JP2019535273A - RNAでの幹細胞分化による膵臓β細胞の誘導 - Google Patents
RNAでの幹細胞分化による膵臓β細胞の誘導 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2019535273A JP2019535273A JP2019525968A JP2019525968A JP2019535273A JP 2019535273 A JP2019535273 A JP 2019535273A JP 2019525968 A JP2019525968 A JP 2019525968A JP 2019525968 A JP2019525968 A JP 2019525968A JP 2019535273 A JP2019535273 A JP 2019535273A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- cells
- cell
- mrna
- pancreatic
- combination
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 title claims abstract description 123
- 210000002237 B-cell of pancreatic islet Anatomy 0.000 title claims abstract description 71
- 230000006698 induction Effects 0.000 title abstract description 23
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 title abstract description 9
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims abstract description 314
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 claims abstract description 162
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 158
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 claims abstract description 96
- 210000004263 induced pluripotent stem cell Anatomy 0.000 claims abstract description 46
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 claims abstract description 44
- 230000009996 pancreatic endocrine effect Effects 0.000 claims abstract description 38
- 210000003890 endocrine cell Anatomy 0.000 claims abstract description 37
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 138
- 238000001890 transfection Methods 0.000 claims description 72
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 claims description 69
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 claims description 69
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 claims description 69
- 210000004039 endoderm cell Anatomy 0.000 claims description 58
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 claims description 49
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 45
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 43
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims description 41
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 29
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 claims description 25
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 claims description 23
- 230000004044 response Effects 0.000 claims description 23
- 101100310648 Mus musculus Sox17 gene Proteins 0.000 claims description 19
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 19
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 claims description 16
- 206010058314 Dysplasia Diseases 0.000 claims description 11
- 102000007354 PAX6 Transcription Factor Human genes 0.000 claims description 11
- 101150081664 PAX6 gene Proteins 0.000 claims description 11
- 101001062354 Xenopus tropicalis Forkhead box protein A2 Proteins 0.000 claims description 11
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 11
- -1 Hlxb9 Proteins 0.000 claims description 9
- 102100028096 Homeobox protein Nkx-6.2 Human genes 0.000 claims description 8
- 101000578254 Homo sapiens Homeobox protein Nkx-6.1 Proteins 0.000 claims description 8
- 101000578258 Homo sapiens Homeobox protein Nkx-6.2 Proteins 0.000 claims description 8
- 102100041030 Pancreas/duodenum homeobox protein 1 Human genes 0.000 claims description 8
- 101710183548 Pyridoxal 5'-phosphate synthase subunit PdxS Proteins 0.000 claims description 8
- OGQSCIYDJSNCMY-UHFFFAOYSA-H iron(3+);methyl-dioxido-oxo-$l^{5}-arsane Chemical compound [Fe+3].[Fe+3].C[As]([O-])([O-])=O.C[As]([O-])([O-])=O.C[As]([O-])([O-])=O OGQSCIYDJSNCMY-UHFFFAOYSA-H 0.000 claims description 8
- 101100518002 Danio rerio nkx2.2a gene Proteins 0.000 claims description 4
- 108700014808 Homeobox Protein Nkx-2.2 Proteins 0.000 claims description 4
- 102100027886 Homeobox protein Nkx-2.2 Human genes 0.000 claims description 4
- 101100460496 Homo sapiens NKX2-2 gene Proteins 0.000 claims description 4
- 101000819074 Homo sapiens Transcription factor GATA-4 Proteins 0.000 claims description 4
- 101000819088 Homo sapiens Transcription factor GATA-6 Proteins 0.000 claims description 4
- 101150075928 Pax4 gene Proteins 0.000 claims description 4
- 101150106167 SOX9 gene Proteins 0.000 claims description 4
- 102100021380 Transcription factor GATA-4 Human genes 0.000 claims description 4
- 102100021382 Transcription factor GATA-6 Human genes 0.000 claims description 4
- 101150070243 ptf1a gene Proteins 0.000 claims description 4
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 claims description 3
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 claims description 3
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 abstract description 10
- 210000001900 endoderm Anatomy 0.000 abstract description 7
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 abstract description 7
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 abstract description 5
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 33
- 210000000227 basophil cell of anterior lobe of hypophysis Anatomy 0.000 description 31
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 22
- 108091023040 Transcription factor Proteins 0.000 description 21
- 102000040945 Transcription factor Human genes 0.000 description 20
- 230000008569 process Effects 0.000 description 20
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 17
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 17
- 210000001778 pluripotent stem cell Anatomy 0.000 description 16
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 16
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 15
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 14
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 11
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 11
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 10
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 10
- 239000012096 transfection reagent Substances 0.000 description 10
- 206010067584 Type 1 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 9
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 9
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 9
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 9
- 230000001131 transforming effect Effects 0.000 description 9
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 9
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 8
- 230000008672 reprogramming Effects 0.000 description 8
- 210000001671 embryonic stem cell Anatomy 0.000 description 7
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 7
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 7
- 239000000047 product Substances 0.000 description 7
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 7
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 108700019146 Transgenes Proteins 0.000 description 6
- 108010082117 matrigel Proteins 0.000 description 6
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 6
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 6
- 230000023603 positive regulation of transcription initiation, DNA-dependent Effects 0.000 description 6
- 210000001082 somatic cell Anatomy 0.000 description 6
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 5
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 5
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 5
- 230000006870 function Effects 0.000 description 5
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 5
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 5
- 239000000463 material Substances 0.000 description 5
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 5
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 5
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 5
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 5
- FWBHETKCLVMNFS-UHFFFAOYSA-N 4',6-Diamino-2-phenylindol Chemical compound C1=CC(C(=N)N)=CC=C1C1=CC2=CC=C(C(N)=N)C=C2N1 FWBHETKCLVMNFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 4
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 4
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 4
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 4
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 4
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 4
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 4
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 4
- 239000002356 single layer Substances 0.000 description 4
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 4
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 4
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 4
