CN115776881A

CN115776881A - 长效配制品

Info

Publication number: CN115776881A
Application number: CN202180048521.2A
Authority: CN
Inventors: R·霍尔姆; I·C·F·费福尔特; 董文玉; M·科伦坡
Original assignee: Janssen Pharmaceutica NV
Current assignee: Janssen Pharmaceutica NV
Priority date: 2020-07-09
Filing date: 2021-07-08
Publication date: 2023-03-10
Also published as: EP4178540A1; JP2023532981A; WO2022008644A1; CA3184868A1

Abstract

本发明涉及用于经由肌内或皮下注射施用的药物组合物，这些药物组合物包含悬浮在药学上可接受的水性载体中的微米或纳米颗粒的活性成分并且包含作为表面改性剂的PEG4000；还涉及此类药物组合物在治疗和预防病原性分枝杆菌感染中的用途。

Description

长效配制品

技术领域

本发明涉及用于经由肌内或皮下注射施用的药物组合物，其包含悬浮在药学上可接受的水性载体中的微米或纳米颗粒的活性药物成分(API)，并且其含有PEG4000。它还涉及此类组合物的灭菌和随后的重悬。

背景技术

长效配制品的目的可以是减少药物负荷(burden)。这对于可能持续几个月的治疗方案特别有用。

需要施用的剂型的次数和/或体积通常称为“药丸负荷”。出于很多原因，如摄入频率，高药丸负荷是不希望的，高药丸负荷通常具有以下不便：必须吞咽大剂型，连同需要储存或运输大量的或大体积的药丸。高药丸负荷增加了患者不服用他们的完整剂量的风险，由此不能遵守规定的剂量方案。同样地，减小了治疗的有效性，这还导致出现耐药性(例如贝达喹啉情况下的细菌耐药性)。

由此提供涉及以长时间间隔(如一周或更长、或甚至一个月或更长)施用剂型的治疗将是有吸引力的。

本领域已知多种配制品，包括长效配制品。例如，已知微米和纳米悬浮技术在抗HIV药物领域中实现了长效制剂，例如国际专利申请WO 2007/147882和WO 2012/140220中所描述的。另外，例如在EP-A-0 499 299中已经描述了现有技术中已知的纳米颗粒。此类颗粒具有亚微米范围内的平均粒度并且由结晶的原料药的颗粒组成，这些颗粒在其表面吸附有表面改性剂。纳米颗粒也已经被用于配制难溶于水的活性成分。

抗结核病药物贝达喹啉的长效配制品还描述于国际专利申请WO 2019/012100中。

与此类长效配制品的制造和适用性相关的挑战涉及以下事实：即必须对它们进行灭菌(这对注射剂是重要的，例如，如果旨在将它们进行静脉内、肌内或皮下施用)。有多种不同的方式对此类长效配制品进行灭菌，包括通过加热灭菌、高压灭菌和γ-辐射。一些方法的实例描述于，例如美国专利/申请US 5,298,262、US 5,346,702和US 2010/255102中。对于加热灭菌和高压灭菌，重要的是能够选择可高压灭菌的(例如，不降解的)赋形剂(例如，表面改性剂或表面活性剂)。在此类灭菌后出现进一步的挑战，这些挑战与长效配制品的希望的稳定性、该配制品内活性药物成分(API)颗粒的不希望的聚集以及配制品的希望的重悬性(re-suspendability)相关联(灭菌(例如高压灭菌)后)。美国专利US 5,298,262和US 5,346,702披露了使用浊点改性剂来防止灭菌期间的颗粒聚集。浊点是如下的温度，高于该温度时，表面活性剂(或表面改性剂)发生相分离并从溶液中沉淀出。悬浮液的加热灭菌或高压灭菌必须在表面活性剂/表面改性剂的浊点以下进行，因为否则，当加热高于它们浊点温度时，由于溶解度变化，它们会发生相分离并沉淀。这将使颗粒(活性药物成分的颗粒)从表面游离(free)并且颗粒将由此聚集。浊点改性剂(或增效剂)的想法是使得灭菌或高压灭菌过程的温度更高并且由此防止或限制颗粒聚集。US 5,298,262和US 5,346,702中提及的浊点改性剂包括离子型浊点改性剂和非离子型浊点改性剂，如十二烷基硫酸钠、十二烷基三甲基溴化铵、聚乙二醇和丙二醇。作为浊点改性剂提及的聚乙二醇包括PEG300、PEG400、PEG1000和PEG2000，其中说明了PEG400是优选的，并且在实例中，特别是PEG400和PEG1000示出能使浊点(Tetronic 908的浊点)升高。其他浊点改性剂或增效剂还描述于多种其他文献中。

现在描述另外的可替代的和/或改善的长效配制品，并且本发明涉及此类配制品。

发明内容

本发明涉及用于通过肌内或皮下注射施用的药物组合物，其包含治疗有效量的微米或纳米颗粒的悬浮液形式的活性药物成分或其药学上可接受的盐，该药物组合物包含：

(a)微米或纳米颗粒形式的活性药物成分或其药学上可接受的盐，和表面改性剂；以及

(b)药学上可接受的水性载体，

该药物组合物的特征在于该表面改性剂包含PEG4000等，并且其中该组合物进行灭菌(例如通过高压灭菌)和重悬，其中这种组合物在本文中可以称为“本发明的一种或多种组合物”。

PEG4000(或聚乙二醇4000)是已知的高分子量聚合物，其中4000是指以道尔顿计的近似平均分子量。PEG4000可从比如西格玛奥德里奇公司(Sigma-Aldrich)的来源商购，因此照这样使用PEG4000。然而，包含在本发明范围(例如，当使用术语“PEG4000”或“PEG4000等”时)内的是其他高分子量聚乙二醇，例如高于1000以及高达8000的那些(例如，PEG1000至PEG8000，例如PEG2000至PEG6000)，即使在特定实施例中，当本文在本发明的上下文中提及时，PEG基团是PEG3000至PEG5000(例如，PEG3500至PEG4500)。如本文所指示，PEG旁边的数字代表以道尔顿计的平均分子量，正如应当理解的，大多数PEG包括具有分子量分布的分子，即它们是多分散的。

本发明的组合物是悬浮液，通过该悬浮液我们意指将活性药物成分(或API)悬浮在药学上可接受的水性载体中。

本发明的组合物(即，悬浮液)含有表面改性剂，其可以被吸附到活性成分(或API)的表面上。如所指示的，表面改性剂包含PEG4000等(并且还可以含有其他表面改性剂，比如下文描述的那些)。

活性药物成分是指那些具有药理、免疫或代谢作用以恢复、校正或改变生理功能或进行医学诊断的成分。活性药物成分可以是在本文所述的本发明组合物(悬浮液)的上下文中适合形成微米或纳米颗粒的任何已知活性成分。在实施例中，这种活性药物成分可以被灭菌(例如通过辐射、加热灭菌或高压灭菌)，并且在另外的实施例中，这种活性药物成分是可高压灭菌的(例如，含有这种活性药物成分的悬浮液是可高压灭菌的)。在又一个实施例中，活性药物成分在灭菌后(例如高压灭菌后)重悬。可以提及的特定API包括符合上述标准的抗生素、抗细菌药物(例如抗结核病药物)或抗病毒药物(已经批准或正在开发)(例如，可以将其微粉化以形成微米或纳米颗粒，并且含有其的悬浮液是可高压灭菌的)。可以提及的特定API是抗结核病药物贝达喹啉，该药已经在多个国家/地区获得上市批准，并且以商品名

(即贝达喹啉，配制为富马酸盐)上市。

因此，在实施例中，本发明可涉及用于通过肌内或皮下注射施用的药物组合物，其包含治疗有效量的微米或纳米颗粒的悬浮液形式的活性药物成分或其药学上可接受的盐，该药物组合物包含：

(a)微米或纳米颗粒形式的活性药物成分或其药学上可接受的盐，在其表面吸附有表面改性剂；以及

(b)药学上可接受的水性载体；其中活性成分是悬浮的，

并且其中该表面改性剂包含PEG4000等，并且其中该组合物进行灭菌(例如通过高压灭菌)和重悬。

应理解，术语“长期治疗”是指其中一次给药或一次施用(例如通过肌内或皮下注射)将在如本文所述的一段时间内具有持续治疗效果的治疗，例如在几个小时、几个周或几个月(例如，在实施例中，在至少或长达一个月、三个月或六个月的时期)内的持续治疗效果；参见实例。换言之，长期治疗可以是指在超过一次给药/施用的情况下，在给药/施用之间的(如本文所述的)长时间段(即，间隔)为如本文所述的长时间段。

在另一个方面，如本文(例如上文)所述，本文提供了一种用于长期治疗患有特定疾病或病症(例如需要抗生素、抗细菌药物或抗病毒药物)的受试者的方法，其中提供了/需要(例如本文、如下文所述的量的)一次给药或施用(并且一次给药或施用具有持续效果，例如在本文所述的时间段内)。在另一个方面，本文提供了如下长期治疗方案，其中提供/需要两次这样的给药或施用，此给药/施用间隔给予，其中间隔时间段如本文所述，例如至少或长达一个月、三个月或六个月的时期-例如在持续治疗效果持续的时间内。在另外的实施例中，提供了如下长期治疗方案，其中以如本文所述的这种间隔提供/需要三次这样的给药或施用。在又一个实施例中，提供了本文所述的长期治疗方案，但是其在引入治疗期(这不是长期治疗方案，例如每天一次的施用过程，持续一周、两周、三周或一个月)之前进行。

在另一个方面，本发明涉及用于在处于特定疾病或病症风险的受试者中长期预防这种疾病或病症的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的如上文详细说明或下文进一步详细说明的药物组合物，其中间歇施用或将要间歇施用该组合物，时间间隔的范围是一周至一年、或一周至两年。

本发明还涉及如上文详细说明或下文进一步详细说明的药物组合物用于制造用于在处于疾病或病症风险的受试者中长期预防这种疾病或病症的药物的用途，其中间歇施用或将要间歇施用该组合物，时间间隔的范围是一周至一年、或一周至两年。

在一个实施例中，本发明涉及用于如本文详细说明的用途或方法，其中间歇施用或将要施用该药物组合物，时间间隔的范围是一周至一个月、或范围是一个月至三个月、或范围是三个月至六个月、或范围是六个月至十二个月、或范围是12个月至24个月。

在另一个实施例中，本发明涉及用于如本文详细说明的用途或方法，其中每两周一次、或每个月一次、或每三个月一次施用或将要施用该药物组合物。

另外的药物组合物、治疗或预防方法，以及用于生产基于这些组合物的药物的用途将在下文描述并且意在作为本发明的部分。

还参考以下附图描述本发明：

图1：在时间零时以及1个月时参考实例A的PSD测量值，其中“概念(Concept)7”是指参考实例A

图2：在多种条件(包括高压灭菌后)下针对参考实例B和C的PSD测量值，并且其中概念3是指参考实例B，概念4是指参考实例C

图3：高压灭菌前和后实例1微米悬浮液的PSD

图4：在多种条件下(包括高压灭菌后和另外的时间后(并且在不同的温度下))实例1微米悬浮液的PSD

图5：在多种其他条件(包括在60℃下长达3个月)下实例1微米悬浮液的PSD

图6：“当以40mg/kg的剂量以200mg/ml微米配制品(参见实例1，配制品1B即微米悬浮液)IM或SC施用时，雄性大鼠中TMC207的血浆动力学”和“当以40mg/kg的剂量以200mg/ml纳米配制品(参见实例1，配制品1A即纳米悬浮液)IM或SC施用时，雄性大鼠中TMC207的血浆动力学”

图7：在大鼠中皮下施用含有不同表面活性剂(PEG 4000与TPGS组合，以及TPGS)的贝达喹啉LAI微米悬浮液的血浆浓度相对于时间的曲线；数据代表具有SD的平均值

图8：在大鼠中皮下施用含有不同表面活性剂(PEG 4000与TPGS组合，以及TPGS)的BDQ LAI微米悬浮液后贝达喹啉(BDQ)代谢物的血浆浓度相对于时间的曲线；数据代表具有SD的平均值

图9：在大鼠中肌内施用含有不同表面活性剂(PEG 4000与TPGS组合，以及TPGS)的贝达喹啉LAI微米悬浮液的血浆浓度相对于时间的曲线；数据代表具有SD的平均值

图10：在大鼠中肌内施用含有不同表面活性剂(PEG 4000与TPGS组合，以及TPGS)的BDQ LAI微米悬浮液后贝达喹啉(BDQ)代谢物的血浆浓度相对于时间的曲线；数据代表具有SD的平均值

具体实施方式

如上文所述，本发明的组合物可以含有任何合适的活性药物成分。然而，在实施例中，药物成分是合适的抗生素、抗细菌药物(例如抗结核病药物)或抗病毒药物。在特别的实施例中，用于本发明的化合物是化合物TMC207，也称为贝达喹啉。

贝达喹啉可以以其非盐形式使用或以合适的药学上可接受的盐形式使用，如酸加成盐形式或碱加成盐形式。在实施例中，在本发明的组合物中，贝达喹啉是其非盐形式。

药学上可接受的酸加成盐被定义为包含贝达喹啉能够形成的具有治疗活性的无毒酸加成盐形式。所述酸加成盐可以通过用适当的酸处理贝达喹啉的游离形式而获得，所述酸例如为无机酸，例如氢卤酸，特别是盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸和磷酸；有机酸，例如乙酸、羟基乙酸、丙酸、乳酸、丙酮酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、马来酸、富马酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、环拉酸(cyclamic acid)、水杨酸、对氨基水杨酸和双羟萘酸(pamoic acid)。特别地，考虑了富马酸盐，因为这是已在市场上销售的产品

中使用的形式。

可能的治疗活性无毒碱加成盐形式可以通过用适当的有机和无机碱处理来制备。适当的碱盐形式包括例如铵盐、碱金属盐和碱土金属盐(特别是锂盐、钠盐、钾盐、镁盐和钙盐)；与有机碱(例如苄星青霉素、N-甲基-D-葡糖胺、海巴胺(hydrabamine)盐)的盐；以及与氨基酸例如精氨酸和赖氨酸的盐。

相反地，所述酸或碱加成盐形式可以通过用适当碱或酸处理而转化为游离形式。

在本申请的框架中使用的术语加成盐还包括能够形成贝达喹啉及其盐的溶剂化物。此类溶剂化物是例如，水合物和醇化物。

每当在本文中提及使用贝达喹啉(或TMC207)时，我们是指在市售产品

中使用且在WO 2004/011436中披露为抗分枝杆菌剂的单一立体异构体形式。

已经发现，贝达喹啉的物理-化学特性允许制造具有独特药代动力学特性的微米或纳米颗粒悬浮液，其中该微米或纳米颗粒悬浮液可以用于长期治疗病原性分枝杆菌感染连同用于长期预防病原性分枝杆菌感染，并且为此目的，仅需要有限次数的药物施用。这在就药丸负荷连同患者对规定的剂量方案的依从性而言都是有益的。

如本文所用，术语“治疗病原性分枝杆菌感染”涉及治疗感染了病原性分枝杆菌感染的受试者。这种分支杆菌感染可以是分枝杆菌结核病或多重耐药分枝杆菌结核病。

术语“预防病原性分枝杆菌感染”涉及防止或避免受试者感染病原性分枝杆菌感染。感染源可以是多种多样的，例如含有病原性分枝杆菌感染的材料。

术语“治疗有效量”、“有效预防病原性分枝杆菌感染的量”和类似术语是指产生有效的血浆水平的、本发明组合物的量或浓度(或此类组合物中活性成分贝达喹啉的量/浓度)。“有效的血浆水平”是指贝达喹啉的那些血浆水平，该水平提供病原性分枝杆菌感染的有效治疗或有效预防。这是因为给予的量/剂量/施用可以与有效治疗/预防所需的暴露水平或所需的血浆水平相关联，例如如本文所述(参见例如实例)。

术语“受试者”特别涉及人类。

术语“微米或纳米颗粒”是指微米或纳米范围内的颗粒。颗粒的大小应该低于最大尺寸，超过该最大尺寸，通过皮下或肌内注射施用变得受损或甚至不再可能。所述最大尺寸取决于例如针头直径或身体对大颗粒的不利反应所施加的限制，或两者。在一个实施例中，本发明的药物组合物包含微米颗粒形式的活性成分(例如贝达喹啉)。在另一个实施例中，本发明的药物组合物包含纳米颗粒形式的活性成分(例如贝达喹啉)。

本发明的微米或纳米颗粒的平均有效粒度可以低于约50μm、或低于约20μm、或低于约10μm、或低于约1000nm、或低于约500nm、或低于约400nm、或低于约300nm、或低于约200nm。平均有效粒度的下限可以是低的，例如，低至约100nm或低至约50nm。在一个实施例中，平均有效粒度范围为约50nm至约50μm，或约50nm至约20μm、或约50nm至约10μm、或约50nm至约1000nm、约50nm至约500nm、或约50nm至约400nm、或约50nm至约300nm、或约50nm至约250nm、或约100nm至约250nm、或约150nm至约220nm、或100至200nm、或约150nm至约200nm、例如约130nm、或约150nm。例如，在制备之后和长达3个月的时间段(例如当在约5℃、25℃和40℃的温度下储存时)之后通常：

-在实施例中，微米悬浮液可以具有约3与10μm之间(例如约3.5、4或5μm)的D90和约2与4μm之间(例如约3μm)的D50

-在实施例中，纳米悬浮液可以具有约0.5与1.5μm之间(例如约或小于1μm，或约或小于1000nm)的D90和约0.1与0.5μm之间(例如约或小于约0.3μm，或小于约300nm)的D50。

在实施例中，使用微米颗粒，其中如通过D10、D50和/或D90测量的(在实施例中如通过D50测量的)平均有效粒度小于约50μm、或小于约20μm，且大于约0.1μm(100nm)。在实施例中，用于本发明的组合物中的此类微米颗粒的范围在约20μm与约0.1μm之间(在另外的实施例中，在约15μm与高于约0.2μm(200nm)之间以及在另外的实施例中，在约10μm与高于0.5μm(500nm)之间，例如在约10μm与高于1μm之间或高于约1000nm、或高于约500nm、或高于约400nm、或高于约300nm、或高于约200nm。上述值是指制备后的测量值。然而，在实施例中，所述值也可以指在长达3个月的时间段之后(例如5天、一周、两周、一个月、两个月或三个月之后)并在多种温度(例如在约5℃、25℃和40℃的温度)下储存之后的测量值。

如本文所用，术语平均有效粒度具有其如本领域普通技术人员已知的常规含义，并且可以通过本领域已知的粒度测量技术，例如像沉降场流动分级分离、光子相关谱、激光衍射或圆盘离心对其进行测量。本文提到的平均有效粒度可以涉及颗粒的体积分布。在那种情况中，“小于约50μm的有效粒度”是指至少50％体积的颗粒具有小于50μm的有效平均粒度，并且同样应用于提到的其他有效粒度。以类似方式，平均有效粒度可以涉及这些颗粒的重量分布，但是通常这将导致对于平均有效粒度的相同或大约相同的值。

本发明的药物组合物提供了活性成分(例如贝达喹啉)随延长时间段的释放，并且因此还可以称为持续或缓慢释放组合物。施用后，本发明的组合物留在体内并且稳定地释放活性成分(例如贝达喹啉)，在患者系统内保持该活性成分的此类水平持续延长的时间段，由此在所述时间段提供了病原性分枝杆菌感染的适当治疗或预防。因为以下事实：本发明的药物组合物留在体内并且稳定地释放活性成分(例如贝达喹啉)(及其活性代谢物，本文称为M2；参见下文，甲基取代的代谢物)，所以可以将它们称为适合于作为长效(或贮库)配制品的药物组合物。

如本文所用，其中术语“延长的时间段”是指期限(或时间段)，范围可以是一周上至一年或上至两年，或一个期限，范围是一至两周，或两至三周，或三至四周，或一个期限，范围是一至两个月，或两至三个月，或三至四个月，或三至六个月，或六个月至12个月，或12个月至24个月，或一个期限，范围是几天，例如7、10或12天，或几周，例如2、3或4周，或一个月，或几个月，例如2、3、4、5或六个月或甚至更长，例如7、8、9或12个月。

本发明的药物组合物可以应用于长期治疗或长期预防疾病或病症(例如与细菌或病毒感染(例如病原性分枝杆菌感染)相关的疾病或病症)，或换言之，本发明的药物组合物可以用于在延长的时间段内治疗病原性分枝杆菌感染，或预防病原性分枝杆菌感染。在疾病或病症(例如病原性分枝杆菌感染)的治疗或预防中，本发明的组合物持续一个延长的时间段有效，例如持续至少约一周或更长时间，或持续约1个月或更长时间。表述“持续至少约一周或更长时间有效”是指活性成分例如贝达喹啉(和/或其活性代谢物M2)的血浆水平将高于阈值。在治疗应用的情况下，所述阈值是活性成分(例如贝达喹啉)(和/或其活性代谢物M2)提供病原性分枝杆菌感染的有效治疗的最低血浆水平。在病原性分枝杆菌感染的预防应用的情况下，所述阈值是活性成分(例如贝达喹啉)(和/或其活性代谢物M2)可有效预防病原性分枝杆菌感染传播的最低血浆水平。

其中“长期”，例如涉及“长期预防病原性分枝杆菌感染”或“长期治疗病原性分枝杆菌感染”、或类似术语时使用，是指多个期限，范围可以是一周上至一年或上至两年，或更长，如五或10年。特别是在治疗病原性分枝杆菌感染的情况下，此类期限将会很长，大约为一至几个月、一年或更长时间。此类期限还可以较短，特别是在预防的情况下。更短期限是几天的那些，例如7、10或12天，或几周，例如2、3或4周，或一个月，或几个月，例如2、3、4、5或六个月或甚至更长，例如7、8、9或12个月。在一个实施例中，根据本发明的方法和用途被用于在一个月、或几个月，例如2、3、4、5或六个月或甚至更长、例如7、8、9或12个月期间预防病原性分枝杆菌感染。

可以按多种时间间隔施用本发明的药物组合物。当用于预防病原性分枝杆菌感染时，可以仅一次或有限次，例如两次、三次、四次、五次或六次、或更多次施用本发明的药物组合物。在有限时间段(例如其中存在感染风险的时间段)期间需要预防的情况下，这可以是可推荐的。

可以按上述时间间隔，例如按范围是一周至一个月、或范围是一个月至三个月、或范围是三个月至六个月、或范围是六个月至十二个月的时间间隔施用本发明的药物组合物。在一个实施例中，可以每两周一次、或每个月一次、或每三个月一次施用药物组合物。在另一个实施例中，时间间隔范围是一至两周、或两至三周、或三至四周，或时间间隔范围是一至两个月、或两至三个月、或三至四个月、或三至六个月、或六个月至12个月、或12个月至24个月。时间间隔可以是至少一周，但是还可以是几周，例如2、3、4、5或6周，或时间间隔是一个月，或是几个月，例如2、3、4、5或6个月或甚至更长，例如7、8、9或12个月。在一个实施例中，本发明的药物组合物是按一个、两个或三个月的时间间隔施用。本发明的药物组合物的每次施用之间的这些更长时期提供了就药丸负荷和依从性而言的进一步改进。为了进一步改善依从性，患者可以被指令服用他们的药物，其中按每周计划在周中的某一天，或在每月计划的情况下在月中的某一天施用该组合物。

本发明的组合物的每次施用之间的时间间隔长度可以变化。例如，可以按照血浆水平选择所述时间间隔。在认为活性成分(例如贝达喹啉)(和/或其活性代谢物M2)的血浆水平太低的情况下，例如，当这些水平接近下文详细说明的最小血浆水平时，间隔可以更短。在认为活性成分(例如贝达喹啉)(和/或其活性代谢物M2)的血浆水平过高的情况下，间隔可以更长。在一个实施例中，按相等时间间隔施用本发明的组合物。可以施用组合物而没有任何中间额外施用，或换言之，可以在由变化的或相等长度的时间段(例如至少一周的时间段，或本文详细说明的任何其他时段)彼此间隔开的特定时间点施用组合物，在此期间不另外施用活性成分(例如贝达喹啉)。具有相同长度时间间隔具有以下优点，即施用计划简单，例如施用发生在周中的同一天，或月中的同一天。因此此类施用计划涉及有限的“药丸负荷”，从而有益地促进患者对规定的给药方案的依从性。

用其治疗的受试者的血浆中的活性成分(例如贝达喹啉)(和/或其活性代谢物M2)的浓度(或“C”)通常表示为每单位体积的质量，典型地是每毫升的纳克数(ng/ml)。为了方便，该浓度在本文可以称为“血浆药物浓度”或“血浆浓度”。

施用的活性成分(例如贝达喹啉)的剂量(或量)取决于本发明的药物组合物中活性成分(例如贝达喹啉)的量，或取决于施用的给定组合物的量。在希望更高血浆水平的情况下，可以施用更高活性成分(例如贝达喹啉)浓度的组合物或更多给定组合物中的任一个或二者。如果希望更低血浆水平，那么这反过来也一样也可以应用。而且可以选择变化的时间间隔和变化的给药的组合，以达到某一希望的血浆水平。

施用的活性成分(例如贝达喹啉)的剂量(或量)还取决于施用频率(即每次施用之间的时间间隔)。通常，在给予更不频繁的情况下剂量将更高。所有这些参数可以用于指引血浆水平至希望的值。

给药方案还取决于设想的是疾病或病症(例如病原性分枝杆菌感染)的预防还是治疗。在治疗的情况下，选择施用的活性成分(例如贝达喹啉)的剂量或者给药频率或者两者，使得活性成分(例如贝达喹啉)的血浆浓度被保持在高于最小血浆水平。在这一上下文中，术语“最小血浆水平(或C_min)”是指活性成分(例如贝达喹啉)(和/或其活性代谢物M2)提供病原性分枝杆菌感染的有效治疗的血浆水平。特别地，活性成分(例如贝达喹啉)(和/或其活性代谢物M2)的血浆水平被保持在高于约10ng/ml、或高于约15ng/ml、或高于约20ng/ml、或高于约40ng/ml的最小血浆水平的水平上。活性成分(例如贝达喹啉)(和/或其活性代谢物M2)的血浆水平可以被保持在高于较高最小血浆水平，例如高于约50ng/ml、或高于约90ng/ml、或高于约270ng/ml、或高于约540ng/ml。在一个实施例中，活性成分(例如贝达喹啉)(和/或其活性代谢物M2)的血浆水平被保持在高于约13.5ng/ml的水平，或被保持在高于约20ng/ml的水平。或活性成分(例如贝达喹啉)(和/或其活性代谢物M2)的血浆水平可以保持在某一范围内，特别是以下范围：起始自选自上述那些的最小血浆水平并且终止在选自上述那些的更高血浆水平，并且选自500ng/ml和1000ng/ml(例如从10至15、10至20、10至40等，或从15至20、或15至40、或15至90等，或20至40、20至90、或20至270等，或40至90、40至270、或40-540等，每次从约按ng/ml计的指示值至约按ng/ml计的指示值)。在一个实施例中，所述范围是从约10至约20、从约20至约90、从90至270、从270至540、从540至1000，每次从约按ng/ml计的指示值至约按ng/ml计的指示值。

活性成分(例如贝达喹啉)(和/或其活性代谢物M2)的血浆水平应保持高于上述最小血浆水平，因为在较低水平细菌不再被充分抑制，从而它可以增殖，带来出现突变的额外风险。

在预防的情况下，术语“最小血浆水平(或C_min)”是指活性成分(例如贝达喹啉)(和/或其活性代谢物M2)提供对感染的有效治疗/预防的最低血浆水平。

特别地，在预防的情况下，活性成分(例如贝达喹啉)(和/或其活性代谢物M2)的血浆水平可以保持在高于涉及治疗的上述最小血浆水平的水平上。然而，在预防中，活性成分(例如贝达喹啉)(和/或其活性代谢物M2)的血浆水平可以保持在较低水平，例如在高于约4ng/ml、或约5ng/ml、或约8ng/ml的水平。活性成分(例如贝达喹啉)(和/或其活性代谢物M2)的血浆水平应优选地保持高于这些最小血浆水平，因为在较低水平药物会不再有效，由此增加感染传播的风险。活性成分(例如贝达喹啉)(和/或其活性代谢物M2)的血浆水平可以保持在略微更高的水平，以具有安全界限。此类更高水平起始自约50ng/ml或更高。活性成分(例如贝达喹啉)(和/或其活性代谢物M2)的血浆水平可以保持在涉及治疗的上述范围内的水平，但是其中下限包括约4ng/ml、或约5ng/ml、或约8ng/ml的血浆水平。

贝达喹啉(和/或其活性代谢物M2)的优点是其可以被以相对较高的血浆水平使用而无任何显著的副作用。贝达喹啉(和/或其活性代谢物M2)的血浆浓度可能达到相对较高的水平，但与任何药物一样，不应超过最大血浆水平(或C_max)，即贝达喹啉(和/或其活性代谢物M2)引起显著副作用的血浆水平。另外，还应考虑化合物从组织中的释放，这未在血浆水平内考虑。如本文所用，术语“显著副作用”是指存在于相关患者群中的副作用达到以下程度：副作用影响患者的正常功能。在实施例中，选择将要施用的贝达喹啉(和/或其活性代谢物M2)的施用的量和频率，使得血浆浓度长期保持在一个水平，该水平包括在最大血浆水平(或如上文详细说明的C_max)和最小血浆水平(或如上文详细说明的C_min)之间。

在某些情况下，可能希望将活性成分(例如贝达喹啉)(和/或其活性代谢物M2)的血浆水平保持在相对较低水平，例如尽可能接近本文详细说明的最小血浆水平。这将允许减小施用频率和/或每次给药所施用的活性成分(例如贝达喹啉)(和/或其活性代谢物M2)的量。还将允许避免不希望的副作用，这将有助于在多数目标人群组中剂型的接受性，所述目标人群组是具有感染风险并且因此更不倾向于耐受副作用的健康人。在预防的情况下，活性成分(例如贝达喹啉)(和/或其活性代谢物M2)的血浆水平可以被保持在相对较低水平。如上文或下文详细说明，一个实施例涉及用于预防感染的用途或方法，其中活性成分(例如贝达喹啉)(和/或其活性代谢物M2)的最小血浆水平如本文详细说明，并且最大血浆水平约等于引起活性成分发挥治疗作用的最低血浆水平，这也如本文详细说明。

在其他实施例中，活性成分(例如贝达喹啉)(和/或其活性代谢物M2)的血浆水平保持在低于约10ng/ml、更特别地约15ng/ml、进一步特别地约20ng/ml、仍更特别地约40ng/ml的较低最大血浆水平的水平上。在特定实施例中，活性成分(例如贝达喹啉)(和/或其活性代谢物M2)的血浆水平被保持在低于约13.5ng/ml的水平。在一个实施例中，活性成分(例如贝达喹啉)(和/或其活性代谢物M2)的血浆水平保持在上文详细说明的较低最大血液水平和涉及预防时提到的最小血浆水平的区间。例如，活性成分(例如贝达喹啉)(和/或其活性代谢物M2)的血浆水平保持低于约10ng/ml并且高于约4ng/ml的最小水平。

在其他情况下，可能希望将活性成分(例如贝达喹啉)(和/或其活性代谢物M2)的血浆水平保持在相对较高水平，例如在该情况下存在高感染风险并且更频繁和/或更高剂量不是问题。在这些情况下，最小血浆水平可以等于活性成分(例如贝达喹啉)(和/或其活性代谢物M2)提供病原性分枝杆菌感染的有效治疗的最低血浆水平，如本文提到的特定水平。

在预防的情况下，应该基于约0.2mg/天至约50mg/天、或0.5mg/天至约50mg/天、或约1mg/天至约10mg/天、或约2mg/天至约5mg/天、例如约3mg/天来计算将要施用的剂量。这对应于以下的每周剂量：约1.5mg至约350mg、特别地约3.5mg至约350mg、特别地约7mg至约70mg、或约14mg至约35mg，例如约35mg，或对应于以下的每月剂量：6mg至约3000mg、特别地约15mg至约1,500mg、更特别地约30mg至约300mg、或约60mg至约150mg，例如约150mg。通过将日剂量与每次施用之间的天数相乘可以容易地计算出其他给药方案的剂量。

在治疗的情况下，将要施用的剂量应该在某种程度上较高并且应该基于约1mg/天至约150mg/天、或约2mg/天至约100mg/天、或约5mg/天至约50mg/天、或约10mg/天至约25mg/天，例如约15mg/天来进行计算。可以如上文所述计算对应的每周或每月剂量。对于在预防中应用，剂量可以较低，尽管也可以使用与治疗应用相同的剂量。在实施例中，以每月间隔或每三个月或每六个月间隔给予一次给药/施用，总治疗持续时间为三个、六个月或12个月。在给药/施用为每月、每三个月或每六个月的情况下，在实施例中，给予的剂量(例如在人类受试者中)是基于给予2周的400mg日剂量计算的。因此，每次给药给予的活性成分(例如贝达喹啉)的总量可能约为5600mg(例如，在3000至8000mg范围之间)，但可以达此类量的五分之一(例如，在500至2000mg范围之间，例如在约1000与1500mg之间)。

在另一个实施例中，在预防或特别是治疗的情况下，剂量也可以以mg/kg表示。例如，在实例中，可以基于体重(例如哺乳动物的，并且如本文的实例所示，在小鼠中)施用某些剂量，因此可以采用1mg/kg至1000mg/kg之间的剂量(例如可以使用40mg/kg、80mg/kg、160mg/kg、320mg/kg或480mg/kg)，并且此类剂量可以保持4周、8周或12周的时期(例如如实例中所示)有效。例如，可以每4周服用一个剂量(有效地视为12周治疗方案，即总共三个剂量)，或可以服用有效地提供足够的治疗的单一剂量(例如，通过CFU的减少来定义，参见实例)，所述足够的治疗可以通过经12周的时段进行监测证明。因此，在一方面，为了治疗细菌感染，可以服用一个剂量(例如在1mg/kg与1000mg/kg之间，例如在2mg/kg与500mg/kg之间)或每4周服用一个此类剂量(例如可以服用二个或三个此类剂量)。此类剂量取决于待治疗的细菌感染。例如，在潜伏性结核病或麻风病的治疗中，由于控制细菌所需的贝达喹啉的含量较低，因此可能需要给予较低的剂量(与例如多重耐药结核病相比)。下文描述了一个实例，其中表明了在小鼠中在小鼠潜伏性结核病感染模型中，160mg/kg的一个剂量足以降低CFU–还可以看到160mg/kg的两个或三个剂量(分别在第4和第8周施用的第二和第三个剂量)在该模型中也有效。

已经发现，一旦施用，活性成分(例如贝达喹啉)(和/或其活性代谢物M2)的血浆水平几乎稳定，即在有限界限内波动。已经发现，在延长的时间段期间，血浆水平接近几乎稳定状态模式，或发现近似几乎零数量级释放速度。“稳定状态”是指在延长时间段，其中存在于受试者血浆内的药物的量保持在几乎相同水平的情况。活性成分(例如贝达喹啉)(和/或其活性代谢物M2)的血浆水平通常不示出任何下降到低于药物有效的最小血浆水平的情况。术语“保持在几乎相同水平”并不排除可以存在在可接受范围内的血浆浓度的小波动，例如在约±30％、或约±20％、或约±10％、或约±10％的范围内的波动。

在一些情况下，在施用后可以存在初始血浆浓度峰，此后血浆水平达到“稳定状态”，如下文所述。

本发明的组合物示出良好的局部耐受并且易于施用。良好的局部耐受涉及在注射部位的最小刺激和炎症；易于施用是指施用具体药物配制品所需的针的尺寸和时间的长度。此外，本发明的组合物还示出好的稳定性并且具有可接受的货架期。

本发明的微米或纳米颗粒具有吸附到其表面的表面改性剂。表面改性剂的功能是作为润湿剂以及胶态悬浮液的稳定剂。

在一个实施例中，本发明组合物中的微米或纳米颗粒主要包含结晶的活性成分(例如贝达喹啉或其盐)；以及表面改性剂，其组合的量可以至少包含约50％、或者至少约80％、或者至少约90％、或至少约95％、或至少约99％的微米或纳米颗粒。如本文所指示，在实施例中，贝达喹啉呈其非盐形式(或呈其“游离形式”)，并且在另外的实施例中，其呈结晶非盐(或呈游离)形式。在此方面，如本文所提及，可以使用国际专利申请WO 2004/011436(或WO 2006/125769，其描述了一种用手性试剂进行的光学拆分)中描述的程序照原样地制备贝达喹啉。按照此类程序，通过从甲苯/乙醇中沉淀获得贝达喹啉，并表明产物发生了结晶。贝达喹啉的此类形式可以用于制备本发明的组合物，另外，此类形式可以是具有以下特征的单一多晶型：

(i)在181.5℃(吸热开始)下的熔融吸热和DSC曲线表明产物在约182.5℃下的熔融(随后立即分解；通过差示扫描量热法(DSC)进行测量，通过将约3mg的化合物转移到标准的铝TA仪器(TA-Instrument)样品盘中，用适当的闭环(coer)关闭样品盘，并在配备有RCS冷却装置的TA仪器Q2000 MTDSC上使用以下参数记录DSC曲线–初始温度25℃；加热范围10℃/min；最终温度300℃，氮气流50ml/min)；

(ii)尤其地，红外(IR)谱的峰值在约1600cm^-1、约1450cm^-1、约1400cm^-1、约1340cm^-1和约1250cm^-1(其中使用可进行32次扫描的、合适的microATR附件对样品进行分析，1cm^-1分辨率，Thermo Nexus 670FTIR光谱仪，DTGS带KBr窗口检测器、KBr分束器上的Ge和一个微型ATR附件(带有Si晶体的Hairick Split-Pea))；以及/或者

(iii)X射线粉末衍射(XRPD)特征峰在约11.25°2-θ、约18°2-θ、约18.5°2-θ、约19°2-θ、约20.25°2-θ、约21.25°2-θ、约22.25°2-θ、约24.5°2-θ和约27°2-θ，显示出衍射峰不存在光晕，表明产物的结晶度(其中分析是在PANalytical(飞利浦(Philips))X’PertPRO MPD衍射仪上进行的，并且该仪器配备了Cu LFF X射线管，并且化合物散布在零背景样品架上；仪器参数为：发生器电压–45kV；发生器电流强度–40mA；几何学–布拉格-布伦塔诺(Bragg-Brentano)；载物台–旋转载物台；扫描模式–连续；扫描范围3至50°2θ；步长0.02°/步；计数时间30秒/步；旋转器旋转时间–1秒；辐射型CuKα)。

因此，在实施例中，在制备本发明组合物的方法中(即，在转化为微米/纳米颗粒之前)使用的活性成分(例如贝达喹啉)是结晶形式(例如，上文表征的特定形式)。在本发明的另外的实施例中，在本发明组合物中使用的活性成分(例如贝达喹啉)(即，在例如通过碾磨转化为微米/纳米颗粒之后)也是结晶形式(例如，上文表征的特定形式)。

在另外的方面，本发明涉及用于通过肌内或皮下注射施用的药物组合物，其包含治疗有效量的、颗粒的悬浮液形式的活性药物成分或其药学上可接受的盐，该药物组合物基本上由以下组成：

(1)微米或纳米颗粒形式的活性药物成分或其药学上可接受的盐，在其表面吸附有表面改性剂；以及

(2)药学上可接受的水性载体；其中活性成分是悬浮的，

该药物组合物的特征在于该表面改性剂包含PEG4000等，并且其中该组合物进行灭菌(例如通过高压灭菌)和重悬。

表明本发明的配制品含有PEG4000(等)，并且为了避免疑问，PEG4000(等)可以与另一种合适的表面改性剂组合。

合适的表面改性剂(其可与PEG4000等组合)可以选自从已知的有机和无机药物赋形剂，包括多种聚合物、低分子量寡聚体、天然产物和表面活性剂。特定的表面改性剂包括非离子型和阴离子型表面活性剂。表面改性剂的代表性实例包括明胶、酪蛋白、卵磷脂、带负电荷的磷脂的盐或者其酸性形式(比如磷脂酰甘油、磷脂酰肌糖、磷脂酰丝氨酸、磷脂酸和它们的盐，比如碱金属盐，例如，它们的钠盐，例如卵的磷脂酰甘油钠，如以商品名Lipoid^TM EPG可得的产品)、阿拉伯胶、硬脂酸、苯扎氯铵、聚氧乙烯烷基醚(例如，聚乙二醇醚，如聚西托醇1000、聚氧乙烯蓖麻油衍生物)；聚氧乙烯硬脂酸酷、胶体二氧化硅、十二烷基硫酸钠、羧甲基纤维素钠、胆汁盐，如牛磺胆酸钠、脱氧牛磺胆酸钠、脱氧胆酸钠；甲基纤维素、羟乙基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、硅铝酸镁、乙烯醇(PVA)、泊洛沙姆(如Pluronic^TM F68、F108和F127，其是环氧乙烷和环氧丙烷的共聚物)；泰洛沙泊(tyloxapol)；维生素E-TGPS(α-生育酚聚乙二醇琥珀酸酯，特别是α-生育酚聚乙二醇1000琥珀酸脂)；泊洛沙胺，如Tetronic^TM 908(T908)，其是环氧乙烷和环氧丙烷顺序加成到乙二胺而得到的四官能嵌段共聚物；葡聚糖；卵磷脂；磺基琥珀酸钠二辛酯，如在商品名AerosolOT^TM(AOT)下销售的产品；十二烷基硫酸钠(Duponol^TM P)；烷基芳基聚醚磺酸盐，商品名Triton^TM X-200下可得；聚氧乙烯脱水山梨糖醇脂肪酸酯(Tweens^TM 20、40、60和80)；脂肪酸的脱水山梨糖醇酯(Span^TM 20、40、60和80或Arlacel^TM20、40、60和80)；蔗糖硬脂酸酯和蔗糖二硬脂酸酯混合物，如在商品名Crodesta^TM F110或Crodesta^TM SL-40下可得到的产品；己基癸基三甲基氯化铵(CTAC)；聚乙烯吡咯烷酮(PVP)。如果需要，可以组合(与PEG4000等)使用两种或更多种表面改性剂。

可以与PEG4000(等)组合使用的特定表面改性剂选自泊洛沙姆、α-生育酚聚乙二醇琥珀酸酯、聚氧乙烯脱水山梨糖醇脂肪酸酯和带负电荷的磷脂的盐或者其酸形式。更特别地，表面改性剂选自Pluronic^TM F108、维生素E TGPS、Tween^TM 80和Lipoid^TM EPG(并且在特定实施例中，其是维生素E TPGS)。可以使用这些表面改性剂中的一种或多种。Pluronic^TMF108对应于泊洛沙姆338并且是聚氧乙烯、聚氧丙烯嵌段共聚物，其通常符合式HO-[CH₂CH₂O]_x-[CH(CH₃)CH₂O]_y-[CH₂CH₂O]_z-H，其中x、y和z的平均值分别是128、54和128。泊洛沙姆338的其他商品名为Hodag Nonionic^TM 1108-F和Synperonic^TM PE/F108。在一个实施例中，表面改性剂包含聚氧乙烯脱水山梨糖醇脂肪酸酯和磷脂酰甘油盐(特别是卵的磷脂酰甘油钠)的组合。

活性成分(例如贝达喹啉)关于表面改性剂的最佳相对量取决于所选的表面改性剂、悬浮液的比表面积(其由平均有效粒度和活性成分(例如贝达喹啉)浓度决定)、表面改性剂的临界微团浓度(如果形成微团)等。活性成分(例如贝达喹啉)与表面改性剂的相对量(w/w)优选地在以下范围内：1:2至约20:1，特别地在以下范围内：1:1至约10:1，例如在以下范围内：2:1至约10:1，例如约4:1。

如所指示的，表面改性剂含有PEG4000，但还可以含有另外的表面改性剂(例如，上文提及的表面改性剂)。在本发明的多个实施例中，本发明的组合物包含表面改性剂，该表面改性剂含有以下w/w比率的PEG4000和一种或多种其他表面改性剂：

-至少1:10的PEG4000:一种或多种其他表面改性剂

-在1:10与100:1之间(例如，在约1:10与20:1之间)的PEG4000:一种或多种其他表面改性剂

-约10:1的PEG4000:一种或多种其他表面改性剂

因此，当本发明的组合物的表面改性剂包含至少1:10w/w的比率的PEG4000(等):一种或多种其他表面改性剂时，那么其可以含有5mg/mL的PEG4000和50mg/ml的一种或多种其他的表面改性剂(例如，维生素E TPGS，本文中也简称为“TPGS”)。在实施例中，鉴于活性成分(例如贝达喹啉)与表面改性剂的相对量可以为在1:1与10:1之间(例如，约4:1)，则在此类情况下活性成分(例如贝达喹啉)可以以约200mg/ml存在(其可以形成特定的可注射配制品或剂量)。虽然本发明的组合物因含有PEG4000(等)而被区分，并且它可能是一个相对较小的量，但在实施例中，表面改性剂包含按重量计至少25％、例如按重量计至少50％的PEG4000等(并且，剩余部分为如本文所述的一种或多种其他合适的表面改性剂，例如维生素E TPGS)。例如，在实施例中，本发明的组合物的表面改性剂包含至少1:1w/w的比率的PEG4000等:一种或多种其他合适的表面改性剂。在另外的实施例中，表面改性剂包含按重量计至少75％的PEG4000等(并且，剩余部分为如本文所述的一种或多种的其他合适的表面改性剂，例如维生素E TPGS)。因此，在实施例中，本发明的组合物的表面改性剂包含至少3:1w/w的比率的PEG4000等:一种或多种其他合适的表面改性剂。在仍另外的实施例中，本发明的组合物的表面改性剂包含按重量计至少85％的PEG4000等、或在约85％与约95％之间的PEG4000等(并且，在每种情况下，剩余部分为如本文所述的一种或多种其他合适的表面改性剂，例如，维生素ETPGS)。因此，在实施例中，本发明的组合物的表面改性剂包含至少8:1w/w的比率的PEG4000等:一种或多种其他合适的表面改性剂(例如，在8:1与12:1w/w之间的比率的PEG4000等:一种或多种其他合适的表面改性剂)。

PEG4000(等)与一种或多种其他表面改性剂的比率还可以取决于所使用的其他表面改性剂；例如当一种或多种其他表面改性剂包含维生素E TPGS和/或吐温(聚氧乙烯聚醚磺酸盐)时，上文的比率可以适用，并且例如，表面改性剂包含按重量计至少60％的PEG4000，并且在实施例中，包含按重量计至少75％的PEG4000；在一种或多种其他表面改性剂包含泊洛沙姆的情况下，则比率可以为在1:10至10:1之间(的PEG:一种或多种其他表面改性剂)，例如在1:5与5:1之间，并且在实施例中为在1:2与2:1之间，并且在实施例中，在此情况下表面改性剂包含至少30％的PEG4000，例如，至少40％(并且，在特别的实施例中约50％)。在某些情况下，需要至少10％的PEG4000，但是上限可以为60％(例如，当一种或多种其他表面改性剂是泊洛沙姆时)。

如所指示的，本发明的组合物包含含有PEG4000等的表面改性剂。在实施例中，表面改性剂可以基本上由PEG4000等组成。然而，在替代性实施例中，表面改性剂还含有另一种如本文所述的合适的表面改性剂。

在本发明的组合物中使用一种或多种其他表面改性剂的情况下，那么在特定实施例中，那些其他的表面改性剂可以选自维生素E TPGS或泊洛沙姆。例如，其他的表面改性剂可以是维生素E TPGS。因此，如本文所指示，活性成分(例如贝达喹啉)与表面改性剂的w/w比率可以在2:1至10:1的范围内(例如，约4:1)，并且因此，当使用200mg/ml的活性成分(例如贝达喹啉)(例如，对于单次可注射剂量)时，那么组合物可以含有在100mg/ml与20mg/ml之间的表面改性剂。在这种情况下，并且再次如所指示的，表面改性剂的量可以含有例如至少3:1的比率的PEG4000(等)和一种或多种其他合适的表面改性剂(或按重量计至少75％的PEG4000)。因此，当存在100mg/ml的表面改性剂存在时，则表面改性剂可以由至少75mg/ml的PEG4000等组成，并且任何剩余部分都由一种或多种其他合适的表面改性剂(例如，维生素E TPGS)组成，并且当存在20mg/ml的表面改性剂时，则表面改性剂可以由至少15mg/ml的PEG4000等组成，并且任何剩余部分都由一种或多种其他合适的表面改性剂组成。由于上文指示活性成分(例如贝达喹啉)与表面改性剂的比率可以为约4:1，那么当存在200mg/ml的活性成分(例如贝达喹啉)(例如，作为一个可注射剂量)时，则表面改性剂的量可以为在约35mg/ml与60mg/ml之间(例如，约55mg/ml，在该情况下，表面改性剂可以含有约50mg/ml的PEG4000等以及约5mg/ml的一种或多种其他表面改性剂，例如维生素E TPGS)。

本发明的组合物可能需要是无菌的，以便可以将它们施用于患者。可以以多种方式(包括在无菌工艺或无菌环境中制造此类组合物)实现无菌组合物。然而，这种方法具有多种缺点、挑战并且涉及较高的成本。优选的替代方案是进行灭菌而不必遵循整个无菌工艺，并且加热灭菌、高压灭菌和γ辐射是可以实现灭菌的灭菌步骤。有利地，本发明的组合物可以被高压灭菌(即，是可高压灭菌的)，并且高压灭菌可以在不使组合物发生实质性降解或分解的情况下完成。

在灭菌后出现与以下相关联的进一步的挑战：长效配制品的希望的稳定性、此配制品内活性药物成分(API)颗粒的不希望的聚集以及配制品的希望的重悬性(灭菌(例如高压灭菌)后)。

在这种情况下，本发明的组合物可以被灭菌，例如通过加热灭菌、高压灭菌或γ辐射(在实施例中，通过高压灭菌进行灭菌)，即使浊点可能低于进行高压灭菌的温度。有利地，本发明的组合物在灭菌后可以容易地重悬(即使在灭菌过程(特别是高压灭菌过程)期间超过浊点)。

因此，在本发明另外的方面，提供了：

(a)用于对本发明的组合物进行灭菌(例如，对组合物进行高压灭菌)的方法；

(b)随后将本发明的此类组合物重悬，

该方法可以称为“本发明的方法”。实例表明PEG4000可能是重悬的关键。将理解的是，灭菌(例如加热灭菌或高压灭菌)后，例如由于相分离，可能有一些颗粒聚集(尤其是如果在高于浊点的温度下进行灭菌过程)。鉴于本发明的组合物基本上应该是悬浮液，那么重悬步骤可能是必需的(这样的悬浮步骤也可以在较晚的时间点处进行，例如正在制备悬浮液以用于其最终用途时)。本发明的组合物一开始作为悬浮液(活性成分(例如贝达喹啉)颗粒悬浮于药学上可接受的载体中)，并且表面改性剂(即，如上文定义的含有PEG4000的表面改性剂)可能被吸附在活性成分(例如贝达喹啉)的表面上–高压灭菌后，表面改性剂(本文还称为润湿剂)与活性成分(例如贝达喹啉)和/或活性成分(例如贝达喹啉)颗粒聚集之间可能发生解离。因此，重悬回初始悬浮液是必需的并且可以通过将本发明的组合物的涡旋或振荡来实现(灭菌(例如高压灭菌)后)。可以通过使表面改性剂(即，PEG4000和一种或多种其他合适的表面改性剂)吸附在活性成分(例如贝达喹啉)的表面上来使(载体中的活性成分(例如贝达喹啉)的)重悬发生。

如所指示的，灭菌(例如高压灭菌)后的重悬性可能与PEG4000的存在相关联。另外地或可替代地，使用PEG4000作为表面改性剂可能是有利的，因为PEG4000可以替代如下的表面改性剂，这种表面改性剂可能同样有效(例如，具有允许灭菌后悬浮和/或重悬性的相似特性)，但在高于一定的剂量或量(例如作为注射剂)时，被替代的表面改性剂可能是不耐受的(例如在人类中)。例如，其他表面改性剂(比如维生素E TPGS)在人类中作为注射剂在高于一定的剂量时可能是不耐受的，并且因此需要被完全替代或降低剂量/量。

可以通过高压灭菌对微米或纳米悬浮液(不含有PEG4000)进行灭菌并且可以将其充分重悬(例如，在本文定义的条件下重悬，尤其是通过涡旋小于40秒)，在这种情况下可以不需要PEG4000。然而，在重悬性不足(例如，花费超过40秒)的实施例中，例如在高压灭菌后，在这种微米或纳米悬浮液中使用PEG4000等可有助于改善重悬性(即，通过使重悬更容易，包括通过将花费的时间减少至小于40秒)。美国药典(US Pharmacopoeia)表明悬浮液应该是可再分散的，以防它们在储存等时沉降，并且目标是总体上具有悬浮液，其中重悬花费的时间尽可能短；因此在此方面，以及在本发明的方面，PEG4000(等)可以起到辅助作用。

因此，鉴于以上情况，在本发明的另外的实施例中提供了：

-PEG4000等，其在用于通过肌内或皮下注射施用的药物组合物中用作表面改性剂，其中所述组合物包含微米或纳米颗粒的悬浮液形式的活性药物成分(例如贝达喹啉)或其药学上可接受的盐，其特征在于例如在灭菌(例如高压灭菌)后，该PEG4000有助于使所述组合物重悬

-PEG4000等，其用于在使包含微米或纳米颗粒的悬浮液形式的活性药物成分(例如贝达喹啉)或其药学上可接受的盐的药物组合物重悬中使用，例如其中所述组合物已经进行灭菌(例如高压灭菌)

-PEG4000等，其在包含微米或纳米颗粒的悬浮液形式的活性药物成分(例如贝达喹啉)或其药学上可接受的盐的药物组合物中用作重悬性助剂，例如其中所述组合物已经进行灭菌(例如高压灭菌)

-PEG4000等，其用于提高(或改善)包含微米或纳米颗粒的悬浮液形式的活性药物成分(例如贝达喹啉)或其药学上可接受的盐的药物组合物的重悬性，例如其中所述组合物已经进行灭菌(例如高压灭菌)

在以上所有情况下，PEG4000等可以在本文所述的药物组合物中用于此类用途。在某些情况下，重悬性可以与没有PEG4000的药物组合物进行比较。

在另外的替代性实施例中，提供了：

-PEG4000等在包含微米或纳米颗粒的悬浮液形式的活性药物成分(例如贝达喹啉)或其药学上可接受的盐的药物组合物中作为表面改性剂的用途，其中例如在灭菌(例如高压灭菌)后，该PEG4000有助于使所述组合物重悬

-PEG4000等在使包含微米或纳米颗粒的悬浮液形式的活性药物成分(例如贝达喹啉)或其药学上可接受的盐的药物组合物重悬中的用途，例如其中所述组合物已经进行灭菌(例如高压灭菌)

-PEG4000等在包含微米或纳米颗粒的悬浮液形式的活性药物成分(例如贝达喹啉)或其药学上可接受的盐的药物组合物中作为重悬性助剂的用途，例如其中所述组合物已经进行灭菌(例如高压灭菌)

-PEG4000等用于提高(或改善)包含微米或纳米颗粒的悬浮液形式的活性药物成分(例如贝达喹啉)或其药学上可接受的盐的药物组合物的重悬性的用途，例如其中所述组合物已经进行灭菌(例如高压灭菌)

在以上所有情况下，可以在本文所述的药物组合物中使用PEG4000等。再次，在某些情况下，重悬性可以与没有PEG4000的药物组合物进行比较。

通过机械手段微粉化/粒度减小/纳米化和通过从过饱和溶液受控地沉淀，或者通过使用如GAS技术(“气体抗溶剂”)中的超临界流体，或者此类技术的任一组合，可以制备本发明的颗粒。在一个实施例中，使用一种方法，该方法包括如下步骤：将活性成分(例如贝达喹啉)分散在液体分散介质中，以及在碾磨介质存在下应用机械手段将活性成分(例如贝达喹啉)的粒度减小至小于约50μm、特别是小于约1,000nm的平均有效粒度。可以在表面改性剂存在下减小粒度。

制备本发明颗粒的一般程序包括：

(a)获得微粉化形式的活性成分(例如贝达喹啉)；

(b)向液体介质中添加微粉化的活性成分(例如贝达喹啉)以形成预混合物/预分散体；以及

(c)将该预混合物在碾磨介质存在下进行机械处理，以减小平均有效粒度。

在特定实施例中，提供了用于制备药物组合物的方法，该方法包括：

(a)获得微粉化形式的活性药物成分(例如贝达喹啉)或其药学上可接受的盐；

(b)向液体介质中添加该微粉化的活性成分(例如贝达喹啉)或其药学上可接受的盐，以形成预混合物/预分散体，其特征在于该液体介质含有如权利要求1、2、3或4中任一项所述的包含PEG4000等的表面改性剂；

(c)将该预混合物在碾磨介质存在下进行机械处理，以减小平均有效粒度；

(d)灭菌(例如高压灭菌)；以及

(e)重悬(例如，如果需要)。

在此类情况下，重悬可以通过涡旋小于40秒进行。在特定实施例中，提供了PEG4000在这种方法或此类方法中的用途。

使用本领域已知的技术制备微粉化形式的活性成分(例如贝达喹啉)。预分散体中活性成分(例如贝达喹啉活性剂)的平均有效粒度优选小于约100μm(如通过筛析测定)。当微粉化的活性成分(例如贝达喹啉)的平均有效粒度大于约100μm时，活性成分(例如贝达喹啉)化合物的粒度优选被减小至小于100μm(例如，如本文所述的粒度或粒度范围)。

然后可以将微粉化的活性成分(例如贝达喹啉)添加到液体介质中，其中微粉化的贝达喹啉基本上不可溶而形成预分散体。液体介质中活性成分(例如贝达喹啉)的浓度(重量比重量百分数)可以变化很大并且取决于所选的表面改性剂和其他因素。组合物中活性成分(例如贝达喹啉)的合适浓度在约0.1％至约60％之间，或约1％至约60％之间，或约10％至约50％之间，或约10％至约30％之间，例如约10％、20％或30％变化(在该段落中每个％是关于w/v的)。

可以通过使预混合物接受机械手段处理而直接使用以将分散体中有效平均有效粒度减小至小于2,000nm。当将球磨机用于研磨时，优选直接使用预混合物。可替代地，可以使用合适的搅拌，例如像轧制机，将活性成分(例如贝达喹啉)和任选的表面改性剂分散在液体介质中，直到实现均匀分散。

用于减小活性成分(例如贝达喹啉)的有效平均有效粒度的机械手段可以方便地采用分散磨机的形式。合适的分散磨机包括球磨机研磨机、磨碎机/碾磨机、振动磨机、平面磨机、介质磨机，如砂磨机和珠粒研磨机。介质磨机是优选的，因为需要相对较短的碾磨时间来提供所希望的粒度的减小。珠粒优选是ZrO₂珠粒。例如，对于纳米颗粒，理想的珠粒尺寸为约0.5mm，并且对于微米颗粒，理想的珠粒尺寸为约2mm。

用于粒度减小步骤的碾磨介质可以选自刚性介质，优选球形或者微粒形，具有小于3mm，更优选小于1mm的平均粒度(低至200μm珠粒)。这种介质可如所希望的以较短的处理时间提供本发明的颗粒并且对碾磨设备造成较小的磨损。碾磨介质的实例是ZrO₂，如用氧化镁稳定化或用钇稳定化的95％ ZrO₂、硅酸锆、玻璃碾磨介质、聚合珠粒、不锈钢、二氧化钛、氧化铝等。优选的碾磨介质具有大于2.5g/cm³的密度并且包括95％的用氧化镁稳定化的ZrO₂、和聚合珠粒。

研磨时间可以变化很大并且主要取决于特定机械装置和所选的加工条件而定。对于轧制机，可能需要长达2天或更长的加工时间。

应该在不会显著降解活性成分(例如贝达喹啉)化合物的温度下减小粒度。通常优选小于30℃至40℃的加工温度。如果需要，可以用常规冷却设备冷却加工设备。方便地在环境温度和对于碾磨过程是安全和有效的加工压力的条件下进行该方法。

根据本发明，药物组合物含有优选药学上可接受的水性载体。所述水性载体包括任选地与其他药学上可接受的成分混合的无菌水。后者包含用于可注射配制品的任何成分。此类成分是可选的。这些成分可以选自以下中的一种或多种：助悬剂、缓冲液、pH调节剂、防腐剂、等渗剂等成分。在一个实施例中，所述成分选自以下中的一种或多种：助悬剂、缓冲液、pH调节剂，以及任选地，防腐剂和等渗剂。特定成分可以同时作为这些试剂中的两种或更多种发挥功能，例如像防腐剂和缓冲液，或像缓冲液和等渗剂起作用。

合适的任选的缓冲剂和pH调节剂应按足以使分散体中和至非常轻微的碱性(高达pH 8.5)的量使用，优选在7至7.5的pH范围内。具体缓冲剂是弱酸盐。可以添加的缓冲剂和pH调节剂可以选自酒石酸、马来酸、甘氨酸、乳酸钠/乳酸、抗坏血酸、柠檬酸钠/柠檬酸、乙酸钠/乙酸、碳酸氢钠/碳酸、琥珀酸钠/琥珀酸、苯甲酸钠/苯甲酸、磷酸钠、三羟甲基甲胺、碳酸氢钠/碳酸钠、氢氧化铵、苯磺酸、苯甲酸钠/苯甲酸、二乙醇胺、葡萄糖酸δ内酯、盐酸、氢溴酸、赖氨酸、甲磺酸、单乙醇胺、氢氧化钠、氨丁三醇、葡糖酸、甘油酸、戊二酸(gluratic)、谷氨酸、乙二胺四乙酸(EDTA)、三乙醇胺，包括其混合物。在实施例中，本发明的组合物不含缓冲剂。在实施例中，尤其是当pH降低时，本发明的组合物确实含有缓冲液，例如柠檬酸盐-磷酸盐缓冲液。

合适的任选的防腐剂包括可以选自下组的抗微菌剂和抗氧化剂，该组由以下组成：苯甲酸、苯甲醇、丁基化羟基苯甲醚(BHA)、丁羟甲苯(BHT)、三氯叔丁醇、五倍子酸盐、羟苯酸盐、EDTA、苯酚、氯甲酚、间甲酚、苄索氯铵、肉豆寇基-γ-皮考啉氯(piccoliniumchloride)、醋酸苯汞和硫柳汞。自由基清除剂包括BHA、BHT、维生素E和抗坏血酸棕榈酸酯，以及它们的混合物。氧清除剂包括抗坏血酸钠、亚硫酸钠、L-半胱氨酸、乙酰半胱氨酸、蛋氨酸、硫代甘油、丙酮合亚硫酸氢钠、异抗坏血酸、羟丙基环糊精。螯合剂包括柠檬酸钠、EDTA钠和苹果酸。在本发明的实施例中，本发明的组合物不含防腐剂。

可以存在等渗剂(isotonizing agent)或等张剂(isotonifier)以确保本发明的药物组合物的等渗性，并且包括糖，例如葡萄糖、右旋糖、蔗糖、果糖、海藻糖、乳糖；多元糖醇，优选三元或更高级的糖醇，例如甘油、赤藓醇、阿拉伯糖醇、木糖醇、山梨糖醇和甘露醇。可替代地，氯化钠、硫酸钠、或其他适当无机盐可以用于使溶液等渗。这些等张剂可以单独使用或组合使用。悬浮液方便地包括从0至10％(w/v)、特别是0至6％的等渗性。令人关注的是非离子等张剂，例如葡萄糖，因为电解质可能会影响胶体稳定性。在本发明的实施例中，本发明的组合物含有等渗剂或等张剂，其在另外的实施例中是非离子等张剂，例如合适的糖如甘露醇。等渗剂的量如上文所述，但也可以以一定的与活性成分(例如贝达喹啉)相比的比率添加，例如活性成分(例如贝达喹啉)和等渗剂(例如甘露醇)的w/w比率可以为在1:1与10:1之间，例如在约2:1与8:1之间，尤其是在约3:1与6:1之间(例如约4:1)。

本发明的药物组合物的希望特征涉及易于施用。本发明的药物组合物的黏度应该足够低以允许通过注射施用。特别是它们应如此设计，使得它们可以容易地吸入注射器中(例如从小瓶)，在不太长的时间跨度注射穿过细针(例如20G 1¹/₂、21G 1¹/₂、22G 2或22G1¹ _/4的针)。在一个实施例中，本发明的组合物的黏度低于约75mPa·s，或低于60mPa·s。此类黏度或更低黏度的水性悬浮液通常符合上述标准。

理想地，根据本发明的水性悬浮液将包含可被耐受的尽可能多的活性成分(例如贝达喹啉)(或其药学上可接受的盐)以便保持注射体积最小，特别是从3％至70％(w/v)，或从3％至60％(w/v)，或从3％至40％(w/v)，或从10％至40％(w/v)的活性成分(例如贝达喹啉)(或其药学上可接受的盐)。在一个实施例中，本发明的水性悬浮液含有约50％-70％(w/v)的活性成分(例如贝达喹啉)(或其药学上可接受的盐)，或约40％-60％(w/v)的活性成分(例如贝达喹啉)(或其药学上可接受的盐)，或约30％-50％(w/v)的活性成分(例如贝达喹啉)(或其药学上可接受的盐)。

在一个实施例中，基于组合物的总体积，水性悬浮液可以包含按重量计：

(a)从10％至70％(w/v)、或从20％至60％(w/v)、或从20％至50％(w/v)、或从20％至40％(w/v)的活性成分(例如贝达喹啉)(或其药学上可接受的盐)；

(b)从0.5％至20％(w/v)、或从2％至15％或20％(w/v)、或从5％至15％(w/v)的润湿剂(本文中还称为表面改性剂)；

(c)从0％至10％(w/v)、或从0％至5％(w/v)、或从0％至2％(w/v)、或从0％至1％(w/v)的一种或多种缓冲剂；

(d)从0％至20％(w/v)、或从2％至15％或20％(w/v)、或从5％至15％(w/v)的等渗剂

(e)从0％至2％(w/v)的防腐剂；以及

(f)注射用水，适量添加至100％。

(a)从3％至50％(w/v)、或从10％至40％(w/v)、或从10％至30％(w/v)的活性成分(例如贝达喹啉)(或其药学上可接受的盐)；

(b)从0.5％至10％(w/v)、或从0.5％至2％(w/v)的润湿剂；

(d)从0％至10％(w/v)、或0％至6％(w/v)的等渗剂

(e)从0％至2％(w/v)的防腐剂；以及

(f)注射用水，适量添加至100％。

可以向这些悬浮液中任选地添加一个量的酸或碱，以使pH至约pH 7的值。合适的酸或碱是生理学上可接受的任何那些中的任一种，例如HCl、HBr、硫酸、碱金属氢氧化物(例如NaOH)。在实施例中，不需要将这种酸或碱添加至本发明的组合物中。

本发明还涉及如上文所述的药物组合物，其用作治疗或预防疾病或病症(例如，如本文所述)的药物。

此外，本发明涉及如本文所述的药物组合物用于制备预防或治疗疾病或病症(例如，如本文所述)的药物的用途。

本发明还涉及治疗受试者的细菌或病毒感染的方法，所述方法包括施用治疗有效量的如本文所述的药物组合物。

如本文所用，词语“基本上”并不排除“完全”，例如“基本上无”Y的组合物可以完全不含Y。必要时，词语“基本上”可以从本发明的定义中省略。与数值相连的术语“约”是指具有在数值的上下文中它的通常含义。必要时，词语“约”可以被±10％、或±5％、或±2％、或±1％的数值替代。所有在此引用的文件都通过引用以其全文结合。

以下实例旨在说明本发明并且不应理解为将本发明限制于此。

实例

方法实例：微米和纳米悬浮液的制备

活性成分贝达喹啉可以原样使用或可以转化为其药学上可接受的盐，如富马酸盐(例如市售产品

中使用的形式)。除非另有说明，否则本文所指贝达喹啉以其非盐形式使用。

贝达喹啉配制品的原形药物如下：

200和100mg/mL的纳米和微米悬浮液的制备。

使用材料：

锆珠粒0.5mm(以辅助加工)

无菌注射用水(Viaflo)

贝达喹啉(没有研磨/碾磨)

表面改性剂，包括PEG4000(等)和一种或多种其他合适的表面改性剂(例如，生育酚PEG 1000琥珀酸酯)–一种或多种赋形剂

锆珠粒2mm(以辅助加工)

甘露醇(肠胃外)–赋形剂

缓冲液(如果需要)，例如柠檬酸盐-磷酸盐缓冲液

将玻璃瓶和用作碾磨介质的ZrO₂珠粒(0.5mm或2mm，取决于所需的纳米或微米悬浮液)在高压釜中灭菌。将原料药(量取决于要制备的配制品；参见例如以下配制品/悬浮液)以及在注射用水(量取决于需要/希望的浓度；参见例如以下配制品/悬浮液)中的表面改性剂(例如PEG 4000和生育酚PEG 1000琥珀酸酯)的溶液放入玻璃瓶中。添加500μm或2mm(取决于需要/希望的是微米悬浮液还是纳米悬浮液)的平均粒度的ZrO₂珠粒。将瓶置于轧制机上。将悬浮液在100rpm下微粉化/纳米化长达72小时的时间段。例如，微粉化可以以100rpm进行3小时(或长达3小时)，纳米化可以以100rpm进行长达46小时的时期(例如约40小时)。在碾磨过程结束时，用注射器除去浓缩的微米或纳米悬浮液并填充至小瓶中。下表中描述了所得配制品(基于纳米悬浮液和微米悬浮液)。通过HPLC/UV进行浓度的测定。如果需要，制造活性成分贝达喹啉的最终浓度为200mg/ml的稀释液。将所得的悬浮液避光保持。还进行了其他浓度的制造和测试，包括300mg/ml和100mg/ml的纳米和微米配制品。

将此类配制品已经(以及将要)在动物的肌内和皮下给药以进行PK研究，以调查可能的长效作用(例如在麻风病的治疗中)。

悬浮液的物理稳定性将通过在不同的储存条件下测量粒度来跟踪。

配制品的某些实施例具有以下特征：

-微米悬浮液通过使用2mm Zr珠粒

-以200mg/mL碾磨(否则浓度可能太高，例如300mg/ml)

-更长的碾磨时间，得到纳米悬浮液

-合适的表面改性剂，例如基于物理稳定性选择的表面改性剂，例如，如本文所述的表面改性剂或润湿剂。

贝达喹啉微米悬浮液的参考实例

本文中将200mg/ml微米悬浮液称为参考实例A(没有缓冲液)以及参考实例B和C (有缓冲液)

参考实例A

	mg/ml
		贝达喹啉	200
TPGS	50
		甘露醇	50
无菌注射用水	适量

粒度分布(PSD)

储存时间	储存温度(℃)	D10(μm)	D50(μm)	D90(μm)
					0	0.820	1.99	4.96
1个月	25℃	0.704	1.59	3.64

1个月后的PSD测量值表明配制品仍然相对稳定，并且体积密度％也描绘于图1(其中“概念7”是指参考实例A)中。

使用HPLC进行的稳定性测试：

使用HPLC测试法来确定参考实例A的长效可注射配制品的稳定性。目的是测量贝达喹啉在室温下一定时间段后相对于两种已知的降解物的量。

HPLC程序：柱–ProntoSIL 120-3-C18 SH，100mm长x 3.0mm内径，3μm粒度，或等效物；柱温35℃；自动采样器温度5℃；流速0.5mL/min；检测UV；波长230nm；数据收集时间50分钟；分析运行时间60分钟；注射体积10μl；流动相A是在水中0.03M盐酸；流动相B是甲醇/乙腈/2-丙醇–45/45/10(v/v/v)。

HPLC纯度测试表明参考实例A的配制品在长时间段中仍相对稳定(鉴于降解物和贝达喹啉的相对量保持稳定)。

参考实例B和C

粒度分布(PSD)

这些配制品在多种条件(包括高压灭菌后)下的PSD表明这些配制品保持相对稳定。这在图2中示出，其中概念3是指参考实例B并且概念4是指参考实例C。

实例1–本发明的微米悬浮液

所有参考实例的悬浮液都含有维生素E TPGS，其在肠胃外(例如肌内)可能不耐受，特别是在指定的量(例如50mg/ml)时。本发明的悬浮液有利地减少了维生素E TPGS(作为表面改性剂)的量，尽管不需要将维生素E TPGS完全替代(例如，因为5mg/ml在肠胃外可能是耐受的)。使用了PEG4000(或聚乙二醇4000)，其可以由科莱恩有限公司(ClariantGmbH)提供。PEG4000是亲水剂，其可用于增加悬浮媒介物的黏度并且可充当助悬剂。

实例1配制品：

	mg/ml
		贝达喹啉	200
PEG4000	50
		TPGS	5
缓冲液–柠檬酸盐-磷酸盐	0.01N(pH 6)
		甘露醇	50
无菌注射用水	适量

在这种情况下，添加缓冲液以避免pH降低。

粒度分布(PSD)

条件	D10(μm)	D50(μm)	D90(μm)
				高压灭菌前	1.27	3.29	10.4
高压灭菌后	1.22	2.74	6.72

实例1微米悬浮液的PSD表明高压灭菌后配制品保持相对稳定。这在图3中示出。

实例1配制品的近似浊点计算为约105℃至110℃。

在Systec高压釜(VX/VE系列)中对实例1微米悬浮液进行高压灭菌，其中当前的参数是：

灭菌温度：121℃(高于计算的浊点)

灭菌时间：15分钟

卸载温度：80℃

典型的高压灭菌循环–蒸汽产生器积累需要的蒸汽压，蒸汽流入灭菌室内，在达到灭菌温度后，在灭菌时间段期间温度保持恒定，并且在该时间段过去后，具有任选的内置冷却装置的循环被冷却直到达到卸载温度。

鉴于高压灭菌温度高于测量的浊点，所以可以预期，例如由于相分离，会看到颗粒聚集。

实例1微米悬浮液的另外的数据

悬浮液经历某些条件后的粒度分布(PSD)

以上关于PSD的数据也表明实例1微米悬浮液在高压灭菌后和另外的时间(并且在不同的温度下)后保持相对稳定，这也在图4中进行了概述。

重悬性：高压灭菌后，在容器底部可以看到颗粒，因此必须振荡容器。有利地，可见在测试处，振荡后可以容易地使实例1的配制品重悬。

实例1微米悬浮液的另外的数据

悬浮液经历某些另外的条件后的粒度分布(PSD)

条件	D10(μm)	D50(μm)	D90(μm)
				碾磨4小时后、高压灭菌前	1.10	3.40	10.6
高压灭菌后，在5℃下18天	1.13	2.4	5.51
				在25℃下1个月	1.12	2.41	5.70
25℃下3个月	1.12	2.40	5.55
				在60℃下3个月	1.20	2.52	5.82

可见甚至在高压灭菌后，PSD在60℃下可以稳定甚至长达3个月，这在图5中进行了概述。

使用上述HPLC测试法来确定实例1的长效可注射配制品的稳定性。再次，目的是测量贝达喹啉在室温下某些时间段后相对于已知的降解物/杂质的量，并且给出以下结果：

结论

关键结论是，如通过PSD和在HPLC测试法中的纯度测定所确定，甚至在高压灭菌后，在高温下储存一定量的时间后，参考实例和实例1的悬浮液是稳定的。

另外的关键结论是，在高压灭菌后，甚至在高温下储存一定量的时间后，实例1的悬浮液容易地重悬。

另外的重悬性数据

在上述实例中高压灭菌后，通过涡旋相关组合物客观地测量了上述组合物的重悬性。发现没有PEG4000的组合物难以重悬(在此，重悬花费超过40秒，并且需要涡旋和振荡)，而具有PEG4000的组合物能相对容易地重悬(在此，重悬需要小于40秒的温和涡旋)。

实例1A(微米悬浮液)

粒度分布(PSD)和重悬性(实例1A)

实例1B(微米悬浮液)

粒度分布(PSD)和重悬性(实例1B)

实例1C(微米悬浮液)

粒度分布(PSD)和重悬性(实例1C)

实例1D(微米悬浮液)

粒度分布(PSD)和重悬性(实例1D)

实例1E(微米悬浮液)

粒度分布(PSD)和重悬性(实例1E)

参考实例1F(微米悬浮液)

粒度分布(PSD)和重悬性(实例1F)

实例2：药代动力学研究

小鼠、大鼠和比格犬中的药代动力学研究

小鼠、大鼠和比格犬中的多个研究描述于国际专利申请WO2019/012100中，这些研究总体上表明使用例如参考实例A的配制品，观察到了贝达喹啉和/或其活性代谢物M2在某些时间段(包括1个月、3个月和6个月)内的持续血浆浓度。

大鼠中的药代动力学曲线

在此研究中使用了200mg/mL浓度的配制品，并使用了参考实例A的微米悬浮液，即，除了200mg/ml浓度的(活性贝达喹啉的)微米颗粒之外，还使用TPGS(4:1贝达喹啉:TPGS)和在WFI(注射用水)中的50mg/ml甘露醇，没有缓冲液。贝达喹啉也称为TMC207。

这些研究表明当皮下(SC)和肌内(IM)施用时，参考实例A在雄性大鼠中在延长的时间段内产生了稳定的血浆水平。

雄性大鼠

第一次实验是在雄性大鼠中进行的，其中以40mg/kg(0.2mL/kg)的浓度皮下(SC)和肌内(IM)施用上文提及的每种相关的200mg/ml纳米悬浮液和微米悬浮液。在3个月时进行中期分析，并在6个月时随访结果。在该研究中使用了十二只大鼠。用200mg/ml微米悬浮液(参见参考实例A)对三只大鼠进行肌内(IM)给药。用200mg/ml微米悬浮液(参见参考实例A)对三只大鼠进行皮下(SC)给药。

第1阶段结果–长达2200小时

图6“当以40mg/kg的剂量以200mg/ml微米配制品(参见参考实例A)IM或SC施用时，雄性大鼠中TMC207的血浆动力学”

对于TMC207计算出以下参数(参见图)：

在适用情况下给出平均值(括号内为最小值(min)→最大值(max))

第2阶段结果–长达4400小时

在所有情况下，将BDQ或M2的血浆浓度计算为相关研究中三只大鼠的平均值。

大鼠研究：对于参考实例A的配制品(即200mg/ml浓度的微米悬浮液)，以40mg/kgSC给药(StDev＝标准偏差)和以40mg/kg IM给药

参考实例A和实例1的血浆浓度相对于时间曲线

在下图中示出了，SC注射40mg/kg后，在大鼠中研究了参考实例A(用F4标记)和实例1(用F1标记)的血浆浓度相对于时间的曲线。测量了贝达喹啉及其活性代谢物M2的浓度。

在研究的持续时间里，在所有组的所有动物中观察到了母体化合物的高于LLOQ(定量下限)的持续血浆浓度。SC施用后的前28天内，对于配制品F1和F4二者，观察到了母体化合物的2个血浆浓度峰(C_max)。28天后，两种配制品的药物血浆浓度随着时间的推移总体会聚到相似的曲线和浓度。

图7示出了在大鼠中皮下施用含有不同表面活性剂(PEG 4000与TPGS组合，以及TPGS)的贝达喹啉LAI微米悬浮液的血浆浓度相对于时间的曲线。

关于M2代谢物的血浆浓度-时间曲线，对F1和F4二者，在所有动物中再次观察到M2的高于LLOQ的持续血浆浓度。

图8示出了在大鼠中皮下施用含有不同表面活性剂(PEG 4000与TPGS组合，以及TPGS)的BDQ LAI微米悬浮液后贝达喹啉(BDQ)代谢物的血浆浓度相对于时间的曲线。

在肌内施用后，在研究的持续时间里，对于F1和F4配制品二者，在所有动物中再次观察到了上述母体的高于LLOQ的持续血浆浓度。

图9示出了在大鼠中肌内施用含有不同表面活性剂(PEG 4000与TPGS组合，以及TPGS)的贝达喹啉LAI微米悬浮液的血浆浓度相对于时间的曲线。

类似地，在肌内施用后代谢物实现了持续的血浆浓度。

图10示出了在大鼠中肌内施用含有不同表面活性剂(PEG 4000与TPGS组合，以及TPGS)的BDQ LAI微米悬浮液后贝达喹啉(BDQ)代谢物的血浆浓度相对于时间的曲线。

结论：参考实例A(F4)和实例1(F1)二者的配制品以它们自己的方式能有效实现两种药物和活性代谢物(M2)的持续释放，并且因此认为二者均适用于这种目的。

Claims

1.PEG4000等，其在用于通过肌内或皮下注射施用的药物组合物中用作表面改性剂，其中所述组合物包含微米或纳米颗粒的悬浮液形式的活性药物成分(例如贝达喹啉)或其药学上可接受的盐，其特征在于在灭菌(例如高压灭菌)后，该PEG4000有助于使所述组合物重悬。

2.PEG4000等，其用于在使包含微米或纳米颗粒的悬浮液形式的活性药物成分(例如贝达喹啉)或其药学上可接受的盐的药物组合物重悬中使用，其中所述组合物已经进行灭菌(例如高压灭菌)。

3.PEG4000等在包含微米或纳米颗粒的悬浮液形式的活性药物成分(例如贝达喹啉)或其药学上可接受的盐的药物组合物中作为表面改性剂的用途，其中在灭菌(例如高压灭菌)后，该PEG4000有助于使所述组合物重悬。

4.PEG4000等在使包含微米或纳米颗粒的悬浮液形式的活性药物成分(例如贝达喹啉)或其药学上可接受的盐的药物组合物重悬中的用途，其中所述组合物已经进行灭菌(例如高压灭菌)。

5.一种用于通过肌内或皮下注射施用的药物组合物，其包含治疗有效量的微米或纳米颗粒的悬浮液形式的活性药物成分或其药学上可接受的盐，该药物组合物包含：

(b)药学上可接受的水性载体，

6.如权利要求5所述的组合物，其中该表面改性剂包含按重量计至少75％的PEG4000等，并且剩余部分为一种或多种其他合适的表面改性剂。

7.如权利要求6所述的组合物，其中该一种或多种其他合适的表面改性剂选自泊洛沙姆、α-生育酚聚乙二醇琥珀酸酯、聚氧乙烯脱水山梨糖醇脂肪酸酯和带负电荷的磷脂的盐的组。

8.如权利要求7所述的组合物，其中该其他表面改性剂代表一种表面改性剂，其为α-生育酚聚乙二醇琥珀酸酯(TPGS)。

9.如权利要求5至8中任一项所述的组合物，其中微米或纳米颗粒的该活性成分或其药学上可接受的盐的平均有效粒度低于约50μm，特别是低于约200nm。

10.如权利要求5至9所述的组合物，其包含基于该组合物的总体积按重量计：

(a)从10％至70％(w/v)、或从20％至60％(w/v)、或从20％至50％(w/v)、或从20％至40％(w/v)的活性成分(或其药学上可接受的盐；但其中w/v是基于其非盐形式计算的)；

(b)从0.5％至20％(w/v)、或从2％至15％或20％(w/v)、或从5％至15％(w/v)的润湿剂(或表面改性剂，即，包含PEG4000等)；

(e)从0％至2％(w/v)的防腐剂；以及

(f)注射用水，适量添加至100％。

11.一种用于制备如权利要求5至10中任一项所述的药物组合物的方法，该方法包括

(d)灭菌(例如高压灭菌)；以及

(e)重悬(如果需要)。

12.如权利要求11所述的方法，其中该重悬通过涡旋小于40秒进行。

13.PEG4000在如权利要求11或权利要求12所述的方法中的用途。

14.如权利要求1或权利要求2所述使用的PEG4000等，其中该药物组合物如权利要求5至10中任一项所述。

15.如权利要求3或权利要求4所述的用途，其中该药物组合物如权利要求5至10中任一项所述。