CN109198189A - 一种菌-酶协同发酵制备高蛋白含量的玉米蛋白粉的方法 - Google Patents

一种菌-酶协同发酵制备高蛋白含量的玉米蛋白粉的方法 Download PDF

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Abstract

本发明涉及一种制备高蛋白含量的玉米蛋白粉的方法,尤其涉及一种菌‑酶协同发酵制备高蛋白含量的玉米蛋白粉的方法。(1)发酵液制备:将复合酶制剂按0.4~1:100的重量体积比加入到酵母种子液中得到发酵液;(2)接种发酵:将发酵液与玉米蛋白粉按照1:1~1.5的重量比进行混合,搅拌均匀后,在温度为30~37℃条件下,密闭发酵12~24小时;(3)干燥。通过本发明的方法,能够将低粗蛋白含量(55%‑65%或以下)的玉米蛋白粉提高至70%及以上,提高了玉米蛋白粉的使用范围,例如在特种饲料例如高蛋白饲料中的使用。

Description

一种菌-酶协同发酵制备高蛋白含量的玉米蛋白粉的方法
技术领域
本发明涉及一种制备高蛋白含量的玉米蛋白粉的方法,尤其涉及一种菌-酶协同发酵制备高蛋白含量的玉米蛋白粉的方法。
背景技术
玉米蛋白粉是采用玉米生产玉米淀粉过程中得到的副产物,主要由玉米蛋白、淀粉和少量纤维组成。因生产工艺的不同,玉米蛋白粉的营养成分会不同。在通常的淀粉制备工艺中,产出的玉米蛋白粉可以达到60%左右的蛋白含量,其蛋白含量远高于豆粕,略高于普通鱼粉,与大豆浓缩蛋白相当。
虽然玉米蛋白粉能在普通的水产饲料中广泛应用,但是,在特种水产饲料,特别在制备高蛋白饲料时,玉米蛋白粉的使用压缩了配方空间,这严重限制玉米蛋白粉在高蛋白水产饲料中的使用。
鉴于上述缺陷,需要对玉米蛋白粉进行处理,提高玉米蛋白粉的粗蛋白含量,从而拓宽玉米蛋白粉的使用范围,特别是在高蛋白水产饲料中的使用。
发明内容
针对以上不足,本发明提供一种菌-酶协同发酵制备高蛋白含量的玉米蛋白粉的方法。
针对目前玉米蛋白粉蛋白含量偏低的情况,本发明采用酵母菌和复合酶共同协同作用,通过将玉米蛋白粉中的碳水化合物分解,提高蛋白含量。
一种菌-酶协同发酵制备高蛋白含量的玉米蛋白粉的方法,包括:
(1)发酵液制备:
将复合酶制剂按0.4~1:100的重量体积比加入到酵母种子液中得到发酵液;
其中,所述酵母种子液包括酿酒酵母、假丝酵母、布拉迪酵母、白地霉中的一种或多种,所述酵母种子液的活菌含量为0.3*108cfu/g~2*1010cfu/g;
其中,所述复合酶制剂包括淀粉酶和糖化酶,所述淀粉酶和糖化酶的重量比为1-4:1-10,所述淀粉酶的酶活为5000-100000IU/g,所述糖化酶的酶活为4000-50000IU/g;
(2)接种发酵:将发酵液与玉米蛋白粉按照1:1~1.5的重量比进行混合,搅拌均匀后,在温度为30~37℃条件下,密闭发酵12~24小时;
(3)干燥:将发酵后的物质干燥,例如烘干,得到高蛋白含量的玉米蛋白粉。
经试验证实,上述处理后玉米蛋白粉的蛋白含量可以从60%提升至70%以上,例如70%、75%、78%等。
发明人在现有的较低含量的玉米蛋白粉(约60%左右或以下)的基础上,采用酵母菌和复合酶协同作用,一方面,将玉米蛋白粉中的淀粉快速转化为菌体、二氧化碳和乙醇,进而达到浓缩蛋白质的效果,另一方面,可能存在其他转化分解效果。
优选的,所述酵母种子液的制备包括:将酵母菌菌种按0.2~1:100的重量体积比加入水中制备得到酵母种子液。
