JP2014528412A - 抗ウイルス化合物 - Google Patents

Abstract

ＲＮＡウイルス感染症を含むウイルス感染症の治療のための化合物およびそれに関連する組成物ならびにＲＩＧ−Ｉ経路を活性化することができる化合物を含む脊椎動物細胞のＲＩＧ−Ｉ経路を調節することができる化合物を本明細書に開示する。【選択図】図１

Description

本明細書に開示される化合物および方法は、ＲＮＡウイルス感染症を含む脊椎動物のウイルス感染症を治療するのに有用である。

ＲＮＡウイルスの一群は、米国および世界中で公衆衛生上の大きな問題となっている。よく知られているＲＮＡウイルスには、インフルエンザウイルス（トリ分離株およびブタ分離株を含む）、Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）、ウエストナイルウイルス、ＳＡＲＳ−コロナウイルス、呼吸器多核体ウイルス（ＲＳＶ）およびヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）がある。

世界で１億７，０００万を越える人がＨＣＶに感染し、そのうちの１億３，０００万人が慢性肝疾患（肝硬変、癌腫および肝不全）発症のリスクのある慢性キャリアである。したがって、先進国ではＨＣＶが全肝移植の原因の３分の２を占めている。最近の研究では、慢性感染患者の加齢によりＨＣＶ感染症による死亡率が上昇していることがわかっている。同様に、毎年人口の５〜２０％が季節性インフルエンザに感染し、その結果、２００，０００人が入院し、３６，０００人が死亡している。

インフルエンザおよびＨＣＶに比べると、ウエストナイルウイルスによる感染者数は最も少なく、２０１０年の米国では９８１人である。感染患者の２０％が重症型の疾患を発症し、死亡率は４．５％となっている。インフルエンザおよびＨＣＶとは異なり、ウエストナイルウイルス感染症の治療に承認された治療法は存在せず、また生物テロリストの薬剤になる可能性があることから、ウエストナイルウイルスは薬物開発の優先度の高い病原体となっている。

上に挙げたＲＮＡウイルスのうち、インフルエンザウイルスにのみワクチンが存在する。したがって、これらのウイルスによる高い罹患率および死亡率を軽減するためには、薬物療法が不可欠である。残念ながら、抗ウイルス薬の数は少なく、その多くのものが効果に乏しい上、そのほとんどすべてが、ウイルスの耐性の進化が速く、作用の範囲が狭いという問題を抱えている。さらに、急性インフルエンザおよびＨＣＶ感染症の治療法は中程度の効果しかない。ＨＣＶ感染症の標準治療であるペグ化インターフェロンとリバビリンには、患者の５０％にしか効果が認められず、併用療法に伴い用量制限をもたらす副作用が多数認められる。急性インフルエンザ抗ウイルス剤のアダマンタンおよびノイラミニダーゼ阻害剤は両種類とも、効果があるのは感染後４８時間以内に限られるため、治療の機会が得られる時間帯が限定されている。アダマンタンは、これらに対する高い耐性がみられるため、既に使用が制限されており、ノイラミニダーゼ阻害剤は、大量に備蓄されているが、やがては乱用やインフルエンザの耐性株の出現を招くことになるであろう。

これらのウイルスに対する薬物開発の努力はほとんどの場合、ウイルスタンパク質を標的とするものである。このことは、現在用いられている薬物が、薬効範囲が狭くウイルス耐性が出現しやすい理由の大きな部分を占めている。ほとんどのＲＮＡウイルスのゲノムは小さく、多くのものが十二に満たないタンパク質をコードしている。したがって、ウイルス標的は限られたものとなっている。上記のことに基づき、ウイルス感染症に対する効果的な治療法の必要性は非常に大きく、満たされていない。

本明細書に開示される化合物および方法は、ウイルス薬物開発の焦点を、ウイルスタンパク質を標的とすることから、宿主の先天性の抗ウイルス応答を標的とし増強する薬物の開発に転換するものである。このような化合物および方法は、より効果が高く、ウイルス耐性がより出現しにくく、副作用がより少なく、様々な異なるウイルスに効果を示す可能性がある。

ＲＩＧ−Ｉ経路は、ＲＮＡウイルス感染症に対する自然免疫応答の調節に深く関与している。ＨＣＶ、インフルエンザおよびウエストナイルウイルスを含めた多くのウイルスの治療にはＲＩＧ−Ｉアゴニストが有用であると予想される。したがって、本開示は、ＲＮＡウイルスによる感染症を含めたウイルス感染症を治療する化合物および方法に関するものであり、化合物はＲＩＧ−Ｉ経路を調節することができるものである。

本開示の一実施形態は、式

によって表される化合物を含み、式中、破線は結合の有無を示し；Ｒ^１はＲ^ａ、ＯＲ^２またはＮＲ^２Ｒ^３であってよく；各Ｒ^ａは、独立してＨ、任意に置換されたヒドロカルビル、任意に置換されたアリール、任意に置換されたヘテロアリールであってよく；Ｒ^２およびＲ^３は、それぞれ独立してＲ^ａ、ＣＯＲ^ａまたはＳＯ_２Ｒ^ａであってよく；Ｙ^１、Ｙ^２、Ｙ^３およびＹ^４は、それぞれ独立してＣＲ^４またはＮであってよく；各Ｒ^４は、独立してＲ^２、ＯＲ^ａ、ＮＲ^２Ｒ^３、ＳＲ^ａ、ＳＯＲ^ａ、ＳＯ_２Ｒ^ａ、ＳＯ_２ＮＨＲ^ａ、ＮＣＯＲ^ａ、ハロゲン、トリハロメチル、ＣＮ、Ｓ＝Ｏまたはニトロであってよく；Ｒ^５はＲ^ａ、ＣＯＲ^ａ、ＳＯ_２Ｒ^ａであり得るか、存在せず；ＶはＣＲ^２、ＣＲ^２Ｒ^３、Ｃ＝Ｏ、ＣＯＣＲ^２Ｒ^３またはＣ＝ＮＲ^２であってよく；ＷおよびＸは、それぞれ独立してＮ、ＮＲ^ａ、Ｏ、Ｓ、ＣＲ^２Ｒ^４またはＣＲ^４であってよい。

本開示のいくつかの実施形態は、式

によって表される化合物（「ＫＩＮ１０００」化合物）を含む。

別の実施形態は、式

によって表される化合物を含み、式中、Ｒ^１０、Ｒ^１３、Ｒ^１４、Ｒ^１６、Ｒ^１７、Ｒ^１８、Ｒ^１９、Ｒ^２０、Ｒ^２１およびＲ^２２は独立してＲ^ｂ、ＯＲ^ｂ、ＳＲ^ｂ、ＣＯＲ^ｂ、ＣＯ_２Ｒ^ｂ、ＯＣＯＲ^ｂ、ＮＲ^ｂＲ^ｃ、ＣＯＮＲ^ｂＲ^ｃ、ＮＲ^ｂＣＯＲ^ｃ、ＳＯ_２ＮＲ^ｂＲ^ｃ、ＣＦ_３、ＣＮ、ＮＯ_２、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＩまたはＣ_２〜５ヘテロシクリルであり；各Ｒ^ｂは、独立してＨまたはＣ_１〜３ヒドロカルビルであり、各Ｒ^ｃは、独立してＨまたはＣ_１〜３アルキルである。

本開示のまた別の実施形態は、式

によって表される化合物（「ＫＩＮ１１４８」化合物）を含む。

本開示のいくつかの実施形態は、本明細書に記載のいずれかの化合物を含む医薬組成物を含む。

本開示のいくつかの実施形態は、脊椎動物に本明細書に記載の医薬組成物を投与することを含む、脊椎動物のウイルス感染症を治療または予防する方法を含む。いくつかの実施形態では、ウイルス感染症は、１つ以上の次に挙げる科のウイルスによって引き起こされるものである：アレナウイルス科、アストロウイルス科、ビルナウイルス科、ブロモウイルス科、ブニヤウイルス科、カリシウイルス科、クロステロウイルス科、コモウイルス科、シストウイルス科、フラビウイルス科、フレキシウイルス科、ヘペウイルス、レビウイルス科、ルテオウイルス科、モノネガウイルス目、モザイクウイルス、ニドウイルス目、ノダウイルス科、オルトミクソウイルス科、ピコビルナウイルス、ピコルナウイルス科、ポティウイルス科、レオウイルス科、レトロウイルス科、セキウイルス科、テヌイウイルス、トガウイルス科、トンブスウイルス科、トティウイルス科、ティモウイルス科、ヘパドナウイルス科、ヘルペスウイルス科、パラミクソウイルス科またはパピローマウイルス科。いくつかの実施形態では、ウイルス感染症はインフルエンザウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、ウエストナイルウイルス、ＳＡＲＳ−コロナウイルス、ポリオウイルス、麻疹ウイルス、デングウイルス、黄熱病ウイルス、ダニ媒介脳炎ウイルス、日本脳炎ウイルス、セントルイス脳炎ウイルス、マレーバレーウイルス、ポワッサンウイルス、ロシオウイルス、跳躍病ウイルス、バンジウイルス、イルヘウスウイルス、ココベラウイルス、クンジンウイルス、アルファイウイルス、ウシ下痢ウイルス、キャサヌール森林病ウイルス、呼吸器多核体ウイルスまたはＨＩＶである。

本開示の方法のいくつかの実施形態は、本明細書に記載のいずれかの医薬組成物を予防ワクチンまたは治療ワクチンのアジュバントとして投与することを含む。いくつかの実施形態では、この方法は、インフルエンザウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、ウエストナイルウイルス、ＳＡＲＳ−コロナウイルス、ポリオウイルス、麻疹ウイルス、デングウイルス、黄熱病ウイルス、ダニ媒介脳炎ウイルス、日本脳炎ウイルス、セントルイス脳炎ウイルス、マレーバレーウイルス、ポワッサンウイルス、ロシオウイルス、跳躍病ウイルス、バンジウイルス、イルヘウスウイルス、ココベラウイルス、クンジンウイルス、アルファイウイルス、ウシ下痢ウイルス、キャサヌール森林病ウイルスまたはＨＩＶに対するワクチンを追加投与することによって脊椎動物にワクチン接種することを含む。

本開示のいくつかの実施形態は、真核細胞の自然免疫応答を調節する方法を含み、この方法は、本明細書に記載のいずれかの化合物を細胞に投与することを含む。いくつかの実施形態では、細胞はｉｎ ｖｉｖｏである。他の実施形態では、細胞はｉｎ ｖｉｔｒｏである。

化合物ＫＩＮ１０００の有効性の検証および特徴を示す図である（「ＲＬＵ」＝相対ルシフェラーゼ単位）。図１Ａは、ＩＦＮβ−ルシフェラーゼ（ＩＦＮβ−ＬＵＣ、左）、ＩＳＧ５６−ルシフェラーゼ（ＩＳＧ５６−ＬＵＣ、中央）およびＩＳＧ５４−ルシフェラーゼ（ＩＳＧ５４−ＬＵＣ、右）の各レポーター遺伝子の用量依存的誘導を示すことによって、最初の「ヒット」化合物の有効性が検証されたことを示す。図１ＢはＫＩＮ１０００の特異性を確認したものであり、ＫＩＮ１０００は非特異的なβ−アクチンプロモーターを誘導しない（「０．５％ＤＭＳＯ」＝溶媒対照；「１０μＭ ＫＩＮ１０００」＝ＫＩＮ１０００存在下でのβ−アクチン−ルシフェラーゼレポーター；「１０μＭ 化合物Ｘ」＝陽性対照のβ−アクチン誘導）。図１Ｃは、ＭＴＳアッセイにより、化合物で４８時間処理したヒト細胞に対してＫＩＮ１０００が顕著な細胞毒性を示さないことを明らかにしたものである。また、５０％細胞死亡率を表すＯ．Ｄ．値が水平方向の線で示されており、ＫＩＮ１０００のＣＣ５０が２０μＭを上回ることも明らかにしている。 ＫＩＮ１０００による転写因子活性化を示す図である。図２Ａにおいて、ＫＩＮ１０００の量を漸増させて処理したＨｅＬａ細胞で、核内強度から細胞質内強度を減じること（「正規化した核内強度」）によって定量したＩＲＦ−３の核移行の用量依存的な増加がみられた。図２Ｂにおいて、ＫＩＮ１０００の量を漸増させて処理したＨｅＬａ細胞で、核内強度から細胞質内強度を減じることによって定量したＮＦκＢ移行の用量依存的な増加がみられた。「ＳｅＶ」は陽性対照のセンダイウイルス感染を表す。 ＫＩＮ１０００の抗ウイルス活性を示す図である。ＫＩＮ１０００を漸増させて処理したＭＲＣ５細胞でインフルエンザウイルスによる感染の用量依存的な減少がみられた。 ＫＩＮ１０００によって誘導されたサイトカイン発現のレベルをＬｕｍｉｎｅｘ（登録商標）（Ｌｕｍｉｎｅｘ Ｃｏｒｐ．、Ａｕｓｔｉｎ ＴＸ）により定量したものを示す図である。ＫＩＮ１０００の量を漸増させて処理したヒト樹状細胞でＩＬ−８、ＭＣＰ−１（ＣＣＬ２）ならびにＭＩＰ−１αおよびβ（それぞれＣＣＬ３およびＣＣＬ４）を含むサイトカインの用量依存的な発現がみられた。 ＫＩＮ１０００およびその誘導体化合物ＫＩＮ１１４８による遺伝子発現の誘導を示す図である。図５Ａは、１０μＭのＫＩＮ１０００（灰色）またはＫＩＮ１１４８（黒）による処理後４〜２４時間にわたるＨｅＬａ細胞におけるＩＦＩＴ２（左）およびＯＡＳ１（右）の遺伝子発現レベルを示す。図５Ｂは、ＫＩＮ１０００（灰色無地の棒）またはＫＩＮ１１４８（黒無地の棒）で処置したＰＨ５ＣＨ８細胞（左）およびＫＩＮ１０００（灰色縞模様の棒）またはＫＩＮ１１４８（黒格子模様の棒）で処理したＨｅＬａ細胞（右）におけるＩＦＩＴ２の遺伝子発現レベルを示す。各試験群では、３本の縦棒はそれぞれ５、１０および２０μＭの化合物（ＫＩＮ１０００またはＫＩＮ１１４８）を表す。図５Ｃは、１μＭ ＫＩＮ１０００（灰色）または１μＭ ＫＩＮ１１４８（黒）で処理した初代ＨＵＶＥＣ細胞におけるＩＦＩＴ２（左）、ＯＡＳ１（中央）およびＭｘＡ（右）の遺伝子発現レベルを示す。 ＫＩＮ１０００およびＫＩＮ１１４８の呼吸器多核体ウイルスに対する抗ウイルス活性を示す図である。図６Ａは、ＫＩＮ１０００およびＫＩＮ１１４８の量を漸増させて処理したＨｅＬａ細胞でＲＳＶによる感染の用量依存的な減少がみられることを示している。図６Ｂは、感染の最大２４時間前に薬物を添加した場合にＫＩＮ１１４８がＲＳＶに対する抗ウイルス活性を示したことを示している。 ＫＩＮ１１４８のインフルエンザＡウイルスＵｄｏｒｎ／７２に対する抗ウイルス活性を示す図である。２μＭ（Ｈ２９２）または１０μＭ（ＨＥＫ２９３）のＫＩＮ１１４８で処理したＨ２９２細胞（左）およびＨＥＫ２９３細胞（右）でウイルスによる感染の減少がみられた。 ＫＩＮ１１４８のデングウイルス２型に対する抗ウイルス活性を示す図である。ＫＩＮ１１４８の量を漸増させて処理したＨｕｈ７細胞でウイルスによる感染の用量依存的な減少がみられた。 ＫＩＮ１１４８のＢ型肝炎ウイルスに対する抗ウイルス活性を示す図である。ＫＩＮ１１４８の量を漸増させて処理したＨｅｐＡＤ３８細胞で上清中ウイルスレベルの用量依存的な減少がみられた。上清中にＨＢＶが存在しないことを表すＯ．Ｄ．値を「ＨＢＶ細胞なし」と標示された水平方向の線によって示す。 ｉｎ ｖｉｖｏでＫＩＮ１０００およびＫＩＮ１１４８によって誘導されたＩｇＧ抗体産生を示す図である。動物（Ｌｅｗｉｓ雌ラット、１０〜１２週齢）の足蹠および尾根部の皮下に、ＰＢＳ中にOVAを懸濁した液、ＯＶＡ＋ｐｏｌｙＩ：Ｃ、ＯＶＡ＋ＫＩＮ１０００またはＯＶＡ＋ＫＩＮ１１４８の懸濁液をワクチン接種した（部位当たり０．０２５ｍＬの注射量）。初回免疫の２週間後および８週間後にラットに追加免疫を同様に実施した。示した時点でラットから採血し、血清を調製して、ＥＬＩＳＡにより抗体レベルを検出した。ＫＩＮ１０００（大きい格子の棒）およびＫＩＮ１１４８（横縞の棒）を含有するワクチン調製物のＯＤ４５０値を、ワクチンとしてＰＢＳ中に懸濁したＯＶＡのみを投与した個体から得られた値に対して正規化した。対照アジュバントとしてＰｏｌｙ Ｉ：Ｃ（小さい格子の棒）を用いた。 ＫＩＮ化合物のワクチン接種によって誘発された細胞応答を示す図である。１回目の追加免疫（初回免疫の４週間後）の２週間後に誘発された遅延型過敏反応を測定した。示した時点で、ＰＢＳ０．０２ｍＬ（左耳介）またはＰＢＳ中ＯＶＡ０．０２ｍＬ（１ｍｇ／ｍＬ）（右耳介）の注射によってラットに抗原刺激を実施した。２４時間後、カリパスで耳の厚さを測定した。右耳と左耳の差の計算結果を示す。「ＯＶＡ＋Ｋ１１４８」（縦縞の棒）＝ＫＩＮ１１４８を含有するワクチンを注射した個体の耳の厚さの差。対照アジュバントとしてＰｏｌｙ Ｉ：Ｃ（「ＯＶＡ＋ｐＩ：Ｃ」；横縞の棒）を用いた。

（詳細な説明）
本開示は、ウイルスの治療の焦点を、ウイルスタンパク質を標的とすることから、宿主（患者）の先天性の抗ウイルス応答を標的とし増強する薬物の開発に転換する化合物および方法を提供する。このような化合物および方法は、より効果が高く、ウイルス耐性がより出現しにくく、副作用がより少なく、様々な異なるウイルスに効果を示す可能性がある。

ＲＩＧ−Ｉ経路は、ＲＮＡウイルス感染症に対する自然免疫応答の調節に深く関与している。ＲＩＧ−Ｉは様々なＲＮＡウイルスに対する免疫を引き起こすのに不可欠な細胞質型の病原体認識受容体である。ＲＩＧ−Ｉは、一続きのウリジンのホモポリマーまたはＵ／Ａポリマーのモチーフを特徴とするＲＮＡウイルスゲノム内にあるモチーフと結合する二本鎖ＲＮＡヘリカーゼである。ＲＮＡとの結合により、自己のリプレッサードメインによるＲＩＧ−Ｉシグナル伝達抑制を解除するコンホメーション変化が誘導され、ＲＩＧ−Ｉがその直列したカスパーゼ活性化および動員ドメイン（ＣＡＲＤ）を介して下流にシグナルを伝達することが可能になる。ＲＩＧ−Ｉシグナル伝達はそのＮＴＰアーゼ活性に依存するものであるが、ヘリカーゼドメインは必要としない。ＲＩＧ−Ｉシグナル伝達は休止細胞では作動せず、リプレッサードメインがウイルス感染に応答してシグナル伝達を司るオン−オフスイッチとしての役割を果たす。

ＲＩＧ−Ｉシグナル伝達は、ミトコンドリア外膜に局在する不可欠なアダプタータンパク質のＩＰＳ−１（Ｃａｒｄｉｆ、ＭＡＶおよびＶＩＳＡとしても知られる）を介して行われる。ＩＰＳ−１は、感染を制御するＩ型ＩＦＮおよびウイルス応答性遺伝子の発現を誘導する転写因子であるＩＲＦ−３の下流での活性化を刺激する巨大分子シグナル伝達複合体を動員する。ＲＩＧ−Ｉシグナル伝達を直接的に、またはＲＩＧ−Ｉ経路のＩＲＦ−３を含む構成成分の調節を介して引き起こす化合物は、抗ウイルス剤または免疫調節剤として魅力的な治療応用となる。

ハイスループットなスクリーニング方法を用いて、ＲＮＡウイルス感染に対する細胞性自然免疫応答の重要な調節因子であるＲＩＧ−Ｉ経路を調節する化合物を同定した。特定の実施形態では、有効性の認められたＲＩＧ−Ｉアゴニストリード化合物が、インターフェロン調節因子３（ＩＲＦ−３）を特異的に活性化することが明らかにされた。別の実施形態では、上記化合物は次に挙げるうちの１つ以上を示す：上記化合物は、インターフェロン誘導遺伝子（ＩＳＧ）の発現を誘導する、細胞ベースのアッセイにおいて細胞毒性が低い、アナログ開発およびＳＡＲ研究に適している、薬物様の生理化学的特性を有する、ならびにインフルエンザＡウイルスおよび／またはＨＣＶに対する抗ウイルス活性を有する。

以下で述べるように、上記化合物は新たなクラスの潜在的な抗ウイルス治療剤となるものである。本開示は化合物のｉｎ ｖｉｖｏでの特定の作用機序に拘束されるものではないが、これらの化合物はＲＩＧ−Ｉ経路を調節するのに選択されるものである。ある特定の実施形態では、調節とはＲＩＧ−Ｉ経路の活性化のことである。本明細書に開示される化合物および方法には、ＨＣＶおよび／またはインフルエンザウイルスのウイルスタンパク質、ウイルスＲＮＡおよび細胞培養モデルにおける感染性ウイルスのうちの１つ以上を減少させる機能がある。

一実施形態では、本明細書の開示は下式：

によって表されるクラスの化合物に関するものであり、式中、破線は結合の有無を表し；Ｒ^１はＲ^ａ、ＯＲ^２またはＮＲ^２Ｒ^３であってよく；Ｒ^ａは、それぞれ独立してＨ、任意に置換されたヒドロカルビル、任意に置換されたアリール、任意に置換されたヘテロアリールであってよく；Ｒ^２およびＲ^３は、それぞれ独立してＲ^ａ、ＣＯＲ^ａまたはＳＯ_２Ｒ^ａであってよく；Ｙ^１、Ｙ^２、Ｙ^３およびＹ^４は、それぞれ独立してＣＲ^４またはＮであってよく；各Ｒ^４は、独立してＲ^２、ＯＲ^ａ、ＮＲ^２Ｒ^３、ＳＲ^ａ、ＳＯＲ^ａ、ＳＯ_２Ｒ^ａ、ＳＯ_２ＮＨＲ^ａ、ＮＣＯＲ^ａ、ハロゲン、トリハロメチル、ＣＮ、Ｓ＝Ｏまたはニトロであってよく；Ｒ^５はＲ^ａ、ＣＯＲ^ａ、ＳＯ_２Ｒ^ａであり得るか、存在せず；ＶはＣＲ^２、ＣＲ^２Ｒ^３、Ｃ＝Ｏ、ＣＯＣＲ^２Ｒ^３またはＣ＝ＮＲ^２であってよく；ＷおよびＸは、それぞれ独立してＮ、ＮＲ^ａ、Ｏ、Ｓ、ＣＲ^２Ｒ^４またはＣＲ^４であってよい。

式１に関して、Ｙ^１はＣＲ^４またはＮであり得る。いくつかの実施形態では、Ｙ^１はＣＲ^４である。

式１に関して、Ｙ^２はＣＲ^４またはＮであり得る。いくつかの実施形態では、Ｙ^２はＣＲ^４である。

いくつかの実施形態では、Ｙ^１およびＹ^２はともにＣＲ^４であり、Ｒ^１８によって任意に置換された別の複素環を一緒に形成する。いくつかの実施形態では、Ｖは：

であり得る。

式１に関して、Ｙ^３はＣＲ^４またはＮであり得る。いくつかの実施形態では、Ｙ^３はＣＲ^４である。

式１に関して、Ｙ^４はＣＲ^４またはＮであり得る。いくつかの実施形態では、Ｙ^４はＣＲ^４である。

いくつかの実施形態では、Ｙ^１、Ｙ^２、Ｙ^３およびＹ^４はＣＲ^４である。いくつかの実施形態では、Ｙ^１、Ｙ^２、Ｙ^３およびＹ^４はＣＨである。いくつかの実施形態では、Ｙ^１およびＹ^２は

であり、Ｙ^３およびＹ^４はＣＨである。

いくつかの実施形態は、式２〜１２：

のいずれかによって表される化合物を含む。

本明細書の任意の関連する構造的特徴に関して、各Ｒ^ａは、独立してＨ；Ｃ_１〜１２またはＣ_１〜６ヒドロカルビルなどの任意に置換されたヒドロカルビル；任意に置換されたフェニルを含む任意に置換されたＣ_６〜１２アリールなどの任意に置換されたアリール；任意に置換されたピリジニル、任意に置換されたフリル、任意に置換されたチエニルなどの任意に置換されたＣ_２〜１２ヘテロアリールを含む任意に置換されたヘテロアリールであり得る。いくつかの実施形態では、各Ｒ^ａは、独立してＨまたはａが１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２である式Ｃ_ａＨ_ａ＋１を有する直鎖もしくは分岐鎖アルキルまたは式Ｃ_ａＨ_ａ−１を有するシクロアルキル、例えば、式：ＣＨ_３、Ｃ_２Ｈ_５、Ｃ_３Ｈ_７、Ｃ_４Ｈ_９、Ｃ_５Ｈ_１１、Ｃ_６Ｈ_１３、Ｃ_７Ｈ_１５、Ｃ_８Ｈ_１７、Ｃ_９Ｈ_１９、Ｃ_１０Ｈ_２１などの直鎖もしくは分岐鎖アルキルまたは式：Ｃ_３Ｈ_５、Ｃ_４Ｈ_７、Ｃ_５Ｈ_９、Ｃ_６Ｈ_１１、Ｃ_７Ｈ_１３、Ｃ_８Ｈ_１５、Ｃ_９Ｈ_１７、Ｃ_１０Ｈ_１９などのシクロアルキルなどを含むＣ_１〜１２アルキルであり得る。

Ｒ^ａに関して、いくつかの実施形態では、アリール基はハロゲン、トリハロメチル、アルコキシ、アルキルアミノ、ＯＨ、ＣＮ、アルキルチオ、アリールチオ、スルホキシド、アリールスルホニル、アルキルスルホニル、カルボン酸、ニトロまたはアシルアミノで置換されている。

Ｒ^ａに関して、いくつかの実施形態では、ヘテロアリール基は、単環であるか縮合している。いくつかの実施形態では、単環のヘテロアリール基はイミダゾールである。いくつかの実施形態では、縮合したヘテロアリール基はベンゾイミダゾールである。いくつかの実施形態では、ヘテロアリール基はハロゲン、トリハロメチル、アルコキシ、アルキルアミノ、ＯＨ、ＣＮ、アルキルチオ、アリールチオ、スルホキシド、アリールスルホニル、アルキルスルホニル、カルボン酸、ニトロまたはアシルアミノで置換されている。いくつかの実施形態では、アルキル基は分岐状、環式または多環式である。

Ｒ^ａに関して、ヒドロカルビルはアルキル、アルケニルまたはアルキニルであり得る。いくつかの実施形態では、アルキル基はハロゲン、トリハロメチル、アルコキシ、アルキルアミノ、ＯＨ、ＣＮ、ヘテロアリール、アルキルチオ、アリールチオ、スルホキシド、アリールスルホニル、アルキルスルホニル、カルボン酸、ニトロまたはアシルアミノで置換されている。いくつかの実施形態では、ヘテロアリール基は、単環であるか縮合している。いくつかの実施形態では、単環のヘテロアリール基はイミダゾールである。いくつかの実施形態では、縮合したヘテロアリール基はベンゾイミダゾールである。いくつかの実施形態では、アルケニル基は分岐状、環式または多環式である。いくつかの実施形態では、アルケニル基はハロゲン、トリハロメチル、アルコキシ、アルキルアミノ、ＯＨ、ＣＮ、ヘテロアリール、アルキルチオ、アリールチオ、スルホキシド、アリールスルホニル、アルキルスルホニル、カルボン酸、ニトロまたはアシルアミノである。

本明細書の任意の関連する構造的特徴に関して、Ｒ^ｂは、ＨまたはＣＨ_３、Ｃ_２Ｈ_５、Ｃ_３Ｈ_７、シクロプロピル、ＣＨ＝ＣＨ_２、ＣＨ_２ＣＨ＝ＣＨ_２、Ｃ≡ＣＨ、ＣＨ_２Ｃ≡ＣＨなどのＣ_１〜３ヒドロカルビルであり得る。

本明細書の任意の関連する構造的特徴に関して、Ｒ^ｃは、ＨまたはＣＨ_３、Ｃ_２Ｈ_５、Ｃ_３Ｈ_７、シクロプロピルなどのＣ_１〜３アルキルであり得る。いくつかの実施形態では、Ｒ^ｃはＨである。

本明細書の式１、式２、式３または式４などの任意の関連する式または構造の記述に関して、Ｒ^１はＲ^ａ、ＯＲ^２またはＮＲ^２Ｒ^３である。いくつかの実施形態では、Ｒ^１は任意に置換されたフェニルである。いくつかの実施形態では、Ｒ^１は非置換フェニルである。いくつかの実施形態では、Ｒ^１は任意に置換されたナフチルである。いくつかの実施形態では、Ｒ^１は非置換ナフチルである。

いくつかの実施形態では、Ｒ^１は

である。

いくつかの実施形態では、Ｒ^１は

である。

いくつかの実施形態では、Ｒ^１は

である。

いくつかの実施形態では、Ｒ^１は

である。

いくつかの実施形態では、Ｒ^１は

である。

いくつかの実施形態では、Ｒ^１は

である。

いくつかの実施形態では、Ｒ^１は

である。

本明細書の任意の関連する構造的特徴に関して、Ｒ^２はＲ^ａ、ＣＯＲ^ａまたはＳＯ_２Ｒ^ａであり得る。いくつかの実施形態では、Ｒ^２はＨ、メチル、エチル、プロピル（例えば、ｎ−プロピル、イソプロピルなど）、シクロプロピル、ブチル、シクロブチルまたはその異性体、ペンチル、シクロペンチルまたはその異性体、ヘキシル、シクロヘキシルまたはその異性体などであり得る。いくつかの実施形態では、Ｒ^２はＨである。

本明細書の任意の関連する構造的特徴に関して、Ｒ^３はＲ^ａ、ＣＯＲ^ａまたはＳＯ_２Ｒ^ａであり得る。いくつかの実施形態では、Ｒ^３はＨ、メチル、エチル、プロピル（例えば、ｎ−プロピル、イソプロピルなど）、シクロプロピル、ブチル、シクロブチルまたはその異性体、ペンチル、シクロペンチルまたはその異性体、ヘキシル、シクロヘキシルまたはその異性体などであり得る。いくつかの実施形態では、Ｒ^３はＨである。

本明細書の任意の関連する構造的特徴に関して、各Ｒ^４は、独立してＲ^２、ＯＲ^ａ、ＣＯＲ^ａ、ＣＯ_２Ｒ^ａ、ＯＣＯＲ^ａ、ＣＯＮＲ^２Ｒ^３、ＮＲ^２Ｒ^３、ＮＲ^ｂＣＯＲ^ａ、ＳＲ^ａ、ＳＯＲ^ａ、ＳＯ_２Ｒ^ａ、ＳＯ_２ＮＲ^ａＲ^ｂ、ＮＣＯＲ^ａ、ハロゲン、トリハロメチル、ＣＮ、Ｓ＝Ｏ、ニトロまたはＣ_２〜５ヘテロアリールであり得る。いくつかの実施形態では、Ｒ^４はＨである。

一般にＲ^５およびＲ^８〜Ｒ^３２は、Ｈあるいは０〜６個の炭素原子と、Ｏ、Ｎ、Ｓ、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒおよびＩから独立して選択される０〜５個のヘテロ原子とを有し、かつ／または１５ｇ／ｍｏｌ〜３００ｇ／ｍｏｌの分子量を有する置換基などの任意の置換基であり得る。Ｒ^５およびＲ^８〜Ｒ^３２はいずれも、ｂ）Ｃ＝Ｃ、Ｃ≡Ｃ、ＣＯ、ＣＯ_２、ＣＯＮ、ＮＣＯ_２、ＯＨ、ＳＨ、Ｏ、Ｓ、Ｎ、Ｎ＝Ｃ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、ＮＯ_２、ＣＯ_２Ｈ、ＮＨ_２などの１つ以上の官能基でａ）任意に置換されているか、これが任意に結合している１つ以上のアルキル部分を含み得るか；アルキル部分のないＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＮＯ_２、ＣＮ、ＮＨ_２、ＯＨ、ＣＯＨ、ＣＯ_２Ｈなどの置換基であり得る。

本明細書の任意の関連する構造的特徴に関して、いくつかの実施形態では、Ｒ^５はＲ^ａ、ＣＯＲ^ａ、ＳＯ_２Ｒ^ａであっても、存在しなくてもよい。Ｒ^５のいくつかの非限定的な例としては、ＨまたはＣＨ_３、Ｃ_２Ｈ_５、Ｃ７、シクロプロピルなどのＣ_１〜３アルキルが挙げられ得る。いくつかの実施形態では、Ｒ^５はＣＨ_３であり得る。いくつかの実施形態では、Ｒ^５はＨである。

上記の任意の関連する式または構造の記述に関して、Ｒ^８のいくつかの非限定的な例としては、Ｒ^ｂ、ＯＲ^ｂ、ＳＲ^ｂ、ＣＯＲ^ｂ、ＣＯ_２Ｒ^ｂ、ＯＣＯＲ^ｂ、ＮＲ^ｂＲ^ｃ、ＣＯＮＲ^ｂＲ^ｃ、ＮＲ^ｂＣＯＲ^ｃ、ＳＯ_２ＮＲ^ｂＲ^ｃ、ＣＦ_３、ＣＮ、ＮＯ_２、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＩまたはＣ_２〜５ヘテロシクリルが挙げられ得る。いくつかの実施形態では、Ｒ^８はＨ、ＣＨ_３、ＣＨ_２ＣＨ_３、Ｃｌ、Ｂｒ、ＯＨ、ＯＣＨ_３、ＳＣＨ_３、ＮＨ_２、ＮＨＣＨ_３、Ｎ（ＣＨ_３）_２、ＳＯ_２ＮＨ_２、モルホリノ、ＣＨ_２Ｃ≡ＣＨまたはＮＯ_２である。いくつかの実施形態では、Ｒ^８はＨである。

上記の任意の関連する式または構造の記述に関して、Ｒ^９のいくつかの非限定的な例としては、Ｒ^ｂ、ＣＯＲ^ｂ、ＣＯ_２Ｒ^ｂ、ＣＯＮＲ^ｂＲ^ｃ、ＮＲ^ｂＣＯＲ^ｃ、ＳＯ_２ＮＲ^ｂＲ^ｃ、ＣＦ_３、ＣＮまたはＣ_２〜５ヘテロシクリルが挙げられ得る。いくつかの実施形態では、Ｒ^９はＨ、ＣＨ_３、ＣＨ_２ＣＨ_３、ＳＯ_２ＮＨ_２またはＣＨ_２Ｃ≡ＣＨである。いくつかの実施形態では、Ｒ^９はＨ、ＣＨ_３、ＣＨ_２ＣＨ_３、ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３、ＣＨ_２ＣＨ＝ＣＨ_２またはＣＨ_２Ｃ≡ＣＨである。いくつかの実施形態では、Ｒ^９はＣＨ_２Ｃ≡ＣＨである。いくつかの実施形態では、Ｒ^９はＨである。

上記の任意の関連する式または構造の記述に関して、Ｒ^１０のいくつかの非限定的な例としては、Ｒ^ｂ、ＯＲ^ｂ、ＳＲ^ｂ、ＣＯＲ^ｂ、ＣＯ_２Ｒ^ｂ、ＯＣＯＲ^ｂ、ＮＲ^ｂＲ^ｃ、ＣＯＮＲ^ｂＲ^ｃ、ＮＲ^ｂＣＯＲ^ｃ、ＳＯ_２ＮＲ^ｂＲ^ｃ、ＣＦ_３、ＣＮ、ＮＯ_２、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＩまたはＣ_２〜５ヘテロシクリルが挙げられ得る。いくつかの実施形態では、Ｒ^１０はＨ、ＣＨ_３、ＣＨ_２ＣＨ_３、Ｃｌ、Ｂｒ、ＯＨ、ＯＣＨ_３、ＳＣＨ_３、ＮＨ_２、ＮＨＣＨ_３、Ｎ（ＣＨ_３）_２、ＳＯ_２ＮＨ_２、モルホリノ、ＣＨ_２Ｃ≡ＣＨまたはＮＯ_２である。いくつかの実施形態では、Ｒ^１０はＨである。

上記の任意の関連する式または構造の記述に関して、Ｒ^１１のいくつかの非限定的な例としては、Ｒ^ｂ、ＯＲ^ｂ、ＳＲ^ｂ、ＣＯＲ^ｂ、ＣＯ_２Ｒ^ｂ、ＯＣＯＲ^ｂ、ＮＲ^ｂＲ^ｃ、ＣＯＮＲ^ｂＲ^ｃ、ＮＲ^ｂＣＯＲ^ｃ、ＳＯ_２ＮＲ^ｂＲ^ｃ、ＣＦ_３、ＣＮ、ＮＯ_２、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＩまたはＣ_２〜５ヘテロシクリルが挙げられ得る。いくつかの実施形態では、Ｒ^１１はＨ、ＣＨ_３、ＣＨ_２ＣＨ_３、Ｃｌ、Ｂｒ、ＯＨ、ＯＣＨ_３、ＳＣＨ_３、ＮＨ_２、ＮＨＣＨ_３、Ｎ（ＣＨ_３）_２、ＳＯ_２ＮＨ_２、モルホリノ、ＣＨ_２Ｃ≡ＣＨまたはＮＯ_２である。いくつかの実施形態では、Ｒ^１１はＨ、ＣｌまたはＢｒである。いくつかの実施形態では、Ｒ^１１はＣｌである。いくつかの実施形態では、Ｒ^１１はＢｒである。いくつかの実施形態では、Ｒ^１１はＨである。

上記の任意の関連する式または構造の記述に関して、Ｒ^１２のいくつかの非限定的な例としては、Ｒ^ｂ、ＯＲ^ｂ、ＳＲ^ｂ、ＣＯＲ^ｂ、ＣＯ_２Ｒ^ｂ、ＯＣＯＲ^ｂ、ＮＲ^ｂＲ^ｃ、ＣＯＮＲ^ｂＲ^ｃ、ＮＲ^ｂＣＯＲ^ｃ、ＳＯ_２ＮＲ^ｂＲ^ｃ、ＣＦ_３、ＣＮ、ＮＯ_２、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＩまたはＣ_２〜５ヘテロシクリルが挙げられ得る。いくつかの実施形態では、Ｒ^１２はＨ、ＣＨ_３、ＣＨ_２ＣＨ_３、Ｃｌ、Ｂｒ、ＯＨ、ＯＣＨ_３、ＳＣＨ_３、ＮＨ_２、ＮＨＣＨ_３、Ｎ（ＣＨ_３）_２、ＳＯ_２ＮＨ_２、モルホリノ、ＣＨ_２Ｃ≡ＣＨまたはＮＯ_２である。いくつかの実施形態では、Ｒ^１２はＨ、ＣｌまたはＳＯ_２ＮＨ_２である。いくつかの実施形態では、Ｒ^１２はＨである。いくつかの実施形態では、Ｒ^１２はＣｌである。いくつかの実施形態では、Ｒ^１２はＳＯ_２ＮＨ_２である。いくつかの実施形態では、Ｒ^１２はＨである。

いくつかの実施形態では、Ｒ^１１およびＲ^１２は一緒になって：

になる。

上記の任意の関連する式または構造の記述に関して、Ｒ^１３のいくつかの非限定的な例としては、Ｒ^ｂ、ＯＲ^ｂ、ＳＲ^ｂ、ＣＯＲ^ｂ、ＣＯ_２Ｒ^ｂ、ＯＣＯＲ^ｂ、ＮＲ^ｂＲ^ｃ、ＣＯＮＲ^ｂＲ^ｃ、ＮＲ^ｂＣＯＲ^ｃ、ＳＯ_２ＮＲ^ｂＲ^ｃ、ＣＦ_３、ＣＮ、ＮＯ_２、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＩまたはＣ_２〜５ヘテロシクリルが挙げられ得る。いくつかの実施形態では、Ｒ^１３はＨ、ＣＨ_３、ＣＨ_２ＣＨ_３、Ｃｌ、Ｂｒ、ＯＨ、ＯＣＨ_３、ＳＣＨ_３、ＮＨ_２、ＮＨＣＨ_３、Ｎ（ＣＨ_３）_２、ＳＯ_２ＮＨ_２、モルホリノ、ＣＨ_２Ｃ≡ＣＨまたはＮＯ_２である。いくつかの実施形態では、Ｒ^１３はＨまたはＣｌである。いくつかの実施形態では、Ｒ^１３はＨである。いくつかの実施形態では、Ｒ^１３はＣｌである。いくつかの実施形態では、Ｒ^１１およびＲ^１３はＣｌである。

上記の任意の関連する式または構造の記述に関して、Ｒ^１４のいくつかの非限定的な例としては、Ｒ^ｂ、ＯＲ^ｂ、ＳＲ^ｂ、ＣＯＲ^ｂ、ＣＯ_２Ｒ^ｂ、ＯＣＯＲ^ｂ、ＮＲ^ｂＲ^ｃ、ＣＯＮＲ^ｂＲ^ｃ、ＮＲ^ｂＣＯＲ^ｃ、ＣＦ_３、ＣＮ、ＮＯ_２、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩが挙げられ得る。いくつかの実施形態では、Ｒ^１４はＨ、ＣＨ_３、ＣＨ_２ＣＨ_３、Ｃｌ、Ｂｒ、ＯＨ、ＯＣＨ_３、ＳＣＨ_３、ＮＨ_２、ＮＨＣＨ_３、Ｎ（ＣＨ_３）_２、ＣＨ_２Ｃ≡ＣＨまたはＮＯ_２である。いくつかの実施形態では、Ｒ^１４はＨである。

いくつかの実施形態では、Ｒ^１０およびＲ^１４はＨである。いくつかの実施形態では、Ｒ^１０、Ｒ^１２およびＲ^１４はＨである。いくつかの実施形態では、Ｒ^１０、Ｒ^１３およびＲ^１４はＨである。いくつかの実施形態では、Ｒ^１０、Ｒ^１１、Ｒ^１３およびＲ^１４はＨである。いくつかの実施形態では、Ｒ^１０、Ｒ^１１、Ｒ^１２およびＲ^１４はＨである。いくつかの実施形態では、Ｒ^１０、Ｒ^１１、Ｒ^１２、Ｒ^１３およびＲ^１４はＨである。

上記の任意の関連する式または構造の記述に関して、Ｒ^１６のいくつかの非限定的な例としては、Ｒ^ｂ、ＯＲ^ｂ、ＳＲ^ｂ、ＣＯＲ^ｂ、ＣＯ_２Ｒ^ｂ、ＯＣＯＲ^ｂ、ＮＲ^ｂＲ^ｃ、ＣＯＮＲ^ｂＲ^ｃ、ＮＲ^ｂＣＯＲ^ｃ、ＳＯ_２ＮＲ^ｂＲ^ｃ、ＣＦ_３、ＣＮ、ＮＯ_２、Ｆ、ＣｌまたはＣ_２〜５ヘテロシクリルが挙げられ得る。いくつかの実施形態では、Ｒ^１６はＨ、ＣＨ_３、ＣＨ_２ＣＨ_３、Ｃｌ、Ｂｒ、ＯＨ、ＯＣＨ_３、ＳＣＨ_３、ＮＨ_２、ＮＨＣＨ_３、Ｎ（ＣＨ_３）_２、ＳＯ_２ＮＨ_２、モルホリノ、ＣＨ_２Ｃ≡ＣＨまたはＮＯ_２である。いくつかの実施形態では、Ｒ^１６はＨである。

上記の任意の関連する式または構造の記述に関して、Ｒ^１７のいくつかの非限定的な例としては、Ｒ^ｂ、ＯＲ^ｂ、ＳＲ^ｂ、ＣＯＲ^ｂ、ＣＯ_２Ｒ^ｂ、ＯＣＯＲ^ｂ、ＮＲ^ｂＲ^ｃ、ＣＯＮＲ^ｂＲ^ｃ、ＮＲ^ｂＣＯＲ^ｃ、ＳＯ_２ＮＲ^ｂＲ^ｃ、ＣＦ_３、ＣＮ、ＮＯ_２、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＩまたはＣ_２〜５ヘテロシクリルが挙げられ得る。いくつかの実施形態では、Ｒ^１７はＨ、ＣＨ_３、ＣＨ_２ＣＨ_３、Ｃｌ、Ｂｒ、ＯＨ、ＯＣＨ_３、ＳＣＨ_３、ＮＨ_２、ＮＨＣＨ_３、Ｎ（ＣＨ_３）_２、ＳＯ_２ＮＨ_２、モルホリノ、ＣＨ_２Ｃ≡ＣＨまたはＮＯ_２である。いくつかの実施形態では、Ｒ^１７はＨである。

上記の任意の関連する式または構造の記述に関して、Ｒ^１８のいくつかの非限定的な例としては、Ｒ^ｂ、ＯＲ^ｂ、ＳＲ^ｂ、ＣＯＲ^ｂ、ＣＯ_２Ｒ^ｂ、ＯＣＯＲ^ｂ、ＮＲ^ｂＲ^ｃ、ＣＯＮＲ^ｂＲ^ｃ、ＮＲ^ｂＣＯＲ^ｃ、ＳＯ_２ＮＲ^ｂＲ^ｃ、ＣＦ_３、ＣＮ、ＮＯ_２、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＩまたはＣ_２〜５ヘテロシクリルが挙げられ得る。いくつかの実施形態では、Ｒ^１８はＨ、ＣＨ_３、ＣＨ_２ＣＨ_３、Ｃｌ、Ｂｒ、ＯＨ、ＯＣＨ_３、ＳＣＨ_３、ＮＨ_２、ＮＨＣＨ_３、Ｎ（ＣＨ_３）_２、ＳＯ_２ＮＨ_２、モルホリノ、ＣＨ_２Ｃ≡ＣＨまたはＮＯ_２である。いくつかの実施形態では、Ｒ^１８はＨまたはＣＨ_３である。いくつかの実施形態では、Ｒ^１８はＨである。いくつかの実施形態では、Ｒ^１８はＣＨ_３である。いくつかの実施形態では、Ｒ^１８はＨである。

上記の任意の関連する式または構造の記述に関して、Ｒ^１９のいくつかの非限定的な例としては、Ｒ^ｂ、ＯＲ^ｂ、ＳＲ^ｂ、ＣＯＲ^ｂ、ＣＯ_２Ｒ^ｂ、ＯＣＯＲ^ｂ、ＮＲ^ｂＲ^ｃ、ＣＯＮＲ^ｂＲ^ｃ、ＮＲ^ｂＣＯＲ^ｃ、ＳＯ_２ＮＲ^ｂＲ^ｃ、ＣＦ_３、ＣＮ、ＮＯ_２、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒまたはＣ_２〜５ヘテロシクリルが挙げられ得る。いくつかの実施形態では、Ｒ^１９はＨ、ＣＨ_３、ＣＨ_２ＣＨ_３、Ｃｌ、Ｂｒ、ＯＨ、ＯＣＨ_３、ＳＣＨ_３、ＮＨ_２、ＮＨＣＨ_３、Ｎ（ＣＨ_３）_２、ＳＯ_２ＮＨ_２、モルホリノ、ＣＨ_２Ｃ≡ＣＨまたはＮＯ_２である。いくつかの実施形態では、Ｒ^１９はＨである。

上記の任意の関連する式または構造の記述に関して、Ｒ^２０のいくつかの非限定的な例としては、Ｒ^ｂ、ＯＲ^ｂ、ＳＲ^ｂ、ＣＯＲ^ｂ、ＣＯ_２Ｒ^ｂ、ＯＣＯＲ^ｂ、ＮＲ^ｂＲ^ｃ、ＣＯＮＲ^ｂＲ^ｃ、ＮＲ^ｂＣＯＲ^ｃ、ＳＯ_２ＮＲ^ｂＲ^ｃ、ＣＦ_３、ＣＮ、ＮＯ_２、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＩまたはＣ_２〜５ヘテロシクリルが挙げられ得る。いくつかの実施形態では、Ｒ^２０はＨ、ＣＨ_３、ＣＨ_２ＣＨ_３、Ｃｌ、Ｂｒ、ＯＨ、ＯＣＨ_３、ＳＣＨ_３、ＮＨ_２、ＮＨＣＨ_３、Ｎ（ＣＨ_３）_２、ＳＯ_２ＮＨ_２、ＣＨ_２Ｃ≡ＣＨまたはＮＯ_２である。いくつかの実施形態では、Ｒ^２０はＨである。

上記の任意の関連する式または構造の記述に関して、Ｒ^２１のいくつかの非限定的な例としては、Ｒ^ｂ、ＯＲ^ｂ、ＳＲ^ｂ、ＣＯＲ^ｂ、ＣＯ_２Ｒ^ｂ、ＯＣＯＲ^ｂ、ＮＲ^ｂＲ^ｃ、ＣＯＮＲ^ｂＲ^ｃ、ＮＲ^ｂＣＯＲ^ｃ、ＳＯ_２ＮＲ^ｂＲ^ｃ、ＣＦ_３、ＣＮ、ＮＯ_２、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＩまたはＣ_２〜５ヘテロシクリルが挙げられ得る。いくつかの実施形態では、Ｒ^２１はＨ、ＣＨ_３、Ｃｌ、Ｂｒ、ＯＨ、ＯＣＨ_３、ＳＣＨ_３、ＮＨ_２、ＮＨＣＨ_３、Ｎ（ＣＨ_３）_２、ＳＯ_２ＮＨ_２、モルホリノ、ＣＨ_２Ｃ≡ＣＨまたはＮＯ_２である。いくつかの実施形態では、Ｒ^２１はＨである。

上記の任意の関連する式または構造の記述に関して、Ｒ^２２のいくつかの非限定的な例としては、Ｒ^ｂ、ＯＲ^ｂ、ＳＲ^ｂ、ＣＯＲ^ｂ、ＣＯ_２Ｒ^ｂ、ＯＣＯＲ^ｂ、ＮＲ^ｂＲ^ｃ、ＣＯＮＲ^ｂＲ^ｃ、ＮＲ^ｂＣＯＲ^ｃ、ＳＯ_２ＮＲ^ｂＲ^ｃ、ＣＦ_３、ＣＮ、ＮＯ_２、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＩまたはＣ_２〜５ヘテロシクリルが挙げられ得る。いくつかの実施形態では、Ｒ^２２はＨ、ＣＨ_３、ＣＨ_２ＣＨ_３、Ｃｌ、Ｂｒ、ＯＨ、ＯＣＨ_３、ＳＣＨ_３、ＮＨ_２、ＮＨＣＨ_３、Ｎ（ＣＨ_３）_２、ＳＯ_２ＮＨ_２、モルホリノまたはＮＯ_２である。いくつかの実施形態では、Ｒ^２２はＨである。

いくつかの実施形態では、Ｒ^１９、Ｒ^２０、Ｒ^２１およびＲ^２２はＨである。

上記の任意の関連する式または構造の記述に関して、Ｒ^２３のいくつかの非限定的な例としては、Ｒ^ｂ、ＯＲ^ｂ、ＳＲ^ｂ、ＣＯＲ^ｂ、ＣＯ_２Ｒ^ｂ、ＯＣＯＲ^ｂ、ＮＲ^ｂＲ^ｃ、ＣＯＮＲ^ｂＲ^ｃ、ＮＲ^ｂＣＯＲ^ｃ、ＳＯ_２ＮＲ^ｂＲ^ｃ、ＣＦ_３、ＣＮ、ＮＯ_２、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＩまたはＣ_２〜５ヘテロシクリルが挙げられ得る。いくつかの実施形態では、Ｒ^２３はＨ、ＣＨ_３、ＣＨ_２ＣＨ_３、Ｃｌ、Ｂｒ、ＯＨ、ＯＣＨ_３、ＳＣＨ_３、ＮＨ_２、ＮＨＣＨ_３、Ｎ（ＣＨ_３）_２、ＳＯ_２ＮＨ_２、ＣＨ_２Ｃ≡ＣＨまたはＮＯ_２である。いくつかの実施形態では、Ｒ^２３はＨまたはＳＯ_２ＮＨ_２である。いくつかの実施形態では、Ｒ^２３はＨである。いくつかの実施形態では、Ｒ^２３はＳＯ_２ＮＨ_２である。

上記の任意の関連する式または構造の記述に関して、Ｒ^２４のいくつかの非限定的な例としては、Ｒ^ｂ、ＯＲ^ｂ、ＳＲ^ｂ、ＣＯＲ^ｂ、ＣＯ_２Ｒ^ｂ、ＯＣＯＲ^ｂ、ＮＲ^ｂＲ^ｃ、ＣＯＮＲ^ｂＲ^ｃ、ＮＲ^ｂＣＯＲ^ｃ、ＳＯ_２ＮＲ^ｂＲ^ｃ、ＣＦ_３、ＣＮ、ＮＯ_２、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＩまたはＣ_２〜５ヘテロシクリルが挙げられ得る。いくつかの実施形態では、Ｒ^２４はＨ、ＣＨ_３、ＣＨ_２ＣＨ_３、Ｃｌ、Ｂｒ、ＯＨ、ＯＣＨ_３、ＳＣＨ_３、ＮＨ_２、ＮＨＣＨ_３、Ｎ（ＣＨ_３）_２、ＳＯ_２ＮＨ_２、モルホリノまたはＮＯ_２である。いくつかの実施形態では、Ｒ^２４はＨであり得る。

いくつかの実施形態では、Ｒ^２３およびＲ^２４はＨである。

上記の任意の関連する式または構造の記述に関して、Ｒ^２５のいくつかの非限定的な例としては、Ｒ^ｂ、ＯＲ^ｂ、ＳＲ^ｂ、ＣＯＲ^ｂ、ＣＯ_２Ｒ^ｂ、ＯＣＯＲ^ｂ、ＮＲ^ｂＲ^ｃ、ＣＯＮＲ^ｂＲ^ｃ、ＮＲ^ｂＣＯＲ^ｃ、ＳＯ_２ＮＲ^ｂＲ^ｃ、ＣＦ_３、ＣＮ、ＮＯ_２、ＦまたはＣ_２〜５ヘテロシクリルが挙げられ得る。いくつかの実施形態では、Ｒ^２５はＨ、ＣＨ_３、ＣＨ_２ＣＨ_３、Ｎ（ＣＨ_３）_２、ＳＯ_２ＮＨ_２、モルホリノ、ＣＨ_２Ｃ≡ＣＨまたはＮＯ_２である。いくつかの実施形態では、Ｒ^２５はＣＨ_３またはＨである。いくつかの実施形態では、Ｒ^２５はＨである。

上記の任意の関連する式または構造の記述に関して、Ｒ^２６のいくつかの非限定的な例としては、Ｒ^ｂ、ＣＦ_３、ＣＮまたはＮＯ_２が挙げられ得る。いくつかの実施形態では、Ｒ^２６はＨ、ＣＨ_３またはＣＨ_２ＣＨ_３である。いくつかの実施形態では、Ｒ^２６はＨである。

上記の任意の関連する式または構造の記述に関して、Ｒ^２７のいくつかの非限定的な例としては、Ｒ^ｂ、ＯＲ^ｂ、ＳＲ^ｂ、ＣＯＲ^ｂ、ＣＯ_２Ｒ^ｂ、ＣＯＮＲ^ｂＲ^ｃ、ＳＯ_２ＮＲ^ｂＲ^ｃ、ＣＦ_３、ＣＮ、ＮＯ_２、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＩまたはＣ_２〜５ヘテロシクリルが挙げられ得る。いくつかの実施形態では、Ｒ^２７はＨ、ＣＨ_３、ＣＨ_２ＣＨ_３、Ｃｌ、Ｂｒ、ＯＨ、ＯＣＨ_３、ＳＣＨ_３、ＳＯ_２ＮＨ_２、ＣＨ_２Ｃ≡ＣＨまたはＮＯ_２である。いくつかの実施形態では、Ｒ^２７はＨ、（ＣＨ_２）_３ＣＨ_３、ＣＨ_２ＣＨ_２ＯＣＨ_３、ＣＨ_２ＣＨ_２Ｎ（ＣＨ_３）_２、ＣＨ_２ＣＨ_２−モルホリノまたはＣＨ_２ＣＨ_２ＳＣＨ_３である。いくつかの実施形態では、Ｒ^２７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｒ^２７は（ＣＨ_２）_３ＣＨ_３である。いくつかの実施形態では、Ｒ^２７はＣＨ_２ＣＨ_２ＯＣＨ_３である。いくつかの実施形態では、Ｒ^２７はＣＨ_２ＣＨ_２Ｎ（ＣＨ_３）_２である。いくつかの実施形態では、Ｒ^２７はＣＨ_２ＣＨ_２−モルホリノである。いくつかの実施形態では、Ｒ^２７はＣＨ_２ＣＨ_２ＳＣＨ_３である。

上記の任意の関連する式または構造の記述に関して、Ｒ^２８のいくつかの非限定的な例としては、Ｒ^ｂ、ＯＲ^ｂ、ＳＲ^ｂ、ＣＯＲ^ｂ、ＣＯ_２Ｒ^ｂ、ＯＣＯＲ^ｂ、ＮＲ^ｂＲ^ｃ、ＣＯＮＲ^ｂＲ^ｃ、ＮＲ^ｂＣＯＲ^ｃ、ＳＯ_２ＮＲ^ｂＲ^ｃ、ＣＦ_３、ＣＮ、ＮＯ_２、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＩまたはＣ_２〜５ヘテロシクリルが挙げられ得る。いくつかの実施形態では、Ｒ^２８はＨ、ＣＨ_３、ＣＨ_２ＣＨ_３、Ｃｌ、Ｂｒ、ＯＨ、ＯＣＨ_３、ＳＣＨ_３、ＮＨ_２、ＮＨＣＨ_３、Ｎ（ＣＨ_３）_２、ＳＯ_２ＮＨ_２、モルホリノ、ＣＨ_２Ｃ≡ＣＨまたはＮＯ_２である。いくつかの実施形態では、Ｒ^２８はＨ、ＣＨ_２ＣＨ_３、ＯＣＨ_３、Ｎ（ＣＨ_３）_２、モルホリノまたはＳＣＨ_３である。いくつかの実施形態では、Ｒ^２８はＨである。いくつかの実施形態では、Ｒ^２８はＣＨ_２ＣＨ_３である。いくつかの実施形態では、Ｒ^２８はＯＣＨ_３である。いくつかの実施形態では、Ｒ^２８はＣＮ（ＣＨ_３）_２である。いくつかの実施形態では、Ｒ^２８はモルホリノである。いくつかの実施形態では、Ｒ^２８はＳＣＨ_３である。

上記の任意の関連する式または構造の記述に関して、Ｒ^２９のいくつかの非限定的な例としては、Ｒ^ｂ、ＯＲ^ｂ、ＳＲ^ｂ、ＣＦ_３、ＣＮ、ＮＯ_２、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＩまたはＣ_２〜５ヘテロシクリルが挙げられ得る。いくつかの実施形態では、Ｒ^２９はＨ、ＣＨ_３またはＣＨ_２ＣＨ_３である。いくつかの実施形態では、Ｒ^２９はＨである。

いくつかの実施形態では、Ｒ^８およびＲ^２９はＨである。

上記の任意の関連する式または構造の記述に関して、Ｒ^３０のいくつかの非限定的な例としては、Ｒ^ｂ、ＯＲ^ｂ、ＳＲ^ｂ、ＣＯＲ^ｂ、ＣＯ_２Ｒ^ｂ、ＯＣＯＲ^ｂ、ＮＲ^ｂＲ^ｃ、ＣＯＮＲ^ｂＲ^ｃ、ＮＲ^ｂＣＯＲ^ｃ、ＳＯ_２ＮＲ^ｂＲ^ｃ、ＣＦ_３、ＣＮ、ＮＯ_２、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩが挙げられ得る。いくつかの実施形態では、Ｒ^３０はＨ、ＣＨ_３、ＣＨ_２ＣＨ_３、Ｃｌ、Ｂｒ、ＯＨ、ＯＣＨ_３、ＳＣＨ_３、ＮＨ_２、ＮＨＣＨ_３、Ｎ（ＣＨ_３）_２、ＳＯ_２ＮＨ_２、ＣＨ_２Ｃ≡ＣＨまたはＮＯ_２である。いくつかの実施形態では、Ｒ^３０はＨである。

上記の任意の関連する式または構造の記述に関して、Ｒ^３１のいくつかの非限定的な例としては、Ｒ^ｂ、ＯＲ^ｂ、ＳＲ^ｂ、ＣＯＲ^ｂ、ＣＯ_２Ｒ^ｂ、ＯＣＯＲ^ｂ、ＮＲ^ｂＲ^ｃ、ＣＯＮＲ^ｂＲ^ｃ、ＮＲ^ｂＣＯＲ^ｃ、ＳＯ_２ＮＲ^ｂＲ^ｃ、ＣＦ_３、ＣＮ、ＮＯ_２、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＩまたはＣ_２〜５ヘテロシクリルが挙げられ得る。いくつかの実施形態では、Ｒ^３１はＨ、ＣＨ_３、ＣＨ_２ＣＨ_３、Ｃｌ、Ｂｒ、ＯＨ、ＯＣＨ_３、ＳＣＨ_３、ＮＨ_２、ＮＨＣＨ_３、Ｎ（ＣＨ_３）_２、ＳＯ_２ＮＨ_２、モルホリノ、ＣＨ_２Ｃ≡ＣＨまたはＮＯ_２である。いくつかの実施形態では、Ｒ^３１はＨである。

上記の任意の関連する式または構造の記述に関して、Ｒ^３２のいくつかの非限定的な例としては、Ｒ^ｂ、ＯＲ^ｂ、ＳＲ^ｂ、ＣＯＲ^ｂ、ＣＯ_２Ｒ^ｂ、ＯＣＯＲ^ｂ、ＮＲ^ｂＲ^ｃ、ＣＯＮＲ^ｂＲ^ｃ、ＮＲ^ｂＣＯＲ^ｃ、ＳＯ_２ＮＲ^ｂＲ^ｃ、ＣＦ_３、ＣＮ、ＮＯ_２、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＩまたはＣ_２〜５ヘテロシクリルが挙げられる。いくつかの実施形態では、Ｒ^３２はＨ、ＣＨ_３、ＣＨ_２ＣＨ_３、Ｃｌ、Ｂｒ、ＯＨ、ＯＣＨ_３、ＳＣＨ_３、ＮＨ_２、ＮＨＣＨ_３、Ｎ（ＣＨ_３）_２、ＳＯ_２ＮＨ_２、モルホリノ、ＣＨ_２Ｃ≡ＣＨまたはＮＯ_２である。いくつかの実施形態では、Ｒ^３２はＨまたはＮＯ_２である。いくつかの実施形態では、Ｒ^３２はＨである。いくつかの実施形態では、Ｒ^３２はＮＯ_２である。

いくつかの実施形態では、Ｒ^３０、Ｒ^３１およびＲ^３２はＨである。いくつかの実施形態では、Ｒ^３１およびＲ^３２はＨである。

ＮＨＣＨ_３、Ｎ（ＣＨ_３）_２、ＳＯ_２ＮＨ_２、モルホリノ、ＣＨ_２Ｃ≡ＣＨまたはＮＯ_２。いくつかの実施形態では、Ｒ^３３はＨである。

本明細書に開示される別の実施形態では、化合物は

（「ＫＩＮ１０００」化合物）である。

特に明示されない限り、構造、式、名称または他の任意の手段によって本明細書の化合物に言及する場合にはいずれも、薬学的に許容されるナトリウム塩、カリウム塩およびアンモニウム塩などの塩；エステルプロドラッグなどのプロドラッグ；多形体、溶媒和物、水和物などの代替固体形態；互変異性体；または化合物を本明細書に記載の通りに使用する条件下で本明細書に記載の化合物に迅速に転換し得る他の任意の化学種が含まれる。

立体化学が明記されない限り、化合物の構造、式または名称はいずれも、その化合物の任意の立体異性体または立体異性体の任意の混合物を指し得る。

本明細書で使用される「官能基」という用語は、異なる化合物中に存在する場合でも同様の化学的特性を有する１原子または原子団を指し、したがって、官能基は有機化合物のファミリーに特有の物理的および化学的特性を決定するものである。

特に明示されない限り、例えばアルキル、アリールなどの任意の化合物または化学構造的特徴（本明細書ではまとめて「化合物」と呼ぶ）を「任意に置換されている」と言う場合、その化合物は置換基を持たなくても（その場合、「非置換である」）、１つ以上の置換基を含んでいても（その場合、「置換されている」）よい。「置換基」という用語は当業者に公知の通常の意味を有する。いくつかの実施形態では、置換基は１５ｇ／ｍｏｌ〜５０ｇ／ｍｏｌ、１５ｇ／ｍｏｌ〜１００ｇ／ｍｏｌ、１５ｇ／ｍｏｌ〜１５０ｇ／ｍｏｌ、１５ｇ／ｍｏｌ〜２００ｇ／ｍｏｌ、１５ｇ／ｍｏｌ〜３００ｇ／ｍｏｌまたは１５ｇ／ｍｏｌ〜５００ｇ／ｍｏｌの分子量（例えば、置換基の原子の合計原子質量）を有し得る当該技術分野で公知の通常の有機部分であり得る。いくつかの実施形態では、置換基は、０〜３０個、０〜２０個、０〜１０個もしくは０〜５個の炭素（Ｃ）原子；および／またはＮ、Ｏ、Ｓ、Ｓｉ、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒもしくはＩを含む０〜３０個、０〜２０個、０〜１０個もしくは０〜５個のヘテロ原子を含み；ただし、置換基は、置換された化合物中にＣ、Ｎ、Ｏ、Ｓ、Ｓｉ、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩを含む原子を少なくとも１個含む。置換基の例としては、特に限定されないが、アルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、ヘテロアルケニル、ヘテロアルキニル、アリール、ヘテロアリール、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、アシル、アシルオキシ、アルキルカルボキシラート、チオール、アルキルチオ、シアノ、ハロ、チオカルボニル、Ｏ−カルバミル、Ｎ−カルバミル、Ｏ−チオカルバミル、Ｎ−チオカルバミル、Ｃ−アミド、Ｎ−アミド、Ｓ−スルホンアミド、Ｎ−スルホンアミド、イソシアナート、チオシアナート、イソチオシアナート、ニトロ、シリル、スルフェニル、スルフィニル、スルホニル、ハロアルキル、ハロアルコキシル、トリハロメタンスルホニル、トリハロメタンスルホンアミド、アミノなどが挙げられる。便宜上、「分子量」という用語は、それが完全な分子でなくても、分子の部分または一部について、その分子の部分または一部にある原子の合計原子質量を示すために使用される。

本明細書で使用される「ヒドロカルビル」という用語は、当該技術分野で一般に理解されている最も広い意味を有し、炭素と水素とからなる部分を含み得る。いくつかの例は、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールなどおよびその組合せを含み、直鎖状、分岐状、環状またはその組合せであり得る。ヒドロカルビルは、その構造が有し得る任意の他の数の部分と結合し得るものであり（例えば、−ＣＨ_３、−ＣＨ＝ＣＨ_２などの１つの他の基；−フェニル−、−Ｃ≡Ｃ−などの２つの他の基；または任意の数の他の基と結合し得る）、いくつかの実施形態では、１〜３５個の炭素原子を含み得る。ヒドロカルビル基の例としては、特に限定されないが、Ｃ_１アルキル、Ｃ_２アルキル、Ｃ_２アルケニル、Ｃ_２アルキニル、Ｃ_３アルキル、Ｃ_３アルケニル、Ｃ_３アルキニル、Ｃ_４アルキル、Ｃ_４アルケニル、Ｃ_４アルキニル、Ｃ_５アルキル、Ｃ_５アルケニル、Ｃ_５アルキニル、Ｃ_６アルキル、Ｃ_６アルケニル、Ｃ_６アルキニル、フェニルなどが挙げられる。

本明細書で使用される「アルキル」という用語は、当該技術分野で一般に理解されている最も広い意味を有し、炭素と水素とからなり、二重結合も三重結合も含まず、環状構造を持たない部分を含み得る。アルキルは直鎖アルキル、分岐鎖アルキル、シクロアルキルまたはその組合せを含み得るものであり、いくつかの実施形態では、１〜３５個の炭素原子を含み得る。いくつかの実施形態では、アルキルはメチル（−ＣＨ_３）、エチル（−ＣＨ_２ＣＨ_３）、ｎ−プロピル（−ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３）、ｎ−ブチル（−ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３）、ｎ−ペンチル（−ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３）、ｎ−ヘキシル（−ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３）などのＣ_１〜１０直鎖アルキル；Ｃ_３Ｈ_７（例えば、イソ−プロピル）、Ｃ_４Ｈ_９（例えば、分岐ブチル異性体）、Ｃ_５Ｈ_１１（例えば、分岐ペンチル異性体）、Ｃ_６Ｈ_１３（例えば、分岐ヘキシル異性体）、Ｃ_７Ｈ_１５（例えば、分岐ヘプチル異性体）などのＣ_３〜１０分岐鎖アルキル；Ｃ_３Ｈ_５（例えば、シクロプロピル）、Ｃ_４Ｈ_７（例えば、シクロブチル、メチルシクロプロピルなどのシクロブチル異性体）、Ｃ_５Ｈ_９（例えば、シクロペンチル、メチルシクロブチル、ジメチルシクロプロピルなどのシクロペンチル異性体）、Ｃ_６Ｈ_１１（例えば、シクロヘキシル異性体）、Ｃ_７Ｈ_１３（例えば、シクロヘプチル異性体）などのＣ_３〜１０シクロアルキル；などを含み得る。

「アルキル」、「アルケニル」および「アルキニル」という用語は、それぞれ置換および非置換アルキル、アルケニルおよびアルキニルを指す。アルキル基は、本明細書で定義される任意に置換されたものであり得る。

置換アルキル、アルケニルおよびアルキニルは、Ｈ、低級アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、アルコキシ、アリールオキシ、アリールアルコキシ、アルコキシアルキルアリール、アルキルアミノ、アリールアミノ、ＮＨ_２、ＯＨ、ＣＮ、ＮＯ_２、ＯＣＦ_３、ＣＦ_３、Ｆ、１−アミジン、２−アミジン、アルキルカルボニル、モルホリニル、ピペリジニル、ジオキサニル、ピラニル、ヘテロアリール、フラニル、チオフェニル、テトラゾロ、チアゾリル、イソチアゾリル、イミダゾリル、チアジアゾリル、チアジアゾールＳ−オキシド、チアジアゾールＳ，Ｓ−ジオキシド、ピラゾロ、オキサゾリル、イソオキサゾリル、ピリジニル、ピリミジニル、キノリニル、イソキノリニル、ＳＲ、ＳＯＲ、ＳＯ_２Ｒ、ＣＯ_２Ｒ、ＣＯＲ、ＣＯＮＲ’Ｒ’’、ＣＳＮＲ’Ｒ’’およびＳＯ_ｎＮＲ’Ｒ’’を含む１〜５個の置換基で置換されたアルキル、アルケニルおよびアルキニルを指す。

本明細書において単独でまたは組み合わせて使用される「アルキニル」という用語は、２〜２０個の炭素原子を含み、炭素−炭素三重結合を１つ以上有し、環状構造を持たない直鎖または分岐鎖炭化水素を含む官能基を指す。アルキニル基は、本明細書で定義される任意に置換されたものであり得る。アルキニル基の例としては、特に限定されないが、エチニル、プロピニル、ヒドロキシプロピニル、ブチニル、ブチン−１−イル、ブチン−２−イル、３−メチルブチン−１−イル、ペンチニル、ペンチン−１−イル、ヘキシニル、ヘキシン−２−イル、ヘプチニル、オクチニル、ノニニル、デシニル、ウンデシニル、ドデシニル、トリデシニル、テトラデシニル、ペンタデシニル、ヘキサデシニル、ヘプタデシニル、オクタデシニル、ノナデシニル、エイコシニルなどが挙げられる。

本明細書において単独でまたは組み合わせて使用される「アルキレン」という用語は、２つ以上の位置で結合した直鎖または分岐鎖飽和炭化水素から誘導されるメチレン（−ＣＨ_２−）などの飽和脂肪族基を指す。特に明記されない限り、「アルキル」という用語は、「アルキレン」基を包含し得る。

本明細書において単独でまたは組み合わせて使用される「アルキルカルボニル」または「アルカノイル」という用語は、カルボニル基を介して親分子部分と結合したアルキル基を含む官能基を指す。アルキルカルボニル基の例としては、特に限定されないが、メチルカルボニル、エチルカルボニルなどが挙げられる。

本明細書において単独でまたは組み合わせて使用される「ヘテロアルキル」という用語は、単結合によってのみ連結した１〜２０個の原子を含み、鎖中の少なくとも１個の原子が炭素であり、鎖中の少なくとも１個の原子がＯ、Ｓ、Ｎまたはその任意の組合せである直鎖または分岐鎖炭化水素を含む官能基を指す。ヘテロアルキル基は、完全飽和であっても、１〜３の不飽和度を含むものであってもよい。非炭素原子がヘテロアルキル基の任意の内部の位置にあってよく、最大２個の非炭素原子が、例えば−ＣＨ_２−ＮＨ−ＯＣＨ_３などのように連続していてもよい。さらに、非炭素原子は任意に酸化されていてよく、窒素は任意に四級化されていてよい。

本明細書において単独でまたは組み合わせて使用される「アルキルオキシ」または「アルコキシ」という用語は、アルキルエーテル基を含む官能基を指す。アルコキシの例としては、特に限定されないが、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソプロポキシ、ｎ−ブトキシ、ｉｓｏ−ブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシなどが挙げられる。

本明細書において単独でまたは組み合わせて使用される「ヒドロキシ」という用語は、官能基ヒドロキシル（−ＯＨ）を指す。

本明細書において単独でまたは組み合わせて使用される「カルボキシル」または「カルボキシ」という用語は、官能基−Ｃ（＝Ｏ）ＯＨまたはその対応する「カルボン酸」陰イオン−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−を指す。例としては、特に限定されないが、ギ酸、酢酸、シュウ酸、安息香酸が挙げられる。「Ｏ−カルボキシル」基は、Ｒが有機部分または基である一般式ＲＣＯＯを有するカルボキシル基を指す。「Ｃ−カルボキシル」基は、Ｒが有機部分または基である一般式ＣＯＯＲを有するカルボキシル基を指す。

本明細書において単独でまたは組み合わせて使用される「オキソ」という用語は、官能基＝Ｏを指す。

本明細書で使用される「炭素環式」という用語は、当該技術分野で一般に理解されている最も広い意味を有し、環原子がすべて炭素である環または環系を含む。例としては、特に限定されないが、フェニル、ナフチル、アントラセニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニルなどおよびその組合せが挙げられる。

本明細書で使用される「複素環式」という用語は、当該技術分野で一般に理解されている最も広い意味を有し、環原子のうち少なくとも１個がＮ、Ｏ、Ｓなどの炭素以外の原子である環または環系を含む。例としては、特に限定されないが、ヘテロアリール、シクロへテロアルキル、シクロへテロアルケニル、シクロへテロアルキニルなどおよびその組合せが挙げられる。

本明細書において単独でまたは組み合わせて使用される「シクロアルキル」、「炭素環式アルキル」および「炭素環アルキル」という用語は、炭素環構造中に炭素−炭素単結合によってのみ連結した３〜１２個の炭素原子の非共役環分子環構造を有する置換または非置換非芳香族炭化水素を含む官能基を指す。シクロアルキル基は単環式、二環式または多環式であってよく、また任意に、例えばアリール、ヘテロアリール、シクロアルケニル、ヘテロシクロアルキルまたはヘテロシクロアルケニルなどの環構造を１〜３個さらに含み得る。

本明細書において単独でまたは組み合わせて使用される「低級シクロアルキル」という用語は、炭素環構造中に炭素−炭素単結合によってのみ連結した３〜６個の炭素原子の非共役環分子環構造を有する単環式置換または非置換非芳香族炭化水素を含む官能基を指す。低級シクロアルキル基の例としては、特に限定されないが、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルおよびシクロヘキシルが挙げられる。

本明細書で使用される「アリール」という用語は、当該技術分野で一般に理解されている最も広い意味を有し、芳香環または芳香環系を含み得る。アリール基は単環式、二環式または多環式であってよく、また任意に、例えば、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルケニルまたはヘテロアリールなどの環構造を１〜３個さらに含み得る。「アリール」という用語は、特に限定されないが、フェニル（ベンゼニル）、チオフェニル、インドリル、ナフチル、トリル、キシリル、アントラセニル、フェナントリル、アズレニル、ビフェニル、ナフタレニル、１−メチルナフタレニル、アセナフテニル、アセナフチレニル、アントラセニル、フルオレニル、フェナレニル、フェナントレニル、ベンゾ［ａ］アントラセニル、ベンゾ［ｃ］フェナントレニル、クリセニル、フルオランテニル、ピレニル、テトラセニル（ナフタセニル）、トリフェニレニル、アンタントレニル、ベンゾピレニル、ベンゾ［ａ］ピレニル、ベンゾ［ｅ］フルオランテニル、ベンゾ［ｇｈｉ］ペリレニル、ベンゾ［ｊ］フルオランテニル、ベンゾ［ｋ］フルオランテニル、コランヌレニル、コロネニル、ジコロニレニル、ヘリセニル、ヘプタセニル、ヘキサセニル、オバレニル、ペンタセニル、ピセニル、ペリレニル、テトラフェニレニルなどを含む。

さらに、本明細書において単独でまたは組み合わせて使用される「アリール」、「ヒドロカルビルアリール」または「アリール炭化水素」という用語は、３〜１２個の炭素原子の共役環分子環構造を有する置換または非置換芳香族炭化水素を含む官能基を指し得る。置換アリールはＨ、低級アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、アルコキシ、アリールオキシ、アリールアルコキシ、アルコキシアルキルアリール、アルキルアミノ、アリールアミノ、ＮＨ_２、ＯＨ、ＣＮ、ＮＯ_２、ＯＣＦ_３、ＣＦ_３、Ｂｒ、Ｃｌ、Ｆ、１−アミジノ、２−アミジノ、アルキルカルボニル、モルホリノ、ピペリジニル、ジオキサニル、ピラニル、ヘテロアリール、フラニル、チオフェニル、テトラゾロ、チアゾール、イソチアゾロ、イミダゾロ、チアジアゾール、チアジアゾールＳ−オキシド、チアジアゾールＳ，Ｓ−ジオキシド、ピラゾロ、オキサゾール、イソオキサゾール、ピリジニル、ピリミジニル、キノリン、イソキノリン、ＳＲ、ＳＯＲ、ＳＯ_２Ｒ、ＣＯ_２Ｒ、ＣＯＲ、ＣＯＮＲ’Ｒ”、ＣＳＮＲ’Ｒ”、ＳＯ_ｎＮＲ’Ｒ”などを含む１〜５個の置換基で置換されたアリールを指す。

本明細書において単独でまたは組み合わせて使用される「低級アリール」という用語は、３〜６個の炭素原子の共役環分子環構造を有する置換または非置換芳香族炭化水素を含む官能基を指す。低級アリール基の例としては、特に限定されないが、フェニルおよびナフチルが挙げられる。

本明細書において単独でまたは組み合わせて使用される「ヘテロアリール」という用語は、環構造中の少なくとも１個の原子が炭素であり、環構造中の少なくとも１個の原子がＯ、Ｓ、Ｎまたはその任意の組合せである３〜１２個の原子の共役環分子環構造を有する置換または非置換芳香族炭化水素を含む官能基を指す。ヘテロアリール基は単環式、二環式または多環式であってよく、また任意に、例えば、アリール、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロシクロアルキルまたはヘテロシクロアルケニルなどの環構造を１〜３個さらに含み得る。ヘテロアリール基の例としては、特に限定されないが、アクリジニル、ベンジドリル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾイソオキサゾリル、ベンゾジオキシニル、ジヒドロベンゾジオキシニル、ベンゾジオキソリル、１，３−ベンゾジオキソリル、ベンゾフリル、ベンゾイソオキサゾリル、ベンゾピラニル、ベンゾチオフェニル、ベンゾ［ｃ］チオフェニル、ベンゾトリアゾリル、ベンゾオキサジアゾリル、ベンゾオキサゾリル、ベンゾチアジアゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾチエニル、カルバゾリル、クロモニル、シンノリニル、ジヒドロシンノリニル、クマリニル、ジベンゾフラニル、フロピリジニル、フリル、インドリジニル、インドリル、ジヒドロインドリル、イミダゾリル、インダゾリル、イソベンゾフリル、イソインドリル、イソインドリニル、ジヒドロイソインドリル、イソキノリル、ジヒドロイソキノリニル、イソオキサゾリル、イソチアゾリル、オキサゾリル、オキサジアゾリル、フェナントロリニル、フェナントリジニル、プリニル、ピラニル、ピラジニル、ピラゾリル、ピリジル、ピリミジニル、ピリダジニル、ピロリニル、ピロリル、ピロロピリジニル、キノリル、キノキサリニル、キナゾリニル、テトラヒドロキノリニル、テトラゾロピリダジニル、テトラヒドロイソキノリニル、チオフェニル、チアゾリル、チアジアゾリル、チエノピリジニル、チエニル、チオフェニル、トリアゾリル、キサンテニルなどが挙げられる。

本明細書において単独でまたは組み合わせて使用される「低級ヘテロアリール」という用語は、環構造中の少なくとも１個の原子が炭素であり、環構造中の少なくとも１個の原子がＯ、Ｓ、Ｎまたはその任意の組合せである３〜６個の原子の共役環分子環構造を有する単環式または二環式の置換または非置換芳香族炭化水素を含む官能基を指す。

本明細書に記載の一部の実施形態に関係のあるフェニル構造を下に図示する。この構造は下のように非置換であってよく、またこの構造が非置換であれば通常は水素原子が占める任意の位置に置換基が独立して存在するように置換されていてもよい。結合点が−｜によって示されない限り、通常は水素原子が占める任意の位置に結合が生じてもよい。

各Ｒ_ａは、独立してＨ；任意に置換されたヒドロカルビル；任意に置換されたフェニルまたは任意に置換されたアリールなどの任意に置換されたアリール；任意に置換されたピリジニル、任意に置換されたフリル、任意に置換されたチエニルなどの任意に置換されたヘテロアリールであり得る。いくつかの実施形態では、各Ｒ_ａは、独立してＨあるいはａが１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２である式Ｃ_ａＨ_ａ＋１を有する直鎖もしくは分岐鎖アルキルまたは式Ｃ_ａＨ_ａ−１を有するシクロアルキル、例えば、式：ＣＨ_３、Ｃ_２Ｈ_５、Ｃ_３Ｈ_７、Ｃ_４Ｈ_９、Ｃ_５Ｈ_１１、Ｃ_６Ｈ_１３、Ｃ_７Ｈ_１５、Ｃ_８Ｈ_１７、Ｃ_９Ｈ_１９、Ｃ_１０Ｈ_２１などの直鎖もしくは分岐鎖アルキルまたは式：Ｃ_３Ｈ_５、Ｃ_４Ｈ_７、Ｃ_５Ｈ_９、Ｃ_６Ｈ_１１、Ｃ_７Ｈ_１３、Ｃ_８Ｈ_１５、Ｃ_９Ｈ_１７、Ｃ_１０Ｈ_１９などのシクロアルキルなどを含むＣ_１〜１２アルキルであり得る。

「治療する」という用語は、ヒトまたはその他の動物における疾患の診断、治療、緩和、ワクチン接種、治療または予防の増強のうちの１つ以上を含む。

本明細書で使用される「脊椎動物」という用語は、特に限定されないが、哺乳動物、ヒト、鳥類、イヌ、ネコ、家畜（ｌｉｖｅｓｔｏｃｋ，ｆａｒｍａｎｉｍａｌｓ）、放牧群などのあらゆる生きた脊椎動物を含む。

多くのＲＮＡウイルスが共通の生化学経路、調節経路およびシグナル伝達経路を持つ。このようなウイルスとしては、特に限定されないが、インフルエンザウイルス（トリ分離株およびブタ分離株を含む）、呼吸器多核体ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、ウエストナイルウイルス、ＳＡＲＳ−コロナウイルス、ポリオウイルス、麻疹ウイルス、デングウイルス、黄熱病ウイルス、ダニ媒介脳炎ウイルス、日本脳炎ウイルス、セントルイス脳炎ウイルス、マレーバレーウイルス、ポワッサンウイルス、ロシオウイルス、跳躍病ウイルス、バンジウイルス、イルヘウスウイルス、ココベラウイルス、クンジンウイルス、アルファイウイルス、ウシ下痢ウイルスおよびキャサヌール森林病ウイルスが挙げられる。本明細書に開示される化合物および方法を用いて、このようなウイルスを治療することができる。

関連するＲＮＡウイルスの分類学上の科としては、特に限定されないが、アレナウイルス科、アストロウイルス科、ビルナウイルス科、ブロモウイルス科、ブニヤウイルス科、カリシウイルス科、クロステロウイルス科、コモウイルス科、シストウイルス科、フラビウイルス科、フレキシウイルス科、ヘペウイルス、レビウイルス科、ルテオウイルス科、モノネガウイルス目、モザイクウイルス、ニドウイルス目、ノダウイルス科、オルトミクソウイルス科、パラミクソウイルス科、ピコビルナウイルス、ピコルナウイルス科、ポティウイルス科、レオウイルス科、レトロウイルス科、セキウイルス科、テヌイウイルス、トガウイルス科、トンブスウイルス科、トティウイルス科およびティモウイルス科が挙げられる。本明細書に開示される化合物および方法を薬学的に許容される製剤の一部分として用いて、上に挙げたウイルスの科に含まれるウイルスを治療することができる。その他の関連するウイルスの科としては、特に限定されないが、ヘパドナウイルス科、ヘルペスウイルス科およびパピローマウイルス科が挙げられる。

特定の実施形態は、脊椎動物を含む動物の疾患を治療および／または予防する目的で、化合物を単独でまたは抗原と組み合わせて含む医薬組成物を提供する。したがって、いくつかの実施形態では、医薬組成物をワクチンとして使用し得る。

本開示は、アジュバントとしての化合物の使用を提供する。

本明細書に開示される化合物および方法は、現在開発中または使用中の他の治療法と相加的または相乗的なものであり得る。例えば、リバビリンとインターフェロン−αを併用すると、ＨＣＶ感染症の効果的な治療がもたらされる。両薬剤の併用による効果は、一方の製剤を単独で使用した場合の効果を上回ることがある。本開示の組成物は、単独で、あるいはインターフェロン、リバビリンおよび／またはウイルス標的（ウイルスプロテアーゼ、ウイルスポリメラーゼ、ウイルス複製複合体の集合体）と宿主標的（ウイルスのプロセシングに必要な宿主プロテアーゼ、ＮＳ５Ａなどのウイルス標的のリン酸化に必要な宿主キナーゼおよびウイルスの配列内リボソーム進入部位すなわちＩＲＥＳを効率的に利用するのに必要な宿主因子の阻害物質）の両方に対して開発中の様々な小分子と組み合わせて、またはこれらとともに投与することができる。

本明細書に開示される化合物および方法は、特に限定されないが、アダマンタン阻害剤、ノイラミニダーゼ阻害剤、αインターフェロン、非ヌクレオシドまたはヌクレオシドポリメラーゼ阻害剤、ＮＳ５Ａ阻害剤、抗ヒスタミン剤、プロテアーゼ阻害剤、ヘリカーゼ阻害剤、Ｐ７阻害剤、進入阻害剤、ＩＲＥＳ阻害剤、免疫促進剤、ＨＣＶ複製阻害剤、シクロフィリンＡ阻害剤、Ａ_３アデノシンアゴニストおよびマイクロＲＮＡ抑制剤と組み合わせて、またはこれらとともに使用することができる。

本明細書に開示される化合物および方法と組み合わせて、またはこれらとともに使用することができるサイトカインとしては、特に限定されないが、ＩＬ−２、ＩＬ−１２、ＩＬ−２３、ＩＬ−２７またはＩＦＮ−γが挙げられる。本明細書に開示される化合物および方法と組み合わせて、またはこれらとともに投与するのに用いることができる、または用いることができるであろう新たなＨＣＶ薬としては、特に限定されないが、ＡＣＨ−１６２５（Ａｃｈｉｌｌｉｏｎ）；グリコシル化インターフェロン（Ａｌｉｏｓ Ｂｉｏｐｈａｒｍａ）；ＡＮＡ５９８、ＡＮＡ７７３（Ａｎａｄｙｓ Ｐｈａｒｍ）；ＡＴＩ−０８１０（Ａｒｉｓｙｎ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）；ＡＶＬ−１８１（Ａｖｉｌａ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）；ＬＯＣＴＥＲＯＮ（登録商標）（Ｂｉｏｌｅｘ）；ＣＴＳ−１０２７（Ｃｏｎａｔｕｓ）；ＳＤ−１０１（Ｄｙｎａｖａｘ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）；クレミゾール（Ｅｉｇｅｒ Ｂｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）；ＧＳ−９１９０（Ｇｉｌｅａｄ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）；ＧＩ−５００５（ＧｌｏｂａｌＩｍｍｕｎｅ ＢｉｏＰｈａｒｍａ）；レシキモド／Ｒ−８４８（Ｇｒａｃｅｗａｙ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）；アルブインターフェロンアルファ−２ｂ（Ｈｕｍａｎ Ｇｅｎｏｍｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）；ＩＤＸ−１８４、ＩＤＸ−３２０、ＩＤＸ−３７５（Ｉｄｅｎｉｘ）；ＩＭＯ−２１２５（Ｉｄｅｒａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）；ＩＮＸ−１８９（Ｉｎｈｉｂｉｔｅｘ）；ＩＴＣＡ−６３８（Ｉｎｔａｒｃｉａ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）；ＩＴＭＮ−１９１／ＲＧ７２２７（Ｉｎｔｅｒｍｕｎｅ）；ＩＴＸ−５０６１、ＩＴＸ−４５２０（ｉＴｈｅｒｘ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）；ＭＢ１１３６２（Ｍｅｔａｂａｓｉｓ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）；バビツキシマブ（Ｐｅｒｅｇｒｉｎｅ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）；ＰＳＩ−７９７７、ＲＧ７１２８、ＰＳＩ−９３８（Ｐｈａｒｍａｓｓｅｔ）；ＰＨＸ１７６６（Ｐｈｅｎｏｍｉｘ）；ニタゾキサニド／ＡＬＩＮＩＡ（登録商標）（Ｒｏｍａｒｋ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）；ＳＰ−３０（Ｓａｍａｒｉｔａｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）；ＳＣＶ−０７（ＳｃｉＣｌｏｎｅ）；ＳＣＹ−６３５（Ｓｃｙｎｅｘｉｓ）；ＴＴ−０３３（Ｔａｃｅｒｅ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）；ビラミジン／タリバビリン（Ｖａｌｅａｎｔ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）；テラプレビル、ＶＣＨ−７５９、ＶＣＨ−９１６、ＶＣＨ−２２２、ＶＸ−５００、ＶＸ−８１３（Ｖｅｒｔｅｘ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）；およびＰＥＧ−ＩＮＦラムダ（Ｚｙｍｏｇｅｎｅｔｉｃｓ）が挙げられる。

本明細書に開示される化合物および方法と組み合わせて、またはこれらとともに投与するのに用いることができる、または用いることができるであろう新たなインフルエンザ薬およびウエストナイルウイルス薬としては、特に限定されないが、ノイラミニダーゼ阻害剤（ペラミビル、ラニナミビル）；ノイラミニダーゼ阻害剤、リバビリン、アマンタジン（ＡＤＳ−８９０２）の３剤療法；ポリメラーゼ阻害剤（ファビピラビル）；逆転写酵素阻害剤（ＡＮＸ−２０１）；吸入キトサン（ＡＮＸ−２１１）；進入／結合阻害剤（結合部位模倣物、ＦＬＵＣＩＤＥ（商標）（ＮａｎｏＶｉｒｉｃｉｄｅｓ、Ｗｅｓｔ Ｈａｖｅｎ、Ｃｏｎｎｅｃｔｉｃｕｔ）；進入阻害剤（ＦＬＵＤＡＳＥ（登録商標）（ＮｅｘＢｉｏ、Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ、Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ）；融合阻害剤（ウエストナイルに対するＭＧＡＷＮ１）；宿主細胞阻害剤（ランチビオティクス）；ＲＮＡゲノム切断（ＲＮＡｉ、ＲＮアーゼＬ）；免疫促進剤（インターフェロン、Ａｌｆｅｒｏｎ−ＬＤＯ；ニューロキニン１アゴニスト、Ｈｏｍｓｐｅｒａ、ウエストナイルに対するインターフェロンＡｌｆｅｒｏｎ Ｎ）；およびＴＧ２１が挙げられる。

本明細書に開示される化合物および方法と組み合わせて、またはこれらとともに投与するのに用いることができるインフルエンザおよび／または肝炎の他の治療薬としては、特に限定されないが、次のものが挙げられる：

上に挙げた薬剤は、同じ医薬組成物の一部分として組み込んでもよく、また同時にまたは別の治療計画に従って、本開示の化合物とは別に投与してもよい。

本明細書に開示される化合物および方法は、ワクチン開発を可能にする他の化合物および方法と相加的または相乗的なものであり得る。その抗ウイルス性および免疫増強性により、化合物は、予防的または治療的ワクチン接種に影響を及ぼすよう用いることができる。化合物は、効果を得るのに他のワクチン成分と同時にまたはこれと組み合わせて投与する必要はない。化合物のワクチン適用はウイルス感染症の予防または治療に限定されず、化合物によって誘発される免疫応答の一般的性質により、あらゆる治療的および予防的ワクチン適用を包含し得る。

当業者に理解されているように、ワクチンはウイルス、細菌感染症、癌などに対するものであり得、また特に限定されないが、弱毒生ワクチン（ＬＡＩＶ）、不活化ワクチン（ＩＩＶ；死滅ウイルスワクチン）、サブユニット（スプリットワクチン）；サブビリオンワクチン；精製タンパク質ワクチン；またはＤＮＡワクチンのうちの１つ以上を含み得る。適切なアジュバントとしては、特に限定されないが、水／油エマルション、非イオン性コポリマーアジュバント、例えばＣＲＬ１００５（Ｏｐｔｉｖａｘ（商標）；Ｖａｘｃｅｌ Ｉｎｃ．、Ｎｏｒｃｒｏｓｓ、Ｇａ．）、リン酸アルミニウム、水酸化アルミニウム、水酸化アルミニウムと水酸化マグネシウムの水性懸濁液、細菌内毒素、ポリヌクレオチド、高分子電解質、親油性アジュバントおよびＮ−アセチル−ノル−ムラミル（ｍｕｒａｎｙｌ）−Ｌ−アラニル−Ｄ−イソグルタミン、Ｎ−アセチル−ムラミル（ｍｕｒａｎｙｌ）−（６−Ｏ−ステアロイル）−Ｌ−アラニル−Ｄ−イソグルタミンまたはＮ−グリコール−ムラミル（ｍｕｒａｎｙｌ）−ＬａｌｐｈａＡｂｕ−Ｄ−イソグルタミン（Ｃｉｂａ−Ｇｅｉｇｙ Ｌｔｄ．）などの合成ムラミルジペプチド（ノルＭＤＰ）アナログの一つ以上を含む。

本開示の化合物を含む医薬組成物は様々な形態で、例えば、液体、ゲル、凍結乾燥物または圧縮固体として製剤化することができる。好ましい形態は、当業者によって治療され認識される具体的な適応症によって決まる。一実施形態では、本開示のＲＩＧ−Ｉアゴニストは、直接的な医薬品化学工程を用いる小分子薬物であり得る経口送達用の製剤を含む。

本開示の製剤の投与は、特に限定されないが、経口、皮下、静脈内、脳内、鼻腔内、経皮、腹腔内、筋肉内、肺内、髄腔内、経膣、直腸内、眼内または他の任意の許容される方法を含む様々な方法で実施することができる。製剤は、ボーラス注射でも許容されるが、ポンプ（例えば、皮下浸透圧ポンプ）または埋込みなどの当該技術分野で公知の技術を用いる注入によって継続的に投与してもよい。いくつかの場合には、製剤を溶液またはスプレーとして直接塗布し得る。

医薬組成物の例には、非経口投与用に設計された溶液がある。医薬溶液製剤は多くの場合、即時使用するのに適した液体形態で提供されるが、このような非経口製剤はほかにも、凍結または凍結乾燥形態で提供することができる。前者の場合、使用前に組成物を解凍しなければならない。凍結乾燥調製物は一般に、その液体調整物よりも安定性が高いことが当業者によって認識される通り、後者の形態は多くの場合、様々な保管条件下で組成物中に含まれる活性化合物の安定性を増大させるために用いられる。このような凍結乾燥調製物は、使用前に無菌注射用水または無菌生理的食塩水などに限定されない適切な薬学的に許容される希釈剤を１つ以上添加することによって再構成される。

非経口剤は、必要に応じて、所望の純度を有する化合物と、当該技術分野で通常用いられる１つ以上の薬学的に許容される担体、賦形剤または安定剤（これらはすべて「賦形剤」と呼ばれる）、例えば、緩衝剤、安定剤、保存剤、等張化剤、非イオン性界面活性剤、抗酸化剤および／またはその他の種々の添加剤とを混合することにより、凍結乾燥製剤あるいは水溶液として保管用に調製することができる。

緩衝剤はｐＨを生理的条件に近い範囲に維持するのに役立つ。緩衝剤は通常、２ｍＭ〜５０ｍＭの範囲の濃度で存在する。本開示に使用するのに適した緩衝剤は、有機、無機両方の酸およびその塩、例えば、クエン酸緩衝剤（例えば、クエン酸一ナトリウム−クエン酸二ナトリウム混合物、クエン酸−クエン酸三ナトリウム混合物、クエン酸−クエン酸一ナトリウム混合物など）、コハク酸緩衝剤（例えば、コハク酸−コハク酸一ナトリウム混合物、コハク酸−水酸化ナトリウム混合物、コハク酸−コハク酸二ナトリウム混合物など）、酒石酸緩衝剤（例えば、酒石酸−酒石酸ナトリウム混合物、酒石酸−酒石酸カリウム混合物、酒石酸−水酸化ナトリウム混合物など）、フマル酸緩衝剤（例えば、フマル酸−フマル酸一ナトリウム混合物、フマル酸−フマル酸二ナトリウム混合物、フマル酸一ナトリウム−フマル酸二ナトリウム混合物など）、グルコン酸緩衝剤（例えば、グルコン酸−グルコン酸ナトリウム混合物、グルコン酸−水酸化ナトリウム混合物、グルコン酸−グルコン酸カリウム混合物など）、シュウ酸緩衝剤（例えば、シュウ酸−シュウ酸ナトリウム混合物、シュウ酸−水酸化ナトリウム混合物、シュウ酸−シュウ酸カリウム混合物など）、乳酸緩衝剤（例えば、乳酸−乳酸ナトリウム混合物、乳酸−水酸化ナトリウム混合物、乳酸−乳酸カリウム混合物など）および酢酸緩衝剤（例えば、酢酸−酢酸ナトリウム混合物、酢酸−水酸化ナトリウム混合物など）などを含む。ほかにもリン酸緩衝剤、ヒスチジン緩衝剤およびトリスなどのトリメチルアミン塩が考えられる。

微生物の増殖を遅らせるために保存剤を添加することができ、通常、０．２％〜１％（ｗ／ｖ）の量で添加する。本開示に使用するのに適した保存剤は、特に限定されないが、フェノール、ベンジルアルコール、メタ−クレゾール、メチルパラベン、プロピルパラベン、オクタデシルジメチルベンジルアンモニウムクロリド、ベンザルコニウムハロゲン化物（例えば、塩化ベンザルコニウム、臭化ベンザルコニウムまたはヨウ化ベンザルコニウム）、塩化ヘキサメトニウム、メチルパラベンまたはプロピルパラベンなどのアルキルパラベン、カテコール、レゾルシノール、シクロヘキサノールおよび３−ペンタノールを含む。

液体組成物の等張性を確保するために等張化剤を添加することができ、等張化剤は、特に限定されないが、多価糖アルコール、好ましくは三価以上の糖アルコール、例えばグリセリン、エリスリトール、アラビトール、キシリトール、ソルビトールおよびマンニトールなどを含む。多価アルコールは、他の成分の相対量を考慮に入れて０．１重量％〜２５重量％、通常は１重量％〜５重量％の量で存在し得る。

安定剤は、機能上、治療剤を可溶化する、あるいは変性または容器壁への付着を防ぐのに役立つ増量剤から添加剤に及び得る、広範な種類の賦形剤を指す。典型的な安定剤は、多価糖アルコール（上記）；アルギニン、リジン、グリシン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、アラニン、オルニチン、Ｌ−ロイシン、２−フェニルアラニン、グルタミン酸、トレオニンなどのアミノ酸；イノシトールなどのシクリトールを含む、ラクトース、トレハロース、スタキオース、マンニトール、ソルビトール、キシリトール、リビトール、ミオイノシトール（ｍｙｏｉｎｉｓｉｔｏｌ）、ガラクチトール、グリセロールなどの有機糖または糖アルコール；ポリエチレングリコール；アミノ酸ポリマー；尿素、グルタチオン、チオクト酸、チオグリコール酸ナトリウム、チオグリセロール、アルファ−モノチオグリセロールおよびチオ硫酸ナトリウムなどの含硫還元剤；低分子量ポリペプチド（すなわち、１０残基未満）；ヒト血清アルブミン、ウシ血清アルブミン、ゼラチンまたは免疫グロブリンなどのタンパク質；ポリビニルピロリドンなどの親水性ポリマー；キシロース、マンノース、果糖およびブドウ糖などの単糖類；ラクトース、マルトースおよびショ糖などの二糖類；ラフィノースなどの三糖類；ならびにデキストランなどの多糖類であり得る。安定剤は通常、活性化合物の重量を基準として０．１〜１０，０００重量部で存在する。

