JP2016533709A5

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Publication number: JP2016533709A5
Application number: JP2016517431A
Authority: JP
Filing date: 2014-09-26
Publication date: 2017-09-21
Anticipated expiration: 2034-09-26

Claims

複数の修飾ＡＡＶカプシドタンパク質を備えるカプシドライブラリーであって、
ａ）野生型ＡＡＶ２カプシドタンパク質のＱ２６３、Ｑ３８５、Ｑ４５７、Ｑ４６１、Ｑ５４５又はＱ５８９に対応する少なくとも一つの位置の非グルタミンアミノ酸残基、
ｂ）野生型ＡＡＶ２カプシドタンパク質のＳ２６４、Ｓ２６７、Ｓ３８４、Ｓ４５２、Ｓ４９２、Ｓ５４７又はＳ７０７に対応する少なくとも一つの位置の非セリンアミノ酸残基、
ｃ）野生型ＡＡＶ２カプシドタンパク質のＡ２６６、Ａ４６５、Ａ４９３又はＡ５９３に対応する少なくとも一つの位置の非アラニンアミノ酸残基、
ｄ）野生型ＡＡＶ２カプシドタンパク質のＮ３８２、Ｎ５５１、Ｎ５８７、Ｎ５８８、Ｎ５９６、Ｎ７０５又はＮ７０９に対応する少なくとも一つの位置の非アスパラギンアミノ酸残基
ｅ）野生型ＡＡＶ２カプシドタンパク質のＧ３８３、Ｇ４６６、Ｇ５４６又はＧ５８６に対応する少なくとも一つの位置の非グリシンアミノ酸残基、
ｆ）野生型ＡＡＶ２カプシドタンパク質のＹ４４４又はＹ７０４に対応する少なくとも一つの位置の非チロシンアミノ酸残基、
ｇ）野生型ＡＡＶ２カプシドタンパク質のＴ４５０、Ｔ４５４、Ｔ４５５、Ｔ４９１、Ｔ５０３、Ｔ５５０又はＴ５９２に対応する少なくとも一つの位置の非トレオニンアミノ酸残基、
ｈ）野生型ＡＡＶ２カプシドタンパク質のＲ４５９又はＲ５８５に対応する少なくとも一つの位置の非アルギニンアミノ酸残基、
ｉ）野生型ＡＡＶ２カプシドタンパク質のＫ４９０、Ｋ５２７、Ｋ５３２、Ｋ５４９、Ｋ５５６又はＫ７０６に対応する少なくとも一つの位置の非リシンアミノ酸残基、
ｊ）野生型ＡＡＶ２カプシドタンパク質のＤ４９４、Ｄ５２９、Ｄ５５３、Ｄ５９４又はＤ７１１に対応する少なくとも一つの位置の非アスパラギン酸アミノ酸残基、
ｋ）野生型ＡＡＶ２カプシドタンパク質のＥ４９９、Ｅ５３０、Ｅ５３１、Ｅ５４８又はＥ５５５に対応する少なくとも一つの位置の非グルタミン酸アミノ酸残基、
ｌ）野生型ＡＡＶ２カプシドタンパク質のＶ５５２又はＶ７０８に対応する少なくとも一つの位置の非バリンアミノ酸残基、
ｍ）野生型ＡＡＶ２カプシドタンパク質のＰ４５１に対応する少なくとも一つの位置の非プロリンアミノ酸残基、
ｎ）野生型ＡＡＶ２カプシドタンパク質のＩ５５４に対応する少なくとも一つの位置の非イソロイシンアミノ酸残基、
ｏ）野生型ＡＡＶ２カプシドタンパク質のＦ７１２に対応する少なくとも一つの位置の非フェニルアラニンアミノ酸残基、又は
ｐ）上記ａ）からｏ）に記載された２以上のアミノ酸置換の組み合わせ、
