JP2018515141A - 新規のバキュロウイルスベクター及び使用の方法 - Google Patents
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Abstract
Description
本発明は一般に、組換えバキュロウイルスに関する。
バキュロウイルスは昆虫に感染し、ヒトには非病原性である。しかし、幅広い範囲のほ乳類及び鳥類細胞に形質導入することができる。バイオセーフティ、大きいクローニング能力、形質導入された細胞における低い細胞毒性及び非複製性、並びに操作及び生産の容易さのおかげで、バキュロウイルスは、抗ウイルス治療、がん治療、再生医療及びワクチンなどの、幅広い用途のための遺伝子送達ベクターとして、爆発的な人気を得ている。
一つの態様において、本発明は、融合タンパク質をコードする導入遺伝子を含むベクターに関するものであり、融合タンパク質が、(a)融合タンパク質のN末端に位置するシグナルペプチド;(b)異種抗原;及び(c)バキュロウイルスエンベロープGP64タンパク質のC末端領域であって、少なくとも100のアミノ酸残基長を有し、且つGP64タンパク質の中央塩基性領域内に位置するB12D5結合エピトープを欠く、バキュロウイルスエンベロープGP64タンパク質のC末端領域を含み、異種抗原が、シグナルペプチドとGP64タンパク質のC末端領域との間に位置する。
本発明は、以下の実施例においてより具体的に説明されている。これらの実施例は、単なる例示であることが意図される。なぜなら、実施例における多数の改変及び変更が当業者には明らかであるためである。本発明の様々な実施形態をここで詳細に説明する。図面を参照すると、図面全体において、類似の番号は、類似の構成要素を示す。この詳細な説明において、及び以下に続く特許請求の範囲全体において使用されるように、「a」、「an」、及び「the」の意味は、文脈上他に明確に指示されない限り、複数形の参照を含む。また、この詳細な説明において、及び以下に続く特許請求の範囲全体において使用されるように、「in」の意味は、文脈上他に明確に指示されない限り、「in」及び「on」を含む。さらに、読者の便宜のために、タイトル又はサブタイトルが明細書中で使用され得る。このことは、本発明の範囲に影響を与えるものではない。加えて、この明細書において使用されるいくつかの用語が、以下により具体的に定義される。
ベクターの構築及び組換えバキュロウイルス、ウイルス様粒子、及びタンパク質の生成
タンパク質発現及び抗原の精製
組換えウイルスによる抗原の発現
ワクチン調製及び免疫化
組換えウイルスによって産生された抗原の免疫原性
Claims (15)
- エンベロープ上に融合タンパク質を提示する、組換えバキュロウイルスであって、前記融合タンパク質が、
(i)異種抗原;及び
(ii)バキュロウイルスエンベロープGP64タンパク質のC末端領域であって、少なくとも100のアミノ酸残基長を有し、且つ前記GP64タンパク質の中央塩基性領域内に位置するB12D5結合エピトープを欠く、バキュロウイルスエンベロープGP64タンパク質のC末端領域
を含む、
組換えバキュロウイルス。 - 請求項1に記載の組換えバキュロウイルスであって、そのゲノムが、融合タンパク質をコードする導入遺伝子を含み、前記融合タンパク質が、
(a)シグナルペプチド;
(b)前記異種抗原;及び
(c)前記バキュロウイルスエンベロープGP64タンパク質の前記C末端領域
を含み、
前記抗原が、前記シグナルペプチドと前記GP64タンパク質の前記C末端領域との間に位置する、
組換えバキュロウイルス。 - 融合タンパク質をコードする導入遺伝子を含むベクターであって、前記融合タンパク質が、
(a)前記融合タンパク質のN末端に位置するシグナルペプチド;
(b)異種抗原;及び
(c)バキュロウイルスエンベロープGP64タンパク質のC末端領域であって、少なくとも100のアミノ酸残基長を有し、且つ前記GP64タンパク質の中央塩基性領域内に位置するB12D5結合エピトープを欠く、バキュロウイルスエンベロープGP64タンパク質のC末端領域
を含み、
前記異種抗原が、前記シグナルペプチドと前記GP64タンパク質の前記C末端領域との間に位置する、
ベクター。 - 組換えバキュロウイルスである、請求項3に記載のベクター。
- 前記導入遺伝子が、プロモーターに作動可能に連結される、請求項3に記載のベクター又は請求項2に記載の組換えバキュロウイルス。
- 前記GP64タンパク質の前記C末端領域が、配列番号:2、3、又は4のアミノ酸配列を欠く、請求項1に記載の組換えバキュロウイルス。
- 前記GP64タンパク質の前記C末端領域が、配列番号:1の327〜512のアミノ酸を含む、請求項1に記載の組換えバキュロウイルス。
- 前記GP64タンパク質の前記C末端領域が、配列番号:1の292〜328のアミノ酸残基のN末端を有する、請求項1に記載の組換えバキュロウイルス。
- 前記シグナルペプチドが、配列番号:5、6、7、8、9、10、11、及び12からなる群より選択されるアミノ酸配列を含む、請求項1に記載の組換えバキュロウイルス。
- 請求項1に記載の組換えバキュロウイルスで形質導入された昆虫細胞。
- 前記抗原が、病原体タンパク質、がん細胞タンパク質、及び免疫チェックポイントタンパク質からなる群より選択される少なくとも1つである、請求項1に記載の組換えバキュロウイルス。
- 請求項11に記載の組換えバキュロウイルスであって、
(i)前記病原体が、ヒトパピローマウイルス、ブタ生殖器呼吸器症候群ウイルス、ヒト免疫不全ウイルス−1、デングウイルス、C型肝炎ウイルス、B型肝炎ウイルス、ブタサーコウイルス2、ブタコレラウイルス、口蹄疫ウイルス、ニューカッスル病ウイルス、伝染性胃腸炎ウイルス、ブタ流行性下痢ウイルス、インフルエンザウイルス、仮性狂犬病ウイルス、パルボウイルス、ブタ水疱病ウイルス、ポックスウイルス、ロタウイルス、マイコプラズマ肺炎、ヘルペスウイルス、感染性気管支炎、感染性嚢胞疾患ウイルスからなる群より選択される少なくとも1つであり;
(ii)前記がんが、非小細胞肺がん、乳がん、メラノーマ、リンパ腫、結腸がん、肝細胞がん、及びそれらの任意の組み合わせからなる群より選択される少なくとも1つであり;
(iii)前記免疫チェックポイントが、PD−1、PD−L1、PD−L2、及びCTLA−4からなる群より選択される少なくとも1つである、
組換えバキュロウイルス。 - 前記抗原が、ブタコレラウイルスエンベロープ糖タンパク質E2、ブタ流行性下痢ウイルスS1タンパク質、プログラム細胞死タンパク質1、及び腫瘍関連抗原からなる群より選択される少なくとも1つである、請求項1に記載の組換えバキュロウイルス。
- 前記抗原が、病原体タンパク質、がん細胞タンパク質、及び免疫チェックポイントタンパク質からなる群より選択される少なくとも1つである、請求項3に記載のベクター。
- 抗原特異的免疫原性応答を、それを必要とする被験体において誘発するための、医薬品の製造における、請求項3に記載のベクター又は請求項1に記載の組換えバキュロウイルスの使用。
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