JP2018528778A - 穀物粉中のタンパク質を濃縮する方法 - Google Patents
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Abstract
Description
本開示は、穀物粉中のタンパク質を濃縮する方法、その方法を使用して濃縮されたタンパク質を含む穀物粉、及びその濃縮タンパク質を含む穀物粉を含む飼料添加物に関する。より詳細には、本開示は、穀物粉中のタンパク質を濃縮する方法であって、穀物粉を酵素で処理して、構造性炭水化物を分解するステップを含む方法に関する。
穀物は、エネルギー含量が高いことから、飼料効率が高く、且つ粗繊維含有量が低く、そのため、消化性が良いので、家畜飼料として広く使用されている。しかし、穀物飼料は、タンパク質比率が低く、アミノ酸比率が低い。したがって、バランスの取れた栄養を得るために、穀物飼料にタンパク質及びアミノ酸を補充する必要がある。タンパク質源としての使用には、動物性タンパク質源、例えば、魚粉、脱脂粉乳、肉粉、又は血液粉、及び植物性タンパク質源、例えば、大豆、カノーラ、又は亜麻が使用される。植物性タンパク質源の中から、トウモロコシグルテンは、トウモロコシデンプンの製造手順において生成される副生成物である。トウモロコシグルテンは、高いタンパク質含有量(一般的な植物性タンパク質源より約3倍高い)を有する魚粉と同じくらいのタンパク質含有量を有し、安価である。トウモロコシグルテンのこれらの特徴により、トウモロコシグルテンは、タンパク質源として飼料に広く使用されている。
トウモロコシグルテン原料の分析
本開示の発明者らは、固体状態発酵のための原材料としてトウモロコシグルテンを使用した。このため、微生物発酵に適する、原材料中の水溶性サッカライド含有量のレベルを測定した。
トウモロコシグルテン中の構造性炭水化物の推定
実施例1において微生物によって使用されるトウモロコシグルテン原料中の水溶性サッカライド含有量が非常に少ないということを確認した後、微生物が使用できる成分の量を増加させるために、酵素処理を行った。酵素スクリーニングの前に、トウモロコシグルテン中の構造性炭水化物を分解して、トウモロコシグルテンを構成する炭水化物の主要モノサッカライドを同定し、その結果に基づいて酵素の標的基質を推定した。
酵素処理に起因する原料成分の変化
微生物によって使用されるトウモロコシグルテン原料中の水溶性サッカライド含有量は非常に少ない。しかし、トウモロコシグルテンの主要炭水化物として推定される成分を分解するグルコアミラーゼを用いてトウモロコシグルテン原料を事前処理すると、トウモロコシグルテンのサッカライド成分が変化した。実施例1で使用した実験方法を実施した。
固体状態発酵に適する調製条件
微生物発酵のための炭素源を酵素処理により得た。しかし、通常、トウモロコシグルテンのpHは4以下なので、バシラス菌株はそこでは増殖しない。したがって、本実験では、バシラス菌株を接種してトウモロコシグルテンを発酵させるために、トウモロコシグルテンのpHを、バシラスの増殖に最適な範囲である6〜7の範囲に調整した。
酵素に応じた微生物によって得られたタンパク質増加効果の比較
実施例3で確認したように、デンプン分解酵素を使用すると、トウモロコシグルテン中の水溶性サッカライド含有量が増加した。市販のデンプン分解酵素は、様々な酵素活性及び反応条件を有する。したがって、それらは、様々なデンプン分解効果、水溶性サッカライド含有量レベル、及び固体状態発酵由来のタンパク質増加比率を有する。本実験では、酵素スクリーニングによって、トウモロコシグルテン中のタンパク質の濃縮に適するデンプン分解酵素を選別した。
酵素を使用した又は使用しなかった場合に得られた発酵パターン及び性質の比較
実施例5によって得られた結果に示されるように、24時間の発酵後、グルコアミラーゼ及び固体状態発酵に起因するタンパク質増加効果があった。さらに明らかにするために、タンパク質増加効果に加えて、発酵過程及び発酵の性質へのグルコアミラーゼ処理効果、微生物の増殖パターン、含水量変化、タンパク質の増加、並びにタンパク質分解性及びタンパク質溶解性を測定した。発酵は実施例5と同じ方式で行い、実験群をグルコアミラーゼ0.5%処理群及び酵素非処理群として分類し、試料を各群から4時間ごとに採取した(表6を参照)。
酵素反応に応じて得られた実験結果の比較
本開示は、酵素前処理及び微生物発酵を同時に行うことによってトウモロコシグルテン中のタンパク質含有量を増加させる方法に関する。酵素処理の直後に別個の酵素反応なしで発酵を行った場合、トウモロコシグルテン中のタンパク質比率を増加させるプロセス及びトウモロコシグルテンを製造するプロセスが単純化され、また、製造費を下げることができる。この仮定を確認するために、別個の酵素反応の必要性を以下の2つの実験結果を比較することで明らかにした:実施例5と同じ方式で発酵を行い、酵素の添加後、酵素反応を60℃の温度で1時間行った。実施例5と同じ方式で発酵を行い、酵素反応の時間を設けずに、微生物を接種した。
酵素の濃度に応じたデンプン含有量及びタンパク質含有量比率の比較
酵素の濃度に応じたトウモロコシグルテン中のデンプン含有量の減少とタンパク質含有量比率の増加の関係を明らかにした。原材料中のデンプンは、酵素処理なしであっても、微生物発酵に起因して、あるレベルの量に減少した。また、酵素の濃度が高いほど、原材料中のデンプン含有量が少なかった。その結果、タンパク質含有量比率は相対的に増加した(表8を参照)。
トウモロコシグルテンの酵母による発酵の確認
上記実施例に記載したように、トウモロコシグルテンが、バシラスによって発酵され、酵素の添加に起因するタンパク質含有量比率増加効果を有することを確認した。本開示の発明者らは、微生物によるトウモロコシグルテンの発酵特性を比較するために、バシラス以外に酵母によってトウモロコシグルテンが発酵するかどうかを確認する実験をさらに実施した。
トウモロコシグルテンの乳酸菌による発酵の確認
上記実施例に記載したように、トウモロコシグルテンが、バシラス又は酵母によって発酵され、グルコアミラーゼ酵素の添加に起因するタンパク質含有量比率増加効果を有することを確認した。本開示の発明者らは、微生物に応じたトウモロコシグルテンの発酵特性を比較するために、バシラス及び酵母以外に乳酸菌によってトウモロコシグルテンが発酵するかどうかを確認する実験をさらに実施した。
微生物による発酵に起因するタンパク質分解性の比較
タンパク質増加効果以外の他の指標における任意の違いを明らかにするために、トウモロコシグルテンのタンパク質分解性をSDS-PAGEで分析した。SDS-PAGE分析に使用した試料は、以下の方法を使用して調製した。
Claims (15)
- 穀物粉中のタンパク質を濃縮する方法であって、
穀物粉を酵素で処理して、構造性炭水化物を分解するステップ、及び
前記穀物粉に細菌を接種して、発酵を行うステップ、
を含む、前記方法。 - 酵素を用いた前記処理の前に、塩基溶液を前記穀物粉に添加して、前記穀物粉中での前記細菌の増殖に最適なpHに調整するステップをさらに含む、請求項1記載の方法。
- 前記細菌が、バシラス属である、請求項1記載の方法。
- 前記バシラス属が、枯草菌、バシラス・リケニホルミス、バシラス・トヨイ、バシラス・コアギュランス、バシラス・ポリファメンチクス、及びバシラス・アミロリケファシエンスK2Gから成る群より選択される少なくとも1種の菌株を含む、請求項3記載の方法。
- 前記細菌が、乳酸菌である、請求項1記載の方法。
- 前記乳酸菌が、ラクトバシラス属、ラクトコッカス属、ロイコノストック属、ペディオコッカス属、及びビフィドバクテリウム属から成る群より選択される少なくとも1種の菌株を含む、請求項5記載の方法。
- 穀物粉中のタンパク質を濃縮する方法であって、
穀物粉を酵素で処理して、構造性炭水化物を分解するステップ、及び
前記穀物粉に酵母を接種して、発酵を行うステップ、
を含む、前記方法。 - 前記酵母が、サッカロミケス属である、請求項7記載の方法。
- 前記穀物粉が、トウモロコシグルテンである、請求項1又は7記載の方法。
- 前記発酵が、固体状態発酵である、請求項1又は7記載の方法。
- 前記構造性炭水化物が、デンプン、セルロース、ヘミセルロース又はペクチンから成る群より選択される少なくとも1種を含む、請求項1又は7記載の方法。
- 前記酵素が、α-アミラーゼ又はグルコアミラーゼである、請求項1又は7記載の方法。
- 前記酵素が、100重量部の前記穀物粉に対して0.1〜1重量部の量で使用される、請求項1又は7記載の方法。
- 請求項1又は7記載の方法を使用することによって濃縮されたタンパク質を含む穀物粉。
- 請求項14記載の濃縮タンパク質を含有する穀物粉を含む飼料添加物。
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