JP2016089104A

JP2016089104A - 産生信号誘発ポリマーの合成方法、産生信号誘発モノマー前駆体及び産生信号誘発ポリマー前駆体

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Publication number: JP2016089104A
Application number: JP2014227661A
Authority: JP
Inventors: 充宏荏原; Mitsuhiro Ebara; 隆夫青柳; Takao Aoyanagi
Original assignee: National Institute for Materials Science
Current assignee: National Institute for Materials Science
Priority date: 2014-11-10
Filing date: 2014-11-10
Publication date: 2016-05-23
Anticipated expiration: 2034-11-10
Also published as: JP6465464B2

Abstract

【課題】本発明は、産生信号誘発ポリマーであるＰＭＰＳを、嫌気性・嫌水性雰囲気で取り扱うことなく、容易に合成可能な産生信号誘発ポリマーの合成方法を提供することを課題とする。【解決手段】３つの保護基が取り付けられたホスホリルセリン基がメタクリレート誘導体に結合されてなる産生信号誘発モノマー前駆体合成工程と、ポリアルキルメタクリレート主鎖と、３つの保護基が取り付けられたホスホリルセリン基を含む側鎖と、を有する産生信号誘発ポリマー前駆体合成工程と、ポリアルキルメタクリレート主鎖と、ホスホリルセリン基を含む側鎖と、を有する産生信号誘発ポリマー合成工程と、を有する産生信号誘発ポリマーの合成方法を用いることにより、前記課題を解決できる。【選択図】図４

Description

本発明は、産生信号誘発ポリマーの合成方法、産生信号誘発モノマー前駆体及び産生信号誘発ポリマー前駆体に関する。

サイトカイン（Ｃｙｔｏｋｉｎｅ）は、細胞から放出され、細胞間情報伝達分子となる低分子量の微量生理活性タンパク質である。体液を通って細胞表面の高親和性受容体などに結合して、細胞の増殖、分化、細胞死又は創傷治癒などの多面的な生物活性を発現させる。特に、免疫、炎症に関係したものが多く知られる。様々な細胞内シグナル伝達経路をへて、細胞のＤＮＡやＲＮＡ変異やタンパク質合成のパターンを変化させ、細胞の働きを変える。

図１は、マクロファージが刺激を受けた場合に、炎症性サイトカインを産生する様子を示す概略図である。図１に示すように、マクロファージ６１は刺激６２を受けると、インターロイキン６（ＩＬ６）やトゥーモア・ネクロシス・ファクター（ＴＮＦ、腫瘍壊死因子）等の炎症性サイトカイン６３を産生する。炎症性サイトカイン６３が広がると、隣接する細胞を壊死させる。細胞の壊死は線維化（コラーゲン化）を生じさせる（非特許文献１、２）。この現象により心筋梗塞が悪化する様子が報告されている（非特許文献３）。

図２は、マクロファージにアポトーシス細胞を近接させて、マクロファージにアポトーシス細胞を認識させた場合に、抗炎症性サイトカインを産生する様子を示す概略図である。
図２に示すように、マクロファージ６１にアポトーシス細胞６５を近接させて、認識させた場合には、マクロファージ６１は刺激を受けても、炎症性サイトカインではなく、インターロイキン１０（ＩＬ１０）やインターフェロン（ＩＮＦ）等の抗炎症性サイトカイン６６を産生する。抗炎症性サイトカインが産生されると、隣接する細胞の炎症を抑制できる。

しかし、アポトーシス（ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）とは、多細胞生物の体を構成する細胞の死に方の一種で、個体をより良い状態に保つために積極的に引き起こされるものであり、アポトーシス細胞は、白血球の一種である好中球であり、炎症を伴わずに細胞死する細胞であるので、自由に操作できず、取り扱いが難しかった。

そこで、本発明者は、ホスファチジルセリンを有するバイオミメテック材料を合成した。マクロファージはホスファチジルセリンのホスホリルセリン基を認識して抗炎症性サイトカインを産生する。そのため、この材料は、アポトーシス細胞と同様な効果を奏することが可能であった。この材料を、細胞間情報伝達分子産生信号誘発機能高分子（産生信号誘発ポリマーと略記する。）と名付けた。

その後、Ｂｉｏｍｅｍｂｒａｎｅｍｉｍｉｃｐｏｌｙｍｅｒｓの一つであるポリ−（２−メタクリロイルオキシエチルホスホリルセリン）（ｐｏｌｙ（２−ｍｅｔｈａｃｒｙｌｏｙｌｏｘｙｅｔｈｙｌｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌｓｅｒｉｎｅ）：略称ＰＭＰＳ）が合成された（非特許文献４）。ＰＭＰＳは、ポリアルキルメタクリレートからなる主鎖と、ホスホリルセリン基を含む側鎖と、を有するポリマーである。この材料もホスホリルセリン基を有するので、マクロファージが認識して抗炎症性サイトカインを産生可能であり、アポトーシス細胞と同様な効果を奏することが可能と考えられ、前記産生信号誘発ポリマーの一つであると考えられる。

非特許文献１に開示のＰＭＰＳの合成方法では、ＲＯＨから出発して、環状のリン酸ハロゲン化物を反応させている（非特許文献１、５１９ページ参照）。この環状のリン酸ハロゲン化物は、空気中・高湿雰囲気において容易に分解するため、嫌気性・嫌水性雰囲気で取り扱うことを要し、合成操作が容易ではなかった。

Ｊ．Ｓａｖｉｌｌ、ｅｔ．ａｌ．、"Ｐｈａｇｏｃｙｔｅｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎｏｆｃｅｌｌｓｕｎｄｅｒｇｏｉｎｇａｐｏｐｔｏｓｉｓ"、Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｔｏｄａｙ１４、３１−１３６（１９９３）Ｒ．Ｅ．Ｖｏｌｌ、ｅｔａｌ．、"Ｉｍｍｕｎｏｓｕｐｐｒｅｓｓｉｖｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆａｐｏｐｔｏｔｉｃｃｅｌｌｓ"、Ｎａｔｕｒｅ３９０、３５０−３５１（１９９７）Ｍ．Ｎｉａｎ、Ｐ．Ｌｅｅ、Ｎ．Ｋｈａｐｅｒ、Ｐ．Ｌｉｕ、"ＩｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙＣｙｔｏｋｉｎｅｓａｎｄＰｏｓｔｍｙｏｃａｒｄｉａｌＩｎｆａｒｃｔｉｏｎＲｅｍｏｄｅｌｉｎｇ"、Ｃｉｒｃ．Ｒｅｓ．９４、１５４３−１５５３（２００４）Ｈ．Ｋｉｍ、ｅｔ．ａｌ．、Ｐｏｌｙｍｅｒ５５（２０１４）５１７−５２４ＫｉｎｇＲＢ、ＳｕｎｄａｒａｍＰＭ，"Ｂｉｓ（ｄｉａｌｋｙｌａｍｉｎｏ）ｐｈｏｓｐｈｉｎｅｓ"、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．、４９：１７８４-１７８９（１９８４）

