JP2018522923A - 痩身ならびにスキンケア用組成物、および、その調製方法 - Google Patents

Abstract

本開示は、痩身ならびにスキンケアの機能を有する組成物であって、下記の原材料を下記の重量部含む組成物を提供する。原料：オーツ麦５〜１０部、ビターオレンジの花１〜３部、蓮の葉１〜３部、および、乾燥オレンジ皮３〜５部。当該組成物の調製方法において、原材料は粉砕され、水で抽出される。

Description

〔関連出願の相互参照〕
本出願は、２０１５年８月２４日出願の中国特許出願第２０１５１０５２７３０７．１号の優先権を主張するものであり、ここにその開示を参考文献として合体させる。

本発明は、バイオテクノロジー、特に、組成物、その調製方法と利用法、ならびに、前記組成物を含むスキンケア製品、および、その調製方法、に関する。

人々の生活水準の上昇に伴い、肥満が人々の生活、特に、女性の生活の質に影響する要因の一つになっている。仕事と生活からのストレス、不規則な食事、妊娠と出産、運動不足、などが肥満の主要な原因となる。肥満は外見に影響を与えるだけでなく体の健康にも影響を与える。

現在、肥満を無くすための製品が数多く存在し、それらには、経口投与剤や外用調製剤が含まれる。市販の減量薬剤には二つのカテゴリがある。すなわち、中枢神経系に作用する食用抑制剤と、膵臓リパーゼ阻害剤と、である。食欲抑制剤は、それによって神経系に対する悪影響が及ぶ可能性があることから、その使用が制限される。膵臓リパーゼ阻害剤オルリスタット（Ｏｒｌｉｓｔａｔ）は、膵臓リパーゼの活性を阻害することによって食物からの脂肪の分解および吸収を抑制することによって減量を補助することができる。しかし、それは、脂肪便、および、脂肪溶解性ビタミンの欠乏、を引き起こす可能性がある。最近では、オルリスタットは肝臓機能に対する障害を引き起こす可能性があることも報告されている。食欲抑制剤ロルカセリン（ｌｏｒｃａｓｅｒｉｎ）およびクシミア（Ｑｓｙｍｉａ）は、ここ１３年間でＦＤＡによって認可された最初の減量薬となったが、これらの薬品に関しては脳、循環器系、などに対するいくつかの安全性に関する不確実性がいまだにある。したがって、高効率で副作用の無い減量剤は市場においてほとんど存在していない。

痩身クリームやボディーシェイプアップクリームなどの外用減量調製剤も大きな話題になっている。しかし、痩身クリームなどの市販の外用調製剤の効果については楽観されていない。いくつかの製品は主として皮膚に対して「熱い」感覚を与えるカプサイシンに依存し、それによって消費者に脂肪が燃焼していると誤認させている。他の製品は皮膚の発汗の促進と浮腫の軽減とを通じて痩身効果を達成する。これらの製品の、疾患ではなく症状を治療するという特徴により、これらの製品の減量効果は短時間しか持続せず、容易にリバウンドする。さらに、それによって皮膚に障害が生じて、たるんだ皮膚やエイジングなどが起こる可能性がある。

したがって、効果的で長持ちする痩身効果を有する外用スキンケア調製剤を開発することが重要である。

上記に鑑み、本開示は、組成物、その調製方法と利用法、ならびに、前記組成物を含むスキンケア製品、および、その調製方法、提供する。前記組成物またはスキンケア製品は、安全で皮膚に対する刺激が無い。ここで得られる組成物と調製物は、レプチンの分泌レベルを増大し、体脂肪の代謝を加速するのみならず、体内のコラーゲンの含有率を増大し、脂肪低減による皮膚の弛みと浮腫を改善し、したがって、健康と痩身の相乗作用を達成する。さらに、本開示は、皮膚修復の効果、血液循環の改善、および、抗疲労効果、を有することが、実験によって示されている。

上記課題を達成するために、本開示は下記の技術的解決手段を提供する。

本開示は、下記の原材料を下記の重量部含む組成物を提供する。
オーツ麦 ５〜１０部
ビターオレンジの花 １〜３部
蓮の葉 １〜３部
乾燥オレンジ皮 ３〜５部

本開示は、さらに、前記組成物の調製方法を提供し、これは、所望量の前記処方による原材料を粉砕する工程と、水で抽出する工程と、を有し、前記水抽出の温度は６１℃〜１００℃であり、前記水抽出の時間は１時間〜４時間であり、前記原材料の水に対する質量比は１：２１〜１：４０である。

好ましくは、前記調製方法における前記水抽出の温度は８０℃〜１００℃であり、水抽出の時間は１時間〜４時間である。

好ましくは、前記調製方法における前記原材料の水に対する質量比は１：３０〜１：４０である。

好ましくは、前記調製方法は、さらに、水抽出後に、冷却、濾過、および、濾液収集、の工程を有する。

好ましくは、前記調製方法の濾過は、単純濾過（ｃｏｍｍｏｎ ｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ）と真空濾過とを含む。

より好ましくは、前記単純濾過は、１００メッシュ〜２００メッシュのふるいを通過させるものである。

好ましくは、真空濾過は、０．３ｃｍ〜０．６ｃｍの珪藻土をその間に有する濾紙を備えるブフナー漏斗で行われる。

好ましくは、真空濾過は、０．３ｃｍ〜０．６ｃｍの珪藻土をその間に有する二層の濾紙を備えるブフナー漏斗で行われる。

好ましくは、前記濾過処理は、抽出溶液を冷却して１００メッシュのふるいを通過させる工程と、残滓の分離除去後に真空濾過を行う工程と、からなる。

好ましくは、前記調製方法の前記冷却は、溶液を２０℃〜３０℃まで冷却する。

本開示は、さらに、前記調製方法によって製造される組成物も提供する。

伝統的漢方薬の「心身一体、弁証、全人的」理論に依れば、天然の植物機能性原材料を使用して、体内のコラーゲン含有率を増大させ、脂肪の低下によって引き起こされる皮膚の弛みと浮腫とを改善し、これによって、痩身補助の目的を達成する。さらに、ＥＬＩＳＡ法に依り、前記組成物の、脂肪細胞によって分泌されるレプチンに対する効果に関する研究は、レプチンの分泌が前記組成物の相乗効果で増大することを示している。さらに、前記原材料の組成物は、経絡浚渫（ｍｅｒｉｄｉａｎ ｄｒｅｄｇｉｎｇ）、気（ｑｉ）−血液活性化、筋膜と筋肉に対する気−血液滋養、に対する効果を有する。したがって、上記に鑑みて、脂肪代謝と抗疲労とに対する効果を有する痩身組成物が得られる。

本開示は、痩身およびスキンケアのための、薬剤、食品、ヘルスケア製品、および／または、スキンケア製品、の製造における前記組成物の利用法、および／または、前記調製方法によって調製される組成物、も提供する。

本開示は、さらに、前記組成物の利用法、および／または、薬剤、食品、スキンケア製品、の製造において前記調整方法によって調製される前記組成物、および／または、脂肪細胞によるレプチンの分泌の改善、掻痒の治療、皮膚の修復、赤みならびに腫れの除去、抗疲労、血液循環の促進、および、コラーゲン合成の促進、のためのスキンケア製品、も提供する。

本開示は、さらに、前記組成物、および／または、前記調製方法によって調製された組成物ならびにスキンケア製品、において許容可能なアジュバントを含むスキンケア製品も提供する。

本開示のいくつかの実施例において、前記スキンケア製品の投与形態は、ペースト、クリーム、エッセンス、トナー、エマルジョン、または、スプレー、とすることができる。

本開示は、さらに、下記の原材料から形成される前記スキンケア製品を調製する方法も提供する。

前記調製方法は以下の工程を有する。
工程１：Ａ相を加熱、攪拌して第１生産物を得る。
工程２：Ｂ相を加熱、攪拌して第２生産物を得る。
工程３：前記第１生産物と前記第２生産物とを混合し、その混合物を乳化して第３生産物を得る。
工程４：Ｃ相と前記第３生産物とを混合して第４生産物を得る。
工程５：前記第４生産物を攪拌、冷却し、Ｄ相、Ｅ相、および、Ｆ相、を添加し、混合、冷却して製品を得る。

好ましくは、前記調製方法において、工程１の、加熱温度は８０℃〜８５℃であり、加熱速度は１℃／分〜２℃／分であり、加熱時間は３０分〜３５分であり、攪拌速度は２０ｒｐｍ〜６０ｒｐｍである。

好ましくは、前記調製方法において、工程２の、加熱温度は８０℃〜８５℃であり、加熱速度は１℃／分〜２℃／分であり、加熱時間は３０分〜３５分であり、攪拌速度は２０ｒｐｍ〜６０ｒｐｍである。

好ましくは、前記調製方法において、工程３の、混合の攪拌速度は３０ｒｐｍ〜５０ｒｐｍであり、前記乳化は２５００ｒｐｍ〜３５００ｒｐｍ、３分間〜５分間、の条件下で処理される均質乳化である。

好ましくは、前記調製方法において、工程４の、攪拌速度は３０ｒｐｍ〜５０ｒｐｍである。

好ましくは、前記調製方法において、工程５の、攪拌速度は３０ｒｐｍ〜５０ｒｐｍであり、冷却温度は４０℃〜５０℃であり、冷却速度は１℃／分〜２℃／分である。

好ましくは、前記調製方法において、工程５の冷却温度は３０℃〜４０℃である。

好ましくは、本開示によって提供される前記スキンケア製品は以下の方法によって調製される。

（１）Ａ相を油相ポットに入れ、攪拌しながら８０℃〜８５℃に加熱する。攪拌速度は２０ｒｐｍ〜６０ｒｐｍであり、加熱速度は１℃／分〜２℃／分である。Ａ相が完全に溶解するまで前記温度を３０分〜３５分にわたって一定に維持する。
（２）Ｂ相を水相ポットに入れ、攪拌しながら８０℃〜８５℃に加熱する（攪拌速度は２０ｒｐｍ〜６０ｒｐｍであり、加熱速度は１℃／分〜２℃／分である）。前記温度を３０分〜３５分にわたって一定に維持する。
（３）乳化：攪拌しながら（攪拌速度は３０ｒｐｍ〜５０ｒｐｍ）、まず前記油相ポットの前記Ａ相を乳化ポットに入れ、その後、前記Ｂ相を前記乳化ポットに加える。２５００ｒｐｍ〜３５００ｒｐｍ、３分間〜５分間、の条件下で均質乳化を行う。
（４）Ｃ相を攪拌しながら前記乳化ポットに加える、攪拌速度は３０ｒｐｍ〜５０ｒｐｍである。
（５）３０ｒｐｍ〜５０ｒｐｍの攪拌速度で攪拌しながら、冷却速度１℃／分〜２℃／分で、温度を４０℃〜５０℃へと冷却し、Ｄ相、Ｅ相、および、Ｆ相、を順次添加し、均一になるまで攪拌する。
（６）混合物を攪拌し４０℃以下まで冷却し、取出しによって製品を得る。

本開示は、さらに、前記調製方法によって調製されるスキンケア製品も提供する。

本開示のいくつかの実施例において、前記調製方法によって痩身クリームが調製される。本開示の前記組成物とスキンケア製品における通常の技術およびアジュバントととを使用して、エッセンス、トナー、エマルジョン、スプレー、などのその他の投与形態も調製することができる。

実験によって、前記組成物および／または本開示によって提供される前記調整方法によって調製された組成物は、脂肪細胞によるレプチンの分泌の改善、掻痒の治療、皮膚の修復、赤みと腫れの除去、抗疲労、血液循環の促進、および、コラーゲン合成の促進、の効果を有ることを示している。

結論として、前記組成物および／または本開示によって提供される組成物は、痩身およびスキンケアの作用を有する。

本発明によって提供される前記スキンケア製品を使用する推奨方法は、前記組成物と本発明の前記クリームとの両方を、人体（たとえば、すね、前腕、および、痩身を必要とするその他の部分）の皮膚表面に塗付し、それが吸収されるまでやさしくマッサージする方法である。

実験によって、前記組成物は安全で皮膚に対する刺激を起こさないことが示されている。前記スキンケア組成物および調製物は、レプチンの分泌レベルを増加させ、体脂肪の代謝を加速するのみならず、体内のコラーゲンの含有量を改善し、脂肪低減による皮膚の弛みと浮腫を改善し、これによって、健康と痩身との相乗効果を達成する。さらに、本開示には、皮膚修復の作用、血液循環の改善、および、抗疲労作用、を有することが実験によって示されている。

本開示の具体例、または、従来技術における技術的解決手段をより明確に記載するために、実施例または従来技術の説明に使用される添付の図面について以下簡単に説明する。

実施例１の組成物を投与されたすねの赤外線サーモグラフを示し、図１（Ａ）は使用前の画像を図示し、図１（Ｂ）は使用後の画像を図示している。 実施例１の組成物を投与された前腕の赤外線サーモグラフを示し、図２（Ａ）は使用前の画像を図示し、図２（Ｂ）は使用後の画像を図示している。 実施例４の組成物を投与されたすねの赤外線サーモグラフを示し、図３（Ａ）は使用前の画像を図示し、図３（Ｂ）は使用後の画像を図示している。 実施例４の組成物を投与された前腕の赤外線サーモグラフを示し、図４（Ａ）は使用前の画像を図示し、図４（Ｂ）は使用後の画像を図示している。

本開示は、組成物、その調製方法と利用法、前記組成物を含有するスキンケア製品、および、その調製方法、を開示する。当業者は、ここでの内容から学習して、処理パラメータを適当に改善することができる。特に、すべての類似の置換と改造とが当業者にとっては明らかであり、これは本発明の範囲内に含まれるものとみなされることが銘記される。当業者は、本発明の要旨、範囲から逸脱することなく、本発明の方法と用途とに対して改変を行ったり、或いは組み合わせを改変したりすることができ、したがって、本発明の技術を理解し適用することができることは当然である。

本開示によって提供される例中の原材料はすべて市販のものである。本開示に使用される原材料の供給元は表３に示されており、本開示に使用される装置の供給元および型番は表４に示されている。

原材料と供給元

装置と供給元

本開示を以下の実施例との組み合わせでさらに例示する。

〔実施例１：植物組成物の調製〕
（１）下記の原材料を粉砕し、次に比率に応じて計量し、その後、均一に混合した。
原材料：オーツ麦５０ｇ、ビターオレンジの花２０ｇ、蓮の葉２０ｇ、乾燥オレンジピール５０ｇ
（２）水を添加し、抽出を行った。水に対する前記原材料の質量比は１：２１であった。抽出は６１℃で３時間行われた。
（３）工程（２）で得られた抽出物溶液を２０℃まで冷却し、１００メッシュのふるいで濾過し、その後、残滓を分離除去した後、真空濾過にかけた。抽出溶液を収集して組成物を得た。

工程（３）の真空濾過において、０．３ｃｍ〜０．６ｃｍの珪藻土をその間に有する二層の濾紙をブフナー漏斗内に敷いた。

〔実施例２：植物組成物の調製〕
（１）下記の原材料を粉砕し、次に比率に応じて計量し、その後、均一に混合した。
原材料：オーツ麦６５ｇ、ビターオレンジの花３０ｇ、蓮の葉１０ｇ、乾燥オレンジピール３０ｇ
（２）水を添加し、抽出を行った。水に対する原材料の質量比は１：３０であった。抽出は１００℃で１時間行われた。
（３）工程（２）で得られた抽出物溶液を２５℃まで冷却し、２００メッシュのふるいで濾過し、その後、残滓を分離除去した後、真空濾過にかけた。抽出溶液を収集して組成物を得た。

工程（３）の真空濾過において、０．３ｃｍ〜０．６ｃｍの珪藻土をその間に有する二層の濾紙をブフナー漏斗内に敷いた。

〔実施例３：植物組成物の調製〕
（１）下記の原材料を粉砕し、次に比率に応じて計量し、その後、均一に混合した。
原材料：オーツ麦１００ｇ、ビターオレンジの花１０ｇ、蓮の葉３０ｇ、乾燥オレンジピール４０ｇ
（２）水を添加し、抽出を行った。水に対する原材料の質量比は、１：４０であった。抽出は８０℃で４時間行われた。
（３）工程（２）で得られた抽出物溶液を３０℃まで冷却し、１００メッシュのふるいで濾過し、その後、残滓を分離除去した後、真空濾過にかけた。抽出溶液を収集して組成物を得た。

工程（３）の真空濾過において、０．３ｃｍ〜０．６ｃｍの珪藻土をその間に有する二層の濾紙をブフナー漏斗内に敷いた。

〔実施例４：痩身クリームの調製〕
調整法と投与量

《前記クリームの調製方法》
（１）Ａ相を油相ポットに入れ、攪拌しながら８０℃に加熱した。攪拌速度は４０ｒｐｍであり、加熱速度は１℃／分であった。Ａ相が完全に溶解するまで前記温度を３０分にわたって一定に維持した。
（２）Ｂ相を水相ポットに入れ、攪拌しながら８０℃に加熱した（攪拌速度は４０ｒｐｍ、加熱速度は１℃／分であった）。前記温度を３０分間にわたって一定に維持した。
（３）乳化：攪拌しながら（攪拌速度は３０ｒｐｍ）、まず前記油相ポットの前記Ａ相を乳化ポットに移し、その後、前記Ｂ相を前記乳化ポットに移した。２５００ｒｐｍ、３分間、の条件下で均質乳化を行った。
（４）Ｃ相を攪拌しながら前記乳化ポットに加えた。攪拌速度は３０ｒｐｍであった。
（５）３０ｒｐｍの攪拌速度で攪拌しながら、冷却速度１℃／分で、温度４０℃まで冷却し、Ｄ相、Ｅ相、および、Ｆ相、を順次添加し、均一になるまで攪拌した。
（６）混合物を攪拌し４０℃まで冷却し、排出によって製品を得た。

〔実施例５：痩身クリームの調製〕
調製法および投与量

《前記クリームの調製方法》
（１）Ａ相を油相ポットに入れ、攪拌しながら８２℃に加熱した。攪拌速度は２０ｒｐｍであり、加熱速度は２℃／分であった。Ａ相が完全に溶解するまで前記温度を３５分間にわたって一定に維持した。
（２）Ｂ相を水相ポットに入れ、攪拌しながら８２℃に加熱した。（攪拌速度は２０ｒｐｍ、加熱速度は２℃／分であった）。前記温度を３５分間にわたって一定に維持した。
（３）乳化：攪拌しながら（攪拌速度は４０ｒｐｍ）、まず前記油相ポットの前記Ａ相を乳化ポットに移し、その後、前記Ｂ相を前記乳化ポットに移した。３０００ｒｐｍを４分間の条件下で均質乳化を行った。
（４）Ｃ相を攪拌しながら前記乳化ポットに加えた。攪拌速度は４０ｒｐｍであった。
（５）４０ｒｐｍの攪拌速度で攪拌しながら、冷却速度２℃／分で、温度４５℃へと冷却し、Ｄ相、Ｅ相、および、Ｆ相、を順次添加し、均一になるまで攪拌した。
（６）混合物を攪拌し３５℃まで冷却し、排出によって製品を得た。

〔実施例６：痩身クリームの調製〕
調製法および投与量

《前記クリームの調製方法》
（１）Ａ相を油相ポットに入れ、攪拌しながら８５℃に加熱した。攪拌速度は６０ｒｐｍであり、加熱速度は１℃／分であった。Ａ相が完全に溶解するまで前記温度を３２分一定に維持した。
（２）Ｂ相を水相ポットに入れ、攪拌しながら８５℃に加熱した（攪拌速度は６０ｒｐｍ、加熱速度は２℃／分であった）。前記温度を３２分間にわたって一定に維持した。
（３）乳化：攪拌しながら（攪拌速度は５０ｒｐｍ）、まず前記油相ポットの前記Ａ相を乳化ポットに移し、その後、前記Ｂ相を前記乳化ポットに移した。３５００ｒｐｍを５分間の条件下で均質乳化を行った。
（４）Ｃ相を攪拌しながら前記乳化ポットに加えた。攪拌速度は５０ｒｐｍであった。
（５）５０ｒｐｍの攪拌速度で攪拌しながら、冷却速度２℃／分で、温度５０℃へと冷却し、Ｄ相、Ｅ相、および、Ｆ相、を順次添加し、均一になるまで攪拌した。
（６）混合物を攪拌し３０℃まで冷却し、排出によって製品を得た。

〔実施例７：有効性実験〕
Ｉ．実施例１、実施例２、および、実施例３、で調製された痩身組成物のＣＣＤ−９６６ＳＫ細胞のコラーゲン合成に対する効果

《１．１ 実験材料》
ヒト皮膚繊維芽細胞ＣＣＤ−９６６ＳＫ（台湾食品工業研究所）；
ＭＥＭ細胞培養培地（最少必須培地、Ｅａｒｌｅ）、胎児ウシ血清、非必須アミノ酸、および、ピルビン酸ナトリウム（インビトロジェン社）；
ジメチルスルホキシド（シグマ社）；
ＷＳＴ−Ｉ（水溶性テトラゾール塩）（アブノバ社）；
Ｓｉｒｃｏｌコラーゲン測定キット（バイオカラー社）；および
実施例のサンプル。

《１．２ 器具》
ＢＰ３１００Ｓ 電子天秤（ザルトリウス社）；
ＳＺＣＬ インテリジェント温度制御加熱攪拌機（鞏義市予華儀器有限公司）；
ＳＨＢ−ＩＩＩ 水循環式真空ポンプ（鄭州長城科工貿有限公司）；
Ｍ−１８１５ ＴＣ ＣＯ_２インキュベータ（アメリカ）；
ＦＪ−２０１７ 液体シンチレーションカウンタ（国営二六二廠）；
Ｓｉｇｍａ ４Ｋ１５ プラットフォーム高速冷蔵遠心分離機（アメリカ シグマ社）；
ＡＤＶＡＮＴＡＧＥ 真空凍結乾燥装置（アメリカ Ｖｉｒｔｉｓ社）；および
Ｍｕｌｉｓｋａｎ ＧＯ 酵素リンク分析器（サーモ社）。

《１．３ 実験方法》
ヒト皮膚繊維芽細胞ＣＣＤ−９６６ＳＫを、３７℃で５％のＣＯ_２を含むインキュベータ内で、ＭＥＭ培養培地（１０％のＦＢＳ、１％のペニシリン−ストレプトマイシン、１％の非必須アミノ酸、および、１％のピルビン酸ナトリウム、を含有）で培養した。培地は２〜３日ごとに交換した。細胞増殖に対する効果：ＣＣＤ−９６６ＳＫ細胞を、１×１０^４細胞／ウェルの密度で９６ウェルプレートに播種した。１ウェル当たり１００μＬの総量にするために、前記サンプル（１０％胎児ウシ血清を含有する完全ＭＥＭ培地で作成）も添加した。コラーゲンの含有量をＣｏｌｌａｇｅｎ Ａｓｓａｙ Ｋｉｔ （Ｓｉｒｃｏｌ Ｃｏｌｌａｇｅｎ ａｓｓａｙ）によって測定した。

《１．４ 実験結果》
実施例１、実施例２、および、実施例３、で得られた痩身組成物の、ヒト皮膚繊維芽細胞ＣＣＤ−９６６ＳＫのコラーゲン合成に対する効果を評価した。対照グループには植物性抽出物は含まれなかった。実験結果を表８に示した。その結果は、実施例１、実施例２、および、実施例３、で得られた植物性抽出物は、ヒト皮膚繊維芽細胞ＣＣＤ−９６６ＳＫにおけるコラーゲンの合成を大幅に促進したことを示した（Ｐ＜０．０５）。

結果

ＩＩ．実施例１、実施例２、および、実施例３、において調製された痩身組成物の脂肪細胞からのレプチン分析に対する効果

《１．増殖培養培地（１０００ｍＬ）の作成》
８５０ｍＬの脱イオン水を乾燥Ｄ−ＭＥＭ／Ｆ−１２（１：１）粉に添加した。粉が完全に溶解した後、２．４４ｇのＮａＨＣＯ_３と３．１５ｇのＨＥＰＥＳとを添加した。水によって最終量を１０００ｍＬに調節し、０．１Ｎ ＨＣｌとＮａＯＨとによってｐＨを７．２に調節した。前記溶液を０．２２μｍの濾過膜を通すことによって殺菌し、アリコットに分け、使用のために４℃で保存した。増殖培養培地として使用される時に、１０％の非活性化ウシ血清を、殺菌条件下で添加し、それを基本培地として使用するときは、１０％の非活性化胎児ウシ血清を殺菌条件下で添加した。

《２．分化培養培地Ｉ（１００ｍＬ）の作成》
インスリン（１０μｇ／ｍＬ）、デキサメタゾン（１μＭ）、およびＩＢＭＸ（０．５ｍＭ）を前記基本培養培地に添加した。培地を、０．２２μｍの濾過膜を通すことによって殺菌し、アリコットに分け、使用に供するために４℃で保存した。１０％の非活性化胎児ウシ血清とペニシリンストリレプトマイシンとを殺菌条件下で添加することによって、分化培養培地Ｉを作成した。

《３．分化培養培地ＩＩ（１００ｍＬ）の調製》
前記基本培養培地に１ｍｇのインスリンを添加して、１０μｇ／ｍＬの最終インスリン濃度を有する１００ｍＬの分化培養培地を調製した。培地を、０．２２μｍの濾過膜を通すことによって殺菌し、アリコットに分け、使用に供するために４℃で保存した。１０％の非活性化胎児ウシ血清を殺菌条件下で添加することによって、分化培養培地ＩＩを作成した。

《４．細胞培養》
３Ｔ３−Ｌ１前駆脂肪細胞を、３７℃で５％のＣＯ_２を含むインキュベータ内で、１０％のウシ血清を含む前記増殖培地で培養した。培地は２〜３日ごとに交換し、前記細胞が５０％〜６０％の集合（ｃｏｎｆｌｕｅｎｃｅ）に達した時に二次培養を行った。分化の誘導を、典型的なカクテル法によって行った。細胞密度を２×１０^５細胞／ｍＬに調節し、二次培養のために６ウェルプレートまたは２４ウェルプレートに播種した。単層細胞の集合まで、培養培地を２〜３日ごとに交換した。前記増殖培地を、２日間、１０％の胎児ウシ血清を含有する前記基本培養培地に変えた。前記基本培養培地を、２日間で、前記分化培養培地によって置き換え、その後、分化培養培地ＩＩでの誘導を行った。４８時間後、１０％の胎児ウシ血清を含有する基本培養培地を使用し、４８時間ごとに交換した。７日後、細胞の９０％が丸い形状を有し、脂肪小滴（すなわち、分化後の成熟した脂肪細胞）によって満たされた。

《５．アディポカインに対する異なる濃度のＡｃｔの効果のＥＬＩＳＡによる検出》
各グループにおいて三つの平行のウェルが設けられた。細胞培養ウェル中の上清を１０日目に収集し、レプチン含有量を、前記キットの指示に従って検出した。対照グループをセットした。サンプルは分化の８日目に使用された。

実施例１〜３において調製された製品の、成熟脂肪細胞からのレプチン分泌に対する効果の結果を表９に示した。表９に示されているように、実施例１〜３の製品は、成熟脂肪細胞からのレプチン分泌を促進し、レプチン分泌の増加をもたらした。

結果

ＩＩＩ．実施例１で調製された痩身抽出物、および、実施例４で調製された痩身クリームの、モルモット掻痒症モデルに対する抗炎症効果の実験

《１．実験材料》
（１．１ 実験サンプル）
実施例１で調製された痩身抽出物、実施例４で調製された痩身クリーム

（１．２ 実験動物）
健康なモルモット、ＳＰＦ／ＶＡＦグレード、半分がオスで半分はメス。体重２５０±１０ｇ（北京金牧陽実験動物養殖有限責任公司、動物合格証番号 ＳＣＸＫ（京）２０１０−０００１）。飼育条件：北京金牧陽実験動物養殖有限責任公司の農場。

（１．３ 試薬）
リン酸ヒスタミン（シグマ社製品）

《２．実験方法》
（２．１ 実験投与量）
テストサンプルを、高投与量グループ、中投与量グループ、および、低投与量グループ、に対し、それぞれ、０．１５ｍＬ／ｃｍ^２、０．１ ｍＬ／ｃｍ^２、および、０．０５ｍＬ／ｃｍ^２、の量、塗付した。モデル対照グループには、０．１ｍＬ／ｃｍ^２の量の蒸留水を局所塗付した。

（２．２ リン酸ヒスタミン痒み試験）
３６匹のモルモットをランダムに複数グループ、すなわち、モデル対照グループ、高投与量グループ、中投与量グループ、低投与量グループ、に分けた。実験前日に、右後脚の裏側の毛を剃った。剃毛された皮膚に、３日間連続で、サンプルが均一にそれぞれ塗付されたのに対して、モデル対照グループには蒸留水が塗付された。実験の三日目に、適量のリン酸ヒスタミンを正確に計量し、使用前に、蒸留水中で、０．０１％、０．０２％、０．０３％、０．０４％、０．０５％、０．０６％、０．０７％、０．０８％、０．０９％、および、０．１０％、の濃度に段階的に希釈した。前記モルモットの右後脚の裏側の前記剃毛領域を約１ｃｍ^２の面積の領域にわたって、粗いサンドペーパによってこすった。サンプルは１回以上塗付された。１０分後、前記擦り剥き領域に０．０５ｍＬの０．０１％リン酸ヒスタミンを滴下した。その後、０．０５ｍＬの、０．０１％、０．０２％、０．０３％、０．０４％、…、の段階的な濃度のリン酸ヒスタミンを、モルモットが右後ろ脚を舐め始めるまで、３分間ごとに滴下した。モルモットがその右後脚を舐め始めるに至ったリン酸ヒスタミンの総量を痒み閾値とした。各グループの痒み閾値を計算し、グループ間の差を測定した。

《３．結果》
その結果、痒みを引き起こすためのリン酸ヒスタミンの塗付後、モルモットはそれらの右後脚を舐めるという行動を示した。サンプルを痒み領域に塗付した後、高投与量グループのリン酸ヒスタミン痒み閾値は徐々に増加し、モデル対照グループとの比較で大きな差を示した（Ｐ＜０．０５）。結果を表１０に示した。

モルモットのリン酸ヒスタミン痒み反応に対するサンプルの効果（ｘ±ｓ、ｎ＝６）

注：モデル対照グループとの比較、＊Ｐ＜０．０５。

《４．結論》
実施例１で調製された痩身抽出物および実施例４で調製された痩身クリームは、リン酸ヒスタミンによって引き起こされた痒みの痒み閾値を効果的に増大させることができ、皮膚炎を軽減し、疥癬を防止する効果を提供した。

実施例２および実施例３で調製された痩身組成物と、実施例５および実施例６で精製された痩身クリームと、を使用して実験を繰り返した。類似の結果が得られ、実施例１の痩身抽出物および実施例４の痩身クリームのそれと有意の差はなかった（Ｐ＞０．０５）。

ＩＶ．実施例１および実施例４で調製された調製物の皮膚修復機能評価

《１．実験材料》
（１．１ 実験サンプル）
実施例１で調製された痩身抽出物、実施例４で調製された痩身クリーム。

（１．２ 実験動物）
３６匹の健康なモルモット、ＳＰＦ／ＶＡＦグレード、半分がオスで半分はメス。体重２５０±１０ｇ（北京金牧陽実験動物養殖有限責任公司、動物合格証番号 ＳＣＸＫ（京）２０１０−０００１）。飼育条件：北京金牧陽実験動物養殖有限責任公司の農場。

（１．３ 試薬と装置）
アセトンおよびエーテル（いずれも北京化工廠製）
皮膚水分分析器

《２．実験方法》
（２．１． 実験投与量）
テストサンプルを、高投与量グループ、中投与量グループ、および、低投与量グループ、に対して、それぞれ、０．１５ｍＬ／ｃｍ^２、０．１ｍＬ／ｃｍ^２、および、０．０５ｍＬ／ｃｍ^２、の量、塗付した。モデル対照グループには、０．１ｍＬ／ｃｍ^２の量の蒸留水を局所塗付した。

（２．２）
３６匹のモルモットをランダムに複数グループ、すなわち、モデル対照グループ、高投与量グループ、中投与量グループ、低投与量グループ、に分けた。実験前日に、右後脚の裏側の毛を約２×２ｃｍ^２の面積にわたって剃った。ブランク対照グループを除くその他すべてのグループの剃毛皮膚上に、１５０μＬの混合物（アセトン：エーテル＝１：１）を滴下した。１０分後、対応するサンプルを、それぞれ、前記剃毛領域に、一日に二回、５日間、塗付した。前記ブランク対照グループおよびモデル対照グループには、前記剃毛領域に蒸留水を塗付した。５日目に、剃毛皮膚の水分含有量を、サンプルの塗付の２０分後にテストした。グループ間の差を測定し、水分損失率を計算した。

皮膚脱水モデルにおける皮膚水分含有量に対するサンプルの効果は、アレルギー性皮膚に対する前記サンプルの修復作用の評価のための実験ベースを提供した。

水分損失保護率（％）＝（サンプルグループの皮膚水分含有量−モデルグループの皮膚水分含有量）／ブランク対照グループの皮膚水分含有量×１００

《３．結果》
その結果、モルモット皮膚の脱水後、モデルグループの皮膚脱水率は５０．７５％であることが示された。前記サンプルの塗付後、実施例１において調製された痩身組成物、および、実施例４において調製された痩身クリームは、モルモット皮膚の水分含有率を大幅に増大し、モデル対照グループとの比較で大きな差を示した（Ｐ＜０．０５）。結果を表１１に示した。

アレルギー性皮膚に対する修復作用（ｘ±ｓ、ｎ＝６）

《４．結論》
実施例１において調製された痩身組成物、および、実施例４において調製された痩身クリームは、明白な皮膚修復作用を有した。

実施例２および実施例３において調製された痩身組成物と、実施例５および実施例６において調製された痩身クリームと、を使用して実験を繰り返した。類似の結果が得られ、実施例１の痩身抽出物および実施例４の痩身クリームのそれと有意の差はなく（Ｐ＞０．０５）、本開示において調製された調製物が良好な修復作用を有することを示した。

Ｖ．実施例１および実施例４で調製された調製物の赤みと腫れの除去に対する効果の評価

《１．実験材料》
（１．１ 実験サンプル）
実施例１で調製された痩身抽出物、および、実施例４で調製された痩身クリーム。

（１．２ 実験動物）
３６匹のＳＤラット、ＳＰＦ／ＶＡＦグレード、半分がオスで半分はメス。体重１８０±１０ｇ。（北京金牧陽実験動物養殖有限責任公司、動物合格証番号 ＳＣＸＫ（京）２０１０−０００１）。飼育条件：北京金牧陽実験動物養殖有限責任公司の農場。

（１．３ 試薬と装置）
抗−ＤＮＰ ＩｇＥ、ＤＮＰ−ＨＡＳ、および、Ｅｖａｎｓ Ｂｌｕｅ（Ｓｉｇｍａ社製）；
アセトン（北京化工廠製）；
ＲＴ−６０００ マイクロプレートリーダ（雷杜社製）

《２．実験方法》
（２．１ 実験投与量）
テストサンプルを、高投与量グループ、中投与量グループ、および、低投与量グループ、に対し、それぞれ、０．１５ｍＬ／ｃｍ^２、０．１ｍＬ／ｃｍ^２、および、０．０５ｍＬ／ｃｍ^２、の量、塗付した。ブランク対照グループおよびモデル対照グループには、０．１ｍＬ／ｃｍ^２の量の蒸留水を局所塗付した。

（２．２ 皮膚アレルギーテスト）
３６匹のラットを、５日間の適合給餌のために食物および水を自由に摂取できる状態で、室温で籠の中に収納した。これらのラットを体重に基づいてランダムに複数のグループ、すなわち、ブランク対照グループ、モデル対照グループ、高投与量グループ、中投与量グループ、低投与量グループ、に、各グループ６匹のラットに分けた。背中の毛を剃った。ブランク対照グループを除いて、０．０５μｇ（０．５μＬ）の抗−ＤＮＰ ＩｇＥをラットの背中の３点に皮下注射した。４８時間後、４％のＥｖａｎｓ Ｂｌｕｅを含有するＤＮＰ−ＨＡＳ １００μｇ（１００μＬ）を、ラットの尾静脈を介して注射した。ＤＮＰ−ＨＡＳの前記尾静脈注射の１時間前、サンプルをラットの背中の抗−ＤＮＰ ＩｇＥの注射スポットの周囲の２ｃｍ^２の領域にわたって塗付した。ＤＮＰ−ＨＡＳの静脈注射の３０分後にラットを屠殺した。青色染色された皮膚を切除し、２４時間、アセトン−生理食塩水混合溶液（１：１）中に出現させた。前記溶液を、遠心分離器にかけて上清を分離し、光学密度を６２０ｎｍの分光計で検出した。Ｅｖａｎｓ Ｂｌｕｅ溶液を使用して標準曲線を確立した。前記ラットの背中皮膚の色素含有率と、ＰＣＡ反応の抑制率を計算した。抑制率は以下の式によって計算する。
抑制率（％）＝（モデル対照グループの色素含有率−処理グループの色素含有率）／（モデル対照グループの色素含有率）×１００

《３．結果》
結果に示されているように、青色染色皮膚が感作後にラットの局所皮膚上に現れた。サンプルの塗付後、青色染色ラット皮膚の色素含有率は劇的に低減し、モデル対照グループとの比較で極めて大きな差、または、大きな差を示した（Ｐ＜０．０１，Ｐ＜０．０５）。結果を表１２に示した。

ラットのＰＣＡ反応に対するサンプルの効果

《４．結論》
実施例１において調製された痩身組成物、および、実施例４において調製された痩身クリームは、感作後にラット青色染色皮膚の色素含有率を大きく低減させ、本開示の調製物が外因性刺激によって引き起こされる赤みと腫れを除去する潜在的機能を有することを示した。

実施例２、実施例３、実施例５、および、実施例６、において調製された調製物を使用して実験を繰り返した。類似の結果が得られ、実施例１の痩身抽出物および実施例４の痩身クリームのそれと有意の差はなかった（Ｐ＞０．０５）。

ＶＩ．実施例１で調製された組成物、および、実施例４で調製されたクリーム、の抗疲労効果の評価
近年、極度に精神的な仕事によって引き起こされる慢性疲労がオフィスワーカーの共通の問題となっている。主要な症状は、肩と首の痛みと不快感であり、これは人々の労働効率と生活の質とに重大な影響を与える。本例において調製されたサンプルの抗疲労効果を下記の方法によって評価した。

サンプル：実施例１で調製された植物性組成物、および、実施例４で調製されたクリーム。

被験者：首の痛みの症状を有する３０名のオフィスワーカーを各グループ１５名の二つのグループにランダムに分けた。実施例１で調製された植物性組成物、および、実施例４で調製されたクリーム、を試験的に使用した。

塗付方法：朝と夜とにそれぞれ、一日２回、４週間にわたって、首などの痛み領域に前記サンプルを塗り付けマッサージする。

《評価基準》
「顕著な効果」：痛みが無くなった；
「症状の緩解」；痛みが軽減された；
「効果無し」：前後に有意な差が無かった；
「有効」：「顕著な効果」および「症状の軽減」

３０名の被験者からの結果の統計を表１３に示した。

サンプルの抗疲労効果の評価

前記評価の結果は、本開示において調製された前記組成物およびクリームが、痛みの軽減および抗疲労の効果を有することを示した。実施例２、実施例３、実施例５、および、実施例６、において調製されたサンプルを使用して上記実験を反復した。類似の結果が得られ、実施例１で調製された痩身抽出物、および、実施例４で調製された痩身クリームのそれと大きな差が無かった（Ｐ＞０．０５）。

ＶＩＩ．実施例１および実施例４で調製された調製物の血液循環促進効果の評価

サンプル：実施例１で得られた植物性抽出物、および、実施例４で得られたクリーム。

塗付方法：朝と夜とにそれぞれ、一日２回、４週間にわたって、すねと前腕部とに前記サンプルを塗り付けマッサージする。

評価方法：前記スキンケア製品の血液循環促進効果は赤外線サーモグラフィによって推定することができる。スキンケア製品の赤外線サーモグラフィは、血液流速とテスト領域の温度とを検出することができ、これが血液循環の状態を示す。速い血流と高い温度は、良好な状態を意味する。血液循環促進効果は、サンプルの使用の前後の赤外線サーモグラフィを比較することによって評価される。図１および図２は、実施例１の組成物を塗付したすねと前腕との赤外線サーモグラフィを示し、図３および図４は、実施例４の組成物を塗付したすねと前腕との赤外線サーモグラフィを示している。赤外線サーモグラフィに示されているように、被験者の血液の流速はサンプルの使用後に増加した（図１（Ｂ）、図２（Ｂ）、図３（Ｂ）、および、図４（Ｂ）、を参照）。これらの図において、薄い色のテスト領域は血流が速い領域を示している。

赤外線サーモグラフィは、実施例１および実施例４で得られたサンプルが血液循環の促進に良好な効果を有していることを示している。実施例２、実施例３、実施例５、および、実施例６で得られたサンプルを使用して前記実験を繰り返した。上述の類似の結果が得られ、実施例１の痩身抽出物および実施例４の痩身クリームのそれと有意の差はなかった（Ｐ＞０．０５）。

組成物とその調製方法ならびに利用法、および、前記組成物を含むスキンケア製品とその調製方法を、以上、詳細に記載した。具体例は、本開示の原理と実施態様を例示するために使用されたものであって、これらは、単に本開示の方法と中心概念の理解を助けるために使用されたものにすぎない。当業者は、本発明の原理から逸脱することなく、本発明に対して様々な改良および改変を行うことができ、そのような改良および改変は本発明の請求項の保護範囲に属するものである。

Claims (9)

1. 下記の原材料を下記の重量部含む組成物。
   オーツ麦 ５〜１０部
   ビターオレンジの花 １〜３部
   蓮の葉 １〜３部
   乾燥オレンジ皮 ３〜５部
2. 所望量の処方による前記原材料を粉砕する工程と、水によって抽出する工程と、を有し、
   前記水による抽出の温度は６１℃〜１００℃であり、
   前記水による抽出の時間は１時間〜４時間であり、
   前記原材料の水に対する質量比は１：２１〜１：４０である請求項１に記載の組成物の調製方法。
3. 痩身とスキンケアのための、薬剤、食品、ヘルスケア製品、および／または、スキンケア製品、の製造における、請求項１に記載の組成物、または、請求項２に記載の調製方法よって調製された組成物、の利用。
4. 脂肪細胞からのレプチンの分泌レベルの増大、掻痒の治療、皮膚の修復、赤みと腫れの除去、抗疲労、血液循環の改善、および、コラーゲン合成の促進、の作用を有する、薬剤、食品、ヘルスケア製品、および／または、スキンケア製品、の製造における、請求項１に記載の組成物、または、請求項２に記載の調製方法よって調製された組成物、の利用。
5. 請求項１に記載の組成物、または、請求項２に記載の調製方法よって調製された組成物、と、スキンケア製品において許容可能なアジュバントと、を有するスキンケア製品。
6. 前記スキンケア製品の投与形態は、ペースト、クリーム、エッセンス、トナー、エマルジョン、または、スプレー、である請求項５に記載のスキンケア製品。
7. 請求項５または６に記載のスキンケア製品を調製する調製方法であって、前記スキンケア製品は、表１に記載された質量比の原材料から作られ、以下の工程を有する調製方法。
   工程１：Ａ相を加熱、攪拌して第１生産物を得る。
   工程２：Ｂ相を加熱、攪拌して第２生産物を得る。
   工程３：前記第１生産物と前記第２生産物とを混合し、当該混合物を乳化して第３生産物を得る。
   工程４：Ｃ相と前記第３生産物とを混合して第４生産物を得る。
   工程５：前記第４生産物を攪拌、冷却し、Ｄ相、Ｅ相、および、Ｆ相、を順次添加し、混合、冷却して製品を得る。
   

   
8. 前記工程１の、加熱温度は８０℃〜８５℃であり、加熱速度は１℃／分〜２℃／分であり、加熱時間は３０分〜３５分であり、攪拌速度は２０ｒｐｍ〜６０ｒｐｍであり、
   前記工程２の、加熱温度は８０℃〜８５℃であり、加熱速度は１℃／分〜２℃／分であり、加熱時間は３０分〜３５分であり、攪拌速度は２０ｒｐｍ〜６０ｒｐｍであり、
   前記工程３の、混合の攪拌速度は３０ｒｐｍ〜５０ｒｐｍであり、前記乳化は２５００ｒｐｍ〜３５００ｒｐｍ、３分間〜５分間、の条件下で処理される均質乳化であり、
   前記工程４の、攪拌速度は３０ｒｐｍ〜５０ｒｐｍであり、
   前記工程５の、攪拌速度は３０ｒｐｍ〜５０ｒｐｍであり、冷却温度は４０℃〜５０℃であり、冷却速度は１℃／分〜２℃／分であり、
   前記工程５の、冷却温度は３０℃〜４０℃である請求項７に記載の調製方法。
9. 請求項７または８に記載の方法によって調製されるスキンケア製品。

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