JP2013500483A - 可動クロマトグラフィーカラムセパレータ - Google Patents
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Abstract
Description
a)ガイドリングの外側から内側に先細りする先細り構造、及び
b)フリットを取り付けるための、ガイドリングの内側に向けられた開口を有する切り欠き(8)
を有することを特徴とするガイドリングが記載される。
a)一つのフリット、又は
b)上フリット及び下フリットの二つのフリット
である。
a)クロマトグラフィーカラムを上クロマトグラフィーカラムチャンバと下クロマトグラフィーカラムチャンバとに分け、
b)クロマトグラフィーカラムの内壁に沿ってスライドすることによってクロマトグラフィーカラム内で可変の位置を有する
ということを特徴とする。
a)同じクロマトグラフィー官能基を有する、同じ又は異なる粒径のクロマトグラフィー材料、又は
b)異なるクロマトグラフィー官能基を有するクロマトグラフィー材料
である。
本明細書には、液クロマトグラフィーカラムにおいて使用するための円形のガイドリングであって、ガイドリングが二つの軸対称な断面区域を含む垂直断面を有し、軸対称な断面区域のそれぞれが、
a)ガイドリングの外側から内側に先細りする先細り構造、及び
b)フリットを取り付けるための、ガイドリングの内側に向けられた開口を有する切り欠き
を有することを特徴とするガイドリングが記載される。
a)セパレータが、クロマトグラフィーカラムを上クロマトグラフィーカラムチャンバと下クロマトグラフィーカラムチャンバとに分け、
b)セパレータが、クロマトグラフィーカラム内で可変の位置を有し、
c)セパレータが、クロマトグラフィー材料中に埋められている
クロマトグラフィーカラムセパレータが記載される。
―上下のクロマトグラフィーカラムチャンバ中で異なるタイプの同じクロマトグラフィー材料を使用するための手段を提供し、たとえば、上クロマトグラフィーカラムチャンバ中には、より高い機械的安定性を有するクロマトグラフィー材料を使用することができ、下クロマトグラフィーカラムチャンバ中には、より低い機械的安定性を有するクロマトグラフィー材料を使用することができ、
―下クロマトグラフィーカラムチャンバ中のクロマトグラフィー材料を交換することなく、上クロマトグラフィーカラムチャンバ中の使用された、破損した、又は崩壊したクロマトグラフィー材料を交換するための手段を提供し、
―各クロマトグラフィーカラムチャンバ中で異なるクロマトグラフィー官能基を有する異なるクロマトグラフィー材料を使用して、二つの異なるクロマトグラフィー法の組み合わせを可能にするための手段を提供する。
欧州特許第1064951B1号に記載されているようにして、エリスロポイエチンの発酵及び精製を実施した。本明細書に提示されるデータは、EP1064951の実施例1d)に記載されているように、逆相HPLCにおいてVydac C4クロマトグラフィー材料に対して得られたものである。
WO2006/072564に記載されているデータ及び方法、特に実施例10〜12にしたがって、抗IL13レセプタα抗体を産生した。
イオン交換クロマトグラフィーの場合、抗IL13Rα抗体を含むプロテインA溶出液をpH6.5に調節し、10mMリン酸カリウム緩衝液で平衡化しておいたSP-Sepharoseカチオン交換クロマトグラフィーカラムに適用した。10mMリン酸カリウム緩衝液を用いる洗浄ステップののち、抗体を50mMリン酸カリウム緩衝液pH6.5で溶出させた。SP-Sepharose溶出液のpH値をpH7.1に調節し、35mMリン酸カリウム緩衝液で平衡化しておいたQ-Sepharoseアニオン交換クロマトグラフィーカラムに適用した。精製された抗体をアニオン交換クロマトグラフィーカラムのフロースルーから得た。
本発明のクロマトグラフィーカラムセパレータを含むクロマトグラフィーカラムを用いるハイブリッドイオン交換クロマトグラフィーの場合、抗IL13Rα抗体を含むプロテインA溶出液をpH7.1に調節し、10mMリン酸カリウム緩衝液で平衡化しておいたハイブリッドクロマトグラフィーカラムに適用した。10mMリン酸カリウム緩衝液を用いる洗浄ステップののち、抗体を20mMリン酸カリウム緩衝液pH7.1で溶出させた。
Claims (20)
- 液クロマトグラフィーカラムにおいて使用するための円形のガイドリングであって、ガイドリングが二つの軸対称な断面区域を含む垂直断面を有し、前記軸対称な断面区域のそれぞれが、
a)前記ガイドリングの外側から内側に先細りする先細り構造、及び
b)フリットを取り付けるための、前記ガイドリングの内側に向けられた開口を有する切り欠き
を有することを特徴とするガイドリング。 - 前記切り欠きが長方形の切り欠きである、請求項1記載のリング。
- 前記断面区域のそれぞれが三角形形状を有し、その最長の辺が前記切り欠きの直径の少なくとも1.5倍の長さを有する、請求項1又は2記載のリング。
- 前記リングが、ゴム、プラスチック、シリコーン、ポリテトラフルオロエチレン、ポリエチレン又はポリプロピレンでできている、請求項1〜3のいずれか1項記載のリング。
- フリットを円筒形の液クロマトグラフィーカラムの中に取り付けるための、請求項1〜4のいずれか1項記載のガイドリングの使用。
- 請求項1〜4のいずれか1項記載のガイドリング及び前記ガイドリング中に取り付けられたフリットを含むクロマトグラフィーカラムセパレータ。
- 前記フリットが、
a)一つのフリット、又は
b)上フリット及び下フリットの二つのフリット
である、請求項6記載のセパレータ。 - a)前記フリットが1μm〜20μmの孔径を有する、又は
b)前記フリットそれぞれが、互いに独立して、1μm〜20μmの孔径を有し、前記上フリットの孔径が前記下フリットの孔径よりも小さい、請求項6又は7記載のセパレータ。 - 前記フリットが、金属、シリコーン、ポリプロピレン、ポリエチレン、ポリテトラフルオロエチレン、焼結材料又はそれらの組み合わせでできている、請求項6〜8のいずれか1項記載のセパレータ。
- 前記セパレータが、すべて前記セパレータの片側に取り付けられた間隔ホルダを含む、請求項6〜9のいずれか1項記載のセパレータ。
- クロマトグラフィーカラムをチャンバに分割するための、請求項6〜10のいずれか1項記載のクロマトグラフィーカラムセパレータの使用。
- クロマトグラフィーカラムを上クロマトグラフィーカラムチャンバと下クロマトグラフィーカラムチャンバとに分けるための、請求項6〜10のいずれか1項記載のクロマトグラフィーカラムセパレータの使用。
- クロマトグラフィーカラム中のクロマトグラフィー材料を二つの別々の部分に分けるための、請求項6〜10のいずれか1項記載のクロマトグラフィーカラムセパレータの使用。
- 一つのクロマトグラフィーカラム中で二つの異なるクロマトグラフィー材料を分けるための、請求項6〜10のいずれか1項記載のクロマトグラフィーカラムセパレータの使用。
- 請求項6〜10のいずれか1項記載のクロマトグラフィーカラムセパレータ一つ以上を含むクロマトグラフィーカラム。
- 前記クロマトグラフィーカラムが一つ又は二つのクロマトグラフィーカラムセパレータを含む、請求項15記載のカラム。
- いずれかのクロマトグラフィーカラムセパレータが、第一のクロマトグラフィー材料及び第二のクロマトグラフィー材料と接触し、前記第一及び第二のクロマトグラフィー材料が、
a)同じクロマトグラフィー官能基を有する、同じ又は異なる粒径のクロマトグラフィー材料、又は
b)異なるクロマトグラフィー官能基を有するクロマトグラフィー材料
である、請求項15又は16記載のカラム。 - ポリペプチドの精製のための、請求項15〜17のいずれか1項記載のクロマトグラフィーカラムの使用。
- 請求項6〜10のいずれか1項記載のクロマトグラフィーカラムセパレータの形状とは逆である形状を底に有し、前記ガイドリングの外径よりも小さい直径を有することを特徴とするクロマトグラフィーカラム充填装置。
- a)請求項6〜10のいずれか1項記載のクロマトグラフィーカラムセパレータ、
b)フィッティング、
c)クロマトグラフィーカラムセパレータ適用装置
を含むパーツのキット。
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