JP2015096567A - 細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子及びその合成方法 - Google Patents
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Abstract
Description
図2に示すように、マクロファージ61にアポトーシス細胞65を近接させて、認識させた場合には、マクロファージ61は刺激を受けても、炎症性サイトカインではなく、インターロイキン10(IL10)やインターフェロン(INF)等の抗炎症性サイトカイン66を産生する。抗炎症性サイトカインが産生されると、隣接する細胞の炎症を抑制できる。
ホスファチジルセリン含有リポソーム77がアポトーシス細胞のバイオミメテック材料として使用できるかが調べられた。Lipid Uptakeの材料の種類の依存性の結果を示すグラフから、ホスファチジルセリン含有する場合にLipid Uptakeの数値が高くなることから、ホスファチジルセリン含有リポソームをアポトーシス細胞のバイオミメテック材料として使用できるとの結果が得られた(非特許文献5)。
また、高分子―リポソームナノ複合体組成物も作成されており、それは剤形安定性に優れたものだが(特許文献1)、リポソームを含有する構成により、ホスファチジルセリン含有リポソームと同様の問題がある。
実際、市販されているN−Z−L−serine benzyl esterを、活性化剤imidazole Hydrochlorideで、O−Benzyl N,N,N’,N’−tetraisopropyl phosphorodiamiditeの水酸基と反応させて、側鎖に保護された三価のホスホリルセリン基を有する中間生成物を合成してから、この中間生成物を、活性化剤imidazole Hydrochlorideで、フリーラジカル重合法にて重合したNIPAAm−HMAAm copolymerの水酸基と反応させて、側鎖に保護された三価のホスホリルセリン基を有する高分子鎖(細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子前駆体)を合成してから、前記前駆体を、酸化剤tert−butyl hydroperoxideを用いて、三価のリンを五価になるまで酸化した後、脱保護剤Pd−Cにより脱保護して、ホスホリルセリン基を側鎖に有する高分子(細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子)を作成できた。この新たな合成方法において、反応の順番を考慮することにより、ポリマー側鎖に存在する水酸基とN−Z−L−serine benzyl esterが有する水酸基をバランスよく反応させることができ、細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子として利用可能なホスファチジルセリンを有するポリマーを容易に合成することができることを見出して、本発明を完成した。
本発明は、以下の構成を有する。
(3)前記細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能部位がホスホリルセリン基(PhoSer基)であることを特徴とする(1)に記載の細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子。
(4)前記ホスホリルセリン基がL型であることを特徴とする(3)に記載の細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子。
(6)前記細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能部位が、前記主鎖に対して側鎖又は末端基として結合されていることを特徴とする(5)に記載の細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子。
(7)1又は2種類以上の非誘発機能部位が、前記主鎖に対して側鎖として結合されていることを特徴とする(6)に記載の細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子。
(9)前記合成高分子がポリ(アクリルアミド)、ポリ(メタクリルアミド)、ポリ(アクリル酸)、ポリ(アクリル酸エステル)、ポリ(メタクリル酸)、ポリ(メタクリル酸エステル)、ポリエチレングリコール(PEG)、脂肪族ポリエステル、ポリアミノ酸の群から選択されるいずれか一の高分子であることを特徴とする(5)に記載の細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子。
(10)前記多糖類が、アミロース、アミロペクチン、アルギン酸、ヒアルロン酸、キトサンの群から選択されるいずれか一の多糖類であることを特徴とする(5)に記載の細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子。
(13)前記活性化剤がイミダゾール・ハイドロクロライドであることを特徴とする(11)に記載の細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子の合成方法。
(14)前記酸化剤がtert−butyl hydroperoxideであることを特徴とする(11)に記載の細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子の合成方法。
(15)前記脱保護剤がPd/Cであることを特徴とする(11)に記載の細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子の合成方法。
具体的には、まず、活性化剤であるimidazole Hydrochlorideにより、ホスホロアミダイト化合物であるO−Benzyl N,N,N’,N’−tetraisopropyl phosphorodiamiditeを、セリン化合物であるN−Z−L−serine benzyl esterと反応させて、中間生成物を合成してから、次に、この中間生成物と生体適合性高分子とを結合・酸化反応させて、細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子前駆体を合成してから、最後に、脱保護反応させることにより、細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子を容易にかつ確実に合成することができる。
この高分子はそのまま、或いは、膜状、液状又は粒子状にして、炎症部位のマクロファージに認識させて、抗炎症性サイトカインを産生させることが可能な、アポトーシス細胞と同様な効果を奏する、バイオミメテック材料とすることができる。
<細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子>
図5は、本発明の実施形態である細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子の一例を示す概略図である。
図5に示すように、細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子31は、細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能部位51を備えた生体適合性高分子である。
正電荷を有するアミノ基と、負電荷を有するカルボキシル基により発生する微視的電場の影響を受けたキラル炭素が、マクロファージに細胞間情報伝達分子産生信号を誘発する。
ホスホリルセリン基は、ホスファチジルセリンというリン脂質の官能基として知られている。リン脂質(Phospholipid)は、構造中にリン酸エステル部位をもつ脂質の総称であり、両親媒性を持ち、脂質二重層を形成して糖脂質やコレステロールと共に細胞膜の主要な構成成分となるほか、生体内でのシグナル伝達にも関わる。そして、リン脂質としては、ホスファチジルコリン(レシチン)がよく知られており、ホスファチジルコリンは、2つの脂肪酸(オレイン酸(Oleoyl)・パルミチン酸(Palmitoyl))・グリセリン(Glycerol)・リン酸(Phosphate)・コリン(Choline)が複合した構造をもつが、ホスホリルコリン基は、細胞間情報伝達分子産生信号を誘発する機能を有しないためである。
細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子31は、合成高分子又は多糖類からなる主鎖41を有する生体適合性高分子であることが好ましい。合成高分子又は多糖類からなる主鎖41を有することにより、ホスホリルセリン基のような細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能部位51を一の生体適合性高分子中に安定に存在させることができ、この生体適合性高分子を膜状、液状又は粒子状に加工して、バイオミメテック材料を容易に製造できる。
図5では、細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能部位51が、主鎖41に対して側鎖として結合されている。しかし、細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能部位51の結合の態様は、この例に限られるものではない。図6〜9に示す態様としてもよい。
また、図5〜9では、直鎖状高分子を主鎖41とする構成を示したが、これに限られるものではなく、分岐状高分子を主鎖41とする構成としてもよい。
図7は、本発明の実施形態である細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子の別の一例を示す概略図である。細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能部位51が、主鎖41に対して末端基として結合されている。両端の末端基が細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能部位51とされている。
図8は、本発明の実施形態である細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子の別の一例を示す概略図である。細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能部位51が、主鎖41に対して側鎖及び末端基として結合されている。一端側のみの末端基が細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能部位51とされている。
図9は、本発明の実施形態である細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子の更に別の一例を示す概略図である。細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能部位51が、主鎖41に対して側鎖及び末端基として結合されている。両端の末端基が細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能部位51とされている。
具体的には、非誘発機能部位52としては、水酸基又はメチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、tert−ブチル基等のC1〜C5のアルキル基を挙げることができる。
なお、脂肪族ポリエステルとしては、ポリ乳酸、グリコール酸/L−ポリ乳酸共重合体、ポリ(カプロラクトン)を挙げることができる。
また、ポリアミノ酸としては、ポリアスパラギン酸やポリグルタミン酸を挙げることができる。
実際、ポリメタクリル酸は、コンタクトレンズの材料に用いられており、生体安全性の高い合成高分子として知られており、ポリ(カプロラクトン)は、水溶性は低いが、生分解性は高い高分子として知られている。
このような化学構造を有する部分が備えられていればよい。
また、この化学構造部分に、各ブロックがランダムに配列されて、かつ、各ブロックの高分子鎖長もランダムとされて、連結されていてもよい。
次に、本発明の実施形態である細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子の合成方法について説明する。
本発明の実施形態である細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子の合成方法は、第1〜第3の保護基が結合されたホスホリルセリン化合物の合成工程S1と、細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子前駆体の合成工程S2と、細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子の合成工程S3と、を有する。
まず、化学式(2)で表される、ホスホロアミダイト化合物を準備する。
具体的には、ホスホロアミダイト化合物としては、化学式(3)で表されるO−Benzyl N,N,N,N−tetraisopropyl phosphorodiamiditeを挙げることができる。
具体的には、セリン化合物としては、化学式(5)で表されるベンジルエステル(N−Z−L−serine benzyl ester)を挙げることができる。ベンジルエステルは市販品を用いることができる。
次に、合成高分子又は多糖類からなり、水酸基を有する、生体適合性高分子を準備する。
例えば、合成高分子としてポリ(アクリルアミド)からなり、水酸基を有する、生体適合性高分子として、化学式(7)で表されるポリ(ヒドロキシメチル)アクリルアミドを挙げることができる。水酸基は、炭素を介在させて結合されることが好ましい。これにより、反応の際の立体障害の影響を低減できる。
他の合成高分子としては、ポリ(メタクリルアミド)、ポリ(アクリル酸)、ポリ(アクリル酸エステル)、ポリ(メタクリル酸)、ポリ(メタクリル酸エステル)、ポリエチレングリコール(PEG)、脂肪族ポリエステル、ポリアミノ酸の群から選択されるいずれか一の高分子を挙げることができ、多糖類としては、アミロース、アミロペクチン、アルギン酸、ヒアルロン酸、キトサンを挙げることができる。
連続して、酸化剤により、結合反応生成物のリンを三価から五価になるまで酸化して、側鎖に保護された五価のホスホリルセリン基を有する高分子鎖からなる、細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子前駆体を合成する。
例えば、第1〜第3の保護基が結合されたホスホリルセリン基(PhoSer基)を有する、化学式(10)で表される細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子前駆体が形成される。
次に、水素雰囲気、酢酸中で、脱保護剤としてPd/C触媒を用いて、この細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子前駆体の第1の保護基X1〜第3の保護基X3を脱離(脱保護)する。
脱離(脱保護)反応時間は、1時間以上とすることが好ましく、10時間以上とすることがより好ましい。
これにより、ホスホリルセリン基を側鎖に有する生体適合性高分子からなる、化学式(1)で表される細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子を合成できる。
まず、本発明の実施形態である細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子膜について説明する。
図10は、本発明の実施形態である細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子膜の一例を示す図であって、平面図(a)と、(a)のA−A’線における断面図(b)である。
図10に示すように、本発明の実施形態である細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子膜11は、平面視略矩形状の膜状体である。しかし、平面視形状はこれに限られるものではなく、円形状、楕円形状、多角形状等としてもよい。
細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子膜11の一面11aには、マクロファージが認識し、抗炎症性サイトカインを産生させる細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能部位51が露出されている。なお、図10では、一面側のみに非誘発機能部位51が露出されている構成を示したが、これに限られるものではなく、膜状凝集体の両面で非誘発機能部位が露出されている構成としてもよい。この構成により、いずれかの面をマクロファージに近接させることにより、マクロファージに細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子膜11を認識させることができ、抗炎症性サイトカインを産生させることができる。
図11、12に示すように、表層である第1層21は、複数の細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子31が絡み合って形成されている。第1層21の下層には、同様に複数の細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子31が絡み合って凝集されてなる別の層22が形成されている(図示略)。下層22の細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能部位51が露出されていないが、第1層21の細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子31の細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能部位51が露出されているので、この面を近接させることにより、細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能部位51をマクロファージに認識させて、抗炎症性サイトカインを産生させることができる。
次に、本発明の実施形態である細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子膜の作成方法について説明する。
まず、本発明の実施形態である細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子膜の作成方法として、エレクトロスピニング法で、細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子を膜状に凝集させる方法を挙げることができる。
具体的には、細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子を溶媒に分散させた溶液を作成し、それを注射器に入れた後、注射器の先端と、捕集板とに電界を印加した状態で、注射器から溶液を噴射する。噴射された溶液の溶媒が気化・蒸発され、繊維状の細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子が捕集板上に凝集して、捕集される。これにより、膜状凝集体の細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子膜が得られる。溶媒中に電解質などを添加してもよい。
具体的には、細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子を溶媒に分散させた溶液を作成し、それをフィルターでろ過する。これにより、フィルター上に、繊維状の細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子が凝集して、捕集される。これにより、膜状凝集体の細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子膜が得られる。吸引濾過により、生成速度を速めることができる。
図13は、本発明の実施形態である細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子分散液の一例を示す図である。
図13に示すように、本発明の実施形態である細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子分散液81は、容器83中で、本発明の実施形態である細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子31が、水中に一様に分散されて構成されている。本発明の実施形態である細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子31は、主鎖41と、細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能部位51と、非誘発機能部位52とを備えている。
