JP2017163979A - 培養生成液 - Google Patents
培養生成液 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2017163979A JP2017163979A JP2017045860A JP2017045860A JP2017163979A JP 2017163979 A JP2017163979 A JP 2017163979A JP 2017045860 A JP2017045860 A JP 2017045860A JP 2017045860 A JP2017045860 A JP 2017045860A JP 2017163979 A JP2017163979 A JP 2017163979A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- culture
- stem cell
- stem cells
- culture vessel
- area
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title abstract description 55
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 claims abstract description 660
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 claims abstract description 147
- 239000012530 fluid Substances 0.000 claims abstract description 140
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 claims abstract description 40
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims abstract description 9
- 210000002901 mesenchymal stem cell Anatomy 0.000 claims description 217
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 88
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims description 60
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 30
- 230000036760 body temperature Effects 0.000 claims description 26
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 13
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 11
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 claims description 9
- 238000007599 discharging Methods 0.000 claims description 9
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 6
- 230000001788 irregular Effects 0.000 claims description 5
- 239000002994 raw material Substances 0.000 claims description 3
- 238000005070 sampling Methods 0.000 claims 1
- 230000003068 static effect Effects 0.000 claims 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 159
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 39
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 36
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 25
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 description 25
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 24
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 24
- 230000003796 beauty Effects 0.000 description 21
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 12
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 12
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 12
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 12
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 11
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 10
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 9
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 9
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 7
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 6
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 5
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 3
- 230000006870 function Effects 0.000 description 3
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 3
- 230000000644 propagated effect Effects 0.000 description 3
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 2-Aminoethan-1-ol Chemical compound NCCO HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 230000021164 cell adhesion Effects 0.000 description 2
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 2
- 210000004761 scalp Anatomy 0.000 description 2
- DAEPDZWVDSPTHF-UHFFFAOYSA-M sodium pyruvate Chemical compound [Na+].CC(=O)C([O-])=O DAEPDZWVDSPTHF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N β‐Mercaptoethanol Chemical compound OCCS DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HJCMDXDYPOUFDY-WHFBIAKZSA-N Ala-Gln Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(N)=O HJCMDXDYPOUFDY-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- 208000035285 Allergic Seasonal Rhinitis Diseases 0.000 description 1
- 229930183010 Amphotericin Natural products 0.000 description 1
- QGGFZZLFKABGNL-UHFFFAOYSA-N Amphotericin A Natural products OC1C(N)C(O)C(C)OC1OC1C=CC=CC=CC=CCCC=CC=CC(C)C(O)C(C)C(C)OC(=O)CC(O)CC(O)CCC(O)C(O)CC(O)CC(O)(CC(O)C2C(O)=O)OC2C1 QGGFZZLFKABGNL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-UHFFFAOYSA-N D-OH-Asp Natural products OC(=O)C(N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-UHFFFAOYSA-N D-alpha-Ala Natural products CC([NH3+])C([O-])=O QNAYBMKLOCPYGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000004624 Dermatitis Diseases 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 1
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-UWTATZPHSA-N L-Alanine Natural products C[C@@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-UWTATZPHSA-N 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-UWTATZPHSA-N L-Aspartic acid Natural products OC(=O)[C@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-UWTATZPHSA-N 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 229930182816 L-glutamine Natural products 0.000 description 1
- 229930182821 L-proline Natural products 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- BUGBHKTXTAQXES-UHFFFAOYSA-N Selenium Chemical compound [Se] BUGBHKTXTAQXES-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010042496 Sunburn Diseases 0.000 description 1
- 102000004338 Transferrin Human genes 0.000 description 1
- 108090000901 Transferrin Proteins 0.000 description 1
- 229960003767 alanine Drugs 0.000 description 1
- 229960002648 alanylglutamine Drugs 0.000 description 1
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 229940009444 amphotericin Drugs 0.000 description 1
- APKFDSVGJQXUKY-INPOYWNPSA-N amphotericin B Chemical compound O[C@H]1[C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](C)O[C@H]1O[C@H]1/C=C/C=C/C=C/C=C/C=C/C=C/C=C/[C@H](C)[C@@H](O)[C@@H](C)[C@H](C)OC(=O)C[C@H](O)C[C@H](O)CC[C@@H](O)[C@H](O)C[C@H](O)C[C@](O)(C[C@H](O)[C@H]2C(O)=O)O[C@H]2C1 APKFDSVGJQXUKY-INPOYWNPSA-N 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 229960005261 aspartic acid Drugs 0.000 description 1
- 208000010668 atopic eczema Diseases 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000013256 coordination polymer Substances 0.000 description 1
- 239000012531 culture fluid Substances 0.000 description 1
- 238000013500 data storage Methods 0.000 description 1
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 239000003889 eye drop Substances 0.000 description 1
- 229940012356 eye drops Drugs 0.000 description 1
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 1
- 229960002449 glycine Drugs 0.000 description 1
- 210000001621 ilium bone Anatomy 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 239000007758 minimum essential medium Substances 0.000 description 1
- 210000004197 pelvis Anatomy 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 1
- 229960002429 proline Drugs 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 229910052711 selenium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011669 selenium Substances 0.000 description 1
- 229960001153 serine Drugs 0.000 description 1
- 208000017520 skin disease Diseases 0.000 description 1
- 229940054269 sodium pyruvate Drugs 0.000 description 1
- 210000001562 sternum Anatomy 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 239000012581 transferrin Substances 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 230000002087 whitening effect Effects 0.000 description 1
- 230000037303 wrinkles Effects 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Description
第1培養容器の容量が約20〜30ccであり、第1幹細胞の初期平面形状が略円形であり、第1幹細胞の変形後の平面形状が略円形を核として第1幹細胞が一方向へ不定形に伸張した扁平形状であり、第1採取手段では、第1培養容器を体温と略同一の温度で12〜24時間静的放置しつつ、12〜24時間の間において約1〜2時間間隔で第1培養容器内の第1幹細胞の初期平面形状からの変形を観察し、第1幹細胞が初期平面形状から不定形の扁平形状に変形した場合、第1幹細胞が第1培養容器の底面に定着したと判断する。
11 コンピュータ
12 バーコードリーダ
13 電子顕微鏡
14 キーボード
15 マウス
16 ディスプレイ
17 第1コード用紙
18 原料骨髄液
19 ガラス試験管
20 試験管立て
21 恒温槽
22 中間層骨髄液
23 培養液
24 第1培養容器(第1扁平培養容器)
25 第2培養容器(第2扁平培養容器)
26 第1間葉系幹細胞(第1幹細胞)
27 底面
28 遠心分離器
29 ガラス試験管
30 第2間葉系幹細胞(第2幹細胞)
31 培養生成液
32 保存容器
33 保存容器
34 冷蔵庫
35 第3培養容器(第3扁平培養容器)
37 上面
38 底部
39 スペーサー
40 頂部
41 注入口
42 蓋
43 頂部
44 底部
45 注入口
46 蓋
47 頂部
48 底部
49 注入口
50 蓋
Claims (13)
- ドナーから採取した骨髄液を原料として作られる幹細胞の培養過程において生成された培養生成液であって、
前記培養生成液が、前記ドナーから採取した骨髄液を層状に分離し、層状に分離させた前記骨髄液のうちの中間層に位置する中間層骨髄液を抽出し、所定容量かつ所定面積の底面を有する第1培養容器に前記中間層骨髄液と所定の培養液とを注入して該中間層骨髄液に含まれる第1幹細胞を培養しつつ該第1幹細胞を該第1培養容器の底面に定着させる第1定着手段と、
前記第1定着手段によって前記第1幹細胞を前記第1培養容器の底面に定着させた後、前記第1培養容器内の培養液を排出しつつあらたな培養液を該第1培養容器に注入し、前記第1培養容器の底面面積に対する前記第1幹細胞の総平面面積が第1目標割合に達するまで該第1幹細胞を培養し、前記第1幹細胞の総平面面積が前記第1目標割合に達した時点で、前記第1培養容器から前記第1幹細胞を採取する第1採取手段と、
前記第1採取手段によって採取した前記第1幹細胞を層状に遠心分離し、層状に分離させた前記第1幹細胞のうちの最下層に位置する第2幹細胞を抽出するとともに、所定容量かつ所定面積の底面を有して前記第1培養容器よりも大きい容量かつ大きい底面面積の第2培養容器に前記第2幹細胞とあらたな培養液とを注入し、前記第2幹細胞を培養しつつ該第2幹細胞を前記第2培養容器の底面に定着させる第2定着手段と、
前記第2定着手段によって前記第2幹細胞を前記第2培養容器の底面に定着させた後、前記第2培養容器内の培養液を排出しつつあらたな培養液を該第2培養容器に注入し、前記第2培養容器の底面面積に対する前記第2幹細胞の総平面面積が第2目標割合に達するまで該第2幹細胞を培養し、前記第2幹細胞の総平面面積が前記第2目標割合に達した時点で、前記第2幹細胞の培養過程において単一種の該第2幹細胞から分泌された所定の代謝物質が含まれた前記培養生成液を前記第2培養容器から抽出する第1抽出手段とから作られていることを特徴とする培養生成液。 - 前記第1定着手段では、前記第1培養容器を所定角度に傾斜させた状態で所定時間静的に放置し、前記中間層骨髄液に含まれる第1幹細胞を培養しつつ該第1幹細胞を前記第1培養容器の底面に定着させ、前記第1採取手段では、前記第1培養容器を所定角度に傾斜させた状態で所定時間静的に放置し、前記第1培養容器の底面面積に対する前記第1幹細胞の総平面面積が第1目標割合に達するまで該第1幹細胞を培養し、前記第2定着手段では、前記第2培養容器を所定角度に傾斜させた状態で所定時間静的に放置し、前記第2幹細胞を培養しつつ該第2幹細胞を前記第2培養容器の底面に定着させ、前記第1抽出手段では、前記第2培養容器を所定角度に傾斜させた状態で所定時間静的に放置し、前記第2培養容器の底面面積に対する前記第2幹細胞の総平面面積が第2目標割合に達するまで該第2幹細胞を培養する請求項1に記載の培養生成液。
- 前記培養生成液が、前記第1抽出手段において前記第2培養容器内から培養生成液を抽出した後、前記第2培養容器から前記第2幹細胞を採取する第2採取手段と、所定容量かつ所定面積の底面を有して前記第2培養容器よりも大きい容量かつ大きい底面面積の第3培養容器に前記第2採取手段によって採取した前記第2幹細胞とあらたな培養液とを注入し、前記第2幹細胞を培養しつつ該第2幹細胞を前記第3培養容器の底面に定着させる第3定着手段と、前記第3定着手段によって前記第2幹細胞を前記第3培養容器の底面に定着させた後、前記第3培養容器内の培養液を排出しつつあらたな培養液を該第3培養容器に注入し、前記第3培養容器の底面面積に対する前記第2幹細胞の総平面面積が第3目標割合に達するまで該第2幹細胞を培養し、前記第2幹細胞の総平面面積が前記第3目標割合に達した時点で、前記第2幹細胞の培養過程において単一種の該第2幹細胞から分泌された所定の代謝物質が含まれた前記培養生成液を前記第3培養容器から抽出する第2抽出手段とから作られている請求項1または請求項2に記載の培養生成液。
- 前記第3定着手段では、前記第3培養容器を所定角度に傾斜させた状態で所定時間静的に放置し、前記第2幹細胞を培養しつつ該第2幹細胞を前記第3培養容器の底面に定着させ、前記第2抽出手段では、前記第3培養容器を所定角度に傾斜させた状態で所定時間静的に放置し、前記第3培養容器の底面面積に対する前記第2幹細胞の総平面面積が第3目標割合に達するまで該第2幹細胞を培養する請求項3に記載の培養生成液。
- 前記第1採取手段では、前記ドナーから2〜3ccの骨髄液を採取し、前記2〜3ccの骨髄液を上下方向へ延びる分離容器に注入し、前記分離容器を体温と略同一の温度で所定時間静的に放置して該骨髄液を該分離容器内において上下方向へ層状に分離させ、前記分離容器内において層状に分離した前記骨髄液のうちの中間層に位置する前記中間層骨髄液を抽出する請求項1ないし請求項4いずれかに記載の培養生成液。
- 前記第1培養容器の容量が、約20〜30ccであり、前記第1幹細胞の初期平面形状が、略円形であり、前記第1幹細胞の変形後の平面形状が、前記略円形を核として該第1幹細胞が一方向へ不定形に伸張した扁平形状であり、前記第1採取手段では、前記第1培養容器を体温と略同一の温度で12〜24時間静的放置しつつ、前記12〜24時間の間において約1〜2時間間隔で前記第1培養容器内の第1幹細胞の初期平面形状からの変形を観察し、前記第1幹細胞が初期平面形状から前記不定形の扁平形状に変形した場合、該第1幹細胞が前記第1培養容器の底面に定着したと判断する請求項1ないし請求項5いずれかに記載の培養生成液。
- 前記第1採取手段では、前記第1培養容器を体温と略同一の温度で36〜48時間静的放置しつつ、前記36〜48時間の間において約1〜2時間間隔で前記第1培養容器の底面に定着した前記第1幹細胞の該第1培養容器の底面面積に対する総平面面積を観察する請求項1ないし請求項6いずれかに記載の培養生成液。
- 前記第1培養容器の底面面積に対する前記第1幹細胞の総平面面積の第1目標割合が、70〜80%である請求項7に記載の培養生成液。
- 前記第2採取手段では、前記第1幹細胞を分離容器に注入し、前記分離容器を遠心分離器に設置して該第1幹細胞を遠心分離させ、前記分離容器内において層状に遠心分離した前記第1幹細胞のうちの最下層に位置する前記第2幹細胞を抽出する請求項1ないし請求項8いずれかに記載の培養生成液。
- 前記第2培養容器の容量が、約40〜60ccであり、前記第3培養容器の容量が、約70〜80ccであり、前記第2幹細胞の初期平面形状が、略円形であり、前記第2幹細胞の変形後の平面形状が、前記略円形を核として該第2幹細胞が一方向へ不定形に伸張した扁平形状であり、前記第2および第3定着手段では、前記第2および第3培養容器を体温と略同一の温度で36〜48時間静的放置しつつ、前記36〜48時間の間において約1〜2時間間隔で前記第2および第3培養容器内の第2幹細胞の初期平面形状からの変形を観察し、前記第2幹細胞が初期平面形状から前記不定形の扁平形状に変形した場合、該第2幹細胞が前記第2および第3培養容器の底面に定着したと判断する請求項3ないし請求項9いずれかに記載の培養生成液。
- 前記第2および第3採取手段では、前記第2および第3培養容器を体温と略同一の温度で36〜48時間静的放置しつつ、前記36〜48時間の間において約1〜2時間間隔で前記第2および第3培養容器の底面に定着した前記第2幹細胞の該第2および第3培養容器の底面面積に対する総平面面積を観察する請求項3ないし請求項10いずれかに記載の培養生成液。
- 前記第2培養容器の底面面積に対する前記第2幹細胞の総平面面積の第2目標割合が、88〜92%であり、前記第3培養容器の底面面積に対する前記第2幹細胞の総平面面積の第3目標割合が、88〜92%である請求項3ないし請求項11いずれかに記載の培養生成液。
- 前記第1および第2幹細胞が、間葉系幹細胞である請求項1ないし請求項12いずれかに記載の培養生成液。
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2016047107 | 2016-03-10 | ||
JP2016047107 | 2016-03-10 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2017163979A true JP2017163979A (ja) | 2017-09-21 |
JP6884606B2 JP6884606B2 (ja) | 2021-06-09 |
Family
ID=59909365
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2017045860A Active JP6884606B2 (ja) | 2016-03-10 | 2017-03-10 | 培養生成液 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JP6884606B2 (ja) |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2006149375A (ja) * | 2004-10-29 | 2006-06-15 | Olympus Corp | 体液由来幹細胞の分離方法および培養方法 |
WO2006123579A1 (ja) * | 2005-05-17 | 2006-11-23 | National University Corporation Nagoya University | 骨組織形成用細胞の調製方法、及び骨組織形成用細胞の利用 |
WO2011111787A1 (ja) * | 2010-03-10 | 2011-09-15 | 株式会社ツーセル | 間葉系幹細胞を含む細胞製剤及びその製造方法 |
-
2017
- 2017-03-10 JP JP2017045860A patent/JP6884606B2/ja active Active
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2006149375A (ja) * | 2004-10-29 | 2006-06-15 | Olympus Corp | 体液由来幹細胞の分離方法および培養方法 |
WO2006123579A1 (ja) * | 2005-05-17 | 2006-11-23 | National University Corporation Nagoya University | 骨組織形成用細胞の調製方法、及び骨組織形成用細胞の利用 |
WO2011111787A1 (ja) * | 2010-03-10 | 2011-09-15 | 株式会社ツーセル | 間葉系幹細胞を含む細胞製剤及びその製造方法 |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
中村幸夫: "目的別で選べる細胞培養プロトコール", 実験医学別冊, JPN6017006982, 20 March 2012 (2012-03-20), pages 139 - 146, ISSN: 0004400199 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JP6884606B2 (ja) | 2021-06-09 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN105907641B (zh) | 一种组装型、多条件平行培养微流控装置及其使用方法 | |
CN105769911A (zh) | 间充质干细胞诱导斑秃处毛发再生的方法及应用 | |
CN109486753A (zh) | 一种脂肪干细胞提取方法 | |
Turnbull et al. | Cardiac tissue engineering models of inherited and acquired cardiomyopathies | |
JP6401818B2 (ja) | 活性化幹細胞製造方法 | |
JP5155530B2 (ja) | 成体幹細胞分離・培養システム | |
CN106434547A (zh) | 制备脐带间充质干细胞的方法 | |
CN107446884A (zh) | 人脐带间充质干细胞膜颗粒及其制备与应用 | |
JP6345826B2 (ja) | 培養生成液製造方法 | |
JP2017163979A (ja) | 培養生成液 | |
WO2017155055A1 (ja) | 培養生成液製造方法 | |
CN108486039A (zh) | 小分子诱导人脂肪干细胞分化为睾丸间质细胞的方法 | |
JP2018143168A (ja) | 細胞培養担体 | |
JP6153653B2 (ja) | 幹細胞培養方法 | |
WO2017188370A1 (ja) | 活性化幹細胞製造方法 | |
JP2017104106A (ja) | 単一種幹細胞 | |
Gerilechaogetu et al. | Production of spontaneously beating neonatal rat heart tissue for calcium and contractile studies | |
Kim et al. | Modularized dynamic cell culture platform for efficient production of extracellular vesicles and sequential analysis | |
WO2017099067A1 (ja) | 幹細胞培養方法 | |
JP2017200473A (ja) | 活性化幹細胞 | |
CN106362212A (zh) | 一种用于去除组织细胞的亲脂性去细胞溶液、试剂盒和方法 | |
CN104845931A (zh) | 人乳干细胞的获取方法及人乳干细胞库的构建方法 | |
CN108823163A (zh) | 一种人体研究用脑干细胞的制备和提取方法 | |
CN219097377U (zh) | 超声穿刺病理标本处理盒 | |
CN206553534U (zh) | 一种提高肺癌干细胞富集效率的细胞培养容器 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
AA64 | Notification of invalidation of claim of internal priority (with term) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A241764 Effective date: 20170404 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20170523 |
|
A711 | Notification of change in applicant |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A711 Effective date: 20190314 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20190314 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20190606 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20200306 |
|
A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20201124 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20201208 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20210208 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20210405 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20210511 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20210512 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6884606 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |