JP2021038980A - Afp−l3測定方法及びafp−l3測定キット、並びに、これらに用いるブロック化標識レクチン - Google Patents
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Abstract
Description
(1)試料中のAFP−L3を測定する方法であり、
第1の水溶性高分子からなる水溶性担体と前記水溶性担体に固定された標識物質及びレンズマメレクチンとを備えるブロック化標識レクチンと、前記試料と、を接触させる測定工程を含む、AFP−L3測定方法。
(2)前記水溶性担体に固定されていない遊離レンズマメレクチンの存在下で前記測定工程を実施する、(1)に記載のAFP−L3測定方法。
(3)第2の水溶性高分子の存在下で前記測定工程を実施する、(1)又は(2)に記載のAFP−L3測定方法。
(4)前記ブロック化標識レクチンが、第1の水溶性高分子の重量平均分子量が200,000以上である高分子量ブロック化標識レクチンと、第1の水溶性高分子の重量平均分子量が100,000未満である低分子量ブロック化標識レクチンと、の組み合わせである、(1)〜(3)のうちのいずれかに記載のAFP−L3測定方法。
(5)前記測定工程が、標識物質及びレンズマメレクチンを備える標識化レクチンと、前記試料と、を接触させる工程をさらに含む、(1)〜(4)のうちのいずれかに記載のAFP−L3測定方法。
(6)(1)〜(5)のうちのいずれかに記載のAFP−L3測定方法に用いるための、第1の水溶性高分子からなる水溶性担体と前記水溶性担体に固定された標識物質及びレクチンとを備える、ブロック化標識レクチン。
(7)試料中のAFP−L3を測定するためのキットであり、(6)に記載のブロック化標識レクチンを含む、AFP−L3測定キット。
(8)前記ブロック化標識レクチンが、第1の水溶性高分子の重量平均分子量が200,000以上である高分子量ブロック化標識レクチンと、第1の水溶性高分子の重量平均分子量が100,000未満である低分子量ブロック化標識レクチンと、の組み合わせである、(7)に記載のAFP−L3測定キット。
(9)前記水溶性担体に固定されていない遊離レンズマメレクチンをさらに含む、(7)又は(8)に記載のAFP−L3測定キット。
(10)第2の水溶性高分子をさらに含む、(7)〜(9)のうちのいずれかに記載のAFP−L3測定キット。
(11)標識物質及びレンズマメレクチンを備える標識化レクチンをさらに含む、(7)〜(10)のうちのいずれかに記載のAFP−L3測定キット。
第1の水溶性高分子からなる水溶性担体と前記水溶性担体に固定された標識物質及びレンズマメレクチンとを備えるブロック化標識レクチンと、前記試料と、を接触させる測定工程を含む、
ことを特徴とする方法である。また、本発明のAFP−L3測定キットは、試料中のAFP−L3を測定するためのキットであり、前記ブロック化標識レクチンを含むことを特徴とするキットである。さらに、本発明のブロック化標識レクチンは、上記本発明のAFP−L3測定方法及びAFP−L3測定キットに用いるための上記のブロック化標識レクチンである。
本発明のAFP−L3測定方法に用いられる「試料」としては、AFP−L3が存在し得る試料である限り特に制限はない。一般的には、診断対象等、目的のAFP−L3を測定する対象(好ましくはヒト)から採取された血清、血漿、全血、尿、便、口腔粘膜、咽頭粘膜、腸管粘膜、及び各種生検試料等が挙げられる。本発明に係る試料として好ましくは、水性試料であり、血清又は血漿である。これらの試料は、必要に応じて希釈したものであってもよい。
本発明において、「AFP−L3」とは、α−フェトプロテイン(AFP)であって、AFPが一つ有するN型糖鎖にコアフコースが付加された糖鎖構造(二分岐型複合糖鎖の還元末端側のN−アセチルグルコサミンにα1−6の形式でフコースが結合した構造)を持つα−フェトプロテインL3(AFP−L3)のことを示す。AFP−L3は、血清中のAFP濃度とは独立の指標として、肝細胞がんの検出、悪性度判定、治療効果判定等のための指標となることが知られている。
本発明において、「ブロック化標識レクチン」とは、水溶性高分子からなる水溶性担体と前記水溶性担体に固定された標識物質及びレンズマメレクチンとを備える複合体であって、水溶性担体と標識物質とレンズマメレクチンとが直接的又は間接的に結合した結合体である。本発明のブロック化標識レクチンに含まれるレンズマメレクチンとしては、上述のとおりである。
