ES2660438T3 - Captura in vitro y análisis de células tumorales circulantes - Google Patents

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Abstract

Un procedimiento de captura de células tumorales circulantes de una muestra, que comprende (i) poner en contacto la muestra con un reactivo de afinidad dirigido a seprasa de mamífero, (ii) poner en contacto la muestra con un reactivo de afinidad dirigido a EpCAM de mamífero, y (iii) capturar las células retenidas en las etapas (i) y (ii), capturando así las células tumorales circulantes de la muestra, en el que el reactivo de afinidad dirigido a seprasa y el reactivo de afinidad dirigido a EpCAM se inmovilizan cada uno sobre una superficie de un soporte sólido.

Description

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Las células seleccionadas (aquellas que permanecen en la superficie después del lavado con PBS del microchip) se tiñeron directamente usando DAPI (tinción nuclear), anticuerpos marcados con fluoresceína dirigidos contra CD45, anticuerpos anti-citoqueratina (8,18,19) marcados con ficoeritrina (PE) y anticuerpos anti-EpCAM marcados con Cy7 (para el chip seprasa+) o anticuerpos anti-seprasa marcados con Cy7 (para el chip EpCAM+). Después de la tinción
5 y el lavado, se obtuvieron imágenes de los chips en un Zeiss Axiovert 200M utilizando un objetivo de microscopio 40X y una cámara EMCCD. Se encontró que > 95 % de las células seprasa+ no expresaron niveles visibles de EpCAM, como se discernió a partir de la tinción en el chip usando anticuerpos anti-EpCAM marcados con colorante fluorescente Cy7. Las células EpCAM+ también se inmunofenotiparon usando también anticuerpos anti-seprasa marcados con Cy7 con resultados similares garantizados (> 95 % de células EpCAM+ no expresaron seprasa).
10 Los resultados de varias muestras clínicas se muestran en la Tabla 1. En la Tabla 1, la columna «Patología» enumera el estadio de la enfermedad en el momento en que se tomó la muestra. «Ab de afinidad» indica el anticuerpo utilizado para capturar las CTC de la muestra. El número de células se proporciona para 7,5 ml de sangre. La pureza se calcula como una proporción de CTC (seprasa+ o EpCAM+) con respecto al número total de células seleccionadas (WBC
15 (CD45+) + CTC + células de tinción triple -dichas células (CD45+, DAPI+ y CK+)). Las muestras analizadas incluyeron muestras de pacientes metastásicos y de pacientes con enfermedad localizada. Además, se realizó el seguimiento de un solo paciente con enfermedad localizada antes y 3 semanas después de la cirugía (resección del tejido enfermo). La proporción de CTC seprasa+ y CTC EpCAM+ también se muestra como una función de la patología.
20 Tabla 1. CTC seleccionadas por seprasa y EpCAM
Patología
Ab de afinidad CTC 7,5 ml) (por WBC 7,5 ml) (por Pureza Proporción FAP/EpCAM
Pancreático metast.
FAP 158 11 94 %
Pancreático metast.
EpCAM 176 13 90 % 0,92
Pancreático metast.
FAP 94 21 82 %
Pancreático metast.
EpCAM 11 15 42 % 8,54
Pancreático metast.
FAP 625 10 98 %
Pancreático metast.
EpCAM 98 13 88 % 6,38
Pancreático no metast.
FAP 11 7 61 %
Pancreático no metast.
EpCAM 34 5 87 % 0,32
Pancreático no metast.
FAP 94 19 83 %
Pancreático no metast.
EpCAM 581 28 95 % 0,16
Pancreático localizado (30 días posOP)
FAP 73 9 89 %
Pancreático localizado (30 días posOP)
EpCAM 91 12 88 % 0,80
Pancreático localizado (resecado)
FAP 237 – –
Pancreático localizado (resecado)
EpCAM 125 – – 1,90
3 semanas posOP
FAP 30 – –
3 semanas posOP
EpCAM 39 – – 0,77
Sin cáncer
FAP 0 8 - -
Sin cáncer
EpCAM 1 4 - -
Ejemplo 2
25 Determinación de la proporción de CTC seprasa(+) y EpCAM(+) en la sangre periférica de pacientes con diversos cánceres
Los chips microfluídicos para CTC se fabricaron en sustratos de COC. El diseño del chip consistió en una huella de 26,3 x 20,5 mm con canales principales de entrada y salida (20,5 mm de longitud, 400 µm de anchura y 150 µm de
30 profundidad) que conectaban una serie de 50 canales curvilíneos que formaban de manera conjunta el lecho de selección de células. La Figura 1 muestra el diseño del chip de selección de CTC. Cada canal de selección curvilíneo tenía 30,6 mm de longitud, 150 �m de profundidad y 25 �m de anchura. El área de superficie del lecho de selección de CTC era de 596 mm2 (11 mm2/canal) con 45,1 mm2 de dicha área de superficie en los canales principales. El volumen total del chip era de 9,4 �l (138 nl/canal) con un volumen de 2,5 �l para los canales principales.
35
10
imagen9
Los procedimientos descritos en el presente documento también se pueden usar para comparar el número de células
seprasa+ con el de CTC EpCAM+ derivadas de un tumor. La proporción de CTC que expresan seprasa y CTC que
expresan EpCAM se puede usar para determinar el potencial metastásico del tumor. El análisis de las CTC contadas
5 en ambos lechos de afinidad para pacientes individuales que presentaban diferentes enfermedades mostró una
subpoblación de células dominante variable. Los datos se resumen en la Tabla 3. Se observó un número mayor de
CTC Fap+ en PDAC localizado y cáncer colorrectal metastásico, mientras que se observó que las células EpCAM+
eran dominantes en melanoma metastásico y PDAC metastásico. La mediana para la proporción FAPα/EpCAM fue
de 1,21, 1,16, 0,87, 0,69 para PDAC local, cáncer colorrectal metastásico, PDAC metastásico y melanoma 10 metastásico, respectivamente. El recuento de estas dos subpoblaciones y sus proporciones pueden servir como un
marcador que indica el estadio de la enfermedad.
Tabla 3. Proporción de expresión de seprasa y EpCAM en CTC de varios cánceres
Proporción de Fap imagen10 a EpCAM
células PDAC localizado (n = 28) PDAC metastásico (n = 16) CRC metastásico (n = 6) Melanoma metastásico (n = 11)
Fapα � EpCAM
70 % 44 % 83 % 36 %
EpCAM > Fapα
30 % 56 % 17 % 64 %
15
Ejemplo 3
Análisis de expresión de las CTC capturadas con el reactivo de afinidad dirigido a seprasa
20 Usando los procedimientos descritos en el presente documento, las CTC se capturaron, se liberaron, se contaron mediante detección de impedancia (no se realizó tinción) y se recogieron en un microtubo. Las CTC recogidas se centrifugaron y se lisaron usando ~ 20 �l de solución de lisis de un kit Cell-to-CT™ disponible comercialmente (Life Technologies, Grand Island, N.Y.). La tecnología Cells-to-CT™ permite la transcripción inversa de lisados de 10– 105 células sin aislar ni purificar el ARN. La eliminación de la etapa de aislamiento del ARN agiliza y simplifica
25 sustancialmente el análisis de la expresión génica de las células. De forma alternativa, la lisis de las CTC y el aislamiento del ARN se realizaron directamente usando el lecho de captura de CTC. Esto se puede realizar cuando se usa otro conjunto de chips conectados en serie, modificado con FAPα y EpCAM, para contar las células y caracterizar su fenotipo mediante inmunotinción.
30 Después de la lisis, las muestras se trataron con DNasa para eliminar el ADNg residual de la muestra de ARN total (ARNT). Se realizaron reacciones de transcripción inversa tanto positivas como negativas (sin enzima RT) con 10 �l de ARNT de CTC en un volumen total de 50 �l. La reacción de RT se realizó con M-MulV a 37 °C d urante 60 minutos. Se realizó una PCR cuantitativa en tiempo real para evaluar 15 niveles de expresión génica usando un ensayo SYBR Green en un instrumento 7900HT Applied Biosystems equipado con una placa de 384 pocillos. Se recogieron los
35 perfiles de expresión génica de las CTC seprasa+ y EpCAM+ capturadas. Se evaluaron los siguientes genes (es decir, marcadores epiteliales, mesenquimatosos, EMT y CSC (células madre cancerosas)): EpCAM, KRAS, CD133, CD146, KRT19, CD34, GAPDH, CD24, FAP, ACT2, VIM, NANOG, CD44, CXCR4 y TWIST1 (Tabla 4).
Tabla 4. Marcadores de expresión génica evaluados en CTC aisladas
40
Gen
Función / Implicación
EpCAM
Marcador epitelial
KRAS
Oncogén, potencialmente contiene mutación
CD133
CD133+ muestra las propiedades de CSC
CD146
Activador de EMT
KRT19
Marcador epitelial
CD34
Marcador hematopoyético normal
GADPH
Gen constitutivo
CD24
Oncogén sobreexpresado en muchos tumores malignos humanos. Las células CD24+ CD44+ EpCAM+ tienen un potencial oncógeno 100 veces mayor
FAP
Marcador de fibroblastos (CAF)
ACT2
Marcador de EMT, activación asociada con un mal pronóstico
VIM
Regulación por incremento durante EMT
NANOG
Marcador de CSC
12
imagen11

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Families Citing this family (37)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US10155988B2 (en) * 2010-04-07 2018-12-18 Board Of Regents, The University Of Texas System Methods of detecting tumor cells
TWI539158B (zh) * 2010-06-08 2016-06-21 維里德克斯有限責任公司 使用血液中之循環黑色素瘤細胞預測黑色素瘤病患之臨床結果的方法。
US10130946B2 (en) 2011-09-30 2018-11-20 The Regents Of The University Of Michigan System for detecting rare cells
US9645149B2 (en) 2011-09-30 2017-05-09 The Regents Of The University Of Michigan System for detecting rare cells
US10073024B2 (en) 2012-10-29 2018-09-11 The Regents Of The University Of Michigan Microfluidic device and method for detecting rare cells
JP6404824B2 (ja) 2012-11-09 2018-10-17 エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲーＦ． Ｈｏｆｆｍａｎｎ−Ｌａ Ｒｏｃｈｅ Ａｋｔｉｅｎｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ 循環腫瘍細胞のインビトロでの捕捉および解析
EP2799872B1 (en) * 2013-05-01 2017-10-18 F. Hoffmann-La Roche AG Selective release of sub-group of biological units
US20150160246A1 (en) 2013-12-11 2015-06-11 Analiza, Inc. Devices and methods for determining and/or isolating cells such as circulating cancer or fetal cells
US9709556B2 (en) 2013-12-11 2017-07-18 Analiza, Inc. Devices and methods for determining and/or isolating circulating cancer cells
US10829804B2 (en) 2015-03-23 2020-11-10 The University Of North Carolina At Chapel Hill Method for identification and enumeration of nucleic acid sequences, expression, splice variant, translocation, copy, or DNA methylation changes using combined nuclease, ligase, polymerase, terminal transferase, and sequencing reactions
WO2016154302A1 (en) 2015-03-23 2016-09-29 The University Of North Carolina At Chapel Hill Universal molecular processor for precision medicine
US10317406B2 (en) 2015-04-06 2019-06-11 The Regents Of The University Of Michigan System for detecting rare cells
CN105259096B (zh) * 2015-10-19 2018-01-12 武汉顺可达生物科技有限公司 磷酸锌纳米基底及其制备方法和在循环肿瘤细胞捕获与释放中的应用
CN106868098A (zh) 2015-12-10 2017-06-20 益善生物技术股份有限公司 循环肿瘤细胞分型鉴定试剂盒
CN108884445A (zh) 2016-03-09 2018-11-23 北京智康博药肿瘤医学研究有限公司 肿瘤细胞悬浮培养物和相关方法
WO2017188346A1 (ja) * 2016-04-27 2017-11-02 国立大学法人 東京大学 マイクロファイバーを用いた血中循環細胞の捕捉及び回収用材料及び当該材料を用いる方法
WO2017199651A1 (ja) * 2016-05-18 2017-11-23 ソニー株式会社 生体物質分析装置、生体物質分析システム、生体物質選別方法、生体物質分析用プログラム及び細胞培養容器
WO2017205267A1 (en) 2016-05-22 2017-11-30 Cornell University Multifunctional microfluidic device for capturing target cells and analyzing genomic dna isolated from the target cells while under flow conditions
CN107475354A (zh) * 2016-06-08 2017-12-15 益善生物技术股份有限公司 前列腺癌组织溯源ctc分型鉴定试剂盒
CN107475355A (zh) * 2016-06-08 2017-12-15 益善生物技术股份有限公司 肺癌早期筛查试剂盒
CN106366197B (zh) * 2016-08-31 2021-03-30 上海美吉生物医药科技有限公司 一种HER2、EGFR、EpCAM、MUC1多重抗体免疫磁珠及其制备方法
CN106434904A (zh) * 2016-09-07 2017-02-22 上海交通大学医学院附属仁济医院 一种实时监控肝癌复发或转移的CD133、EpCAM和CK19联合检测试剂盒
WO2018111989A1 (en) 2016-12-14 2018-06-21 Purdue Research Foundation Fibroblast activation protein (fap)-targeted imaging and therapy
WO2018116465A1 (ja) * 2016-12-22 2018-06-28 日立化成株式会社 Ｈｅｒ２陽性癌細胞の検出方法
CN106866820B (zh) * 2017-02-17 2020-04-03 艾比玛特医药科技（上海）有限公司 一种用于捕获肿瘤细胞的抗人角蛋白18的单克隆抗体及其应用
CA3058406A1 (en) * 2017-03-30 2018-10-04 The Board Of Trustees Of The University Of Illinois Method and kit for diagnosing early stage pancreatic cancer
CN108344615B (zh) * 2018-01-24 2020-10-23 杭州安弼晟生物科技有限公司 一种循环肿瘤细胞捕获系统及控制方法
WO2020139211A1 (en) 2018-12-28 2020-07-02 Mikro Biyosistemler Elektronik Sanayi Ve Ticaret A.S. A microfluidic device for selective capture of biological entities
CN110082529B (zh) * 2019-03-11 2022-04-19 南方医科大学深圳医院 一种肿瘤细胞表面标志物及其应用
CN112143732B (zh) * 2019-06-28 2022-03-22 中国科学院苏州纳米技术与纳米仿生研究所 特异性识别N-cadherin的ssDNA适配体、其筛选方法及应用
JPWO2022009642A1 (es) * 2020-07-06 2022-01-13
CN112569362B (zh) * 2020-12-23 2022-05-17 北京航空航天大学 一种通过打散ctc细胞团抑制肿瘤转移的方法
CN112924363A (zh) * 2021-01-22 2021-06-08 中国科学院苏州纳米技术与纳米仿生研究所 中间型循环肿瘤细胞作为肿瘤诊断和预后标志物及其应用
EP4284911A1 (en) * 2021-01-27 2023-12-06 BioFluidica, Inc. High efficiency capture of fetal cells from maternal samples
CN112730840B (zh) * 2021-01-29 2023-10-17 章毅 鉴别cd44和cd24分子表型的方法
CN114874989A (zh) * 2022-04-11 2022-08-09 中国科学院苏州纳米技术与纳米仿生研究所 一种循环肿瘤细胞捕获方法
WO2024021040A1 (zh) * 2022-07-29 2024-02-01 曾繁根 细胞辨识方法

Family Cites Families (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE69941689D1 (de) * 1998-02-12 2010-01-07 Univ Texas Verfahren und reagenzien zur raschen und effizienten isolierung zirkulierender krebszellen
US7785810B2 (en) * 2000-09-09 2010-08-31 The Research Foundation Of State University Of New York Method and compositions for isolating metastatic cancer cells, and use in measuring metastatic potential of a cancer thereof
AU2004286307A1 (en) 2003-10-31 2005-05-12 Vitatex, Inc. Blood test prototypes and methods for the detection of circulating tumor and endothelial cells
WO2008131048A2 (en) * 2007-04-16 2008-10-30 Cellpoint Diagnotics, Inc. Devices and methods for diagnosing, prognosing, or theranosing a condition by enriching rare cells
US8889361B2 (en) 2007-09-19 2014-11-18 The Research Foundation For The State University Of New York Gene expression signatures in enriched tumor cell samples
MX2010004671A (es) 2007-12-10 2010-05-27 Hoffmann La Roche Seprasa como marcador para cancer.
US10429376B2 (en) 2008-05-16 2019-10-01 Board Of Supervisors Of Louisiana State University And Agricultural And Mechanical College Microfluidic isolation of tumor cells or other rare cells from whole blood or other liquids
GR1006582B (el) 2008-07-14 2009-11-03 Ελενη Στυλιανου Μωυσιαδου Προϊοντα καθαρισμου και απολυμανσης με φυσικα αβλαβη υλικα που εχουν βαση την ζαχαρη
US20100210989A1 (en) * 2008-12-23 2010-08-19 Janet Lesley Macpherson Processing blood
EP2409151B1 (en) * 2009-03-18 2018-07-11 The Regents of The University of California Device for capturing circulating cells
JP5923035B2 (ja) 2009-03-24 2016-05-24 バイオセプト インコーポレイティッド 細胞の捕捉および解析のデバイスおよび方法
WO2010124227A2 (en) 2009-04-24 2010-10-28 The Board Of Trustees Of The University Of Illinois Methods and devices for capturing circulating tumor cells
SG192587A1 (en) 2011-02-03 2013-09-30 Univ Northeastern Methods and compositions for highly specific capture and release of biological materials
CN202279815U (zh) * 2011-07-19 2012-06-20 西门子公司 循环肿瘤细胞捕获装置
JP6404824B2 (ja) 2012-11-09 2018-10-17 エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲーＦ． Ｈｏｆｆｍａｎｎ−Ｌａ Ｒｏｃｈｅ Ａｋｔｉｅｎｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ 循環腫瘍細胞のインビトロでの捕捉および解析

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