JP2018508462A - 疾患の処置における使用のためのcd3イプシロンおよびbcmaに対する二特異性抗体 - Google Patents
疾患の処置における使用のためのcd3イプシロンおよびbcmaに対する二特異性抗体 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2018508462A JP2018508462A JP2017529627A JP2017529627A JP2018508462A JP 2018508462 A JP2018508462 A JP 2018508462A JP 2017529627 A JP2017529627 A JP 2017529627A JP 2017529627 A JP2017529627 A JP 2017529627A JP 2018508462 A JP2018508462 A JP 2018508462A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- bcma
- cells
- antibody
- patient
- bispecific antibody
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 102000006942 B-Cell Maturation Antigen Human genes 0.000 title claims abstract description 484
- 108010008014 B-Cell Maturation Antigen Proteins 0.000 title claims abstract description 484
- BGFTWECWAICPDG-UHFFFAOYSA-N 2-[bis(4-chlorophenyl)methyl]-4-n-[3-[bis(4-chlorophenyl)methyl]-4-(dimethylamino)phenyl]-1-n,1-n-dimethylbenzene-1,4-diamine Chemical compound C1=C(C(C=2C=CC(Cl)=CC=2)C=2C=CC(Cl)=CC=2)C(N(C)C)=CC=C1NC(C=1)=CC=C(N(C)C)C=1C(C=1C=CC(Cl)=CC=1)C1=CC=C(Cl)C=C1 BGFTWECWAICPDG-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 475
- 238000011282 treatment Methods 0.000 title claims abstract description 241
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 title claims abstract description 162
- 201000010099 disease Diseases 0.000 title claims abstract description 28
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims abstract description 457
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 claims abstract description 220
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 161
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 claims abstract description 120
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 claims abstract description 118
- 102100031585 ADP-ribosyl cyclase/cyclic ADP-ribose hydrolase 1 Human genes 0.000 claims abstract description 98
- 101000777636 Homo sapiens ADP-ribosyl cyclase/cyclic ADP-ribose hydrolase 1 Proteins 0.000 claims abstract description 98
- 102100035721 Syndecan-1 Human genes 0.000 claims abstract description 98
- 101000946860 Homo sapiens T-cell surface glycoprotein CD3 epsilon chain Proteins 0.000 claims abstract description 91
- 102100035794 T-cell surface glycoprotein CD3 epsilon chain Human genes 0.000 claims abstract description 91
- 208000034578 Multiple myelomas Diseases 0.000 claims abstract description 79
- 101000801255 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 17 Proteins 0.000 claims abstract description 59
- 102000046935 human TNFRSF17 Human genes 0.000 claims abstract description 57
- 239000000523 sample Substances 0.000 claims description 174
- 210000004180 plasmocyte Anatomy 0.000 claims description 169
- 102000017420 CD3 protein, epsilon/gamma/delta subunit Human genes 0.000 claims description 135
- 108050005493 CD3 protein, epsilon/gamma/delta subunit Proteins 0.000 claims description 135
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 claims description 124
- 230000027455 binding Effects 0.000 claims description 109
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 claims description 51
- 239000012636 effector Substances 0.000 claims description 44
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 claims description 42
- 239000013610 patient sample Substances 0.000 claims description 30
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 claims description 24
- 102100024222 B-lymphocyte antigen CD19 Human genes 0.000 claims description 23
- 101000980825 Homo sapiens B-lymphocyte antigen CD19 Proteins 0.000 claims description 23
- 230000034190 positive regulation of NF-kappaB transcription factor activity Effects 0.000 claims description 22
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 claims description 20
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims description 20
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 claims description 20
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 claims description 20
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 18
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 18
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 18
- 230000004913 activation Effects 0.000 claims description 15
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 claims description 15
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims description 11
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 claims description 7
- 238000003556 assay Methods 0.000 abstract description 18
- 230000004043 responsiveness Effects 0.000 abstract description 4
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 141
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 108
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 82
- 230000002147 killing effect Effects 0.000 description 41
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 37
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 37
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 35
- 238000001943 fluorescence-activated cell sorting Methods 0.000 description 33
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 27
- 108010047041 Complementarity Determining Regions Proteins 0.000 description 26
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 26
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 25
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 24
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 description 21
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 18
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 17
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 17
- 102100036922 Tumor necrosis factor ligand superfamily member 13B Human genes 0.000 description 16
- 201000000596 systemic lupus erythematosus Diseases 0.000 description 16
- 101000581981 Homo sapiens Neural cell adhesion molecule 1 Proteins 0.000 description 15
- 101000738771 Homo sapiens Receptor-type tyrosine-protein phosphatase C Proteins 0.000 description 15
- 102100027347 Neural cell adhesion molecule 1 Human genes 0.000 description 15
- 102100037422 Receptor-type tyrosine-protein phosphatase C Human genes 0.000 description 15
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 15
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 14
- 230000006044 T cell activation Effects 0.000 description 14
- 101710181056 Tumor necrosis factor ligand superfamily member 13B Proteins 0.000 description 14
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 14
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 14
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 14
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 13
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 13
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 12
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 12
- 101001057504 Homo sapiens Interferon-stimulated gene 20 kDa protein Proteins 0.000 description 11
- 101001055144 Homo sapiens Interleukin-2 receptor subunit alpha Proteins 0.000 description 11
- 102100026878 Interleukin-2 receptor subunit alpha Human genes 0.000 description 11
- 210000000662 T-lymphocyte subset Anatomy 0.000 description 11
- 230000022534 cell killing Effects 0.000 description 11
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 11
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 11
- 108010004469 allophycocyanin Proteins 0.000 description 10
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 10
- 102100025137 Early activation antigen CD69 Human genes 0.000 description 9
- 101000934374 Homo sapiens Early activation antigen CD69 Proteins 0.000 description 9
- 238000009175 antibody therapy Methods 0.000 description 9
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 9
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 9
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 9
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 9
- 108010087819 Fc receptors Proteins 0.000 description 8
- 102000009109 Fc receptors Human genes 0.000 description 8
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 8
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 8
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 8
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 8
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 8
- BFMYDTVEBKDAKJ-UHFFFAOYSA-L disodium;(2',7'-dibromo-3',6'-dioxido-3-oxospiro[2-benzofuran-1,9'-xanthene]-4'-yl)mercury;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Na+].O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC(Br)=C([O-])C([Hg])=C1OC1=C2C=C(Br)C([O-])=C1 BFMYDTVEBKDAKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 8
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 8
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 8
- 230000036963 noncompetitive effect Effects 0.000 description 8
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 8
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 8
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 8
- 238000002198 surface plasmon resonance spectroscopy Methods 0.000 description 8
- 102100040678 Programmed cell death protein 1 Human genes 0.000 description 7
- 101710089372 Programmed cell death protein 1 Proteins 0.000 description 7
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 7
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 7
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 7
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 7
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 7
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 7
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 7
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 7
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 7
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 7
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 7
- 238000013517 stratification Methods 0.000 description 7
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 6
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 108010054477 Immunoglobulin Fab Fragments Proteins 0.000 description 6
- 102000001706 Immunoglobulin Fab Fragments Human genes 0.000 description 6
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 6
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 6
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 6
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 6
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 6
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 6
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 6
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 6
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000002975 chemoattractant Substances 0.000 description 5
- 238000007405 data analysis Methods 0.000 description 5
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 5
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 5
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 5
- 210000004602 germ cell Anatomy 0.000 description 5
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 5
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 5
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 5
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 5
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 5
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 4
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 4
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 4
- 208000037914 B-cell disorder Diseases 0.000 description 4
- 238000012286 ELISA Assay Methods 0.000 description 4
- 238000008157 ELISA kit Methods 0.000 description 4
- 102100034458 Hepatitis A virus cellular receptor 2 Human genes 0.000 description 4
- 101000795167 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 13B Proteins 0.000 description 4
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 4
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 4
- 108010057466 NF-kappa B Proteins 0.000 description 4
- 102000003945 NF-kappa B Human genes 0.000 description 4
- 239000006146 Roswell Park Memorial Institute medium Substances 0.000 description 4
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 4
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 description 4
- 230000003460 anti-nuclear Effects 0.000 description 4
- 102000015736 beta 2-Microglobulin Human genes 0.000 description 4
- 108010081355 beta 2-Microglobulin Proteins 0.000 description 4
- 238000004040 coloring Methods 0.000 description 4
- 238000004163 cytometry Methods 0.000 description 4
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 4
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 4
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 4
- 238000013394 immunophenotyping Methods 0.000 description 4
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 4
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 4
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 4
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 4
- 230000004044 response Effects 0.000 description 4
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 4
- DAEPDZWVDSPTHF-UHFFFAOYSA-M sodium pyruvate Chemical compound [Na+].CC(=O)C([O-])=O DAEPDZWVDSPTHF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 241000894007 species Species 0.000 description 4
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 4
- 239000013595 supernatant sample Substances 0.000 description 4
- NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 1-methylethyl 11-methoxy-3,7,11-trimethyl-2,4-dodecadienoate Chemical compound COC(C)(C)CCCC(C)CC=CC(C)=CC(=O)OC(C)C NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000024893 Acute lymphoblastic leukemia Diseases 0.000 description 3
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 3
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 3
- 101000642536 Apis mellifera Venom serine protease 34 Proteins 0.000 description 3
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 3
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 3
- 101710083479 Hepatitis A virus cellular receptor 2 homolog Proteins 0.000 description 3
- 108700005091 Immunoglobulin Genes Proteins 0.000 description 3
- 241000282567 Macaca fascicularis Species 0.000 description 3
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 3
- 108091007491 NSP3 Papain-like protease domains Proteins 0.000 description 3
- 208000021161 Plasma cell disease Diseases 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 108010090804 Streptavidin Proteins 0.000 description 3
- 108091008874 T cell receptors Proteins 0.000 description 3
- 102000016266 T-Cell Antigen Receptors Human genes 0.000 description 3
- 229940126547 T-cell immunoglobulin mucin-3 Drugs 0.000 description 3
- 239000013504 Triton X-100 Substances 0.000 description 3
- 229920004890 Triton X-100 Polymers 0.000 description 3
- 102100029675 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 13B Human genes 0.000 description 3
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 3
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 3
- 230000010056 antibody-dependent cellular cytotoxicity Effects 0.000 description 3
- 230000001640 apoptogenic effect Effects 0.000 description 3
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 3
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 3
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 3
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 3
- 229960003008 blinatumomab Drugs 0.000 description 3
- 210000001772 blood platelet Anatomy 0.000 description 3
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 3
- 210000002798 bone marrow cell Anatomy 0.000 description 3
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 3
- 230000011748 cell maturation Effects 0.000 description 3
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 3
- 230000004154 complement system Effects 0.000 description 3
- 230000000875 corresponding effect Effects 0.000 description 3
- 238000002784 cytotoxicity assay Methods 0.000 description 3
- 231100000263 cytotoxicity test Toxicity 0.000 description 3
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 3
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 3
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 3
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 3
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 3
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 3
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 3
- 238000010166 immunofluorescence Methods 0.000 description 3
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 3
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 3
- 238000002843 lactate dehydrogenase assay Methods 0.000 description 3
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 3
- 206010025135 lupus erythematosus Diseases 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 210000003071 memory t lymphocyte Anatomy 0.000 description 3
- 238000010606 normalization Methods 0.000 description 3
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 3
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 3
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 3
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 3
- 238000012552 review Methods 0.000 description 3
- 238000009738 saturating Methods 0.000 description 3
- 230000005634 sigma model Effects 0.000 description 3
- 210000001179 synovial fluid Anatomy 0.000 description 3
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 3
- 238000011269 treatment regimen Methods 0.000 description 3
- XZKIHKMTEMTJQX-UHFFFAOYSA-N 4-Nitrophenyl Phosphate Chemical compound OP(O)(=O)OC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 XZKIHKMTEMTJQX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YRNWIFYIFSBPAU-UHFFFAOYSA-N 4-[4-(dimethylamino)phenyl]-n,n-dimethylaniline Chemical compound C1=CC(N(C)C)=CC=C1C1=CC=C(N(C)C)C=C1 YRNWIFYIFSBPAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000014697 Acute lymphocytic leukaemia Diseases 0.000 description 2
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 2
- 206010003827 Autoimmune hepatitis Diseases 0.000 description 2
- 108010019670 Chimeric Antigen Receptors Proteins 0.000 description 2
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- 108010043121 Green Fluorescent Proteins Proteins 0.000 description 2
- 102000004144 Green Fluorescent Proteins Human genes 0.000 description 2
- 101001068133 Homo sapiens Hepatitis A virus cellular receptor 2 Proteins 0.000 description 2
- 101000830600 Homo sapiens Tumor necrosis factor ligand superfamily member 13 Proteins 0.000 description 2
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010073807 IgG Receptors Proteins 0.000 description 2
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 2
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 2
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 description 2
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 description 2
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 2
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- 229930182816 L-glutamine Natural products 0.000 description 2
- 208000005777 Lupus Nephritis Diseases 0.000 description 2
- 101710085938 Matrix protein Proteins 0.000 description 2
- 101710127721 Membrane protein Proteins 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 101100425747 Mus musculus Tnfrsf17 gene Proteins 0.000 description 2
- 102100032965 Myomesin-2 Human genes 0.000 description 2
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 2
- 208000006664 Precursor Cell Lymphoblastic Leukemia-Lymphoma Diseases 0.000 description 2
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 102000003705 Syndecan-1 Human genes 0.000 description 2
- 108090000058 Syndecan-1 Proteins 0.000 description 2
- 102100033726 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 17 Human genes 0.000 description 2
- 206010054094 Tumour necrosis Diseases 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000008228 bacteriostatic water for injection Substances 0.000 description 2
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 2
- 238000009583 bone marrow aspiration Methods 0.000 description 2
- 230000020411 cell activation Effects 0.000 description 2
- 238000012832 cell culture technique Methods 0.000 description 2
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 description 2
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 2
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 2
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000024203 complement activation Effects 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 2
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 2
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 2
- GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N fluorescein Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000006870 function Effects 0.000 description 2
- 239000005090 green fluorescent protein Substances 0.000 description 2
- 210000002443 helper t lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 230000016784 immunoglobulin production Effects 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 2
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 description 2
- 210000002809 long lived plasma cell Anatomy 0.000 description 2
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 230000036210 malignancy Effects 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 230000001338 necrotic effect Effects 0.000 description 2
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 2
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 2
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 238000009097 single-agent therapy Methods 0.000 description 2
- 229940054269 sodium pyruvate Drugs 0.000 description 2
- 230000000392 somatic effect Effects 0.000 description 2
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 2
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 2
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 2
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 2
- 210000002303 tibia Anatomy 0.000 description 2
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 2
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 2
- 230000003827 upregulation Effects 0.000 description 2
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 2
- 238000003260 vortexing Methods 0.000 description 2
- LZDYZEGISBDSDP-UHFFFAOYSA-N 2-(1-ethylaziridin-1-ium-1-yl)ethanol Chemical compound OCC[N+]1(CC)CC1 LZDYZEGISBDSDP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OBYNJKLOYWCXEP-UHFFFAOYSA-N 2-[3-(dimethylamino)-6-dimethylazaniumylidenexanthen-9-yl]-4-isothiocyanatobenzoate Chemical compound C=12C=CC(=[N+](C)C)C=C2OC2=CC(N(C)C)=CC=C2C=1C1=CC(N=C=S)=CC=C1C([O-])=O OBYNJKLOYWCXEP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NNMALANKTSRILL-LXENMSTPSA-N 3-[(2z,5e)-2-[[3-(2-carboxyethyl)-5-[(z)-[(3e,4r)-3-ethylidene-4-methyl-5-oxopyrrolidin-2-ylidene]methyl]-4-methyl-1h-pyrrol-2-yl]methylidene]-5-[(4-ethyl-3-methyl-5-oxopyrrol-2-yl)methylidene]-4-methylpyrrol-3-yl]propanoic acid Chemical compound O=C1C(CC)=C(C)C(\C=C\2C(=C(CCC(O)=O)C(=C/C3=C(C(C)=C(\C=C/4\C(\[C@@H](C)C(=O)N\4)=C\C)N3)CCC(O)=O)/N/2)C)=N1 NNMALANKTSRILL-LXENMSTPSA-N 0.000 description 1
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 1
- HJCMDXDYPOUFDY-WHFBIAKZSA-N Ala-Gln Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(N)=O HJCMDXDYPOUFDY-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- 239000012099 Alexa Fluor family Substances 0.000 description 1
- 108090000672 Annexin A5 Proteins 0.000 description 1
- 102000004121 Annexin A5 Human genes 0.000 description 1
- 102100021569 Apoptosis regulator Bcl-2 Human genes 0.000 description 1
- 108010028006 B-Cell Activating Factor Proteins 0.000 description 1
- 102000051485 Bcl-2 family Human genes 0.000 description 1
- 108700038897 Bcl-2 family Proteins 0.000 description 1
- 102100026596 Bcl-2-like protein 1 Human genes 0.000 description 1
- 206010061728 Bone lesion Diseases 0.000 description 1
- 206010057248 Cell death Diseases 0.000 description 1
- 102000019034 Chemokines Human genes 0.000 description 1
- 108010012236 Chemokines Proteins 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000001398 Granzyme Human genes 0.000 description 1
- 108060005986 Granzyme Proteins 0.000 description 1
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 1
- 208000002250 Hematologic Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 101000971171 Homo sapiens Apoptosis regulator Bcl-2 Proteins 0.000 description 1
- 101100005713 Homo sapiens CD4 gene Proteins 0.000 description 1
- 101001056180 Homo sapiens Induced myeloid leukemia cell differentiation protein Mcl-1 Proteins 0.000 description 1
- 101000917826 Homo sapiens Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor II-a Proteins 0.000 description 1
- 101000917858 Homo sapiens Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-A Proteins 0.000 description 1
- 101000611936 Homo sapiens Programmed cell death protein 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000851434 Homo sapiens Tumor necrosis factor ligand superfamily member 13B Proteins 0.000 description 1
- 206010020631 Hypergammaglobulinaemia benign monoclonal Diseases 0.000 description 1
- 208000019758 Hypergammaglobulinemia Diseases 0.000 description 1
- 102000009490 IgG Receptors Human genes 0.000 description 1
- 229940076838 Immune checkpoint inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 102000009786 Immunoglobulin Constant Regions Human genes 0.000 description 1
- 108010009817 Immunoglobulin Constant Regions Proteins 0.000 description 1
- 108010067060 Immunoglobulin Variable Region Proteins 0.000 description 1
- 102000017727 Immunoglobulin Variable Region Human genes 0.000 description 1
- 102100026539 Induced myeloid leukemia cell differentiation protein Mcl-1 Human genes 0.000 description 1
- 102100037850 Interferon gamma Human genes 0.000 description 1
- 102000006992 Interferon-alpha Human genes 0.000 description 1
- 108010047761 Interferon-alpha Proteins 0.000 description 1
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 1
- 108010002352 Interleukin-1 Proteins 0.000 description 1
- 108090000172 Interleukin-15 Proteins 0.000 description 1
- 101800003050 Interleukin-16 Proteins 0.000 description 1
- 108050003558 Interleukin-17 Proteins 0.000 description 1
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 1
- 108010002586 Interleukin-7 Proteins 0.000 description 1
- 108010002335 Interleukin-9 Proteins 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100029204 Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor II-a Human genes 0.000 description 1
- 102100029193 Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-A Human genes 0.000 description 1
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 102000018697 Membrane Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 1
- 208000015914 Non-Hodgkin lymphomas Diseases 0.000 description 1
- 108091005461 Nucleic proteins Proteins 0.000 description 1
- 108090000526 Papain Proteins 0.000 description 1
- KHGNFPUMBJSZSM-UHFFFAOYSA-N Perforine Natural products COC1=C2CCC(O)C(CCC(C)(C)O)(OC)C2=NC2=C1C=CO2 KHGNFPUMBJSZSM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000006994 Precancerous Conditions Diseases 0.000 description 1
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 241000219061 Rheum Species 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 206010070834 Sensitisation Diseases 0.000 description 1
- 108010071390 Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 102000007562 Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- 201000004283 Shwachman-Diamond syndrome Diseases 0.000 description 1
- 239000004268 Sodium erythorbin Substances 0.000 description 1
- 102100035748 Squamous cell carcinoma antigen recognized by T-cells 3 Human genes 0.000 description 1
- 230000009809 T cell chemotaxis Effects 0.000 description 1
- 230000010782 T cell mediated cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 230000006052 T cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 101710178300 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 13C Proteins 0.000 description 1
- 102100029690 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 13C Human genes 0.000 description 1
- 206010053614 Type III immune complex mediated reaction Diseases 0.000 description 1
- 108091005966 Type III transmembrane proteins Proteins 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 1
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 1
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- 229960002648 alanylglutamine Drugs 0.000 description 1
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 1
- 230000001745 anti-biotin effect Effects 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 238000003149 assay kit Methods 0.000 description 1
- 239000005667 attractant Substances 0.000 description 1
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 description 1
- 210000004271 bone marrow stromal cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000011545 carbonate/bicarbonate buffer Substances 0.000 description 1
- 238000000423 cell based assay Methods 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 239000013592 cell lysate Substances 0.000 description 1
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 1
- 210000001175 cerebrospinal fluid Anatomy 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 230000031902 chemoattractant activity Effects 0.000 description 1
- 210000000038 chest Anatomy 0.000 description 1
- 230000002759 chromosomal effect Effects 0.000 description 1
- 208000037976 chronic inflammation Diseases 0.000 description 1
- 230000006020 chronic inflammation Effects 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 1
- 239000013068 control sample Substances 0.000 description 1
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 1
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 1
- 230000000139 costimulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 1
- 210000001151 cytotoxic T lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 239000012470 diluted sample Substances 0.000 description 1
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 1
- 230000003828 downregulation Effects 0.000 description 1
- 230000007783 downstream signaling Effects 0.000 description 1
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 235000013861 fat-free Nutrition 0.000 description 1
- 238000003500 gene array Methods 0.000 description 1
- 238000012637 gene transfection Methods 0.000 description 1
- 238000007429 general method Methods 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 230000009033 hematopoietic malignancy Effects 0.000 description 1
- 210000001981 hip bone Anatomy 0.000 description 1
- 102000049109 human HAVCR2 Human genes 0.000 description 1
- 102000048362 human PDCD1 Human genes 0.000 description 1
- 102000056239 human TNFRSF13B Human genes 0.000 description 1
- 235000003642 hunger Nutrition 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 239000012274 immune-checkpoint protein inhibitor Substances 0.000 description 1
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 1
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 1
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 108010074108 interleukin-21 Proteins 0.000 description 1
- 230000016507 interphase Effects 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 230000013016 learning Effects 0.000 description 1
- 238000007422 luminescence assay Methods 0.000 description 1
- 239000012139 lysis buffer Substances 0.000 description 1
- 230000002101 lytic effect Effects 0.000 description 1
- 238000007885 magnetic separation Methods 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 1
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 1
- 201000005328 monoclonal gammopathy of uncertain significance Diseases 0.000 description 1
- 210000003643 myeloid progenitor cell Anatomy 0.000 description 1
- OHDXDNUPVVYWOV-UHFFFAOYSA-N n-methyl-1-(2-naphthalen-1-ylsulfanylphenyl)methanamine Chemical compound CNCC1=CC=CC=C1SC1=CC=CC2=CC=CC=C12 OHDXDNUPVVYWOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011275 oncology therapy Methods 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 210000002997 osteoclast Anatomy 0.000 description 1
- 229940055729 papain Drugs 0.000 description 1
- 235000019834 papain Nutrition 0.000 description 1
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 1
- 229930192851 perforin Natural products 0.000 description 1
- 238000002823 phage display Methods 0.000 description 1
- 230000035479 physiological effects, processes and functions Effects 0.000 description 1
- 108010086662 phytohemagglutinin-M Proteins 0.000 description 1
- 230000036470 plasma concentration Effects 0.000 description 1
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 1
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 1
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 230000000861 pro-apoptotic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001686 pro-survival effect Effects 0.000 description 1
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 1
- 210000001236 prokaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 230000005180 public health Effects 0.000 description 1
- 230000008707 rearrangement Effects 0.000 description 1
- 238000003259 recombinant expression Methods 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N rhodamine B Chemical compound [Cl-].C=12C=CC(=[N+](CC)CC)C=C2OC2=CC(N(CC)CC)=CC=C2C=1C1=CC=CC=C1C(O)=O PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010079 rubber tapping Methods 0.000 description 1
- 210000003296 saliva Anatomy 0.000 description 1
- 238000003118 sandwich ELISA Methods 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 230000008313 sensitization Effects 0.000 description 1
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 1
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 230000037351 starvation Effects 0.000 description 1
- 210000001562 sternum Anatomy 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 239000012089 stop solution Substances 0.000 description 1
- PXQLVRUNWNTZOS-UHFFFAOYSA-N sulfanyl Chemical class [SH] PXQLVRUNWNTZOS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000472 sulfonyl group Chemical group *S(*)(=O)=O 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- JGVWCANSWKRBCS-UHFFFAOYSA-N tetramethylrhodamine thiocyanate Chemical compound [Cl-].C=12C=CC(N(C)C)=CC2=[O+]C2=CC(N(C)C)=CC=C2C=1C1=CC=C(SC#N)C=C1C(O)=O JGVWCANSWKRBCS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011287 therapeutic dose Methods 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 230000000451 tissue damage Effects 0.000 description 1
- 231100000827 tissue damage Toxicity 0.000 description 1
- 230000005945 translocation Effects 0.000 description 1
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 1
- 125000000430 tryptophan group Chemical group [H]N([H])C(C(=O)O*)C([H])([H])C1=C([H])N([H])C2=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C12 0.000 description 1
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 1
- 208000025883 type III hypersensitivity disease Diseases 0.000 description 1
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 1
- 238000012795 verification Methods 0.000 description 1
- 239000011534 wash buffer Substances 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 238000002689 xenotransplantation Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
- C07K16/2809—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily against the T-cell receptor (TcR)-CD3 complex
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/2878—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the NGF-receptor/TNF-receptor superfamily, e.g. CD27, CD30, CD40, CD95
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/574—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
- G01N33/57407—Specifically defined cancers
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
- G01N33/6863—Cytokines, i.e. immune system proteins modifying a biological response such as cell growth proliferation or differentiation, e.g. TNF, CNF, GM-CSF, lymphotoxin, MIF or their receptors
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
- C07K2317/31—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency multispecific
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
- C07K2317/33—Crossreactivity, e.g. for species or epitope, or lack of said crossreactivity
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
- C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
- G01N2333/705—Assays involving receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- G01N2333/70578—NGF-receptor/TNF-receptor superfamily, e.g. CD27, CD30 CD40 or CD95
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
- G01N2800/22—Haematology
Abstract
Description
BCMA;TR17_HUMAN、TNFRSF17(UniProt Q02223)としてもまた公知の、ヒトB細胞成熟標的は、分化した形質細胞内で優先的に発現する、腫瘍壊死受容体スーパーファミリーのメンバーである[Laabiら、1992年、Madryら、1998年]。BCMAは、B細胞の成熟、成長、および生存に関与する、非グリコシル化III型膜貫通タンパク質である。BCMAは、TNFスーパーファミリーの2つのリガンド:BCMAに対する高アフィニティーリガンドであるAPRIL(増殖誘導性リガンド)と、BCMAに対する低アフィニティーリガンドであるB細胞活性化因子(BAFF)(THANK、BlyS、Bリンパ球刺激因子、TALL−1、およびzTNF4)とに対する受容体である。APRILとBAFFとは、構造的類似性および重複を示すが、顕著に異なる受容体結合特異性も示す。また、負の調節因子TACIも、BAFFおよびAPRILの両方に結合する。APRILおよびBAFFの、BCMAおよび/またはTACIへの協調した結合は、転写因子NF−κBを活性化させ、生存促進性Bcl−2ファミリーメンバー(例えば、Bcl−2、Bcl−xL、Bcl−w、Mcl−1、A1)の発現およびアポトーシス促進性因子(例えば、Bid、Bad、Bik、Bimなど)の下方調節を増大させ、こうして、アポトーシスを阻害し、生存を促進する。この作用の組合せは、B細胞の分化、増殖、生存、および抗体産生を促進する(Rickert RCら、Immunol Rev(2011年)、244巻(1号):115〜133頁において総説されている)。
T細胞二特異性抗体は、標的細胞の近くで直接T細胞を活性化することにより、例えば標的細胞を有効に殺滅するための強力な化合物である。例えば、多発性骨髄腫細胞の場合は悪性形質細胞、または全身性エリテマトーデスもしくは関節リウマチの場合は抗核抗体分泌形質細胞の表面におけるBCMAに結合するT細胞二特異性抗体は、用量依存的にこれらの形質細胞を殺滅することができる。本発明者らは、形質細胞の殺滅に影響する特定のパラメータを認識した。そのようなパラメータは、適切なフローサイトメトリー法によって測定されるBCMA発現の度合い、特定の濃度の可溶性BCMAの存在、悪性形質細胞に対するT細胞の比、および特定の濃度の可溶性BCMAリガンドであるAPRILの存在である。本発明者らの知見は、例えば、処置担当医師(複数可)が、個々の患者に対してBCMA−T細胞二特異性抗体による治療法を目的に合わせるための重要なガイダンスを提供し、本発明者らの知見はまた、前記パラメータを測定するための検査キットの科学的基盤も提供する。
i)前記患者から、体液試料を単離するステップと、
ii)前記試料における可溶性BCMAの量を測定するステップと、
iii)前記試料における可溶性BCMAの量が、2.5ng/mLまたはそれより高い場合、また、
iv)前記患者試料における前記可溶性BCMAが、前記二特異性抗体に特異的に結合する場合、より高い用量でおよび/またはより高頻度の処置スケジュールで、前記二特異性抗体により前記患者を処置するステップと
を連続的に含む二特異性抗体に関する。
i)前記患者から、体液試料を単離するステップと、
ii)前記試料における可溶性BCMAの量を測定するステップと、
iii)前記試料における可溶性BCMAの量が、2.5ng/mLまたはそれより高い場合、また、
iv)前記患者試料における前記可溶性BCMAが、前記二特異性抗体に特異的に結合する場合、第1の用量に関してより高い用量で、または前記二特異性抗体の第1の用量および第2の用量の間のより短い期間もしくは前記二特異性抗体の第1の用量および第3の用量の間のより短い期間による、より高頻度の処置スケジュールで、前記二特異性抗体により前記患者を処置するステップと
を連続的に含む二特異性抗体に関する。
i)前記患者から、形質細胞およびT細胞を含む体液試料を単離するステップと、
ii)前記試料におけるAPRILの量を測定するステップと、
iii)前記患者試料におけるAPRILの量が、100ng/mLを超える場合、より高い用量でおよび/またはより高頻度の処置スケジュールで、前記二特異性抗体により前記患者を処置するステップと
を連続的に含む二特異性抗体に関する。
i)前記患者から、形質細胞およびT細胞を含む体液試料を単離するステップと、
ii)前記試料におけるAPRILの量を測定するステップと、
iii)前記患者試料におけるAPRILの量が、100ng/mLを超える場合、100ng/mLを下回る可溶性APRIL濃度を有する患者に推奨される用量と比較して、100ng/mLのAPRIL濃度においては2倍高い用量で、APRIL濃度が、1000ng/mLまで増大する場合は最大80倍高いさらに増大された用量で、前記二特異性抗体により前記患者を処置するステップ、またはより高い前記用量に達するようにそれぞれのより高頻度の処置スケジュールにより、前記二特異性抗体のいずれか2用量間のより短い期間で前記患者を処置するステップと
を連続的に含む二特異性抗体に関する。
前記患者の処置における使用に意図される、BCMAおよびCD3εに特異的に結合する二特異性抗体の抗BCMA抗体部分のKd値の0.70〜1.3倍であるKd値を有する抗BCMA抗体を使用することによって、前記CD138+CD38+細胞におけるBCMA発現を測定するステップと、フローサイトメトリーによって、相対蛍光強度中央値または平均蛍光強度MFIが、ベースラインを、80またはそれ超、好ましくは100またはそれ超、好ましくは200またはそれ超、さらにより好ましくは300またはそれ超上回るか否かを決定するステップと
を含む方法に関する。
前記患者の処置における使用に意図される、BCMAおよびCD3εに特異的に結合する二特異性抗体の抗BCMA抗体部分のKd値の0.70〜1.3倍であるKd値を有する抗BCMA抗体を使用することによって、前記患者由来のCD138+CD38+細胞を含む単離された体液試料を、前記CD138+CD38+細胞におけるBCMA発現に関して分析するステップと、相対蛍光強度中央値または平均蛍光強度MFIが、ベースラインを、80またはそれ超、好ましくは100またはそれ超、好ましくは200またはそれ超、さらにより好ましくは300またはそれ超上回る場合、前記二特異性抗体により前記患者を処置するステップと
を含む方法に関する。
i)BCMAおよびCD3εに特異的に結合する治療用二特異性抗体の抗BCMA抗体部分のKd値の0.70〜1.3倍であるKd値を有する抗BCMA抗体を使用することによって測定される、CD138+CD38+細胞を含む単離された体液試料における細胞表面BCMA発現が、相対蛍光強度中央値もしくは平均蛍光強度MFIとして決定されるベースラインを、100もしくはそれ超、好ましくは200もしくはそれ超、さらにより好ましくは300もしくはそれ超上回る場合、前記治療用抗体により前記患者を処置するステップ、または
ii)BCMAおよびCD3εに特異的に結合する治療用二特異性抗体の抗BCMA抗体部分のKd値の0.70〜1.3倍であるKd値を有する抗BCMA抗体を使用することによって測定される、CD138+CD38+細胞を含む単離された体液試料における細胞表面BCMA発現が、相対蛍光強度中央値もしくは平均蛍光強度MFIとして決定されるベースラインを、100未満、好ましくは50未満、なお好ましくは10未満しか上回らない場合、前記治療用抗体により前記患者を処置しないステップ
を含む方法に関する。
i)前記患者の体液試料において、CD138+CD38+細胞に対するCD3+細胞の比が、0.35:1、好ましくは0.5:1またはそれより高い、好ましくは1:1またはそれより高い、より好ましくは5:1またはそれより高い、さらにより好ましくは10:1またはそれより高い場合、単独療法においてBCMAおよびCD3εに特異的に結合する治療用二特異性抗体により前記患者を処置し、
ii)前記患者の単離された体液試料において、CD138+CD38+細胞に対するCD3+細胞の比が、0.5:1よりも低い、好ましくは0.25:1よりも低い場合、T細胞増殖性療法またはT細胞化学誘引物質療法と組み合わせて、BCMAおよびCD3εに特異的に結合する治療用二特異性抗体により前記患者を処置することに関する。
i)前記患者の単離された体液試料において、CD138+CD38+細胞に対するCD3+細胞の比が、0.35:1、好ましくは0.5:1もしくはそれより高い、好ましくは1:1もしくはそれより高い、より好ましくは5:1もしくはそれより高い、さらにより好ましくは10:1もしくはそれより高い場合、前記治療用抗体により前記患者を処置するステップ、または
ii)前記患者の単離された体液試料において、CD138+CD38+細胞に対するCD3+細胞の比が、0.35:1よりも低い、好ましくは0.5:1、好ましくは0.25:1よりも低い場合、T細胞増殖性療法もしくはT細胞化学誘引物質療法と組み合わせて、BCMAおよびCD3に特異的に結合する二特異性抗体により前記患者を処置するステップ
を含む方法に関する。
i)前記試料における可溶性BCMAの量が、2.5ng/mLよりも低い場合、前記治療用抗体により前記患者を処置するステップ、または
ii)前記試料における可溶性BCMAの量が、2.5ng/mLもしくはそれより高く、
前記患者試料における前記可溶性BCMAが、前記二特異性抗体に結合しない場合、前記治療用抗体により前記患者を処置するステップ、または
iii)前記試料における可溶性BCMAの量が、2.5ng/mLもしくはそれより高い、好ましくは10ng/mLもしくはそれより高い、より好ましくは50ng/mLもしくはそれより高い、さらにより好ましくは250ng/mLもしくはそれより高く、
前記患者試料における前記可溶性BCMAが、前記二特異性抗体に特異的に結合する場合、より高い用量で、および/もしくはより高頻度の処置スケジュールで、前記二特異性抗体により前記患者を処置するステップ
を含む方法に関する。
i)前記試料における可溶性BCMAの量が、2.5ng/mLよりも低い場合、前記治療用抗体により前記患者を処置するステップ、あるいは
ii)前記試料における可溶性BCMAの量が、2.5ng/mLまたはそれより高く、
前記患者試料における前記可溶性BCMAが、前記二特異性抗体に結合しない場合、前記治療用抗体により前記患者を処置するステップ、あるいは
iii)前記試料における可溶性BCMAの量が、2.5ng/mLまたはそれより高い、好ましくは10ng/mLまたはそれより高い、より好ましくは50ng/mLまたはそれより高い、さらにより好ましくは250ng/mLまたはそれより高く、前記患者試料における前記可溶性BCMAが、前記二特異性抗体に特異的に結合する場合、第1の用量に関してより高い用量で、または前記二特異性抗体の第1の用量および第2の用量の間のより短い期間もしくは前記二特異性抗体の第1の用量および第3の用量の間のより短い期間による、より高頻度の処置スケジュールで、前記二特異性抗体により前記患者を処置するステップ
を含む方法に関する。
i)前記試料における可溶性APRILの量が、100ng/mLもしくはそれを下回る、好ましくは20ng/mLもしくはそれを下回る場合、前記治療用抗体により前記患者を処置するステップ、または
ii)前記試料における可溶性APRILの量が、100ng/mLもしくはそれより高い、好ましくは1000ng/mLもしくはそれより高い場合、APRIL非競合的二特異性抗体により前記患者を処置するステップ、または
iii)前記試料における可溶性APRILの量が、100ng/mLよりも高い、好ましくは1000ng/mLもしくはそれより高い場合、より高い用量で、および/もしくはより高頻度の処置スケジュールで、前記二特異性抗体により前記患者を処置するステップ
を含む方法に関する。
i)前記試料における可溶性APRILの量が、100ng/mLもしくはそれを下回る、好ましくは20ng/mLもしくはそれを下回る場合、前記治療用抗体により前記患者を処置するステップ、または
ii)前記試料における可溶性APRILの量が、100ng/mLもしくはそれより高い、好ましくは1000ng/mLもしくはそれより高い場合、BCMAリガンド競合的二特異性抗体により前記患者を処置するステップ、または
iii)前記患者試料におけるAPRILの量が、100ng/mLを超える場合、100ng/mLを下回る可溶性APRIL濃度を有する患者に推奨される用量と比較して、100ng/mLのAPRIL濃度においては2倍高い用量で、APRIL濃度が、1000ng/mLまで増大する場合は最大80倍高いさらに増大された用量で、前記二特異性抗体により前記患者を処置するステップ、もしくはより高い前記用量に達するようにそれぞれのより高頻度の処置スケジュールにより、前記二特異性抗体のいずれか2用量間のより短い期間で前記患者を処置するステップ
を含む方法に関する。
少なくとも1種の調査方法を利用して、前記新たな患者のBCMA関連の形質細胞状態を提供するステップと、
1種の方法の少なくとも結果を利用して、少なくとも1種の同様の表現を有する同じ障害を患う以前の患者に関して以前の処置計画を検索するステップと、
少なくとも1種の以前の処置計画における情報に基づき新たな患者の処置を改善する仕方を決定するために、以前の患者に関して以前の処置計画を審査するステップと
を含む方法に関する。
1)細胞表面BCMA発現の決定用:悪性PCにおけるBCMAを決定するための、標識抗体(好ましくは4種の抗体;そのうち1種はCD138に、1種はCD38に、1種はCD19に、1種はBCMAに特異的に結合する(本発明に従う特性を有する))があらかじめ充填されたバイアルまたはチューブ;アイソタイプ対照抗体の入ったチューブ;
2)E:T比の決定用:悪性PCおよびT細胞を検出するための、標識抗体があらかじめ充填されたバイアルまたはチューブ(好ましくは、4種の抗体;そのうち1種はCD138に、1種はCD38に、1種はCD19に、1種はCD3に特異的に結合する);アイソタイプ対照抗体の入ったチューブ;
3)可溶性BCMAの決定用:マイクロタイタープレート、捕捉抗体(ポリクローナルBCMA抗体)、ビオチンコンジュゲート検出抗体(BCMAに特異的に結合(本発明に従う特性を有する))、質量較正された標準、ストレプトアビジン−HRPまたはストレプトアビジン−ALP、詳細なプロトコール、PBS、洗浄緩衝液 − PBS中の0.05%Tween 20、pH7.2〜7.4、試薬希釈剤1 − PBS中の1%のBSA5、基質溶液 − 着色試薬A(H2O2)および着色試薬B(テトラメチルベンジジン)の1:1混合物、停止溶液 − 2N H2SO4を含むELISAキット;
4)可溶性APRILの決定用:マイクロタイタープレート、捕捉抗体(抗ヒトAPRIL抗体)、ビオチンコンジュゲート検出抗体(抗ヒトAPRIL抗体)、質量較正された標準、ストレプトアビジン−HRPまたはストレプトアビジン−ALP、詳細なプロトコール、PBS、洗浄緩衝液 − PBS中の0.05%Tween 20、pH7.2〜7.4、試薬希釈剤1 − PBS中の1%のBSA5、基質溶液 − 着色試薬A(H2O2)および着色試薬B(テトラメチルベンジジン)の1:1混合物、停止溶液 − 2N H2SO4を含むELISAキット。
本発明者らは、形質細胞が関与する障害、特に、多発性骨髄腫、全身性エリテマトーデスおよび/または関節リウマチを、いくつかのサブタイプに分類(分割)することができることを認識した。このようなサブタイプを次に示す:
ステージI:血清ベータ−2ミクログロブリンが、3.5(mg/L)未満であり、アルブミンレベルが、3.5(g/L)を上回る。
ステージII:ステージIでもIIIでもない、すなわち、ベータ−2ミクログロブリンレベルが、3.5〜5.5の間である(アルブミンレベルは任意)、またはアルブミンが3.5を下回るが、ベータ−2ミクログロブリンは3.5未満であるのいずれかであることを意味する。
ステージIII:血清ベータ−2ミクログロブリンが、5.5を超える。
− BCMA発現の測定のための診断用抗体および治療用抗体が、ある程度まで関連していること(MFI)
− 多発性骨髄腫についてのE:T比
− 体液試料、特に、患者が多発性骨髄腫を患う場合は骨髄吸引物試料および患者がSLEまたはRAを患う場合は滑液における可溶性BCMAおよび/またはAPRILの量は、治療法成功に関連性がある。好ましくは、2、3または全4つの特徴が組み合わされる。好ましくは、2、3または全4つの特徴の決定が、本発明に従う処置方法、治療法選択、処置計画選択および見込みを予測することのために組み合わされる。
− MFIが50またはそれ未満の場合、TCBにより処置しないこと、
− 可溶性BCMAが2.5ng/mLを超える場合、用量/用量スケジュールを適合させること、
− APRILが100ng/mLを上回る場合、または単に非競合BCMA−TCBを採用する場合、用量/用量スケジュールを適合させること、
− E:Tが0.5:1を下回る場合、T細胞拡大/増強治療法と組み合わせること。
前記二特異性抗体の抗BCMA抗体部分のKd値の0.70〜1.3倍であるKd値を有する抗BCMA抗体を使用することにより、前記患者のCD138+CD38+細胞におけるBCMA発現を決定するステップと、MFIが、ベースラインを、80またはそれ超、好ましくは100またはそれ超上回ると判明した場合、
前記決定方法の結果を利用して、同様の(好ましくは同じ)表現を有する同じ障害を患う以前の患者を検索するステップと、
以前の処置計画における情報に基づき、新たな患者の処置を改善する仕方を決定するために、以前の患者の以前の処置計画を審査するステップと
を含む方法を指す。
前記二特異性抗体の抗BCMA抗体部分のKd値の0.70〜1.3倍であるKd値を有する抗BCMA抗体を使用することにより、前記患者のCD138+CD38+細胞におけるBCMA発現を決定するステップと、MFIが、ベースラインを、80またはそれ超、好ましくは100またはそれ超上回ると判明した場合、BCMA−T細胞二特異性抗体療法により患者を処置するが、ベースラインを、100未満、好ましくは50未満、なお好ましくは10未満しか上回らないMFIにおいては処置しないと考慮するステップ
を含む方法を指す。
前記患者の単離された体液試料において、CD138+CD38+細胞に対するCD3+細胞の比(さらにまた、E:T比とも称する)が、0.35:1、好ましくは0.5:1またはそれより高いか否かを決定するステップと、
前記決定方法の結果を利用して、同様の(好ましくは同じ)表現を有する同じ障害を患う以前の患者を検索するステップと、
以前の処置計画における情報に基づき、新たな患者の処置を改善する仕方を決定するために、以前の患者の以前の処置計画を審査するステップと
を含む方法を指す。
前記患者の単離された体液試料において、可溶性BCMAの量が、2.5ng/mLまたはそれより高いか否かを決定するステップと、
前記決定方法の結果を利用して、同様の(好ましくは同じ)表現を有する同じ障害を患う以前の患者を検索するステップと、
以前の処置計画における情報に基づき、新たな患者の処置を改善する仕方を決定するために、以前の患者の以前の処置計画を審査するステップと
を含む方法を指す。
前記患者の単離された体液試料において、APRILの量が、100ng/mLまたはそれより高いか否かを決定するステップと、
前記決定方法の結果を利用して、同様の(好ましくは同じ)表現を有する同じ障害を患う以前の患者を検索するステップと、
以前の処置計画における情報に基づき、新たな患者の処置を改善する仕方を決定するために、以前の患者の以前の処置計画を審査するステップと
を含む方法を指す。
前記二特異性抗体の抗BCMA抗体部分のKd値の0.70〜1.3倍であるKd値を有する抗BCMA抗体を使用することにより、前記患者のCD138+CD38+細胞におけるBCMA発現を決定し、MFIが、ベースラインを、80またはそれ超、好ましくは100またはそれ超上回ると判明した場合、
前記患者の単離された体液試料において、CD138+CD38+細胞に対するCD3+細胞の比(さらにまた、E:T比とも称する)が、0.35:1、好ましくは0.5:1またはそれより高いか否かを決定すること、
前記患者の単離された体液試料において、可溶性BCMAの量が、2.5ng/mLまたはそれより高いか否かを決定すること、および
前記患者の単離された体液試料において、APRILの量が、100ng/mLまたはそれより高いか否かを決定すること。
i)前記患者から、体液試料を単離するステップと、
ii)前記試料における可溶性BCMAの量を測定するステップと、
iii)前記試料における可溶性BCMAの量が、2.5ng/mLまたはそれより高い場合、また、
iv)前記患者試料における前記可溶性BCMAが、前記二特異性抗体に特異的に結合する場合、第1の用量に関してより高い用量で、または前記二特異性抗体の第1の用量および第2の用量の間のより短い期間もしくは前記二特異性抗体の第1の用量および第3の用量の間のより短い期間による、より高頻度の処置スケジュールで、前記二特異性抗体により前記患者を処置するステップと
を連続的に含む二特異性抗体。
i)前記患者から、形質細胞およびT細胞を含む体液試料を単離するステップと、
ii)ELISA方法の使用により、前記試料におけるAPRILの量を測定するステップと、
iii)前記患者試料におけるAPRILの量が、100ng/mLを超える場合、100ng/mLを下回る可溶性APRIL濃度を有する患者に推奨される用量と比較して、100ng/mL〜1000ng/mLのAPRIL濃度においては50%〜100%より高い用量で、1000ng/mL APRIL濃度を上回る場合は2倍を超えて最大80倍高い用量で、前記二特異性抗体により前記患者を処置するステップ、またはより高い前記用量に達するようにそれぞれのより高頻度の処置スケジュールにより、前記二特異性抗体のいずれか2用量間のより短い期間で前記患者を処置するステップと
を連続的に含む二特異性抗体。
i)BCMAおよびCD3εに特異的に結合する治療用二特異性抗体の抗BCMA抗体部分のKd値の0.70〜1.3倍であるKd値を有する抗BCMA抗体を使用することによって測定される、CD138+CD38+細胞を含む単離された体液試料における細胞表面BCMA発現が、相対蛍光強度中央値もしくは平均蛍光強度MFIとして決定されるベースラインを、100もしくはそれ超、好ましくは200もしくはそれ超、さらにより好ましくは300もしくはそれ超上回る場合、前記治療用抗体により前記患者を処置するステップ、または
ii)BCMAおよびCD3εに特異的に結合する治療用二特異性抗体の抗BCMA抗体部分のKd値の0.70〜1.3倍であるKd値を有する抗BCMA抗体を使用することによって測定される、CD138+CD38+細胞を含む単離された体液試料もしくは単離された血液試料における細胞表面BCMA発現が、相対蛍光強度中央値もしくは平均蛍光強度MFIとして決定されるベースラインを、100未満、好ましくは50未満、なお好ましくは10未満しか上回らない場合、前記治療用抗体により前記患者を処置しないステップ
を含む方法。
i)前記患者の単離された体液試料において、CD138+CD38+細胞に対するCD3+細胞の比が、0.35:1、好ましくは0.5:1またはそれより高い、好ましくは1:1またはそれより高い、より好ましくは5:1またはそれより高い、さらにより好ましくは10:1またはそれより高い場合、単独療法において、BCMAおよびCD3εに特異的に結合する治療用二特異性抗体により前記患者を処置し、
ii)前記患者の単離された体液試料において、CD138+CD38+細胞に対するCD3+細胞の比が、0.35:1よりも低い、好ましくは0.5:1、好ましくは0.25:1よりも低い場合、T細胞増殖性療法またはT細胞化学誘引物質療法と組み合わせて、BCMAおよびCD3εに特異的に結合する治療用二特異性抗体により前記患者を処置する
方法。
i)前記患者の単離された体液試料において、CD138+CD38+細胞に対するCD3+細胞の比が、0.35:1、好ましくは0.5:1もしくはそれより高い、好ましくは1:1もしくはそれより高い、より好ましくは5:1もしくはそれより高い、さらにより好ましくは10:1もしくはそれより高い場合、前記治療用抗体により前記患者を処置するステップ、または
ii)前記患者の単離された体液試料において、CD138+CD38+細胞に対するCD3+細胞の比が、0.35:1よりも低い、好ましくは0.5:1、好ましくは0.25:1よりも低い場合、T細胞増殖性療法もしくはT細胞化学誘引物質療法と組み合わせて、前記患者を処置するステップ
を含む方法。
i)前記患者の単離された体液試料において、可溶性BCMAの量が、2.5ng/mLよりも低い場合、前記治療用抗体により前記患者を処置するステップ、あるいは
ii)前記試料における可溶性BCMAの量が、2.5ng/mLまたはそれより高く、
前記患者試料における前記可溶性BCMAが、前記二特異性抗体に結合しない場合、前記治療用抗体により前記患者を処置するステップ、あるいは
iii)前記試料における可溶性BCMAの量が、2.5ng/mLまたはそれより高く、前記患者試料における前記可溶性BCMAが、前記二特異性抗体に特異的に結合する場合、第1の用量に関してより高い用量で、または前記二特異性抗体の第1の用量および第2の用量の間のより短い期間もしくは前記二特異性抗体の第1の用量および第3の用量の間のより短い期間による、より高頻度の処置スケジュールで、前記二特異性抗体により前記患者を処置するステップ
を含む方法。
i)前記患者の単離された体液試料において、可溶性APRILの量が、100ng/mLもしくはそれを下回る場合、APRIL競合的二特異性抗体もしくはAPRIL非競合的二特異性抗体により前記患者を処置するステップ、または
ii)前記試料における可溶性APRILの量が、100ng/mLもしくはそれより高い場合、APRIL非競合的二特異性抗体により前記患者を処置するステップ
を含む方法。
少なくとも1種の調査方法を利用して、前記新たな患者のBCMA関連の形質細胞状態を提供するステップと、
1種の方法の少なくとも結果を利用して、少なくとも1種の同様の表現を有する同じ障害を患う以前の患者のための以前の処置計画を検索するステップと、
少なくとも1種の以前の処置計画における情報に基づき、新たな患者の処置を改善する仕方を決定するために、以前の患者の以前の処置計画を審査するステップとを含み、
処置計画が、BCMAおよびCD3εに特異的に結合する二特異性抗体の使用、その用量、ならびに前記二特異性抗体の少なくとも第1の用量および第2の用量の間の期間にわたる処置スケジュールを伴う方法。
細胞培養技法
Current Protocols in Cell Biology(2000年)、Bonifacino,J.S.、Dasso,M.、Harford,J.B.、Lippincott−Schwartz,J.、およびYamada,K.M.(編)、John Wiley&Sons,Inc.において記載されている、標準的な細胞培養技法を使用する。
末梢血単核細胞(PBMC)は、Histopaque密度遠心分離により、地域の血液バンク、または健常ヒトドナーに由来する採取したての血液から得られる、富化されたリンパ球調製物(軟膜)から調製した。略述すると、血液を、滅菌PBSで希釈し、Histopaque勾配(Sigma、H8889)にわたり、注意深く層化させた。450×g、室温で30分間遠心分離の後(ブレーキをオフに切り替える)、PBMCを含有する相間部の上方の血漿部分を廃棄した。PBMCを、新しい50ml Falconチューブへと移し、チューブを、PBSで、50mlの総容量まで満たした。混合物を、400×g、室温で10分間遠心分離した(ブレーキをオンに切り替える)。上清を廃棄し、PBMCペレットを、滅菌PBSで2回洗浄した(350×g、4℃で10分間の遠心分離ステップ)。結果として得られるPBMC集団を、自動的にカウントし(ViCell)、アッセイ開始まで、インキュベーター内、37℃、5%のCO2、10%のFCS、および1%のL−アラニル−L−グルタミン(Biochrom、K0302)を含有するRPMI1640培地中で保存した。
末梢血単核細胞(PBMC)は、Histopaque密度遠心分離により、地域の血液バンク、または健常ヒトドナーに由来する採取したての血液から得られる、富化されたリンパ球調製物(軟膜)から調製した。PBMCからのT細胞の富化は、製造元の指示書に従い、Miltenyi Biotec(型番130−093−244)製のNaive CD8+ T cell isolation Kitを使用して実施したが、CD8+T細胞の最後の単離ステップは省略した(初代ヒト汎T細胞の単離についての記載もまた参照されたい)。
BCMA陽性ヒト骨髄腫細胞系(NCI−H929、RPMI−8226、U266B1およびL−363)を使用した。NCI−H929細胞((H929)ATCC(登録商標)CRL−9068(商標))を、10〜20%の熱不活化FCSを伴い、2mMのL−グルタミン、1mMのピルビン酸ナトリウム、および50μMのメルカプトエタノールを含有する場合もある、80〜90%のRPMI 1640中で培養した。RPMI−8226細胞((RPMI)ATCC(登録商標)CCL−155(商標))を、90%のRPMI 1640、および10%の熱不活化FCSを含有する培地中で培養した。U266B1((U266)ATCC(登録商標)TIB−196(商標))細胞を、2mMのL−グルタミン、10mMのHEPES、1mMのピルビン酸ナトリウム、4500mg/Lのグルコース、および1500mg/Lの炭酸水素ナトリウム、および15%の熱不活化FCSを含有するように改変されたRPMI−1640培地中で培養した。L−363細胞系(Leibniz Institute DSMZ(German collection of microorganisms and cell cultures);DSMZ受託番号ACC 49)を、85%のRPMI 1640、および15%の熱不活化FCS中で培養した。
患者骨髄腫細胞におけるBCMA発現の最適化された測定
(実施例1.1)
フローサイトメトリーによって検出される、患者骨髄腫細胞におけるBCMA発現の定性的測定(蛍光強度中央値)
地域の倫理審査委員会によるガイドラインおよびヘルシンキ宣言に従い、説明同意文書の署名を得た後で、多発性骨髄腫患者から血液および骨髄吸引物を収集した。フローサイトメトリーによって、骨髄吸引物に由来する患者骨髄腫細胞の細胞表面におけるBCMAの定性的発現を測定した。表面プラズモン共鳴によって検出される10.9±2.7nMのヒトBCMAに対するアフィニティーを有する、APCコンジュゲート二価BCMA−1抗体を使用して、蛍光強度中央値(MFI)を決定した。
フローサイトメトリーによって検出される、患者骨髄腫細胞におけるBCMAの定量的測定(特異的抗原結合能)
フローサイトメトリーを使用して、患者骨髄腫細胞の細胞表面において、BCMAの定量的発現、すなわち、BCMAの特異的抗原結合能(SABC)も測定した。Qifikit(Dako)方法を使用して、H929ヒト骨髄腫細胞系と比較して、患者の骨髄骨髄腫細胞の細胞表面におけるBCMA抗原コピー数または特異的抗原結合能を定量化した。骨髄吸引物を収集し、FACS緩衝液(100μl/ウェル;350×gを5分間)で細胞を洗浄し、100万(Mio)個の細胞/mlとなるように調整した。50μl(=50万個の細胞)の細胞懸濁液を96丸底ウェルプレートの各ウェルに移した。続いて、最終濃度25μg/ml(または飽和濃度)となるようにFACS緩衝液(PBS、0.1%のBSA)に希釈した50μlのマウス抗ヒトBCMA IgG(BioLegend型番357502)またはマウスIgG2aアイソタイプ対照(BioLegend型番401501)を添加し、30分間4℃で暗所にて染色を行った。次に、100μlのセットアップまたは較正ビーズを別々のウェルに添加し、細胞をビーズと共にFACS緩衝液で2回洗浄した。Qifikitに備え付けられたフルオレセインコンジュゲート抗マウス二次抗体を含有する(飽和濃度で)25μlのFACS緩衝液に、細胞およびビーズを再懸濁した。45分間4℃で暗所にて、細胞およびビーズを染色した。細胞を1回洗浄し、全試料を100μlのFACS緩衝液に再懸濁した。マルチカラーフローサイトメーターおよびインストールされたソフトウェア(例えば、FACS Divaソフトウェアを実行するCantoIIデバイスまたはCellQUESTソフトウェアを使用するFACS Caliburフローサイトメーター)において試料を分析した。Paint−A−Gate PROプログラム(BD Biosciences)をデータ分析に使用した。表4は、特異的抗原結合能(SABC)によって測定される、患者の骨髄骨髄腫細胞における定量的BCMA発現を要約する。
BCMA−TCBの殺滅効力は、標的細胞:BCMAhi発現H929対BCMAmed/lo発現U266 vs.BCMAmed/lo発現L363対BCMAlo発現RPMI−8226骨髄腫細胞の表面におけるBCMA発現によって影響される
BCMA−TCB抗体の効力は、骨髄腫細胞の細胞表面におけるBCMAの発現のレベルによって影響されうる。標的細胞として異なるヒト骨髄腫細胞系、すなわち、BCMAhi発現H929対BCMAmed/lo発現U266骨髄腫細胞を使用したリダイレクトT細胞細胞傷害性アッセイにおいて、BCMA−TCBの殺滅効力を測定した。
骨髄腫患者骨髄吸引物におけるエフェクター細胞対腫瘍細胞(E:T)比の測定
BCMA抗体の効力は、骨髄腫細胞の細胞表面におけるBCMAの発現のレベルによって影響されうる。しかし、BCMA−TCB抗体に関して、表面に高レベルのBCMAを発現する細胞であっても、その殺滅効力は、多発性骨髄腫患者において観察される通り有意に変動されることがあるE:T比によっても影響されうる。
フローサイトメトリーによる骨髄腫患者骨髄吸引物におけるCD3+T細胞対CD138+CD38+骨髄腫細胞(E:T)比の決定
(実施例2.1.1)
骨髄腫患者骨髄吸引物における骨髄腫細胞の測定
骨髄腫患者における骨髄浸潤悪性形質細胞の百分率および絶対数を決定するために、単離されたばかりの骨髄吸引物を使用して免疫表現型分析を行った。赤血球を溶解しK3−EDTA(エチレンジアミン四酢酸)で抗凝集処理された全骨髄試料を免疫表現型分析に使用した。CD138+CD38+CD45+CD56+CD19−として識別された悪性形質細胞の特異的識別および免疫表現型特徴付けを目標とした、直接免疫蛍光技法およびマルチカラー染色を使用して、チューブ当たり合計2×106個の細胞を染色した。続いて、少なくともCD138−APCC750/CD38−FITC/CD56−PE/CD19−PerCP−Cy7/CD45−V450を含む蛍光色素コンジュゲート抗体のパネルを使用して、20〜30分間氷上で遮光して、骨髄細胞を染色した。使用した蛍光色素標識された抗体は、BD Biosciences(San Jose、CA)およびCaltag Laboratories(San Francisco CA)から購入した。マルチカラーフローサイトメーターおよびインストールされたソフトウェア(例えば、FACS Divaソフトウェアを実行するCantoIIデバイスまたはCellQUESTソフトウェアを使用するFACS Caliburフローサイトメーター)を使用して取得を行った。Paint−A−Gate PROプログラム(BD Biosciences)をデータ分析に使用した。CD138+CD38+CD45+CD56+CD19−集団におけるゲーティングにより、悪性形質細胞の百分率を決定した。悪性形質細胞の絶対数を計算するために、悪性形質細胞の百分率に、例えば、血液学分析器(Advia(登録商標)120 System、Siemens)により測定された骨髄吸引物試料の容量を乗じた。いくつかの実験において、Trucount(商標)チューブ(BD Biosciences、San Jose CA USA)を使用して、血液中の白血球の絶対数を決定した。
骨髄腫患者骨髄吸引物におけるT細胞およびT細胞サブセットの測定
BCMA−TCBに関して、エフェクター細胞は主に、多くのT細胞サブセットを含むT細胞である。T細胞およびT細胞サブセットの百分率および絶対数を決定するために、単離されたばかりの骨髄吸引物を使用して、免疫表現型分析を行った。赤血球を溶解しK3−EDTA(エチレンジアミン四酢酸)で抗凝集処理された全骨髄試料を免疫表現型分析に使用した。CD45+CD3+CD56−またはCD3+またはCD45+CD19−CD56−として識別されうるT細胞の特異的識別および免疫表現型特徴付けを目標とした、直接免疫蛍光技法およびマルチカラー染色を使用して、チューブ当たり合計2×106個の細胞を染色した。続いて、CD138−APCC750/CD38−FITC/CD56−PE/CD19−PerCP−Cy7/CD45−V450を含む蛍光色素コンジュゲート抗体のパネルを使用して、20〜30分間氷上で遮光して、骨髄細胞を染色した。使用した蛍光色素標識された抗体は、BD Biosciences(San Jose、CA)およびCaltag Laboratories(San Francisco CA)から購入した。マルチカラーフローサイトメーターおよびインストールされたソフトウェア(例えば、FACS Divaソフトウェアを実行するCantoIIデバイスまたはCellQUESTソフトウェアを使用するFACS Caliburフローサイトメーター)を使用して取得を行った。Paint−A−Gate PROプログラム(BD Biosciences)をデータ分析に使用した。CD45+CD19−CD56−集団におけるゲーティングにより、骨髄浸潤T細胞の百分率を決定した。T細胞の絶対数を計算するために、T細胞の百分率に、骨髄吸引物試料の容量を乗じた。
BCMA−TCBの殺滅効力は、H929骨髄腫標的細胞の表面において検出される高BCMA発現にもかかわらずE:T比によって影響される
異なるE:T比および細胞表面において高対低レベルのBCMA発現を有するヒト骨髄腫細胞系を使用して、リダイレクトT細胞細胞傷害性アッセイにおいてBCMA−1−TCBの殺滅効力を測定した。
フローサイトメトリーによって検出される、ヒト骨髄腫細胞系におけるBCMAの定性的測定(蛍光強度中央値)
フローサイトメトリーを使用して、H929およびU266骨髄腫標的細胞の細胞表面におけるBCMAの定性的発現をまず測定した。簡潔に説明すると、細胞を採取し、洗浄し、生存率について計数し、96ウェル丸底プレートに50,000細胞/ウェルとなるよう再懸濁し、10μg/mlの抗ヒトBCMA抗体(Abcam、型番ab54834、マウスIgG1)と共に30分間4℃で(内部化を防止するため)インキュベートした。マウスIgG1をアイソタイプ対照として使用した(BD Biosciences、型番554121)。次に、細胞を遠心分離し(5分間、350×g)、2回洗浄し、FITCコンジュゲート抗マウス二次抗体と共に30分間4℃でインキュベートした。インキュベーション時間の終わりに、細胞を遠心分離し(5分間、350×g)、FACS緩衝液で2回洗浄し、100ulのFACS緩衝液に再懸濁し、FACS Divaソフトウェアを実行するCantoIIデバイスにおいて分析した。図3は、H929およびU266骨髄腫細胞におけるBCMA発現を描写する。両方のヒト骨髄腫細胞系対照に関して陰性と比較して右への明らかなシフトが見られ、H929細胞はBCMAhi発現細胞であり、U266はBCMAmed/lo発現細胞である。
フローサイトメトリーによって検出される、ヒト骨髄腫細胞系におけるBCMAの定量的測定(特異的抗原結合能SABC)
フローサイトメトリーを使用して、ヒト骨髄腫細胞系の細胞表面におけるBCMAの定量的発現、すなわち、BCMAの特異的抗原結合能(SABC)も測定した。Qifikit(Dako、型番K0078)方法を使用して、H929(ATCC(登録商標)CRL−9068(商標))およびU266(ATCC(登録商標)TIB−196(商標))ヒト骨髄腫細胞系の細胞表面におけるBCMA抗原コピー数を定量化した。細胞をFACS緩衝液(100μl/ウェル;350×g、5分間)で1回洗浄し、100万(Mio)個の細胞/mlとなるように調整した。示されている通りに、96丸底ウェルプレートの各ウェルに50μl(=50万個の細胞)の細胞懸濁液を移す。続いて、最終濃度25μg/ml(または飽和濃度)となるようFACS緩衝液(PBS、0.1%のBSA)に希釈した50μlのマウス抗ヒトBCMA IgG(BioLegend型番357502)またはマウスIgG2aアイソタイプ対照(BioLegend型番401501)を添加し、30分間4℃で暗所にて染色を行う。次に、100μlのセットアップまたは較正ビーズを別々のウェルに添加し、細胞をビーズと共にFACS緩衝液で2回洗浄する。Qifikitによって提供されるフルオレセインコンジュゲート抗マウス二次抗体(飽和濃度)を含有する25μlのFACS緩衝液に、細胞およびビーズを再懸濁する。45分間4℃で暗所にて、細胞およびビーズを染色する。細胞を1回洗浄し、100μlのFACS緩衝液に全試料を再懸濁する。マルチカラーフローサイトメーターおよびインストールされたソフトウェア(例えば、FACS Divaソフトウェアを実行するCantoIIデバイスまたはCellQUESTソフトウェアを使用するFACS Caliburフローサイトメーター)において試料を分析する。表7に示す通り、BCMAmed/lo発現骨髄腫細胞として定義されたU266とは対照的に、H929細胞は、他の骨髄腫細胞系よりも最大5〜6倍高い最高密度でヒトBCMAを発現し、BCMAhi発現H929として定義された。BCMA定量的発現(SABC)は、BCMA定性的発現(相対MFI)と十分に相関した。
リダイレクトT細胞細胞傷害性アッセイにおけるBCMA−TCBの効力は、E:T比によって影響される
BCMA−TCB抗体の殺滅効力におけるE:T比の影響を検査した。簡潔に説明すると、ヒトBCMAhi発現H929およびBCMAmid/lo発現U266多発性骨髄腫標的細胞を細胞解離緩衝液により採取し、10%のウシ胎仔血清(Invitrogen)を補充したRPMIにおいて洗浄および再懸濁した。丸底96ウェルプレートにおいてウェル当たりおよそ30,000個の細胞を蒔き、所望の最終濃度のために構築物のそれぞれの希釈物を添加した(3連で);0.1pM〜100nMの範囲の最終濃度。適切な比較のために、全TCB構築物および対照を同じ容積モル濃度となるように調整した。ヒト総T細胞(エフェクター)をウェルに添加して、最終E:T比5:1を得た。10:1、2.5:1、1:1を含む異なるE:T比で、エフェクター細胞としてヒトPBMCを使用した。陰性対照群は、エフェクターまたは標的細胞のみによって表された。ヒト汎T細胞の活性化の陽性対照として、1μg/ml PHA−M(Sigma型番L8902)を使用した。正規化のため、細胞死を誘導する最終濃度の1%Triton X−100と標的細胞とのインキュベーションにより、H929 MM標的細胞の最大溶解(=100%)を決定した。最小溶解(=0%)は、エフェクター細胞のみと共インキュベートされた、すなわち、T細胞二特異性抗体全くなしの標的細胞によって表された。37℃、5%CO2における24時間インキュベーション後に、続いて、LDH検出キット(Roche Applied Science)により、製造元の指示書に従い、アポトーシス性骨髄腫標的細胞から上清へのLDH放出を測定した。濃度応答曲線において、LDH放出の百分率をBCMA−TCB抗体の濃度に対してプロットした。Prismソフトウェア(GraphPad)を使用してEC50値を測定し、最大LDH放出の50%をもたらすTCB抗体濃度として決定した。表8に示す通り、BCMAhi発現H929細胞およびBCMAmid/lo発現U266細胞を殺滅するBCMA−1−TCBの効力は、影響された、すなわち、BCMA−1−TCBの殺滅効力は、E:T比が縮小するにつれて低減された。殺滅効力の低減(すなわち、EC50値の増大)は、BCMAmid/lo発現U266細胞系においてより顕著であり、E:T比が10:1から2.5:1および1:1へと低減された場合、BCMA−1−TCB殺滅能力は失われた。
ELISAに基づく方法による骨髄腫患者血清/血漿および骨髄吸引物における可溶性BCMAの検出
健康個体と比較して、無処置多発性骨髄腫患者の血清において、高レベルの可溶性BCMAが見出される可能性があり、可溶性レベルは、一部の患者では120ng/mLまで上昇する(Sanchezら、Brit J Haematol、2012年)。T細胞二特異性抗体は、in vitroの細胞に基づくアッセイにおいてフェムトモルからピコモルの有効性を有する非常に強力な分子であるため、効果的な臨床用量は、患者に非常に低い用量で与えられることが予想され(Bargouら、Science、2008年;321巻(5891号);974〜7頁)、よって、骨髄腫患者におけるこのような可溶性BCMAは、BCMA−TCB抗体に結合して、それが骨髄腫細胞の細胞表面におけるBCMAに結合するのを妨げることにより、BCMA−TCB抗体の効力に影響を与えることができ、そのためリダイレクトT細胞の悪性形質細胞殺滅が妨げられる。
骨髄腫患者血清/血漿および骨髄吸引物における可溶性BCMAの測定
地域の倫理審査委員会によるガイドラインおよびヘルシンキ宣言に従い、説明同意文書の署名を得た後で、多発性骨髄腫患者から末梢血および骨髄吸引物を収集する。Corvac(商標)血清分離器チューブ(Becton Dickinson)から遠心分離によって血清を単離し、使用まで−80℃で保存する。ヘパリン処置したチューブ内に骨髄吸引物または血液を収集し、遠心分離し、上清を収集し、使用まで−80℃で保存する。いくつかの実験において、可溶性BCMA測定のためのアッセイに先立ち、患者骨髄吸引物を最大48時間培養する。BCMA酵素結合免疫吸着測定法(ELISA)(R&D Systems、カタログ番号DY193E)によって、血清、血漿および上清試料を分析する。血清/血漿/骨髄試料を1:50に希釈し、製造元のプロトコールに従い、BCMA ELISAアッセイを行った。450nmに設定したプレートリーダーを使用して、ELISAプレートを分析する。値は、各検体につき3連の試料の平均を表す。注目すべきことに、この特異的BCMA ELISAキットは、組換えヒトAPRILもしくはBAFF、組換えヒトTACI/Fcまたは組換えマウスBCMA/FcもしくはマウスBCMAと交差反応しない。マウスモノクローナル抗ヒトBCMA抗体(カタログ番号WH0000608M1;Sigma−Aldrich)またはBCMA ELISAにおいて提供されるポリクローナル捕捉抗体を使用して、BCMA抗原標準または骨髄腫患者由来の血清/血漿/骨髄(1:50希釈)をインキュベートする。続いて、BCMA ELISAプロトコールに従って試料をアッセイする。表8.1は、培養下の(およそ48時間)無処置骨髄腫患者骨髄吸引物の上清において測定される可溶性BCMAのレベルを要約する。
BCMA−TCB抗体が、骨髄腫患者血清/血漿および骨髄吸引物における可溶性BCMAに結合するか否かに関する検証
捕捉抗体として使用されるヒトBCMA ECDに対するポリクローナルBCMA抗体および検出抗体としてBCMA−TCB二特異性抗体のBCMA結合剤を表すBCMA抗体による捕捉サンドイッチELISA方法を使用して、以前に収集し−80℃で保存した、可溶性BCMAを含有する骨髄腫患者血清/血漿および骨髄吸引物上清試料を、BCMA−TCB抗体への結合に関して検査する。簡潔に説明すると、ポリクローナル捕捉BCMA抗体を、炭酸塩/炭酸水素塩緩衝液(pH9.6)における1〜10μg/mLの濃度でPVCマイクロタイタープレートに固定化する。次に、プレートを接着性プラスチックで覆い、一晩4℃でインキュベートする。続いてコーティング溶液を除去し、ウェルを200μlのPBSで満たすことにより、プレートを2回洗浄する。シンクの上でプレートを振ることにより、溶液または洗浄液を除去する。ペーパータオルの上でプレートを軽く叩くことにより、残っている液滴を除去する。次に、ウェル当たり200μlのブロッキング緩衝液である5%脱脂粉乳/PBSを添加することにより、コーティングされたウェルに残っているタンパク質結合部位をブロッキングする。続いてプレートを接着性プラスチックで覆い、少なくとも1〜2時間室温でまたは一晩4℃でインキュベートする。可溶性BCMA含有骨髄腫患者血清/血漿および骨髄吸引物上清試料由来の100μlの適切に希釈された試料を各ウェルに2連で添加する。標準およびブランクを各プレートで実行する。次に、マイクロプレートを90分間37℃でインキュベートする。次に、試料を除去し、200μlのPBSでウェルを満たすことにより、プレートを2回洗浄する。BCMA−TCB二特異性抗体のBCMA結合剤を表すBCMA抗体からなる、100μlの希釈したビオチンコンジュゲート検出抗体を各ウェルに添加する。次に、プレートを接着性プラスチックで覆い、2時間室温でインキュベートする。プレートをPBSで4回洗浄する。洗浄後に、西洋わさびペルオキシダーゼ(HRP)またはアルカリホスファターゼ(ALP)にコンジュゲートされた100μlのストレプトアビジンをウェルに添加する。HRPまたはALPコンジュゲートされたストレプトアビジンは、使用直前に最適濃度となるようブロッキング緩衝液に希釈する。次に、プレートを接着性プラスチックで覆い、1〜2時間室温でインキュベートする。続いてプレートをPBSで4回洗浄する。ALP基質としてpNPP(p−ニトロフェニル−リン酸)を使用し、ウェルに添加し、室温で15〜30分間インキュベートする。続いて、等容量の0.75M NaOHを添加することにより反応を停止する。次に、プレートリーダーを使用して、405nmでプレートを測定する。HRP基質に対しては、過酸化水素を使用し、450nmで最適密度を読み取る。次に、濃度をx軸(対数目盛り)対吸光度をY軸(線形)にした系列希釈から作成されるデータの標準曲線を用意する。
骨髄腫患者血清/血漿および骨髄における可溶性APRILまたはBAFFの検出
多発性骨髄腫など、ある特定の造血器悪性腫瘍において、循環BCMAリガンドAPRILおよびBAFFのレベルは上昇されうる(Moreauxら、2004年;Blood、103巻(8号):3148〜3157頁)。よって、本発明者らは、血清/血漿中の高レベルのリガンドが、腫瘍細胞におけるBCMA受容体へのBCMA−TCB抗体の結合に干渉しうることを認識する。健康なドナーと比較して、多発性骨髄腫患者血液における循環APRIL(BCMAに対する高アフィニティーリガンド)のレベルは、約100ng/mL(約10ng/mLに対して)である。BAFF(BCMAに対する低アフィニティーリガンド)に関しては、レベルは、健康なドナーの約3ng/mLと比較して、1〜1000ng/mLに増減しうる。腫瘍細胞近く、すなわち、多発性骨髄腫患者の骨髄微小環境において(骨髄は、APRILが構成的に豊富な臓器である)、APRIL/BAFF濃度は、血清において測定されるレベルよりもはるかに高くなりうる。より重要なことに、APRILは、骨髄微小環境において構成的に発現され、悪性骨髄腫細胞に対する重要な生存因子であり、また、骨髄の骨髄系前駆体細胞によって主に産生および分泌される(Matthesら、Blood、2011年;118巻(7号):1838〜1844頁)。よって、最大1000ng/mLまたはそれよりもさらに高いより大きな度合いのものであることが予想される、骨髄腫患者の骨髄におけるAPRILの濃度は、この文脈において強い関連性がある。全身性エリテマトーデスなど、ある特定の自己免疫疾患において、約85ng/mLによる循環APRILのレベルも上昇される(Koyamaら、2005年;Ann Rheum Dis、64巻:1065〜1067頁)。
ELISAに基づく方法により骨髄腫患者の血清/血漿または骨髄吸引物において様々なレベルの可溶性APRILを測定することができる
地域の倫理審査委員会によるガイドラインおよびヘルシンキ宣言に従い、説明同意文書の署名を得た後で、多発性骨髄腫患者から末梢血および骨髄吸引物を収集する。Corvac(商標)血清分離器チューブ(Becton Dickinson)から遠心分離によって血清を単離し、使用まで−80℃で保存する。ヘパリン処置したチューブに骨髄吸引物および血液を収集し、遠心分離し、上清を収集し、使用まで−80℃で保存する。いくつかの実験において、可溶性APRIL測定のアッセイに先立ち、患者骨髄吸引物を最大48時間培養する。APRIL酵素結合免疫吸着測定法(ELISA)(R&D Systems、カタログ番号DY884B)によって、血清、血漿および骨髄上清試料を分析する。血清試料を1:50に希釈し、製造元のプロトコールに従い、APRIL ELISAアッセイを行う。450nmに設定したプレートリーダーを使用して、ELISAプレートを分析する。値は、各検体につき2回連または3連の試料の平均を表す。APRIL ELISAキットに提供される捕捉抗体を使用して、APRIL抗原標準または骨髄腫患者由来の血清/血漿もしくは骨髄吸引物上清(1:50希釈)をインキュベートする。次に、APRIL ELISAプロトコールに従って試料をアッセイする。
可溶性APRILは、BCMA陽性骨髄腫標的細胞を殺滅するAPRIL競合/遮断BCMA−TCB抗体の効力に影響する
APRIL遮断/競合BCMA−TCB抗体の殺滅効力が、可溶性APRILによって影響されるか検証するために、多発性骨髄腫患者に見られる上昇濃度の可溶性APRIL(すなわち、100ng/mL〜1000ng/mL)の存在下において、細胞におけるBCMAへの抗原結合部分の結合を介した構築物の架橋によりBCMA陽性骨髄腫標的細胞のT細胞媒介性殺滅を誘導するその潜在力に関してAPRIL遮断/競合BCMA−TCB抗体を分析した。APRILは、BAFFが受容体に結合するよりも最大1000倍高いアフィニティーでヒトBCMAに結合するため、高濃度の可溶性APRILは、この文脈において、可溶性BAFFの場合よりも関連性がある。特に、治療薬が患者に非常に低い用量で与えられる場合、高レベルの可溶性APRILは、TCB抗体の有効性に影響する可能性が最も高い(Bargouら、Science、2008年;321巻(5891号);974〜7頁)。よって、次の実験を行った。
APRIL遮断/競合J6M0−TCB抗体は、細胞内リン酸化NF−κBによって検出されるAPRIL依存的NF−κB活性化を遮断する(フローサイトメトリー)
BCMA結合剤としてのAPRIL/BAFF競合J6M0により作製されたBCMA−TCB二特異性抗体であるJ6M0−TCB(Tai YTら、Blood、2014年、123巻(29号):3128〜28頁)の殺滅効力における可溶性APRILの効果は、リダイレクトT細胞殺滅アッセイにおいて検査するように計画したが、その前に、実験を実行して、J6M0−TCBが実際に、APRILを遮断しこれと競合することを確認した。J6M0−TCBを検査したところ、APRIL依存的NF−κB活性化を遮断した。Lafargeら、BMC Molecular Biol、2007年;8巻:64頁に記載されている通り、フローサイトメトリーによって細胞内リン酸化NF−κBの検出を測定した。ホスホフローサイトメトリー法は、感度が不十分で面倒なステップを含有するELISAに基づく発光アッセイによるNF−κB活性化の検出の代替法である(PerezおよびNolan.、Nat Biotechnol、2002年;20巻(2号):155〜62頁)。BCMA陽性H929骨髄腫細胞へのJ6M0−TCBの結合が、BCMA受容体の下流の公知の核内因子シグナリング経路であるAPRIL依存的NF−κB活性化を遮断するか査定した。簡潔に説明すると、細胞インキュベーター内で24時間37℃にて、FCSなしのRPMI1640においてH929細胞を飢餓させた。飢餓時間の終わりに、細胞を採取し、計数し、ViCellを使用して細胞生存率を評価した。BSA含有FACS染色緩衝液(BD Biosciences)において1ml当たり1×106個の細胞となるように、生細胞を調整した。丸底96ウェルプレートにおけるウェルごとに100μlのこの細胞懸濁液をさらにアリコート分割し、飽和濃度400nM(77μg/ml)の25μlのJ6M0−TCB抗体またはアイソタイプ対照抗体と共に20分間37℃でインキュベートし、続いて100ng/mLまたは1μg/mL組換えマウスΔ−APRIL(R&D Systems Europe)の直接インキュベーションをさらに15分間37℃で行った。陰性対照として、細胞を無処置のまま放置した、または対応するIgGアイソタイプ対照抗体400nM(77μg/ml)と共に合計45分間37℃でインキュベートした。陽性対照として、細胞を100ng/mLまたは1μg/mL組換えマウスΔ−APRIL単独(R&D Systems Europe)と共に15分間37℃でインキュベートした。刺激の終わりに、細胞を遠心分離し(360×g、4分間)、あらかじめ加温したCytofix緩衝液(BD Biosciences、型番554655)において細胞ペレットを直ちに固定し、37℃で10分間インキュベートした。次に、細胞を遠心分離し、上清を除去し、ボルテックスによって細胞ペレットを破壊した。続いて氷冷Phosflow Perm緩衝液III(BD Biosciences、型番558050)において細胞を30分間氷上で透過処理した。次に細胞を遠心分離し、上清を除去し、ボルテックスによって細胞ペレットを破壊した。細胞を100μLのPhosflow Perm緩衝液IIIに再懸濁し、透過処理した細胞を抗NF−κB p65(pS529)抗体(BD Biosciences、型番558423)またはアイソタイプ対照抗体(マウスIgG2b、κ、BD Biosciences型番555058)で60分間室温にて遮光して染色した。染色期間の後に、フローサイトメトリー分析に先立ちPBS+PBS中の0.1%のBSA+0.1%のBSAで細胞を洗浄した。上述の通りに処置したH929細胞から得た相対蛍光強度中央値を測定した。アイソタイプ対照の存在下におけるΔ−APRILの結合により得た蛍光強度中央値(MFI)シグナルを1に設定した;他のシグナルをこれに対して正規化した。図4に描写されている通り、H929細胞において、1000ng/mL APRIL媒介性NF−κB活性化におけるAPRIL競合BCMA結合性アーム(arm)を有するJ6M0−TCB抗体の効果を検査した。H929細胞への可溶性APRILの添加は、NF−κB活性化を誘導した。APRIL競合BCMA結合性アームJ6M0−TCBにH929細胞を曝露すると、ホスホフローサイトメトリーによって測定されるNF−κB活性化シグナルの少なくとも79.3%減少が見られた。J6M0抗BCMA抗体(WO2012163805)は、APRIL誘導性NF−κB活性化を遮断することが報告された。本結果は、J6M0が、BCMAへの結合に関してAPRILと競合する抗BCMA抗体であり、これが、APRIL下流シグナリングを遮断することを確認する。
高レベルの可溶性APRILは、BCMA発現H929骨髄腫細胞を殺滅するAPRIL競合BCMA−TCB抗体の効力に影響する(比色LDH放出アッセイ)
次に、BCMA結合剤としてのAPRIL/BAFF競合J6M0により作製されたBCMA−TCB二特異性抗体であるJ6M0−TCB(Tai YTら、Blood、2014年、123巻(29号):3128〜28頁)の殺滅効力における可溶性APRILの効果をリダイレクトT細胞殺滅アッセイにおいて検査した。簡潔に説明すると、ヒトBCMA陽性H929多発性骨髄腫標的細胞を細胞解離緩衝液により採取し、10%のウシ胎仔血清(Invitrogen)を補充したRPMIにおいて洗浄および再懸濁した。丸底96ウェルプレートにおいてウェル当たりおよそ30,000個の細胞を蒔き、所望の最終濃度のためにTCB構築物のそれぞれの希釈物を添加した(3連で);最終濃度100ng/mLまたは1000ng/mLのAPRILの存在または非存在下における、0.1pM〜10nMの範囲のJ6M0−TCB抗体の最終濃度。適切な比較のために、全TCB構築物および対照を同じ容積モル濃度となるように調整した。ヒトPBMC(エフェクター)をウェルに添加して、最終E:T比10:1を得た。陰性対照群は、エフェクターまたは標的細胞のみによって表された。ヒト汎T細胞の活性化の陽性対照として、1μg/mL PHA(Sigma型番L8902)を使用した。正規化のため、細胞死を誘導する最終濃度の1%Triton X−100と標的細胞とのインキュベーションにより、H929 MM標的細胞の最大溶解(=100%)を決定した。最小溶解(=0%)は、エフェクター細胞のみと共インキュベートした、すなわち、T細胞二特異性抗体全くなしの標的細胞によって表された。37℃、5%CO2における24時間インキュベーション後に、続いてLDH検出キット(Roche Applied Science)により、製造元の指示書に従い、アポトーシス性/壊死性H929骨髄腫標的細胞から上清へのLDH放出を測定した。濃度応答曲線において、LDH放出の百分率をJ6M0−TCB抗体の濃度に対してプロットした。Prismソフトウェア(GraphPad)を使用してEC50値を測定し、最大LDH放出の50%をもたらすTCB抗体濃度として決定した。図5に示す通り、J6M0−TCB抗体は、外因性可溶性APRILの存在または非存在下において、BCMA陽性H929骨髄腫細胞の殺滅を誘導した。図5に描写されている通り、APRIL遮断/競合J6M0−TCBは、外因性APRILの非存在下において、低ピコモル効力(EC50APRIL0=5.8pM)でBCMA陽性H929骨髄腫の濃度依存的殺滅を誘導した。100ng/mLのAPRILを培養物に添加した場合、このようなリガンド濃度は、EC50の2.4倍増大により示される通り(EC50APRIL100=14.2pM)、J6M0−TCBによって媒介される殺滅効力に最小にしか影響を与えなかった。しかし、1000ng/mLのAPRILを培養物に添加した場合、84.3倍のEC50の増大によって反映される通り(EC50APRIL1000=488.9pM)、J6M0−TCBによって媒介される殺滅効力は、大幅に低減された。表9は、外因性APRILの非存在および存在下におけるAPRIL遮断/競合J6M0−TCBのEC50値を要約する。
可溶性APRILは、T細胞活性化を誘導するAPRIL競合/遮断BCMA−TCB抗体の効力に影響する
フローサイトメトリーによって、T細胞活性化を誘導するAPRIL競合/遮断J6M0−TCBの効力における可溶性APRILの効果も検査した。ヒトBCMA発現MM細胞の存在または非存在において、CD4+およびCD8+T細胞における初期活性化マーカーCD69または後期活性化マーカーCD25の表面発現を評価することにより、T細胞活性化を測定した。簡潔に説明すると、BCMA陽性H929細胞を細胞解離緩衝液により採取し、計数し、生存率をチェックした。改変RPMI−1640培地において1ml当たり0.3×106個の(生)細胞となるように細胞を調整し、ウェル当たり100μlのこの細胞懸濁液をピペットで吸って丸底96ウェルプレートに入れた(示されている通り)。50μlの(希釈した)APRIL競合/遮断J6M0−TCB抗体を細胞含有ウェルに添加して、最終濃度0.3pM〜30nMを得た。健康なドナーの採取したての血液からヒトPBMCエフェクター細胞を単離し、改変RPMI−1640培地において1ml当たり6×106個の(生)細胞となるように調整した。アッセイプレートのウェル当たり50μlのこの細胞懸濁液を添加して、PBMC対骨髄腫腫瘍細胞の最終E:T比10:1を得た。APRIL競合/遮断J6M0−TCB抗体が、ヒトBCMAを発現する標的細胞の存在下において、特異的にT細胞を活性化することができたか分析するために、3nMのJ6M0−TCB抗体と共にPBMCを含有したが、標的細胞を含有しないウェルを含めた。37℃、5%CO2における15〜28時間(CD69)または24〜48時間(CD25)のインキュベーション後に、細胞を遠心分離し(5分間、350×g)、0.1%のBSAを含有する150μl/ウェルのPBSで2回洗浄した。CD4(マウスIgGl、K;クローンRPA−T4)、CD8(マウスIgGl、K;クローンHIT8a;BD型番555635)、CD69(マウスIgGl;クローンL78;BD型番340560)およびCD25(マウスIgGl、K;クローンM−A251;BD型番555434)の表面染色を、供給元の示唆に従い、4℃で30分間行った。0.1%のBSAを含有する150μl/ウェルのPBSで細胞を2回洗浄し、100μl/ウェルの固定緩衝液(BD型番554655)を使用して15分間4℃で固定した。遠心分離後に、0.1%のBSAを有する200μl/ウェルのPBSに試料を再懸濁し、FACS CantoII装置(ソフトウェアFACS Diva)を使用して分析した。図6は、48時間のインキュベーション後の、CD4+およびCD8+T細胞における初期活性化マーカーCD69(B、D)および後期活性化マーカーCD25(A、C)の発現レベルを描写する(2つの独立した実験の代表的な結果)。APRIL競合/遮断J6M0−TCB抗体は、BCMA陽性標的細胞の存在下、外因性可溶性APRILの非存在下において、濃度依存的かつ特異的な様式で、CD69およびCD25活性化マーカーの上方調節を誘導した(四角)。100ng/mLの可溶性APRILを培養物に添加した場合、CD4+およびCD8+T細胞における活性化マーカーCD69およびCD25の両方に関して、濃度応答曲線の右へのわずかなシフトが観察された。1000ng/mLの可溶性APRILを培養物に添加した場合、CD4+およびCD8+T細胞の両方におけるT細胞活性化の明らかな低減が見られた。DP47−TCB対照抗体でヒトPBMCを処置した場合、CD4+およびCD8+T細胞の活性化は観察されず、T細胞におけるCD3への結合にもかかわらず、TCB抗体がBCMA陽性標的細胞に結合しない場合、T細胞活性化が起こらないことを示唆する(データ図示せず)。結果は、特に、BCMA−TCBがAPRILと競合する場合、高レベルの可溶性APRILが、腫瘍標的およびT細胞への結合後にT細胞活性化を誘導するBCMA−TCB抗体の効力を低減することを明らかに示唆する。
骨髄腫患者悪性形質細胞を殺滅するBCMA−1−TCB抗体の効力は、より大きいE:T比および悪性形質細胞におけるより大きいBCMA発現(相対MFI)を有する患者骨髄試料においてより顕著である
地域の倫理審査委員会によるガイドラインおよびヘルシンキ宣言に従い、説明同意文書の署名を得た後で、多発性骨髄腫患者から骨髄吸引物を収集する。骨髄浸潤自家T細胞による骨髄浸潤悪性形質細胞のリダイレクトT細胞殺滅を誘導するBCMA−1−TCB抗体の効力を評価するために、骨髄腫患者から全骨髄試料を収集し、全骨髄試料にBCMA−1−TCB抗体を直接スパイクした。簡潔に説明すると、200μlの全骨髄試料を96ディープウェルプレートに移した。無菌PBSにおいてBCMA−1−TCB抗体および対照抗体希釈物を調製し、0.03pM〜30nMの範囲の最終濃度のために、この調製物をそれぞれのウェルに添加した。全骨髄−抗体懸濁液を穏やかな振とうにより混合し、続いてパラフィンフィルムで密封して、37℃、5%CO2で24時間インキュベートした。インキュベーション期間後に、細胞懸濁液試料をK3−EDTA(エチレンジアミン四酢酸)により赤血球溶解し、免疫表現型分析のために細胞試料を調製した。CD138−APCC750/CD38−FITC/CD5−BV510/CD56−PE/CD19−PerCP−Cy7/CD45−V450/BCMA−APC/アネキシン−V−PerCP−Cy5.5を含む抗体パネルに基づき調製した20μlの対応するFACS抗体溶液を96−U字底プレートに添加した。蛍光色素標識された抗体は、BD Biosciences(San Jose、CA)およびCaltag Laboratories(San Francisco CA)から購入し、自家製のAPCコンジュゲート抗ヒトBCMA抗体を使用した。次に、試料を15分間、暗所で室温にてインキュベートし、マルチレーザーフローサイトメーターを使用して取得および分析を行った。悪性形質細胞集団CD138+CD38+CD45+CD19−CD56+においてゲーティングされるアネキシン−V陽性発現を評価することにより、骨髄腫細胞死を決定した。次に、BCMA−1−TCB二特異性抗体の各濃度における骨髄腫細胞死の百分率を決定した。図7に描写される通り、わずか24時間のインキュベーション後には既に、BCMA−1−TCBは、患者C1(A)および患者C8(B)の両方に由来する悪性形質細胞の濃度依存的かつ特異的殺滅を誘導した。しかし、骨髄腫細胞の殺滅は、患者C1骨髄試料において、患者C8骨髄試料よりも顕著であった。これは、患者C1骨髄試料における、不利な0.5:1のE:T比および骨髄腫細胞におけるより弱いBCMA発現(すなわち、相対MFI値1489)を有する患者C8骨髄試料よりも有利な11:1のE:T比およびBCMA発現(すなわち、相対MFI値2636)に起因しうる。結果は、患者骨髄におけるE:T比の測定と組み合わせた、悪性形質細胞におけるBCMA発現の測定が、骨髄腫患者がBCMA−TCB処置に応答できるかについてより正確に予測しうることを示唆する。
BCMA−1−TCBに対する患者骨髄試料の応答性に関する患者生物学的パラメータ(骨髄腫細胞におけるBCMA相対発現、E:T比、可溶性APRILおよび可溶性BCMA)
中程度の相対MFI(1000〜5000の範囲)を有する試料は、薬物に71.4%(5/7)応答し、低BCMA発現(相対MFI<1000)を有する試料は、薬物に33.3%(1/3)応答する。有利なE:T比(E:T>1)を有する患者試料は、薬物に66.7%(4/6)応答する。不利なE:T比<1を有する患者試料は、薬物に60%(3/5)応答する。少なくとも2種の生物学的パラメータの組合せを評価した。骨髄腫細胞における有利なBCMA発現および有利なE:T比の両方が、薬物応答予測に使用された場合、75%(3/4)の相関が見出された。
Claims (27)
- 多発性骨髄腫疾患を患う患者の処置における使用のための、ヒトB細胞成熟抗原(さらにまた、「BCMA」とも称する)の細胞外ドメイン、およびヒトCD3ε(さらにまた、「CD3」とも称する)に特異的に結合する二特異性抗体であって、前記疾患が、CD138+CD38+細胞を含む前記患者の単離された体液試料において、前記二特異性抗体の抗BCMA抗体部分のKd値の0.70〜1.3倍であるKd値を有する抗BCMA抗体を使用することによって測定される、前記CD138+CD38+細胞におけるBCMA発現が、相対蛍光強度中央値または平均蛍光強度MFIとして決定されるベースラインを、80またはそれ超上回ることを特徴とする二特異性抗体。
- 多発性骨髄腫疾患を患う患者の処置における使用のための、ヒトBCMAの細胞外ドメイン、およびヒトCD3εに特異的に結合する二特異性抗体であって、前記疾患が、前記患者の単離された体液試料において、標的細胞に対するT細胞(エフェクター細胞)の比(E:T比)が、0.35:1またはそれより高いことを特徴とする二特異性抗体。
- 前記E:T比が、0.35:1〜22:1であることを特徴とする、請求項2に記載の使用のための二特異性抗体。
- 多発性骨髄腫疾患を患う患者の処置における使用のための、ヒトBCMAの細胞外ドメイン、およびヒトCD3εに特異的に結合する二特異性抗体であって、前記疾患が、前記患者由来の単離された体液試料において、可溶性BCMAの量が、2.5ng/mLまたはそれより高く、前記患者試料における前記可溶性BCMAが、前記二特異性抗体に特異的に結合することを特徴とし、前記二特異性抗体による前記患者の前記処置が、1.5倍から最大10倍である1週間当たりの用量で行われるか、または/および用量投与間の時間間隔が、標準用量と比較して、1週間に1回投与から最大1日に1回までに短縮されることを特徴とする二特異性抗体。
- 前記二特異性抗体による前記患者の前記処置が、標準用量と比較して、1.5倍から最大2.0倍である1週間当たりの用量で行われることを特徴とする、請求項4に記載の使用のための二特異性抗体。
- 前記二特異性抗体による前記患者の前記処置が、用量投与間の時間間隔が前記標準用量と比較して、1週間に1回投与から最大1週間に2回まで短縮されて行われることを特徴とする、請求項4に記載の使用のための二特異性抗体。
- 多発性骨髄腫疾患を患う患者の処置における使用のための、ヒトBCMA受容体への結合に関して可溶性BCMAと競合するか、そして/またはNF−κBのAPRIL媒介性活性化を遮断する、BCMAおよびCD3εに特異的に結合する二特異性抗体であって、前記疾患が、前記患者由来の単離された体液試料において、APRILの量が、10ng/mLよりも高く、最大100ng/mLであることを特徴とし、前記二特異性抗体による前記患者の前記処置が、1週間につき、1.5倍から最大20倍の用量で行われる、または/および用量投与間の時間間隔が、標準用量と比較して、1週間に1回投与から最大1日に1回までに短縮されることを特徴とする二特異性抗体。
- 前記二特異性抗体による前記患者の前記処置が、標準用量と比較して、1.5倍から最大3.0倍である1週間当たりの用量で行われることを特徴とする、請求項7に記載の使用のための二特異性抗体。
- 前記二特異性抗体による前記患者の前記処置が、用量投与間の時間間隔が、前記標準用量と比較して、1週間に1回投与から最大1週間に3回までに短縮されて行われることを特徴とする、請求項7に記載の使用のための二特異性抗体。
- ヒトBCMA受容体への結合に関して可溶性BCMAと競合する、BCMAおよびCD3εに特異的に結合する二特異性抗体であって、前記抗体がBCMAへの結合に関してAPRILと競合し、それによって前記抗体が、BCMAへの結合に関してAPRILと競合するか、そして/またはNF−κBのAPRIL媒介性活性化を遮断する、多発性骨髄腫疾患を患う患者の処置における使用のための二特異性抗体であり、前記疾患が、形質細胞およびT細胞を含む前記患者の単離された体液試料において、APRILの量が、少なくとも100ng/mLから最大1000ng/mLであることを特徴とし、前記二特異性抗体による前記患者の前記処置が、1.5倍から最大80倍の用量により行われるか、または/および用量投与間の時間間隔が、標準用量と比較して、1週間に1回投与から最大1日に1回までに短縮されることを特徴とする二特異性抗体。
- 前記二特異性抗体による前記患者の前記処置が、標準用量と比較して、1.5倍から最大10倍である1週間当たりの用量で行われることを特徴とする、請求項10に記載の使用のための二特異性抗体。
- 前記二特異性抗体による前記患者の前記処置が、用量投与間の時間間隔が、前記標準用量と比較して、1週間に1回投与から最大1日に1回までに短縮されて行われることを特徴とする、請求項10に記載の使用のための二特異性抗体。
- 形質細胞が関与する障害を患う患者の処置における使用のための、ヒトBCMAの細胞外ドメイン、およびヒトCD3に特異的に結合する二特異性抗体であって、CD138+CD38+細胞を含む前記患者の単離された体液試料において、前記二特異性抗体の抗BCMA抗体部分のKd値の0.70〜1.3倍であるKd値を有する抗BCMA抗体を使用することによって測定される、前記CD138+CD38+細胞におけるBCMA発現が、相対蛍光強度中央値または平均蛍光強度MFIとして決定されるベースラインを、80またはそれ超上回る二特異性抗体。
- 前記二特異性抗体が、その重鎖および軽鎖CDRとして、前記抗BCMA抗体と同じアミノ酸配列のCDRを含むことを特徴とする、請求項1から13のいずれか一項に記載の使用のための二特異性抗体。
- 形質細胞が関与する障害を患う患者の処置における使用のための、ヒトBCMAの細胞外ドメイン、およびヒトCD3εに特異的に結合する二特異性抗体であって、前記患者の単離された体液試料において、標的細胞に対するT細胞(エフェクター細胞)の比(E:T比)が、0.35:1〜22:1である二特異性抗体。
- 形質細胞が関与する障害を患う患者の処置における使用のための、ヒトBCMAの細胞外ドメイン、およびヒトCD3εに特異的に結合する二特異性抗体であって、前記処置が、
i)前記患者から、体液試料を単離するステップと、
ii)前記試料における可溶性BCMAの量を測定するステップと、
iii)前記試料における可溶性BCMAの量が、2.5ng/mLまたはそれより高い場合、また、
iv)前記患者試料における前記可溶性BCMAが、前記二特異性抗体に特異的に結合する場合、標準用量と比較して、1.5〜10倍もしくは1.5〜2.0倍である毎週の用量、および/または1週間に1回投与から1週間に2回もしくはさらには1週間に3回もしくは1日に1回へと短縮された用量投与間の時間間隔で、前記二特異性抗体により前記患者を処置するステップと
を連続的に含む二特異性抗体。 - ヒトBCMA受容体への結合に関して可溶性BCMAと競合する、BCMAおよびCD3εに特異的に結合する二特異性抗体であって、前記抗体が、BCMAへの結合に関してAPRILと競合するか、そして/またはNF−κBのAPRIL媒介性活性化を遮断する、形質細胞が関与する障害を患う患者の処置における使用のための二特異性抗体であり、前記処置が、
i)前記患者から、形質細胞およびT細胞を含む体液試料を単離するステップと、
ii)ELISA方法の使用により、前記試料におけるAPRILの量を測定するステップと、
iii)前記患者試料におけるAPRILの量が、10ng/mLを下回る可溶性APRIL濃度を有する患者に推奨される用量と比較して、10ng/mLよりも高く、最大100ng/mLである場合は2倍高い毎週の用量で、APRIL濃度が、1000ng/mLまで増大する場合は最大80倍高いさらに増大された用量で前記二特異性抗体により前記患者を処置するステップ、またはより高い前記用量に達するようにそれぞれのより高頻度の処置スケジュールにより、前記二特異性抗体のいずれか2用量間のより短い期間で前記患者を処置するステップと
を連続的に含む二特異性抗体。 - 形質細胞が関与する障害を患う患者のCD138+CD38+細胞を含む単離された体液試料におけるBCMAタンパク質発現を決定する方法であって、前記患者の処置における使用に意図される、ヒトBCMAの細胞外ドメイン、およびヒトCD3εに特異的に結合する二特異性抗体の抗BCMA抗体部分のKd値の0.70〜1.3倍であるKd値を有する抗BCMA抗体を使用することによって、前記CD138+CD38+細胞におけるBCMA発現を測定するステップと、相対蛍光強度中央値または平均蛍光強度MFIが、ベースラインを、80またはそれ超上回るか否かを決定するステップを含む方法。
- 単離された体液試料における細胞表面BCMA発現を決定するin vitro方法であって、BCMAおよびCD3εに特異的に結合する治療用二特異性抗体の抗BCMA抗体部分のKd値の0.70〜1.3倍であるKd値を有する抗BCMA抗体を使用して、前記CD138+CD38+細胞の相対蛍光強度中央値または平均蛍光強度MFIが、ベースラインを、80またはそれ超上回るか否かを決定するステップを含むin vitro方法。
- 形質細胞が関与する障害を患う患者の単離された体液試料において、CD138+CD38+細胞に対するCD3+細胞の比が、0.35:1またはそれより高いか否かを決定するための方法。
- 形質細胞が関与する障害を患う患者の単離された体液試料において、CD138+CD38+細胞に対するCD3+細胞の比が、0.35:1またはそれより高いか否かを決定するin vitro方法。
- 形質細胞が関与する障害を患う患者のCD138+CD38+細胞を含む単離された体液試料において、前記試料における可溶性BCMAの量が、2.5ng/mLまたはそれより高いか否かを決定する方法。
- 形質細胞が関与する障害を患う患者の単離された体液試料において、前記試料における可溶性BCMAの量が、2.5ng/mLまたはそれより高いか否かを決定するin vitro方法。
- 形質細胞が関与する障害を患う患者のCD138+CD38+細胞を含む単離された体液試料において、前記試料における可溶性APRILの量が、80ng/mLまたはそれより高いか否かを決定する方法。
- 細胞表面BCMA発現の決定に使用するためのキットであって、1種はCD138に、1種はCD38に、1種はCD19に、1種は、BCMAおよびCD3εに特異的に結合する治療用二特異性抗体の抗BCMA抗体部分のKd値の0.70〜1.3倍であるKd値で抗BCMA抗体に特異的に結合する、4種の標識抗体をあらかじめ充填したバイアルまたはチューブを含むキット。
- E:T比の決定に使用するためのキットであって、1種はCD138に、1種はCD38に、1種はCD19に、1種はCD3に特異的に結合する、悪性PCおよびT細胞を検出するための4種の標識抗体をあらかじめ充填したバイアルまたはチューブを含むキット。
- 可溶性BCMAの決定に使用するためのキットであって、捕捉抗体としてのポリクローナル抗BCMA抗体と、BCMAおよびCD3εに特異的に結合する治療用二特異性抗体の抗BCMA抗体部分のKd値の0.70〜1.3倍であるKd値を有する検出抗BCMA抗体とを含むキット。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2021069083A JP2021120374A (ja) | 2014-12-03 | 2021-04-15 | 疾患の処置における使用のためのcd3イプシロンおよびbcmaに対する二重特異的抗体 |
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
EP14196168.0A EP3029068A1 (en) | 2014-12-03 | 2014-12-03 | Bispecific antibodies against CD3epsilon and BCMA for use in the treatment of diseases |
EP14196168.0 | 2014-12-03 | ||
PCT/EP2015/078388 WO2016087531A1 (en) | 2014-12-03 | 2015-12-02 | Bispecific antibodies against cd3epsilon and bcma for use in treatment of diseases |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2021069083A Division JP2021120374A (ja) | 2014-12-03 | 2021-04-15 | 疾患の処置における使用のためのcd3イプシロンおよびbcmaに対する二重特異的抗体 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2018508462A true JP2018508462A (ja) | 2018-03-29 |
JP2018508462A5 JP2018508462A5 (ja) | 2019-01-17 |
Family
ID=52002823
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2017529627A Pending JP2018508462A (ja) | 2014-12-03 | 2015-12-02 | 疾患の処置における使用のためのcd3イプシロンおよびbcmaに対する二特異性抗体 |
JP2021069083A Pending JP2021120374A (ja) | 2014-12-03 | 2021-04-15 | 疾患の処置における使用のためのcd3イプシロンおよびbcmaに対する二重特異的抗体 |
Family Applications After (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2021069083A Pending JP2021120374A (ja) | 2014-12-03 | 2021-04-15 | 疾患の処置における使用のためのcd3イプシロンおよびbcmaに対する二重特異的抗体 |
Country Status (10)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US20170327580A1 (ja) |
EP (3) | EP3029068A1 (ja) |
JP (2) | JP2018508462A (ja) |
KR (1) | KR20170109535A (ja) |
CN (1) | CN107406505A (ja) |
AU (2) | AU2015357122B2 (ja) |
CA (1) | CA2969560A1 (ja) |
ES (1) | ES2959635T3 (ja) |
SG (1) | SG11201704572UA (ja) |
WO (1) | WO2016087531A1 (ja) |
Families Citing this family (64)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR101681818B1 (ko) | 2011-08-23 | 2016-12-01 | 로슈 글리카트 아게 | T 세포 활성화 항원 및 종양 항원에 대해 특이적인 이중특이적 항체 및 이의 사용 방법 |
CA2879768A1 (en) | 2012-10-08 | 2014-04-17 | Roche Glycart Ag | Fc-free antibodies comprising two fab-fragments and methods of use |
RS59992B1 (sr) | 2013-02-26 | 2020-04-30 | Roche Glycart Ag | Bispecifični antigen vezujući molekuli koji aktiviraju t ćelije specifični za cd3 i cea |
AU2015299163B2 (en) | 2014-08-04 | 2019-07-18 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Bispecific T cell activating antigen binding molecules |
WO2016055592A1 (en) | 2014-10-09 | 2016-04-14 | Engmab Ag | Bispecific antibodies against cd3epsilon and ror1 |
BR112017010324A2 (pt) | 2014-11-20 | 2018-05-15 | F. Hoffmann-La Roche Ag | método para tratar ou retardar a progressão de um câncer em um indivíduo, moléculas, métodos para aumentar a função imune em um indivíduo e para selecionar um paciente para tratamento, kits, composição farmacêutica e usos de uma combinação de uma molécula |
KR102528825B1 (ko) | 2015-04-13 | 2023-05-08 | 화이자 인코포레이티드 | B-세포 성숙 항원을 표적화하는 키메라 항원 수용체 |
US9969809B2 (en) | 2015-04-13 | 2018-05-15 | Pfizer Inc. | Therapeutic antibodies and their uses |
FI3298033T4 (fi) | 2015-05-18 | 2023-09-22 | Tcr2 Therapeutics Inc | Koostumuksia ja lääkinnällisiä käyttöjä fuusioproteiineja käyttävälle tcr:n uudelleenohjelmoinnille |
AR106188A1 (es) | 2015-10-01 | 2017-12-20 | Hoffmann La Roche | Anticuerpos anti-cd19 humano humanizados y métodos de utilización |
AU2016329111A1 (en) | 2015-10-02 | 2018-02-08 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Bispecific anti-CEAXCD3 T cell activating antigen binding molecules |
BR112018003984A2 (pt) | 2015-12-09 | 2018-09-25 | Hoffmann La Roche | anticorpos |
EP3400246B1 (en) | 2016-01-08 | 2020-10-21 | H. Hoffnabb-La Roche Ag | Methods of treating cea-positive cancers using pd-1 axis binding antagonists and anti-cea/anti-cd3 bispecific antibodies |
RS64266B1 (sr) | 2016-03-22 | 2023-07-31 | Hoffmann La Roche | Bispecifični molekul koji aktivira t ćeliju koji se aktivira proteazom |
US11623958B2 (en) | 2016-05-20 | 2023-04-11 | Harpoon Therapeutics, Inc. | Single chain variable fragment CD3 binding proteins |
CN109641047A (zh) | 2016-05-20 | 2019-04-16 | 哈普恩治疗公司 | 单结构域血清白蛋白结合蛋白质 |
CN109715668A (zh) | 2016-08-02 | 2019-05-03 | T细胞受体治疗公司 | 用于使用融合蛋白进行tcr重编程的组合物和方法 |
WO2018060301A1 (en) | 2016-09-30 | 2018-04-05 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Bispecific antibodies against cd3 |
GB2564823B8 (en) | 2016-10-07 | 2022-06-29 | Tcr2 Therapeutics Inc | Compositions and methods for TCR reprogramming using fusion proteins |
WO2018083204A1 (en) | 2016-11-02 | 2018-05-11 | Engmab Sàrl | Bispecific antibody against bcma and cd3 and an immunological drug for combined use in treating multiple myeloma |
JP7291396B2 (ja) | 2016-11-22 | 2023-06-15 | ティーシーアール2 セラピューティクス インク. | 融合タンパク質を用いたtcrの再プログラミングのための組成物及び方法 |
WO2018144535A1 (en) | 2017-01-31 | 2018-08-09 | Novartis Ag | Treatment of cancer using chimeric t cell receptor proteins having multiple specificities |
WO2018160754A2 (en) | 2017-02-28 | 2018-09-07 | Harpoon Therapeutics, Inc. | Inducible monovalent antigen binding protein |
US20200179511A1 (en) | 2017-04-28 | 2020-06-11 | Novartis Ag | Bcma-targeting agent, and combination therapy with a gamma secretase inhibitor |
EP3615055A1 (en) | 2017-04-28 | 2020-03-04 | Novartis AG | Cells expressing a bcma-targeting chimeric antigen receptor, and combination therapy with a gamma secretase inhibitor |
EP3621994A4 (en) | 2017-05-12 | 2020-12-30 | Harpoon Therapeutics, Inc. | MESOTHELINE BINDING PROTEINS |
WO2019000223A1 (en) * | 2017-06-27 | 2019-01-03 | Nanjing Legend Biotech Co., Ltd. | ENABLERS OF IMMUNE EFFECTOR CELLS OF CHIMERIC ANTIBODIES AND METHODS OF USE THEREOF |
WO2019035938A1 (en) | 2017-08-16 | 2019-02-21 | Elstar Therapeutics, Inc. | MULTISPECIFIC MOLECULES BINDING TO BCMA AND USES THEREOF |
WO2019075378A1 (en) | 2017-10-13 | 2019-04-18 | Harpoon Therapeutics, Inc. | B-MATURATION ANTIGEN BINDING PROTEINS |
EA202090817A1 (ru) | 2017-10-13 | 2020-09-08 | Харпун Терапьютикс, Инк. | Триспецифические белки и способы их применения |
TWI829655B (zh) | 2017-10-18 | 2024-01-21 | 瑞士商諾華公司 | 用於選擇性蛋白質降解的組合物及方法 |
WO2019099639A1 (en) | 2017-11-15 | 2019-05-23 | Navartis Ag | Bcma-targeting chimeric antigen receptor, cd19-targeting chimeric antigen receptor, and combination therapies |
US20200371091A1 (en) | 2017-11-30 | 2020-11-26 | Novartis Ag | Bcma-targeting chimeric antigen receptor, and uses thereof |
TW201930591A (zh) | 2018-01-08 | 2019-08-01 | 瑞士商諾華公司 | 用於與嵌合抗原受體療法併用之免疫增強rna |
US20210038659A1 (en) | 2018-01-31 | 2021-02-11 | Novartis Ag | Combination therapy using a chimeric antigen receptor |
US11866498B2 (en) | 2018-02-08 | 2024-01-09 | Genentech, Inc. | Bispecific antigen-binding molecules and methods of use |
EP3752203A1 (en) | 2018-02-13 | 2020-12-23 | Novartis AG | Chimeric antigen receptor therapy in combination with il-15r and il15 |
BR112020024351A2 (pt) | 2018-06-01 | 2021-02-23 | Novartis Ag | moléculas de ligação contra bcma e usos das mesmas |
CA3105448A1 (en) | 2018-07-03 | 2020-01-09 | Elstar Therapeutics, Inc. | Anti-tcr antibody molecules and uses thereof |
MX2021000488A (es) | 2018-07-19 | 2021-04-12 | Regeneron Pharma | Anticuerpos anti-bcma x anti-cd3 biespecificos y usos de estos. |
JP2021534783A (ja) | 2018-08-31 | 2021-12-16 | ノバルティス アーゲー | キメラ抗原受容体発現細胞を作製する方法 |
WO2020047449A2 (en) | 2018-08-31 | 2020-03-05 | Novartis Ag | Methods of making chimeric antigen receptor-expressing cells |
AU2019346466A1 (en) | 2018-09-25 | 2021-05-20 | Harpoon Therapeutics, Inc. | DLL3 binding proteins and methods of use |
KR20210068408A (ko) * | 2018-09-28 | 2021-06-09 | 암젠 인크 | 가용성 bcma에 대한 항체 |
CA3118191A1 (en) * | 2018-10-31 | 2020-05-07 | Glaxosmithkline Intellectual Property Development Limited | Methods of treating cancer |
CN109485734B (zh) * | 2018-12-30 | 2020-05-12 | 广州百暨基因科技有限公司 | 一种靶向bcma和cd19的双特异性嵌合抗原受体及其应用 |
AU2020214336A1 (en) * | 2019-01-30 | 2021-09-09 | The Wistar Institute Of Anatomy And Biology | DNA-encoded bispecific T-cell engagers targeting cancer antigens and methods of use in cancer theraputics |
BR112021016609A2 (pt) | 2019-02-25 | 2021-11-03 | Novartis Ag | Composições de partículas de sílica mesoporosa para entrega viral |
EP3942025A1 (en) | 2019-03-21 | 2022-01-26 | Novartis AG | Car-t cell therapies with enhanced efficacy |
US20220168389A1 (en) | 2019-04-12 | 2022-06-02 | Novartis Ag | Methods of making chimeric antigen receptor-expressing cells |
US20220251152A1 (en) | 2019-04-24 | 2022-08-11 | Novartis Ag | Compositions and methods for selective protein degradation |
CN110229232B (zh) * | 2019-06-19 | 2020-05-19 | 北京智仁美博生物科技有限公司 | 双特异性抗体及其用途 |
EP4065158A2 (en) | 2019-11-26 | 2022-10-05 | Novartis AG | Chimeric antigen receptors binding bcma and cd19 and uses thereof |
AU2021228708A1 (en) | 2020-02-27 | 2022-09-15 | Novartis Ag | Methods of making chimeric antigen receptor-expressing cells |
KR20220147109A (ko) | 2020-02-27 | 2022-11-02 | 노파르티스 아게 | 키메라 항원 수용체 발현 세포의 제조 방법 |
WO2021252920A1 (en) | 2020-06-11 | 2021-12-16 | Novartis Ag | Zbtb32 inhibitors and uses thereof |
EP4168447A1 (en) | 2020-06-19 | 2023-04-26 | F. Hoffmann-La Roche AG | Antibodies binding to cd3 and cd19 |
JP2023538118A (ja) | 2020-08-21 | 2023-09-06 | ノバルティス アーゲー | Car発現細胞のインビボ生成のための組成物及び方法 |
CN112285366B (zh) * | 2020-12-25 | 2021-06-08 | 南京广祺医药科技有限公司 | 一种测定血清中双特异性抗体BsAb的ELISA方法及应用 |
AU2022255506A1 (en) | 2021-04-08 | 2023-11-09 | Marengo Therapeutics, Inc. | Multifunctional molecules binding to tcr and uses thereof |
JP2024515793A (ja) | 2021-04-27 | 2024-04-10 | ノバルティス アーゲー | ウイルスベクター生産システム |
TW202323521A (zh) | 2021-08-20 | 2023-06-16 | 瑞士商諾華公司 | 製備表現嵌合抗原受體的細胞之方法 |
WO2024025967A1 (en) * | 2022-07-28 | 2024-02-01 | Springworks Therapeutics, Inc. | Determination of bcma level on plasma cells by flow cytometry |
WO2024089639A1 (en) | 2022-10-26 | 2024-05-02 | Novartis Ag | Lentiviral formulations |
Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2013072406A1 (en) * | 2011-11-15 | 2013-05-23 | Amgen Research (Munich) Gmbh | Binding molecules for bcma and cd3 |
WO2014122143A1 (en) * | 2013-02-05 | 2014-08-14 | Engmab Ag | Method for the selection of antibodies against bcma |
JP2014520088A (ja) * | 2011-05-27 | 2014-08-21 | グラクソ グループ リミテッド | Bcma(cd269/tnfrsf17)結合タンパク質 |
WO2014140248A1 (en) * | 2013-03-15 | 2014-09-18 | Amgen Research (Munich) Gmbh | Binding molecules for bcma and cd3 |
JP2014529600A (ja) * | 2011-08-23 | 2014-11-13 | ロシュ グリクアート アーゲー | T細胞活性化抗原に対して特異的な二重特異性抗体及び腫瘍抗原および使用方法 |
Family Cites Families (17)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO1988007089A1 (en) | 1987-03-18 | 1988-09-22 | Medical Research Council | Altered antibodies |
US5204244A (en) | 1987-10-27 | 1993-04-20 | Oncogen | Production of chimeric antibodies by homologous recombination |
US5202238A (en) | 1987-10-27 | 1993-04-13 | Oncogen | Production of chimeric antibodies by homologous recombination |
US20020142000A1 (en) | 1999-01-15 | 2002-10-03 | Digan Mary Ellen | Anti-CD3 immunotoxins and therapeutic uses therefor |
WO2001024812A1 (en) | 1999-10-06 | 2001-04-12 | N.V. Nutricia | USE OF TRANSFORMING GROWTH FACTOR β AND GROWTH FACTORS IN THE TREATMENT AND PREVENTION OF DISEASES OF THE INTESTINAL MUCOSA |
UA74798C2 (uk) | 1999-10-06 | 2006-02-15 | Байоджен Айдек Ма Інк. | Спосіб лікування раку у ссавця за допомогою поліпептиду, що протидіє взаємодії april з його рецепторами |
JP2004533997A (ja) | 2001-02-20 | 2004-11-11 | ザイモジェネティクス,インコーポレイティド | Bcma及びtaciの両者を結合する抗体 |
WO2007117600A2 (en) | 2006-04-07 | 2007-10-18 | Macrogenics, Inc. | Combination therapy for treating autoimmune diseases |
US7960944B2 (en) | 2007-09-05 | 2011-06-14 | Eveready Battery Company, Inc. | Power supply that supplies power to and communicates with an electrical appliance |
WO2009132058A2 (en) | 2008-04-25 | 2009-10-29 | Zymogenetics, Inc. | Levels of bcma protein expression on b cells and use in diagnostic methods |
LT2406284T (lt) | 2009-03-10 | 2016-10-10 | Biogen Ma Inc. | Antikūnai prieš b ląstelių subrendimo antigenus |
JP2014500879A (ja) | 2010-11-16 | 2014-01-16 | ベーリンガー インゲルハイム インターナショナル ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング | Bcma発現に相関性を有する疾患を治療する因子及び方法 |
KR101614195B1 (ko) | 2011-03-29 | 2016-04-20 | 로슈 글리카트 아게 | 항체 Fc 변이체 |
US20130101599A1 (en) | 2011-04-21 | 2013-04-25 | Boehringer Ingelheim International Gmbh | Bcma-based stratification and therapy for multiple myeloma patients |
RU2650805C2 (ru) | 2012-04-11 | 2018-04-17 | Дзе Юнайтед Стейтс Оф Америка, Эз Репрезентед Бай Дзе Секретари, Департмент Оф Хелс Энд Хьюман Сёрвисез | Химерные антигенные рецепторы, нацеленные на антиген созревания в-клеток |
TW201425336A (zh) | 2012-12-07 | 2014-07-01 | Amgen Inc | Bcma抗原結合蛋白質 |
AU2015299163B2 (en) * | 2014-08-04 | 2019-07-18 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Bispecific T cell activating antigen binding molecules |
-
2014
- 2014-12-03 EP EP14196168.0A patent/EP3029068A1/en not_active Ceased
-
2015
- 2015-12-02 SG SG11201704572UA patent/SG11201704572UA/en unknown
- 2015-12-02 US US15/533,043 patent/US20170327580A1/en not_active Abandoned
- 2015-12-02 CN CN201580075389.9A patent/CN107406505A/zh active Pending
- 2015-12-02 JP JP2017529627A patent/JP2018508462A/ja active Pending
- 2015-12-02 CA CA2969560A patent/CA2969560A1/en active Pending
- 2015-12-02 WO PCT/EP2015/078388 patent/WO2016087531A1/en active Application Filing
- 2015-12-02 EP EP15804458.6A patent/EP3227333B1/en active Active
- 2015-12-02 KR KR1020177017812A patent/KR20170109535A/ko unknown
- 2015-12-02 EP EP23183309.6A patent/EP4282484A3/en active Pending
- 2015-12-02 AU AU2015357122A patent/AU2015357122B2/en active Active
- 2015-12-02 ES ES15804458T patent/ES2959635T3/es active Active
-
2020
- 2020-08-19 US US16/997,565 patent/US20200385471A1/en active Pending
-
2021
- 2021-04-15 JP JP2021069083A patent/JP2021120374A/ja active Pending
- 2021-08-25 AU AU2021221695A patent/AU2021221695A1/en active Pending
Patent Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2014520088A (ja) * | 2011-05-27 | 2014-08-21 | グラクソ グループ リミテッド | Bcma(cd269/tnfrsf17)結合タンパク質 |
JP2014529600A (ja) * | 2011-08-23 | 2014-11-13 | ロシュ グリクアート アーゲー | T細胞活性化抗原に対して特異的な二重特異性抗体及び腫瘍抗原および使用方法 |
WO2013072406A1 (en) * | 2011-11-15 | 2013-05-23 | Amgen Research (Munich) Gmbh | Binding molecules for bcma and cd3 |
WO2014122143A1 (en) * | 2013-02-05 | 2014-08-14 | Engmab Ag | Method for the selection of antibodies against bcma |
WO2014140248A1 (en) * | 2013-03-15 | 2014-09-18 | Amgen Research (Munich) Gmbh | Binding molecules for bcma and cd3 |
Non-Patent Citations (4)
Title |
---|
RICKERT, R. C. ET AL.: "Signaling by the tumor necrosis factor receptor superfamily in B-cell biology and disease", IMMUNOL. REV, vol. 244, JPN6020000133, 2011, pages 115 - 133, XP071455818, ISSN: 0004189834, DOI: 10.1111/j.1600-065X.2011.01067.x * |
SANCHEZ, E. ET AL.: "Serum B-cell maturation antigen is elevated in multiple myeloma and correlates with disease status", BR. J/ HAEMATOL., vol. 158, JPN6020000130, 2012, pages 727 - 738, XP055186278, ISSN: 0004556332, DOI: 10.1111/j.1365-2141.2012.09241.x * |
TAI, Y. T. ET AL.: "Novel anti-B-cell maturation antigen antibody-drug conjugate (GSK2857916) selectively induces killin", BLOOD, vol. 123, JPN6020000131, May 2014 (2014-05-01), pages 3128 - 3138, ISSN: 0004189833 * |
中村和靖 ほか: "エフェクター機能の増強による次世代抗体医薬の開発", DRUG DELIVERY SYSTEM, vol. Vol. 26-6, JPN6020000134, 2011, pages 611 - 618, ISSN: 0004189835 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
EP4282484A2 (en) | 2023-11-29 |
AU2015357122B2 (en) | 2021-05-27 |
EP3227333B1 (en) | 2023-08-16 |
JP2021120374A (ja) | 2021-08-19 |
CN107406505A (zh) | 2017-11-28 |
US20200385471A1 (en) | 2020-12-10 |
ES2959635T3 (es) | 2024-02-27 |
WO2016087531A1 (en) | 2016-06-09 |
AU2021221695A1 (en) | 2021-09-23 |
EP3227333A1 (en) | 2017-10-11 |
SG11201704572UA (en) | 2017-07-28 |
US20170327580A1 (en) | 2017-11-16 |
EP4282484A3 (en) | 2024-02-28 |
AU2015357122A1 (en) | 2017-06-29 |
CA2969560A1 (en) | 2016-06-09 |
EP3029068A1 (en) | 2016-06-08 |
KR20170109535A (ko) | 2017-09-29 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US20200385471A1 (en) | Bispecific antibodies against cd3epsilon and bcma for use in treatment of diseases | |
US20210380699A1 (en) | Anti-pd-l1 antibodies | |
US10604576B2 (en) | Antibodies and immunocytokines | |
US20230192847A1 (en) | Tigit antibodies, encoding nucleic acids and methods of using said antibodies in vivo | |
JP6703520B2 (ja) | Cd3イプシロンおよびbcmaに対する二特異性抗体 | |
KR20170075778A (ko) | 항-tim-3 항체 | |
JP2020536573A (ja) | 改変抗SIRPa抗体及びその使用 | |
KR20210137477A (ko) | 이중기능성 융합 단백질 및 그것의 제약학적 용도 | |
JP2019520034A (ja) | 新規な抗SIRPa抗体およびそれらの治療適用 | |
KR20190097067A (ko) | 미엘린 올리고덴드로사이트 당단백질에 결합하는 항체 | |
JP2022514179A (ja) | 新規アゴニスト抗tnfr2抗体分子 | |
JP2020530859A (ja) | 免疫調節剤としてのcd96結合剤 | |
TW202116807A (zh) | 用於治療特定患者之癌症的抗體組合 | |
US20200190191A1 (en) | Multispecific antibody with combination therapy for immuno-oncology | |
JP2007525416A (ja) | 早期活性化分子のターゲティングに基づく免疫調節 | |
RU2738802C1 (ru) | Определяющие комплементарность участки для связывания cd3 и содержащая их биспецифическая антигенсвязывающая молекула | |
JP2023510468A (ja) | Cd47を標的とする抗体及びその使用 | |
RU2816531C2 (ru) | Комбинации антител для лечения рака у конкретных пациентов | |
EA043994B1 (ru) | Определяющие комплементарность участки для связывания cd3 и содержащая их биспецифическая антигенсвязывающая молекула | |
NZ789594A (en) | Anti-PD-L1 antibodies | |
Ferrari | Characterisation of scFv A7 reactivity and development of a novel bispecific antibody for targeted therapies in Rheumatoid Arthritis. |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20181203 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20181203 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20200109 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20200402 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20200527 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20200709 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20201215 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20210415 |
|
C60 | Trial request (containing other claim documents, opposition documents) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: C60 Effective date: 20210415 |
|
C11 | Written invitation by the commissioner to file amendments |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: C11 Effective date: 20210427 |
|
A911 | Transfer to examiner for re-examination before appeal (zenchi) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A911 Effective date: 20210527 |
|
C21 | Notice of transfer of a case for reconsideration by examiners before appeal proceedings |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: C21 Effective date: 20210601 |
|
A912 | Re-examination (zenchi) completed and case transferred to appeal board |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A912 Effective date: 20210730 |
|
C211 | Notice of termination of reconsideration by examiners before appeal proceedings |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: C211 Effective date: 20210803 |
|
C22 | Notice of designation (change) of administrative judge |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: C22 Effective date: 20220405 |
|
C22 | Notice of designation (change) of administrative judge |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: C22 Effective date: 20220809 |
|
C13 | Notice of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: C13 Effective date: 20220823 |
|
C23 | Notice of termination of proceedings |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: C23 Effective date: 20221220 |
|
C03 | Trial/appeal decision taken |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: C03 Effective date: 20230124 |
|
C30A | Notification sent |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: C3012 Effective date: 20230124 |