胞傷害性を示し、IC₅₀は1.1nM、最大死滅率は55％であった。遊離のペイ
ロード29は、T47D細胞の細胞傷害性を示し、IC₅₀は0.07nM、最大死滅率は67％であった。
63とコンジュゲートされたアイソタイプ対照抗体(アイソタイプ対照-Q-63)は、T47D細胞
の死滅を示さず、コンジュゲートされていない抗PRLR抗体(PRLR-Q)は、T47D細胞の死滅を
示さなかった。

図45に示すように、60とコンジュゲートされた抗PRLR抗体(PRLR-60)は、T47D細胞の細
胞傷害性を示し、IC₅₀は0.6nM、最大死滅率は60％であった。遊離のペイロード49は、T47
D細胞の細胞傷害性を示し、IC₅₀は0.03nM、最大死滅率は69％であった。60とコンジュゲ
ートされたアイソタイプ対照抗体(アイソタイプ対照-60)は、T47D細胞の死滅を示さず、
コンジュゲートされていない抗PRLR抗体(PRLR)は、T47D細胞の死滅を示さなかった。

図46に示すように、77とコンジュゲートされた抗PRLR抗体(PRLR-77)は、T47D細胞の細
胞傷害性を示し、IC₅₀は0.4nM、最大死滅率は69％であった。遊離のペイロード27は、T47
D細胞の細胞傷害性を示し、IC₅₀は0.1nM、最大死滅率は67％であった。77とコンジュゲー
トされたアイソタイプ対照抗体(アイソタイプ対照-77)は、T47D細胞の死滅を示さず、コ
ンジュゲートされていない抗PRLR抗体(PRLR)は、T47D細胞の死滅を示さなかった。

図47に示すように、78とコンジュゲートされた抗PRLR抗体(PRLR-78)は、T47D細胞の細
胞傷害性を示し、IC₅₀は0.9nM、最大死滅率は61％であった。遊離のペイロード27は、T47
D細胞の細胞傷害性を示し、IC₅₀は0.1nM、最大死滅率は67％であった。78とコンジュゲー
トされたアイソタイプ対照抗体(アイソタイプ対照-78)は、T47D細胞の死滅を示さず、コ
ンジュゲートされていない抗PRLR抗体(PRLR)は、T47D細胞の死滅を示さなかった。

表5は、Ovcar3(Muc16+)、C4-2(PSMA+)、及びT47D(PRLR+)細胞におけるペイロードのみ
の抗増殖能を掲載している。

上記の実施態様及び実施例は、単に例示的かつ非限定的であることが意図される。当業
者は、具体的な化合物、材料、及び手順の数多くの等価物を認識するか、又はそれらをル
ーチンの実験だけを用いて確認することができるであろう。そのような等価物は全て、本
範囲内にあると考えられ、添付の特許請求の範囲によって包含される。

上記の実施態様及び実施例は、単に例示的かつ非限定的であることが意図される。当業
者は、具体的な化合物、材料、及び手順の数多くの等価物を認識するか、又はそれらをル
ーチンの実験だけを用いて確認することができるであろう。そのような等価物は全て、本
範囲内にあると考えられ、添付の特許請求の範囲によって包含される。
本件出願は、以下の構成の発明を提供する。
（構成１）
式(I)の化合物又はその医薬として許容し得る塩:
（化１）

(式中:
Aは、アリーレン又はヘテロアリーレンであり;
Lは、リンカーであり;
BAは、結合剤であり;かつ
kは、1〜30の整数である)。
（構成２）
Aが:
（化２）

であり、
ここで:
R ¹ が、出現する毎に独立に、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アリー
ル、アルカリール、アラルキル、ハロ、ハロアルキル、ハロアルコキシ、ヘテロアリール
、ヘテロシクロアルキル、ヒドロキシル、シアノ、ニトロ、
（化３）

又はアジドであり、
ここで、R ^A が、アルキル又はヘテロアルキルであり;
nが、0〜4の整数であり;
mが、0〜3の整数であり;
pが、0〜6の整数であり;かつ
qが、0〜5の整数である、
構成1記載の化合物。
（構成３）
Aが:
（化４）

である、構成1又は2記載の化合物。
（構成４）
Aが:
（化５）

であり、
ここで、nが、0、1、又は2である、
構成1〜3のいずれか一項記載の化合物。
（構成５）
nが0である、構成1〜4のいずれか一項記載の化合物。
（構成６）
R ¹ が、出現する毎に独立に、アルコキシ又はハロである、構成1〜4のいずれか一項記載
の化合物。
（構成７）
Lが:
（化６）

であり、
ここで:
SPがスペーサーであり;
（化７）

が前記結合剤との1以上の結合であり;
AA ¹ がアミノ酸であり;かつ
AA ² がアミノ酸である、
構成1〜6のいずれか一項記載の化合物。
（構成８）
AA ¹ -AA ² が:バリン-シトルリン、シトルリン-バリン、リジン-フェニルアラニン、フェ
ニルアラニン-リジン、バリン-アスパラギン、アスパラギン-バリン、トレオニン-アスパ
ラギン、アスパラギン-トレオニン、セリン-アスパラギン、アスパラギン-セリン、フェ
ニルアラニン-アスパラギン、アスパラギン-フェニルアラニン、ロイシン-アスパラギン
、アスパラギン-ロイシン、イソロイシン-アスパラギン、アスパラギン-イソロイシン、
グリシン-アスパラギン、アスパラギン-グリシン、グルタミン酸-アスパラギン、アスパ
ラギン-グルタミン酸、シトルリン-アスパラギン、アスパラギン-シトルリン、アラニン-
アスパラギン、又はアスパラギン-アラニンである、構成7記載の化合物。
（構成９）
Lが:
（化８）

であり、
ここで:
SPがスペーサーであり;
（化９）

が前記結合剤との1以上の結合であり;
R ^AA1 がアミノ酸側鎖であり;かつ
R ^AA2 がアミノ酸側鎖である、
構成1〜6のいずれか一項記載の化合物。
（構成１０）
Lが:
（化１０）

であり、
ここで:
SPがスペーサーであり;かつ
（化１１）

が前記結合剤との1以上の結合である、
構成9記載の化合物。
（構成１１）
SPがC _5-7 アルキレンを含む、構成7〜10のいずれか一項記載の化合物。
（構成１２）
SPが:
（化１２）

であり、
ここで:
（化１３）

が前記結合剤との結合であり;かつ
bが2〜8の整数である、
構成11記載の化合物。
（構成１３）
Lが:
（化１４）

であり、
ここで:
（化１５）

が前記結合剤との結合であり;かつ
bが2〜8の整数である、
構成1〜6のいずれか一項記載の化合物。
（構成１４）
Lが:
（化１６）

であり、
ここで:
BAが抗体であり;
R ^N が水素原子又はアルキルであり;
R ^M がアルキルであり;
（化１７）

によって表される2つの結合が該抗体のシステインとの結合であり;かつ
bが2〜8の整数である、
構成1〜6のいずれか一項記載の化合物。
（構成１５）
Lが:
（化１８）

であり、
ここで、
（化１９）

が前記結合剤との結合である、
構成13記載の化合物。
（構成１６）
Lが:
（化２０）

であり、ここで、
（化２１）

が前記結合剤との結合である、
構成1〜6のいずれか一項記載の化合物。
（構成１７）
BAが抗体であり、かつ
Lが:
（化２２）

であり;
ここで、
（化２３）

によって表される2つの結合が該抗体のシステインとの結合である、
構成1〜6のいずれか一項記載の化合物。
（構成１８）
Lが:
（化２４）

であり;
ここで、
（化２５）

が前記結合剤との結合である、
構成1〜6のいずれか一項記載の化合物。
（構成１９）
Aが:
（化２６）

であり、
ここで:
R ¹ が、出現する毎に独立に、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アリー
ル、アルカリール、アラルキル、ハロ、ハロアルキル、ハロアルコキシ、ヘテロアリール
、ヘテロシクロアルキル、シアノ、ニトロ、
（化２７）

又はアジドであり、
ここで、R ^A がアルキルであり;
nが0〜4の整数であり;
mが0〜3の整数であり;
pが0〜6の整数であり;かつ
qが0〜5の整数であり;かつ
Lが:
（化２８）

であり、
ここで:
SPがスペーサーであり;
（化２９）

が前記結合剤との1以上の結合であり;
R ^AA1 がアミノ酸側鎖であり;かつ
R ^AA2 がアミノ酸側鎖である、
構成1記載の化合物。
（構成２０）
Aが:
（化３０）

であり;
ここで、R ¹ が、出現する毎に独立に、アルキル、アルコキシ、ハロアルキル、又はハロ
であり;かつ
Lが:
（化３１）

であり、
ここで:
（化３２）

が前記結合剤との結合であり;かつ
bが2〜8の整数である、
構成1記載の化合物。
（構成２１）
Aが:
（化３３）

であり、
ここで:
nが0、1、又は2であり;かつ
R ¹ が、出現する毎に独立に、アルキル、アルコキシ、ハロアルキル、又はハロであり、
Lが:
（化３４）

であり、
ここで:
（化３５）

が前記結合剤との結合である、
構成1記載の化合物。
（構成２２）
前記化合物が:
（化３６）

であり;
ここで:
Abが抗体であり;
（化３７）

が該抗体のシステインとの結合であり;
（化３８）

が該抗体のリジンとの結合であり;
kが1〜30の整数であり;かつ
tが1〜8の整数である、
構成1記載の化合物。
（構成２３）
前記化合物が:
（化３９）

である、構成22記載の化合物。
（構成２４）
tが1である、構成1〜23のいずれか一項記載の化合物。
（構成２５）
前記BAが抗体である、構成1〜21のいずれか一項記載の化合物。
（構成２６）
前記抗体が抗MUC16抗体又は抗PSMA抗体である、構成1〜25のいずれか一項記載の化合物
。
（構成２７）
式IIの化合物又はその医薬として許容し得る塩:
（化４０）

(式中、Aは、アリーレン又はヘテロアリーレンである)。
（構成２８）
Aが:
（化４１）

であり、
ここで:
R ¹ が、出現する毎に独立に、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アリー
ル、アルカリール、アラルキル、ハロ、ハロアルキル、ハロアルコキシ、ヘテロアリール
、ヘテロシクロアルキル、シアノ、ニトロ、
（化４２）

又はアジドであり、
ここで、R ^A がアルキルであり;
nが0〜4の整数であり;
mが0〜3の整数であり;
pが0〜6の整数であり;かつ
qが0〜5の整数である、
構成27記載の化合物。
（構成２９）
前記式(II)の化合物が式(IIA)の化合物である、構成28記載の化合物:
（化４３）

。
（構成３０）
前記式(II)の化合物が式(IIB)の化合物である、構成28記載の化合物:
（化４４）

。
（構成３１）
前記式(II)の化合物が式(IIB2)の化合物である、構成28記載の化合物:
（化４５）

。
（構成３２）
前記式(II)の化合物が式(IIB3)の化合物である、構成28記載の化合物:
（化４６）

。
（構成３３）
R ¹ が、独立に、C _1-6 アルコキシ、ハロアルキル、又はハロである、構成28〜32のいずれ
か一項記載の化合物。
（構成３４）
R ¹ が、独立に、アルコキシ又はハロである、構成28〜33のいずれか一項記載の化合物。
（構成３５）
n、m、p、及びqが0、1、又は2である、構成28〜34のいずれか一項記載の化合物。
（構成３６）
n、m、p、及びqが0である、構成28〜35のいずれか一項記載の化合物。
（構成３７）
前記化合物が:
（化４７）

である、構成27記載の化合物。
（構成３８）
R ¹ が、出現する毎に独立に、アルコキシ、ハロアルキル、又はハロである、構成1、27
、又は28記載の化合物。
（構成３９）
R ¹ がアルコキシである、構成38記載の化合物。
（構成４０）
R ¹ がメトキシ、トリフルオロメチル、クロロ、又はフルオロである、構成38記載の化合
物。
（構成４１）
R ¹ がメトキシである、構成40記載の化合物。
（構成４２）
前記化合物が:
（化４８）

である、構成40記載の化合物。
（構成４３）
構成1〜42のいずれか一項記載の化合物及び医薬として許容し得る賦形剤を含む医薬組
成物。
（構成４４）
増殖性障害を治療する方法であって、該障害を有する患者に、構成1〜42のいずれか一
項記載の化合物又は構成43記載の組成物の治療有効量を投与することを含む、前記方法。
（構成４５）
式P1の化合物:
（化４９）

(式中、Aは、アリーレン又はヘテロアリーレンであり、かつRLは反応性リンカーである)
。
（構成４６）
前記式P1の化合物が式P1Bの化合物である、構成45記載の化合物:
（化５０）

(式中、
Aは:
（化５１）

であり、
ここで:
R ¹ は、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アリール、アルカリール、ア
ラルキル、ハロ、ハロアルキル、ハロアルコキシ、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキ
ル、シアノ、ニトロ、
（化５２）

