JP2014517311A5

JP2014517311A5 -

Info

Publication number: JP2014517311A5
Application number: JP2014514560A
Authority: JP
Filing date: 2012-06-05
Publication date: 2015-07-23
Anticipated expiration: 2032-06-05

Claims

流体サンプル中のヒト血小板因子４（ＰＦ４）／ヘパリン抗体の存在を検出するデバイスにおいて、固体サポートに固定したＰＦ４／ポリアニオン複合体と、非粒子状蛍光染料でラベル化した抗ヒト抗体とを側方流動フォーマットで具え、前記ラベル化した抗ヒト抗体が前記固定したＰＦ４／ポリアニオン複合体の上流側で前記固体サポートに放出可能に取り付けられていることを特徴とするデバイス。
請求項１に記載のデバイスにおいて、前記固体サポートがテストストリップであることを特徴とするデバイス。
請求項１に記載のデバイスにおいて、前記ポリアニオンが、ポリビニルスルホン酸、ポリスチレンスルホン酸、ポリアネトールスルホン酸、ポリビニルリン酸塩、ポリビニルホスホン酸塩、ポリビニル硫酸塩、及びこれらの組み合わせからなる群から選択されることを特徴とするデバイス。
請求項１に記載のデバイスにおいて、前記テストストリップが：
ａ）コンジュゲートパッドであって：
（ｉ）抗ヒト抗体を含むコンジュゲートゾーンと；
（ｉｉ）流体サンプルを受けるように構成され、前記コンジュゲートゾーンの下流側に配置されているサンプルゾーンと；
（ｉｉｉ）サンプルバッファを受けるように構成され、前記コンジュゲートゾーンと前記サンプルゾーンの近くに配置されているサンプルバッファゾーンと；
を具えるコンジュゲートパッドと；
ｂ）前記コンジュゲートパッドの下流側に配置され、当該コンジュゲートパッドと流体連通している多孔膜であって：
（ｉ）その上に固定化したＰＦ４／ポリアニオン複合体を含む検出ゾーンと；
（ｉｉ）その上に固定化した捕捉試薬を含み、前記ラベル化した抗ヒト抗体に結合するように構成された、前記検出ゾーンの下流側に配置されている制御ゾーンと；
を具える多孔膜と；
を具えることを特徴とするデバイス。
請求項４に記載のデバイスにおいて、前記コンジュゲートパッドが更に、コンジュゲートバッファを受けるように構成されたコンジュゲートバッファゾーンを具え、前記第２バッファゾーンが前記コンジュゲートバッファゾーンの上流側に配置されていることを特徴とするデバイス。
請求項４に記載のデバイスにおいて、前記テストストリップが更に、コンジュゲートバッファを受けるように構成したコンジュゲートバッファゾーンを含む湿パッドを具え、当該湿パッドが前記コンジュゲートパッドの上流側に、前記コンジュゲートパッドと流体連通して配置されていることを特徴とするデバイス。
請求項４に記載のデバイスにおいて、前記テストストリップが更に、前記多孔膜と流体連通する芯材パッドを具えており、前記膜が前記コンジュゲートパッドと前記芯材パッドの中間に配置されていることを特徴とするデバイス。
請求項４に記載のデバイスにおいて、前記テストストリップが更に、前記多孔膜と流体連通する芯材パッドを具えており、前記膜が前記コンジュゲートパッドと前記芯材パッドの中間に配置されていることを特徴とするデバイス。
請求項１乃至８のいずれか一項に記載のデバイスにおいて、前記非粒子状蛍光ラベルがアミン反応性染料であることを特徴とするデバイス。
請求項９に記載のデバイスにおいて、前記アミン染料が、ＤｙＬｉｇｈｔ（商標）、ＡｌｅｘａＦｌｕｏｒ（登録商標）、ＨｉＬｙｔｅＦｌｕｏｒ（商標）、ＣｙＤｙｅ（商標）、Ｃｙ（登録商標）、ＣＦ（商標）、ＩＲＤｙｅ（登録商標）、及びこれらの組み合わせからなる群から選択されることを特徴とするデバイス。
流体サンプル中のヒト血小板因子４（ＰＦ４）／ヘパリン抗体の存在を検出する方法において：
ａ）請求項１乃至９のいずれか１項に係る側方流動アッセイデバイスを取得するステップと；
ｂ）ＰＦ４／ヘパリン抗体を含む又は含むと考えられるサンプルをサンプルゾーンに接触させるステップと；
ｃ）ＰＦ４／ヘパリン抗体がサンプル中に存在する場合はこれを検出ゾーンに運んで、固定化したＰＦ４／ポリアニオン複合体に結合させ、これによって、前記ＰＦ４／ヘパリン抗体を前記検出ゾーンに固定化するステップと；
ｄ）ステップｃ）に続いて、非粒子状蛍光染料でラベル化した抗ヒト抗体を運んで、固定化したＰＦ４／ヘパリン抗体に結合させ、これによって、前記ラベル化した抗ヒト抗体を検出ゾーン中に固定化するステップと；
ｅ）結合していないラベル化した抗ヒト抗体を制御ゾーンに運んで、固定化した捕捉試薬と結合させ、これによって、ラベル化した抗ヒト抗体を制御ゾーン中に固定化するステップと；
ｆ）検出ゾーンと制御ゾーン中の非粒子状蛍光ラベルからの蛍光を評価するステップであって、前記両ゾーン中の蛍光の存在が、サンプル中のＰＦ４／ヘパリン抗体の存在を表示するステップと；
を具えることを特徴とする方法。
流体サンプル中のヒト血小板因子４（ＰＦ４）／ヘパリン抗体の存在を検出する方法において、固体サポートに固定されたＰＦ４／ポリアニオン複合体、ＰＦ４／ヘパリン抗体、及び非粒状蛍光染料でラベル化した抗ヒト抗体を含むサンドイッチ複合体を側方流動フォーマットで形成するステップを具えることを特徴とする方法。
請求項１２に記載の方法において、前記ラベル化した抗ヒト抗体が、前記ＰＦ４／ヘパリン抗体が前記固定化したＰＦ４／ポリアニオン複合体に結合した後、前記ＰＦ４／ヘパリン抗体と接触することを特徴とする方法。
請求項１１乃至１３のいずれか一項に記載の方法において、前記非粒子状蛍光ラベルがアミン反応性染料であることを特徴とする方法。
請求項１４に記載のデバイスにおいて、前記アミン染料が、ＤｙＬｉｇｈｔ（商標）、ＡｌｅｘａＦｌｕｏｒ（登録商標）、ＨｉＬｙｔｅＦｌｕｏｒ（商標）、ＣｙＤｙｅ（商標）、Ｃｙ（登録商標）、ＣＦ（商標）、ＩＲＤｙｅ（登録商標）、及びこれらの組み合わせからなる群から選択されることを特徴とする方法。