他の種々の賦形剤は、充填剤（例えば、デンプン）、キレート剤（例えばＥＤＴＡ）、抗酸化剤（例えば、アスコルビン酸、メチオニン、ビタミンＥ）および共溶媒を含む。

また活性成分は、例えばコアセルベーション法もしくは界面重合によって調製したマイクロカプセル、例えば、ヒドロキシメチルセルロース、ゼラチンまたはポリ−（メチルメタクリル酸（ｍｅｔｈｙｌｍｅｔｈａｃｙｌａｔｅ））マイクロカプセルに、コロイド薬物送達系（例えば、リポソーム、アルブミンマイクロスフィア、マイクロエマルション、ナノ粒子およびナノカプセル）に、またはマクロエマルションに封入することができる。このような技術は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ，Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，第２１版（Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ Ｗｉｌｌｉａｍｓ ＆ Ｗｉｌｋｉｎｓ，Ａ Ｗｏｌｔｅｒｓ Ｋｌｕｗｅｒ Ｃｏｍｐａｎｙにより出版、２００５年）に開示されており、その教示は参照により本明細書に組み込まれる。

ｉｎ ｖｉｖｏ投与に使用する非経口製剤は一般に無菌である。このことは、例えば無菌ろ過膜でろ過することによって、容易に達成される。

適切な徐放性製剤の例としては、フィルムまたはマイクロカプセルなどの適切な形態を有し、化合物または組成物を含有する固体疎水性ポリマーの半透性マトリックスが挙げられる。徐放性マトリックスの例としては、ポリエステル、ヒドロゲル（例えば、ポリ（２−ヒドロキシエチル−メタクリル酸）またはポリ（ビニルアルコール））、ポリラクチド、Ｌ‐グルタミン酸とエチル−Ｌ−グルタミン酸のコポリマー、非分解性エチレン酢酸ビニル、ＰＲＯＬＥＡＳＥ（登録商標）技術（Ａｌｋｅｒｍｅｓ、Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ、Ｍａｓｓａｃｈｕｓｅｔｔｓ）またはＬＵＰＲＯＮ ＤＥＰＯＴ（登録商標）（乳酸−グリコール酸コポリマーと酢酸ロイプロリドとからなる注射用マイクロスフィア；Ａｂｂｏｔｔ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、Ａｂｂｏｔｔ Ｐａｒｋ、Ｉｌｌｉｎｏｉｓ）などの分解性乳酸−グリコール酸コポリマーおよびポリ−Ｄ−（−）−３−ヒドロキシ酪酸が挙げられる。エチレン酢酸ビニルおよび乳酸−グリコール酸などのポリマーは１００日間以上などの長期間にわたる分子の放出が可能であるのに対して、特定のヒドロゲルは化合物の放出期間がこれよりも短い。

化合物および組成物の経口投与は本開示の１つの意図される実施方法である。経口投与には、医薬組成物は固体または液体の形態、例えば、カプセル、錠剤、粉末、顆粒、懸濁液、エマルションまたは溶液の形態であり得る。医薬組成物は、所与の量の活性成分を含有する投与単位の形態で作製するのが好ましい。ヒトまたはその他の脊椎動物に適した１日量は、患者の状態およびその他の因子によって大きく異なり得るが、ルーチンの方法を用いて当業者により決定され得る。

固形剤形では、活性化合物は少なくとも１つの不活性希釈剤、例えばショ糖、ラクトースまたはデンプンなどと混合することができる。このような剤形はまた、通常の実施方法と同じく、他の物質、例えば、ステアリン酸マグネシウムなどの滑沢剤を含み得る。カプセル剤、錠剤および丸剤の場合、剤形はまた、緩衝剤を含み得る。錠剤および丸剤はさらに、腸溶性コーティングを用いて調製することができる。

化合物または組成物は従来の投与用にラクトース、ショ糖、デンプン粉末、アルカン酸のセルロースエステル、ステアリン酸、タルク、ステアリン酸マグネシウム、酸化マグネシウム、リン酸および硫酸のナトリウム塩およびカルシウム塩、アラビアゴム、ゼラチン、アルギン酸ナトリウム、ポリビニル−ピロリジンおよび／またはポリビニルアルコールなどの補助剤と混合して錠剤化またはカプセル化することができる。あるいは、化合物または組成物を生理食塩水、水、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、エタノール、油（例えばトウモロコシ油、ラッカセイ油、綿実油またはゴマ油など）、トラガントガムおよび／または各種緩衝液に溶かしてもよい。その他の補助剤および投与様式は医薬分野で公知である。担体または希釈剤は、単独のもしくはロウを含むモノステアリン酸グリセリンもしくはジステアリン酸グリセリルまたは当該技術分野で公知のその他の物質などの時間遅延物質を含み得る。

本開示は、特に限定されないが、ウイルス感染症に対する治療法およびワクチンの開発、真核細胞における自然免疫応答の調節の研究などを含めた多数の用途での本明細書の化合物、組成物および方法のｉｎ ｖｉｔｒｏでの使用および用途をさらに含む。本開示の化合物、組成物および方法はまた、動物モデルに用いることができる。本開示の化合物、組成物および方法のこのようなｉｎ ｖｉｔｒｏおよび動物におけるｉｎ ｖｉｖｏでの使用の結果は、例えば、ヒトでのｉｎ ｖｉｖｏ使用についての情報をもたらし得るものであり、またヒトでのいかなる治療的または予防的使用によらず有益なものとなり得る。

以下の実施例では、本開示の化合物の抗ウイルス特性および薬理学的特性について記載する。ここに挙げる実施例は、本開示の化合物の特定の実施形態を明らかにするために記載されるものである。当業者は、この実施例に開示される技術が、本発明者らにより本開示の実施において十分に機能することが発見された技術および組成物の代表的なものであり、したがって、その実施の好ましい形態を構成するものであると考えられることを理解するべきである。しかし、当業者は、本開示を踏まえて、開示される具体的な実施形態に多数の変更を施すことが可能であり、それでもなお本開示の趣旨および範囲を逸脱することなく同様のまたはほぼ同じ結果を得ることが可能であることを理解するべきである。例えば、以下の実施例では、本開示の化合物のｉｎ ｖｉｔｒｏの試験方法が提供される。他のｉｎ ｖｉｔｒｏウイルス感染モデルは、特に限定されないが、ウシ下痢ウイルス、ウエストナイルウイルスおよびＧＢＶ−Ｃウイルスなどのフラビウイルス、呼吸器多核体ウイルスなどの他のＲＮＡウイルスならびにＨＣＶレプリコン系を含む。さらに、任意の適切な培養細胞のウイルス複製のための成分を抗ウイルスアッセイに用いることができる。
［実施例１］
ＫＩＮ１０００の生物活性

活性化合物を同定するルシフェラーゼアッセイ
ＲＩＧ−Ｉシグナル伝達経路応答性プロモーター（ＩＦＮβ、ＩＳＧ５６またはＩＳＧ５４プロモーター）と結合したルシフェラーゼレポーター遺伝子を安定にトランスフェクトしたヒト培養細胞を播き、一晩増殖させた。次いで化合物「ＫＩＮ１０００」を加え、ＫＩＮ１０００の存在下で１８〜２０時間、細胞を培養した。Ｓｔｅａｄｙ−Ｇｌｏルシフェラーゼ基質（Ｐｒｏｍｅｇａ）を加え、ルミノメーター（Ｂｅｒｔｈｏｌｄ）で発光を読み取った。

図１Ａは、ＩＦＮβ（「ＩＦＮβ−ＬＵＣ」、左）、ＩＳＧ５６（「ＩＳＧ５６−ＬＵＣ」、中央）およびＩＳＧ５４（「ＩＳＧ５４−ＬＵＣ」、右）のプロモーターと結合したルシフェラーゼレポーター遺伝子の用量依存的な誘導を示すことによって、本明細書に記載のＫＩＮ１０００の有効性が検証されたことを示す。さらに、ＫＩＮ１０００は非特異的プロモーター（β−アクチン−ＬＵＣ、図１Ｂ）を誘導しなかった。

細胞毒性を判定するＭＴＳアッセイ
培地に希釈して漸増させた化合物または同量のＤＭＳＯでヒト培養ＨｅＬａ細胞を４８時間処理し、その細胞生存率に及ぼす影響を確認した。生細胞内でのテトラゾリウム化合物［３−（４，５−ジメチル−２−イル）−５−（３−カルボキシメトキシフェニル）−２−（４−スルホフェニル）−２Ｈ−テトラゾリウム、分子内塩；すなわちＭＴＳ］から着色ホルマザン化合物への転換を測定する細胞生存率アッセイを用いて、生存細胞の割合を計算した。

９６ウェルマイクロタイタープレートリーダーでＭＴＳからホルマザンへの転換を検出し、得られた吸光度を直接プロットして細胞生存率を推定した。Ｃｅｌｌ Ｔｉｔｅｒ Ｏｎｅ（Ｐｒｏｍｅｇａ）は製造業者プロトコルの推奨通りに使用した１段階の試薬であり、細胞を試薬の存在下で３時間インキュベートしたのち、吸光度（Ｏ．Ｄ．）を読み取った。０．５％ＤＭＳＯを含有する培地に化合物を希釈し、最終濃度を０μＭ、１μＭ、５μＭ、１０μＭおよび２０μＭにした。陰性対照のウェルには化合物を含ませず、１０％ＤＭＳＯを用いて細胞毒性の陽性対照を試験した。各濃度のＫＩＮ１０００および対照を３連ウェルで試験した。ＫＩＮ１０００は複数の細胞型に対して細胞毒性を示さなかった（ＭＴＳアッセイ、図１Ｃ）。

ＩＲＦ−３の活性化および核への移行を判定する免疫蛍光細胞化学アッセイ
ＲＩＧ−Ｉによって仲介されるＩＳＧ発現の誘導はＩＲＦ−３転写因子のリン酸化、二量体化および核移行によってもたらされる。培地に希釈して漸増させた化合物または同量のＤＭＳＯでヒト培養ＨｅＬａ細胞を２０時間処理した。陽性対照のウェルは１００ＨＡ／ｍＬのセンダイウイルスに同時間感染させた。ＩＲＦ−３に特異的なポリクローナルウサギ血清と、ＤｙＬｉｇｈｔ（登録商標）（Ｐｉｅｒｃｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｉｎｃ．、Ｒｏｃｋｆｏｒｄ、ＩＬ）４８８に結合した二次抗体とを用いて、ＩＲＦ−３を検出した。ＫＩＮ１０００は、核内と細胞質内でのＩＲＦ−３の差の用量依存的な増加を示している（図２Ａ）。

ＮＦκＢ活性化を判定する免疫蛍光細胞化学アッセイ
ＲＩＧ−Ｉに依存する自然免疫応答はまた、ＮＦκＢ転写因子を活性化して核内レベルを上昇させる。培地に希釈して漸増させた化合物または同量のＤＭＳＯでヒト培養ＨｅＬａ細胞を２０時間処理した。陽性対照のウェルは１００ＨＡ／ｍＬのセンダイウイルスに同時間感染させた。ＮＦκＢのｐ６５サブユニットに特異的なマウスモノクローナル抗体と、ＤｙＬｉｇｈｔ４８８に結合した二次抗体とを用いて、ＮＦκＢを検出した。

免疫蛍光アッセイの定量化
化合物で処理しＩＲＦ−３またはＮＦκＢについて染色したヒト培養細胞を含む９６ウェルプレートを、ＡｒｒａｙＳｃａｎ（登録商標）の機器およびソフトウェア（Ｃｅｌｌｏｍｉｃｓ）を用いてスキャンし定量した。細胞質内強度に対して正規化した核内強度または核内と細胞質内との差の増加により転写因子活性化を明らかにした。ＫＩＮ１０００は、核内と細胞質内でのＮＦκＢの差の用量依存的な増加を示している（図２Ｂ）。

この実施形態に記載した方法によって、本明細書に記載の他の化合物を同様に評価することができ、また他の細胞型を用いることもできる。
［実施例２］
ＫＩＮ１０００のインフルエンザＷＳＮ株に対する抗ウイルス活性

インフルエンザウイルスによる感染の１２〜２４時間前に、ＫＩＮ１０００の量を漸増させてＭＲＣ５細胞を処理した。次いで、細胞中のウイルスタンパク質の免疫蛍光アッセイにより、ウイルス導入の２４時間後の感染細胞数を定量した。本明細書に開示されるＫＩＮ１０００化合物は、インフルエンザウイルス株ＷＳＮに対して効果的な活性を示した。図３は、ＫＩＮ１０００の量を漸増させて処理したＭＲＣ５細胞にインフルエンザウイルスによる感染の用量依存的な減少がみられることを示している。
［実施例３］
ＫＩＮ１０００のｅｘ ｖｉｖｏ免疫刺激活性

初代免疫細胞におけるＫＩＮ１０００の活性をアッセイし、ＫＩＮ１０００が免疫応答を刺激するかどうかを判定した。ヒト培養初代樹状細胞を０μＭ、１μＭまたは１０μＭのＫＩＮ１０００で２４時処理した。処理したウェルから上清を分離し、サイトカインタンパク質のレベルを調べた。磁気ビーズに結合した特異的抗体と、ストレプトアビジン／フィコエリトリンと反応して蛍光シグナルを発生する二次抗体とを用いて、サイトカインを検出した。Ｍａｇｐｉｘ（登録商標）（Ｌｕｍｉｎｅｘ Ｃｏｒｐ．）機器を用いて、結合したビーズを検出し定量したが、例えばＥＬＩＳＡなどの当該技術分野で公知の同様の技術を用いて、蛍光タンパク質産生量を測定してもよい。

ＫＩＮ１０００は、樹状細胞によるケモカインＩＬ−８、ＭＣＰ−１、ＭＩＰ−１αおよびＭＩＰ−１βの発現を誘導することが示された（図４）。

サイトカイン分泌を測定することができるその他の細胞は、例えば、特に限定されないがヒト末梢血単核球、ヒトマクロファージ、マウスマクロファージ、マウス脾細胞、ラット胸腺細胞およびラット脾細胞を含む。
［実施例４］
構造活性相関（ＳＡＲ）試験を用いた抗ウイルス活性および薬理学的特性

この実施例では、抗ウイルス作用に関する化合物の最適化について記載する。最初に、小型のアナログ誘導体のセットを用いて構造クラスを明らかにする。次いで、この最初の段階で特定された活性アナログを用いて、さらなる最適化の対象となる構造クラスのサブセットを明らかにする（段階２）。

段階２、誘導体の拡張
段階２では、構造の多様性を作出し、核となる変異体を評価することに焦点を絞り込む。１つ以上の細胞系または末梢血単核球でのＩＲＦ−３移行アッセイ、抗ウイルス活性および細胞毒性における生物活性について、構造誘導体を試験する。ｉｎ ｖｉｔｒｏでの毒性ならびに吸収、分布、代謝および排泄（ＡＤＭＥ）の測定をさらに実施して、効果の向上および低い細胞毒性を示す最適化された分子をさらに特徴付ける。また、その作用機序および抗ウイルス活性の幅を検討する。

ＳＡＲ試験における化学的設計
アナログの構造を設計するため、リード化合物の薬物様特性、代謝不安定性および潜在的毒性を分析する。Ｌｉｐｉｎｓｋｉの法則によって測定される薬物様特性および関連する物理化学的特性をバイオアベイラビリティの主要な指標とする。代謝不安定性および毒性学的不安定性を示唆する構造的特徴は低い安定性、短い半減期、反応性中間体または特異体質性毒性を示している可能性があるため、これを除去する。５〜１０の化合物アナログのセットを構築し、化学反応性の高いまたは代謝を受けやすい構造的特徴を除去または改変することによって、予備的なＳＡＲを開発する。

２Ａ型ＨＣＶ、呼吸器多核体ウイルス、デングウイルス２型およびインフルエンザＡウイルス株に対するｉｎ ｖｉｔｒｏでの抗ウイルス活性について化合物を試験する。薬物による処理後、本明細書に記載のアッセイを用いて、ウイルスタンパク質およびＲＮＡレベルを調べる。

ＳＡＲのラウンドを数回反復して、ｉｎ ｖｉｔｒｏでの毒性学的特性およびＡＤＭＥ特性の特徴付ならびにさらなる機序試験のために化合物を選択する。前臨床開発を裏付けるのに十分なピコモル濃度からナノモル濃度の効力を有するリード化合物を提供できるようＳＡＲ試験をデザインする。

ｉｎ ｖｉｔｒｏ薬理学
ｉｎ ｖｉｔｒｏ薬理試験を実施し、腸透過性、代謝安定性および毒性のうちの１つ以上のアッセイで最も有望なアナログの性能を測定する。重要なｉｎ ｖｉｔｒｏの特徴付け試験には、血漿タンパク結合；ヒトおよびモデル生物での血清、血漿および全血安定性；腸透過性；固有クリアランス；ヒトＥｔｈｅｒ−ａ−ｇｏ−ｇｏ（ｈＥＲＧ）チャネル阻害；ならびに遺伝毒性が含まれ得る。

各アナログについて、ＨＰＬＣおよび／またはＨＰＬＣ質量分析に基づく分析方法を用いて、各種試験系における薬物および代謝産物の濃度を評価する。各分子には特定の分析方法が最適なものとなるが、逆相クロマトグラフィーを単独でまたは四極子質量分析と組み合わせて用いて、いくつかのリード分子の特性および純度を特徴付けることができる。最初に、哺乳動物種（例えばマウス、カニクイザルおよびヒトなど）の血清、血漿および全血の濃度を漸増させて経時的な薬物安定性をＨＰＬＣによって評価し、半減期を決定する。

質量分析による顕著な代謝産物の特徴付け
平衡透析法を用いて分配を分析することによって、ヒト血漿タンパク結合を評価する。腸透過性のモデル化では、ヒト上皮細胞系ＴＣ７で頂端側から基底側への流動を評価する。ヒト肝ミクロソームでのインキュベーション時に親化合物が消失する速度を測定することによって、最も有望なアナログのサブセットの肝クリアランスを推定する。上記のように、特定の代謝産物を分離し特徴付けることができる。

ｉｎ ｖｉｔｒｏ毒性
ｉｎ ｖｉｔｒｏ毒性試験を実施してリードアナログの潜在的な心毒性および遺伝毒性を評価する。自動パッチクランプを用いて、遺伝子導入によりヒトＫｖ１１．１遺伝子を発現する組換えチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞系のｈＥＲＧチャネル電流に対する各化合物の影響を評価する。ｈＥＲＧチャネルに対する分子のＩＣ５０を決定するために、各化合物の最大血清中濃度の３０倍と溶解度限界のうちの低い方を最大とする濃度を評価する。サルモネラ・チフィムリウム（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ）菌株ＴＡ９８およびＴＡ１００の変異復帰を誘導する能力または培養ＣＨＯ細胞の小核形成を促進する能力について、化合物のサブセットを様々な濃度で評価する。
［実施例５］
ＫＩＮ１０００および誘導体化合物による遺伝子発現の活性化

ＨｅＬａ細胞における遺伝子発現
ヒト培養細胞を２０μＭ、１０μＭ、５μＭの化合物またはＤＭＳＯ対照で処理し、最大２４時間インキュベートした。細胞を回収し、ＱＩＡｓｈｒｅｄｄｅｒカラムおよびＲＮｅａｓｙ Ｍｉｎｉ Ｋｉｔ（Ｑｉａｇｅｎ）を製造業者の指示に従って用いて、ＲＮＡを単離した。逆転写を実施し、ｃＤＮＡ鋳型を定量的リアルタイムＰＣＲに使用した。検証済みの市販のＴａｑＭａｎ遺伝子発現アッセイ（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ／Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を製造業者の指示に従って用いて、ＰＣＲ反応を実施した。相対的な発現分析法（ΔΔＣｔ）を用いて遺伝子発現レベルを測定した。

ＰＨ５ＣＨ８細胞における遺伝子発現
ヒト培養細胞を１０μＭ、５μＭ、１μＭまたはＤＭＳＯ対照で処理し、最大２４時間インキュベートした。細胞を回収し、ＱＩＡｓｈｒｅｄｄｅｒカラムおよびＲＮｅａｓｙ Ｍｉｎｉ Ｋｉｔ（Ｑｉａｇｅｎ）を製造業者の指示に従って用いて、ＲＮＡを単離した。逆転写を実施し、ｃＤＮＡ鋳型を定量的リアルタイムＰＣＲに使用した。検証済みの市販のＴａｑＭａｎ遺伝子発現アッセイ（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ／Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を製造業者の指示に従って用いて、ＰＣＲ反応を実施した。相対的な発現分析法（ΔΔＣｔ）を用いて遺伝子発現レベルを測定した。

初代ＨＵＶＥＣ細胞における遺伝子発現
細胞を解凍して１ウェル当たりの細胞数２．４×１０^４個で６ウェルプレートに播き、通常は５日間、４８時間毎に新鮮な培地と交換しながら培養し、８０％のコンフルエンスになるまで増殖させた。１０μＭ、１μＭの化合物またはＤＭＳＯ対照を加え、最大２４時間インキュベートした。細胞を回収し、ＱＩＡｓｈｒｅｄｄｅｒカラムおよびＲＮｅａｓｙ Ｍｉｎｉ Ｋｉｔ（Ｑｉａｇｅｎ）を製造業者の指示に従って用いて、ＲＮＡを単離した。逆転写を実施し、ｃＤＮＡ鋳型を定量的リアルタイムＰＣＲに使用した。検証済みの市販のＴａｑＭａｎ遺伝子発現アッセイ（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ／Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を製造業者の指示に従って用いて、ＰＣＲ反応を実施した。相対的な発現分析法（ΔΔＣｔ）を用いて遺伝子発現レベルを測定した。

図５は、ＫＩＮ１０００およびその誘導体化合物ＫＩＮ１１４８による遺伝子発現の誘導を示す。図５Ａは、１０μＭ ＫＩＮ１０００（灰色）または１０μＭ ＫＩＮ１１４８（黒）による処理後４〜２４時間にわたるＨｅＬａ細胞におけるＩＦＩＴ２（左）およびＯＡＳ１（右）の遺伝子発現レベルを示す。図５Ｂは、ＫＩＮ１０００（灰色無地の棒）またはＫＩＮ１１４８（黒無地の棒）で処理したＰＨ５ＣＨ８細胞（左）およびＫＩＮ１０００（灰色縞模様の棒）またはＫＩＮ１１４８（黒格子模様の棒）で処理したＨｅＬａ細胞（右）におけるＩＦＩＴ２の遺伝子発現レベルを示す。各試験群では、３本の縦棒はそれぞれ５、１０および２０μＭの化合物（ＫＩＮ１０００またはＫＩＮ１１４８）を表す。図５Ｃは、１μＭ ＫＩＮ１０００（灰色）または１μＭ ＫＩＮ１１４８（黒）で処理した初代ＨＵＶＥＣ細胞におけるＩＦＩＴ２（左）、ＯＡＳ１（中央）およびＭｘＡ（右）の遺伝子発現レベルを示す。軸のスケーリングの差から、初代細胞型の方が化合物の活性が高いことがわかる。以上のデータは、化合物が、応答性遺伝子発現を誘導することにより細胞において活性であることを示している。

特に限定されないが、初代血液単核細胞、ヒトマクロファージ、ＴＨＰ−１細胞、Ｈｕｈ７細胞、Ａ５４９細胞、ＭＲＣ５細胞、ラット脾細胞、ラット胸腺細胞、マウスマクロファージ、マウス脾細胞およびマウス胸腺細胞を含む細胞型でも同様に遺伝子発現をアッセイすることができる。その他の対象遺伝子の発現を本明細書に記載の通りにアッセイすることができる。
［実施例６］
ＫＩＮ１０００の各種ウイルスに対する抗ウイルス活性

細胞培養感染モデルにおける抗ウイルス作用
最適化した分子の抗ウイルス活性の幅をさらに特徴付けるために、細胞培養感染モデルを用いて、特に限定されないが、様々な株のインフルエンザウイルス、ＨＣＶ、デングウイルス、ＲＳＶおよび公衆衛生上の問題となりつつあるウエストナイルウイルス（ＷＮＶ）を含む様々なウイルスについて分析を行った。この試験は、感染の２〜２４時間前に細胞を化合物で処理すること、または感染後８時間以内に細胞を処理することを含む。ウイルス産生および細胞内ＩＳＧ発現を経時的に評価し、リード構造クラスの代表的な化合物の抗ウイルス効果を分析する。陽性対照としてＩＦＮβ処理を用いた。

フォーカス形成またはプラークアッセイによりウイルス産生を測定する。並行実験では、ｑＰＣＲおよび免疫ブロット分析によりウイルスＲＮＡおよび細胞内ＩＳＧ発現を測定する。ここに挙げた実験は、ウイルス感染時の化合物のシグナル伝達作用の有効性を検証するべくデザインされたものであり、様々な株のウイルスに対しウイルス対策において、自然免疫による抗ウイルスプログラムを指令する化合物の作用を評価するものである。各ウイルス感染系を対象に各化合物の詳細な用量反応解析を実施し、処理前および処理後両方の感染症モデルについて、ウイルス産生を対照細胞よりも５０％（ＩＣ５０）および９０％（ＩＣ９０）抑制する有効量を決定する。

リード化合物の抗ウイルス解析のためのウイルス系および試験デザイン
［実施例７］
ＫＩＮ１０００および誘導体化合物の呼吸器多核体ウイルスに対する活性

前日に、ＨｅＬａ細胞を６ウェルプレートに１ウェル当たりの細胞数４×１０^５個で播いた。その翌日、培地をＭＯＩが０．１のＦＢＳを含まない培地中のＲＳＶに交換した。３７℃で２時間、ウイルスを結合させた。２時間後、細胞を温かい完全培地で洗浄し、異なる濃度１０μＭ、５μＭ、１μＭの薬物を含有する培地またはＤＭＳＯ対照を含有する培地に交換した。細胞を３７℃の恒温器内に４８時間置いた。

ウイルスの検出および力価測定には、ウイルス上清回収の２４時間前にＨｅＬａ細胞を９６ウェルプレートに１ウェル当たりの細胞数８×１０^３個で播いた。４８時間のインキュベーションの後、感染プレートのウイルス上清を回収し、これを用いて上記細胞に１／１０の最終希釈で感染させた。細胞を３７℃の恒温器内に２４時間置いた。

感染の２４時間後、細胞をＰＢＳで２回洗浄し、メタノール／アセトン溶液で固定した。固定後、細胞をＰＢＳで２回洗浄し、ブロッキング緩衝液（ＰＢＳ中１０％ウマ血清、１ｇ／ｍＬ ＢＳＡおよび０．１％ Ｔｒｉｔｏｎ−１００Ｘ）に交換し１時間経過させた。ブロッキング緩衝液を１／２０００希釈の一次抗体を含有する結合緩衝液に交換し、室温で２時間経過させる。一次抗体はＲＳＶに対するマウスモノクローナル抗体であった。細胞をＰＢＳで２回洗浄し、１／３０００希釈のＡｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ−４８８ヤギ抗マウス二次抗体とヘキスト核染色剤とを含有する結合緩衝液に交換し、室温で１時間経過させた。細胞をＰＢＳで２回洗浄し、全ウェルにＰＢＳを加える。９６ウェルプレートを密封し、ＡｒｒａｙＳｃａｎ機器（Ｔｈｅｒｍｏ−Ｆｉｓｃｈｅｒ）を用いた免疫蛍光アッセイにより、ウイルス感染力に関わる蛍光活性を測定した。

図６は実施例のプロトコルを用いて実施した実験を示したものであり、ＫＩＮ１０００およびＫＩＮ１１４８に呼吸器多核体ウイルスに対する抗ウイルス活性がみられることがわかる。図６Ａは、ＫＩＮ１０００およびＫＩＮ１１４８の量を漸増させて処理したＨｅＬａ細胞にＲＳＶによる感染の用量依存的な減少がみられることを示している。図６Ｂは、感染の最大２４時間前に薬物を添加した場合にＫＩＮ１１４８がＲＳＶに対する抗ウイルス活性を示したことを示している。

感染の前の化合物による処理
この方法の変法では、ウイルスによる感染前の様々な時点で化合物を加える。ウイルスの検出および力価測定は記載した通りに実施する。

アナログの試験およびＳＡＲ試験
ＫＩＮ１０００の構造誘導体の活性を測定する基準として、ＲＳＶに対する抗ウイルス活性を用いた。ＲＳＶに対する抗ウイルス活性を示すものとして選択されたＫＩＮ１０００の構造誘導体を表３に示す。親化合物ＫＩＮ１０００に比べ、ここに挙げたアナログにはＲＳＶに対する抗ウイルス活性のレベルに差がみられた。＋＋＋＝７０％超の感染阻害、＋＋＝５０％超の阻害、＋＝３０％超の阻害、−＝３０％未満の阻害。

［実施例８］
ＫＩＮ１０００および誘導体化合物のインフルエンザＡ／ＵＤＯＲＮ／７２ウイルスに対する活性

Ｈ２９２細胞のインフルエンザＡ／Ｕｄｏｒｎ／７２感染
ＲＰＭＩ１６４０＋１０％ＦＣＳ中の.２×１０^６個のＨ２９２細胞を最終濃度０．５％のＤＭＳＯ中２μＭのＫＩＮ１１４８で６時間処理した。化合物含有培地を吸引し、ＭＯＩが０．１のＡ／Ｕｄｏｒｎ／７２を含有する１×ＭＥＭに交換し、ＣＯ_２恒温器内に３７℃で置いた。感染の２時間後、ウイルス含有培地を吸引し、１μｇ／ｍＬのＴＰＣＫ処理トリプシン、２μＭのＫＩＮ１１４８、０．５％のＤＭＳＯを含有する１×ＭＥＭに交換した。細胞を３７℃のＣＯ_２恒温器内に１８時間置いた。感染の２０時間後、ウイルス上清を回収し、ＭＤＣＫ細胞で力価を測定した。

ＨＥＫ２９３細胞のインフルエンザＡ／Ｕｄｏｒｎ／７２感染
５×１０^５個のＨＥＫ２９３細胞を１×ＭＥＭ中、ＭＯＩが０．２のＡ／Ｕｄｏｒｎ／７２に感染させた。感染の２時間後、ウイルス含有培地を吸引し、１μｇ／ｍＬのＴＰＣＫ処理トリプシン、１０μＭのＫＩＮ１１４８、０．５％のＤＭＳＯを含有する１×ＭＥＭに交換した。細胞を３７℃のＣＯ_２恒温器に戻し、１８時間経過させた。感染の２０時間後、ウイルス上清を回収し、ＭＤＣＫ細胞で力価を測定した。

ＭＤＣＫ細胞での力価
２μｇ／ｍＬのＴＰＣＫ−トリプシンの存在下、感染上清１０μＬを２×１０^６個のＭＤＣＫ細胞に加え、３７℃のＣＯ_２恒温器内に置いた。８時間後、上清を除去し、細胞を固定し、インフルエンザＮＰタンパク質に特異的なＦＩＴＣ結合抗体で染色した。ＡｒｒａｙＳｃａｎの機器およびソフトウェア（Ｃｅｌｌｏｍｉｃｓ）を用いて、フォーカス数を定量した。

図７は、ＫＩＮ１１４８のインフルエンザＡウイルスＵｄｏｒｎ／７２に対する抗ウイルス活性を示している。２μＭ（Ｈ２９２）または１０μＭ（ＨＥＫ２９３）のＫＩＮ１１４８で処置したＨ２９２細胞（左）およびＨＥＫ２９３細胞（右）にウイルスによる感染の減少がみられた。
［実施例９］
ＫＩＮ１０００および誘導体化合物のデングウイルスに対する活性

前日に、Ｈｕｈ７細胞を６ウェルプレートに１ウェル当たりの細胞数４×１０^５個で播いた。その翌日、培地をＭＯＩが０．２５のＦＢＳを含まない培地中のデングウイルス２型に交換した。４℃で１時間、ウイルスを結合させた。１時間後、細胞を温かい完全培地で洗浄し、異なる濃度１０μＭ、５μＭ、１μＭのＫＩＮ１１４８を含有する培地またはＤＭＳＯ対照を含有する培地に交換した。細胞を３７℃の恒温器内に４８時間置いた。

Ｖｅｒｏ細胞での力価
ウイルス上清回収の２４時間前にＶｅｒｏ細胞を９６ウェルプレートに１ウェル当たりの細胞数８×１０^３個で播いた。４８時間後、ウイルス上清を回収し、これを１／１００の最終希釈でＶｅｒｏ細胞の感染に用いた。

感染の２４時間後、Ｖｅｒｏ細胞をＰＢＳで２回洗浄し、メタノール／アセトンで１５分間固定した。固定後、細胞をＰＢＳで２回洗浄し、ブロッキング緩衝液に交換し３０〜４５分経過させた。ブロッキング緩衝液を１／２０００希釈のエンベロープタンパク質を標的とする一次モノクローナル抗体を含有する結合緩衝液に交換し、２時間経過させた。２時間後、細胞をＰＢＳで２回洗浄し、１／３０００希釈のＡｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ−４８８ヤギ抗マウス二次抗体とヘキスト核染色剤とを含有する結合緩衝液に交換し、４５分経過させた。４５分後、細胞をＰＢＳで２回洗浄し、全ウェルにＰＢＳを加えた。９６ウェルプレートを密封し、ＡｒｒａｙＳｃａｎの機器およびソフトウェア（Ｃｅｌｌｏｍｉｃｓ）を用いたＩＦにより、ウイルス感染力に関わる蛍光活性を測定した。

図８は、この実施例のプロトコルを用いて実施した実験の結果を示したものであり、ＫＩＮ１１４８のデングウイルス２型に対する抗ウイルス活性を示している。ＫＩＮ１１４８の量を漸増させて処理したＨｕｈ７細胞にウイルスによる感染の用量依存的な減少がみられた。
［実施例１０］
ＫＩＮ１０００および誘導体化合物のＢ型肝炎ウイルスに対する活性

化合物（０．５％のＤＭＳＯ培地中１〜１０μＭの濃度）の存在下、ＨｅｐＡＤ３８細胞（制御されたＨＢＶゲノムを発現するＨｅｐ２細胞）を７２時間培養した。ＨＢＶを発現しないＨｅｐＡＤ３８細胞を陰性対照として用いた。処理の７２時間後、培地１００μｌをＥＬＩＳＡに用いてＨＢＶ表面抗原を測定した。Ｃｒｅａｔｉｖｅ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ社（ＮＪ）の市販のＨＢＶ ｓＡｇ ＥＬＩＳＡにより、細胞によって産生されたＨＢＶ表面抗原の上清中の量を測定した。

図９は、この実施例のプロトコルを用いて実施した実験の結果を示したものであり、ＫＩＮ１１４８のＢ型肝炎ウイルスに対する抗ウイルス活性を示している。ＫＩＮ１１４８の量を漸増させて処理したＨｅｐＡＤ３８細胞で上清中ウイルスレベルの用量依存的な減少がみられた。
［実施例１１］
関連する前臨床動物モデルにおける最適化した薬物リードのｉｎ ｖｉｖｏ薬物動態特性、毒性学的特性および抗ウイルス特性

前臨床薬物動態および忍容性のプロファイリング
インフルエンザウイルスおよびＷＮＶ感染の動物モデルにおける抗ウイルス活性の特徴付けをさらに行うために、ＫＩＮ１０００および関連化合物のｉｎ ｖｉｖｏの薬物動態（ＰＫ）プロファイルおよび忍容性／毒性を評価する。マウスは最もよく用いられるＷＮＶおよびインフルエンザのげっ歯類モデルであるため、これらの試験にはマウスを試験種として選択する。

マウス血漿中の各化合物の濃度の測定に逆相ＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ検出法を用いる。ＰＫプロファイリングの前に、主として少数の保管条件に対する水溶解度および安定性を最大限に高めることに焦点を絞り込んだ限定された製剤成分のスクリーニングを用いて、各化合物の最初の経口製剤および静脈内製剤を開発する。製剤の性能測定には、当該技術分野で公知のいずれかの分析方法を用いることができる。３段階の戦略に従って各化合物の製剤を開発する：
・段階１：ｐＨ（ｐＨ３〜９）、緩衝剤および浸透圧を調節する
・段階２：エタノール（１０％未満）、プロピレングリコール（４０％未満）またはポリエチレングリコール（ＰＥＧ）３００もしくは４００（６０％未満）の共溶媒を添加して溶解度を増大させる
・段階３：必要に応じて、Ｎ−Ｎ−ジメチルアセトアミド（ＤＭＡ、３０％未満）、Ｎ−メチル−２−ピロリドン（ＮＭＰ、２０％未満）および／またはジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ、２０％未満）の共溶媒あるいはシクロデキストリン（４０％未満）を添加し溶解度をさらに高める。

ｉｎ ｖｉｔｒｏでの抗ウイルス試験、機序試験、ＡＤＭＥ試験および毒性試験で十分な性能を示した化合物については、予備的なマウスＰＫ試験を実施する。表３を参照されたい。一晩絶食させたマウスに、強制経口投与（１０ｍｌ／ｋｇ未満）またはｉ．ｖ．ボーラス注射（５ｍｌ／ｋｇ未満）により各化合物を単回容量として投与する。各時点で３個体の試料採取ができるよう、各投与群について複数の個体に投与する。投与前ならびに投与の５分後、１５分後、３０分後、１時間後、２時間後、４時間後、８時間後および２４時間後に、後眼窩洞から血液試料を採取する。これまでに開発されている生物学的分析法に従って薬物濃度を測定する。ＷｉｎＮｏｎｌｉｎソフトウェアを用いて薬物動態パラメータを評価する。

予備的なＰＫ試験での性能に基づき、抗ウイルスモデルでの特徴付けの前に、マウスで予備的な忍容性および毒性について化合物をさらに評価する。忍容性試験を２段階で実施する。すなわち、最初に用量漸増段階（それぞれ５日間のウォッシュアウト期間を挟む最大５用量）で最大耐容量（ＭＴＤ、フェーズ１）を決定し、次いで、ＭＴＤを７日間連日投与して急性毒性を評価する（フェーズ２）。表３を参照されたい。いずれの投与も強制経口投与により実施する。１つの実験例では、雌雄それぞれ５個体を段階１（フェーズ１）の試験に供し、各投与群の雌雄それぞれ１５個体を段階２（フェーズ２）の試験に供する。試験エンドポイントには、ＭＴＤの決定、身体検査、臨床観察、血液学的検査、血清化学的検査および個体の体重測定が含まれる。死亡した場合、瀕死状態で安楽死させた場合、予定していた実験終了時のいずれにおいても、全個体に肉眼的病理学検査を実施する。毒性試験は本来予備的なものであり、初期の毒性エンドポイントを確認し、抗ウイルス動物モデルのリード候補の選択を進めるものである。

マウス感染モデルを用いた抗ウイルス特性および免疫防御の評価
前臨床的マウス感染モデルでさらに評価するため、最適化した化合物を化合物の薬物動態、抗ウイルス作用および自然免疫作用に基づいて選択する。表４を参照されたい。化合物の自然免疫作用を測定し、そのＷＮＶおよびインフルエンザウイルス攻撃からマウスを保護する能力を評価する。ＷＮＶ感染モデルでは、野生型Ｃ５７Ｂｌ／６マウスにＷＮＶの毒性系統１株（ＷＮＶ−ＴＸ）による足蹠皮下感染を実施する。インフルエンザウイルス株Ａ／ＰＲ／８／３４、Ａ／ＷＳＮ／３３およびＡ／Ｕｄｏｒｎ／７２では、非外科的な気管内注入を実施する。

ある特定の実験に使用するインフルエンザウイルス株には２つ異なるサブタイプ（Ｈ１Ｎ１およびＨ３Ｎ２）があり、Ｃ５７Ｂｌ／６マウスにおいて様々な病原特性および臨床像を示す。単独の、または感染前１２時間もしくは感染後２４時間から開始し、所定の血漿中半減期の薬物に毎日曝露する化合物治療と組み合わせた様々な攻撃量（例えば、１０〜１，０００ｐｆｕのウイルスなど）について、マウスの罹患率および死亡率をモニターする。化合物の用量反応解析および感染の経時試験を実施し、１）血清中ウイルス量の抑制、２）標的器官でのウイルス複製および伝播の抑制ならびに３）ウイルス病原性に対する防御に対する化合物の効果を評価する。

ＷＮＶについては、血清に加えて、リンパ節、脾臓および脳のウイルス負荷を評価し、インフルエンザウイルスについては、心臓、肺、腎臓、肝臓および脳のウイルス負荷を評価する。ここに挙げた実験のデザインには、１００ｐｆｕのＷＮＶ−ＴＸまたは１，０００ｐｆｕのインフルエンザウイルスの標準的な攻撃後に各化合物によって血清中ウイルス量を５０％および９０％抑制するのに有効な量（ＥＤ５０およびＥＤ９０）を決定することが加えられる。化合物による治療後、２４時間置きに、ウイルスＲＮＡのｑＰＣＲにより血清中ウイルス量を決定する。感染のＷＮＶ神経侵襲モデルを用いて、脳神経系におけるＷＮＶ病原性抑制に対するＥＤ５０およびＥＤ９０での化合物の作用を試験する。

単独のまたは感染後２４時間から開始する化合物治療と組み合わせた１ｐｆｕのＷＮＶ−ＭＡＤによる標準的な頭蓋内攻撃を実施した後、マウスの罹患率および死亡率をモニターする。
［実施例１２］
ＫＩＮ１０００および誘導体化合物のｉｎ ｖｉｖｏでの抗ウイルス活性

マウス感染モデルを用いたＫＩＮ１０００および誘導体化合物の抗ウイルス特性の評価
最も有望な化合物を最大５つ選択し、インフルエンザウイルスおよび／または呼吸器多核体ウイルスによる感染の前臨床マウスモデルでさらに評価する。ＫＩＮ１０００および誘導体化合物の抗ウイルス効果を測定する非臨床試験を表６に挙げる。

マウスインフルエンザモデル
インフルエンザウイルス株Ａ／ＷＳＮ／３３およびＡ／Ｕｄｏｒｎ／７２の非外科的な気管内注入を実施する。これらのインフルエンザウイルス株は２つの異なるサブタイプ（Ｈ１Ｎ１およびＨ３Ｎ２）であり、Ｃ５７Ｂｌ／６マウスにおいて様々な病原特性および臨床像を示す。感染の全期間にわたって（通常は２週間）、２種類の投与レベルおよびプラセボ対照群を設けて、化合物のＫＩＮ１０００ファミリーのリード誘導体を強制経口投与またはＩＰ投与により連日投与する。毎日の臨床観察、死亡率、体重および体温を含むがこれらに限定されないエンドポイントについて、各グループの雌雄それぞれ５個体を評価する。雌雄それぞれ３個体を用いて、血清、心臓、肺、腎臓、肝臓および脳におけるウイルス力価を測定する。感染期間中の様々な時点での化合物治療個体および対照個体におけるサイトカイン発現をアッセイする。

マウスＲＳＶモデル
呼吸器多核体ウイルス Ａ２ ｌｏｎｇ株の非外科的な気管内注入を実施する。細胞変性効果を引き起こさない量のＲＳＶ Ａ２ウイルスでＢＡＬＢ−ｃマウスを感染させた後、２種類の投与レベルまたはプラセボ対照を設け、最大２１日間、化合物の経口またはＩＰ投与を連日実施する。罹患率および死亡率、血清中および血液中でのウイルス力価、サイトカイン分泌、免疫細胞集団の増加ならびに自然免疫遺伝子発現の検査を含め上記の通りにマウスをモニターする。
［実施例１３］
ｉｎ ｖｉｖｏでのＫＩＮ１０００および誘導体化合物のアジュバント活性

ＫＩＮ１０００および関連化合物のアジュバント活性の幅を特徴付けるため、ワクチン接種およびワクチン接種と保護のｉｎ ｖｉｖｏ動物モデルを用いる。この試験には、特に限定されないがラットおよびマウスを含めた動物を単独のまたは抗原と組み合わせた化合物で刺激した後、アジュバント効果を評価することが含まれる。

修飾され増強された体液性および細胞性免疫応答をアッセイすることによりアジュバント効果を測定する。ワクチン接種および／または追加免疫後の異なる時間において、血清用に血液を採取し抗体のクラス（ＩｇＭ、ＩｇＧ、ＩｇＡまたはＩｇＥ）および／またはＩｇＧ抗体のＩｇＧ１、ＩｇＧ２ａ、ＩｇＧ２ｂ、ＩｇＧ２ｃ、ＩｇＧ３を含むアイソタイプの相対濃度を決定することにより、体液性応答を経時的に評価する。さらに、生成した抗体の親和性およびアビディティ―も決定した。ワクチン調製物が化合物と抗原との組合せを含む場合、生成した抗体の中和活性も決定した。

末梢血単核球、リンパ節、脾細胞またはその他の二次リンパ器官を抗原でｅｘ ｖｉｖｏ刺激した後、複数の時点で上清中のサイトカインまたはケモカイン産生を測定することを含む、当該分野で確立されている方法により、化合物によって誘導された細胞性免疫応答を測定する。測定するサイトカインは、特に限定されないがＩＦＮガンマおよびＴＮＦアルファを含むＴｈ１型サイトカイン、特に限定されないがＩＬ−４、ＩＬ−１０、ＩＬ−５およびＩＬ−１３を含むＴｈ２型サイトカインならびに特に限定されないがＩＬ−１７、ＩＬ−２１およびＩＬ−２３を含むＴｈ１７サイトカインを含む。また化合物によって誘発された、特に限定されないがＲＡＮＴＥＳ、ＩＰ−１０、ＭＩＰ１ａ、ＭＩＰ１ｂおよびＩＬ−８を含むケモカインを測定する。また、蛍光標識した特異的抗体による細胞内サイトカイン染色とフローサイトメトリーにより、またはＥＬＩＳＰＯＴにより、サイトカインのＴ細胞抗原特異的産生を測定することができる。ＣＤ４＋およびＣＤ８＋の両Ｔ細胞集団を調べる。

また、活性化の表面マーカーのフローサイトメトリーによる免疫表現型検査によって、細胞レベルでのアジュバント活性の測定を実施する。また、パーフォリンの細胞内サイトカイン染色、細胞表面マーカー発現またはチミジン取込みを含む増殖アッセイによりＣＤ８ Ｔ細胞抗原特異的応答を評価する。

ここに挙げた実験は、様々な組合せのプライムブーストスキームで化合物のアジュバント活性の有効性を検証するべくデザインされたものであり、ＫＩＮ１０００または関連化合物の自然免疫抗ウイルスプログラムに対する効果が、ワクチン調製物中の抗原に対して増大した適応免疫応答をどのように形成するかを評価するものである。

選択された各抗原について上記の各化合物の詳細な免疫応答分析を実施し、その特定の抗原（１つまたは複数）と化合物製剤との免疫上の相互関係を決定する。ここで得られた結果は、選択された最適化した化合物と選択された感染病原体に由来する所望の抗原（１つまたは複数）製剤との組み合わせによりワクチン接種および追加免疫を実施した動物を、動物の疾患または死亡をもたらすことがわかっている量の感染病原体でのちに攻撃する防御試験の指針となる。ワクチン接種によりもたらされる防御は通常、臨床症状および生存をモニターすることによって測定する。

概念実証実験を実施した。第０日に、抗原（オボアルブミン、０．２ｍｇ／Ｋｇ）およびＫＩＮ１０００（１ｍｇ／Ｋｇ）またはＫＩＮ１１４８（１ｍｇ／ｍＬ）をリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）に懸濁させた液で１０〜１２週齢の雌ＬＥＷＩＳラットを刺激した。対照個体には、オボアルブミン（ＯＶＡ、ＩｎｖｉｖｏＧｅｎ Ｉｎｃ．）ＰＢＳ液またはＯＶＡとポリＩ：Ｃ（０．１ｍｇ／Ｋｇ、ＩｎｖｉｖｏＧｅｎ Ｉｎｃ．）を投与した。２週間後および８週週間後、ラットに追加免疫を実施した。初回刺激では足蹠および尾根部の皮下に、追加免疫では足蹠および側腹部にワクチンを投与した（０．０２５ｍＬ／部位）。初回刺激の０週間後、１週間後、２週間後、４週間後、６週間後および９週間後に尾部採血により血液試料を採取し、血清に調製した。抗ＩｇＭ、抗ＩｇＧおよび抗ＩｇＧアイソタイプ特異的抗体を用いたＥＬＩＳＡにより、ＯＶＡ特異的抗体の力価を決定した。ＯＶＡを単独でワクチン接種した対照と比較したＯＶＡ＋ＫＩＮ１０００およびＯＶＡ＋ＫＩＮ１１４８ワクチン接種個体におけるＩｇＧ抗体レベルを図１０に示す。

また、抗原に対する遅延型過敏症（ＤＴＨ）を測定することにより、細胞媒介性アジュバント活性の測定を行う。同概念実証実験では、初回追加免疫の２週間後のＯＶＡによる攻撃に対する遅延型過敏反応を測定することにより、細胞応答を評価した。ラットをイソフルランで鎮静させ、左右の耳の耳介にそれぞれＰＢＳまたはＯＶＡ（１ｍ/ｇｍＬＯＶＡのＰＢＳ溶液０．０２ｍＬ）を注射した。２４時間後、耳の厚さの差を計算した。測定された右耳と左耳の厚さの差を図１１に示す。

特に明示されない限り、本明細書および請求項で使用される成分の量、分子量のような特性、反応条件などを表す数値はすべて、あらゆる場合において「約」という用語によって修飾されるものとして理解されるべきである。したがって、別途明示されない限り、本明細書および添付の特許請求の範囲に記載される数値パラメータは、本開示によって得ようとする所望の特性によって変化し得る近似値である。少なくとも、特許請求の範囲への均等論の適用を制限することを試みるわけではないが、各数値パラメータは少なくとも、報告されている有効桁数を考慮し、通常の丸め法を適用することによって解釈されるべきである。

本開示の広い範囲を記載する数値の範囲およびパラメータは近似値であるが、具体例に記載されている数値は可能な限り正確に報告されている。しかし、いかなる数値にも、各試験測定値にみられる標準偏差に必然的に起因するある程度の誤差が本来的に含まれる。

本開示の記載に関連して（特に、のちの請求項に関連して）使用される用語「ａ」、「ａｎ」、「ｔｈｅ」およびこれと同類の指示対象は、本明細書に別途明示されるか、文脈からそうでないことが明らかである場合を除き、単数および複数の両方を包含するものと解釈されるべきである。本明細書の数値の範囲を列挙する場合、それは単にその範囲内に収まる個々の数値に個別に言及するのを省略する方法として機能するよう意図したものである。本明細書に特に明示されない限り、個々の数値は、それが個別に本明細書に列挙された場合と同様に本明細書に組み込まれるものとする。本明細書に記載の方法はすべて、本明細書に別途明示されるか、文脈からそうでないことが明らかである場合を除き、任意の適切な順序で実施することができる。本明細書に記載されるあらゆる具体例または例示語（例えば、「などの」）の使用は、単に本開示の理解を容易にすることを意図したものであり、別途特許請求される本開示の範囲を限定するものではない。本明細書に記載されている言葉は、本開示の実施に不可欠であるが特許請求されていない要素を表すものとして解釈されるべきではない。

本明細書に開示される本発明の択一的な要素または実施形態の分類は、限定的なものであると解釈されるべきではない。各グループのメンバーが個別に言及され特許請求される場合もあれば、グループ内の他のメンバーまたは本明細書に記載されている他の要素と任意に組み合わさって言及され特許請求される場合もある。利便性および／または特許性を理由に、グループの１つ以上のメンバーがグループに包含されるか、グループから削除されることがある。このような何らかの包含または削除が生じた場合、本明細書は、修正され、添付の特許請求の範囲で使用されるすべてのマーカッシュ群の記載事項を満たすグループを含むものと見なされる。

本明細書には、本発明の特定の実施形態が、本発明を実施するため本発明者らが知る最良の形態を含め記載されている。当然のことながら、これまでの記載を読めば、ここに記載した実施形態に対する変形形態が当業者に明らかとなるであろう。本発明者らは、当業者が必要に応じてこのような変形形態を用いることを予想するとともに、本発明が本明細書に具体的に記載されている以外の方法で実施されることを意図する。したがって、本発明は、準拠法によって認められる、添付の特許請求の範囲に記載される内容の改変物および均等物をすべて包含する。さらに、本明細書で別途明記されるか、文脈からそうでないことが明らかである場合を除き、上記要素のその可能なあらゆる変形形態での任意の組合せが本発明に包含される。

本明細書に開示される具体的な実施例は、請求項において「〜からなる」および「〜から実質的になる」という言葉を用いてさらに限定され得る。「〜からなる」という移行語は、請求項で用いられる場合、出願されたもの、補正により追加されたものを問わず、請求項に明示されない要素、段階または成分を一切除外するものである。「〜から実質的になる」という移行語は、請求項の範囲を明示される材料または段階および基礎となる新規な特徴（１つまたは複数）に実質的には影響を及ぼさない材料または段階に限定するものである。このように特許請求される本開示の実施形態は、本明細書に本来的にまたは明確に記載され使用可能なものである。

最後に、本明細書に開示される本開示の実施形態が、本開示の原理を説明するためのものであることを理解するべきである。本開示の範囲には、用い得る他の修正形態が含まれる。したがって、例として、特に限定されないが、本明細書に記載されている教示に従って、本開示のものに代わる形態を用いることができる。したがって、本開示は、図示および記載されているものと正確に同じものに限定されない。

Claims (27)

1. 式：
   

   

   ［式中、
   破線が結合の有無を示し；
   Ｒ^１がＲ^ａ、ＯＲ^２またはＮＲ^２Ｒ^３であり；
   各Ｒ^ａが、独立してＨ、任意に置換されたヒドロカルビル、任意に置換されたアリール、任意に置換されたヘテロアリールであり；
   Ｒ^２およびＲ^３が、それぞれ独立してＲ^ａ、ＣＯＲ^ａまたはＳＯ_２Ｒ^ａであり；
   Ｙ^１、Ｙ^２、Ｙ^３およびＹ^４が、それぞれ独立してＣＲ^４またはＮであり；
   各Ｒ^４が、独立してＲ^２、ＯＲ^ａ、ＮＲ^２Ｒ^３、ＳＲ^ａ、ＳＯＲ^ａ、ＳＯ_２Ｒ^ａ、ＳＯ_２ＮＨＲ^ａ、ＮＣＯＲ^ａ、ハロゲン、トリハロメチル、ＣＮ、Ｓ＝Ｏまたはニトロであり；
   Ｒ^５がＲ^ａ、ＣＯＲ^ａ、ＳＯ_２Ｒ^ａであるか、存在せず；
   ＶがＣＲ^２、ＣＲ^２Ｒ^３、Ｃ＝Ｏ、ＣＯＣＲ^２Ｒ^３またはＣ＝ＮＲ^２であり；および
   ＷおよびＸが、それぞれ独立してＮ、ＮＲ^ａ、Ｏ、Ｓ、ＣＲ^２Ｒ^４またはＣＲ^４である］
   によって表される、化合物。
2. 式：
   

   

   ［式中、
   Ｒ^１０、Ｒ^１３、Ｒ^１４、Ｒ^１６、Ｒ^１７、Ｒ^１８、Ｒ^１９、Ｒ^２０、Ｒ^２１およびＲ^２２が独立してＲ^ｂ、ＯＲ^ｂ、ＳＲ^ｂ、ＣＯＲ^ｂ、ＣＯ_２Ｒ^ｂ、ＯＣＯＲ^ｂ、ＮＲ^ｂＲ^ｃ、ＣＯＮＲ^ｂＲ^ｃ、ＮＲ^ｂＣＯＲ^ｃ、ＳＯ_２ＮＲ^ｂＲ^ｃ、ＣＦ_３、ＣＮ、ＮＯ_２、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＩまたはＣ_２〜５ヘテロシクリルであり；各Ｒ^ｂが、独立してＨまたはＣ_１〜３ヒドロカルビルであり、各Ｒ^ｃが、独立してＨまたはＣ_１〜３アルキルである］
   によってさらに表される、請求項１に記載の化合物。
3. 請求項１または２に記載の化合物を含む、医薬組成物。
4. ＷがＳであり、ＸがＮである、請求項１に記載の化合物。
5. Ｙ^１およびＹ^２がともにＣＲ^４であり、Ｒ^４によって任意に置換された別の複素環を一緒に形成し；
   Ｙ^３がＣＲ^４であり；および
   Ｙ^４がＣＲ^４である、
   請求項１または４に記載の化合物。
6. Ｒ^１が、任意に置換されたナフチルである、請求項１、４または５のいずれに記載の化合物。
7. 式：
   

   

   によってさらに表される、請求項１に記載の化合物。
8. Ｒ^１が、任意に置換されたフェニルである、請求項１または４に記載の化合物。
9. Ｒ^５がＨまたはＣ_１〜３アルキルである、請求項１、２、３、４、５、６、７または８に記載の化合物。
10. ＷがＳである、請求項１、８または９に記載の化合物。
11. ＸがＮである、請求項１、８、９または１０に記載の化合物。
12. Ｙ^３がＣＲ^４であり、Ｒ^４がＲ^ｂ、ＯＲ^ｂ、ＣＯＲ^ｂ、ＣＯ_２Ｒ^ｂ、ＯＣＯＲ^ｂ、ＮＲ^ｂＲ^ｃ、ＣＦ_３、ＣＮ、ＮＯ_２、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩであり、Ｒ^ｂおよびＲ^ｃが、独立してＨまたはＣ_１〜３アルキルである、請求項１、４、５、６、９、１０または１１に記載の化合物。
13. Ｙ^４がＣＲ^４であり、Ｒ^４がＲ^ｂ、ＯＲ^ｂ、ＣＯＲ^ｂ、ＣＯ_２Ｒ^ｂ、ＯＣＯＲ^ｂ、ＮＲ^ｂＲ^ｃ、ＣＦ_３、ＣＮ、ＮＯ_２、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩであり、Ｒ^ｂおよびＲ^ｃが、独立してＨまたはＣ_１〜３アルキルである、請求項１、４、６、９、１０、１１または１２に記載の化合物。
14. 式：
    

    

    ［式中、
    Ｒ^１０、Ｒ^１１、Ｒ^１２、Ｒ^１３、Ｒ^１４、Ｒ^１６、Ｒ^１７およびＲ^１８が、独立してＲ^ｂ、ＯＲ^ｂ、ＣＯＲ^ｂ、ＣＯ_２Ｒ^ｂ、ＯＣＯＲ^ｂ、ＮＲ^ｂＲ^ｃ、ＣＦ_３、ＣＮ、ＮＯ_２、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩであり、Ｒ^ｂおよびＲ^ｃが、独立してＨまたはＣ_１〜３アルキルであり；
    Ｒ^５がＨまたはＣ_１〜３アルキルである］
    によってさらに表される、請求項１に記載の化合物。
15. Ｒ^１８がＣＨ_３である、請求項１４に記載の化合物。
16. Ｒ^１３がＢｒである、請求項１４または１５に記載の化合物。
17. 式：
    

    

    によってさらに表される、請求項１に記載の化合物。
18. 式：
    

    

    

    

    を有する、化合物。
19. 請求項４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７または１８に記載の化合物を含む、医薬組成物。
20. 請求項３または１９に記載の医薬組成物を脊椎動物に投与することを含む、脊椎動物のウイルス感染症を治療または予防する方法。
21. 前記ウイルス感染症が、次に挙げる科：アレナウイルス科、アストロウイルス科、ビルナウイルス科、ブロモウイルス科、ブニヤウイルス科、カリシウイルス科、クロステロウイルス科、コモウイルス科、シストウイルス科、フラビウイルス科、フレキシウイルス科、ヘペウイルス、レビウイルス科、ルテオウイルス科、モノネガウイルス目、モザイクウイルス、ニドウイルス目、ノダウイルス科、オルトミクソウイルス科、ピコビルナウイルス、ピコルナウイルス科、ポティウイルス科、レオウイルス科、レトロウイルス科、セキウイルス科、テヌイウイルス、トガウイルス科、トンブスウイルス科、トティウイルス科、ティモウイルス科、ヘパドナウイルス科、ヘルペスウイルス科、パラミクソウイルス科またはパピローマウイルス科のうちの１つ以上のウイルスによって引き起こされるものである、請求項２０に記載の方法。
22. 前記ウイルス感染症がインフルエンザウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、ウエストナイルウイルス、ＳＡＲＳ−コロナウイルス、ポリオウイルス、麻疹ウイルス、デングウイルス、黄熱病ウイルス、ダニ媒介脳炎ウイルス、日本脳炎ウイルス、セントルイス脳炎ウイルス、マレーバレーウイルス、ポワッサンウイルス、ロシオウイルス、跳躍病ウイルス、バンジウイルス、イルヘウスウイルス、ココベラウイルス、クンジンウイルス、アルファイウイルス、ウシ下痢ウイルス、キャサヌール森林病ウイルス、呼吸器多核体ウイルスまたはヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）である、請求項２０に記載の方法。
23. 医薬組成物を予防ワクチンまたは治療ワクチンのアジュバントとして投与するための、請求項２０、２１または２２に記載の方法。
24. インフルエンザウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、ウエストナイルウイルス、ＳＡＲＳ−コロナウイルス、ポリオウイルス、麻疹ウイルス、デングウイルス、黄熱病ウイルス、ダニ媒介脳炎ウイルス、日本脳炎ウイルス、セントルイス脳炎ウイルス、マレーバレーウイルス、ポワッサンウイルス、ロシオウイルス、跳躍病ウイルス、バンジウイルス、イルヘウスウイルス、ココベラウイルス、クンジンウイルス、アルファイウイルス、ウシ下痢ウイルス、キャサヌール森林病ウイルス、呼吸器多核体ウイルスまたはヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）に対するワクチンを追加投与することによって脊椎動物にワクチン接種することを含む、請求項２３に記載の方法。
25. 真核細胞の自然免疫応答を調節する方法であって、請求項１、２、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７または１８のいずれか１項に記載の化合物を前記細胞に投与することを含む方法。
26. 前記細胞がｉｎ ｖｉｖｏである、請求項２５に記載の方法。
27. 前記細胞がｉｎ ｖｉｔｒｏである、請求項２５に記載の方法。

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