JP2015537210A5

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Info

Publication number: JP2015537210A5
Application number: JP2015541154A
Authority: JP
Filing date: 2013-11-08
Publication date: 2016-12-15
Anticipated expiration: 2033-11-08

Claims

試料から循環腫瘍細胞を捕捉する方法であって、
ｉ）該試料を、哺乳動物のセプラーゼ標的親和性試薬に接触させること；
ｉｉ）該試料を、哺乳動物のＥｐＣＡＭ標的親和性試薬に接触させること；並びに
ｉｉｉ）工程ｉ）およびｉ）で得た細胞を捕捉することにより、該試料から循環腫瘍細胞を捕捉すること；
を含み、
ここで、セプラーゼ標的親和性試薬およびＥｐＣＡＭ標的親和性試薬は、それぞれ固体支持体の表面に固定されている、方法。
セプラーゼ標的親和性試薬は、セプラーゼの競合的または非競合的阻害剤である、請求項１に記載の方法。
セプラーゼ標的親和性試薬は、セプラーゼの抗体、核酸アプタマー、またはペプチドアプタマーまたはペプチドリガンドである、請求項１又は２に記載の方法。
セプラーゼのペプチドリガンドは、Ａｃ−Ｇｌｙ−プロリンボロン酸（Ａｃ−Ｇｌｙ−ＢｏｒｏＰｒｏ）およびプロリンジフェニルホスホネート（Ｇｌｙ−ＰｒｏＰ（ＯＰｈ）_２）から選択される、請求項３に記載の方法。
ＥｐＣＡＭ標的親和性試薬は、抗体である、請求項１に記載の方法。
セプラーゼ標的親和性試薬およびＥｐＣＡＭ標的親和性試薬を、連続的または同時に施す、請求項１に記載の方法。
固体支持体が、マイクロ流体デバイスの一部である、請求項１に記載の方法。
捕捉された循環腫瘍細胞を放出する工程を更に含む、請求項１〜７のいずれか１項に記載の方法。
放出は、過剰量の可溶性セプラーゼ結合剤の添加、アビジン化合物の添加、あるいは二官能性リンカーの光開裂または酵素分解により行われる、請求項８に記載の方法。
前記二官能性リンカーは、酵素的または化学的に切断可能な部位を有する、請求項９に記載の方法。
前記試料は、腫瘍試料または腫瘍を有する患者の血液試料である、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の方法。
捕捉された細胞上でセプラーゼおよびＥｐＣＡＭを検出することを更に含む、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の方法。
ＥｐＣＡＭを発現する細胞に対するセプラーゼを発現する細胞の比率を決定することを更に含む、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の方法。
請求項１に記載の方法で患者試料から循環腫瘍細胞を捕捉することにより、患者における悪性腫瘍の存在を検出する方法。
請求項１に記載の方法で患者試料から循環腫瘍細胞を捕捉することにより、腫瘍を保有しているかまたは保有していた患者において転移性腫瘍を発症するリスクを評価する方法。
前記患者試料は、全血、体液、任意の細胞含有血液画分、腫瘍断片、腫瘍細胞懸濁液、または患者試料から樹立した細胞培養物、もしくは該培養物の上清、または患者の腫瘍から樹立した異種移植片を含む、請求項１４または１５に記載の方法。
捕捉された細胞において、ＥｐＣＡＭ、ＣＤ１４６、ＣＫ５、ＣＫ７、ＣＫ１８、ＣＫ１９、ＣＤ４４、Ｃｄ４４ｖ６、ＥｐｈＢ４、ＩＧＦ−１Ｒ、ＢＣＬ２、ＨＥＲ２、ＨＥＲ３、ＣＡ１９−９、ＣＥＡ、ＣＤ１３３、ＭＵＣ１、Ｎ−カドヘリン、サバイビン、ＥＧＦＲ、ＫＲＡＳ、ＢＲＡＦ、ｐ５３、Ｐｉ３ＫＣＡ、ＰＴＥＮ、ＫＲＴ１９、ＣＤ３４、ＣＤ２４、ＡＣＴ２、ＶＩＭ、ＮＡＮＯＧ、ＣＸＣＲ４およびＴＷＩＳＴ１のうち１つまたは複数のバイオマーカーを検出する工程を更に含む、請求項１または５に記載の方法。