JP2016520518A5

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Publication number: JP2016520518A5
Application number: JP2016501989A
Authority: JP
Filing date: 2014-03-13
Publication date: 2017-04-20
Anticipated expiration: 2034-03-13

Description

要旨
本開示は、ナノ粒子と、ナノ粒子の表面上の少なくとも１つのリンパ球に影響する分子と、抗原に結合するときに固有のクローン形質リンパ球受容体、すなわち、抗原特異的リンパ球受容体とかみ合うナノ粒子の表面上の少なくとも１つ分子複合体と、を含むナノスケール人工抗原提示細胞（ナノａＡＰＣ）を提供する。
本発明は、例えば、以下の項目を提供する。
（項目１）
ナノスケール人工抗原提示細胞（ナノａＡＰＣ）であって、
ナノ粒子と、
前記ナノ粒子の表面上の少なくとも１つのリンパ球に影響する分子と、
抗原に結合すると、抗原特異的リンパ球受容体受容体とかみ合う、前記ナノ粒子の前記前記表面上の少なくとも１つの分子複合体と、を含む、前記ナノスケール人工抗原提示細胞（ナノａＡＰＣ）。
（項目２）
前記ナノ粒子が直径５０〜１００ｎｍである、項目１に記載の前記ナノａＡＰＣ。
（項目３）
前記ナノ粒子が量子ドットである、項目１に記載の前記ナノａＡＰＣ。
（項目４）
前記ナノ粒子が常磁性である、項目１に記載の前記ナノａＡＰＣ。
（項目５）
前記ナノ粒子が生分解性である、項目１に記載の前記ナノａＡＰＣ。
（項目６）
前記ナノ粒子がプラスチックを含む、項目１に記載の前記ナノａＡＰＣ。
（項目７）
架橋抗体またはオリゴマー化分子をさらに含む、項目１〜６のいずれかに記載の前記ナノａＡＰＣ。
（項目８）
前記少なくとも１つのリンパ球に影響する分子がＴ細胞に影響する分子であり、前記分子複合体が少なくとも１つの抗原結合間隙を含む抗原提示複合体である、項目１〜７のいずれかに記載の前記ナノａＡＰＣ。
（項目９）
前記少なくとも１つの抗原提示複合体がＭＨＣクラスＩペプチド結合間隙を含む、項目８に記載の前記ナノａＡＰＣ。
（項目１０）
前記少なくとも１つの抗原提示複合体がＭＨＣクラスＩ分子を含む、項目９に記載の前記ナノａＡＰＣ。
（項目１１）
前記少なくとも１つの抗原提示複合体が、少なくとも２つの融合タンパク質を含むＭＨＣクラスＩ分子複合体であり、第１の融合タンパク質が第１のＭＨＣクラスＩα鎖及び第１の免疫グロブリン重鎖を含み、第２の融合タンパク質が第２のＭＨＣクラスＩα鎖及び第２の免疫グロブリン重鎖を含み、前記第１及び第２の免疫グロブリン重鎖が会合して、前記ＭＨＣクラスＩ分子複合体を形成し、前記ＭＨＣクラスＩ分子複合体が第１のＭＨＣクラスＩペプチド結合間隙及び第２のＭＨＣクラスＩペプチド結合間隙を含む、項目９に記載の前記ナノａＡＰＣ。
（項目１２）
前記少なくとも１つの抗原提示複合体がＭＨＣクラスＩＩペプチド結合間隙を含む、項目１〜７のいずれかに記載の前記ナノａＡＰＣ。
（項目１３）
前記抗原提示複合体がＭＨＣクラスＩＩ分子である、項目１２に記載の前記ナノａＡＰＣ。
（項目１４）
前記抗原提示複合体が、少なくとも４つの融合タンパク質を含むＭＨＣクラスＩＩ分子複合体であり、
（ａ）２つの第１の融合タンパク質が、（ｉ）免疫グロブリン重鎖と、（ｉｉ）ＭＨＣクラスＩＩβ鎖の細胞外ドメインと、を含み、
（ｂ）２つの第２の融合タンパク質が、（ｉ）免疫グロブリン軽鎖と、（ｉｉ）ＭＨＣクラスＩＩα鎖の細胞外ドメインと、を含み、
前記２つの第１の融合タンパク質及び前記２つの第２の融合タンパク質が会合して、前記ＭＨＣクラスＩＩ分子複合体を形成し、各第１の融合タンパク質の前記ＭＨＣクラスＩＩβ鎖の前記細胞外ドメイン及び各第２の融合タンパク質の前記ＭＨＣクラスＩＩα鎖の前記細胞外ドメインがＭＨＣクラスＩＩペプチド結合間隙を形成する、項目１２に記載の前記ナノａＡＰＣ。
（項目１５）
前記免疫グロブリン重鎖が可変領域を含む、項目１４に記載の前記ナノａＡＰＣ。
（項目１６）
抗原ペプチドが前記少なくとも１つの抗原結合間隙に結合する、項目８に記載の前記ナノａＡＰＣ。
（項目１７）
前記抗原ペプチドが、腫瘍関連抗原のペプチド、自己抗原のペプチド、同種抗原のペプチド、及び感染病原体抗体のペプチドからなる群から選択される、項目１６に記載の前記ナノａＡＰＣ。
（項目１８）
少なくとも２つの抗原提示複合体を含む、項目８に記載の前記ナノａＡＰＣ。
（項目１９）
同一の抗原が、前記少なくとも２つの抗原提示複合体の各抗原結合間隙に結合する、項目１８に記載の前記ナノａＡＰＣ。
（項目２０）
異なる抗原が、前記少なくとも２つの抗原提示複合体の各抗原結合間隙に結合する、項目１８に記載の前記ナノａＡＰＣ。
（項目２１）
第１の抗原提示複合体が、少なくとも１つのＭＨＣクラスＩペプチド結合間隙を含み、第２の抗原提示複合体が、少なくとも１つのＭＨＣクラスＩＩペプチド結合間隙を含む、項目１８に記載の前記ナノａＡＰＣ。
（項目２２）
前記少なくとも１つの抗原提示複合体が非古典的なＭＨＣ様分子である、項目８に記載の前記ナノａＡＰＣ。
（項目２３）
前記非古典的なＭＨＣ様分子がＣＤ１ファミリーメンバーである、項目２２に記載の前記ナノａＡＰＣ。
（項目２４）
前記非古典的なＭＨＣ様分子が、ＣＤ１ａ、ＣＤ１ｂ、ＣＤ１ｃ、ＣＤ１ｄ、及びＣＤ１ｅからなる群から選択される、項目２３に記載の前記ナノａＡＰＣ。
（項目２５）
前記少なくとも１つのＴ細胞に影響する分子がＴ細胞共刺激分子である、項目８に記載の前記ナノａＡＰＣ。
（項目２６）
前記Ｔ細胞共刺激分子が、ＣＤ８０（Ｂ７−１）、ＣＤ８６（Ｂ７−２）、Ｂ７−Ｈ３、４−１ＢＢＬ、ＣＤ２７、ＣＤ３０、ＣＤ１３４（ＯＸ−４０Ｌ）、Ｂ７ｈ（Ｂ７ＲＰ−１）、ＣＤ４０、ＬＩＧＨＴ、ＣＤ２８に特異的に結合する抗体、ＨＶＥＭに特異的に結合する抗体、ＣＤ４０Ｌに特異的に結合する抗体、ＯＸ４０に特異的に結合する抗体、及び４−１ＢＢに特異的に結合する抗体からなる群から選択される、項目２５に記載の前記ナノａＡＰＣ。
（項目２７）
前記少なくとも１つのＴ細胞に影響する分子が接着分子である、項目８に記載の前記ナノａＡＰＣ。
（項目２８）
前記接着分子が、ＩＣＡＭ−１及びＬＦＡ−３からなる群から選択される、項目２７に記載の前記ナノａＡＰＣ。
（項目２９）
前記少なくとも１つのＴ細胞に影響する分子がＴ細胞成長因子である、項目８に記載の前記ナノａＡＰＣ。
（項目３０）
前記Ｔ細胞成長因子がサイトカイン及び超抗原からなる群から選択される、項目２９に記載の前記ナノａＡＰＣ。
（項目３１）
前記Ｔ細胞成長因子がサイトカインであり、前記サイトカインが、ＩＬ−２、ＩＬ−４、ＩＬ−７、ＩＬ−１０、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、及びγインターフェロンからなる群から選択される、項目２９に記載の前記ナノａＡＰＣ。
（項目３２）
前記Ｔ細胞成長因子が、
（Ａ）少なくとも２つの融合タンパク質を含む第１の分子複合体であって、第１の融合タンパク質が第１のサイトカイン及び免疫グロブリン重鎖を含み、第２の融合タンパク質が第２のサイトカイン及び第２の免疫グロブリン重鎖を含み、前記第１及び第２の免疫グロブリン重鎖が会合して、前記第１の分子複合体を形成する、第１の分子複合体、ならびに
（Ｂ）少なくとも４つの融合タンパク質を含む第２の分子複合体であって、
（ａ）２つの第１の融合タンパク質が、（ｉ）免疫グロブリン重鎖と、（ｉｉ）第１のサイトカインと、を含み、
（ｂ）２つの第２の融合タンパク質が、（ｉ）免疫グロブリン軽鎖と、（ｉｉ）第２のサイトカインと、を含み、
前記２つの第１の融合タンパク質及び前記２つの第２の融合タンパク質が会合して、前記第２の分子複合体を形成する、第２の分子複合体、からなる群から選択される、項目２９に記載の前記ナノａＡＰＣ。
（項目３３）
前記Ｔ細胞成長因子が前記第１の分子複合体である、項目３２に記載の前記ナノａＡＰＣ。
（項目３４）
前記第１及び第２のサイトカインが同一である、項目３２に記載の前記ナノａＡＰＣ。
（項目３５）
前記第１及び第２のサイトカインが異なる、項目３２に記載の前記ナノａＡＰＣ。
（項目３６）
前記Ｔ細胞成長因子が前記第２の分子複合体である、項目３３に記載の前記ナノａＡＰＣ。
（項目３７）
前記第１及び第２のサイトカインが同一である、項目３６に記載の前記ナノａＡＰＣ。
（項目３８）
前記第１及び第２のサイトカインが異なる、項目３６に記載の前記ナノａＡＰＣ。
（項目３９）
前記少なくとも１つのＴ細胞に影響する分子が制御性Ｔ細胞インデューサー分子である、項目８に記載の前記ナノａＡＰＣ。
（項目４０）
前記少なくとも１つの制御性Ｔ細胞インデューサー分子が、ＴＧＦβ、ＩＬ−１０、インターフェロン−α、及びＩＬ−１５からなる群から選択される、項目３９に記載の前記ナノａＡＰＣ。
（項目４１）
前記少なくとも１つのＴ細胞に影響する分子がアポトーシス誘導分子である、項目８に記載の前記ナノａＡＰＣ。
（項目４２）
前記アポトーシス誘導分子が、毒素、ＴＮＦα、及びＦａｓリガンドからなる群から選択される、項目４１に記載の前記ナノａＡＰＣ。
（項目４３）
少なくとも２つの異なるＴ細胞に影響する分子を含む、項目８に記載の前記ナノａＡＰＣ。
（項目４４）
ナノスケール人工抗原提示細胞（ナノａＡＰＣ）であって、
ナノ粒子と、
前記ナノ粒子の前記表面上の少なくとも１つのＢ細胞に影響する分子と、
Ｂ細胞表面免疫グロブリンまたはＢ細胞表面上のＭＨＣ−抗原複合体とかみ合う前記ナノ粒子の前記表面上の少なくとも１つの分子複合体と、を含む、前記ナノスケール人工抗原提示細胞（ナノａＡＰＣ）。
（項目４５）
前記少なくとも１つのＢ細胞に影響する分子がＣＤ４０リガンドである、項目４４に記載の前記ナノａＡＰＣ。
（項目４６）
前記分子複合体がＴ細胞受容体（ＴＣＲ）である、項目４４に記載の前記ナノａＡＰＣ。
（項目４７）
前記分子複合体が少なくとも４つの融合タンパク質を含むＴＣＲ分子複合体であり、
（ａ）２つの第１の融合タンパク質が（ｉ）ＴＣＲα鎖またはＴＣＲγ鎖を含み、
（ｂ）２つの第２の融合タンパク質が（ｉ）免疫グロブリン軽鎖と、（ｉｉ）ＴＣＲβ鎖またはＴＣＲδ鎖の細胞外ドメインと、を含み、前記２つの第１の融合タンパク質が前記ＴＣＲα鎖を含む場合、前記２つの第２の融合タンパク質は前記ＴＣＲβ鎖を含み、前記２つの第１の融合タンパク質が前記ＴＣＲγ鎖を含む場合、前記２つの第２の融合タンパク質は前記ＴＣＲδ鎖を含み、
前記２つの第１の融合タンパク質及び前記２つの第２の融合タンパク質が会合して、前記ＴＣＲ分子複合体を形成し、各第１の融合タンパク質の前記ＴＣＲαまたはγ鎖の前記細胞外ドメイン及び各第２の融合タンパク質の前記ＴＣＲβまたはδ鎖の前記細胞外ドメインが、ＴＣＲ抗原結合間隙を形成する、項目４４に記載の前記ナノａＡＰＣ。
（項目４８）
ナノスケール人工抗原提示細胞（ナノａＡＰＣ）であって、
ナノ粒子と、
前記ナノ粒子の前記表面上の少なくとも１つのＴ細胞共刺激分子と、
前記ナノ粒子の前記表面上の少なくとも１つのＭＨＣクラスＩ分子複合体と、を含み、前記少なくとも１つのＭＨＣクラスＩ分子複合体が、少なくとも２つの融合タンパク質を含み、第１の融合タンパク質が第１のＭＨＣクラスＩα鎖及び第１の免疫グロブリン重鎖を含み、第２の融合タンパク質が第２のＭＨＣクラスＩα鎖及び第２の免疫グロブリン重鎖を含み、前記第１及び第２の免疫グロブリン重鎖が会合して、前記ＭＨＣクラスＩ分子複合体を形成し、前記ＭＨＣクラスＩ分子複合体が、第１のＭＨＣクラスＩペプチド結合間隙及び第２のＭＨＣクラスＩペプチド結合間隙を含む、前記ナノスケール人工抗原提示細胞（ナノａＡＰＣ）。
（項目４９）
前記少なくとも１つのＴ細胞共刺激分子が、ＣＤ２８に特異的に結合する抗体である、項目４８に記載の前記ナノａＡＰＣ。
（項目５０）
項目１〜４９のいずれかに記載の複数のナノスケール人工抗原提示細胞（ナノａＡＰＣ）を含む調製物。
（項目５１）
薬学的に許容される担体をさらに含む、項目５０に記載の前記調製物。
（項目５２）
抗原特異的Ｔ細胞の形成の誘導方法であって、
複数の前駆Ｔ細胞を含む単離された調製物を、抗原が抗原結合間隙に結合する、項目８に記載の少なくとも１つの第１のナノａＡＰＣと接触させ、それによって、前記複数の前駆Ｔ細胞のメンバーを、前記抗原を認識する抗原特異的Ｔ細胞を含む第１の細胞集団を形成するように誘導することを含み、前記第１の細胞集団における抗原特異的Ｔ細胞の数または割合は、前駆Ｔ細胞が、ＣＤ３に特異的に結合する抗体を含むが、抗原提示複合体を含まないナノａＡＰＣとともにインキュベートされる場合に形成される抗原特異的Ｔ細胞の数または割合を超える、前記方法。
（項目５３）
前記抗原特異的Ｔ細胞が細胞傷害性Ｔ細胞である、項目５２に記載の前記方法。
（項目５４）
前記抗原特異的Ｔ細胞がヘルパーＴ細胞である、項目５２に記載の方法。
（項目５５）
前記抗原特異的Ｔ細胞が制御性Ｔ細胞である、項目５２に記載の前記方法。
（項目５６）
前記抗原特異的Ｔ細胞を前記第１の細胞集団から分離することをさらに含む、項目５２に記載の前記方法。
（項目５７）
前記第１の細胞集団を、抗原が前記粒子の前記抗原結合間隙に結合する、少なくとも１つの項目７に記載の第２のナノａＡＰＣとともにインキュベートすることをさらに含み、前記インキュベートが、前記第１の細胞集団における抗原特異的Ｔ細胞の数または割合と比べて増加した数または割合の抗原特異的Ｔ細胞を含む第２の細胞集団を形成するのに十分な時間実行される、項目５２に記載の前記方法。
（項目５８）
前記抗原が同一である、項目５２に記載の前記方法。
（項目５９）
前記抗原が異なる、項目５２に記載の前記方法。
（項目６０）
前記単離された調製物が少なくとも２つの第１のナノａＡＰＣと接触し、異なる抗原が第１のナノａＡＰＣのそれぞれに結合する、項目５２に記載の前記方法。
（項目６１）
細胞の集団における抗原特異的Ｔ細胞の数または割合の増加方法であって、
抗原特異的Ｔ細胞を含む第１の細胞集団を、抗原が前記抗原結合間隙に結合する、少なくとも１つの項目８に記載の第１のナノａＡＰＣとともにインキュベートすることを含み、前記インキュベートが、前記第１の細胞集団における抗原特異的Ｔ細胞の数または割合と比べて増加した数または割合の抗原特異的Ｔ細胞を含む第２の細胞集団を形成するのに十分な時間実行される、前記方法。
（項目６２）
前記第１の細胞集団が均質細胞集団である、項目６１に記載の前記方法。
（項目６３）
前記抗原特異的Ｔ細胞を患者に投与することをさらに含む、項目６２に記載の前記方法。
（項目６４）
前記患者が、癌、自己免疫疾患、感染症を有するか、または免疫抑制させられている、項目６３に記載の前記方法。
（項目６５）
前記前駆Ｔ細胞が前記患者から得られる、項目６３に記載の前記方法。
（項目６６）
前記前駆Ｔ細胞が前記患者ではないドナーから得られる、項目６３に記載の前記方法。
（項目６７）
前記抗原特異的Ｔ細胞が、静脈内投与、動脈内投与、皮下投与、皮内投与、リンパ内投与、及び腫瘍内投与からなる群から選択される投与経路によって投与される、項目６３に記載の前記方法。
（項目６８）
前記第２の集団の前記抗原特異的Ｔ細胞を前記患者に投与することをさらに含む、項目６１に記載の前記方法。
（項目６９）
患者の免疫応答の調節方法であって、
（Ａ）複数の粒子と、（Ｂ）薬学的に許容される担体と、を含む調製物を患者に投与することを含み、前記複数の粒子のメンバーが、
（１）少なくとも１つのＴ細胞に影響する分子と、
（２）少なくとも１つの抗原提示複合体と、を含み、前記少なくとも１つの抗原提示複合体が少なくとも１つの抗原結合間隙を含み、抗原が前記少なくとも１つの抗原結合間隙に結合する、前記方法。
（項目７０）
前記少なくとも１つのＴ細胞に影響する分子が、（１）アポトーシス誘導分子、（２）制御性Ｔ細胞誘導分子、（３）Ｔ細胞共刺激分子、（４）接着分子、及び（５）Ｔ細胞成長因子からなる群から選択される、項目６９に記載の前記方法。
（項目７１）
患者の免疫応答の抑制方法であって、
（Ａ）複数の粒子と、（Ｂ）薬学的に許容される担体と、を含む調製物を患者に投与するステップを含み、前記複数の粒子のメンバーが、
（１）少なくとも１つのアポトーシス誘導分子と、
