JP2015081836A - 質量分析方法及び質量分析装置 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】レーザ光パワーを複数段階に変えてISD-MS分析を行い、それぞれマススペクトルを取得する(S1-S2)。主としてインソース分解により生成されるc系列フラグメントイオンは、主としてクーリングによる意図しない開裂で生成されるb系列イオン等と異なり、低レーザ光パワーにおいて信号強度増加が顕著である。そこで、複数のISDマススペクトルに共通のイオンを基準として各ISDマススペクトルにおいて他のピークの強度を規格化し(S4)、複数のISDマススペクトル間で同じm/zのピークの相対強度を比較する(S5)。その結果により、c系列フラグメントイオンを識別し(S6)、フラグメントイオン情報を利用しつつペプチドの同定等を実施する(S7)。
【選択図】図2
Description
なお、以下の説明では、MALDIイオン源におけるインソース分解を利用した質量分析方法を「MALDI−ISD分析」と称す。
a)同一の試料に対し、MALDIイオン源において試料に照射するレーザ光のパワーを複数段階に変化させつつインソース分解を利用した質量分析を行い、それぞれマススペクトルを取得するマススペクトル取得ステップと、
b)前記複数のマススペクトルで観測される任意のピークの信号強度を基準として、その各マススペクトルにおいて他のピークの相対強度を求め、複数のマススペクトルの間で同一の質量電荷比を持つピークの相対強度を比較することにより、該ピークに対応するフラグメントイオンのイオン系列を識別するフラグメントイオン識別ステップと、
を実行することを特徴としている。
a)同一の試料に対し、MALDIイオン源において試料に照射するレーザ光のパワーを複数段階に変化させつつインソース分解を利用した質量分析を行い、それぞれマススペクトルを取得するべく各部を制御する測定実行制御部と、
b)前記測定実行制御部の制御の下で得られた複数のマススペクトルで観測される任意のピークの信号強度を基準として、その各マススペクトルにおいて他のピークの相対強度を求め、複数のマススペクトルの間で同一の質量電荷比を持つピークの相対強度を比較することにより、該ピークに対応するフラグメントイオンのイオン系列を識別するデータ処理部と、
を備えることを特徴としている。
また、イオントラップは一般的には3次元四重極型イオントラップであるが、リニアイオントラップでもよい。
図1は本実施例によるMALDI−IT−TOFMSシステムの概略構成図である。まず、このシステムの構成と基本的な分析動作について説明する。
(1)試料(目的化合物)
(A)Angiotensin II, human[アミノ酸配列:DRVYIHPF](以下「Ang2」と称す)
(B)N-Acetyl-Renin Substrate Tetradecapeptide, porcine[アミノ酸配列:Ac-DRVYIHPFHLLVYS](以下「Renin」と称す)
(C)Adrenocorticotropic hormone fragment 18-39, human[アミノ酸配列:RPVKVYPNGAEDESAEAFPLEF](以下「ACTH18-39」と称す)
(2)マトリクス: 2,5-ジヒドロキシ安息香酸(2,5-dihydroxybenzoic acid)
(3)質量分析装置:MALDI四重極イオントラップ飛行時間型質量分析計(島津製作所製 AXIMA-Resonance)
(4)サンプルプレート: ステンレス製2mm厚プレート
10…サンプルプレート
11…試料ステージ
12…サンプル
13…引出電極
14…加速電極
15…レーザ照射部
16…反射鏡
2…イオントラップ
20…リング電極
21、22…エンドキャップ電極
3…質量分析部
30…飛行空間
31…反射器
32…検出器
4…ガス供給部
5…制御部
6…データ処理部
61…スペクトルデータ格納部
62…フラグメントイオン帰属処理部
63…タンパク質/ペプチド同定処理部
7…入力部
8…表示部
Claims (4)
- マトリクス支援レーザー脱離イオン化(MALDI)イオン源と、イオンを一時的に保持するイオントラップとを具備し、前記イオントラップにより又は該イオントラップとは別に具備された質量分離部により、イオンを質量電荷比に応じて分離して検出する質量分析装置を用いた質量分析方法であって、
a)同一の試料に対し、MALDIイオン源において試料に照射するレーザ光のパワーを複数段階に変化させつつインソース分解を利用した質量分析を行い、それぞれマススペクトルを取得するマススペクトル取得ステップと、
b)前記複数のマススペクトルで観測される任意のピークの信号強度を基準として、その各マススペクトルにおいて他のピークの相対強度を求め、複数のマススペクトルの間で同一の質量電荷比を持つピークの相対強度を比較することにより、該ピークに対応するフラグメントイオンのイオン系列を識別するフラグメントイオン識別ステップと、
を実行することを特徴とする質量分析方法。 - 請求項1に記載の質量分析方法であって、
前記フラグメントイオン識別ステップでは、相対的に高いレーザ光パワーの下で得られたマススペクトル上のピークの相対強度に比べて、相対的に低いレーザ光パワーの下で得られたマススペクトル上のピークの相対強度比が高くなるイオンを探索し、該イオンをインソース分解に由来するフラグメントイオンであると判断することを特徴とする質量分析方法。 - マトリクス支援レーザー脱離イオン化(MALDI)イオン源と、該イオン源で生成されたイオンを一時的に保持するイオントラップとを、具備し、前記イオントラップにより又は該イオントラップとは別に具備された質量分離部により、イオンを質量電荷比に応じて分離して検出する質量分析装置において、
a)同一の試料に対し、MALDIイオン源において試料に照射するレーザ光のパワーを複数段階に変化させつつインソース分解を利用した質量分析を行い、それぞれマススペクトルを取得するべく各部を制御する測定実行制御部と、
b)前記測定実行制御部の制御の下で得られた複数のマススペクトルで観測される任意のピークの信号強度を基準として、その各マススペクトルにおいて他のピークの相対強度を求め、複数のマススペクトルの間で同一の質量電荷比を持つピークの相対強度を比較することにより、該ピークに対応するフラグメントイオンのイオン系列を識別するデータ処理部と、
を備えることを特徴とする質量分析装置。 - 請求項3に記載の質量分析装置であって、
前記データ処理部は、相対的に高いレーザ光パワーの下で得られたマススペクトル上のピークの相対強度に比べて、相対的に低いレーザ光パワーの下で得られたマススペクトル上のピークの相対強度比が高くなるイオンを探索し、該イオンをインソース分解に由来するフラグメントイオンであると判断することを特徴とする質量分析装置。
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