JP2018521308A5 - - Google Patents
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Claims (18)
- ２以上のタイプの標識分子を含む試料中の単一分子を識別する方法であって、
前記試料中の前記単一分子の発光寿命および発光強度を決定する工程と、
前記単一分子の発光寿命および発光強度の両方の組合せに基づいて、前記単一分子を、前記２以上のタイプの標識分子のうちの１つであると識別する工程と、
を備える方法。 - １つまたは複数の励起エネルギーの一連のパルスを前記試料に対して加える工程を更に備える、請求項１に記載の方法。
- 前記試料からの複数の放射光子を検出する工程を更に備える、請求項１に記載の方法。
- 前記試料からの複数の放射光子の各々について、前記放射光子の検出と事前に加えられた励起エネルギーとの間の経過時間を記録する工程を更に備える、請求項１に記載の方法。
- 前記２以上のタイプの標識分子が、４つのタイプの分子を含む、請求項１に記載の方法。
- 前記４つのタイプの分子が、４つのタイプの発光標識ヌクレオチドを含む、請求項５に記載の方法。
- 前記４つのタイプの発光標識ヌクレオチドが、アデニンを含む第１のヌクレオチド、グアニンを含む第２のヌクレオチド、シトシンを含む第３のヌクレオチド、およびチミンまたはウラシルを含む第４のヌクレオチドを含む、請求項６に記載の方法。
- 前記単一分子が、核酸に組み込まれた発光標識ヌクレオチドである、請求項１に記載の方法。
- 前記方法が、一連の単一分子を識別するために繰り返される、請求項１に記載の方法。
- 前記一連の単一分子が、プライマーを含む核酸に順次組み込まれた一連の発光標識ヌクレオチドである、請求項９に記載の方法。
- 前記プライマーを含む前記核酸に順次組み込まれた発光標識ヌクレオチドの配列を分析することにより、鋳型核酸の配列を決定する工程を更に備える、請求項１０に記載の方法。
- 前記一連のパルスの各々が、単一の励起エネルギーを含む、請求項２に記載の方法。
- 前記一連のパルスの第１の部分が、第１の励起エネルギーを含み、複数のパルスの第２の部分が、第２の励起エネルギーを含む、請求項２に記載の方法。
- 前記一連のパルスが、約１０ＭＨｚ〜約１００ＭＨｚまたは約１００ＭＨｚ〜約１ＧＨｚの平均周波数で加えられる、請求項２に記載の方法。
- 前記一連のパルスが、約５０ＭＨｚ〜約２００ＭＨｚの平均周波数で加えられる、請求項２に記載の方法。
- 識別された各単一分子について、検出された放射光子の数が、約１０個〜約１００個または約１００個〜約１，０００個である、請求項３に記載の方法。
- 識別された各単一分子が、固体支持体に固定されている、請求項１に記載の方法。
- 前記固体支持体が、試料ウェルの底面を含む、請求項１７に記載の方法。
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