JP2014515021A - 凍結乾燥された薬物ナノ懸濁液 - Google Patents

Abstract

本発明は、凍結乾燥（ｆｒｅｅｚｅ−ｄｒｉｅｄ）（凍結乾燥（ｌｙｏｐｈｉｌｉｚｅｄ）とも呼ばれる）された薬物ナノ懸濁液に関する。本発明の凍結乾燥薬物ナノ懸濁液組成物は、長期的貯蔵などの貯蔵中に粒径分布の許容可能な安定性を有する。

Description

本発明は、凍結乾燥（ｆｒｅｅｚｅ−ｄｒｉｅｄ）（凍結乾燥（ｌｙｏｐｈｉｌｉｚｅｄ）とも呼ばれる）された薬物ナノ懸濁液に関する。本発明の凍結乾燥薬物ナノ懸濁液組成物は、長期間の貯蔵など、貯蔵中の粒径分布の許容可能な安定性を有する。粒径分布の長期間の貯蔵安定性は、２週間、特に１ヶ月、さらに特には２ヶ月、またさらに特には３ヶ月または６ヶ月、または少なくとも６ヶ月から２年までの期間の安定性を含む。あらゆる製剤開発手順の不可欠な要素であることから、粒径分布の長期間の貯蔵安定性は重要な特性である。

ナノ粒子またはナノ懸濁液は、先行技術において公知であり、例えば欧州特許出願公開第Ａ−０４９９２９９号明細書に記載されている。本発明の凍結乾燥薬物ナノ懸濁液配合物のための前駆体配合物である薬物ナノ懸濁液配合物は、薬物がその中にナノ粒子状で懸濁されている配合物である。液体媒体または分散媒は好ましくは、水などの水性媒体である。薬物ナノ懸濁液前駆体配合物は通常、立体安定剤、好ましくは界面活性剤（例えば、高分子界面活性剤）またはポリマーを含む。立体安定剤は、薬物ナノ粒子表面上に吸着または付着し、引力のあるファンデルワールス力に打ち勝つ、大きく、高密度な立体障壁を提供し、したがって立体安定剤は、凝集、凝塊または粒子融合でさえ低減する。この技術によって、著しく高い用量負荷（ｄｏｓｅ ｌｏａｄｉｎｇ）のナノ懸濁液（例えば、薬物４００ｍｇ／ｍＬ）が可能となる。立体安定剤は好ましくは、薬学的に許容される賦形剤である。薬物ナノ粒子は一般に、平均粒径１μｍ未満、ｄ^９９値５μｍ未満を有する。さらに詳細には、ｄ^９５値は０．９μｍである。（ｄ９９がＸである、またはｄ９５がＸであるとは、粒子の９９重量％または９５重量％（または体積または数による％など、他の適切な測定技術による）がそのサイズＸ未満であることを意味する）。特に、凍結乾燥されるべきナノ懸濁液、または凍結乾燥薬物ナノ懸濁液の再構成から得られるナノ懸濁液のナノ粒子の平均粒径は、約１０００ｎｍ未満、または約５００ｎｍ未満、または約４００ｎｍ未満、または約３００ｎｍ未満、または約２００ｎｍ未満であり得る。好ましくは、平均粒径は、約２００ｎｍまたは約４００ｎｍまたは約８００ｎｍ、さらに好ましくは約２００ｎｍである。

薬物ナノ懸濁液を生成するための可能性のあるアプローチは、湿式ビーズミリングによる攪拌媒体における原薬の粉砕である。

薬物ナノ懸濁液は、溶解性、溶出速度、バイオアベイラビリティを高めることができる。薬物ナノ懸濁液は、徐放性または遅延放出（デポ）配合物としても使用することができる。かかる配合物は、例えば非経口的に、例えば筋肉内または皮下に投与される場合、長期的治療または長期的予防に使用することができる。これは、配合物が、少なくとも１週間、または少なくとも２週間、または少なくとも１ヶ月または少なくとも２ヶ月または少なくとも３ヶ月などの特定の期間、有効な血漿中レベル−最小治療濃度を超える血漿中レベルを提供することができることを意味する。この配合物は、副作用を及ぼす閾値未満である血漿中レベルを提供することもできる。その閾値は、実際の薬物に応じて、かなりの期間中の、例えば１５分を超える期間中の平均血漿中レベルであり、それを超えると、患者は好ましくない副作用を経験し、あるいは逆に、その血漿中レベル値より下だと、当該の配合物の全身耐性（ｓｙｓｔｅｍｉｃ ｔｏｌｅｒａｎｃｅ）はまだ許容可能である。この閾値は、例えば、活性成分の予想外のバースト放出のために、実際の薬物に応じて短時間、例えば１５分未満の間に一時的な高い血漿中レベルに対して保たれない。前述の特徴−最小治療濃度を超える血漿中レベルであるが副作用を及ぼす閾値未満の血漿中レベル
のどちらも、現代のデポ配合物が、対象とする患者に対して許容可能であるために満たすべき基本要求であると考えられる。薬物投与回数および各投与後の有害な副作用の出現を制限することによって、治療における患者の服薬遵守は確実に改善するだろう。しかしながら、これらの基本要求を超えて、患者の服薬遵守をさらに改善するであろう、多くの更なる切実な要求を特定することができる。最も顕著な２つの要求は良好な局所耐性（ｌｏｃａｌ ｔｏｌｅｒａｎｃｅ）および投与の容易さである。

注射剤に関しては、良好な局所耐性とは、注射部位の最小限の刺激および炎症を意味し；投与の容易さとは、特定の薬物配合物を１回分投与するのに必要な針のサイズおよび時間の長さを意味する。

液体の薬物ナノ懸濁液の著しい欠点は、その長期間安定性が限られていることである。沈殿およびオストワルト熟成作用がしばしば、不安定性の問題として認識されている。

したがって、凍結乾燥薬物ナノ懸濁液は、魅力的な代替物であり得る。このような方法で、ナノ粒子範囲の薬物を含む配合物の貯蔵寿命を延ばすことができる。好ましくは、凍結乾燥薬物ナノ懸濁液自体が、平均粒径または粒径分布と関連して、許容可能な長期間安定性を有する。この凍結乾燥薬物ナノ懸濁液を貯蔵した後および再構成した場合、その平均粒径、粒径分布、ｄ^５０、ｄ^９０、ｄ^９５またはｄ^９９は維持されるか、または依然として許容可能である。これらの凍結乾燥薬物ナノ懸濁液は、次に投与することができる液体ナノ懸濁液に即座に再構成することができる。前記再構成ナノ懸濁液の投与としては、経口投与または例えば静脈内、筋肉内または皮下投与などの非経口投与が挙げられる。投与は好ましくは、例えば筋肉内または皮下投与などの非経口投与である。再構成懸濁液が均一に分散された状態であること、または振盪すると容易に分散可能であり、均一な投与が可能であることに注意を払わなければならない。

凍結乾燥直後に５０ｍｇ／ｍＬ Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ ＥＬで安定化された薬物ストックナノ懸濁液の粒径分布と、かつ周囲条件での貯蔵３ヶ月での粒径分布（破線）の比較。５μｍ境界線は、非経口的薬物ナノ懸濁液の粒径上限を表す。 凍結乾燥直後に５０ｍｇ／ｍＬポロキサマー３３８で安定化されたリルピビリンのストックナノ懸濁液の粒径分布と、周囲条件での貯蔵３ヶ月での粒径分布（破線）の比較。 積極的凍結乾燥プロセス条件（実線、最初の乾燥時の貯蔵温度が凍結後直ぐに４０℃に上昇した）後および保守的な凍結乾燥プロセス条件（破線、貯蔵温度０℃）後に５０ｍｇ／ｍＬ Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ ＥＬで安定化された薬物ストックナノ懸濁液の粒径分布の比較。どちらの実施中にも、生成物温度はＣＦＴ（一般に示差走査熱量測定（ＤＳＣ）によって評価される、最大凍結濃縮溶質のガラス転移温度Ｔｇ’と示される臨界配合物温度）（Ｐｉｋａｌ ＭＪ．２００２．Ｆｒｅｅｚｅ ｄｒｙｉｎｇ，ｉｎ：Ｊ．Ｓｗａｒｂｒｉｃｋ（Ｅｄ．），Ｅｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ｖｏｌ．２，Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ（２００２）１２９９−１３２６）をかなり超える温度で測定されたことに留意されたい。 Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ ＥＬ（Ｃｒ ＥＬ）またはポロキサマー３３８（Ｐ３３８）のいずれかで安定化された、周囲条件にて３ヶ月貯蔵した後の薬物ストック−ナノ懸濁液の、高いまたは低い残留含水率の関数としての再分散率（ＲＤＩ）の比較。 凍結乾燥直後および周囲条件にて貯蔵して３ヶ月の時点での、分散保護物質（ｌｙｏｐｒｏｔｅｃｔａｎｔ）として５０ｍｇ／ｍＬ Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ ＥＬおよび５０ｍｇ／ｍＬトレハロースで安定化された薬物ストック−ナノ懸濁液の粒径分布の、高いまたは低い残留水分含有量の関数としての比較。初期のナノ粒子安定性は含水率に依存しないが（実線対点線）、貯蔵後の残留含水率１％未満（破線）は、１％を超える含水率（一点短鎖線）と比較して優れた粒子安定性を示したことに留意されたい。 凍結乾燥後の本来の粒径分布（実線）が、２５℃（破線）ならびに４０℃（点線）で３ヶ月貯蔵した後に完全に保存されたことを示す、分散保護物質として５０ｍｇ／ｍＬポロキサマー３３８および５０ｍｇ／ｍＬ ＰＶＰ Ｋ１５で安定化された高濃縮薬物ナノ懸濁液（２００ｍｇ／ｍＬリルピビリン）の粒径分布の比較。

したがって、本発明は、薬物を含む凍結乾燥ナノ懸濁液、または薬物を含み、かつ固形組成物へと凍結乾燥されている水性ナノ懸濁液を意味する、凍結乾燥薬物ナノ懸濁液に関する。

本発明の凍結乾燥ナノ懸濁液で使用することができる適切な薬物または医薬有効成分としては、限定されないが：
鎮痛薬および抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ、フェンタニル、インドメタシン、イブプロフェン、ケトプロフェン、ナブメトン、パラセタモール、ピロキシカム、トラマドール、セレコキシブおよびロフェコキシブなどのＣＯＸ−２阻害薬）；
抗不整脈薬（プロカインアミド、キニジン、ベラパミル）；
抗菌薬および抗原虫薬（アモキシシリン、アンピシリン、ベンザチンペニシリン、ベンジルペニシリン、セファクロル、セファドロキシル、セフプロジル、セフロキシムアキセチル、セファレキシン、クロラムフェニコール、クロロキン、シプロフロキサシン、クラリスロマイシン、クラブラン酸、クリンダマイシン、ドキシサイクリン、エリスロマイシン、フルクロキサシリンナトリウム、ハロファントリン、イソニアジド、硫酸カナマイシン、リンコマイシン、メフロキン、ミノサイクリン、ナフシリンナトリウム、ナリジクス酸、ネオマイシン、ノルフロキサシン、オフロキサシン、オキサシリン、フェノキシメチルペニシリンカリウム、ピリメタミン−スルファドキシム、ストレプトマイシン）；
抗凝固薬（ワルファリン）；
抗うつ薬（アミトリプチリン、アモキサピン、ブトリプチリン、クロミプラミン、デシプラミン、ドスレピン、ドキセピン、フルオキセチン、レボキセチン、アミネプチン、セレジリン、ジェピロン、イミプラミン、炭酸リチウム、ミアンセリン、ミルナシプラン、ノルトリプチリン、パロキセチン、セルトラリン；３−［２−［３，４−ジヒドロベンゾフロ［３，２−ｃ］ピリジン−２（１Ｈ）−イル］エチル］−２−メチル−４Ｈ−ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−４−オン）；
抗糖尿病薬（グリベンクラミド、メトホルミン）；
抗てんかん薬（カルバマゼピン、クロナゼパム、エトスクシミド、ガバペンチン、ラモトリジン、レベチラセタム、フェノバルビタール、フェニトイン、プリミドン、チアギャビン、トピラメート、バルプロミド、ビガバトリン）；
抗真菌剤（アンホテリシン、クロトリマゾール、エコナゾール、フルコナゾール、フルシトシン、グリセオフルビン、イトラコナゾール、ケトコナゾール、硝酸ミコナゾール、ナイスタチン、テルビナフィン、ボリコナゾール）；
抗ヒスタミン薬（アステミゾール、シンナリジン、シプロヘプタジン、デカルボエトキシロラタジン、フェキソフェナジン、フルナリジン、レボカバスチン、ロラタジン、ノルアステミゾール、オキサトミド、プロメタジン、テルフェナジン）；
抗高血圧薬（カプトプリル、エナラプリル、ケンタセリン、リシノプリル、ミノキシジル、プラゾシン、ラミプリル、レセルピン、テラゾシン）；
抗ムスカリン様作用薬（硫酸アトロピン、ヒオスシン）；
抗腫瘍剤および代謝拮抗剤（シスプラチン、カルボプラチンなどの白金化合物；パクリタキセル、ドセタキセルなどのタキサン；カンプトテシン、イリノテカン、トポテカンなどのテカン；ビンブラスチン、ビンデシン、ビンクリスチン、ビノレルビンなどのビンカ
アルカロイド；ヌクレオシド誘導体および葉酸アンタゴニスト、例えば５−フルオロウラシル、カペシタビン、ゲムシタビン、メルカプトプリン、チオグアニン、クラドリビン、メトトレキセート；窒素マスタードなどのアルキル化剤、例えばシクロホスファミド、クロラムブシル、クロルメチン、イホスファミド、メルファラン、またはニトロソウレア、例えばカルムスチン、ロムスチン、または他のアルキル化剤、例えばブスルファン、ダカルバジン、プロカルバジン、チオテパ；ダウノルビシン、ドキソルビシン、イダルビシン、エピルビシン、ブレオマイシン、ダクチノマイシン、マイトマイシンなどの抗生物質；トラスツズマブなどのＨＥＲ２抗体；エトポシド、テニポシドなどのポドフィロトキシン誘導体；ファルネシルトランスフェラーゼ阻害剤；ミトキサントロンなどのアントラキノン誘導体；アビラテロンまたは酢酸アビラテロンなどのそのエステル）；
抗片頭痛薬（アルニジタン、ナラトリプタン、スマトリプタン）；
抗パーキンソン薬（ブロモクリプチンメシレート、レボドパ、セレジリン）；
抗精神病薬、催眠薬および鎮静剤（アルプラゾラム、ブスピロン、ロルジアゼポキシド、クロルプロマジン、クロザピン、ジアゼパム、フルペチキソール、フルフェナジン、フルラゼパム、９−ヒドロキシリスペリドン、ロラゼパム、マザペルチン、オランザピン、オキサゼパム、ピモジド、ピパンペロン、ピラセタム、プロマジン、リスペリドン、セルフォテル（ｓｅｌｆｏｔｅｌ）、セロクエル、セルチンドール、スルピリド、テマゼパム、チオチキセン、トリアゾラム、トリフルペリドール、ジブラシドン、ゾルピデム）；
抗脳卒中薬（ルベルゾール、ルベルゾールオキシド、リルゾール、アプチガネル、エリプロジル、レマセミド）；
鎮咳薬（デキストロメトルファン、レボドロプロピジン）；
抗ウイルス剤（アシクロビル、ガンシクロビル、ロビリド、チビラピン、ジドブジン、ラミブジン、ジドブジン＋ラミブジン、ジダノシン、ザルシタビン、スタブジン、アバカビル、ロピナビル、アンプレナビル、ネビラピン、エファビレンツ、デラビルジン、インジナビル、ネルフィナビル、リトナビル、サキナビル、アデフォビル、ヒドロキシウレア、エトラビリン、ダピビリン、リルピビリン、ダルナビル、テノフォビル（ｔｅｎｏｆｏｖｉｒ）またはテノフォビルジソプロキシルフマレート、エムトリシタビン（ｅｍｔｒｉｃｉｔａｂｉｎｅ））；
β−アドレナリン受容体遮断薬（アテノロール、カルベジロール、メトプロロール、ネビボロール、プロパノロール）；
強心薬（アムリノン、ジギトキシン、ジゴキシン、ミルリノン）；
コルチコステロイド（ジプロピオン酸ベクロメタゾン、ベタメタゾン、ブデソニド、デキサメタゾン、ヒドロコルチゾン、メチルプレドニゾロン、プレドニゾロン、プレドニゾン、トリアムシノロン）；
消毒剤（クロルヘキシジン）；
利尿剤（アセタゾラミド、フルセミド、ヒドロクロロチアジド、イソソルビド）；
精油（アネトール、アニス油、カラウェ、カルダモン、カシア油、シネオール、シナモン油、チョウジ油、コエンドロ油、脱メントール化ミント油、ジラ油、ユーカリ油、オイゲノール、ショウガ、レモン油、からし油、ネロリ油、ナツメグ油、オレンジ油、ペパーミント、セージ、スペアミント、テルピネオール、タイム）；
胃腸薬（シメチジン、シサプリド、クレボプリド、ジフェノキシラート、ドンペリドン、ファモチジン、ランソプラゾール、ロペラミド、ロペラミドオキシド、メサラジン、メトクロプラミド、モサプリド、ニザチジン、ノルシスアプリド（ｎｏｒｃｉｓａｐｒｉｄｅ）、オルサラジン、オメプラゾール、パントプラゾール、ペルプラゾール、プルカロプリド、ラベプラゾール、ラニチジン、リドグレル、スルファサラジン）；
止血薬（アミノカプロン酸）；
脂質調節剤（アトルバスタチン、ロバスタチン、プラバスタチン、プロブコール、シムバスタチン）；
局所麻酔薬（ベンゾカイン、リグノカイン）；
オピオイド鎮痛薬（ブプレノルフィン、コデイン、デキストロモルアミド、ジヒドロコ
デイン、ヒドロコドン、オキシコドン、モルヒネ）；
副交感神経作用薬および抗痴呆薬（ＡＩＴ−０８２、エプタスチグミン、ガランタミン、メトリフォネート、ミラメリン、ネオスチグミン、フィゾスチグミン、タクリン、ドネペジル、リバスチグミン、サブコメリン、タルサクリジン、キサノメリン、メマンチン、ラザベミド）；
性ホルモン（エストロゲン：結合型エストロゲン、エチニルエストラジオール、メストラノール、エストラジオール、エストリオール、エストロン；黄体ホルモン；酢酸クロルマジノン、酢酸シプロテロン、１７−デアセチルノルゲスティメート、デソゲストレル、ジエノゲスト、ジドロゲステロン、エチノジオールジアセテート、ゲストデン、３−ケトデソゲストレル、レボノルゲストレル、リネストレノール、酢酸メドロキシプロゲステロン、メゲストロール、ノルエチンドロン、酢酸ノルエチンドロン、ノルエチステロン、酢酸ノルエチステロン、ノルエチノドレル、ノルゲスティメート、ノルゲストレル、ノルゲストリエノン、プロゲステロン、酢酸キンゲスタノール）；
刺激薬（シルデナフィル）；
血管拡張薬（アムロジピン、ブフロメジル、亜硝酸アミル、ジルチアゼム、ジピリダモール、三硝酸グリセリル、硝酸イソソルビド、リドフラジン、モルシドミン、ニカルジピン、ニフェジピン、ペントキシフィリン、硝酸ペンタエリトリトール）；
その立体異性体形；
そのＮオキシド、その薬学的に許容される酸または塩基付加塩、またはその溶媒和化合物など；
が挙げられる。

薬学的に許容される酸付加塩は、便利なことに、適切な有機酸および無機酸、例えばハロゲン化水素酸、例えば塩化水素酸、臭化水素酸等；硫酸；硝酸；リン酸等；または有機酸、例えば、酢酸、プロパン酸、ヒドロキシ酢酸、２−ヒドロキシプロパン酸、２−オキソプロパン酸、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、マレイン酸、フマル酸、リンゴ酸、酒石酸、２−ヒドロキシ−１，２，３−プロパントリカルボン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、４−メチルベンゼンスルホン酸、シクロヘキサンスルファミン酸、２−ヒドロキシ安息香酸、４−アミノ−２−ヒドロキシ安息香酸等で活性成分の塩基形を処理することによって、得ることができる酸付加塩形を含む。その逆に、アルカリで処理することによって、その塩形を遊離塩基へと変換することができる。

酸性プロトンを含有する活性成分は、適切な有機塩基および無機塩基で処理することによって、その治療上活性な非毒性金属またはアミン付加塩形へと変換され得る。適切な塩基塩形は、例えばアンモニウム塩、アルカリおよびアルカリ土類金属塩、例えばリチウム、ナトリウム、カリウム、マグネシウム、カルシウム塩等、有機塩基との塩、例えば第１級、第２級および第３級脂肪族および芳香族アミン、例えばメチルアミン、エチルアミン、プロピルアミン、イソプロピルアミン、４つのブチルアミン異性体、ジメチルアミン、ジエチルアミン、ジエタノールアミン、ジプロピルアミン、ジイソプロピルアミン、ジ−ｎ−ブチルアミン、ピロリジン、ピペリジン、モルホリン、トリメチルアミン、トリエチルアミン、トリプロピルアミン、キヌクリジン、ピリジン、キノリンおよびイソキノリン、ベンザチン、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン、２−アミノ−２−（ヒドロキシメチル）−１，３−プロパンジオール、ヒドラバミン塩、および例えば、アルギニン、リジンなどのアミノ酸との塩等を含む。その逆に、塩形を酸で処理することによって遊離酸形へと変換することができる。

溶媒和化合物という用語は、活性成分またはその薬学的に許容される塩が形成することができる、含水化合物および溶媒添加形を含む。かかる形の例は、例えば含水化合物、アルコラート等である。

活性成分のＮオキシド形は、１つまたはいくつかの第３級窒素原子がいわゆるＮオキシドへと酸化された、活性成分を含む。

「立体異性体形」という用語は、活性成分が保持し得る可能性のあるすべての立体異性の形を定義する。さらに詳しくは、不斉中心はＲ−またはＳ−立体配置を有し、１つまたは複数の二重結合を含有する活性成分は、Ｅ−またはＺ−立体配置を有し得る。

一実施形態において、薬物または医薬有効成分は、例えばイトラコナゾールなどの抗真菌剤、または特に抗ＨＩＶ薬などの抗ウイルス剤、さらに特には例えばダピビリン、エトラビリンまたはリルピビリンなどの非核酸系逆転写酵素阻害剤（ＮＮＲＴＩ）である。

凍結乾燥されるべきナノ懸濁液中の薬物の濃度は、１〜５００ｍｇ／ｍｌまたは１〜４００ｍｇ／ｍｌまたは５０〜２００ｍｇ／ｍｌまたは５０〜１００ｍｇ／ｍｌまたは１０〜１００ｍｇ／ｍｌまたは１０〜７５ｍｇ／ｍｌまたは１０〜５０ｍｇ／ｍｌまたは２０〜５０ｍｇ／ｍｌの範囲であってもよく、あるいは約２００ｍｇ／ｍｌまたは約３００ｍｇ／ｍｌである。ナノ粒子濃度が高いと、凍結乾燥ケークの機械的安定性が向上する。凍結乾燥薬物ナノ懸濁液は、凍結乾燥されたナノ懸濁液中と同じ薬物濃度を有する、または異なる薬物濃度（より高いまたは低い濃度）を有する液体の薬物ナノ懸濁液に再構成され得る。

一実施形態において、本発明は、その薬物が、ＵＳＰ３３，ｇｅｎｅｒａｌ ｎｏｔｅｓ，５．Ｍｏｎｏｇｒａｐｈ ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓに従って、わずかに可溶性、ごくわずかに可溶性または実質的に不溶性である、凍結乾燥薬物ナノ懸濁液に関する。特に、わずかに可溶性、ごくわずかに可溶性または実質的に不溶性の薬物は、上記のリストに列挙される、わずかに可溶性、ごくわずかに可溶性または実質的に不溶性の薬物から選択される。好ましい薬物は、イトラコナゾール、エトラビリン、ダピビリン、リルピビリンから選択される。その薬物は好ましくは、化学的小分子医薬有効成分（例えばペプチドまたはタンパク質またはＤＮＡ／ＲＮＡ配列などの大分子と異なる成分）である。

一実施形態において、本発明は、薬物、特にわずかに可溶性、ごくわずかに可溶性または実質的に不溶性の薬物を含む、さらに立体安定剤を含む凍結乾燥ナノ懸濁液に関する。一実施形態において、立体安定剤は室温で固体である。一実施形態において、立体安定剤は室温で結晶質固体であり、特に立体安定剤は室温で結晶質固体であり、かつ３０℃以上の融点または５０℃以上の融点または７５℃以上の融点または９０℃以上の融点を有する。一実施形態において、立体安定剤は室温で非晶質固体であり、特に立体安定剤は室温で非晶質固体であり、かつ３０℃以上のガラス転移温度（Ｔｇ）または５０℃以上のＴｇまたは７５℃以上のＴｇまたは９０℃以上のＴｇを有する。

立体安定剤は、凍結乾燥薬物ナノ懸濁液の長期的貯蔵を含む貯蔵中の粒径分布の許容可能な安定性を提供する。凍結乾燥薬物ナノ懸濁液におけるナノ粒子の本来の粒径分布を保存するのに、凍結速度は重要な因子ではないことが判明した。

凍結乾燥薬物ナノ懸濁液の粒径分布安定性の決定は、再分散率（ＲＤＩ）を計算することによって、または凍結乾燥直後および貯蔵期間後（Ｔ０）、例えば１または２または３ヶ月貯蔵した後（Ｔ１、Ｔ２、Ｔ３）のｄ^５０またはｄ^９０またはｄ^９９値を決定することによって行うことができる。ＲＤＩはＤ_０／Ｄと定義され、Ｄ_０はＴ_０での凍結乾燥後の体積加重平均粒径であり、Ｄは、貯蔵期間後、例えば３ヶ月貯蔵した後の相当する値である。したがって、ＲＤＩ １００％は凍結乾燥薬物ナノ懸濁液が、再水和後にＴ_０にて本来の粒径に完全に変換されることを意味する。２５℃にて３ヵ月後のＲＤＩが少なくと
も９０％、特に少なくとも９２％または９４％または９６％または９８％である場合には、凍結乾燥薬物ナノ懸濁液は許容可能な粒径貯蔵安定性を有する。特に、４０℃にて３ヵ月後のＲＤＩが少なくとも９０％、特に少なくとも９２％または９４％または９６％または９８％である場合には、凍結乾燥薬物ナノ懸濁液は許容可能な粒径貯蔵安定性を有する。

一実施形態において、立体安定剤は、室温で固体、結晶質または非晶質であり、かつポリマーまたは界面活性剤（例えば、高分子界面活性剤）である。好ましい実施形態において、立体安定剤は、特に非経口配合物用の凍結乾燥ナノ懸濁液においてポロキサマー３３８である。好ましい実施形態において、立体安定剤は、特に経口投与用の凍結乾燥ナノ懸濁液においてヒドロキシプロピルメチルセルロースである。

凍結乾燥されるべきナノ懸濁液中の立体安定剤の濃度は、１〜２００ｍｇ／ｍｌまたは１０〜１００ｍｇ／ｍｌまたは１０〜７５ｍｇ／ｍｌまたは１０〜５０ｍｇ／ｍｌまたは２０〜５０ｍｇ／ｍｌの範囲であってもよく、あるいは約３３．３ｍｇ／ｍｌまたは約５０ｍｇ／ｍｌである。

一実施形態において、本発明は、上記の実施形態のいずれかに記載の立体安定剤を含み、かつ凍結保護物質または分散保護物質をさらに含む凍結乾燥薬物ナノ懸濁液に関する。凍結保護物質は、凍結工程中に凍結乾燥される成分を安定化する化合物である。分散保護物質は、脱水工程中に凍結乾燥される成分を安定化する化合物である。多くの賦形剤が、凍結保護物質と分散保護物質の両方の役割を果たすことができる。

一実施形態において、凍結保護物質または分散保護物質は、サッカリド、特に単糖または二糖、例えばショ糖、トレハロース、マンニトールなどである。一実施形態において、凍結保護物質または分散保護物質は、例えばポリビニルピロリドンなどのポリマーであり、例えばＰＶＰ Ｋ１２、ＰＶＰ Ｋ１５またはＰＶＰ Ｋ１７、ＰＶＰ Ｋ１５およびＰＶＰ Ｋ１７が好ましい。

一実施形態において、凍結保護物質または分散保護物質は、サッカリドとポリマーの混合物、例えばＰＶＰとトレハロースの混合物である。

凍結保護物質または分散保護物質はさらに、凍結乾燥薬物ナノ懸濁液の長期的貯蔵などの貯蔵中の粒径分布の安定性を高め得る。

凍結乾燥されるべきナノ懸濁液中の凍結保護物質または分散保護物質の濃度は、１〜２００ｍｇ／ｍｌまたは１０〜１００ｍｇ／ｍｌまたは１０〜７５ｍｇ／ｍｌまたは１０〜５０ｍｇ／ｍｌまたは２０〜５０ｍｇ／ｍｌの範囲であってもよく、あるいは約１２．５ｍｇ／ｍｌまたは約２５ｍｇ／ｍｌまたは約５０ｍｇ／ｍｌまたは約７５ｍｇ／ｍｌである。

好ましい実施形態において、分散保護物質または凍結保護物質の濃度は、凍結乾燥ケークの収縮または崩壊を防ぐために可能な限り低いが、ナノ粒子の安定性を確保するのに十分に高く、立体安定剤の濃度は、粉砕直後の初期のナノ粒子安定性を達成してナノ懸濁液を得るための最低濃度よりも一般的に高い最低濃度である。一実施形態において、上記の実施形態のいずれかに記載の凍結乾燥薬物ナノ懸濁液は、２重量％以下または１重量％以下または０．５重量％以下の残留含水率を有する。このように残留含水率が制限されることによって、凍結乾燥ナノ懸濁液の長期的貯蔵など貯蔵中の粒径分布の安定性がさらに向上する。

一実施形態において、本発明は、薬物の製造に使用される、上記の実施形態のいずれかに記載の凍結乾燥薬物ナノ懸濁液、特に液体の薬物ナノ懸濁液、さらに特には経口または非経口投与用の、特に非経口投与用の、さらに特には皮下または筋肉内投与用の水性薬物ナノ懸濁液に関する。

本発明は、液体媒体または分散媒、特に水性分散媒、例えば水または注入用の水で、上記または下記に記載の凍結乾燥薬物ナノ懸濁液を再構成することによって得られる水性ナノ懸濁液にも関する。

本発明は、液体媒体または分散媒、特に水性分散媒で、上記または下記に記載の凍結乾燥薬物ナノ懸濁液を再構成することを特徴とする、液体のナノ懸濁液、特に水性ナノ懸濁液にも関する。

本発明の凍結乾燥薬物ナノ懸濁液はさらに、薬学的に許容される成分も含み得る。後者は、注射可能な配合物または懸濁配合物または経口配合物で使用されるいずれかの成分を含む。これらの成分は、懸濁化剤、緩衝剤、ｐＨ調整剤、保存剤、等張化剤等のうちの１つまたは複数から選択され得る。一実施形態において、前記成分は、懸濁化剤、緩衝剤、ｐＨ調整剤、任意に、保存剤および等張化剤のうちの１つまたは複数から選択される。特定の成分は、これらの作用物質（ａｇｅｎｔ）の２種類以上として同時に機能することができ、例えば、保存剤および緩衝剤のように挙動し、または緩衝剤および等張化剤のように挙動することができる。薬学的に許容される成分の例を以下にさらに記述する。

一実施形態において、本発明は、その薬物が抗ＨＩＶ薬、特に非核酸系逆転写酵素阻害剤（ＮＮＲＴＩ）、例えばダピビリン、エトラビリンまたはリルピビリン、特にリルピビリンなどである、上記の実施形態のいずれかに記載の凍結乾燥ナノ懸濁液に関する。前記ナノ懸濁液は、特に抗ＨＩＶ薬の液体ナノ懸濁液における、さらに特には非経口投与、特に皮下または筋肉内投与用の、特にＨＩＶ感染の長期的予防または長期的治療のための抗ＨＩＶ薬の水性ナノ懸濁液における薬物の製造で使用され得る。

その薬物動態学的特性および最低レベルを超える血漿中レベルを維持する必要性のために、現在使用されている抗ＨＩＶ薬は、比較的高い用量を頻回投与する必要がある。投与する必要がある剤形の数および／またはボリュームは通常、「薬の負担（ｐｉｌｌ ｂｕｒｄｅｎ）」と呼ばれる。高い薬の負担は、大きな剤形を飲み込まなければならない不都合としばしば併せて、摂取の頻度、ならびに多数または多量のピルを貯蔵および輸送する必要など、多くの理由から望ましくない。薬の負担が高いと、患者が全用量を摂取しないリスクが増加し、その結果、処方された用法を守ることができなくなる。治療の有効性を低下させるたけでなく、ウイルス耐性の出現も引き起こされる。高い薬の負担と関連する問題は、患者が多数の異なる抗ＨＩＶ薬を服薬しなければならない抗ＨＩＶ療法において顕著である。

したがって、比較的小さなサイズの剤形の投与を含み、かつさらに頻回投与を必要としないという点で、薬の負担を減らすＨＩＶ抑制療法を提供することが望ましいと考えられる。１週間以上またはさらには１ヶ月以上などの長い時間間隔での剤形の投与を含む抗ＨＩＶ療法を提供することが魅力的であると考えられる。

現在、ＨＩＶを完全に根絶することができず、そのためＨＩＶ感染者が他人に感染させるという絶え間ないリスクを有する。初期感染後、ＡＩＤＳの最初の症状が出る前に長い時間がかかる。人々は、その作用を全く経験することなく感染した状態で何年も生存し、そのため他者にウイルスをさらに伝達するリスクに気がつかない。したがって、ＨＩＶ感染の予防は重要である。予防は現在、性的接触による、特に感染するリスクのある集団で
のコンドームの使用によって感染を避けること、ＨＩＶの存在に関して血液試料の注意深いモニタリング、および感染している可能性のある対象の血液との接触を避けることに集中している。

これらの対策にもかかわらず、感染しているＨＩＶ感染者と個人が接触するという差し迫ったリスクが常にある。これは特に、感染患者または感染しているリスクのある患者に医療を施す人、医師、看護士または歯科医などの場合である。したがって、ＨＩＶの感染に対する予防を提供する更なる手段が必要とされている。適用が容易である有効な予防手段が特に必要である。かかる予防手段の提供は本発明のもう１つの目的である。

したがって、本発明の一実施形態は、抗ＨＩＶ薬４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリルまたはその立体異性体形；またはその薬学的に許容される塩の、上記の実施形態のいずれかに記載の凍結乾燥ナノ懸濁液である。

本発明の一実施形態は、それがいつであれ上述の実施形態のいずれかに記載の、抗ＨＩＶ薬４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリルまたはその立体異性体形；またはその薬学的に許容される塩の凍結乾燥ナノ懸濁液であり、前記凍結乾燥ノ懸濁液はさらに、立体安定剤、特にポロキサマー３３８を含み、さらに任意に凍結保護物質、特にポリビニルピロリドン、さらに特にはＰＶＰ Ｋ１５またはＰＶＰ Ｋ１７を含む。凍結乾燥ナノ懸濁液を得るために凍結乾燥されるべきナノ懸濁液中の抗ＨＩＶ薬、立体安定剤および凍結保護物質の濃度に関しては、上記の関連セクションを参照されたい。

前記凍結乾燥ナノ懸濁液は、水性分散媒、特に水または注射用の水で希釈することによって水性ナノ懸濁液に再構成することができる。前記再構成ナノ懸濁液はデポ配合物として、特に注射可能なデポ配合物として使用することができ、ＨＩＶ感染の治療ならびにＨＩＶの伝染に対する予防における用途が見出され得る。

これらの再構成ナノ懸濁液は、ＨＩＶの増殖（複製）を抑制するのに十分な血漿中レベルとなる１週間以上の時間間隔で間欠的に投与されることができる。これによって投与回数が減り、そのため患者の薬の負担および服薬遵守に関して有利である。したがって４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリルまたはその立体異性体形；またはその薬学的に許容される塩の、本発明のナノ粒子配合物は、ＨＩＶ感染の長期的治療において有用であり得る。

４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリルまたはその立体異性体形；またはその薬学的に許容される塩の再構成ナノ懸濁液を１週間以上の時間間隔で間欠投与することによってさらに、ＨＩＶの伝染に対する予防を提供するのに十分であり得る血漿中レベルが得られる。この場合にも、投与回数の低減が必要であり、これもまた感染しているリスクのある個人の薬の負担および服薬遵守に関して有利である。したがって、４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリルまたはその立体異性体形；またはその薬学的に許容される塩の本発明のナノ粒子配合物は、ＨＩＶ感染の長期的予防において有用であり得る。

一実施形態において、本発明は、薬学的に許容される水性担体中の４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリルまたはその立体異性体形；またはその薬学的に許容される塩の再
構成ナノ懸濁液状での、治療有効量の４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリルまたはその立体異性体形；またはその薬学的に許容される塩を含む、筋肉内または皮下注射による投与のための医薬組成物であって；そのナノ懸濁液が、
（ａ）４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリルまたはその立体異性体形；またはその薬学的に許容される塩；
（ｂ）室温で固体である立体安定剤；
（ｃ）任意に凍結保護物質または分散保護物質；
を含む凍結乾燥ナノ懸濁液から再構成される、医薬組成物に関する。

一実施形態において、上記の再構成ナノ懸濁液中の立体安定剤は、室温で結晶質固体であり、特に、立体安定剤は室温で結晶質固体であり、かつ３０℃以上の融点または５０℃以上の融点または７５℃以上の融点または９０℃以上の融点を有する。一実施形態において、上記の再構成ナノ懸濁液中の立体安定剤は、室温で非晶質固体であり、特に、立体安定剤は室温で結晶質固体であり、かつ３０℃以上のガラス転移温度（Ｔｇ）または５０℃以上のＴｇまたは７５℃以上のＴｇまたは９０℃以上のＴｇを有する。

一実施形態において、上記の再構成ナノ懸濁液中の立体安定剤はポロキサマー３３８である。

一実施形態において、上記の再構成ナノ懸濁液はさらに、例えばポリビニルピロリドン、例えばＰＶＰ Ｋ１２、ＰＶＰ Ｋ１５またはＰＶＰ Ｋ１７、またはＰＶＰと、例えばトレハロースなどのサッカリドとの混合物など、凍結保護物質または分散保護物質を含む。

本発明はさらに、ＨＩＶに感染している対象を治療する方法に関し、前記方法は、上記または下記に指定される医薬組成物を特に筋肉内または皮下注射によって投与することを含む。あるいは、その代わりとして、本発明は、ＨＩＶ感染を治療するための薬物を製造するための、上記または下記に指定される医薬組成物の使用に関する。あるいは、その代わりとして、本発明は、ＨＩＶ感染の治療で使用される、上記または下記に指定される医薬組成物に関する。

他の態様において、ＨＩＶ感染を長期的に治療する方法が提供され、前記方法は、筋肉内または皮下注射によって、有効量の上記または下記に指定される医薬組成物をＨＩＶ感染対象に投与することを含み；その組成物は、１週〜１年、または１週〜２年の範囲にある時間間隔にて間欠的に投与される、または投与されるべきである。あるいは、その代わりとして、本発明は、ＨＩＶ感染の長期的治療用の薬物を製造するための、かつ筋肉内または皮下注射によって投与するための、上記または下記に指定される医薬組成物の使用に関し、その薬物は、１週〜１年、または１週〜２年の範囲にある時間間隔にて間欠的に投与される、または投与されるべきである。あるいは、その代わりとして、本発明は、ＨＩＶ感染の長期的治療に使用される、上記または下記に指定される医薬組成物に関し、その組成物は筋肉内または皮下注射によって投与するための組成物であり、かつその組成物は、１週〜１年、または１週〜２年の範囲にある時間間隔にて間欠的に投与される、または投与されるべきである。

本発明はさらに、ＨＩＶに感染するリスクのある対象においてＨＩＶ感染を予防する方法に関し、前記方法は、ＨＩＶ感染の予防に有効な、有効量の上記または下記に指定される医薬組成物を前記対象に投与することを含む。あるいは、その代わりとして、本発明は、ＨＩＶに感染するリスクのある対象においてＨＩＶ感染の予防のための薬物を製造する
ための、上記または下記に指定される医薬組成物の使用に関する。あるいは、その代わりとして、本発明は、ＨＩＶに感染するリスクのある対象におけるＨＩＶ感染の予防に使用される、上記または下記に指定される医薬組成物に関する。

他の態様において、本発明は、ＨＩＶに感染するリスクのある対象におけるＨＩＶ感染を長期的に予防する方法に関し、前記方法は、ＨＩＶ感染の予防に有効な、有効量の上記または下記に指定される医薬組成物を前記対象に筋肉内または皮下注射によって投与することを含み；その組成物は、１週〜１年、または１週〜２年の範囲にある時間間隔にて間欠的に投与される、または投与されるべきである。あるいは、その代わりとして、本発明は、ＨＩＶに感染するリスクのある対象におけるＨＩＶ感染の長期的な予防のための薬物を製造するための、かつ筋肉内または皮下注射によって投与するための、上記または下記に指定される医薬組成物の使用に関し、その薬物は、１週〜１年、または１週〜２年の範囲にある時間間隔にて間欠的に投与される、または投与されるべきである。あるいは、その代わりとして、本発明は、ＨＩＶに感染するリスクのある対象におけるＨＩＶ感染の長期的な予防に使用される、上記または下記に指定される医薬組成物に関し、その組成物は、筋肉内または皮下注射によって投与される組成物であり、かつその組成物は、１週〜１年、または１週〜２年の範囲にある時間間隔にて間欠的に投与される、または投与されるべきである。

一実施形態において、本発明は、本明細書で指定されるように用いられる、使用または方法または医薬組成物に関し、その医薬組成物は、１週〜１ヶ月の範囲、１ヶ月〜３ヶ月の範囲、または３ヶ月〜６ヶ月の範囲、または６ヶ月〜１２ヶ月の範囲、または１２ヶ月〜２４ヶ月の範囲にある時間間隔にて間欠的に投与される、または投与されるべきである。

他の実施形態において、本発明は、本明細書で指定されるように用いられる、使用または方法または医薬組成物に関し、その医薬組成物は、２週間に１回、または１ヶ月に１回、または３ヶ月に１回投与される、または投与されるべきである。

４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリルを塩基形で、または酸付加塩形などの適切な薬学的に許容される付加塩形として、使用することができる。薬学的に許容される付加塩とは、治療上活性な非毒性の塩形を含むことを意味する。酸付加塩形は、無機酸としての適切な酸、例えば、ハロゲン化水素酸、例えば塩化水素酸、臭化水素酸等；硫酸；硝酸；リン酸等；または有機酸、例えば、酢酸、プロパン酸、ヒドロキシ酢酸、２−ヒドロキシプロパン酸、２−オキソプロパン酸、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、マレイン酸、フマル酸、リンゴ酸、酒石酸、２−ヒドロキシ−１，２，３−プロパントリカルボン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、４−メチルベンゼンスルホン酸、シクロヘキサンスルファミン酸、２−ヒドロキシ安息香酸、４−アミノ−２−ヒドロキシ安息香酸等の酸で塩基形を処理することによって得ることができる。本発明で使用される好ましい形は、その塩基形での４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリル活性成分である。

４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリルは、立体異性体形で、さらに詳しくはＥおよびＺ異性体形で存在する。どちらの異性体も本発明で使用することができる。本明細書において４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリルが記載される場合はいつでも、Ｅ型またはＺ型ならびに両方の型の混合物が包含されることを意味する。本発明で使用される
、４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリルの好ましい型は、Ｅ異性体、つまり（Ｅ）−４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］−アミノ］−２−ピリミジニル］−アミノ］−ベンゾニトリル、特に塩基形のＥ異性体であり、リルピビリンと呼ばれる。４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリルのＺ−異性体、つまり（Ｚ）−４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］−アミノ］−２−ピリミジニル］−アミノ］−ベンゾニトリルも使用することができる。

本明細書において４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリルのＥ型が記載される場合はいつでも、純粋なＥ異性体またはＥ型が主に存在する、Ｅ型とＺ型の異性体混合物が含まれることを意味し、つまり異性体混合物は５０％を超える、特に８０％を超えるＥ型、または９０％を超えるＥ型を含有する。Ｚ型を実質的に含まないＥ型が特に興味深い。この文脈において実質的に含まないとは、全くまたはほとんどＺ型を含まないＥ−Ｚ混合物、例えばＥ型を９０％も含有する、特に９５％またはさらには９８％または９９％含有する異性体混合物を意味する。同様に、本明細書において４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリルのＺ型が記載される場合はいつでも、純粋なＺ異性体またはＺ型が主に存在する、Ｅ型とＺ型の異性体混合物が含まれることを意味し、つまり異性体混合物は５０％を超える、特に８０％を超えるＺ型、またはさらには９０％を超えるＺ型を含有する。Ｅ型を実質的に含まないＺ型も使用することができる。この文脈において実質的に含まないとは、全くまたはほとんどＥ型を含まないＥ−Ｚ混合物、例えばＺ型を９０％も含有する、特に９５％またはさらには９８％または９９％含有する異性体混合物を意味する。一実施形態において、４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリル活性成分は、Ｅ型で、特に４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリル塩基のＥ型で使用される。

４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリルの立体異性体形の塩、特に４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリルのＺまたはＥ異性体形の上記の塩、例えばＥ−４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリルの塩酸塩なども、本発明での使用に関して包含されることを意味する。

本明細書で以下に使用される場合はいつでも、４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリルは、別段の指定がない限り、その立体異性体形；またはその薬学的に許容される塩も含む。４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリルの物理化学的性質によって、ＨＩＶ感染の長期的治療ならびにＨＩＶ感染の長期的予防に、かつごく限られた回数の薬物投与が必要とされるこの目的に、使用することができるという点から、固有の薬物動態学的特性を有するナノ懸濁液を製造することが可能となることが判明した。これは、薬の負担ならびに処方された用法の患者の服薬遵守に関して有益である。

本明細書で使用される、「ＨＩＶ感染の治療」という用語は、ＨＩＶに感染している対象の治療に関する。「ＨＩＶ感染の治療」という用語は、ＨＩＶ感染に伴う疾患の治療、例えばＡＩＤＳ、またはＨＩＶ感染に伴う他の病状、血小板減少症、カポジ肉腫、および
認知症および進行性構音障害、運動失調および失見当識などの症状を生じる、進行性脱髄を特徴とする中枢神経系の感染、およびＨＩＶ感染に伴う更なる病状、例えば末梢神経障害、進行性全身性リンパ節腫脹（ＰＧＬ）、およびＡＩＤＳ関連複合症（ＡＲＣ）などの治療にも関係する。

「ＨＩＶ感染の予防」という用語は、ＨＩＶに感染する可能性のある対象の予防または回避に関する。感染源は様々であり、ＨＩＶを含有する物質、特に血液または精子などのＨＩＶを含有する体液、またはＨＩＶに感染している他の対象である。ＨＩＶ感染の予防は、ＨＩＶを含有する物質またはＨＩＶ感染個体からの非感染者へのウイルス伝染の予防に関し、または非感染者の体内にウイルスが侵入することの予防に関する。ＨＩＶウイルスの伝染は、性的伝染による、または感染対象の血液との接触によるものなど（例えば、感染対象に治療を施す医療スタッフ）、ＨＩＶ伝達の公知のいずれかの原因によるものであり得る。ＨＩＶの伝達は、例えば、血液試料を取り扱う場合または輸血の場合に、ＨＩＶ感染血液との接触によっても起こり得る。ＨＩＶ感染細胞を用いて研究室の実験を行う場合、感染細胞との接触によっても伝染し得る。

「ＨＩＶ感染の治療」、「抗ＨＩＶ療法」ならびに同様な用語は、ＨＩＶのウイルス量（指定体積の血清中のウイルスＲＮＡのコピー数として表される）が低減される治療を意味する。治療が有効であるほど、ウイルス量が少なくなる。好ましくは、ウイルス量は、できる限り低いレベルに、例えば約２００コピー／ｍｌ未満、特に約１００コピー／ｍｌ未満、さらに特には５０コピー／ｍｌ未満、できればウイルスの検出限界未満に低減されるべきである。１、２または３桁のオーダーのウイルス量の低減（例えば、約１０〜約１０^２、またはそれ以上の約１０^３などのオーダーの低減）が、治療の有効性の指標である。抗ＨＩＶ治療の有効性を測定する他のパラメーターは、正常な成人では５００〜１５００細胞／μｌの範囲であるＣＤ４数である。それより低いＣＤ４数がＨＩＶ感染の指標であり、約２００細胞／μｌ未満になると、ＡＩＤＳを発症している可能性がある。例えば細胞数約５０、１００、２００／μｌ以上のＣＤ４の増加は、抗ＨＩＶ治療の有効性の指標でもある。ＣＤ４数は特に、約２００細胞／μｌを超える、または約３５０細胞／μｌを超えるレベルに増加すべきである。ウイルス量またはＣＤ４数、またはその両方を用いて、ＨＩＶ感染の程度を診断することができる。

「ＨＩＶの有効な治療」という用語および同様な用語は、上述のように、ウイルス量を減らすか、またはＣＤ４数を増加するか、または両方である治療を意味する。「ＨＩＶの有効な予防」という用語および同様な用語は、ＨＩＶを含有する物質またはＨＩＶ感染対象などのＨＩＶ感染源と接触している集団における、新たに感染した対象の相対数の減少が存在する状況を意味する。例えば、ＨＩＶ感染個体および非感染個体の混合集団において、本発明の医薬組成物で処置した非感染個体と非処置の非感染個体とを比較した場合に、新たに感染した個体の相対数の減少があるかどうかを測定することによって、有効な予防を測定することができる。この減少は、時間の経過にわたる所定の集団における感染個体数と非感染個体数の統計的解析によって測定することができる。

「治療有効量」、「有効量」、「ＨＩＶ感染の予防に有効な量」、および同様な用語は、効果的な血漿中レベルを生じる、活性成分４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリルの量を意味する。「効果的な血漿中レベル」とは、ＨＩＶ感染の有効な治療または有効な予防を提供する、ＨＩＶ阻害剤４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリルの血漿中レベルを意味する。

「対象」という用語は特に、ヒトに関する。

凍結乾燥されるべきナノ懸濁液または凍結乾燥ナノ懸濁液の再構成から得られるナノ懸濁液のナノ粒子の平均粒径は、約１０００ｎｍ未満、または約５００ｎｍ未満、または約４００ｎｍ未満、または約３００ｎｍ未満、約２００ｎｍ未満であり得る。好ましくは、平均粒径は、約２００ｎｍまたは約４００ｎｍまたは約８００ｎｍ、さらに好ましくは約２００ｎｍである。

本明細書で使用される、平均粒径という用語は、当業者には公知のその従来の意味を有し、例えば、沈降場流動分画、光子相関分光法、レーザー回折またはディスク遠心などの公知の粒径測定技術によって測定することができる。本明細書に記載の平均粒径は、粒子の体積分布に関連し得る。その場合には、「平均粒径約５０μｍ未満」とは、粒子の体積の少なくとも５０％が約５０μｍ未満の粒径を有し、同じことが記載の他の粒径に当てはまる。同様な様式で、平均粒径は、粒子の重量分布に関連し得る。その場合には、「平均粒径約５０μｍ未満」とは、粒子の重量の少なくとも５０％が約５０μｍ未満の粒径を有し、同じことが記載の他の粒径に当てはまる。通常、体積分布および重量分布から、平均粒径に関して同じ値またはほぼ同じ値が得られる。

本発明の医薬組成物は、長時間にわたる活性成分４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリルの放出を提供し、したがって徐放性または遅延放出組成物とも呼ぶことができる。投与後、本発明の組成物は体内に留まり、患者のシステムにおいてこの活性成分のかかるレベルを長時間維持しながら、４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリルを徐々に放出し、その結果、前記期間中にＨＩＶ感染の抗ＨＩＶ療法または予防が提供される。本発明の医薬組成物が体内に留まり、４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリルを徐々に放出するという事実から、デポ配合物として適した医薬組成物と呼ぶことができる。

本明細書において使用される「長期間（長時間）」という用語は、１週〜１年または２年までの範囲にある期間（または時間）、または１〜２週、または２〜３週、または３〜４週の範囲の期間、または１〜２ヶ月、または２〜３ヶ月、または３〜４ヶ月、または３〜６ヶ月、または６〜１２ヶ月、または１２〜２４ヶ月の範囲の期間、または数日、例えば７、１０または１２日、または数週、例えば２、３または４週、または１ヶ月、または数ヶ月、例えば２、３、４、５または６ヶ月、またはそれ以上、例えば７、８、９または１２ヶ月の範囲の期間を意味する。

本発明の医薬組成物は、ＨＩＶ感染の長期的治療または長期的予防に適用することができ、または言い換えると、ＨＩＶ感染の治療またはＨＩＶ感染の予防において長期間、本発明の医薬組成物を使用することができる。本発明の組成物は、抗ＨＩＶ療法またはＨＩＶ感染の予防において長期間、例えば少なくとも約１週間以上、または約１ヶ月以上の間有効である。「少なくとも約１週間以上有効な」という表現は、活性成分、４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリルの血漿中レベルが、閾値を超える値であることを意味する。治療用途の場合には、前記閾値は、４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリルがＨＩＶ感染の有効な治療を提供する、最も低い血漿中レベルである。ＨＩＶ感染予防における適用の場合には、前記閾値は、４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリルがＨＩＶ感染の予防に有効である、最も低い血漿中レベルである。

例えば「ＨＩＶ感染の長期的予防」または「ＨＩＶ感染の長期的治療」に関して使用される「長期」または同様な用語は、１週から１年または２年まで、またはそれ以上、例えば５年または１０年の範囲にあり得る期間を意味する。特に、ＨＩＶ感染の治療の場合には、かかる期間は、１〜数年のオーダーの長さである。かかる期間は、特に予防の場合には比較的短い期間である場合がある。より短い期間は、数日、例えば７、１０または１２日、または数週、例えば２、３または４週、または１ヶ月または数ヶ月、例えば２、３、４、５または６ヶ月またはそれ以上、例えば７、８、９または１２ヶ月の期間である。一実施形態において、本発明に従った方法および使用は、１ヶ月、または数ヶ月、例えば２、３、４、５または６ヶ月またはそれ以上、例えば７、８、９または１２ヶ月の間、ＨＩＶ感染を予防するためのものである。一実施形態において、本発明に従った方法および使用は、１ヶ月、または数ヶ月、例えば２、３、４、５または６ヶ月またはそれ以上、例えば７、８、９または１２ヶ月の間、ＨＩＶ感染を治療するためのものである。

本発明の医薬組成物は、様々な時間間隔で投与することができる。ＨＩＶ感染の予防で使用される場合、本発明の医薬組成物は、１回のみ、または限定された回数、例えば２、３、４、５または６回、またはそれ以上投与されることができる。感染のリスクのある期間など、限定された期間、予防する必要がある場合に推奨され得る。

本発明の医薬組成物は、上記の時間間隔で、例えば１週〜１ヶ月の範囲、または１ヶ月〜３ヶ月の範囲、または３ヶ月〜６ヶ月の範囲、または６ヶ月〜１２ヶ月の範囲の時間間隔で投与することができる。一実施形態において、医薬組成物は、２週間に１回、または１ヶ月に１回、または３ヶ月に１回投与することができる。他の実施形態において、その時間間隔は、１〜２週、または２〜３週、または３〜４週の範囲であるか、またはその時間間隔は、１〜２ヶ月、または２〜３ヶ月、または３〜４ヶ月、または３〜６ヶ月、または６〜１２ヶ月、または１２〜２４ヶ月の範囲である。その時間間隔は、少なくとも１週間であり得るが、数週、例えば２、３、４、５または６週であってもよく、または１ヶ月または数ヶ月、例えば２、３、４、５または６ヶ月またはそれ以上、例えば７、８、９または１２ヶ月の時間間隔であってもよい。一実施形態において、本発明の医薬組成物は、１、２または３ヶ月の時間間隔で投与される。本発明の医薬組成物の各投与間の期間がこのように長いと、薬の負担および服薬遵守がさらに改善される。服薬遵守をさらに改善するために、組成物が週単位のスケジュールで投与される場合、その週の特定の曜日に、または月単位のスケジュールの場合にはその月の特定の日に、薬を服用するように患者に指示してもよい。

本発明の各投与間の時間間隔の長さは変化し得る。例えば前記時間間隔は、血漿中レベルの関数で選択され得る。４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリルの血漿中レベルが低すぎるとみなされる場合、例えばこれらが以下に指定の最低血漿中レベルに近づく場合には、その間隔は短くなり得る。４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリルの血漿中レベル高すぎるとみなされる場合、その間隔は長くなり得る。一実施形態において、本発明の組成物は、等しい時間間隔で投与される。この組成物は、介在する更なる投与なく投与され、または言い換えれば、組成物は、異なるまたは等しい長さの期間、例えば少なくとも１週の期間、または本明細書に指定される他の期間互いに離れた特定の時点で投与され、その期間は、更なる４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリルは投与されない。時間間隔が同じ長さであることは、例えば週の同じ曜日または月の同じ日に投与が行われ、投与スケジュールが簡単であるという利点がある。したがって、かかる投与スケジュールは、「薬の負担」が限られており、そのため処方された用法に対する患者の服薬遵守に有益に貢献する。

それで治療された対象の血漿中の４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリルの濃度は一般に、単位体積当たりの質量として、通常ナノグラム／ミリリットル（ｎｇ／ｍｌ）で表される。便宜上、この濃度は本明細書において「血漿中薬物濃度」または「血漿中濃度」と呼ばれる場合がある。

投与される４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリルの用量（または量）は、本発明の医薬組成物中の薬物の量、または投与される所定の組成物の量に応じて異なる。血漿中レベルが高いほど望ましい場合には、より高い４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリル濃度の組成物、またはより多い量の所定の組成物のいずれか、または両方が投与され得る。その逆に、より低い血漿中レベルが望まれる場合にも、これが当てはまる。特定の目的の血漿中レベルを得るために、様々な時間間隔と様々な投薬の組み合わせも選択され得る。

投与される４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリルの用量（または量）は、投与の頻度（つまり、各投与間の時間間隔）に応じても異なる。通常、投与の頻度が少ないと、用量は高くなる。これらのすべてのパラメーターを用いて、血漿中レベルを目的の値に向けることができる。

投与計画は、ＨＩＶ感染の予防が想定されるか、またはＨＩＶ感染の治療が想定されるかどうかに応じても異なる。治療の場合には、４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリルの血漿中濃度が最低血漿中レベルを超えて維持されるように、投与される４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリルの用量または投薬の頻度、またはその両方が選択される。この文脈において「最小血漿中レベル」（またはＣ_ｍｉｎ）という用語は、ＨＩＶの有効な治療を提供する４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリルの血漿中レベルを意味する。特に、４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリルの血漿中レベルは、約１０ｎｇ／ｍｌの最小血漿中レベルを超える、または約１５ｎｇ／ｍｌを超える、または約２０ｎｇ／ｍｌを超える、または約４０ｎｇ／ｍｌを超える、または約５０ｎｇ／ｍｌを超える、または約９０ｎｇ／ｍｌを超える、または約２７０ｎｇ／ｍｌを超える、または約５４０ｎｇ／ｍｌを超えるレベルで維持される。一実施形態において、４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリルの血漿中レベルは、約９０ｎｇ／ｍｌのレベルを超えて維持される。あるいは、４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリルの血漿中レベルは、一定の範囲内で、特に上記の値から選択される最小血漿中レベルから始まり、上記の値から選択される、より高い血漿中レベルで終わり、かつ５００ｎｇ／ｍｌ〜１０００ｎｇ／ｍｌ（例えば、１０〜１５、１０〜２０、１０〜４０等、または１５〜２０、または１５〜４０、または１５〜９０等、または２０〜４０、２０〜９０、または２０〜２７０等、または４０〜９０、４０〜２７０、または４０〜５４０等、毎回およその指示値（ｎｇ／ｍｌ）から、およその指示値（ｎｇ／ｍｌ）までである）から選択される範囲内で維持され得る。一実施形態において前記範囲は、約１０〜約２０、約２０〜約９０、約９０〜約２７０、約２７０〜約５４０、約５４０〜約１０００であり、毎回およその指示値（ｎｇ／ｍｌ）から、
およその指示値（ｎｇ／ｍｌ）までである。

レベルが低いと、ウイルスをもはや十分に抑制できず、その結果ウイルスが増殖し、突然変異の出現の更なるリスクを伴うため、４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリルの血漿中レベルは、上記の最小血漿中レベルを超えるレベルで維持すべきである。

ＨＩＶ予防の場合には、「最小血漿中レベル」（またはＣ_ｍｉｎ）という用語は、ＨＩＶ感染の有効な予防を提供する、４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリルの最も低い血漿中レベルを意味する。ＨＩＶを含有する物質またはＨＩＶ感染者からＨＩＶに感染していない対象への伝染の場合には、これが前記伝染の抑制に有効な最も低い血漿中レベルである。

特に、ＨＩＶ予防の場合には、４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリルの血漿中レベルは、治療に関して上記の最小血漿中レベルを超えるレベルに維持され得る。しかしながら、予防において、４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリルの血漿中レベルは、それより低いレベル、例えば約４ｎｇ／ｍｌまたは約５ｎｇ／ｍｌ、または約８ｎｇ／ｍｌを超えるレベルで維持され得る。レベルが低いと、薬物がもはや有効ではなくなり、その結果、ＨＩＶ感染の伝染のリスクが高くなるため、４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリルの血漿中レベルは好ましくは、これらの最小血漿中レベルを超えるレベルで維持すべきである。ＴＭＣ２７８の血漿中レベルは、安全域を有するように、やや高いレベルで維持され得る。このようにより高いレベルは、約５０ｎｇ／ｍｌ以上；または約９０ｎｇ／ｍｌ以上から始まる。４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリルの血漿中レベルは、治療に関して上述の範囲のレベルで維持され得るが、その下限は、約４ｎｇ／ｍｌ、または約５ｎｇ／ｍｌ、または約８ｎｇ／ｍｌの血漿中レベルを含む。

４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリルの利点は、著しい副作用なく、比較的高い血漿中レベルまで使用できることである。４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリルの血漿中濃度は、比較的高いレベルに達するが、あらゆる薬物と同様に、４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリルが著しい副作用を起こす血漿中レベルである、最高血漿中レベル（またはＣ_ｍａｘ）を超えるべきではない。本明細書で使用される、「著しい副作用」という用語は、副作用が患者の正常な機能に影響する程度まで、関連する患者の集団に副作用が存在することを意味する。４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリルのＣ_ｍａｘは、細胞アッセイの試験データの外挿から、または臨床試験の評価から決定することができ、好ましくは約５００ｎｇ／ｍｌまたは１０００ｎｇ／ｍｌの値を超えないほうがよい。一実施形態において、投与されるべき４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリルの投与量および頻度は、最高血漿中レベル（または上記で指定されるＣ_ｍａｘ）と最小血漿中レベル（または上記で指定されるＣ_ｍｉｎ）の間に含まれるレベルで長期間、血漿中濃度が維持されるように選択される。

特定の場合には、比較的低いレベル、例えば本明細書で指定される最小血漿中レベルに可能な限り近いレベルで、４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリルの血漿中レベルを維持することが望ましい場合がある。これによって、投与の頻度および／または各投与で投与される４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリルの量を低減することが可能となるだろう。好ましくない副作用を避けることも可能となり、それは、感染のリスクがある健康なヒトであり、したがって副作用を我慢する傾向が低い、標的集団の大部分において投薬形態を許容する一因となるであろう。４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリルの血漿中レベルは、予防の場合には比較的低いレベルで維持され得る。一実施形態は、上記または以下で指定される、ＨＩＶ感染の予防のための使用または方法に関し、４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリルの最小血漿中レベルは、本明細書で指定されるとおりであり、最高血漿中レベルは、これも本明細書に指定されるように、ＲＴ阻害剤を治療上作用させる最も低い血漿中レベルにおよそ等しい。

他の実施形態において、４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリルの血漿中レベルは、約１０ｎｇ／ｍｌ、さらに特には約１５ｎｇ／ｍｌ、さらに特には約２０ｎｇ／ｍｌ、またさらに特には約４０ｎｇ／ｍｌのより低い最高血漿中レベル未満のレベルで維持される。特定の実施形態において、４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリルの血漿中レベルは、約１３．５ｎｇ／ｍｌのレベル未満で維持される。一実施形態において、４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリルの血漿中レベルは、上記で指定される、より低い最高血中レベルと、予防に関して記述される最小血漿中レベルとの間で維持される。例えば、４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリルの血漿中レベルは、約１０ｎｇ／ｍｌ未満であり、かつ約４ｎｇ／ｍｌの最小レベルを超えて維持される。

他の場合には、例えば高い感染リスクがあり、頻度が多くなり、かつ／または用量が多くなることが問題にならない場合、比較的より高いレベルで４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリルの血漿中レベルを維持することが望ましい場合がある。これらの場合には、最小血漿中レベルは、本明細書に記載の特定のレベルなど、ＨＩＶの有効な治療を提供する、４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリルの最も低い血漿中レベルに等しい。

予防の場合には、投与されるべき４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリル、特にリルピビリンの用量は、約０．２ｍｇ／日〜約５０ｍｇ／日、または０．５ｍｇ／日〜約５０ｍｇ／日のベースで、または約１ｍｇ／日〜約１０ｍｇ／日、または約１０ｍｇ／日〜約２０ｍｇ／日のベースで、または約１５ｍｇ／日〜約２５ｍｇ／日のベースで、または約２０ｍｇ／日〜約２５ｍｇ／日のベースで、または約２ｍｇ／日〜約５ｍｇ／日、例えば約３ｍｇ／日または約５ｍｇ／日または約２０ｍｇ／日のベースで計算されるべきである。これは、約１．５ｍｇ〜約３５０ｍｇ、特に約３．５ｍｇ〜約３５０ｍｇ、特に約７ｍｇ〜約７０ｍｇ、または約７０ｍｇ〜約１４０ｍｇ、約１０５ｍｇ〜約１７５ｍｇ、または約１４０ｍｇ〜約１７５ｍｇ、または約１４ｍｇ〜約３５ｍｇ、例えば約２１ｍｇまたは約３５ｍｇまたは約１４０ｍｇの週用量に相当し、または６ｍｇ〜約３０００ｍｇ、
特に約１５ｍｇ〜約１，５００ｍｇ、さらに特には約３０ｍｇ〜約３００ｍｇ、または約３００ｍｇ〜約６００ｍｇ、または約４５０ｍｇ〜約７５０ｍｇ、または約６００ｍｇ〜約７５０ｍｇ、または約６０ｍｇ〜約１５０ｍｇ、例えば約９０ｍｇまたは約１５０ｍｇまたは約６００ｍｇの月用量に相当する。他の投与計画の用量は、日用量に各投与間の日数を掛けることによって容易に計算することができる。

