JP2015523894A - 迅速検査装置および方法 - Google Patents
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Abstract
Description
本発明の装置に、第1の部品を用いて得られる血漿または任意の他の濾液、たとえば尿、糞便、唾液、体組織等のヒトまたは動物の排泄物であるがこれらに限定されない濾液中の化学もしくは生物学的物質または微生物等の分析物の定量的、半定量的または定性的な存在を検出するための、すなわち判断するための試薬が設けられてもよい。試薬は、当該試薬に対する反応物が検出可能な量で濾液中に存在する場合に、試薬と濾液との識別可能な反応を得ることができるように血漿および/または濾液と接触させられる限り、いずれの好適な位置および形態で供給されてもよい。それは、上述のようにストリップ上にあってもよいが、さらに、または代わりに、流体中、要素17内、フィルタ12内、チャネル13の壁上、またはその組合せにおいて、完全にまたは部分的に供給されてもよい。さらに、試薬が濾液中に化合された場合にのみ反応が起こり得るように、多成分試薬である試薬を使用してもよい。
−心臓FABP(H−FABPまたは心臓型)、
−肝臓FABP(L FABPまたは肝臓型)、
−腸FABP(I−FABPまたは小腸型)、
−回腸FABP(ILBPまたは回腸型)、
−脳FABP(B−FABPまたは脳型)、
−脂肪細胞FABP(A−FABPまたは脂肪細胞型)、
−上皮/表皮FABP(E−FABPまたは上皮細胞型)、
−精巣FABP(T−FABPまたは精巣型)、および
−ミエリンFABP(M−FABPまたは神経細胞型
である。
−希釈液を有する第1の部品(たとえば発明に係る装置1の第1の部品2であり、上述の希釈液21を含むチャンバ24を含み、好ましくは図示されるような単数または複数の第1の結合要素を有する)、
−検査ストリップを有する第2の部品(たとえば発明に係る装置1の第2の部品3であり、図示されるような試薬16および単数または複数の第2の結合要素を有するチャネル13を含む)、
−希釈液で希釈された血液試料から血球を濾過するためのフィルタ(たとえばフィルタ12)であり、これは、第1もしくは第2の部品内に、またはこれらの部品の一方に結合するための別個の要素として設けられてもよく、少なくとも血漿はこれを通過可能であるが、赤血球は通過不可能であり、さらに、
−既知の量の血液をサンプリングする可能性を提供する吸着および/または吸収要素(たとえばスポンジ状要素17)であり、これは、第1もしくは第2の部品内に、またはこれらの部品の一方に結合するための別個の要素として設けられてもよい。この要素を適用して、既知の量の血液試料(典型的に約30または60μLの血液、ただしこの量は変動してもよい)を装置1内に投入することができ、それによって、血液構成要素が、それを通過する希釈液によって希釈され得る。
−FABPの第1のエピトープと特異的に結合可能な捕捉抗体(試薬16)。捕捉抗体は、有利には、装置1の外側から観察することができるチャネル13またはストリップ14の表面内または表面上において固体化する形態であり得る。H−FABPの検出のために捕捉抗体として使用されるのに好適な抗体は、抗ヒトモノクローナル抗体H−FABP 67D3(たとえばオランダ、ウーデンのHycult Biotechnology社から入手可能)である。好適な表面は、毛細管作用を有する多孔部であり、それは、たとえば側方流動検出に適用することができる。
−任意に、第1エピトープとは異なるFABPの第2エピトープと特異的に結合可能な検出抗体であり、両抗体は、FABPに対する互いの結合に対し好ましくないように実質的に影響を与えることはない。検出抗体は、希釈液中に供給され得る。希釈液中の検出検体の適切な濃度は、5〜20μg/Lである。検出抗体はさらに、第2の部品内に、たとえばストリップ14内またはストリップ14上に供給されてもよい。H−FABPの検出のために検出抗体として使用されるのに好適な抗体は、抗ヒトモノクローナル抗体H−FABP 66E2(たとえばオランダ、ウーデンのHycult Biotechnology社から入手可能)である。
−上述した本発明の装置を提供するステップ、
−既知の量の血液を当該吸着および/または吸収要素に投入するステップ、
−希釈液を当該要素に押し通して血液試料を希釈するステップ、
−希釈した当該血液試料を部分的に当該フィルタに押し通すことによって血漿から(赤)血球を分離するステップ、
−当該フィルタを通過した血漿と試薬との反応を促進するステップ。実施形態では、これは、当該血液または血漿中のFABPを、当該検出抗体および捕捉抗体のうちの少なくとも一方と、抗体とFABPとの間に特異結合が発生する条件下で接触させることを意味し得る。さらに、
−特異結合を検出するステップ。
次に、本発明を、発明を決して限定しない以下の実施例によって例示する。
ポイント・オブ・ケア(POC)迅速検査(血漿中のH−FABPの検出のために、一般開業医の診療室で、救急車で、病院で、または家庭用検査として使用される検査)の展開
本検査は、濃度の増大の存在の免疫化学的確定を可能にする。検査は、血漿中の>4μg/Lの心臓型脂肪酸結合タンパク質(H−FABP)を検出するように設計され、本明細書で説明した装置と組み合わされた。血液試料を採取して肯定的な検査結果が得られるまでの時間は60秒未満であり得る。
−希釈液(たとえば、50mMのリン酸ナトリウム、0.137Mの塩化ナトリウム、0.0027Mの塩化カリウム、0.05%のTween 20、0.05%のProclin 300、pH6)を含む貯留部、
−規定量の血液を収集するためのスポンジ、
−血漿および血球を分離するための血液フィルタ、ならびに
−濾液中のH−FABPの検出のための検査ストリップ。
Claims (20)
- 血液または血液成分などのヒトまたは動物試料を検査するための検査装置であって、第1の部品および第2の部品を備え、前記第1および第2の部品は、前記第1の部品を前記第2の部品と結合させるために協動する第1および第2の結合要素を含み、前記検査装置はさらに、試料吸収および/または吸着要素を備え、前記第1の部品は流体貯留部を含み、前記第2の部品は少なくとも1つのレセプタクルを含み、前記流体貯留部は、前記第1および第2の部品が少なくとも前記第1および第2の結合要素によって互いに接続するか接続させられると、前記流体貯留部内の液体を前記吸着および/または吸収要素を通しておよび/または前記要素に沿って押し出し、血液またはその成分などの前記試料を前記吸着および/または吸収要素から前記レセプタクル内に押し出し、好ましくは前記第2の部品内の少なくとも1つの試薬と接触させるように、体積が減少可能である、検査装置。
- 前記第1の部品には、その第1の端にまたは第1の端の近傍に前記第1の結合手段が設けられ、前記吸着および/または吸収要素は、前記第1の端にまたは前記第1の端の近傍に設けられ、前記流体貯留部は、前記吸着および/または吸収要素の前記第1の端と反対側に設けられる、請求項1に記載の検査装置。
- 前記第1および第2の結合要素は、前記第1の部品の第1の端が前記第2の部品のチャネルの入口の上方に位置決めされるように、前記第1の部品を前記第2の部品に対して解放可能に位置決めするように設計され、前記チャネルの内部に、少なくとも1つのフィルタが、前記入口内に、または前記入口と前記少なくとも1つの試薬との間に設けられる、請求項1または2に記載の検査装置。
- 前記流体貯留部は、チャンバと、前記貯留部の体積を減少させるために前記チャンバに対して可動のプランジャとを含み、少なくとも1つの前記吸着および/または吸収要素に向かって開口する出口が前記貯留部に設けられる、請求項1から3のいずれか1項に記載の検査装置。
- 前記第1の部品にグリップが設けられ、前記グリップは、少なくとも前記チャンバおよび/または前記プランジャを含む前記第1の部品のハウジング部上でまたはハウジング部の周りに回転可能であり、前記グリップを回転させると、前記プランジャが前記チャンバに対して移動し、前記体積を減少させる、請求項4に記載の検査装置。
- 前記グリップに、少なくとも1つの歯と、前記歯のためのガイドトラックを有する前記ハウジング部とが設けられ、またはその逆であり、前記ガイドトラックは、前記グリップを回転させると、前記グリップが直線方向に強制的に移動するように、好ましくは前記吸着および/または吸収要素に向かってまたは当該要素から離れるように移動するように延在する、請求項5に記載の検査装置。
- 前記第2の部品は、好ましくは縦方向を有する検査ストリップを含み、前記少なくとも1つの試薬は前記ストリップ内または前記ストリップ上に供給され、前記ストリップは、前記第2の部品の外側から少なくとも部分的に視認可能であり、好ましくは、前記ストリップの少なくとも一部は前記少なくとも1つの試薬を含む、請求項1から6のいずれか1項に記載の検査装置。
- 前記第1の部品は第1の縦方向を有し、前記第2の部品は第2の縦方向を有し、前記第1および第2の縦方向は、0または180度とは異なる、好ましくは実質的に90度の相対角度で延在する、請求項1から7のいずれか1項に記載の検査装置。
- 前記第1の部品は、実質的に円筒形の部品を含むか当該部品によって形成される第1の結合要素を有し、前記第2の部品は、前記第2の縦方向に対して実質的に垂直に延在して前記第1の結合要素とのロック、好ましくは少なくとも形状ロックおよび/または圧入ロックを形成する少なくとも部分的に円形の壁を含む第2の結合要素を有し、それによって、前記第1の縦方向において前記第1の結合要素を前記第2の結合要素に挿入して、前記第1の部品を前記第2の部品と結合させることができる、請求項8に記載の検査装置。
- 前記第1の部品は、前記貯留部を封止するシールを含み、前記第1の部品に、前記シールを突き刺すか破裂させるための要素が設けられ、それによって、前記貯留部と前記吸着および/または吸収要素との間に流体接続が形成される、請求項1から9のいずれか1項に記載の検査装置。
- 前記第1および第2の部品は前記第1および第2の結合要素によって結合され、前記貯留部が最大減少体積位置にあるとき、前記吸着および/または吸収要素、ならびに前記要素と前記少なくとも1つの試薬との間に設けられたフィルタを介して、前記貯留部と前記少なくとも1つの試薬との間に流体接続が設けられ、前記流体接続は、前記貯留部からの流体、およびそこに含まれる試料成分、好ましくは少なくとも血漿で実質的に完全に充填され、前記フィルタは好ましくは、前記少なくとも1つの試薬と接触する前に前記血液から少なくとも血球を濾過するのに適したフィルタである、請求項1から10のいずれか1項に記載の検査装置。
- 血液から少なくとも血球を、または試料から粒子を濾過するためのフィルタが設けられ、前記フィルタは、シングル、ダブル、または多層フィルタである、請求項1から11のいずれか1項に記載の検査装置。
- 前記第1の部品は、前記貯留部を開けるための、かつ前記貯留部から液体を押し出すために前記貯留部の体積を制御して減少させるためのメカニズムを含む、請求項1から12のいずれか1項に記載の検査装置。
- 血液試料を採取するための血液吸収および/または吸着要素と、好ましくは前記試料から要素を濾過して取り除くためのフィルタとを備え、前記血液吸収および/または吸着要素ならびに前記フィルタの少なくとも一方に、検査ストリップ上、検査ストリップ内または検査ストリップの前記試料の成分および/または成分と反応する反応成分が供給される、好ましくは請求項1から13のいずれか1項に記載の検査装置。
- 血液またはその成分などのヒトまたは動物試料を検査する方法であって、ある量の試料が、要素内および/または要素上で吸着および/または吸収され、前記要素は、片側が、液体、特に溶媒または希釈剤が入った貯留部に接続され、前記要素は、少なくとも1つの試薬およびフィルタを含むチャネルに接続され、前記貯留部は、前記貯留部内の前記液体が前記要素を通しておよび/または前記要素に沿って少なくとも部分的に押し出され、その内部および/またはその上に供給された前記試料を溶解および/または希釈し、そのように希釈および/または溶解された前記試料を前記フィルタを通して少なくとも部分的に押し出すように体積が減少し、前記フィルタにおいて、少なくとも細胞が、好ましくは少なくとも血球が濾過して取り除かれ、前記フィルタを通過する希釈および/または溶解された前記試料の部分は、前記少なくとも1つの試薬と少なくとも部分的に接触する、方法。
- 血液を吸着および/または吸収するための前記要素は、前記貯留部に隣接して、検査装置の第1の部品に含まれ、前記要素は血液で実質的に飽和され、その後、前記第1の部品が、前記少なくとも1つの試薬を含む前記装置の第2の部品に接続され、その後、前記貯留部の体積が減少し、前記液体を前記貯留部から前記要素を通して、前記第2の部品内にかつ前記第2の部品を通して押し出し、前記少なくとも1つの試薬と接触させる、請求項15に記載の方法。
- 検査用のヒトまたは動物試料を調製するための方法であって、ある量の試料が、要素内および/または要素上で吸着および/または吸収され、前記要素は、片側が、液体、特に溶媒または希釈剤が入った貯留部に接続され、前記要素は、少なくとも1つの試薬およびフィルタを含むチャネルに接続され、前記貯留部は、前記貯留部内の前記液体が前記要素を通しておよび/または前記要素に沿って少なくとも部分的に押し出され、その内部および/またはその上に供給された前記試料を溶解および/または希釈し、そのように希釈および/または溶解された前記試料を前記フィルタを通して少なくとも部分的に押し出すように体積が減少し、前記フィルタにおいて、少なくとも細胞が、好ましくは少なくとも血球が濾過して取り除かれ、前記フィルタを通過する希釈および/または溶解された前記試料の部分は、保管および/または輸送用のレセプタクルに受けられる、方法。
- 部品キットであって、
希釈液を有する第1の部品と、
検査ストリップを有する第2の部品と、
前記希釈液で希釈された血液試料から血球を濾過するためのフィルタとを備え、前記フィルタは、前記第1もしくは第2の部品内に、またはこれらの部品の一方と結合するための別個の要素として設けられ得、少なくとも血漿は前記フィルタを通過可能であるが血球は前記フィルタを通過不可能であり、前記部品キットはさらに、
既知の量の血液をサンプリングする可能性を提供する吸着および/または吸収要素を備え、前記要素は、前記第1もしくは第2の部品内に、またはこれらの部品の一方と結合するための別個の要素として設けられ得、これによって、前記血液の構成要素が、前記要素を通過した前記希釈液によって希釈され得る、部品キット。 - 前記吸収および/または吸着要素に、反応成分が、特に前記検査ストリップ上、前記検査ストリップ内または前記検査ストリップの前記試料の成分および/または成分と反応する成分が供給される、請求項18に記載の部品キット。
- 少なくとも2つの吸収および/または吸着要素に異なる反応成分が供給される、請求項19に記載の部品キット。
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