（２）少なくとも１つの抗原提示複合体と、を含み、前記少なくとも１つの抗原提示複合体が少なくとも１つの抗原結合間隙を含み、抗原が前記少なくとも１つの抗原結合間隙に結合する、前記方法。
（項目７２）
集団における抗体産生Ｂ細胞の数または割合の増加方法であって、
複数の前駆Ｂ細胞を含む単離された調製物を、少なくとも１つの項目４４に記載の第１のナノａＡＰＣと接触させ、それによって、前記複数の前駆Ｂ細胞のメンバーを、前記抗原ペプチドに特異的に結合する抗体を産生する抗体産生Ｂ細胞を含む第１の細胞集団を形成するように誘導するステップを含む、前記方法。
（項目７３）
前記第１の細胞集団から、抗体を産生するＢ細胞を分離することをさらに含む、項目７２に記載の前記方法。
（項目７４）
前記第１の細胞集団を、少なくとも１つの項目４３に記載の第２のナノａＡＰＣとともにインキュベートすることをさらに含み、前記インキュベートが、前記第１の細胞集団における抗体産生Ｂ細胞の数または割合と比べて増加した数または割合の抗体産生Ｂ細胞を含む第２の細胞集団を形成するのに十分な時間実行される、項目７２に記載の前記方法。
（項目７５）
集団における抗体産生Ｂ細胞の数または割合の増加方法であって、
抗体産生Ｂ細胞を含む第１の細胞集団を、少なくとも１つの項目４４に記載の第１のナノａＡＰＣとともにインキュベートすることであって、前記インキュベートが、前記第１の細胞集団における抗体産生Ｂ細胞の数または割合と比べて増加した数または割合の抗体産生Ｂ細胞を含む第２の細胞集団を形成するのに十分な時間実行される、前記方法。
（項目７６）
前記第１の細胞集団が均質細胞集団である、項目７５に記載の前記方法。
（項目７７）
集団における抗体産生Ｂ細胞の数または割合の増加方法であって、
複数の前駆Ｂ細胞を含む単離された調製物を、項目４４に記載の前記調製物と接触させ、それによって、前記複数の前駆Ｂ細胞のメンバーを、前記抗原ペプチドに特異的に結合する抗体を産生する抗体産生Ｂ細胞を含む第１の細胞集団を形成するように誘導するステップを含む、前記方法。
（項目７８）
患者の免疫応答の調節方法であって、
（Ａ）複数の粒子と、（Ｂ）薬学的に許容される担体と、を含む調製物を患者に投与することであって、前記複数の粒子のメンバーが、
（１）少なくとも１つのＢ細胞に影響する分子と、
（２）Ｂ細胞表面上のＭＨＣ−抗原複合体とかみ合う少なくとも１つの分子複合体と、を含む、前記方法。
（項目７９）
前記少なくとも１つのＢ細胞に影響する分子が、（１）ＣＤ４０リガンド、（２）サイトカイン、及び（３）サイトカイン分子複合体からなる群から選択される、項目７８に記載の前記方法。
（項目８０）
前記分子複合体が、Ｔ細胞受容体及び少なくとも４つの融合タンパク質を含むＴＣＲ分子複合体からなる群から選択され、
（ａ）２つの第１の融合タンパク質が（ｉ）ＴＣＲα鎖またはＴＣＲγ鎖を含み、
（ｂ）２つの第２の融合タンパク質が（ｉ）免疫グロブリン軽鎖と、（ｉｉ）ＴＣＲβ鎖またはＴＣＲδ鎖の細胞外ドメインと、を含み、前記２つの第１の融合タンパク質が前記ＴＣＲα鎖を含む場合、前記２つの第２の融合タンパク質は前記ＴＣＲβ鎖を含み、前記２つの第１の融合タンパク質が前記ＴＣＲγ鎖を含む場合、前記２つの第２の融合タンパク質は前記ＴＣＲδ鎖を含み、
前記２つの第１の融合タンパク質及び前記２つの第２の融合タンパク質が会合して、前記ＴＣＲ分子複合体を形成し、各第１の融合タンパク質の前記ＴＣＲαまたはγ鎖の前記細胞外ドメイン及び各第２の融合タンパク質の前記ＴＣＲβまたはδ鎖の前記細胞外ドメインが、ＴＣＲ抗原結合間隙を形成する、項目７８に記載の前記方法。
（項目８１）
ポリクローナルＴ細胞集団における抗原特異的Ｔ細胞の濃縮方法であって、前記ポリクローナルＴ細胞集団を、項目７に記載の前記ナノａＡＰＣとともにインキュベートすることを含む、前記方法。
（項目８２）
前記抗原特異的Ｔ細胞を前記ポリクローナルＴ細胞集団から分離することをさらに含む、項目８１に記載の前記方法。
（項目８３）
前記分離が、磁気濃縮カラム、フローサイトメトリー、または分画遠心法を使用して達成される、項目８２に記載の前記方法。
（項目８４）
前記ナノａＡＰＣの存在下で、前記抗原特異的Ｔ細胞を培養することをさらに含む、項目８２または８３に記載の前記方法。
（項目８５）
前記抗原特異的Ｔ細胞を患者に投与することをさらに含む、項目８２〜８４のいずれかに記載の前記方法。
（項目８６）
Ｔ細胞の活性化方法であって、
磁場の存在下で、Ｔ細胞の集団を項目８に記載の前記ナノａＡＰＣとともにインキュベートすることを含み、前記ナノａＡＰＣが常磁性である、前記方法。
（項目８７）
前記インキュベーションが、３７℃で１０分間〜３日間実行される、項目８６に記載の前記方法。

ＭＨＣ−Ｉｇダイマーの調製。可溶性ＭＨＣ−Ｉｇダイマー、Ｋ^ｂ−Ｉｇ、及びＤ^ｂ−Ｉｇを調製し、記載の通りペプチドで充填した（４８）。簡潔に、Ｋ^ｂ−Ｉｇ分子を、アルカリ条件（ｐＨ１１．５）で取り除くことによってペプチドで充填し、次いで、５０倍の過剰ペプチドの存在下で再び折り畳んだ。Ｄ^ｂ−Ｉｇ分子を、弱酸性条件下で（ｐＨ６．５）取り除き、５０倍のモル過剰ペプチド及び２倍のモル過剰のヒトβ２−ミクログロブリンの存在下で再び折り畳んだ。ヒトＡ２−Ｉｇを、過剰Ｍ１ペプチドの存在下で受動的に充填した（４９）。ペプチド「ＳＩＹ」（ＳＩＹＲＹＹＧＬ、配列番号３、合成）、「ＳＩＩＮ」（ＳＩＩＮＦＥＫＬ、配列番号４、卵白アルブミンタンパク質に由来）、「ＧＰ１００」（ＫＶＰＲＮ量子ドットＷＬ、配列番号５、メラニン形成細胞ＧＰ１００タンパク質から）、「ＡＳＮ」（ＡＳＮＥＮＭＥＴＨ、配列番号６、インフルエンザＡ核タンパク質から）、及び「Ｍ１」（ＧＩＬＧＦＶＦＴＬ、配列番号７、インフルエンザＡＭ１タンパク質から）は、Ｇｅｎｓｃｒｉｐｔ（Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ，ＮＪ）から購入した。タンパク質濃度を、サイズ排除高速液体クロマトグラフィーによって、標識後に判定した。

Claims

Ｔ細胞を活性化する方法であって、該方法は、
磁場の存在下で、Ｔ細胞の集団をナノスケール人工抗原提示細胞（ナノａＡＰＣ）とともにインキュベートすることを含み、該ナノａＡＰＣは、
常磁性ナノ粒子と、
該ナノ粒子の表面上の少なくとも１つのＴ細胞に影響する分子と、
ペプチド抗原が結合する少なくとも１つの抗原結合間隙を含む、該ナノ粒子の表面上の少なくとも１つの抗原提示複合体と
を含む、方法。
前記ナノ粒子が直径２〜５００ｎｍである、請求項１に記載の方法。
前記ナノ粒子が直径５０〜１００ｎｍである、請求項２に記載の方法。
前記Ｔ細胞の集団が、１０分間〜３日間磁場の存在下でインキュベートされる、請求項１に記載の方法。
前記少なくとも１つの抗原提示複合体が、ＭＨＣクラスＩペプチド結合間隙を含む、請求項１に記載の方法。
前記ＭＨＣクラスＩ分子複合体が、２つの融合タンパク質を含み、各融合タンパク質が、抗原結合間隙を形成するＭＨＣクラスＩα鎖および免疫グロブリン重鎖アミノ酸配列を含む、請求項５に記載の方法。
前記ＭＨＣクラスＩ分子複合体がＨＬＡ−Ａ２である、請求項６に記載の方法。
前記少なくとも１つの抗原提示複合体が、ＭＨＣクラスＩＩペプチド結合間隙を含む、請求項１に記載の方法。
前記ＭＨＣクラスＩＩ分子複合体が、４つの融合タンパク質を含み、（ａ）２つの第１の融合タンパク質は、（ｉ）免疫グロブリン重鎖アミノ酸配列および（ｉｉ）ＭＨＣクラスＩＩβ鎖の細胞外ドメインを含み、（ｂ）２つの第２の融合タンパク質は、（ｉ）免疫グロブリン軽鎖アミノ酸配列および（ｉｉ）ＭＨＣクラスＩＩα鎖の細胞外ドメインを含む、請求項８に記載の方法。
前記ペプチド抗原が、腫瘍関連抗原のペプチド、自己抗原のペプチド、同種抗原のペプチド、および感染病原体抗原のペプチドからなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
前記ペプチド抗原が、腫瘍関連抗原のペプチドである、請求項１０に記載の方法。
前記少なくとも１つのＴ細胞に影響する分子がＴ細胞共刺激分子である、請求項１に記載の方法。
前記Ｔ細胞共刺激分子が、ＣＤ８０（Ｂ７−１）、ＣＤ８６（Ｂ７−２）、Ｂ７−Ｈ３、４−１ＢＢＬ、ＣＤ２７、ＣＤ３０、ＣＤ１３４（ＯＸ−４０Ｌ）、Ｂ７ｈ（Ｂ７ＲＰ−１）、ＣＤ４０、ＬＩＧＨＴ、ＣＤ２８に特異的に結合する抗体、ＨＶＥＭに特異的に結合する抗体、ＣＤ４０Ｌに特異的に結合する抗体、ＯＸ４０に特異的に結合する抗体、および４−１ＢＢに特異的に結合する抗体から選択される、請求項１２に記載の方法。
前記少なくとも１つのＴ細胞に影響する分子がＴ細胞成長因子を含む、請求項１に記載の方法。
前記Ｔ細胞成長因子がサイトカインおよび超抗原から選択される、請求項１４に記載の方法。
前記少なくとも１つのＴ細胞に影響する分子が制御性Ｔ細胞インデューサー分子を含む、請求項１に記載の方法。
前記制御性Ｔ細胞インデューサー分子が、ＴＧＦβ、ＩＬ−１０、インターフェロン−α、およびＩＬ−１５から選択される、請求項１６に記載の方法。
前記Ｔ細胞共刺激分子が、ＣＤ２８に特異的に結合する抗体である、請求項１３に記載の方法。
前記活性化されたＴ細胞が細胞傷害性Ｔ細胞である、請求項１に記載の方法。
前記Ｔ細胞の集団が、末梢血単核球、骨髄、リンパ節組織、脾臓組織、または腫瘍組織から得られる、請求項１に記載の方法。
前記Ｔ細胞の集団が、アフェレーシスまたは白血球アフェレーシスにより得られる、請求項１に記載の方法。
前記活性化されたＴ細胞が患者に投与されるものである、請求項１に記載の方法。
前記患者が、癌、自己免疫疾患、または感染症を有しているか、あるいは免疫抑制されている、請求項２２に記載の方法。
前記Ｔ細胞の集団が、前記患者から得られる、請求項２２に記載の方法。
前記Ｔ細胞の集団が、患者ではないドナーから得られる、請求項２２に記載の方法。
前記Ｔ細胞の集団が、前記ナノａＡＰＣとともに３〜２１日間インキュベートされる、請求項１に記載の方法。