优选的,所述酵母种子液的制备还包括:将酵母菌菌种扩大培养,得到酵母种子液,例如通过真菌培养的扩大培养。
进一步优选的,在上述两种酵母种子液的制备中,所述酵母菌菌种的活菌数为0.15×1010~2×1010cfu/g。
进一步优选的,所述酵母菌菌种由酿酒酵母和假丝酵母组成,其中酿酒酵母和假丝酵母的活菌数比例为1-5:1-10。
进一步优选的,所述酵母菌菌种为酿酒酵母。
进一步优选的,所述酵母菌菌种由酿酒酵母、假丝酵母和布拉迪酵母组成,所述酿酒酵母、假丝酵母和布拉迪酵母的活菌数比例为1-3:1-5:1-10。
进一步优选的,所述酵母菌菌种由酿酒酵母和布拉迪酵母组成,所述酿酒酵母和布拉迪酵母的活菌数比例为1-5:1-10。
进一步优选的,所述酵母菌菌种由假丝酵母和布拉迪酵母组成,所述假丝酵母和布拉迪酵母的活菌数比例为1-3:1-3。
进一步优选的,所述酵母菌菌种由酿酒酵母、假丝酵母、布拉迪酵母和白地霉组成,所述酿酒酵母、假丝酵母、布拉迪酵母和白地霉的活菌数比例为1-5:1-5:1-10:1-3。
进一步优选的,在上述步骤(1)中,所述酵母种子液制备得到以后,加热至28-40℃,例如32℃,保温活化15-60分钟,例如保温活化10分钟。
上述保温活化的温度范围优选在32℃±5℃范围内。
优选的,所述复合酶中的淀粉酶为50000IU/g。
优选的,所述复合酶中的糖化酶为20000IU/g。
其中,所述复合酶制剂由淀粉酶和糖化酶组成,所述淀粉酶和糖化酶的重量比为1:4,所述淀粉酶为50000IU/g,所述糖化酶为20000IU/g。
优选的,所述步骤(2)的发酵温度为35℃。
优选的,所述步骤(2)的发酵液与玉米蛋白粉的的重量比为1:1。
优选的,上述步骤(2)的玉米蛋白粉为粗蛋白质含量在55~65%的玉米蛋白粉。
优选的,上述步骤(2)发酵液与玉米蛋白粉在呼吸袋或带单向排气阀的耐弱酸腐蚀的容器中发酵。
优选的,上述步骤(2)中采用将发酵液喷淋的方式与玉米蛋白粉混合。
优选的,所述步骤(3)的烘干参数为进风温度120-150℃,出风温度48-60℃烘干,烘干15-30分钟。
优选的,所述步骤(3)的烘干在低温烘干箱中烘干。
进一步优选的,所述步骤(3)的烘干,将发酵后的物质投入低温沸腾烘干箱内,维持进风温度120℃,出风温度50℃烘干,烘干30分钟。
在一个优选的实施例中,一种菌-酶协同发酵制备高蛋白含量的玉米蛋白粉的方法,包括:
(1)发酵液制备:
将复合酶制剂按0.4~1:100的重量体积比加入到酵母种子液中得到发酵液;
其中,所述酵母种子液的制备包括:将酵母菌菌种按0.2~1:100的重量体积比加入水中制备得到酵母种子液,所述酵母菌菌种由酿酒酵母和假丝酵母组成,所述酿酒酵母和假丝酵母的活菌比例为1-5:1-10,所述酵母种子液的活菌含量为0.3*108cfu/g~2*1010cfu/g;
所述淀粉酶和糖化酶的重量比为1-4:1-10,所述淀粉酶的酶活为5000-100000IU/g,所述糖化酶的酶活为4000-50000IU/g;
(2)接种发酵:将发酵液与玉米蛋白粉按照1:1~1.5的重量比进行混合,例如1:1的重量比进行混合,搅拌均匀后,在温度为30~37℃条件下,密闭发酵12~24小时;
(3)干燥:将发酵后的物质干燥,例如烘干,得到高蛋白含量的玉米蛋白粉。
在另一个优选的实施例中,一种菌-酶协同发酵制备高蛋白含量的玉米蛋白粉的方法,包括:
(1)发酵液制备:
将复合酶制剂按0.4~1:100的重量体积比加入到酵母种子液中得到发酵液;
其中,优选的,所述酵母种子液的制备包括:将酵母菌菌种按0.2~1:100的重量体积比加入水中制备得到酵母种子液,所述酵母菌菌种为酿酒酵母,所述酵母种子液的活菌含量为0.3*108cfu/g~2*1010cfu/g;
所述淀粉酶和糖化酶的重量比为1-4:1-10,所述淀粉酶的酶活为5000-100000IU/g,所述糖化酶的酶活为4000-50000IU/g;
(2)接种发酵:将发酵液与玉米蛋白粉按照1:1~1.5的重量比进行混合,例如1:1的重量比进行混合,搅拌均匀后,在温度为30~37℃条件下,密闭发酵12~24小时;
(3)干燥:将发酵后的物质干燥,例如烘干,得到高蛋白含量的玉米蛋白粉。
在一个更优选的实施例中,一种菌-酶协同发酵制备高蛋白含量的玉米蛋白粉的方法,包括:
(1)发酵液制备:
将复合酶制剂按0.4~1:100的重量体积比加入到酵母种子液中得到发酵液;
其中,所述酵母种子液的制备包括:将酵母菌菌种按0.2~1:100的重量体积比加入水中制备得到酵母种子液,所述酵母菌菌种由酿酒酵母和假丝酵母组成,所述酿酒酵母和假丝酵母的重量比例为1-5:1-10,所述酵母种子液的活菌含量为0.3*108cfu/g~2*1010cfu/g;
其中,所述复合酶制剂由淀粉酶和糖化酶组成,所述淀粉酶和糖化酶的重量比为1:4,所述淀粉酶为50000IU/g,所述糖化酶为20000IU/g;
(2)接种发酵:将发酵液与玉米蛋白粉按照1:1~1.5的重量比进行混合,例如1:1的重量比进行混合,搅拌均匀后,在温度为35℃条件下,密闭发酵12~24小时;
(3)干燥:将发酵后的物质干燥,例如烘干,得到高蛋白含量的玉米蛋白粉。
在另一个更优选的实施例中,一种菌-酶协同发酵制备高蛋白含量的玉米蛋白粉的方法,包括:
(1)发酵液制备:
将复合酶制剂按0.4~1:100的重量体积比加入到酵母种子液中得到发酵液;
其中,优选的,所述酵母种子液的制备包括:将酵母菌菌种按0.2~1:100的重量体积比加入水中制备得到酵母种子液,所述酵母菌菌种为酿酒酵母,所述酵母种子液的活菌含量为0.3*108cfu/g~2*1010cfu/g;
其中,所述复合酶制剂由淀粉酶和糖化酶组成,所述淀粉酶和糖化酶的重量比为1:4,所述淀粉酶为50000IU/g,所述糖化酶为20000IU/g;
(2)接种发酵:将发酵液与玉米蛋白粉按照1:1~1.5的重量比进行混合,例如1:1的重量比进行混合,搅拌均匀后,在温度为35℃条件下,密闭发酵12~24小时;
(3)干燥:将发酵后的物质干燥,例如烘干,得到高蛋白含量的玉米蛋白粉。
发明人在试验中发现,采用单纯的酵母菌或复合酶方法提高玉米蛋白粉的粗蛋白含量,都不能达到理想的效果,而酵母粉和复合酶的协同发酵效果能够实现显著提高粗蛋白含量的效果。
发明人进一步研究发现,菌种的选择、酵母菌的复配、复合酶的选择、酵母菌与复合酶的复配,都会对玉米蛋白粉的粗蛋白含量提高效果带来显著的影响,并且以本发明所提供的选择和复配带来最显著的提高效果,例如在本发明中采用的复合酶制剂为能将淀粉快速转化为单糖的淀粉酶和糖化酶,且它们在pH3.5~pH7.5之间具有稳定的活性。
进一步地,发明人在采用酵母菌和复合酶的协同发酵过程中,发酵温度、时间、干燥的方式及温度、时间都对本发明的蛋白含量提高具有显著影响。
本发明还提供一种采用上述制备方法制备得到的高蛋白含量的玉米蛋白粉。
通过本发明的方法,能够将低粗蛋白含量(55%-65%或以下)的玉米蛋白粉提高至70%及以上,提高了玉米蛋白粉的使用范围,例如在特种饲料例如高蛋白饲料中的使用。
具体实施方式
以下结合具体实施例对本发明进行进一步说明。
实施例1:
一种菌-酶协同发酵制备高蛋白含量的玉米蛋白粉的方法,步骤如下:
(1)发酵液制备
称取1公斤酵母菌粉(活菌数含量:酿酒酵母0.5×1010cfu/g、布拉迪酵母0.5×1010cfu/g,酿酒酵母为400g,布拉迪酵母为600g)加入到100公斤反渗透水中,搅拌混合均匀,然后加热至32℃后,保温(32℃±5℃)活化10分钟,然后再加入0.5公斤复合酶制剂(酶活组成:淀粉酶50000IU/g、糖化酶20000IU/g,淀粉酶100g,糖化酶400g),搅拌2分钟后备用。
(2)接种发酵
称取与发酵液等量的玉米蛋白粉,倒入混合机中搅拌,然后将制备好的发酵液喷入混合机中喷淋方式接种到混合搅拌的玉米蛋白粉中,混合搅拌均匀,再分装至带有单向透气阀的塑料桶中,加盖密封;
(3)培养
将装有物料的发酵桶至发酵室,控制室内温度保持35±2℃,发酵24小时。
(4)烘干粉碎
发酵结束后,将发酵袋中物料投入低温沸腾烘干箱内,维持进风温度120℃,出风温度50℃烘干,烘干30分钟,得到蛋白含量为70%以上的玉米蛋白粉。
实施例2:
一种菌-酶协同发酵制备高蛋白含量的玉米蛋白粉的方法,步骤如下:
(1)发酵液制备
称取1公斤酵母菌粉(活菌数含量:酿酒酵母2×1010cfu/g)加入到100公斤反渗透水中,搅拌混合均匀,然后加热至32℃后,保温(32℃±5℃)活化10分钟,然后再加入1公斤复合酶制剂(酶活组成:淀粉酶50000IU/g、糖化酶20000IU/g,淀粉酶200g,糖化酶300g),搅拌2分钟后备用。
(2)接种发酵
称取与发酵液等量的玉米蛋白粉,倒入混合机中,同时开动搅拌开关,然后将制备好的发酵液喷入混合机中喷淋方式接种到混合的原料玉米蛋白粉中,混合搅拌均匀,再分装至呼吸袋中,然后加热将袋口密封;
(3)培养
然后将装有物料的呼吸袋移至发酵室,控制室内温度保持35±2℃,发酵12小时。
(4)烘干粉碎
发酵结束后,将呼吸袋中物料投入低温沸腾烘干箱内,维持进风温度120℃,出风温度50℃烘干,烘干30分钟,得到蛋白含量为70%以上的玉米蛋白粉。
试验例1:菌、酶和菌-酶协同处理的效果比较
玉米蛋白粉的制备步骤如下:
(1)发酵液制备
称取2公斤酵母菌粉(活菌数含量:酿酒酵母2×1010cfu/g)加入到200公斤反渗透水中,搅拌混合均匀,然后加热至32℃后,保温(32℃±5℃)活化10分钟,然后将活化液平均分为两份,其中一份标记为菌剂组,另一份活化液再加入1公斤复合酶制剂(酶活组成:淀粉酶50000IU/g、糖化酶20000IU/g,淀粉酶200g,糖化酶800g),搅拌2分钟后,标记为菌酶协同组;然后称取1公斤复合酶制剂(酶活组成:淀粉酶50000IU/g、糖化酶20000IU/g,淀粉酶200g,糖化酶800g),加入到100公斤反渗透水中,搅拌2分钟后,标记为酶制剂组,备用。
(2)接种发酵
分别称取菌剂组、菌酶协同组和酶制剂组的发酵液各50公斤,然后分别与50公斤同样粗蛋白含量的玉米蛋白粉,在混合机中进行均匀混合,搅拌均匀后,再分装至呼吸袋中,然后加热将袋口密封;然后对应标注菌剂组、菌酶协同组和酶制剂组三个类别。
(3)培养
然后将标注好的装有物料的呼吸袋移至发酵室,控制室内温度保持35±2℃,发酵12小时。
(4)烘干粉碎
发酵结束后,将呼吸袋中物料投入低温沸腾烘干箱内,维持进风温度120℃,出风温度50℃烘干,烘干30分钟,即得到对应的玉米蛋白粉;检测其粗蛋白含量,检测结果表1所示。
表1:
说明:本试验例中所涉及样品的水分均折算为12%。
从表1的结果可以看出,采用菌-酶协同处理,与单独的菌、或单独的酶制剂处理相比,具有更好的效果,并且其效果也好于两种方法的叠加效果,因此,本发明申请中的菌-酶之间具有协同效果。
试验例2:不同菌株使用效果的比较
玉米蛋白粉的制备步骤如下:
(1)发酵液制备
称取3公斤复合酶制剂(每公斤复合酶组成:淀粉酶50000IU/g、糖化酶20000IU/g,淀粉酶200g,糖化酶800g),加入到300公斤反渗透水中,搅拌2分钟后,平均分为3份;然后分别称取1公斤酵母菌粉(活菌数含量:酿酒酵母2×1010cfu/g)、1公斤乳酸菌菌粉(活菌数含量:植物乳杆菌2×1010cfu/g)和1公斤芽孢杆菌菌粉(活菌数含量:地衣芽孢杆菌2×1010cfu/g),分别加入到3份复合酶液中,搅拌均匀后,分别标记为酵母菌组、乳酸菌组和芽孢杆菌组,备用。
(2)接种发酵
分别称取酵母菌组、乳酸菌组和芽孢杆菌组的发酵液各50公斤,然后分别与50公斤同样粗蛋白含量的玉米蛋白粉,在混合机中进行均匀混合,搅拌均匀后,再分装至呼吸袋中,然后加热将袋口密封;然后对应标注酵母菌组、乳酸菌组和芽孢杆菌组三个类别。
(3)培养
然后将标注好的装有物料的呼吸袋移至发酵室,控制室内温度保持35±2℃,发酵12小时。
(4)烘干粉碎
发酵结束后,将呼吸袋中物料投入低温沸腾烘干箱内,维持进风温度120℃,出风温度50℃烘干,烘干30分钟,即得到对应的玉米蛋白粉;检测其粗蛋白含量,检测结果表2所示。
表2:不同类别菌株发酵效果对比情况
说明:本试验例中所涉及样品的水分均折算为12%。
从表2的结果可以看出,采用酵母菌的作用效果明显好于乳酸菌组和芽孢杆菌组,因此,本发明中选用酵母菌是发酵制备高蛋白含量的玉米蛋白粉的效果的关键影响因素之一。
试验例3:不同发酵温度对发酵效果的影响
玉米蛋白粉的制备步骤如下:
(1)发酵液制备
称取2公斤复合酶制剂(每公斤复合酶组成:淀粉酶50000IU/g、糖化酶20000IU/g,淀粉酶200g,糖化酶800g),加入到200公斤反渗透水中,搅拌2分钟后,然后称取2公斤酵母菌粉(活菌数含量:酿酒酵母1×1010cfu/g,布拉迪酵母0.5×1010cfu/g),搅拌均匀后备用。
(2)接种发酵
分别称取100公斤发酵液与100公斤的玉米蛋白粉,在混合机中进行均匀混合,搅拌均匀后,再分装至呼吸袋中,然后加热将袋口密封;然后对应标注25℃组、30℃组、35℃组、40℃组、45℃组。
(3)培养
然后将标注好的装有物料的呼吸袋移至对应温度的发酵室,控制发酵室内温度为标注温度±2℃,发酵12小时。
(4)烘干粉碎
发酵结束后,将呼吸袋中物料投入低温沸腾烘干箱内,维持进风温度135℃,出风温度50℃烘干,烘干15分钟,即得到对应的玉米蛋白粉;检测其粗蛋白含量,检测结果表3所示。
表3:在不同温度下的发酵效果
说明:本试验例中所涉及样品的水分均折算为12%。
从表3的结果可以看出,本发明中发酵温度是发酵效果的关键影响因素之一,控制发酵温度在30℃-37℃范围内具有更优选的高蛋白含量的处理效果,温度过高或过低都会影响到发酵效果。
以上所述,仅为本发明的较佳的具体实施例,但本发明的保护范围并不局限于此,任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内,根据本发明的技术方案及其构思加以等同替换或改变,都应涵盖在本发明的保护范围内。

Claims (10)

1.一种菌-酶协同发酵制备高蛋白含量的玉米蛋白粉的方法,其特征在于,包括:
(1)发酵液制备:
将复合酶制剂按0.4~1:100的重量体积比加入到酵母种子液中得到发酵液;
其中,所述酵母种子液包括酿酒酵母、假丝酵母、布拉迪酵母、白地霉中的一种或多种,所述酵母种子液的活菌含量为0.3*108cfu/g~2*1010cfu/g;
其中,所述复合酶制剂包括淀粉酶和糖化酶,所述淀粉酶和糖化酶的重量比为1-4:1-10,所述淀粉酶的酶活为5000-100000IU/g,所述糖化酶的酶活为4000-50000IU/g;
(2)接种发酵:将发酵液与玉米蛋白粉按照1:1~1.5的重量比进行混合,搅拌均匀后,在温度为30~37℃条件下,密闭发酵12~24小时;
(3)干燥:将发酵后的物质干燥,例如烘干,得到高蛋白含量的玉米蛋白粉。
2.根据权利要求1所述的一种菌-酶协同发酵制备高蛋白含量的玉米蛋白粉的方法,其特征在于,所述酵母种子液的制备包括:将酵母菌菌种按0.2~1:100的重量体积比加入水中制备得到酵母种子液;或,所述酵母种子液的制备还包括:将酵母菌菌种扩大培养,得到酵母种子液。
3.根据权利要求2所述的一种菌-酶协同发酵制备高蛋白含量的玉米蛋白粉的方法,其特征在于,所述酵母菌菌种的活菌数为0.15×1010~2×1010cfu/g。
4.根据权利要求2或3所述的一种菌-酶协同发酵制备高蛋白含量的玉米蛋白粉的方法,其特征在于,所述酵母菌菌种由酿酒酵母和假丝酵母组成,所述酿酒酵母和假丝酵母的活菌数比例为1-5:1-10;或所述酵母菌菌种为酿酒酵母;或所述酵母菌菌种由酿酒酵母、假丝酵母和布拉迪酵母组成,所述酿酒酵母、假丝酵母和布拉迪酵母的活菌数比例为1-3:1-5:1-10;或所述酵母菌菌种由酿酒酵母和布拉迪酵母组成,所述酿酒酵母和布拉迪酵母的活菌数比例为1-5:1-10;或所述酵母菌菌种由假丝酵母和布拉迪酵母组成,所述假丝酵母和布拉迪酵母的活菌数比例为1-3:1-3;或所述酵母菌菌种由酿酒酵母、假丝酵母、布拉迪酵母和白地霉组成,所述酿酒酵母、假丝酵母、布拉迪酵母和白地霉的活菌数比例为1-5:1-5:1-10:1-3。
5.根据权利要求1所述的一种菌-酶协同发酵制备高蛋白含量的玉米蛋白粉的方法,其特征在于,在上述步骤(1)中,所述酵母种子液制备得到以后,加热至28-40℃,保温活化15-60分钟。
6.根据权利要求1所述的一种菌-酶协同发酵制备高蛋白含量的玉米蛋白粉的方法,其特征在于,所述复合酶中的淀粉酶为50000IU/g;所述复合酶中的糖化酶为20000IU/g。
7.根据权利要求1所述的一种菌-酶协同发酵制备高蛋白含量的玉米蛋白粉的方法,其特征在于,所述步骤(2)的发酵液与玉米蛋白粉的的重量比为1:1。
8.根据权利要求1所述的一种菌-酶协同发酵制备高蛋白含量的玉米蛋白粉的方法,其特征在于,上述步骤(2)发酵液与玉米蛋白粉在呼吸袋或带单向排气阀的耐弱酸腐蚀的容器中发酵。
9.根据权利要求1所述的一种菌-酶协同发酵制备高蛋白含量的玉米蛋白粉的方法,其特征在于,上述步骤(2)中采用将发酵液喷淋的方式与玉米蛋白粉混合。
10.根据权利要求1所述的一种菌-酶协同发酵制备高蛋白含量的玉米蛋白粉的方法,其特征在于,所述步骤(3)的烘干参数为进风温度120-150℃,出风温度48-60℃烘干,烘干15-30分钟。
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