JP2016164191A - 光学活性チアゾリルアラニン誘導体の塩 - Google Patents

Abstract

【課題】本願は、危険な試剤を使用することなく、且つ、経済的に有利な、工業的生産に適した、高品質の光学活性チアゾリルアラニン誘導体およびその塩の製造法を提供することを目的とする。
【解決手段】本発明は、チアゾリルアラニン誘導体を塩に変換して、一方の立体配置を有する化合物を優先的に晶析することにより、所望の立体配置を有する光学活性チアゾリルアラニン誘導体の塩を製造する方法、及び、当該塩を解塩することにより、光学活性チアゾリルアラニン誘導体を製造する方法に関する。
【選択図】なし

Description

本願発明は、光学活性チアゾリルアラニン誘導体およびその塩の製造方法に関する。光学活性チアゾリルアラニンは、ヒトの必須アミノ酸であるヒスチジンの薬理的等価体として知られており、医薬品等の中間体として有用な化合物である。

光学活性チアゾリルアラニン誘導体に関しては、従来以下のような製造方法が知られている。
１）酵素による分割法
・リパーゼを用いて、Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−チアゾリルアラニンエステルを分割するＮ−ベンジルオキシカルボニル−チアゾリルアラニンの合成方法（非特許文献１）
・Ｌ−アミノアシラーゼを用いて、Ｎ−アセチル−チアゾリルアラニンを分割する、チアゾリルアラニンの合成方法（特許文献１）
・プロテアーゼを用いて、Ｎ−アセチル−チアゾリルアラニンを分割する方法（特許文献２）
２）アミノトランスフェラーゼを用いて、天然アミノ酸から２−ヒドロキシ−３−チアゾリルアクリル酸へのアミノ基転移反応により合成する方法（特許文献３）
３）アスパラギン酸より合成する方法（非特許文献２）
しかしながら、１）及び２）の方法は、酵素反応の媒体として多量の水を使用しており、生産性が低い。また、水に対する親和性が高い光学活性チアゾリルアラニン誘導体を水性媒体より単離するには、多量の有機溶剤での抽出処理や、イオン交換樹脂カラム処理などの、非効率で煩雑な操作が必要である。このため、これらは工業的製造法として好ましくない。

更に、２）の方法は、原料である２−ヒドロキシ−３−チアゾリルアクリル酸の効率的な合成方法が確立されていない。

従って、これらの方法は、何れも経済的な製法とは言い難い。

一方、３）の方法は、安価なアスパラギン酸を原料としているが、爆発性があり、毒性の高いジアゾメタンを増炭反応に使用しており、工業的生産には適していない。

欧州特許第３７７１３９号公報 欧州特許第４１０２６０号公報 特開２００３−８１９５０号公報

Chemistry Letters, 1989, 2219-2222 Synthesis, 1992, 1145-1150

本願は、上記に鑑み、危険な試剤を使用することなく、且つ、経済的に有利な、工業的生産に適した、高品質の光学活性チアゾリルアラニン誘導体およびその塩の製造法を提供することを目的とする。

上記課題を解決するために、本発明者らが鋭意検討した結果、優先晶析を利用することにより、所望の立体配置を有する光学活性チアゾリルアラニン誘導体を光学分割できることが分かった。特に、光学活性チアゾリルアラニン誘導体を光学分割剤とのジアステレオマー塩として、所望の立体配置を有する光学活性チアゾリルアラニン誘導体の塩を晶析することにより、効率的に光学分割できることが分かった。また、晶析による光学分割時に、所望のものとは逆の立体配置を有する異性体の異性化を進行させることで、所望の立体配置を有するチアゾリルアラニン誘導体に変換できることを見出した。更に、当該光学活性チアゾリルアラニン誘導体の効率的な単離方法をも確立し、本発明を完成するに至った。

即ち、本願の第１の発明は、下記式（３）：

（式中、Ｒ^４は、水酸基、置換されていても良いアルコキシ基、又は置換されていても良いアミノ基を表す。Ｒ^５及びＲ^６は、それぞれ独立して、水素原子、又は置換されていても良い１価の有機基を表すか、或いは、互いに一緒になって、置換されていても良い２価の有機基を表す。）で表されるチアゾリルアラニン誘導体を塩に変換して、所望の立体配置を有する下記式（２）：

（式中、＊は光学活性点を表す。Ｒ^４、Ｒ^５及びＲ^６は前記に同じ。）で表される光学活性チアゾリルアラニン誘導体の塩を晶析する、光学活性チアゾリルアラニン誘導体の塩の製造方法に関する。

また、上記光学活性チアゾリルアラニン誘導体の塩を解塩する、下記式（１）：

（式中、＊は光学活性点を表す。Ｒ^１は水酸基、置換されていても良いアルコキシ基、又は置換されていても良いアミノ基を表す。Ｒ^２及びＲ^３は、それぞれ独立して、水素原子もしくは置換されていても良い１価の有機基を表すか、または、互いに一緒になって、置換されていても良い２価の有機基を表す。）で表される光学活性チアゾリルアラニン誘導体の製造方法にも関する。

また、本願の第２の発明は、酸又は塩基を含む前記式（１）で表される光学活性チアゾリルアラニン誘導体の水溶液と、塩基又は酸とを混合することにより、前記水溶液中の酸又は塩基を中和して水に可溶な塩に変換しつつ、当該溶液から光学活性チアゾリルアラニン誘導体（１）を析出させる、光学活性チアゾリルアラニン誘導体（１）の晶析法に関する。

本発明にかかる方法によれば、簡便かつ効率的に、高品質の光学活性チアゾリルアラニン誘導体（１）を工業的に有利に製造することができる。光学活性チアゾリルアラニン誘導体（１）の光学純度は、９５％ｅｅ以上、好ましくは９７％ｅｅ以上、より好ましくは９８％ｅｅ以上、更に好ましくは９９％ｅｅ以上が期待できる。

実施例２の表題化合物の^１Ｈ−ＮＭＲスペクトル 実施例６の表題化合物^１Ｈ−ＮＭＲスペクトル 実施例７の表題化合物^１Ｈ−ＮＭＲスペクトル 実施例９の表題化合物^１Ｈ−ＮＭＲスペクトル 実施例１１の表題化合物^１Ｈ−ＮＭＲスペクトル

以下に、本願発明について詳述する。

まず、本願の第１の発明について説明する。第１の発明は、大きく分けて以下の２工程からなる。

第１工程
下記式（３）：

で表されるチアゾリルアラニン誘導体を塩に変換し、所望の立体配置を有する下記式（２）：

で表される光学活性チアゾリルアラニン誘導体の塩を晶析する工程。

第２工程
上記光学活性チアゾリルアラニン誘導体（２）との塩を解塩し、下記式（１）：

で表される光学活性チアゾリルアラニン誘導体に変換する工程。

ここで、＊は光学活性点を表す。

Ｒ^１及びＲ^４は、それぞれ、水酸基、置換されていても良いアルコキシ基、又は置換されていても良いアミノ基を表す。

Ｒ^１及びＲ^４における置換されていても良いアルコキシ基としては、カルボニル基と結合してエステル化合物を形成するものであれば特に限定されず、例えば、メトキシ基、エトキシ基。ｎ−プロポキシ基、イソプロポキシ基、ｎ−ブトキシ基、ｔｅｒｔ−ブトキシ基等のアルキルオキシ基、ベンジルオキシ基、メチルベンジルオキシ基、フェニルエトキシ基等のアラルキルオキシ基、フェニルオキシ基、トルイルオキシ基、キシリルオキシ基等のアリールオキシ基、等が挙げられる。

Ｒ^１及びＲ^４における置換されていても良いアミノ基としては、カルボニル基と結合してアミド化合物を形成するものであれば特に限定されず、例えば、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基、ｎ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基等のアルキル基、ベンジル基、メチルベンジル基、フェニルエチル基等のアラルキル基、フェニル基、トルイル基、キシリル基等のアリール基、等の有機基が窒素原子上に結合した、１級又は２級アミノ基が挙げられる。具体的には、メチルアミノ基、エチルアミノ基、ベンジルアミノ基、アニリノ基、ジメチルアミノ基、ピロリジノ基、モルホリノ基、Ｎ−ベンジル−Ｎ−エチルアミノ基、Ｎ−エチルアニリノ基、等が挙げられる。これらの有機基は、更に１または２以上の置換基で置換されていても良い。

Ｒ^１とＲ^４は同一であっても良いし、異なっていても良い。Ｒ^１とＲ^４が異なる場合は、後で詳述するが、光学活性チアゾリルアラニン誘導体（２）と光学分割剤等とのジアステレオマー塩を分別晶析後に、光学分割剤を分離する工程において、常法に従い、Ｒ^４を除去した後にＲ^１を導入しても良いし、Ｒ^４を除去せずにそのままＲ^１へと変換しても良い。

Ｒ^４としては、チアゾリルアラニン誘導体（３）の入手が容易なこと、置換基の除去及び置換が容易で、変換の自由度が高いこと等から、アルコキシ基が好ましく、なかでも、メトキシ基またはエトキシ基が好ましい。

Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^５、及びＲ^６は、それぞれ独立して、水素原子もしくは置換されていても良い１価の有機基を表すか、または、Ｒ^２とＲ^３、Ｒ^５とＲ^６がそれぞれ一緒になって、置換されていても良い２価の有機基を表す。

上記Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^５、及びＲ^６における、置換されていても良い１価の有機基としては特に限定されず、例えば、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基、ｎ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基等のアルキル基、ベンジル基、メチルベンジル基、フェニルエチル基等のアラルキル基、フェニル基、トルイル基、キシリル基等のアリール基、等を挙げることができる。これらの有機基は、更に１または２以上の置換基で置換されていても良い。

また、置換されていても良い２価の有機基としては特に限定されず、例えば、メチリデン基、エチリデン基、イソプロピリデン基、ｓｅｃ−ブチリデン基、ベンジリデン基、ｏ−ヒドロキシベンジリデン基等、炭化水素の同一炭素上の水素原子２個を除いたもの（アルキリデン基）や、テトラメチレン基、ペンタメチレン基等、炭化水素における異なる２個の炭素上の水素原子を１個ずつ除いたもの、等を挙げることができる。これらの有機基は、更に１または２以上の置換基で置換されていても良い。

Ｒ^２とＲ^５は、同一であっても、異なっていてもよい。また、Ｒ^３とＲ^６も、同一であっても、異なっていてもよい。さらに、Ｒ^２とＲ^３、Ｒ^５とＲ^６が一緒になって形成された２価の有機基は、同一であっても良いし、異なっていても良い。

Ｒ^２がＲ^５と異なる場合、およびＲ^３がＲ^６と異なる場合は、後で詳述するが、光学活性チアゾリルアラニン誘導体（２）と光学分割剤等とのジアステレオマー塩を分別晶析後に、光学分割剤等を分離する工程において、常法に従い、Ｒ^５及び／又はＲ^６を除去し、その後Ｒ^２及び／又はＲ^３を導入しても良いし、Ｒ^５及び／又はＲ^６を除去せずにそのままＲ^２及び／又はＲ^３へと変換しても良い。

Ｒ^５及びＲ^６としては、チアゾリルアラニン誘導体（３）の入手が容易なこと、置換基の除去及び置換が容易で、変換の自由度が高いこと等から、通常、水素原子が好ましく用いられる。有機基の場合でも、光学活性チアゾリルアラニン誘導体（２）と光学分割剤とのジアステレオマー塩の分別晶析時に、水素原子である場合とは逆の立体配置のジアステレオマー塩を優先して析出させることもできるため、好適に実施される。各種有機基のなかでも、上記アルキリデン基は、その他の有機基とは異なり、チアゾリルアラニン誘導体の異性化を促進すること、加水分解により容易に除去できること等から、好適に用いられる。なかでも、ベンジリデン基、ｏ−ヒドロキシベンジリデン基等が、特に好適に用いられる。

上記アルキリデン基は、通常、チアゾリルアラニン誘導体に対応するアルデヒド化合物を脱水縮合することにより導入される。この脱水縮合反応は、本工程の反応晶析系中で対応するアルデヒド化合物を反応させても良いし、別途合成しても良い。別途合成する場合は、通常は、対応するチアゾリルアラニン誘導体とアルデヒド化合物を、有機溶媒中で加熱下、副生する水を蒸発除去しながら反応させて、Ｎ−アルキリデン−チアゾリルアラニン誘導体を有機溶媒溶液として取得する。

上記有機溶媒としては特に限定されず、例えば、トルエンや酢酸エチル等の汎用的な有機溶媒を用いることができる。

別途合成した上記Ｎ−アルキリデン−チアゾリルアラニン誘導体は、上記有機溶媒溶液をそのまま、又は、抽出、晶析、蒸留、又は、クロマトグラフィー等の常法により単離、精製して、本工程に供する。

続いて、第１の発明を構成する各工程について説明する。

まず、第１工程について説明する。本工程では、晶析溶媒中で、チアゾリルアラニン誘導体（３）を塩に変換して、所望の光学活性チアゾリルアラニン誘導体（２）の塩を晶析する。

具体的には、チアゾリルアラニン誘導体（３）のラセミ体を塩に変換し、そこに所望の光学活性チアゾリルアラニン誘導体（２）の塩を接種するなどして、所望の光学活性チアゾリルアラニン誘導体（２）の塩を優先的に析出させる。または、チアゾリルアラニン誘導体（３）のラセミ体と光学分割剤とを作用させることにより２種のジアステレオマー塩を形成し、これらの溶解度の差を利用することにより、所望の光学活性チアゾリルアラニン誘導体（２）と光学分割剤とからなるジアステレオマー塩を優先的に析出させる。

以下に、所望の立体配置を有する光学活性チアゾリルアラニン誘導体（２）と光学分割剤との塩の場合を例に挙げて説明する。

本工程で用いる上記光学分割剤としては、ラセミ体チアゾリルアラニン誘導体（３）との間に２種のジアステレオマー塩を形成する光学活性化合物であって、且つ、所定の晶析溶媒に対して、上記２種のジアステレオマー塩間の溶解度差が大きいものであれば、特に制限なく使用することができる。

通常は、チアゾリルアラニン誘導体（３）と塩を形成しやすい、光学活性な酸性化合物が好適に用いられる。上記光学活性な酸性化合物としては特に限定されないが、例えば、安価で入手容易であることから、光学活性の（Ｄ体又はＬ体の）、酒石酸やその誘導体、乳酸、リンゴ酸、マンデル酸、カンファースルホン酸、Ｎ−保護−アミノ酸誘導体、等を挙げることができる。なかでも、光学活性の酒石酸及びＮ−保護−アミノ酸誘導体が好ましく用いられる。光学活性チアゾリルアラニン誘導体（２）と光学分割剤の立体配置の組み合わせは特に制限されない。

なお、光学活性のＮ−保護−アミノ酸誘導体は、一般的には、光学分割剤としては認識されていなかった。本発明者らは、本発明の光学分割剤としてＮ−保護−アミノ酸誘導体を用いたところ、形成された２種のジアステレオマー塩の溶解度差が大きく、分別晶析に適していること、および、解塩後の光学分割剤の除去性も高いことから、光学分割剤として優れた特性を有していることを見出した。

以下に、Ｎ−保護−アミノ酸誘導体型の光学分割剤について説明する。
Ｎ−保護−アミノ酸誘導体型の光学分割剤は、下記一般式（４）：

で表される。

ここで＊は光学活性点を表す。

Ｒ^７はアミノ酸側鎖を表すか、又は、Ｒ^８と一緒になって、２価の有機基を表す。

Ｒ^７としては、例えば、入手が容易な天然又は非天然の一般的なアミノ酸の側鎖が挙げられる。なかでも、２種のジアステレオマー塩の溶解度差が大きく、所望の立体を有するジアステレオマー塩の結晶性が良い、分別晶析に適したアミノ酸側鎖として、嵩高い置換基や水素結合等により立体の制約が高いものが好ましい。具体的には、ベンジル基、フェニル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ｐ−ヒドロキシベンジル基、ｐ−ヒドロキシフェニル基、等が挙げられる。なかでも、ベンジル基、ｐ−ヒドロキシベンジル基、ｐ−ヒドロキシフェニル基が好ましく、アミノ酸が安価で入手が容易であることから、特にベンジル基、ｐ−ヒドロキシフェニル基が好ましい。

また、Ｒ^７がＲ^８と一緒になって形成される２価の有機基である場合、トリメチレン基（プロリン側鎖）、テトラメチレン基等、環状構造となることで立体の制約が高くなる２価の有機基が好ましい。

Ｒ^８は、水素原子又は置換されていても良い１価の有機基を表すか、或いは、Ｒ^７と一緒になって、２価の有機基を表す。置換されていても良い１価の有機基としては、具体的には、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^５、及びＲ^６の場合と同様のものが挙げられる。

Ｒ^９は、アミノ基の保護基を表す。Ｒ^９としては、例えば、プロテクティブ・グループス・イン・オーガニック・シンセシス第２版（PROTECTIVE GROUPS IN ORGANIC SYNTHESIS 2nd Ed.）、ジョン・ウィリー・アンド・サンズ（JOHN WILLY & SONS）出版（１９９１年）に記載されているアミノ基の保護基から選択することができる。

一般に、取り扱いの容易さ、安価である点、基質化合物の合成面の便利さ等の観点から、例えば、メトキシカルボニル基、エトキシカルボニル基、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基、ベンジルオキシカルボニル基等のウレタン型保護基、アセチル基、ベンゾイル基等のアシル型保護基、Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチルカルバモイル基、Ｎ−フェニルカルバモイル基等のカルバモイル型保護基、等が好ましく用いられる。なかでも、ベンジルオキシカルボニル基、アセチル基、Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチルカルバモイル基、Ｎ−フェニルカルバモイル基が好ましい。特に、光学分割剤の安定性や、解塩後の除去の容易さ等から、Ｎ−フェニルカルバモイル基が好ましい。

光学分割剤の使用量としては、上記ジアステレオマー塩を形成して分別晶析するために充分な量であれば、特に制限されない。光学分割剤の種類により異なるため、一律に規定することはできないが、チアゾリルアラニン誘導体（３）１モルに対して、通常、０．５〜５モル、好ましくは０．８〜３モル、更に好ましくは０．９〜２モルである。

なお、本晶析系においては、加熱条件下、溶液中に存在する所望のものとは逆の立体配置を有するチアゾリルアラニン誘導体を異性化させつつ晶析を行うことにより、光学活性チアゾリルアラニン誘導体（２）と光学分割剤とからなるジアステレオマー塩の収量を向上させることもできる。なお、異性化は、チアゾリルアラニン誘導体（３）のＲ^５およびＲ^６がアルキリデン基の場合に行うことができる。

上記異性化は、異性化促進剤を共存させることで、より円滑に進行させることもできる。上記異性化促進剤としては、本発明の本質に悪影響を与えずにチアゾリルアラニン誘導体の異性化を促進する化合物であれば、特に制限なく使用することができる。通常、アルデヒド化合物が好適に用いられる。なかでも、アリールアルデヒドが好ましく、特に、オルト位、又は、パラ位に水酸基を有するアリールアルデヒドが好ましい。入手が容易であること等から、サリチルアルデヒドが好適に用いられる。

異性化促進剤の使用量としては、所望のものとは逆の立体配置を有するチアゾリルアラニン誘導体を異性化して、光学活性チアゾリルアラニン誘導体（２）と光学分割剤とからなるジアステレオマー塩の収量を向上させるために充分な量であれば、特に制限されない。異性化促進剤の種類により異なるため、一律に規定することはできないが、チアゾリルアラニン誘導体（３）１モルに対して、通常０．０１モル以上、好ましくは０．０５モル以上である。使用量の上限としては、チアゾリルアラニン誘導体（３）１モルに対して、通常２モル以下、好ましくは１モル以下、更に好ましくは０．５モル以下である。経済性等の観点から、異性化促進剤の使用量は必要最低限の量とするのが好ましい。

本工程で用いる晶析溶媒としては、本発明の本質に悪影響がないものであれば特に限定されない。上記晶析溶媒の例としては、有機溶媒を単独で用いても良く、２種以上を混合して使用しても良い。尚、有機溶媒は、常温、常圧下で流動性のある液体であればよく、特に限定されない。例えば、ヘキサン、ヘプタン、メチルシクロヘキサン等の脂肪族炭化水素類；トルエン、キシレン等の芳香族炭化水素類；塩化メチレン、クロロホルム等のハロゲン化炭化水素類；テトラヒドロフラン、１，４−ジオキサン、ｔ−ブチルメチルエーテル等のエーテル類；酢酸メチル、酢酸エチル、酢酸イソプロピル等の脂肪酸エステル類；アセトニトリル、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド等の非プロトン性極性溶媒；メタノール、エタノール、イソプロパノール、ｎ−ブタノール等のアルコール類；酢酸、プロピオン酸等の脂肪酸類等を挙げることができる。これらのなかでも、芳香族炭化水素類、脂肪酸エステル類、アルコール類、および脂肪酸類が、特に、アルコール類が好ましく用いられる。

また、晶析溶媒は、悪影響のない範囲で水を含んでいても良いが、含水量が高まるとジアステレオマー塩の溶解度が高まる傾向にあるため、適切な量に調整する必要がある。好ましい含水量は、チアゾリルアラニン誘導体（３）、光学分割剤、および、異性化剤の組み合わせや、上記溶媒中の有機溶媒の種類と比率等により異なるため、一律に規定することはできないが、通常、晶析溶媒中の濃度として１０％以下である。

チアゾリルアラニン誘導体（３）と光学分割剤とを作用させる方法としては、一般的な反応晶析操作を特に制限されずに用いることができる。例えば、チアゾリルアラニン誘導体（３）の溶液に光学分割剤を添加しても良いし、逆に光学分割剤の溶液にチアゾリルアラニン誘導体（３）を添加しても良い。また、チアゾリルアラニン誘導体（３）及び光学分割剤のそれぞれの溶液を、一定の比率で連続的に混合しても良い。更に、上記異性化促進剤を共存させる場合には、チアゾリルアラニン誘導体（３）又は光学分割剤の溶液に異性化促進剤を添加しておいても良いし、後から異性化促進剤を晶析液に添加しても良い。

これらの混合方法については、チアゾリルアラニン誘導体（３）及び光学分割剤と、晶析溶媒との組み合わせに応じて、上記反応晶析操作により得られる晶析スラリーの流動性、並びに、析出するジアステレオマー塩の光学純度を維持できるように、溶解度等の物性も考慮して適切に選択すれば良い。

反応晶析の反応温度としては、反応混合物の沸点以下であれば特に制限されないが、一般に、温度が高いほど反応、特に、異性化を伴った分別晶析の場合の異性化は速やかに進行する。通常、３０℃以上であり、好ましくは、４０℃以上であり、より好ましくは５０℃以上であり、とりわけ、６０℃以上が特に好ましい。

反応晶析の反応時間としては、チアゾリルアラニン誘導体（３）、光学分割剤、及び、異性化剤の種類や使用量に依存するため、一律に規定することはできないが、通常、１０〜１００時間程度で、所望のものとは逆の立体配置を有するチアゾリルアラニン誘導体の異性化を充分進行させて、所望のジアステレオマー塩の収量を最大化することができる。

反応晶析の反応濃度としては、反応混合物の流動性が確保できる範囲であれば特に制限されないが、一般に、濃度が高いほど晶析回収率が向上するため好ましい。特に、異性化剤を共存させて、不要なジアステレオマー塩の異性化を行う場合には、晶析母液中の不要なジアステレオマー塩を異性化（チアゾリルアラニン誘導体をラセミ化）して、所望のジアステレオマー塩の収量を向上させることができる。そのため、濃度を上げるほど、晶析母液中へのチアゾリルアラニン誘導体のロスを抑えて、晶析回収率だけでなく光学収率も向上させることができる。反応濃度は、通常、２〜５０重量％であり、好ましくは、５〜４０重量％であり、とりわけ、１０〜３０重量％が特に好ましい。

このようにして得られた晶析スラリーは、更に、必要に応じて、一般的な晶析操作を適用することもできる。具体的には、晶析スラリーの流動性や析出したジアステレオマー塩の品質を整えるために撹拌下熟成しても良いし、冷却、濃縮、貧溶媒の添加等により溶解度を下げて、ジアステレオマーの収量を向上させることもできる。

析出した光学活性チアゾリルアラニン誘導体（２）と光学分割剤とからなるジアステレオマー塩は、ろ過、遠心分離等の一般的な固液分離操作を用いて分離することができる。分離した光学活性チアゾリルアラニン誘導体（２）と光学分割剤とからなるジアステレオマー塩の湿潤固体は、更に、適当な溶媒で洗浄した後、そのまま、或いは、常圧下又は減圧下で乾燥した後に、次工程に供する。

次に、第２工程について説明する。

本工程では、光学活性チアゾリルアラニン誘導体（２）の塩に、酸又は塩基を添加して解塩し、光学活性チアゾリルアラニン誘導体（１）を単離する。上記塩が光学活性チアゾリルアラニン誘導体（２）と光学分割剤とからなるジアステレオマー塩である場合には、酸又は塩基を添加して解塩し、光学活性チアゾリルアラニン誘導体と光学分割剤とを分離する。以下に、光学分割剤が酸性化合物の場合を例に挙げて説明する。

ジアステレオマー塩の解塩のために用いる酸としては、上記光学分割剤と置き換わって光学活性チアゾリルアラニン誘導体（２）と塩を形成（塩交換）するものであれば特に制限されない。通常、上記光学分割剤よりも酸性度の高い酸性化合物であれば、容易に塩交換が進行するため、好適に用いられる。

また、ジアステレオマー塩の解塩のために用いる塩基としては、上記光学活性チアゾリルアラニン誘導体（２）と置き換わって光学分割剤と塩を形成するものであれば特に制限されない。通常、上記光学活性チアゾリルアラニン誘導体（２）よりも塩基性度の高い塩基性化合物であれば、容易に塩交換が進行するため、好適に用いられる。

上記解塩の反応溶媒としては、本発明の本質に悪影響がないものであれば特に限定されない。通常は、水を溶媒として実施されるが、悪影響のない範囲で有機溶媒を含んでいても良い。

上記有機溶媒としては、解塩生成物である光学活性チアゾリルアラニン誘導体と光学分割剤とを分配するために、解塩反応溶液（水性媒体）と混和しない有機溶媒を用いるのが好ましい。このような有機溶媒としては、例えば、ヘキサン、ヘプタン、メチルシクロヘキサン等の脂肪族炭化水素類；トルエン、キシレン等の芳香族炭化水素類；塩化メチレン、クロロホルム等のハロゲン化炭化水素類；テトラヒドロフラン、１，４−ジオキサン、ｔ−ブチルメチルエーテル等のエーテル類；酢酸メチル、酢酸エチル、酢酸イソプロピル等の脂肪酸エステル類等を挙げることができる。これらのなかでも、芳香族炭化水素類、エーテル類、および脂肪酸エステル類が好ましく用いられる。

反応溶媒の量としては、反応混合物の流動性が確保できる範囲であれば特に制限されないが、水と親和性の高い光学活性チアゾリルアラニン誘導体（１）を単離するためには、水の量は必要最小限とするのが好ましい。水の量は、通常、光学活性チアゾリルアラニン誘導体（２）と光学分割剤とのジアステレオマー塩１重量部に対して１０重量部以下であり、好ましくは５重量部以下であり、とりわけ３重量部以下が特に好ましい。

一方、有機溶媒の量は、反応混合物の流動性が確保できる範囲であれば特に制限されないが、経済性の観点から必要最低限に押さえるのが好ましい。有機溶媒の量は、通常、光学活性チアゾリルアラニン誘導体（２）と光学分割剤とのジアステレオマー塩１重量部に対して１０重量部以下であり、好ましくは５重量部以下であり、とりわけ３重量部以下が特に好ましい。上記有機溶媒は、解塩反応の開始前から添加していても良いが、解塩反応、及び、後述する加水分解による光学活性チアゾリルアラニン誘導体の置換基の変換（修飾）が終了した後で、光学活性チアゾリルアラニン誘導体と光学分割剤を分別するために添加しても良い。

上記解塩反応の温度としては、反応混合物の沸点以下とする。解塩と共に光学活性チアゾリルアラニン誘導体の置換基の変換を行う場合は、一般に、温度が高いほど反応は速やかに進行する。しかし、一方で、反応溶液をそのまま後工程に用いる等により、アルキリデン基の導入のために用いられたアルデヒドが光学活性チアゾリルアラニン誘導体（２）に残存している場合は、解塩時にラセミ化が伴うため、８０℃以下で解塩反応を行うのが好ましい。より好ましくは、７０℃以下であり、更に好ましくは６０℃以下であり、５０℃以下が特に好ましい。

塩交換により形成された、光学活性チアゾリルアラニン誘導体の塩と光学分割剤、又は、光学分割剤の塩と光学活性チアゾリルアラニン誘導体は、水に対する親和性の違いを利用し、有機溶媒相と水相とに分配させる等して、両者を分別することができる。

例えば、塩酸などのハロゲン化水素酸や硫酸等の鉱酸を用いた場合には、光学分割剤を遊離の酸として有機溶媒相に分配して、光学活性チアゾリルアラニン誘導体の鉱酸塩と分別することができる。また、水酸化リチウム、水酸化ナトリウム等のアルカリ金属水酸化物等の強アルカリを用いた場合には、光学活性チアゾリルアラニン誘導体を遊離のアミンとして有機溶媒相に分配して、光学分割剤のアルカリ金属塩と分別することができる。

従って、反応溶媒として水のみを用いた場合は、反応後に有機溶媒を添加するとよい。

なお、光学活性チアゾリルアラニン誘導体が有機相に抽出された場合は、光学分割剤の塩を含む水相を分別した後、有機相に、水を加え、必要に応じてｐＨを酸性に調整することにより、光学活性チアゾリルアラニン誘導体の水溶液を得ることができる。

上記解塩反応において、光学活性チアゾリルアラニン誘導体（２）は、加水分解等により、置換基の修飾を受けることがある。例えば、光学活性チアゾリルアラニン誘導体（２）がエステル化合物（即ち、前記式（２）におけるＲ^４が置換されていても良いアルコキシ基）である場合は、酸又は塩基の添加により加水分解されて、遊離のアミノ酸に変換される。従って、所望の光学活性チアゾリルアラニン誘導体（１）が遊離のアミノ酸（即ち、前記式（１）におけるＲ^１が水酸基）の場合には、解塩処理により、光学分割剤の分離と光学活性チアゾリルアラニン誘導体の置換基の変換（修飾）を同時に行うことができる。

更には、解塩反応後に、得られた光学活性チアゾリルアラニンの置換基の変換（修飾）を積極的に行ってもよい。例えば、光学分割剤の種類によっては、第２工程の上記ジアステレオマー塩の解塩反応により生じた光学活性チアゾリルアラニン誘導体又はその塩との分別が困難な場合があるが、本願発明者らは、このような場合に、解塩反応により生じた光学活性チアゾリルアラニン誘導体の置換基を変換（修飾）することで、容易に光学分割剤と分離できることを見出した。例えば、解塩反応により生じた光学活性チアゾリルアラニン誘導体のアミノ基をウレタン型保護基で一旦保護して、下記式（５）：

で表される光学活性のＮ−保護−光学活性チアゾリルアラニン誘導体に変換することにより、光学分割剤を効率良く分離できること、並びに、光学分割剤を分離した後に脱保護することにより、容易に光学活性チアゾリルアラニン誘導体（１）に変換できることを見出した。以下に例を挙げて説明する。

ここで、＊は光学活性点を表す。

Ｒ^１０は、水酸基、置換されていても良いアルコキシ基、又は置換されていても良いアミノ基を表す。

Ｒ^１０における置換されていても良いアルコキシ基としては、カルボニル基と結合してエステル化合物を形成するものであれば特に限定されないが、例えば、メトキシ基、エトキシ基。ｎ−プロポキシ基、イソプロポキシ基、ｎ−ブトキシ基、ｔｅｒｔ−ブトキシ基等のアルキルオキシ基、ベンジルオキシ基、メチルベンジルオキシ基、フェニルエトキシ基等のアラルキルオキシ基、フェニルオキシ基、トルイルオキシ基、キシリルオキシ基等のアリールキルオキシ基、等が挙げられる。

Ｒ^１０における置換されていても良いアミノ基としては、カルボニル基と結合してアミド化合物を形成するものであれば特に限定されないが、例えば、メチル基、エチル基。ｎ−プロピル基、イソプロピル基、ｎ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基等のアルキル基、ベンジル基、メチルベンジル基、フェニルエチル基等のアラルキル基、フェニル基、トルイル基、キシリル基等のアリール基、等の有機基が窒素原子上に結合した、１級又は２級アミノ基が挙げられる。具体的には、メチルアミノ基、エチルアミノ基、ベンジルアミノ基、アニリノ基、ジメチルアミノ基、ピロリジノ基、モルホリノ基、Ｎ−ベンジル−Ｎ−エチルアミノ基、Ｎ−エチルアニリノ基、等が挙げられる。これらの有機基は、更に１または２以上の置換基で置換されていても良い。

Ｒ^１０は、Ｒ^１およびＲ^４と同一であっても良いし、異なっていても良い。Ｒ^１０がＲ^４と異なる場合は、チアゾリルアラニン誘導体のアミノ基にウレタン型保護基を導入する工程において、常法に従い、Ｒ^４を除去した後にＲ^１０を導入しても良いし、Ｒ^４を除去せずに、そのままＲ^１０へと変換しても良い。同様に、Ｒ^１０がＲ^１と異なる場合は、Ｎ−保護−光学活性チアゾリルアラニン誘導体（４）のアミノ基のウレタン型保護基を脱保護する工程において、常法に従い、Ｒ^１０を除去した後にＲ^１を導入しても良いし、Ｒ^１０を直接Ｒ^１へと変換しても良い。

Ｒ¹¹は、アミノ基のウレタン型保護基を表す。Ｒ¹¹における、アミノ基のウレタン型保護基としては、特に限定されず、例えば、プロテクティブ・グループス・イン・オーガニック・シンセシス第２版（PROTECTIVE GROUPS IN ORGANIC SYNTHESIS 2nd Ed.）、ジョン・ウィリー・アンド・サンズ（JOHN WILLY & SONS）出版（１９９１年）に記載されている保護基から選択することができる。一般に、取り扱いの容易さ、安価である点、基質化合物の合成面の便利さ等の観点から、例えば、炭素数１〜４の低級アルコキシカルボニル基、又は、置換されていても良い炭素数７〜１０のアラルキルオキシカルボニル基が好ましく用いられるが、なかでも、メトキシカルボニル基、エトキシカルボニル基、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基、ベンジルオキシカルボニル基等が好ましい。特に、脱保護の容易さから、ｔ−ブトキシカルボニル基が好ましい。

上記アミノ基のウレタン型保護基の導入及び脱保護の方法は、特に限定されず、例えば、プロテクティブ・グループス・イン・オーガニック・シンセシス第２版（PROTECTIVE GROUPS IN ORGANIC SYNTHESIS 2nd Ed.）、ジョン・ウィリー・アンド・サンズ（JOHN WILLY & SONS）出版（１９９１年）に記載されている方法を用いることができる。例えば、上記アミノ基のウレタン型保護基の導入方法としては、特に限定されないが、一般的には、アミノ基保護剤として、例えば、クロロギ酸メチル、クロロギ酸エチル、クロロギ酸ベンジル等のクロロギ酸エステル類を用いて処理することにより、それぞれ、メトキシカルボニル基、エトキシカルボニル基、ベンジルオキシカルボニル基を導入する方法、若しくは、アミノ基保護剤として、例えば、ジｔｅｒｔ−ブチルジカーボネート等のジカーボネート類を用いて処理することによりｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基を導入する方法等を挙げることができる。