本発明は、ポリアルキルメタクリレートからなる主鎖と、ホスホリルセリン基を含む側鎖と、を有する産生信号誘発ポリマー、例えば、ＰＭＰＳを、環状のリン酸ハロゲン化物を用いることなく、かつ、嫌気性・嫌水性雰囲気で取り扱うことなく、容易に合成可能な産生信号誘発ポリマーの合成方法、産生信号誘発モノマー前駆体及び産生信号誘発ポリマー前駆体を提供することを課題とする。

本発明者は、上記事情を鑑みて、試行錯誤した結果、非特許文献１に記載の合成方法とは別の合成方法であって、環状のリン酸ハロゲン化物を用いることなく、かつ、嫌気性・嫌水性雰囲気で取り扱うことなく、容易に合成可能な産生信号誘発ポリマーの合成方法を見出した。この方法は、新規な産生信号誘発モノマー前駆体及び新規な産生信号誘発ポリマー前駆体を経由する方法である。
具体的には、まず、反応中間体を経由して、産生信号誘発モノマー前駆体を合成する。これは、リン酸、アミノ基、カルボキシル基を保護した三価のホスホリルセリン基を有するモノマーであって、新規な材料である。
次に、この産生信号誘発モノマー前駆体を重合することにより、産生信号誘発ポリマー前駆体を合成する。これは、リン酸、アミノ基、カルボキシル基を保護した三価のホスホリルセリン基を側鎖に有するポリマーであって、新規な材料である。
次に、この産生信号誘発ポリマー前駆体を酸化及び脱保護することにより、産生信号誘発ポリマーを合成する。これは、リン酸、アミノ基、カルボキシル基を脱保護した五価のホスホリルセリン基を有するポリマーであり、マクロファージが認識して抗炎症性サイトカインを産生可能であり、アポトーシス細胞と同様な効果を奏することが可能である。
なお、所定の展開溶媒を用いて、シリカゲルカラムクロマトグラフィーにて精製を行い、産生信号誘発ポリマー前駆体を精製して、純度を高めることにより、産生信号誘発ポリマーの収率を高めることができる。
本合成方法は収率高く、かつ、容易に産生信号誘発ポリマーを合成できることを見出して、本発明を完成した。
本発明は、以下の構成を有する。

（１）活性化剤により、３つの保護基が取り付けられたホスホリルセリン化合物と、メタクリレート誘導体を反応させて、３つの保護基が取り付けられたホスホリルセリン基がメタクリレート誘導体に結合されてなる産生信号誘発モノマー前駆体を合成する工程と、開始剤により、前記産生信号誘発モノマー前駆体を重合して、ポリアルキルメタクリレートからなる主鎖と、３つの保護基が取り付けられたホスホリルセリン基を含む側鎖と、を有する産生信号誘発ポリマー前駆体を合成する工程と、酸化剤により、前記産生信号誘発ポリマー前駆体のホスホリルセリン基のリンを三価から五価に酸化するとともに、脱保護剤により、前記産生信号誘発ポリマー前駆体のホスホリルセリン基の３つの保護基を取り除いて、ポリアルキルメタクリレートからなる主鎖と、ホスホリルセリン基を含む側鎖と、を有する産生信号誘発ポリマーを合成する工程と、を有することを特徴とする産生信号誘発ポリマーの合成方法。

（２）産生信号誘発モノマー前駆体を合成する工程の前工程として、活性化剤により、１つの保護基を有するホスホロアミダイト化合物と、２つの保護基及びヒドロキシ基を有するセリン化合物を反応させて、３つの保護基が取り付けられたホスホリルセリン化合物を合成することを特徴とする（１）に記載の産生信号誘発ポリマーの合成方法。

（３）保護基がベンジル（ｂｅｎｚｙｌ：略称Ｂｎ）基、ｔｅｒｔ−ブチル（ｔｅｒｔ−ｂｕｔｙｌ：略称ｔ−Ｂｕ）基、ベンジルオキシカルボニル基（ｂｅｎｚｙｌｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌ：略称Ｃｂｚ）基、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（ｔｅｒｔ−ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌ：略称Ｂｏｃ）基の群から選択されるいずれか一又は二以上の官能基であることを特徴とする（１）又は（２）に記載の産生信号誘発ポリマーの合成方法。

（４）前記活性化剤がイミダゾール・ハイドロクロライドであることを特徴とする（１）又は（２）に記載の産生信号誘発ポリマーの合成方法。
（５）前記酸化剤がｔｅｒｔ−ｂｕｔｙｌｈｙｄｒｏｐｅｒｏｘｉｄｅであることを特徴とする（１）に記載の産生信号誘発ポリマーの合成方法。
（６）前記脱保護剤がＰｄ／Ｃであることを特徴とする（１）に記載の産生信号誘発ポリマーの合成方法。

（７）産生信号誘発モノマー前駆体を合成する工程と産生信号誘発ポリマー前駆体を合成する工程との間に、高極性溶媒と低極性溶媒からなり、高極性溶媒が低極性溶媒の４０ｖｏｌ％以下の混合溶媒を展開溶媒として用いて、産生信号誘発モノマー前駆体を精製する工程と、を有することを特徴とする（１）に記載の産生信号誘発ポリマーの合成方法。

（８）３つの保護基が取り付けられたホスホリルセリン基がメタクリレート誘導体に結合されてなるモノマーであって、前記３つの保護基がベンジル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ベンジルオキシカルボニル基、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基の群から選択されるいずれか一又は二以上の官能基であることを特徴とする産生信号誘発モノマー前駆体。

（９）ポリアルキルメタクリレートからなる主鎖と、３つの保護基が取り付けられたホスホリルセリン基を含む側鎖と、を有するポリマーであって、前記３つの保護基がそれぞれ、ベンジル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ベンジルオキシカルボニル基、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基の群から選択されるいずれかの官能基であることを特徴とする産生信号誘発ポリマー前駆体。

本発明の産生信号誘発ポリマーの合成方法は、活性化剤により、３つの保護基が取り付けられたホスホリルセリン化合物と、メタクリレート誘導体を反応させて、３つの保護基が取り付けられたホスホリルセリン基がメタクリレート誘導体に結合されてなる産生信号誘発モノマー前駆体を合成する工程と、開始剤により、前記産生信号誘発モノマー前駆体を重合して、ポリアルキルメタクリレートからなる主鎖と、３つの保護基が取り付けられたホスホリルセリン基を含む側鎖と、を有する産生信号誘発ポリマー前駆体を合成する工程と、酸化剤により、前記産生信号誘発ポリマー前駆体のホスホリルセリン基のリンを三価から五価に酸化するとともに、脱保護剤により、前記産生信号誘発ポリマー前駆体のホスホリルセリン基の３つの保護基を取り除いて、ポリアルキルメタクリレートからなる主鎖と、ホスホリルセリン基を含む側鎖と、を有する産生信号誘発ポリマーを合成する工程と、を有することを特徴とする構成なので、環状のリン酸ハロゲン化物を用いることなく、かつ、嫌気性・嫌水性雰囲気で取り扱うことなく、産生信号誘発ポリマーを容易に合成できる。産生信号誘発ポリマーは、炎症部位のマクロファージに認識させて、抗炎症性サイトカインを産生させることが可能であり、アポトーシス細胞と同様な効果を奏することができる。産生信号誘発ポリマーを利用することにより、心筋梗塞などの炎症を抑制できる。

本発明の産生信号誘発モノマー前駆体は、３つの保護基が取り付けられたホスホリルセリン基がメタクリレート誘導体に結合されてなるモノマーであって、前記３つの保護基がベンジル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ベンジルオキシカルボニル基、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基の群から選択されるいずれか一又は二以上の官能基である構成なので、ホスホリルセリン基のリン酸、アミノ基、カルボキシル基を反応させることなく、重合により、産生信号誘発ポリマー前駆体を容易に合成できる。

本発明の産生信号誘発ポリマー前駆体は、ポリアルキルメタクリレートからなる主鎖と、３つの保護基が取り付けられたホスホリルセリン基を含む側鎖と、を有するポリマーであって、前記３つの保護基がそれぞれ、ベンジル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ベンジルオキシカルボニル基、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基の群から選択されるいずれかの官能基である構成なので、酸化・脱保護により、ホスホリルセリン基のリンを三価から五価に酸化し、３つの保護基を脱保護して、産生信号誘発ポリマーを容易に合成できる。

マクロファージは刺激を受けた場合に、炎症性サイトカインを産生する様子を示す概略図である。マクロファージにアポトーシス細胞を近接させて、マクロファージにアポトーシス細胞を認識させた場合に、抗炎症性サイトカインを産生する様子を示す概略図である。得られたクルード生成物（実施例１）のＮＭＲチャート図である。得られた白色固体（実施例１）のＮＭＲチャート図である。得られたクルード生成物（実施例２）のＮＭＲチャート図である。得られたクルード生成物（実施例２）のマススペクトルである。得られた白色固体（実施例２）のＮＭＲチャート図である。

（本発明の実施形態）
＜産生信号誘発ポリマーの合成方法＞
まず、本発明の実施形態である産生信号誘発ポリマーの合成方法について説明する。
本発明の実施形態である産生信号誘発ポリマーの合成方法は、産生信号誘発モノマー前駆体合成工程Ｓ１と、産生信号誘発ポリマー前駆体合成工程Ｓ２と、産生信号誘発ポリマー合成工程Ｓ３と、を有する。

（産生信号誘発モノマー前駆体合成工程Ｓ１）
反応式（１）に示すように、活性化剤により、３つの保護基が取り付けられたホスホリルセリン化合物（反応中間体）と、メタクリレート誘導体を反応させる。これにより、３つの保護基が取り付けられたホスホリルセリン基がメタクリレート誘導体に結合されてなる産生信号誘発モノマー前駆体を合成する。

Ｘ_１、Ｘ_２、Ｘ_３はそれぞれ同一又は異なる官能基である。リン酸、アミノ基、カルボニル基の保護し、それらの反応を抑制することから、保護基と呼ばれる。

保護基Ｘ_１、Ｘ_２、Ｘ_３としては、ベンジル（ｂｅｎｚｙｌ：略称Ｂｎ）基、ｔｅｒｔ−ブチル（ｔｅｒｔ−ｂｕｔｙｌ：略称ｔ−Ｂｕ）基、ベンジルオキシカルボニル（ｂｅｎｚｙｌｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌ：略称Ｃｂｚ）基、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（ｔｅｒｔ−ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌ：略称Ｂｏｃ）基の群から選択されるいずれか一又は二以上の官能基を挙げることができる。
これらにより、リン酸、アミノ基、カルボニル基の保護し、重合反応の際、反応されることを抑制できる。また、重合反応後、容易に取り外すことができる。

メタクリレート誘導体としては、ヒドロキシ−アルキルメタクリレートを挙げることができる。アルキル基はＣ_１以上Ｃ_５以下が好ましい。

［産生信号誘発モノマー前駆体］
産生信号誘発モノマー前駆体は、３つの保護基Ｘ_１、Ｘ_２、Ｘ_３が取り付けられたホスホリルセリン基がメタクリレート誘導体に結合されてなるモノマーである。
３つの保護基Ｘ_１、Ｘ_２、Ｘ_３がベンジル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ベンジルオキシカルボニル基、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基の群から選択されるいずれか一又は二以上の官能基である。

（前工程）
なお、３つの保護基が取り付けられたホスホリルセリン化合物は、反応式（２）に示すように、前工程で、活性化剤より、１つの保護基Ｘ_１を有するホスホロアミダイト化合物と、２つの保護基Ｘ_２、Ｘ_３及びヒドロキシ基（ＯＨ基）を有するセリン化合物を反応させて、容易に合成できる。

活性化剤としては、イミダゾール・ハイドロクロライドを挙げることができる。これにより、反応を促進できる。

非プロトン性有機溶媒であるジクロロメタンを用いることが好ましい。これにより、セリン化合物の水酸基にホスホロアミダイト化合物を結合ことができる。

ホスホロアミダイト化合物としては、Ｏ−ＢｅｎｚｙｌＮ，Ｎ，Ｎ，Ｎ−ｔｅｔｒａｉｓｏｐｒｏｐｙｌｐｈｏｓｐｈｏｒｏｄｉａｍｉｄｉｔｅを挙げることができる。
このホスホロアミダイト化合物は、ＰＯ結合を有し、酸素（Ｏ）に保護基Ｘ_１が結合され、Ｐに２つのアミノ基が結合されてなる。各アミノ基には２つのアルキル基が接合されている。各アルキル基は、水素又はＣ_１〜Ｃ_５のアルキル基であり、互いに同一であっても異なっていてもよい。（２）では、一例として、ジイソプロピル−アミノ基を用いている。また、保護基Ｘ_１としてはベンジル（ｂｅｎｚｙｌ：略称Ｂｎ）基、ｔｅｒｔ−ブチル（ｔｅｒｔ−ｂｕｔｙｌ：略称ｔ−Ｂｕ）基を挙げることができる。

セリン化合物としては、カルボキシル基の酸素に保護基Ｘ_２が結合され、アミノ基のＮに保護基Ｘ_３が結合されてなる化合物を挙げることができる。

第２の保護基Ｘ_２としては、ベンジル（ｂｅｎｚｙｌ：略称Ｂｎ）基、ｔｅｒｔ−ブチル（ｔｅｒｔ−ｂｕｔｙｌ：略称ｔ−Ｂｕ）基を挙げることができ、第３の保護基Ｘ_３としては、ベンジルオキシカルボニル（ｂｅｎｚｙｌｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌ：略称Ｃｂｚ）基、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（ｔｅｒｔ−ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌ：略称Ｂｏｃ）基を挙げることができる。
具体的には、セリン化合物としては、ベンジルエステル（Ｎ−Ｚ−Ｌ−ｓｅｒｉｎｅｂｅｎｚｙｌｅｓｔｅｒ）、ｔｅｒｔ-ブチルエステル（Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−ｓｅｒｉｎｅｔｅｒｔ−ｂｕｔｙｌｅｓｔｅｒ）等を挙げることができる。ベンジルエステルは市販品を用いることができる。

Ｂｏｃは、（ＣＨ_３）_３Ｃ−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−構造からなる官能基である。アミノ基の保護基として重要である。脱保護によって生ずる副生成物は気体のイソブテンと二酸化炭素だけなので後処理が簡便である。

前記活性化剤としては、イミダゾール・ハイドロクロライドを挙げることができる。これにより、反応を促進できる。

なお、産生信号誘発モノマー前駆体は精製することが好ましい。精製方法は、カラムクロマトグラフィー法を挙げることができる。精製に用いる展開溶媒は、高極性溶媒と低極性溶媒の混合溶媒が好ましく、低極性溶媒のｖｏｌ比を高くしたものが好ましい。高極性溶媒が低極性溶媒の４０ｖｏｌ％以下とすることが好ましい。特に、高極性溶媒：低極性溶媒＝１：３としたものが好ましい。
低極性溶媒としては、Ｈｅｘａｎｅを挙げることができ、高極性溶媒としては、ＭｅＯＨ、ＥｔＯＨ、Ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ、Ｅｔｈｙｌａｃｅｔａｔｅを挙げることができる。
低極性溶媒とは、溶解パラメーターが８以下のものであり、高極性溶媒とは溶解パラメーターが８以上のものである。

（産生信号誘発ポリマー前駆体合成工程Ｓ２）
反応式（３）に示すように、開始剤により、前記産生信号誘発モノマー前駆体を重合する。これにより、ポリアルキルメタクリレートからなる主鎖と、３つの保護基が取り付けられたホスホリルセリン基を含む側鎖と、を有する産生信号誘発ポリマー前駆体を合成する。

開始剤として２、２’−ａｚｏｂｉｓ（４−ｍｅｔｈｏｘｙ−２，４−ｄｉｍｅｔｈｙｌｖａｌｅｒｏｎｉｔｒｉｌｅ）を挙げることができる。

ポリアルキルメタクリレートからなる主鎖のアルキル基はＣ１〜Ｃ５が好ましい。

［産生信号誘発ポリマー前駆体］
産生信号誘発ポリマー前駆体は、ポリアルキルメタクリレートからなる主鎖と、３つの保護基Ｘ_１、Ｘ_２、Ｘ_３が取り付けられたホスホリルセリン基を含む側鎖と、を有する。
３つの保護基Ｘ_１、Ｘ_２、Ｘ_３がそれぞれ、ベンジル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ベンジルオキシカルボニル基、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基の群から選択されるいずれかの官能基である。

（産生信号誘発ポリマー合成工程Ｓ３）
反応式（４）に示すように、酸化剤により、前記ホスホリルセリン基のリンを三価から五価に酸化するとともに、脱保護剤により、前記ホスホリルセリン基の３つの保護基を取り除く。これにより、産生信号誘発ポリマーを合成する。産生信号誘発ポリマーとして、ここでは、ＰＭＰＳを一例として挙げている。

産生信号誘発ポリマーは、ポリアルキルメタクリレートからなる主鎖と、ホスホリルセリン（ＰｈｏＳｅｒ：略称ＰＳ）基を含む側鎖と、を有する。

ホスホリルセリン基は、アミノ基とカルボキシル基を備えたキラル炭素を有し、正電荷を有するアミノ基と、負電荷を有するカルボキシル基により発生する微視的電場の影響を受けたキラル炭素が、マクロファージに細胞間情報伝達分子産生信号を誘発する。よって、前記ホスホリルセリン基をマクロファージに近接させることのより、マクロファージに細胞間情報伝達分子産生信号を誘発して、抗炎症性サイトカインを産生させることができる。つまり、ホスホリルセリン基が産生信号誘発部位である。

ホスホリルセリン基はＬ型が好ましい。Ｌ型は、Ｄ型に比べ、マクロファージに細胞間情報伝達分子産生信号を誘発能が高く、前記ホスホリルセリン基をマクロファージに近接させることのより、抗炎症性サイトカインをより産生させることができる。

ポリアルキルメタクリレートからなる主鎖のアルキル基はＣ_１〜Ｃ_５が好ましい。これにより、産生信号誘発ポリマーを生体適合性ポリマーとして取り扱うことができる。Ｃ１の場合、主鎖はポリメチルメタクリレート（Ｐｏｌｙｍｅｔｈｙｌｍｅｔｈａｃｒｙｌａｔｅ：略称ＰＭＭＡ）となり、産生信号誘発ポリマーはＰＭＰＳとなる。

ポリアルキルメタクリレートは、生体が持つ異物反応（例えば、炎症の惹起や血栓形成などの反応）を起こさず、生体に対して不活性なポリマー及び／又は生体内で徐々に分解され、代謝排泄されてしまう生体適合性ポリマーの一つであり、医用材料に応用できる。
ポリアルキルメタクリレートの側鎖には、ホスホリルセリン基のような産生信号誘発部位を安定に存在させることができる。

産生信号誘発ポリマーの側鎖はすべて産生信号誘発部位を包含している。これにより、マクロファージの認識能も高め、マクロファージへの誘発能も高めて、細胞間情報伝達分子をより多く、短時間で産生させることができる。

産生信号誘発ポリマーは、分子量１万以上であることが好ましい。これにより、産生信号誘発部位を安定に存在させることができる。更に、膜状、液状又は粒子状のバイオミメテック材料としたときの安定性も高めることができる。

酸化剤としては、ｔｅｒｔ−ｂｕｔｙｌｈｙｄｒｏｐｅｒｏｘｉｄｅを挙げることができる。これにより、ホスホリルセリン基のリンのみを三価から五価に効率よく酸化できる。

脱保護剤としては、Ｐｄ／Ｃを挙げることができる。これにより、保護基のみを効率よく脱保護できる。
水素雰囲気、酢酸中で、脱離（脱保護）する。
脱離（脱保護）反応時間は、１時間以上とすることが好ましく、１０時間以上とすることがより好ましい。

産生信号誘発ポリマーは、例えば、産生信号誘発ポリマー膜としてから、マクロファージに近接させることにより、マクロファージに産生信号誘発部位を認識させて、抗炎症性サイトカインを産生させる。

なお、最終生成物「産生信号誘発ポリマー」は精製することが好ましい。精製方法としては再沈殿法を挙げることができる。

本発明の実施形態である産生信号誘発ポリマーの合成方法は、活性化剤により、３つの保護基が取り付けられたホスホリルセリン化合物と、メタクリレート誘導体を反応させて、３つの保護基が取り付けられたホスホリルセリン基がメタクリレート誘導体に結合されてなる産生信号誘発モノマー前駆体を合成する工程と、開始剤により、前記産生信号誘発モノマー前駆体を重合して、ポリアルキルメタクリレートからなる主鎖と、３つの保護基が取り付けられたホスホリルセリン基を含む側鎖と、を有する産生信号誘発ポリマー前駆体を合成する工程と、酸化剤により、前記産生信号誘発ポリマー前駆体のホスホリルセリン基のリンを三価から五価に酸化するとともに、脱保護剤により、前記産生信号誘発ポリマー前駆体のホスホリルセリン基の３つの保護基を取り除いて、ポリアルキルメタクリレートからなる主鎖と、ホスホリルセリン基を含む側鎖と、を有する産生信号誘発ポリマーを合成する工程と、を有することを特徴とする構成なので、環状のリン酸ハロゲン化物を用いることなく、かつ、嫌気性・嫌水性雰囲気で取り扱うことなく、水酸基をバランスよく反応させて、産生信号誘発ポリマーを容易にかつ確実に合成することができる。産生信号誘発ポリマーは、炎症部位のマクロファージに認識させて、抗炎症性サイトカインを産生させることが可能であり、アポトーシス細胞と同様な効果を奏することができる。産生信号誘発ポリマーを利用することにより、心筋梗塞などの炎症を抑制できる。

本発明の実施形態である産生信号誘発ポリマーの合成方法は、産生信号誘発モノマー前駆体を合成する工程の前工程として、活性化剤により、１つの保護基を有するホスホロアミダイト化合物と、２つの保護基及びヒドロキシ基を有するセリン化合物を反応させて、３つの保護基が取り付けられたホスホリルセリン化合物を合成する構成なので、３つの保護基が取り付けられたホスホリルセリン化合物を容易に合成できる。

本発明の実施形態である産生信号誘発ポリマーの合成方法は、保護基がベンジル（ｂｅｎｚｙｌ：Ｂｎ）基、ｔｅｒｔ−ブチル（ｔｅｒｔ−ｂｕｔｙｌ：ｔ−Ｂｕ）基、ベンジルオキシカルボニル基（ｂｅｎｚｙｌｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌ：Ｃｂｚ）基、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（ｔｅｒｔ−ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌ：Ｂｏｃ）基の群から選択されるいずれか一又は二以上の官能基である構成なので、水酸基をバランスよく反応させることができ、産生信号誘発ポリマーを容易にかつ確実に合成できる。

本発明の実施形態である産生信号誘発ポリマーの合成方法は、前記活性化剤がイミダゾール・ハイドロクロライドである構成なので、水酸基をバランスよく反応させて、産生信号誘発モノマー前駆体を容易に合成できる。また、３つの保護基が取り付けられたホスホリルセリン化合物を容易に合成できる。

本発明の実施形態である産生信号誘発ポリマーの合成方法は、前記酸化剤がｔｅｒｔ−ｂｕｔｙｌｈｙｄｒｏｐｅｒｏｘｉｄｅである構成なので、結合反応生成物のリンを三価から五価に効率よく酸化でき、産生信号誘発ポリマー前駆体を容易に酸化できる。

本発明の実施形態である産生信号誘発ポリマーの合成方法は、前記脱保護剤がＰｄ／Ｃである構成なので、第１〜第３の保護基を効率よく脱離することができ、産生信号誘発ポリマー前駆体を容易に脱保護できる。

本発明の実施形態である産生信号誘発ポリマーの合成方法は、産生信号誘発モノマー前駆体を合成する工程と産生信号誘発ポリマー前駆体を合成する工程との間に、高極性溶媒と低極性溶媒からなり、高極性溶媒が低極性溶媒の４０ｖｏｌ％以下の混合溶媒を展開溶媒として用いて、産生信号誘発モノマー前駆体を精製する工程と、を有する構成なので、産生信号誘発モノマー前駆体の純度を高めることができ、産生信号誘発ポリマー前駆体を収率高く合成できる。

本発明の実施形態である産生信号誘発モノマー前駆体は、３つの保護基が取り付けられたホスホリルセリン基がメタクリレート誘導体に結合されてなるモノマーであって、前記３つの保護基がベンジル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ベンジルオキシカルボニル基、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基の群から選択されるいずれか一又は二以上の官能基である構成なので、ホスホリルセリン基のリン酸、アミノ基、カルボキシル基を反応させることなく、重合により、産生信号誘発ポリマー前駆体を容易に合成できる。

本発明の実施形態である産生信号誘発ポリマー前駆体は、ポリアルキルメタクリレートからなる主鎖と、３つの保護基が取り付けられたホスホリルセリン基を含む側鎖と、を有するポリマーであって、前記３つの保護基がそれぞれ、ベンジル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ベンジルオキシカルボニル基、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基の群から選択されるいずれかの官能基である構成なので、酸化・脱保護により、ホスホリルセリン基のリンを三価から五価に酸化し、３つの保護基を脱保護して、産生信号誘発ポリマーを容易に合成できる。

本発明の実施形態である産生信号誘発ポリマーの合成方法、産生信号誘発モノマー前駆体及び産生信号誘発ポリマー前駆体は、上記実施形態に限定されるものではなく、本発明の技術的思想の範囲内で、種々変更して実施することができる。本実施形態の具体例を以下の実施例で示す。しかし、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。

（実施例１）
＜Ｏ−ＢｅｎｚｙｌＮ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−ｔｅｔｒａｉｓｏｐｒｏｐｙｌｐｈｏｓｐｈｏｒｏｄｉａｍｉｄｉｔｅの合成＞
以下に示すように、Ｋｉｎｇらの合成方法（非特許文献５）を用いて、Ｏ−ＢｅｎｚｙｌＮ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−ｔｅｔｒａｉｓｏｐｒｏｐｙｌｐｈｏｓｐｈｏｒｏｄｉａｍｉｄｉｔｅを合成した。

まず、窒素フロー下の二口フラスコ（３００ｍＬ）に回転子、ｄｉｉｓｏｐｒｏｐｙｌａｍｉｎｅ４９ｍＬ、ｈｅｘａｎｅ１４０ｍＬを入れてから、マグネティックスターラーを用いて撹拌した。
次に、氷冷下、この溶液に、ｐｈｏｓｐｈｏｌｕｓｔｒｉｃｈｌｏｒｉｄｅ／ｈｅｘａｎｅ溶液（５ｍＬ／１０ｍＬ）を、等圧滴下ロートにて、１ｍＬ／ｍｉｎの滴下速度で滴下した。
次に、次の化学反応式（５）に示すように、この溶液を３時間室温で撹拌してから、８０℃で２２時間還流して、ｂｉｓ（ｄｉｉｓｏｐｒｏｐｙｌａｍｉｎｏ）ｃｈｌｏｒｏｐｈｏｓｐｈｉｎｅを合成した。

還流後、再び、反応容器を氷冷した。
次に、ｔｒｉｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ（略称ＴＥＡ）を２４ｍＬ加えてから、等圧滴下漏斗でＴＥＡ／ｂｅｎｚｙｌａｌｃｏｈｏｌ溶液（８ｍＬ／６ｍＬ）を滴下速度１ｍＬ／ｍｉｎで滴下して、氷冷下で２５分撹拌し、更に、室温で３５分撹拌した。
次に、反応後の溶液中に存在する析出物をろ過により除去した。
更に、ロータリーエバポレーターで液体成分をある溶媒を完全に除去した。これにより、得られた残留物に２０ｍＬのｈｅｘａｎｅを加えて残留物を溶解させた。
次に、この溶液を分液ロートに移してから、８０ｍＬのａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅにて分液抽出操作を行い、ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ層を廃棄した。
次に、同様の操作を６０ｍＬのａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅで２回行い、ｈｅｘａｎｅ層から不純物を除去した。
次に、分液抽出操作により精製した溶液をロータリーエバポレーターにかけ、溶媒であるｈｅｘａｎｅを完全に除去した。
以上により、次の化学反応式（６）に示すように反応させて、ｂｉｓ（ｄｉｉｓｏｐｒｏｐｙｌａｍｉｎｏ）ｃｈｌｏｒｏｐｈｏｓｐｈｉｎｅからＯ−ＢｅｎｚｙｌＮ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−ｔｅｔｒａｉｓｏｐｒｏｐｙｌｐｈｏｓｐｈｏｒｏｄｉａｍｉｄｉｔｅを得た。

＜反応中間体の合成＞
まず、窒素フロー、氷冷下の２００ｍＬナスフラスコに回転子を入れ、Ｎ−Ｚ−Ｌ−ｓｅｒｉｎｅｂｅｎｚｙｌｅｓｔｅｒ（市販品）３０ｍｍｏｌ、ｄｉｃｈｌｏｒｏｍｅｔｈａｎｅ１２０ｍＬを入れ、Ｏ−ｂｅｎｚｙｌＮ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−ｔｅｔｒａｉｓｏｐｒｏｐｙｌｐｈｏｓｐｈｏｒｏｄｉａｍｉｄｉｔｅ／ｄｉｃｈｌｏｒｏｍｅｔｈａｎｅ溶液（３３ｍｍｏｌ／８０ｍＬ）を加えた。
次に、氷冷下でｉｍｉｄａｚｏｌｅｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅを８．７ｍｍｏｌ加え、室温で２１時間撹拌した。
以上により、次の化学反応式（７）に示すように反応させて、反応中間体を得た。

＜産生信号誘発モノマー前駆体の合成＞
次に、Ｎ_２フローした雰囲気下、室温で、ｈｙｄｒｏｘｙｅｔｈｙｌｍｅｔｈａｃｒｙｌａｔｅ（略称ＨＥＭＡ）（３３ｍｍｏｌ）を加えた。
次に、ｉｍｉｄａｚｏｌｅｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ（８４ｍｍｏｌ）を４５分毎に３回に分けて、加えた。
次に、１５０分後に、５ｗｔ％ＮａＣｌ水溶液で洗浄した。
次に、ｄｉｃｈｌｏｒｏｍｅｔｈａｎｅにて抽出して、クルード生成物を得た。

以上のように、次の化学反応式（８）に示すように反応させて、前記反応中間体をＨＥＭＡに反応させて、クルード生成物を得た。これは、Ｂｎ／Ｃｂｚｐｒｏｔｅｃｔｅｄｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｓｅｒｉｎｅｍｏｎｏｍｅｒであり、ＰＳｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｍｏｎｏｍｅｒである。また、産生信号誘発モノマー前駆体である。

＜産生信号誘発モノマー前駆体の精製＞
次に、得られたクルード生成物を展開溶媒Ｈｅｘａｎｅ：ｅｔｈｙｌａｃｅｔａｔｅ＝３：１を用いて、シリカゲルカラムクロマトグラフィーにて精製した。

＜産生信号誘発モノマー前駆体の評価＞
次に、得られたクルード生成物のＮＭＲ測定を行った。
図３は、得られたクルード生成物（実施例１）のＮＭＲチャート図である。ピーク及びピーク強度により、目的とする化学構造の合成物が得られたことを確認した。

＜産生信号誘発モノマー前駆体の重合＞
まず、産生信号誘発モノマー前駆体「Ｂｎ／Ｃｂｚｐｒｏｔｅｃｔｅｄｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｓｅｒｉｎｅｍｏｎｏｍｅｒ：略称Ｃｂｚ−ＰＳｍｏｎｏｍｅｒ」を１Ｍの濃度となるようにＥｔｈａｎｏｌ／Ｄｉｍｅｔｈｙｌｆｏｒｍａｍｉｄｅに溶解し、氷冷下で撹拌した。
次に、開始剤「２，２’−ａｚｏｂｉｓ（４−ｍｅｔｈｏｘｙ−２，４−ｄｉｍｅｔｈｙｌｖａｌｅｒｏｎｉｔｒｉｌｅ）：略称Ｖ−７０」をＣｂｚ−ＰＳｍｏｎｏｍｅｒ：Ｖ−７０＝１００：１（ｍｏｌａｒｒａｔｉｏ）となるように系に加え、凍結脱気操作を３回おこなった。
次に、系内部を窒素置換し、ＥｔＯＨ：ＤＭＦ＝１：１の混合溶媒中、Ｎ_２フローした雰囲気下、３０℃で２４時間撹拌することで重合を進行させた。
その後、ＤＭＦ中にて透析、真空乾燥を行うことによって白色固体を得た。
以上のように、次の化学反応式（９）に示す化学反応に従い、白色固体を得た。白色固体は、産生信号誘発ポリマー前駆体「Ｂｎ／Ｃｂｚｐｒｏｔｅｃｔｅｄｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｓｅｒｉｎｅｐｏｌｙｍｅｒ：略称Ｃｂｚ−ＰＳｐｏｌｙｍｅｒ」）である。

＜産生信号誘発ポリマー前駆体の評価＞
次に、得られた白色固体のＮＭＲ測定を行った。
図４は、得られた白色固体（実施例１）のＮＭＲチャート図である。ピーク及びピーク強度により、目的とする化学構造が得られたことを確認した。
産生信号誘発ポリマー前駆体は、保護されたホスホリルセリン基を有する側鎖のみからなるものであった。
次に、ＧＰＣによって分子量を測定した。分子量Ｍｗ＝１５５００であった。これにより、約２５量体であることを算出できた。

＜酸化＞
白色固体をｄｉｃｈｌｏｒｏｍｅｔｈａｎｅ溶媒に分散し、調製した溶液を氷冷し、酸化剤であるｔｅｒｔ−ｂｕｔｙｌｈｙｄｒｏｐｅｒｏｘｉｄｅを加え、攪拌した後、１０ｗｔ％ＮａＨＳＯ_３水溶液と５ｗｔ％ＮａＨＣＯ_３水溶液でリンの酸化反応をクエンチングした。これにより、三価のリンを五価になるまで酸化した。

＜脱保護＞
酸化した白色固体を氷酢酸に溶解させてから、パラジウム炭素（Ｐｄ／Ｃ）触媒を分散させ、回転子とともに耐圧反応容器に入れてから、水素雰囲気下で数十時間激しく撹拌した。これにより、脱保護できた。

以上のように、次の化学反応式（１０）に示すように反応させて、産生信号誘発ポリマー前駆体を合成した。ホスホリルコリン基を有する側鎖のみを有するポリマーであった。

＜産生信号誘発ポリマーの精製＞
次に、パラジウム炭素触媒と溶液を遠心分離操作にて分け、液相をジエチルエーテルに滴下して再沈殿法にて精製した。

（実施例２）
＜Ｏ−ｔｅｒｔ−ｂｕｔｏｘｙ−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−ｔｅｔｒａｉｓｏｐｒｏｐｙｌｐｈｏｓｐｈｏｒｏｄｉａｍｉｄｉｔｅの合成＞
まず、保護基をＢｅｎｚｙｌの代わりにｔｅｒｔ−ｂｕｔｙｌとした他は実施例１と同様にして、Ｏ−ｔｅｒｔ−ｂｕｔｏｘｙ−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−ｔｅｔｒａｉｓｏｐｒｏｐｙｌｐｈｏｓｐｈｏｒｏｄｉａｍｉｄｉｔｅを合成した。

＜反応中間体の合成＞
まず、Ｎ_２フローした雰囲気下、氷冷下の２００ｍＬナスフラスコに回転子、Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−ｓｅｒｉｎｅｔｅｒｔ−ｂｕｔｙｌｅｓｔｅｒ（３０ｍｍｏｌ）と、ＣＨ_２Ｃｌ_２（１２０ｍＬ）を入れ、Ｏ−ｔｅｒｔ−ｂｕｔｏｘｙ−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−ｔｅｔｒａｉｓｏｐｒｏｐｙｌｐｈｏｓｐｈｏｒｏｄｉａｍｉｄｉｔｅ／ＣＨ_２Ｃｌ_２（３３ｍｍｏｌ／８０ｍＬ）を加えた。
次に、ｉｍｉｄａｚｏｌｅｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ（８．７ｍｍｏｌ）を加え、ＣＨ_２Ｃｌ_２中、Ｎ_２フローした雰囲気下、室温で、２１時間攪拌した。
以上のように、化学反応式（１１）に示す化学反応に従い、反応中間体を合成した。

＜産生信号誘発モノマー前駆体の合成＞
次に、Ｎ_２フローした雰囲気下、室温で、ｈｙｄｒｏｘｙｅｔｈｙｌｍｅｔｈａｃｒｙｌａｔｅ（略称ＨＥＭＡ）（３３ｍｍｏｌ）を加えた。
次に、ｉｍｉｄａｚｏｌｅｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅを４５分毎に３回に分けて、加えた。
次に、１５０分後に、５ｗｔ％ＮａＣｌ水溶液で洗浄した。
次に、ｄｉｃｈｌｏｒｏｍｅｔｈａｎｅにて抽出して、クルード生成物を得た。

以上のようにして、次の化学反応式（１２）に示すように反応させて、前記反応中間体をＨＥＭＡに反応させて、クルード生成物を得た。これは、ｔ−Ｂｕ／Ｂｏｃｐｒｏｔｅｃｔｅｄｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｓｅｒｉｎｅｍｏｎｏｍｅｒであり、ＰＳｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｍｏｎｏｍｅｒである。また、産生信号誘発モノマー前駆体である。

＜産生信号誘発モノマー前駆体の評価＞
次に、得られたクルード生成物のＮＭＲ測定を行った。
図５は、得られたクルード生成物（実施例２）のＮＭＲチャート図である。ピーク及びピーク強度により、目的とする化学構造の合成物が得られたことを確認した。
図６は、得られたクルード生成物（実施例２）のマススペクトルである。これによっても、目的とする化学構造の合成物が得られたことを確認した。

＜産生信号誘発モノマー前駆体の重合＞
まず、産生信号誘発モノマー前駆体「ｔ−Ｂｕ／Ｂｏｃｐｒｏｔｅｃｔｅｄｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｓｅｒｉｎｅｍｏｎｏｍｅｒ：略称Ｂｏｃ−ＰＳｍｏｎｏｍｅｒ」を１Ｍの濃度となるようにＤｉｍｅｔｈｙｌｆｏｒｍａｍｉｄｅ（略称ＤＭＦ）に溶解し、氷冷下で撹拌した。
次に、開始剤「２，２’−ａｚｏｂｉｓ（４−ｍｅｔｈｏｘｙ−２，４−ｄｉｍｅｔｈｙｌｖａｌｅｒｏｎｉｔｒｉｌｅ）：略称Ｖ−７０」をＢｏｃ−ＰＳｍｏｎｏｍｅｒ：Ｖ−７０＝１００：１（ｍｏｌａｒｒａｔｉｏ）となるように系に加え、凍結脱気操作を３回おこなった。
次に、系内を窒素置換し、ＤＭＦ溶媒中、Ｎ_２フローした雰囲気下、３０℃で、２４時間撹拌して、重合を進行させた。
その後、ＤＭＦ中にて透析、真空乾燥を行うことによって白色固体を得た。
以上のように、次の化学反応式（１３）に示す化学反応に従い、白色固体を得た。白色固体は、産生信号誘発ポリマー前駆体「ｔ−Ｂｕ／Ｂｏｃｐｒｏｔｅｃｔｅｄｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｓｅｒｉｎｅｐｏｌｙｍｅｒ：略称Ｂｏｃ−ＰＳｐｏｌｙｍｅｒ」）である。

＜産生信号誘発ポリマー前駆体の評価＞
次に、得られた白色固体のＮＭＲ測定を行った。
図７は、得られた白色固体（実施例２）のＮＭＲチャート図である。ピーク及びピーク強度により、目的とする化学構造が得られたことを確認した。
産生信号誘発ポリマー前駆体の側鎖は、保護されたホスホリルセリン基を有する側鎖のみであった。

以上のようにして、次の化学反応式（１４）に示すように反応させて、産生信号誘発ポリマーを合成した。ホスホリルコリン基を有する側鎖のみを有するポリマーであった。

（実施例３）
＜展開溶媒の検討（Ｂｎ／Ｃｂｚｐｒｏｔｅｃｔｅｄｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｓｅｒｉｎｅｍｏｎｏｍｅｒの精製）＞
まず、ＭｅＯＨ、ＥｔＯＨ、Ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ、Ｅｔｈｙｌａｃｅｔａｔｅ、Ｈｅｘａｎｅを用いて、ＴＬＣ（Ｔｈｉｎ−ＬａｙｅｒＣｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ）によってシリカゲルカラムクロマトグラフィーに用いる展開溶媒を検討した。

その結果、ＭｅＯＨ、ＥｔＯＨ、Ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ、Ｅｔｈｙｌａｃｅｔａｔｅのような極性が高い溶媒を用いた場合には、有意に精製を行うことができなかった。
逆に、極性が低いＨｅｘａｎｅを用いた場合でも、有意な精製を行うことが出来なかった。
表１は、単一の溶媒を展開溶媒とした場合の実験結果を示す。

そこで、低極性溶媒であるＨｅｘａｎｅと高極性溶媒であるＭｅＯＨ、ＥｔＯＨ、Ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ、Ｅｔｈｙｌａｃｅｔａｔｅを混合して用いることを検討した。

まず、ＨｅｘａｎｅとＭｅＯＨ、ＥｔＯＨ、Ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ、Ｅｔｈｙｌａｃｅｔａｔｅを体積比１：１の割合で混合した溶媒について、ＴＬＣで検討した。
ＥｔＯＨ、Ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ混合の場合では、溶媒の極性が高く、精製を有意に行うことができなかった。
また、ＨｅｘａｎｅとＭｅＯＨは混合しなかったため検討を行うことができなかった。
一方、Ｅｔｈｙｌａｃｅｔａｔｅ／Ｈｅｘａｎｅの系では、精製を行うことが可能であることを確認した。しかし、溶媒の極性が若干高かったため精製に最適では無いことが示唆された。

そのため、Ｅｔｈｙｌａｃｅｔａｔｅの比を１０〜４０％に調整したＥｔｈｙｌａｃｅｔａｔｅ／Ｈｅｘａｎｅにて精製の評価を行ったところ、産生信号誘発モノマー前駆体の精製において、「Ｅｔｈｙｌａｃｅｔａｔｅ：Ｈｅｘａｎｅ＝１：３」の展開溶媒を用いると、産生信号誘発モノマー前駆体の純度が高められ、産生信号誘発ポリマー前駆体の収率が向上した。これにより、Ｅｔｈｙｌａｃｅｔａｔｅ：Ｈｅｘａｎｅ＝１：３の濃度が精製に最適であるということが明らかとなった。
表２は、混合溶媒を展開溶媒とした場合の実験結果を示す。

本発明の産生信号誘発ポリマーの合成方法、産生信号誘発モノマー前駆体及び産生信号誘発ポリマー前駆体は、マクロファージに近接させることにより、産生信号誘発部位をマクロファージに認識させて、抗炎症性サイトカインを産生させることができる産生信号誘発ポリマーの合成方法、及びその合成で使用される産生信号誘発モノマー前駆体及び産生信号誘発ポリマー前駆体に関するものであり、アポトーシス細胞のバイオミメテック材料となる産生信号誘発ポリマーを容易に製造でき、医薬品製造産業、医薬関連製品産業等において利用可能性がある。

６１…マクロファージ、６２…刺激、６３…炎症性サイトカイン、６５…アポトーシス細胞、６６…抗炎症性サイトカイン。

Claims

活性化剤により、３つの保護基が取り付けられたホスホリルセリン化合物と、メタクリレート誘導体を反応させて、３つの保護基が取り付けられたホスホリルセリン基がメタクリレート誘導体に結合されてなる産生信号誘発モノマー前駆体を合成する工程と、
開始剤により、前記産生信号誘発モノマー前駆体を重合して、ポリアルキルメタクリレートからなる主鎖と、３つの保護基が取り付けられたホスホリルセリン基を含む側鎖と、を有する産生信号誘発ポリマー前駆体を合成する工程と、
酸化剤により、前記産生信号誘発ポリマー前駆体のホスホリルセリン基のリンを三価から五価に酸化するとともに、脱保護剤により、前記産生信号誘発ポリマー前駆体のホスホリルセリン基の３つの保護基を取り除いて、ポリアルキルメタクリレートからなる主鎖と、ホスホリルセリン基を含む側鎖と、を有する産生信号誘発ポリマーを合成する工程と、を有することを特徴とする産生信号誘発ポリマーの合成方法。
産生信号誘発モノマー前駆体を合成する工程の前工程として、活性化剤により、１つの保護基を有するホスホロアミダイト化合物と、２つの保護基及びヒドロキシ基を有するセリン化合物を反応させて、３つの保護基が取り付けられたホスホリルセリン化合物を合成することを特徴とする請求項１に記載の産生信号誘発ポリマーの合成方法。
保護基がベンジル（ｂｅｎｚｙｌ：Ｂｎ）基、ｔｅｒｔ−ブチル（ｔｅｒｔ−ｂｕｔｙｌ：ｔ−Ｂｕ）基、ベンジルオキシカルボニル基（ｂｅｎｚｙｌｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌ：Ｃｂｚ）基、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（ｔｅｒｔ−ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌ：Ｂｏｃ）基の群から選択されるいずれか一又は二以上の官能基であることを特徴とする請求項１又は２に記載の産生信号誘発ポリマーの合成方法。
前記活性化剤がイミダゾール・ハイドロクロライドであることを特徴とする請求項１又は２に記載の産生信号誘発ポリマーの合成方法。
前記酸化剤がｔｅｒｔ−ｂｕｔｙｌｈｙｄｒｏｐｅｒｏｘｉｄｅであることを特徴とする請求項１に記載の産生信号誘発ポリマーの合成方法。
前記脱保護剤がＰｄ／Ｃであることを特徴とする請求項１に記載の産生信号誘発ポリマーの合成方法。
産生信号誘発モノマー前駆体を合成する工程と産生信号誘発ポリマー前駆体を合成する工程との間に、高極性溶媒と低極性溶媒からなり、高極性溶媒が低極性溶媒の４０ｖｏｌ％以下の混合溶媒を展開溶媒として用いて、産生信号誘発モノマー前駆体を精製する工程と、を有することを特徴とする請求項１に記載の産生信号誘発ポリマーの合成方法。
３つの保護基が取り付けられたホスホリルセリン基がメタクリレート誘導体に結合されてなるモノマーであって、
前記３つの保護基がベンジル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ベンジルオキシカルボニル基、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基の群から選択されるいずれか一又は二以上の官能基であることを特徴とする産生信号誘発モノマー前駆体。
ポリアルキルメタクリレートからなる主鎖と、３つの保護基が取り付けられたホスホリルセリン基を含む側鎖と、を有するポリマーであって、
前記３つの保護基がそれぞれ、ベンジル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ベンジルオキシカルボニル基、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基の群から選択されるいずれかの官能基であることを特徴とする産生信号誘発ポリマー前駆体。