JP2013535463A - タンパク質を精製するプロセス - Google Patents
タンパク質を精製するプロセス Download PDFInfo
- Publication number
- JP2013535463A JP2013535463A JP2013521208A JP2013521208A JP2013535463A JP 2013535463 A JP2013535463 A JP 2013535463A JP 2013521208 A JP2013521208 A JP 2013521208A JP 2013521208 A JP2013521208 A JP 2013521208A JP 2013535463 A JP2013535463 A JP 2013535463A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- host cell
- recombinant
- antibody
- protein
- seq
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
- C07K1/14—Extraction; Separation; Purification
- C07K1/30—Extraction; Separation; Purification by precipitation
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
- C07K1/107—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length by chemical modification of precursor peptides
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
- C07K1/14—Extraction; Separation; Purification
- C07K1/16—Extraction; Separation; Purification by chromatography
- C07K1/18—Ion-exchange chromatography
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
- C07K1/14—Extraction; Separation; Purification
- C07K1/16—Extraction; Separation; Purification by chromatography
- C07K1/22—Affinity chromatography or related techniques based upon selective absorption processes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
- C07K1/14—Extraction; Separation; Purification
- C07K1/36—Extraction; Separation; Purification by a combination of two or more processes of different types
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/475—Growth factors; Growth regulators
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/24—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against cytokines, lymphokines or interferons
- C07K16/241—Tumor Necrosis Factors
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/90—Isomerases (5.)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P21/00—Preparation of peptides or proteins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/10—Immunoglobulins specific features characterized by their source of isolation or production
- C07K2317/14—Specific host cells or culture conditions, e.g. components, pH or temperature
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/55—Fab or Fab'
Abstract
Description
a.宿主細胞試料又はその抽出物のpHをpH5以下に調整して、組換えジスルフィドイソメラーゼを沈殿させるステップ、及び
b.沈殿した組換えジスルフィドイソメラーゼを組換えタンパク質から分離して、組換えタンパク質試料を提供するステップ
を含む方法が提供される。
a.宿主細胞試料又はその抽出物のpHをpH範囲3.5から5に調整して、組換えDsbCを沈殿させるステップ、及び
b.沈殿した組換えDsbCを分離して、精製された組換え抗体又はその断片を含有する試料を提供するステップ
を含む方法が提供される。
配列番号1は、CDP870のCDRH1のアミノ酸配列を示す。
・ 細胞から一部若しくは全ての化学的物質を抽出するための部分的又は全細胞溶解から得られる材料、又は
・ 細胞から発現されるタンパク質の1つ又は複数が液相内に放出されるように細胞をプロセシングすることから得られる材料
を言うために用いられる。
・ FkpA、Skp、SurA、PPiA、及びPPiDなどの、タンパク質のフォールディングを促進し得る1つ又は複数のタンパク質、並びに/又は
・ SecY、SecE、SecG、SecYEG、SecA、SecB、FtsY、及びLepなどの、タンパク質の分泌若しくは転位を促進し得る1つ又は複数のタンパク質、並びに/又は
・ DsbA、DsbB、DsbD、DsbGなどの、ジスルフィド結合の形成を促進し得る1つ又は複数のタンパク質。
・ FkpA、Skp、SurA、PPiA、及びPPiDなどの、タンパク質のフォールディングを促進し得る1つ又は複数のタンパク質、
・ SecY、SecE、SecG、SecYEG、SecA、SecB、FtsY、及びLepなどの、タンパク質の分泌若しくは転位を促進し得る1つ又は複数のタンパク質、並びに
・ DsbA、DsbB、DsbD、DsbGなどの、ジスルフィド結合の形成を促進し得る1つ又は複数のタンパク質。
・ 組換えタンパク質及び組換えジスルフィドイソメラーゼを発現する宿主細胞の集団を含む溶液、
・ 宿主細胞を除去するための遠心分離及び/又は濾過の後の、組換えタンパク質及び組換えジスルフィドイソメラーゼを発現する宿主細胞の集団の上清、
・ 熱処理などの抽出ステップの後の、組換えタンパク質及び組換えジスルフィドイソメラーゼを発現する宿主細胞の集団の抽出物、或いは
・ 熱処理などの抽出ステップ並びに1つ又は複数のその後の遠心分離及び/又は濾過のステップの後の、組換えタンパク質及び組換えジスルフィドイソメラーゼを発現する宿主細胞の集団の抽出物
に対して行うことができる。
組換えDsbC及び組換え抗体を発現する宿主細胞系の生成
全ての実験で、大腸菌細胞系W3110を親野生型細胞系として用いた。
a.突然変異したTsp遺伝子、
b.突然変異したTsp遺伝子及び運搬組換えDsbC、
c.突然変異したTsp遺伝子及び突然変異したspr遺伝子、
d.突然変異したTsp遺伝子及び突然変異したspr遺伝子及び運搬組換えDsbC。
MXE001株を以下のように生成した:
Tspカセットを、SalI制限断片、NotI制限断片として、同様に制限されたpKO3プラスミド内に移動させた。pKO3プラスミドは、染色体組み込み事象を起こして選択するためのクロラムフェニコールマーカーと共に、pSC101複製起点(RepA)の温度感受性の突然変異体を用いる。レバンスクラーゼをコードするsacB遺伝子は、ショ糖上で成長した大腸菌に対して致死的であり、したがって、(クロラムフェニコールマーカー及びpSC101起点と共に)脱組み込み事象及びプラスミドキュアリング事象を起こして選択するために用いられる。この方法論は、以前に記載されている(Hamilton et al., 1989, Journal of Bacteriology, 171, 4617-4622、及びBlomfield et al., 1991, Molecular Microbiology, 5, 1447-1457)。pKO3系は、挿入された遺伝子を除いて全ての選択マーカーを宿主ゲノムから除去する。
EcoRI制限マーカー及びAseI制限マーカーを含む、配列番号15で示されるノックアウト突然変異したTsp遺伝子を含むpMXE191。
5ul 緩衝液×10(Roche)
1ul dNTPミックス(Roche、10mMミックス)
1.5ul 5’オリゴ(5pmol)
1.5ul 3’オリゴ(5pmol)
2ul 細胞溶解物
0.5ul TaqDNAポリメラーゼ(Roche 5U/ul)
38.5ul H2O
PCRサイクル
94℃ 1分
94℃ 1分)
55℃ 1分)30サイクル反復
72℃ 1分)
72℃ 10分
spr突然変異を生じさせ、相補性アッセイの使用に選択した。
1.V98E
2.D133A
3.V135D
4.V135G
5.G147C
6.S95F及びY115F
pMXE336、pK03 spr S95F(−SalI)
pMXE337、pK03 spr Y115F(−SalI)
pMXE338、pK03 spr G147C(−SalI)
pMXE339、pK03 spr D133A(−SalI)
pMXE340、pK03 spr V135D (−SalI)
pMXE341、pK03 spr V135G(−SalI)
pMXE342、pK03 spr V98E(−SalI)
pMXE343、pK03 spr C94A(−SalI)
pMXE344、pK03 spr H145A(−SalI)
pMXE345、pK03 spr H157A(−SalI)
pMXE346、pK03 spr W174R(−SalI)
抗TNF Fab’の重鎖配列及び軽鎖配列とDsbCをコードする配列との両方を含有するプラスミドを構築した。
MXE008株を、Fab’軽鎖、Fab’重鎖、及びDsbCをコードするプラスミドで形質転換した。
株MXE008を、Sambrook et al 1989, Molecular cloning: a laboratory manual. CSHL press, N.Y.において見ることができる従来の制限クローニング方法を用いて構築された、CDP870のFab’(配列番号9で示される軽鎖配列及び配列番号10で示される重鎖配列を有する抗TNF Fab’)の発現ベクターである、プラスミドpMXE117(pTTO CDP870又は40.4 IGS2)で形質転換した。プラスミドpMXE117(pTTO CDP870又は40.4 IGS2)は、強力なtacプロモーター配列及びlacオペレーター配列という特徴を含んでいた。Fabの軽鎖遺伝子及び重鎖遺伝子を、単一のジシストロン性メッセージとして転写した。大腸菌OmpAタンパク質に由来するシグナルペプチドをコードするDNAを、軽鎖遺伝子配列及び重鎖遺伝子配列の両方の5’末端に融合し、これは、大腸菌ペリプラズムへのポリペプチドの転位を指示した。転写を、二重転写ターミネーターrrnB t1t2を用いて終結させた。lacIq遺伝子は、構成的に発現したLacIリプレッサータンパク質をコードした。これは、脱抑制がアロラクトース又はIPTGの存在によって誘発されるまで、tacプロモーターからの転写を抑制した。用いられた複製起点はp15Aであり、これは、少ないコピー数を維持した。プラスミドは、抗生物質の選択のためのテトラサイクリン耐性遺伝子を含有していた。
組換え抗体抗TNF Fab’を発現する宿主細胞の成長
例1において生産されたMXE008株を、抗TNFαFab’を発現させるための発酵実験において用いた。
大腸菌株からの抗TNFαFab’の抽出及びpH調整
例2からの凍結ペレット細胞ペレットを次いで解凍し、抽出緩衝液(0.1MのTris/10mMのEDTA、pH7.4)内に再懸濁させた。抽出は、60℃で一晩行った。
逆相HPLCによるpH調整の後の宿主細胞試料抽出物の分析
pH5.0、4.5、若しくは3.0へのpH調整の後の各宿主細胞試料抽出物試料、又は対照試料(pH調整なし、pH7)を、時点(T)=0、T=1時間、T=2時間、T=4.5時間、T=8時間、及びT=24時間の時間経過にわたって採取し、リアルタイムの分析を、逆相HPLCを介して行った。逆相HPLCは、疎水性に基づくタンパク質の分離を可能にし、適切なHPLCカラム(Agilent Technologiesの、Poroshell(商標)300SB−C8、5ミクロン、2.1×75mm)を用いて行われた。試料を分析の前に濾過した(0.22um)。
試料のSDS−PAGE分析
非還元SDS−PAGE分析を、pH7、pH5.0、pH4.5、及びpH3.0での長期保存の後に行った。図7は、SDS−PAGE分析ゲルを示す。図7から、DBPの量が、pH3へのpH調整の後に低減していることが分かる。DsbC及びFab’の重鎖(HC)は、ゲル上で同一の分子量を示すが、DsbC及びHCのバンドが、DsbCの低減に起因して、pH5、pH4.5、及びpH3へのpH調整の後に低減していることが分かり、このことにより、DsbC−ヒス及びDBPの量がpH調整後に低減していることが確認される。
Claims (25)
- 組換えタンパク質をグラム陰性細菌宿主細胞試料又はその抽出物から精製するための方法であって、前記宿主細胞が、組換えタンパク質及び組換えジスルフィドイソメラーゼDsbCを発現し、
a.宿主細胞試料又はその抽出物のpHをpH5以下に調整して、組換えジスルフィドイソメラーゼを沈殿させるステップ、及び
b.沈殿した組換えジスルフィドイソメラーゼを組換えタンパク質から分離して、組換えタンパク質試料を生産するステップ
を含む上記方法。 - 宿主細胞試料又はその抽出物のpHがpH4.5以下に調整される、請求項1に記載の方法。
- 宿主細胞試料又はその抽出物のpHがpH4.5から3.0に調整される、請求項2に記載の方法。
- 宿主細胞試料又はその抽出物のpHがpH3以下に調整される、請求項2に記載の方法。
- ステップa)において宿主細胞ジペプチド結合タンパク質がさらに沈殿し、ステップb)において宿主細胞ジペプチド結合タンパク質がさらに組換えタンパク質から分離される、請求項4に記載の方法。
- ジスルフィドイソメラーゼがヒスチジンタグを含む、請求項1から5までのいずれか一項に記載の方法。
- グラム陰性細菌宿主細胞が大腸菌(E.coli)である、請求項1から6までのいずれか一項に記載の方法。
- 宿主細胞がFkpa及び/又はSkpを含む、請求項1から7までのいずれか一項に記載の方法。
- ステップa)において、宿主細胞試料又はその抽出物のpHが、氷酢酸を用いてpH5未満に調整される、請求項1から8までのいずれか一項に記載の方法。
- 宿主細胞試料又はその抽出物がpH5以下で1時間以下にわたり保持される、請求項1から9までのいずれか一項に記載の方法。
- ステップb)における分離が遠心分離及び/又は濾過を含む、請求項1から10までのいずれか一項に記載の方法。
- ステップb)の後に、組換えタンパク質試料をクロマトグラフィーに供するさらなる精製ステップを含む、請求項1から11までのいずれか一項に記載の方法。
- クロマトグラフィーがイオン交換クロマトグラフィーである、請求項11に記載の方法。
- ステップb)の後に、組換えタンパク質試料のpHがpH5から7に調整される、請求項1から13までのいずれか一項に記載の方法。
- ステップa)の前に、抽出緩衝液が宿主細胞試料又はその抽出物に添加され、宿主細胞試料又はその抽出物が熱処理ステップに供される、請求項1から14までのいずれか一項に記載の方法。
- 組換えタンパク質がpI6から9を有する、請求項1から15までのいずれか一項に記載の方法。
- 組換えタンパク質がpI8から9を有する、請求項16に記載の方法。
- 組換えタンパク質が組換え抗体である、請求項1から17までのいずれか一項に記載の方法。
- 組換え抗体が、モノクローナル抗体、ヒト化抗体、若しくはキメラ抗体、又はその断片、例えばその結合断片である、請求項18に記載の方法。
- 組換え抗体がFab断片又はFab’断片である、請求項18又は請求項19に記載の方法。
- 組換え抗体がヒトTNFαに特異的である、請求項18から20までのいずれか一項に記載の方法。
- 抗体が、可変ドメインがCDRH1について配列番号1、CDRH2について配列番号2、及びCDRH3について配列番号3で示される配列を有するCDRを含む重鎖、並びに可変ドメインがCDRL1について配列番号4、CDRL2について配列番号5、及びCDRL3について配列番号6で示される配列を有するCDRを含む軽鎖を含む、請求項21に記載の方法。
- 抗体が、配列番号7で示される軽鎖可変領域配列及び配列番号8で示される重鎖可変領域を含む、請求項22に記載の方法。
- 抗体がFab断片であり、配列番号10で示される配列を有する重鎖及び配列番号9で示される配列を有する軽鎖を含む、請求項23に記載の方法。
- 組換えタンパク質をコードする発現ベクターで形質転換されたグラム陰性細菌宿主細胞試料又はその抽出物のpHをpH5以下に調整して、宿主細胞組換えジスルフィドイソメラーゼを沈殿させ、沈殿した宿主細胞組換えジスルフィドイソメラーゼを組換えタンパク質から分離し、精製された組換えタンパク質試料を生産するステップの使用。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
GBGB1012599.5A GB201012599D0 (en) | 2010-07-27 | 2010-07-27 | Process for purifying proteins |
GB1012599.5 | 2010-07-27 | ||
PCT/GB2011/001129 WO2012013930A2 (en) | 2010-07-27 | 2011-07-27 | Process for purifying proteins |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2013535463A true JP2013535463A (ja) | 2013-09-12 |
JP5935222B2 JP5935222B2 (ja) | 2016-06-15 |
Family
ID=42752868
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2013521208A Active JP5935222B2 (ja) | 2010-07-27 | 2011-07-27 | タンパク質を精製するプロセス |
Country Status (24)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US9751930B2 (ja) |
EP (1) | EP2598516B8 (ja) |
JP (1) | JP5935222B2 (ja) |
KR (1) | KR101944121B1 (ja) |
CN (1) | CN103189385B (ja) |
AU (1) | AU2011284548B2 (ja) |
BR (1) | BR112013000177B1 (ja) |
CA (1) | CA2804099C (ja) |
CY (1) | CY1116526T1 (ja) |
DK (1) | DK2598516T3 (ja) |
ES (1) | ES2537877T3 (ja) |
GB (1) | GB201012599D0 (ja) |
HR (1) | HRP20150639T1 (ja) |
HU (1) | HUE026049T2 (ja) |
IL (1) | IL224044A (ja) |
ME (1) | ME02162B (ja) |
MX (1) | MX337184B (ja) |
PL (1) | PL2598516T3 (ja) |
PT (1) | PT2598516E (ja) |
RS (1) | RS54085B1 (ja) |
SG (2) | SG196862A1 (ja) |
SI (1) | SI2598516T1 (ja) |
SM (1) | SMT201500142B (ja) |
WO (1) | WO2012013930A2 (ja) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US9920125B2 (en) | 2012-05-31 | 2018-03-20 | Agency For Science, Technology And Research | Methods for use of mixed multifunctional surfaces for reducing aggregate content in protein preparations |
JP2021078502A (ja) * | 2015-03-06 | 2021-05-27 | ジェネンテック, インコーポレイテッド | 超精製DsbA及びDsbC、ならびにそれらの作製及び使用方法 |
Families Citing this family (12)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
PL2993231T3 (pl) | 2009-09-24 | 2019-01-31 | Ucb Biopharma Sprl | Szczep bakteryjny do ekspresji rekombinowanego białka mający degp pozbawione aktywności proteazowej przy zachowaniu aktywności białka opiekuńczego i nokauty genów tsp i ptr |
GB201000590D0 (en) | 2010-01-14 | 2010-03-03 | Ucb Pharma Sa | Bacterial host strain |
GB201000587D0 (en) | 2010-01-14 | 2010-03-03 | Ucb Pharma Sa | Bacterial hoist strain |
GB201000591D0 (en) | 2010-01-14 | 2010-03-03 | Ucb Pharma Sa | Bacterial hoist strain |
GB201001791D0 (en) | 2010-02-03 | 2010-03-24 | Ucb Pharma Sa | Process for obtaining antibodies |
PT2731973T (pt) | 2011-07-13 | 2018-02-22 | Ucb Biopharma Sprl | Estirpe hospedeira bacteriana que expressa dsbc recombinante |
GB201208367D0 (en) * | 2012-05-14 | 2012-06-27 | Ucb Pharma Sa | Biological product |
EP2855504B1 (en) | 2012-05-31 | 2018-10-24 | Agency For Science, Technology And Research | Chromatographic purification of immunoglobulin g preparations with particles having multimodal functionalities |
AU2015371341B2 (en) | 2014-12-22 | 2021-05-20 | Ucb Biopharma Sprl | Method of protein manufacture |