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 3
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 3
- 108700011259 MicroRNAs Proteins 0.000 description 3
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 3
- 230000011748 cell maturation Effects 0.000 description 3
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 3
- 238000002659 cell therapy Methods 0.000 description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 3
- 210000002242 embryoid body Anatomy 0.000 description 3
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 3
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 3
- 239000002679 microRNA Substances 0.000 description 3
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 3
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 3
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 3
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 3
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 3
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 3
- 238000004114 suspension culture Methods 0.000 description 3
- 208000001072 type 2 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 3
- 239000013603 viral vector Substances 0.000 description 3
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 3
- ZOOGRGPOEVQQDX-UUOKFMHZSA-N 3',5'-cyclic GMP Chemical compound C([C@H]1O2)OP(O)(=O)O[C@H]1[C@@H](O)[C@@H]2N1C(N=C(NC2=O)N)=C2N=C1 ZOOGRGPOEVQQDX-UUOKFMHZSA-N 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- 101150023320 B16R gene Proteins 0.000 description 2
- 102400001242 Betacellulin Human genes 0.000 description 2
- 101800001382 Betacellulin Proteins 0.000 description 2
- 102100031650 C-X-C chemokine receptor type 4 Human genes 0.000 description 2
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 2
- 102000012422 Collagen Type I Human genes 0.000 description 2
- 108010022452 Collagen Type I Proteins 0.000 description 2
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 2
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 2
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010014611 Encephalitis venezuelan equine Diseases 0.000 description 2
- 102000001267 GSK3 Human genes 0.000 description 2
- 108060006662 GSK3 Proteins 0.000 description 2
- 101000922348 Homo sapiens C-X-C chemokine receptor type 4 Proteins 0.000 description 2
- 241000282553 Macaca Species 0.000 description 2
- 241001504519 Papio ursinus Species 0.000 description 2
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 2
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 2
- KPKZJLCSROULON-QKGLWVMZSA-N Phalloidin Natural products N1C(=O)[C@@H]([C@@H](O)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C[C@@](C)(O)CO)NC(=O)[C@H](C2)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H]3C[C@H](O)CN3C(=O)[C@@H]1CSC1=C2C2=CC=CC=C2N1 KPKZJLCSROULON-QKGLWVMZSA-N 0.000 description 2
- 108010009711 Phalloidine Proteins 0.000 description 2
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 2
- 101100316831 Vaccinia virus (strain Copenhagen) B18R gene Proteins 0.000 description 2
- 101100004099 Vaccinia virus (strain Western Reserve) VACWR200 gene Proteins 0.000 description 2
- 208000002687 Venezuelan Equine Encephalomyelitis Diseases 0.000 description 2
- 201000009145 Venezuelan equine encephalitis Diseases 0.000 description 2
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 2
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 description 2
- 239000002771 cell marker Substances 0.000 description 2
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 210000001612 chondrocyte Anatomy 0.000 description 2
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 2
- 241001493065 dsRNA viruses Species 0.000 description 2
- 210000003981 ectoderm Anatomy 0.000 description 2
- 238000009713 electroplating Methods 0.000 description 2
- 238000004520 electroporation Methods 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 210000001654 germ layer Anatomy 0.000 description 2
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 2
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 2
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 2
- 210000004153 islets of langerhan Anatomy 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 2
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 description 2
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 2
- NFVJNJQRWPQVOA-UHFFFAOYSA-N n-[2-chloro-5-(trifluoromethyl)phenyl]-2-[3-(4-ethyl-5-ethylsulfanyl-1,2,4-triazol-3-yl)piperidin-1-yl]acetamide Chemical compound CCN1C(SCC)=NN=C1C1CN(CC(=O)NC=2C(=CC=C(C=2)C(F)(F)F)Cl)CCC1 NFVJNJQRWPQVOA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000001537 neural effect Effects 0.000 description 2
- 210000005155 neural progenitor cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 2
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 2
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 2
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 2
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 2
- 230000035790 physiological processes and functions Effects 0.000 description 2
- 230000003169 placental effect Effects 0.000 description 2
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 2
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 description 2
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 2
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 2
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 2
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 2
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 2
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 2
- OZFAFGSSMRRTDW-UHFFFAOYSA-N (2,4-dichlorophenyl) benzenesulfonate Chemical compound ClC1=CC(Cl)=CC=C1OS(=O)(=O)C1=CC=CC=C1 OZFAFGSSMRRTDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000040650 (ribonucleotides)n+m Human genes 0.000 description 1
- AGJBKFAPBKOEGA-UHFFFAOYSA-M 2-methoxyethylmercury(1+);acetate Chemical compound COCC[Hg]OC(C)=O AGJBKFAPBKOEGA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- HJCMDXDYPOUFDY-WHFBIAKZSA-N Ala-Gln Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(N)=O HJCMDXDYPOUFDY-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- 108700028369 Alleles Proteins 0.000 description 1
- 102100024505 Bone morphogenetic protein 4 Human genes 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 108010075254 C-Peptide Proteins 0.000 description 1
- MDZCSIDIPDZWKL-UHFFFAOYSA-N CHIR-98014 Chemical compound C1=C([N+]([O-])=O)C(N)=NC(NCCNC=2N=C(C(=CN=2)N2C=NC=C2)C=2C(=CC(Cl)=CC=2)Cl)=C1 MDZCSIDIPDZWKL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AQGNHMOJWBZFQQ-UHFFFAOYSA-N CT 99021 Chemical compound CC1=CNC(C=2C(=NC(NCCNC=3N=CC(=CC=3)C#N)=NC=2)C=2C(=CC(Cl)=CC=2)Cl)=N1 AQGNHMOJWBZFQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000000905 Cadherin Human genes 0.000 description 1
- 108050007957 Cadherin Proteins 0.000 description 1
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 1
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 1
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 1
- ZZZCUOFIHGPKAK-UHFFFAOYSA-N D-erythro-ascorbic acid Natural products OCC1OC(=O)C(O)=C1O ZZZCUOFIHGPKAK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101100239628 Danio rerio myca gene Proteins 0.000 description 1
- 239000012591 Dulbecco’s Phosphate Buffered Saline Substances 0.000 description 1
- 238000008157 ELISA kit Methods 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- 102000038624 GSKs Human genes 0.000 description 1
- 108091007911 GSKs Proteins 0.000 description 1
- 102400000321 Glucagon Human genes 0.000 description 1
- 108060003199 Glucagon Proteins 0.000 description 1
- 102000009465 Growth Factor Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010009202 Growth Factor Receptors Proteins 0.000 description 1
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100029283 Hepatocyte nuclear factor 3-alpha Human genes 0.000 description 1
- 101000762379 Homo sapiens Bone morphogenetic protein 4 Proteins 0.000 description 1
- 101001062353 Homo sapiens Hepatocyte nuclear factor 3-alpha Proteins 0.000 description 1
- 108700021430 Kruppel-Like Factor 4 Proteins 0.000 description 1
- 241000711408 Murine respirovirus Species 0.000 description 1
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 1
- 101710126211 POU domain, class 5, transcription factor 1 Proteins 0.000 description 1
- 108091007412 Piwi-interacting RNA Proteins 0.000 description 1
- 101100247004 Rattus norvegicus Qsox1 gene Proteins 0.000 description 1
- 108700005075 Regulator Genes Proteins 0.000 description 1
- 108010071390 Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 102000007562 Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- 108020004688 Small Nuclear RNA Proteins 0.000 description 1
- 102000039471 Small Nuclear RNA Human genes 0.000 description 1
- 108020004459 Small interfering RNA Proteins 0.000 description 1
- 101001023030 Toxoplasma gondii Myosin-D Proteins 0.000 description 1
- 108020004566 Transfer RNA Proteins 0.000 description 1
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 1
- 229930003268 Vitamin C Natural products 0.000 description 1
- 108010031318 Vitronectin Proteins 0.000 description 1
- 102100035140 Vitronectin Human genes 0.000 description 1
- 102000013814 Wnt Human genes 0.000 description 1
- 108050003627 Wnt Proteins 0.000 description 1
- 108010076089 accutase Proteins 0.000 description 1
- 108010023082 activin A Proteins 0.000 description 1
- 238000004115 adherent culture Methods 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 1
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 1
- GZCGUPFRVQAUEE-SLPGGIOYSA-N aldehydo-D-glucose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O GZCGUPFRVQAUEE-SLPGGIOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000735 allogeneic effect Effects 0.000 description 1
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 1
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 230000005784 autoimmunity Effects 0.000 description 1
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 210000002459 blastocyst Anatomy 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 230000021164 cell adhesion Effects 0.000 description 1
- 230000033026 cell fate determination Effects 0.000 description 1
- 230000010307 cell transformation Effects 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 231100000045 chemical toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 1
- 210000002808 connective tissue Anatomy 0.000 description 1
- 238000005138 cryopreservation Methods 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 238000009795 derivation Methods 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 230000005014 ectopic expression Effects 0.000 description 1
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 1
- 230000002996 emotional effect Effects 0.000 description 1
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000001605 fetal effect Effects 0.000 description 1
- 238000007667 floating Methods 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010362 genome editing Methods 0.000 description 1
- MASNOZXLGMXCHN-ZLPAWPGGSA-N glucagon Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O)C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC=1NC=NC=1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C1=CC=CC=C1 MASNOZXLGMXCHN-ZLPAWPGGSA-N 0.000 description 1
- 229960004666 glucagon Drugs 0.000 description 1
- 150000002303 glucose derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 1
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 1
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 1
- 230000002440 hepatic effect Effects 0.000 description 1
- 210000003494 hepatocyte Anatomy 0.000 description 1
- 235000009200 high fat diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000003054 hormonal effect Effects 0.000 description 1
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 1
- 239000003018 immunosuppressive agent Substances 0.000 description 1
- 229940124589 immunosuppressive drug Drugs 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 230000006362 insulin response pathway Effects 0.000 description 1
- 230000003914 insulin secretion Effects 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 210000005061 intracellular organelle Anatomy 0.000 description 1
- 101150044508 key gene Proteins 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 101150111214 lin-28 gene Proteins 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 230000005923 long-lasting effect Effects 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 239000012092 media component Substances 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 230000008450 motivation Effects 0.000 description 1
- 210000002894 multi-fate stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 230000005937 nuclear translocation Effects 0.000 description 1
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 description 1
- 235000021048 nutrient requirements Nutrition 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 210000002747 omentum Anatomy 0.000 description 1
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 description 1
- 239000006179 pH buffering agent Substances 0.000 description 1
- 238000002638 palliative care Methods 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 1
- 210000003240 portal vein Anatomy 0.000 description 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 1
- 238000011809 primate model Methods 0.000 description 1
- 230000000861 pro-apoptotic effect Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 1
- 239000000018 receptor agonist Substances 0.000 description 1
- 229940044601 receptor agonist Drugs 0.000 description 1
- 239000002464 receptor antagonist Substances 0.000 description 1
- 229940044551 receptor antagonist Drugs 0.000 description 1
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 1
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 1
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 1
- 238000009256 replacement therapy Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000013341 scale-up Methods 0.000 description 1
- 230000009758 senescence Effects 0.000 description 1
- 239000004055 small Interfering RNA Substances 0.000 description 1
- 238000010374 somatic cell nuclear transfer Methods 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 238000009168 stem cell therapy Methods 0.000 description 1
- 238000009580 stem-cell therapy Methods 0.000 description 1
- 230000035882 stress Effects 0.000 description 1
- 230000001502 supplementing effect Effects 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002123 temporal effect Effects 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 1
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 1
- 230000009452 underexpressoin Effects 0.000 description 1
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 1
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 235000019154 vitamin C Nutrition 0.000 description 1
- 239000011718 vitamin C Substances 0.000 description 1
- 230000003820 β-cell dysfunction Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
- C12N5/0602—Vertebrate cells
- C12N5/0676—Pancreatic cells
- C12N5/0678—Stem cells; Progenitor cells; Precursor cells
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
- C12N5/0602—Vertebrate cells
- C12N5/0676—Pancreatic cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/37—Digestive system
- A61K35/39—Pancreas; Islets of Langerhans
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
- A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2500/00—Specific components of cell culture medium
- C12N2500/05—Inorganic components
- C12N2500/10—Metals; Metal chelators
- C12N2500/20—Transition metals
- C12N2500/24—Iron; Fe chelators; Transferrin
- C12N2500/25—Insulin-transferrin; Insulin-transferrin-selenium
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2500/00—Specific components of cell culture medium
- C12N2500/30—Organic components
- C12N2500/34—Sugars
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2500/00—Specific components of cell culture medium
- C12N2500/30—Organic components
- C12N2500/38—Vitamins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
- C12N2501/10—Growth factors
- C12N2501/155—Bone morphogenic proteins [BMP]; Osteogenins; Osteogenic factor; Bone inducing factor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
- C12N2501/10—Growth factors
- C12N2501/16—Activin; Inhibin; Mullerian inhibiting substance
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
- C12N2501/30—Hormones
- C12N2501/38—Hormones with nuclear receptors
- C12N2501/385—Hormones with nuclear receptors of the family of the retinoic acid recptor, e.g. RAR, RXR; Peroxisome proliferator-activated receptor [PPAR]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
- C12N2501/30—Hormones
- C12N2501/38—Hormones with nuclear receptors
- C12N2501/395—Thyroid hormones
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
- C12N2501/40—Regulators of development
- C12N2501/415—Wnt; Frizzeled
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
- C12N2501/60—Transcription factors
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
- C12N2501/70—Enzymes
- C12N2501/72—Transferases [EC 2.]
- C12N2501/727—Kinases (EC 2.7.)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
- C12N2501/998—Proteins not provided for elsewhere
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2506/00—Differentiation of animal cells from one lineage to another; Differentiation of pluripotent cells
- C12N2506/45—Differentiation of animal cells from one lineage to another; Differentiation of pluripotent cells from artificially induced pluripotent stem cells
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2533/00—Supports or coatings for cell culture, characterised by material
- C12N2533/50—Proteins
- C12N2533/54—Collagen; Gelatin
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2533/00—Supports or coatings for cell culture, characterised by material
- C12N2533/90—Substrates of biological origin, e.g. extracellular matrix, decellularised tissue
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Physiology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Virology (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Obesity (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Emergency Medicine (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
Abstract
Description
本出願は、2016年11月16日に出願された米国仮特許出願番号第62/423,120号の利益を主張しており、この仮特許出願は、参考として本明細書中に援用される。
本開示は、細胞密度、試薬濃度、およびmRNAの特異的組み合わせの特異的組み合わせおよび範囲を利用する動態的に制御された細胞成長プロセスを通じて、多能性幹細胞からの膵臓β細胞の誘導を方向付けることに関する。
ヒト幹細胞の生成および結果としての分化における近年の努力は、細胞運命の可塑性、ヒト疾患のモデル、および臨床上の治療剤に関するパラダイムを変化させてきた。胚性幹細胞(ESC)および体細胞から作製される人工多能性幹細胞(iPSC)はともに、それらの相当する初代細胞から区別不能な特異的細胞タイプの増大しつつあるリストへと分化され得る。結果として、幹細胞は、新たなヒト細胞療法の開発にとって極めて有望である。iPSCは、制限のない細胞利用可能性、その細胞を得る手順の非侵襲性、および免疫抑制薬からの解放を許して、各処置を個々の患者に免疫を合わせる潜在的能力のために、個別化医療の分野において特別な潜在的能力を示す。
iPSC由来膵臓β細胞を生成することにおける近年の進歩にも拘わらず、インスリン生成β細胞を一貫して生成する効率的方法は、なお開発中である。多くの最新のプロトコルは、成長因子、ホルモン、サイトカイン、シグナルペプチドおよびインスリン生成β細胞を生成する分化カスケードに沿った各工程における他の細胞内シグナル分子(本文中では単純にするためにまとめて成長因子といわれる)の組み合わせの使用を要する。不運なことに、精製ポリペプチドとして供給される場合、成長因子は、概して高価であり、不安定であり、バッチ間で一貫しないので、これらを使用することは困難になっている。さらに、成長因子は非常に特異的であるが組み合わせに関わる様式で機能することから、分化の各ステージは、成長因子の種々のセットによって必然的に決められ、これは、最適化することが困難でありコストがかかる。本発明の目標の1つは、膵臓β細胞の生成をガイドするにあたって、成長因子の必要性を根本的に除去することであった。
本発明を記載する場合に、本明細書で定義されない全ての用語は、当該分野で認識されるそれらの一般的な意味を有する。以下の説明が本発明の具体的実施形態または特定の使用のものである程度まで、その説明は例証的であるに過ぎず、本願発明の限定ではないことが意図される。以下の説明は、本発明の趣旨および範囲の中に包含される全ての選択肢、改変および均等物を網羅することが意図される。
本発明の理解を容易にするために、多くの用語が以下に定義される。本明細書で定義される用語は、本発明に直接関連する分野の当業者によって一般に理解されるとおりの意味を有する。「1つの、ある(a)」、「1つの、ある(an)」および「上記、この、その(the)」のような用語は、単数形の実体のみに言及することを意図するのではなく、具体例が例証のために使用され得る包括的なクラスを含む。本明細書中の用語法は、本発明の具体的実施形態を記載するために使用されるが、それらの使用法は、請求項の中で概説されるものを除いて、本発明の範囲を定めない。
例示的な細胞タイプとしては、例えば、内胚葉細胞、膵臓前駆細胞、膵内分泌細胞、およびβ細胞が挙げられ得る。
iPSCを、標準サイズの6ウェル細胞培養プレート(約9.5cm2成長面積/ウェル)または標準サイズ12ウェル細胞培養プレート(約3.8cm2成長面積/ウェル)へとプレートして、分化を開始した。他のサイズの培養容器は、必要に応じて同様に適用可能であり、ときおり、試薬および時間の使用のより高い効率のために、6ウェルまたは12ウェルのプレートを超えるものがより好ましい場合がある。機能的な分化したβ細胞を生成するための高効率プロトコルに関する例示的な条件は、出発細胞ステージ、培養容器、被覆、解離剤、培地名称および主要な構成要素、例示的な6ウェルプレートに対する播種密度、および酸素レベルを含め、以下のβ細胞表に提供される。
内胚葉細胞を、市販の細胞培養容器上にプレートする。6ウェルプレートを、図2に示される実験において使用したが、他の標準的な市販のウェルサイズも適切かつ適用可能である。プレートをMatrigel(BD Biosciences)で予め被覆し、次いで、1×105〜1×106 細胞を、DMEM/F12または8mM D−グルコースを補充したMCDB131中にプレートした。
膵臓前駆細胞を、DMEM/F12または8mM D−グルコースを補充したMCDB131中のMatrigel(BD Biosciences)またはコラーゲンI(Sigma)で予め被覆した6ウェルプレートまたは他のプレートの中で培養した。他の類似の付着細胞培養培地はまた、使用に適している。
膵内分泌細胞を、市販の細胞培養容器上で培養した。6ウェルプレートをこれらの実験において使用したが、全ての他のタイプもまた適用可能である。プレートを、CMRL(Mediatech)中のMatrigel(BD Biosciences)またはコラーゲンI(Sigma)で予め被覆した。クラスターを集めた後に、超低付着プレートまたはフラスコを使用した。
図4に示されるように、単層膵内分泌細胞から3次元構造で形成される細胞のクラスターを集め、15mlチューブ(2×105〜1×106 細胞/チューブ)の中に移し、成長培地を遠心分離(300g、2分間)によって除去し、1ml/サンプルのKrebs緩衝液(Melton publication 2014)で2回洗浄した。3mlの低グルコース(2mM) Krebs培地をその細胞に添加し、2時間インキュベートした。その培地を遠心分離によって除去し、その細胞を、1ml Krebs緩衝液/サンプルで2回洗浄した。次いで、1mlのKrebs 低グルコースを各チューブに添加し、空気交換を可能にするようにキャップを緩めたままにして、30分間、37℃においてインキュベーター中でインキュベートした。次いで、上清を、分析のために遠心分離によって集め、次いで、その細胞を1mlのKrebs緩衝液で1回洗浄し、次いで、高グルコース(20mM)を有するKrebs緩衝液中で30分間インキュベートし、次いで、遠心分離して、分析のために上清を集めた。その細胞を2回洗浄し、その後、低グルコース−高グルコースサイクルを再び、合計3回経験させた。その上清を各工程において集め、4〜6回の独立した反復から合わせ、市販のELISAキット(ALPCO)およびプレートリーダー(TecanまたはSpectroMax)を使用することによってインスリンレベルに関してアッセイした。そのアッセイを、比較のためにMeltonプロトコル(2014)に本質的に従うことによって作製したβ細胞でも行ったところ、その結果は、本発明の方法を使用して作製したβ細胞が、Melton法と比較して、より低い基底インスリン発現、および培地中のグルコースの増大に対するより高いインスリン応答速度を有することを示した(図7)。これは、本開示の実施形態の予測外のかつ驚くべき有利な特徴を示す。
本発明に従って生成された例示的な成熟膵臓β細胞の機能をさらに検証するために、そのiPSC由来膵臓β細胞のグルコース応答性インスリン分泌機能を、以下のような糖尿病マウスモデル:1)NODマウス自然発症1型糖尿病モデル、2)STZ誘導性I型糖尿病モデル、3)ob/obもしくはdb/db II型糖尿病モデル;あるいは以下のような非ヒト霊長類モデル:STZ誘導性マカク/ベルベットモンキーもしくはヒヒ I型糖尿病モデル、または自然発症または高脂肪食誘導性マカク/ベルベットモンキーもしくはヒヒ II型糖尿病モデルにおいて試験する。
cGMP手順の下で適するように適合された開示されたプロトコルを使用してヒトiPSC由来膵臓β細胞を使用する臨床試験を、iPSC由来膵臓β細胞療法が現在進行中でなく、ヒトESCに由来する膵臓前駆細胞がこの瞬間に、I型糖尿病を処置することに照準を合わせた臨床試験において使用されている最中であるとしても、他の細胞療法を参照しながら動物研究に従って投与する。自己由来の(好ましいタイプ)または同種異系のiPS細胞に由来するβ細胞は、誘導性I型糖尿病、痩せ型II型糖尿病(lean type II diabetes)、個体自身のβ細胞が離脱またはなくなってしまっている場合の後期ステージ糖尿病、またはβ細胞機能不全に関連する疾患タイプの他のタイプを処置するために、例えば、門脈を通じて送達される。本開示に記載されるとおりの本発明の実施に従って生成される例示的な製造されたβ細胞は、ヒト身体の他の部分(例えば、筋肉、結合組織、膵臓器官または他の器官の一定の部位)に送達される。
本発明は、例えば、以下の項目を提供する。
(項目1)
グルコース感知インスリン分泌膵臓β細胞への幹細胞の分化を誘導するための方法であって、該方法は、
(a)人工多能性幹細胞を出発細胞として、分化のための条件下で培養する工程;
(b)多能性状態から中内胚葉系統に向かって出るように、該出発細胞を誘導する工程;
(c)有効用量においてかつ特定の時間域内でmRNAの第1の組み合わせでの培養細胞トランスフェクションを通じて、該分化している細胞を内胚葉細胞に向かって方向付ける工程;
(d)mRNAの第2の組み合わせでのトランスフェクションを通じて、該内胚葉細胞を膵臓前駆細胞に向かってさらに方向付ける工程;
(e)mRNAの第3の組み合わせで該膵臓前駆細胞を膵内分泌細胞へとさらに成熟させる工程;および
(f)環境グルコースに応答性でありかつ応答してインスリンを分泌し得る膵臓β細胞で富化されたクラスターを集める工程、
を包含する方法。
(項目2)
前記mRNAの第1の組み合わせは、FoxA2 mRNAを含む、項目1に記載の方法。
(項目3)
前記mRNAの第1の組み合わせは、Sox17 mRNAを含む、項目1に記載の方法。
(項目4)
前記mRNAの第1の組み合わせは、FoxA2およびSox17 mRNAを含む、項目1に記載の方法。
(項目5)
前記mRNAの第1の組み合わせは、FoxA2、Sox17、GATA4、およびGATA6 mRNAを含む、項目1に記載の方法。
(項目6)
前記mRNAの第2の組み合わせは、PDX1、Hlxb9、Ptf1a、ixl1、HNF1aおよびb、ならびにSox9 mRNAのうちの少なくとも1つを含む、項目1に記載の方法。
(項目7)
前記mRNAの第3の組み合わせは、PDX1、NKX6.1、NKX2.2、Pax6、Pax4、Hlxb9、およびNgn3 mRNAのうちの少なくとも1つを含む、項目1に記載の方法。
(項目8)
膵臓β細胞運命拘束をもたらす前記mRNAは、NKX6.1、MAFA、またはMAFA mRNAのうちの少なくとも1つを含む、項目1に記載の方法。
(項目9)
前記出発細胞は、被験体の体液または組織から採取される、項目1に記載の方法。
(項目10)
項目1に記載の方法によって得られる細胞。
(項目11)
項目10に記載の細胞を含む、疾患、障害、または形成異常を処置するための組成物。
(項目12)
疾患、障害、または形成異常を処置するための方法であって、該方法は、項目9に記載の細胞および項目11に記載の組成物のうちの少なくとも一方をその必要性のある被験体に投与する工程を包含する、方法。
(項目13)
前記細胞は、レシピエント被験体に由来する、項目12に記載の方法。
(項目14)
前記出発細胞は、レシピエントから採取される、項目12に記載の方法。
(項目15)
人工グルコース感知インスリン分泌膵臓β細胞を生成するための方法であって、該方法は、
(a)人工多能性幹細胞を出発細胞として、分化のための条件下で培養する工程;
(b)多能性状態から中内胚葉系統に向かって出るように、該出発細胞を誘導する工程;
(c)有効用量においてかつ特定の時間域内でmRNAの第1の組み合わせでの培養細胞トランスフェクションを通じて、該分化している細胞を内胚葉細胞に向かって方向付ける工程;
(d)mRNAの第2の組み合わせでのトランスフェクションを通じて、該内胚葉細胞を膵臓前駆細胞に向かってさらに方向付ける工程;
(e)mRNAの第3の組み合わせで該膵臓前駆細胞を膵内分泌細胞へとさらに成熟させる工程;および
(f)環境グルコースに応答性でありかつ応答してインスリンを分泌し得る膵臓β細胞で富化されたクラスターを集める工程、
を包含する方法。
Claims (15)
- グルコース感知インスリン分泌膵臓β細胞への幹細胞の分化を誘導するための方法であって、該方法は、
(a)人工多能性幹細胞を出発細胞として、分化のための条件下で培養する工程;
(b)多能性状態から中内胚葉系統に向かって出るように、該出発細胞を誘導する工程;
(c)有効用量においてかつ特定の時間域内でmRNAの第1の組み合わせでの培養細胞トランスフェクションを通じて、該分化している細胞を内胚葉細胞に向かって方向付ける工程;
(d)mRNAの第2の組み合わせでのトランスフェクションを通じて、該内胚葉細胞を膵臓前駆細胞に向かってさらに方向付ける工程;
(e)mRNAの第3の組み合わせで該膵臓前駆細胞を膵内分泌細胞へとさらに成熟させる工程;および
(f)環境グルコースに応答性でありかつ応答してインスリンを分泌し得る膵臓β細胞で富化されたクラスターを集める工程、
を包含する方法。 - 前記mRNAの第1の組み合わせは、FoxA2 mRNAを含む、請求項1に記載の方法。
- 前記mRNAの第1の組み合わせは、Sox17 mRNAを含む、請求項1に記載の方法。
- 前記mRNAの第1の組み合わせは、FoxA2およびSox17 mRNAを含む、請求項1に記載の方法。
- 前記mRNAの第1の組み合わせは、FoxA2、Sox17、GATA4、およびGATA6 mRNAを含む、請求項1に記載の方法。
- 前記mRNAの第2の組み合わせは、PDX1、Hlxb9、Ptf1a、ixl1、HNF1aおよびb、ならびにSox9 mRNAのうちの少なくとも1つを含む、請求項1に記載の方法。
- 前記mRNAの第3の組み合わせは、PDX1、NKX6.1、NKX2.2、Pax6、Pax4、Hlxb9、およびNgn3 mRNAのうちの少なくとも1つを含む、請求項1に記載の方法。
- 膵臓β細胞運命拘束をもたらす前記mRNAは、NKX6.1、MAFA、またはMAFA mRNAのうちの少なくとも1つを含む、請求項1に記載の方法。
- 前記出発細胞は、被験体の体液または組織から採取される、請求項1に記載の方法。
- 請求項1に記載の方法によって得られる細胞。
- 請求項10に記載の細胞を含む、疾患、障害、または形成異常を処置するための組成物。
- 疾患、障害、または形成異常を処置するための方法であって、該方法は、請求項9に記載の細胞および請求項11に記載の組成物のうちの少なくとも一方をその必要性のある被験体に投与する工程を包含する、方法。
- 前記細胞は、レシピエント被験体に由来する、請求項12に記載の方法。
- 前記出発細胞は、レシピエントから採取される、請求項12に記載の方法。
- 人工グルコース感知インスリン分泌膵臓β細胞を生成するための方法であって、該方法は、
(a)人工多能性幹細胞を出発細胞として、分化のための条件下で培養する工程;
(b)多能性状態から中内胚葉系統に向かって出るように、該出発細胞を誘導する工程;
(c)有効用量においてかつ特定の時間域内でmRNAの第1の組み合わせでの培養細胞トランスフェクションを通じて、該分化している細胞を内胚葉細胞に向かって方向付ける工程;
(d)mRNAの第2の組み合わせでのトランスフェクションを通じて、該内胚葉細胞を膵臓前駆細胞に向かってさらに方向付ける工程;
(e)mRNAの第3の組み合わせで該膵臓前駆細胞を膵内分泌細胞へとさらに成熟させる工程;および
(f)環境グルコースに応答性でありかつ応答してインスリンを分泌し得る膵臓β細胞で富化されたクラスターを集める工程、
を包含する方法。
Priority Applications (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2022045179A JP2022079544A (ja) | 2016-11-16 | 2022-03-22 | RNAでの幹細胞分化による膵臓β細胞の誘導 |
JP2024022731A JP2024045609A (ja) | 2016-11-16 | 2024-02-19 | RNAでの幹細胞分化による膵臓β細胞の誘導 |
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201662423120P | 2016-11-16 | 2016-11-16 | |
US62/423,120 | 2016-11-16 | ||
PCT/US2017/062105 WO2018094114A2 (en) | 2016-11-16 | 2017-11-16 | Induction of pancreatic beta cells by stem cell differentiation with rna |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2022045179A Division JP2022079544A (ja) | 2016-11-16 | 2022-03-22 | RNAでの幹細胞分化による膵臓β細胞の誘導 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2019535273A true JP2019535273A (ja) | 2019-12-12 |
JP7125394B2 JP7125394B2 (ja) | 2022-08-24 |
Family
ID=62107301
Family Applications (3)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2019525968A Active JP7125394B2 (ja) | 2016-11-16 | 2017-11-16 | RNAでの幹細胞分化による膵臓β細胞の誘導 |
JP2022045179A Withdrawn JP2022079544A (ja) | 2016-11-16 | 2022-03-22 | RNAでの幹細胞分化による膵臓β細胞の誘導 |
JP2024022731A Pending JP2024045609A (ja) | 2016-11-16 | 2024-02-19 | RNAでの幹細胞分化による膵臓β細胞の誘導 |
Family Applications After (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2022045179A Withdrawn JP2022079544A (ja) | 2016-11-16 | 2022-03-22 | RNAでの幹細胞分化による膵臓β細胞の誘導 |
JP2024022731A Pending JP2024045609A (ja) | 2016-11-16 | 2024-02-19 | RNAでの幹細胞分化による膵臓β細胞の誘導 |
Country Status (13)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US20180135021A1 (ja) |
EP (1) | EP3541927A4 (ja) |
JP (3) | JP7125394B2 (ja) |
KR (1) | KR102587530B1 (ja) |
CN (1) | CN109963938B (ja) |
AU (1) | AU2017363145B2 (ja) |
BR (1) | BR112019009997A2 (ja) |
CA (1) | CA3043372A1 (ja) |
IL (1) | IL266478A (ja) |
MX (1) | MX2019005768A (ja) |
PH (1) | PH12019501077A1 (ja) |
TW (1) | TWI842667B (ja) |
WO (1) | WO2018094114A2 (ja) |
Families Citing this family (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR102247950B1 (ko) * | 2019-10-16 | 2021-05-04 | 가톨릭대학교 산학협력단 | 이식 후 당뇨병의 발병 위험도 예측 방법 |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20120207744A1 (en) * | 2009-03-19 | 2012-08-16 | Mendlein John D | Reprogramming compositions and methods of using the same |
WO2015178397A1 (ja) * | 2014-05-20 | 2015-11-26 | 国立大学法人熊本大学 | インスリン産生細胞の分化誘導方法 |
WO2016134313A1 (en) * | 2015-02-20 | 2016-08-25 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Generating arterial endothelial cell populations |
Family Cites Families (15)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
AU2003902621A0 (en) * | 2003-05-27 | 2003-06-12 | Commonwealth Scientific And Industrial Research Organisation | Ecdysone receiptor ligand-binding domain structure |
US7985585B2 (en) * | 2004-07-09 | 2011-07-26 | Viacyte, Inc. | Preprimitive streak and mesendoderm cells |
CN101541953A (zh) * | 2006-06-02 | 2009-09-23 | 佐治亚大学研究基金会 | 通过从人胚胎干细胞获得的定形内胚层细胞的分化得到胰和肝内胚层细胞及组织 |
JP2009157562A (ja) * | 2007-12-26 | 2009-07-16 | Sealex Corp | タグシートの製造方法及びタグシート |
WO2009109512A1 (de) * | 2008-02-29 | 2009-09-11 | Basf Se | Ionische flüssigkeit enthaltende katalysatortinte und deren verwendung in elektroden-, ccm-, gde- und mea-herstellung |
JP5268009B2 (ja) * | 2008-06-27 | 2013-08-21 | 独立行政法人産業技術総合研究所 | 成体膵臓幹細胞の樹立方法及び分化方法 |
US20130029416A1 (en) * | 2011-07-22 | 2013-01-31 | Tayaramma Thatava | Differentiating induced pluripotent stem cells into glucose-responsive, insulin-secreting progeny |
ES2729563T3 (es) * | 2012-05-13 | 2019-11-04 | Allele Biotechnology & Pharmaceuticals Inc | Derivación sin alimentadores de células madre pluripotentes inducidas humanas con ARN mensajero sintético |
GB201216796D0 (en) * | 2012-09-20 | 2012-11-07 | Cambridge Entpr Ltd | In vitro pancreatic differentiation |
WO2014130887A1 (en) * | 2013-02-22 | 2014-08-28 | Cedars-Sinai Medical Center | Pancreatic insulin-producing beta-cell lines derived from human pluripotent stem cells |
CN105358680B (zh) * | 2013-04-03 | 2019-06-25 | 富士费勒姆细胞动力学有限公司 | 用于悬浮培养内胚层祖细胞的方法和组合物 |
CN106414718A (zh) * | 2013-06-11 | 2017-02-15 | 哈佛学院校长同事会 | SC-β细胞以及用于产生其的组合物和方法 |
US10443042B2 (en) * | 2014-12-18 | 2019-10-15 | President And Fellows Of Harvard College | Serum-free in vitro directed differentiation protocol for generating stem cell-derived beta cells and uses thereof |
WO2016187451A1 (en) * | 2015-05-19 | 2016-11-24 | Allele Biotechnology And Pharmaceuticals, Inc. | Multi-pathway induction of stem cell differentiation with rna |
TW201823453A (zh) * | 2016-11-16 | 2018-07-01 | 美商綠陽生物科技及製藥公司 | 以rna藉由幹細胞分化誘導肝細胞 |
-
2017
- 2017-11-16 JP JP2019525968A patent/JP7125394B2/ja active Active
- 2017-11-16 KR KR1020197013916A patent/KR102587530B1/ko active IP Right Grant
- 2017-11-16 WO PCT/US2017/062105 patent/WO2018094114A2/en unknown
- 2017-11-16 CA CA3043372A patent/CA3043372A1/en active Pending
- 2017-11-16 US US15/815,625 patent/US20180135021A1/en active Pending
- 2017-11-16 AU AU2017363145A patent/AU2017363145B2/en active Active
- 2017-11-16 EP EP17872174.2A patent/EP3541927A4/en active Pending
- 2017-11-16 CN CN201780071029.0A patent/CN109963938B/zh active Active
- 2017-11-16 BR BR112019009997A patent/BR112019009997A2/pt unknown
- 2017-11-16 MX MX2019005768A patent/MX2019005768A/es unknown
- 2017-11-16 TW TW106139776A patent/TWI842667B/zh active
-
2019
- 2019-05-06 IL IL266478A patent/IL266478A/en unknown
- 2019-05-15 PH PH12019501077A patent/PH12019501077A1/en unknown
-
2022
- 2022-03-22 JP JP2022045179A patent/JP2022079544A/ja not_active Withdrawn
-
2024
- 2024-02-19 JP JP2024022731A patent/JP2024045609A/ja active Pending
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20120207744A1 (en) * | 2009-03-19 | 2012-08-16 | Mendlein John D | Reprogramming compositions and methods of using the same |
WO2015178397A1 (ja) * | 2014-05-20 | 2015-11-26 | 国立大学法人熊本大学 | インスリン産生細胞の分化誘導方法 |
WO2016134313A1 (en) * | 2015-02-20 | 2016-08-25 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Generating arterial endothelial cell populations |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
CLIN EXP MED, vol. 15, JPN6021036749, 2015, pages 501 - 509, ISSN: 0004597360 * |
DIFFERENTIATION, vol. 87, JPN6021036747, 2014, pages 200 - 208, ISSN: 0004597361 * |
STEM CELLS TRANSLATIONAL MEDICINE, vol. 5, JPN6021036746, 2016, pages 1525 - 1537, ISSN: 0004597362 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JP7125394B2 (ja) | 2022-08-24 |
AU2017363145B2 (en) | 2024-02-15 |
RU2019118438A (ru) | 2020-12-18 |
PH12019501077A1 (en) | 2019-08-19 |
KR102587530B1 (ko) | 2023-10-11 |
RU2019118438A3 (ja) | 2021-03-22 |
AU2017363145A1 (en) | 2019-07-04 |
TW201823454A (zh) | 2018-07-01 |
JP2022079544A (ja) | 2022-05-26 |
EP3541927A4 (en) | 2020-11-25 |
EP3541927A2 (en) | 2019-09-25 |
KR20190073441A (ko) | 2019-06-26 |
IL266478A (en) | 2019-07-31 |
TWI842667B (zh) | 2024-05-21 |
US20180135021A1 (en) | 2018-05-17 |
WO2018094114A3 (en) | 2018-07-26 |
WO2018094114A2 (en) | 2018-05-24 |
CN109963938A (zh) | 2019-07-02 |
BR112019009997A2 (pt) | 2019-08-27 |
CN109963938B (zh) | 2024-04-19 |
JP2024045609A (ja) | 2024-04-02 |
MX2019005768A (es) | 2019-12-16 |
CA3043372A1 (en) | 2018-05-24 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US10828335B2 (en) | Production of midbrain dopaminergic neurons and methods for the use thereof | |
CN104640979B (zh) | 可用于治疗胰岛素依赖性糖尿病的干细胞和胰腺细胞 | |
JP2022069552A (ja) | Rnaでの幹細胞分化による肝細胞の誘導 | |
JP2024045609A (ja) | RNAでの幹細胞分化による膵臓β細胞の誘導 | |
KR20160063066A (ko) | 유전자 전달용 그래핀 옥사이드―폴리에틸렌이민 복합체 및 이의 용도 | |
WO2016187451A1 (en) | Multi-pathway induction of stem cell differentiation with rna | |
RU2822203C2 (ru) | Индуцирование панкреатических бета-клеток посредством дифференцировки стволовых клеток под действием рнк | |
KR102361849B1 (ko) | 합성 메신저 rna를 사용한 인간-유도된 만능 줄기 세포의 무-피더 유래 | |
NZ794430A (en) | Induction of pancreatic beta cells by stem cell differentiation with RNA | |
NZ794429A (en) | Induction of hepatocytes by stem cell differentiation with RNA | |
Bharadwaj et al. | Stem cell’s potential role in the treatment of diabetes mellitus | |
WO2020247954A1 (en) | Compositions and methods for maturing stem cell-derived beta cells | |
KR20170124497A (ko) | 유전자 전달용 그래핀 옥사이드―폴리에틸렌이민 복합체 및 이의 용도 | |
Šarić et al. | Alternative Embryonic Stem Cell Sources |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20190718 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20200929 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20210921 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20211215 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20220218 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20220322 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20220725 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20220812 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 7125394 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |