JP2015063493A - シソ科植物エキスの製造方法 - Google Patents

Abstract

【課題】 抗炎症作用や抗ガン作用等の機能性を有するルテオリンを含有する安全な機能性素材を提供する。
【解決手段】 シソ科植物を原料として、該原料をβ−グルコシダーゼ活性を有する酵素を用いて酵素処理することにより、機能性成分であるルテオリンを含有するシソ科植物エキスの製造方法を提供する。さらに、油脂を添加し攪拌処理した後に、該油脂を分離・除去することにより、機能性成分であるルテオリンを含有し、かつ、シソ科植物の特徴的な強い臭いを低減したシソ科植物エキスの製造方法を提供する。
【選択図】なし

Description

本発明は、シソ科植物エキスの製造方法に関する。

シソ科植物（Ｌａｍｉａｃｅａｅ）は、香気成分や抗酸化成分に富むものが多く、古くから香辛料や薬草といったいわゆるハーブとして利用されている。また、シソ科植物の有する機能性成分がもたらす様々な生理活性に着目して、種々の検討が行われている。例えば、ローズマリー、タイムおよびメリッサからなる群から選ばれたシソ科植物より水で抽出されるヒアルロニダーゼ阻害物質を有効成分とする抗アレルギー剤（特許文献１）、シソ科、クスノキ科、フトモモ科及びキク科植物からなる群より選ばれた少なくとも１種を有効成分として含有する生体内抗酸化剤（特許文献２）、又は、シソ科、キク科、ショウガ科、バラ科およびセリ科植物からなる群より選ばれた少なくとも１種の植物の抽出物の分画物を有効成分として含有する血小板凝集抑制剤（特許文献３）が開示されている。

ルテオリンは、ローズマリーやスギナ等の植物に含まれているフラボンであり、抗炎症作用（非特許文献１）や抗ガン作用（非特許文献２）等の機能性を有する。例えば、ルテオリンは、ｉｎ ｖｉｔｒｏ試験において様々な種類の腫瘍細胞の増殖を抑制すること（ＩＣ５０：３〜５０μＭ）が、また、ｉｎ ｖｉｖｏ試験において腫瘍の成長を効果的に抑制すること（食品中に５０〜２００ｐｐｍのルテオリンを配合した場合、一日当たり０．１〜０．３ｍｇ／Ｋｇ（体重）のルテオリンを胃内投与した場合又は５〜１０ｍｇ／Ｋｇ（体重）のルテオリンを腹腔内投与した場合）が報告されている（非特許文献３）。

シソ科植物は、ルテオリンを始めとする機能性成分の多くを配糖体の形で含有している。しかし、これら機能性成分は、配糖体よりもアグリコンの形態で投与する方が有効であるという報告がされている（非特許文献４）。また、シソ科植物は、カルバクロールやチモールといった刺激臭を有する成分を含有しており、独特の強い臭気を有するため、シソ科植物に含まれる機能性成分を継続的に摂取する上で制限を受けるという問題がある。このような独特の強い臭気の低減を目的として、例えば、抗酸化成分を含む植物を、アルコール濃度２０〜８０重量％のアルコール水溶液にて抽出し、得られた植物抽出液のアルコール濃度を１０重量％以下とした後に、合成吸着剤に通液することを特徴とする抗酸化剤の製造方法（特許文献４）が開示されている。

このように、抗炎症作用や抗ガン作用等の機能性を有するルテオリンを含有する安全な機能性素材が依然として求められている。

特開平８−３３３２６７号公報 特開２０１１−２３６１４９号公報 特開２０１２−１５３６７１号公報 特開２００２−３８４０号公報

プランタ・メディカ（Ｐｌａｎｔａ Ｍｅｄｉｃａ）、２００７年、第７３巻、第３号、ｐ．２２１−２２６ インディアン・ジャーナル・オブ・クリニカル・バイオケミストリー（ＩＮＤＩＡＮ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）、２０１２年、第２７巻、第２号、ｐ．１５７−１６３ モレキュールズ（Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ）、２００８年、第１３巻、ｐ．２６２８−２６５１ ザ・ジャーナル・オブ・ファーマコロジー・アンド・エクスペリメンタル・テラピューティクス（Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）、２００１年、第２９６巻、第１号、ｐ．１８１−１８７

本発明の課題は、シソ科植物を原料として、機能性成分であるルテオリンを含有するシソ科植物エキスの製造方法を提供することである。さらに、本発明の課題は、機能性成分であるルテオリンを含有し、シソ科植物の特徴的な強い臭いを低減したシソ科植物エキスの製造方法を提供することである。

本発明者らは、鋭意研究を行った結果、シソ科植物を原料として、該原料をβ−グルコシダーゼ活性を有する酵素を用いて酵素処理すること、さらに、油脂を添加し攪拌処理した後に、該油脂を分離・除去することにより、上記課題を解決することができることを見出し、本発明を完成させた。
なお、本明細書におけるシソ科植物とは、シソ科に属する植物又はシソ科の植物のことをいう。

すなわち、本発明は、シソ科植物を原料として、該原料をβ−グルコシダーゼ活性を有する酵素を用いて酵素処理することにより得られる、機能性成分であるルテオリンを含有する、シソ科植物エキスの製造方法を提供するものである。そして、本発明は、さらに、油脂を添加し攪拌処理した後に、該油脂を分離・除去することにより得られる、機能性成分であるルテオリンを含有し、かつ、シソ科植物の特徴的な強い臭いを低減したシソ科植物エキスの製造方法を提供するものである。

本発明には、下記の態様が含まれる。
項（１）
シソ科植物を原料として、該原料をβ−グルコシダーゼ活性を有する酵素を用いて酵素処理することにより得られる、ルテオリンを含有することを特徴とするシソ科植物エキスの製造方法。
項（２）
ルテオリンが遊離のものである、項（１）に記載の製造方法。
項（３）
シソ科植物が、タイム、セージ、ローズマリー又はマジョラムからなる群より選ばれる少なくとも１種である、項（１）又は項（２）に記載の製造方法。
項（４）
前記原料が、粉砕物又は抽出物である項（１）乃至項（３）のいずれか１項に記載の製造方法。
項（５）
さらに、油脂を添加し攪拌処理した後に、該油脂を分離・除去することにより、シソ科植物の特徴的な強い臭いを低減することを特徴とする、項（１）乃至項（４）のいずれか１項に記載の製造方法。
項（６）
油脂を添加して行う攪拌処理が、β−グルコシダーゼ活性を有する酵素を用いた酵素処理と並行して又はβ−グルコシダーゼ活性を有する酵素を用いた酵素処理後に行われる、項（５）に記載の製造方法。
項（７）
項（１）乃至項（６）のいずれか１項に記載の製造方法により得られるシソ科植物エキス。
項（８）
項（７）記載のシソ科植物エキスを含有する飲料、食品、医薬部外品又は飼料。

本発明によれば、機能性成分であるルテオリンを含有するシソ科植物エキスを提供することができる。さらに、本発明によれば、機能性成分であるルテオリンを含有し、かつ、カルバクロール等の刺激臭を有する成分によるシソ科植物の特徴的な強い臭いを低減したシソ科植物エキスを提供することができる。
本発明によるシソ科植物エキスを用いることにより、ルテオリンの機能性を利用した飲料、食品、医薬部外品又は飼料を提供することができる。

本発明において、原料のシソ科植物は、一般に食用に供されるものでシソ科（Ｌａｍｉａｃｅａｅ）に属する植物であればいずれを用いてもよい。例えば、タイム、セージ、ローズマリー、マジョラム、オレガノ、セイバリー、バジル、レモンバーム、ミント、エゴマ及びシソ等が挙げられるが、好ましくは、タイム、セージ、ローズマリー、マジョラム、オレガノであり、より好ましくは、タイム、セージ又はローズマリーである。本発明において使用するシソ科植物は、生の状態のものであっても、乾燥したものであっても、いずれも用いることができる。また、本発明において使用するシソ科植物の部位は、特に限定されず、葉、茎、根、実又は種子等、いずれを用いてもよい。原料のシソ科植物は、１種を単独で用いてもよく、また複数種を併用してもよい。

本発明において、原料のシソ科植物は、粉砕物又は抽出物を用いてもよく、中でも、シソ科植物の抽出物を用いることが好ましい。

シソ科植物の粉砕物は、原料のシソ科植物を単独で、又は水等の溶媒を加えて粉砕処理した粉砕物であればよい。原料のシソ科植物を粉砕処理する方法は、特に限定されず、食材の加工に一般に用いられる方法を単独又は組み合わせて処理することができる。粉砕処理に用いる機器としては、例えば、切断、粉砕、摩擦、空気圧、水圧等を利用して加工する各種の裁断機、粉砕機等が挙げられる。シソ科植物の粉砕物は、粉砕後そのまま又は固液分離して得られた液部を用いることができる。さらに、シソ科植物の粉砕物は、適宜ｐＨ調整剤等の添加物を配合することができる。

シソ科植物の抽出物は、原料のシソ科植物を水、アルコール又は水−アルコール混合溶液等で抽出した抽出物であればよい。原料のシソ科植物を抽出する方法は、特に限定されず、公知の手段を単独又は組み合わせて抽出することができる。抽出方法としては、例えば、常温抽出、加熱抽出、加圧抽出、攪拌抽出、超音波抽出等が挙げられる。原料のシソ科植物は、そのままの形状で抽出してもよく、細切処理又は粉砕処理したものを用いてもよい。シソ科植物の抽出物は、抽出後そのまま又は固液分離して得られた液部を用いることができる。中でも、抽出後固液分離して得られた液部が好ましい。また、シソ科植物の抽出物は、その濃縮物を用いることができる。さらに、シソ科植物の抽出物は、適宜ｐＨ調整剤等の添加物を配合することができる。シソ科植物の抽出物としては、例えば、タイムエキス、セージエキス、ローズマリーエキス、マジョラムエキス、オレガノエキス、セイバリーエキス、バジルエキス、レモンバームエキス、ミントエキス、エゴマエキス、シソエキス等が挙げられる。

本発明において、シソ科植物を原料として、該原料をβ−グルコシダーゼ活性を有する酵素を用いて酵素処理を行う。本発明において用いるβ−グルコシダーゼ活性を有する酵素は、食品に用いることができるβ−グルコシダーゼ活性を有する酵素であればいずれでもよく、該酵素を含むものであってもよい。また、酵素製剤の形でも用いることができる。β−グルコシダーゼ活性を有する酵素としては、例えば、β−グルコシダーゼ製剤であるアロマーゼ（登録商標）（天野エンザイム株式会社製）、スミチーム（登録商標）ＢＧＡ（新日本化学工業株式会社製）、ラピターゼ（登録商標）ＡＲ２０００（ディー・エス・エムジャパン株式会社製）等が挙げられる。

本発明において、β−グルコシダーゼ活性を有する酵素を用いて酵素処理する温度は、通常２０〜７０℃、好ましくは３０〜６５℃、より好ましくは４０〜６０℃である。また、本発明において、β−グルコシダーゼ活性を有する酵素を用いて酵素処理する時間は、通常３０分間〜３０時間、好ましくは１〜２４時間、より好ましくは２〜２０時間である。また、本発明において、β−グルコシダーゼ活性を有する酵素の添加量は、処理温度及び処理時間により適宜変更することができるが、例えば、酵素製剤として、原料のシソ科植物に対して、通常０．０１〜５重量％、好ましくは０．０５〜３重量％、より好ましくは０．１〜２重量％である。

本発明において、β−グルコシダーゼ活性を有する酵素を用いて酵素処理する前に、原料のシソ科植物のｐＨを、β−グルコシダーゼ活性を有する酵素の至適ｐＨ付近に調整することが好ましい。調整するｐＨは、通常ｐＨ２〜８であり、好ましくはｐＨ３〜６である。なお、前記ｐＨ調整を行った場合、該酵素処理した後に中和処理を行ってもよい。ｐＨの調整及び中和処理は、ｐＨ調整剤として一般に食品に利用されているものを用いることができる。ｐＨ調整剤は、食品添加物として指定されたものであれば特に限定されない。ｐＨ調整剤としては、例えば、塩酸、クエン酸、酢酸、水酸化ナトリウム、炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム等が挙げられる。

本発明において、得られるシソ科植物エキスが含有する機能性成分であるルテオリンの含有量については、少なくとも含有していればよく、好ましくは固形物あたり５０ｐｐｍ以上であり、より好ましくは固形物あたり２００ｐｐｍ以上、さらに好ましくは固形物あたり５００ｐｐｍ以上、特に好ましくは固形物あたり１０００ｐｐｍ以上である。
なお、本発明においてシソ科植物エキスが含有するルテオリンとは、アグリコンの状態で存在する、いわゆる遊離の状態のものをいう。

本発明において、前記酵素処理を行った後に、酵素失活処理を行う。酵素失活処理は、最終的に得られるシソ科植物エキスにおいて酵素活性が残存しないように行えばよく、また、酵素失活処理の条件は、前記酵素処理において用いた酵素が失活する条件であれば特に限定されない。

本発明において、原料のシソ科植物を、油脂を添加し攪拌処理を行ってもよい。本発明において、β−グルコシダーゼ活性を有する酵素を用いた酵素処理及び油脂を添加し攪拌処理した後、該油脂の分離・除去を行うことで、機能性成分であるルテオリンを効率的に含有させることに加えて、カルバクロール等の刺激臭を有する成分によるシソ科植物の特徴的な強い臭いを効果的に低減した、シソ科植物エキスを製造することができる。
油脂を添加し攪拌処理を行うとき、該攪拌処理は、β−グルコシダーゼ活性を有する酵素を用いた酵素処理と並行して又はβ−グルコシダーゼ活性を有する酵素を用いた酵素処理後に行うことができる。
また、該攪拌処理後に行われる該油脂の分離・除去は、前記β−グルコシダーゼ活性を有する酵素を用いた酵素処理後に行うことができる。

本発明において用いる油脂は、一般に食品に用いることができる油脂であればいずれでもよく、該油脂を含むものであってもよい。本発明において用いる油脂としては、例えば、なたね油、大豆油、コーン油、ヒマワリ油、サフラワー油、米ぬか油、綿実油、オリーブ油、ごま油、落花生油、ブドウ種子油、椿油、シソ油、アマニ油、クルミ油、カラシ油、カボチャ種子油、スイカ種子油、ココナッツ油、アーモンド油、ヘーゼルナッツ油、マカデミアナッツ油、カシューナッツ油、ピスタチオ油、小麦胚芽油、茶実油、アボカド油、パパイヤ油、パーム油、パーム核油、ヤシ油、カカオバター等の植物性油脂；ラード、ヘット、鶏油、魚油、馬油、鯨油、アザラシ油、乳脂等の動物性油脂；及びこれらの水素添加油脂、分別油脂等が挙げられる。

本発明において、油脂を添加し攪拌処理する方法は、特に限定されず、一般的に攪拌に使用される公知の手段を用いることが出来る。油脂を添加し攪拌処理する方法としては、例えば、攪拌翼や攪拌子等を用いる機械式又は磁気式の攪拌機により攪拌対象を攪拌処理する方法、空気や窒素等の気体を攪拌対象に吹き込み攪拌処理する方法、また、攪拌対象を収容する容器を振盪、回転等することにより攪拌対象を攪拌処理する方法等が挙げられる。

本発明において、油脂を添加し攪拌処理する温度は、添加する油脂が流動性を有する温度であればいずれでもよいが、通常２０〜１００℃、好ましくは３０〜９０℃、より好ましくは３５〜８０℃である。また、本発明において、油脂を添加し攪拌処理する時間は、少なくとも５分間以上であり、通常１０分間〜３０時間、好ましくは２０分間〜２４時間、より好ましくは３０分間〜２０時間である。また、本発明において、攪拌処理する油脂の添加量は、該処理温度及び該処理時間により適宜変更することができるが、通常、油脂を添加する処理液中の固形物に対して重量比で０．２倍量〜２０倍量、好ましくは０．５倍量〜１５倍量、より好ましくは１倍量〜１０倍量である。

本発明において、油脂を添加し攪拌処理を行った場合、用いた油脂は、分離・除去される。油脂を分離・除去する方法は、特に限定されず、遠心分離、デカンテーション、油吸着剤や油凝集剤の使用等の公知の方法により行うことができる。

本発明により得られるシソ科植物エキスは、風味が良好で嗜好性に優れていることから、そのままの形態でも利用することができるが、さらに、該エキスを固液分離した液部として用いることができる。固液分離する方法は、特に限定されず、濾過、遠心分離等の公知の方法により行うことができる。また、本発明により得られるシソ科植物エキスは、そのまま又は固液分離した液部を常法により濃縮機等で処理して濃縮物として用いてもよく、また、乾燥して用いてもよい。乾燥方法は、特に限定されず、公知の手段を用いて乾燥することができる。乾燥方法としては、例えば、スプレードライヤー、ドラムドライヤー、フリーズドライヤー、エアードライヤー等の公知の手段を用いることができる。また、デキストリン等の賦形剤を添加して乾燥してもよい。さらに、乾燥により得られたものを粉砕後、粉末等として用いてもよく、必要に応じて造粒機等を用いて顆粒品とすることができる。

本発明により得られるシソ科植物エキスは、そのまま又は水等で希釈して利用することができる。さらに、本発明により得られるシソ科植物エキスは、種々の加工食品、例えば、即席食品、乳製品、菓子類、調味料、茶飲料、野菜飲料、大豆飲料、豆乳飲料等の各種の飲料や食品に適宜添加、配合して用いることもできる。また、必要に応じて、通常の飲料又は食品の原料や添加物として使用されているものと併用することもできる。

本発明により得られるシソ科植物エキスは、特定保健用食品、機能性食品、栄養補助食品といった食品や、医薬部外品又は飼料等に用いることができる。形態としては、アンプル、カプセル、丸剤、錠剤、粉末、顆粒、固形、液剤、ゲル、エアロゾル等とすることができるほか、各種製品中に配合することができる。これら製品の調製に当たっては、賦形剤、結合剤、潤沢剤等を適宜配合することができる。

以下、実施例を示して本発明を具体的に説明するが、本発明は以下の例によって限定されるものではない。なお、本実施例において、各原料及び素材の配合比率、含有比率、濃度は断りのない限り全て重量部基準である。

［調製１］
タイム粉末（株式会社ケー・アイ・エス製）４０ｇに水７６０ｇを加えて、９０℃で３０分間抽出した後、濾布（不織布）を用いて濾過することにより固液分離を行うことで、タイムエキス６４０ｇ（固形分１．６４％）（調製１）を得た。得られたタイムエキスについて、機能性成分であるルテオリン及び刺激臭成分であるカルバクロールの含有量を高速液体クロマトグラフィー（以下、「ＨＰＬＣ」という）で以下に示す測定条件にて測定した結果、その固形物あたりの含有量は、ルテオリン：不検出、カルバクロール：１０５３ｐｐｍであった。

＜ＨＰＬＣの測定条件（ルテオリン）＞
検出器：ＵＶ検出器（紫外波長２５４ｎｍ）
カラム：ＩｎｅｒｔＳｕｓｔａｉｎ Ｃ１８（内径４．６ｍｍ、長さ２５０ｍｍ）
移動相Ａ：１５容量％アセトニトリル水溶液（０．１容量％酢酸含有）
移動相Ｂ：３５容量％アセトニトリル水溶液（０．１容量％酢酸含有）
グラジエント：移動相Ａから移動相Ｂへのリニアグラジエント（５０分間）
流速：１．５ｍｌ／分
カラム温度：４０℃
標品：ルテオリン（東京化成工業株式会社製）を８０％アセトニトリル水溶液に溶解して、検量線を作成した。
検体：試料を８０％アセトニトリル水溶液で、適宜希釈したもの。

＜ＨＰＬＣの測定条件（カルバクロール）＞
検出器：ＵＶ検出器（紫外波長２８０ｎｍ）
カラム：ＩｎｅｒｔＳｕｓｔａｉｎ Ｃ１８（内径４．６ｍｍ、長さ２５０ｍｍ）
移動相Ａ：２０容量％アセトニトリル水溶液
移動相Ｂ：アセトニトリル
グラジエント：移動相Ａから移動相Ｂへのリニアグラジエント（４０分間）
流速：１．０ｍｌ／分
カラム温度：４０℃
標品：カルバクロール（和光純薬工業株式会社製）を８０％アセトニトリル水溶液に溶解して、検量線を作成した。
検体：試料を８０％アセトニトリル水溶液で、適宜希釈したもの。

［実施例１］
調製１で得られたタイムエキス１６０ｇを三角フラスコに入れ、β−グルコシダーゼ製剤であるアロマーゼを０．３２ｇ添加して、６０℃で３時間酵素処理した後、８０℃で３０分間酵素失活処理を行った。次いで、遠心分離（２５００×Ｇ、５分間）して固液分離することで、本発明のシソ科植物エキス１４０ｇ（固形分１．８０％）（実施例１）を得た。得られた本発明のシソ科植物エキスについて、調製１と同様にしてＨＰＬＣでルテオリン含有量及びカルバクロール含有量を測定した結果、その固形物あたりの含有量は、ルテオリン：１０８００ｐｐｍ、カルバクロール：８８５ｐｐｍであった。

［調製２］
セージ粉末（株式会社ケー・アイ・エス製）３０ｇに水５４０ｇを加えて、９０℃で３０分間抽出した後、濾布（不織布）を用いて濾過することにより固液分離を行うことで、セージエキス４５０ｇ（固形分１．４３％）（調製２）を得た。得られたセージエキスについて、調製１と同様にしてＨＰＬＣでルテオリン含有量及びカルバクロール含有量を測定した結果、その固形物あたりの含有量は、ルテオリン：不検出、カルバクロール：５１ｐｐｍであった。

［実施例２］
調製２で得られたセージエキス１６０ｇを三角フラスコに入れ、β−グルコシダーゼ製剤であるアロマーゼを０．３２ｇ添加して、６０℃で３時間酵素処理した後、８０℃で３０分間酵素失活処理を行った。次いで、遠心分離（２５００×Ｇ、５分間）して固液分離することで、本発明のシソ科植物エキス１４０ｇ（固形分１．８１％）（実施例２）を得た。得られた本発明のシソ科植物エキスについて、調製１と同様にしてＨＰＬＣでルテオリン含有量及びカルバクロール含有量を測定した結果、その固形物あたりの含有量は、ルテオリン：５９７６ｐｐｍ、カルバクロール：３４ｐｐｍであった。

［調製３］
ローズマリー粉末（株式会社ケー・アイ・エス製）２０ｇに水３８０ｇを加えて、９０℃で３０分間抽出した後、濾布（不織布）を用いて濾過することにより固液分離を行うことで、ローズマリーエキス３００ｇ（固形分１．３５％）（調製３）を得た。得られたローズマリーエキスについて、調製１と同様にしてＨＰＬＣでルテオリン含有量及びカルバクロール含有量を測定した結果、その固形物あたりの含有量は、ルテオリン：不検出、カルバクロール：６５ｐｐｍであった。

［実施例３］
調製３で得られたローズマリーエキス１６０ｇを三角フラスコに入れ、β−グルコシダーゼ製剤であるアロマーゼを０．３２ｇ添加して、６０℃で３時間酵素処理した後、８０℃で３０分間酵素失活処理を行った。次いで、遠心分離（２５００×Ｇ、５分間）して固液分離することで、本発明のシソ科植物エキス１４０ｇ（固形分１．５５％）（実施例３）を得た。得られた本発明のシソ科植物エキスについて、調製１と同様にしてＨＰＬＣでルテオリン含有量及びカルバクロール含有量を測定した結果、その固形物あたりの含有量は、ルテオリン：５２５５ｐｐｍ、カルバクロール：４３ｐｐｍであった。

［実施例４］
タイム粉末（株式会社ケー・アイ・エス製）１０ｇに水１９０ｇを加えて、さらに大豆油（加藤製油株式会社製）２０ｇを添加して、攪拌しながら、９０℃で３０分間抽出した後、濾布（不織布）を用いて固液分離した。得られた濾液１５０ｇを三角フラスコに入れ、β−グルコシダーゼ製剤であるアロマーゼを０．３ｇ添加して、６０℃で３時間酵素処理した後、８０℃で３０分間酵素失活処理を行った。次いで、遠心分離（２５００×Ｇ、５分間）により油相を分離除去することで、本発明のシソ科植物エキス１４０ｇ（固形分１．９３％）（実施例４）を得た。得られた本発明のシソ科植物エキスについて、調製１と同様にしてＨＰＬＣでルテオリン含有量及びカルバクロール含有量を測定した結果、その固形物あたりの含有量は、ルテオリン：１０６００ｐｐｍ、カルバクロール：１３０ｐｐｍであった。