以上のようにしてウレタン型保護基を導入したＮ−保護−光学活性チアゾリルアラニン誘導体（５）は、抽出や晶析等、光学分割剤との溶解度差を利用する処理を施すことにより、容易に光学分割剤と分離することが可能である。光学分割剤と分離したＮ−保護−光学活性チアゾリルアラニン誘導体（５）は、更に抽出、晶析、蒸留、或いは、クロマトグラフィー等の常法により単離、精製しても良いが、工業的生産における作業上、及び／又は、経済上の観点から、上記常法による単離、精製をすることなく、そのまま次の脱保護反応に用いても良い。

Ｎ−保護−光学活性チアゾリルアラニン誘導体（５）におけるアミノ基のウレタン型保護基の脱保護方法としては、保護基の種類により好適な方法は異なるが、例えば、酸処理、塩基処理（アルカリ処理）、接触還元等を挙げることができる。これにより、光学活性チアゾリルアラニン誘導体（１）を得ることができる。

尚、本発明で用いる上記チアゾリルアラニン誘導体（３）としては、従来の技術として例示したものを含めて、種々の方法により製造することができるが、本発明の目的からは、このなかでも、工業的生産に適した方法を用いることが好ましい。

例えば、比較的安価に入手可能な下記式（６）：

で表される４−ハロゲノメチルチアゾール又はその塩を、同じく比較的安価に入手可能な下記式（７）：

で表されるＮ−保護−アミノマロン酸エステルと反応させることにより、下記式（８）：

で表されるＮ−保護−アミノ−チアゾリルメチルマロン酸エステルに変換し、次いで、加水分解により脱保護、及び、脱炭酸した後にエステル化することにより、容易にチアゾリルアラニンエステルに変換することができる。

ここで、Ｘは、塩素、臭素等のハロゲン原子を表す。

Ｒ^１２は、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基、ｎ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基等のアルキル基、ベンジル基、メチルベンジル基、フェニルエチル基等のアラルキル基を表す。Ｒ^１２としては、Ｎ−保護−アミノマロン酸エステルの入手容易性、除去及び置換が容易で変換の自由度が高いこと等から、アルキル基が好ましく、なかでも、メチル基またはエチル基が好ましい。

Ｒ^１３は、アミノ基の保護基を表す。Ｒ^１３としては、例えば、プロテクティブ・グループス・イン・オーガニック・シンセシス第２版（PROTECTIVE GROUPS IN ORGANIC SYNTHESIS 2nd Ed.）、ジョン・ウィリー・アンド・サンズ（JOHN WILLY & SONS）出版（１９９１年）に記載されているアミノ基の保護基から選択することができるが、Ｎ−保護−アミノマロン酸エステルの入手が容易なこと、脱保護が容易であること等から、アシル型又はウレタン型保護基が好ましく、なかでも、アセチル基等のアシル型保護基が好ましい。

次に、本願の第２の発明について説明する。

第２の発明では、酸または塩基を含む、前記式（１）で表される光学活性チアゾリルアラニン誘導体の水溶液と、塩基又は酸とを混合することにより、水溶液中の酸又は塩基を中和して水に可溶な塩に変換しつつ、光学活性チアゾリルアラニン誘導体（１）を当該溶液から析出させる。この様に簡便な操作により、以前の工程で使用した試剤や副生した不純物を除去すると共に、光学活性チアゾリルアラニン（１）を結晶として取得することができる。

第２の発明に用いる上記光学活性チアゾリルアラニン誘導体（１）としては、前記第１の発明の製法や、その他各種製法により調製された光学活性チアゾリルアラニン誘導体（１）を特に限定されることなく用いることができる。

上記光学活性チアゾリルアラニン誘導体（１）の水溶液は、例えば、第１の発明の第２工程で得られた解塩反応により得られた水溶液をそのまま用いても良い。また、ウレタン保護基を導入して光学分割剤との分離処理を行った場合は、脱保護反応後の水溶液をそのまま用いてもよい。なお、上記光学活性チアゾリルアラニン誘導体（１）の水溶液は、悪影響のない範囲で有機溶媒を含んでいても良い。

また、不純物の除去や脱色を目的として、必要に応じて、活性炭、活性白土、合成吸着剤等で処理することにより、着色成分や臭気成分などの不純物類を吸着除去しても良い。その他にも、不溶性の不純物を濾過により除去しても良いし、水と相溶性のない有機溶媒により当該水溶液を洗浄しても良い。これらのなかでも、着色成分の除去には、活性炭処理が特に効果的であり、好適に用いられる。

中和に用いる酸としては、特に制限されず、例えば、塩酸等のハロゲン化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸等の無機酸類、メタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸等のスルホン酸類、トリフルオロ酢酸、安息香酸等のカルボン酸類、等が挙げられる。なかでも、塩基との中和により生じる塩の溶解性が高いことから、塩酸等のハロゲン化水素酸、メタンスルホン酸等のスルホン酸類、又は、トリフルオロ酢酸等のカルボン酸類が特に好適に用いられる。

中和に用いる塩基としては、特に制限されず、例えば、水酸化リチウム、炭酸リチウム等の塩基性リチウム化合物、水酸化ナトリウム、炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム等の塩基性ナトリウム化合物、水酸化カリウム、炭酸カリウム、炭酸水素カリウム等の塩基性カリウム化合物等の塩基性アルカリ金属化合物、トリエチルアミン、アニリン、ピリジン等のアミン類、アンモニア等を挙げることができる。なかでも、酸との中和により生じる塩の溶解性が高いことから、水酸化リチウム、炭酸リチウム等の塩基性リチウム化合物、又は、トリエチルアミン等のアミン類が特に好適に用いられる。

次に、酸または塩基を含む光学活性チアゾリルアラニン誘導体（１）の水溶液と、塩基又は酸とを混合することにより、水溶液中の酸又は塩基を、上記水に可溶な塩に変換しつつ、光学活性チアゾリルアラニン誘導体（１）を当該溶液から析出させる方法について述べる。

塩基又は酸による中和処理を行う際に、例えば、水量が少なく水溶液の流動性が悪い場合には、上記中和処理を行う前に、上記溶液を流動化するのに必要な水量となるまで水を添加する。

上記中和処理は、水性溶液を弱酸性〜中性の範囲、具体的には、上記光学活性チアゾリルアラニン誘導体（１）の等電点付近に調整するのが好ましい。光学活性チアゾリルアラニン誘導体（１）の種類により一律に規定することは出来ないが、通常、ｐＨ４〜７付近に調整するのが好ましい。

上記中和処理において、酸又は塩基の添加は、一般に、時間をかけた方が、晶析スラリーの流動性や分離性、並びに、精製効果が向上する傾向にあるので、生産性の観点から支障のない範囲で、出来るだけ長時間かけて添加するのが好ましい。

なお、上記光学活性チアゾリルアラニン誘導体（１）は、塩基性水溶液ではチアゾール環の分解やα−アミノ基の酸化が起こりやすく不安定である。このため、酸性水溶液で取り扱うのがより好ましい。従って、上記光学活性チアゾリルアラニン誘導体（１）を中和晶析する場合には、酸性水溶液を塩基で中和するのが好適である。

しかし、本発明者らの検討により、水溶液の液性が強酸性の場合は比較的安定であるのに対して、酸性〜弱酸性の場合は着色が見られる等、比較的不安定であることが分かった。このことは、上記光学活性チアゾリルアラニン誘導体（１）の強酸性水溶液を塩基で中和して晶析する際、特に操作時間が長くなる実機生産においては問題になる可能性がある。

本発明者らがこの点について検討した結果、酸性〜弱酸性領域での安定性が温度に依存することを見出した。従って、上記光学活性チアゾリルアラニン誘導体（１）の水溶液が不安定な酸性〜弱酸性領域で操作することとなる場合、上記光学活性チアゾリルアラニン誘導体（１）の強酸性水溶液を塩基で中和する操作を、低温に維持するのが好ましい。

上記塩基での中和の際の温度は、特に結晶が析出する前は、通常２５℃以下、好ましくは２０℃以下、より好ましくは１０℃以下に維持する。なかでもｐＨ１〜４、特に結晶が析出する前のｐＨ１〜２の領域を１０℃以下の低温に維持するのが好ましい。

また、光学活性チアゾリルアラニン誘導体（１）の溶解性が低い水溶性の有機溶媒、なかでも、水と相溶性の高い有機溶媒を共存させることにより、水との親和性が高い光学活性チアゾリルアラニン誘導体（１）の溶解量を低下させ、析出量を増大させることが可能である。

上記有機溶媒の好適な例としては、テトラヒドロフラン、１，４−ジオキサン、ｔ−ブチルメチルエーテル等のエーテル類；アセトン、メチルエチルケトン、シクロヘキサノン等のケトン類；メタノール、エタノール、イソプロパノール、ベンジルアルコール等のアルコール類等を挙げることができる。なかでも、水と相溶性の高い有機溶媒が特に好ましい。具体的には、エーテル類としてはテトラヒドロフラン、又は、１，４−ジオキサンが特に好ましく、ケトン類としてはアセトンが特に好ましく、アルコール類としてはメタノール、又は、エタノール、又は、イソプロパノールが特に好ましい。特に、アルコール類が好ましい。

これらの溶媒は、単一で使用しても、２種以上を混合して使用しても良い。上記有機溶媒の使用量としては、一律に規定することはできないが、通常、水１重量部に対して０〜２０重量部、好ましくは０．１〜１０重量部、更に好ましくは０．２〜５重量部である。

有機溶媒の添加順序は得に制限されず、ｐＨを調製した後、有機溶媒を添加しても良いし、予め添加した後、ｐＨを調整しても良い。言うまでもなく、これらの有機溶媒は、前工程で使用した有機溶媒をそのまま溶媒置換することなく使用する場合を含む。

このようにして得られた晶析スラリーは、更に、必要に応じて、冷却等通常の晶析操作において用いられる析出量を増大させるための操作を制限されずに用いることができる。

析出した光学活性チアゾリルアラニン誘導体（１）の分離においては、濾過、遠心分離等の一般的な固液分離操作を用いて分離することが出来る。分離した光学活性チアゾリルアラニン誘導体（１）の湿潤固体は、更に、上記水と相溶性のある有機溶媒、又は、上記水と相溶性のある有機溶媒と水との混合溶媒等を用いて洗浄した後、常圧下、又は、減圧下で水等の溶媒を除去することができる。

以上のように、第２の本発明によれば、簡便な操作により、以前の工程で使用した試剤や副生した不純物を除去することができる。特に、活性炭等の吸着剤処理により着色成分を除去すると共に、中和晶析中の分解による着色を中和時の温度管理により抑制して、着色のない高純度の光学活性チアゾリルアラニン（１）を結晶として取得することができる。

以下に例を挙げて本発明を更に詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。

尚、３−（４−チアゾリル）アラニンおよびその誘導体の光学純度は、ＨＰＬＣ［カラム：ＣＲＯＷＮＰＡＫ ＣＲ（＋） ４ｍｍＩ．Ｄ．×１５０ｍｍ 粒径５μｍ（ダイセル社製）、移動相：過塩素酸水溶液（ｐＨ１．５）、流速：０．５ｍｌ／ｍｉｎ、検出波長：２５４ｎｍ、カラム温度：２０℃］にて測定した。

（実施例１） ３−（４−チアゾリル）−Ｌ−アラニンエチルエステル・Ｌ−酒石酸塩の合成
３−（４−チアゾリル）−Ｄ，Ｌ−アラニンエチルエステル２．００ｇを含有する酢酸エチル溶液２０．０ｇに光学分割剤としてＬ−酒石酸１．５７ｇを加え、サリチルアルデヒド０．１２ｇを添加して、窒素雰囲気下、６０℃で１２時間撹拌した。この溶液を０℃まで冷却し、ヘキサン２０ｍｌを１時間かけて滴下した後に同温度で１時間熟成し、結晶をろ過した。ヘキサン１０ｍｌで洗浄し、減圧乾燥して、３−（４−チアゾリル）−Ｌ−アラニンエチルエステル・Ｌ−酒石酸塩の結晶２．９８ｇを得た。光学純度は８３％ｅｅであった。

（実施例２） ３−（４−チアゾリル）−Ｌ−アラニンエチルエステル・Ｎ−アセチル−Ｄ−ｐ−ヒドロキシフェニルグリシン塩の合成
３−（４−チアゾリル）−Ｄ，Ｌ−アラニンエチルエステル２．００ｇを含有する酢酸エチル溶液２０．０ｇに光学分割剤としてＮ−アセチル−Ｄ−ｐ−ヒドロキシフェニルグリシン２．２０ｇを加え、サリチルアルデヒド０．１２ｇを添加して、窒素雰囲気下、６０℃で１２時間撹拌した。この溶液を０℃まで冷却し、同温度で１時間熟成した後に、結晶をろ過した。０℃に冷却した酢酸エチル１０ｍｌで洗浄し、減圧乾燥して、３−（４−チアゾリル）−Ｌ−アラニンエチルエステル・Ｎ−アセチル−Ｄ−ｐ−ヒドロキシフェニルグリシン塩の結晶３．４８ｇを得た。光学純度は９８％ｅｅであった。図１に、本実施例で得られた化合物の¹Ｈ−ＮＭＲ［４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３／ＤＭＳＯ−ｄ_６＝２／１］のスペクトルを示す。

（実施例３） ３−（４−チアゾリル）−Ｌ−アラニンエチルエステル・Ｎ−アセチル−Ｄ−ｐ−ヒドロキシフェニルグリシン塩の合成
３−（４−チアゾリル）−Ｄ，Ｌ−アラニンエチルエステル２．００ｇを含有するエタノール溶液１０．０ｇに光学分割剤としてＮ−アセチル−Ｄ−ｐ−ヒドロキシフェニルグリシン２．２０ｇを加え、サリチルアルデヒド０．１２ｇを添加して、窒素雰囲気下、４０℃で１３時間撹拌した。この溶液を０℃まで冷却し、同温度で１時間熟成した後に、結晶をろ過した。０℃に冷却したエタノール１０ｍｌで洗浄し、減圧乾燥して、３−（４−チアゾリル）−Ｌ−アラニンエチルエステル・Ｎ−アセチル−Ｄ−ｐ−ヒドロキシフェニルグリシン塩の結晶２．７８ｇを得た。光学純度は９８％ｅｅであった。

（実施例４） ３−（４−チアゾリル）−Ｌ−アラニンエチルエステル・Ｎ−フェニルカルバモイル−Ｄ−ｐ−ヒドロキシフェニルグリシン塩の合成
Ｎ−フェニルカルバモイル−Ｄ−ｐ−ヒドロキシフェニルグリシン３．０１ｇを光学分割剤として使用する以外は、実施例３と同様に実施したところ、３−（４−チアゾリル）−Ｌ−アラニンエチルエステル・Ｎ−フェニルカルバモイル−Ｄ−ｐ−ヒドロキシフェニルグリシン塩の結晶３．４６ｇを得た。光学純度は９６％ｅｅであった。

（実施例５） ３−（４−チアゾリル）−Ｌ−アラニンエチルエステル・Ｎ−フェニルカルバモイル−Ｄ−ｐ−ヒドロキシフェニルグリシン塩の合成
３−（４−チアゾリル）−Ｄ，Ｌ−アラニンエチルエステル２．００ｇを含有するアセトニトリル溶液２０．０ｇに光学分割剤としてＮ−フェニルカルバモイル−Ｄ−ｐ−ヒドロキシフェニルグリシン３．０１ｇを加え、サリチルアルデヒド０．１２ｇを添加して、窒素雰囲気下、４０℃で４０時間撹拌した。この溶液を０℃まで冷却し、同温度で１時間熟成した後に、結晶をろ過した。０℃に冷却したアセトニトリル１０ｍｌで洗浄し、減圧乾燥して、３−（４−チアゾリル）−Ｌ−アラニンエチルエステル・Ｎ−フェニルカルバモイル−Ｄ−ｐ−ヒドロキシフェニルグリシン塩の結晶４．１４ｇを得た。光学純度は９７％ｅｅであった。

（実施例６） ３−（４−チアゾリル）−Ｌ−アラニンエチルエステル・Ｎ−フェニルカルバモイル−Ｄ−ｐ−ヒドロキシフェニルグリシン塩の合成
３−（４−チアゾリル）−Ｄ，Ｌ−アラニンエチルエステル２．００ｇを含有する酢酸エチル溶液２０．０ｇに光学分割剤としてＮ−フェニルカルバモイル−Ｄ−ｐ−ヒドロキシフェニルグリシン３．０１ｇを加え、サリチルアルデヒド０．１２ｇを添加して、窒素雰囲気下、６０℃で８０時間撹拌した。この溶液を０℃まで冷却し、同温度で１時間熟成した後に、結晶をろ過した。０℃に冷却した酢酸エチル１０ｍｌで洗浄し、減圧乾燥して、３−（４−チアゾリル）−Ｌ−アラニンエチルエステル・Ｎ−フェニルカルバモイル−Ｄ−ｐ−ヒドロキシフェニルグリシン塩の結晶４．３３ｇを得た。光学純度は９７％ｅｅであった。サリチルアルデヒドは検出されなかった。図２に、本実施例で得られた化合物の¹Ｈ−ＮＭＲ［４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３／ＤＭＳＯ−ｄ_６＝２／１］のスペクトルを示す。

（実施例７） Ｎ−ｏ−ヒドロキシベンジリデン−３−（４−チアゾリル）−Ｄ−アラニンエチルエステル・Ｎ−フェニルカルバモイル−Ｄ−ｐ−ヒドロキシフェニルグリシン塩の合成
実施例３で得られた、３−（４−チアゾリル）−Ｌ−アラニンエチルエステル・Ｎ−アセチル−Ｄ−ｐ−ヒドロキシフェニルグリシン塩の結晶１．０３ｇ（９８％ｅｅ）に、酢酸エチル２０ｍｌ、水５ｍｌおよび濃塩酸０．５０ｇを加えて混合し、分液して水層を得た。更に、酢酸エチル３０ｍｌおよびトリエチルアミン０．５０ｇを加えて混合し、分液して有機層を得た。減圧濃縮後、サリチルアルデヒド０．３０ｇ、酢酸エチル５０ｍｌを添加して、減圧下に濃縮乾固した。これを酢酸エチルに再溶解して１０．０ｇに調整し、光学分割剤としてＮ−フェニルカルバモイル−Ｄ−ｐ−ヒドロキシフェニルグリシン０．７５ｇを加え、更にトルエン１０ｍｌを加えて結晶化させた。この溶液を、２５℃で１時間撹拌、熟成後に結晶をろ過したところ、Ｎ−ｏ−ヒドロキシベンジリデン−３−（４−チアゾリル）−Ｄ−アラニンエチルエステル・Ｎ−フェニルカルバモイル−Ｄ−ｐ−ヒドロキシフェニルグリシン塩の結晶０．６２ｇを黄色固体として得た。光学純度は８６％ｅｅであった。

また、上記晶析母液を５０℃で１４時間撹拌したところ、更に結晶が析出したため、これもろ過したところ、Ｎ−ｏ−ヒドロキシベンジリデン−３−（４−チアゾリル）−Ｄ−アラニンエチルエステル・Ｎ−フェニルカルバモイル−Ｄ−ｐ−ヒドロキシフェニルグリシン塩の結晶０．３３ｇを黄色固体として得た。光学純度は９８％ｅｅであった。図３に、本実施例で得られた化合物の¹Ｈ−ＮＭＲ［４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３／ＤＭＳＯ−ｄ_６＝２／１］のスペクトルを示す。

（実施例８） ３−（４−チアゾリル）−Ｌ−アラニンエチルエステル・Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチルカルバモイル−Ｄ−ｐ−ヒドロキシフェニルグリシン塩の合成
３−（４−チアゾリル）−Ｌ−アラニンエチルエステル２．００ｇを含有するアセトニトリル溶液２０．０ｇに光学分割剤としてＮ−ｔｅｒｔ−ブチルカルバモイル−Ｄ−ｐ−ヒドロキシフェニルグリシン２．８０ｇを加え、サリチルアルデヒド０．１２ｇを添加して、窒素雰囲気下、６０℃で１２時間撹拌した。この溶液を０℃まで冷却し、同温度で１時間熟成した後に、結晶をろ過した。０℃に冷却したアセトニトリル１０ｍｌで洗浄し、減圧乾燥して、３−（４−チアゾリル）−Ｌ−アラニンエチルエステル・Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチルカルバモイル−Ｄ−ｐ−ヒドロキシフェニルグリシン塩の結晶３．８７ｇを得た。光学純度は９８％ｅｅであった。

（実施例９） ３−（４−チアゾリル）−Ｌ−アラニンエチルエステル・Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−Ｄ−ｐ−ヒドロキシフェニルグリシン塩の合成
３−（４−チアゾリル）−Ｄ，Ｌ−アラニンエチルエステル２．００ｇを含有する酢酸エチル溶液２０．０ｇに光学分割剤としてＮ−ベンジルオキシカルボニル−Ｄ−ｐ−ヒドロキシフェニルグリシン３．１６ｇを加え、サリチルアルデヒド０．１２ｇを添加して、窒素雰囲気下、６０℃で１２時間撹拌した。この溶液を０℃まで冷却し、同温度で１時間熟成した後に、結晶をろ過した。０℃に冷却した酢酸エチル１０ｍｌで洗浄し、減圧乾燥して、３−（４−チアゾリル）−Ｌ−アラニンエチルエステル・Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−Ｄ−ｐ−ヒドロキシフェニルグリシン塩の結晶２．９１ｇを得た。光学純度は９５％ｅｅであった。図４に、本実施例で得られた化合物の¹Ｈ−ＮＭＲ［４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３／ＤＭＳＯ−ｄ_６＝２／１］のスペクトルを示す。

（実施例１０） ３−（４−チアゾリル）−Ｌ−アラニンの合成
実施例６で得られた、３−（４−チアゾリル）−Ｌ−アラニンエチルエステル・Ｎ−フェニルカルバモイル−Ｄ−ｐ−ヒドロキシフェニルグリシン塩の結晶３．８９ｇに、水３．８９ｇおよび濃塩酸２．１ｇを加え、これに酢酸エチル１７ｍｌを添加した。有機層を分液して、得られた水層に、水酸化リチウム・一水和物１．３４ｇを加えて中和し、５０℃で１２時間撹拌した。得られた水溶液を２５〜３０℃に維持して、濃塩酸を添加してｐＨを６に調整した後、４０℃以下で７．９５ｇまで減圧濃縮したところ、結晶が析出した。同温度で１時間かけてエタノール１６ｍｌを滴下した後０℃まで冷却し、同温度で１時間熟成した。析出した結晶をろ過し、０℃に冷却したエタノール５ｍｌで洗浄し、減圧乾燥して、３−（４−チアゾリル）−Ｌ−アラニンの結晶１．０７ｇを白色の固体として得た。Ｎ−フェニルカルバモイル−Ｄ−ｐ−ヒドロキシフェニルグリシン、並びに、３−（４−チアゾリル）−Ｄ−アラニンは検出されなかった（光学純度１００％ｅｅ）。

（実施例１１） ３−（４−チアゾリル）−Ｌ−アラニンエチルエステル・Ｌ−酒石酸塩の合成
Ｌ−酒石酸１５．７ｇ、サリチルアルデヒド１．２ｇ、イソプロパノール８０．０ｇからなる溶液に、窒素雰囲気下、６０℃で撹拌しながら、３−（４−チアゾリル）−Ｄ，Ｌ−アラニンエチルエステル２０．０ｇを含有する酢酸エチル溶液１００．０ｇを１時間かけて滴下したところ、結晶が析出した。続いて、得られた晶析溶液を同温度で１８時間撹拌した。析出した結晶少量をサンプリングして分析した結果、光学純度が９７％ｅｅであった。この溶液を６時間かけて０℃まで冷却し、同温度で１時間熟成した後に、結晶をろ過した。０℃に冷却したイソプロパノール５０ｍｌで洗浄して、３−（４−チアゾリル）−Ｌ−アラニンエチルエステル・Ｌ−酒石酸塩の湿結晶４３．７ｇ（純分３１．５ｇ）を得た。光学純度は９７％ｅｅであった。サリチルアルデヒドは検出されなかった。３−（４−チアゾリル）−Ｌ−アラニンエチルエステル・Ｌ−酒石酸塩の湿結晶４．０１ｇを減圧乾燥して、乾燥晶２．８９ｇを得た。図５に、本実施例で得られた化合物の¹Ｈ−ＮＭＲ［４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３／ＤＭＳＯ−ｄ_６＝２／１］のスペクトルを示す。

（実施例１２） ３−（４−チアゾリル）−Ｌアラニンの合成
実施例１１で得られた３−（４−チアゾリル）−Ｌ−アラニンエチルエステル・Ｌ−酒石酸塩の湿結晶３８．８ｇ（純分２８．０ｇ）に、水４６．２ｇおよび３０％水酸化ナトリウム水溶液３．３１ｇを加え、５０℃で１時間撹拌した。得られた水溶液に、テトラヒドロフラン８．４ｇを添加し、２０±５℃、ｐＨ１０を維持して、ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−ジカーボネート１８．３ｇを１時間かけて滴下し、同条件で更に１０時間撹拌した。反応の進行に伴いｐＨが低下するため、３０％水酸化ナトリウム水溶液にてｐＨを調整した。反応終了後に静置したところ、２層に分液した。下層を抜き取り、これにトルエン５０．４ｇ、水２８．０ｇを加え、１０℃以下を維持しながら、濃塩酸でｐＨ３に調整した。２５℃で分液して水層を除去し、得られた有機層を更に水４２ｇで洗浄して、Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−３−（４−チアゾリル）−Ｌ−アラニン２０．７ｇを含有するトルエン溶液１０６．１ｇを得た。Ｌ−酒石酸は検出されなかった。

続いて、得られたトルエン溶液１０４．７ｇ（純分２０．４ｇ）に、水１５．７ｇを添加して５５℃に温調し、撹拌下、濃塩酸１５．６ｇを３時間かけて滴下し、次いで同温度で１時間反応を継続した。得られた反応液に水１６．３ｇを添加し、分液して淡黄色の水溶液６３．８ｇを得た。これに活性炭（白鷺Ａ２）１．２２ｇを加え、４０℃で１時間撹拌した後にろ過し、水８．２ｇで洗浄して、１２．９ｇの３−（４−チアゾリル）−Ｌ−アラニンを含有する、無色の水溶液７１．９ｇを得た。

この水溶液６４．７ｇ（純分１１．６ｇ）に、３０℃以下を維持してトリエチルアミン１．３６ｇを２時間かけて滴下してｐＨ６．１に調整したところ、結晶が析出した。次いで、同温度でイソプロパノール１４０ｇを１時間かけて滴下し、２５℃で１時間熟成した。更に、この溶液を２時間かけて０℃まで冷却し、同温度で１時間熟成した後に、析出した結晶をろ過し、イソプロパノール／水＝９／１（重量比）の混合溶媒２５ｇで洗浄し、減圧乾燥して、３−（４−チアゾリル）−Ｌ−アラニンの結晶１０．８ｇを白色の固体として得た。３−（４−チアゾリル）−Ｄ−アラニンは検出されなかった（光学純度１００％ｅｅ）。

（比較例１）
実施例１０と同様の方法にて得られた、１３．０ｇの３−（４−チアゾリル）−Ｌ−アラニンを含有する無色の水溶液７３．８ｇに、５０℃下でトリエチルアミン１．５５ｇを２時間かけて滴下してｐＨ６．１に調整したところ、反応液が黄褐色に着色した。次いで、２５℃でイソプロパノール１６０ｇを１時間かけて滴下し、２５℃で１時間熟成した。更に、この溶液を２時間かけて０℃まで冷却し、同温度で１時間熟成した後に、析出した結晶をろ過し、イソプロパノール／水＝９／１（重量比）の混合溶媒２５ｇで洗浄し、減圧乾燥して、３−（４−チアゾリル）−Ｌ−アラニンの結晶１１．９ｇを得た。３−（４−チアゾリル）−Ｄ−アラニンは検出されなかった（光学純度１００％ｅｅ）が、結晶が褐色に着色していた。

（実施例１３） ３−（４−チアゾリル）−Ｌアラニンの再精製
比較例１で得られた３−（４−チアゾリル）−Ｌ−アラニンの結晶８．６１ｇに、水２４．０ｇおよび濃塩酸１０．２９ｇを加えて、淡褐色の水溶液を得た。これに活性炭（白鷺Ａ２）０．８１ｇを加え、４０℃で１時間撹拌した後にろ過し、水５．５ｇで洗浄して、無色の水溶液４７．９ｇを得た。

この水溶液に、３０℃以下を維持してトリエチルアミン０．９１ｇを２時間かけて滴下してｐＨ６．０に調整したところ、結晶が析出した。次いで、同温度でイソプロパノール９３ｇを１時間かけて滴下し、２５℃で１時間熟成した。更に、この溶液を２時間かけて０℃まで冷却し、同温度で１時間熟成した後に、析出した結晶をろ過し、イソプロパノール／水＝９／１（重量比）の混合溶媒１７ｇで洗浄し、減圧乾燥して、３−（４−チアゾリル）−Ｌ−アラニンの結晶７．５６ｇを白色の固体として得た。

（実施例１４） Ｎ−フェニルカルバモイル−Ｄ−ｐ−ヒドロキシフェニルグリシンの合成
Ｄ−ｐ−ヒドロキシフェニルグリシン１００ｇに、水３００ｇ、３０％水酸化ナトリウム水溶液１５８．６ｇを加え、５℃で撹拌して透明な溶液を得た（ｐＨ１２．１）。この溶液に、５〜１０℃を維持しながら、フェニルイソシアネート７１．２ｇを２時間かけて滴下し、同温度で２時間反応を継続した。得られた反応液に濃塩酸１１８．９ｇを加えてｐＨ２．５に調整し、酢酸エチル５００ｍｌで抽出した。得られた有機層を、水１００ｍｌで洗浄した後に、４０℃以下で２７３ｇまで減圧濃縮した後、２５℃でトルエン２００ｍｌを２時間かけて滴下したところ、結晶が析出した。同温度で２時間熟成した後、析出した結晶をろ過し、トルエン１５０ｍｌで２回洗浄し、減圧乾燥して、表題の化合物１１８．６９ｇを褐色の固体として得た。

Claims (20)

1. 下記式（３）：
   （式中、Ｒ^４は、水酸基、置換されていても良いアルコキシ基、又は置換されていても良いアミノ基を表す。Ｒ^５及びＲ^６は、それぞれ独立して、水素原子、又は置換されていても良い１価の有機基を表すか、または、一緒になって、置換されていても良い２価の有機基を表す。）で表されるチアゾリルアラニン誘導体を塩に変換し、所望の立体配置を有する下記式（２）：
   （式中、＊は光学活性点を表す。Ｒ^４、Ｒ^５、及びＲ^６は、上記に同じ。）で表される光学活性チアゾリルアラニン誘導体の塩を晶析することを特徴とする、光学活性チアゾリルアラニン誘導体の塩の製造方法。
2. 光学活性チアゾリルアラニン誘導体（２）を光学分割剤との塩として晶析する、請求項１に記載の製造方法。
3. 光学分割剤が、光学活性な、酒石酸又はＮ−保護−アミノ酸誘導体である、請求項２に記載の製造方法。
4. 晶析の際、溶媒としてアルコール類を用いる、請求項１〜３の何れかに記載の製造方法。
5. 晶析を異性化促進剤共存下に行う、請求項１〜４の何れかに記載の製造方法。
6. 請求項１〜５の何れかに記載の製造方法により得られた光学活性チアゾリルアラニン誘導体（２）の塩を解塩することを特徴とする、下記一般式（１）：
   （式中、＊は光学活性点を表す。Ｒ^１は、水酸基、置換されていても良いアルコキシ基、又は、置換されていても良いアミノ基を表す。Ｒ^２及びＲ^３は、それぞれ独立して、水素原子、又は、置換されていても良い１価の有機基を表すか、或いは、一緒になって、置換されていても良い２価の有機基を表す。）で表される光学活性チアゾリルアラニン誘導体の製造方法。
7. 光学活性チアゾリルアラニン誘導体（１）の水溶液と、塩基又は酸とを混合することにより、水溶液中の酸又は塩基を中和して水に可溶な塩に変換しつつ、当該溶液から光学活性チアゾリルアラニン誘導体（１）を析出させる工程を更に含む請求項６に記載の製造方法。
8. 光学活性チアゾリルアラニン誘導体（１）の水溶液中に存在する酸を、塩基を用いて中和する、請求項７に記載の製造方法。
9. 晶析溶媒としてアルコール類を用いる、請求項７又は８に記載の製造方法。
10. 酸又は塩基を含む下記式（１）：
    （式中、＊は光学活性点を表す。Ｒ^１は、水酸基、置換されていても良いアルコキシ基、又は、置換されていても良いアミノ基を表す。Ｒ^２及びＲ^３は、それぞれ独立して、水素原子、又は、置換されていても良い１価の有機基を表すか、或いは、一緒になって、置換されていても良い２価の有機基を表す。）で表される光学活性チアゾリルアラニン誘導体の水溶液と、塩基又は酸とを混合することにより、前記水溶液中の酸又は塩基を中和して水に可溶な塩に変換しつつ、当該溶液から光学活性チアゾリルアラニン誘導体（１）を析出させることを特徴とする、光学活性チアゾリルアラニン誘導体（１）の晶析法。
11. 中和に用いる酸がハロゲン化水素酸である、請求項１０に記載の晶析法。
12. 光学活性チアゾリルアラニン誘導体（１）の水溶液中に存在する酸を、塩基を用いて中和する、請求項１０に記載の晶析法。
13. 中和に用いる塩基が塩基性リチウム化合物である、請求項１２に記載の晶析法。
14. 中和に用いる塩基がアミン化合物である、請求項１２に記載の晶析法。
15. 中和時の温度を２５℃以下に維持する、請求項１０〜１４の何れかに記載の晶析法。
16. 中和時に、更に、有機溶媒を混合する請求項１〜１５の何れかに記載の晶析法。
17. 前記有機溶媒がアルコール類である、請求項１６に記載の晶析法。
18. 下記式（４）：
    （式中、＊は光学活性点を表す。Ｒ^７は、独立してアミノ酸側鎖を表すか、又は、Ｒ^８と一緒になって、２価の有機基を表す。Ｒ^８は、水素原子又は置換されていても良い１価の有機基を表すか、Ｒ^８と一緒になって２価の有機基を表す。Ｒ^９は、アミノ基の保護基を表す。）で表わされる、Ｎ−保護−アミノ酸誘導体型の光学分割剤。
19. 下記式（２）：
    （式中、＊は光学活性点を表す。Ｒ^４は、水酸基、置換されていても良いアルコキシ基、又は、置換されていても良いアミノ基を表す。Ｒ^５及びＲ^６は、それぞれ独立して、水素原子又は置換されていても良い１価の有機基を表すか、互いが一緒になって、置換されていても良い２価の有機基を表す。）で表される、光学活性チアゾリルアラニン誘導体と、下記一般式（４）：
    （式中、＊は光学活性点を表す。Ｒ^７は、独立してアミノ酸側鎖を表すか、又は、Ｒ^８と一緒になって、２価の有機基を表す。Ｒ^８は、水素原子もしくは置換されていても良い１価の有機基を表すか、または、Ｒ^８と一緒になって２価の有機基を表す。Ｒ^９はアミノ基の保護基を表す。）で表わされる、光学活性Ｎ−保護−アミノ酸誘導体との塩。
20. 下記一般式（２）：
    （式中、＊は光学活性点を表す。Ｒ^４は、水酸基、置換されていても良いアルコキシ基、又は、置換されていても良いアミノ基を表す。Ｒ^５及びＲ^６は、それぞれ独立して、水素原子又は置換されていても良い１価の有機基を表すか、互いに一緒になって、置換されていても良い２価の有機基を表す。）で表される、光学活性チアゾリルアラニン誘導体と光学活性酒石酸との塩。