JP2019529458A - オプロゾミブ用の即放性製剤 - Google Patents

Abstract

本開示は、ヒトまたは動物に対する、オプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩の経口投与に有用な即放性医薬製剤（例えば固形剤形、例えば錠剤）、ならびにそれら製剤の製造および使用方法を特徴とする。【選択図】図１

Description

本出願は、２０１６年９月２１日に出願された米国仮特許出願第６２／３９７，８３０号の利益を主張し、その全体が参照として本明細書に組み込まれる。

本開示は、ヒトまたは動物に対する、オプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩の経口投与に有用な医薬製剤（例えば即放性（ＩＲ）医薬製剤、例えば固体製剤、例えば錠剤）、ならびにそれら製剤の製造および使用方法に関する。速やかに崩壊して消化管の十二指腸および空腸での吸収を可能にすることで、悪心、嘔吐および／または下痢の副作用を低減する即放性錠剤を産生する錠剤組成物および方法が開発された。

多発性骨髄腫を含む様々な癌適応症を治療するためのボロン酸プロテアソーム阻害剤であるボルテゾミブや、最近では、難治性多発性骨髄腫を治療するためのテトラペプチドエポキシケトン含有プロテアソーム阻害剤であるカルフィルゾミブがＦＤＡに承認されたことが示すように、プロテアソームは治療標的として有効である。

オプロゾミブ（化学構造は以下に示される）は、経口で生物学的に利用可能な（エポキシケトン含有）トリペプチド不可逆的プロテアソーム阻害剤であり、前臨床モデルにおいて前臨床抗腫瘍活性および広い治療域を示し、現在、第１相臨床試験で研究されている。

本開示は、ヒトまたは動物に対する、オプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩の経口投与に有用な医薬製剤（例えば即放性医薬製剤、例えば固形剤形、例えば錠剤）ならびにそれら製剤の製造および使用方法に関する。

（Ｉ）悪心、嘔吐および下痢（「ＮＶＤ」）は、例えばオプロゾミブが液剤、懸濁剤、カプセル剤および即放性錠剤の形態で製剤化される場合に、その経口投与で観察される胃腸の副作用である。生体動物実験は、オプロゾミブによるＮＶＤ作用が局所的なプロテアソーム阻害によるもので、この局所的なプロテアソーム阻害が部位（胃または小腸）特異的でないことを示唆した。オプロゾミブによるＮＶＤ作用は、むしろ消化管（ＧＩ）（例えば、胃、十二指腸、空腸、回腸、および結腸）におけるオプロゾミブの局所濃度に依存すると考えられた。一旦オプロゾミブが下部消化管に入ると、オプロゾミブは十分に吸収されず、胃腸耐用性の問題を引き起こす可能性がある。このことは、消化管の胃、十二指腸および／または空腸領域におけるオプロゾミブが局所的に高濃度になり、患者に幾分かのＮＶＤを引き起こし、潜在的に用量漸増に影響を与える可能性を意味した。これまで未知であり、多くの実験の後に見出された本発明の新規で進歩的な製剤は、オプロゾミブのＮＶＤ作用を低減する、あるいは排除することを目的としている。このように、本明細書に記載の新規かつ進歩的な製剤は、１種以上の消化管に対する副作用（例えばＮＶＤ）の発生率または重症度を低減できる。

表１および表１ａに示す製剤の多くの他の実施形態が本明細書に記載されている。

表１および表１ａ
オプロゾミブの組成
表１

表１ａ

Opadry II^(R) 白(85F18422)は周知の被覆剤であり、Colorcon, Inc, of West Point, Pennsylvaniaから市販されている。

表１および１ａに記載した製剤は、表２に示した溶解条件下において、約３０分以内に約８０％以上の投与量のオプロゾミブを放出する即放特性を示した（表１の製剤は図１を、表１ａの製剤は図１２をそれぞれ参照）。

表２

表２に示す溶解媒体の１０ｍｍのフローセルを用いて（紫外／可視光分光光度計（Cary UV 50^(R)）を使用）紫外吸収を検出することで、溶解度（ＵＳＰ装置２）を追跡し、決定した。溶解媒体の紫外吸収は、６個の試料（各約１０ｍｌ）を波長２５８ｎｍで測定した。

（II）本明細書に記載のオプロゾミブの医薬製剤は、オプロゾミブの即放特性、例えば従来の即放特性を提供し、表２に示す以下の溶解条件下における紫外吸収により測定した場合、オプロゾミブの投与量の少なくとも約８０％以上が、約３０分以上、例えば約４５分未満、約６０分未満、または約９０分未満のうちに放出される。

本明細書に記載のオプロゾミブの即放性医薬製剤は、以下の１つ以上の利点を提供することができる。

本明細書に記載のオプロゾミブの即放性医薬製剤は、治療上有効なオプロゾミブの血漿への曝露を可能にし、例えば本明細書に記載の障害（例えば、癌、自己免疫疾患、移植片または移植に関連する症状、神経変性疾患、線維症に関連する症状、虚血に関連する症状、感染症（ウイルス、寄生虫または原核生物）および骨量減少に関連する疾患）のうちの１つ以上の障害を治療するのに効果的な、標的組織への強力なプロテアソーム阻害作用を持つ。実施形態によっては、本明細書に記載の製剤は、イヌで測定した場合、最高血漿中濃度への到達時間として約１５〜１８０分（例えば約３０分〜約１２０分、例えば約３０分〜約６０分、例えば約３０分〜約４５分、例えば約３０分、例えば約４５分、例えば約６０分）でオプロゾミブを送達できる。このように、本明細書に記載の製剤は、オプロゾミブを例えば胃および小腸近位部に効率的かつ短期間のうちに放出し、例えば生物学的利用性、薬物動態（ＰＫ）および／または薬力学（ＰＤ）因子を改善し、それによりオプロゾミブが排出および／または分解する前に、オプロゾミブが十二指腸および空腸に吸収される可能性が高まる。好ましい実施形態では、上記製剤は十二指腸および空腸におけるオプロゾミブの吸収を増加させ、忍容性の問題が起きる可能性のある回腸および結腸への上記薬剤の残存量を低下させる。本製剤は、オプロゾミブの胃腸耐用性を高め、患者が服薬計画を順守する可能性を高めることができる。このように、本明細書に記載の製剤は、１つ以上の消化管副作用（例えば、ＮＶＤ）の発生率または重症度を低減できる。

本明細書に記載のオプロゾミブの即放性医薬製剤は、経口投与に適した形態に調製でき、これは一般に患者にとって簡便かつ受け入れ易いため、医薬品投与の好ましい経路の一つである。特定の実施形態では、本明細書に記載の製剤は、固体剤形（例えば錠剤、例えばマトリクス錠剤、例えばマトリクスペレット、例えば粒子充填カプセル、例えば自己乳化薬物送達系（ＳＥＤＤＳ））として経口投与できる。

（III ）（Ａ）したがって、一側面において、本開示は、以下の溶解条件下における紫外吸収により測定した場合、オプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩の投与量の８０％以上が約９０分以内に放出される（例えば約３０分未満〜約９０分未満、例えば約９０分未満、例えば約３０分〜約６０分未満、例えば約６０分未満、例えば約３０分〜約６０分未満、例えば約３０分）、有効量のオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩を含む即放性医薬製剤を特徴とする。

（Ｂ）別の側面において、本開示は、１つ以上の副作用（例えば、ＮＶＤ）の発生率または重症度の低下をもたらす、有効量のオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩を含む即放性医薬製剤を特徴とする。

特定の実施形態では、上記製剤は経口投与に適した形態、例えば固形の経口剤形、例えば錠剤、例えばマトリクス錠剤、例えばマトリクスペレット、例えば粒子充填カプセル、例えば自己乳化薬物送達系（ＳＥＤＤＳ）である。

（Ｃ）さらなる側面において、本開示は、治療上有効なオプロゾミブの血漿への曝露を可能にし、例えば本明細書に記載の障害（例えば、癌、自己免疫疾患、移植片または移植に関連する症状、神経変性疾患、線維症に関連する症状、虚血に関連する症状、感染症（ウイルス、寄生虫または原核生物）および骨量減少に関連する疾患）のうちの１つ以上の障害を治療するのに効果的な、標的組織へのほぼ完全なプロテアソーム阻害をもたらす、有効量のオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩を含む即放性医薬製剤を特徴とする。実施形態によっては、本明細書に記載の製剤は、イヌで測定した場合、最高血漿中濃度への到達時間として約１５〜１８０分（例えば約３０分〜約１２０分、例えば約３０分〜約６０分、例えば約３０分〜約４５分、例えば約３０分、例えば約４５分、例えば約６０分）でオプロゾミブを送達できる。このように、本明細書に記載の製剤は、オプロゾミブを例えば胃および小腸近位部へ効率的かつ短期間のうちに放出し、例えば生物学的利用性、薬物動態（ＰＫ）および／または薬力学（ＰＤ）因子を改善し、それによりオプロゾミブが排出および／または分解する前に、オプロゾミブが十二指腸および空腸に吸収される可能性が高まる。好ましい実施形態では、上記製剤は十二指腸および空腸におけるオプロゾミブの吸収を増加させ、胃腸耐用性の問題が起きる可能性のある回腸および結腸への上記薬剤の残存量を低下させる。本明細書に記載の製剤は、１つ以上の消化管副作用（例えば、ＮＶＤ）の発生率または重症度を低減できる。本製剤は、オプロゾミブの胃腸耐用性を高め、患者が服薬計画を順守する可能性を高めることができる。

（Ｄ）一側面において、本開示は（ｉ）以下の溶解条件下における紫外吸収により測定した場合、オプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩の投与量の８０％以上が約９０分以内に放出され（例えば約３０分〜約９０分未満、例えば約９０分未満、例えば約３０分〜約６０分、例えば約６０分未満、例えば約３０分〜約４５分、例えば約３０分）、また（ｉｉ）１つ以上の副作用（例えばＮＶＤ）の発生率または重症度の低減をもたらす、有効量のオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩を含む即放性医薬製剤を特徴とする。

特定の実施形態では、上記製剤は経口投与に適した形態、例えば固形の経口剤形、例えば錠剤、例えばマトリクス錠剤、例えばマトリクスペレット、例えば粒子充填カプセル、例えば自己乳化薬物送達系（ＳＥＤＤＳ）である。

（Ｅ）一側面において、本開示は、有効量のオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩を含む除放性医薬製剤を特徴とするものであって、（ｉ）上記製剤は、以下の溶解条件下における紫外吸収により測定した場合、オプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩の投与量の８０％以上を約９０分以内、例えば９０分未満、例えば約３０分〜約６０分、例えば約６０分、例えば約３０〜約４５分、例えば約３０分で放出する。

また（ｉｉ）上記製剤は、１つ以上の副作用（例えばＮＶＤ）の発生率または重症度を低減し、また（ｉｉｉ）上記製剤は、治療上有効なオプロゾミブの血漿への曝露を可能にし、例えば本明細書に記載の障害（例えば、癌、自己免疫疾患、移植片または移植に関連する症状、神経変性疾患、線維症に関連する症状、虚血に関連する症状、感染症（ウイルス、寄生虫または原核生物）および骨量減少に関連する疾患）のうちの１つ以上の障害を治療するのに効果的な、標的組織へのほぼ完全なプロテアソーム阻害を示し、実施形態によっては、本明細書に記載の製剤は、イヌで測定した場合、最高血漿中濃度への到達時間として約１５〜１８０分（例えば約３０分〜約１２０分、例えば約３０分〜約６０分、例えば約３０分〜約４５分、例えば約３０分、例えば約４５分、例えば約６０分）でオプロゾミブを送達でき、このように、本明細書に記載の製剤は、オプロゾミブを例えば胃および小腸近位部に効率的かつ短期間のうちに放出し、例えば生物学的利用性、薬物動態（ＰＫ）および／または薬力学（ＰＤ）因子を改善し、それによりオプロゾミブが排出および／または分解する前に、オプロゾミブが十二指腸および空腸に吸収される可能性が高まる。好ましい実施形態では、上記製剤は十二指腸および空腸におけるオプロゾミブの吸収を増加させ、忍容性の問題が起きる可能性のある回腸および結腸への上記薬剤の残存量を低下させる。本明細書に記載の製剤は、１つ以上の消化管副作用（例えば、ＮＶＤ）の発生率または重症度を低減する。本製剤は、オプロゾミブの胃腸耐用性を高め、患者が服薬計画を順守する可能性を高めることができる。

特定の実施形態では、上記製剤は経口投与に適した形態、例えば固形の経口剤形、例えば錠剤、例えばマトリクス錠剤、例えばマトリクスペレット、例えば粒子充填カプセル、例えば自己乳化薬物送達系（ＳＥＤＤＳ）である。

オプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩の「有効量」は、患者の人種、年齢、全身状態、副作用または障害の重篤度、特定の化合物の同一性、投与方式など、患者ごとに異なる。本明細書中で使用する場合、「有効量」とは、治療効果（例えば、制御、緩和、改善、軽減、または進行の遅延）を付与する、または治療患者における疾患、障害、またはそれらの状態もしくは症状を予防する（例えば、発症を遅らせる、または発症リスクを低減する）、オプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩の量をいう。治療効果は、客観的（つまり、何らかの試験または指標で測定可能）または主観的（つまり、患者が効果の指標を与える、または効果を感じる）でよい。

（Ｆ）一側面では、本明細書のいずれかに記載の製剤を患者に投与することを含む、患者の癌（例えば多発性骨髄腫、例えば再発性および／または難治性の多発性骨髄腫、例えばワルデンストロームマクログロブリン血症、例えば骨髄異形成症候群、例えば慢性リンパ球性白血病、例えば形質細胞性白血病、例えば肝細胞癌、例えばマントル細胞白血病）を治療する方法を特徴とする。

別の側面では、本明細書のいずれかに記載の製剤を患者に投与することを含む、患者の自己免疫疾患を治療する方法を特徴とする。

別の側面では、本明細書のいずれかに記載の製剤を患者に投与することを含む、患者の移植片または移植に関連する症状を治療する方法を特徴とする。

別の側面では、本明細書のいずれかに記載の製剤を患者に投与することを含む、患者の神経変性疾患を治療する方法を特徴とする。

別の側面では、本明細書のいずれかに記載の製剤を患者に投与することを含む、患者の線維症に関連する症状を治療する方法を特徴とする。

別の側面では、本明細書のいずれかに記載の製剤を患者に投与することを含む、患者の虚血に関連する症状を治療する方法を特徴とする。

別の側面では、本明細書のいずれかに記載の製剤を患者に投与することを含む、患者の感染症を治療する方法を特徴とする。

別の側面では、本明細書のいずれかに記載の製剤を患者に投与することを含む、患者の骨量減少に関連する疾患を治療する方法を特徴とする。

（Ｇ）一側面では、（ｉ）オプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩、および（ｉｉｉ）水を含む液体の存在下で、１種以上の結合剤および１種以上の崩壊剤から選択される１種以上の医薬的に許容される賦形剤を顆粒化することを含む、本明細書に記載されている製剤を調製する方法を特徴とする。

別の側面では、本明細書に記載の方法によって調製される製剤は、例えば造粒、例えば湿式造粒（例えば泡造粒、噴霧乾燥、凍結乾燥）、直接圧縮、乾式造粒（例えば、スラッギング、ローラー圧縮）、流動層造粒、乳化、押出球形化、溶融押出、ペレット化、薬物層形成、またはコーティングなどによって特徴付けられる。

（IV）実施形態は、以下の特性のうちの１つ以上を含むことができる。上記製剤は、１つ以上の副作用（例えば、悪心／嘔吐（ＮＶＤ））の発生率または重症度を低減できる。

上記製剤は、イヌで測定した場合、最高血漿中濃度への到達時間が約１５〜１８０分（例えば約３０分〜約１２０分、例えば約３０分〜約６０分、例えば約３０分〜約４５分、例えば約３０分、例えば約４５分、例えば約６０分）となるオプロゾミブを提供できる。上記製剤は、経口投与に適した形態であってもよい。

上記製剤は、１種以上の医薬的に許容される高分子を任意に含んでもよい。実施形態によっては、１種以上の医薬的に許容される高分子は、マトリクス形成高分子（例えば、ヒドロキシプロピルメチルセルロースなどの親水性マトリクス形成高分子）である。特定の実施形態では、ヒドロキシプロピルメチルセルロースは、１２０センチポアズ（ｃＰ）（２％水溶液、２０℃）を超える見かけ粘度であってよい。例えば、ヒドロキシプロピルメチルセルロースは、２５００ｃＰ（２％水溶液、２０℃）から６０００ｃＰ（２％水溶液、２０℃）の見かけ粘度であってよい。上記製剤は、３．００重量％〜６０．００重量％の高分子（例えば、３．００重量％〜１１．００重量％の高分子、または１３．００重量％〜２２．００重量％の高分子）を含んでもよい。

本発明の一側面では、上記製剤は、約５重量％〜約９５重量％のオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩（例えば、約１０重量％〜約４０重量％のオプロゾミブまたは医薬的に許容される塩、約１５重量％〜約６０重量％のオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩、約２０重量％〜約５０重量％のオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩、例えば約２５重量％〜約４０重量％のオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩、例えば約２５重量％〜約３３重量％のオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩、例えば約３０重量％〜約３５重量％のオプロゾミブまたはそれらの医薬的に許容される塩、例えば約３３．３３重量パーセントのオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩、または約１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、または３５重量％のオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩）を含むことができる。

上記製剤は、約２５ｍｇのオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩、約５０ｍｇのオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩、約１００ｍｇのオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩、約４００ｍｇのオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩を含むことができる。

上記製剤は、約２０重量％〜約４０重量％のオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩、および約２５ｍｇのオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩を含むことができる。

上記製剤は、約２０重量％〜約４０重量％のオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩、および約５０ｍｇのオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩を含むことができる。

上記製剤は、約２０重量％〜約４０重量％のオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩、および約１００ｍｇのオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩を含むことができる。

上記製剤は、約２５重量％〜約６０重量％のオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩、および約４００ｍｇのオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩を含むことができる。

オプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩は、結晶性の固体でもよい。オプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩は、非晶質の固体でもよい。上記製剤はさらに１種以上の充填剤を含むことができる。上記１種以上の充填剤は、微結晶セルロース、ラクトース一水和物、リン酸一水素カルシウム（ＤＣＰ）、ショ糖、ブドウ糖、マンニトール、およびソルビトールから選択できる。

上記製剤は、１種以上の湿潤剤（例えば、ラウリル硫酸ナトリウム）を任意に含んでもよい。湿潤剤は界面活性剤または他の界面活性を有する薬剤を含んでもよい。
上記製剤は、１種以上の潤滑剤（例えば、ステアリン酸マグネシウム）をさらに含んでもよい。
上記製剤は、１種以上の崩壊剤（例えば、クロスカルメロースナトリウム）をさらに含んでもよい。
上記製剤は、１種以上の被覆剤（例えば、Opadry II^(R) 白(85F18422)）をさらに含んでもよい。

上記製剤は以下を含んでもよい。

例として、上記製剤は以下を含んでもよい。

本発明の別の側面では、上記製剤は以下を含む。ｉ）約２０〜約３５重量％のオプロゾミブ、またはその医薬的に許容される塩、ｉｉ）約３０〜約７０重量パーセントの１種以上の充填剤、ｉｉｉ）約０．０１〜約２重量％の１種以上の潤滑剤、ｉｖ）約３．５〜約５重量％の１種以上の崩壊剤。

別の側面では、本発明は乾燥剤を含む製剤を開示する。上記製剤は、固形剤形（例えば錠剤）でよい。上記錠剤は、約２．５ｍｍ〜約７ｍｍの厚さでよい。上記錠剤は、約５ｍｍ〜約６ｍｍの厚さでよい。

上記錠剤は、約３．０ｍｍ〜約３．７７ｍｍ、例えば約３．０４ｍｍ、例えば約３．７５ｍｍの厚さでよい。

上記錠剤は、約１．００から約２５．００キロポンド（ｋｐ）、例えば約５ｋｐ、例えば約８ｋｐの硬度でよい。

オプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩の投与量の約８０％を超える量が、約９０分以内に放出される。

オプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩の投与量の約８０％を超える量が、約６０分以内に放出される。

オプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩の投与量の約８０％を超える量が、約３０分で放出される。

あるコホートでは、約６０ｍｇのオプロゾミブを含む上記製剤をイヌに対して単回投与すると、オプロゾミブの最高血漿中濃度（Ｃ _max）が６６．４ｎｇ／ｍｌ（標準偏差７３．３）となる。

第２のコホートでは、上記製剤（約６０ｍｇのオプロゾミブ）をイヌに対して投与すると、終了点までのオプロゾミブの濃度時間曲線下面積（ＡＵＣ）は２８．６ｎｇ・ｈｒ／ｍｌ（標準偏差１８．６）となる。２つのコホートの結果が異なるのは、おそらくイヌ同士の代謝が異なるためとおもわれる。

上記製剤は、３０℃／６５％相対湿度（ＲＨ）の開放条件で実際にまたは模擬的に保管すると、少なくとも１ヶ月間安定である。

上記製剤は、４０℃／７５％ＲＨの開放条件で実際にまたは模擬的に保管すると、少なくとも１ヶ月間安定である。

上記製剤は、乾式造粒、湿式造粒または直接圧縮によって調製できる。本発明の１つ以上の実施形態の詳細は、添付の図面および以下の説明に記載される。上記製剤の他の特性および利点、ならびにその製造および使用方法は、説明および図面、ならびに特許請求の範囲から明らかである。

図１は、約３０分以内、約４５分以内、約６０分以内、約９０分以内に約８０％を超えるオプロゾミブを放出する、本発明の製剤（表１参照）の放出特性を示す図であり、上記製剤の保存期間はＴ＝０である。 図２は、例えば米国特許第９，２９５，７０８号に記載されている、オプロゾミブ結晶のＸＲＰＤ（粉末Ｘ線回折）パターンを示す。 図３は、例えば米国特許第９，２９５，７０８号に記載されている、オプロゾミブ結晶のＤＳＣ（示差走査熱量測定）温度記録を示す。 図４は、例えば米国特許第９，２９５，７０８号に記載されている、オプロゾミブ結晶の熱重量分析（ＴＧ）温度記録を示す。 図５は、約３０分以内、約４５分以内、約６０分以内、約９０分以内に約８０％を超えるオプロゾミブを放出する、本発明の製剤（表１参照）の放出特性を示す図であり、上記製剤の保管期間はＴ＝０である。 図６は、約３０分以内、約４５分以内、約６０分以内、約９０分以内に約８０％を超えるオプロゾミブを放出する、本発明の製剤（表１参照）の放出特性を示す図であり、上記製剤は４０℃／８０％ＲＨで２日間（Ｔ＝２）保管した。 図７は、表１のオプロゾミブ製剤をイヌに投与する薬物動態学的および薬力学的（ＰＫ ／ＰＤ）試験の実験計画を示す。 図８は、表１のＩＲ製剤およびＥＲオプロゾミブ製剤をイヌに投与した場合の、薬物動態（ＰＫ）測定結果を示す。 図９は、表１のＩＲ製剤、ＥＲおよび経口懸濁オプロゾミブ製剤をイヌに投与した場合の、薬力学（ＰＤ）測定結果を示す。 図１０は、表１の相異なるオプロゾミブ製剤の経口投与後の嘔吐事象を示す。 図１１は、徐放性（ＥＲ）製剤の組成を示す。 図１２は、約３０分以内、約４５分以内、約６０分以内、約９０分以内に約８０％を超えるオプロゾミブを放出する、表１ａに示した本発明の製剤の放出特性を示す図であり、上記製剤の保管期間は、Ｔ＝０（試験開始）、および４０℃／７５％ＲＨの開放条件でＴ＝１ヶ月である。 図１３は、好ましい乾燥剤とは異なる乾燥剤を含む実験用製剤の相異なる溶解特性を示す図であり、上記製剤の保管期間は、Ｔ＝０（試験開始）、および４０℃／７５％ＲＨの開放条件でＴ＝１ヶ月である。

詳細な説明
本開示は、ヒトまたは動物に対する、オプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩の経口投与に有用な即放性医薬製剤（例えば固形剤形、例えば錠剤）、ならびにそれら製剤の製造および使用方法を特徴とする。

上記製剤が医薬品オプロゾミブを患者または患者に短時間に放出または溶解するため、「放出」および「溶解」という用語は、本発明において交換可能である。

（Ｖ）製剤成分
（Ａ）典型的に、本明細書に記載の製剤は、オプロゾミブが製剤から体内へ放出する速度を変える１種以上の成分を含む。上記１種以上の成分は、製剤の中心部および／または製剤を囲む被覆剤に存在してもよい。

（１）実施形態によっては、オプロゾミブが製剤から体内に放出する速度を変える１種以上の成分は、１種以上の医薬的に許容される高分子でよい。実施形態によっては、１種以上の医薬的に許容される高分子は、天然、合成および／または半合成の原料に由来する親水性または親油性の徐放性高分子および添加剤でもよい。

特定の実施形態では、１種以上の医薬的に許容される高分子は、１種以上のマトリクス形成高分子、例えば１種以上の親水性マトリクス形成高分子でもよい。

特定の実施形態では、１種以上の医薬的に許容される高分子は、１種以上のマトリクス形成高分子、例えば１種以上の親水性マトリクス形成高分子と、１種以上の不溶性高分子、例えば１種以上のメタクリル酸アンモニオ共重合体との混合物でもよい。

特定の実施形態では、１種以上の親水性マトリクス形成高分子は、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）である。実施形態によっては、１種以上のメタクリル酸アンモニオ共重合体はEudragit^(R)である。実施形態によっては、本明細書に記載の製剤は以下の成分を１種以上含む。
・ 様々な置換度および粘度を有する、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ、例えばMethocel^(R) K100LV、K4M、K15M、K100M、Benecel^(R)MP843、MP814、MP844、Metolose^(R)100、4000、15000および100000ＳＲ）、ヒドロキシプロピルセルロース（ＨＰＣ、例えばKlucel^(R)GXF、MXF、HXF）、ヒドロキシエチルセルロース（ＨＥＣ、例えばNatrosol^(R)250 HHX、HX、M、G）、などの非イオン性可溶性セルロースエーテル。
・ ポリエチレンオキサイドなどのエチレンオキサイドの非イオン性単独重合体（例えば、Polyox^(R)WSR N-12K、WSR N-60K、WSR-301、WSR-coagulant、WSR-303、WSR-308）。
・ キサンタンガム、アルギン酸塩、ローカストビーンガムなどの天然由来の多糖類の水溶性天然ガム類。
・ 様々な架橋度または粒度を有する、ポリアルケニルアルコールで化学的に架橋した、水膨潤性だが不溶性の、アクリル酸高分子量単一重合体および共重合体（Carbopol^(R)71G NF、971P、974P、934P）。
・ ポリ酢酸ビニルとポビドンの混合物（Kollidon^(R)SR）。
・ 架橋高アミロースデンプン。
・ イオン性メタクリル酸塩共重合体（Eudragit^(R)L30D、FS30D）。
・ 脂肪酸、脂肪酸エステル、脂肪酸のモノグリセリド、ジグリセリドおよびトリグリセリド、様々な融点の天然および合成由来のロウ、例えばステアリン酸、ラウリルアルコール、セチルアルコール、セトステアリルアルコール、ベヘン酸グリセリル、カルナバワックス、ミツロウ、キャンデリラワックス、微結晶性ロウ、低分子量ポリエチレン。
・ メタクリル酸アンモニオ共重合体（Eudragit^(R)RL100、PO、RS100、PO、NE-30D、RL-30D、RS-30D、RL PO）、エチルセルロース（Ethocel^(R)、Surelease^(R)、Aquacoat^(R)ECD）、酢酸セルロース（CA-398-10）、酢酸酪酸セルロース（CAB-381-20）、酢酸プロピオン酸セルロース（CAP-482-20）、酢酸フタル酸セルロース（Aquacoat^(R)CPD）、酢酸ポリビニル（Kollicoat^(R)）を含む不溶性高分子。
・ 重炭酸ナトリウム、クエン酸、ステアリン酸、およびそれらの組み合わせを含む発泡成分。

（Ｂ）オプロゾミブ
（１）オプロゾミブは、例えば、実施例１に概説する合成経路および手順に従って調製できる。本明細書中で使用する場合、「医薬的に許容される塩の形態の」などの修飾語がない「オプロゾミブ」は、オプロゾミブの遊離塩基の形態を指すことを意図している。

（２）実施形態によっては、上記製剤はオプロゾミブを含む。実施形態によっては、上記製剤は、医薬的に許容される塩の形態でオプロゾミブを含む。

「医薬的に許容される塩」という用語は、上記阻害剤に比較的非毒性の無機酸および有機酸を付加した塩を指す。これらの塩は、上記阻害剤の最終的な単離および精製中にその場調製する、あるいは遊離塩基の形態で精製した上記阻害剤を、適切な有機酸または無機酸と別途反応させ、その結果形成した塩を単離することで調製できる。代表的な塩は、臭化水素酸塩、塩酸塩、硫酸塩、重硫酸塩、リン酸塩、硝酸塩、酢酸塩、吉草酸塩、オレイン酸塩、パルミチン酸塩、ステアリン酸塩、ラウリン酸塩、安息香酸塩、乳酸塩、リン酸塩、トシル酸塩、クエン酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、ナフチル酸塩、メシル酸塩、グルコヘプトン酸塩、ラクトビオン酸塩、ラウリルスルホン酸塩、アミノ酸塩などを含む。（例えば、Berge et al.（1977）“Pharmaceutical Salts”、J. Pharm. Sci. 66：1-19を参照のこと）。特定の実施形態では、上記製剤は非晶質のオプロゾミブを含む。

特定の実施形態において、上記製剤は１種以上の結晶形態のオプロゾミブを含む。そういったオプロゾミブの結晶形態の例は、例えばＵＳ−２０１２−００７７８５５に記載されており、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。上記結晶形態は、以下の特性のうちの任意の１つ以上を含む。

結晶形態のオプロゾミブは、角度２θで表される以下の特性ピーク、９．４（または約９．４）、２４．３（または約２４．３）、１１．１（または約１１．１）、あるいは１５．３（または約１５．３）、のうち１つを含む粉末Ｘ線回折パターンを有する。

結晶形態のオプロゾミブは、以下の特性ピーク、９．４（または約９．４）、１１．１（または約１１．１）、１５．３（または約１５．３）、あるいは２４．３（または約２４．３）（それぞれ角度２θで表す）のうちの任意の２つ、３つ、あるいは４つを含む粉末Ｘ線回折パターンを有する。

結晶形態のオプロゾミブは、角度２θで９．４（または約９．４）にある特性ピークを含み、かつ（ｉ）角度２θで２４．３（または約２４．３）にある特性ピーク、（ｉｉ）角度２θで１１．１（または約１１．１）にある特性ピーク、または（ｉｉｉ）角度２θで１５．３（または約１５．３）にある特性ピークのうち１つを含む粉末Ｘ線回折パターンを有する。

結晶形態のオプロゾミブは、角度２θで９．４（または約９．４）、１１．１（または約１１．１）、および２４．３（または約２４．３）にある特性ピークを含む粉末Ｘ線回折パターンを有する。

結晶形態のオプロゾミブは、角度２θで９．４（または約９．４）、１１．１（または約１１．１）、１５．３（または約１５．３）、および２４．３（または約２４．３）にある特性ピークを含む粉末Ｘ線回折パターンを有する。

結晶形態のオプロゾミブの粉末Ｘ線回折パターンは、１つ以上のより低強度の特性ピークも含むことがある。一般に、これらの追加的なピークの相対強度は、上記４つの特性ピークに関連する相対強度よりも低い。

結晶形態のオプロゾミブは、角度２θで９．４（または約９．４）、１１．１（または約１１．１）、１５．３（または約１５．３）、２２．３（または約２２．３）および２４．３（または約２４．３）にある特性ピークを含む粉末Ｘ線回折パターンを有する。

結晶形態のオプロゾミブは、角度２θで９．４（または約９．４）、１１．１（または約１１．１）、１２．７（または約１２．７）、１５．３（または約１５．３）、２２．３（または約２２．３）、２４．３（または約２４．３）、および２８．３（または約２８．３）にある特性ピークを含む粉末Ｘ線回折パターンを有する。

結晶形態のオプロゾミブは、角度２θで９．４（または約９．４）、１１．１（または約１１．１）、１２．７（または約１２．７）、１５．３（または約１５．３）、２０．９（または約２０．９）、２１．８（または約２１．８）、２２．３（または約２２．３）、２４．３（または約２４．３）、２８．３（または約２８．３）、２９．０（または約２９．０）、２９．７（または約２９．７）、および３０．５（または約３０．５）にある特性ピークを含む粉末Ｘ線回折パターンを有する。

結晶形態のオプロゾミブは、角度２θで８．９（または約８．９）、９．４（または約９．４）、９．８（または約９．８）、１０．６（または約１０．６）、１１．１（または約１１．１）、１２．７（または約１２．７）、１５．３（または約１５．３）、１７．７（または約１７．７）、１９．０（または約１９．０）、２０．６（または約２０．６）、２０．９（または約２０．９）、２１．６（または約２１．６）、２１．８（または約２１．８）、２２．３（または約２２．３）、２２．８（または約２２．８）、２４．３（または約２４．３）、２４．７（または約２４．７）、２６．０（または約２６．０）、２６．４（または約２６．４）、２８．３（または約２８．３）、２９．０（または約２９．０）、２９．７（または約２９．７）、３０．２（または約３０．２）、３０．５（または約３０．５）、３０．８（または約３０．８）、３２．１（または約３２．１）、３３．７（または約３３．７）、３４．５（または約３４．５）、３５．１（または約３５．１）、３５．３（または約３５．３）、３７．９（または約３７．９）、および３８．５（または約３８．５）にある特性ピークを含む粉末Ｘ線回折パターンを有する。

結晶形態のオプロゾミブは、図２に示されたものと概ね同じ（概ね示されたような）粉末Ｘ線回折パターンを有する。

粉末Ｘ線回折パターンにおける特性ピークの位置の定義と併せて使用する場合、「約」という用語は、記載された２θ値±０．２°を意味することを意図している。

実施形態によっては、特性ピークの位置は、角度２θを小数第１位（０．１°）の値で表現してもよい。

また、結晶形態のオプロゾミブは以下の特性のうちの１つ以上を有する。

結晶形態のオプロゾミブは、約１４０℃の融解開始温度を持つことを含む示差走査熱量測定パターンを有する。

結晶形態のオプロゾミブは、約１４７℃に鋭い吸熱の極大を持つことを含む示差走査熱量測定パターンを有する。

結晶形態のオプロゾミブは、約１４０℃に融解開始温度を持ち、かつ約１４７℃に鋭い吸熱の極大を持つことを含む示差走査熱量測定パターンを有する。

結晶形態のオプロゾミブは、図３に示されたものと概ね同じ（概ね示されたような）、示差走査熱量測定パターンを有する。

結晶形態のオプロゾミブは、約１４０℃〜約１５５℃に融点を持つ（例えば、約１４５℃〜約１５０℃）。

組成（II）の結晶性化合物は、２５〜１２５℃の温度範囲で０．０〜０．３％の重量損失を示すことがある。

結晶形態のオプロゾミブは、図４に示されたものと概ね同じ（概ね示されたような）、熱重量分析パターンを有する。

特定の実施形態では、本明細書のいずれかに記載されているように、上記製剤は非晶質のオプロゾミブおよび１種以上の結晶形態のオプロゾミブの両方を含む。

実施形態によっては、上記製剤は医薬的に許容される塩の形態でオプロゾミブを含む。

特定の実施形態では、上記製剤は医薬的に許容される塩の形態で非晶質のオプロゾミブを含む。

特定の実施形態では、上記製剤は医薬的に許容される塩の形態で、１種以上の結晶形態のオプロゾミブを含む。

実施形態によっては、上記製剤は、オプロゾミブおよび医薬的に許容される塩の形態のオプロゾミブの両方を含む。これらの実施形態は、本明細書のいずれかに記載されているような、非晶質のオプロゾミブ、１種以上の結晶形態のオプロゾミブ、医薬的に許容される塩の形態の非晶質のオプロゾミブ、および医薬的に許容される塩の形態の１種以上の結晶形態のオプロゾミブの任意の組み合わせを含んでもよい。

（３）上記製剤は、約５重量％〜約９５重量％のオプロゾミブ、またはその医薬的に許容される塩を含むことができる（例えば約１５重量％〜約６０重量％のオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩、約１０重量％〜約４０重量％のオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩、約２０重量％〜約５０重量％のオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩、例えば約２５重量％〜約４０重量％のオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩、約２０重量％〜約３３重量％のオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩、
例えば約３０重量％〜約３５重量％のオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩、例えば約３３．３３重量％のオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩、または約１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、または３５重量％のオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩）。
上記製剤は、約２５ｍｇのオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩、約５０ｍｇのオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩、約１００ｍｇのオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩、約２００ｍｇのオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩、または約４００ｍｇのオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩を含むことができる。

実施形態によっては、上記製剤は約５ｍｇ〜約５００ｍｇ（例えば、約５ｍｇ〜約４００ｍｇ、約５．０ｍｇ〜約２５０．０ｍｇ、約２５．０ｍｇ〜約１５０．０ｍｇ、約２５．０ｍｇ〜約１３０．０ｍｇ、約２５．０ｍｇ〜約１２５．０ｍｇ、約３０．０ｍｇ〜約７０．０ｍｇ、約５５．０ｍｇ〜約１２５．０ｍｇ、約５５．０ｍｇ〜約６５．０ｍｇ、約８０．０ｍｇ〜約１３０．０ｍｇ、約８０．０ｍｇ〜約１２０．０ｍｇ、約８５．０ｍｇ〜約１２５．０ｍｇ、約８５．０ｍｇ〜約９５．０ｍｇ、約１１５．０ｍｇ〜約１２５．０ｍｇ、約１７５．０ｍｇ〜約２２５．０ｍｇ）のオプロゾミブ、またはその医薬的に許容される塩を含む。

特定の実施形態では、上記製剤は約５．０ｍｇ〜約２５０．０ｍｇ（例えば、約２５．０ｍｇ〜約１５０．０ｍｇ、約２５．０ｍｇ〜約１３０．０ｍｇ、約２５．０ｍｇ〜約１２５．０ｍｇ、約３０．０ｍｇ〜約７０．０ｍｇ、約３５．０ｍｇ〜約１２５．０ｍｇ、約５５．０ｍｇ〜約６５．０ｍｇ、約８０．０ｍｇ〜約１３０．０ｍｇ、約８０．０ｍｇ〜約１２０．０ｍｇ、約８５．０ｍｇ〜約１２５．０ｍｇ、約８５．０ｍｇ〜約９５．０ｍｇ、約１１５．０ｍｇ〜約１２５．０ｍｇ、約１７５．０ｍｇ〜約２２５．０ｍｇ）のオプロゾミブ、またはその医薬的に許容される塩を含むことができる。例えば、上記製剤は、約５０．００ｍｇのオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩、 約６０．００ｍｇのオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩、約９０．００ｍｇのオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩、約１００．００ｍｇのオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩、約１２０．００ｍｇのオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩、または約２００．００ｍｇのオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩を含むことができる。

特定の実施形態では、上記製剤は、約２０．０ｍｇ〜約４００．０ｍｇ（例えば、約３０．０ｍｇ〜約３００．０ｍｇ、約５５．０ｍｇ〜約１２５．０ｍｇ、約５５．０ｍｇ〜約６５．０ｍｇ、約８０．０ｍｇ〜約１２０．０ｍｇ、約８５．０ｍｇ〜約１２５．０ｍｇ、約８５．０ｍｇ〜約９５．０ｍｇ、約１００．０ｍｇ〜約１２５．０ｍｇ）のオプロゾミブ、またはその医薬的に許容される塩を含む。例えば、上記製剤は、約２０ｍｇのオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩、約２５ｍｇのオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩、約３０ｍｇのオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩、約３５ｍｇのオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩、約４０ｍｇのオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩、約４５ｍｇのオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩、 約５０ｍｇのオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩、約５５ｍｇのオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩、約１００ｍｇのオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩、約４００ｍｇのオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩を含むことができる。

実施形態によっては、上記製剤は、約１０重量％〜約５０重量％（例えば、約３３．３３重量％）のオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩、および約１０．０ｍｇ〜４００．０ｍｇ（例えば、約２５．０ｍｇ〜約２５０．０ｍｇ、約２５．０ｍｇ〜約１２５．０ｍｇ、約３０．０ｍｇ〜約１００．０ｍｇ、約５０．０ｍｇ〜約１２５．０ｍｇ、約５５．０ｍｇ〜約６５．０ｍｇ、約８０．０ｍｇ〜約１３０．０ｍｇ、約８０．０ｍｇ〜約１２０．０ｍｇ、約８５．０ｍｇ〜約１２５．０ｍｇ、約８５．０ｍｇ〜約９５．０ｍｇ、約１００．０ｍｇ〜約１２５．０ｍｇ、約１７５．０ｍｇ〜約２２５．０ｍｇ）、例えば、約２５．００ｍｇ、約５０．００ｍｇ、約６０．００ｍｇ、約１００．００ｍｇ、約１５０．００ｍｇ、約２００．００ｍｇ、約２５０．００ｍｇ、約３００．００ｍｇ、または約４００．００ｍｇのオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩を含む。

実施形態によっては、上記製剤は、約２０．００重量％〜約４０．００重量％のオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩、および約２５．００ｍｇのオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩を含むことができ、あるいは、上記製剤は約２０．００重量％〜約４０．００重量％のオプロゾミブまたはそれらの医薬的に許容される塩、および約５０．００ｍｇのオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩を含むことができる。

特定の実施形態において、上記製剤は、約３３．３３重量％〜約４５．００重量％のオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩、および約１００．００ｍｇのオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩を含むことができる。

（４）実施形態によっては、段落（Ｖ）（Ｂ）（２）に記載した特性のうちの任意の１つ以上を、段落（Ｖ）（Ｂ）（３）に記載した特性のうちの任意の１つ以上と組み合わせてもよい。
（Ｃ）（１）実施形態によっては、上記製剤はさらに１種以上の医薬的に許容される賦形剤を含む。医薬的に許容される賦形剤としては、所望する特定の剤形に適し、かつ調合者の判断に従う、あらゆる充填剤、結合剤、界面活性剤（湿潤剤）、崩壊剤、乾燥剤、糖、酸化防止剤、可溶化剤または懸濁剤、キレート剤、保存剤、着色剤、緩衝剤および／または潤滑剤、またはそれらの組み合わせを含む。Remington's Pharmaceutical Sciences, Sixteenth Edition, E. W. Martin (Mack Publishing Co., Easton, Pa., 1980)は、製薬上許容される製剤の調製に使用する様々な製薬上許容される賦形剤、およびその既知の調製技術を開示している。一般に、１種以上の医薬的に許容される賦形剤（例えば、１種以上の充填剤）の重量パーセントは、オプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩の重量パーセントおよび／または強度または純度によって変動し、場合によっては、オプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩の量および１種以上の他の製剤成分、例えば高分子成分、例えばＨＰＭＣの量によって変動する。

（２）実施形態によっては、上記製剤は１種以上の充填剤を含む。本明細書で使用する場合、「充填剤」という用語は、オプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩の量（および、場合によっては、オプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩の量、および１種以上の他の製剤成分、例えば高分子成分、例えばＨＰＭＣの量）が、錠剤の容量を満たすことができない場合に、それを満たす医薬的に許容される物質を指す（The Theory and Practice of Industrial Pharmacy, Third Edition. Leon Lachman, Herbert Lieberman、およびJoseph Kanig, editors. Lea & Febiger, Philadelphia. 1986, page 325を参照のこと）。
充填剤の例としては、これらに限定される物ではないが、微結晶セルロース、ラクトース一水和物、リン酸一水素カルシウム（ＤＣＰ）、ショ糖、ブドウ糖、マンニトール、およびソルビトールが挙げられる。好ましい充填剤としては、微結晶セルロースおよびラクトース一水和物が挙げられる。

実施形態によっては、上記製剤は２種以上の充填剤を含んでもよい。例えば、上記充填剤は微結晶セルロース（例えば、Avicel PH101またはAvicel PH102）およびラクトース一水和物（例えば、Lactose 312またはLactose 316）を含んでもよい。

実施形態によっては、上記製剤は、１種以上の充填剤を約５．００重量％〜約９５．００重量％（例えば、約２０．００重量％〜約８０．００重量％、約３０．００重量％〜約６５．００重量％、約４０．００重量％〜約６５．００重量％、約６０．００重量％〜約６５．００重量％）含んでもよい。例えば、上記製剤は、約３０．８４重量％の１種以上の充填剤、または約３０．８３重量％の１種以上の充填剤、または約６１．６７重量％の１種以上の充填剤を含んでもよい。

実施形態によっては、オプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩に対する１種以上の充填剤の重量パーセント比は、約０．５〜約３．０でよい。例えば、オプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩に対する１種以上の充填剤の重量パーセント比は、約０．９〜約１．８５でよい。

（３）実施形態によっては、上記製剤は１種以上の崩壊剤を含む。本明細書で使用する場合、「崩壊剤」という用語は、水と接触すると薬剤を崩壊させる（したがって活性成分を放出させる）目的で医薬製剤に添加する任意の医薬上許容される薬剤を指す。崩壊剤は、水性環境中で錠剤（およびカプセルの「詰め物」）をより小さな断片に分解するのを促進し、それにより有効表面積を増加させ原薬のより迅速な放出を促進するために、錠剤（およびカプセル化した）製剤に添加される薬剤である。非限定的な崩壊剤の例としては、デンプン（例えばコーンスターチまたは馬鈴薯デンプン）、アルファ化デンプン（Starch 1500）、微結晶セルロース、修飾（架橋）デンプン（例えばナトリウムカルボキシメチルデンプン）、架橋ポリビニルピロリドン、修飾（架橋）セルロース（すなわち、Ac-Di-Sol（溶解促進）、クロスカルメロースナトリウム、Nymcel）、架橋アルギン酸（例えばアルギン酸NFおよびSatialgine^(R)）、天然の超崩壊剤（例えば大豆多糖類またはEmcosoy^(R)）、およびケイ酸カルシウムが挙げられる。例示的な崩壊剤としては、クロスカルメロースナトリウムが挙げられる。

実施形態によっては、上記製剤は１種以上の崩壊剤を約０．５０重量％〜約５．００重量％（例えば、約３．０重量％〜約４．５０重量％、約３．５０重量％〜約４．２５重量％、例えば約４．００重量％）含む。

（４）実施形態によっては、上記製剤は１種以上の潤滑剤を含む。本明細書で使用する場合、「潤滑剤」という用語は、錠剤の壁面と錠剤形成に使用する空隙の壁面との間の、錠剤の放出に関連する摩擦を減少させる、医薬的に許容される物質を指す。（The Theory and Practice of Industrial Pharmacy, Third Edition. Leon Lachman, Herbert Lieberman, and Joseph Kanig, editors. Lea & Febiger, Philadelphia. 1986, page 328を参照）。適切な潤滑剤としては、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸金属塩、ベヘン酸グリセリル、フマル酸ステアリルナトリウム、硬化植物油、または脂肪酸が挙げられる。例示的な潤滑剤としては、ステアリン酸マグネシウムが挙げられる。

実施形態によっては、上記製剤は約０．１０重量％〜約２．００重量％（例えば０．５０重量％〜約１．２０重量％、例えば約１．０重量％）の潤滑剤を含んでもよい。

実施形態によっては、上記製剤は潤滑性（潤滑剤として機能する）および充填剤の機能の両方を有する材料（例えば、シリコン処理微結晶セルロース（ＭＣＣ））を含む。これらの材料は、上記および／または段落（Ｖ）（Ｃ）（２）にあるものでよい。

実施形態によっては、高分子またはコロイド状（例えば、メチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、疎水性修飾ヒドロキシエチルセルロースなどの修飾セルロース高分子、およびカルボマー、疎水性修飾ポリエーテルなどの架橋アクリレート高分子）の粘度調整剤（例えば懸濁剤）を組成物中、つまりその核または壁面に含んでもよい。

実施形態によっては、疎水性または親水性のシリカなどの乾燥剤を、カプセル組成物の重量に対して０．０１〜２０％、より好ましくは０．５〜５％、最も好ましくは１〜２％の濃度で含んでもよい。疎水性シリカの例としては、Degussaから入手可能なSIPERNAT D17、AEROSIL R972およびR974など、その表面がハロゲンシラン、アルコキシシラン、シラザン、およびシロキサンで処理されているシラノールが挙げられる。

親水性シリカの例としては、AEROSIL 200、SIPERNAT 22S、SIPERNAT 50S（Degussaから入手可能）、およびSYLOID 244（W.R. Graceから入手可能）がある。

実施形態によっては、上記製剤は１種以上の乾燥剤を含む（表１ａ、例えば二酸化ケイ素）。上記乾燥剤は、好ましくは二酸化ケイ素、より好ましくは多孔質二酸化ケイ素、さらに好ましくは約５００〜約１０００ｍ²／ｇの表面積を有する二酸化ケイ素、最も好ましくは約７００ｍ²／ｇの表面積を有する二酸化ケイ素である。本発明の一側面では、上記二酸化ケイ素は約０．２〜約１ｃｃ／ｇ、最も好ましくは約０．４ｃｃ／ｇの平均細孔容積を有する。W.R. Grace, Columbia, MDから市販されている多孔質二酸化ケイ素であるSYLOID^(R) 63FPを表１ａの製剤に使用した。Cabot Corporation, Boston, MAから市販されているCab-O-Sil M-5P^(R)のような様々な等級の二酸化ケイ素を調査したが、４０℃／７５％ＲＨの開放条件で１ヶ月間貯蔵後に、満足な溶解特性をもたらさなかった。

実施形態によっては、例えば上記製剤が錠剤またはカプセル剤の形態からなる場合、上記製剤はさらに１種以上の被覆剤（例えば、Opadry II^(R)白 (85F18422)または他の色）を含んでもよい。

（５）実施形態によっては、段落（Ｖ）（Ｃ）（１）に記載した特性のうちの任意の１つ以上を、段落（Ｖ）（Ｃ）（２）、または（Ｖ）（Ｃ）（３）、または（Ｖ）（Ｃ）（４）に記載した特性のうちの任意の１つ以上と組み合わせてもよい。
実施形態によっては、段落（Ｖ）（Ｃ）（１）に記載した特性のうちの任意の１つ以上を、段落（Ｖ）（Ｃ）（２）、および（Ｖ）（Ｃ）（３）、または（Ｖ）（Ｃ）（４）に記載した特性のうちの任意の１つ以上と組み合わせてもよい。
実施形態によっては、段落（Ｖ）（Ｃ）（１）に記載した特性のうちの任意の１つ以上を、段落（Ｖ）（Ｃ）（２）、（Ｖ）（Ｃ）（３）、および（Ｖ）（Ｃ）（４）に記載した特性のうちの任意の１つ以上と組み合わせてもよい。

（Ｄ）限定されない製剤成分の組み合わせ。（１）実施形態によっては、上記製剤は
（ｉ）オプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩、および
（ｉｉ）オプロゾミブが製剤から体内に放出する速度を変える１種以上の成分（例えば、１種以上の薬剤）を含む。

特定の実施形態では、上記製剤は段落（Ｖ）（Ｂ）（２）、および／または（Ｖ）（Ｂ）（３）、および／または（Ｖ）（Ｂ）（４）に記載した特性のうちの任意の１つ以上を含んでもよい。
特定の実施形態では、上記製剤は
（ｉ）段落（Ｖ）（Ａ）（１）に記載した特性のうちの任意の１つ以上、および／または
（ｉｉ）段落（Ｖ）（Ｂ）（２）、および／または（Ｖ）（Ｂ）（３）、および／または（Ｖ）（Ｂ）（４）に記載した特性のうちの任意の１つ以上を含んでもよい。

（２）実施形態によっては、上記製剤は
（ｉ）オプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩、
（ｉｉ）オプロゾミブが製剤から体内に放出する速度を変える任意の１種以上の成分（例えば、１種以上の薬剤およびそれらの混合物）、および
（ｉｉｉ）１種以上の医薬的に許容される賦形剤（例えば、１種以上の充填剤および／または１種以上の崩壊剤、および／または１種以上の潤滑剤）を含む。
例えば、上記製剤は表５および表５ａの成分を含んでもよい。

特定の実施形態では、上記製剤は、段落（Ｖ）（Ａ）（１）に記載した特性のうちの任意の１つ以上を含んでもよい。

特定の実施形態では、上記製剤は、段落（Ｖ）（Ｂ）（２）、および／または（Ｖ）（Ｂ）（３）、および／または（Ｖ）（Ｂ）（４）に記載した特性のうちの任意の１つ以上を含んでもよい。

特定の実施形態では、上記製剤は、段落（Ｖ）（Ｃ）（１）、および／または（Ｖ）（Ｃ）（２）、および／または（Ｖ）（Ｃ）（３）、および／または（Ｖ）（Ｃ）（４）、および／または（Ｖ）（Ｃ）（５）に記載した特性のうちの任意の１つ以上を含んでもよい。
特定の実施形態では、上記製剤は
（ｉ）段落（Ｖ）（Ａ）（１）に記載した特性のうちの任意の１つ以上、
（ｉｉ）段落（Ｖ）（Ｂ）（２）、および／または（Ｖ）（Ｂ）（３）、および／または（Ｖ）（Ｂ）（４）に記載した特性のうちの任意の１つ以上、および
（ｉｉｉ）段落（Ｖ）（Ｃ）（１）、および／または（Ｖ）（Ｃ）（２）、および／または（Ｖ）（Ｃ）（３）、および／または（Ｖ）（Ｃ）（４）、および／または（Ｖ）（Ｃ）（５）に記載された特性のうちの任意の１つ以上を含んでもよい。

実施形態によっては、上記段落（Ｖ）に記載した特性のうちの任意の１つ以上を、上記段落（III ）および／または（IV）に記載した特性のうちの任意の１つ以上と組み合わせてもよい。

（VI）剤形。一般的には、上記製剤は経口投与が好ましく、上記製剤は経口投与に適した任意の形態（限定されないが、例えば、錠剤、丸剤、硬質または軟質カプセル剤、糖衣錠、トローチ剤、カシェ剤、分包剤、散剤（例えば、調剤可能な散剤）、顆粒剤などの固形剤形、および、例えばシロップ剤、スラリー剤、ゲル剤、ペレット剤、微粒子剤、エリキシル剤、乳剤および水性懸濁剤、分散剤、液剤、および濃縮液剤などの液体製剤、または経口投与に合理的に適合させた他の任意の形態を含む、任意の通常の経口剤形）でよい。

実施形態によっては、上記製剤は、例えば段落（Ｖ）に記載したような、本明細書に記載した任意の１種以上の成分を所定量含む、個別の固体経口投与単位（例えばカプセル、錠剤または糖衣錠）の形態でよい。

実施形態によっては、上記製剤は錠剤の形態でよい。その形態は所望の形および寸法にしてよい。特定の実施形態では、上記製剤はカプセル形状の錠剤の形態でよい。実施形態によっては、上記錠剤は修飾したカプセル型または修飾した楕円形核錠でよい。特定の実施形態では、上記製剤は約２．５〜約１２．０ミリメートル（ｍｍ）（例えば、約２．０〜約４．０ｍｍ、約３．０〜約３．８ｍｍ、約３．０ｍｍ〜約３．７７ｍｍ、または約５〜７ｍｍ）の厚みを有する錠剤の形態でよい。

特定の実施形態では、上記製剤は、本明細書で使用する場合は経口摂取用の被覆されていない素錠を指す「圧縮錠剤」の形態でよい。一般的に、圧縮錠剤は一回の圧縮、または予備圧縮とそれに続く最終圧縮（例えば、Carver圧縮機、ローラー圧縮機、単発式錠剤圧縮機を使用）で調製する。上記錠剤は、割線を施す、印刷する、および／または所望の識別記号を刻印または浮き出し加工してもよい。実施形態によっては、上記錠剤は約３．０ｋｐ〜約１４．０ｋｐ（例えば、約３．０ｋｐ〜約１２．０ｋｐ、約５．０ｋｐ〜１０．０ｋｐ、約５．０ｋｐ〜約８．０ｋｐ）の硬度を有する。

特定の実施形態では、上記錠剤は被覆錠剤でよい。さらなる例として、上記錠剤はOpadry II^(R)白 (85F18422)（または他の色）などの通常の被覆剤で被覆してもよい。実施形態によっては、被覆は上記錠剤の約１．００〜約５．００重量％を占める。例えば、被覆は約４．００重量％を占めてもよい。

特定の実施形態では、上記錠剤の重量は約５ｍｇ〜約１，５００ｍｇ（例えば約６０ｍｇ〜約１，０００ｍｇ、約７０ｍｇ〜約５００ｍｇ、例えば約７５ｍｇ、約７８ｍｇ、約８０ｍｇ、約１００ｍｇ、約１５０ｍｇ、約１５６ｍｇ、約２００ｍｇ、約２５０ｍｇ、約４００ｍｇまたは約４５０ｍｇ）でよい。

一般的に、上記製剤は、例えば段落（Ｖ）に記載したような、本明細書に記載した任意の１種以上の成分を組み合わせる工程を含む、当技術分野において公知の任意の適切な通常の調剤方法によって調製してよい。上記調製方法は、（１）乾式混合、（２）直接圧縮、（３）粉砕、（４）乾式造粒あるいは非水系の造粒、（５）湿式造粒、または（６）融合を含む方法の１つまたは組み合わせでよい。たとえばLachman et al., The Theory and Practice of Industrial Pharmacy (1986)を参照のこと。

実施形態によっては、上記製剤は、例えば（ｉ）活性成分、界面活性剤、および本明細書に記載の他の任意の成分を混合（例えば製剤を単位剤形へ小分けしやすくするために、均一かつ十分に混合し、活性成分を組成全体に均一に分散させる）し混合物を得る、（ｉｉ）得られた混合物を選別、篩分、粉砕、および／または磨砕する、（ｉｉｉ）必要であれば適切な助剤を添加し、顆粒の混合物を加工する、（ｉｖ）製品を成形し、場合により被覆し、錠剤または糖衣錠剤核を得る、または（ｖ）カプセルなどの経口投与に適した容器に加工した製剤を添加するといった工程を１つ以上実施することで得られる。

特定の実施形態では、上記製剤は当技術分野で公知の湿式造粒技術を用いて調製でき、これには成分の粉砕および篩分、乾式粉末混合、湿式団粒化、造粒、および最終粉砕の工程が含まれる。実施形態によっては、活性成分を微粒化することで、高剪断造粒、流動層造粒、押出球形化などの湿式造粒技術をより良く活用でき、（カプセル化のための）粉末の流動性および溶解特性を向上させた製剤を得ることができる。

特定の実施形態では、上記製剤は当技術分野で公知の乾式造粒技術を用いて調製でき、それは成分の粉砕および篩分、乾式粉末混合、および最終混合の工程を含む。

特定の実施形態では、圧縮錠剤は粉末または顆粒などの自由流動形態の製剤をローラー圧縮機などの適切な機械で圧縮することで調製できる。湿式打錠剤（Molded Tablets）は、不活性液体希釈剤で湿らせた粉末製剤を適切な機械で成形することで製造できる。

当該の実施例は、本明細書に記載の製剤を調製するより具体的な方法を提供する。
（VII ）製剤の非限定的な特性。本明細書に記載の製剤は以下の特性のうちの任意の１つ以上を有する。

（Ａ）実施形態によっては、オプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩の投与量の約８０％を超える量が、約３０分以上、例えば約３０分、約４５分以内、または約６０分以内に放出される。

実施形態によっては、上記製剤は以下の表６に示した放出特性のうちの任意の１、２、３、４、５、６、７、および／または８つを示す。（Ａ）については図１を、（Ｂ）、（Ｃ）、および（Ｄ）については図５を、（Ｅ）、（Ｆ）、（Ｇ）、および（Ｈ）については図６を参照のこと。

表６
表1のオプロゾミブ即放性25 mg錠の溶解特性

（Ｂ）実施形態によっては、上記製剤は１つ以上の副作用（例えばＮＶＤ）の発生率または重症度の低下をもたらす。

（Ｃ）実施形態によっては、上記製剤は治療上有効なオプロゾミブの血漿への曝露を可能にし、例えば本明細書に記載の障害（例えば、癌、自己免疫疾患、移植片または移植に関連する症状、神経変性疾患、線維症に関連する症状、虚血に関連する症状、感染症（ウイルス、寄生虫または原核生物）および骨量減少に関連する疾患）のうちの１つ以上の障害を治療するのに効果的な、標的組織への強力なプロテアソーム阻害作用を持つ。実施形態によっては、本明細書に記載の製剤は、イヌで測定した場合、最高血漿中濃度への到達時間として約３０〜１８０分（例えば約３０分〜約６０分、例えば約３０分〜約４５分、例えば約４５分〜約６０分、例えば約３０分、例えば約４５分、例えば約６０分）（図９を参照のこと）でオプロゾミブを送達でき、このように本明細書に記載の製剤は、オプロゾミブを例えば胃および小腸近位部に効率的かつ短期間のうちに放出し、例えば生物学的利用性、薬物動態（ＰＫ）および／または薬力学（ＰＤ）因子を改善し、それによりオプロゾミブが排出および／または分解する前に、オプロゾミブが十二指腸および空腸に吸収される可能性が高まる。好ましい実施形態では、上記製剤は十二指腸および空腸におけるオプロゾミブの吸収を増加させ、忍容性の問題が起きる可能性のある回腸および結腸への上記薬剤の残存量を低下させる。本製剤は、オプロゾミブの胃腸耐用性を高め、患者が服薬計画を順守する可能性を高めることができる。

特定の実施形態において、約６０ｍｇのオプロゾミブを含む上記製剤をイヌに対して単回投与すると、オプロゾミブの最高血漿中濃度（Ｃ _max）が６６．４ｎｇ／ｍｌ（標準偏差７３．３）となる。

特定の実施形態では、上記製剤（約６０ｍｇのオプロゾミブ）をイヌに対して投与すると、終了点までのオプロゾミブの濃度時間曲線下面積（ＡＵＣ）は２８．６ｎｇ・ｈｒ／ｍｌ（標準偏差１８．６）となる。

（Ｄ）本製剤は、ビン、ふた付きビン、乾燥剤付きビン、ブリスター包装、または業界で広く受け入れられている他の包装材で包装してよい。

特定の実施形態では、上記２５ｍｇおよび５０ｍｇ製剤は、２５℃／６０％相対湿度の開放条件で実際にまたは模擬的に保管すると、少なくとも１ヶ月間安定である。

安定性試験は、以下の手順のうちの１つを用いて行われた。（Ａ）錠剤を７５ｃｃの白色ＨＤＰＥビンに密封、包装し、３０℃±２℃／６５％相対湿度（ＲＨ）±５％ＲＨ、および４０℃±２℃／７５％ＲＨ±５％ＲＨで保管した。所定の期間保管した時点で、錠剤の外観、硬度、定量法および純度、および溶解性を試験した。（Ｂ）錠剤を７５ｃｃの乾燥剤入り白色ＨＤＰＥビンに密封、包装し、２５℃±２℃／６０％相対湿度（ＲＨ）±５％ＲＨ、および４０℃±２℃／７５％ＲＨ±５％ＲＨで保管した。

所定の期間保管した時点で、錠剤の外観、硬度、定量法および純度、および溶解性を試験した。好ましい実施形態では、上記製剤を７５ｃｃの乾燥剤入り白色ＨＤＰＥビンに２５℃／６０％ＲＨで少なくとも１ヶ月間保管した場合、上記製剤のオプロゾミブの分解は約１．０％未満である。より好ましい実施形態では、オプロゾミブの分解量は０．５％、０．４％、０．３％、０．２％未満であり、場合によっては０．１％未満である。
（Ｃ）特に、不純物ＰＲ‐０５９１７６（ＰＲ‐１７６）およびＰＲ‐４８７が検出および測定された。
ＰＲ‐０５９１７６
ＰＲ‐４８７

（VIII）製剤の使用。タンパク質の分解が規則正しく進行することは、正常な細胞機能の維持にとって極めて重要であり、プロテアソームはタンパク質分解プロセスに不可欠である。プロテアソームは、細胞周期の進行および正常細胞と悪性細胞のアポトーシスにとって重要なタンパク質、例えばサイクリン、カスパーゼ、ＢＣＬ２およびＮＦ‐κＢの水準を調節する（Kumatori et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA (1990) 87:7071-7075; Almond et al., Leukemia (2002) 16: 433-443）。従って、当然であるが、関連する細胞に応じてプロテアソーム活性を阻害することは、悪性疾患、非悪性疾患、および自己免疫疾患などの様々な症状の治療に応用できる。

一般的に悪性細胞はプロテアソーム阻害を受けやすいことが、試験管内および生体内モデルの両方において示されている。実際に、多発性骨髄腫を治療するための治療戦略としてプロテアソーム阻害は既に検証されている。これは、部分的には、タンパク質を迅速に除去するプロテアソーム系に対する高増殖性悪性細胞の依存性に起因すると考えられる（Rolfe et al., J. Mol. Med. (1997) 75:5-17; Adams, Nature (2004) 4: 349-360）。従って、本発明の特定の実施形態は、そのような治療を必要とする患者に対して本明細書に開示されるプロテアソーム阻害化合物を有効量投与することを含む、癌を治療する方法に関する。本明細書中で使用する場合、「癌」という用語は、限定されないが、血液由来および固形腫瘍を含む。癌は、限定されないが、膀胱、血液、骨、脳、乳房、子宮頸部、胸部、結腸、子宮内膜、食道、眼、頭、腎臓、肝臓、肺、リンパ節、口、首、卵巣、膵臓、前立腺、直腸、腎臓、皮膚、胃、精巣、喉、および子宮の癌を含む、血液、骨、器官、皮膚組織および血管系の疾患を指す。具体的な癌としては、限定されないが、白血病（急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、有毛細胞白血病）、成熟Ｂ細胞腫瘍（小リンパ球性リンパ腫、Ｂ細胞性前リンパ球性白血病、リンパ形質細胞性リンパ腫（ワルデンストロームマクログロブリン血症または無痛性リンパ腫など）、脾臓辺縁帯リンパ腫、形質細胞性骨髄腫、形質細胞性白血病、形質細胞腫、単クローン性免疫グロブリン沈着症、Ｈ鎖病、節外性辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫（ＭＡＬＴリンパ腫）、節性辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫（ＮＭＺＬ）、消化管腫瘍（消化管間質腫瘍（ＧＩＳＴ）など）、濾胞性リンパ腫、マントル細胞リンパ腫／白血病、びまん性Ｂ細胞リンパ腫、縦隔（胸腺）大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、血管内大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、原発性滲出液リンパ腫、およびバーキットリンパ腫／白血病）、成熟Ｔ細胞およびナチュラルキラー（ＮＫ）細胞腫瘍（Ｔ細胞前リンパ性白血病、Ｔ細胞大型顆粒リンパ球性白血病、侵攻性ＮＫ細胞白血病、成人Ｔ細胞白血病／リンパ腫、節外性ＮＫ／Ｔ細胞リンパ腫、腸症型Ｔ細胞リンパ腫、肝脾Ｔ細胞リンパ腫、芽球性ＮＫ細胞リンパ腫、菌状息肉腫（セザリー症候群）、原発性皮膚未分化大細胞リンパ腫、リンパ腫様丘疹症、血管免疫芽球性Ｔ細胞リンパ腫、未特定末梢Ｔ細胞リンパ腫、および未分化大細胞型リンパ腫）、ホジキンリンパ腫（結節性硬化型、混合細胞型、リンパ球豊富型、リンパ球減少型または非減少型、結節性リンパ球優位型）、骨髄腫（多発性骨髄腫、無痛性骨髄腫、くすぶり型骨髄腫）、慢性骨髄増殖性疾患、骨髄異形成／骨髄増殖性疾患、骨髄異形成症候群、免疫不全関連リンパ増殖性疾患、組織球性および樹状細胞性腫瘍、肥満細胞症、ユーイング肉腫、軟骨肉腫、線維肉腫、悪性巨細胞腫、骨髄腫性骨疾患、骨肉腫、乳癌（ホルモン依存性、ホルモン非依存性）、婦人科癌（子宮頸癌、子宮内膜癌、卵管癌、妊娠性絨毛性疾患、卵巣癌、腹膜癌、子宮癌、膣癌、外陰癌）、基底細胞癌（ＢＣＣ）、扁平上皮癌（ＳＣＣ）、悪性黒色腫、皮膚線維肉腫、メルケル細胞癌、カポジ肉腫、星状細胞腫、毛様細胞性星細胞腫、胚芽異形成性神経上皮腫瘍、乏突起膠腫、上衣腫、多形性膠芽腫、混合神経膠腫、乏突起星細胞腫、髄芽腫、網膜芽細胞腫、神経芽細胞腫、胚細胞腫、奇形腫、悪性中皮腫（腹膜中皮腫、心膜中皮腫、胸膜中皮腫）、胃腸膵臓内または胃腸膵神経内分泌腫瘍（ＧＥＰ‐ＮＥＴ）、カルチノイド、膵内分泌腫瘍（ＰＥＴ）、結腸直腸腺癌、結腸直腸癌、侵攻性神経内分泌腫瘍、平滑筋肉腫、粘液性腺癌印環細胞腺癌、肝細胞癌、胆管癌、肝芽腫、血管腫、肝腺腫、限局性結節性過形成（結節性再生性過形成、過誤腫）、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）（肺扁平上皮癌、腺癌、肺大細胞癌）、小細胞肺癌、甲状腺癌、前立腺癌（ホルモン治療抵抗性、アンドロゲン非依存性、アンドロゲン依存性、ホルモン非感受性）、腎細胞癌、および軟部組織肉腫（線維肉腫、悪性線維性組織球腫、皮膚線維肉腫、脂肪肉腫、横紋筋肉腫、平滑筋肉腫、血管肉腫、滑膜肉腫、悪性末梢神経鞘腫瘍／神経線維肉腫、骨外性骨肉腫）が挙げられる。

造血組織およびリンパ組織の多くの腫瘍は、細胞増殖または特定の種類の細胞の増加によって特徴付けられる。慢性骨髄増多症（ＣＭＰＤ）は、１種以上の骨髄系が骨髄内で増殖することを特徴とするクローン性造血幹細胞障害であり、末梢血中の顆粒球、赤血球および／または血小板数の増加をもたらす。従って、プロテアソーム阻害剤をそのような疾患の治療に使用することは魅力的であり、現在研究されている（Cilloni et al., Haematologica (2007) 92: 1124-1229）。ＣＭＰＤには、慢性骨髄性白血病、慢性好中球性白血病、慢性好酸球性白血病、真性多血症、慢性特発性骨髄線維症、本態性血小板血症および分類不可能な慢性骨髄増殖性疾患が含まれる。本発明の一側面は、本明細書に開示する有効量のプロテアソーム阻害剤化合物を、ＣＭＰＤの治療を必要とする患者に投与することを含む、ＣＭＰＤを治療する方法である。

慢性骨髄単球性白血病、非定型慢性骨髄性白血病、若年性骨髄単球性白血病および分類不可能な骨髄異形成性／骨髄増殖性疾患などの骨髄異形成／骨髄増殖性疾患は、１種以上の骨髄系の増殖による骨髄の細胞過形成を特徴とする。 本明細書に記載の化合物または組成物でプロテアソームを阻害することは、骨髄異形成性／骨髄増殖性疾患の治療を必要とする患者に有効量の上記化合物または組成物を提供することで、これら骨髄異形成性／骨髄増殖性疾患の治療に活用できる。

骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）は、１種以上の主要な骨髄細胞系における異形成および無効な造血で特徴付けられる一群の造血幹細胞障害を指す。これらの血液悪性腫瘍において、ＮＦ‐κＢを標的としてプロテアソーム阻害剤を用いると、アポトーシスが誘導され悪性細胞が死滅する（Braun et al. Cell Death and Differentiation (2006) 13:748-758）。本発明のさらなる実施形態は、本明細書に開示する有効量の化合物をＭＤＳの治療を必要とする患者に投与することを含む、ＭＤＳを治療する方法である。ＭＤＳには、不応性貧血、環状鉄芽球性不応性貧血、多系統異形成を伴う不応性血球減少症、芽球増加性不応性貧血、分類不可能な骨髄異形成症候群、およびｄｅｌ（５ｑ）単独の染色体異常を伴う骨髄異形成症候群が含まれる。

肥満細胞症は肥満細胞が増殖し、その結果１種以上の臓器系へ蓄積する疾患である。肥満細胞症には、限定されないが、皮膚肥満細胞症、無痛性全身性肥満細胞症（ＩＳＭ）、クローン性血液学的非肥満細胞系列の疾患に関連する全身性肥満細胞症（ＳＭ‐ＡＨＮＭＤ）、侵襲性全身性肥満細胞症（ＡＳＭ）、肥満細胞白血病（ＭＣＬ）、肥満細胞肉腫（ＭＣＳ）および皮膚外肥満細胞腫が含まれる。本発明の別の実施形態は、本明細書に開示する有効量の化合物または組成物を肥満細胞症と診断された患者に投与することを含む、肥満細胞症を治療する方法である。

プロテアソームはＮＦ−κＢを調節し、結果として免疫および炎症反応に関与する遺伝子を調節する。例えば、ＮＦ−κＢは、免疫グロブリン軽鎖κ遺伝子、ＩＬ‐２受容体α鎖遺伝子、クラスＩ主要組織適合性複合体遺伝子、および例えばＩＬ‐２、ＩＬ‐６、顆粒球コロニー刺激因子、およびＩＦＮ‐βをコードする多数のサイトカイン遺伝子の発現に必要である（Palombella et al., Cell (1994) 78:773-785）。従って、特定の実施形態では、本発明は本明細書に開示する有効量のプロテアソーム阻害剤化合物または組成物を患者に投与することを含む、ＩＬ‐２、ＭＨＣ‐Ｉ、ＩＬ‐６、ＴＮＦα、ＩＦＮ‐β、または他の任意の前述のタンパク質の発現水準に影響を与える方法に関する。特定の実施形態では、本発明は本明細書に記載した治療上有効な量の化合物または組成物を投与することを含む、哺乳動物の自己免疫疾患を治療する方法を含む。本明細書中の「自己免疫疾患」は、患者自身の組織から生じ、患者自身の組織に対して影響する疾患または障害である。

自己免疫疾患または自己免疫障害の例としては、限定されないが、乾癬および皮膚炎（例えば、アトピー性皮膚炎）を含む炎症性皮膚疾患などの炎症反応、全身性強皮症および硬化症、炎症性腸疾患（クローン病や潰瘍性大腸炎など）に関連する反応、呼吸窮迫症候群（成人呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）を含む）、皮膚炎、髄膜炎、脳炎、ぶどう膜炎、大腸炎、糸球体腎炎、湿疹および喘息およびその他のＴ細胞浸潤および慢性的炎症反応を含む症状などのアレルギー症状、アテローム性動脈硬化症、白血球粘着異常症、関節リウマチ、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、糖尿病（例えば、１型糖尿病、インスリン依存型糖尿病）、多発性硬化症、レイノー症候群、自己免疫性甲状腺炎、アレルギー性脳脊髄炎、シェーグレン症候群、若年型糖尿病、および、典型的には結核、サルコイドーシス、多発性筋炎、肉芽腫症および血管炎に見られるサイトカインおよびＴリンパ球によって媒介される急性および遅延型過敏症に関連する免疫反応、悪性貧血（アジソン病）、白血球の漏出を含む疾患、中枢神経（ＣＮＳ）炎症性疾患、多臓器損傷症候群、溶血性貧血（限定されないが、クームス陽性貧血、クリオグロブリン血症を含む）、重症筋無力症、抗原‐抗体複合体媒介性の疾患、抗糸球体基底膜疾患、抗リン脂質症候群、アレルギー性神経炎、グレーヴス病、イートン・ランバート症候群、水疱性類天疱瘡、天疱瘡、自己免疫性多内分泌腺症、ライター病、スティッフマン症候群、ベーチェット病、巨細胞性動脈炎、免疫複合体性腎炎、ＩｇＡ腎症、ＩｇＭ多発性神経炎、免疫性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、自己免疫性血小板減少症が挙げられる。

免疫系は、自己の細胞がウイルス感染している、発癌性の形質転換を受けている、またはその表面に見慣れないペプチドを提示しているかを判別検査する。細胞内のタンパク質分解がＴリンパ球に提示する小型ペプチドを生成し、ＭＨＣクラスＩ媒介性の免疫応答を誘導する。従って、特定の実施形態では、本発明は上記細胞を本明細書に記載の化合物に曝露（または患者に投与）し、上記細胞における抗原提示を阻害または変化させる免疫調節剤として上記化合物を使用する方法に関する。

特定の実施形態では、本明細書に記載の化合物を治療に有効な量投与することで、哺乳動物における移植片対宿主病または宿主対移植片病などの移植片または移植関連疾患を治療する方法を含む。本明細書で使用される「移植片」という用語は、移植患者に移植するための提供者に由来する生物学的材料を指す。移植片は、例えば島細胞のような単離細胞、新生児の羊膜、骨髄、造血前駆細胞などの組織、および角膜組織などの眼組織、皮膚、心臓、肝臓、脾臓、膵臓、甲状腺葉、肺、腎臓、管状臓器（例えば、腸、血管、または食道）などの器官のような多様な材料を含む。管状臓器は、食道、血管、または胆管の損傷部分の置換に使用できる。皮膚移植片は、火傷だけでなく、損傷した腸の被覆、または横隔膜ヘルニアのようなある種の欠損の修復にも使用できる。移植片は、死体あるいは生体提供者を問わず、ヒトを含むあらゆる哺乳類に由来する。場合によっては、提供者と移植者は同じ哺乳動物である。

移植片は骨髄または心臓などの臓器であり、移植片の提供者と宿主は、ＨＬＡII型抗原が適合することが好ましい。

組織球および樹状細胞の新生物は食細胞および補助細胞に由来し、それらはリンパ球に対する抗原の処理および提示に主要な役割を有する。樹状細胞中のプロテアソーム含有量を枯渇させると、その抗原誘導反応が変化することが示されている（Chapatte et al. Cancer Res. (2006) 66:5461-5468）。従って、本発明の別の実施形態は、組織球または樹状細胞の新生物を患う患者に対して、本明細書に開示する化合物または組成物を有効量投与することを含む。組織球および樹状細胞の新生物には、組織球肉腫、ランゲルハンス細胞組織球症、ランゲルハンス細胞肉腫、指状突起樹状細胞肉腫／腫瘍、濾胞性樹状細胞肉腫／腫瘍、および非特定樹状細胞肉腫が含まれる。

プロテアソーム阻害は細胞増殖性の疾患および免疫疾患を治療するのに有益であることが示されているため、本発明の実施形態は、本明細書に開示する化合物を必要とする患者に有効量投与し、原発性免疫障害（ＰＩＤ）に関連するリンパ球増殖性疾患（ＬＰＤ）を治療することを含む。Ｂ細胞性およびＴ細胞性の新生物およびリンパ腫を含む、リンパ球増殖性疾患の発生率の増加に関連する免疫不全の最も一般的な臨床状況は、原発性免疫不全症候群および他の原発性免疫疾患、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）への感染、固形臓器移植または骨髄同種移植を受けた患者における医原性免疫抑制、およびメトトレキサート治療に伴う医原性免疫抑制である。一般的にＬＰＤと関連する他のＰＩＤは、限定されないが、毛細血管拡張性運動失調症（ＡＴ）、ウィスコット‐アルドリッチ症候群（ＷＡＳ）、分類不能免疫不全症（ＣＶＩＤ）、重症複合免疫不全症（ＳＣＩＤ）、Ｘ連鎖リンパ球増殖性障害（ＸＬＰ）、ナイミーヘン染色体不安定症候群（ＮＢＳ）、高ＩｇＭ症候群、および自己免疫リンパ増殖症候群（ＡＬＰＳ）である。

本発明のさらなる実施形態は、上記細胞を（生体内、例えば患者において、または試験管内で）本明細書に開示するプロテアソーム阻害剤組成物に曝露することで、腫瘍性タンパク質のプロテアソーム依存性調節に影響を与え、癌の増殖を治療または阻害する方法を含む。ＨＰＶ‐１６およびＨＰＶ‐１８由来のＥ６蛋白質は、網状赤血球の粗溶解物中で、ｐ５３のＡＴＰおよびユビキチン依存性の結合および分解を促進する。劣性癌遺伝子であるｐ５３は、変異型熱不安定性Ｅ１を有する細胞株において非許容温度で蓄積することが示されている。ｐ５３の水準が上昇するとアポトーシスを引き起こす可能性がある。ユビキチン系によって分解される癌原タンパク質の例としては、ｃ‐Ｍｏｓ、ｃ‐Ｆｏｓ、およびｃ‐Ｊｕｎが挙げられる。特定の実施形態では、本発明は本明細書に開示するプロテアソーム阻害剤組成物を有効量患者に投与し、ｐ５３関連アポトーシスを治療する方法に関する。

本発明の別の側面は、本明細書に開示するプロテアソーム阻害剤組成物を使用することで、限定されないが、脳卒中、神経系への虚血性損傷、神経性外傷（例えば、衝撃性脳損傷、脊髄損傷、神経系への外傷性損傷）、多発性硬化症およびその他の免疫介在性神経障害（例えば、ギランバレー症候群およびその変異型、急性運動性軸索神経障害、急性炎症性脱髄性多発神経炎、フィッシャー症候群）、ＨＩＶ／ＡＩＤＳ認知症合併症、軸索変性症、糖尿病性神経障害、パーキンソン病、ハンチントン病、多発性硬化症、細菌性、寄生虫性、真菌性、およびウイルス性髄膜炎、脳炎、血管性認知症、多発脳梗塞性認知症、レビー小体病、ピック病などの前頭葉認知症、皮質下部認知症（ハンチントン病や進行性核上性麻痺など）、限局性皮質萎縮症候群（原発性失語症など）、代謝性毒性認知症（慢性甲状腺機能低下症またはＢ１２欠乏症など）、および感染症に起因する認知症（梅毒または慢性髄膜炎など）を含む、神経変性疾患および症状を治療することに関する。

アルツハイマー病は、老人斑および脳血管におけるβ−アミロイドタンパク質（β−ＡＰ）の細胞外沈着を特徴とする。β−ＡＰは、アミロイドタンパク質前駆体（ＡＰＰ）由来の３９〜４２アミノ酸のペプチド断片である。ＡＰＰには少なくとも３つのアイソフォームが知られている（６９５、７５１、および７７０アミノ酸）。ｍＲＮＡの選択的スプライシングによってアイソフォームが生成するが、通常の分解処理（プロセシング）はβ‐ＡＰ配列の一部に影響を与え、それがβ‐ＡＰの生成を妨げる。プロテアソームによる異常タンパク質の分解処理が、アルツハイマー病の脳におけるβ‐ＡＰの増加に寄与していると考えられている。ラットにおけるＡＰＰ分解処理酵素は、約１０個の様々なサブユニット（２２ｋＤａ〜３２ｋＤａ）を含む。２５ｋＤａサブユニットは、Ｘ‐Ｇｌｎ‐Ａｓｎ‐Ｐｒｏ‐Ｍｅｔ‐Ｘ‐Ｔｈｒ‐Ｇｌｙ‐Ｔｈｒ‐ＳｅｒのＮ末端配列を有し、これはヒトマクロパインのβサブユニットと同一である（Kojima, S. et al., Fed. Eur. Biochem. Soc., (1992) 304:57-60）。ＡＰＰ分解処理酵素はＧｌｎ¹⁵‐Ｌｙｓ¹⁶結合を切断するが、カルシウムイオンの存在下では、酵素はさらにＭｅｔ^-1‐Ａｓｐ¹結合およびＡｓｐ¹‐Ａｌａ²結合を切断し、β‐ＡＰの細胞外ドメインを放出する。

従って、本発明の一側面は、本明細書に開示するプロテアソーム阻害剤化合物または組成物を有効量患者に投与することを含む、アルツハイマー病を治療する方法に関する。そのような治療は、β−ＡＰ分解処理の速度を抑制する、β−ＡＰプラークの形成速度を抑制する、β−ＡＰ生成速度を抑制する、およびアルツハイマー病の臨床症状を抑制することを含む。

実施形態によっては、本明細書に開示するプロテアソーム阻害剤化合物または組成物は、アミロイドーシスを治療するのに有用である。従って、本明細書は、本明細書に開示するプロテアソーム阻害剤化合物または組成物を有効量患者に投与することを含む、患者のアミロイドーシスを治療する方法を提供する。

線維症は、線維芽細胞の高増殖性の成長に起因する、線維性の結合組織が過剰かつ持続的に形成される疾患であり、ＴＧＦ‐βシグナル伝達経路の活性化と関連している。線維症は細胞外基質の広範な沈着を伴うが、これは実質的にあらゆる組織に、あるいは複数の異なる組織間にわたって発生する。ＴＧＦ‐βによる刺激を受けて標的遺伝子の転写を活性化する細胞内シグナル伝達タンパク質（Ｓｍａｄ）の水準は、通常、プロテアソームの活動によって調節される（Xu et al., 2000）。しかし、嚢胞性線維症、注射線維症、心内膜心筋線維症、特発性肺線維症、骨髄線維症、後腹膜線維症、進行性塊状線維症、腎性全身性線維症などの線維症においては、ＴＧＦ‐βシグナル伝達成分の分解が加速することが観察される。線維症と関連することが多い他の症状としては、硬変症、びまん性実質性肺疾患、精巣摘除術後疼痛症候群、結核、鎌状赤血球貧血および関節リウマチが挙げられる。本発明の一実施形態は、そのような治療を必要とする患者に本明細書に記載する組成物を有効量投与することを含む、線維性の症状または線維性に関連する症状を治療する方法である。

多くの場合、火傷の治療は線維症によって妨げられる。従って、特定の実施形態では、本発明は本阻害剤の局所投与または全身投与による火傷の治療に関する。多くの場合、手術後の創傷閉鎖は外観を損なう瘢痕と関連するが、これは線維症の抑制によって予防できる。従って、特定の実施形態では、本発明は瘢痕化を予防または軽減する方法に関する。

ＴＮＦαなどのリポ多糖（ＬＰＳ）誘導性サイトカインの過剰産生は、敗血症性ショックに関連する過程で重要であると考えられている。さらに、ＬＰＳによる細胞の活性化の第一段階は、ＬＰＳの特定の膜受容体への結合であることが一般に認められている。２０Ｓプロテアソーム複合体のα‐およびβ‐サブユニットはＬＰＳ結合タンパク質であることが同定されており、これはＬＰＳ誘導シグナル伝達が敗血症の治療または予防に重要な治療標的になることを示唆している（Qureshi, N. et al., J. Immun. (2003) 171: 1515-1525）。従って、特定の実施形態では、プロテアソーム阻害剤組成物はＴＮＦαを阻害することで敗血症性ショックの予防および／または治療に使用できる。

虚血および再灌流傷害は、低酸素症つまり身体組織に到達する酸素が欠乏する症状をもたらす。この症状はＩκ‐Ｂαの分解の増加を引き起こし、その結果ＮＦ‐κＢを活性化する（Koong et al., 1994）。プロテアソーム阻害剤の投与は、低酸素症をもたらす損傷の重症度を低減できることが示されている（Gao, et al., 2000; Bao, et al., 2001; Pye, et al., 2003）。従って、本発明の特定の実施形態は、虚血症状または再灌流傷害の治療を必要とする患者に本明細書に開示するプロテアソーム阻害剤化合物を有効量投与することを含む、虚血または再灌流傷害を治療する方法に関する。そのような症状または損傷の例としては、限定されないが、急性冠症候群（脆弱性プラーク）、動脈閉塞症（心臓、脳、末梢動脈および血管の閉塞）、アテローム性動脈硬化症（冠状動脈硬化症、冠状動脈疾患）、梗塞、心不全、膵炎、心筋肥大、狭窄、および再狭窄が挙げられる。

ＮＦ‐κＢもＨＩＶエンハンサー／プロモーターに特異的に結合する。ｐｂｊ１４のＨＩＶ調節タンパク質であるＮｅｆは、ｍａｃ２３９のＮｅｆと比較すると、タンパク質キナーゼ結合を制御する領域の２つのアミノ酸が異なる。上記タンパク質キナーゼはＩκＢのリン酸化を指示し、ユビキチン‐プロテアソーム経路を介してＩκＢの分解を引き起こすと考えられている。分解後、ＮＦ‐κＢが核内に放出され、それによってＨＩＶの転写が促進される（Cohen, J., Science, (1995) 267:960）。特定の実施形態では、本発明は、本明細書に開示するプロテアソーム阻害剤化合物または組成物を有効量患者に投与することを含む、患者のＨＩＶ感染を阻害または低減する方法、あるいはウイルス遺伝子の発現水準を減少させる方法に関する。

ウイルス感染は多くの疾患の病理の一因となる。進行中の心筋炎や拡張型心筋症などの心臓の症状は、コクサッキーウイルスＢ３と関連がある。感染マウス心臓の全ゲノムマイクロアレイ比較解析では、慢性心筋炎を発症したマウスの心臓で特定のプロテアソームサブユニットが一様に上方制御された（Szalay et al, Am J Pathol 168:1542-52, 2006）。いくつかのウイルスは、ウイルスがエンドソームから細胞質に放出されるウイルス侵入過程でユビキチン‐プロテアソーム系を利用する。マウス肝炎ウイルス（ＭＨＶ）はコロナウイルス科に属し、これには重症急性呼吸器症候群（ＳＡＲＳ）コロナウイルスも含まれる。ＹｕとＬａｉは、ＭＨＶ感染細胞をプロテアソーム阻害剤で処理すると、未処理の細胞と比較してウイルスの複製が減少し、ウイルス力価の減少と相関することを示した（J Virol 79:644-648, 2005）。ヘパドナウイルス科であるヒトＢ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）も、同様に増殖のためにウイルスにコードされたエンベロープタンパク質を必要とする。プロテアソーム分解経路を阻害すると、分泌エンベロープタンパク質の量が著しく減少する（Simsek et al, J Virol 79:12914-12920, 2005）。ＨＢＶに加えて他の肝炎ウイルス（Ａ、Ｃ、ＤおよびＥ）も、分泌、形態形成、および病態形成のためにユビキチン‐プロテアソーム分解経路を利用する。従って、特定の実施形態において、本発明は本明細書に開示された化合物または組成物を有効量細胞と接触させる（または患者に投与する）ことを含む、ＳＡＲＳ、またはＡ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、およびＥ型肝炎などのウイルス感染を治療する方法に関する。

特定の実施形態では、本明細書に開示する組成物は寄生原虫によって起きる感染症などの寄生虫感染症の治療に有用である。これらの寄生虫のプロテアソームは、主に細胞分化および複製活性に関与していると考えられている（Paugam et al., Trends Parasitol.2003, 19(2): 55-59）。さらに、エントアメーバ属は、プロテアソーム阻害剤にさらされると、シスト形成能を失うことが示されている（Gonzales, et al., Arch. Med. Res.1997, 28, Spec No: 139-140）。このような特定の実施形態では、上記プロテアソーム阻害剤組成物の投与方法は、プラスモジウム属（マラリアの原因になるP. falciparum、P. Vivax、P. malariae、およびP. ovaleを含む）、トリパノソーマ属（シャーガス病の原因になるT. cruzi、アフリカ睡眠病の原因になるT. bruceiを含む）、リーシュマニア属（L. amazonesis、L. donovani、L. infantum、L. mexicanaなどを含む）、ニューモシツチス・カリニ（エイズおよびその他の免疫抑制患者に肺炎を起こすことが知られている原虫）、トキソプラズマ・ゴンディ、赤痢アメーバ（Entamoeba histolytica、Entamoeba invadens）、およびランブル鞭毛虫から選択される原虫寄生虫によって起きる、ヒトの寄生虫感染症の治療に有用である。

特定の実施形態では、本明細書に開示するプロテアソーム阻害剤組成物は、Plasmodium hermani、クリプトスポリジウム属、単包条虫、鶏球虫、Sarcocystis neurona、およびアカパンカビから選択される寄生原虫によって起きる動物および家畜の寄生虫感染症の治療に有用である。寄生虫症の治療においてプロテアソーム阻害剤として作用する他の化合物はＷＯ９８／１０７７９に記載されており、その全体が本明細書に組み込まれる。

特定の実施形態では、プロテアソーム阻害剤組成物は、赤血球および白血球において、回復させることなく寄生虫のプロテアソーム活性を阻害する。このような特定の実施形態では、血球の半減期が長いため、寄生虫へ繰り返し曝露される場合の治療において長期間防御を提供できる。特定の実施形態では、プロテアソーム阻害剤組成物は、将来の感染に対する化学的予防法において長期間防御を提供できる。

原核生物は、真核生物と同様の２０Ｓプロテアソーム粒子を有する。原核生物２０Ｓ粒子のサブユニット組成は真核生物の同じものより単純であるが、同様にペプチド結合を加水分解する能力がある。例えば、ペプチド結合に対する求核攻撃は、βサブユニットのＮ末端上のトレオニン残基を介して起こる。したがって、本発明の一実施形態は、本明細書に開示するプロテアソーム阻害剤化合物または組成物を患者に有効量投与することを含む、原核生物による感染症の治療方法に関する。原核生物による感染症は、マイコバクテリア（結核、ハンセン病、またはブルリ潰瘍など）、または古細菌のいずれかによって起きる疾患を含む。

２０Ｓプロテアソームに結合する阻害剤は骨形成を刺激することも骨器官培養物で示されている。さらに、そういった阻害剤をマウスに全身投与した場合、ある種のプロテアソーム阻害剤は骨容量および骨形成率を７０％以上増加させ（Garrett, I. R. et al., J. Clin. Invest. (2003) 111: 1771-1782）、ユビキチン‐プロテアソーム機構が骨芽細胞の分化および骨形成を調節することが示唆された。したがって、本明細書に開示するプロテアソーム阻害剤化合物または組成物は、骨粗鬆症などの骨量減少に関連する疾患の治療および／または予防に利用できる。

従って、特定の実施形態では、本発明は、本明細書に開示する化合物または組成物を投与することを含む、癌、自己免疫疾患、移植片または移植関連症状、神経変性疾患、線維症関連症状、虚血関連症状、感染症（ウイルス性、寄生性、または原核生物性感染症）、骨量減少に関連する疾患から選択される疾患または症状を治療する方法に関する。

１種以上の他の治療薬が、ペプチドプロテアソーム阻害剤またはペプチドプロテアソーム阻害剤を含む医薬組成物と共に投与される併用療法も本明細書中で提供される。そのような併用治療は、それぞれの治療成分の同時的、逐次的、または個別的な投与で達成してもよい。

特定の実施形態では、本明細書で提供する組成物（例えばオプロゾミブを含む医薬組成物）は、１種以上の他のプロテアソーム阻害剤と併用投与される。

特定の実施形態では、本明細書で提供する組成物（例えばオプロゾミブを含む医薬組成物）は、１種以上の化学療法剤と併用投与される。適切な化学療法剤としては、
ビンカアルカロイド（すなわち、ビンブラスチン、ビンクリスチン、およびビノレルビン）、タキサン（例えば、ドセタキセル、パクリタキセル）、エピポドフィロトキシン（すなわち、エトポシド、テニポシド）、抗生物質（ダクチノマイシン（アクチノマイシンＤ）、ダウノルビシン、ドキソルビシン、イダルビシン、例えばドキソルビシン）、アントラサイクリン、ミトキサントロン、ブレオマイシン、プリカマイシン（ミトラマイシン）およびマイトマイシン、酵素（Ｌ‐アスパラギンを全身的に代謝し、自身でアスパラギンを合成できない細胞を除去するＬ‐アスパラギナーゼ）などの天然物；
抗血小板薬；
ナイトロジェンマスタード（メクロレタミン、イホスファミド、シクロホスファミドおよびその類似体、メルファラン、クロラムブシル、例えばメルファラン）、エチレンイミンおよびメチルメラミン（ヘキサメチルメラミンおよびチオテパ）、アルキルスルホナート（ブスルファン）、ニトロソウレア（カルムスチン（ＢＣＮＵ）およびその類似体、ストレプトゾシン）、トラゼネス‐ダカルバジニン（ＤＴＩＣ）などの抗増殖性／抗分裂促進性アルキル化剤；
葉酸類似体（メトトレキサート）、ピリミジン類似体（フルオロウラシル、フロキスリジンおよびシタラビン）、プリン類似体および関連阻害剤（メルカプトプリン、チオグアニン、ペントスタチン、および２−クロロデオキシアデノシン）などの抗増殖性／抗分裂促進性代謝拮抗薬；
アロマターゼ阻害剤（アナストロゾール、エキセメスタン、レトロゾール）；
白金配位錯体（シスプラチン、カルボプラチン）、プロカルバジン、ヒドロキシ尿素、ミトタン、アミノグルテチミド；
ＤＮＡ結合剤／細胞毒性薬（例えば、ザリプシス）；
ヒストンデアセチラーゼ（ＨＤＡＣ）阻害剤（例えば、トリコスタチン、酪酸ナトリウム、アピシダン、スベロイルアニリドヒドロアミド酸（ＳＡＨＡ（ボリノスタット））、トリコスタチンＡ、デプシペプチド、アピシジン、Ａ‐１６１９０６、スクリプトエイド、ＰＸＤ‐１０１、ＣＨＡＰ、酪酸、デプデシン、オキサムフラチン、フェニル酪酸、バルプロ酸、ＭＳ２７５（Ｎ‐（２‐アミノフェニル）‐４‐［Ｎ‐（ピリジン‐３‐イルメトキシ‐カルボニル）アミノメチル］ベンズアミド）、ＬＡＱ８２４／ＬＢＨ５８９、ＣＩ９９４、ＭＧＣＤ０１０３、ＡＣＹ‐１２１５、パノビノスタット）；および
ロイチン化ホルモン放出ホルモン（ＬＨＲＨ）作動薬（ゴセレリン、ロイプロリド、およびトリプトレリン）などのホルモン（すなわちエストロゲン）およびホルモン作動薬。
他の化学療法剤としては、メクロレタミン、カンプトテシン、イホスファミド、タモキシフェン、ラロキシフェン、ゲムシタビン、ナベルビン、またはこれらの任意の類似体もしくは誘導的変異体が挙げられる。

特定の実施形態では、本明細書で提供する医薬組成物（例えばオプロゾミブを含む医薬組成物）は、１種以上のヒストンデアセチラーゼ（ＨＤＡＣ）阻害剤（例えば、トリコスタチン、酪酸ナトリウム、アピシダン、スベロイルアニリドヒドロアミド酸（ＳＡＨＡ（ボリノスタット））、トリコスタチンＡ、デプシペプチド、アピシジン、Ａ‐１６１９０６、スクリプトエイド、ＰＸＤ‐１０１、ＣＨＡＰ、酪酸、デプデシン、オキサムフラチン、フェニル酪酸、バルプロ酸、ＭＳ２７５（Ｎ‐（２‐アミノフェニル）‐４‐［Ｎ‐（ピリジン‐３‐イルメトキシ‐カルボニル）アミノメチル］ベンズアミド）、ＬＡＱ８２４／ＬＢＨ５８９、ＣＩ９９４、ＭＧＣＤ０１０３、ＡＣＹ‐１２１５、パノビノスタット、例えばＳＡＨＡ、ＡＣＹ‐１２１５、パノビノスタット）と併用投与される。

特定の実施形態では、本明細書で提供する医薬組成物（例えばオプロゾミブを含む医薬組成物）は、１種以上のナイトロジェンマスタード（メクロレタミン、イホスファミド、シクロホスファミドおよびその類似体、メルファラン、クロラムブシル、例えばメルファラン）と併用投与される。

特定の実施形態では、本明細書で提供する医薬組成物（例えばオプロゾミブを含む医薬組成物）は、１種以上のＤＮＡ結合剤／細胞毒性薬（例えばザリプシス）と併用投与される。

特定の実施形態では、本明細書で提供する医薬組成物（例えばオプロゾミブを含む医薬組成物）は、１種以上のタキサン（例えば、ドセタキセル、パクリタキセル）と併用投与される。

特定の実施形態では、提供される医薬組成物（例えばオプロゾミブを含む医薬組成物）は、１種以上の抗生物質（ダクチノマイシン（アクチノマイシンＤ）、ダウノルビシン、ドキソルビシン、およびイダルビシン、例えばドキソルビシン）と併用投与される。

実施形態によっては、本明細書で提供する医薬組成物（例えばオプロゾミブを含む医薬組成物）は、１種以上のサイトカインと併用投与される。サイトカインとしては、限定されないが、インターフェロン‐γ、‐α、および‐β、インターロイキン１〜８、１０および１２、顆粒球単球コロニー刺激因子（ＧＭ‐ＣＳＦ）、ＴＮＦ‐αおよび‐β、ならびにＴＧＦ‐βが挙げられる。

実施形態によっては、本明細書で提供する医薬組成物（例えばオプロゾミブを含む医薬組成物）は、１種以上のステロイドと併用投与される。

適切なステロイドは、限定されないが、２１‐アセトキシプレグネノロン、アルクロメタゾン、アルゲストン、アムシノニド、ベクロメタゾン、ベタメタゾン、ブデソニド、クロロプレドニゾン、クロベタゾール、クロコルトロン、クロプレドノール、コルチコステロン、コルチゾン、コルチバゾール、デフラザコート、デソニド、デソキシメタゾン、デキサメタゾン、ジフロラゾン、ジフルコルトロン、ジフルプレドナート、エノキソロン、フルアザコート、フルクロロニド、フルメタゾン、フルニソリド、フルオシノロンアセトニド、フルオシノニド、フルオコルチンブチル、フルオコルトロン、フルオロメトロン、フルペロロンアセテート、フルプレドニデンアセテート、フルプレドニゾロン、フルランドレノリド、プロピオン酸フルチカゾン、ホルモコータル、ハルシノニド、プロピオン酸ハロベタゾール、ハロメタゾン、ヒドロコルチゾン、エタボン酸ロテプレドノール、マジプレドン、メドリゾン、メプレドニゾン、メチルプレドニゾロン、モメタゾンフロエート、パラメタゾン、プレドニカルベート、プレドニゾロン、プレドニゾロン２５‐ジエチルアミノ酢酸、プレドニゾロンリン酸ナトリウム、プレドニゾン、プレドニバル、プレドニリデン、リメキソロン、チキソコルトール、トリアムシノロン、トリアムシノロンアセトニド、トリアムシノロンベネトニド、トリアムシノロンヘキサアセトニド、およびそれらの塩および／または誘導体（例えばヒドロコルチゾン、デキサメタゾン、メチルプレドニゾロンおよびプレドニゾロン、例えばデキサメタゾン）を含んでもよい。

本発明を以下の実施例でさらに説明する。当然のことだが、これらの実施例は単なる説明用であり、決して本発明を限定するものとして解釈すべきではない。

実施例１ オプロゾミブ（下記例の化合物１）の調製

化合物（Ａ）の合成
０℃のＮ‐Ｂｏｃセリン（メチルエーテル）（４３．８ｇ、２００ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（２６．５ｇ、２６０ｍｍｏｌ）、および４‐（ジメチルアミノ）ピリジンのジクロロメタン溶液（１．２Ｌ）に、クロロギ酸ベンジル（４１ｇ、２４０ｍｍｏｌ）のジクロロロメタン溶液（２５０ｍｌ）を３０分かけて添加した。得られた混合物を同じ温度でさらに３時間撹拌した。飽和重炭酸ナトリウム水溶液（２００ｍｌ）を添加し、有機層を分離し、残留混合物をジクロロメタン（２×４００ｍｌ）で抽出した。合わせた有機層は飽和重炭酸ナトリウム水溶液（２００ｍｌ）および食塩水（２００ｍｌ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥後、Celite-545で濾過した。溶媒を減圧除去し、残留物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、ヘキサンおよび酢酸エチル）で精製した。化合物（Ａ）（５４ｇ）を単離し、ＬＣ／ＭＳで解析した（ＬＲＭＳ（ＭＨ）ｍ／ｚ：３１０．１６）。

化合物（Ｂ）の合成
０℃の化合物（Ａ）（５４ｇ）のジクロロメタン溶液（２００ｍｌ）に、トリフルオロ酢酸（２００ｍＬ）を１０分かけて添加し、得られた混合物を同じ温度でさらに３時間撹拌した。溶媒を減圧除去し、残留物を一晩高真空下に置き、ＬＣ／ＭＳ（ＬＲＭＳ（ＭＨ）ｍ／ｚ：２１０．１１）で解析される化合物（Ｂ）のＴＦＡ塩を得た。

化合物（Ｃ）の合成
０℃の化合物（Ｂ）（４３．８ｇ、２００ｍｍｏｌ）、Ｎ‐Ｂｏｃセリン（メチルエーテル）（３６．７ｇ、１６７ｍｍｏｌ）、ＨＯＢＴ（２７ｇ、２００ｍｍｏｌ）およびＨＢＴＵ（７１．４ｇ、２００ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン溶液（１．２Ｌ）に、Ｎ，Ｎ‐ジエチルイソプロピルアミン（７５ｇ、６００ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン溶液（２５０ｍＬ）を１０分かけて添加し、約ｐＨ８の混合物を得た。上記混合物は室温でさらに５時間撹拌した。大部分の溶媒を室温で減圧除去し、重炭酸ナトリウム水溶液（４００ｍｌ）に希釈した。次いでそれを酢酸エチル（３×４００ｍＬ）で抽出し、重炭酸ナトリウム（１００ｍＬ）および食塩水（１００ｍＬ）で洗浄した。合わせた有機層は硫酸ナトリウムで乾燥し、Celite-545^(R)で濾過した。溶媒を減圧除去し、残留物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、ヘキサンおよび酢酸エチル）で精製した。化合物（Ｃ）（６５ｇ）を単離し、ＬＣ／ＭＳで解析した（ＬＲＭＳ（ＭＨ）ｍ／ｚ：４１１．２１）。

化合物（Ｄ）の合成
０℃の化合物（Ｃ）（１８ｇ）のジクロロメタン溶液（１００ｍｌ）にトリフルオロ酢酸（８０ｍｌ）を５分間かけて添加し、得られた混合物を同じ温度でさらに３時間撹拌した。 溶媒を減圧除去し、残留物を一晩高真空下に置き、ＬＣ／ＭＳ（ＬＲＭＳ（ＭＨ）ｍ／ｚ：３１１．１５）によって解析される中間体化合物（Ｄ）のＴＦＡ塩を得た。

化合物（Ｅ）の合成
０℃の２‐メチル‐チアゾール‐５‐カルボン酸エチル（１５ｇ、８８ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（５０ｍｌ）溶液に、水酸化ナトリウム水溶液（５Ｎ、５０ｍｌ）を１０分間かけて添加し、得られた溶液は室温でさらに２時間撹拌した。次に、それを塩酸（２Ｎ）でｐＨ＝１に酸性化し、テトラヒドロフラン（３×１００ｍｌ）で抽出した。合わせた有機層を食塩水（３０ｍｌ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥した。ほとんどの溶媒を減圧除去し、残留物を凍結乾燥して化合物（Ｅ）（１４ｇ）を得た。

化合物（Ｆ）の合成
０℃の化合物（Ｄ）（４１ｍｍｏｌ）、および２‐メチル‐チアゾール‐５‐カルボン酸（Ｅ）（６．０ｇ、４２ｍｍｏｌ）、ＨＯＢＴ（７．９ｇ、５０ｍｍｏｌ）、およびＨＢＴＵ（１８．０ｇ、５０ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン溶液（８００ｍｌ）に、ｐＨが約８．５に達するまでＮ，Ｎ‐ジエチルイソプロピルアミン（約５０ｇ）のテトラヒドロフラン溶液（２００ｍｌ）を５分間かけて加えた。得られた混合物は同じ温度で一晩撹拌した。次に、それに飽和重炭酸ナトリウム水溶液（２００ｍｌ）を添加して反応を止め、溶媒の大部分を減圧除去した。残留混合物を酢酸エチル（３×４００ｍｌ）で抽出した。合わせた有機層を飽和重炭酸ナトリウム水溶液（２００ｍｌ）および食塩水（１００ｍｌ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、Celite-545^(R)で濾過した。溶媒を減圧除去し、残留物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、２％メタノールを含む酢酸エチル）で精製した。化合物（Ｆ）（１７．１ｇ）を単離し、ＬＣ／ＭＳで解析した（ＬＲＭＳ（ＭＨ）ｍ／ｚ：４３６．１５）。

化合物（Ｇ）の合成
化合物（Ｆ）（１７．１ｇ、９５ｍｍｏｌ）のメタノール溶液（３００ｍｌ）に１０％Ｐｄ／Ｃ（３ｇ）を添加した。得られた混合物は１気圧の水素ガス存在下で４８時間撹拌した。上記混合物はCelite-545^(R)で濾過し、ろ過残留物をメタノール（約２００ｍｌ）で洗浄した。有機層を減圧下で濃縮し、高真空下に置いて化合物（Ｇ）を得、ＬＣ／ＭＳによって解析した（ＬＲＭＳ（ＭＨ）ｍ／ｚ：３４６．１）。

化合物（Ｈ）の合成
Ｎ‐Ｂｏｃフェニルアラニン‐ケトエポキシド（１４０ｍｇ、０．４６ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（２ｍｌ）で希釈し、０℃に冷却した。この溶液にトリフルオロ酢酸（６ｍｌ）を加えた。冷却浴を取り外し、反応液を１時間撹拌し、出発原料を完全に消費したことをＴＬＣで確認した。得られた溶液は減圧下で濃縮し、高真空下に置いて化合物（Ｈ）のＴＦＡ塩を得た。

化合物１の合成
０℃の上記化合物（Ｈ）（１３１ｍｇ、０．３８ｍｍｏｌ）および（Ｊ）（０．４６ｍｍｏｌ）、ＨＯＢＴ（７５ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ）およびＨＢＴＵ（１７１ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（２０ｍｌ）およびＮ，Ｎ‐ジメチルホルムアミド（１０ｍｌ）の溶液に、Ｎ，Ｎ‐ジエチルイソプロピルアミン（１ｍｌ）を滴下して加えた。混合物を同じ温度でさらに５時間撹拌した。次に、それに飽和重炭酸ナトリウム水溶液（２０ｍｌ）を添加して反応を止め、溶媒の大部分を減圧除去した。その後、残留混合物を酢酸エチル（３×４０ｍｌ）で抽出した。合わせた有機層を飽和重炭酸ナトリウム水溶液（２０ｍｌ）および食塩水（１０ｍｌ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥後、Celite-545^(R)で濾過した。溶媒を減圧除去し、残留物をＨＰＬＣ（０．０２Ｍ酢酸アンモニウム水溶液およびアセトニトリル（６６／３４））で精製し化合物１（９２ｍｇ）を得、これを凍結乾燥してＬＣ／ＭＳで解析した（ＬＲＭＳ（ＭＨ）ｍ／ｚ：５３３．２）。

例２
非晶質の化合物１（５０ｍｇ）をアセトニトリル（１ｍｌ）に溶解し、次いでイオン交換水（２ｍｌ）を加え、約１〜２週間かけてゆっくり１ｍｌ蒸発させ、溶液を過飽和にした。得られた結晶を濾過し、１：２アセトニトリル‐水混合液１ｍｌで洗浄し、真空下で１２時間乾燥し、融点１４８℃の化合物１の結晶性多形体（２５ｍｇ）を得た。この試料のTA Instruments示差走査熱量計２９２０^(R)を用いて１０℃／分の加熱速度で記録した特性ＤＳＣ曲線を図３に示す。

例３
非晶質の化合物１（６１１ｍｇ）をテトラヒドロフラン（５ｍｌ）に溶解し、次いでヘキサン（５ｍｌ）を加え、実施例２で調製したように結晶性多形体１を種結晶として添加し、約１７時間かけてゆっくり５ｍｌ蒸発させ、溶液を過飽和にした。得られた結晶を濾過し、１ｍｌの１：１テトラヒドロフラン‐ヘキサンで洗浄し、１２時間真空乾燥し、１４７℃の融点を有する化合物１の結晶性多形体（１５０ｍｇ）を得た。

例４
非晶質の化合物１（１７６ｍｇ）をテトラヒドロフラン（５ｍｌ）に溶解し、次いでトルエン（２５ｍｌ）を加えた。実施例２で調製したように結晶性多形体１を種結晶として添加し、約２日間かけてゆっくり２０ｍｌ蒸発させ、溶液を過飽和にした。得られた結晶を濾過し、１５ｍｌのトルエンで洗浄し、１２時間真空乾燥して、融点１４９℃の化合物１の結晶性多形体（８８ｍｇ）を得た。

例５
非晶質の化合物１（３１２ｍｇ）をトルエン（５０ｍｌ）に溶解し、約１００℃に加熱して完全に溶解させ、次いでヘキサン（５０ｍｌ）を添加し、実施例２で調製したように結晶性多形体１を種結晶として添加し、約２日間かけてゆっくり６０ｍｌ蒸発させることで溶液を過飽和にした。得られた結晶を濾過し、１０ｍｌのトルエンで洗浄し、１２時間真空乾燥して、融点１４９℃の化合物１の結晶性多形体（１５６ｍｇ）を得た。

例６
非晶質の化合物１（１．４ｇ）をトルエン（２５ｍｌ）に溶解し、約５０℃に加熱して完全に溶解させ、次いで２２℃に冷却して溶液を過飽和にし、上記化合物を１２時間結晶化させた。得られた結晶を濾過し、５ｍｌのヘキサンで洗浄し、１２時間真空乾燥して、融点１４９℃の化合物１の結晶性多形体（０．９４ｇ）を得た。

例７
化合物１の合成
化合物（Ｈ）の合成
Ｎ‐Ｂｏｃフェニルアラニン‐ケトエポキシド（１．０当量）を不活性雰囲気下で三口丸底フラスコ中でＤＣＭ（Ｎ‐Ｂｏｃフェニルアラニン‐ケトエポキシド１ｋｇあたり３Ｌ）に溶解し、溶液を氷浴中で冷却した。次に、内部温度を１０℃未満に維持する速度でＴＦＡ（５．０当量）を加えた。次に、反応混合物を約２０℃に温め、１〜３時間撹拌した。その後、混合物の温度を２５℃未満に維持しながら、ＭＴＢＥ（Ｎ‐Ｂｏｃフェニルアラニン‐ケトエポキシド１ｋｇあたり３．６Ｌ）を反応混合物に添加した。次いでヘプタン（Ｎ‐Ｂｏｃフェニルアラニン‐ケトエポキシド１ｋｇあたり２６．４Ｌ）を加え、反応物を２〜３時間−５〜０℃に冷却して化合物（Ｈ）を結晶化させた。得られた白色固体を濾過し、ヘプタン（Ｎ‐Ｂｏｃフェニルアラニン‐ケトエポキシド１ｋｇあたり３Ｌ）で洗浄した。その後、上記白色固体を２２℃で１２時間真空乾燥した。得られた合成物の収率は８６％、ＨＰＬＣによる純度は９９．４％であった。

化合物１の合成
化合物（Ｈ）（１．２当量）、化合物（Ｇ）（１．０当量）、ＨＢＴＵ（１．２当量）、ＨＯＢＴ（１．２当量）、およびＮ−メチルピロリジノン（化合物（Ｇ）１ｋｇあたり８Ｌ）を不活性雰囲気下で乾燥フラスコに加え、混合物を２３℃で撹拌して完全に溶解させた。次いで反応物を−５〜０℃に冷却し、内部反応温度を０℃未満に維持しながら、ジイソプロピルエチルアミン（２．１当量）を１５分かけて加えた。反応混合物を０℃で１２時間撹拌した。

８％重炭酸ナトリウム（化合物（Ｇ）１ｋｇあたり４０Ｌ）を反応混合物に添加することで化合物１の粗精製物を沈殿させ、その懸濁液を２０〜２５℃で１２時間撹拌し、さらに０〜５℃で１時間撹拌した。得られた白色固体を濾過し、水（化合物（Ｇ）１ｋｇあたり５Ｌ）で洗浄した。次に、得られた白色固体を水（１５Ｌ／ｋｇ）に添加し、２０〜２５℃で３時間かけて再懸濁化し、濾過した後に水（化合物（Ｇ）１ｋｇあたり５Ｌ）および酢酸イソプロピル（化合物（Ｇ）１ｋｇあたり２×２Ｌ）で洗浄した。白色固体を４５℃で恒量になるまで真空乾燥した。化合物１の粗精製物の収率は６５％、ＨＰＬＣによる純度は９７．２％であった。

化合物１の粗精製物に、酢酸イソプロピル（化合物１の粗精製物１ｋｇあたり２０Ｌ）を加え、８５℃に加熱して撹拌することで完全に溶解させた。次いで、溶液を熱いまま濾過して粒子状物質を除去し、溶液を８５℃に再加熱して透明な溶液を得た。得られた透明な溶液を１時間あたり１０℃の速度で６５℃まで冷却し、種結晶を添加した。化合物１の結晶化が十分に起きた後、溶液を１時間当たり１０℃の速度で２０℃に冷却した。懸濁液を２０℃で６時間攪拌後、さらに０〜５℃で最低２時間攪拌し、濾過した後に酢酸イソプロピル（化合物１の粗精製物１ｋｇあたり１Ｌ）で洗浄した。化合物１の精製品を４５℃で恒量になるまで最低２４時間真空乾燥した。化合物１の収率は８７％、ＨＰＬＣによる純度は９７．２％であった。

例８
化合物１の合成
化合物（Ｈ）（１．１当量）、化合物（Ｇ）（１．０当量）、ＨＢＴＵ（１．５当量）、ＨＯＢＴ（１．５当量）、およびＤＭＦ（化合物（Ｇ）１ｋｇあたり８Ｌ）を不活性雰囲気下で乾燥フラスコに加え、混合物を２３℃で撹拌して完全に溶解させた。次いで反応物を−５〜０℃に冷却し、内部反応温度を０℃未満に維持しながら、ジイソプロピルエチルアミン（２．１当量）を１５分かけて加えた。反応混合物を０℃で３時間撹拌した。

上記反応混合物は、内部温度を１０℃未満に維持しながら、予め冷却しておいた飽和重炭酸ナトリウム（化合物（Ｇ）１ｋｇあたり９４ Ｌ）を添加し、反応を止めた。次いで内容物を分液漏斗に移した。上記混合物は酢酸エチル（化合物（Ｇ）１ｋｇあたり２４Ｌ）で抽出し、有機層を飽和重炭酸ナトリウム（化合物（Ｇ）１ｋｇあたり１２Ｌ）および飽和塩化ナトリウム（化合物（Ｇ）１ｋｇあたり１２Ｌ）で洗浄した。

３０℃未満の温浴で、有機層を化合物（Ｇ）１ｋｇあたり１５Ｌまで減圧濃縮し、続いて酢酸イソプロピル（１ｋｇのＰＲ−０２２あたり２×２４Ｌ）と共沸蒸留した。最終容量が化合物（Ｇ）１ｋｇあたり８２Ｌになるように、酢酸イソプロピルで調整した後、６０℃に加熱して透明な溶液を得た。透明な混合溶液は５０℃に冷却した後、種結晶を添加した。化合物１の結晶化が十分に起きた後、溶液を２０℃に冷却した。懸濁液を０℃で１２時間撹拌し、濾過した後に酢酸イソプロピル（１ｋｇの化合物１あたり２Ｌ）で洗浄した。化合物１を２０℃で恒量になるまで１２時間真空乾燥した。化合物１の収率は４８％、ＨＰＬＣによる純度は９７．４％であった。

実施例２ オプロゾミブ錠剤の調製および分析
以下に、錠剤、造粒品、および圧縮錠剤を調製する際に従うべき一般的な手順を示す。オプロゾミブ即放性（ＩＲ）２５ｍｇ錠、５０ｍｇ錠、および２００ｍｇ錠は、ローラー圧縮法を用いた乾式造粒法で製造する。

乾式造粒
・金属篩でオプロゾミブと微結晶セルロースを篩分する。
・篩分した原料とラクトース一水和物およびクロスカルメロースナトリウムをタンブルブレンダーで混合する。
・第２工程からの材料と予め篩分しておいたステアリン酸マグネシウムをタンブルブレンダーで混合する。
・混合物をローラー圧縮機でリボン状に圧縮および粉砕する。
・混合顆粒と予め篩分しておいたステアリン酸マグネシウムをタンブルブレンダーで混合する。

錠剤の圧縮と被覆
・Carver圧縮機、ローラー圧縮機または単発式錠剤圧縮機を使用し、９／３２、１３／３２、または１５／３２インチ丸型標準凹穴を用いて、２５ｍｇ、５０ｍｇ、および２００ｍｇの薬物充填量を有する約７８〜約８０ｍｇ、約１５０ｍｇ〜約１５６ｍｇ、および約６００ｍｇの錠剤を圧縮した。
・錠剤を所定の圧力で圧縮し、厚さおよび硬度を検査した。
・錠剤の特性と工程の操作因子を記録する。
・調製した錠剤をさらに加工または使用するまで室温（ＲＴ）で保存する。
・Colorcon^(R)が販売している即放性コーティング高分子組成物であるOpadry II^(R) 85F18422を用いて、錠剤を有孔パンコーターで被覆した。

タブレットの特性評価
・調製した錠剤は、厚さ、硬度、摩損度、および溶解特性を解析した。造粒錠剤は圧縮度および粒度分布を解析した。
・厚さはＶＷＲ電子デジタルキャリパー^(R)で測定した。
・硬度はCaleva THT-15^(R)硬度計で測定した。
・Agilent VK 700^(R)溶解装置およびVK8000^(R)溶解試料採取装置を用い、緩衝液のｐＨ５．５、７５ｒｐｍの条件でＵＳＰ２型パドル装置による溶解試験を実施した。
・ Agilent 1200^(R)自動採取装置およびDAD検出器を備えたAgilent 1260 Infinity^(R) HPLC 装置を使用して溶解試料を分析した。

実施例３ 統計分析
必要に応じて試験結果の統計分析を行うため、GraphPad Prism^(R)ソフトウェアを使用し、スチューデントのｔ検定またはＡＮＯＶＡのいずれかを実施した。溶解特性の比較のため、類似性係数（ｆ２）も計算した。

実施例４ 製剤の放出特性
（１）錠剤製剤をCarver圧縮機、単発式錠剤圧縮機、またはローラー圧縮機のうちの１つを使用して手作業で製造し、製造した錠剤の均一性を全ての錠剤の厚さおよび重量、ならびにいくつかの硬度を測定することで監視した。望ましい錠剤の厚さは、デジタルノギスで測定した場合、約２．５ｍｍ〜約４．０ｍｍの範囲内であると定義した。上記錠剤は、約３．０ｍｍ〜約３．７７ｍｍ、例えば約３．０４ｍｍ、例えば約３．７５ｍｍの厚さでよい。
所望の厚さ範囲を外れた錠剤は取り除いた。錠剤の硬度は（今回の作業範囲内では）厚さに反比例し、錠剤の厚さと硬度はよく相関した。錠剤の望ましい平均硬さ強度は、約１．００〜約２５．００ｋｐ、例えば約５ｋｐ、例えば約８ｋｐであった。

実施例５ 安定性試験
調製後、および室温で１ヶ月以上保管したオプロゾミブ錠剤の安定性を、定量法および純度で評価したところ、異常な成分ピークは認められず、室温での安定性は許容できることがわかった。実施形態によっては、表１の２５ｍｇおよび５０ｍｇ製剤は、２５℃／６０％ＲＨの開放条件で実際にまたは模擬的に保管すると、少なくとも１ヶ月間安定である。

実施形態によっては、乾燥剤、好ましくは親水性シリカを含む表１ａの２５ｍｇ製剤は、４０℃／７５％ＲＨの開放条件で実際にまたは模擬的に保管すると、少なくとも１ヶ月間安定である（図１２）。乾燥剤としてさまざまな等級の二酸化ケイ素を用いた複数の実験の結果、上記製剤に使用するのに最も好ましい二酸化ケイ素は多孔質であり、約５００〜約１０００ｍ²／ｇ、最も好ましくは約７００ｍ²／ｇの表面積であることが分かった。最も好ましい二酸化ケイ素は、約０．２〜約１ｃｃ／ｇ、最も好ましくは約０．４ｃｃ／ｇの平均細孔容積を有する。表１ａの製剤に使用される二酸化ケイ素は、W.R. Grace (Columbia, MD)から市販されているSyloid^(R) 63FPである。

図１３は、図１２と異なる品質の二酸化ケイ素であるCab-o-sil^(R) M-5P (Cabot Corp., Boston, MA)を用いた表１ａの実験製剤の溶解特性を示すグラフである。製剤保存時間がＴ＝０（試験開始時）の放出特性は、表１ａの製剤の以前の放出特性と一致している。しかし、Ｔ＝１ヶ月後の放出速度の低下は一致しておらず、これは消化管におけるオプロゾミブの放出速度の低下に関係するＮＶＤ有害事象の恐れがあることから、市販製剤には望ましくない。以下の表７では、相異なる品質の二酸化ケイ素の特性を比較している。

安定性試験は以下の手順のうちの一つを実施した。

（ｉ）錠剤を７５ｃｃの白色ＨＤＰＥビンに密閉、包装し、３０℃±２℃／６５％ＲＨ±５％ＲＨ、および４０℃±２℃／７５％ＲＨ±５％ＲＨで保管した。所定の期間保管した時点で、錠剤の外観、硬度、定量法および純度、および溶解性を試験した。

（ｉｉ）錠剤を７５ｃｃの乾燥剤入り白色ＨＤＰＥビンに密封、包装し、５℃±３℃、２５℃±２℃／６０％ＲＨ±５％ＲＨ、および４０℃±２℃／７５％ＲＨ±５％ＲＨで保管した。所定の期間保管した時点で、錠剤の外観、硬度、定量法および純度、および溶解性を試験した。
（ｉｉｉ）好ましい実施形態では、上記製剤を７５ｃｃの乾燥剤入りＨＤＰＥビンに５℃±３℃で少なくとも１ヶ月間保管した場合、上記製剤のオプロゾミブの分解は約１．０％未満である。より好ましい実施形態では、オプロゾミブの分解量は０．５％、０．４％、０．３％、０．２％未満であり、場合によっては０．１％未満である。
（ｉｖ）表１および表１ａの製剤の溶解特性の低下について検討および改善するために、異なる品質の乾燥剤を用いて（図１２および１３）、４０℃±２℃／７５％ＲＨ±５％ＲＨの開放条件で安定性試験を実施した。

実施例６ ＰＫ／ＰＤの検討
表１に記載の即放性（ＩＲ）製剤、経口懸濁液（中間粘度４００〜８００ｃＰの１％カルボキシメチルセルロースナトリウムを溶媒とする１．２ｍｇ／ｍｌオプロゾミブ懸濁液）、および図１１に記載の徐放性（ＥＲ）製剤を用いて、ＰＫ／ＰＤについて検討した。

イヌにおける生体内試験の結果は、ＩＲ製剤を用いたオプロゾミブ投与が、ＰＫ／ＰＤ活性を維持しながら、ＥＲ製剤と比較して胃腸不耐性（嘔吐事象および流涎など）を減少させることを示している（図７、８、９および１０）。イヌの雌に経口懸濁剤、即放性剤、またはＥＲ製剤の形態でオプロゾミブ６０ｍｇ／ｋｇを単回投与した。投与前から投与後２４時間にかけて血液試料を採取し、血漿ＰＫ因子の測定およびプロテアソーム阻害の血液ＰＤ分析を実施した（図８参照）。胃腸耐用性は、投与後４８時間まで記録した（図１０）。終了点までの血漿濃度曲線下面積（ＡＵＣ_last）および最大曝露濃度（Ｃ_max）は、ＥＲと比較してＩＲ製剤で優れていた（図７）。上記ＩＲ製剤は、最高血漿中濃度への到達時間が約３０分〜約４５分であった。上記ＩＲ製剤では、プロテアソーム活性の迅速で強力な阻害（投与前の１００％）が観察された（図９）。ＩＲ製剤は、ＥＲ製剤よりも胃腸不耐性の発生度が低かった（図１０）。６０ｍｇ／ｋｇの投与後、ＩＲ製剤では嘔吐事象が１回だけ発生し、流涎事象の発生は無かったが、ＥＲ製剤では８日目および９日目に合計８回の流涎事象が発生した。このように、本明細書に記載の製剤は、１つ以上の消化管副作用（例えば、ＮＶＤ、流涎）の発生率または重症度を低減できる。

オプロゾミブ６０ｍｇを含む上記製剤をイヌに対して単回投与すると、オプロゾミブの最高血漿中濃度（Ｃ_max）が６６．４ｎｇ／ｍｌ（標準偏差７３．３）となる。

上記製剤をイヌに対して投与すると、終了点までのオプロゾミブの濃度時間曲線下面積（ＡＵＣ）は２８．６ｎｇ・ｈｒ／ｍｌ（標準偏差１８．６）となる。

実施例７ オプロゾミブの投薬計画
イヌに対する投薬は、例えば１日目および８日目のように週１回実施した。患者はＱＤｘ２治療計画、またはＱＤｘ２週間治療計画のいずれかに従い、錠剤として製剤化したオプロゾミブを投与するよう計画した。本明細書で使用する場合、「ＱＤｘ２」とは、７日間の治療日程のうち、１〜２日目に１日１回オプロゾミブ錠剤を患者に投与することを意味する。７日間の治療日程うち、１日目〜２日目までオプロゾミブを患者に投与する場合、錠剤として製剤化したオプロゾミブを投与できる。

上記オプロゾミブ製剤は食物と共にまたは食物なしで投与できるが、低脂肪食と共に投与することが好ましい。

製造工程の開発
上記製剤の製造フロー図を、フローチャート１およびフローチャート１ａに示す。

フローチャート１は、表１の製剤のためのオプロゾミブＩＲ錠２５ｍｇ、５０ｍｇ、および２００ｍｇの製造フローチャートである。
フローチャート１ａは、表１ａのためのＩＲ錠２５ｍｇの製造フローチャートである。

均等物
当業者であれば、本明細書に記載の化合物およびその使用方法に対する多数の均等物を認識し、または日常的な実験を超えずに確認できる。そのような均等物は本発明の範囲内にあると考えられ、以下の特許請求の範囲に包含される。したがって、他の実施形態は添付の特許請求の範囲の範囲内にある。
上記に引用した参考文献および刊行物は、全て参照として本明細書に組み込まれる。

Claims (60)

1. オプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩を含む即放性製剤であって、以下の溶解条件下における紫外吸収により測定した場合、オプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩の約８０％以上が約３０分後に放出される、即放性製剤。
   
2. 前記製剤は、１つ以上の消化管（ＧＩ）副作用の発生率または重症度の低減をもたらす、請求項１に記載の製剤。
3. 前記副作用は嘔吐を含む、請求項２に記載の製剤。
4. 前記副作用は流涎の増加を含む、請求項２に記載の製剤。
5. 前記製剤は経口投与に適した形態である、請求項１に記載の製剤。
6. 前記製剤は、約３０〜約１２０分でオプロゾミブの最高血漿中濃度を提供する、請求項１に記載の製剤。
7. 前記製剤は、約３０〜約６０分でオプロゾミブの最高血漿中濃度を提供する、請求項６に記載の製剤。
8. 前記製剤は、約６０分でオプロゾミブの最高血漿中濃度を提供する、請求項６に記載の製剤。
9. 前記製剤は、約５重量％〜約９５重量％のオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩を含む、請求項１に記載の製剤。
10. 前記製剤は、約２０重量％〜約５０重量％のオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩を含む、請求項９に記載の製剤。
11. 前記製剤は、約３３重量％のオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩を含む、請求項９に記載の製剤。
12. 前記製剤は、約１０重量％〜約４０重量％のオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩を含む、請求項９に記載の製剤。
13. 前記製剤は、約２０重量％〜約３３重量％のオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩を含む、請求項９に記載の製剤。
14. 前記製剤は、約５０ｍｇのオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩を含む、請求項１に記載の製剤。
15. 前記製剤は、約１００ｍｇのオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩を含む、請求項１に記載の製剤。
16. 前記製剤は、約２００ｍｇのオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩を含む、請求項１に記載の製剤。
17. 前記製剤は、約４００ｍｇのオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩を含む、請求項１に記載の製剤。
18. 前記製剤は、約２０重量％〜約４０重量％のオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩、および約２５ｍｇのオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩を含む、請求項１に記載の製剤。
19. 前記製剤は、約２０重量％〜約４０重量％のオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩、および約５０ｍｇのオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩を含む、請求項１に記載の製剤。
20. 前記製剤は、約２０重量％〜約４０重量％のオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩、および約１００ｍｇのオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩を含む、請求項１に記載の製剤。
21. 前記製剤は、約２５重量％〜約６０重量％のオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩、および約４００ｍｇのオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩を含む、請求項１に記載の製剤。
22. 前記製剤は、約３３．３３重量％のオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩、および約２５ｍｇのオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩を含む、請求項１に記載の製剤。
23. 前記製剤は、約３３．３３重量％のオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩、および約５０ｍｇのオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩を含む、請求項１に記載の製剤。
24. 前記製剤は、約３３．３３重量％のオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩、および約２００ｍｇのオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩を含む、請求項１に記載の製剤。
25. オプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩は結晶性の固体である、請求項１に記載の製剤。
26. オプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩は非晶質性の固体である、請求項１に記載の製剤。
27. 前記製剤は１種以上の充填剤をさらに含む、請求項１に記載の製剤。
28. 前記１種以上の充填剤は、微結晶セルロースおよびラクトース一水和物から選択される、請求項２７に記載の製剤。
29. 前記製剤は１種以上の崩壊剤をさらに含む、請求項１に記載の製剤。
30. 前記１種以上の崩壊剤は、クロスカルメロースナトリウムから選択される、請求項２９に記載の製剤。
31. 前記製剤は１種以上の潤滑剤をさらに含む、請求項１に記載の製剤。
32. 前記１種以上の潤滑剤は、ステアリン酸マグネシウムである、請求項３１に記載の製剤。
33. 前記製剤は１種以上の乾燥剤をさらに含む、請求項１に記載の製剤。
34. １種以上の乾燥剤は二酸化ケイ素である、請求項３３に記載の製剤。
35. 前記二酸化ケイ素は多孔質である、請求項３４に記載の製剤。
36. ｉ）約２０〜約３５重量％のオプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩、
    ｉｉ）約３０〜約７０重量％の１種以上の充填剤、
    ｉｉｉ）約０．０１〜約２重量％の１種以上の潤滑剤、および
    ｉｖ）約３．５〜約５重量％の１種以上の崩壊剤
    を含む製剤。
37. 前記製剤は約０．１０〜約２重量％の１種以上の乾燥剤を含む、請求項３６に記載の製剤。
38. １種以上の乾燥剤は二酸化ケイ素である、請求項３７に記載の製剤。
39. 前記二酸化ケイ素は多孔質である、請求項３８に記載の製剤。
40. 前記製剤は固形剤形である、請求項３６に記載の製剤。
41. 前記固形剤形は錠剤である、請求項４０に記載の製剤。
42. 前記製剤は１種以上の被覆剤を含む、請求項３６に記載の製剤。
43. 前記錠剤は約２．５ｍｍ〜約７ｍｍの厚さを有する、請求項３６に記載の製剤。
44. 前記錠剤は約１．００ｋｐ〜約２５．００ｋｐの硬度を有する、請求項３６に記載の製剤。
45. オプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩の約８０％以上が約３０分以内に放出される、請求項３６に記載の製剤。
46. オプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩の約８０％以上が約４５分以内に放出される、請求項３６に記載の製剤。
47. オプロゾミブまたはその医薬的に許容される塩の約８０％以上が約６０分以内に放出される、請求項３６に記載の製剤。
48. 約６０ｍｇのオプロゾミブを含む前記製剤をイヌに対して単回投与すると、オプロゾミブの最高血漿中濃度（Ｃ_max）は６６．４ｎｇ／ｍｌ（標準偏差７３．３）となる、請求項３６に記載の製剤。
49. 約６０ｍｇのオプロゾミブを含む前記製剤をイヌに対して単回投与すると、オプロゾミブの終了点までの血漿濃度曲線下面積（ＡＵＣ）は２８．６ｎｇ・ｈｒ／ｍｌ（標準偏差１８．６）となる、請求項３６に記載の製剤。
50. 前記製剤は、２５℃／６０％相対湿度の開放条件で実際にまたは模擬的に保管されると、少なくとも１ヶ月間安定である、請求項３６に記載の製剤。
51. 前記製剤は、４０℃／７５％相対湿度の開放条件で実際にまたは模擬的に保管されると、少なくとも１ヶ月間安定である、請求項３６に記載の製剤。
52. 前記製剤により、悪心、嘔吐、および下痢のうちの１つ以上の発生率または重症度が低下する、請求項１に記載の製剤。
53. 前記製剤により、悪心、嘔吐、および下痢のうちの１つ以上の発症率または重症度が低下する、請求項３６に記載の製剤。
54. 前記製剤は乾式造粒により調製される、請求項３６に記載の製剤。
55. 請求項１に記載の製剤を投与することを含む、癌、自己免疫疾患、移植片または移植に関連する症状、神経変性疾患、線維症に関連する症状、虚血に関連する症状、感染症（ウイルス、寄生虫、または原核生物）、および骨量減少に関連する疾患からなる群から選択される、疾患または症状を治療する方法。
56. 前記疾患または症状は癌である、請求項５５に記載の方法。
57. 前記癌は、多発性骨髄腫、ワルデンストロームマクログロブリン血症、慢性リンパ球性白血病、および骨髄異形成症候群から選択される、請求項５４に記載の方法。
58. 請求項３６に記載の製剤を投与することを含む、癌、自己免疫疾患、移植片または移植に関連する症状、神経変性疾患、線維症に関連する症状、虚血に関連する症状、感染症（ウイルス、寄生虫、または原核生物）および骨量減少に関連する疾患からなる群から選択される、疾患または症状を治療する方法。
59. 前記疾患または症状は癌である、請求項５７に記載の方法。
60. 前記癌は、多発性骨髄腫、ワルデンストロームマクログロブリン血症、慢性リンパ球性白血病、および骨髄異形成症候群から選択される、請求項５８に記載の方法。