［実施例５］
調製１で得られたタイムエキス１６０ｇを三角フラスコに入れ、β−グルコシダーゼ製剤であるアロマーゼを０．３２ｇ添加して、さらに大豆油（加藤製油株式会社製）を１６ｇ添加して、攪拌しながら、６０℃で３時間酵素処理した後、８０℃で３０分間酵素失活処理を行った。次いで、デカンテーションにより油相を分離除去することで、本発明のシソ科植物エキス１４０ｇ（固形分１．９１％）（実施例５）を得た。得られた本発明のシソ科植物エキスについて、調製１と同様にしてＨＰＬＣでルテオリン含有量及びカルバクロール含有量を測定した結果、その固形物あたりの含有量は、ルテオリン：１０１００ｐｐｍ、カルバクロール：不検出であった。

［実施例６］
調製１で得られたタイムエキス１６０ｇを三角フラスコに入れ、β−グルコシダーゼ製剤であるアロマーゼを０．３２ｇ添加して、６０℃で３時間酵素処理した後、８０℃で３０分間酵素失活処理を行った。次いで、大豆油（加藤製油株式会社製）を１６ｇ添加して、６０℃で３０分間、攪拌処理を行った後、遠心分離（２５００×Ｇ、５分間）により油相を分離除去することで、本発明のシソ科植物エキス１４０ｇ（固形分１．９４％）（実施例６）を得た。得られた本発明のシソ科植物エキスについて、調製１と同様にしてＨＰＬＣでルテオリン含有量及びカルバクロール含有量を測定した結果、その固形物あたりの含有量は、ルテオリン：１０７００ｐｐｍ、カルバクロール：不検出であった。

［官能評価１］
実施例４、実施例５、実施例６及び実施例１で得られた本発明のシソ科植物エキスについて、それぞれ水道水で５倍希釈したものを試料として、パネラー１０人による官能評価を実施した。評価は、シソ科植物の特徴的な臭いについて、試料と同様に希釈した調製１のタイムエキスの評点を０点として、各試料と比較することで採点し、その平均値を算出した。結果を表１に示す。

表１に示すとおり、油脂を添加して攪拌処理を行った実施例４、実施例５及び実施例６の本発明のシソ科植物エキスは、シソ科植物の特徴的な臭いが、酵素処理を行っていない調製１のタイムエキスと比較して、十分に低減され、嗜好性が向上していた。一方、油脂を添加した攪拌処理を行わない場合（実施例１）は、酵素処理を行っていない調製１のタイムエキスとほぼ同等の臭い及び風味を有していた。
また、刺激臭成分であるカルバクロールの含有量について、油脂を添加して攪拌処理を行った実施例４、実施例５及び実施例６の本発明のシソ科植物エキスはカルバクロールが不検出又は調製１と比較して低含有量であり、実施例１は調製１と近似した高含有量であった。

［実施例７］
調製２で得られたセージエキス１６０ｇを三角フラスコに入れ、β−グルコシダーゼ製剤であるアロマーゼを０．１６ｇ添加して、さらにラード（植田製油株式会社製）を３２ｇ添加して、攪拌しながら、６０℃で５時間酵素処理した後、９０℃で１０分間酵素失活処理を行った。次いで、遠心分離（２５００×Ｇ、５分間）により油相を分離除去することで、本発明のシソ科植物エキス１４０ｇ（固形分１．８３％）（実施例７）を得た。得られた本発明のシソ科植物エキスについて、調製１と同様にしてＨＰＬＣでルテオリン含有量及びカルバクロール含有量を測定した結果、その固形物あたりの含有量は、ルテオリン：４９４６ｐｐｍ、カルバクロール：不検出であった。

［官能評価２］
実施例７及び実施例２で得られた本発明のシソ科植物エキスについて、それぞれ水道水で５倍希釈したものを試料として、パネラー１０人による官能評価を実施した。評価は、シソ科植物の特徴的な臭いについて、試料と同様に希釈した調製２のセージエキスの評点を０点として、各試料と比較することで採点し、その平均値を算出した。結果を表２に示す。

表２に示すとおり、油脂を添加して攪拌処理を行った実施例７の本発明のシソ科植物エキスは、シソ科植物の特徴的な臭いが、酵素処理を行っていない調製２のセージエキスと比較して、十分に低減され、嗜好性が向上していた。一方、油脂を添加した攪拌処理を行わない場合（実施例２）は、酵素処理を行っていない調製２のセージエキスとほぼ同等の臭い及び風味を有していた。
また、刺激臭成分であるカルバクロールの含有量について、油脂を添加して攪拌処理を行った実施例７の本発明のシソ科植物エキスはカルバクロールが不検出であり、実施例２は調製２と近似した含有量であった。

［実施例８］
調製３で得られたローズマリーエキス１５０ｇを三角フラスコに入れ、β−グルコシダーゼ製剤であるアロマーゼを０．３ｇ添加して、さらに菜種油（加藤製油株式会社製）を７．５ｇ添加して、攪拌しながら、６０℃で５時間酵素処理した後、９０℃で１０分間酵素失活処理を行った。次いで、遠心分離（２５００×Ｇ、１０分間）により油相を分離除去することで、本発明のシソ科植物エキス１３０ｇ（固形分１．６６％）（実施例８）を得た。得られた本発明のシソ科植物エキスについて、調製１と同様にしてＨＰＬＣでルテオリン含有量及びカルバクロール含有量を測定した結果、その固形物あたりの含有量は、ルテオリン：４６６５ｐｐｍ、カルバクロール：不検出であった。

［官能評価３］
実施例８及び実施例３で得られた本発明のシソ科植物エキスについて、それぞれ水道水で５倍希釈したものを試料として、パネラー１０人による官能評価を実施した。評価は、シソ科植物の特徴的な臭いについて、試料と同様に希釈した調製３のローズマリーエキスの評点を０点として、各試料と比較することで採点し、その平均値を算出した。結果を表３に示す。

表３に示すとおり、油脂を添加して攪拌処理を行った実施例８の本発明のシソ科植物エキスは、シソ科植物の特徴的な臭いが、酵素処理を行っていない調製３のローズマリーエキスと比較して、十分に低減され、嗜好性が向上していた。一方、油脂を添加した攪拌処理を行わない場合（実施例３）は、酵素処理を行っていない調製３のローズマリーエキスとほぼ同等の臭い及び風味を有していた。
また、刺激臭成分であるカルバクロールの含有量について、油脂を添加して攪拌処理を行った実施例８の本発明のシソ科植物エキスはカルバクロールが不検出であり、実施例３は調製３と近似した含有量であった。

［実施例９］
マジョラム粉末（株式会社ケー・アイ・エス製）２０ｇに水１８０ｇを加えて、９０℃で３０分間抽出した後、濾布（不織布）を用いて濾過することにより固液分離した。得られた濾液１００ｇを三角フラスコに入れ、β−グルコシダーゼ製剤であるアロマーゼを１．０ｇ添加して、５０℃で２０時間酵素処理した後、９０℃で３０分間酵素失活処理を行った。次いで、パーム油（不二製油株式会社製）を１５ｇ添加して、８０℃で３０分間、攪拌処理を行った後、遠心分離（２５００×Ｇ、５分間）により油相を分離除去することで、本発明のシソ科植物エキス９０ｇ（固形分４．９５％）（実施例９）を得た。得られた本発明のシソ科植物エキスについて、調製１と同様にしてＨＰＬＣでルテオリン含有量及びカルバクロール含有量を測定した結果、その固形物あたりの含有量は、ルテオリン：６１２１ｐｐｍ、カルバクロール：不検出であった。

Claims (8)

1. シソ科植物を原料として、該原料をβ−グルコシダーゼ活性を有する酵素を用いて酵素処理することにより得られる、ルテオリンを含有することを特徴とするシソ科植物エキスの製造方法。
2. ルテオリンが遊離のものである、請求項１に記載の製造方法。
3. シソ科植物が、タイム、セージ、ローズマリー又はマジョラムからなる群より選ばれる少なくとも１種である、請求項１又は請求項２に記載の製造方法。
4. 前記原料が、粉砕物又は抽出物である請求項１乃至請求項３のいずれか１項に記載の製造方法。
5. さらに、油脂を添加し攪拌処理した後に、該油脂を分離・除去することにより、シソ科植物の特徴的な強い臭いを低減することを特徴とする、請求項１乃至請求項４のいずれか１項に記載の製造方法。
6. 油脂を添加して行う攪拌処理が、β−グルコシダーゼ活性を有する酵素を用いた酵素処理と並行して又はβ−グルコシダーゼ活性を有する酵素を用いた酵素処理後に行われる、請求項５に記載の製造方法。
7. 請求項１乃至請求項６のいずれか１項に記載の製造方法により得られるシソ科植物エキス。
8. 請求項７記載のシソ科植物エキスを含有する飲料、食品、医薬部外品又は飼料。