JP2017513899A - 卵白処理 - Google Patents
卵白処理 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2017513899A JP2017513899A JP2016564138A JP2016564138A JP2017513899A JP 2017513899 A JP2017513899 A JP 2017513899A JP 2016564138 A JP2016564138 A JP 2016564138A JP 2016564138 A JP2016564138 A JP 2016564138A JP 2017513899 A JP2017513899 A JP 2017513899A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- egg white
- acid
- buffer
- mixed
- filter
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 235000014103 egg white Nutrition 0.000 title claims abstract description 283
- 210000000969 egg white Anatomy 0.000 title claims abstract description 283
- 108010000912 Egg Proteins Proteins 0.000 title claims abstract description 270
- 102000002322 Egg Proteins Human genes 0.000 title claims abstract description 270
- QCVGEOXPDFCNHA-UHFFFAOYSA-N 5,5-dimethyl-2,4-dioxo-1,3-oxazolidine-3-carboxamide Chemical compound CC1(C)OC(=O)N(C(N)=O)C1=O QCVGEOXPDFCNHA-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 267
- 238000011282 treatment Methods 0.000 title description 5
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 113
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims abstract description 55
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 claims abstract description 25
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 claims abstract description 25
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims description 111
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 claims description 76
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 25
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 20
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 18
- 239000011148 porous material Substances 0.000 claims description 17
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 14
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Natural products CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 13
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 13
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims description 13
- MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N Oxalic acid Chemical compound OC(=O)C(O)=O MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 238000002955 isolation Methods 0.000 claims description 12
- 238000012545 processing Methods 0.000 claims description 12
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 claims description 12
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 claims description 12
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 claims description 11
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 11
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 9
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 claims description 9
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 claims description 9
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 9
- KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N Fluorane Chemical compound F KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 claims description 8
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- VLTRZXGMWDSKGL-UHFFFAOYSA-N perchloric acid Chemical compound OCl(=O)(=O)=O VLTRZXGMWDSKGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims description 6
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims description 6
- 239000004325 lysozyme Substances 0.000 claims description 6
- 229960000274 lysozyme Drugs 0.000 claims description 6
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 claims description 5
- BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 3-azaniumyl-2-hydroxypropanoate Chemical compound NCC(O)C(O)=O BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 claims description 4
- GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N Nitric acid Chemical compound O[N+]([O-])=O GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N Tartaric acid Natural products [H+].[H+].[O-]C(=O)C(O)C(O)C([O-])=O FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- LEHOTFFKMJEONL-UHFFFAOYSA-N Uric Acid Chemical compound N1C(=O)NC(=O)C2=C1NC(=O)N2 LEHOTFFKMJEONL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- TVWHNULVHGKJHS-UHFFFAOYSA-N Uric acid Natural products N1C(=O)NC(=O)C2NC(=O)NC21 TVWHNULVHGKJHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 claims description 4
- KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N boric acid Chemical compound OB(O)O KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000004327 boric acid Substances 0.000 claims description 4
- 235000010338 boric acid Nutrition 0.000 claims description 4
- 235000015165 citric acid Nutrition 0.000 claims description 4
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 claims description 4
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 claims description 4
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 claims description 4
- 229910017604 nitric acid Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 235000006408 oxalic acid Nutrition 0.000 claims description 4
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims description 4
- 239000011975 tartaric acid Substances 0.000 claims description 4
- 235000002906 tartaric acid Nutrition 0.000 claims description 4
- 229940116269 uric acid Drugs 0.000 claims description 4
- 229960000160 recombinant therapeutic protein Drugs 0.000 claims description 3
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 claims description 2
- 230000003750 conditioning effect Effects 0.000 claims description 2
- 125000000218 acetic acid group Chemical group C(C)(=O)* 0.000 claims 1
- 230000001376 precipitating effect Effects 0.000 claims 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 abstract description 28
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 abstract description 27
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 abstract description 8
- 235000013330 chicken meat Nutrition 0.000 abstract description 8
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 abstract description 6
- 238000013375 chromatographic separation Methods 0.000 abstract description 5
- 230000008569 process Effects 0.000 description 20
- 230000020477 pH reduction Effects 0.000 description 14
- 238000005352 clarification Methods 0.000 description 12
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 11
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 10
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 9
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 9
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 8
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 8
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 8
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 8
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 8
- 238000004062 sedimentation Methods 0.000 description 8
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 7
- 239000000047 product Substances 0.000 description 7
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 7
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 6
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 5
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 5
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 5
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 5
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 description 4
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 4
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 4
- 238000012856 packing Methods 0.000 description 4