図14は、本発明の実施形態である細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子接合粒子の一例を示す図である。
図14に示すように、本発明の実施形態である細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子接合粒子91は、本発明の実施形態である細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子31が疎水性高分子からなる微粒子92の表面から林立するように接合されて構成されている。本発明の実施形態である細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子31は、主鎖41と、細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能部位51と、非誘発機能部位52とを備えている。微粒子92の径dは100nm以上1mm未満であり、100nm以上100μmとすることが好ましい。この範囲とすることにより、粒子径のバラツキを少なくできる。微粒子92の形状は球状とされており、これが好ましいが、これに限られるものではなく、塊状であればよい。
<O−Benzyl N,N,N’,N’−tetraisopropyl phosphorodiamiditeの合成>
以下に示すように、Kingらの合成方法(非特許文献6)を用いて、O−Benzyl N,N,N’,N’−tetraisopropyl phosphorodiamiditeを合成した。
次に、氷冷下、この溶液に、phospholus trichloride/hexane溶液(5mL/10mL)を、等圧滴下ロートにて、1mL/minの滴下速度で滴下した。
次に、この溶液を3時間室温で撹拌してから、80℃で22時間還流して、bis(diisopropylamino)chlorophosphineを合成した。
次の化学反応式(11)は、bis(diisopropylamino)chlorophosphineの合成スキームを示す式である。
更に、ロータリーエバポレーターで液体成分をある溶媒を完全に除去した。これにより、得られた残留物に20mLのhexaneを加えて残留物を溶解させた。
次に、同様の操作を60mLのacetonitrileで2回行い、hexane層から不純物を除去した。
次の化学反応式(12)は、bis(diisopropylamino)chlorophosphineからO−Benzyl N,N,N’,N’−tetraisopropyl phosphorodiamiditeの合成スキームを示す式である。
まず、100mLナスフラスコに回転子を入れ、エタノール50mLを注ぎ、モノマーとして再結晶にて精製したNIPAAm9.05gとHMAAm2.02gを入れ、重合開始剤としてazobisisobutyronitrile(AIBN)20mgを混和した。
次に、ジエチルエーテルを貧溶媒とした再沈殿法にて精製した。
次に、真空ポンプで乾燥した。
以上のようにして、NIPAAm−HMAAm copolymerを合成した。
次の化学反応式(13)は、以上のフリーラジカル重合法によるNIPAAm−HMAAm copolymerの合成スキームを示す式である。
まず、窒素フロー、氷冷下の100mL二口フラスコに回転子を入れ、N−Z−L−serine benzyl ester(市販品)2.195g、dichloromethane 30mLを入れ、O−benzyl N,N,N’,N’−tetraisopropyl phosphorodiamidite/dichloromethane溶液(2.505g/15mL)を加えた。
次に、氷冷下でimidazole hydrochlorideを200mg加え、 室温で21時間撹拌して、反応中間体を得た。
次の化学反応式(14)は、この反応中間体の合成スキームを示す式である。
以上の工程により、「保護されたホスホリルセリン基を側鎖に有する3元共重合体」を得た。
次の化学反応式(15)は、「保護されたホスホリルセリン基を側鎖に有する3元共重合体」の合成スキームを示す式である。
まず、「保護されたホスホリルセリン基を側鎖に有する3元共重合体」2.5gを氷酢酸50mLに溶解させてから、パラジウム炭素触媒100mgを分散させ、回転子とともに耐圧反応容器に入れてから、2気圧の水素雰囲気下で48時間激しく撹拌した。
次に、パラジウム炭素触媒と溶液を遠心分離操作にて分け、液相をジエチルエーテルに滴下して再沈殿法にて精製した。
以上の工程により、酸化剤を用いて三価のリンを五価になるまで酸化した後、脱保護して、ホスホリルコリン基を側鎖に有する高分子を合成した。
次の化学反応式(16)は、「保護されたホスホリルセリン基を側鎖に有する3元共重合体」の脱保護反応スキームを示す式である。
次に、化学反応式(15)で表されるスキームにて得られた「保護されたホスホリルセリン基を側鎖に有する3元共重合体」の水酸基に対する保護されたホスホリルセリン基の導入率(o/m)、すなわち、NIPAAm−HMAAm copolymerに対する保護されたホスホリルセリン基の導入率(o/m)の評価を行った。
評価法として1H−NMRスペクトルを測定し、保護基が有するベンジル基とNIPAAmが有するイソプロピル基の3級炭素に結合しているプロトンのピークの積分値を比較した。
図15に示すように、7−8ppmにベンジル基由来のブロードなピークを確認し、反応の有意な進行を示唆するデータが得られた。
また、水酸基に対する導入率(o/m)を算出したところ、27%であると算出できた。これにより、高分子鎖全体の割合を考えると、約5%が保護されたホスホリルセリン基を有するブロックであると考えられた。
次に、「保護されたホスホリルセリン基を側鎖に有する3元共重合体」の脱保護の評価を1H−NMRスペクトル及び濁度変化により行った。
まず、脱保護した高分子鎖の1H−NMRスペクトルを測定した。
図16は、脱保護した高分子鎖の1H−NMRスペクトルである。図16では、7−8ppmに存在したベンジル基由来のピークが消失した。これにより、脱保護の有意な進行を確認した。
次に、各水溶液の温度変化による濁度変化を測定した。
このグラフは、NIPAAm−HMAAm copolymerの各水溶液のLCSTの変化を示す。
図17に示すように、bare polymerの水溶液は、低温から高温にあげていくと、約46℃で100%から0%へ%T/%TMAXが変化した。すなわち、約46℃で透明な水溶液が濁った。bare polymerの水溶液のLCSTは46℃である。
serine added polymerの水溶液の場合、LCSTは44℃と低温側にシフトし、また、濁度変化の傾きも少しなだらかとなった。
deprotected polymerの水溶液のLCSTは50℃と高温側にシフトし、濁度変化の傾きもかなりなだらかとなった。
つまりNIPAAm−HMAAm copolymerへ対して保護されたホスホリルセリン基を付加した場合はLCSTが低温側へシフトし、脱保護することでLCSTが高温側へシフトした。
これにより、保護基は疎水性が強いことから、反応が有意に進行していることが示唆された。
Claims (18)
- 細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能部位を備えた生体適合性高分子であることを特徴とする細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子。
- 前記細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能部位がアミノ基とカルボキシル基を備えたキラル炭素を有することを特徴とする請求項1に記載の細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子。
- 前記細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能部位がホスホリルセリン基(PhoSer基)であることを特徴とする請求項1に記載の細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子。
- 前記ホスホリルセリン基がL型であることを特徴とする請求項3に記載の細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子。
- 前記生体適合性高分子が合成高分子又は多糖類からなる主鎖を有することを特徴とする請求項1〜4のいずれか1項に記載の細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子。
- 前記細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能部位が、前記主鎖に対して側鎖又は末端基として結合されていることを特徴とする請求項5に記載の細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子。
- 1又は2種類以上の非誘発機能部位が、前記主鎖に対して側鎖として結合されていることを特徴とする請求項6に記載の細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子。
- 前記非誘発機能部位が水酸基又はC1〜C5のアルキル基であることを特徴とする請求項7に記載の細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子。
- 前記合成高分子がポリ(アクリルアミド)、ポリ(メタクリルアミド)、ポリ(アクリル酸)、ポリ(アクリル酸エステル)、ポリ(メタクリル酸)、ポリ(メタクリル酸エステル)、ポリエチレングリコール(PEG)、脂肪族ポリエステル、ポリアミノ酸の群から選択されるいずれか一の高分子であることを特徴とする請求項5に記載の細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子。
- 前記多糖類が、アミロース、アミロペクチン、アルギン酸、ヒアルロン酸、キトサンの群から選択されるいずれか一の多糖類であることを特徴とする請求項5に記載の細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子。
- 活性化剤により、第1の保護基を有するホスホロアミダイト化合物と、第2、第3の保護基及び水酸基を有するセリン化合物とを反応させて、前記セリン化合物に前記ホスホロアミダイト化合物を結合して、第1〜第3の保護基を有するホスホリルセリン化合物を合成する工程と、
活性化剤により、前記第1〜第3の保護基を有するホスホリルセリン化合物と、合成高分子又は多糖類からなり、水酸基を有する生体適合性高分子とを結合反応させてから、酸化剤により、結合反応生成物のリンを三価から五価に酸化して、第1〜第3の保護基を有するホスホリルセリン基(PhoSer基)を有する生体適合性高分子からなる細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子前駆体を合成する工程と、
脱保護剤により、前記細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子前駆体の第1〜第3の保護基を脱保護して、細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子を合成する工程と、を有することを特徴とする細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子の合成方法。 - 第1及び第2の保護基がベンジル基(benzyl基)であり、第3の保護基がベンジルオキシカルボニル基(benzyl oxycarbonyl基)であることを特徴とする請求項11に記載の細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子の合成方法。
- 前記活性化剤がイミダゾール・ハイドロクロライドであることを特徴とする請求項11に記載の細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子の合成方法。
- 前記酸化剤がtert−butyl hydroperoxideであることを特徴とする請求項11に記載の細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子の合成方法。
- 前記脱保護剤がPd/Cであることを特徴とする請求項11に記載の細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子の合成方法。
- 請求項1〜10のいずれか1項に記載の細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子が膜状凝集体とされており、膜状凝集体の少なくとも一面で細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能部位が露出されていることを特徴とする細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子膜。
- 請求項1〜10のいずれか1項に記載の細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子が、水中に一様に分散されていることを特徴とする細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子分散液。
- 請求項1〜10のいずれか1項に記載の細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子が疎水性高分子からなる微粒子の表面から林立するように接合されていることを特徴とする細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子接合粒子。
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