又はアジドであり、
ここで、R ^A は、アルキルであり;
nは、0〜4の整数であり;
mは、0〜3の整数であり;
pは、0〜6の整数であり;かつ
qは、0〜5の整数であり;かつ
SP ^R は、反応性スペーサーである)。
（構成４７）
前記式P1の化合物が式P1Hの化合物である、構成45記載の化合物:
（化５３）

(式中:
R ¹ は、水素原子、アルコキシ、ハロ、ハロアルキル、又はトリフルオロメチルであり;
かつ
bは、2〜8の整数である)。
（構成４８）
R ¹ がアルコキシ又はハロアルキルである、構成47記載の化合物。
（構成４９）
R ¹ がメトキシ又はトリフルオロメチルである、構成48記載の化合物。
（構成５０）
R ¹ がメトキシである、構成48記載の化合物。
（構成５１）
前記式P1の化合物が式P1Iの化合物である、構成45記載の化合物:
（化５４）

(式中:
R ¹ は、水素原子、アルコキシ、ハロ、ハロアルキル、又はトリフルオロメチルであり;
かつ
bは、2〜8の整数である)。
（構成５２）
前記式P1の化合物が式P1Jの化合物である、構成45記載の化合物:
（化５５）

(式中:
R ¹ は、水素原子、アルコキシ、ハロ、ハロアルキル、又はトリフルオロメチルであり;
かつ
bは、2〜8の整数である)。
（構成５３）
前記式P1の化合物が式P1N又はP1Uの化合物である、構成45記載の化合物:
（化５６）

(式中、R ^N は、水素原子又はアルキルであり、R ^M はアルキルであり、R ¹ は、水素原子、ア
ルコキシ、ハロ、ハロアルキル、又はトリフルオロメチルであり、かつbは、2〜8の整数
である)。
（構成５４）
前記式P1の化合物が式P1P又は式P1Tの化合物である、構成45記載の化合物:
（化５７）

(式中、R ^N は、水素原子又はアルキルであり、R ^M はアルキルであり、R ¹ は、水素原子、ア
ルコキシ、ハロ、ハロアルキル、又はトリフルオロメチルであり、かつbは、2〜8の整数
である)。
（構成５５）
前記式P1の化合物が式P1Qの化合物である、構成45記載の化合物:
（化５８）

(式中、R ¹ は、水素原子、アルコキシ、ハロ、ハロアルキル、又はトリフルオロメチルで
あり、かつbは、2〜8の整数である)。
（構成５６）
前記式P1の化合物が式P1V又は式P1Wの化合物である、構成45記載の化合物:
（化５９）

(式中、R ¹ は、水素原子、アルコキシ、ハロ、ハロアルキル、又はトリフルオロメチルで
あり、gは、2〜8の整数であり、かつbは、2〜8の整数である)。
（構成５７）
前記式P1の化合物が式P1Kの化合物である、構成45記載の化合物:
（化６０）

(式中、R ¹ は、水素原子、アルコキシ、ハロ、ハロアルキル、又はトリフルオロメチルで
ある)。
（構成５８）
前記化合物が:
（化６１）

である、構成45記載の化合物。
（構成５９）
前記化合物が:
（化６２）

である、構成58記載の化合物。
（構成６０）
式(I)の化合物:
（化６３）

を調製する方法であって、式P1の化合物:
（化６４）

を結合剤とコンジュゲーション条件下で接触させることを含み、
ここで、Aがアリーレン又はヘテロアリーレンであり;
Lがリンカーであり;
BAが結合剤であり;
kが1〜10の整数であり;かつ
RLが反応性リンカーである、
前記方法。
（構成６１）
前記式P1の化合物が、式P2の化合物:
（化６５）

を、式P3の化合物:
（化６６）

と、アミド合成条件下で接触させることにより調製され、
ここで、RLが反応性リンカーであり、Aがアリーレン又はヘテロアリーレンである、
構成60記載の方法。
（構成６２）
式PP5の化合物又はその塩:
（化６７）

(式中、Aは、アリーレン又はヘテロアリーレンである)。
（構成６３）
前記化合物が式PP5Aの化合物である、構成62記載の化合物:
（化６８）

(式中:
R ¹ は、出現する毎に独立に、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、ハロア
ルキル、ハロアルコキシ、ヘテロアルキル、アリール、アルカリール、アラルキル、ハロ
、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキル、シアノ、ニトロ、
（化６９）

又はアジドであり、
ここで、R ^A は、アルキルであり;
nは、0〜4の整数である)。
（構成６４）
前記化合物が、
（化７０）

から選択される化合物である、構成62記載の化合物。
（構成６５）
前記式P1の化合物が、式PP3の化合物:
（化７１）

を、式PP7の化合物:
（化７２）

と、アミド合成条件下で接触させることにより調製され、
ここで、SP ^R が反応性リンカーであり;
R ^AA1 がアミノ酸側鎖であり;
R ^AA1 がアミノ酸側鎖であり;かつ
Aがアリーレン又はヘテロアリーレンである、
構成60記載の方法。
（構成６６）
前記式PP3の化合物が、式PP5の化合物:
（化７３）

を還元剤と接触させることにより調製される、構成65記載の方法。
（構成６７）
前記還元剤が亜鉛末である、構成66記載の方法。
（構成６８）
式PP3の化合物:
（化７４）

を製造する方法であって:
(a)式P2の化合物
（化７５）

を式PP6の化合物:
（化７６）

と、アミド合成条件下で接触させて、式PP5の化合物:
（化７７）

を形成させること(ここで、Aは、アリーレン又はヘテロアリーレンである);及び
(b)該式PP5の化合物を還元剤と接触させることにより、該式PP5の化合物を還元して、
式PP3の化合物を形成させること
を含む、前記方法。
（構成６９）
前記還元剤が亜鉛である、構成68記載の方法。
（構成７０）
前記亜鉛が亜鉛末である、構成69記載の方法。
（構成７１）
Aが:
（化７８）

であり、
ここで:
R ¹ が、出現する毎に独立に、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アリー
ル、アルカリール、アラルキル、ハロ、ハロアルキル、ハロアルコキシ、ヘテロアリール
、ヘテロシクロアルキル、ヒドロキシル、シアノ、ニトロ、
（化７９）

又はアジドであり、
ここで、R ^A がアルキル又はヘテロアルキルであり;
nが0〜4の整数であり;
mが0〜3の整数であり;
pが0〜6の整数であり;かつ
qが0〜5の整数である、
構成68記載の方法。
（構成７２）
Aが:
（化８０）