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 4
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 4
- 230000014616 translation Effects 0.000 description 4
- 102000004269 Granulocyte Colony-Stimulating Factor Human genes 0.000 description 3
- 108010017080 Granulocyte Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 3
- 102000004457 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Human genes 0.000 description 3
- 108010017213 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 3
- 241000286209 Phasianidae Species 0.000 description 3
- HNYOPLTXPVRDBG-UHFFFAOYSA-N barbituric acid Chemical compound O=C1CC(=O)NC(=O)N1 HNYOPLTXPVRDBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000002585 base Substances 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 238000000164 protein isolation Methods 0.000 description 3
- 239000008213 purified water Substances 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 3
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 3
- 241000271566 Aves Species 0.000 description 2
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 2
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 2
- 102000003951 Erythropoietin Human genes 0.000 description 2
- 108090000394 Erythropoietin Proteins 0.000 description 2
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 2
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 2
- 238000011481 absorbance measurement Methods 0.000 description 2
- 150000001447 alkali salts Chemical class 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 238000011095 buffer preparation Methods 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 2
- 238000011118 depth filtration Methods 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 239000006167 equilibration buffer Substances 0.000 description 2
- 229940105423 erythropoietin Drugs 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 238000011010 flushing procedure Methods 0.000 description 2
- 230000005484 gravity Effects 0.000 description 2
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 2
- 230000002132 lysosomal effect Effects 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- OXCMYAYHXIHQOA-UHFFFAOYSA-N potassium;[2-butyl-5-chloro-3-[[4-[2-(1,2,4-triaza-3-azanidacyclopenta-1,4-dien-5-yl)phenyl]phenyl]methyl]imidazol-4-yl]methanol Chemical compound [K+].CCCCC1=NC(Cl)=C(CO)N1CC1=CC=C(C=2C(=CC=CC=2)C2=N[N-]N=N2)C=C1 OXCMYAYHXIHQOA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000013112 stability test Methods 0.000 description 2
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- AXAVXPMQTGXXJZ-UHFFFAOYSA-N 2-aminoacetic acid;2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol Chemical compound NCC(O)=O.OCC(N)(CO)CO AXAVXPMQTGXXJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012935 Averaging Methods 0.000 description 1
- 238000007445 Chromatographic isolation Methods 0.000 description 1
- 102000003839 Human Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108090000144 Human Proteins Proteins 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 1
- 102000006992 Interferon-alpha Human genes 0.000 description 1
- 108010047761 Interferon-alpha Proteins 0.000 description 1
- 102000003996 Interferon-beta Human genes 0.000 description 1
- 108090000467 Interferon-beta Proteins 0.000 description 1
- 229920002274 Nalgene Polymers 0.000 description 1
- 108010058846 Ovalbumin Proteins 0.000 description 1
- 239000004743 Polypropylene Substances 0.000 description 1
- 101710172711 Structural protein Proteins 0.000 description 1
- 108700019146 Transgenes Proteins 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 239000002535 acidifier Substances 0.000 description 1
- 229940095602 acidifiers Drugs 0.000 description 1
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 1
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 1
- 238000010960 commercial process Methods 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 238000003113 dilution method Methods 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 210000002969 egg yolk Anatomy 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 238000003028 enzyme activity measurement method Methods 0.000 description 1
- 238000013401 experimental design Methods 0.000 description 1
- 206010016256 fatigue Diseases 0.000 description 1
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 238000004191 hydrophobic interaction chromatography Methods 0.000 description 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000009027 insemination Effects 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 description 1
- 229960001388 interferon-beta Drugs 0.000 description 1
- 229940047124 interferons Drugs 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 229940092253 ovalbumin Drugs 0.000 description 1
- 210000003101 oviduct Anatomy 0.000 description 1
- 238000010979 pH adjustment Methods 0.000 description 1
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 1
- 239000004417 polycarbonate Substances 0.000 description 1
- 229920000515 polycarbonate Polymers 0.000 description 1
- -1 polypropylene Polymers 0.000 description 1
- 229920001155 polypropylene Polymers 0.000 description 1
- 238000002203 pretreatment Methods 0.000 description 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 1
- 238000011027 product recovery Methods 0.000 description 1
- 230000001850 reproductive effect Effects 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 230000000153 supplemental effect Effects 0.000 description 1
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 1
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 1
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 description 1
- 238000010977 unit operation Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23J—PROTEIN COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS; WORKING-UP PROTEINS FOR FOODSTUFFS; PHOSPHATIDE COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS
- A23J1/00—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites
- A23J1/08—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites from eggs
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
- C07K1/14—Extraction; Separation; Purification
- C07K1/36—Extraction; Separation; Purification by a combination of two or more processes of different types
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
- C07K1/14—Extraction; Separation; Purification
- C07K1/16—Extraction; Separation; Purification by chromatography
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
- C07K1/14—Extraction; Separation; Purification
- C07K1/16—Extraction; Separation; Purification by chromatography
- C07K1/18—Ion-exchange chromatography
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
- C07K1/14—Extraction; Separation; Purification
- C07K1/34—Extraction; Separation; Purification by filtration, ultrafiltration or reverse osmosis
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/02—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies from eggs
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Water Supply & Treatment (AREA)
- Immunology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Meat, Egg Or Seafood Products (AREA)
Abstract
Description
本出願は、その内容全体が参照により本明細書に組み込まれる、2014年4月23日に出願された米国仮特許出願第61/983,003号の優先権を主張する。
-20℃で4Lナルゲンボトル中に保存されていた50〜400キロの冷凍卵白を、室温で、21±1℃に設定した水浴中で約5〜7時間かけて解凍した。1時間ごとに、各ボトルを水浴から取り出し、目視検証して解凍の程度を判断し、繰り返し反転させ、解凍が完了するまで水浴に入れた。解凍したボトルを水浴から取り出し、2〜8℃で保存した。最後の卵白ボトルを解凍した後、ボトル中の卵白を無蓋混合容器にプールした。5.7M酢酸ナトリウムを含むpH4.0の酸性緩衝液(卵白の重量に対して、約1.3%wt/wt)を、解凍卵白プールに毎分1キロで、酸性緩衝液の添加時間が5分を超えないように添加し、2〜8℃で最終目標のpH6.0±0.1を得た。卵白混合物を、無蓋混合容器中で、温度制御なしで連続的に1時間攪拌し、次いで密閉使い捨てミキサーにデカントし、2〜8℃で冷蔵し、そして6時間混合した。混合を停止した後、析出物を6時間静置した。必要に応じて、5.7M酢酸ナトリウムまたは1N水酸化ナトリウムのいずれかを使用して、2〜8℃でpHを6.0±0.1にさらに調節し、その後1時間追加混合し、3時間室温で沈降させた(混合および沈降の合計時間は24時間を超えない)。沈降が完了した後、混合卵白は3つの層、すなわち、上層、中間層、および下層を形成した。次にチューブを中間層に配置し、上層と下層を乱すことなく、チューブを介して中間層を吸い上げたまたは送り出した。フィルター(直列のポール社デプスフィルター、それぞれ40ミクロン、3〜6ミクロン、0.1〜0.3ミクロン)を、フィルター面積の平方メートル当たり80リットルの精製水で事前洗浄し、全有機炭素、浸出物、および抽出物を除去し、その後排出した。次いで、事前洗浄したフィルターを、20mMリン酸ナトリウムおよび140mMの塩化ナトリウムを含むpH6.0の前処理緩衝液の1フィルターホールドアップボリュームを用いて処理し、その後排出した。沈降した析出および凝集卵白微粒子を避けながら卵白溶液をデカントし、デッドエンドろ過により、1種類のフィルターについて平方メートル当たり1リットルの流量で、または30psid未満の差圧でろ過し、任意の沈降していない析出物質を除去し、そして滅菌使い捨てミキサーに収集した。卵白ろ過の完了時に、ろ過システムに残留した卵白を、20mMリン酸ナトリウムおよび140mM塩化ナトリウムを含むpH 6.0の前処理緩衝液の1フィルタートレインホールドアップボリュームで洗い流して生成物を回収し、滅菌使い捨てミキサーに収集した。ろ過卵白溶液を酵素活性および紫外線(UV)吸光度測定用にサンプリングし、それを卵白中の組み換えタンパク質のカラムクロマトグラフィーによる単離に使用する前まで、2〜8℃で最長24時間保存した。表1は、上述の酸性緩衝液(すなわち、5.7MのNaOAc、pH4.0、および1.3%wt/wt)を用いた卵白酸性化の結果を示している。
400キロの冷凍卵白(+/-10%)の冷凍卵白(-20℃)を、2〜8℃(ウォークイン冷蔵室内)で約24〜72時間で解凍した。解凍した卵白をジャケット付き使い捨て密閉混合容器内にプールし、2〜8℃に維持した。5.7M酢酸ナトリウムを含むpH4.0の酸性緩衝液(1.08%wt/wt)を、解凍卵白に毎分1キロで、酸性緩衝液の添加時間が5分を超えないように添加し、最終目標のpH6.0±0.5を得た。酸性化卵白溶液を3時間2〜8℃で連続的に撹拌した。次いで酸性化卵白を、ろ過前に、ジャケット付きタンクにより21±3℃に加温した。フィルター(直列のポール社デプスフィルター、それぞれ40ミクロン、3〜6ミクロン、0.1〜0.3ミクロン)を、フィルター面積の平方メートル当たり80リットルの精製水で事前洗浄し、全有機炭素、浸出物、および抽出物を除去した。フィルター廃液の導電率が、前処理緩衝液の許容可能な導電率の範囲内(例えば、10〜15mS/cm)になるまで、フィルタートレイン内の精製水を、20mMリン酸ナトリウムおよび140mM塩化ナトリウムを含むpH6.0の前処理緩衝液で置換した。均質な混合酸性化卵白を、デッドエンドろ過により、1種類のフィルターについて1リットル/分/m2または10psi?の差圧が生じる流速でろ過し、任意の析出および凝集物質を除去した。フィルタートレインホールドアップボリュームの80%に相当する最初のフィルター廃液量を使用して前処理緩衝液を置換し、そして生成物回収の前に廃棄した。残りのろ過された前処理緩衝液および卵白を、滅菌使い捨てミキサーに収集した。卵白ろ過の完了時に、ろ過システムに残留した卵白を、20mMリン酸ナトリウムおよび140mM塩化ナトリウムを含むpH6.0の前処理緩衝液の1.5フィルタートレインホールドアップボリューム(1ホールドアップボリュームがろ過トレインに残っている間に0.5ホールドアップボリュームが回収される)で洗い流して生成物を回収し、滅菌使い捨て混合タンクに収集した。ろ過卵白を酵素活性および吸光度測定用にサンプリングし、それを卵白中の組み換えタンパク質のカラムクロマトグラフィーによる単離に使用する前まで、2〜8℃で最長24時間保存した。
原料
清澄化試験に使用される全ての化学物質は、USP/MCグレードのものであった。卵白原料物質を表2に示す。全ての原料物質を-20℃で保存し、使用前に2〜8℃で48〜72時間で解凍した。原料物質をプールし、酸性化工程を通して2〜8℃に維持した。
プロセススキッド(AKTAエクスプローラー)が、GEヘルスケアにより提供された(予防保全)。プロセス装置(ポールスタックスシャーシおよびAKTAエクスプローラー)は、特性評価試験全体を通じて、シナゲバPD担当者により管理された。下記の表4は、本実施例で使用されている全てのハードウェア機器を挙げている。
シャーシ#1:(下)マニホールド→T2600→ベントプレート(上)
シャーシ#2:(下)マニホールド→K200P→ベントプレート→マニホールド→Bio10→ベントプレート(上)
清澄化工程を開始する前に、冷凍卵白アリコート(合計20L)を、2〜8℃で48〜72時間かけて解凍した。解凍卵白を、適切なサイズのポリプロピレンタンク(25L)に、滅菌メディアライナー(サーモサイエンティフィック/Hyclone 部品番号 343050〜0005)でプールした。プールされた卵白を、オーバーヘッドミキサー(330rpm)を用いて2〜8℃で均質になるまで混合した。プールされた卵白を、次いでpH4.0の5.7M酢酸ナトリウムの添加により目標pHに調節した。表6は、目標pHを達成するために実行される各清澄化で加えられる5.7M酢酸ナトリウムの容量を記載する。目標pHを達成したことを確実にするために、pHを2時間を超えて観測した。
(1)酸性化卵白の直接充填(すなわち、沈降工程なし)
最初に、単一中心点の実行(“実行1”;1:20スケール;約6のpHの20L酸性化卵白)を実施し、代表的な実験スケールモデルを確立するために、深層ろ過性能についての直接充填(沈降なし、20L/m2の充填比)の影響を評価した。各フィルター(すなわち、T2600、K200P、Bio10)では、フィルター内のインレット供給圧力は、酸性化卵白充填の間に直線的に増加したが、差圧は10psidを超えなかった。また、供給圧力は、緩衝液洗い流しの間にさらに増加することはなく、フィルターT2600において劇的な減少を示した。これらの結果は、酸性化卵白のフィルターへの直接充填が、この実行中にフィルターを著しく詰まらせることはなかったことを示唆している。
2因子、2レベルの実験計画(高/低、低/高)を使用して、卵白酸性化工程のロバスト性を評価した。実験条件は、表6において定義されている。実行2において、酸性化を24時間行い、5.67の最終pH(すなわち、約5.7)を達成した。実行3において、酸性化を6時間行い、6.25の最終pH(すなわち、約6.3)を達成した。結果は、両方の実行が、同等な線形供給圧の増加、およびT2600汚損の増加に起因する最大供給圧を示したことを示す。低い最大供給圧が実行2で観察され、これは卵白のpHと卵白の粘度との相関関係に起因すると考えられている(すなわち、より低い卵白pHがより低い卵白粘度をもたらす)。供給圧力は決して10psigを超えることはなく、実行1に匹敵する性能を示した。
プロセスホールド試験を行い、次の3つのユニット操作ホールドポイントの最大ホールド時間を規定した:(1)解凍卵白(2〜8℃)、(2)酸性化卵白(2〜8℃および周囲温度)、および(3)清澄化卵白(2〜8℃および周囲温度)。生成物の安定性(酵素活性の点で)を、72〜96時間かけて評価した。2つの別々の安定性試験を行い、清澄化パラメーター変動への、酸性化および清澄化した卵白の工程での生成物ホールド時間への影響を評価した。60mlのアリコート(酸性化および清澄化された卵白にそれぞれ2つ)を、上記の2つのロバスト性実験(すなわち、実行2および3)のそれぞれから採取し、2〜8℃または周囲温度のいずれかで保存した。1.5mLの試料を、72時間(pH5.7/24時間)または96時間(pH6.3/6時間)のいずれかまで、24時間毎に採取した。時間の制約のため、安定性試験は、実験1(中心点)では行わなかった。安定性設計パラメーターを、以下の表9にまとめる。
卵白自体はDNAを含まないが、卵白採取プロセスにより少量の卵黄が卵白プールに入ることで、宿主ゲノムDNAが入ってしまうことがある。上記の実行1〜3の試験から得られた酸性化および清澄化された卵白を、宿主ゲノムDNAについて分析した。分析は、次のことを明らかにした:
1.プールおよび酸性化された卵白において、DNAを検出した
2.清澄化工程の間の有意なDNA除去を確認した。
Claims (50)
- バルククロマトグラフ処理用に卵白を調製する方法であって、
酸性剤を含む酸性緩衝液を卵白のプールに添加する工程であって、前記酸性緩衝液は、卵白1キログラム当たり約0.5重量%〜約5重量%である;および
前記酸性緩衝と前記卵白とを混合し、約5〜約6.5のpHを有する混合卵白を形成する工程、を含む方法。 - 前記酸性剤が、酢酸、塩酸、硫酸、硝酸、リン酸、フッ化水素酸、臭化水素酸、過塩素酸、クエン酸、ホウ酸、酒石酸、乳酸、ギ酸、シュウ酸、尿酸、およびバルビツール酸からなる群より選択される、請求項1に記載の方法。
- 前記酸性緩衝液が、約5M〜約6Mの酢酸ナトリウムをさらに含む、請求項2に記載の方法。
- 前記酸性緩衝液が、約5.7Mの酢酸ナトリウムを含む、請求項3に記載の方法。
- 前記酸性緩衝液が、卵白1キログラム当たり約0.5重量%〜約2重量%である、請求項1に記載の方法。
- 前記酸性緩衝液が、卵白1キログラム当たり約0.7重量%〜約1.5重量%である、請求項5に記載の方法。
- 前記酸性緩衝液が、卵白1キログラム当たり約0.9重量%〜約1.4重量%である、請求項6に記載の方法。
- 前記酸性緩衝液が、約4〜約6.5のpHを有する、請求項1に記載の方法。
- 前記酸性緩衝液が、約4のpHを有する、請求項8に記載の方法。
- 前記酸性緩衝液が、約4.5のpHを有する、請求項8に記載の方法。
- 前記混合卵白のpHが約5〜約6.3である、請求項1に記載の方法。
- 前記混合卵白のpHが約5.7〜約6.3である、請求項11に記載の方法。
- 前記混合卵白のpHが約5.8〜約6.2である、請求項12に記載の方法。
- 前記混合卵白のpHが約5.9〜約6.1である、請求項13に記載の方法。
- 前記混合卵白のpHが約6である、請求項14に記載の方法。
- 前記混合卵白のpHが、該混合卵白の粘度が最も低くなるような値である、請求項1に記載の方法。
- 前記卵白が、少なくとも約1時間混合される、請求項1に記載の方法。
- 前記卵白が、約2℃〜約25℃の温度で混合される、請求項1に記載の方法。
- 前記卵白プールが、少なくとも約10リットルの容量を有する、請求項1に記載の方法。
- 前記酸性緩衝液が、卵白プールに単回ボーラス注射で添加される、請求項1に記載の方法。
- 前記酸性緩衝液が、少なくとも約1L/分の速度で添加される、請求項20に記載の方法。
- 前記酸性緩衝液の添加および前記卵白の混合が同時に実施される、請求項1に記載の方法。
- 前記卵白が上層、中間層および下層に分離するように前記混合卵白を沈降させる工程をさらに含む、請求項1に記載の方法。
- 前記中間層を単離する工程をさらに含む、請求項23に記載の方法。
- 前記単離工程後に、前記中間層をろ過することをさらに含む、請求項24に記載の方法。
- 前記ろ過が、前記中間層の少なくとも一部を、約0.1μm〜約100μmの平均孔径を有するフィルターに通過させることを含む、請求項25に記載の方法。
- 前記ろ過が、前記中間層の少なくとも一部を複数のフィルターに通過させることを含む、請求項25に記載の方法。
- 前記混合卵白を沈降させることなく、該混合卵白をろ過することをさらに含む、請求項1に記載の方法。
- 前記ろ過工程が、前記混合卵白を、約0.1μm〜約100μmの平均孔径を有するフィルターに通してろ過することを含む、請求項28に記載の方法。
- 前記ろ過工程が、前記混合卵白の最初のろ過の後に続く1つ以上のろ過工程を含み、後続の1つ以上の該ろ過工程が、約0.1μm〜約40μmの平均孔径を有する1つ以上のフィルターを使用する、請求項29に記載の方法。
- 前記混合工程後の遠心分離工程をさらに含み、前記混合卵白を遠心分離にかけて、オボムチン-リゾチーム複合体を含む析出物を上清から分離させる、請求項1に記載の方法。
- 前記卵白が、卵白にとって外来の組み換え治療用タンパク質を含む、請求項1に記載の方法。
- 組み換えタンパク質を卵白から単離する方法であって、
組み換えタンパク質を含む卵白のプールを供給する工程であって、該プールは少なくとも約10リットルの容量を有する;
卵白のpHを約5〜約6.5に調節する工程であって、該pH調節卵白の導電率は約8mS/cm〜約20mS/cmである;
卵白をろ過し、溶液を形成する工程;および
カラムクロマトグラフィーにより、卵白中の組み換えタンパク質を単離する工程
を含む方法。 - 前記ろ過工程の前に、前記卵白が上層、中間層および下層に分離するように前記卵白を沈降させる工程をさらに含む、請求項33に記載の方法。
- 前記ろ過工程が、前記中間層の少なくとも一部を、約0.1μm〜約100μmの平均孔径を有するフィルターに通過させることを含む、請求項33に記載の方法。
- 前記調節工程が、前記卵白を酸性緩衝液と混合することを含む、請求項33に記載の方法。
- 前記酸性緩衝液が、約8mS/cm〜約40mS/cmの導電率を有する、請求項33に記載の方法。
- 前記酸性緩衝液が、卵白1キログラム当たり約0.5重量%〜約5重量%である、請求項33に記載の方法。
- 酸性化卵白をろ過する方法であって、
約8mS/cm〜約20mS/cmの間の導電率を有する前処理緩衝液をフィルターに通過させる工程;および
約5〜約6.5のpHを有する卵白をフィルターに通過させ、ろ過卵白を得る工程、を含む方法。 - 前記前処理緩衝液が、前記卵白のpHと実質的に同じpHを有する、請求項39に記載の方法。
- 前記前処理緩衝液が、約5.9〜約6.1のpHを有する、請求項40に記載の方法。
- 前記前処理緩衝液が、約6のpHを有する、請求項40に記載の方法。
- 前記前処理緩衝液が、リン酸ナトリウムおよび塩化ナトリウムを含む、請求項39に記載の方法。
- 前記前処理緩衝液が、約10mS/cm〜約18mS/cmの導電率を有する、請求項39に記載の方法。
- 前記卵白が、約8mS/cm〜約20mS/cmの導電率を有する、請求項39に記載の方法。
- 前記フィルターが、少なくとも約8m2のろ過媒体面積を有する、請求項39に記載の方法。
- 前記フィルターが、約0.1μm〜約100μmの平均孔径を有する、請求項39に記載の方法。
- 前記卵白が、少なくとも約50Lの容量を有する、請求項39に記載の方法。
- 前記卵白が、約30psi未満の差圧下で前記フィルターを通過する、請求項39に記載の方法。
- 前記卵白が、約15psi未満の差圧下で前記フィルターを通過する、請求項49に記載の方法。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201461983003P | 2014-04-23 | 2014-04-23 | |
US61/983,003 | 2014-04-23 | ||
PCT/US2015/026794 WO2015164320A1 (en) | 2014-04-23 | 2015-04-21 | Egg white processing |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2017513899A true JP2017513899A (ja) | 2017-06-01 |
JP6571684B2 JP6571684B2 (ja) | 2019-09-04 |
Family
ID=54333069
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2016564138A Active JP6571684B2 (ja) | 2014-04-23 | 2015-04-21 | 卵白処理 |
Country Status (12)
Country | Link |
---|---|
US (3) | US9938319B2 (ja) |
EP (1) | EP3133932B1 (ja) |
JP (1) | JP6571684B2 (ja) |
KR (1) | KR102409341B1 (ja) |
CN (1) | CN106455621B (ja) |
AU (1) | AU2015249902B2 (ja) |
BR (1) | BR112016024586B1 (ja) |
CA (1) | CA2945964C (ja) |
ES (1) | ES2893402T3 (ja) |
MX (1) | MX2016013713A (ja) |
RU (1) | RU2686984C2 (ja) |
WO (1) | WO2015164320A1 (ja) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2021528235A (ja) * | 2018-06-19 | 2021-10-21 | ザトーリウス ステディム ビオテーク ゲーエムベーハー | 濾過と吸着のステップを含む1つの膜積層体 |
Families Citing this family (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP6920280B2 (ja) * | 2016-03-31 | 2021-08-18 | 株式会社カネカ | 精製されたネコ由来エリスロポエチンの製造方法 |
WO2018039163A1 (en) | 2016-08-23 | 2018-03-01 | Alexion Pharmaceuticals, Inc. | Method of purifying a heterologous protein from an egg white |
CN107242346A (zh) * | 2017-06-22 | 2017-10-13 | 安徽王家坝生态农业有限公司 | 一种从蛋白中获取多肽制品的方法 |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20080071067A1 (en) * | 2006-09-20 | 2008-03-20 | Avigenics, Inc. | Methods of purifying proteins from egg white |
Family Cites Families (26)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US2191257A (en) | 1937-08-10 | 1940-02-20 | Armour & Co | Egg white material and process of preparing the same |
US2168926A (en) | 1938-07-07 | 1939-08-08 | Armour & Co | Egg white process |
US2237087A (en) | 1938-07-14 | 1941-04-01 | Armour & Co | Process of treating egg whites |
US2377961A (en) * | 1942-04-22 | 1945-06-12 | Domestic Egg Products Inc | Manufacture of water-soluble egg albumen |
US2427726A (en) | 1944-10-02 | 1947-09-23 | Armour & Co | Preparing dried egg products |
US2744829A (en) * | 1950-07-08 | 1956-05-08 | Benjamin R Harris | Treatment of liquid egg whites |
US2610918A (en) | 1951-04-10 | 1952-09-16 | Kline Leo | Preparation of dried eggs |
US2758935A (en) | 1953-03-16 | 1956-08-14 | Ben L Sarett | Treatment of eggs |
ATE34648T1 (de) | 1984-11-02 | 1988-06-15 | Nestle Sa | Verarbeitung von eidotter. |
SI8510058A8 (en) | 1985-01-16 | 1996-04-30 | Inst Jozef Stefan P O | Process for insulation of poultry egg's cystatine from egg-white |
US4971827A (en) | 1988-06-22 | 1990-11-20 | Specialty Foods Investement Company | Method of producing cholesterol-free egg products with an extended refrigerated shelf life and products produced thereby |
US4853238A (en) | 1988-07-21 | 1989-08-01 | Worthington Foods, Inc. | Method of treating liquid egg and egg white with microwave energy to increase refrigerated shelf life |
DK114392D0 (da) | 1992-09-17 | 1992-09-17 | Kem En Tec As | Isolering af biomolekyler |
AU4837996A (en) | 1996-02-29 | 1997-09-16 | Delta Biotechnology Limited | High purity albumin production process |
GB9902000D0 (en) * | 1999-01-30 | 1999-03-17 | Delta Biotechnology Ltd | Process |
US7541512B2 (en) * | 2001-03-30 | 2009-06-02 | Synageva Biopharma Corp. | Avians containing a lysozyme promoter transgene |
US6936295B2 (en) | 2002-05-23 | 2005-08-30 | Cargill, Incorporated | Method for treating liquid egg whites |
KR100627680B1 (ko) | 2004-02-10 | 2006-09-25 | 유익종 | 가열시 쓴맛이 제거된 응고방지용 난백액의 제조방법 |
WO2006110277A1 (en) * | 2005-04-11 | 2006-10-19 | Medarex, Inc. | Protein purification using hcic amd ion exchange chromatography |
IL184871A0 (en) * | 2006-07-27 | 2008-01-20 | Saint Simeon Marketing E Inves | Method for the production of wine and wine obtained from such method |
WO2009052396A2 (en) * | 2007-10-17 | 2009-04-23 | Biova, L.L.C. | Novel process for solubilizing protein from a proteinaceous material and compositions thereof |
CN101603038B (zh) * | 2009-07-10 | 2011-04-06 | 山东鲁北药业有限公司 | 一种溶菌酶的制备方法 |
EP4241854A3 (en) * | 2010-04-23 | 2023-11-08 | Alexion Pharmaceuticals, Inc. | Lysosomal storage disease enzyme |
MX335995B (es) | 2010-07-02 | 2016-01-07 | Rembrandt Entpr Inc | Materiales aislados de proteinas de huevo y lipidos de huevo y metodos para producir los mismos. |
WO2012146716A1 (en) | 2011-04-29 | 2012-11-01 | Dsm Ip Assets B.V. | Preparation of an egg white composition |
WO2018039163A1 (en) * | 2016-08-23 | 2018-03-01 | Alexion Pharmaceuticals, Inc. | Method of purifying a heterologous protein from an egg white |
-
2015
- 2015-04-21 CN CN201580025889.1A patent/CN106455621B/zh active Active
- 2015-04-21 KR KR1020167032161A patent/KR102409341B1/ko active IP Right Grant
- 2015-04-21 ES ES15782866T patent/ES2893402T3/es active Active
- 2015-04-21 JP JP2016564138A patent/JP6571684B2/ja active Active
- 2015-04-21 US US14/691,817 patent/US9938319B2/en active Active
- 2015-04-21 RU RU2016145601A patent/RU2686984C2/ru active
- 2015-04-21 WO PCT/US2015/026794 patent/WO2015164320A1/en active Application Filing
- 2015-04-21 BR BR112016024586-5A patent/BR112016024586B1/pt active IP Right Grant
- 2015-04-21 EP EP15782866.6A patent/EP3133932B1/en active Active
- 2015-04-21 AU AU2015249902A patent/AU2015249902B2/en active Active
- 2015-04-21 CA CA2945964A patent/CA2945964C/en active Active
- 2015-04-21 MX MX2016013713A patent/MX2016013713A/es unknown
-
2018
- 2018-02-23 US US15/903,714 patent/US20180244716A1/en not_active Abandoned
-
2022
- 2022-11-11 US US18/054,782 patent/US20230159585A1/en active Pending
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20080071067A1 (en) * | 2006-09-20 | 2008-03-20 | Avigenics, Inc. | Methods of purifying proteins from egg white |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2021528235A (ja) * | 2018-06-19 | 2021-10-21 | ザトーリウス ステディム ビオテーク ゲーエムベーハー | 濾過と吸着のステップを含む1つの膜積層体 |
JP7189972B2 (ja) | 2018-06-19 | 2022-12-14 | ザトーリウス ステディム ビオテーク ゲーエムベーハー | 濾過と吸着のステップを含む1つの膜積層体 |
JP7458462B2 (ja) | 2018-06-19 | 2024-03-29 | ザトーリウス ステディム ビオテーク ゲーエムベーハー | 濾過と吸着のステップを含む1つの膜積層体 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
BR112016024586A8 (pt) | 2021-03-16 |
US9938319B2 (en) | 2018-04-10 |
AU2015249902A1 (en) | 2016-11-10 |
EP3133932A4 (en) | 2017-11-01 |
ES2893402T3 (es) | 2022-02-09 |
AU2015249902B2 (en) | 2019-01-31 |
EP3133932A1 (en) | 2017-03-01 |
CN106455621A (zh) | 2017-02-22 |
US20150307547A1 (en) | 2015-10-29 |
EP3133932B1 (en) | 2021-08-11 |
RU2686984C2 (ru) | 2019-05-06 |
CN106455621B (zh) | 2021-07-20 |
BR112016024586A2 (pt) | 2017-08-15 |
MX2016013713A (es) | 2017-05-03 |
BR112016024586B1 (pt) | 2022-03-29 |
US20180244716A1 (en) | 2018-08-30 |
CA2945964C (en) | 2022-06-14 |
CA2945964A1 (en) | 2015-10-29 |
JP6571684B2 (ja) | 2019-09-04 |
RU2016145601A (ru) | 2018-05-24 |
WO2015164320A1 (en) | 2015-10-29 |
US20230159585A1 (en) | 2023-05-25 |
RU2016145601A3 (ja) | 2018-10-22 |
KR20160145750A (ko) | 2016-12-20 |
KR102409341B1 (ko) | 2022-06-14 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP6571684B2 (ja) | 卵白処理 | |
US20160176921A1 (en) | Methods of purifying recombinant proteins | |
EP0870508B1 (en) | Influenza vaccine | |
JP5728016B2 (ja) | 組換えヒトエリスロポエチン(epo)を精製するためのプロセス、このようにして精製されたepoおよびこれを含む医薬組成物 | |
EP3274359B1 (en) | Virus filtration | |
US20220402968A1 (en) | Intensified virus filtration using diafiltration buffer | |
JP2021036876A (ja) | 精製および/またはウイルス不活性化の方法 | |
JP7027347B2 (ja) | 卵白から異種タンパク質を精製する方法 | |
KR102245547B1 (ko) | 고밀도의 미정제 세포 배양 수거물의 정화를 위한 방법 | |
US1718282A (en) | Medical serum | |
van der Meer et al. | Diatomaceous Earth Filtration | |
Bhiman | Optimisation of ultrafiltration for human serum albumin at NBI |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20170111 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20180409 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20190326 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20190412 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20190604 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20190709 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20190806 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20190808 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6571684 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |