ES2635596T3 - Dispositivo y método de prueba rápida - Google Patents

Abstract

El dispositivo de prueba (1) para evaluar una muestra animal o humana, tal como sangre o componentes de la sangre (B), que comprende una primera parte (2) y una segunda parte (3), que comprende el primer y el segundo elementos cooperadores de acoplamiento (4, 5) para acoplar la primera parte (2) con la segunda parte (3), y un absorbente de muestra y/o elemento absorbente (17), en donde la primera parte (2) comprende un depósito de líquido (20), y en donde la segunda parte (3) comprende al menos un receptáculo, en donde el depósito de líquido (20) puede reducirse en volumen para empujar un líquido contenido en él a través y/o a lo largo del absorbente y/o elemento absorbente (17), mediante el empuje de la muestra tal como sangre o componentes de esta (B) desde el absorbente y/o elemento absorbente (17) hacia dentro del receptáculo, preferentemente, en contacto con al menos un reactivo en la segunda parte (3) cuando la primera y la segunda partes (2, 3) se conectan o se ponen en contacto entre sí por al menos el primer y el segundo elementos de acoplamiento (4, 5).

Description

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DESCRIPCION

Dispositivo y metodo de prueba rapida

La invention se refiere a un dispositivo de prueba para la evaluation de la sangre. La invention se refiere, ademas, a un metodo para la evaluacion de la sangre. La invencion se refiere especialmente a tal dispositivo y metodo para la evaluacion rapida de la sangre.

En el documento EP 2 283 360 se describe un dispositivo de prueba rapida para sangre, en donde una esponja se satura con la sangre que se absorbe a partir de un pinchazo que se hace en el dedo de una persona. La esponja se inserta dentro de un contenedor cillndrico, en el que se proporciona una cantidad de diluyente, de manera que la sangre se enjuaga de la esponja y se diluye. Despues, se inserta un embolo dentro del cilindro, que tiene un filtro en el extremo libre de este. Cuando el embolo se presiona dentro del cilindro, la sangre diluida se empuja, al menos parcialmente a traves del filtro a un espacio dentro del embolo. El filtro se disena para filtrar las celulas sangulneas a partir de la sangre diluida, de manera que el plasma sangulneo pasa el filtro y los globulos rojos se retienen. Dentro del embolo se proporciona un reactivo, para que entre en contacto con el plasma sangulneo. El cilindro y el embolo son transparentes, de manera que la reaction, en caso de existir alguna, con el reactivo puede verse a traves del cilindro. Despues, un embolo interno se empuja hacia abajo dentro del embolo, de manera que se fuerza un tope dentro de la abertura del filtro, y se cierra dicha abertura. Este dispositivo conocido tiene la desventaja que es complicado en su construction y uso, es costoso, y el empuje de la sangre a traves del filtro es diflcil de controlar. El dispositivo permite que la sangre se empuje a traves del filtro a una presion demasiado alta, que puede conllevar a un elevado cizallamiento de las celulas sangulneas, lo que contamina el suero que se obtiene despues del filtrado. Una desventaja adicional de este dispositivo conocido es que el resultado puede ser inconsistente, lo que parece ser el resultado de al menos la variabilidad entre los usuarios y la inconsistencia del filtrado de la muestra de sangre total.

El documento US2004/014203 describe un dispositivo de prueba para una muestra tal como sangre, que comprende una primera parte que puede acoplarse a una segunda parte. La primera parte comprende un deposito que contiene un tampon llquido y un espacio para recibir una muestra. El deposito puede empujarse dentro de dicho espacio, abrir el deposito y permitir que el tampon contenido en el fluya dentro del espacio. La segunda parte comprende una tira de prueba y un filtro, con cuyo filtro la tira de prueba se mantiene en su lugar. Una muestra llquida puede introducirse en el espacio a traves de un extremo abierto de este, para cerrarse por el deposito, o puede aspirarse dentro del espacio mediante un elemento de suction. El tampon llquido se mezclara con la muestra dentro del espacio y despues, fluira por gravedad y action capilar sobre la tira, hacia un reactivo. El flujo se controla por el filtro.

Un objetivo de la description es proporcionar un dispositivo alternativo para evaluar muestras humanas o animales tales como sangre y/o componentes de esta, especialmente un dispositivo de prueba rapida. Un objetivo de la presente descripcion es proporcionar un dispositivo facil de usar. Un objetivo de la presente descripcion es proporcionar un dispositivo de prueba que permita un control adecuado de la acumulacion de presion en el y del filtrado de una muestra, tal como sangre, que resulte en una salida consistente y un resultado de la prueba.

De conformidad con la presente invencion, se proporciona un dispositivo de prueba como se define en la reivindicacion 1, un metodo para evaluar una muestra humana o animal como se define en la reivindicacion 14, un metodo para preparar una muestra humana o animal para evaluar de conformidad con la reivindicacion 16 y un estuche de partes como se define en la reivindicacion 17.

Las ventajas adicionales se logran mediante las modalidades indicadas por las reivindicaciones dependientes.

En un aspecto un dispositivo de prueba de esta descripcion se caracteriza porque comprende una primera parte y una segunda parte que tienen primeros y segundos elementos cooperadores de acoplamiento para acoplar la primera parte con la segunda parte. El dispositivo comprende, ademas, un absorbente de la muestra y/o elemento absorbente que puede, por ejemplo, proporcionarse en la primera o segunda parte o en una parte separada entre la primera y la segunda parte. La primera parte comprende un deposito para el llquido. La segunda parte comprende al menos un receptaculo para recibir un filtrado a partir del filtro, y puede comprender ventajosamente al menos un reactivo. El deposito del llquido puede reducirse en volumen para empujar un llquido contenido en el a traves y/o a lo largo del absorbente o elemento absorbente, al empujar la muestra tal como sangre o componentes de esta desde el absorbente y/o elemento absorbente a traves del filtro y el filtrado dentro del receptaculo. Si se proporciona el filtrado puede ponerse en contacto con al menos un reactivo en la segunda parte cuando la primera y la segunda partes se conectan o se ponen en contacto entre si por al menos el primer y segundo elementos de acoplamiento. Preferentemente, en la primera parte se comprende el absorbente y/o elemento absorbente en una position para recibir la muestra, por ejemplo, sangre a partir de, por ejemplo, un pinchazo en un dedo.

Un dispositivo de la invencion permite que el llquido se empuje en y/o a traves del elemento, para disolver y/o diluir la sangre antes de empujarla a traves del filtro. Esto puede reducir el riesgo de danar la muestra, especialmente las celulas sangulneas, especialmente los globulos rojos de la sangre. El deposito, especialmente la construccion para reducir el volumen del deposito y por tanto definir la cantidad de llquido para pasarse a traves del elemento, y el

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elemento definen las cantidades especlficas de la muestra, tales como sangre y llquido que pasa a traves del filtro, de manera que puede definirse el factor de dilucion. Esto puede aumentar la precision de la reaccion con el reactivo.

En una modalidad preferida la primera parte comprende un mecanismo para la abertura del deposito y la reduccion controlada del volumen del deposito para empujar el llquido desde el deposito. El mecanismo de control evitara que la presion que se ejerce sobre el llquido sea demasiado alta, incluso mayor. El mecanismo puede comprender, por ejemplo, elementos de cooperacion que transfieren una rotacion de un agarre a una traslacion de una parte del dispositivo para reducir el volumen del deposito. Sorprendentemente tal mecanismo de conversion puede evitar una reduccion de volumen demasiado rapida del deposito.

En otra modalidad preferida la primera parte comprende un sello hermetico del deposito, en donde la primera parte se provee de un elemento para perforar o romper el sello, de manera tal que se forma una conexion de llquido entre el deposito y el absorbente y/o elemento absorbente.

El sello cierra el deposito, de manera que el llquido contenido en el no puede salir del deposito antes de que el sello se perfore o rompa. Esto evitara que el llquido salga de la primera parte demasiado pronto, por ejemplo, cuando el elemento no esta en su lugar o cuando la primera parte no se conecta adecuadamente a la segunda parte. Ademas, esto permite el almacenamiento facil del dispositivo, especialmente de la primera parte, antes de usar.

En un aspecto adicional la presente descripcion se caracteriza por un metodo de evaluacion o para la preparacion de muestra humana o animal, tal como sangre, en donde una cantidad de la muestra tal como sangre se absorbe y/o absorbe en y/o sobre un elemento, que se conecta por un lado a un deposito que contiene un llquido, especialmente un solvente o diluyente para la muestra, tal como un diluyente para la sangre. Despues, el elemento se conecta ya sea a un receptaculo para almacenar y/o transferir la muestra diluida o el filtrado o a un canal que comprende al menos un reactivo y/o un filtro. El deposito se reduce en volumen, de manera que el llquido contenido en el se empuja al menos parcialmente a traves y/o a lo largo del elemento, para disolver y/o diluir la muestra en el y/o dentro de el. Despues la muestra diluida o disuelta se empuja al menos parcialmente a traves del filtro, en donde en el filtro al menos se filtran las celulas especlficas tales como celulas sangulneas especlficas, especialmente los globulos rojos de la sangre. La parte de la muestra diluida y/o disuelta que pasa a traves del filtro como un filtrado puede despues, al menos parcialmente, ponerse en contacto con el al menos un reactivo, para la reaccion con este. Esto puede realizarse directamente, en una parte conectada al canal que pasa el filtro o puede realizarse separada de este. A tal extremo el filtrado puede, por ejemplo, recibirse en un receptaculo tal como un contenedor para expedirse a un lugar para la evaluacion, puede almacenarse para una referencia posterior o de cualquier otra manera tratarse separada de la parte que comprende el canal.

En una modalidad preferida el al menos un reactivo se proporciona en o sobre una tira de material en una segunda parte del dispositivo, en donde la tira se conecta al filtro o al menos a una camara adentro o junto con la cual el filtro se proporciona. La tira puede fabricarse de cualquier material adecuado y puede fabricarse, por ejemplo, de un material absorbente, un material que proporcione el transporte de la combinacion del llquido diluido hacia el al menos un reactivo. El material puede definir al menos parcialmente la velocidad de transportacion del llquido a lo largo de la tira, mediante la determinacion del tiempo de reaccion del llquido con el reactivo. El material puede, por ejemplo, separar mas los constituyentes de la combinacion llquida, incluso para asegurar mejor la reaccion correcta con el reactivo.

En una explicacion adicional de la presente descripcion a continuacion se describiran modalidades de un dispositivo y metodo para la evaluacion rapida, con referencia a los dibujos. En estos se muestra:

la figura 1 es una vista en perspectiva de una modalidad de un dispositivo de prueba, con una primera y segunda parte separadas;

la figura 2 es una vista en seccion transversal de una parte del dispositivo de la figura 1, con la primera y segunda partes en condicion acoplada y con el deposito en una primera posicion;

la figura 3 es una vista en seccion transversal de una parte del dispositivo, comparable a la figura 2 con la primera y segunda partes en condicion acoplada y con el deposito en una segunda posicion de volumen reducido; las figuras 4 y 5 son vistas laterales en perspectiva de una parte del dispositivo en las posiciones de las figuras 2 y 3 respectivamente, parcialmente transparente;

la figura 6 es una vista en perspectiva de una primera parte de un dispositivo durante la etapa de absorber y/o absorber sangre de un dedo;

la figura 7 es una vista en seccion transversal de una modalidad alternativa de un dispositivo de la descripcion, en una primera posicion;

la figura 8 es una vista lateral en perspectiva y vista en seccion transversal de una modalidad alternativa, con el agarre y el deposito en una primera posicion;

la figura 9 es una vista lateral en perspectiva y vista en seccion transversal de la modalidad de la figura 8, con el agarre y el deposito en una posicion intermedia;

la figura 10 es una vista lateral en perspectiva y vista en seccion transversal de la modalidad de las figuras 8 y 9, con el agarre y el deposito en una segunda posicion de volumen reducido.

las figuras 11a, b son vistas en seccion transversal de una modalidad distinta del dispositivo de la figura 1, con la primera y segunda partes en condicion acoplada y con el deposito en una primera posicion y una vista en seccion

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transversal de una parte de dicho dispositivo con la primera y segunda partes en condicion acoplada y con el dispositivo en una segunda posicion de volumen reducido

la figura 12 es una vista en seccion transversal con la primera parte del dispositivo de conformidad con la figura 11, y un receptaculo.

En esta descripcion las modalidades de la presente invencion se describen a manera de ejemplo solamente. Ellos de ninguna manera deben comprenderse como limitantes del alcance de la invencion como se reivindico en cualquier via o forma. En esta descripcion los mismos elementos o similares se indicaran por los mismos signos de referencia o similares. En esta descripcion las partes diferentes o elementos se describen como partes de un dispositivo o para usar en un metodo para la evaluacion. Sin embargo, estas partes y elementos se consideran, ademas, haberse descrito por completo individualmente, mientras que, ademas, las combinaciones diferentes de estas partes o elementos se consideran haberse descrito en la presente descripcion.

En esta descripcion los dispositivos y metodos se describen con referencia a la evaluacion de la sangre, en donde la sangre se filtra para separar de la sangre al menos la mayorla y preferentemente de manera sustancial todos los globulos rojos de la sangre. Los filtros pueden elegirse de manera que otros elementos sean o puedan separarse de la sangre, tal como las plaquetas de la sangre o las celulas blancas, ya sea conjuntamente con o en vez de los globulos rojos de la sangre. Ademas, otras muestras humanas o animales pueden usarse en dispositivos y/o metodos descritos en la presente descripcion. La sangre se analiza solamente a manera de ejemplo.

En esta descripcion los dispositivos y metodos se describen en donde una muestra tal como sangre se diluye con un llquido, antes de ser empujada a traves de un filtro para filtrarse al menos un tipo de celulas, especialmente los globulos rojos de la sangre. Preferentemente, la muestra, especialmente sangre se lava desde y/o fuera de un elemento en y/o sobre el cual esta se absorbe y/o absorbe, tal como, por ejemplo, pero sin limitarse a un elemento parecido a una esponja. Preferentemente, el llquido se presuriza antes o para empujarlo dentro y/o a traves de dicho elemento para diluir la sangre. El llquido puede ser un diluyente, referido, ademas, como diluyente, o un solvente para una muestra que se toma para evaluarse. El elemento es, preferentemente, un elemento que puede recibir una cantidad predeterminada de una muestra, tal como sangre, especialmente sangre total, tales como un elemento tipo esponja, un elemento capilar y lo similar, a traves del cual puede pasar el llquido. Absorbente y/o que absorbe tiene que comprenderse como que incluye pero no se limita a recibir una muestra tal como sangre mediante el establecimiento de una diferencia de presion sobre el elemento y/o por efecto capilar en y/o a traves de dicho elemento y/o mediante la union reversible qulmica y/o flsica de la muestra, tal como sangre al elemento.

La figura 1 muestra un dispositivo 1 para realizar una prueba rapida de sangre. El dispositivo 1 comprende una primera parte 2 y una segunda parte 3, que pueden acoplarse entre si mediante un primer elemento de acoplamiento 4 sobre la primera parte 2 y una segunda parte de acoplamiento 5 sobre la segunda parte 3. En la modalidad que se muestra en la figura 1 el primer elemento de acoplamiento es, o comprende, un elemento cillndrico 6 con un primer extremo 7 de la primera parte 2, la parte cillndrica que tiene un eje longitudinal Z. El segundo elemento de acoplamiento 5 en esta modalidad se forma por, o comprende, una pared sustancialmente cillndrica 8 que se forma en, o cerca de un extremo del eje longitudinal 9 de la segunda parte 3. La pared 8 incluye una abertura sustancialmente cillndrica 59 con un eje longitudinal X. La segunda parte 3 es, o comprende, un receptaculo para recibir al menos parte de una muestra diluida tal como un filtrado desde la primera parte como se describira a continuacion.

En la modalidad que se muestra en las figuras 1 - 6 y 8 - 10 la segunda parte 3 es sustancialmente en forma aplanada y tiene un segundo eje longitudinal Y, que se extiende sustancialmente perpendicular al primer eje longitudinal X. La abertura tiene una parte inferior 10 opuesta a un lado abierto 11. En la parte inferior 10 se proporciona una abertura de salida en la que se coloca un filtro 12. A un lado del filtro 12 opuesto a la parte inferior 10 un canal 13 conecta al filtro 12, el que se extiende en una segunda direccion longitudinal Y. En el canal se proporciona una tira 14 de materiales, por ejemplo, como los que se conocen generalmente de los ensayos de flujo lateral, los que pueden ser, por ejemplo, materiales absorbentes como los que se usan en las aplicaciones cromatograficas, en tiras de prueba conocidas o lo similar. A manera de ejemplo los materiales pueden ser, por ejemplo, fibras de vidrio y/o celulosa, por ejemplo, las proporcionadas por Millipore US y/o nitrocelulosa, por ejemplo, con un grosor entre 140-170 um y una porosidad de entre 90-135 sec/4cm proporcionada por Sartorius. En la segunda parte 3 puede proporcionarse una ventana 15, que abre hacia el canal 13 y la tira 14. La ventana 15 se separa del segundo elemento de acoplamiento 5. En la posicion de la ventana 15 se proporciona el al menos un reactivo 16 dentro y/o sobre la tira 14, de manera que cualquier reaccion de los componentes de la sangre que se ponen en contacto con el al menos un reactivo 16 pueda verse a traves de dicha al menos una ventana 15.

En la primera parte 2 se proporciona un absorbente de sangre y/o elemento absorbente 17. Este elemento 17 puede formarse, por ejemplo, mediante o comprender un elemento 17 tipo esponja tal como pero sin limitarse a un elemento artificial que tiene celdas abiertas, poros o lo similar para absorber una cantidad de sangre, especialmente sangre total. Preferentemente, el tipo y el volumen del material del elemento 17 se escogen de manera que el elemento 17 pueda absorber una cantidad predefinida de sangre total. El elemento 17 en esta modalidad se coloca en el primer extremo 7 de la primera parte 2, dentro de la parte cillndrica 6. Una superficie 18 del elemento 17 puede formar una porcion extrema de la primera parte 2 y puede situarse libre en dicho extremo 7, de manera que, como se observa en la figura 6,

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la sangre B puede absorberse directamente por el elemento 17 desde, por ejemplo, un pinchazo en un dedo 19. Alternativamente, la sangre puede absorberse a partir de una fuente diferente, tal como un vial. Cuando la primera parte 2 se inserta dentro de la segunda parte 3, el primer y el segundo elementos de acoplamiento 4, 5 se acoplan, como se muestra, por ejemplo, en las figuras 2 y 3, el elemento 17 se coloca directamente sobre y preferentemente muy proximo o incluso en contacto con el filtro 12. El primer elemento 4 puede, por ejemplo, ajustarse a presion dentro del segundo elemento 5 o viceversa.

En esta modalidad el elemento 17 se fija en la primera parte 2. Alternativamente, el elemento 17 puede insertarse dentro de la primera parte 2 despues de haberse saturado con sangre.

La primera parte 2 comprende un deposito para llquido 20 a un lado del elemento 17 frente y alejado de la superficie libre 18 de este, de manera que cualquier llquido que viene de dicho deposito 20 solo puede dejar la primera parte a traves del elemento 17 y a traves del filtro 12 cuando la primera y la segunda partes 2, 3 se conectan correctamente. El deposito 20 puede reducirse en volumen, para empujar hacia afuera una cantidad de llquido 21 contenido en el, a traves del elemento 17 y del filtro 12. Esto tiene la ventaja de que el llquido que abandona el deposito 20 se empuja a traves del elemento 17 y por tanto diluye la sangre absorbida en el antes de pasar a traves del filtro 12. Preferentemente, el deposito 20 se proporciona opuesto a la superficie libre 18 de este. Preferentemente, la primera parte 2 se proporciona con un mecanismo 23 para conducir la reduccion del volumen entre un volumen maximo y un volumen mlnimo o volumen reducido al maximo. Preferentemente, el volumen del llquido 21 en el deposito 20 se escoge de manera que en la posicion de volumen maximo el deposito se llena sustancialmente y completamente con el llquido. Al definir un volumen reducido al maximo, la cantidad de llquido que se empuja a traves del elemento 17 se define de ese modo y por lo tanto se define la tasa de dilucion. Esto puede aumentar la precision de la prueba.

Cuando el deposito esta en la posicion de volumen reducido al maximo se proporciona una conexion de llquido 22 entre el deposito 20 y el al menos un reactivo 16 a traves del absorbente y/o elemento absorbente 17 y del filtro 12 proporcionado entre el elemento 17 y el al menos un reactivo 16. La conexion de llquido 22 se llena sustancialmente y completamente con el llquido 21 a partir del deposito 20 y los componentes de la sangre contenidos en el. En la modalidad en la que el filtro 12 se disena para filtrar al menos los globulos rojos de la sangre, el llquido en el canal 13 sera sustancialmente plasma sangulneo diluido. En la modalidad en la que el mecanismo 23 se disena para controlar el volumen mlnimo y maximo y por tanto definir la cantidad de llquido 21 que se empuja fuera del deposito 20, la relacion de dilucion es bien definida y puede ser, por ejemplo, 1:1 y 1:10 (volumen de sangre versus volumen de llquido que pasa a traves del filtro), por ejemplo, una relacion de dilucion entre 1:2 y 1: 8, tal como pero sin limitarse a 1:5, que significa que cuatro partes de llquido se anaden a una parte de sangre total. La relacion de dilucion puede definirse, ademas, como el volumen de plasma obtenido como tal o en el filtrado versus el volumen de llquido que pasa a traves del filtro, que puede ser, por ejemplo, pero sin limitarse a, entre 1:1 y 1:20.

En la modalidad que se muestra el deposito de llquido 20 puede comprender una camara 24 y un embolo 25, movil con relacion a dicho filtro 12 para reducir el volumen del deposito 20. Una salida 26 se proporciona para el deposito 20, que abre hacia el al menos un absorbente y/o elemento absorbente 17, preferentemente, a un lado de este enfrente y alejado de la superficie 18 y la segunda parte 3. El embolo 25 puede moverse en una direccion F paralela a la direccion longitudinal X, desde una primera posicion inicial como se muestra en las figuras 2 y 4 a una segunda posicion final como se muestra en las figuras 3 y 5. El deposito 20 se define basicamente entre el embolo 25 y las paredes de la camara 24, y tiene un volumen maximo cuando el embolo 25 esta en la posicion inicial y tiene un volumen mlnimo cuando el embolo 25 esta en la posicion final.

El movimiento del embolo 25 en la direccion F puede ser solamente una traslacion en dicha direccion F. Preferentemente, el mecanismo 23 se disenara de manera que la velocidad posible del embolo 25 se limite para reducir el riesgo de ejercer una presion excesiva al llquido. Para este proposito, por ejemplo, el embolo puede desviarse en una direccion opuesta mediante, por ejemplo, un muelle que trabaje sobre el embolo, de manera que para mover el embolo es necesaria una fuerza relativamente grande. En una modalidad alternativa el embolo puede proporcionarse con un canal para que pase el llquido 21 desde el deposito 20 hacia el elemento 17, de manera que al aumentar la velocidad conducira a un aumento de la presion contraria sobre el embolo 25, por tanto limita la presion del llquido que entra en el elemento 17. En una modalidad adicional el elemento 17 puede disenarse de manera que un aumento en la presion del llquido comprimira el elemento a tal extension que el debito de llquido que pasa alll de una parte a la otra puede reducirse, de manera que el exceso de presion del llquido sobre el filtro puede prevenirse nuevamente. Preferentemente, la presion sobre el filtro debe ser tal que los globulos rojos de la sangre no se danen. La lisis, especialmente pero no limitada a la lisis de los globulos rojos de la sangre puede interferir con un resultado preciso de la prueba y por tanto, debe evitarse tanto como sea posible.

En la modalidad que se muestra en las figuras 2 - 5 el mecanismo 23 se disena para iniciar y/o combinar el movimiento del embolo 25 en la direccion F con al menos un movimiento rotacional del embolo 25 y/o de un agarre 26 o viceversa. En la modalidad se muestra que la primera parte se proporciona con un agarre 26, giratorio sobre o alrededor de una parte de carcasa 27 de la primera parte 2 que comprende al menos la camara 24 y/o el embolo 25, de manera que una rotacion de dicho agarre 26 en la direccion R resulta en la reduccion del volumen del deposito, especialmente de la camara 24. El embolo 25 puede conectarse directamente al agarre 26 o puede ser una parte integral de este, de manera

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que el movimiento rotacional del agarre 26 rotara, ademas, el embolo 25. En la modalidad que se muestra, el embolo se forma por un elemento embolo.

En la modalidad que se muestra en, por ejemplo, las figuras 2 - 5 el agarre 26 se proporciona con al menos un diente 28 que se extiende radialmente hacia afuera desde una pared 39, y la parte de carcasa 27 con una pista gula 29 para dicho diente 28. Alternativamente el diente 28 puede proporcionarse en la parte de carcasa 27 y la pista 29 sobre el agarre 26 que se extiende alrededor de la parte de carcasa 27. La pista gula 29 se extiende de manera que una rotacion R del agarre alrededor del eje Z conlleva a un movimiento forzado del agarre 26 en una direccion lineal F. La rotacion en la direccion R conllevara a un movimiento hacia el absorbente y/o elemento absorbente 17. A este extremo la pista 29 tiene al menos una seccion media 30 que se extiende a un angulo a relativo al eje Z. La pista 29 puede extenderse al menos parcialmente como parte de una espiral alrededor de la parte de la parte de carcasa 27. En las modalidades puede haber dos o mas de tales pistas 29 y el correspondiente diente 28. En las modalidades a un primer extremo 31 la pista 29 puede proporcionarse con una restriccion 32, de manera que el diente 28 tiene que forzarse a traves de la restriccion 32 para que el diente entre en la seccion media 30. Esto significa que un usuario, cuando rote el agarre 26 fuera de la primera posicion o de la posicion inicial tendra una retroalimentacion tactil. La restriccion 32 reducira, ademas, el riesgo de que el agarre 26 se rote accidentalmente, y por tanto puede prevenirse el movimiento accidental del embolo 25 en la direccion F. De manera similar en el segundo extremo opuesto 33 de la pista 29 puede proporcionarse una restriccion 34, de manera que el diente 28 tenga que ser forzado a pasar la restriccion 34 al final de la seccion media 30 para llevarse a la posicion final, que nuevamente proporciona una restriccion tactil al usuario para alcanzar la posicion final.

Como puede verse especialmente en las figuras 1, 4 y 5 la pista o las pistas 29 pueden extenderse a traves de la parte de carcasa 27, lo que proporcionara una fabricacion facil, por ejemplo, mediante el moldeo por inyeccion. Despues, una cobertura 35, que cubre la pista 29, puede aplicarse sobre el agarre. La cobertura 35, puede ser, por ejemplo, una hoja fina de metal. El agarre 26 y la parte de carcasa 27 pueden proporcionarse, por ejemplo, con indicador visual 36, que indique cuando se alcancen la posicion inicial y/o la posicion final. En la modalidad que se muestra los indicadores 36 se disenan como flechas 36A, B, proporcionados sobre el agarre 26 y la parte de carcasa 27 respectivamente.

En la modalidad que se muestra en las figuras 2 y 3 la parte de carcasa 27 se proporciona con una ranura anular 38, en donde se extiende una pared anular 39 del agarre 26. Dentro de la pared anular 39 se proporciona un elemento embolo 40, que es hueco y tiene un extremo inferior 41 que se extiende dentro de una pared interior 42 de la ranura 38, y un extremo superior 43 que se extiende arriba de dicha pared interior 42. El extremo inferior 41 se proporciona con una pared extrema 44 que tiene una abertura central 45. Un sello 46 se proporciona en, o sobre, dicha abertura 45. Un extremo superior 47 del agarre 26 se proporciona con una pared superior extrema 48. La camara 24 se define sustancialmente por el elemento embolo 40 y la pared extrema superior 48. Una parte inferior 49 de la parte de carcasa 27, se conecta a, o forma parcialmente el primer elemento de acoplamiento 4. En la posicion inicial primera o de maximo volumen, como se muestra en la figura 2, se proporciona un espacio 51 entre la pared extrema inferior 44 del elemento embolo 40 y la parte inferior 49. En el espacio 51 se proporciona un elemento perforador 52, tal como una aguja o pincho, con un extremo afilado 53 frente a la abertura 45 y adyacente directamente al sello 46. La parte inferior 49 comprende un canal 50 que se extiende entre el filtro 12 y el espacio 51. El canal 50 se ensancha sobre el elemento 17, para una distribution amplia del llquido. Al menos un pasadizo 54 se proporciona a lo largo del elemento 52, desde el espacio 51 hasta el canal 50.

En la primera posicion inicial la camara 24 se rellena completamente con el llquido 21. Por tanto, si el agarre 26 se lleva hacia la parte extrema 49, el sello 46 se presiona contra y sobre el elemento perforador 52, y se abre la camara 24 hacia el espacio 51. El llquido fluira desde el deposito 20 y hacia el interior del canal 50. Mediante el movimiento del agarre 26 mas alla, primero se forzara la pared extrema 44 contra la parte inferior 49, lo que limita el movimiento del elemento embolo 40. El movimiento del agarre mas alla llevara entonces la pared superior extrema 47 hacia la parte inferior 49, por tanto se reduce el volumen de la camara 24 y por consiguiente del deposito 20, lo que empuja mas llquido fuera de la camara 24 y hacia el interior del espacio 51 y del canal 50 bajo presion controlada. El llquido se empuja hacia el interior y a traves del elemento 17, a traves del filtro 12 y de la conexion de llquido 22, que puede comprender o conectar al canal 13, y entra en contacto con el reactivo 16. En el elemento 17 la sangre se diluye por el llquido, donde despues la sangre y el llquido combinados se filtran por el filtro 12, antes de ponerse en contacto con el reactivo 16. Por tanto, el llquido con el plasma abandonaran el filtro como un filtrado. Debido a que el agarre tiene una posicion inicial fija y una posicion final fija, la cantidad de llquido que abandona la camara 24 se define bien, y por tanto se define bien la relacion de la dilucion.

En una modalidad el agarre puede disenarse para rotar con relation a la parte de carcasa para obtener una traslacion de al menos el elemento embolo para reducir el volumen del deposito, en donde durante tal rotacion puede proporcionarse un intervalo en el que la rotacion no proporciona o solamente proporciona una extension muy limitada para dicha traslacion, especialmente y directamente despues de perforar el sello 46, para permitir que se libere y/o se iguale la presion en la primera parte, especialmente sobre el sello 46, antes de reducir mas el volumen mediante la rotacion adicional del agarre que resulta en una traslacion ulterior.

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En la pared extrema superior de la camara 24 una abertura adicional 55 puede proporcionarse, bloqueada por un sello adicional 56. A traves de esta abertura la camara puede llenarse, y/o pueden anadirse los aditivos a la camara 24 o a los llquidos dentro de ella. Esto puede realizarse antes de colocar el sello 56 sobre la abertura 55, o mediante la inyeccion de tales aditivos a traves del sello.

En la figura 7 se describe una modalidad alternativa de un dispositivo 1 de la invencion, en donde las partes y las caracterlsticas se refieren mediante los mismos signos de referencias o similares como se usaron en las figuras 1 - 6 para las mismas o similares partes o caracterlsticas. Esta modalidad solamente se describira en la medida en que sea sustancialmente diferente de la primera modalidad.

En la figura 7 la segunda parte 3 tiene una direccion longitudinal Y que se extiende sustancialmente paralela al eje X de la primera parte 2. La tira 14 se extiende en un canal 13 que se extiende en dicha direccion longitudinal Y, a partir del filtro 12 hasta al menos el, o cada reactivo 16. La segunda parte 3 puede ser sustancialmente cillndrica y puede proporcionarse con un reborde 57 que se extiende alrededor de la parte 3, para soportar la segunda parte 3, por ejemplo, entre dos dedos de una mano o en una abertura 58 en un soporte 59, que se muestra en llneas fantasma en la figura 7, a traves de la que parte de la segunda parte 3 puede pasar pero el reborde 56 no puede pasar. En esta modalidad el agarre 26 puede disenarse como se describio antes con respecto a las figuras 2 - 6 o ser movil en una direccion lineal F solamente para reducir el volumen del deposito 20. En la ultima modalidad, que puede usarse, ademas, con la configuracion de la segunda parte 3 de las figuras 1 - 6, el embolo 25 puede moverse libremente, en donde el llquido que abandona el deposito a traves del canal 50 que tiene una seccion transversal restringida, puede proporcionar una fuerza contraria sobre el embolo, para restringir su velocidad de movimiento. En la modalidad que se muestra en la figura 7 la pared 39 del agarre se desliza en la ranura 38 de la parte de carcasa 27, en donde un cierre de deslizamiento 60 se proporciona a ambos lados de la pared 39, contra las paredes internas y externas 42 y 61 de la ranura 38, de manera que estas son sustancialmente hermeticas. A traves de la pared mas externa 61 cercana a la porcion final 49 de la parte de carcasa 27 se proporciona una abertura 62 que tiene una seccion transversal pequena, de manera que el aire atrapado en el interior de la ranura 38 solo puede expedirse a traves de dicha abertura 62 con un debito restringido, de manera que nuevamente se restringe la velocidad con la cual el embolo 25 puede presionarse hacia la posicion final. El aire en la ranura 38 puede actuar como un colchon de aire o elemento muelle, que proporciona una fuerza contraria sobre el embolo 25. Una abertura 63 similar puede proporcionarse en el agarre 26, para airear el espacio 64 dentro del agarre 26 sobre la pared interna 42.

En la modalidad que se muestra en la figura 7 se proporciona un sello 46 sobre el canal 50 al lado del deposito 20. Dentro del deposito 20 el elemento perforador 52 se proporciona, conectado al embolo 25 y con el extremo afilado 53 frente al sello 46. Despues de presionar el agarre 26 con el embolo 25 hacia abajo en la direccion F, el elemento 52 perforara a traves del sello 46 y dentro del canal 50. El mecanismo 24 y/o la via del recorrido 65 entre las posiciones inicial y final del embolo 25, por ejemplo, definido por un extremo superior de la pared mas externa 61 de la parte de carcasa y un extremo inferior enfrente (en una posicion como se muestra en la figura 7) de una parte de la pared mas externa 66 del agarre 26, puede ser de manera que el extremo 53 se detendra antes de alcanzar el elemento 17. El elemento 52 puede tener una seccion transversal diferente de la del canal 50, en tamano y/o forma, de manera que al menos un pasadizo 54 se crea entre el elemento 52 y la pared del canal 50, para el paso del llquido 21 por ahl a traves o a lo largo del elemento 52 dentro del canal 50. En la modalidad que se muestra la seccion transversal puede estar, por ejemplo, en la forma de un signo de sumar.

En la modalidad de la figura 7 la segunda parte 3 puede fabricarse, al menos parcialmente, de un material transparente, de manera que al menos el reactivo o los reactivos 16 puedan verse a traves de las paredes 66, 67, de la parte 3, al menos cuando hay una reaccion visual entre el reactivo y el llquido que fluye en el canal 13 y/o a traves de la tira 14. En la modalidad que se muestra la segunda parte 3 comprende una pared mas externa 66 y una pared interna 67, la ultima define el canal 13. La tira 14 se mantiene separada de la pared 67 mediante elementos separadores 68. En las modalidades al menos la pared mas externa 66 puede omitirse.

Quedara claro que las partes de las modalidades que se muestran en las figuras 1 - 7 podrlan combinarse en modalidades alternativas, cuyas combinaciones y permutaciones se consideran haberse descrito en la presente descripcion igualmente, como tener las partes diferentes como tal individualmente. Especialmente la primera y la segunda partes 2, 3 como se describe en la presente descripcion en dispositivos 1 combinados debe considerarse, ademas, haberse descrito individualmente y/o como parte de un estuche de partes. En tal estuche de partes pueden incluirse, ademas, una lanceta o perforador o un elemento punzante para pinchar un dedo o tal parte del cuerpo y extraer alguna sangre para absorber y/o absorberse en y/o sobre dicho elemento 17.

Las figuras 8 - 10 muestran una modalidad alternativa de un dispositivo 1 de la presente descripcion. En el analisis de las figuras 8 - 10 se analizaran las diferencias fundamentales con las modalidades analizadas anteriormente. Las mismas partes o similares y las funciones se referiran por los mismos signos de referencia o similares. La modalidad difiere principalmente de las modalidades anteriores tan discutidas en la primera parte 2, en la que se modificaron principalmente el agarre y el deposito.

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En la modalidad de las figuras 8 - 10 el embolo 25 comprende un canal 20A que tiene una seccion transversal relativamente pequena D1, que en el extremo 25A al lado de la camara 51 puede tener una parte 20B ensanchada, por ejemplo, que tiene una seccion transversal D2. En el agarre 26 sobre un extremo 25B del embolo 25 puede proporcionarse una parte 20C del deposito 20, que tiene una seccion transversal D3. El canal 20A, la parte mas ensanchada 20 B y la parte 20C del deposito, en conjunto de manera efectiva, definen el volumen del deposito 20 cuando el dispositivo esta en la primera posicion. En el extremo inferior 25A del embolo la parte ensanchada 20B se hermetiza mediante un sello 45. En el agarre 26 nuevamente puede proporcionarse una abertura 55 cerrada hermeticamente. El canal 20A tiene, preferentemente, una seccion transversal D1 de manera que se restringe el flujo a traves de dicho canal 20A. Esto puede limitar el flujo de llquido para fluir desde la parte 20C del deposito 20.

En esta modalidad el agarre 26 y la parte de carcasa 27, ambos, comprenden sellos tales como anillo O S que se extiende alrededor del embolo 25 para impermeabilizacion ajustada del embolo con relacion a la parte de carcasa 27 y/o el agarre 26. En las modalidades pueden usarse otros sellos, tales como, por ejemplo, un Luer Lock en lugar de anillos O entre el embolo y la parte de carcasa, para permitir que el aire que escapa pase dicho sello. Nuevamente se proporciona en el espacio 51 un elemento perforador 52 con un extremo afilado 53. En la primera posicion como se muestra en la figura 8 el extremo afilado 53 esta a corta distancia del sello 45. Las aberturas 70 alrededor del elemento 52 y dentro del canal 50 son de manera que la velocidad del llquido que fluye a traves del canal 50 no sera demasiado alta.

En esta modalidad nuevamente la parte de carcasa 27 y el agarre 26 se proporcionan con al menos un diente 28 y una pista gula 29 que cooperan con estos. La pista gula 29 nuevamente tiene una seccion media 30 que se extiende mayormente a un angulo a con relacion al eje Z, de manera que es sustancialmente espiral alrededor de una parte de la parte de carcasa y/o el agarre. Nuevamente, los primeros y segundos extremos 31, 33 pueden proporcionarse con las restricciones 32, 34 como se discutio antes, para los mismos propositos. En esta modalidad entre el primer extremo 31 y la seccion media 30 hay una porcion 30A de la pista 29 que comprende una primera parte 30b que se extiende sustancialmente paralela al eje Z, adyacente al primer extremo 31 y una segunda parte 30C que se extiende sustancialmente perpendicularmente a dicho eje Z, o al menos a un angulo hacia dicha primera parte 30B, entre la primera parte 30B y la seccion media 30. Nuevamente, la rotacion del agarre 26 eventualmente conducira a una traslacion del agarre 26 y/o del embolo 25 con relacion a la parte de carcasa 27, entre la primera posicion como se muestra en la figura 8 y comparable a la figura 2 y la segunda posicion como se muestra en la figura 10 y comparable a la figura 3, que reduce el volumen del deposito 20 y empuja una cantidad predeterminada de llquido desde el deposito 20 a traves del elemento 17. En esta modalidad, sin embargo, el al menos un diente 28 tendra que pasar la porcion 30A antes de entrar en la seccion media 30. Con el diente 28 en la primera parte 30B, el agarre 26 se trasladara en la direccion Z sobre una distancia igual al largo de dicha primera parte 30B, por tanto perfora el sello 45 mediante el elemento 52. Debido a que el diente 28 al final de la parte 30B se engarzara a una porcion de la pared de la segunda parte 30C que se extiende a un angulo con relacion a la primera parte 30B, como se muestra en la figura 9, dicha traslacion se detendra, al menos temporalmente. Esto permite igualar la presion y/o liberar la presion en el deposito y/o sobre el sello 45 perforado. En esta posicion el embolo 25 puede moverse con su extremo inferior 25A contra la parte inferior del espacio 51.

Desde esta posicion una rotacion adicional del agarre 26 con relacion a la parte de carcasa 27 movera el diente a traves de la segunda parte 30C y dentro de la seccion media 30 para la traslacion adicional del agarre 26 con relacion al embolo 25 como se describio anteriormente. Esto reducira adicionalmente el volumen del deposito 20 y empujara la cantidad predeterminada de llquido fuera del deposito y a traves del elemento 17 y del filtro 12.

En esta modalidad el canal 20A puede actuar como una restriction del flujo para el llquido que fluye desde la parte 20C del deposito en el agarre, que puede anadirse para restringir la velocidad posible de traslacion del embolo y el agarre y por tanto del flujo con el que el llquido pasa a traves del elemento 17 y dentro del filtro 12. Ademas, el canal 20A puede asegurar que el embolo 25 primero se empujara con el sello 45 sobre el elemento 52 y contra la parte inferior del espacio 51 antes de que una cantidad significativa de llquido se presione desde la parte 20C del deposito dentro del canal 20A y a traves del elemento 17, por tanto previene que parte del llquido quede atrapado dentro del espacio 51. Un efecto adicional del canal 20A puede ser que este expanda el embolo 25 y el agarre 26 para proporcionar un volumen similar del deposito como se proporciona en las modalidades descritas anteriormente, lo que puede tener la ventaja que se necesite una traslacion mas larga para alcanzar la segunda posicion, en comparacion con las modalidades descritas anteriormente.

En las modalidades de la description el filtro 12 puede ser un filtro de un solo cuerpo o puede ser un filtro estratificado, capas diferentes que tienen propiedades diferentes. En las modalidades que se muestran el filtro 12 puede tener, por ejemplo, cuatro capas, de las cuales al menos dos de las capas mas externas 69 son capas que soportan poros anchos, y en donde al menos una de las capas intermedias de las capas mas externas puede ser una capa de filtro 70 que tiene poros mas pequenos, de manera que los globulos rojos de la sangre no pueden pasar dicha capa de filtro que tiene los poros mas pequenos. La otra capa 71 de las dos capas intermedias puede tener, por ejemplo, poros mas anchos que la capa de filtro 70 y los mismos o mas pequenos que las capas mas externas 69, de manera que esta puede filtrar previamente el llquido antes de entrar a la capa de filtro 70 que tiene los poros mas pequenos. En otras modalidades pueden usarse un numero diferente de capas y/o capas que tienen diferentes propiedades de filtration y/o de soporte,

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en dependencia, por ejemplo, de la naturaleza de la muestra para usarse, la capacidad de filtracion deseada y el flujo deseado del llquido a traves del filtro y/o el debito deseado y la presion del llquido sobre ambos lados del filtro 12. A manera de ejemplo, solo un filtro 12 en las modalidades puede comprender dos capas mas externas 69 hechas de fibra de material de filtro que tienen un tamano de poro de manera que este retiene partlculas mas grandes que aproximadamente 3 a 3.1 pm, una capa de filtro intermedia 70 que tiene un tamano de poro para filtrar partlculas mas grandes que aproximadamente 1 pm y una segunda capa intermedia 71 que nuevamente tiene un tamano de poro para filtrar partlculas mas grandes que aproximadamente 3 a 3.1 pm. El material de filtro puede, a manera de ejemplo, ser material de filtracion llquido tal como papel de fibra de vidrio libre de aglutinantes como se fabrica por Ahlstrom, Ee.UU., por ejemplo, grado 141 para las capas mas externas 69 y la segunda capa intermedia 71, y un grado 121 para la primera capa intermedia 70. Estos tamanos y materiales, as! como tambien la configuracion del filtro 12 son proporcionados solamente a manera de ejemplo y de cualquier manera no deben comprenderse como limitantes de la descripcion.

La figura 11a muestra una modalidad adicional de conformidad con la invencion, que muestra un dispositivo 1 donde la primera parte 2 se coloca sobre una segunda parte 3 y donde el dispositivo se representa en una primera posicion de la primera parte 2. La Figura 11 b muestra el dispositivo 1 en una segunda posicion de dicha parte 2, donde el embolo presiona encima del elemento perforador 52. Aqul, la segunda parte 3 es similar a, o identica a la segunda parte 3 como se muestra en la figura 1. El agarre 26 se disena nuevamente para girarse alrededor del eje Z por medio, al menos, de un diente 28, que se extiende radialmente hacia afuera desde el agarre 26 que engarza con una ranura y/o la pista 29 en el interior de la parte de carcasa 27 de la segunda parte 2. Para llevar la primera parte desde la primera a la segunda posicion, el agarre 26 tiene que rotarse con 180 grados o mas, preferentemente, 270 grados o mas, mas preferentemente, al menos 360 grados o mas, de manera que el embolo 40 se mueve entre la primera y la segunda posicion. Esto reducira la velocidad con la que el embolo 40 se movera medianamente entre la primera y la segunda posicion, especialmente dado que el agarre 26 tendra que liberarse y retomarse por un usuario antes de alcanzar la posicion final.

En todas las modalidades la segunda parte puede comprender o formarse por un receptaculo para recibir el filtrado para almacenamiento y/o transporte y/o tratamiento y/o prueba en una manera diferente que para los reactivos, tales como por radiacion, iluminacion, visualizacion o de cualquier otra manera. El filtrado puede, por ejemplo, almacenarse en frio en dicho receptaculo 80. La figura 12 muestra una modalidad en la cual, a manera de ejemplo solamente, la segunda parte 3 se muestra como un frasco 80. En el ejemplo, el frasco 80 comprende una parte contenedor 81 para recibir la primera parte 2 en la misma manera como se describio en las modalidades anteriores. En la parte contenedor 81 al menos se proporciona un filtro 12. La parte contenedor 81 se proporciona, preferentemente, con un segundo medio de acoplamiento y es preferentemente, liberable del frasco 80, de manera que una tapa 82 pueda cerrarse sobre el frasco 80 y la parte contenedor 81 pueda descartarse. La primera parte 2 puede, por ejemplo, ser una primera parte 2 correspondiente a la primera parte 2 de la figura 11. Sin embargo, una primera parte 2 diferente adecuada puede usarse igualmente, tal como una primera parte de la figura 2 o 3.

Con un dispositivo y metodo de la presente description puede realizarse la evaluation de muestras mas rapido y mas exacta que con los metodos y dispositivos convencionales. Lo cual puede ser de muy alta signification, especialmente cuando se evaluan irregularidades que requieren intervenciones instantaneas cuando se detectan, tal como problemas de salud que amenazan la vida. Con un dispositivo de la presente descripcion la presion que se ejerce sobre la muestra es bien controlada, independientemente de la persona que realiza la prueba, lo que anade precision y fortaleza a los resultados que dependen de la prueba. La operation del dispositivo es simple e intuitiva, lo que previene errores durante la operacion, que pueden ser altamente importantes, especialmente en situaciones que amenazan la vida. El dispositivo, especialmente la primera parte con el filtro puede usarse con todo tipo de plataformas de pruebas conocidas en la tecnica, que hace esto aplicable universalmente. El factor de dilution puede definirse exactamente y puede adaptarse facilmente, por ejemplo, mediante la definition de un volumen diferente del deposito, una via de recorrido diferente entre las dos posiciones extremas del agarre y/o mediante el remplazo del absorbente y/o elemento absorbente 17 por un elemento 17 diferente que tiene una capacidad diferente. Por ejemplo, mediante el ajuste de la pista, por ejemplo, mediante la variation del angulo de la section media y/o el diseno y las posiciones de las restricciones y/o la portion 30A, el radio entre la rotation del agarre y la reduction del volumen del deposito pueden ajustarse, para ajustar el flujo de llquido desde el deposito, como puede ser la porcion del canal en el embolo y/u otros canales y/o aberturas del dispositivo.

En una modalidad alternativa la primera parte puede disenarse como se describio anteriormente, en donde en lugar de un agarre giratorio el embolo 40 en la primera posicion se desvla hacia el elemento perforador 52, por ejemplo, mediante un muelle como un elemento de desvlo, de manera que el sello 45 se acerca al elemento perforador 52. Un elemento trabador puede proporcionarse para mantener el embolo 40 en la primera posicion. Mediante la liberation del elemento trabador el embolo puede liberarse, de manera que la fuerza de desvlo del elemento que media el desvlo se libera y el embolo se empuja hacia adelante, y se perfora el sello 5 sobre el elemento perforador 52 y despues, se reduce el volumen de la camara y se empuja el llquido a traves del elemento 17, similar a las modalidades anteriores. El elemento que media el desvlo preferentemente proporciona una fuerza sustancialmente constante sobre el embolo hacia la segunda posicion final, de manera que, preferentemente, el llquido se empuja a traves y/o pasa el elemento 17

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y a traves del filtro 12 con un flujo sustancialmente constante, suficientemente alto para proporcionar una prueba suficientemente rapida pero sin la lisis de los globulos rojos de la sangre.

En las modalidades que tienen un agarre 26 giratorio para mover el embolo que avanza hacia el filtro 12 y/o elemento 17, la pista o pista 29 se extiende sobre un largo suficiente y un angulo para tener que girar el agarre 26 con relacion a la parte de carcasa 27 sobre un angulo sustancial, preferentemente, tal un angulo alrededor del eje Z que un usuario tiene para reposicionar su mano durante la rotacion. Esto evitara adicionalmente una velocidad demasiado alta del embolo y/o una reduccion demasiado rapida del volumen de la camara 24. La pista o pistas 29 se extienden preferentemente, sobre al menos 180 grados, mas preferentemente, sobre al menos un angulo de mas que 270 grados alrededor del eje Z. El angulo sobre el cual el agarre 26 tiene que rotarse alrededor del eje Z puede ser, por ejemplo, aproximadamente 360 grados o mas. Esto reducira la velocidad con la que el embolo se movera medianamente entre las posiciones finales.

A continuacion se describiran los experimentos que explican el uso de los dispositivos, estuches de partes y metodos de conformidad con la descripcion.

Un dispositivo de la presente invencion puede proporcionarse con un reactivo para la deteccion, es decir, para la determinacion de la presencia cuantitativa, semicuantitativa o cualitativa de un analito tal como una sustancia qulmica o biologica o microrganismo en la sangre, plasma o cualquier otro filtrado que se obtiene con la primera parte, por ejemplo, pero sin limitarse a excrementos humanos o animales tales como orina, heces, saliva, tejidos corporales o lo similar. El reactivo puede proporcionarse en cualquier posicion y forma adecuada, con tal que este se ponga en contacto con el plasma y/o el filtrado de manera que pueda obtenerse una reaccion perceptible entre el reactivo y el filtrado si un reactante para dicho reactivo se encuentra en el filtrado en una cantidad detectable. Esto puede ser sobre una tira, como se discutio, pero puede ser, ademas, o en lugar de proporcionarse completamente o en parte en el llquido, en el elemento 17, en el filtro 12, sobre una pared del canal 13 o combinaciones de estos. Ademas, pueden usarse los reactivos que son reactivos de multiples componentes, de manera que solo ocurre una reaccion si ellos se combinan en el filtrado.

Por ejemplo, puede usarse un reactivo que puede indicar la presencia de anticuerpos contra antlgenos no conocidos (organismos) por ejemplo, Helicobacter pylori o antlgenos nativos que indiquen un estado patologico o trastorno.

Ademas, pueden usarse reactivos que indiquen la presencia de antlgenos tal como una medida en la que deban estar presentes o que se exceda un llmite, por ejemplo, antlgenos por los que puedan demostrarse la presencia de tumores o pueda hacerse crelble, o que indiquen un exceso o deficiencia de factores de la coagulacion.

Ademas, pueden aplicarse reactivos con los que pueda determinarse, por ejemplo, la presencia de vitaminas.

Ademas, pueden usarse reactivos con los que, mediante un exceso o subvaloracion de un umbral o llmite, puede indicarse si el exceso es perjudicial para el paciente. Tales reactivos pueden combinarse ventajosamente con un reactivo que indique el exceso o la subvaloracion de ese llmite. Los reactivos adicionales pueden aplicarse con lo que un nivel sangulneo terapeutico de una sustancia puede determinarse, por ejemplo, un farmaco o toxina, tal como un farmaco que, para su funcionamiento optimo, depende de un nivel optimo en sangre que no puede excederse debido a, por ejemplo, efectos adversos indeseables. Ademas, como se menciono pueden aplicarse combinaciones de reactivos. Estos reactivos y aplicaciones solamente son de curso ilustrativo, y no deben interpretarse restrictivamente.

En la presente descripcion los terminos “reactivo” o “reactivos” o una redaccion similar deben comprenderse, al menos, para incluir anticuerpos o enzimas, lo que significa que pueden aplicarse pruebas que son basadas en anticuerpos o enzimas.

Diversos reactivos y otros marcadores pueden aplicarse, tales como antlgenos, reactivos qulmicos, enzimas, marcadores qulmicos y lo similar. Los reactivos y marcadores podrlan usarse para indicar problemas con el corazon, hlgado, rinon, u otros organos, trastornos de la glucosa, tal como diabetes, trastornos del colesterol, defectos en una o mas hormonas o citocinas, parametros diagnosticos en general y tales, anomallas virales o bacterianas tales como influenza, malaria, hepatitis, HIV, inflamacion, MS, ME, y otros indicadores, especialmente para problemas de salud, existentes y/o potenciales. Las desviaciones en este contexto deben comprenderse como tales desviaciones de los valores normales, de lo que puede esperarse que para el paciente en cuestion, estos valores indican o deben indicarle a un medico que son necesarias investigaciones adicionales o intervenciones para, por ejemplo, la administracion de farmacos, llquidos o nutrientes o para intervenciones quirurgicas.

Los ejemplos de reactivos, que por ningun medio limitan la invencion, incluyen, por ejemplo, anticuerpos para virus, por ejemplo, HTLV I y/o II, Influenza o marcadores de las funciones de organos, tales como de problemas cardiacos o cardiovasculares, ataque cardlaco (infarto del miocardio) y/o infarto cerebral, anticuerpos monoclonales, reactivos de coagulacion tales como reactivos anticoagulantes lupus sensibles o insensibles, antlgenos del PSA, HBS-1, anticuerpos HLA, HbA(1c) o GliHb en las mediciones de la hemoglobina.

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En un primer ejemplo de una modalidad de un reactivo 16, los anticuerpos 2 H-FABP (Hycult), que son adecuados para la demostracion de H-FABP se aplicaron sobre la tira 14. En el deposito 20 se proporciono una cantidad de diluyente (tampon) (por ejemplo, 300 microlitros) como dicho llquido 21. Una cantidad de sangre se absorbio mediante el elemento 17, por ejemplo, 30 microlitros de sangre. Mediante el movimiento del agarre 26 y por lo tanto del elemento embolo 40, se empujaron 180 microlitros del tampon a traves del elemento y del filtro que resulto en 75 microlitros de plasma diluido, que se analizo mediante la tira 14 (dilucion efectiva del plasma sangulneo de aproximadamente 7 veces). Este plasma se puso en contacto con el reactivo 16, como resultado de lo cual el reactivo complejo H-FABP acumulado en la tira y descolorado, de un color neutral paso a un color rojo, visible claramente desde el exterior a traves de la ventana. Mediante esto, se encontro que el nivel de H-FABP en la sangre era mas alto que un umbral de 4.4 ng/ml. Las mediciones controles de sangre total extralda por recoleccion venosa y evaluadas en un laboratorio demostraron que la sangre tenia verdaderamente un valor por encima de ese umbral.

Una modalidad de especial preferencia para la deteccion de marcadores para la funcion del rinon, del hlgado y/o para infarto cerebral se describira mas abajo.

Esta modalidad de preferencia especial puede aplicarse en particular a la deteccion cuantitativa, semicuantitativa o cualitativa de FABP en muestras de tejido corporal o llquidos corporales. La protelna de union a acidos grasos (FABP) es una protelna conocida como un marcador temprano del dano en tejidos especlficos en donde cada tipo de tejido se caracteriza por su propio tipo de FABP. Las FABP son protelnas citoplasmaticas de 15 kDa implicadas en la union intracelular de los acidos grasos y se expresan en nueve isoformas diferentes, cada una denominada segun el tejido en el cual se describio por primera vez.

• Corazon-FABP (H-FABP o de tipo cardlaco)

• Hlgado-FABP (L FABP o de tipo hepatico);

• Intestino-FABP (I-FABP o de tipo de intestino delgado),

• Ileo-FABP (ILBP o de tipo iliaco)

• Cerebro-FABP (B-FABP o de tipo cerebral)

• Adipocito-FABP (A-FABP o de tipo adiposo)

• Epitelial/epidermica-FABP (E-FABP o de tipo epitelial),

• Testlculo-FABP (T-FABP o de tipo testicular) y

• Mielina-FABP (M-FABP o de tipo de celula nerviosa).

Hasta la fecha, no existen pruebas rapidas para FABP que puedan proporcionar resultados suficientemente precisos en menos de cinco a seis minutos. La determination rapida de FABP puede conducir a un diagnostico rapido de dano tisular y al comienzo temprano con la terapia apropiada en particular en afecciones que amenazan la vida tales como las enfermedades del corazon o el infarto cerebral. Las mediciones sobre las cantidades de FABP especlfica pueden, entre otras, pero no exclusivamente, aplicarse para el diagnostico de dano al miocardio (H-FABP), dano hepatico (L-FABP), dano renal (L-FABP y/o H-FABP), dano intestinal (que incluye I-FABP, ILBP y/o L-fAbP), dano cerebral (B-FABP y/o H- FABP), en el diagnostico de diversos trastornos del metabolismo de los llpidos, diabetes, trastornos inflamatorios, esclerosis multiple, ateroesclerosis, cancer y rechazo de tejidos despues del trasplante y como indicadores pronosticos y/o de estratificacion de riesgo en pacientes con AMI, embolismo pulmonar agudo y/o sepsis severa y/o choque septico.

La presente invention proporciona la deteccion de basicamente cualquiera de las FABP anteriores en cada isoforma en las que estas pueden presentarse en un animal o un paciente humano, en donde la deteccion, en conjunto con la especificidad deseada, se realiza, preferentemente, sobre las bases de un inmunoensayo, y preferentemente, en sangre.

Los inmunoensayos para la deteccion de FABP son en principio conocidos por el experto, y tales ensayos son adecuados para usar en la presente invencion. Un ejemplo de un inmunoensayo disponible toma la forma de un ELISA sandwich (Pelser MMAL. 2004. "Protelna de union a acidos graso como un marcador plasmatico para el dano tisular." Tesis de la Universidad de Maastricht, Holanda ISBN 90-9018161-X, Capltulo 3, p. 43-51; Wodzig KWH, Pelser MMAL, van der Vusse GJ, Roos W, Glatz JFC. Ensayo inmunoabsorbente unido a enzima en una sola etapa (ELISA) para la protelna de union a acidos grasos del plasma. Ann Clin Biochem 1997; 34:263 - 8). Este ensayo, con una duration total de 45 minutos, es el ELISA para H-FABP mas rapido, suficientemente especlfico y sensible disponible comercialmente (Hycult Biotechnology). Este ensayo hace uso de dos anticuerpos monoclonales diferentes, cada uno dirigido a un epltopo diferente de H-FABP. Uno de estos anticuerpos monoclonales actua como anticuerpo de captura y se une/inmoviliza a una superficie de deteccion. El otro anticuerpo se conjuga con peroxidasa de rabano picante (HRP) y sirve como anticuerpo de deteccion. Los anticuerpos monoclonales que se usan en este ensayo se describen con mas detalle en otra parte (ver arriba Pelser MMAL. 2004, Capltulo 3, p. 43-51 y Capltulo 4, p. 53-67; Roos W, Eymann E, M Symannek, Duppenthaler J, Wodzig KWH, Pelser MMAL, Glatz JFC. "Anticuerpos monoclonales contra la protelna de union al acido graso del corazon humano." J Immunol Methods 1995; 183:149-53). La deteccion puede, despues de la formation de un complejo anticuerpo de captura/H-FABP/anticuerpo de deteccion, detectarse mediante el uso de un sustrato especlfico de la enzima hRp, tal como el cromogeno tetrametil bencidina (TMB) que despues de la conversion por la HRP proporciona un producto de la reaction azul que se detecta espectrofotometricamente al medir la absorcion a 450 nm.

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El experto comprendera que en los aspectos de la presente invencion pueden usarse diversas variaciones de la anterior deteccion principal.

Por tanto, los anticuerpos contra otros tipos de FABP ademas de H-FABP pueden usarse para detectar otras isoformas de esta protelna. Ademas, pueden usarse otros epltopos para la union del anticuerpo a FABP. El desarrollo de anticuerpos contra otros epltopos de una FABP particular para la cual ya esta disponible un anticuerpo para un epltopo, o el desarrollo de anticuerpos que exhiben especificidad de union con otras isoformas de FABP esta dentro del alcance de un experto y no necesita describirse en detalle aqul.

Un anticuerpo que puede aplicarse como un reactivo en los aspectos de la presente invencion puede ser un anticuerpo policlonal o monoclonal. Preferentemente, se usan los anticuerpos monoclonales. Los anticuerpos pueden incluir inmunoglobulinas completas o un fragmento de estas, en donde las inmunoglobulinas pueden seleccionarse a partir de diferentes clases e isotipos, tales como IgA, IgD, IgE, lgG1, IgG2a, lgG2b e lgG3, IgM, etc. Los fragmentos de estas pueden comprender Fab, Fv y F(ab')2, Fab', y lo similar. Ademas, los agregados, pollmeros, y conjugados de las inmunoglobulinas o fragmentos de estas pueden aplicarse adecuadamente siempre que se mantenga la afinidad de union para una FABP dada.

El elemento que es comunmente referido en la presente descripcion como reactivo 16 se formara usualmente por el anticuerpo de captura. Este anticuerpo de captura puede fijarse a la superficie de la tira y/o en esta, de manera que el anticuerpo de captura este o pueda estar en contacto directo con el plasma sangulneo. La tira 14 puede llenar el canal 13 completo o solamente parte de este. Alternativamente, la tira 14 puede dejarse afuera, de manera que el canal 13 en la segunda parte 3 es abierto, en donde el reactivo 16 puede adherirse a la pared del canal 13 o puede proporcionarse en, por ejemplo, forma llquida o solida en el interior del canal 13. La adherencia del anticuerpo de captura a una superficie solida, por ejemplo, puede lograrse a traves de un enlace biotina-estreptavidina. El anticuerpo de captura puede proporcionarse opcionalmente con un marcado paramagnetico de manera que este pueda recolectarse a partir de un llquido e inmovilizarse en una fase solida en cualquier momento durante la reaccion mediante atraccion magnetica.

Preferentemente, la tira que porta el reactivo, por su naturaleza porosa, soporta la absorcion del plasma diluido despues de pasar el filtro 12. Los poros pueden comprenderse como que incluyen pero no se limitan a tener canales de capilares o poros para la transportation de llquido tal como plasma diluido. Preferentemente, la tira 14 que porta el reactivo es capaz de absorber mucho o incluso la mayorla del plasma diluido, separado. La FABP presente en la fase llquida se encuentra preferentemente en una forma en donde esta forma complejo con un anticuerpo de deteccion. Es altamente preferido que la tira 14 que porta el reactivo soporte un flujo capilar, por el cual el plasma es arrastrado dentro del elemento 14 poroso que porta el reactivo bajo la influencia de la fuerza capilar, como un resultado de lo que es puesto en contacto con el reactivo inmovilizado (es decir, el anticuerpo de captura inmovilizado). Por ejemplo, el plasma puede en parte fluir bajo la tira y succionarse dentro de la tira mediante dicha fuerza capilar.

Preferentemente, la prueba de FABP de la presente invencion es en la forma de un LFIA (Inmunoensayo de Flujo Lateral) o ELISA sandwich, en donde, ademas, se usa un anticuerpo de deteccion para la deteccion de la union de la FABP al anticuerpo de captura. La union del anticuerpo de deteccion a la FABP puede ocurrir en principio, antes, durante o despues de la union de la FABP al anticuerpo de captura. Preferentemente, primero se permite que el anticuerpo de deteccion se una a una FABP presente en la muestra del cuerpo y despues, este complejo se permite unirse al anticuerpo de captura inmovilizado o para ser inmovilizado. Para lograr esto el anticuerpo de deteccion puede anadirse muy adecuadamente al llquido diluyente en la camara 24 del dispositivo 1 de la invencion. En una modalidad alternativa, el anticuerpo puede anadirse al (preferentemente poroso) elemento 17 con el que la cantidad conocida de sangre se absorbe y/o absorbe. Tal un elemento 17 puede tomar la forma de una esponja, en donde se presenta el anticuerpo de deteccion de manera que este puede mezclarse directamente con la muestra de sangre, antes de que el llquido diluyente se empuje a traves del elemento 17.

En otra modalidad alternativa, el anticuerpo puede anadirse al filtro 12 o en el canal 13 o, preferentemente, a la tira 14. Es importante que el anticuerpo de deteccion se mezcle homogeneamente con la sangre o con el plasma sangulneo bajo las condiciones en que ocurre, o es posible, la union a la FABP. En una modalidad en donde se aplica un anticuerpo de captura que es para inmovilizarse y en la que primero se permite que reaccione con la FABP en la fase llquida, este anticuerpo de captura puede anadirse al diluyente, a un elemento que arrastra la sangre o a un elemento de recoleccion de sangre o al plasma despues de la separation del plasma por el filtro 12. De hecho, cada combination posible o secuencia es posible, siempre que el resultado final proporcione un complejo inmovilizado de anticuerpo de captura-/FABP-/-anticuerpo de deteccion. Obviamente, pueden usarse, ademas, otros principios de ELISA, por ejemplo, los de tipo no sandwich, en los que solo se usa un Ac.

El anticuerpo de deteccion puede marcarse con cualquier marcador de deteccion apropiado, tales como oro o plata coloidal, latex (o carbon), estreptavidina, biotina, microesferas, perlas de latex, peroxidasa, peroxidasa de rabano picante marcada con estreptavidina (HRP), fosfatasa, fosfatasa alcalina (AP), marcadores cromogenicos, marcadores fluorescentes, marcadores fosforescentes, marcadores quimioluminiscentes, anticuerpos secundarios o cualquier otro

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marcador adecuado con el que pueda establecerse la deteccion de la union exitosa. Un anticuerpo secundario opcional puede comprender cualquiera de los marcadores anteriores.

Preferentemente, se usa oro coloidal, porque no es necesaria la etapa de lavados y se obtiene una prueba simple de una etapa. El oro coloidal consiste en partlculas aisladas con un diametro de 10 nm a 100 nm y un coeficiente de extincion muy alto. Cuando se concentra en una superficie solida el oro coloidal puede observarse muy facilmente de manera visual como un color rojo. Preferentemente, el anticuerpo de captura se aplica por tanto en un patron reconocible, preferentemente, a la superficie de cualquiera de los elementos del dispositivo 1, tal como la tira 14, de manera que el anticuerpo de captura este en contacto con el plasma sangulneo y cuya superficie pueda observarse al menos en parte desde el exterior del dispositivo.

El experto comprendera que al menos las aplicaciones de flujo lateral son contempladas en la presente invencion. El experto comprendera, ademas, que junto y en paralelo a la prueba primaria puede realizarse una prueba secundaria con la que o bien se detecte una segunda FABP, o por la que se proporcione una reaccion de control. Para este fin, por ejemplo, puede aplicarse un segundo reactivo en la misma manera o similar como el primer reactivo. En otras aplicaciones el filtro 12 puede aplicarse directamente debajo de la primera parte y el filtrado puede recibirse en un receptaculo diferente, tal como, pero sin limitarse a un receptaculo para almacenamiento y/o envlo del filtrado para referencia posterior. Este puede ser, por ejemplo, un frasco, contenedor, absorbente o elemento absorbente u otros medios adecuados.

Las muestras del cuerpo que pueden usarse en una prueba de conformidad con la invencion, en principio, no se limitan a la sangre. Ademas, pueden evaluarse otras muestras del cuerpo tales como muestras de tejidos, o una muestra de orina, heces, saliva, lagrimas, mucosidad, esputo, semen, secreciones cervicales, llquido cerebroespinal, vomito, secreciones nasales, sudor, llquido amniotico, o leche de pecho.

En un aspecto adicional, la presente invencion proporciona un estuche de partes para formar un dispositivo de prueba de conformidad con la invencion o para realizar un metodo de conformidad con la invencion, los componentes de los cuales, preferentemente, se empaquetan juntos. El estuche de conformidad con la invencion incluye:

- Una primera parte con diluyente (tal como la primera parte 2 del dispositivo 1, de conformidad con la invencion, que comprende una camara 24 con un diluyente 21 como se describio anteriormente, y, preferentemente, con el primer elemento de acoplamiento o elementos, como se muestra en las figuras);

- Una segunda parte con una tira de prueba (tal como la segunda parte 3 del dispositivo 1, de conformidad con la invencion, que comprende el canal 13 con el reactivo 16 y el segundo elemento de acoplamiento o elementos, como se muestra en las figuras);

- Un filtro para filtrar las celulas sangulneas a partir de una muestra de sangre diluida con el diluyente (tal como un filtro 12) que puede proporcionarse en la primera o segunda parte o como elemento separado para el acoplamiento con una de esas partes) a traves del que al menos el plasma sangulneo puede pasar pero a traves del que los globulos rojos de la sangre no pueden pasar;

- Un absorbente y/o elemento absorbente el que proporciona la posibilidad de muestreo de una cantidad conocida de sangre (tal como un elemento 17 parecido a una esponja) que puede proporcionarse en la primera o segunda parte, o como elemento separado para el acoplamiento con una de esas partes. Este elemento puede aplicarse para introducir una cantidad conocida de una muestra de sangre dentro del dispositivo 1 (tlpicamente aproximadamente 30 a 60 pL de sangre, pero esta cantidad puede variar) por donde los constituyentes de la sangre pueden diluirse por el diluyente que pasa a traves de este.

Ademas, el estuche de partes puede comprender:

- Un anticuerpo de captura que puede unirse especlficamente a un primer epltopo de FABP (reactivo 16). El anticuerpo de captura puede estar, ventajosamente, en una forma en la que este se inmoviliza en, o sobre una superficie del canal 13 o tira 14 que pueda observarse desde el exterior del dispositivo 1. Un anticuerpo adecuado para usar como anticuerpo de captura para la deteccion de H-FABP es el anticuerpo monoclonal antihumano H-FABP 67D3 (tal como disponible de Hycult Biotechnology BV, Uden, Holanda). Una superficie adecuada es una parte porosa que tiene accion capilar, la que puede, por ejemplo, aplicarse en la deteccion de flujo lateral;

- Opcionalmente un anticuerpo de deteccion que puede unirse especlficamente con un segundo epltopo de FABP, el que es diferente del primer epltopo y en donde ambos anticuerpos no afecten materialmente a la union del otro a FABP en una manera perjudicial. El anticuerpo de deteccion puede proporcionarse en el diluyente. Una concentracion adecuada de un anticuerpo de deteccion en el diluyente es de 5 a 20 pg/L. El anticuerpo de deteccion podrla proporcionarse, ademas, en la segunda parte, por ejemplo, en o sobre la tira 14. Un anticuerpo adecuado para usar como anticuerpo de deteccion para la deteccion de H-FABP es el anticuerpo monoclonal antihumano H-FABP 66E2, tal como disponible de Hycult Biotechnology BV, Uden, Holanda).

La aplicacion del dispositivo y el sistema de deteccion en conformidad con la invencion proporciona una prueba rapida en el punto de atencion (POC), es decir, una prueba rapida para usar por medicos generales, en una ambulancia, en un hospital o como una prueba en el hogar para la deteccion de H-FABP en plasma.

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Un metodo de deteccion de FABP en una muestra de sangre de un paciente, preferentemente, incluye las siguientes etapas:

- proporcionar un dispositivo de la presente invention como se describio anteriormente;

- introducir una cantidad conocida de sangre en dicho absorbente y/o elemento absorbente;

- empujar el diluyente a traves de dicho elemento, que diluye la muestra de sangre;

- separar las celulas (rojas) del plasma sangulneo mediante el empuje de dicha muestra de sangre diluida

parcialmente a traves de dicho filtro;

- promover una reaction entre el plasma sangulneo que tiene que pasar dicho filtro y un reactivo. En las modalidades esto puede significar que contacta la FABP en dicha sangre o plasma sangulneo con al menos uno de dichos anticuerpos de deteccion y anticuerpos de captura bajo las condiciones en donde ocurre la union especlfica entre el anticuerpo y la FABP; y

- detectar la union especlfica.

Las variaciones diferentes en las modalidades sobre este proceso se explicaron en detalle anteriormente.

La presente invencion ahora se ilustrara mediante los siguientes ejemplos, los que de ninguna manera limitan la invencion.

Ejemplo

Desarrollo de una prueba rapida en el punto de atencion (POC) (una prueba para usar en los consultorios de los medicos generales, ambulancia, hospital, o como una prueba en el hogar para la deteccion de H-FABP en plasma)

La prueba proporciona la determination inmunoqulmica de la presencia de una concentration aumentada. Las pruebas se disenaron para detectar > 4 pg/L de la protelna de union a acidos grasos tipo cardlaco (H-FABP) en el plasma, y se combinaron con un dispositivo como se describio en la presente description. El tiempo entre la toma de la muestra de sangre y la obtencion de un resultado positivo de la prueba puede ser menor que 60 segundos

La presente modalidad describe en detalle un estuche de partes como se describio anteriormente y como imaginaron los inventores. Esta modalidad incluye:

- Un deposito que comprende un diluyente (por ejemplo, Fosfato de Sodio 50 mM, Cloruro de Sodio 0.137 M, Cloruro de Potasio 0.0027 M, Tween-20 0.05 %, Proclin 300 0.05 %, pH 6)

- Una esponja para recolectar una cantidad definida de sangre;

- Un filtro de sangre para la separation del plasma y las celulas sangulneas

- Una tira de prueba para la deteccion de H-FABP en el filtrado.

El estuche de las partes puede comprender, ademas, una lanceta (pinchazo de dedo) para un corte en la punta de un dedo para proporcionar una muestra de sangre u otros medios para extraer sangre u obtener una muestra de sangre.

La esponja se aplica contra el corte en el dedo o se aplica de otra manera para introducir aproximadamente 30 pL de sangre de una muestra de sangre dentro de esta. El diluyente del deposito del dispositivo 1 se empuja a traves del elemento, de manera que la sangre se diluye. La presion con la que el diluyente pasa a traves del elemento y una superficie relativamente grande sobre la que el diluyente se pone en contacto con el elemento pueden contribuir a disolver la sangre en el diluyente

A continuation la muestra de sangre diluida se empuja a traves de un filtro. La sangre diluida se presiona con fuerza a traves del filtro, de manera que la sangre se presiona a traves del filtro de sangre mientras las celulas sangulneas se detienen y permanecen en el elemento 17 y/o filtro 12. El plasma sangulneo se recolecta al otro lado del filtro de sangre en el canal 13 de la segunda parte. La FABP presente en la muestra de sangre se unira esencialmente y de manera instantanea al anticuerpo monoclonal conjugado a oro AcMdeteccion presente en la primera parte (almohadilla conjugada) de la tira para formar un complejo FABP-AcMdeteccion-oro.

A una distancia, por ejemplo, de aproximadamente 20 a 40 mm desde el filtro la tira porosa comprende inmovilizada a ella una cantidad de aproximadamente 200 ng del anticuerpo monoclonal 67D3 (Hycult Biotechnology BV, Uden, Holanda), dirigido contra la FABP humana de tipo cardlaco (que es referido como el 'segundo anticuerpo' AcMcaptura) y en la que el anticuerpo reconoce un epltopo de la FABP humana de tipo cardlaco que es diferente al que reconoce el AcMdeteccion.

De manera similar, a una distancia de aproximadamente 20 a 40 mm del filtro la parte porosa comprende inmovilizado a ella un anticuerpo monoclonal dirigido contra otra protelna (por ejemplo, un control o referencia o segunda protelna de prueba). La longitud total y el volumen (es decir, el tamano) de la parte porosa es, preferentemente, de manera que una portion significativa (aproximadamente 60 pL) de la muestra del plasma diluido se absorbe en la parte porosa.

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Despues de la absorcion del plasma en la parte porosa, el complejo FABP-AcMdeteccion-oro se unira al segundo anticuerpo monoclonal AcMcaptura inmovilizado sobre esta bajo la formacion de una banda coloreada que es visible a traves de la pared transparente o abierta del vastago. La intensidad de esta banda coloreada aumentara con la concentracion de FABP en la muestra de sangre. En caso de que la concentracion de FABP en la muestra de sangre original sea < 4.5 pg/L, no se vera la banda coloreada.

De manera similar, otra protelna que se encuentra en la sangre se unira al anticuerpo especlfico que se inmoviliza en la seccion porosa a una distancia de 10 mm desde el extremo inferior del vastago como se describe anteriormente y si el diluyente es proporcionado, ademas, con un anticuerpo conjugado a oro contra otro epltopo de esa protelna, este complejo se vera como una banda coloreada sobre la parte porosa a una distancia de l0 mm del extremo inferior del vastago. Esta reaccion puede usarse como un control sobre la presencia de plasma sangulneo en la prueba y, por tanto, una correcta aplicacion. Otro metodo para proporcionar un control es aplicar un Ac antiraton como un reactivo control sobre la tira 14. Para descartar los resultados falsos negativos de la prueba se detecto un AcM de deteccion libre para comprobar si el conjugado AcM de deteccion que se uso para detectar la H-FABP aun estaba intacto.

La invencion no se limita de ninguna manera a los ejemplos de los dispositivos y metodos descritos en la presente descripcion. Diversas enmiendas y variaciones son posibles dentro del alcance de la invencion como se define por las reivindicaciones. Por ejemplo, las combinaciones de partes y dispositivos como se describieron se consideran haberse descrito ademas, en la presente descripcion. El agarre puede disenarse para trasladar, en donde el al menos un diente y pista se disenaron para hacer que el embolo gire para obtener una traslacion de este para reducir el volumen del deposito y desplazar el llquido. El deposito podrla dividirse en dos o mas camaras, separadas por sellos perforables o lo similar, cada una para contener al menos un componente de un llquido de multiples componentes, de manera que tras la traslacion del embolo el sello se perfora y los componentes se mezclan.

Claims (17)

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   Reivindicaciones

   1. El dispositivo de prueba (1) para evaluar una muestra animal o humana, tal como sangre o componentes de la sangre (B), que comprende una primera parte (2) y una segunda parte (3), que comprende el primer y el segundo elementos cooperadores de acoplamiento (4, 5) para acoplar la primera parte (2) con la segunda parte (3), y un absorbente de muestra y/o elemento absorbente (17), en donde la primera parte (2) comprende un deposito de llquido (20), y en donde la segunda parte (3) comprende al menos un receptaculo, en donde el deposito de llquido (20) puede reducirse en volumen para empujar un llquido contenido en el a traves y/o a lo largo del absorbente y/o elemento absorbente (17), mediante el empuje de la muestra tal como sangre o componentes de esta (B) desde el absorbente y/o elemento absorbente (17) hacia dentro del receptaculo, preferentemente, en contacto con al menos un reactivo en la segunda parte (3) cuando la primera y la segunda partes (2, 3) se conectan o se ponen en contacto entre si por al menos el primer y el segundo elementos de acoplamiento (4, 5).
2. 2. El dispositivo de prueba de conformidad con la reivindicacion 1, en donde la primera parte (2) se proporciona con el primer medio de acoplamiento (4) en o cerca de un primer extremo (7) de esta, en donde el absorbente y/o elemento absorbente (17) se proporciona en o cerca de dicho primer extremo (7), y en donde el deposito de llquido (20) se proporciona a un lado del absorbente y/o elemento absorbente (17) opuesto al primer extremo (7).
3. 3. El dispositivo de prueba de conformidad con la reivindicacion 1 o 2, en donde el primer y segundo elementos de acoplamiento (4, 5) se disenan de manera liberable mediante la ubicacion de la primera parte (2) con relacion a la segunda parte (3), de manera que un primer extremo (7) de la primera parte (2) se coloca sobre un orificio de entrada de un canal (13) en la segunda parte (4), en donde en el canal (13) al menos un filtro (12) se proporciona en el orificio de entrada o entre el orificio de entrada y el al menos un reactivo (16).
4. 4. El dispositivo de prueba de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en donde el deposito de llquido (20) comprende una camara (24) y un embolo (25), movil con relacion a dicha camara (24) para reducir el volumen del deposito (20), en donde se proporciona un orificio de salida para el deposito (20), que abre hacia el al menos un absorbente y/o elemento absorbente (17).
5. 5. El dispositivo de prueba de conformidad con la reivindicacion 4, en donde la primera parte (2) se proporciona con un agarre (26), giratorio sobre o alrededor de una parte de carcasa (27) de la primera parte (2) que comprende al menos la camara (24) y/o el embolo (25), de manera que una rotacion de dicho agarre (26) resulta en un movimiento del embolo (25) con relacion a la camara (24), para reducir dicho volumen.
6. 6. El dispositivo de prueba de conformidad con la reivindicacion 5, en donde el agarre (26) se proporciona con al menos un diente (28) y la parte de carcasa (27) con una pista gula (29) para dicho diente (28) o viceversa, en donde la pista gula (29) se extiende de manera que una rotacion del agarre (26) conlleva a un movimiento de empuje del agarre (26) en una direccion lineal, preferentemente un movimiento hacia o afuera del absorbente y/o elemento absorbente (17).
7. 7. El dispositivo de prueba de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en donde la segunda parte (3) comprende una tira de prueba (14), preferentemente que tiene una direccion longitudinal, en donde el al menos un reactivo (16) se proporciona en o sobre la tira (14) y en donde la tira (14) esta al menos parcialmente visible desde el exterior de la segunda parte (3), preferentemente al menos una parte de la tira que comprende el al menos un reactivo (16).
8. 8. El dispositivo de prueba de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en donde la primera parte (2) tiene una primera direccion longitudinal y la segunda parte (3) como una segunda direccion longitudinal, en donde la primera y la segunda direcciones longitudinales se extienden a un angulo comun diferente de 0 o 180 grados y preferentemente sustancialmente 90 grados.
9. 9. El dispositivo de prueba de conformidad con la reivindicacion 8, en donde la primera parte (2) tiene un primer elemento de acoplamiento (4), que comprende o se forma por una parte sustancialmente cillndrica, mientras que la segunda parte (3) tiene un segundo elemento de acoplamiento (5) que comprende una pared al menos parcialmente circular, que se extiende sustancialmente perpendicular a la segunda direccion longitudinal, lo que forma una abertura para formar un cierre, preferentemente al menos una forma de cierre y/o cierre de ajuste a presion, con el primer elemento de acoplamiento (4), de manera que el primer elemento de acoplamiento (4) puede insertarse en el segundo elemento de acoplamiento (5) en la primera direccion longitudinal para el acoplamiento de la primera parte con la segunda (2, 3).
10. 10. El dispositivo de prueba de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en donde la primera parte (2) comprende un sello (46) que hermetiza el deposito (20), en donde la primera parte (2) se proporciona con un elemento (52) para perforar o romper el sello, de manera que se forma una conexion de llquido entre el deposito (20) y el absorbente y/o elemento absorbente (17).

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11. 11. El dispositivo de prueba de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en donde la primera y la segunda partes (2, 3) se acoplan mediante el primer y segundo elementos de acoplamiento (4, 5), en donde con el deposito (20) en una posicion de volumen reducido al maximo se proporciona una conexion de llquido entre el deposito (20) y el al menos un reactivo (16) a traves del absorbente y/o elemento absorbente (17) y un filtro (12) proporcionado entre el elemento (17) y el al menos un reactivo (16), en donde la conexion de llquidos se llena de manera sustancial y completamente con un llquido del deposito y los componentes de la muestra contenidos en el, preferentemente al menos plasma sangulneo, mientras que el filtro es, preferentemente, un filtro adecuado para filtrar al menos las celulas sangulneas a partir de la sangre antes de entrar en contacto con el al menos un reactivo.
12. 12. El dispositivo de prueba de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en donde un filtro (12) se proporciona para filtrar al menos las celulas sangulneas o partlculas de una muestra, en el que el filtro es un filtro de capa unica, doble o multiple.
13. 13. El dispositivo de prueba de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en donde la primera parte (2) comprende un mecanismo para la abertura del deposito (20) y la reduccion controlada del volumen del deposito (20) para empujar el llquido desde el deposito (20).
14. 14. El metodo para evaluar muestras animales o humanas, tales como sangre o componentes de esta, en donde una cantidad de una muestra (B) se absorbe y/o se absorbe en y/o sobre un elemento (17), el que en un lado se conecta a un deposito (20) que contiene un llquido, especialmente un solvente o diluyente, en donde el elemento (17) se conecta a un canal (13) que comprende al menos un reactivo (16) y un filtro (12), en donde el deposito (20) se reduce en volumen, de manera que el llquido contenido en el, es empujado al menos parcialmente a traves y/o a lo largo del elemento (17), que disuelve y/o diluye la muestra (B) proporcionada en el y/o dentro de el, y la entonces muestra diluida y/o disuelta al menos parcialmente atraviesa el filtro (12), en donde en el filtro (12) al menos las celulas se filtran, preferentemente al menos las celulas sangulneas, mientras que la parte de la muestra diluida y/o disuelta a traves del filtro (12) se pone en contacto al menos parcialmente con el al menos un reactivo (16).
15. 15. El metodo de conformidad con la reivindicacion 14, en donde el elemento (17) para absorber y/o absorber sangre esta contenido en una primera parte (2) de un dispositivo de prueba (1), proximo al deposito (20), dicho elemento (17) se satura sustancialmente con sangre, donde despues la primera parte (2) se conecta a una segunda parte (3) del dispositivo (1), que comprende el al menos un reactivo (16), donde despues el deposito (20) se reduce en volumen, lo que empuja el llquido desde el deposito (20) a traves del elemento (17) y dentro y a traves de la segunda parte (3) en contacto con el al menos un reactivo (16).
16. 16. El metodo para preparar una muestra humana o animal para la evaluacion, en donde una cantidad de una muestra (B) se absorbe y/o se absorbe en y/o sobre un elemento (17), el que a un lado se conecta al deposito (20) que contiene un llquido, especialmente un solvente o diluyente, en donde el elemento (17) se conecta a un canal (13) que comprende al menos un reactivo (16) y un filtro (12), en donde el deposito (20) se reduce en volumen, de manera que el llquido contenido en el se empuja al menos parcialmente a traves y/o a lo largo del elemento (17), para disolver y/o diluir la muestra (B) proporcionada en el y/o dentro de el, y la muestra entonces diluida y/o disuelta al menos parcialmente atraviesa el filtro (12), en donde en el filtro (12) al menos las celulas se filtran, preferentemente al menos las celulas sangulneas, mientras que la parte de la muestra diluida y/o disuelta que pasa a traves del filtro (12) se recibe en un receptaculo para almacenar y/o transportar.
17. 17. Un estuche de las partes para formar un dispositivo de prueba (1) de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 - 13 o para realizar un metodo de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 14 - 16, que comprende:

    - Una primera parte (2) con un diluyente;

    - Una segunda parte (3) con una tira de prueba (14);

    - Un filtro (12) para filtrar las celulas sangulneas a partir de una muestra de sangre diluida con el diluyente, el que puede proporcionarse en la primera o la segunda parte (2, 3), o como elemento separado para el acoplamiento con una de estas partes, a traves del cual al menos el plasma sangulneo puede pasar pero a traves del cual las celulas sangulneas no pueden pasar;

    - Un absorbente y/o elemento absorbente (17) que proporciona la posibilidad de muestrear una cantidad conocida de sangre (B), dicho elemento (17) puede proporcionarse en la primera o segunda parte (2, 3), o como elemento separado (17) para el acoplamiento con una de estas partes (2, 3), de manera que los constituyentes de la sangre pueden diluirse mediante el diluyente que pasa a traves del elemento (17).