本発明のブロック化標識レクチンに含まれる水溶性担体は、主に前記標識物質及びレンズマメレクチンを担持する担体として機能するものであり、水溶性高分子からなる。本発明に係る水溶性担体を構成する水溶性高分子(以下、「第1の水溶性高分子」という)としては、前記標識物質及びレンズマメレクチンを固定させて担持できる水溶性高分子である限り特に制限はない。本発明において、「水溶性高分子」とは、常温常圧下で水に対する溶解度が0.01g/mLを超える、好ましくは0.05g/mL以上である、より好ましくは0.1g/mL以上である高分子化合物を示す。
本発明のブロック化標識レクチンに含まれる標識物質は、主に前記ブロック化標識レクチンの標識として機能するものであり、公知の免疫学的測定において標識物質として用いられているものを特に制限なく用いることができる。
本発明のブロック化標識レクチンにおいて、前記標識物質の含有量としては特に制限されず、測定機構等に応じて適宜調整することができるが、測定感度をより向上させるために、第1の水溶性高分子1分子に結合する標識物質の分子数ができるだけ多くなるように設定することが好ましく、例えば、前記標識物質が酵素である場合、第1の水溶性高分子の質量(第1の水溶性高分子が2種以上の組み合わせである場合にはそれらの合計、以下同じ)100質量部に対する標識物質の質量(標識物質が2種以上の組み合わせである場合にはそれらの合計)が、100〜1,000質量部であることが好ましく、300〜800質量部であることがより好ましい。
本発明のAFP−L3測定方法は、上記本発明のブロック化標識レクチンと、前記試料と、を接触させる測定工程を含む。本発明において、「測定」には、AFP−L3の存在の有無の確認をする検出の他、AFP−L3の量の定量又は半定量が含まれる。
本発明のAFP−L3測定方法においては、AFP−L3をレンズマメレクチンを用いて測定する前に、前記試料に対して、下記の精製処理:
非水溶性担体及び前記非水溶性担体に固定された分子を備え、かつ、前記分子がAFP−L3を捕捉可能な分子である捕捉担体と、前記試料と、を接触させ、AFP−L3を前記捕捉担体に捕捉させる捕捉工程と、
前記捕捉担体に結合していない夾雑物を除去する洗浄工程と、
前記捕捉担体からAFP−L3を遊離させて調製試料を得る遊離工程と、
を含む処理を施すことが好ましい。
本発明において、「捕捉担体」とは、非水溶性担体と前記非水溶性担体に固定された分子とを備える複合体であって、前記分子がAFP−L3を捕捉可能な分子であり、前記非水溶性担体と前記分子とが直接的又は間接的に結合した結合体である。
本発明において、「AFP−L3を捕捉可能な分子」とは、AFP−L3と結合可能であり、該AFP−L3を対象物質として捕捉可能な分子(以下、場合により「AFP−L3捕捉分子」という)である。前記AFP−L3捕捉分子としては、AFP−L3への結合能を有する限り特に制限はなく、抗体、結合タンパク質(プロテインA、プロテインG、プロテインL等)、レセプタータンパク質、核酸等が挙げられる。前記抗体としては、ポリクローナル抗体であってもモノクローナル抗体であってもよい。また、本発明において、「抗体」には、完全な抗体の他、抗体断片(例えば、Fab、Fab’、F(ab’)2、Fv、単鎖抗体、ダイアボディー等)や抗体の可変領域を結合させた低分子化抗体も含まれる。なお、精製工程においては、特に対象物質以外の糖含有成分を洗浄除去することが望ましいため、前記AFP−L3捕捉分子からは、糖鎖結合性を有するレクチン(レンズマメレクチン)は除くことが好ましい。
前記捕捉担体に含まれる非水溶性担体は、主に前記AFP−L3捕捉分子を担持し、固相化する担体として機能するものであり、非水溶性の物質である。本発明において、「非水溶性の物質」とは、常温常圧下において水に不溶(水に対する溶解度が0.001g/mL以下、好ましくは0.0001g/mL以下、以下同様)である物質を示す。
前記捕捉担体において、前記AFP−L3捕捉分子の含有量としては特に制限されず、該AFP−L3捕捉分子とAFP−L3との結合のしやすさ等に応じて適宜調整することができるが、例えば、前記非水溶性担体(好ましくは粒子)の質量(非水溶性担体が2種以上の組み合わせである場合にはそれらの合計)100質量部に対するAFP−L3捕捉分子の質量(AFP−L3捕捉分子が2種以上の組み合わせである場合にはそれらの合計)が、0.1〜10質量部であることが好ましく、1〜5質量部であることがより好ましい。
前記捕捉工程においては、前記捕捉担体と前記試料とを接触させ、AFP−L3と前記AFP−L3捕捉分子との結合を介して前記AFP−L3を前記捕捉担体に捕捉させる。前記捕捉担体と前記試料とを接触させる方法としては、特に制限されず、適宜従来公知の方法又はそれに準じた方法を採用することができ、例えば、前記非水溶性担体がプレートで前記捕捉担体がAFP−L3捕捉分子固定化プレートである場合にはこれに前記試料を注入する方法や、前記非水溶性担体が粒子で前記捕捉担体がAFP−L3捕捉分子固定化粒子である場合には前記試料中に前記AFP−L3捕捉分子固定化粒子を添加する方法が挙げられる。
前記洗浄工程においては、前記捕捉担体に結合した物質(試料中にAFP−L3が含まれる場合には少なくともこれを含む)と、それ以外の前記捕捉担体に結合していない(捕捉されていない)夾雑物とを分離し、前記夾雑物を除去する。前記夾雑物を除去する方法としては、特に制限されず、適宜従来公知の方法又はそれに準じた方法を採用することができ、例えば、前記非水溶性担体がプレートで前記捕捉担体がAFP−L3捕捉分子固定化プレートである場合には前記捕捉工程の後にプレート上から液相(上清)を除去する方法や、前記非水溶性担体が粒子で前記捕捉担体がAFP−L3捕捉分子固定化粒子である場合には前記捕捉工程の後に前記粒子を遠心や集磁によって回収して液相(上清)を除去する方法が挙げられる。また、前記洗浄工程においては、次いで、必要に応じて、洗浄液の注入及び除去を繰り返してもよい。前記洗浄液としては、例えば、中性(好ましくは、pH6〜9)の公知の緩衝液(ナトリウムリン酸バッファー、MES、Tris、CFB、、MOPS、PIPES、HEPES、トリシンバッファー、ビシンバッファー、グリシンバッファー等)が挙げられ、また、BSA等の安定化蛋白や界面活性剤等が添加されたものであってもよい。
前記遊離工程においては、前記捕捉担体に結合したAFP−L3を、前記捕捉担体から遊離させ、測定工程に供するための試料として、再遊離したAFP−L3を含有する調製試料を得る。前記捕捉担体からAFP−L3を遊離させる方法としては、特に制限されず、例えば、反応系を酸性又はアルカリ性にする方法;前記リンカーとして光切断型リンカーを用いた場合には、光照射によってこれを切断する方法;界面活性剤を用いた方法;タンパク質変性剤を用いた方法;熱を加える方法;上記の方法を複合的に用いた方法等が挙げられる。
本発明のAFP−L3測定の測定方法の原理としては、免疫学的測定方法のサンドイッチ法、競合法、及び免疫比濁法と同様の原理をいずれも採用することができる。本発明のAFP−L3測定方法において、前記試料中のAFP−L3を定量する場合には、一般的に、ELISA、CLEIA(化学発光酵素免疫測定法)等の、マイクロプレートや粒子を担体とする方法を採用し、前記標識物質の種類に応じた検出・定量を行い、標準試料による測定値との比較をすることにより行うことができる。一方、より簡便かつ迅速にAFP−L3を検出する観点からは、サンドイッチ法として、例えば、イムノクロマト等の方法を採用することができる。
本発明のAFP−L3測定方法において、前記測定工程、すなわち、前記ブロック化標識レクチンとAFP−L3との反応は、水溶性高分子の存在下で行うこと、つまり、該水溶性高分子と前記ブロック化標識レクチンと前記試料(AFP−L3)とが共存する条件下で行うことが好ましい。
本発明のAFP−L3測定方法においては、前記測定工程が、標識物質及びレンズマメレクチンを備える標識化レクチンと、前記試料と、を接触させる工程をさらに含むこと、つまり、該標識化レクチンと前記ブロック化標識レクチンと前記試料(AFP−L3)とが共存する条件下で、前記ブロック化標識レクチンとAFP−L3とを反応させると共に、前記標識化レクチンとAFP−L3とを反応させることが好ましい。本発明のAFP−L3の測定方法では、前記測定工程において標識化レクチンを共存させることにより、測定感度をさらに向上させることが可能となる。これは、反応系に標識されたレンズマメレクチンが余剰に存在することによって、AFP−L3とブロック化標識レクチンとの反応が結合方向により促進されるため、また、高分子体であるブロック化標識レクチンが立体障害によって結合できないAFP−L3に対してでも低分子である標識化レクチンでは結合が可能となるため、であると本発明者らは推察する。
本発明のAFP−L3測定方法において、前記測定工程、すなわち、前記ブロック化標識レクチンとAFP−L3との反応は、遊離レンズマメレクチンの存在下で行うこと、つまり、該遊離レンズマメレクチンと前記ブロック化標識レクチンと前記試料(AFP−L3)とが共存する条件下で行うことが好ましい。
本発明のAFP−L3測定キットは、構成試薬として、少なくとも、本発明のブロック化標識レクチンを備える。また、第2の水溶性高分子、前記標識化レクチン、前記遊離レンズマメレクチン、及び前記捕捉担体からなる群から選択される少なくとも1種をさらに備えることが好ましい。これらは、それぞれ独立に、固体(粉末)状であっても緩衝液に溶解された液体状であってもよい。液体状である場合、各溶液(標品)におけるブロック化標識レクチン、前記標識化レクチン、及び前記捕捉担体の濃度は、特に限定されないが、過剰に添加すると場合により非特異的なシグナルが増加する傾向にある観点から、それぞれ独立に、0.01〜10μg/mLであることが好ましく、0.1〜5.0μg/mLであることがより好ましく、0.5〜3.0μg/mLであることがさらに好ましい。また、第2の水溶性高分子の濃度は、0.01〜10.0w/v%であることが好ましく、0.1〜5.0w/v%であることがより好ましく、0.5〜3.0w/v%であることがさらに好ましい。さらに、遊離レンズマメレクチンの濃度は、1μg/mL以上であることが好ましく、10〜500μg/mLであることがより好ましく、50〜250μg/mLであることがさらに好ましい。
ブロック化標識レクチン及び標識化レクチンを用いたアルファフェトプロテインL3分画(AFP−L3)の測定
(1)ヒドラジン化デキストランの調製
4.8mLの0.1Mリン酸バッファー(pH7.0)に分子量250Kのデキストラン(CarboMer社製)を240.0mg添加し、25℃の暗所で30分間攪拌して、溶解させた。次いで、150mM NaIO4を2.664mL、イオン交換水を0.536mL添加して、25℃の暗所で30分間攪拌した。PD−10カラム(GE Healthcare社製、Sephadex G−25充填カラム)を用いて、0.1Mナトリウムリン酸バッファー(pH6.0)でバッファー交換を行い、20.0mLの溶液を得た。5.04gのNH2NH2・HClを添加し、25℃の暗所で2時間攪拌した。800mgのDMAB(ジメチルアミンボラン)を加え、さらに25℃の暗所で2時間攪拌した。RC50K(分子量5万の再生セルロース)透析膜を用いてイオン交換水4Lによる透析を暗所で3時間行った後、4℃で一晩静置した。0.1Mナトリウムリン酸バッファー(pH6.0)を用いたゲル濾過(Sephadex G−25)でバッファー交換を行い、85.0mLの溶液を得た。デキストランの濃度が1.0mg/mLとなるように調整し、ヒドラジン化デキストランの溶液を得た。
10mg/mLのアルカリフォスファターゼ(オリエンタル酵母社製、ALP−50)30.0mLについて、0.1Mナトリウムリン酸バッファー(pH6.0)を用いたゲル濾過(Sephadex G−25)でバッファー交換を行い、3.0mg/mLの溶液を90.6mL調製した。27mM NaIO4を45.3mL添加して、25℃の暗所で3分間攪拌した。0.1Mナトリウムリン酸バッファー(pH6.0)を用いたゲル濾過(Sephadex G−25)でバッファー交換を行い、0.5mg/mLの溶液を調製した。実施例1の(1)で調製した1.0mg/mLヒドラジン化デキストランをヒドラジド基(アミノ基)の濃度が25μMになるように添加し、25℃の暗所で16時間攪拌した。DMABを85mg添加し、25℃の暗所で2時間攪拌した。次いで、1.5M Trisバッファー(pH9.0)を10.1mL添加し、25℃の暗所で2時間攪拌した。Labscale TFF System(Merck Millipore社製)に限外濾過モジュール(ペリコンXL50、Merck Millipore社製)を取り付け15mLまで濃縮し、0.1Mナトリウムリン酸バッファー(pH7.0)を用いたゲル濾過(Superdex 200pg)を行い、3.0mg/mLのデキストラン−酵素結合体の溶液14mLを得た。
実施例1の(2)で調製したデキストラン−酵素結合体に0.1Mナトリウムリン酸バッファー(pH7.0)を加えて2mg/mLデキストラン−酵素結合体を750μL調製した。これにDMSO中に溶解した250mMのSM(PEG)4(Thermo Fisher Scientific社製、SM(PEG)4)を8.35μL添加、混合し、25℃の暗所で1時間転倒混和した。反応後、PD−10カラム(Sephadex G−25)を用いて20mM EDTA・2Na、0.5% CHAPSを含む0.1Mナトリウムリン酸バッファー(pH6.3)にバッファー交換を行った。バッファー交換後に遠心式フィルター(Merck社製、Amicon Ultra 50K)を用いてマレイミド−PEG化デキストラン−酵素結合体の濃縮を行い、最終濃度を2mg/mLに調製した。
5mgのレンズマメレクチン(LCA;J−ケミカル社製)を2.5mLの0.1Mナトリウムリン酸バッファー(pH7.0)中に溶解し、2mg/mL LCA溶液を得た。2.5mLのLCA溶液に100μLの0.5M EDTA・2Na(pH8.0)を添加して混和し、次いで75μLの10mg/mL 2−イミノチオラン塩酸塩溶液を添加し、25℃の暗所で1時間転倒混和した。反応後、PD−10カラム(Sephadex G−25)を用いて20mM EDTA・2Na、0.5% CHAPSを含む0.1Mナトリウムリン酸バッファー(pH6.3)にバッファー交換を行った。バッファー交換後のLCAは650μg/mLに調製した。
実施例1の(4)で得たチオール化して650μg/mLに調製したLCA 2mLに対して、10μLの1M Glucoseを添加し、25℃の暗所で30分間転倒混和した。次いで、実施例1の(3)で得たマレイミド−PEG化デキストラン−酵素結合体の溶液(2mg/mL)を500μL添加し、25℃の暗所で1時間転倒混和し、LCAとデキストラン−酵素結合体とをカップリングさせた。反応後、25μLの200mM 3−Mercapto−1,2−propanediolを添加し、25℃の暗所で30分間転倒混和した。さらにその後、50μLの200mM 2−Iodoacetamideを添加し、25℃の暗所で30分間転倒混和した。反応後の溶液は遠心式フィルター(Merck社製、Amicon Ultra 50K)を用いて濃縮した後にφ0.22μmフィルターを通過させ、ゲル濾過クロマトグラフィー(カラム:Superose 6 Increase 10/300 GL、バッファー:0.1M MES、0.5M NaCl、1mM MgCl2、0.1mM ZnCl2、5mM Glucose、0.05% CHAPS、pH6.8)によって精製し、最終的に167.4μg/mLのブロック化標識レクチン1(デキストラン−酵素−LCA結合体)の溶液を2mL得た。
5mgのレンズマメレクチン(LCA;J−ケミカル社製)を1mLの0.1Mナトリウムリン酸バッファー(pH7.0)中に溶解し、5mg/mL LCA溶液を得た。1mLのLCA溶液に41μLの10mg/mL Sulfo−EMCS(同仁化学研究所社製)を添加し、25℃の暗所で1時間転倒混和した。反応後、NAP−10カラム(GE Healthcare社製、Sephadex G−25充填カラム)を用いて0.5%CHAPSを含む0.1Mナトリウムリン酸バッファー(pH6.0)にバッファー交換を行い、回収したマレイミド化LCAを濃度2.5mg/mLに調製した。
磁性粒子(富士レビオ社製)と抗AFPモノクローナル抗体F(ab’)2断片(富士レビオ社製)とを反応させて抗体断片を粒子上に固相化した。抗体断片を固相化した粒子を、粒子濃度が0.01%となるように粒子希釈液(50mM Tris、100mM KCl、0.5% BSA、pH7.2)で希釈して、抗AFP抗体F(ab’)2断片結合粒子液を調製した。
遊離デキストラン及び遊離LCAを用いたAFP−L3測定
標識体希釈液(30mM MES、360mM NaCl、1.5%アルギニン、0.06mM ZnCl2、0.6mM MgCl2、2.4% C14APS、0.15% Tween 20、1×CFB、1% Tergitol 15−s−7、0.0005% Antiform SI)にさらに1.0%の遊離デキストランを添加したもの、50μg/mLの遊離LCAを添加したもの、1.0%の遊離デキストラン2000K及び50μg/mLの遊離LCAの両方を添加したものを用いて、実施例1の(5)で得られたブロック化標識レクチン1を0.5μg/mLとなるように希釈し、各条件の標識体液をそれぞれ調製した。また、試料として、下記の表2に記載の各濃度(2.0〜1000ng/mL)のL3型抗原を含むCFBを検体溶液として調製した。
複数のブロック化標識レクチン混合物を用いたAFP−L3の測定
(1)ブロック化標識レクチンの調製
デキストランとして、分子量500Kのデキストラン(Fluka社製)又は分子量70Kのデキストラン(TCI社製)を用いたこと以外は実施例1の(1)〜(5)と同様にして、各ブロック化標識レクチンを調製した。分子量500Kのデキストランを用いたブロック化標識レクチンを「ブロック化標識レクチン2(500K)」と、分子量70Kのデキストランを用いたブロック化標識レクチンを「ブロック化標識レクチン3(70K)」と、それぞれ表記する。
粒子希釈液の組成を、50mM Tris、150mM NaCl、2mM EDTA・2Na、0.5mg/mL Sodium Dextran Sulfate 5,000、30μg/mL Mouse KLG、1.0% BSA、0.005% Antiform SI、0.1% ProClin 300、pH7.2としたこと以外は、実施例1の(7)と同様にして、抗AFP抗体F(ab’)2断片結合粒子液を調製した。
L3型抗原の濃度を、下記の表4に記載の各濃度(2.0〜2000ng/mL)となるように希釈したこと以外は実施例1の(7)と同様にして、各検体溶液を調製した。また、下記の表4に示す濃度及び組み合わせで、ブロック化標識レクチン2(500K)、ブロック化標識レクチン3(70K)、及び実施例1の(6)で得られた標識化レクチン1を、標識体希釈液(30mM MES、360mM NaCl、1.5%アルギニン、0.06mM ZnCl2、0.6mM MgCl2、2.4% C14APS、0.15% Tween 20、1×CFB、1% Tergitol 15−s−7、1%遊離デキストラン2000K、50μg/mL遊離LCA、0.0005% Antiform SI)に0.5μg/mLとなるようにそれぞれ希釈し、ブロック化標識レクチン2(500K)液、ブロック化標識レクチン3(70K)液、及び標識化レクチン1液の3種類の標識体液をそれぞれ調製した。
血清中のAFP−L3測定における試料の精製処理
試料として、L3型抗原を200ng/mL含むCFB(B1、バッファー検体)、L3抗原を200ng/mL添加した健常人血清(S1、血清検体)、L3型抗原を添加しない健常人血清(S2、血清検体)を、それぞれ調製した。
40μLの抗AFP抗体結合粒子(富士レビオ社製)と300μLの各血清検体(S1又はS2)とを混合し、室温で40秒間撹拌振とうを行った。磁性粒子を集磁して上清を除去した後、300μLのルミパルス(登録商標)洗浄液で3回洗浄した。溶出液(0.1M Glycine、0.3M NaCl、0.2% TritonX−100、1×CFB、pH2.1)を200μL加え、室温で20秒間撹拌振とうを行った。上清を別の容器に移し替え、10μLの2M Tris(pH10.0)を加えて中和した後、90μLのCFBを加え、精製処理済み試料を調製した。
実施例1の(5)で得られたブロック化標識レクチン1、又は実施例1の(6)で得られた標識化レクチン1を、標識体希釈液(30mM MES、360mM NaCl、1.5%アルギニン、0.06mM ZnCl2、0.6mM MgCl2、30μg/mL Inactivated ALP、30μg/mL Mouse KLG、2.4% C14APS、0.15% Tween 20、1×CFB、1% Tergitol 15−s−7、2%遊離デキストラン2000K、0.0005% Antiform SI)に0.5μg/mLとなるようにそれぞれ希釈し、ブロック化標識レクチン1液、及び標識化レクチン1液の各標識体液をそれぞれ調製した。
Claims (11)
- 試料中のAFP−L3を測定する方法であり、
第1の水溶性高分子からなる水溶性担体と前記水溶性担体に固定された標識物質及びレンズマメレクチンとを備えるブロック化標識レクチンと、前記試料と、を接触させる測定工程を含む、
ことを特徴とするAFP−L3測定方法。 - 前記水溶性担体に固定されていない遊離レンズマメレクチンの存在下で前記測定工程を実施することを特徴とする、請求項1に記載のAFP−L3測定方法。
- 第2の水溶性高分子の存在下で前記測定工程を実施することを特徴とする、請求項1又は2に記載のAFP−L3測定方法。
- 前記ブロック化標識レクチンが、第1の水溶性高分子の重量平均分子量が200,000以上である高分子量ブロック化標識レクチンと、第1の水溶性高分子の重量平均分子量が100,000未満である低分子量ブロック化標識レクチンと、の組み合わせであることを特徴とする、請求項1〜3のうちのいずれか一項に記載のAFP−L3測定方法。
- 前記測定工程が、標識物質及びレンズマメレクチンを備える標識化レクチンと、前記試料と、を接触させる工程をさらに含むことを特徴とする、請求項1〜4のうちのいずれか一項に記載のAFP−L3測定方法。
- 請求項1〜5のうちのいずれか一項に記載のAFP−L3測定方法に用いるための、第1の水溶性高分子からなる水溶性担体と前記水溶性担体に固定された標識物質及びレンズマメレクチンとを備えるブロック化標識レクチン。
- 試料中のAFP−L3を測定するためのキットであり、請求項6に記載のブロック化標識レクチンを含むことを特徴とする、AFP−L3測定キット。
- 前記ブロック化標識レクチンが、第1の水溶性高分子の重量平均分子量が200,000以上である高分子量ブロック化標識レクチンと、第1の水溶性高分子の重量平均分子量が100,000未満である低分子量ブロック化標識レクチンと、の組み合わせであることを特徴とする、請求項7に記載のAFP−L3測定キット。
- 前記水溶性担体に固定されていない遊離レンズマメレクチンをさらに含むことを特徴とする、請求項7又は8に記載のAFP−L3測定キット。
- 第2の水溶性高分子をさらに含むことを特徴とする、請求項7〜9のうちのいずれか一項に記載のAFP−L3測定キット。
- 標識物質及びレンズマメレクチンを備える標識化レクチンをさらに含むことを特徴とする、請求項7〜10のうちのいずれか一項に記載のAFP−L3測定キット。
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Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN114236138A (zh) * | 2021-12-20 | 2022-03-25 | 杨霜 | 一种岩藻糖糖蛋白荧光显色载体的制备方法、荧光强度参考载体的制作方法及用途 |
CN115716874A (zh) * | 2022-11-04 | 2023-02-28 | 深圳市卓润生物科技有限公司 | 针对afp-l3与凝集素复合物的单克隆抗体及其试剂盒和应用 |
Citations (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS6179164A (ja) * | 1984-09-26 | 1986-04-22 | Amano Pharmaceut Co Ltd | 抗原抗体反応の短縮方法 |
JPS63289001A (ja) * | 1986-11-28 | 1988-11-25 | スカルボ インコーポレイテッド,ウエスト コースト | 結合分析試薬のための新規な標識デザイン |
JP2001181299A (ja) * | 1999-12-22 | 2001-07-03 | Nichirei Corp | 酵素−タンパク質複合体 |
WO2006070732A1 (ja) * | 2004-12-28 | 2006-07-06 | Advanced Life Science Institute, Inc. | ブロック化酵素プローブ複合体 |
JP2013253866A (ja) * | 2012-06-07 | 2013-12-19 | Konica Minolta Inc | レクチンを用いたアナライトの検出方法 |
WO2017183711A1 (ja) * | 2016-04-22 | 2017-10-26 | 富士レビオ株式会社 | レクチン標的分子の捕捉方法 |
JP2018004323A (ja) * | 2016-06-28 | 2018-01-11 | 東ソー株式会社 | デキストランを共存させた免疫学的測定方法 |
WO2018174044A1 (ja) * | 2017-03-22 | 2018-09-27 | 富士フイルム和光純薬株式会社 | 糖鎖を有する物質とレクチンとの複合体形成方法 |
-
2019
- 2019-09-02 JP JP2019159747A patent/JP7361543B2/ja active Active
Patent Citations (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS6179164A (ja) * | 1984-09-26 | 1986-04-22 | Amano Pharmaceut Co Ltd | 抗原抗体反応の短縮方法 |
JPS63289001A (ja) * | 1986-11-28 | 1988-11-25 | スカルボ インコーポレイテッド,ウエスト コースト | 結合分析試薬のための新規な標識デザイン |
JP2001181299A (ja) * | 1999-12-22 | 2001-07-03 | Nichirei Corp | 酵素−タンパク質複合体 |
WO2006070732A1 (ja) * | 2004-12-28 | 2006-07-06 | Advanced Life Science Institute, Inc. | ブロック化酵素プローブ複合体 |
JP2013253866A (ja) * | 2012-06-07 | 2013-12-19 | Konica Minolta Inc | レクチンを用いたアナライトの検出方法 |
WO2017183711A1 (ja) * | 2016-04-22 | 2017-10-26 | 富士レビオ株式会社 | レクチン標的分子の捕捉方法 |
JP2018004323A (ja) * | 2016-06-28 | 2018-01-11 | 東ソー株式会社 | デキストランを共存させた免疫学的測定方法 |
WO2018174044A1 (ja) * | 2017-03-22 | 2018-09-27 | 富士フイルム和光純薬株式会社 | 糖鎖を有する物質とレクチンとの複合体形成方法 |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
HIROAKI TATENO, SACHIKO NAKAMURA-TSURUTA, JUN HIRABAYASHI: "Comparative analysis of core-fucose-binding lectins from Lens culinaris and Pisum sativum using fron", GLYCOBIOLOGY, vol. Volume 19, Issue 5, JPN6023016641, 13 February 2009 (2009-02-13), pages 527 - 536, ISSN: 0005050177 * |
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN114236138A (zh) * | 2021-12-20 | 2022-03-25 | 杨霜 | 一种岩藻糖糖蛋白荧光显色载体的制备方法、荧光强度参考载体的制作方法及用途 |
CN114236138B (zh) * | 2021-12-20 | 2023-11-07 | 杨霜 | 一种岩藻糖糖蛋白荧光显色载体的制备方法、荧光强度参考载体的制作方法及用途 |
CN115716874A (zh) * | 2022-11-04 | 2023-02-28 | 深圳市卓润生物科技有限公司 | 针对afp-l3与凝集素复合物的单克隆抗体及其试剂盒和应用 |
CN115716874B (zh) * | 2022-11-04 | 2024-02-02 | 深圳市卓润生物科技有限公司 | 针对afp-l3与凝集素复合物的单克隆抗体及其试剂盒和应用 |
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