JP2018503097A - 水中試験における線虫およびその他の生物に対する有効成分の活性を測定する装置および方法 - Google Patents
水中試験における線虫およびその他の生物に対する有効成分の活性を測定する装置および方法 Download PDFInfo
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Abstract
Description
10 ハウジング
11 カメラ
12 対物レンズ
13 ホルダー
14 照明機構
15 第一光源
16 第二光源
17 ロッドレンズ(17a、17b出射光線)
18 ロッドレンズ(18a、18b出射光線)
30 細胞培養皿
31 ウェル
32 上部
33 底部
34 第一側壁
35 第二側壁
36 溶液
37 ウェル・カバー
100 出発ブロック
101 ブロック
102 ブロック
103 ブロック
104 ブロック
105 ブロック
106 ブロック
107 ループ
108 質問
109 ブロック
110 ループ
111 質問
112 ブロック
113 ブロック
114 ブロック
Claims (15)
- 水中試験における線虫およびその他の生物に対する有効成分の活性を測定するための装置(1)であって、
−中で線虫を有効成分で充填できる複数のウェル(31)を備える細胞培養皿(30)のためのホルダー(13)であって、該細胞培養皿(30)が、底部(33)および上部(32)とともに、底部(33)と上部(32)との間に伸びる側壁を備えるものである、ホルダー(13);
−好ましくは細胞培養皿(30)の底部(33)、の画像を記録するために用いられるカメラ(11)
−細胞培養皿(30)を照射する第一光源(15)を少なくとも備えている照明機構(14);
を含んでなり、
第一光源(15)と取り付けられた状態の細胞培養皿(30)の第一側壁(34)との間に、第一光源(15)の光を、第一側壁(34)を通過して、細胞培養皿(30)の底部(33)の方向へ方向づける第一光学装置が配置されている、装置(1)。 - 前記光学装置が、細胞培養皿(30)の第一側壁(34)の全長に実質的に及ぶロッドレンズ(17)を備えていることを特徴とする、請求項1に記載の装置(1)。
- 前記第一光源(15)が線状光導体を備えていることを特徴とする、請求項1または2に記載の装置(1)。
- 前記光学装置が、細胞培養皿(30)の上部ウェル・カバー(37)への直接照射を防止することを特徴とする、請求項1〜3のいずれか一項に記載の装置(1)。
- 前記光学装置が、カメラ(11)の対物レンズ(12)への光の直接侵入を防止することを特徴とする、請求項1〜4のいずれか一項に記載の装置(1)。
- 前記皿ホルダー(13)が、透明材料から成ることを特徴とする、請求項1〜5のいずれか一項に記載の装置(1)。
- 第一光源(15)とロッドレンズ(17)との隙間が、2〜4cmであることを特徴とする、請求項2〜6のいずれか一項に記載の装置(1)。
- 前記照明機構(13)が、第二光源(16)および細胞培養皿(30)の第二側壁(35)に配置された第二光学装置を備え、該第二側壁(35)が第一側壁に向かい合っていることを特徴とする、請求項1〜7のいずれか一項に記載の装置(1)。
- 水中試験における線虫およびその他の生物に対する有効成分の活性を測定する方法であって、
a)細胞培養皿(30)の少なくとも1つのウェル(31)を線虫および有効成分で充填する工程;
b)請求項1〜8のいずれか一項に記載の装置(1)中に細胞培養皿(30)を配置する工程;
c)経時的に次から次へと続く、細胞培養皿(30)の複数の画像を作成する工程;
d)細胞培養皿(30)の照射に依存して作成された画像を二値化する工程;
e)1つの基本画像および複数の追跡画像を有する第一組の画像について、ウェルに基づき、第一測定曲線を決定する工程であって、各追跡画像が差分法にて基本画像と比較され、差分ピクセル数が決定される、工程;
f)第二組の画像について、ウェルに基づき、少なくとも第二測定曲線を決定する工程であって、第二組に対しては、第二組の基本画像として第一組の追跡画像が使用され、第二組の追跡画像として少なくとも1つの第一組のさらなる追跡画像が使用される、工程;
g)第一測定曲線および少なくとも第二測定曲線に基づいて平均曲線を決定する工程
を含んでなる、方法。 - 前記第二組の基本画像に使用するものが、第一組の基本画像に直ちに続く第一組の第一追跡画像であり、第二組の追跡画像として第二組に使用されるものが、第一組の第一追跡画像を除く全ての第一組の追跡画像であり、かつ、第二組が、1個の追加の追跡画像によって完成されることを特徴とする、請求項9に記載の方法。
- 1つの組の基本画像と最終追跡画像との間の記録時間(TA)が、該記録時間(TA)内に、未処置線虫が中に入れられたウェルについての差分ピクセル数が漸近極限AWに達するように確立されることを特徴とする、請求項9または10に記載の方法。
- 第一組の基本画像と最終組の最終追跡画像との間に総時間が確立されることを特徴とし、その総時間が、記録時間(TA)のおよそ2倍に相当することを特徴とする、請求項11に記載の方法。
- 2個の連続する画像間の時間間隔が一定であり、かつ1〜5秒であることを特徴とする、請求項9〜12のいずれか一項に記載の方法。
- 1つの組の画像が、8〜12個の画像を含むことを特徴とする、請求項9〜13のいずれか一項に記載の方法。
- 前記平均曲線が、8〜12の測定曲線に基づいて決定されることを特徴とする、請求項10〜14のいずれか一項に記載の方法。
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