治療の場合には、投与されるべき４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリル、特にリルピビリンの用量は、やや高く、約１ｍｇ／日〜約１５０ｍｇ／日、または約２ｍｇ／日〜約１００ｍｇ／日、または約５ｍｇ／日〜約５０ｍｇ／日、または約１０ｍｇ／日〜約２５ｍｇ／日、または約１５ｍｇ／日〜約２５ｍｇ／日、または約２０ｍｇ／日〜約２５ｍｇ／日、例えば約１５ｍｇ／日または約２０ｍｇ／日または約２５ｍｇ／日のベースで計算されるべきである。相当する週用量または月用量は、上記のように計算することができる。予防における適用の場合には、治療用途と同じ用量を用いてもよいが、その用量は少なくなり得る。

一実施形態において、４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリル、特にリルピビリンの月用量は６００ｍｇである。一実施形態において、再構成水性ナノ懸濁液中の４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリル、特にリルピビリンの濃度は２００ｍｇ／ｍｌまたは３００ｍｇ／ｍｌである。

投与されると、４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリルの血漿中レベルは、多少安定となり、つまり限界内で変動することが判明している。血漿中レベルは、多少なりとも定常状態モードに近づく、または多少なりともゼロオーダーの放出速度に長期間近づくことが分かっている。「定常状態」とは、対象の血漿中に存在する薬物の量が、長期間にわたって多少なりとも同じレベルのままである状態を意味する。４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリルの血漿中レベルは一般に、薬物がそのレベルで有効である最小血漿中レベルを下回る減少を示さない。「多少なりとも同じレベルのまま」という表現は、許容可能な範囲の血漿中濃度の小さな変動、例えば約＋／−３０％、または約＋／−２０％、または約＋／−１０％、または約＋／−１０％の範囲内の変動があり得ることを除外しない。

一部の場合には、投与後の初期血漿中濃度ピークがある場合があり、そのピーク後には、上述のように血漿中レベルが「定常状態」に達する。

本発明の組成物は、良好な局所耐性および投与の容易さを示す。良好な局所耐性は、注射部位での最小限の刺激および炎症を意味し；投与の容易さとは、特定の薬物配合物を１回分投与するのに必要な針のサイズおよび時間の長さを意味する。一実施形態において、本発明の組成物中のナノ粒子は主に、結晶質４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリル；および立体安定剤を含み、その合計量は少なくとも、ナノ粒子約５０重量％、または少なくとも約８０重量％、または少なくとも約９０重量％、または少なくとも約９２重量％、または少なくとも約９５重量％、または少なくとも約９８重量％、または少なくとも約９９重量％、または少なくとも約９９．５重量％を含み得る。

本発明による再構成医薬組成物は、好ましくは薬学的に許容される担体、特に水性担体
を含有し、前記水性担体は、任意に他の薬学的に許容される成分との混合物状態で滅菌水を含む。後者は、注射可能な配合物または懸濁液配合物または経口用配合物で使用される成分を含む。これらの成分は、懸濁化剤、緩衝剤、ｐＨ調整剤、保存剤、等張化剤などの成分のうちの１種または複数種から選択され得る。一実施形態において、前記成分は、懸濁化剤、緩衝剤、ｐＨ調整剤、任意に保存剤、および等張化剤のうちの１種または複数種から選択される。特定の成分は、これらの作用物質のうちの２種類以上として同時に機能することができ、例えば、保存剤および緩衝剤のように挙動し、または緩衝剤および等張化剤のように挙動することができる。上記のように、他の薬学的に許容される成分も、凍結乾燥薬物ナノ懸濁液自体の中に存在してもよい。あるいは、他の薬学的に許容される成分は、凍結乾燥薬物ナノ懸濁液自体、ならびに担体、特に水性担体のどちらにも存在しても良い。好ましくは、他の薬学的に許容される成分は、凍結乾燥薬物ナノ懸濁液自体に存在する。

適切な緩衝剤およびｐＨ調整剤は、分散液に中性ないし、好ましくはｐＨ範囲７〜７．５の、ごくわずかに塩基性（ｐＨ８．５まで）を付与するのに十分な量で使用すべきである。特定の緩衝剤は、弱酸の塩である。添加することができる緩衝剤およびｐＨ調整剤は、酒石酸、マレイン酸、グリシン、乳酸ナトリウム／乳酸、アスコルビン酸、クエン酸、クエン酸ナトリウム／クエン酸、酢酸ナトリウム／酢酸、重炭酸ナトリウム／炭酸、コハク酸ナトリウム／コハク酸、安息香酸ナトリウム／安息香酸、リン酸ナトリウム、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン、重炭酸ナトリウム／炭酸ナトリウム、水酸化アンモニウム、ベンゼンスルホン酸、安息香酸ナトリウム／安息香酸、ジエタノールアミン、グルコノデルタラクトン、塩化水素酸、臭化水素、リジン、メタンスルホン酸、モノエタノールアミン、水酸化ナトリウム、トロメタミン、グルコン酸、グリセリン酸、グルタル酸、グルタミン酸、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、トリエタノールアミン、その混合物などから選択され得る。

保存剤は、安息香酸、ベンジルアルコール、ブチル化ヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）、ブチル化ヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、クロルブトール、没食子酸、ヒドロキシベンゾエート、ＥＤＴＡ、フェノール、クロロクレゾール、メタクレゾール、塩化ベンゼトニウム、ミリスチル−γ−ピコリニウムクロリド、酢酸フェニル水銀およびチメロサールからなる群から選択することができる、抗菌剤および酸化防止剤を含む。ラジカル捕捉剤としては、ＢＨＡ、ＢＨＴ、ビタミンＥおよびアスコルビン酸パルミテート、およびその混合物が挙げられる。酸素捕捉剤としては、アスコルビン酸ナトリウム、亜硫酸ナトリウム、Ｌ−システイン、アセチルシステイン、メチオニン、チオグリセロール、アセトン重亜硫酸ナトリウム、イソアスコルビン酸、ヒドロキシプロピルシクロデキストリンが挙げられる。キレート剤としては、クエン酸ナトリウム、ナトリウムＥＤＴＡおよびリンゴ酸が挙げられる。酸化防止剤、緩衝剤および等張化剤として、クエン酸を使用することができる。

等張化剤が本発明の医薬組成物の等張性を確保するために存在してもよく、グルコース、ブドウ糖、ショ糖、フルクトース、トレハロース、ラクトースなどの糖；多価糖アルコール、好ましくは三価または四価以上の糖アルコール、例えばグリセリン、エリトリトール、アラビトール、キシリトール、ソルビトールおよびマンニトールが挙げられる。その代わりとして、溶液に等張性を付与するために、塩化ナトリウム、硫酸ナトリウム、または他の適切な無機塩を使用してもよい。これらの等張化剤は単独で、または組み合わせて使用することができる。懸濁液は好都合なことに、等張化剤を０〜１０％（ｗ／ｖ）、特に０〜６％含む。電解質がコロイド安定性に影響を及ぼし得るため、非イオン性等張化剤、例えばグルコースまたはトレハロースが興味の対象となる。

本発明の医薬組成物の好ましい特徴は、投与の容易さに関する。本発明の医薬組成物の
粘度は好ましくは、注射による投与を可能にするのに十分に低いほうがよい。特に、本発明の医薬組成物は、シリンジに容易に（例えば、バイアルから）吸い上げられ、細い針（例えば、２０Ｇ１ １／２、２１Ｇ１ １／２、２２Ｇ２または２２Ｇ１ １／４）を通してそれほど長くない時間で注入することができるようにデザインすべきである。一実施形態において、本発明の組成物の粘度は、約７５ｍＰａ・ｓ未満、または６０ｍＰａ・ｓ未満である。かかる粘度またはそれ以下の粘度の水性懸濁液が通常、上記の基準を満たす。

理想的には、本発明による再構成水性懸濁液は、注入容積を最小限に維持するように、許容され得るほどの４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリルを、特に３〜５０％（ｗ／ｖ）、または３〜４０％（ｗ／ｖ）、または３〜３０％（ｗ／ｖ）、または３〜２０％（ｗ／ｖ）、または１０〜４０％（ｗ／ｖ）、または１０〜３０％（ｗ／ｖ）含む。一実施形態において、本発明の再構成水性懸濁液は、４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリル約１０％（ｗ／ｖ）、４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリル約２０％（ｗ／ｖ）、または４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリル約３０％（ｗ／ｖ）を含む。

一実施形態において、再構成水性ナノ懸濁液は、組成物の全体積に対して重量で：
（ａ）４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリル、特にリルピビリン３％〜５０％（ｗ／ｖ）、または１０％〜４０％（ｗ／ｖ）、または１０％〜３０％（ｗ／ｖ）、または１０％（ｗ／ｖ）、または２０％（ｗ／ｖ）、または３０％（ｗ／ｖ）；
（ｂ）本発明による立体安定剤、例えばポロキサマー、例えばポロキサマー３３８ ０．５％〜１０％、または０．５％〜２％（ｗ／ｖ）、または３％（ｗ／ｖ）、または５％（ｗ／ｖ）；
（ｃ）凍結保護物質または分散保護物質、例えばＰＶＰ０〜２０％（ｗ／ｖ）、または０〜１０％（ｗ／ｖ）、または５％（ｗ／ｖ）；
（ｄ）１種または複数種の緩衝剤０％〜１０％、または０％〜５％、または０％〜２％、または０％〜１％；
（ｅ）等張化剤０％〜１０％、または０％〜６％（ｗ／ｖ）；
（ｆ）保存剤０％〜２％（ｗ／ｖ）；および
（ｇ）全体で１００％（ｗ／ｖ）とするための適量の注射用水；
を含む。

懸濁液に、そのｐＨをｐＨ約７にする量の酸または塩基が任意に添加される。適切な酸または塩基は、生理学的に許容される酸または塩基のいずれか、例えばＨＣｌ、ＨＢｒ、硫酸、ＮａＯＨなどのアルカリ金属水酸化物である。

本発明における４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリルの投与は、多くの場合に、他のＨＩＶ阻害剤を同時投与することが薦められるが、ＨＩＶ感染を治療するには十分であることができる。後者としては好ましくは、他の種類のＨＩＶ阻害剤、特にＮＲＴＩ、ＰＩおよび融合阻害剤から選択される阻害剤が挙げられる。一実施形態において、同時投与される他のＨＩＶ阻害剤はＰＩ阻害剤である。できれば同時投与され得るＨＩＶ阻害剤は、ＮＮＲＴＩを含むＨＡＡＲＴコンビネーションで使用される阻害剤である。例えば、２種類の更なるＮＲＴＩまたはＮＲＴＩおよびＰＩが同時投与される。かかる同時投与は、経口投与または非経口投与、例えばＨＩＶ感染の長期的治療またはＨＩＶ感染の長期的
予防のための非経口投与による投与である。

特定の場合において、ＨＩＶ感染の治療は、本発明による４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリルの組成物の投与のみに、つまり、更なるＨＩＶ阻害剤の同時投与をしない単独療法としての投与に限定されてもよい。この選択肢は、例えばウイルス量が比較的低い場合、例えばウイルス量（血清の指定体積中のウイルスＲＮＡのコピー数として表される）が約２００コピー／ｍｌ未満、特に約１００コピー／ｍｌ未満、さらに特には５０コピー／ｍｌ未満、具体的にはウイルスの検出限界未満である場合に推奨され得る。一実施形態において、この種類の単独療法は、一定期間、ＨＩＶ薬物を併用しての、特にＨＡＡＲＴコンビネーションのいずれかを使用しての初期治療後に、血漿中のウイルス量が上記の低いウイルスレベルに達するまで適用される。

更なる態様において、本発明は、ＨＩＶに感染している対象の治療を維持する薬物を製造するための、本発明による抗ウイルス有効量の４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリルを含む再構成医薬組成物の使用に関し、その組成物は、１週〜１年、または１週〜２年の範囲の時間間隔にて間欠的に投与される、または投与されるべきである。

したがって、更なる態様において、本発明は、ＨＩＶに感染している患者を長期的に治療するための方法であって、
（ｉ）ＨＩＶ阻害剤を併用しての前記患者の治療；に続いて
（ｉｉ）本発明による抗ウイルス有効量の４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリルを含む医薬組成物の間欠投与であって、その組成物が、少なくとも１週、または少なくとも２週または１月に１回または３ヶ月に１回の時間間隔で投与される、間欠投与；
を含む方法を提供する。

本明細書で使用される「実質的に」という用語は、「完全に」を除外せず、例えば、Ｙを「実質的に含まない」組成物は、Ｙを完全に含まないという意味であり得る。必要に応じて、「実質的に」という用語は、本発明の定義から省くことができる。数値と関連する「約（およそ）」という用語は、数値の文脈におけるその通常の意味を有する。必要に応じて、「約」という用語は、数値±１０％、または±５％、または±２％、または±１％に置き換えることができる。本明細書に記載のすべての文書は、その全体が参照により組み込まれる。

実験パート１
以下の実施例は本発明を例示するためのものであり、本発明をそれに制限するものと解釈すべきではない。

材料および方法
２種類の低水溶性結晶質ＡＰＩ：イトラコナゾールおよびリルピビリン。０．３ｍｍイットリウム安定化ジルコニアビーズ。Ｌｕｔｒｏｌ Ｆ１０８Ｐｒｉｌｌ（ポロキサマー３３８）およびＣｒｅｍｏｐｈｏｒ ＥＬ（ＢＡＳＦ，Ｌｕｄｗｉｇｓｈａｆｅｎ，Ｇｅｒｍａｎｙ）。受け取ったままの状態で使用される、分析グレードのＰＶＰ Ｋ１５、トレハロースおよびショ糖（Ｓｉｇｍａ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｍｕｎｉｃｈ，Ｇｅｒｍａｎｙ）。ナノ懸濁液を製造するための、Ｂｒａｕｎ（Ｂｒａｕｎ−Ｍｅｌｓｕｎｇｅｎ ＡＧ，Ｍｅｌｓｕｎｇｅｎ，Ｇｅｒｍａｎｙ）から購入された注射用水。脱塩水はＳａｒｔｏｂｒａｎ ＰＨ_２Ｏ膜フィルター（Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ ｓｔｅｄｉ
ｍ ｂｉｏｔｅｃｈ，Ｇｅｒｍａｎｙ）を通して濾過され、レーザー回折分析に使用された。

主な梱包材料
Ｌｕｔｚ ＧｍｂＨ（Ｗｅｒｔｈｅｉｍ，Ｇｅｒｍａｎｙ）からの１５ＲバイアルおよびＷｅｓｔ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，Ｉｎｃ．（Ｌｉｏｎｖｉｌｌｅ，ＰＡ，ＵＳＡ）からの２０ｍｍ Ｗｅｓｔ Ｆｌｕｒｏｔｅｃ（登録商標）凍結乾燥ストッパーを受け取った状態で使用した。底のないトレイを用いて棚にすべてのバイアルを置いた。

ナノ懸濁液の製造
ポロキサマー３３８ ５０ｍｇ／ｍＬまたはＣｒｅｍｏｐｈｏｒＥＬ ５０ｍｇ／ｍＬのいずれかとイトラコナゾール１００ｍｇ／ｍＬを混合し、高せん断メディアミル（Ｎｅｔｚｓｃｈ ＭｉｎｉＣｅｒ（登録商標））において湿式ビーズミリングによって調製した。ミリングには、０．３ｍｍイットリウム安定化ジルコニアビーズを使用した。データ比較のために、１００ｍｇ／ｍＬリルピビリンを５０ｍｇ／ｍＬポロキサマー３３８で安定化し、上記と同じ手順を用いてミリングした。次いで、リルピビリン濃度をさらに２００ｍｇ／ｍＬに上げ、５０ｍｇ／ｍＬポロキサマー３３８で再び安定化した。得られたストックナノ懸濁液を５０ｍｇ／ｍＬ ＰＶＰ Ｋ１５、トレハロースまたはショ糖と混合した。

レーザー回折分析
Ｍａｌｖｅｒｎ ＭａｓｔｅｒＳｉｚｅｒ（登録商標）を用いて、各凝集塊を見つけることができる範囲にわたって粒径分布が決定された。配合物中に存在する立体安定剤に応じて、純水中での粒子の安定性が測定の間十分ではないことから、５ｍｇ／ｍＬポロキサマー３３８またはＣｒｅｍｏｐｈｏｒ ＥＬの水溶液を媒体として使用した。粒径計算の基本は、生成物屈折率１．６５および生成物吸収率０．００１を用いたミー（Ｍｉｅ）理論であった。ＭａｓｔｅｒＳｉｚｅｒ２０００ Ｓｏｆｔｗａｒｅによって達成された、得られたフィッティング曲線は、光学的モデルの妥当性を表した。バックグラウンドおよび測定積分時間を６０秒に維持し、単位試料当たり３回繰り返して（ｎ＝３）で測定を行った。

凍結乾燥手順
１５Ｒバイアルに各配合物１ｍＬを満たした。次いで、凍結乾燥を実験室規模の凍結乾燥機（ＶｉｒＴｉｓ Ａｄｖａｎｔａｇｅ Ｐｌｕｓ，ＳＰ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，ＵＳＡ）で行った。凍結は−４０℃（棚の入口温度）で、＋５℃および−５℃でそれぞれ１５分間の平衡化工程を含む６０分間行った。配合物中のポロキサマー３３８の結晶化を促進するために、−２０℃（棚入口温度）で９０分間のアニーリング工程を実行した。凍結セットポイントから最初の乾燥棚温度設定までの棚の昇温速度は研究全体を通して１℃／分であった。第１および第２乾燥中の棚入口温度セットポイントは４０℃であった。この工程の保持時間（浸漬期間）は、試料中の含水量の調節が可能となるように、６０分または６００分のいずれかであった。第１および第２乾燥中のチャンバ圧力は実験全体を通じて１００ミリトルで制御された。凍結乾燥サイクルは配合物当たり２回繰り返して（ｎ＝２）行われたことに留意のこと。Ｏｍｅｇａ（Ｏｍｅｇａ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｓｔａｍｆｏｒｄ，ＣＴ）から市販の較正された３０ゲージＴ型銅／コンスタンタン熱電対を使用して、凍結乾燥中の生成物を測定した。各熱電対をストッパーを通して挿入し、バイアルの底中央に位置づけ、生成物における代表的な温度モニタリングと、氷昇華相の正確な終点検出の両方を得た。

示差走査熱量測定，ＤＳＣ
ＭｅｔｔｌｅｒＤＳＣ８２２ｅ（ＭｅｔｔｌｅｒＴｏｌｅｄｏ，Ｇｒｅｉｆｅｎｓｅｅ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）を使用して、すべての配合物混合物における熱転移の決定を行った。データの収集は、温度範囲５〜１５０℃で行った。適用された加熱速度は５℃／分であった。

カール・フィッシャー（ＫＦ）残留水分測定
Ｍｅｔｒｏｈｍ Ｔｈｅｒｍｏｐｒｅｐ８３２ユニットと組み合わされたＭｅｔｒｏｈｍ Ｋａｒｌ Ｆｉｓｃｈｅｒ８３１ＫＦクーロメーターを使用して、凍結乾燥試料の残留水分を測定した。生成物約５０ｍｇを計量して受注製作のガラスバイアルに入れ、次いで、乾燥窒素で試料バイアルをパージした後にオーブンユニットに挿入した。生成物を１４０℃に規定の期間加熱し、水分を滴定溶媒中に蓄積した。試料の重量に応じて、残留含水量をパーセント（％）で報告した。

安定性試験の手順
凍結乾燥直後に、生成物（ｎ＝４）を密閉し、それぞれ２５℃および４０℃／相対湿度７５％で貯蔵した。１、２および３ヵ月後、平均粒径および粒径分布について、試料を分析した。凍結乾燥後、ならびに貯蔵して３ヵ月後に、ＤＳＣおよびカール・フィッシャー測定を行った。

表１：凍結乾燥直後、ならびに２５℃および４０℃で貯蔵して３ヵ月後にそれぞれ得られたｄ^５０、ｄ^９５およびＲＤＩ値。配合物：５０ｍｇ／ｍＬポロキサマー３３８のみで、または５０ｍｇ／ｍＬポリビニルピロリドン（ＰＶＰ Ｋ１５タイプ）、５０ｍｇ／ｍＬトレハロースまたは５０ｍｇ／ｍＬショ糖と併せて、安定化されたリルピビリンナノ粒子濃度２００ｍｇ／ｍＬ。計算された標準偏差（ｎ＝４）は小さく、非常に一貫性のあるｄ^５０、ｄ^９５およびＲＤＩ値を示すことに留意のこと。略語は、Ｐ３３８＝ポロキサマー３３８、Ｔｒ＝トレハロース、Ｓｕ＝ショ糖、ＰＶＰ＝ＰＶＰ Ｋ１５、Ｔ_０＝凍結乾燥直後に決定されたｄ^５０、ｄ^９５およびＲＤＩ値、Ｔ_３＝貯蔵して３ヵ月後のｄ^５０、ｄ^９５およびＲＤＩ値を意味する。

更なるデータを図１〜６に示す。

実験パート２
ａ）ＰＶＰ Ｋ１２またはＰＶＰ Ｋ１７またはトレハロースを含む薬物ナノ懸濁液

薬物ナノ懸濁液１〜５ａの調製
濃縮ナノ懸濁液の調製：
ポロキサマー３３８ １１２．５ｇを注射用水に溶解した。リルピビリン４５０ｇを添加し、懸濁した。目的の最終重量（リルピビリン３００ｍｇ／ｍｌおよびポロキサマー７５ｍｇ／ｍｌ）になるまで注射用水を添加した。３００μｍイットリウム安定化ジルコニアビーズのビーズ装填８０％でＮｅｔｚｓｃｈ Ｐｈａｒｍａ Ｌａｂｓｔａｒ（５２６ｍｌミリングチャンバ）内で、得られた懸濁液をミリングした。適切な粒径に達するまで（Ｍａｌｖｅｒｎで測定）、撹拌機速度２０００ｒｐｍにてミリングを行った。

ミリング後：
薬物ナノ懸濁液１に関しては、濃縮ナノ懸濁液１３３．３ｍｌ（または１４４ｇ）を採取し、２００ｍｇ／ｍｌ ＰＶＰ Ｋ１７ストック溶液５０ｍｌを添加した。２００ｍｌ（または２１２．６ｇ）になるまで、注射用水を添加し、混合物を均一になるまで攪拌した。
薬物ナノ懸濁液２に関しては、濃縮ナノ懸濁液１３３．３ｍｌ（または１４４ｇ）を採取し、２００ｍｇ／ｍｌ ＰＶＰ Ｋ１２ストック溶液２５ｍｌを添加し、均一になるまで混合物を攪拌した。２００ｍｌ（または２１２．６ｇ）になるまで、注射用水を添加し、混合物を均一になるまで攪拌した。
薬物ナノ懸濁液３に関しては、濃縮ナノ懸濁液１３３．３ｍｌ（または１４４ｇ）を採取し、２００ｍｇ／ｍｌ ＰＶＰ Ｋ１２ストック溶液５０ｍｌを添加した。２００ｍｌ（または２１２．６ｇ）になるまで、注射用水を添加し、混合物を均一になるまで攪拌した。
薬物ナノ懸濁液４に関しては、濃縮ナノ懸濁液１３３．３ｍｌ（または１４４ｇ）を採取し、２００ｍｇ／ｍｌ ＰＶＰ Ｋ１７ストック溶液２５ｍｌを添加した。２００ｍｌ（または２１２．６ｇ）になるまで、注射用水を添加し、混合物を均一になるまで攪拌した。
薬物ナノ懸濁液５に関しては、濃縮ナノ懸濁液１３３．３ｍｌ（または１４４ｇ）を採
取し、２００ｍｇ／ｍｌトレハロースストック溶液５０ｍｌを添加した。２００ｍｌ（または２１２．６ｇ）になるまで、注射用水を添加し、混合物を均一になるまで攪拌した。
薬物ナノ懸濁液５ａに関しては、濃縮ナノ懸濁液１３３．３ｍｌ（または１４４ｇ）を採取し、２００ｍｇ／ｍｌ ＰＶＰ Ｋ１７ストック溶液２５ｍｌを添加した。２００ｍｇ／ｍｌトレハロースストック溶液２５ｍｌを添加した。２００ｍｌ（または２１２．６ｇ）になるまで、注射用水を添加し、混合物を均一になるまで攪拌した。

薬物ナノ懸濁液６および７の調製
ナノ懸濁液６の調製：
ポロキサマー３３８ １６．６５ｇを注射用水に溶解した。リルピビリン１００ｇを添加し、懸濁した。目的の最終重量になるまで、注射用水を添加した。３００μｍイットリウム安定化ジルコニアのビーズ装填８０％でＮｅｔｚｓｃｈ Ｐｈａｒｍａ Ｌａｂｓｔａｒ（１３７ｍｌミリングチャンバ）において、得られた懸濁液をミリングした。適切な粒径（Ｍａｌｖｅｒｎで測定）に達するまで、攪拌機速度２０００ｒｐｍにてミリングを行った。ＰＶＰ Ｋ１７粉末２５ｇを添加し、溶解するまで攪拌した。

ナノ懸濁液７の調製：
ポロキサマー３３８ ２５ｇを注射用水に溶解した。リルピビリン１５０ｇを添加し、懸濁した。目的の最終重量になるまで、注射用水を添加した。３００μｍイットリウム安定化ジルコニアのビーズ装填８０％でＮｅｔｚｓｃｈ Ｐｈａｒｍａ Ｌａｂｓｔａｒ（１３７ｍｌミリングチャンバ）において、得られた懸濁液をミリングした。適切な粒径（Ｍａｌｖｅｒｎで測定）に達するまで、攪拌機速度２０００ｒｐｍにてミリングを行った。前記懸濁液２１５．９２ｍｌにＰＶＰ Ｋ１７粉末１０．８０ｇを添加し、溶解するまで攪拌した。

ナノ懸濁液７ａの調製：
ポロキサマー３３８ ２５ｇを注射用水に溶解した。リルピビリン１５０ｇを添加し、懸濁した。目的の最終重量になるまで、注射用水を添加した。３００μｍイットリウム安定化ジルコニアのビーズ装填８０％でＮｅｔｚｓｃｈ Ｐｈａｒｍａ Ｌａｂｓｔａｒ（１３７ｍｌミリングチャンバ）において、得られた懸濁液をミリングした。適切な粒径（Ｍａｌｖｅｒｎで測定）に達するまで、攪拌機速度２０００ｒｐｍにてミリングを行った。前記懸濁液２０６．９２ｍｌにＰＶＰ Ｋ１７粉末１５．５２ｇを添加し、溶解するまで攪拌した。

薬物ナノ懸濁液１〜７ａを以下のように凍結乾燥させた：
各配合物３ｍＬを８ｍｌライオバイアルに満たした（薬物ナノ懸濁液７および７ａに関しては、充填体積２ｍＬを用いた）。次いで、ＨＯＦパイロットプラント凍結乾燥機で凍結乾燥を行った。凍結乾燥サイクルは以下のように行った：２０℃でローディングし；５℃で４５分間、−５℃で２０分間、−４０℃で２時間４０分、−２０℃で２時間１０分、−４０℃で４０分間凍結し；真空（０．０８ミリバール）下にて、−４０℃で２分間の後、４０℃で１１０時間２１分乾燥させ、２０℃で４０分間さらに乾燥させる。

凍結乾燥前（ＦＤ）に決定された、かつ凍結乾燥直後（Ｔ０）および４０℃にて２週間、１ヶ月、３ヶ月および５ヶ月の貯蔵後に決定されたｄ^１０、ｄ^５０、ｄ^９０およびｄ^９９（μｍ）を表２に示す。再構成は、水（１ヶ月以下の安定性）または５％グルコース水（３および５ヶ月の安定性）中で行った。

薬物ナノ懸濁液８〜１１の調製
濃縮ナノ懸濁液の調製：
ポロキサマー３３８ ５０ｇを注射用水に溶解した。リルピビリン３００ｇを添加し、懸濁した。目的の最終重量（リルピビリン３００ｍｇおよびポロキサマー５０ｍｇ／ｍｌ）になるまで、注射用水を添加した。３００μｍイットリウム安定化ジルコニアビーズのビーズ装填８０％でＮｅｔｚｓｃｈ Ｐｈａｒｍａ Ｌａｂｓｔａｒ（５２６ｍｌミリン
グチャンバ）において、得られた懸濁液をミリングした。適切な粒径（Ｍａｌｖｅｒｎで測定）に達するまで、攪拌機速度２０００ｒｐｍにてミリングを行った。

ミリング後：
薬物ナノ懸濁液８に関して、濃縮ナノ懸濁液６５ｍｌ（または７０．４ｇ）を採取し、２００ｍｇ／ｍｌ ＰＶＰ Ｋ１７ストック溶液６．１ｍｌを添加し、均一になるまで混合物を攪拌した。最終体積（９７．５ｍｌ）または最終重量（１０３．６ｇ）になるまで、注射用水を添加した。
薬物ナノ懸濁液９に関して、濃縮ナノ懸濁液６５ｍｌ（または７０．４ｇ）を採取し、２００ｍｇ／ｍｌ ＰＶＰ Ｋ１７ストック溶液１２．２ｍｌを添加し、均一になるまで混合物を攪拌した。最終体積（９７．５ｍｌ）または最終重量（１０３．６ｇ）になるまで、注射用水を添加した。
薬物ナノ懸濁液１０に関して、濃縮ナノ懸濁液６５ｍｌ（または７０．４ｇ）を採取し、２００ｍｇ／ｍｌ ＰＶＰ Ｋ１７ストック溶液１８．３ｍｌを添加し、均一になるまで混合物を攪拌した。最終体積（９７．５ｍｌ）または最終重量（１０３．６ｇ）になるまで、注射用水を添加した。
薬物ナノ懸濁液１１に関して、濃縮ナノ懸濁液６５ｍｌ（または７０．４ｇ）を採取し、２００ｍｇ／ｍｌ ＰＶＰ Ｋ１７ストック溶液２４．４ｍｌを添加し、均一になるまで混合物を攪拌した。最終体積（９７．５ｍｌ）または最終重量（１０３．６ｇ）になるまで、注射用水を添加した。

薬物ナノ懸濁液８〜１１を以下のように凍結乾燥させた：
各配合物３ｍＬを８ｍｌライオバイアルに満たした。次いで、ＨＯＦパイロットプラント凍結乾燥機で凍結乾燥を行った。凍結乾燥サイクルは以下のように行った：２０℃でローディングし；５℃で４５分間、−５℃で２０分間、−５０℃で２時間４０分、−２０℃で２時間１０分、−５０℃で４０分間凍結し；真空（０．０８ミリバール）下にて、−５０℃で２分間の後、４０℃で４２時間２１分乾燥させ、２０℃で４０分間さらに乾燥させる。

凍結乾燥前（ＦＤ）に決定された、かつ凍結乾燥直後（Ｔ０）および４０℃にて１ヶ月および３ヶ月貯蔵した後に決定されたｄ^１０、ｄ^５０、ｄ^９０およびｄ^９９（μｍ）を表３に示す。ナノ懸濁液は、５％グルコース水中で、リルピビリン３００ｍｇ／ｍｌの相当する濃度に再構成された。

薬物ナノ懸濁液１２〜１５の調製
濃縮ナノ懸濁液の調製：
ポロキサマー３３８ ５０ｇを注射用水に溶解した。リルピビリン３００ｇを添加し、懸濁した。目的の最終重量（リルピビリン３００ｍｇおよびポロキサマー５０ｍｇ／ｍｌ）になるまで、注射用水を添加した。３００μｍイットリウム安定化ジルコニアビーズのビーズ装填８０％でＮｅｔｚｓｃｈ Ｐｈａｒｍａ Ｌａｂｓｔａｒ（５２６ｍｌミリングチャンバ）において、得られた懸濁液をミリングした。適切な粒径（Ｍａｌｖｅｒｎで測定）に達するまで、攪拌機速度２０００ｒｐｍにてミリングを行った。

ミリング後：
薬物ナノ懸濁液１２に関して、濃縮ナノ懸濁液６５ｍｌ（または７０．４ｇ）を採取し、２００ｍｇ／ｍｌ ＰＶＰ Ｋ１７ストック溶液１２．２ｍｌを添加し、均一になるまで混合物を攪拌した。２００ｍｇ／ｍｌグルコースストック溶液（グルコース一水和物２
２０ｍｇ／ｍｌ）１６．３ｍｌを添加し、均一になるまで混合物を攪拌した。最終体積（９７．５ｍｌ）または最終重量（１０３．６ｇ）になるまで、注射用水を添加した。

薬物ナノ懸濁液１３に関して、濃縮ナノ懸濁液６５ｍｌ（または７０．４ｇ）を採取し、２００ｍｇ／ｍｌ ＰＶＰ Ｋ１７ストック溶液１２．２ｍｌを添加し、均一になるまで混合物を攪拌した。２００ｍｇ／ｍｌグルコースストック溶液（グルコース一水和物２２０ｍｇ／ｍｌ）１１．２ｍｌを添加し、均一になるまで混合物を攪拌した。３００ｍｇ／ｍｌクエン酸ストック溶液（ｐＨ５．５）１．６ｍｌを添加し、均一になるまで混合物を攪拌した。ｐＨ６になるまで、ＮａＯＨ溶液を添加した。最終体積（９７．５ｍｌ）または最終重量（１０３．６ｇ）になるまで、注射用水を添加した。

薬物ナノ懸濁液１４に関して、濃縮ナノ懸濁液６５ｍｌ（または７０．４ｇ）を採取し、２００ｍｇ／ｍｌ ＰＶＰ Ｋ１７ストック溶液１２．２ｍｌを添加し、均一になるまで混合物を攪拌した。３００ｍｇ／ｍｌクエン酸ストック溶液（ｐＨ５．５）５．２ｍｌを添加し、均一になるまで混合物を攪拌した。ｐＨ６になるまで、ＮａＯＨ溶液を添加した。最終体積（９７．５ｍｌ）または最終重量（１０３．６ｇ）になるまで、注射用水を添加した。

薬物ナノ懸濁液１５に関して、濃縮ナノ懸濁液６５ｍｌ（または７０．４ｇ）を採取し、２００ｍｇ／ｍｌ ＰＶＰ Ｋ１７ストック溶液１２．２ｍｌを添加し、均一になるまで混合物を攪拌した。１００ｍｇ／ｍｌ ＮａＣｌストック溶液５．９ｍｌを添加し、均一になるまで混合物を攪拌した。最終体積（９７．５ｍｌ）または最終重量（１０３．６ｇ）になるまで、注射用水を添加した。

薬物ナノ懸濁液１２〜１５を以下のように凍結乾燥させた：
各配合物３ｍＬを８ｍｌライオバイアルに満たした。次いで、ＨＯＦパイロットプラント凍結乾燥機で凍結乾燥を行った。凍結乾燥サイクルは以下のように行った：２０℃でローディングし；５℃で４５分間、−５℃で２０分間、−５０℃で２時間４０分、−２０℃で２時間１０分、−５０℃で４０分間凍結し；真空（０．０８ミリバール）下にて、−５０℃で２分間の後、４０℃で４２時間２１分乾燥させ、２０℃で４０分間さらに乾燥させる。

凍結乾燥前（ＦＤ）に決定された、かつ凍結乾燥直後（Ｔ０）および４０℃にて１ヶ月および３ヶ月貯蔵した後に決定されたｄ^１０、ｄ^５０、ｄ^９０およびｄ^９９（μｍ）を表４に示す。ナノ懸濁液は、水中で、リルピビリン３００ｍｇ／ｍｌの相当する濃度に再構成された。（高張性）

Claims (21)

1. 薬物と、室温で固体である立体安定剤と、を含む凍結乾燥ナノ懸濁液。
2. 前記立体安定剤が室温で結晶質固体である、請求項１に記載の凍結乾燥ナノ懸濁液。
3. 前記立体安定剤が室温で非晶質固体である、請求項１に記載の凍結乾燥ナノ懸濁液。
4. 前記立体安定剤が、ポリマーまたは界面活性剤から選択される、請求項１から３のいずれか一項に記載の凍結乾燥ナノ懸濁液。
5. 前記立体安定剤が界面活性剤である、請求項４に記載の凍結乾燥ナノ懸濁液。
6. 前記界面活性剤がポロキサマーである、請求項５に記載の凍結乾燥ナノ懸濁液。
7. 前記ポロキサマーがポロキサマー３３８である、請求項６に記載の凍結乾燥ナノ懸濁液。
8. 凍結保護物質をさらに含む、請求項１から７のいずれか一項に記載の凍結乾燥ナノ懸濁液。
9. 前記凍結保護物質が、ポリビニルピロリドン、ショ糖、トレハロースから選択される、請求項８に記載の凍結乾燥ナノ懸濁液。
10. 前記凍結保護物質がポリビニルピロリドンである、請求項９に記載の凍結乾燥ナノ懸濁液。
11. 前記薬物が、わずかに可溶性、ごくわずかに可溶性または実質的に不溶性の薬物である、請求項１から１０のいずれか一項に記載の凍結乾燥ナノ懸濁液。
12. 前記薬物が、４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリルまたはその立体異性体形；またはその薬学的に許容される塩である、請求項１から１１のいずれか一項に記載の凍結乾燥ナノ懸濁液。
13. 前記薬物が、４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリル塩基である、請求項１２に記載の凍結乾燥ナノ懸濁液。
14. 前記薬物が、Ｅ−４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリルである、請求項１から１３のいずれか一項に記載の凍結乾燥ナノ懸濁液。
15. 請求項１から１４のいずれか一項に記載の凍結乾燥ナノ懸濁液を水性分散媒で再構成することによって得られる、水性ナノ懸濁液。
16. 請求項１に記載の凍結乾燥ナノ懸濁液を水性分散媒で再構成することによって得られる水性ナノ懸濁液であって、再構成されたナノ懸濁液が、組成物の全体積に対して重量で：
    （ａ）３％〜５０％（ｗ／ｖ）、または１０％〜４０％（ｗ／ｖ）、または１０％〜３０％（ｗ／ｖ）、または１０％（ｗ／ｖ）、または２０％（ｗ／ｖ）、または３０％（ｗ
    ／ｖ）の４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリル、特にリルピビリン；
    （ｂ）０．５％〜１０％、または０．５％〜２％（ｗ／ｖ）、または３％（ｗ／ｖ）、または５％（ｗ／ｖ）の本発明による立体安定剤、例えばポロキサマー、例えばポロキサマー３３８；
    （ｃ）０〜２０％（ｗ／ｖ）、または０〜１０％（ｗ／ｖ）、または５％（ｗ／ｖ）の凍結保護物質または分散保護物質、例えばＰＶＰ；
    （ｄ）０％〜１０％、または０％〜５％、または０％〜２％、または０％〜１％の１種または複数種の緩衝剤；
    （ｅ）０％〜１０％、または０％〜６％（ｗ／ｖ）の等張化剤；
    （ｆ）０％〜２％（ｗ／ｖ）の保存剤；および
    （ｇ）全体で１００％とするための適量の注射用水；
    を含む、水性ナノ懸濁液。
17. リルピビリンを含む、請求項１６に記載の水性ナノ懸濁液。
18. 請求項１から１４のいずれか一項に記載の凍結乾燥ナノ懸濁液を水性分散媒で再構成することを特徴とする、水性ナノ懸濁液を調製する方法。
19. 薬学的に許容される水性担体中の４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリルまたはその立体異性体形；またはその薬学的に許容される塩の再構成ナノ懸濁液状で、治療有効量の４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリルまたはその立体異性体形；またはその薬学的に許容される塩を含む、筋肉内または皮下注射で投与するための医薬組成物であって：
    前記ナノ懸濁液が、
    （ａ）４−［［４−［［４−（２−シアノエテニル）−２，６−ジメチルフェニル］アミノ］−２−ピリミジニル］アミノ］ベンゾニトリルまたはその立体異性体形；またはその薬学的に許容される塩；および
    （ｂ）室温で固体である立体安定剤；
    （ｃ）任意に凍結保護物質または分散保護物質；
    を含む凍結乾燥ナノ懸濁液から再構成される、医薬組成物。
20. リルピビリンを含む、請求項１９に記載の医薬組成物。
21. ポロキサマー３３８を含む、請求項２０に記載の医薬組成物。

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