CA2969889A1 (en) * | 2014-12-22 | 2016-06-30 | Ucb Biopharma Sprl | Protein manufacture |
CN110272491B (zh) * | 2018-03-13 | 2023-01-24 | 江苏恒瑞医药股份有限公司 | 一种抗pd-1抗体的纯化工艺 |
KR20220031670A (ko) * | 2019-08-05 | 2022-03-11 | 와커 헤미 아게 | 발효 방법에서 재조합 단백질 방출용 박테리아 균주 |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2002504826A (ja) * | 1997-06-09 | 2002-02-12 | ボード・オヴ・リージェンツ,ザ・ユニヴァーシティ・オヴ・テキサス・システム | 細菌細胞における異種ジスルフィド結合含有ポリペプチドを生成する方法 |
Family Cites Families (56)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
GB8422238D0 (en) | 1984-09-03 | 1984-10-10 | Neuberger M S | Chimeric proteins |
GB8719042D0 (en) | 1987-08-12 | 1987-09-16 | Parker D | Conjugate compounds |
US5030570A (en) | 1988-06-30 | 1991-07-09 | The Eunice Kennedy Shriver Center For Mental Retardation | DNA encoding and method of expressing human monoamine oxidase type A |
US5530101A (en) | 1988-12-28 | 1996-06-25 | Protein Design Labs, Inc. | Humanized immunoglobulins |
GB8907617D0 (en) | 1989-04-05 | 1989-05-17 | Celltech Ltd | Drug delivery system |
GB8928874D0 (en) | 1989-12-21 | 1990-02-28 | Celltech Ltd | Humanised antibodies |
EP0542810A1 (en) | 1990-08-02 | 1993-05-26 | B.R. Centre Limited | Methods for the production of proteins with a desired function |
US5264365A (en) | 1990-11-09 | 1993-11-23 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Protease-deficient bacterial strains for production of proteolytically sensitive polypeptides |
US5508192A (en) | 1990-11-09 | 1996-04-16 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Bacterial host strains for producing proteolytically sensitive polypeptides |
GB9112536D0 (en) | 1991-06-11 | 1991-07-31 | Celltech Ltd | Chemical compounds |
GB9113120D0 (en) | 1991-06-18 | 1991-08-07 | Kodak Ltd | Photographic processing apparatus |
GB9120467D0 (en) | 1991-09-26 | 1991-11-06 | Celltech Ltd | Anti-hmfg antibodies and process for their production |
WO1993008829A1 (en) | 1991-11-04 | 1993-05-13 | The Regents Of The University Of California | Compositions that mediate killing of hiv-infected cells |
GB9215540D0 (en) | 1992-07-22 | 1992-09-02 | Celltech Ltd | Protein expression system |
US6027888A (en) * | 1996-04-05 | 2000-02-22 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Methods for producing soluble, biologically-active disulfide-bond containing eukaryotic proteins in bacterial cells |
GB9625640D0 (en) | 1996-12-10 | 1997-01-29 | Celltech Therapeutics Ltd | Biological products |
EP1190258B1 (en) | 1999-06-29 | 2006-10-25 | Siga Technologies, Inc. | Assay for degp protease inhibitors |
GB0006398D0 (en) | 2000-03-16 | 2000-05-03 | Novartis Ag | Organic compounds |
GB0013810D0 (en) | 2000-06-06 | 2000-07-26 | Celltech Chiroscience Ltd | Biological products |
AU8867501A (en) | 2000-09-01 | 2002-03-13 | Biogen Inc | Co-crystal structure of monoclonal antibody 5c8 and cd154, and use thereof in drug design |
AU2001287040A1 (en) | 2000-09-01 | 2002-03-13 | Biogen, Inc. | Methods of designing and producing novel compounds having improved binding affinity for cd154 or other trimeric proteins |
US7041479B2 (en) * | 2000-09-06 | 2006-05-09 | The Board Of Trustess Of The Leland Stanford Junior University | Enhanced in vitro synthesis of active proteins containing disulfide bonds |
ES2312494T3 (es) | 2000-12-14 | 2009-03-01 | Genentech, Inc. | Produccion de anticuerpos completos en celulas procariotas. |
ATE318890T1 (de) | 2000-12-14 | 2006-03-15 | Genentech Inc | Bakterielle wirtstämme |
WO2004003019A2 (en) | 2002-06-28 | 2004-01-08 | Domantis Limited | Immunoglobin single variant antigen-binding domains and dual-specific constructs |
TWI327597B (en) | 2001-08-01 | 2010-07-21 | Centocor Inc | Anti-tnf antibodies, compositions, methods and uses |
CA2454731C (en) | 2001-08-27 | 2010-11-02 | Genentech, Inc. | A system for antibody expression and assembly |
GB0124317D0 (en) | 2001-10-10 | 2001-11-28 | Celltech R&D Ltd | Biological products |
EP2022799A2 (en) | 2001-11-16 | 2009-02-11 | Biogen Idec Inc. | Polycistronic expression of antibodies |
GB0129105D0 (en) | 2001-12-05 | 2002-01-23 | Celltech R&D Ltd | Expression control using variable intergenic sequences |
WO2004042017A2 (en) * | 2002-10-31 | 2004-05-21 | Genentech, Inc. | Methods and compositions for increasing antibody production |
EP1570267B1 (en) | 2002-12-03 | 2011-10-12 | UCB Pharma, S.A. | Assay for identifying antibody producing cells |
ZA200504990B (en) | 2003-01-09 | 2006-08-30 | Genentech Inc | Purification of polypeptides |
GB0303337D0 (en) | 2003-02-13 | 2003-03-19 | Celltech R&D Ltd | Biological products |
AU2004253868B2 (en) | 2003-06-13 | 2011-06-16 | Biogen Ma Inc. | Aglycosyl anti-CD154 (CD40 ligand) antibodies and uses thereof |
PL1639011T3 (pl) | 2003-06-30 | 2009-05-29 | Domantis Ltd | Pegilowane przeciwciała jednodomenowe (dAb) |
GB0315450D0 (en) | 2003-07-01 | 2003-08-06 | Celltech R&D Ltd | Biological products |
GB0315457D0 (en) | 2003-07-01 | 2003-08-06 | Celltech R&D Ltd | Biological products |
AU2004261198A1 (en) | 2003-07-26 | 2005-02-10 | Biogen Idec Ma Inc. | Altered antibodies having improved antigen-binding affinity |
WO2006033702A2 (en) | 2004-07-26 | 2006-03-30 | Biogen Idec Ma Inc. | Anti-cd154 antibodies |
WO2006028936A2 (en) | 2004-09-02 | 2006-03-16 | Genentech, Inc. | Heteromultimeric molecules |
US7563443B2 (en) | 2004-09-17 | 2009-07-21 | Domantis Limited | Monovalent anti-CD40L antibody polypeptides and compositions thereof |
GB0425534D0 (en) | 2004-11-19 | 2004-12-22 | Celltech R&D Ltd | Process for obtaining antibodies |
SI2125894T1 (sl) | 2007-03-22 | 2019-05-31 | Biogen Ma Inc. | Vezavne beljakovine, vključno s protitelesi, derivati protiteles in fragmenti protiteles, ki specifično vežejo CD154, ter njihove uporabe |
US7662587B1 (en) | 2009-03-05 | 2010-02-16 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Gene knockout mutations that increase peptide production |
PL2993231T3 (pl) | 2009-09-24 | 2019-01-31 | Ucb Biopharma Sprl | Szczep bakteryjny do ekspresji rekombinowanego białka mający degp pozbawione aktywności proteazowej przy zachowaniu aktywności białka opiekuńczego i nokauty genów tsp i ptr |
US8470552B2 (en) | 2009-10-12 | 2013-06-25 | Keck Graduate Institute | Strategy to reduce lactic acid production and control PH in animal cell culture |
EP2496601B1 (en) | 2009-11-05 | 2017-06-07 | F. Hoffmann-La Roche AG | Methods and composition for secretion of heterologous polypeptides |
GB201000588D0 (en) * | 2010-01-14 | 2010-03-03 | Ucb Pharma Sa | Bacterial host strain |
GB201000591D0 (en) | 2010-01-14 | 2010-03-03 | Ucb Pharma Sa | Bacterial hoist strain |
GB201000587D0 (en) | 2010-01-14 | 2010-03-03 | Ucb Pharma Sa | Bacterial hoist strain |
GB201000590D0 (en) | 2010-01-14 | 2010-03-03 | Ucb Pharma Sa | Bacterial host strain |
GB201001791D0 (en) | 2010-02-03 | 2010-03-24 | Ucb Pharma Sa | Process for obtaining antibodies |
PT2731973T (pt) | 2011-07-13 | 2018-02-22 | Ucb Biopharma Sprl | Estirpe hospedeira bacteriana que expressa dsbc recombinante |
EP2546267A1 (en) | 2011-07-13 | 2013-01-16 | UCB Pharma S.A. | Bacterial host strain expressing recombinant DsbC |
GB201208367D0 (en) | 2012-05-14 | 2012-06-27 | Ucb Pharma Sa | Biological product |
-
2010
- 2010-07-27 GB GBGB1012599.5A patent/GB201012599D0/en not_active Ceased
-
2011
- 2011-07-27 EP EP11745810.9A patent/EP2598516B8/en active Active
- 2011-07-27 AU AU2011284548A patent/AU2011284548B2/en active Active
- 2011-07-27 US US13/812,350 patent/US9751930B2/en active Active
- 2011-07-27 PT PT117458109T patent/PT2598516E/pt unknown
- 2011-07-27 ES ES11745810.9T patent/ES2537877T3/es active Active
- 2011-07-27 PL PL11745810T patent/PL2598516T3/pl unknown
- 2011-07-27 WO PCT/GB2011/001129 patent/WO2012013930A2/en active Application Filing
- 2011-07-27 CN CN201180036417.8A patent/CN103189385B/zh active Active
- 2011-07-27 SG SG2014005441A patent/SG196862A1/en unknown
- 2011-07-27 HU HUE11745810A patent/HUE026049T2/en unknown
- 2011-07-27 MX MX2013000899A patent/MX337184B/es active IP Right Grant
- 2011-07-27 RS RS20150429A patent/RS54085B1/en unknown
- 2011-07-27 SI SI201130516T patent/SI2598516T1/sl unknown
- 2011-07-27 JP JP2013521208A patent/JP5935222B2/ja active Active
- 2011-07-27 KR KR1020137004911A patent/KR101944121B1/ko active IP Right Grant
- 2011-07-27 BR BR112013000177-1A patent/BR112013000177B1/pt not_active IP Right Cessation
- 2011-07-27 SG SG2013001318A patent/SG186974A1/en unknown
- 2011-07-27 DK DK11745810.9T patent/DK2598516T3/da active
- 2011-07-27 ME MEP-2015-94A patent/ME02162B/me unknown
- 2011-07-27 CA CA2804099A patent/CA2804099C/en active Active
-
2012
- 2012-12-31 IL IL224044A patent/IL224044A/en active IP Right Grant
-
2015
- 2015-06-15 HR HRP20150639TT patent/HRP20150639T1/hr unknown
- 2015-06-18 SM SM201500142T patent/SMT201500142B/xx unknown
- 2015-06-23 CY CY20151100535T patent/CY1116526T1/el unknown
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2002504826A (ja) * | 1997-06-09 | 2002-02-12 | ボード・オヴ・リージェンツ,ザ・ユニヴァーシティ・オヴ・テキサス・システム | 細菌細胞における異種ジスルフィド結合含有ポリペプチドを生成する方法 |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
JPN6015036356; Journal of Biotechnology Vol.120, 2005, p.38-45 * |
JPN6015036358; Protein Expression and Purification Vol.52, 2007, p.194-201 * |
JPN6015036359; Biochemistry Vol.32, 1993, p.12251-12256 * |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US9920125B2 (en) | 2012-05-31 | 2018-03-20 | Agency For Science, Technology And Research | Methods for use of mixed multifunctional surfaces for reducing aggregate content in protein preparations |
JP2021078502A (ja) * | 2015-03-06 | 2021-05-27 | ジェネンテック, インコーポレイテッド | 超精製DsbA及びDsbC、ならびにそれらの作製及び使用方法 |
JP7191132B2 (ja) | 2015-03-06 | 2022-12-16 | ジェネンテック, インコーポレイテッド | 超精製DsbA及びDsbC、ならびにそれらの作製及び使用方法 |
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP5935222B2 (ja) | タンパク質を精製するプロセス | |
US11384136B2 (en) | Process for obtaining antibodies | |
KR102036399B1 (ko) | 단백질 발현용 재조합 박테리아 숙주 세포 | |
CA2584226C (en) | Process for obtaining antibodies | |
JP5960607B2 (ja) | 変異体spr遺伝子及び野生型Tsp遺伝子を含む細菌宿主系統 | |
JP6132551B2 (ja) | シャペロン活性を保持するプロテアーゼ欠損DegP並びにノックアウトTsp及びptr遺伝子を持つ、組換えタンパク質発現のための細菌株 | |
CA2582726A1 (en) | Process for obtaining antibodies |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20140725 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20150908 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20151126 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20160308 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20160329 |
|
A711 | Notification of change in applicant |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A711 Effective date: 20160414 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20160422 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20160414 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 5935222 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |