JP2020537542A5 - - Google Patents

Description

均等物
本出願には、以下の文献の内容全体が参照により組み込まれる：２０１８年１０月３日に提出された代理人整理番号P1094.70002WO00により参照される国際ＰＣＴ出願；２０１８年１０月３日に提出された代理人整理番号P1094.70003WO00により参照される国際ＰＣＴ出願；２０１７年１０月３日に提出された米国仮出願第62/567,296号、表題「ライソゾーム病の遺伝子治療」；２０１７年１０月３日に提出された第62/567,311号、表題「ライソゾーム病の遺伝子治療」；２０１７年１０月３日に提出された第62/567,319号、表題「ライソゾーム病の遺伝子治療」；２０１７年１０月３日に提出された第62/567,301号、表題「ライソゾーム病の遺伝子治療」；２０１７年１０月３日に提出された第62/567,310号、表題「ライソゾーム病の遺伝子治療」；２０１７年１０月３日に提出された第62/567,303号、表題「ライソゾーム病の遺伝子治療」；および２０１７年１０月３日に提出された第62/567,305号、表題「ライソゾーム病の遺伝子治療」。

Claims (50)

1. 以下を含む、単離された核酸、
   （ｉ）阻害性核酸が、配列番号３に示される配列によってコードされる、α−シヌクレインを標的とする阻害性核酸をコードする導入遺伝子を含む、発現構築物；
   および
   （ｉｉ）発現構築物に隣接する２つのアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）逆方向末端反復（ＩＴＲ）配列。
2. 導入遺伝子が、プロモーターに作動可能に連結されている、請求項１に記載の単離された核酸。
3. プロモーターが、ニワトリ−ベータアクチン（ＣＢＡ）プロモーターである、請求項２に記載の単離された核酸。
4. ＣＭＶエンハンサーをさらに含む、請求項２または３に記載の単離された核酸。
5. ウッドチャック肝炎ウイルスの転写後調節要素（ＷＰＲＥ）をさらに含む、請求項１〜３のいずれか一項に記載の単離された核酸。
6. ウシ成長ホルモンポリＡシグナルテールをさらに含む、請求項１〜３のいずれか一項に記載の単離された核酸。
7. 各ＩＴＲ配列が、野生型ＡＡＶ２ ＩＴＲ配列である、請求項１〜３のいずれか一項に記載の単離された核酸。
8. 各ＩＴＲ配列が、発現構築物に対して近位の「Ｄ」領域（配列番号１４）を含む、請求項１〜３のいずれか一項に記載の単離された核酸。
9. 少なくとも１つのＩＴＲ配列が、発現構築物に対してＩＴＲの外側に位置する「Ｄ」領域（配列番号１４）を含む、請求項１〜３のいずれか一項に記載の単離された核酸。
10. 発現構築物に対して５’に位置するＩＴＲ配列が、発現構築物に対して近位の「Ｄ」領域（配列番号１４）を含み、および、発現構築物に対して３’に位置するＩＴＲ配列が、発現構築物に対してＩＴＲ配列の外側に位置する「Ｄ」領域（配列番号１４）を含む、請求項１〜３のいずれか一項に記載の単離された核酸。
11. ５’ＩＴＲの核酸配列が、配列番号２５のヌクレオチド１〜１４５であり、および３’ＩＴＲが、配列番号２５の核のヌクレオチド４０１８〜４１６２である、請求項１０に記載の単離された核酸。
12. ５’ＩＴＲと発現構築物との間にＴＲＹ領域をさらに含み、ここで、ＴＲＹ領域が配列番号１５に示される配列を有する、請求項１１に記載の単離された核酸。
13. 阻害性核酸が、ｍｉＲＮＡ足場配列をさらに含む、請求項１〜３のいずれか一項に記載の単離された核酸。
14. ｍｉＲＮＡ足場配列が、配列番号２３に示される配列によってコードされる、請求項１３に記載の単離された核酸。
15. 配列番号２３のヌクレオチド１１０５〜１３６７に示される配列によって、阻害性核酸がコードされる、請求項１４に記載の単離された核酸。
16. 以下を含む、組換えアデノ随伴ウイルス（ｒＡＡＶ）ベクター：
    （ｉ）阻害性核酸が、配列番号３に示される配列によってコードされる、α−シヌクレインを標的とする阻害性核酸をコードする導入遺伝子を含む、発現構築物；
    および
    （ｉｉ）発現構築物に隣接する２つのアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）逆方向末端反復（ＩＴＲ）配列。
17. 導入遺伝子が、プロモーターに作動可能に連結されている、請求項１６に記載のｒＡＡＶベクター。
18. プロモーターが、ニワトリ−ベータアクチン（ＣＢＡ）プロモーターである、請求項１７に記載のｒＡＡＶベクター。
19. ＣＭＶエンハンサーさらに含む、請求項１６〜１８のいずれか一項に記載のｒＡＡＶベクター。
20. ウッドチャック肝炎ウイルスの転写後調節要素（ＷＰＲＥ）をさらに含む、請求項１６〜１８のいずれか一項に記載のｒＡＡＶベクター。
21. ウシ成長ホルモンポリＡシグナルテールをさらに含む、請求項１６〜１８のいずれか一項に記載のｒＡＡＶベクター。
22. 各ＩＴＲ配列が、野生型ＡＡＶ２ ＩＴＲ配列である、請求項１６〜１８のいずれか一項に記載のｒＡＡＶベクター。
23. 各ＩＴＲ配列が、発現構築物に対して近位の「Ｄ」領域（配列番号１４）を含む、請求項１６〜１８のいずれか一項に記載のｒＡＡＶベクター。
24. 少なくとも１つのＩＴＲ配列が、発現構築物に対してＩＴＲの外側に位置する「Ｄ」領域（配列番号１４）を含む、請求項１６〜１８のいずれか一項に記載のｒＡＡＶベクター。
25. 発現構築物に対して５’に位置するＩＴＲ配列が、発現構築物に対して近位の「Ｄ」領域（配列番号１４）を含み、および、発現構築物に対して３’に位置するＩＴＲ配列が、発現構築物に対してＩＴＲ配列の外側に位置する「Ｄ」領域（配列番号１４）を含む、請求項１６〜１８のいずれか一項に記載のｒＡＡＶベクター。
26. ５’ＩＴＲの核酸配列が、配列番号２５のヌクレオチド１〜１４５であり、および３’ＩＴＲが、配列番号２５の核のヌクレオチド４０１８〜４１６２である、請求項２５に記載のｒＡＡＶベクター。
27. ５’ＩＴＲと発現構築物との間にＴＲＹ領域をさらに含み、ここで、ＴＲＹ領域が配列番号１５に示される配列を有する、請求項２６に記載のｒＡＡＶベクター。
28. 阻害性核酸が、ｍｉＲＮＡ足場配列をさらに含む、請求項１６〜１８のいずれか一項に記載のｒＡＡＶベクター。
29. ｍｉＲＮＡ足場配列が、配列番号２３に示される配列によってにコードされる、請求項２８に記載のｒＡＡＶベクター。
30. 阻害性核酸が、配列番号２３のヌクレオチド１１０５〜１３６７に示される配列によってコードされる、請求項２９に記載のｒＡＡＶベクター。
31. 以下を含む、組換えアデノ随伴ウイルス（ｒＡＡＶ）：
    （ｉ）アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）カプシドタンパク質；
    および
    （ｉｉ）請求項１６〜１８のいずれか一項に記載のｒＡＡＶベクター。
32. ＡＡＶカプシドタンパク質が、ＡＡＶ９カプシドタンパク質である、請求項３１に記載のｒＡＡＶ。
33. ３’から５’の順番で、以下を含む核酸を含む、組換えアデノ随伴ウイルス（ｒＡＡＶ）ベクター：
    （ａ）５’アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）逆方向末端反復（ＩＴＲ）；
    （ｂ）ＣＭＶエンハンサー；
    （ｃ）ニワトリベータアクチン（ＣＢＡ）プロモーター；
    （ｄ）阻害性核酸が、配列番号３に示される配列によってコードされる、α−シヌクレインを標的とする阻害性核酸をコードする導入遺伝子；
    （ｅ）ウッドチャック肝炎ウイルスの転写後調節要素（ＷＰＲＥ）；
    （ｆ）ウシ成長ホルモンポリＡシグナルテール；
    および
    （ｇ）３’ＡＡＶ ＩＴＲ。
34. 阻害性核酸が、配列番号２３のヌクレオチド１１０５〜１３６７に示される配列によってコードされる、請求項３３に記載のｒＡＡＶベクター。
35. 以下を含む、組換えアデノ随伴ウイルス（ｒＡＡＶ）：
    （ｉ）アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）カプシドタンパク質；
    および
    （ｉｉ）請求項３３または３４に記載のｒＡＡＶベクター。
36. ＡＡＶカプシドタンパク質が、ＡＡＶ９カプシドタンパク質である、請求項３５に記載のｒＡＡＶ。
37. 請求項１６〜３０、および３３のいずれか一項に記載のｒＡＡＶベクターを含む、プラスミド。
38. 配列番号３に示される配列を含む阻害性核酸コード配列を含む、バキュロウイルスベクター。
39. 以下を含む、細胞：
    （ｉ）１つ以上のアデノ随伴ウイルスｒｅｐタンパク質、および／または、１つ以上のアデノ随伴ウイルスｃａｐタンパク質をコードする第１のベクター；
    および
    （ｉｉ）配列番号３に示される配列を含む阻害性核酸コード配列を含む、第２のベクター。
40. 第１のベクターが、プラスミドであり、および、第２のベクターが、プラスミドである、請求項３９に記載の細胞。
41. 哺乳動物細胞である、請求項３９または４０に記載の細胞。
42. 哺乳動物細胞が、ＨＥＫ２９３細胞である、請求項４１に記載の細胞。
43. 第１のベクターが、バキュロウイルスベクターであり、および、第２のベクターが、バキュロウイルスベクターである、請求項３９に記載の細胞。
44. 昆虫細胞である、請求項３９または４３に記載の細胞。
45. 以下を含む、請求項３１、３２、３５、および３６のいずれか一項に記載の組換えアデノ随伴ウイルス（ｒＡＡＶ）を生成する方法：
    （ｉ）細胞に、１つ以上のアデノ随伴ウイルスｒｅｐタンパク質、および／または、１つ以上のアデノ随伴ウイルスｃａｐタンパク質をコードする第１のベクター、および配列番号３で示される配列を含むコード配列をコードする阻害性核酸を含む発現構築物を含むｒＡＡＶベクターを送達すること；
    （ｉｉ）ｒＡＡＶのパッケージングを可能にする条件の下で細胞を培養すること；
    および
    （ｉｉｉ）ｒＡＡＶの収集のために培養宿主細胞または培養培地を回収すること。
46. パーキンソン病またはレビー小体型認知症を有するかまたは有すると疑われる対象を処置するための薬物の製造における、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の単離された核酸、請求項１６〜２０および３３のいずれか一項に記載のｒＡＡＶベクター、または請求項３１、３２、３５、および３６のいずれか一項に記載のｒＡＡＶの使用。
47. 薬物が、対象のＣＮＳへの直接注射のために製剤化される、請求項４６に記載の使用。
48. 対象のＣＮＳに対する直接注射が、脳内注射、実質内注射、髄腔内注射、大槽内注射、またはそれらの任意の組み合わせである、請求項４７に記載の使用。
49. 対象のＣＮＳに対する直接注射が、対流強化送達（ＣＥＤ）を含む、請求項４７に記載の使用。
50. 薬物が、末梢注射のために製剤化され、ここで任意に、末梢注射が、静脈内注射である、請求項４６に記載の使用。