を備える、カプシドライブラリー。
ａ）前記非グルタミンアミノ酸残基が、Ｓ、Ｔ、Ｅ、Ａ、Ｇ、Ｎ、Ｋ、Ｒ、Ｈ、Ｐ、Ｄ、Ｍ、Ｌ、Ｉ及びＶからなる群から選択され、
ｂ）前記非セリンアミノ酸残基が、Ａ、Ｔ、Ｑ、Ｈ、Ｒ、Ｋ、Ｎ、Ｇ、Ｌ、Ｖ、Ｍ、Ｉ、Ｐ、Ｅ及びＤからなる群から選択され、
ｃ）前記非アラニンアミノ酸残基が、Ｓ、Ｇ、Ｔ、Ｌ、Ｖ、Ｐ、Ｒ、Ｎ、Ｄ、Ｑ、Ｅ、Ｋ及びＨからなる群から選択され、
ｄ）前記非アスパラギンアミノ酸残基が、Ｔ、Ｄ、Ａ、Ｑ、Ｓ、Ｈ、Ｒ、Ｋ、Ｇ、Ｐ、Ｅ、Ｆ、Ｉ、Ｖ、Ｙ及びＣからなる群から選択され、
ｅ）前記非グリシンアミノ酸残基が、Ｓ、Ｅ、Ｋ、Ｎ、Ｒ、Ｄ、Ｑ、Ａ、Ｔ、Ｈ及びＰからなる群から選択され、
ｆ）前記非チロシンアミノ酸残基がＦであり、
ｇ）前記非トレオニンアミノ酸残基が、Ｎ、Ｓ、Ｇ、Ａ、Ｄ、Ｌ、Ｈ、Ｐ、Ｒ、Ｉ、Ｑ、Ｖ、Ｋ、Ｍ、Ｅ、Ｙ及びＦからなる群から選択され、
ｈ）前記非アルギニンアミノ酸残基が、Ｔ、Ｑ、Ｅ、Ｄ、Ｋ、Ｎ、Ｓ、Ｈ、Ｐ、Ａ及びＧからなる群から選択され、
ｉ）前記非リシンアミノ酸残基が、Ｔ、Ｇ、Ｒ、Ｅ、Ｓ、Ｎ、Ａ、Ｈ、Ｄ及びＱからなる群から選択され、
ｊ）前記非アスパラギン酸アミノ酸残基が、Ｅ、Ｇ、Ｑ、Ｈ、Ｒ、Ｎ、Ｓ、Ａ、Ｔ、Ｖ、Ｋ、Ｍ、Ｉ及びＬからなる群から選択され、
ｋ）前記非グルタミン酸アミノ酸残基が、Ｎ、Ｄ、Ｋ、Ａ、Ｔ、Ｎ、Ｓ、Ｒ及びＧからなる群から選択され、
ｌ）前記非バリンアミノ酸残基が、Ｔ、Ａ、Ｉ、Ｎ、Ｑ、Ｋ、Ｍ、Ｈ、Ｐ、Ｌ、Ｅ及びＤからなる群から選択され、
ｍ）前記非プロリンアミノ酸残基が、Ｎ、Ｔ、Ｑ、Ａ、Ｇ、Ｋ、Ｒ、Ｓ、Ｈ、Ｅ及びＤからなる群から選択され、
ｎ）前記非イソロイシンアミノ酸残基が、Ｌ、Ａ、Ｙ、Ｎ、Ｔ、Ｈ、Ｐ、Ｄ、Ｖ、Ｓ及びＦからなる群から選択され、
ｏ）前記非フェニルアラニンアミノ酸残基が、Ｗ、Ｌ及びＣから選択される、
請求項１に記載の修飾ＡＡＶカプシドタンパク質。
野生型ＡＡＶ２カプシドタンパク質のアミノ酸残基Ｙ４４４、Ｙ５００、Ｒ５８５及びＲ５８８におけるフェニルアラニン置換を備える、請求項１に記載の修飾ＡＡＶカプシドタンパク質。
野生型ＡＡＶ２カプシドタンパク質のアミノ酸残基Ｋ５０７におけるトレオニン置換を備える、請求項１に記載の修飾ＡＡＶカプシドタンパク質。
配列番号１７５、配列番号１７６、配列番号１７７、配列番号１７８、配列番号１７９又は配列番号１８０を備える、請求項１に記載の修飾ＡＡＶカプシドタンパク質。
配列番号１０７、配列番号１０８、配列番号１０９、配列番号１１０、配列番号１１１、配列番号１１２又は配列番号１１３を備える、請求項１に記載の修飾ＡＡＶカプシドタンパク質。
請求項１から６のいずれか１項に記載の修飾ＡＡＶカプシドタンパク質をコードする核酸セグメントを備える、複数のＡＡＶベクター又はビリオン。
野生型のＡＡＶ２ベクター又はビリオンと比較して、選択された哺乳動物宿主細胞において、高い形質導入効率を有する、請求項７に記載のＡＡＶベクター又はビリオン。
野生型ＡＡＶ２と比較して、前記形質導入効率が、少なくとも２倍、少なくとも約４倍、少なくとも約６倍、少なくとも約８倍、少なくとも約１０倍、又は少なくとも約１２倍高い、請求項８に記載のＡＡＶベクター又はビリオン。
前記哺乳動物宿主細胞が、血液細胞、幹細胞、造血細胞、ＣＤ３４ ^＋細胞、肝臓細胞、癌細胞、血管細胞、膵臓細胞、神経細胞、眼又は網膜細胞、上皮又は内皮細胞、樹状細胞、繊維芽細胞、肺細胞、心臓細胞、腸細胞、横隔膜細胞、腎臓細胞、又は骨髄細胞を含む、請求項９に記載のＡＡＶベクター又はビリオン。
野生型ＡＡＶ２と比較して、前記形質導入効率が２０倍高く、前記哺乳動物宿主細胞がネズミ肝臓である、請求項１０に記載のＡＡＶベクター又はビリオン。
当該ベクターを備える適切な宿主細胞において、当該ベクターが、前記核酸セグメントを発現することが可能なプロモーターに作動可能に連結されている診断用又は治療用分子をコードする少なくとも１つの核酸セグメントをさらに備える、請求項７から１１のいずれか１項に記載のＡＡＶベクター。
前記核酸セグメントが、前記核酸セグメントに作動可能に連結されている、エンハンサー、転写後調節配列、ポリアデニル化シグナル、又はそれらの任意の組み合わせをさらに含む、請求項１２に記載のＡＡＶベクター。
前記核酸セグメントが、ポリペプチド、ペプチド、リボザイム、ペプチド核酸、ｓｉＲＮＡ、ＲＮＡｉ、アンチセンスオリゴヌクレオチド、アンチセンスポリヌクレオチド、抗体、抗原結合断片、又はそれらの任意の組み合わせを発現又はコードする、請求項１２又は１３に記載のＡＡＶベクター。
前記治療薬が、アゴニスト、アンタゴニスト、抗アポトーシス因子、阻害剤、受容体、サイトカイン、細胞毒、赤血球生成剤（erythropoietic agent）、糖タンパク質、成長因子、成長因子受容体、ホルモン、ホルモン受容体、インターフェロン、インターロイキン、インターロイキン受容体、神経成長因子、神経活性ペプチド、神経活性ペプチド受容体、プロテアーゼ、プロテアーゼ阻害剤、タンパク質デカルボキシラーゼ、プロテインキナーゼ、プロテインキナーゼ阻害剤、酵素、受容体結合タンパク質、輸送タンパク質又はその阻害剤、セロトニン受容体又はその取り込み阻害剤、セルピン、セルピン受容体、腫瘍抑制因子、化学療法薬、又はそれらの任意の組み合わせである、請求項１２から１４のいずれか１項に記載のＡＡＶベクター。
１又は複数のアミノ酸置換を備える、修飾ＡＡＶ２カプシドタンパク質。
前記１又は複数のアミノ酸置換が、１又は複数のＬｏｏｐＩ、ＬｏｏｐＩＶ又はＬｏｏｐＶで生じる、請求項１６に記載の修飾ＡＡＶ２カプシドタンパク質。
配列番号１０７、配列番号１０８、配列番号１０９、配列番号１１０、配列番号１１１、配列番号１１２又は配列番号１１３を備える、請求項１６に記載の修飾ＡＡＶ２カプシドタンパク質。
配列番号１７５、配列番号１７６、配列番号１７７、配列番号１７８、配列番号１７９、配列番号１８０、又は野生型ＡＡＶ２カプシドタンパク質のアミノ酸残基Ｋ５０７にトレオニン置換を備える、請求項１６に記載の修飾ＡＡＶ２カプシドタンパク質。
配列番号１０５を備える、請求項１６に記載の修飾ＡＡＶ２カプシドタンパク質。