JP2019038771A - シキミ酸の製造方法 - Google Patents
シキミ酸の製造方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2019038771A JP2019038771A JP2017161507A JP2017161507A JP2019038771A JP 2019038771 A JP2019038771 A JP 2019038771A JP 2017161507 A JP2017161507 A JP 2017161507A JP 2017161507 A JP2017161507 A JP 2017161507A JP 2019038771 A JP2019038771 A JP 2019038771A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- shikimic acid
- exchange resin
- producing
- solution containing
- plant
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- JXOHGGNKMLTUBP-HSUXUTPPSA-N shikimic acid Chemical compound O[C@@H]1CC(C(O)=O)=C[C@@H](O)[C@H]1O JXOHGGNKMLTUBP-HSUXUTPPSA-N 0.000 title claims abstract description 365
- JXOHGGNKMLTUBP-JKUQZMGJSA-N shikimic acid Natural products O[C@@H]1CC(C(O)=O)=C[C@H](O)[C@@H]1O JXOHGGNKMLTUBP-JKUQZMGJSA-N 0.000 title claims abstract description 365
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims abstract description 76
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract description 77
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 52
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 claims abstract description 37
- NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;1-ethenyl-2-ethylbenzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.CCC1=CC=CC=C1C=C.C=CC1=CC=CC=C1C=C NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 31
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 claims abstract description 31
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 claims abstract description 31
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 claims abstract description 13
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 83
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 70
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 70
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 61
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 52
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 claims description 45
- 239000003957 anion exchange resin Substances 0.000 claims description 45
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 43
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims description 22
- 239000003929 acidic solution Substances 0.000 claims description 10
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims description 9
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 claims description 8
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 claims description 8
- 230000000593 degrading effect Effects 0.000 claims description 6
- 230000002745 absorbent Effects 0.000 abstract 1
- 239000002250 absorbent Substances 0.000 abstract 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 78
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 64
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 56
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 18
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 16
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 16
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 14
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 13
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 11
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 11
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000000047 product Substances 0.000 description 9
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 8
- 241000720991 Illicium Species 0.000 description 7
- 238000005349 anion exchange Methods 0.000 description 7
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 7
- 239000010419 fine particle Substances 0.000 description 7
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 240000007232 Illicium verum Species 0.000 description 6
- 235000008227 Illicium verum Nutrition 0.000 description 6
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- PPBRXRYQALVLMV-UHFFFAOYSA-N Styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1 PPBRXRYQALVLMV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 6
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 6
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 6
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 5
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 5
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 5
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 5
- 108010059892 Cellulase Proteins 0.000 description 4
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108010059820 Polygalacturonase Proteins 0.000 description 4
- 101710184309 Probable sucrose-6-phosphate hydrolase Proteins 0.000 description 4
- 102400000472 Sucrase Human genes 0.000 description 4
- 101710112652 Sucrose-6-phosphate hydrolase Proteins 0.000 description 4
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 4
- 229940106157 cellulase Drugs 0.000 description 4
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 4
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 4
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 4
- 108010093305 exopolygalacturonase Proteins 0.000 description 4
- 235000011073 invertase Nutrition 0.000 description 4
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 4
- 238000010298 pulverizing process Methods 0.000 description 4
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 4
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 4
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 101100313763 Arabidopsis thaliana TIM22-2 gene Proteins 0.000 description 3
- 241000533845 Enterolobium cyclocarpum Species 0.000 description 3
- 241000383833 Pachyphyllum Species 0.000 description 3
- NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N acrylic acid group Chemical group C(C=C)(=O)O NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229920001429 chelating resin Polymers 0.000 description 3
- 229920006037 cross link polymer Polymers 0.000 description 3
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 3
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 3
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 3
- 239000002608 ionic liquid Substances 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 3
- 229910021642 ultra pure water Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000012498 ultrapure water Substances 0.000 description 3
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 3
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101710121765 Endo-1,4-beta-xylanase Proteins 0.000 description 2
- 241000198061 Illicium henryi Species 0.000 description 2
- 108010014251 Muramidase Proteins 0.000 description 2
- 102000016943 Muramidase Human genes 0.000 description 2
- 108010062010 N-Acetylmuramoyl-L-alanine Amidase Proteins 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 238000005341 cation exchange Methods 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 230000006835 compression Effects 0.000 description 2
- 238000007906 compression Methods 0.000 description 2
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 2
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 2
- 230000003292 diminished effect Effects 0.000 description 2
- 235000011869 dried fruits Nutrition 0.000 description 2
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- IDGUHHHQCWSQLU-UHFFFAOYSA-N ethanol;hydrate Chemical compound O.CCO IDGUHHHQCWSQLU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960000274 lysozyme Drugs 0.000 description 2
- 239000004325 lysozyme Substances 0.000 description 2
- 235000010335 lysozyme Nutrition 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 239000012466 permeate Substances 0.000 description 2
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 2
- 229920001467 poly(styrenesulfonates) Polymers 0.000 description 2
- 238000007086 side reaction Methods 0.000 description 2
- GETQZCLCWQTVFV-UHFFFAOYSA-N trimethylamine Chemical group CN(C)C GETQZCLCWQTVFV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000003828 vacuum filtration Methods 0.000 description 2
- SMZOUWXMTYCWNB-UHFFFAOYSA-N 2-(2-methoxy-5-methylphenyl)ethanamine Chemical compound COC1=CC=C(C)C=C1CCN SMZOUWXMTYCWNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920000875 Dissolving pulp Polymers 0.000 description 1
- 235000011201 Ginkgo Nutrition 0.000 description 1
- 235000008100 Ginkgo biloba Nutrition 0.000 description 1
- 244000194101 Ginkgo biloba Species 0.000 description 1
- 240000003157 Illicium floridanum Species 0.000 description 1
- 235000008226 Illicium floridanum Nutrition 0.000 description 1
- UEEJHVSXFDXPFK-UHFFFAOYSA-N N-dimethylaminoethanol Chemical group CN(C)CCO UEEJHVSXFDXPFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N Nitric acid Chemical compound O[N+]([O-])=O GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000270295 Serpentes Species 0.000 description 1
- 229910000831 Steel Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000002947 alkylene group Chemical group 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- -1 aromatic amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 description 1
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 125000000596 cyclohexenyl group Chemical group C1(=CCCCC1)* 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 125000002147 dimethylamino group Chemical group [H]C([H])([H])N(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 238000002036 drum drying Methods 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- KWIUHFFTVRNATP-UHFFFAOYSA-N glycine betaine Chemical group C[N+](C)(C)CC([O-])=O KWIUHFFTVRNATP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004009 herbicide Substances 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 206010022000 influenza Diseases 0.000 description 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- 229910017604 nitric acid Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002894 organic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 125000000962 organic group Chemical group 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 1
- ABLZXFCXXLZCGV-UHFFFAOYSA-N phosphonic acid group Chemical group P(O)(O)=O ABLZXFCXXLZCGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000010399 physical interaction Effects 0.000 description 1
- 125000001453 quaternary ammonium group Chemical group 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 238000001694 spray drying Methods 0.000 description 1
- 239000010959 steel Substances 0.000 description 1
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 1
- 125000000542 sulfonic acid group Chemical group 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C51/00—Preparation of carboxylic acids or their salts, halides or anhydrides
- C07C51/42—Separation; Purification; Stabilisation; Use of additives
- C07C51/47—Separation; Purification; Stabilisation; Use of additives by solid-liquid treatment; by chemisorption
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C62/00—Compounds having carboxyl groups bound to carbon atoms of rings other than six—membered aromatic rings and containing any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, groups, groups, or groups
- C07C62/30—Unsaturated compounds
- C07C62/32—Unsaturated compounds containing hydroxy or O-metal groups
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Abstract
Description
例えば、特許文献1には、脱脂したトウシキミの粉砕物からシキミ酸をエタノールまたはメタノールで抽出し、活性炭で脱色した後、粗結晶から晶析させるトウシキミの抽出分離方法が開示されている。
特許文献2には、セルロースを溶解可能なイオン液体を加えて植物からシキミ酸を抽出し、強塩基性陰イオン交換樹脂によりイオン液体を除去後に、シキミ酸を取得するシキミ酸の取得方法が開示されている。
かかる状況下、本発明の目的は、シキミ酸を収率よく得ることのできるシキミ酸の製造方法を提供することである。
<1> シキミ酸を含有する溶液からシキミ酸を回収する工程を含み、前記シキミ酸を回収する工程が、シキミ酸を含有する溶液を疎水性合成吸着剤で処理し処理液を得る工程(P1)と、両性イオン交換樹脂を用いたイオン交換クロマトグラフィー法により、少なくとも前記工程(P1)を行った後の処理液から、シキミ酸を含有する分画を得る工程(P2)とを含むシキミ酸の製造方法。
<2> 前記シキミ酸を回収する工程において、工程(P2)の後に、工程(P2)で得られた分画を濃縮乾燥する工程(P3)を含む、<1>に記載のシキミ酸の製造方法。
<3> 前記シキミ酸を回収する工程の前に、シキミ酸を含有する溶液を得る工程を含み、前記シキミ酸を含有する溶液を得る工程が、シキミ酸を含む植物からシキミ酸を抽出する工程(E1)と、前記工程(E1)の後にシキミ酸を含む抽出液を固液分離する工程(E2)とを含む、<1>又は<2>に記載のシキミ酸の製造方法。
<4> 前記シキミ酸を含有する溶液を得る工程において、前記工程(E1)の前に、シキミ酸を含む植物を粉砕して粉砕物とする工程(E0)を含み、前記工程(E1)と前記工程(E2)の間に、シキミ酸を含む抽出液を酵素で処理する工程(E1a)を更に含む、<3>に記載のシキミ酸の製造方法。
<5> 前記シキミ酸を回収する工程において、前記工程(P1)と前記工程(P2)の間に、前記工程(P1)で得られた処理液を強塩基性陰イオン交換樹脂に接触させ、前記処理液に含まれるシキミ酸を強塩基性陰イオン交換樹脂に吸着させた後、前記シキミ酸が吸着された前記強塩基性陰イオン交換樹脂からシキミ酸を酸性溶液により溶離する工程(P1a)を更に含む、<1>から<4>のいずれかに記載のシキミ酸の製造方法。
<6> 前記疎水性合成吸着剤が、芳香族系合成吸着剤である、<1>から<5>のいずれかに記載のシキミ酸の製造方法。
<7> 前記シキミ酸を含む植物がシキミ族の植物である、<3>又は<4>に記載のシキミ酸の製造方法。
<8> 前記酵素が植物細胞壁分解酵素である、<4>に記載のシキミ酸の製造方法。
<10> 前記シキミ酸を含有する溶液を得る工程の後に、シキミ酸を含有する溶液からシキミ酸を回収する工程を含み、前記シキミ酸を回収する工程が、シキミ酸を含有する溶液を疎水性合成吸着剤で処理し処理液を得る工程(p1)と、両性イオン交換樹脂を用いたイオン交換クロマトグラフィー法により、少なくとも前記工程(p1)を行った後の処理液から、シキミ酸を含有する分画を得る工程(p2)とを含む<9>に記載のシキミ酸の製造方法。
<11> 前記シキミ酸を含有する溶液からシキミ酸を回収する工程において、工程(p2)の後に、工程(p2)で得られた分画を濃縮乾燥する工程(p3)を含む、<10>に記載のシキミ酸の製造方法。
<12> 前記シキミ酸を回収する工程において、前記工程(p1)と前記工程(p2)の間に、前記工程(p1)で得られた処理液を強塩基性陰イオン交換樹脂に接触させ、前記処理液に含まれるシキミ酸を強塩基性陰イオン交換樹脂に吸着させた後、前記シキミ酸が吸着された前記強塩基性陰イオン交換樹脂からシキミ酸を酸性溶液により溶離する工程(p1a)を更に含む、<9>又は<10>に記載のシキミ酸の製造方法。
<13> 前記疎水性合成吸着剤が、芳香族系合成吸着剤である、<10>から<12>のいずれかに記載のシキミ酸の製造方法。
<14> 前記シキミ酸を含む植物がシキミ族の植物である、<9>から<13>のいずれかに記載のシキミ酸の製造方法。
<15> 前記酵素が植物細胞壁分解酵素である、<9>から<14>のいずれかに記載のシキミ酸の製造方法。
本発明の製造方法(I)は、シキミ酸を含有する溶液からシキミ酸を回収する工程を含み、前記シキミ酸を回収する工程が、シキミ酸を含有する溶液を疎水性合成吸着剤で処理し処理液を得る工程(P1)と、両性イオン交換樹脂を用いたイオン交換クロマトグラフィー法により、少なくとも前記工程(P1)を行った後の処理液から、シキミ酸を含有する分画を得る工程(P2)とを含むシキミ酸の製造方法である。
工程(P1)は、シキミ酸を含有する溶液を疎水性合成吸着剤で処理し処理液を得る工程である。
本発明者らは、シキミ酸を含有する溶液(特に、シキミ酸を含む植物からシキミ酸を抽出した抽出液)に含まれる不純物(着色物質等)の多くが、疎水性合成吸着剤に物理的に吸着しやすいことを見出した。そのため、疎水性合成吸着剤で処理することにより、シクロヘキセン環を有するシキミ酸は疎水性合成吸着剤へ物理的に吸着せず溶出される一方で、不純物の多くは疎水性合成吸着剤へ物理的に吸着し、除去することができる。
なお、シキミ酸を含有する溶液の調製方法について詳しくは後述する。
洗浄に用いる溶媒は、通常、水であり、脱塩水、蒸留水、純水等の水を利用できる。
なお、SVとは、1時間当たりに、樹脂(合成吸着剤、イオン交換樹脂または両性イオン交換樹脂)の容量の何倍量を通液したかを示す単位である。SVは、
SV=流量(L/Hr)/充填された樹脂量(L)
で求めることができる。例えば、樹脂100mLに1時間で500mL通液したときの空間速度(SV)は、5(1/Hr)である。
工程(P2)は、両性イオン交換樹脂を用いたイオン交換クロマトグラフィー法により、少なくとも前記工程(P1)を行った後の処理液から、シキミ酸を含有する分画を得る工程である。
このようにすることにより、工程(P1)で除去されなかった不純物とシキミ酸を分離でき、高純度のシキミ酸を収率よく得られる。
そのため、本発明の製造方法(I)は、純度が95%以上の精製シキミ酸を得る精製シキミ酸の製造方法として好適であり、純度が98%以上の精製シキミ酸を得る精製シキミ酸の製造方法としてより好適である。
なお、シキミ酸の純度の測定方法は、実施例にて説明する。
また、両性イオン交換樹脂は、ゲル型であっても、マクロポーラス型であってもよい。また、強塩基性イオン交換樹脂に、アクリル酸を含浸させて重合させた、スネークケイジ型と呼ばれる樹脂であってもよい。
また、工程(P2)は、回分固定層方式、移動層方式のいずれであってもよい。
本発明の製造方法(I)では、工程(P1)の後に工程(P2)を行うことで、シキミ酸の純度の高い分画(例えば、純度が95%以上の精製シキミ酸や純度が98%以上の精製シキミ酸を含有する分画)が得られる。そのため、晶析等でさらに精製しなくても純度の高いシキミ酸を得ることができる。シキミ酸を含有する分画を濃縮乾燥させてシキミ酸を得ることにより、従来の晶析で精製する方法のようにシキミ酸が晶析せずに溶媒中に残存することがなく、純度の高いシキミ酸をより高収率で得ることができる。
すなわち、本発明の製造方法(I)は、工程(P2)の前に、工程(P1)以外の工程を含んでもよい。
工程(P1a)は、前記工程(P1)で得られた処理液を強塩基性陰イオン交換樹脂に接触させ、前記処理液に含まれるシキミ酸を強塩基性陰イオン交換樹脂に吸着させた後、前記シキミ酸が吸着された前記強塩基性陰イオン交換樹脂からシキミ酸を酸性溶液により溶離する工程である。
工程(E1)は、シキミ酸を含む植物からシキミ酸を抽出する工程である。具体的には、シキミ酸を含む植物と溶媒を混合してシキミ酸を含む植物からシキミ酸を溶媒中に抽出する工程である。
シキミ族に属する植物としては、Illicium floridanum、Illicium diffengri、Illicium henryi、Illicium verum、Illicium lancealatum、Illicium pachyphyllum、Illicium anisatumおよびIllicium religiosumを挙げることができる。
粉砕方法は、シキミ酸を含む植物を砕くことができる方法であれば特に限定されず従来公知の方法を用いることができる。例えば、圧縮力、剪断力、衝撃力、摩擦力等を利用した粉砕装置を使用することができ、具体的には、ジョークラッシャー、ロールクラッシャー、スクリューミル、ボールミル等が挙げられる。
工程(E2)は、シキミ酸を含む抽出液を固液分離する工程であり、シキミ酸を含む抽出液からシキミ酸を含む植物の粉砕物等の固形分を除去する工程である。
固液分離の方法は、特に限定されず、従来公知の方法を使用することができる。例えば、任意の濾材を用いた濾過、減圧濾過、遠心分離等により固液分離することができる。好ましくは、任意の濾材を用いた濾過である。
植物の細胞壁を分解する酵素としては、セルラーゼ、ペクチナーゼ、キシラナーゼ、リゾチーム等が挙げられ、セルラーゼおよび/またはペクチナーゼを含むことが好ましい。
また、使用する酵素は2種類以上を併用してもよい。2種類以上の酵素を用いる場合、2種類以上の酵素を同時に添加し酵素処理を行っても、それぞれの酵素を個別に用いて酵素処理を複数回行ってもよい。
酵素処理時間は、酵素処理温度等により適宜決定され、0.5時間以上であることが好ましい。酵素処理時間の上限は、特に制限されないが、例えば、24時間以下であっても、15時間以下であってもよい。
また、加熱処理の時間は、酵素を失活されることができればよく、例えば、20分以上であることが好ましく、30分以上であることがより好ましい。加熱時間が短すぎると、酵素が十分に失活しないおそれがある。また、加熱時間の上限は特に制限されず、24時間以下であっても、12時間以下であっても、5時間以下であってもよい。
加熱処理を行うことにより、工程(P1)や工程(P2)でのシキミ酸の収率がより向上する。
本発明の製造方法(II)は、シキミ酸を含有する溶液を得る工程を含み、前記シキミ酸を含有する溶液を得る工程が、シキミ酸を含む植物を粉砕し粉砕物とする工程(e0)と、前記工程(e0)で得られた粉砕したシキミ酸を含む植物からシキミ酸を、水を含む溶媒で抽出し、抽出液を得る工程(e1)と、前記工程(e1)で得られた抽出液を酵素で処理する工程(e1a)前記工程(e1a)を行った抽出液を固液分離する工程(e2)とを含むことを特徴とするシキミ酸の製造方法である。
工程(e0)は、シキミ酸を含む植物を粉砕し粉砕物とする工程である。シキミ酸を含む植物を粉砕し、粉末状とすることで抽出効率を高めることができる。
工程(e1)は、前記工程(e0)で得られた粉砕したシキミ酸を含む植物からシキミ酸を、水を含む溶媒で抽出する工程である。具体的には、シキミ酸を含む植物と溶媒を混合してシキミ酸を含む植物からシキミ酸を溶媒中に抽出する工程である。
工程(e1a)は、前記工程(e1)で得られた抽出液を酵素で処理する工程である。
酵素としては、植物細胞壁分解酵素であることが好ましい。
植物の細胞壁を分解する酵素としては、セルラーゼ、ペクチナーゼ、キシラナーゼ、リゾチーム等が挙げられ、セルラーゼおよび/またはペクチナーゼを含むことが好ましい。
また、使用する酵素は2種類以上を併用してもよい。2種類以上の酵素を用いる場合、2種類以上の酵素を同時に添加し酵素処理を行っても、それぞれの酵素を個別に用いて酵素処理を複数回行ってもよい。
酵素処理時間は、酵素処理温度等により適宜決定され、0.5時間以上であることが好ましい。酵素処理時間の上限は、特に制限されないが、例えば、24時間以下であっても、15時間以下であってもよい。
また、加熱処理の時間は、酵素を失活されることができればよく、例えば、20分以上であることが好ましく、30分以上であることがより好ましい。加熱時間が短すぎると、酵素が十分に失活しないおそれがある。また、加熱時間の上限は特に制限されず、24時間以下であっても、12時間以下であっても、5時間以下であってもよい。
工程(e2)は、前記工程(e1a)を行った抽出液を固液分離する工程であり、抽出液からシキミ酸を含む植物の粉砕物等の固形分を除去する工程である。
固液分離の方法は、特に限定されず、従来公知の方法を使用することができる。例えば、任意の濾材を用いた濾過、減圧濾過、遠心分離等により固液分離することができる。好ましくは、任意の濾材を用いた濾過である。
(シキミ酸を含有する溶液を得る工程)
撹拌機、コンデンサー、ディーンスタークトラップを備えた2Lの4つ口フラスコに、八角150g、脱塩水1050gを入れ、100℃で6時間還流し、八角中に含まれるシキミ酸を抽出した。還流中、ディーンスタークトラップには、八角中に含まれるオイル成分および水(留出水)が溜まった。なお、還流は、ディーンスタークトラップに溜まったオイル成分がフラスコ内に戻らないように、適宜、留出水を抜き出して、留出水をフラスコの別の口からフラスコ内に戻しながら行った。また、ディーンスタークトラップに溜まったオイル成分は除去した。
40℃に冷却後、酵素(三菱ケミカルフーズ製スクラーゼC 0.75g、スクラーゼN 0.75g)を加え、40℃で12時間撹拌した。その後、90℃で30分撹拌して酵素を失活させた。
30℃に冷却した後、ろ過(ろ紙、アドバンテックNo5C、110mm)し、脱塩水200mLで洗浄して、抽出液に含まれる固形成分を除去しシキミ酸を含む抽出液1500mLを得た。
なお、八角は、中国産八角(エスビー食品社製、スターアニス(ホール))をそのまま用いた。
内径4.5cmのカラム(1)に、疎水性合成吸着剤(三菱ケミカル社製、ダイヤイオン(登録商標)HP20)300mL(内径4.5×高さ23cm)を充填した。カラム(1)に、得られた抽出液1500mLをローラーポンプでSV=1の流速で通液し、次いで脱塩水を通液して、処理液1700mLを得た。
カラム(3)から溶出される液のうち、はじめの600mLの溶出液は捨て、次の1000mLを回収した。この液をエバポレーターで濃縮した後、真空乾燥機(フルバキューム、50℃)で、13時間乾燥し、純度98%以上のシキミ酸4.8gを得た。
(シキミ酸を含有する溶液を得る工程)
八角200gをカリタ製コーヒーミル(クラシックミル)に投入し、粉砕し、粉末状(パウダー)の八角を得た。
撹拌機、コンデンサー、ディーンスタークトラップを備えた2Lの4つ口フラスコに、粉砕した八角パウダー150g、脱塩水1050gを入れ、100℃で6時間還流し、八角中に含まれるシキミ酸を抽出した。還流中、ディーンスタークトラップには、八角中に含まれるオイル成分および水(留出水)が溜まった。なお、還流は、ディーンスタークトラップに溜まったオイル成分がフラスコ内に戻らないように、適宜、留出水を抜き出して、留出水をフラスコの別の口からフラスコ内に戻しながら行った。また、ディーンスタークトラップに溜まったオイル成分は除去した。
40℃に冷却後、酵素(三菱ケミカルフーズ製スクラーゼC0.75g、スクラーゼN0.75g)を加え、40℃で12時間撹拌した。その後、90℃で30分撹拌して酵素を失活させた。
30℃に冷却した後、ろ過(ろ紙、アドバンテックNo5C、110mm)し、脱塩水200mLで洗浄して、抽出液に含まれる固形成分を除去し抽出液1500mLを得た。
実施例1と同様の方法にて精製し、純度98%以上のシキミ酸6.2gを得た。
(シキミ酸を含有する溶液を得る工程)
実施例2と同様の方法でシキミ酸の抽出液を得た。
内径4.5cmのカラム(1)に、疎水性合成吸着剤(三菱ケミカル社製、ダイヤイオン(登録商標)HP20)300mL(内径4.5×高さ23cm)を充填した。また、内径4.5cmのカラム(2)に、Cl型の陰イオン交換樹脂(ダイヤイオン(登録商標)SA20A、三菱ケミカル社製)200mLを充填し、水酸化ナトリウム水溶液(35g/500ml)で処理して、OH型の陰イオン交換樹脂とした。次に、カラム(1)で処理された処理液がカラム(2)で処理できるように、カラム(1)とカラム(2)とを直列に連結し、2床2塔式の装置を組んだ。
まず、得られたシキミ酸を含む抽出液1500mLを、2床2塔式の装置に通液した。このとき、シキミ酸は、カラム(1)の疎水性合成吸着剤には吸着せず通過し、カラム(2)に供給され、SA20Aに吸着された。
次いで、シキミ酸の吸着されたSA20Aのカラム(2)に1Nの塩酸230mLを通液し、さらに、脱塩水865mLを通液し、溶離液1100mLを得た。なお、液はローラーポンプでSV=1(1/Hr)の流速で供給した。得られた溶離液をエバポレーターにて濃縮し、濃縮液110mLを得た。
(シキミ酸を含有する溶液を得る工程)
実施例2に比べて細かく粉砕されるようにコーヒーミルを調整し、シキミ酸を含む植物を粉砕した以外は実施例2と同様の方法でシキミ酸を含む抽出液を得た。
実施例3と同様の方法で精製し、純度98%以上のシキミ酸14.3gを得た。
八角200gをカリタ製コーヒーミルに投入し、粉砕し、粉末状(パウダー)の八角を得た。
撹拌機、コンデンサーを備えた2Lの4つ口フラスコに、粉砕した八角パウダー362g、メタノール(新日鉄化学社製)1009gを入れ、65℃で30分間還流した。
30℃に冷却した後、ろ過(ろ紙、アドバンテックNo5C、110mm)し、抽出液653gを得た。
この抽出液と石油エーテル(JXTGエネルギー社製、試薬リグロイン特級)171gを分液ロートに入れ、5分間程度よく振った後、分離した相の下相(メタノール相)を抽出液として回収した。
回収した抽出液に脱塩水322gを混合した後、ろ過(ろ紙、アドバンテックNo5C、110mm)して、抽出液375gを得た。
30℃に冷却した後、ろ過(ろ紙、アドバンテックNo5C、110mm)して、抽出液319gを得た。
抽出液を60℃、80Torrで濃縮し、濃縮液25gを得た。
この濃縮液に種晶としてシキミ酸を微量加えて、24時間冷暗所に放置した。その後、ろ過(ろ紙、アドバンテックNo5C、110mm)して、エタノール水(エタノール(日本アルコール販売社製)20g+超純水3g)で洗浄し、さらにエタノール水(エタノール15g+超純水3g)で洗浄し、抽出液62gを得た。ろ紙上の湿潤シキミ酸を乾燥(真空乾燥機でフルバキューム、60℃処理、13時間)し、純度93.8%のシキミ酸3.6gを得た。
八角200gをカリタ製コーヒーミル(クラシックミル)に投入し、粉砕し、粉末状(パウダー)の八角を得た。
2Lの丸底フラスコに、粉砕した八角パウダー150g、脱塩水1050gを入れ、100℃で6時間還流した。
30℃に冷却した後、ろ過(ろ紙、アドバンテックNo5C、110mm)したが、ろ紙が微粒子で目詰まりして、ろ過できなかった。
[純度]
シキミ酸濃度は、HPLC法(カラム:Inertsil ODS−3(粒子径3μm、長さ150mm、内径4.6mm)、移動相:(A)CH3CN + (B)2.1%酢酸溶液(A/B=30/70(v/v))、0.5mL/min、カラム温度:30℃、検出:254nm)で定量した。
測定には、100〜1000ppmのシキミ酸溶液(溶媒:超純水)を用いて検量線を作成した。
測定によって得られたシキミ酸濃度から、シキミ酸含有量を算出し、次式によりシキミ酸の純度を求めた。
シキミ酸の純度=シキミ酸の含有量/試料重量×100(%)
抽出率は以下のようにして求めた。結果を表1に示す。
抽出率は、次式により算出した。
抽出率=抽出されたシキミ酸の重量/原料の重量(%)
実施例1〜4、比較例1、2のシキミ酸を含有する溶液を得る工程における、抽出液に含まれる固形成分を除去する際の濾過性を以下の基準に従い評価した。
結果を表1に示す。
×:1500mLのろ過にかかる時間が2日以上
△:1500mLのろ過にかかる時間が3時間以内
〇:1500mLのろ過にかかる時間が1時間以内
Claims (16)
- シキミ酸を含有する溶液からシキミ酸を回収する工程を含み、
前記シキミ酸を回収する工程が、
シキミ酸を含有する溶液を疎水性合成吸着剤で処理し処理液を得る工程(P1)と、
両性イオン交換樹脂を用いたイオン交換クロマトグラフィー法により、少なくとも前記工程(P1)を行った後の処理液から、シキミ酸を含有する分画を得る工程(P2)とを含むことを特徴とするシキミ酸の製造方法。 - 前記シキミ酸を回収する工程において、
工程(P2)の後に、工程(P2)で得られた分画を濃縮乾燥する工程(P3)を含む、請求項1に記載のシキミ酸の製造方法。 - 前記シキミ酸を回収する工程の前に、シキミ酸を含有する溶液を得る工程を含み、
前記シキミ酸を含有する溶液を得る工程が、
シキミ酸を含む植物からシキミ酸を抽出する工程(E1)と、
前記工程(E1)の後にシキミ酸を含む抽出液を固液分離する工程(E2)とを含む、請求項1又は2に記載のシキミ酸の製造方法。 - 前記シキミ酸を含有する溶液を得る工程において、
前記工程(E1)の前に、シキミ酸を含む植物を粉砕して粉砕物とする工程(E0)を含み、
前記工程(E1)と前記工程(E2)の間に、シキミ酸を含む抽出液を酵素で処理する工程(E1a)を更に含む、請求項3に記載のシキミ酸の製造方法。 - 前記シキミ酸を回収する工程において、前記工程(P1)と前記工程(P2)の間に、
前記工程(P1)で得られた処理液を強塩基性陰イオン交換樹脂に接触させ、前記処理液に含まれるシキミ酸を強塩基性陰イオン交換樹脂に吸着させた後、前記シキミ酸が吸着された前記強塩基性陰イオン交換樹脂からシキミ酸を酸性溶液により溶離する工程(P1a)を更に含む、請求項1〜4のいずれかに記載のシキミ酸の製造方法。 - 前記疎水性合成吸着剤が、芳香族系合成吸着剤である、請求項1〜5のいずれかに記載のシキミ酸の製造方法。
- 前記シキミ酸を含む植物がシキミ族の植物である、請求項3又は4に記載のシキミ酸の製造方法。
- 前記酵素が植物細胞壁分解酵素である、請求項4に記載のシキミ酸の製造方法。
- シキミ酸を含有する溶液を得る工程を含み、
前記シキミ酸を含有する溶液を得る工程が、
シキミ酸を含む植物を粉砕し粉砕物とする工程(e0)と、
前記工程(e0)で得られた粉砕したシキミ酸を含む植物からシキミ酸を、水を含む溶媒で抽出し、抽出液を得る工程(e1)と、
前記工程(e1)で得られた抽出液を酵素で処理する工程(e1a)と、
前記工程(e1a)を行った抽出液を固液分離する工程(e2)とを含むことを特徴とするシキミ酸の製造方法。 - 前記シキミ酸を含有する溶液を得る工程の後に、シキミ酸を含有する溶液からシキミ酸を回収する工程を含み、
前記シキミ酸を回収する工程が、
シキミ酸を含有する溶液を疎水性合成吸着剤で処理し処理液を得る工程(p1)と、
両性イオン交換樹脂を用いたイオン交換クロマトグラフィー法により、少なくとも前記工程(p1)を行った後の処理液から、シキミ酸を含有する分画を得る工程(p2)とを含む請求項9に記載のシキミ酸の製造方法。 - 前記シキミ酸を回収する工程において、工程(p2)の後に、工程(p2)で得られた分画を濃縮乾燥する工程(p3)を含む、請求項10に記載のシキミ酸の製造方法。
- 前記シキミ酸を回収する工程において、前記工程(p1)と前記工程(p2)の間に、
前記工程(p1)で得られた処理液を強塩基性陰イオン交換樹脂に接触させ、前記処理液に含まれるシキミ酸を強塩基性陰イオン交換樹脂に吸着させた後、前記シキミ酸が吸着された前記強塩基性陰イオン交換樹脂からシキミ酸を酸性溶液により溶離する工程(p1a)を更に含む、請求項10又は11に記載のシキミ酸の製造方法。 - 前記疎水性合成吸着剤が、芳香族系合成吸着剤である、請求項10〜12のいずれかに記載のシキミ酸の製造方法。
- 前記シキミ酸を含む植物がシキミ族の植物である、請求項9〜13のいずれかに記載のシキミ酸の製造方法。
- 前記酵素が植物細胞壁分解酵素である、請求項9〜14のいずれかに記載のシキミ酸の製造方法。
- 前記強塩基性陰イオン交換樹脂がジメチルエタノールアンモニウム基を有する、請求項5又は12に記載のシキミ酸の製造方法。
Priority Applications (4)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2017161507A JP6893356B2 (ja) | 2017-08-24 | 2017-08-24 | シキミ酸の製造方法 |
CN201880069241.8A CN111278799A (zh) | 2017-08-24 | 2018-08-23 | 莽草酸的制造方法 |
PCT/JP2018/031182 WO2019039553A1 (ja) | 2017-08-24 | 2018-08-23 | シキミ酸の製造方法 |
JP2021087724A JP7058891B2 (ja) | 2017-08-24 | 2021-05-25 | シキミ酸の製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2017161507A JP6893356B2 (ja) | 2017-08-24 | 2017-08-24 | シキミ酸の製造方法 |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2021087724A Division JP7058891B2 (ja) | 2017-08-24 | 2021-05-25 | シキミ酸の製造方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2019038771A true JP2019038771A (ja) | 2019-03-14 |
JP6893356B2 JP6893356B2 (ja) | 2021-06-23 |
Family
ID=65438960
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2017161507A Active JP6893356B2 (ja) | 2017-08-24 | 2017-08-24 | シキミ酸の製造方法 |
JP2021087724A Active JP7058891B2 (ja) | 2017-08-24 | 2021-05-25 | シキミ酸の製造方法 |
Family Applications After (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2021087724A Active JP7058891B2 (ja) | 2017-08-24 | 2021-05-25 | シキミ酸の製造方法 |
Country Status (3)
Country | Link |
---|---|
JP (2) | JP6893356B2 (ja) |
CN (1) | CN111278799A (ja) |
WO (1) | WO2019039553A1 (ja) |
Families Citing this family (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN111056941B (zh) * | 2019-12-26 | 2022-07-05 | 浙江康恩贝制药股份有限公司 | 一种利用银杏叶提取物层析废液制备高纯度莽草酸的方法 |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20070149805A1 (en) * | 2005-12-23 | 2007-06-28 | Stephen F. Austin State University | Method for the extraction and purification of shikimic acid |
US20070161818A1 (en) * | 2006-01-06 | 2007-07-12 | Shiyou Li | Processes for the extraction and purification of shikimic acid and the products of such processes |
JP2012188374A (ja) * | 2011-03-09 | 2012-10-04 | Sophia School Corp | シキミ酸取得方法及びシキミ酸製造方法 |
WO2014189357A1 (en) * | 2013-05-21 | 2014-11-27 | Sime Darby Malaysia Berhad | A process for extracting phenolic compound |
Family Cites Families (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1978422B (zh) * | 2005-12-08 | 2011-07-20 | 中国科学院上海药物研究所 | 莽草酸的分离纯化方法 |
CN101318893B (zh) * | 2006-08-25 | 2011-07-20 | 江南大学 | 一种从八角中同时提取莽草酸和香精油的工艺 |
CN100408541C (zh) * | 2006-09-29 | 2008-08-06 | 广西万山香料有限责任公司 | 从八角中提取分离莽草酸的方法 |
CN101024609B (zh) * | 2007-03-30 | 2010-07-07 | 南京农业大学 | 一种莽草酸的生产工艺 |
CN101391951A (zh) * | 2007-09-18 | 2009-03-25 | 兴化格林生物制品有限公司 | 高纯度莽草酸的生产制备工艺 |
CN101759557A (zh) * | 2009-11-20 | 2010-06-30 | 南京泽朗医药科技有限公司 | 一种莽草酸的制备方法 |
CN106278873A (zh) * | 2016-08-19 | 2017-01-04 | 广西甙元植物制品有限公司 | 一种从八角中提取分离莽草酸的生产工艺 |
-
2017
- 2017-08-24 JP JP2017161507A patent/JP6893356B2/ja active Active
-
2018
- 2018-08-23 CN CN201880069241.8A patent/CN111278799A/zh active Pending
- 2018-08-23 WO PCT/JP2018/031182 patent/WO2019039553A1/ja active Application Filing
-
2021
- 2021-05-25 JP JP2021087724A patent/JP7058891B2/ja active Active
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20070149805A1 (en) * | 2005-12-23 | 2007-06-28 | Stephen F. Austin State University | Method for the extraction and purification of shikimic acid |
US20070161818A1 (en) * | 2006-01-06 | 2007-07-12 | Shiyou Li | Processes for the extraction and purification of shikimic acid and the products of such processes |
JP2012188374A (ja) * | 2011-03-09 | 2012-10-04 | Sophia School Corp | シキミ酸取得方法及びシキミ酸製造方法 |
WO2014189357A1 (en) * | 2013-05-21 | 2014-11-27 | Sime Darby Malaysia Berhad | A process for extracting phenolic compound |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
WO2019039553A1 (ja) | 2019-02-28 |
CN111278799A (zh) | 2020-06-12 |
JP6893356B2 (ja) | 2021-06-23 |
JP7058891B2 (ja) | 2022-04-25 |
JP2021121631A (ja) | 2021-08-26 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP2020526373A (ja) | 乾燥大麻及びカンナビスの葉からカンナビノイドを精製し分離するためのプロセス | |
CN102015533A (zh) | 纯化固体盐组合物的方法和设备 | |
US20120088941A1 (en) | Polyol refining | |
CN103497106A (zh) | 从绿咖啡豆提取绿原酸的方法 | |
CN1321961C (zh) | 一种从虎杖中提取纯化白藜芦醇的新方法 | |
CN101544543B (zh) | 厚朴药材中酚类化合物的纯化分离方法 | |
JP2009120494A (ja) | フコキサンチン高含有褐藻類エキスの製造方法 | |
JP7058891B2 (ja) | シキミ酸の製造方法 | |
JP6559010B2 (ja) | 精製クロロゲン酸類含有組成物の製造方法 | |
ES2559623T3 (es) | Proceso para la extracción de pentosa a partir de sustrato ligno-celulósico | |
CN101851221B (zh) | 一种从落叶松中制备二氢槲皮素的方法 | |
KR101571511B1 (ko) | 결정화 공정 폐기물의 정제물을 사용하여 수율을 항상시킨 고순도 무수당 알코올의 제조방법 | |
CN101417917B (zh) | 一种高纯度全反式番茄红素晶体的制备方法 | |
CA3081207C (en) | Bisacurone extraction method | |
CN106008441B (zh) | 一种高纯度egc的纯化方法 | |
CN111164088A (zh) | 脱水糖醇薄片及其制备方法 | |
JP5547946B2 (ja) | 精製アピゲニン含有抽出物の製造方法 | |
KR100881279B1 (ko) | 아세톤의 고순도 정제방법 | |
JP6266420B2 (ja) | ジメチルスルホキシドの精製方法 | |
US8779210B2 (en) | Process for the treatment of an aqueous mixture comprising a dipolar aprotic compound | |
CN1331859C (zh) | 分离紫杉醇和三尖杉磷碱的方法 | |
JP2013116876A (ja) | エルゴチオネインの精製方法 | |
Wang et al. | Adsorption equilibrium, kinetics and dynamic process of polyphenols from orange peel extract on mixed‐mode adsorption resin HD‐1 | |
KR100346882B1 (ko) | 설탕에스테르의정제방법 | |
JP6473526B2 (ja) | ビサクロン抽出方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A711 | Notification of change in applicant |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A711 Effective date: 20200128 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20200128 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20200820 |
|
A871 | Explanation of circumstances concerning accelerated examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A871 Effective date: 20210329 |
|
A975 | Report on accelerated examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971005 Effective date: 20210401 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20210413 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20210416 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20210511 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20210525 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6893356 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |