JP2018510867A5 - - Google Patents

Claims (16)

1. 対象のタンパク質および一以上の混入物を含む混合物から対象のタンパク質を精製する方法であって、対象のタンパク質が抗体であり、混合物が、哺乳類培養細胞であり、以下を含む方法：
   ａ）混合物を第１のクロマトグラフィーマトリックスにさらす、ここで対象のタンパク質は第１のクロマトグラフィーマトリックスに結合し、第１のクロマトグラフィーがアフィニティークロマトグラフィーである；
   ｂ）第１のクロマトグラフィーマトリックスを第１の洗浄溶液と接触させる、ここで第１の洗浄溶液はｐＨが少なくとも９．０であり、アルギニンまたはアルギニン誘導体を含まない；および
   ｃ）第１のクロマトグラフィーマトリックスから溶出溶液中に対象のタンパク質を溶出する。
2. アフィニティークロマトグラフィーがプロテインＡアフィニティークロマトグラフィーである、請求項１記載の方法。
3. 抗体がモノクローナル抗体である、請求項１または２記載の方法。
4. モノクローナル抗体がヒト抗体、ヒト化抗体およびキメラ抗体からなる群から選択される、請求項３記載の方法。
5. 第１の洗浄溶液のｐＨが約９から約１１の間である、請求項１から４のいずれかに記載の方法。
6. 第１の洗浄溶液のｐＨが約９．５から約１０．５の間である、請求項５記載の方法。
7. 第１の洗浄溶液のｐＨが約９．６である、請求項５記載の方法。
8. 第１の洗浄溶液のｐＨが約１０．４である、請求項５記載の方法。
9. 第１の洗浄溶液の後に、第１のクロマトグラフィーマトリックスを第２の洗浄溶液と接触させることをさらに含む、請求項１から８のいずれかに記載の方法、ここで第２の洗浄溶液はｐＨが少なくとも９．０であり、アルギニンまたはアルギニン誘導体を含まない。
10. 第２の洗浄溶液の後に、第１のクロマトグラフィーマトリックスを第３の洗浄溶液と接触させることをさらに含む、請求項９記載の方法、ここで第３の洗浄溶液はｐＨが約６と約７の間であり、アルギニンまたはアルギニン誘導体を含まない。
11. 第１の洗浄溶液が約０．０１〜１．０Ｍの範囲の濃度の炭酸ナトリウムおよび約０．５〜２Ｍの範囲の濃度の塩化ナトリウムを含む、請求項１から１０のいずれかに記載の方法。
12. 第２の洗浄溶液が約０．０１〜１．０Ｍの範囲の濃度の炭酸ナトリウムを含む、請求項９から１１のいずれかに記載の方法。
13. 混合物を一以上のさらなるクロマトグラフィーマトリックスにさらす、請求項１から１２のいずれかに記載の方法。
14. 一以上のさらなるクロマトグラフィーマトリックスが、イオン交換クロマトグラフィー（例えば、陰イオン交換クロマトグラフィーまたは陽イオン交換クロマトグラフィー）、疎水性相互作用クロマトグラフィー、およびミックスモードクロマトグラフィーから選択される、請求項１３記載の方法。
15. 混合物が、回収された培養細胞液、培養細胞上清、および条件培養細胞の上清、細胞溶解物、および清澄化したバルクから選択される、請求項１から１４のいずれかに記載の方法。
16. 哺乳類培養細胞がチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）培養細胞である、請求項１から１５のいずれかに記載の方法。