である、構成71記載の方法。
（構成７３）
Aが:
（化８１）

であり、
ここで、nが0、1、又は2である、構成71〜72記載の方法。
（構成７４）
nが0である、構成71〜73記載の方法。
（構成７５）
R ¹ が、出現する毎に独立に、アルコキシ又はハロである、構成71〜73記載の方法。
（構成７６）
Aが:
（化８２）

であり、
ここで:
nが0、1、又は2であり;かつ
R ¹ が、出現する毎に独立に、アルキル、アルコキシ、ハロアルキル、又はハロである、
構成71〜73記載の方法。
（構成７７）
Aが:
（化８３）

であり、
ここで、nが0又は1であり;かつR ¹ がアルコキシ、ハロ、又はハロアルキルである、
構成71〜73記載の方法。
（構成７８）
Aが:
（化８４）

であり、ここで、nが0又は1であり;かつR ¹ がC _1-6 アルコキシ、ハロ、又はC _1-6 ハロアルキ
ルである、
構成71〜73記載の方法。
（構成７９）
Aが:
（化８５）

であり、
ここで、nが0又は1であり;かつR ¹ がC _1-6 アルコキシ、ハロ、又はC _1-6 ハロアルキルであ
る、
構成71〜73記載の方法。
（構成８０）
前記式PP5の化合物を還元して、式PP3の化合物を形成させることが酸の中で還元するこ
とを含む、構成68〜79のいずれか一項記載の方法。
（構成８１）
前記酸が酢酸、ギ酸、pTsOH、及びNH ₄ Clからなる群から選択される、構成80記載の方法
。
（構成８２）
以下の式を有する化合物:
（化８６）

(式中、Aは、アリーレン又はヘテロアリーレンであり、
L ¹ 及びL ² は、リンカーであり、
BAは結合剤であり、
kは、0〜30の整数であり、
tは、0〜8の整数である)。
（構成８３）
kとtの和が1〜8の整数と等しい、構成82記載の化合物。
（構成８４）
Aが:
（化８７）

であり、
ここで:
R ¹ が、出現する毎に独立に、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アリー
ル、アルカリール、アラルキル、ハロ、ハロアルキル、ハロアルコキシ、ヘテロアリール
、ヘテロシクロアルキル、シアノ、ニトロ、
（化８８）

又はアジドであり、
ここで、R ^A がアルキルであり;
nが0〜4の整数であり;
mが0〜3の整数であり;
pが0〜6の整数であり;かつ
qが0〜5の整数である、
構成82記載の化合物。
（構成８５）
L ¹ 又はL ² が:
（化８９）

であり、
ここで:
SPがスペーサーであり;
（化９０）

が前記結合剤との1以上の結合であり;
AA ¹ がアミノ酸であり;かつ
AA ² がアミノ酸である、
構成82〜84のいずれか一項記載の化合物。
（構成８６）
AA ¹ -AA ² が:バリン-シトルリン、シトルリン-バリン、リジン-フェニルアラニン、フェ
ニルアラニン-リジン、バリン-アスパラギン、アスパラギン-バリン、トレオニン-アスパ
ラギン、アスパラギン-トレオニン、セリン-アスパラギン、アスパラギン-セリン、フェ
ニルアラニン-アスパラギン、アスパラギン-フェニルアラニン、ロイシン-アスパラギン
、アスパラギン-ロイシン、イソロイシン-アスパラギン、アスパラギン-イソロイシン、
グリシン-アスパラギン、アスパラギン-グリシン、グルタミン酸-アスパラギン、アスパ
ラギン-グルタミン酸、シトルリン-アスパラギン、アスパラギン-シトルリン、アラニン-
アスパラギン、又はアスパラギン-アラニンである、構成84記載の化合物。
（構成８７）
L ¹ 又はL ² が:
（化９１）

であり、
ここで:
SPがスペーサーであり;
（化９２）

が前記結合剤との1以上の結合であり;
R ^AA1 がアミノ酸側鎖であり;かつ
R ^AA2 がアミノ酸側鎖である、
構成82〜86のいずれか一項記載の化合物。
（構成８８）
SPが:
（化９３）

であり、
ここで:
（化９４）

が前記結合剤との結合であり;かつ
bが2〜8の整数である、
構成87記載の化合物。
（構成８９）
L ¹ が、
（化９５）

であり、
ここで:
（化９６）

が前記結合剤との結合であり;かつbが2〜8の整数である、
構成87記載の化合物。
（構成９０）
L ² が、
（化９７）

であり、
ここで:
BAが抗体であり;
R ^N が水素原子又はアルキルであり;
R ^M がアルキルであり;
（化９８）

によって表される2つの結合が該抗体のシステインとの結合であり;かつbが2〜8の整数で
ある、
構成87記載の化合物。
（構成９１）
L ² が、
（化９９）

である、構成90記載の化合物。
（構成９２）
式(I)の抗体-薬物-コンジュゲート化合物を調製する方法であって:
(a)脱グリコシル化抗体又は非グリコシル化抗体を、式(PT1)の化合物:
（化１００）

と、トランスグルタミナーゼの存在下で反応させることを含み、
ここで:
Aがアリーレン又はヘテロアリーレンであり;かつ
Lがリンカーである、
前記方法。
（構成９３）
Aが:
（化１０１）

であり、
ここで:
R ¹ が、出現する毎に独立に、ハロ、ハロアルキル、ハロアルコキシ、ヒドロキシル、ア
ルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、ハロアルコキシ、アリール、アルカリー
ル、アラルキル、ヘテロアリール、ヘテロアルキル、ヘテロシクロアルキル、シアノ、ニ
トロ、
（化１０２）

又はアジドであり、
ここで、R ^A がアルキル又はヘテロアルキルであり;
nが0〜4の整数であり;
mが0〜3の整数であり;
pが0〜6の整数であり;かつ
qが0〜5の整数である、
構成92記載の方法。
（構成９４）
前記リンカーが:
（化１０３）

であり、
ここで:
一方の
（化１０４）

が前記ペイロードとの結合であり、もう一方の
（化１０５）

が前記結合剤との結合であり;かつ
bが2〜8の整数である、
構成92記載の方法。
（構成９５）
前記式(PT1)の化合物が、
（化１０６）

である、構成92記載の方法。
（構成９６）
工程(a)が、約7.0〜約8.0のpHで、少なくとも4時間である、構成92記載の方法。
（構成９７）
工程(a)の前記式(PT1)の化合物が、前記脱グリコシル化抗体又は非グリコシル化抗体と
比較して、少なくとも5モル濃度当量の濃度である、構成92記載の方法。
（構成９８）
工程(a)の前記トランスグルタミナーゼが、脱グリコシル化抗体又は非グリコシル化抗
体のミリグラム当たり1〜30Uで存在する、構成92記載の方法。
（構成９９）
前記抗体が、工程(a)の前に、ペプチド N-グリコシダーゼF(PNGアーゼF)で脱グリコシ
ル化される、構成92〜95のいずれか一項記載の方法。
（構成１００）
前記抗体が非グリコシル化されている、構成92〜95のいずれか一項記載の方法。
（構成１０１）
工程(a)の前記式(PT1)の化合物が以下の式によるものである、構成92〜97のいずれか一
項記載の方法:
（化１０７）

(式中、Aは:
（化１０８）

であり、
ここで:
R ¹ は、出現する毎に独立に、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アリー
ル、アルカリール、アラルキル、ハロ、ハロアルキル、ハロアルコキシ、ヘテロアリール
、ヘテロシクロアルキル、ヒドロキシル、シアノ、ニトロ、
（化１０９）

又はアジドであり、
ここで、R ^A は、アルキル又はヘテロアルキルであり;
nは、0〜4の整数であり;
mは、0〜3の整数であり;
pは、0〜6の整数であり;かつ
qは、0〜5の整数である)。
（構成１０２）
工程(a)の前記式(PT1)の化合物が:
（化１１０）

である、構成92〜98のいずれか一項記載の方法。
（構成１０３）
工程(a)が、水、緩衝水、食塩水、緩衝食塩水、及び有機化合物からなる群から選択さ
れる1以上の溶媒中で実施される、構成92〜102のいずれか一項記載の方法。
（構成１０４）
工程(a)が、リン酸塩、HEPES、又はMOPSで緩衝化された水の中で実施される、構成92〜
103のいずれか一項記載の方法。
（構成１０５）
(b)前記グルタミニル修飾抗体を反応性ペイロード化合物と反応させて、抗体-ペイロー
ドコンジュゲートを形成させること
をさらに含む、構成92〜104のいずれか一項記載の方法。
（構成１０６）
(b)前記グルタミニル修飾抗体を反応性リンカー-ペイロード化合物と反応させて、抗体
-リンカー-ペイロードコンジュゲートを形成させること
をさらに含む、構成92〜105のいずれか一項記載の方法。
（構成１０７）
(b)前記グルタミニル修飾抗体を反応性リンカー化合物と反応させて、抗体-リンカーコ
ンジュゲートを形成させること;及び
(c)該抗体-リンカーコンジュゲートを反応性ペイロード化合物と反応させて、抗体-リ
ンカー-ペイロードコンジュゲートを形成させること
をさらに含む、構成92〜105のいずれか一項記載の方法。
（構成１０８）
構成92〜104のいずれか一項記載の方法によって産生されるグルタミニル修飾抗体。
（構成１０９）
構成108記載の抗体及び1以上の医薬として許容し得る希釈剤、賦形剤、又は担体を含む
医薬組成物。
（構成１１０）
それを必要としている対象の状態を治療する方法であって、該対象に、構成108記載の
抗体の医薬として許容し得る量を投与することを含む、前記方法。
（構成１１１）
治療のための、構成108記載のグルタミニル修飾抗体。
（構成１１２）
癌の治療のための、構成108記載のグルタミニル修飾抗体。
（構成１１３）
前記化合物が、
（化１１１）

から選択される、構成27記載の化合物。
（構成１１４）
前記化合物が、
（化１１２）

から選択される、構成45記載の化合物。
（構成１１５）
（化１１３）

から選択され;かつ
tが1〜8の整数である、
抗体薬物コンジュゲート。

Claims

式(I)の化合物又はその医薬として許容し得る塩:

(式中:
Aは、アリーレン又はヘテロアリーレンであり;
Lは、リンカーであり;
BAは、結合剤であり;かつ
kは、1〜30の整数である)。
Aが:

であり、
ここで:
R¹が、出現する毎に独立に、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アリー
ル、アルカリール、アラルキル、ハロ、ハロアルキル、ハロアルコキシ、ヘテロアリール
、ヘテロシクロアルキル、ヒドロキシル、シアノ、ニトロ、

又はアジドであり、
ここで、R^Aが、アルキル又はヘテロアルキルであり;
nが、0〜4の整数であり;
mが、0〜3の整数であり;
pが、0〜6の整数であり;かつ
qが、0〜5の整数である、
請求項1記載の化合物。
Aが:

である、請求項1又は2記載の化合物。
Aが:

であり、
ここで、nが、0、1、又は2である、
請求項1〜3のいずれか一項記載の化合物。
nが0である、請求項1〜4のいずれか一項記載の化合物。
R¹が、出現する毎に独立に、アルコキシ又はハロである、請求項1〜4のいずれか一項記
載の化合物。
Lが:

であり、
ここで:
SPがスペーサーであり;

が前記結合剤との1以上の結合であり;
AA¹がアミノ酸であり;かつ
AA²がアミノ酸である、
請求項1〜6のいずれか一項記載の化合物。
AA¹-AA²が:バリン-シトルリン、シトルリン-バリン、リジン-フェニルアラニン、フェ
ニルアラニン-リジン、バリン-アスパラギン、アスパラギン-バリン、トレオニン-アスパ
ラギン、アスパラギン-トレオニン、セリン-アスパラギン、アスパラギン-セリン、フェ
ニルアラニン-アスパラギン、アスパラギン-フェニルアラニン、ロイシン-アスパラギン
、アスパラギン-ロイシン、イソロイシン-アスパラギン、アスパラギン-イソロイシン、
グリシン-アスパラギン、アスパラギン-グリシン、グルタミン酸-アスパラギン、アスパ
ラギン-グルタミン酸、シトルリン-アスパラギン、アスパラギン-シトルリン、アラニン-
アスパラギン、又はアスパラギン-アラニンである、請求項7記載の化合物。
Lが:

であり、
ここで:
SPがスペーサーであり;

が前記結合剤との1以上の結合であり;
R^AA1がアミノ酸側鎖であり;かつ
R^AA2がアミノ酸側鎖である、
請求項1〜6のいずれか一項記載の化合物。
Lが:

であり、
ここで:
SPがスペーサーであり;かつ

が前記結合剤との1以上の結合である、
請求項9記載の化合物。
SPがC_5-7アルキレンを含む、請求項7〜10のいずれか一項記載の化合物。
SPが:

であり、
ここで:

が前記結合剤との結合であり;かつ
bが2〜8の整数である、
請求項11記載の化合物。
Lが:

であり、
ここで:

が前記結合剤との結合であり;かつ
bが2〜8の整数である、
請求項1〜6のいずれか一項記載の化合物。
Lが:

であり、
ここで:
BAが抗体であり;
R^Nが水素原子又はアルキルであり;
R^Mがアルキルであり;

によって表される2つの結合が該抗体のシステインとの結合であり;かつ
bが2〜8の整数である、
請求項1〜6のいずれか一項記載の化合物。
Lが:

であり、
ここで、

が前記結合剤との結合である、
請求項13記載の化合物。
Lが:

であり、ここで、

が前記結合剤との結合である、
請求項1〜6のいずれか一項記載の化合物。
BAが抗体であり、かつ
Lが:

であり;
ここで、

によって表される2つの結合が該抗体のシステインとの結合である、
請求項1〜6のいずれか一項記載の化合物。
Lが:

であり;
ここで、

が前記結合剤との結合である、
請求項1〜6のいずれか一項記載の化合物。
Aが:

であり、
ここで:
R¹が、出現する毎に独立に、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アリー
ル、アルカリール、アラルキル、ハロ、ハロアルキル、ハロアルコキシ、ヘテロアリール
、ヘテロシクロアルキル、シアノ、ニトロ、

又はアジドであり、
ここで、R^Aがアルキルであり;
nが0〜4の整数であり;
mが0〜3の整数であり;
pが0〜6の整数であり;かつ
qが0〜5の整数であり;かつ
Lが:

であり、
ここで:
SPがスペーサーであり;

が前記結合剤との1以上の結合であり;
R^AA1がアミノ酸側鎖であり;かつ
R^AA2がアミノ酸側鎖である、
請求項1記載の化合物。
Aが:

であり;
ここで、R¹が、出現する毎に独立に、アルキル、アルコキシ、ハロアルキル、又はハロ
であり;かつ
Lが:

であり、
ここで:

が前記結合剤との結合であり;かつ
bが2〜8の整数である、
請求項1記載の化合物。
Aが:

であり、
ここで:
nが0、1、又は2であり;かつ
R¹が、出現する毎に独立に、アルキル、アルコキシ、ハロアルキル、又はハロであり、
Lが:

であり、
ここで:

が前記結合剤との結合である、
請求項1記載の化合物。
前記化合物が:

であり;
ここで:
Abが抗体であり;

が該抗体のシステインとの結合であり;

が該抗体のリジンとの結合であり;
kが1〜30の整数であり;かつ
tが1〜8の整数である、
請求項1記載の化合物。
前記化合物が:

である、請求項22記載の化合物。
tが1である、請求項1〜23のいずれか一項記載の化合物。
前記BAが抗体である、請求項1〜21のいずれか一項記載の化合物。
前記抗体が抗MUC16抗体又は抗PSMA抗体である、請求項1〜25のいずれか一項記載の化合
物。
式IIの化合物又はその医薬として許容し得る塩:

(式中、Aは、アリーレン又はヘテロアリーレンである)。
Aが:

であり、
ここで:
R¹が、出現する毎に独立に、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アリー
ル、アルカリール、アラルキル、ハロ、ハロアルキル、ハロアルコキシ、ヘテロアリール
、ヘテロシクロアルキル、シアノ、ニトロ、

又はアジドであり、
ここで、R^Aがアルキルであり;
nが0〜4の整数であり;
mが0〜3の整数であり;
pが0〜6の整数であり;かつ
qが0〜5の整数である、
請求項27記載の化合物。
前記式(II)の化合物が式(IIA)の化合物である、請求項28記載の化合物:

。
前記式(II)の化合物が式(IIB)の化合物である、請求項28記載の化合物:

。
前記式(II)の化合物が式(IIB2)の化合物である、請求項28記載の化合物:

。
前記式(II)の化合物が式(IIB3)の化合物である、請求項28記載の化合物:

。
R¹が、独立に、C_1-6アルコキシ、ハロアルキル、又はハロである、請求項28〜32のいず
れか一項記載の化合物。
R¹が、独立に、アルコキシ又はハロである、請求項28〜33のいずれか一項記載の化合物
。
n、m、p、及びqが0、1、又は2である、請求項28〜34のいずれか一項記載の化合物。
n、m、p、及びqが0である、請求項28〜35のいずれか一項記載の化合物。
前記化合物が:

である、請求項27記載の化合物。
R¹が、出現する毎に独立に、アルコキシ、ハロアルキル、又はハロである、請求項1、2
7、又は28記載の化合物。
R¹がアルコキシである、請求項38記載の化合物。
R¹がメトキシ、トリフルオロメチル、クロロ、又はフルオロである、請求項38記載の化
合物。
R¹がメトキシである、請求項40記載の化合物。
前記化合物が:

である、請求項40記載の化合物。
請求項1〜42のいずれか一項記載の化合物及び医薬として許容し得る賦形剤を含む医薬
組成物。
増殖性障害を治療する方法であって、該障害を有する患者に、請求項1〜42のいずれか
一項記載の化合物又は請求項43記載の組成物の治療有効量を投与することを含む、前記方
法。
式P1の化合物:

(式中、Aは、アリーレン又はヘテロアリーレンであり、かつRLは反応性リンカーである)
。
前記式P1の化合物が式P1Bの化合物である、請求項45記載の化合物:

(式中、
Aは:

であり、
ここで:
R¹は、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アリール、アルカリール、ア
ラルキル、ハロ、ハロアルキル、ハロアルコキシ、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキ
ル、シアノ、ニトロ、

又はアジドであり、
ここで、R^Aは、アルキルであり;
nは、0〜4の整数であり;
mは、0〜3の整数であり;
pは、0〜6の整数であり;かつ
qは、0〜5の整数であり;かつ
SP^Rは、反応性スペーサーである)。
前記式P1の化合物が式P1Hの化合物である、請求項45記載の化合物:

(式中:
R¹は、水素原子、アルコキシ、ハロ、ハロアルキル、又はトリフルオロメチルであり;
かつ
bは、2〜8の整数である)。
R¹がアルコキシ又はハロアルキルである、請求項47記載の化合物。
R¹がメトキシ又はトリフルオロメチルである、請求項48記載の化合物。
R¹がメトキシである、請求項48記載の化合物。
前記式P1の化合物が式P1Iの化合物である、請求項45記載の化合物:

(式中:
R¹は、水素原子、アルコキシ、ハロ、ハロアルキル、又はトリフルオロメチルであり;
かつ
bは、2〜8の整数である)。
前記式P1の化合物が式P1Jの化合物である、請求項45記載の化合物:

(式中:
R¹は、水素原子、アルコキシ、ハロ、ハロアルキル、又はトリフルオロメチルであり;
かつ
bは、2〜8の整数である)。
前記式P1の化合物が式P1N又はP1Uの化合物である、請求項45記載の化合物:

(式中、R^Nは、水素原子又はアルキルであり、R^Mはアルキルであり、R¹は、水素原子、ア
ルコキシ、ハロ、ハロアルキル、又はトリフルオロメチルであり、かつbは、2〜8の整数
である)。
前記式P1の化合物が式P1P又は式P1Tの化合物である、請求項45記載の化合物:

(式中、R^Nは、水素原子又はアルキルであり、R^Mはアルキルであり、R¹は、水素原子、ア
ルコキシ、ハロ、ハロアルキル、又はトリフルオロメチルであり、かつbは、2〜8の整数
である)。
前記式P1の化合物が式P1Qの化合物である、請求項45記載の化合物。:

(式中、R¹は、水素原子、アルコキシ、ハロ、ハロアルキル、又はトリフルオロメチルで
あり、かつbは、2〜8の整数である)。
前記式P1の化合物が式P1V又は式P1Wの化合物である、請求項45記載の化合物:

(式中、R¹は、水素原子、アルコキシ、ハロ、ハロアルキル、又はトリフルオロメチルで
あり、gは、2〜8の整数であり、かつbは、2〜8の整数である)。
前記式P1の化合物が式P1Kの化合物である、請求項45記載の化合物:

(式中、R¹は、水素原子、アルコキシ、ハロ、ハロアルキル、又はトリフルオロメチルで
ある)。
前記化合物が:

である、請求項45記載の化合物。
前記化合物が:

である、請求項58記載の化合物。
式(I)の化合物:

を調製する方法であって、式P1の化合物:

を結合剤とコンジュゲーション条件下で接触させることを含み、
ここで、Aがアリーレン又はヘテロアリーレンであり;
Lがリンカーであり;
BAが結合剤であり;
kが1〜10の整数であり;かつ
RLが反応性リンカーである、
前記方法。
前記式P1の化合物が、式P2の化合物:

を、式P3の化合物:

と、アミド合成条件下で接触させることにより調製され、
ここで、RLが反応性リンカーであり、Aがアリーレン又はヘテロアリーレンである、
請求項60記載の方法。
式PP5の化合物又はその塩:

(式中、Aは、アリーレン又はヘテロアリーレンである)。
前記化合物が式PP5Aの化合物である、請求項62記載の化合物:

(式中:
R¹は、出現する毎に独立に、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、ハロア
ルキル、ハロアルコキシ、ヘテロアルキル、アリール、アルカリール、アラルキル、ハロ
、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキル、シアノ、ニトロ、

又はアジドであり、
ここで、R^Aは、アルキルであり;
nは、0〜4の整数である)。
前記化合物が、

から選択される化合物である、請求項62記載の化合物。
前記式P1の化合物が、式PP3の化合物:

を、式PP7の化合物:

と、アミド合成条件下で接触させることにより調製され、
ここで、SP^Rが反応性リンカーであり;
R^AA1がアミノ酸側鎖であり;
R^AA1がアミノ酸側鎖であり;かつ
Aがアリーレン又はヘテロアリーレンである、
請求項60記載の方法。
前記式PP3の化合物が、式PP5の化合物:

を還元剤と接触させることにより調製される、請求項65記載の方法。
前記還元剤が亜鉛末である、請求項66記載の方法。
式PP3の化合物:

を製造する方法であって:
(a)式P2の化合物

を式PP6の化合物:

と、アミド合成条件下で接触させて、式PP5の化合物:

を形成させること(ここで、Aは、アリーレン又はヘテロアリーレンである);及び
(b)該式PP5の化合物を還元剤と接触させることにより、該式PP5の化合物を還元して、
式PP3の化合物を形成させること
を含む、前記方法。
前記還元剤が亜鉛である、請求項68記載の方法。
前記亜鉛が亜鉛末である、請求項69記載の方法。
Aが:

であり、
ここで:
R¹が、出現する毎に独立に、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アリー
ル、アルカリール、アラルキル、ハロ、ハロアルキル、ハロアルコキシ、ヘテロアリール
、ヘテロシクロアルキル、ヒドロキシル、シアノ、ニトロ、

又はアジドであり、
ここで、R^Aがアルキル又はヘテロアルキルであり;
nが0〜4の整数であり;
mが0〜3の整数であり;
pが0〜6の整数であり;かつ
qが0〜5の整数である、
請求項68記載の方法。
Aが:

である、請求項71記載の方法。
Aが:

であり、
ここで、nが0、1、又は2である、請求項71〜72記載の方法。
nが0である、請求項71〜73記載の方法。
R¹が、出現する毎に独立に、アルコキシ又はハロである、請求項71〜73記載の方法。
Aが:

であり、
ここで:
nが0、1、又は2であり;かつ
R¹が、出現する毎に独立に、アルキル、アルコキシ、ハロアルキル、又はハロである、
請求項71〜73記載の方法。
Aが:

であり、
ここで、nが0又は1であり;かつR¹がアルコキシ、ハロ、又はハロアルキルである、
請求項71〜73記載の方法。
Aが:

であり、ここで、nが0又は1であり;かつR¹がC_1-6アルコキシ、ハロ、又はC_1-6ハロアルキ
ルである、
請求項71〜73記載の方法。
Aが:

であり、
ここで、nが0又は1であり;かつR¹がC_1-6アルコキシ、ハロ、又はC_1-6ハロアルキルであ
る、
請求項71〜73記載の方法。
前記式PP5の化合物を還元して、式PP3の化合物を形成させることが酸の中で還元するこ
とを含む、請求項68〜79のいずれか一項記載の方法。
前記酸が酢酸、ギ酸、pTsOH、及びNH₄Clからなる群から選択される、請求項80記載の方
法。
以下の式を有する化合物:

(式中、Aは、アリーレン又はヘテロアリーレンであり、
L¹及びL²は、リンカーであり、
BAは結合剤であり、
kは、0〜30の整数であり、
tは、0〜8の整数である)。
kとtの和が1〜8の整数と等しい、請求項82記載の化合物。
Aが:

であり、
ここで:
R¹が、出現する毎に独立に、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アリー
ル、アルカリール、アラルキル、ハロ、ハロアルキル、ハロアルコキシ、ヘテロアリール
、ヘテロシクロアルキル、シアノ、ニトロ、

又はアジドであり、
ここで、R^Aがアルキルであり;
nが0〜4の整数であり;
mが0〜3の整数であり;
pが0〜6の整数であり;かつ
qが0〜5の整数である、
請求項82記載の化合物。
L¹又はL²が:

であり、
ここで:
SPがスペーサーであり;

が前記結合剤との1以上の結合であり;
AA¹がアミノ酸であり;かつ
AA²がアミノ酸である、
請求項82〜84のいずれか一項記載の化合物。
AA¹-AA²が:バリン-シトルリン、シトルリン-バリン、リジン-フェニルアラニン、フェ
ニルアラニン-リジン、バリン-アスパラギン、アスパラギン-バリン、トレオニン-アスパ
ラギン、アスパラギン-トレオニン、セリン-アスパラギン、アスパラギン-セリン、フェ
ニルアラニン-アスパラギン、アスパラギン-フェニルアラニン、ロイシン-アスパラギン
、アスパラギン-ロイシン、イソロイシン-アスパラギン、アスパラギン-イソロイシン、
グリシン-アスパラギン、アスパラギン-グリシン、グルタミン酸-アスパラギン、アスパ
ラギン-グルタミン酸、シトルリン-アスパラギン、アスパラギン-シトルリン、アラニン-
アスパラギン、又はアスパラギン-アラニンである、請求項84記載の化合物。
L¹又はL²が:

であり、
ここで:
SPがスペーサーであり;

が前記結合剤との1以上の結合であり;
R^AA1がアミノ酸側鎖であり;かつ
R^AA2がアミノ酸側鎖である、
請求項82〜86のいずれか一項記載の化合物。
SPが:

であり、
ここで:

が前記結合剤との結合であり;かつ
bが2〜8の整数である、
請求項87記載の化合物。
L¹が、

であり、
ここで:

が前記結合剤との結合であり;かつbが2〜8の整数である、
請求項87記載の化合物。
L²が、

であり、
ここで:
BAが抗体であり;
R^Nが水素原子又はアルキルであり;
R^Mがアルキルであり;

によって表される2つの結合が該抗体のシステインとの結合であり;かつbが2〜8の整数で
ある、
請求項87記載の化合物。
L²が、

である、請求項90記載の化合物。
式(I)の抗体-薬物-コンジュゲート化合物を調製する方法であって:
(a)脱グリコシル化抗体又は非グリコシル化抗体を、式(PT1)の化合物:

と、トランスグルタミナーゼの存在下で反応させることを含み、
ここで:
Aがアリーレン又はヘテロアリーレンであり;かつ
Lがリンカーである、
前記方法。
Aが:

であり、
ここで:
R¹が、出現する毎に独立に、ハロ、ハロアルキル、ハロアルコキシ、ヒドロキシル、ア
ルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、ハロアルコキシ、アリール、アルカリー
ル、アラルキル、ヘテロアリール、ヘテロアルキル、ヘテロシクロアルキル、シアノ、ニ
トロ、

又はアジドであり、
ここで、R^Aがアルキル又はヘテロアルキルであり;
nが0〜4の整数であり;
mが0〜3の整数であり;
pが0〜6の整数であり;かつ
qが0〜5の整数である、
請求項92記載の方法。
前記リンカーが:

であり、
ここで:
一方の

が前記ペイロードとの結合であり、もう一方の

が前記結合剤との結合であり;かつ
bが2〜8の整数である、
請求項92記載の方法。
前記式(PT1)の化合物が、

である、請求項92記載の方法。
工程(a)が、約7.0〜約8.0のpHで、少なくとも4時間である、請求項92記載の方法。
工程(a)の前記式(PT1)の化合物が、前記脱グリコシル化抗体又は非グリコシル化抗体と
比較して、少なくとも5モル濃度当量の濃度である、請求項92記載の方法。
工程(a)の前記トランスグルタミナーゼが、脱グリコシル化抗体又は非グリコシル化抗
体のミリグラム当たり1〜30Uで存在する、請求項92記載の方法。
前記抗体が、工程(a)の前に、ペプチド N-グリコシダーゼF(PNGアーゼF)で脱グリコシ
ル化される、請求項92〜95のいずれか一項記載の方法。
前記抗体が非グリコシル化されている、請求項92〜95のいずれか一項記載の方法。
工程(a)の前記式(PT1)の化合物が以下の式によるものである、請求項92〜97のいずれか
一項記載の方法:

(式中、Aは:

であり、
ここで:
R¹は、出現する毎に独立に、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アリー
ル、アルカリール、アラルキル、ハロ、ハロアルキル、ハロアルコキシ、ヘテロアリール
、ヘテロシクロアルキル、ヒドロキシル、シアノ、ニトロ、

又はアジドであり、
ここで、R^Aは、アルキル又はヘテロアルキルであり;
nは、0〜4の整数であり;
mは、0〜3の整数であり;
pは、0〜6の整数であり;かつ
qは、0〜5の整数である)。
工程(a)の前記式(PT1)の化合物が:

である、請求項92〜98のいずれか一項記載の方法。
工程(a)が、水、緩衝水、食塩水、緩衝食塩水、及び有機化合物からなる群から選択さ
れる1以上の溶媒中で実施される、請求項92〜102のいずれか一項記載の方法。
工程(a)が、リン酸塩、HEPES、又はMOPSで緩衝化された水の中で実施される、請求項92
〜103のいずれか一項記載の方法。
(b)前記グルタミニル修飾抗体を反応性ペイロード化合物と反応させて、抗体-ペイロー
ドコンジュゲートを形成させること
をさらに含む、請求項92〜104のいずれか一項記載の方法。
(b)前記グルタミニル修飾抗体を反応性リンカー-ペイロード化合物と反応させて、抗体
-リンカー-ペイロードコンジュゲートを形成させること
をさらに含む、請求項92〜105のいずれか一項記載の方法。
(b)前記グルタミニル修飾抗体を反応性リンカー化合物と反応させて、抗体-リンカーコ
ンジュゲートを形成させること;及び
(c)該抗体-リンカーコンジュゲートを反応性ペイロード化合物と反応させて、抗体-リ
ンカー-ペイロードコンジュゲートを形成させること
をさらに含む、請求項92〜105のいずれか一項記載の方法。
請求項92〜104のいずれか一項記載の方法によって産生されるグルタミニル修飾抗体。
請求項108記載の抗体及び1以上の医薬として許容し得る希釈剤、賦形剤、又は担体を含
む医薬組成物。
それを必要としている対象の状態を治療する方法であって、該対象に、請求項108記載
の抗体の医薬として許容し得る量を投与することを含む、前記方法。
治療のための、請求項108記載のグルタミニル修飾抗体。
癌の治療のための、請求項108記載のグルタミニル修飾抗体。
前記化合物が、

から選択される、請求項27記載の化合物。
前記化合物が、

から選択される、請求項45記載の化合物。
から選択され;かつ
tが1〜8の整数である、
抗体薬物コンジュゲート。