JP2017519812A - ノンカロリー甘味料 - Google Patents
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Abstract
Description
この開示は、表題が「ノンカロリー甘味料」のPCT出願である。本出願は、参照することによりその内容全体が本明細書に組み込まれる2014年5月5日に出願された米国特許出願第14/269,435号に対する優先権を主張する。
配列表の書面原稿及びサイズが32,670バイト(MICROSOFT WINDOWS(登録商標) EXPLORERで測定した場合)であり、名称が「32559-1 l_ST25.txt」のファイルを含有するコンピューター可読形式の配列表が本明細書に提供され、参照することにより本明細書に組み込まれる。この配列表は、SEQ ID NO:1〜6から成る。
本開示は、一般的に天然甘味料に関する。更に詳細には、本開示は、ノンカロリー甘味料及びノンカロリー甘味料の合成方法に関する。
ステビオールグリコシドは、ステビア・レバウディアナ(Stevia rebaudiana)葉から単離された天然物である。ステビオールグリコシドは、高強度で低カロリーの甘味料として広く使用され、スクロースより著しく甘い。天然に存在するステビオールグリコシドは、同一の基本ステビオール構造を共有するが、C13及びC19位の炭水化物残基(例えば、グルコース、ラムノース及びキシロース残基)が異なる。構造が既知のステビオールグリコシドとしては、ステビオール、ステビオシド、レバウディオサイド(rebaudioside)A、レバウディオサイドB、レバウディオサイドC、レバウディオサイドD、レバウディオサイドE、レバウディオサイドF及びズルコサイドAが挙げられる(例えば、表1参照)。
ステビオールグリコシドは、分子構造によってのみならず、それらの味覚特性によっても互いに異なる。例えば、異なるステビオールグリコシドは、異なる甘味度及び後味を有する。例えば、ステビオシドはスクロースの100〜150倍甘いが、より苦い後味を有する。例えば、バウジオシドA及びレバウディオサイドEはスクロースの250〜450倍甘く、ステビオシドより後味が少ない。レバウディオサイドCはスクロースの40〜60倍甘い。ズルコサイドAはスクロースの約30倍甘い。
代替甘味料は、高糖質食品及び飲料の消費と関連する多くの疾患への意識のため関心が高まりつつある。人工甘味料は入手可能であるが、ズルシン、サイクラミン酸ナトリウム及びサッカリン等の多くの人工甘味料は、それらの安全性に関する懸念のため国によっては禁止又は制限されている。従って、天然起源のノンカロリー甘味料が人気になりつつある。ステビア甘味料の広範な使用への主な障害の1つは、それらの望ましくない風味特質である。従って、代替甘味料及びそれらの製造方法を開発して、甘味効力と香味プロファイルの最良の組み合わせを提供する必要がある。
本開示は、一般的に天然甘味料に関する。更に詳細には、本開示は、ノンカロリー甘味料及びノンカロリー甘味料の合成方法に関する。本開示は、ノンカロリー甘味料を調製するために使用できる酵素にも関する。
UDP-グリコシルトランスフェラーゼ融合酵素(「EUS」)。別の態様では、本開示はUDP-グリコシルトランスフェラーゼ融合酵素(本明細書では「EUS」と称する)に関する。UDP-グリコシルトランスフェラーゼ融合酵素は、スクロースシンターゼドメインに結合したウリジンジホスホグリコシルトランスフェラーゼドメインを含む。UDP-グリコシルトランスフェラーゼ融合酵素は、1,2-βグリコシド結合及び1,6-βグリコシド結合酵素活性並びにスクロースシンターゼ活性を示す。
別の態様では、本開示は、甘くする量のレバウディオサイドD2を含む飲料製品に関する。レバウディオサイドD2は、飲料製品中に約5ppm〜約100ppmの濃度で存在する。一部の実施形態では、例えば100ppm未満の低濃度のレバウディオサイドD2は、10,000〜30,000ppmの濃度を有するスクロース溶液と同等の甘味を有する。
別の態様では、本開示は、甘くする量のレバウディオサイドD2を含む消費製品に関する。レバウディオサイドD2は、消費製品中に約5ppm〜約100ppmの濃度で存在する。一部の実施形態では、例えば100ppm未満の低濃度のレバウディオサイドD2は、10,000〜30,000ppmの濃度を有するスクロース溶液と同等の甘味を有する。
別の態様では、本開示は、下記化学構造から成る甘味料に関する。
先行する実施形態のいずれとも組み合わせが可能な特定実施形態では、レバウディオサイドD2が唯一の甘味料であり、製品が約1%〜約4%(w/v-%)のスクロース溶液と同等の甘味強度を有する。先行する実施形態のいずれとも組み合わせが可能な特定実施形態では、本方法は、追加の甘味料を添加する工程を更に含み、製品は約1%〜約10%(w/v-%)のスクロース溶液と同等の甘味強度を有する。
本開示の他の態様は、a)1種以上の甘味料を含有する飲料製品又は消費製品を準備する工程、及びb)約5ppm〜約100ppmの精製レバウディオサイドD2を飲料製品又は消費製品に添加する工程によって、甘くした飲料製品又は甘くした消費製品を調製する方法に関する。
本開示の下記詳細な説明を考慮すると、本開示がよりよく理解され、上述したもの以外の特徴、態様及び利点が明らかになるであろう。該詳細な説明は以下の図面を参照する。
特に指定のない限り、本明細書で用いる全ての技術用語及び科学用語は、本開示が属する技術分野の当業者が一般的に解釈するのと同じ意味を有する。本開示の実施又は試験では、本明細書で開示するものと類似又は同等のいずれの方法及び材料をも使用できるが、好ましい材料及び方法について以下に述べる。
用語「相補的」は、当業者が理解するその通常及び慣例の意味に準じて用いられ、互いにハイブリダイズすることができるヌクレオチド塩基間の関係を限定せずに描写するために用いられる。例えば、DNAに関して、アデノシンはチミンと相補的であり、シトシンはグアニンと相補的である。従って、対象技術は、添付の配列表に報告した全配列と相補的な単離核酸断片並びに実質的に同様の核酸配列をも包含する。
用語「核酸」及び「ヌクレオチド」は、当業者が理解するその通常及び慣例の意味に準じて用いられ、デオキシリボヌクレオチド又はリボヌクレオチド及びその一本鎖若しくは二本鎖形のポリマーを限定せずに表すために用いられる。特に限定しない限り、この用語は、基準核酸と同様の結合特性を有し、天然に存在するヌクレオチドに似た様式で代謝される天然ヌクレオチドの既知類似体を含有する核酸を包含する。特に指定のない限り、特定の核酸配列は、暗にその保存的修飾又は縮重バリアント(例えば縮重コドン置換)及び相補配列、並びに明確に指示した配列をも包含する。
用語「単離された」は、当業者が理解するその通常及び慣例の意味に準じて用いられ、単離核酸又は単離ポリペプチドの文脈で用られるときは、その天然環境から引き離す人の手が存在するので、天然物でない核酸又はポリペプチドを限定せずに表すために用いられる。単離核酸又はポリペプチドは、精製形で存在することができ、或いは非天然環境内で、例えば、トランスジェニック宿主細胞内で存在することができる。
用語「縮重バリアント」は、1つ以上の縮重コドン置換によって基準核酸配列とは異なる残基配列を有する核酸配列を指す。縮重コドン置換は、1つ以上の選択(又は全ての)コドンの第3位が混合塩基及び/又はデオキシイノシン残基で置換される生成配列によって達成可能である。核酸配列及びその全ての縮重バリアントは同一のアミノ酸又はポリペプチドを発現する。
用語「ポリペプチド」、「タンパク質」、及び「ペプチド」は、当業者が理解するその通常及び慣例の意味に準じて用いられ;これらの3つの用語は互換的に使用されることもあり、アミノ酸、又はアミノ酸類似体のポリマーをそのサイズ又は機能にかかわらず限定せずに表すために用いられる。「タンパク質」は相対的に大きいポリペプチドに関して用いられることが多いが、「ペプチド」は小さいポリペプチドに関して用いられることが多く、当技術分野でのこれらの用語の用法は重複し、多様である。本明細書で使用する用語「ポリペプチド」は、特に指定のない限り、ペプチド、ポリペプチド、及びタンパク質を指す。用語「タンパク質」、「ポリペプチド」、及び「ペプチド」は、ポリヌクレオチド産物を指すときは互換的に使用される。従って、典型的なポリペプチドには、ポリヌクレオチド産物、天然に存在するタンパク質、ホモログ、オルソログ、パラログ、断片及び他の等価物、バリアント、及び前述のものの類似体が含まれる。
基準ポリペプチドに関して用いられるときの用語「ポリペプチド断片」及び「断片」は、当業者にとってそれらの通常又は慣例の意味に準じて用いられ、基準ポリペプチド自体に比べてアミノ酸残基が欠失しているが、残りのアミノ酸配列が通常は基準ポリペプチドの対応位置で同一であるポリペプチドを限定せずに表すために用いられる。該欠失は、基準ポリペプチドのアミノ末端又はカルボキシ末端、或いは両方で起こり得る。
ポリペプチド又はタンパク質の用語「機能性断片」は、全長ポリペプチド又はタンパク質の一部分であり、かつ全長ポリペプチド又はタンパク質と実質的に同一の生物学的活性を有するか、又は全長ポリペプチド又はタンパク質と実質的に同一の機能を遂行する(例えば同一の酵素反応を遂行する)ペプチド断片を指す。
用語「機能性バリアント」には、保存的に置換されたバリアントが更に含まれる。用語「保存的に置換されたバリアント」は、1つ以上の保存的アミノ酸置換によって基準ペプチドと異なり、かつ基準ペプチドの活性の一部又は全てを維持するアミノ酸配列を有するペプチドを指す。「保存的アミノ酸置換」は、機能的に同様の残基とのアミノ酸残基の置換である。保存的置換の例としては、イソロイシン、バリン、ロイシン又はメチオニン等の非極性(疎水性)残基の一つと別の残基との置換;荷電又は極性(親水性)残基の一つと別の残基との置換、例えばアルギニンとリジン、グルタミンとアスパラギン、スレオニンとセリンの置換;リジン又はアルギニン等の塩基性残基の一つと別の残基との置換;或いはアスパラギン酸又はグルタミン酸等の酸性残基の一つと別の残基との置換;或いはフェニルアラニン、チロシン、又はトリプトファン等の芳香族残基の一つと別の残基との置換が挙げられる。該置換は、タンパク質又はポリペプチドの見掛けの分子量又は等電点にほとんど又は全く影響を及ぼさないと予想される。フレーズ「保存的に置換されたバリアント」には、結果として生じるペプチドが、ここに記載の基準ペプチドの活性の一部又は全てを維持することを条件に、残基が化学的誘導体化残基と置き換わっているペプチドも含まれる。
対象技術のポリペプチドに関連する用語「バリアント」には、基準ポリペプチドのアミノ酸配列と少なくとも75%、少なくとも76%、少なくとも77%、少なくとも78%、少なくとも79%、少なくとも80%、少なくとも81%、少なくとも82%、少なくとも83%、少なくとも84%、少なくとも85%、少なくとも86%、少なくとも87%、少なくとも88%、少なくとも89%、少なくとも90%、少なくとも91%、少なくとも92%、少なくとも93%、少なくとも94%、少なくとも95%、少なくとも96%、少なくとも97%、少なくとも98%、少なくとも99%、100%でさえ同一のアミノ酸配列を有する機能的に活性なポリペプチドが更に含まれる。
対象技術のバリアントポリペプチド配列に関する「アミノ酸配列同一性パーセント(%)」は、必要ならば、配列アラインメントを行ない、ギャップを導入して最大配列同一性パーセントを達成した後、かつ配列同一性の一部としていずれの保存的置換をも考慮せずに、候補配列における基準ポリペプチド(例えば、SEQ ID NO:6等)のアミノ酸残基と同一であるアミノ酸残基の百分率を意味する。
基準位置に「対応する」アミノ酸位置は、アミノ酸配列をアラインメントすることによって同定する場合に、基準配列でアラインメントする位置を表す。該アラインメントは、手で又は周知の配列アラインメントプログラム、例えばClustalW2、Blast 2等を用いて行なうことができる。
特に指定のない限り、2つのポリペプチド又はポリヌクレオチド配列の同一性パーセントは、それらの2つの配列のより短い全長にわたる同一のアミノ酸残基又はヌクレオチドの百分率を表す。
「適切な制御配列」は、当業者が理解するその通常及び慣例の意味に準じて用いられ、コード配列の上流(5'非コード配列)にあるか、コード配列内にあるか、又はコード配列の下流(3'非コード配列)にあり、かつ転写、RNAプロセシング若しくは安定性、又は関連コード配列の翻訳に影響を与えるヌクレオチド配列を限定せずに表すために用いられる。制御配列としては、プロモーター、翻訳リーダー配列、イントロン、及びポリアデニル化認識配列が挙げられる。
「プロモーター」は、当業者が理解するその通常及び慣例の意味に準じて用いられ、コード配列又は機能性RNAの発現を調節できるDNA配列を限定せずに表すために用いられる。一般に、コード配列は、プロモーター配列に対して3'位にある。プロモーターは、それらの完全さで天然遺伝子から誘導されるか、又は自然に見られる異なるプロモーター由来の異なる要素で構成されるか、又は合成DNAセグメントを含むことさえある。当業者には当然のことながら、異なるプロモーターは、異なる細胞型の遺伝子の発現、又は発生の異なる段階での発現、又は異なる環境条件に応じた発現を指揮することができる。遺伝子をほとんどの細胞型においてほとんどの時に発現させるプロモーターは、一般的に「構成的プロモーター」と呼ばれる。更に、ほとんどの場合、制御配列の正確な境界は完全には定義されておらず、異なる長さのDNA断片が同一のプロモーター活性を有することがある。
本明細書で使用する用語「発現」は、当業者が理解するその通常及び慣例の意味に準じて用いられ、対象技術の核酸断片から誘導されたセンス(mRNA)又はアンチセンスRNAの転写及び安定蓄積を限定せずに表すために用いられる。「過剰発現」は、正常又は非形質転換生物における産生レベルを超える、トランスジェニック又は組換え生物における遺伝子産物の産生を意味する。
「形質転換」は、当業者が理解するその通常及び慣例の意味に準じて用いられ、ポリヌクレオチドの標的細胞への転移を限定せずに表すために用いられる。転移したポリヌクレオチドを標的細胞のゲノム又は染色体DNAに組み入れることができ、結果として遺伝子学的に安定した遺伝となるか、或いは宿主染色体と無関係にそれが複製することができる。形質転換した核酸断片を含有する宿主生物は、「トランスジェニック」又は「組換え」又は「形質転換」生物と呼ばれる。
本明細書で宿主細胞に関連して使用する用語「形質転換」、「トランスジェニック」、及び「組換え」は、当業者が理解するその通常及び慣例の意味に準じて用いられ、異種核酸分子が中に導入された宿主生物の細胞、例えば植物又は微生物の細胞を限定せずに表すために用いられる。核酸分子を安定的に宿主細胞のゲノムに組み込むことができ、或いは核酸分子は、染色体外分子として存在することができる。該染色体外分子は、自己複製していることがある。形質転換細胞、組織、又は対象は形質転換プロセスの最終産物のみならず、そのトランスジェニック子孫をも包含するものと解釈される。
同様に、本明細書でポリペプチド又はアミノ酸配列と関連して使用する用語「組換え」、「異種」、及び「外因的」は、特定の宿主細胞に外来性の起源をもつか、又は同起源の場合、その本来の形態から修飾されているポリペプチド又はアミノ酸配列を意味する。従って、組換えDNAセグメントを宿主細胞内で発現させて組換えてポリペプチドを生成することができる。
用語「プラスミド」、「ベクター」、及び「カセット」は、当業者が理解するその通常及び慣例の意味に準じて用いられ、細胞の中央代謝の一部でない遺伝子を運ぶことが多く、通常は環状二本鎖DNA分子の形態の染色体外要素を限定せずに表すために用いられる。該要素は、選択遺伝子産物のためにプロモーター断片及びDNA配列を適切な3'非翻訳配列と共に細胞に導入できる独特の構成にいくつかのヌクレオチド配列が連結又は組み込まれた、いずれの起源由来の自己複製配列、ゲノム組み込み配列、ファージ又はヌクレオチド配列、線形若しくは環状の一本鎖若しくは二本鎖DNA又はRNAでもあり得る。「形質転換カセット」は、外来遺伝子を含有し、この外来遺伝子に加えて特定の宿主細胞の形質転換を促進する要素を有する特異的ベクターを表す。「発現カセット」は、外来遺伝子を含有し、この外来遺伝子に加えて外来宿主内で当該遺伝子の発現を増強できる要素を有する特異的ベクターを表す。
本明細書で使用する場合、「合成の」又は「有機合成した」又は「化学合成した」又は「有機合成すること」又は「化学合成すること」又は「有機合成」又は「化学合成」は、一連の化学反応を通じて化合物を調製することを表すために用いられ;これには化合物を例えば、天然源から抽出することは含まれない。
本明細書で使用する用語「経口消費できる製品」は、人又は動物の口と接触するいずれの飲料、食品、健康補助食品、栄養補助食品、医薬組成物、歯科衛生組成物及び化粧品をも表し、口の中に取り入れた後に口から排出される物質及び飲み、食べ、咀嚼し、又は他のやり方で摂取され、かつ一般的に許容できる濃度範囲で使用したときにヒト又は動物に安全な物質が含まれる。
本明細書で使用する場合、用語「非晶質レバウディオサイドD2」は、非結晶性固形のレバウディオサイドD2を意味する。
本明細書で使用する場合、用語「甘味強度」は、個体、例えば、ヒトによって観察又は経験される甘い感覚の相対的強度、或いはテイスター、例えばBrixスケールで検出される甘味の程度又は量を意味する。
本明細書で使用する場合、用語「甘味を増強する」は、本開示の飲料製品又は消費製品の1つ以上の甘味特性の知覚を、レバウディオサイドD2を含有しない対応する経口消費できる製品に比べて、その性質又は品質を変えずに増加、増大、強化、強調、拡大、及び/又は増強する際のレバウディオサイドD2の効果を指す。
本明細書で使用する場合、用語「オフテースト(off-taste)」は、本開示の飲料製品又は消費製品で特徴的又は普通に見られない味の量又は程度を意味する。例えば、オフテーストは、甘くした消費製品の消費者にとって望ましくない味、例えば、苦味、甘草様味、金属味、嫌悪味、渋味、甘味発生遅延、なかなか消えない甘い後味等である。
本明細書で使用する場合、用語「w/v-%」は、糖等の化合物の、該化合物を含有する本開示の液体の経口消費できる製品100ml毎の質量(グラムで)を表す。本明細書で使用する場合、用語「w/w-%」は、糖等の化合物の、該化合物を含有する本開示の経口消費できる製品1グラム毎の質量(グラムで)を表す。
本明細書で使用する場合、用語「ppm」は、質量百万分率、例えば、レバウディオサイドD2等の化合物の、該化合物を含有する本開示の経口消費できる製品1キログラム当たりの質量(ミリグラムで)(すなわち、mg/kg)又はレバウディオサイドD2等の化合物の、該化合物を含有する本開示の経口消費できる製品1リットル当たりの質量(ミリグラムで)(すなわち、mg/L)を表し;或いは体積百万分率、例えば、レバウディオサイドD2等の化合物の、該化合物を含有する本開示の経口消費できる製品1リットル当たりの体積(ミリリットルで)(すなわち、ml/L)を表す。
本開示により、ノンカロリー甘味料及びノンカロリー甘味料の合成方法を開示する。また、本開示によりノンカロリー甘味料を調製するための酵素及び該酵素の使用方法を開示する。
一態様では、本開示は合成ノンカロリー甘味料に関する。合成ノンカロリー甘味料は、合成レバウディオサイド型ステビオールグリコシドであり、名称「レバウディオサイドD2」が与えられている。下記化学構造(I)に示すように、レバウディオサイドD2(「Reb D2」)は、ステビオールグリコシド、レバウディオサイドDの5つのグリコシド残基と同様の5つのグリコシド残基を有するステビオールグリコシドである。
レバウディオサイドD2、レバウディオサイドE及びレバウディオサイドDの化学構造に示すように、レバウディオサイドD2及びレバウディオサイドDは、該構造中のアグリコンステビオールに結合した5つのβ-D-グリコシル単位を有するが、レバウディオサイドEは4つのD-グリコシド残基を含有する(例えば、表1及び図8参照)。合成レバウディオサイドD2は、ステビオールのC19位に2つのグリコシド残基及びC13位に3つのグリコシド残基を含む。比較すると、レバウディオサイドDも5つのグリコシド残基を含み;アグリコンステビオールのC19位に2つのグリコシド残基及びC13位に3つのグリコシド残基を含む。レバウディオサイドD2の第5グリコシド残基(「糖V」)は、1,6-β-グリコシド結合によってReb-EのC13-O-グルコースのC-6'に位置するが、レバウディオサイドDの第5グリコシド残基(「糖V」)は、1,3-β-グリコシド結合によってReb-EのC13-O-グルコースのC-3'に位置している(図8参照)。しかしながら、レバウディオサイドEは、C19位に2つのグリコシド残基及びC13位に2つのグリコシド残基を含む。理論によって拘束されるものではないが、5つのグリコシド残基を有するステビオールグリコシド(レバウディオサイドD)及び4つのグリコシド残基を有するステビオールグリコシド(レバウディオサイドA及びレバウディオサイドE)は、グリコシド残基が少ないステビオールグリコシド(ステビオシド及びルブソサイド)より顕著に良い味質を有すると考えられる。
別の態様では、本開示は、レバウディオサイドEからレバウディオサイドD2を合成する方法に関する。一実施形態では、本方法は、レバウディオサイドEと、スクロース、ウリジン二リン酸(UDP)及びウリジン二リン酸-グルコース(UDP-グルコース)から成る群より選択される基質と、ウリジンジホスホグリコシルトランスフェラーゼ及びスクロースシンターゼドメインに結合したウリジン-ジホスホ(UDP)グリコシルトランスフェラーゼドメインを含むUDP-グリコシルトランスフェラーゼ融合酵素(EUS)から選択されるUDP-グリコシルトランスフェラーゼとを含む反応混合物を調製する工程、及びこの反応混合物を、グルコースがレバウディオサイドEと共有結合してレバウディオサイドD2を生成するのに十分な時間インキュベートしてレバウディオサイドD2を生成する工程を含む。
特に適切なウリジンジホスホ(UDP)グリコシルトランスフェラーゼは、例えば、EUGT11(WO 2013022989に記載どおり)であり得る。EUGT11は、1,2-19-O-グルコース及び1,2-13-O-グルコースグリコシル化活性を有するウリジン5'-二リン酸依存性グリコシルトランスフェラーゼ(「UGT」)である。EUGT11は、ステビオシドからレバウディオサイドEの生産及びレバウディオサイドAからレバウディオサイドDの生産を触媒することが知られている。しかしながら、驚くべきことにかつ予想外に、ウリジンジホスホ(UDP)グリコシルトランスフェラーゼをインビトロで用いてレバウディオサイドEをレバウディオサイドD2に変換できることを発見した。
適切なウリジンジホスホグリコシルトランスフェラーゼは、例えばイネ(Oryza sativa)ウリジンジホスホグリコシルトランスフェラーゼEUGT11であり得る。特に適切なウリジンジホスホグリコシルトランスフェラーゼは、SEQ ID NO:1のアミノ酸配列を有する。
適切なスクロースシンターゼドメインは、例えば、アラビドプシス属(Arabidopsis)スクロースシンターゼ1;アラビドプシス属(Arabidopsis)スクロースシンターゼ3及びヤエナリ(Vigna radiate)スクロースシンターゼであり得る。特に適切なスクロースシンターゼドメインは、例えば、アラビドプシス属(Arabidopsis)スクロースシンターゼ1である。特に適切なアラビドプシス属(Arabidopsis)スクロースシンターゼ1は、シロイヌナズナ(Arabidopsis thaliana)スクロースシンターゼ1(AtSUSl)であり得る。特に適切なスクロースシンターゼ1は、例えば、SEQ ID NO:3のアミノ酸配列を有するスクロースシンターゼ1であり得る。
反応において、UDP-グリコシルトランスフェラーゼ(例えば、EUGT11及びEUS)は1,6-13-O-グルコースグリコシル化活性を有し、一実施形態では、グルコース分子をレバウディオサイドEに移してレバウディオサイドD2を形成することができる。UDP-グリコシルトランスフェラーゼ(例えば、EUGT11及びEUS)も1,2-19-O-グルコース及び1,2-13-O-グルコースグリコシル化活性を有する。別の実施形態では、UDP-グリコシルトランスフェラーゼがグルコース分子をステビオシドに移してレバウディオサイドEを形成することができ、グルコース分子をレバウディオサイドAに移してレバウディオサイドDを形成することもできる。更に、EUS融合酵素はスクロースシンターゼ活性を有するので、UDP及びスクロースからUDP-グルコースを再生することができる。
この実施形態の方法で用いるのに適したUDPグリコシルトランスフェラーゼは上記と同一である。この実施形態の方法で用いるのに適したスクロースシンターゼは上記と同一である。
別の特に適切な実施形態は、スクロースシンターゼドメインに結合したウリジンジホスホグリコシルトランスフェラーゼドメインを含むUDP-グリコシルトランスフェラーゼ融合酵素を用いてレバウディオサイドEからレバウディオサイドD2を生成する方法に関する。この方法は、レバウディオサイドEと、スクロースと、ウリジン二リン酸(UDP)と、スクロースシンターゼドメインに結合したウリジンジホスホグリコシルトランスフェラーゼドメインを含むUDP-グリコシルトランスフェラーゼ融合酵素とを含む反応混合物を調製する工程、及びこの反応混合物を、グルコースがレバウディオサイドEと共有結合してレバウディオサイドD2を生成するのに十分な時間インキュベートしてレバウディオサイドD2を生成する工程を含む。
特に適切なUDP-グリコシルトランスフェラーゼ融合酵素については更に詳細に後述する。
最初に、この実施形態の方法で用いるUDPグリコシルトランスフェラーゼは上記と同一である。上述したように、この方法は、ウリジンジホスホグリコシルトランスフェラーゼを含有する反応混合物にスクロースシンターゼを添加してUGT-SUSカップリング系を生じさせる工程を更に含むことができる。
この実施形態の方法で用いるのに適したUDPグリコシルトランスフェラーゼは、上記と同じである。この実施形態の方法で用いるのに適したスクロースシンターゼは、上記と同じである。
別の特に適切な実施形態は、スクロースシンターゼドメインに結合したウリジンジホスホグリコシルトランスフェラーゼドメインを含むUDP-グリコシルトランスフェラーゼ融合酵素を用いてステビオシドからレバウディオサイドD2を生成する方法に関する。この方法は、ステビオシドと、スクロースから成る群より選択される基質と、ウリジン二リン酸(UDP)と、スクロースシンターゼドメインに結合したウリジンジホスホグリコシルトランスフェラーゼドメインを含むUDP-グリコシルトランスフェラーゼ融合酵素とを含む反応混合物を調製する工程、及びこの反応混合物を、グルコースがステビオシドと共有結合してレバウディオサイドE中間体を生成し、グルコースが該レバウディオサイドE中間体と共有結合してレバウディオサイドD2を生成するの十分な時間インキュベートしてレバウディオサイドD2を生成する工程を含む。
特に適切なUDP-グリコシルトランスフェラーゼ融合酵素について以下に更に詳細に述べる。
別の態様では、本開示は、UDP-グリコシルトランスフェラーゼ融合酵素(本明細書では「EUS」とも称する)に関する。特に、UDP-グリコシルトランスフェラーゼ融合酵素は、スクロースシンターゼドメインに結合したウリジンジホスホグリコシルトランスフェラーゼドメインを含む。EUS融合酵素は、1,2-19-O-グルコースグリコシル化活性を有する。驚くべきことにかつ予想外に、EUS融合酵素は、グルコース分子をレバウディオサイドEに移してレバウディオサイドD2を生成することができる1,6-13-O-グルコースグリコシル化活性をも有する。更に、EUS融合酵素はスクロースシンターゼ活性を有するので、UDP及びスクロースからUDP-グルコースを再生することができる。
UDP-グリコシルトランスフェラーゼ融合酵素は、SEQ ID NO:5に示すアミノ酸配列と少なくとも70%、少なくとも80%、少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも91%、少なくとも92%、少なくとも93%、少なくとも94%、少なくとも95%、少なくとも96%、少なくとも97%、少なくとも98%、少なくとも99%、100%でさえ同一のポリペプチド配列を有し得る。好適には、UDP-グリコシルトランスフェラーゼ融合酵素のアミノ酸配列は、SEQ ID NO:5と少なくとも80%の同一性を有する。更に好適には、UDP-グリコシルトランスフェラーゼ融合酵素のアミノ酸配列は、SEQ ID NO:5に示すアミノ酸配列と少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも91%、少なくとも92%、少なくとも93%、少なくとも94%、少なくとも95%、少なくとも96%、少なくとも97%、少なくとも98%、少なくとも99%、100%さえのアミノ酸配列同一性を有する。
適切なスクロースシンターゼドメインは、例えば、アラビドプシス属(Arabidopsis)スクロースシンターゼ1;アラビドプシス属(Arabidopsis)スクロースシンターゼ3及びヤエナリ(Vigna radiate)スクロースシンターゼであり得る。特に適切なスクロースシンターゼドメインは、例えば、アラビドプシス属(Arabidopsis)スクロースシンターゼ1であり得る。特に適切なアラビドプシス属(Arabidopsis)スクロースシンターゼ1は、シロイヌナズナ(Arabidopsis thaliana)スクロースシンターゼ1(AtSUSl)であり得る。特に適切なスクロースシンターゼ1ドメインは、例えば、SEQ ID NO:3のアミノ酸配列を有するスクロースシンターゼ1であり得る。
スクロースシンターゼは、NDP及びスクロースを生成するためのNDP-グルコースとD-フルクトースとの間の化学反応を触媒する。スクロースシンターゼはグリコシルトランスフェラーゼである。この酵素分類の系統名は、NDP-グルコース:D-フルクトース2-α-D-グルコシルトランスフェラーゼである。一般的に使用されている他の名称としては、UDP-グルコース-フルクトースグルコシルトランスフェラーゼ、スクロースシンターゼ、スクロース-UDPグルコシルトランスフェラーゼ、スクロース-ウリジン二リン酸グルコシルトランスフェラーゼ、及びウリジンジホスホグルコース-フルクトースグルコシルトランスフェラーゼがある。
別の態様では、本開示はレバウディオサイドDの合成方法に関する。本方法は、レバウディオサイドAと、スクロース、ウリジン二リン酸(UDP)及びウリジン二リン酸-グルコース(UDP-グルコース)から成る群より選択される基質と、ウリジンジホスホグリコシルトランスフェラーゼ及びスクロースシンターゼドメインに結合したウリジンジホスホグリコシルトランスフェラーゼドメインを含むUDP-グリコシルトランスフェラーゼ融合酵素(EUS)から成る群より選択されるUDP-グリコシルトランスフェラーゼとを含む反応混合物を調製する工程、及びこの反応混合物を、グルコースがレバウディオサイドAと共有結合してレバウディオサイドDを生成するのに十分な時間インキュベートしてレバウディオサイドDを生成する工程を含む。
UDP-グリコシルトランスフェラーゼがウリジンジホスホグリコシルトランスフェラーゼである実施形態では、適切なウリジンジホスホグリコシルトランスフェラーゼはイネ(Oryza sativa)ウリジンジホスホグリコシルトランスフェラーゼ EUGT11(GenBank登録番号AC133334)であり得る。特に適切なウリジンジホスホグリコシルトランスフェラーゼは、例えばSEQ ID NO:lのアミノ酸配列を有するウリジンジホスホグリコシルトランスフェラーゼであり得る。
UDP-グリコシルトランスフェラーゼがウリジンジホスホグリコシルトランスフェラーゼである実施形態では、本方法は、スクロースシンターゼを反応混合物に添加する工程を更に含むことができる。適切なスクロースシンターゼは、例えば、アラビドプシス属(Arabidopsis)スクロースシンターゼ1、アラビドプシス属(Arabidopsis)スクロースシンターゼ3及びヤエナリ(Vigna radiate)スクロースシンターゼであり得る。特に適切なスクロースシンターゼは、例えば、アラビドプシス属(Arabidopsis)スクロースシンターゼ1であり得る。特に適切なアラビドプシス属(Arabidopsis)スクロースシンターゼ1は、シロイヌナズナ(Arabidopsis thaliana)スクロースシンターゼ1(AtSUSl)であり得る。特に適切なスクロースシンターゼ1は、例えば、SEQ ID NO:3のアミノ酸配列を有するスクロースシンターゼ1であり得る。
UDP-グリコシルトランスフェラーゼが、上述したようにスクロースシンターゼドメインに結合したウリジンジホスホグリコシルトランスフェラーゼドメインを含むUDP-グリコシルトランスフェラーゼ融合酵素(EUS)である実施形態では、適切なウリジンジホスホグリコシルトランスフェラーゼドメインはイネ(Oryza sativa)ウリジンジホスホグリコシルトランスフェラーゼ EUGT11(GenBank登録番号AC133334)であり得る。特に適切なウリジンジホスホグリコシルトランスフェラーゼドメインは、例えば、SEQ ID NO:lのアミノ酸配列を有するウリジンジホスホグリコシルトランスフェラーゼドメインであり得る。特に適切なスクロースシンターゼ1ドメインは、例えば、SEQ ID NO:3のアミノ酸配列を有し得る。特に適切なUDP-グリコシルトランスフェラーゼ融合酵素(EUS)は、例えば、SEQ ID NO:5のアミノ酸配列を有し得る。
この実施形態の方法で用いるのに適したUDP-グリコシルトランスフェラーゼは上記と同一である。この実施形態の方法で用いるのに適したスクロースシンターゼは上記と同一である。
特に適切な実施形態は、UDP-グリコシルトランスフェラーゼ融合酵素を用いてレバウディオサイドDを合成する方法に関する。この方法は、レバウディオサイドAと、スクロースと、ウリジン二リン酸(UDP)と、スクロースシンターゼドメインに結合したウリジンジホスホグリコシルトランスフェラーゼドメインを含むUDP-グリコシルトランスフェラーゼ融合酵素(EUS)との反応混合物を調製する工程、及びこの反応混合物を、グルコースがレバウディオサイドAと共有結合してレバウディオサイドDを生成するのに十分な時間インキュベートしてレバウディオサイドDを生成する工程を含む。
特に適切なUDP-グリコシルトランスフェラーゼ融合酵素については更に詳細に上述してある。
一態様では、本開示は、甘くする量のレバウディオサイドD2を有する、飲料製品及び消費製品から成る群より選択される経口消費できる製品に関する。
経口消費できる製品は、約1%(w/v-%)〜約4%(w/v-%)のスクロース溶液と同等の甘味強度を有し得る。
経口消費できる製品は、約5ppm〜約100ppmのレバウディオサイドD2を有することができる。
レバウジオシドD2は、経口消費できる製品中の唯一の甘味料であってよい。
経口消費できる製品は、少なくとも1種の追加の甘味料を有してもよい。少なくとも1種の追加甘味料は、例えば、天然の高甘味度甘味料であり得る。追加の甘味料は、ステビアエキス、ステビオールグリコシド、ステビオシド、レバウディオサイドA、レバウディオサイドB、レバウディオサイドC、レバウディオサイドD、レバウディオサイドE、レバウディオサイドF、ズルコサイドA、ルブソサイド、ステビオールビオシド、スクロース、高フルクトースコーンシロップ、フルクトース、グルコース、キシロース、アラビノース、ラムノース、エリスリトール、キシリトール、マンニトール、ソルビトール、イノシトール、AceK、アスパルテーム、ネオテーム、スクラロース、サッカリン、ナリンギンジヒドロカルコン(NarDHC)、ネオヘスペリジンジヒドロカルコン(NDHC)、ルブソシド、モグロシド IV、シアメノシドI、モグロシド V、モナチン、タウマチン、モネリン、ブラゼイン、L-アラニン、グリシン、ロハングオ(Lo Han Guo)、ヘルナンズルシン、フィロズルチン、トリロブタイン、及びその組み合わせから選択可能である。
一態様では、本開示は、甘くする量のレバウディオサイドD2を含む飲料製品に関する。
飲料製品は、例えば、炭酸飲料製品及び非炭酸飲料製品であり得る。飲料製品は、例えば、ソフトドリンク、ファウンテン(fountain)飲料、冷凍飲料;すぐに飲める飲料;冷凍したすぐに飲める飲料、コーヒー、茶、乳飲料、粉末ソフトドリンク、液体濃縮物、風味付けした水、改良水、果実ジュース、果実ジュースで風味付けしたドリンク、スポーツドリンク、及びエナジードリンクであってもよい。
一部の実施形態では、本開示の飲料製品は、1種以上の飲料成分、例えば、酸味料、果実ジュース及び/又は野菜ジュース、果肉等、香味料、着色料、保存料、ビタミン、ミネラル、電解質、エリスリトール、タガトース、グリセリン、及び二酸化炭素を含むことができる。該飲料製品は、例えば飲料濃縮物及びすぐに飲める炭酸飲料等のいずれの適切な形態も提供可能である。
本明細書で使用する場合、「健康補助食品(dietary supplement)」は、食事を補助し、食事に欠けているか又は食事で十分に消費できない可能性があるビタミン、ミネラル、繊維、脂肪酸、アミノ酸等の栄養素を与えることを意図した化合物を指す。技術上周知のいずれの適切な健康補助食品も使用可能である。適切な健康補助食品の例は、例えば、栄養素、ビタミン、ミネラル、繊維、脂肪酸、ハーブ、植物、アミノ酸、及び代謝物であり得る。
本明細書で使用する場合、「栄養補助食品(nutraceutical)」は、疾患若しくは障害(例えば、疲労、不眠症、老化作用、記憶喪失、気分障害、心血管疾患及び高レベルの血中コレステロール、糖尿病、骨粗しょう症、炎症、自己免疫障害等)の予防及び/又は治療を含めた医学上又は健康上の利益を与え得るいずれの食品又は食品の一部をも含む化合物を指す。技術上周知のいずれの適切な栄養補助食品をも使用可能である。一部の実施形態では、栄養補助食品を食品及び飲料のサプリメントとして並びにカプセル剤若しくは錠剤等の固形剤、又は溶液若しくは懸濁液等の液剤であってよい経腸又は非経口用途のための医薬製剤として使用することができる。
一部の実施形態では、健康補助食品及び栄養補助食品は、保護親水コロイド(例えばガム、タンパク質、加工デンプン)、結合剤、膜形成剤、被包剤/材、壁/殻材、マトリックス化合物、コーティング、乳化剤、表面活性剤、可溶化剤(油、脂肪、蝋、レシチン等)、吸着剤、担体、充填剤、共化合物(co-compound)、分散剤、湿潤剤、加工助剤(溶媒)、流動剤、味マスキング剤、増量剤、ゼリー化剤(jellyfying agent)、ゲル形成剤、抗酸化剤及び抗菌剤を更に含有することができる。
本開示のゲルミックス及びゲル組成物は、技術上周知のいずれの適切な方法によっても調製可能である。一部の実施形態では、本開示の食用ゲルミックス及び食用ゲル組成物は、レバウディオサイドD2とゲル化剤に加えて他の成分を用いて調製可能である。他の適切な成分の例は、例えば、食用酸、食用酸の塩、緩衝系、嵩高剤、捕捉剤、架橋剤、1種以上の香料、1種以上の着色料、及びその組み合わせであり得る。
技術上周知のいずれの適切な医薬組成物を使用してもよい。ある特定の実施形態では、本開示の医薬組成物は約5ppm〜約100ppmのレバウディオサイドD2、及び1種以上の医薬的に許容できる賦形剤を含有することができる。一部の実施形態では、本開示の医薬組成物を用いて、生物学的効果を発揮する1種以上の活性薬を含有する医薬を処方することができる。従って、一部の実施形態では、本開示の医薬組成物は、生物学的効果を発揮する1種以上の活性薬を含有することができる。適切な活性薬は、技術上周知である(例えば、The Physician's Desk Reference)。該組成物は、例えば、Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Co., Easton, Pa., USAに記載されているように、技術上周知の手順に従って調製可能である。
消費製品中に存在するレバウディオサイドD2の適量は、例えば、約5百万分率(ppm)〜約100百万分率(ppm)であり得る。一部の実施形態では、例えば、100ppm未満の低濃度のレバウディオサイドD2は、10,000ppm〜30,000ppmの濃度を有するスクロース溶液と同等の甘味を有する。最終濃度は、約5ppm〜約100ppm、約5ppm〜約95ppm、約5ppm〜約90ppm、約5ppm〜約85ppm、約5ppm〜約80ppm、約5ppm〜約75ppm、約5ppm〜約70ppm、約5ppm〜約65ppm、約5ppm〜約60ppm、約5ppm〜約55ppm、約5ppm〜約50ppm、約5ppm〜約45ppm、約5ppm〜約40ppm、約5ppm〜約35ppm、約5ppm〜約30ppm、約5ppm〜約25ppm、約5ppm〜約20ppm、約5ppm〜約15ppm、又は約5ppm〜約10ppmの範囲である。或いは、レバウディオサイドD2は、本開示の消費製品中に約5ppm〜約100ppm、約10ppm〜約100ppm、約15ppm〜約100ppm、約20ppm〜約100ppm、約25ppm〜約100ppm、約30ppm〜約100ppm、約35ppm〜約100ppm、約40ppm〜約100ppm、約45ppm〜約100ppm、約50ppm〜約100ppm、約55ppm〜約100ppm、約60ppm〜約100ppm、約65ppm〜約100ppm、約70ppm〜約100ppm、約75ppm〜約100ppm、約80ppm〜約100ppm、約85ppm〜約100ppm、約90ppm〜約100ppm、又は約95ppm〜約100ppmの範囲の最終濃度で存在し得る。
ある特定の実施形態では、約5ppm〜約100ppmのレバウディオサイドD2が食品組成物中に存在する。本明細書で使用する場合、「食品組成物」は、栄養価を有し得るが、これが必要なわではなく、かつヒト及び動物による消費を意図し得るいずれの固体又は液体の摂取可能物質をも表す。
食品組成物は、ハーブ、スパイス及び調味料、天然及び合成香料、並びに風味向上剤、例えばグルタミン酸一ナトリウム等であってもよい。一部の実施形態では、食品組成物は、例えば、調理済み包装製品、例えばダイエット甘味料、液体甘味料、顆粒化フレーバーミックス、ペットフード、家畜用餌、タバコ、及びベーキング用途の材料、例えばパン、クッキー、ケーキ、パンケーキ、ドーナツ等の調製用の粉末化ベーキングミックスであり得る。他の実施形態では、食品組成物は、スクロースをほとんど又は全く含まないダイエット及び低カロリー食品及び飲料であってもよい。
別の態様では、本開示は、下記化学構造から成る甘味料に関する。
ある特定の実施形態では、消費製品及び飲料製品を甘くし及び/又はその甘さを増強するのに十分な最終濃度でレバウディオサイドD2甘味料を含めることができ及び/又は添加することができる。レバウディオサイドD2の「最終濃度」は、最終消費製品及び飲料製品中に存在する(すなわち、全ての成分及び/又は化合物を添加して消費製品及び飲料製品が生成された後の)レバウディオサイドD2の濃度を指す。従って、ある特定の実施形態では、レバウディオサイドD2は、消費製品及び飲料製品を調製するために用られる化合物又は成分に含められ及び/又は添加される。レバウディオサイドD2は、単一の化合物若しくは成分、又は複数の化合物及び成分に存在し得る。他の実施形態では、レバウディオサイドD2は、消費製品及び飲料製品に含められ及び/又は添加される。ある特定の実施形態では、レバウディオサイドD2は、約5ppm〜約100ppm、約5ppm〜約95ppm、約5ppm〜約90ppm、約5ppm〜約85ppm、約5ppm〜約80ppm、約5ppm〜約75ppm、約5ppm〜約70ppm、約5ppm〜約65ppm、約5ppm〜約60ppm、約5ppm〜約55ppm、約5ppm〜約50ppm、約5ppm〜約45ppm、約5ppm〜約40ppm、約5ppm〜約35ppm、約5ppm〜約30ppm、約5ppm〜約25ppm、約5ppm〜約20ppm、約5ppm〜約15ppm、又は約5ppm〜約10ppmの範囲の最終濃度で含められ及び/又は添加される。或いは、レバウディオサイドD2は、約5ppm〜約100ppm、約10ppm〜約100ppm、約15ppm〜約100ppm、約20ppm〜約100ppm、約25ppm〜約100ppm、約30ppm〜約100ppm、約35ppm〜約100ppm、約40ppm〜約100ppm、約45ppm〜約100ppm、約50ppm〜約100ppm、約55ppm〜約100ppm、約60ppm〜約100ppm、約65ppm〜約100ppm、約70ppm〜約100ppm、約75ppm〜約100ppm、約80ppm〜約100ppm、約85ppm〜約100ppm、約90ppm〜約100ppm、又は約95ppm〜約100ppmの範囲の最終濃度で含められ及び/又は添加される。
ある特定の実施形態では、レバウディオサイドD2は、消費製品及び飲料製品に含められ及び/又は添加される唯一の甘味料である。該実施形態では、消費製品及び飲料製品は、約1%〜約4%(w/v-%)のスクロース溶液、約1%〜約3%(w/v-%)のスクロース溶液、又は約1%〜約2%(w/v-%)のスクロース溶液と同等の甘味強度を有する。或いは、消費製品及び飲料製品は、約1%〜約4%(w/v-%)のスクロース溶液、約2%〜約4%(w/v-%)のスクロース溶液、約3%〜約4%(w/v-%)のスクロース溶液、又は約4%と同等の甘味強度を有する。例えば、消費製品及び飲料製品は、約1%、約2%、約3%、又は約4%(w/v-%)(これらの値間のいずれの範囲をも含めて)のスクロース溶液と同等の甘味強度を有し得る。
本開示の消費製品及び飲料製品は、レバウディオサイドD2と本開示の1種以上の甘味料との混合物を、所望の甘味強度、栄養特性、味覚プロファイル、口当たり、又は他の感覚受容因子を達成するのに十分な比率で含むことができる。
下記非限定例を考慮すると、本開示が更に完全に理解されるであろう。
この実施例では、全ての候補UGT遺伝子の全長DNA断片を合成した。
詳細には、大腸菌発現のためにcDNAsをコドン最適化した(Genscript, Piscataway, NJ)。合成DNAを細菌発現ベクターpETite N-His SUMO Kan Vector(Lucigen)中でクローン化した。UDP-グリコシルトランスフェラーゼ融合酵素(EUS)(SEQ ID NO:6参照)をコードするヌクレオチド配列のため、イネ(Oryze sativa)ウリジンジホスホグリコシルトランスフェラーゼ(EUGT11)ドメイン(SEQ ID NO:2参照) をコードするヌクレオチド配列と、シロイヌナズナ(A. thaliana)スクロースシンターゼ1(AtSUSl)ドメイン(SEQ ID NO:4参照)をコードするヌクレオチド配列との間のフレームにGSGリンカー(ヌクレオチド配列:ggttctggtによってコードされた)を挿入した。
表2は、タンパク質及び配列識別番号(sequence identifier number)を要約する。
細胞ペレットを溶解緩衝液(50mMのリン酸カリウム緩衝液、pH7.2、25μg/mlのリゾチーム、5μg/mlのデオキシリボヌクレアーゼI、20mMのイミダゾール、500mMのNaCl、10%のグリセロール、及び0.4%のTRITON X-100)に再懸濁させた。4℃で超音波処理により細胞を破壊し、細胞デブリを遠心分離により清澄にした(18,000xg;30分)。上清を平衡化(平衡化緩衝液:50mMのリン酸カリウム緩衝液、pH7.2、20mMのイミダゾール、500mMのNaCl、10%のグリセロール)Ni-NTA(Qiagen)アフィニティーカラムに装填した。タンパク質サンプルの装填後、カラムを平衡化緩衝液で洗浄して未結合混入タンパク質を除去した。His標識されたUGT組換えポリペプチドを、250mMのイミダゾールを含有する平衡化緩衝液で溶出した。精製後、組換えEUGT11タンパク質(図2Aに矢印で示した62kDバンド)及びEUS融合酵素(図2Bに矢印で示した155kDバンド)をSDS-PAGEで分析した。分子量標準を各SDS-ゲル画像の左に示してある。
この実施例では、レバウディオサイドAをステビオールグリコシド基質として用いて、組換えEUGT11タンパク質及び組換えEUS融合酵素を1,2-19 O-グルコースグリコシル化活性についてアッセイした。
組換えポリペプチド(10μg)を200μLのインビトロ反応系で試験した。反応系は50mMのリン酸カリウム緩衝液、pH7.2、3mMのMgCl2、1mg/mlのステビオールグリコシド基質、及び1mMのUDP-グルコースを含有した。反応は30℃で行ない、200μLの1-ブタノールを添加して終わらせた。サンプルを3回200μLの1-ブタノールで抽出した。プールした画分を乾燥させ、高速液体クロマトグラフィー(HPLC)分析のため7μLの80%メタノールに溶かした。レバウディオサイドA(純度99%)を基質として用いた。レバウディオサイドAは、Blue California(Rancho Santa Margarita, CA)から得た。インビトロ反応を14時間及び24時間行なった。図3Aは、比較のためレバウディオサイドD(標識「Reb D」)のピークを示す。
UGT触媒グリコシル化反応を、スクロースシンターゼ(例えば、AtSUSl)で触媒されるUDP-グルコース産生反応(本明細書では「UGT-SUSカップリング系」と称する)と共役させた。詳細には、シロイヌナズナ(Arabidopsis thaliana)スクロースシンターゼ1(AtSUSl)配列(Bieniawska et al., Plant J. 2007, 49: 810-828)を合成して細菌発現ベクターに挿入した。組換えAtSUSlタンパク質を発現させてアフィニティークロマトグラフィーで精製した。AtSUSlタンパク質をEUGT11タンパク質に添加して、本明細書ではEUGT11-AtSUSlカップリング系と称するインビトロ反応混合物を形成した。結果として生じたUGT-SUS(例えば、EUGT11-AtSUSl)カップリング系においては、UDP-グルコースがスクロース及びUDPから産生され、その結果、余分なUDP-グルコースの添加を省いた。
図3に示すように、全ての反応条件でEUS及びEUGT11が糖部分をレバウディオサイドAに移してレバウディオサイドDを生成した。レバウディオサイドAは、EUS融合酵素(図3B及び3E)及びUGT-SUS(すなわち、EUGT11-AtSUSl)カップリング反応系(図5D及び5G)によって14時間及び24時間のインキュベーション時間で完全にレバウディオサイドDに変換された。しかしながら、レバウディオサイドAは、EUGT11酵素のみでは14時間(図3C)及び24時間(図3F)で一部だけがレバウディオサイドDに変換された。更に、同一分子量のEUSは、EUGT11より高い酵素活性を有し、14時間(図3B)及び24時間(図3E)のインキュベーション時間で全てのレバウディオサイドAをレバウディオサイドDに変換した。これらの結果は、UGT-SUS(すなわち、EUGT11-AtSUSl)カップリング系の反応は、EUS融合酵素を用いて達成できることを実証した。更に、これらの結果は、EUGT11が、レバウディオサイドAからレバウディオサイドDを生成するための1,2-19-O-グルコースグリコシル化活性を示すこと(図3C及び3F)、及びAtSUSlが、UGT-SUSカップリング系におけるEUGT11による変換効率を高めること(図3B、3D、3E及び3G)を実証した。図3Aは、比較のためにステビオシド(標識「Ste」)、レバウディオサイドA(標識「Reb A」)及びレバウディオサイドD(標識「Reb D」)のピークを示す。
この実施例では、実施例2で述べたように14時間及び24時間のインキュベーション時間でステビオールグリコシド基質としてステビオシドを用いて、EUGT11及びEUSを1,2-19-O-グルコースグリコシル化活性についてアッセイした。
上記実施例2に記載のEUGT11によるレバウディオサイドAのレバウディオサイドDへの変換に加えて、EUGT11はステビオシドをもレバウディオサイドEに変換した(図4中、標識「Reb E」)。驚くべきことに、約7.28分のHPLC保持時間を有する予想外の化合物、レバウディオサイドD2(図4中、標識「Reb D2」)が全ての反応でEUGT11とEUSの両者により生成された。AtSUSlをEUGT11反応混合物に添加してUGT-SUSカップリング系を生じさせたとき(図4D及び4G)、及びEUSを用いたとき(図4B及び4E)、更にレバウディオサイドD2が生成された。レバウディオサイドD2生成の増加と共に、生成されたレバウディオサイドE(図4C及び4F中の標識「Reb E」)は、レバウディオサイドD2の生成中に消費された。これらの結果は、EUGT11が、レバウディオサイドEからレバウディオサイド(レバウディオサイドD2)を生成するための反応を触媒できることを示した。図4Aは、比較のためステビオシド(標識「Ste」)、レバウディオサイドA(標識「Reb A」)及びレバウディオサイドD(標識「Reb D」)のピークを示す。
この実施例では、レバウディオサイドEのレバウディオサイドD2への変換をインビトロで確認するため、実施例2で述べたようにステビオールグリコシド基質としてレバウディオサイドEを用いてEUGT11及びEUSをアッセイした。
比較のため、別のUGT(UGT76G1)の酵素活性をもアッセイした。ステビア由来のUGT76G1は、ステビオシドのC13-O-グルコースのC-3'に糖残基を移してレバウディオサイドAを形成する酵素として同定されている。図5F及び5Jに示すように、UGT-SUSカップリング系においてUGT76G1を使用すると、糖残基がレバウディオサイドEのC13-O-グルコースのC-3'に転移してレバウディオサイドDを形成する。図5A及び5Bは、比較のため精製レバウディオサイドD(「Reb D」)及びレバウディオサイドE(「Reb-E」)を示す。
上記実施例3で論じ、図5C及び5Gに示すように、EUGT11だけが1つのグルコース分子をレバウディオサイドEに移して、レバウディオサイドD及びEと異なる(それぞれ、図5A及び図5Bのピークを比較されたい)レバウディオサイド(本明細書では「レバウディオサイドD2」と称し、図5C及び5G中の標識「Reb D2」)を形成することができた。UGT-SUSカップリング系におけるEUGT11(図5D及び5H)並びにEUS(図5E及び5I)は、レバウディオサイドEからレバウディオサイドD2への変換を増進した。
これらの結果は、EUGT11が、関連ステビオールグリコシドを生成するための1,2-19-O-グルコースグリコシル化活性を有するUGTであることを実証した。EUGT11は、基質としてのステビオシドからReb-Eを生成し、基質としてのReb-AからReb-Dを生成するための反応を触媒することができる。驚くべきことに、化合物(Reb-D2)は、基質としてのステビオシドとのインビトロ反応で予想外に合成された。さらなる実験は、Reb-D2がReb-Eから直接合成されることを確証した。Reb-D2の構造によれば、インビトロ反応において、EUGT11がD-グルコースをReb-EのC13-O-グルコースのC-6'に移してl,6-β-グリコシド結合をもたらした。
この実施例では、拡大インビトロ反応からレバウディオサイド(レバウディオサイドD2)を精製し、液体クロマトグラフィー/質量分析(LC/MS)及び核磁気共鳴(NMR)分析用に調製した。
レバウディオサイド(レバウディオサイドD2)を拡大インビトロ反応から精製した。インビトロ反応をHPLC分析によりモニターした。所望の時点で、Reb-D2化合物をカラムで精製し、真空乾燥で濃縮した。精製Reb-D2は、95%純度の白色粉末であった。収集したReb-D2化合物を高分解能質量スペクトル(HRMS)解析に使用した。LTQ Orbitrap Discovery HRMS機器で、その分解能を30kに設定してHRMSデータを生成し、正イオンエレクトロスプレーモードで、m/z 150から1500までデータをスキャンした。ニードル電圧を4kVに設定し;他のソース条件は、シースガス=25、補助ガス(aux gas)=0、スイープガス=5(全てのガス流量は任意単位)、キャピラリー電圧=30V、キャピラリー温度=300℃、及びチューブレンズ電圧=75であった。サンプルを2:2:1のアセトニトリル:メタノール:水(注入溶出剤と同じ)で希釈し、50マイクロリットルのサンプルを注入した。Bruker Avance DRX 500 MHz機器又はVarian INOVA 600 MHz機器を用いて標準パルスシーケンスを利用して核磁気共鳴(NMR)スペクトルを取得した。1D(1H及び13C)及び2D(TOCSY、HMQC、及びHMBC)NMRスペクトル分析をピリジン-d5(C5D5Nとしても知られる)中で行なった。
Reb-D2の分子式を、m/zがそれぞれ1146.5169及び1151.4721で[M+NH4]+及び[M+Na]+に対応する付加イオンを示すその正の高分解能質量スペクトル(HRMS)に基づいてC50H80O28と推定した。この組成は13C NMRスペクトルデータにより支持された。Reb-D2の1H NMRスペクトルデータは、δ 1.10及び1.44に2つのメチルの一重線、δ 5.09及び5.72に環外二重結合の一重線として2つのオレフィン性プロトン、δ 0.74〜2.80の間に9つのsp3メチレン及び2つのsp3メチンプロトンの存在を示した。これは、ステビア属から単離されたent-カウランジテルペノイドの特徴である。
ent-カウランジテルペノイドの基本骨格はTOCSY研究により支持され、重要な相関性を示した:H-l/H-2;H-2/H-3;H-5/H-6;H-6/H-7;H-9/H-11;H-11/H-12。Reb-D2の1H NMRスペクトルもδ 5.04、5.10、5.21、5.48及び6.30で共鳴するアノマープロトンを示し;その構造内の5つの糖単位を示唆している。Reb-D2の5%H2S04による酸加水分解はD-グルコースを与えた。これはTLCによって標品との直接比較により同定された。δ 5.04(d, J=7.5Hz)、5.10(d, J=7.4Hz)、5.21(d, J=7.9Hz)、5.48(d, J=7.9Hz)、及び6.30(d, J=7.9Hz)でグルコース成分の5つのアノマープロトンについて観察された大きいカップリング定数は、他のステビオールグリコシドについて報告されたようにそれらのβ-配向性を示唆している。Reb-D2についての1H及び13C NMRの値をTOCSY、HMQC及びHMBCデータに基づいて割り当て、表3に要約する。
Reb-D2のNMRスペクトルデータ及び加水分解実験の結果に基づいて、アグリコンステビオールに結合したその構造中に5つのβ-D-グリコシル単位があると結論づけた。Reb-D2とレバウディオサイドEの1H及び13C NMRの値の厳密な比較(表2参照)により、エーテル結合の形でC13に2-O-β-D-グルコビオシル単位及びエステル結合の形でC19位に別の2-O-β-D-グルコビオシル単位を有し、さらなるβ-D-グルコシル単位の割当が残っているステビオールアグリコン成分の存在が示唆された。更に、糖部分の5つのオキシメチンカーボンの1つがδ 69.8の低磁場に現れることを示すReb-D2の13C NMRスペクトルデータにより、この位置にβ-D-グルコシル単位が更に配置されることが示唆された。Reb-D2及びReb-Eの2つの糖I及びIVについての同一のプロトン及びカーボンスペクトルデータにより、糖II又は糖IIIのどちらかの6位にβ-D-グルコシル単位が配置されることが示唆された。β-D-グルコシル成分の糖IIの6位における1H及び13Cの化学シフトが両方とも低磁場シフトしたことにより、さらなるβ-D-グルコシル単位がこの位置に付着していることをが示唆された。この構造は、図7に示すように主要なTOCSYとHMBCの相関によって更に支持された。
NMR及び質量スペクトルデータ並びに加水分解研究の結果に基づいて、レバウディオサイドEの酵素的変換により生成されるReb-D2の構造を13-[(2-O-β-D-グルコピラノシル-6-O-β-D-グルコピラノシル-β-D-グルコピラノシル)オキシ]-ent-カウラ-16-エン-19-オイック酸-(2-O-β-D-グルコピラノシル-β-D-グルコピラノシル)エステルと推定した。
13-[(2-O-β-D-グルコピラノシル-6-O-β-D-グルコピラノシル-β-D-グルコピラノシル)オキシ]-ent-カウラ-16-エン-19-オイック酸-(2-O-β-D-グルコピラノシル-β-D-グルコピラノシル)エステル(Reb-D2)。白色粉末;1H-NMR(600MHz, C5D5N, δppm)及び13C-NMR (150MHz, C5D5N, δppm)分光学的データは表2参照;HRMS (M+NH4)+ m/z 1146.5169(C50H84O28Nに対する計算値:1146.5180)、(M+Na)+ m/z 1151.4721(C50H80O28Naに対する計算値:1151.4734)。
広範な1D(1H及び13C)、及び2D NMR(TOCSY、HMQC、及びHMBC)、並びに高分解能質量スペクトルデータ及び加水分解研究に基づいてReb-D2の構造を13-[(2-O-β-D-グルコピラノシル-6-O-β-D-グルコピラノシルβ-D-グルコピラノシル)オキシ]-ent-カウラ-16-エン-19-オイック酸-(2-O-β-D-グルコピラノシルβ-D-グルコピラノシル)エステルと推定した。
この実施例では、レバウディオサイド(レバウディオサイドD2)の構造をReb-E及びReb-Dと比較した。
ステビオールグリコシドのデータベースによれば、Reb-Dだけがその構造中にアグリコンステビオールに結合した5つのβ-D-グリコシル単位、すなわちアグリコンステビオールのC19位に2つのグリコシド残基及びC13位に3つのグリコシド残基を含有する。スレビア由来のUGT76G1は、糖残基をReb-EのC13-O-グルコースのC-3'に移してレバウディオサイドDを形成する酵素と同定されている(図5F及び5J参照)。Reb-D2は、レバウディオサイドDと比較すると構造が異なるが、やはり5つのD-グリコシド残基を含有するステビオールグリコシドである(図8参照)。レバウディオサイドD2の第5グリコシド残基(「糖V」)は、1,6-β-グリコシド結合によってReb-EのC-13-O-グルコースのC-6'に位置しているが、レバウディオサイドDの第5グリコシド残基(「糖V」)は、1,3-β-グリコシド結合によってReb-EのC13-O-グルコースのC-3'に位置している(図8参照)。ここで述べたように、EUGT11及びEUGは両方ともインビトロで直接Reb-EをReb-D2に変換することができる。
この実施例では、Reb-D2について味覚検査を行なった。
コントロールとしてスクロースを用いてReb-D2の官能評価を行なった。スクロースサンプルはSigma-Aldrichから購入し、室温で容器入り飲料水(bottled water)中1.0%、3.0%、及び6.0%(w/v)の3つの異なる濃度のスクロースでコントロールサンプルを調製した。官能評価のための300、及び600ppmのステビオールグリコシドReb-D2は、1000mLの容器入り飲料水に対応質量を添加することによって調製した。混合物を室温で撹拌し、次にステビオールグリコシドサンプルを1.0%、3.0%、及び6.0%のいくつかのコントロールスクロースサンプルに対して9名の志願者団により評価した。
盲検結果は、2つの異なる濃度(300及び600ppm)のReb-D2で9名の志願者の過半数の間で一致した結果を示し;全体的な%甘味等価(sweetness equivalence)(SE)平均は、それぞれ約2.4及び5.4であった。この結果は、レバウディオサイドD2がスクロースの約80〜90倍甘いことを示している。
この実施例では、Reb-D2の溶解度をReb-Dと比較した。
Reb-D2及びReb-Dを水に添加して0.25mM、0.5mM、1mM、1.5mM、2mM、5mM及び10mMのReb-D2及びReb-D溶液を調製した。Reb-D2粉末は即座に水に完全に溶解したが、0.25mMのReb-Dだけが水に全体的に溶解した。更に、0.5mM、1mM、1.5mM、2mM、5mM及び10mMの濃度のReb-Dの溶液は、30℃で72時間加熱しても溶解しなかった。
これらの結果は、水中でReb-D2がReb-Dより高い溶解度を有することを実証している。
上記を考慮すると、本開示のいくつかの利点が達成され、他の有利な結果が得られることが分かるであろう。本開示の範囲を逸脱することなく、上記方法及びシステムに種々の変更を加え得るので、上記説明に含まれ、添付図面に示される全ての事項は、例示として解釈すべきであり、限定的意味に解釈すべきでないことが意図される。
本開示又はその種々の異形、実施形態又は態様の要素を導入するときには、冠詞「a」、「an」、「the」及び「said」は、1つ以上の要素を意味するつもりである。用語「含む」、「含める」及び「有する」は、包括的であり、列挙した要素以外に更に要素があり得ることを意味するつもりである。
Claims (103)
- 下記化学構造から成る合成レバウディオサイド。
- レバウディオサイドD2の合成方法であって、下記工程、
レバウディオサイドEと、スクロース、ウリジン二リン酸(UDP)及びウリジン二リン酸-グルコース(UDP-グルコース)から成る群より選択される基質と、ウリジンジホスホグリコシルトランスフェラーゼ及びスクロースシンターゼドメインに結合したウリジンジホスホグリコシルトランスフェラーゼドメインを含むUDP-グリコシルトランスフェラーゼ融合酵素から成る群より選択されるウリジン二リン酸(UDP)-グリコシルトランスフェラーゼとを含む反応混合物を調製する工程、及び
前記反応混合物を、グルコースが前記レバウディオサイドEと共有結合してレバウディオサイドD2を生成するのに十分な時間インキュベートしてレバウディオサイドD2を生成する工程、
を含むことを特徴とする方法。 - 前記UDP-グリコシルトランスフェラーゼが、イネ(Oryza sativa)ウリジンジホスホグリコシルトランスフェラーゼEUGT11である、請求項2に記載の方法。
- スクロースシンターゼを前記反応混合物に添加する工程を更に含む、請求項2に記載の方法。
- 前記スクロースシンターゼが、アラビドプシス属(Arabidopsis)スクロースシンターゼ1、アラビドプシス属(Arabidopsis)スクロースシンターゼ3及びヤエナリ(Vigna radiate)スクロースシンターゼから成る群より選択される、請求項4に記載の方法。
- 前記スクロースシンターゼが、シロイヌナズナ(Arabidopsis thaliana)スクロースシンターゼ1である、請求項4に記載の方法。
- 前記UDP-グリコシルトランスフェラーゼが、スクロースシンターゼドメインに結合したウリジンジホスホグリコシルトランスフェラーゼドメインを含むUDP-グリコシルトランスフェラーゼ融合酵素である、請求項2に記載の方法。
- 前記UDP-グリコシルトランスフェラーゼ融合酵素が、SEQ ID NO:5と約90%の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項7に記載の方法。
- 前記ウリジンジホスホグリコシルトランスフェラーゼドメインが、イネ(Oryza sativa)ウリジンジホスホグリコシルトランスフェラーゼEUGT11ドメインである、請求項2の方法。
- 前記ウリジンジホスホグリコシルトランスフェラーゼドメインが、SEQ ID NO:1のアミノ酸配列である、請求項2に記載の方法。
- 前記スクロースシンターゼドメインが、アラビドプシス属(Arabidopsis)スクロースシンターゼ1、アラビドプシス属(Arabidopsis)スクロースシンターゼ3及びヤエナリ(Vigna radiate)スクロースシンターゼから成る群より選択される、請求項2に記載の方法。
- 前記スクロースシンターゼドメインが、シロイヌナズナ(Arabidopsis thaliana)スクロースシンターゼ1である、請求項2に記載の方法。
- 前記スクロースシンターゼドメインが、SEQ ID NO:3のアミノ酸配列である、請求項2に記載の方法。
- レバウディオサイドD2の合成方法であって、下記工程、
ステビオシドと、スクロース、ウリジン二リン酸及びウリジン二リン酸-グルコースから成る群より選択される基質と、ウリジンジホスホグリコシルトランスフェラーゼ及びスクロースシンターゼドメインに結合したウリジンジホスホグリコシルトランスフェラーゼドメインを含むUDP-グリコシルトランスフェラーゼ融合酵素から成る群より選択されるUDP-グリコシルトランスフェラーゼとを含む反応混合物を調製する工程、及び
前記反応混合物を、グルコースが前記ステビオシドと共有結合してレバウディオサイドE中間体を生成し、グルコースが前記レバウディオサイドE中間体と共有結合してレバウディオサイドD2を生成するのに十分な時間インキュベートしてレバウディオサイドD2を生成する工程、
を含むことを特徴とする方法。 - 前記UDP-グリコシルトランスフェラーゼが、イネ(Oryza sativa)ウリジンジホスホグリコシルトランスフェラーゼEUGT11である、請求項14に記載の方法。
- スクロースシンターゼを前記反応混合物に添加する工程を更に含む、請求項15に記載の方法。
- 前記スクロースシンターゼが、アラビドプシス属(Arabidopsis)スクロースシンターゼ1、アラビドプシス属(Arabidopsis)スクロースシンターゼ3及びヤエナリ(Vigna radiate)スクロースシンターゼから成る群より選択される、請求項16に記載の方法。
- 前記スクロースシンターゼが、シロイヌナズナ(Arabidopsis thaliana)スクロースシンターゼ1である、請求項16に記載の方法。
- 前記UDP-グリコシルトランスフェラーゼが、スクロースシンターゼドメインに結合したウリジンジホスホグリコシルトランスフェラーゼドメインを含むUDP-グリコシルトランスフェラーゼ融合酵素である、請求項14に記載の方法。
- 前記UDP-グリコシルトランスフェラーゼ融合酵素が、SEQ ID NO:5と約90%の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項19に記載の方法。
- 前記ウリジンジホスホグリコシルトランスフェラーゼドメインが、イネ(Oryza sativa)ウリジンジホスホグリコシルトランスフェラーゼEUGT11である、請求項14の方法。
- 前記ウリジンジホスホグリコシルトランスフェラーゼドメインが、SEQ ID NO:1のアミノ酸配列である、請求項14に記載の方法。
- 前記スクロースシンターゼドメインが、アラビドプシス属(Arabidopsis)スクロースシンターゼ1、アラビドプシス属(Arabidopsis)スクロースシンターゼ3及びヤエナリ(Vigna radiate)スクロースシンターゼから成る群より選択される、請求項14に記載の方法。
- 前記スクロースシンターゼドメインが、シロイヌナズナ(Arabidopsis thaliana)スクロースシンターゼ1である、請求項14に記載の方法。
- 前記スクロースシンターゼドメインが、SEQ ID NO:3のアミノ酸配列である、請求項14に記載の方法。
- スクロースシンターゼドメインに結合したウリジンジホスホグリコシルトランスフェラーゼドメインを含むUDP-グリコシルトランスフェラーゼ融合酵素。
- SEQ ID NO:5と約90%の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項26のUDP-グリコシルトランスフェラーゼ融合酵素。
- 前記ウリジンジホスホグリコシルトランスフェラーゼドメインが、イネ(Oryza sativa)ウリジンジホスホグリコシルトランスフェラーゼEUGT11である、請求項26のUDP-グリコシルトランスフェラーゼ融合酵素。
- 前記ウリジンジホスホグリコシルトランスフェラーゼドメインが、SEQ ID NO:1のアミノ酸配列である、請求項26に記載のUDP-グリコシルトランスフェラーゼ融合酵素。
- 前記スクロースシンターゼドメインが、アラビドプシス属(Arabidopsis)スクロースシンターゼ1、アラビドプシス属(Arabidopsis)スクロースシンターゼ3及びヤエナリ(Vigna radiate)スクロースシンターゼから成る群より選択される、請求項26に記載のUDP-グリコシルトランスフェラーゼ融合酵素。
- 前記スクロースシンターゼドメインが、シロイヌナズナ(Arabidopsis thaliana)スクロースシンターゼ1である、請求項30に記載のUDP-グリコシルトランスフェラーゼ融合酵素。
- 前記スクロースシンターゼドメインが、SEQ ID NO:3のアミノ酸配列である、請求項26に記載のUDP-グリコシルトランスフェラーゼ融合酵素。
- レバウディオサイドDの合成方法であって、下記工程:
レバウディオサイドAと、スクロース、ウリジン二リン酸(UDP)及びウリジン二リン酸-グルコース(UDP-グルコース)から成る群より選択される基質と、ウリジンジホスホグリコシルトランスフェラーゼ及びスクロースシンターゼドメインに結合したウリジンジホスホグリコシルトランスフェラーゼドメインを含むUDP-グリコシルトランスフェラーゼ融合酵素から成る群より選択されるUDP-グリコシルトランスフェラーゼとを含む反応混合物を調製する工程、及び
前記反応混合物を、グルコースが前記レバウディオサイドAと共有結合してレバウディオサイドDを生成するのに十分な時間インキュベートしてレバウディオサイドDを生成する工程、
を含むことを特徴とする方法。 - 前記UDP-グリコシルトランスフェラーゼが、イネ(Oryza sativa)ウリジンジホスホグリコシルトランスフェラーゼ EUGT11である、請求項33に記載の方法。
- スクロースシンターゼを前記反応混合物に添加する工程を更に含む、請求項34に記載の方法。
- 前記スクロースシンターゼが、アラビドプシス属(Arabidopsis)スクロースシンターゼ1、アラビドプシス属(Arabidopsis)スクロースシンターゼ3及びヤエナリ(Vigna radiate)スクロースシンターゼから成る群より選択される、請求項35に記載の方法。
- 前記スクロースシンターゼが、シロイヌナズナ(Arabidopsis thaliana)スクロースシンターゼ1である、請求項35に記載の方法。
- 前記UDP-グリコシルトランスフェラーゼが、スクロースシンターゼドメインに結合したウリジンジホスホグリコシルトランスフェラーゼドメインを含むUDP-グリコシルトランスフェラーゼ融合酵素である、請求項33に記載の方法。
- 前記UDP-グリコシルトランスフェラーゼ融合酵素が、SEQ ID NO:5と約90%の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項38に記載の方法。
- 前記ウリジンジホスホグリコシルトランスフェラーゼドメインが、イネ(Oryza sativa)ウリジンジホスホグリコシルトランスフェラーゼEUGT11である、請求項33に記載の方法。
- 前記ウリジンジホスホグリコシルトランスフェラーゼドメインが、SEQ ID NO:1のアミノ酸配列である、請求項33に記載の方法。
- 前記スクロースシンターゼドメインが、アラビドプシス属(Arabidopsis)スクロースシンターゼ1、アラビドプシス属(Arabidopsis)スクロースシンターゼ3及びヤエナリ(Vigna radiate)スクロースシンターゼから成る群より選択される、請求項33に記載の方法。
- 前記スクロースシンターゼドメインが、シロイヌナズナ(Arabidopsis thaliana)スクロースシンターゼ1である、請求項33に記載の方法。
- 前記スクロースシンターゼドメインが、SEQ ID NO:3のアミノ酸配列である、請求項33に記載の方法。
- レバウディオサイドEの合成方法であって、下記工程、
ステビオシドと、スクロース、ウリジン二リン酸(UDP)及びウリジン二リン酸-グルコース(UDP-グルコース)から成る群より選択される基質と、ウリジンジホスホグリコシルトランスフェラーゼ及びスクロースシンターゼドメインに結合したウリジンジホスホグリコシルトランスフェラーゼドメインを含むUDP-グリコシルトランスフェラーゼ融合酵素から成る群より選択されるUDP-グリコシルトランスフェラーゼとを含む反応混合物を調製する工程、
を含み、グルコースが、前記ステビオシドと共有結合してレバウディオサイドEを生成することを特徴とする方法。 - 前記UDP-グリコシルトランスフェラーゼが、イネ(Oryza sativa)ウリジンジホスホグリコシルトランスフェラーゼEUGT11である、請求項45に記載の方法。
- スクロースシンターゼを前記反応混合物に添加する工程を更に含む、請求項46に記載の方法。
- 前記スクロースシンターゼが、アラビドプシス属(Arabidopsis)スクロースシンターゼ1、アラビドプシス属(Arabidopsis)スクロースシンターゼ3及びヤエナリ(Vigna radiate)スクロースシンターゼから成る群より選択される、請求項47に記載の方法。
- 前記スクロースシンターゼが、シロイヌナズナ(Arabidopsis thaliana)スクロースシンターゼ1である、請求項47に記載の方法。
- 前記UDP-グリコシルトランスフェラーゼが、スクロースシンターゼドメインに結合したウリジンジホスホグリコシルトランスフェラーゼドメインを含むUDP-グリコシルトランスフェラーゼ融合酵素である、請求項45に記載の方法。
- 前記UDP-グリコシルトランスフェラーゼ融合酵素が、SEQ ID NO:5と約90%の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項50に記載の方法。
- 前記ウリジンジホスホグリコシルトランスフェラーゼドメインが、イネ(Oryza sativa)ウリジンジホスホグリコシルトランスフェラーゼEUGT11である、請求項45に記載の方法。
- 前記ウリジンジホスホグリコシルトランスフェラーゼドメインが、SEQ ID NO:1のアミノ酸配列である、請求項45に記載の方法。
- 前記スクロースシンターゼドメインが、アラビドプシス属(Arabidopsis)スクロースシンターゼ1、アラビドプシス属(Arabidopsis)スクロースシンターゼ3及びヤエナリ(Vigna radiate)スクロースシンターゼから成る群より選択される、請求項45に記載の方法。
- 前記スクロースシンターゼドメインが、シロイヌナズナ(Arabidopsis thaliana)スクロースシンターゼ1である、請求項45に記載の方法。
- 前記スクロースシンターゼドメインが、SEQ ID NO:3のアミノ酸配列である、請求項45に記載の方法。
- 甘くする量のレバウディオサイドD2を含む、飲料製品及び消費製品から成る群より選択される経口消費できる製品。
- 約5ppm〜約100ppmのレバウディオサイドD2を含む、請求項57の経口消費できる製品。
- レバウディオサイドD2が、唯一の甘味料である、請求項57に記載の経口消費できる製品。
- 前記経口消費できる製品が、約1%(w/v-%)〜約4%(w/v-%)のスクロース溶液と同等の甘味強度を有する、請求項57に記載の経口消費できる製品。
- 少なくとも1種の追加の甘味料を更に含む、請求項57に記載の経口消費できる製品。
- 前記少なくとも1種の追加の甘味料が、高甘味度甘味料である、請求項61に記載の経口消費できる製品。
- 前記少なくとも1種の追加の甘味料が、天然の高甘味度甘味料である、請求項61に記載の経口消費できる製品。
- 前記少なくとも1種の追加の甘味料が、ステビアエキス、ステビオールグリコシド、ステビオシド、レバウディオサイドA、レバウディオサイドB、レバウディオサイドC、レバウディオサイドD、レバウディオサイドE、レバウディオサイドF、ズルコサイドA、ルブソサイド、ステビオールビオシド、スクロース、高フルクトースコーンシロップ、フルクトース、グルコース、キシロース、アラビノース、ラムノース、エリスリトール、キシリトール、マンニトール、ソルビトール、イノシトール、AceK、アスパルテーム、ネオテーム、スクラロース、サッカリン、ナリンギンジヒドロカルコン(NarDHC)、ネオヘスペリジンジヒドロカルコン(NDHC)、ルブソサイド、モグロシドIV、シアメノシドI、モグロシドV、モナチン、タウマチン、モネリン、ブラゼイン、L-アラニン、グリシン、ロハングオ(Lo Han Guo)、ヘルナンズルシン、フィロズルチン、トリロブタイン、及びその組み合わせから成る群より選択される、請求項61に記載の経口消費できる製品。
- 炭水化物、ポリオール、アミノ酸又はその塩、ポリアミノ酸又はその塩、糖酸又はその塩、ヌクレオチド、有機酸、無機酸、有機塩、有機酸塩、有機塩基塩、無機塩、苦味化合物、香料、香味成分、収斂性化合物、タンパク質、タンパク質加水分解物、界面活性剤、乳化剤、フラボノイド、アルコール、ポリマー、及びその組み合わせから成る群より選択される少なくとも1種の添加物を更に含む、請求項57に記載の経口消費できる製品。
- 前記消費製品が、食品、栄養補助食品、医薬品、健康補助食品、歯科衛生組成物、食用ゲル組成物、化粧品及び卓上香味料から成る群より選択される、請求項57に記載の経口消費できる製品。
- 甘くする量のレバウディオサイドD2を含む飲料製品。
- 前記飲料製品が、炭酸飲料製品及び非炭酸飲料製品から成る群より選択される、請求項67に記載の飲料製品。
- 前記飲料製品が、ソフトドリンク、ファウンテン飲料、冷凍飲料;すぐに飲める飲料;冷凍したすぐに飲める飲料、コーヒー、茶、乳飲料、粉末ソフトドリンク、液体濃縮物、風味付けした水、改良水、果実ジュース、果実ジュースで風味付けしたドリンク、スポーツドリンク、及びエナジードリンクから成る群より選択される、請求項67に記載の飲料製品。
- 約5ppm〜約100ppmのレバウディオサイドD2を含む、請求項67に記載の飲料製品。
- 前記レバウディオサイドD2が、唯一の甘味料である、請求項67に記載の飲料製品。
- 前記飲料製品が、約1%(w/v-%)〜約4%(w/v-%)のスクロース溶液と同等の甘味強度を有する、請求項67に記載の飲料製品。
- 少なくとも1種の追加の甘味料を更に含む請求項67に記載の飲料製品であって、該飲料製品が約1%(w/v-%)〜約10%(w/v-%)のスクロース溶液と同等の甘味強度を有する飲料製品。
- 前記少なくとも1種の追加の甘味料が、高甘味度甘味料である、請求項73に記載の飲料製品。
- 前記少なくとも1種の追加の甘味料が、天然の高甘味度甘味料である、請求項73に記載の飲料製品。
- 前記少なくとも1種の追加の甘味料が、ステビアエキス、ステビオールグリコシド、ステビオシド、レバウディオサイドA、レバウディオサイドB、レバウディオサイドC、レバウディオサイドD、レバウディオサイドE、レバウディオサイドF、ズルコサイドA、ルブソサイド、ステビオールビオシド、スクロース、高フルクトースコーンシロップ、フルクトース、グルコース、キシロース、アラビノース、ラムノース、エリスリトール、キシリトール、マンニトール、ソルビトール、イノシトール、AceK、アスパルテーム、ネオテーム、スクラロース、サッカリン、ナリンギンジヒドロカルコン(NarDHC)、ネオヘスペリジンジヒドロカルコン(NDHC)、ルブソサイド、モグロシドIV、シアメノシドI、モグロシドV、モナチン、タウマチン、モネリン、ブラゼイン、L-アラニン、グリシン、ロハングオ(Lo Han Guo)、ヘルナンズルシン、フィロズルチン、トリロブタイン、及びその組み合わせから成る群より選択される、請求項73に記載の飲料製品。
- 炭水化物、ポリオール、アミノ酸又はその塩、ポリアミノ酸又はその塩、糖酸又はその塩、ヌクレオチド、有機酸、無機酸、有機塩、有機酸塩、有機塩基塩、無機塩、苦味化合物、香料、香味成分、収斂性化合物、タンパク質、タンパク質加水分解物、界面活性剤、乳化剤、フラボノイド、アルコール、ポリマー、及びその組み合わせから成る群より選択される少なくとも1種の添加物を更に含む、請求項67に記載の飲料製品。
- 甘くする量のレバウディオサイドD2を含む消費製品。
- 前記消費製品が、食品、栄養補助食品、医薬品、健康補助食品、歯科衛生組成物、食用ゲル組成物、化粧品及び卓上香味料から成る群より選択される、請求項78に記載の消費製品。
- 約5ppm〜約100ppmのレバウディオサイドD2を含む、請求項78に記載の飲料製品。
- 前記レバウディオサイドD2が、唯一の甘味料である、請求項78に記載の飲料製品。
- 前記飲料製品が、約1%(w/v-%)〜約4%(w/v-%)のスクロース溶液と同等の甘味強度を有する、請求項78に記載の飲料製品。
- 少なくとも1種の追加の甘味料を更に含む請求項78に記載の飲料製品であって、該飲料製品が約1%(w/v-%)〜約10%(w/v-%)のスクロース溶液と同等の甘味強度を有する飲料製品。
- 前記少なくとも1種の追加の甘味料が、高甘味度甘味料である、請求項83に記載の飲料製品。
- 前記少なくとも1種の追加の甘味料が、天然の高甘味度甘味料である、請求項83に記載の飲料製品。
- 前記追加の甘味料が、ステビアエキス、ステビオールグリコシド、ステビオシド、レバウディオサイドA、レバウディオサイドB、レバウディオサイドC、レバウディオサイドD、レバウディオサイドE、レバウディオサイドF、ズルコサイドA、ルブソサイド、ステビオールビオシド、スクロース、高フルクトースコーンシロップ、フルクトース、グルコース、キシロース、アラビノース、ラムノース、エリスリトール、キシリトール、マンニトール、ソルビトール、イノシトール、AceK、アスパルテーム、ネオテーム、スクラロース、サッカリン、ナリンギンジヒドロカルコン(NarDHC)、ネオヘスペリジンジヒドロカルコン(NDHC)、ルブソサイド、モグロシドIV、シアメノシドI、モグロシドV、モナチン、タウマチン、モネリン、ブラゼイン、L-アラニン、グリシン、Lo Han Guo、ヘルナンズルシン、フィロズルチン、トリロブタイン、及びその組み合わせから成る群より選択される、請求項83に記載の飲料製品。
- 炭水化物、ポリオール、アミノ酸又はその塩、ポリアミノ酸又はその塩、糖酸又はその塩、ヌクレオチド、有機酸、無機酸、有機塩、有機酸塩、有機塩基塩、無機塩、苦味化合物、香料、香味成分、収斂性化合物、タンパク質、タンパク質加水分解物、界面活性剤、乳化剤、フラボノイド、アルコール、ポリマー、及びその組み合わせから成る群より選択される少なくとも1種の添加物を更に含む、請求項78に記載の飲料製品。
- 下記化学構造から成る甘味料。
- 充填剤、嵩高剤及び固化防止剤の少なくとも1つを更に含む、請求項88に記載の甘味料。
- レバウディオサイドD2を含む製品の調製方法であって、レバウディオサイドD2を前記製品に添加する工程を含み、該製品が、飲料製品及び消費製品から成る群より選択され、かつ約5ppm〜約100ppmのレバウディオサイドD2が前記製品に添加される、前記方法。
- 前記レバウディオサイドD2が、唯一の甘味料であり、かつ前記製品が約1%〜約4%(w/v-%)のスクロース溶液と同等の甘味強度を有する、請求項90に記載の方法。
- 少なくとも1種の追加の甘味料を添加する工程を更に含む請求項90に記載の方法であって、前記製品が約1%〜約10%(w/v-%)のスクロース溶液と同等の甘味強度を有する前記方法。
- 製品の甘味を増強する方法であって、約5ppm〜約100ppmのレバウディオサイドD2を、飲料製品及び消費製品から成る群より選択される製品に添加する工程を含み、この添加されたレバウディオサイドD2が、レバウディオサイドD2を欠いている対応製品に比べて、前記製品の甘味を増強する、前記方法。
- 前記レバウディオサイドD2が、唯一の甘味料であり、かつ前記製品が約1%〜約4%(w/v-%)のスクロース溶液と同等の甘味強度を有する、請求項93に記載の方法。
- 追加の甘味料を添加する工程を更に含む請求項93に記載の方法であって、前記製品が、約1%〜約10%(w/v-%)のスクロース溶液と同等の甘味強度を有する、前記方法。
- 甘くした製品の調製方法であって、飲料製品及び消費製品から成る群より選択される製品を準備する工程、及び約5ppm〜約100ppmのレバウディオサイドD2を前記製品に添加する工程を含む前記方法。
- 少なくとも1種の添加物を前記製品に添加する工程を更に含む、請求項96に記載の方法。
- 前記少なくとも1種の添加物が、炭水化物、ポリオール、アミノ酸又はその塩、ポリアミノ酸又はその塩、糖酸又はその塩、ヌクレオチド、有機酸、無機酸、有機塩、有機酸塩、有機塩基塩、無機塩、苦味化合物、香料、香味成分、収斂性化合物、タンパク質、タンパク質加水分解物、界面活性剤、乳化剤、フラボノイド、アルコール、ポリマー、及びその組み合わせから成る群より選択される、請求項96に記載の方法。
- 少なくとも1種の追加の甘味料を添加する工程を更に含む、請求項96に記載の方法。
- 前記少なくとも1種の追加の甘味料が、高甘味度甘味料である、請求項99に記載の方法。
- 前記少なくとも1種の追加の甘味料が、天然の高甘味度甘味料である、請求項100に記載の方法。
- 前記少なくとも1種の追加の甘味料が、ステビアエキス、ステビオールグリコシド、ステビオシド、レバウディオサイドA、レバウディオサイドB、レバウディオサイドC、レバウディオサイドD、レバウディオサイドE、レバウディオサイドF、ズルコサイドA、ルブソサイド、ステビオールビオシド、スクロース、高フルクトースコーンシロップ、フルクトース、グルコース、キシロース、アラビノース、ラムノース、エリスリトール、キシリトール、マンニトール、ソルビトール、イノシトール、AceK、アスパルテーム、ネオテーム、スクラロース、サッカリン、ナリンギンジヒドロカルコン(NarDHC)、ネオヘスペリジンジヒドロカルコン(NDHC)、ルブソサイド、モグロシドIV、シアメノシドI、モグロシドV、モナチン、タウマチン、モネリン、ブラゼイン、Lアラニン、グリシン、ロハングオ、ヘルナンズルシン、フィロズルチン、トリロブタイン、及びその組み合わせから成る群より選択される、請求項99に記載の方法。
- 前記製品中の前記レバウディオサイドD2が、レバウディオサイドD2多形、非晶質レバウディオサイドD2及びレバウディオサイドD2立体異性体から成る群より選択される、請求項96に記載の方法。
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Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US11155888B2 (en) | 2010-03-12 | 2021-10-26 | Purecircle Usa Inc. | Stevia composition, production method and uses |
US9752174B2 (en) | 2013-05-28 | 2017-09-05 | Purecircle Sdn Bhd | High-purity steviol glycosides |
US9522929B2 (en) | 2014-05-05 | 2016-12-20 | Conagen Inc. | Non-caloric sweetener |
CN107105734A (zh) | 2014-09-19 | 2017-08-29 | 谱赛科有限责任公司 | 高纯度甜菊醇糖苷 |
MY182725A (en) * | 2014-10-03 | 2021-02-03 | Conagen Inc | Non-caloric sweeteners and methods for synthesizing |
US10711024B2 (en) | 2014-12-17 | 2020-07-14 | Cargill, Incorporated | Steviol glycoside compounds, compositions for oral ingestion or use, and method for enhancing steviol glycoside solubility |
WO2016156616A1 (en) | 2015-04-03 | 2016-10-06 | Dsm Ip Assets B.V. | Steviol glycosides |
MX2017013210A (es) | 2015-04-14 | 2018-03-01 | Conagen Inc | Produccion de endulzantes no caloricos con catalizadores de celulas enteras modificadas. |
US10494397B2 (en) * | 2016-07-15 | 2019-12-03 | Pepsico, Inc. | Rebaudioside analogs |
CN110191643B (zh) | 2016-10-14 | 2023-06-06 | 科纳根公司 | 甜菊醇糖苷的生物合成生产及其工艺 |
CN116574775A (zh) | 2016-10-21 | 2023-08-11 | 百事可乐公司 | 一种酶法制备瑞鲍迪甙j的方法 |
CA3041152A1 (en) | 2016-10-21 | 2018-04-26 | Pepsico, Inc. | Method for preparing rebaudioside n using enzymatic method |
KR101997597B1 (ko) * | 2016-11-17 | 2019-07-08 | 서울대학교산학협력단 | 변형 류코노스톡속 균주를 이용한 스테비오사이드 배당체의 합성 방법 및 이에 의하여 제조된 신규한 스테비오사이드 배당체 |
WO2018093196A1 (ko) * | 2016-11-17 | 2018-05-24 | 서울대학교산학협력단 | 변형 류코노스톡속 균주를 이용한 스테비오사이드 배당체의 합성 방법 및 이에 의하여 제조된 신규한 스테비오사이드 배당체 |
CA3050310A1 (en) | 2017-02-03 | 2018-08-09 | Codexis, Inc. | Engineered glycosyltransferases and steviol glycoside glucosylation methods |
MY202423A (en) * | 2017-03-06 | 2024-04-28 | Conagen Inc | Biosynthetic production of steviol glycoside rebaudioside d4 from rebaudioside e |
AU2018294258A1 (en) | 2017-06-30 | 2020-02-06 | Conagen Inc. | Hydrolysis of steviol glycosides by beta-glucosidase |
CN109423486B (zh) * | 2017-08-29 | 2022-02-25 | 中国科学院分子植物科学卓越创新中心 | 新型udp-糖基转移酶及其应用 |
CN107446874B (zh) * | 2017-09-25 | 2020-07-28 | 四川盈嘉合生科技有限公司 | 重组大肠杆菌及其在合成莱鲍迪苷d中的用途 |
CN109415747B (zh) * | 2018-05-25 | 2022-05-03 | 邦泰生物工程(深圳)有限公司 | 一种酶改质甜菊糖的制备方法和制备用酶及应用 |
BR112020023597A2 (pt) * | 2018-09-29 | 2021-04-13 | Firmenich S/A | Derivados de glicosídeo de terpeno e o uso dos mesmos |
WO2020097922A1 (zh) * | 2018-11-16 | 2020-05-22 | 邦泰生物工程(深圳)有限公司 | 一种udp-葡萄糖基转移酶突变体、其应用及其制备莱鲍迪苷d的方法 |
MX2021006986A (es) * | 2018-12-12 | 2021-08-16 | Conagen Inc | Produccion biosintetica de variantes de glucosidos de esteviol. |
CN109750072B (zh) * | 2019-01-31 | 2022-04-19 | 南京工业大学 | 一种酶法制备莱鲍迪苷e的方法 |
CN110878288B (zh) * | 2019-12-09 | 2020-12-29 | 安徽农业大学 | 多肽、核酸及其在合成橙花叔醇糖苷上的应用 |
CN111378630A (zh) * | 2020-04-09 | 2020-07-07 | 北京农学院 | 一种融合蛋白及其高效表达方法与应用 |
CN114045273B (zh) * | 2021-11-15 | 2022-07-22 | 四川大学 | 糖基转移酶OsUGT91C1突变体及其应用 |
WO2023183832A1 (en) | 2022-03-23 | 2023-09-28 | Sweegen, Inc. | Sweetener comprising rebaudiose m and brazzein |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2013022989A2 (en) * | 2011-08-08 | 2013-02-14 | Evolva Sa | Recombinant production of steviol glycosides |
WO2014122227A2 (en) * | 2013-02-06 | 2014-08-14 | Evolva Sa | Methods for improved production of rebaudioside d and rebaudioside m |
WO2014193934A1 (en) * | 2013-05-28 | 2014-12-04 | The Coca-Cola Company | High-purity steviol glycosides |
Family Cites Families (26)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH04149191A (ja) * | 1990-10-09 | 1992-05-22 | Nakano Vinegar Co Ltd | ステビオサイド糖転移化合物及びその製造方法 |
AU2001289843A1 (en) | 2001-08-28 | 2002-02-13 | Bayer Cropscience Ag | Polypeptides for identifying herbicidally active compounds |
US20090183270A1 (en) | 2002-10-02 | 2009-07-16 | Adams Thomas R | Transgenic plants with enhanced agronomic traits |
US20080148432A1 (en) | 2005-12-21 | 2008-06-19 | Mark Scott Abad | Transgenic plants with enhanced agronomic traits |
US9107436B2 (en) | 2011-02-17 | 2015-08-18 | Purecircle Sdn Bhd | Glucosylated steviol glycoside as a flavor modifier |
AU2010289665B2 (en) | 2009-09-04 | 2014-03-20 | Redpoint Bio Corporation | Sweetness enhancers including rebaudioside A or D |
US8524785B2 (en) | 2009-09-04 | 2013-09-03 | International Flavors And Fragrances Inc. | Methods for using rebaudioside C as a flavor enhancer |
WO2011097620A1 (en) | 2010-02-08 | 2011-08-11 | The Coca-Cola Company | Solubility enhanced terpene glycoside(s) |
US9795156B2 (en) | 2011-03-17 | 2017-10-24 | E.P.C (Beijing) Plant Pharmaceutical Technology Co., Ltd | Rebaudioside B and derivatives |
WO2013096663A2 (en) | 2011-12-20 | 2013-06-27 | Cargill, Incorporated | Low level blend of monatin and rebaudioside a |
FR2984743B1 (fr) | 2011-12-23 | 2014-08-22 | Oreal | Utilisation cosmetique du steviol, d'un derive glycoside du steviol, ou un de leurs isomeres pour stimuler, restaurer ou reguler le metabolisme des cellules de la peau et des semi-muqueuses. |
FR2984742A1 (fr) | 2011-12-23 | 2013-06-28 | Oreal | Utilisation de steviol, d'un derive glycoside du steviol, ou d'un de leurs isomeres, pour prevenir, reduire et/ou traiter une alteration du teint de la peau. |
EA201400836A8 (ru) | 2012-01-23 | 2016-03-31 | ДСМ АйПи АССЕТС Б.В. | Получение дитерпена |
CN102559528B (zh) * | 2012-02-09 | 2013-08-21 | 南京工业大学 | 一种产甜叶菊糖基转移酶ugt76g1的基因工程菌及其应用 |
MX352678B (es) | 2012-05-22 | 2017-12-04 | Purecircle Sdn Bhd | Glucosidos de esteviol de alta pureza. |
CN107453917B (zh) | 2012-07-18 | 2020-07-14 | 华为技术有限公司 | 一种数据连接管理的方法、装置及系统 |
CN103570723B (zh) | 2012-07-27 | 2016-07-13 | 广西梧州制药(集团)股份有限公司 | 吡唑并嘧啶衍生物及其制备方法和在药物制备中的用途 |
CN102766667B (zh) * | 2012-08-14 | 2014-06-11 | 成都南诺格生物科技有限责任公司 | 甜菊苷转化为莱鲍迪苷e的方法 |
KR101404728B1 (ko) | 2013-02-28 | 2014-06-09 | 씨제이제일제당 (주) | 스테비오사이드로부터 리바우디오사이드 a를 제조하는 방법 |
CN103397064B (zh) | 2013-08-14 | 2015-04-15 | 苏州汉酶生物技术有限公司 | 一种酶法制备瑞鲍迪甙m的方法 |
RU2706789C2 (ru) | 2013-11-01 | 2019-11-21 | Конаджен Инк. | Рекомбинантное получение стевиол-гликозидов |
US9522929B2 (en) | 2014-05-05 | 2016-12-20 | Conagen Inc. | Non-caloric sweetener |
CN104232496B (zh) | 2014-09-18 | 2017-06-06 | 广州康琳奈生物科技有限公司 | 一种重组毕赤酵母工程菌及其在合成莱鲍迪苷a中的应用 |
MY182725A (en) | 2014-10-03 | 2021-02-03 | Conagen Inc | Non-caloric sweeteners and methods for synthesizing |
MX2017013210A (es) | 2015-04-14 | 2018-03-01 | Conagen Inc | Produccion de endulzantes no caloricos con catalizadores de celulas enteras modificadas. |
WO2017122227A1 (en) | 2016-01-13 | 2017-07-20 | Shri Amm Murugappa Chettiar Research Centre (Mcrc) | Mrsa and vrsa resistant textile materials |
-
2014
- 2014-05-05 US US14/269,435 patent/US9522929B2/en active Active
-
2015
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2016
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-
2018
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-
2020
- 2020-04-10 US US16/846,116 patent/US10941174B2/en active Active
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2013022989A2 (en) * | 2011-08-08 | 2013-02-14 | Evolva Sa | Recombinant production of steviol glycosides |
WO2014122227A2 (en) * | 2013-02-06 | 2014-08-14 | Evolva Sa | Methods for improved production of rebaudioside d and rebaudioside m |
WO2014193934A1 (en) * | 2013-05-28 | 2014-12-04 | The Coca-Cola Company | High-purity steviol glycosides |
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2022540306A (ja) * | 2018-03-12 | 2022-09-15 | コナゲン インコーポレイテッド | 変異体酵素を介するステビオール配糖体レバウシオシドiの生合成的産生 |
JP7305213B2 (ja) | 2018-03-12 | 2023-07-10 | コナゲン インコーポレイテッド | 変異体酵素を介するステビオール配糖体レバウシオシドiの生合成的産生 |
JP2022524214A (ja) * | 2019-03-29 | 2022-04-28 | コナゲン インコーポレイテッド | Udp-ラムノースの生合成生産 |
JP7318989B2 (ja) | 2019-03-29 | 2023-08-01 | コナゲン インコーポレイテッド | Udp-ラムノースの生合成生産 |
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