JP2012531459A

JP2012531459A - 新規コンジュゲート、これらの調製およびこれらの治療用途

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Publication number: JP2012531459A
Application number: JP2012518108A
Authority: JP
Inventors: ブシヤール，エルベ; ブラン，マリー−プリシーユ; コメルソン，アラン; ザン，ジードン
Original assignee: Sanofi SA
Current assignee: Sanofi SA
Priority date: 2009-06-29
Filing date: 2010-05-20
Publication date: 2012-12-10
Anticipated expiration: 2030-05-20
Also published as: CA2766762A1; SG177419A1; EP2448929A1; NI201100219A; CN102482238B; IL217208A0; CA2766762C; SV2011004086A; SG10201607595WA; CR20110670A; EA201270096A1; NZ597136A; FR2947271B1; AU2010267917B2; CN102482238A; EA024627B1; FR2947269A1; WO2011001052A1; US20120225089A1; KR20120101981A

Abstract

本発明は、式（Ｉ）

（式中、Ｒ_１は、ハロゲン原子であり、およびＲ_２は、ＯＨ基、アミノ酸ＡＡに由来するアシル基、または（Ｃ_１−Ｃ_４）アルカノイルオキシ基であり；でなければＲ_１およびＲ_２は、一緒にエポキシ単位を形成し；ＡＡは、天然または人工アミノ酸を示し；Ｒ３は、（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル基であり；Ｒ４およびＲ５は、両方ともＨであり、または一緒にＣ１３とＣ１４の間のＣＨ＝ＣＨ二重結合を形成し；Ｒ_６およびＲ_７は、互いに独立して、Ｈまたは（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル基であり；Ｒ_８およびＲ_９は、互いに独立して、Ｈまたは（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル基であり；Ｒ_１０は、Ｈ、ＯＨ基、（Ｃ_１−Ｃ_４）アルコキシ、ハロゲン原子またはＮＨ_２、ＮＨ（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル、またはＮ（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル基の中から選択されるフェニル核の少なくとも１つの置換基であり；Ｒ_１１は、Ｈまたは（Ｃ_１−Ｃ_４）アルキル基の中から選択されるフェニル核の少なくとも１つの置換基である。）の、少なくとも１つのクリプトフィシンに結合している、標的化剤であって、該標的化剤および該クリプトフィシン誘導体が共有結合しており、該結合が、ＣＲ_１単位を含有する前記フェニル核のオルト（ｏ）、メタ（ｍ）またはパラ（ｐ）位に位置するものである、標的化剤に関する。

Description

本発明は、クリプトフィシンコンジュゲートに、これらを含有する組成物に、およびこれらの治療的用途、特に抗癌剤としての治療用途に関する。本発明は、これらの化合物を調製するための方法およびクリプトフィシン誘導体自体にも関する。

クリプトフィシンは、ノストック（Ｎｏｓｔｏｃ）属のシアノバクテリアによって生産されるデプシペプチド大環状分子のクラスに属する二次代謝産物である。これらの名は、クリプトコックス（Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）属の酵母に対して高細胞傷害性であるという事実に関連している。分子のこのクラスの第一の代表、クリプトフィシン−１（Ｃ−１）は、１９９０年にシアノバクテリア・ノストック（Ｎｏｓｔｏｃ）種（ＡＴＣＣ４２７８９）から単離された（ＥｉｓｓｌｅｒＳ．ら、「Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」２００６、２２、３７４７−３７８９参照）。ＷＯ９８／０８５０５に記載のこれらの化合物の構造、一般式および炭素原子の番号付けを下記に再現する：

下記に図示するエポキシド官能基を特徴とするクリプトフィシンＣ−１およびＣ−５２は、抗癌特性を有する。肺癌の第ＩＩ相臨床試験がＣ−５２（ＬＹ３５５０７３）で行われた：ＥｄｅｌｍａｎＭ．Ｊ．ら、「ＬｕｎｇＣａｎｃｅｒ」２００３、３９、１９７−１９９；ＳｅｓｓａＣ．ら、「Ｅｕｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ」２００２、３８、２３８８−９６参照。Ｃ−５２のプロドラッグである、クリプトフィシンＣ−５５自体は、エポキシ官能基ではなくクロロヒドリン官能基を特徴とする（ＢｉｏｎｐａｌｌｙＲ．Ｒ．ら、「ＣａｎｃｅｒＣｈｅｍｏｔｈｅｒＰｈｒｍａｃｏｌ」２００３、５２、２５−３３）。Ｃ−５５は、非常に活性であることが立証されているが、溶解状態では安定でない。化合物Ｃ−５５Ｇｌｙなどのクロロヒドリングリシナートタイプの誘導体は、安定性が増すとも記載されている（ＬｉａｎｇＪ．ら、「ＩｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎａｌＮｅｗＤｒｕｇｓ」２００５、２３、２１３−２２４）。

コンジュゲート化学は、長年にわたって公知であり、細胞傷害剤の幾つかのファミリー、例えば、メイタンシノイド（ＷＯ０４／１０３２７２）、タキサン（ＷＯ０６／０６１２５８）、トマイマイシン（ＷＯ０９／０１６５１６）、レプトマイシン（ＷＯ０７／１４４７０９）、ＣＣ−１０６５およびこれらの類似体（ＷＯ２００７／１０２０６９）に応用されている；コンジュゲートに関しては、ＭｏｎｎｅｒｅｔＣ．ら、「ＢｕｌｌｅｔｉｎｄｕＣａｎｃｅｒ」２０００、８７（１１）、８２９−３８；ＲｉｃａｒｔＡ．Ｄ．ら、「ＮａｔｕｒｅＣｌｉｎｉｃａｌＰｒａｃｔｉｃｅＯｎｃｏｌｏｇｙ」２００７、４、２４５−２５５も参照のこと。しかし、抗体にまたは他の標的化剤にコンジュゲートさせたクリプトフィシン誘導体には応用されていない。

本発明が解決を意図する技術的問題は、クリプトフィシン誘導体に基づく新規コンジュゲート、およびまたコンジュゲートさせることに適した新規クリプトフィシン誘導体を提案することである。

ＥＰ０８３０１３６およびＷＯ９８／０８５０５には、クリプトフィシン誘導体が記載されているが、クリプトフィシンコンジュゲートは記載されていない。ＷＯ９８／０８５０５には、式（Ａ）のクリプトフィシン誘導体が記載されている：

（式中、Ａｒは、式：

の基Ａｒ’を表すことがあり、この式中、Ｒ_５４は、Ｈ、基（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル、（Ｃ _１ −Ｃ _６）アルキル（Ｒ _５７，Ｒ _５７ ’，Ｒ _５７ ’’）、アリール、フェニル、ヘテロシクロアルキル、ハロゲン原子、ＣＯＯＲ_５７、ＰＯ_３Ｈ、ＳＯ_３Ｈ、ＳＯ_２Ｒ_５８、ＮＲ_５９Ｒ_６０、ＮＨＯＲ_６１、ＮＨＯＲ_６１’、ＣＮ、ＮＯ_２、ＯＲ_６２、ＣＨ _２ＯＲ _６２ ’、ＣＨ _２ＮＲ _９６Ｒ _９６ ’、（Ｃ _１ −Ｃ _６）アルキルＯＲ _１００、

ＳＲ_６３を表し；Ｒ_５５およびＲ_５６は、Ｈ、基（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル、Ｃ（Ｒ _５７，Ｒ _５７ ’，Ｒ _５７ ’’）、アリール、フェニル、ヘテロシクロアルキル、ハロゲン原子、ＣＯＯＲ_５７、ＰＯ_３Ｈ、ＳＯ_３Ｈ、ＳＯ_２Ｒ_５８、ＮＲ _５９Ｒ _６０、ＮＨＯＲ_６１、ＮＨＣＨＲ_６１’、ＣＮ、ＮＯ_２、ＯＲ_６２、ＣＨ _２ＯＲ _６２’、ＣＨ _２ＯＣＯＲ _９５、ＣＨ _２ＮＲ _９６Ｒ _９６ ’、（Ｃ _１ −Ｃ _６）アルキルＯＲ _１００、（Ｃ _１ −Ｃ _６）アルキルＮＲ _５９Ｒ _６０を表す。）。ＷＯ９８／０８５０５には、とりわけ以下の化合物：

が記載されており、これらの化合物は、末端基−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏｔ−Ｂｕを特徴とする。ＷＯ９８／０８５０５には、これらの化合物がコンジュゲートさせることに適しているまたはコンジュゲートさせることを意図したものであることは明記されていない。

ＵＳ２００７／０２１３５１１には、カリケアマイシンイムノコンジュゲートが記載されている。これらの中に、ＡＭＬの治療に使用されるカリケアマイシンイムノコンジュゲート（抗ＣＤ３３−カリケアマイシン）である、ＭＹＬＯＴＡＲＧ（登録商標）（またはＣＭＡ−６７６）の名が挙げられている。コンジュゲートに関しては、ＷＯ２００６／０４２２４０も参照のこと。

Ａｌ−ａｗａｒＲ．Ｓ．ら、「Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．」２００３、４６（１４）、２９８５−３００７およびＡｌ−ａｗａｒＲ．Ｓ．ら、「Ｍｏｌ．ＣａｎｃｅｒＴｈｅｒ．」２００４、３（９）、１０６１−１０６７には、クリプトフィシン誘導体、およびまたこれらのインビボでの評価が記載されている。

ＷＯ０８／０１０１０１には、抗ＥｐｈＡ２モノクローナル抗体、およびまた該モノクローナル抗体に結合している細胞傷害性化合物の１つ以上の分子を含む対応するコンジュゲートが記載されている。ＷＯ０８／０４７２４２には、抗ＣＤ３８モノクローナル抗体、およびまた該モノクローナル抗体に結合している細胞傷害性化合物の１つ以上の分子を含む対応するコンジュゲートが記載されている。前記細胞傷害性化合物は、メイタンシノイド、タキサン、トマイマイシン、レプトマイシンおよびＣＣ−１０６５ならびにこれらの類似体から選択することができる。

ＷＯ２００９／１２６９３４には、抗ＣＤ７０抗体、および細胞傷害性化合物とのこれらのコンジュゲートが記載されており、細胞傷害剤の中にクリプトフィシンの名が挙げられている。ＷＯ２００９／１３４９７６には、必要量の細胞傷害剤を細胞に送達するために最適化された置換度を有するコンジュゲートが記載されており、細胞傷害剤の中にクリプトフィシンの名が挙げられている。

ＷＯ２００５／１１６２５５には、アプタマーのおよびクリプトフィシンである場合がある細胞傷害剤（[００３７]および表２参照）のコンジュゲートであって、リンカーがＰＥＧ鎖をことによると含む（[００３８]）ものであるコンジュゲートが記載されている。より詳細には、クリプトフィシンＣｒｙｐ−ＮＨ_２が記載されており、

ならびに次のリンカー：ＮＨＳ−ＰＥＧ−エリトリトール、ｐＮＰ−ＰＥＧ−エリトリトール、ＮＨＳ−ＰＥＧ−オクタＰＥＧ、ｐＮＰ−ＰＥＧ−オクタＰＥＧおよびＰＥＧ−ｃｏｍｂを伴うアプタマーのこのコンジュゲートも記載されている（表３および４）。フェニル環の配列（−ＣＨ_２Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＭｅ_２−ＣＨ_２ＮＨ−・・・）の種類が、本発明において想定しているものと異なる。ＷＯ２００６／０９６７５４にも、アプタマーのおよびクリプトフィシンである場合もある細胞傷害剤のコンジュゲートが記載されている。

ＷＯ２００９／００２９９３には、親水性リンカー、例えば式：

のリンカーを含む、式Ｂ−Ｌ−Ａの細胞傷害性コンジュゲートが記載されている。

前記細胞傷害剤は、クリプトフィシンである場合がある（４６頁）が、リンカーの結合点が明記されていない。コンジュゲートの一例は、ＥＣ０２６２：

であり、このコンジュゲートのリンカーおよび結合点は、本発明において想定されるものと異なる。

国際公開第９８／０８５０５号国際公開第０４／１０３２７２号国際公開第０６／０６１２５８号国際公開第０９／０１６５１６号国際公開第０７／１４４７０９号国際公開第２００７／１０２０６９号欧州特許第０８３０１３６号明細書米国特許出願公開第２００７／０２１３５１１号明細書国際公開第２００６／０４２２４０号国際公開第０８／０１０１０１号国際公開第０８／０４７２４２号国際公開第２００９／１２６９３４号国際公開第２００９／１３４９７６号国際公開第２００５／１１６２５５号国際公開第２００６／０９６７５４号国際公開第２００９／００２９９３号

ＥｉｓｓｌｅｒＳ．ら、「Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」２００６、２２、３７４７−３７８９ＥｄｅｌｍａｎＭ．Ｊ．ら、「ＬｕｎｇＣａｎｃｅｒ」２００３、３９、１９７−１９９ＳｅｓｓａＣ．ら、「Ｅｕｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ」２００２、３８、２３８８−９６ＢｉｏｎｐａｌｌｙＲ．Ｒ．ら、「ＣａｎｃｅｒＣｈｅｍｏｔｈｅｒＰｈｒｍａｃｏｌ」２００３、５２、２５−３３ＬｉａｎｇＪ．ら、「ＩｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎａｌＮｅｗＤｒｕｇｓ」２００５、２３、２１３−２２４ＭｏｎｎｅｒｅｔＣ．ら、「ＢｕｌｌｅｔｉｎｄｕＣａｎｃｅｒ」２０００、８７（１１）、８２９−３８ＲｉｃａｒｔＡ．Ｄ．ら、「ＮａｔｕｒｅＣｌｉｎｉｃａｌＰｒａｃｔｉｃｅＯｎｃｏｌｏｇｙ」２００７、４、２４５−２５５Ａｌ−ａｗａｒＲ．Ｓ．ら、「Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．」２００３、４６（１４）、２９８５−３００７Ａｌ−ａｗａｒＲ．Ｓ．ら、「Ｍｏｌ．ＣａｎｃｅｒＴｈｅｒ．」２００４、３（９）、１０６１−１０６７

定義
以下の定義が適用される：
コンジュゲート：細胞傷害性化合物の少なくとも１つの分子に共有結合で結合している細胞結合剤；
細胞結合剤：生物学的標的に対して親和性を有する分子：例えば、リガンド、タンパク質、抗体、さらに特にモノクローナル抗体、タンパク質もしくは抗体フラグメント、ペプチド、オリゴヌクレオチドまたはオリゴ糖であり得る。結合剤の機能は、細胞傷害剤のような生物活性化合物を生物学的標的に向けることである。好ましくは、結合剤は、アプタマーではない；
生物学的標的：癌細胞またはこの腫瘍と関係づけられる間質細胞の表面に好ましくは位置する抗原（または抗原群）；これらの抗原は、例えば、成長因子受容体、癌遺伝子産物または突然変異「腫瘍抑制」遺伝子産物、血管新生関連分子、接着分子であり得る；
リンカー：細胞傷害性化合物を結合剤に共有結合で結合させることができる原子団；
アルキル基：アルカンから水素原子を除去することによって得られる飽和した脂肪族の炭化水素に基づく基。アルキル基は、線状である場合もあり、または分岐している場合もある。言及することができる例としては、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、２，２−ジメチルプロピルおよびヘキシル基が挙げられる；
シクロアルキル基：環状構造に携わる３個と８個の間の炭素原子を含む環状アルキル基。言及することができる例としては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルおよびシクロヘキシル基が挙げられる；
ヘテロシクロアルキル基：環に携わっているおよび環を構成する炭素原子に連結されている少なくとも１個のヘテロ原子（Ｏ、ＳまたはＮ）を含むシクロアルキル基；
アルコキシ基：基−Ｏ−アルキル（この場合のアルキル基は、上記で定義したとおりである。）；
アルカノイルオキシ基：基−Ｏ−ＣＯ−アルキル（この場合のアルキル基は、上記で定義したとおりである。）；
アルキレン基：アルカンから２個の水素原子を除去することによって得られる、実験式−Ｃ_ｎＨ_２ｎ−の飽和した二価の基。言及することができる例としては、メチレン（−ＣＨ_２−）、エチレン（−ＣＨ_２ＣＨ_２−）、プロピレン（−ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２−）、ブチレン（−ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２−）およびヘキシレン（−ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２−）基または次の分岐基；

好ましくは、アルキレン基は、式−（ＣＨ_２）_ｎ−のものである（ｎは、整数を表す。）；
値の範囲には限度値が含まれる（例えば、「１から６にわたるｎ」または「１と６の間」というタイプの範囲は、限度値１および６を含む。）
が挙げられる。

用いる略語
ＥｔＯＡｃ：酢酸エチル；ＡＬＫ：（Ｃ_１−Ｃ_１２）アルキレン基、さらに特に（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキレン、さらに特に−（ＣＨ_２）_ｎ−の形態のもの（ｎは、１から１２および好ましくは１から６の整数である。）；ａｑ．：水性；ＴＬＣ：薄層クロマトグラフィー；ＭＳＣ：メタンスルホニルクロリド；ｃｒｙｐｔｏは、式

の単位を示し、ｃｒｙｐｔｏは、とりわけ、後で説明するＤ_１−Ｄ_８クリプトフィシン誘導体のうちの１つ即ち一例のクリプトフィシン誘導体を示す。Ｒｆ：保持係数；ＤＡＲ：置換度（薬物−抗体比）；ＤＢＵ：１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エン；ＤＣＣ：Ｎ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミド；ＤＣＭ：ジクロロメタン；ＤＥＡＤ：アゾジカルボン酸ジエチル；ＤＩＣ：Ｎ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド；ＤＩＰＥＡ：Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン；ＤＭＡ：ジメチルアセトアミド；ＤＭＡＰ：４−ジメチルアミノピリジン；ＤＭＥ：ジメトキシエタン；ＤＭＦ：ジメチルホルムアミド；ＤＭＳＯ：ジメチルスルホキシド；ＥＥＤＱ：２−エトキシ−１−エトキシカルボニル−１，２−ジヒドロキノリン；ＥＤＣＩ：Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチルカルボジイミド；ＥＤＴＡ：エチレンジアミン四酢酸；ｅｑ．：当量；Ｆｍｏｃ：フルオレニルメトキシカルボニル；ＨＯＢｔ：１−ヒドロキシベンゾトリアゾール；ＨＥＰＥＳ：４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジンエタンスルホン酸；ｍＣＰＢＡ：ｍクロロ過安息香酸；ＮＨＳ：Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド；ＮＭＰ：Ｎ−メチルピロリジノン；ＡＰ：大気圧；ＰＡＢＡＣ：「パラ−アミノベンジルアルコールカルボナート」；ＲＰ：減圧；ＳＥＣ：立体排除クロマトグラフィー；ＳＰＥ：固相抽出；ＲＴ：室温；ＴＢＤＭＳ：ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル；ＴＣＥＰ：トリス（２−カルボキシエチル）ホスフィン・塩酸塩；ＴＥＡ：トリエチルアミン；ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸；ＴＩＰＳ：トリイソプロピルシリル；ＴＨＦ：テトラヒドロフラン；ｔ_Ｒ：保持時間。

ＳＰＤＰでの結合剤のアミノ基の修飾を図示する。好ましいイミノチオランでの結合剤のアミノ基の修飾を図示する。

本発明は、式（Ｉ）：

（式中、
Ｒ_１は、ハロゲン原子を表し、およびＲ_２は、基−ＯＨ、アミノ酸ＡＡに由来するアシル基、もしくは基（Ｃ_１−Ｃ_４）アルカノイルオキシを表し；または代替的にＲ_１およびＲ_２は、エポキシド単位を形成し；
ＡＡは、天然または非天然アミノ酸を示し；
Ｒ_３は、基（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキルを表し；
Ｒ_４およびＲ_５は、両方ともＨを表し、または一緒にＣ１３とＣ１４の間の二重結合ＣＨ＝ＣＨを形成し；
Ｒ_６およびＲ_７は、互いに独立して、Ｈまたは基（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキルを表し；
Ｒ_８およびＲ_９は、互いに独立して、Ｈまたは基（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキルを表し；
Ｒ_１０は、Ｈ、基−ＯＨ、（Ｃ_１−Ｃ_４）アルコキシ、ハロゲン原子または基−ＮＨ_２、−ＮＨ（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキルもしくは−Ｎ（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル_２から選択される、フェニル核の少なくとも１つの置換基を表し；
Ｒ_１１は、Ｈおよび基（Ｃ_１−Ｃ_４）アルキルから選択されるフェニル核の少なくとも１つの置換基を表す。）
の少なくとも１つのクリプトフィシン誘導体に結合している結合剤であって、該結合剤および該クリプトフィシン誘導体が共有結合で結合しており、該結合が、単位ＣＲ_１を有するフェニル核のオルト（ｏ）、メタ（ｍ）またはパラ（ｐ）位に存在するものである結合剤に関する。

オルト（ｏ）、メタ（ｍ）またはパラ（ｐ）位：

Ｒ_１は、ハロゲン原子、さらに特にＣｌを表し、Ｒ_３は、基（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル、さらに特にＭｅを表し、Ｒ_６およびＲ_７は、互いに独立して、Ｈまたは基（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキルを表し；さらに特に、これらは、互いに独立して、Ｈまたは基Ｍｅを表し、Ｒ_８およびＲ_９は、互いに独立して、Ｈまたは基（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキルを表し；さらに特に、Ｒ_８は、Ｈを表し、およびＲ_９は、イソブチルを表す。

Ｒ_１０は、Ｈ、基ＯＨ、（Ｃ_１−Ｃ_４）アルコキシまたはハロゲン原子から選択される、フェニル核の少なくとも１つの置換基を表す。Ｒ_１０は、好ましくはフェニル核の３または４位における、基−ＮＨ_２、−ＮＨ（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキルまたは−Ｎ（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル_２、例えば−ＮＨ_２または−ＮＭｅ_２などである場合もある。さらに特に、前記フェニル核は、該フェニル核の３および４位に２つの置換基を含む。好ましくは、この置換基は、３−Ｃｌおよび４−メトキシである。Ｒ_１１は、Ｈおよび基（Ｃ_１−Ｃ_４）アルキルから選択されるフェニル核の少なくとも１つの置換基；さらに特にＨを表す。

さらに特に、置換基Ｒ_１からＲ_１１のうちの１つは、例に記載するものから選択することができる。それぞれの置換基Ｒ_１からＲ_１１は、例に記載するような空間配置（例えば、ＲもしくはＳまたは代替的にＺもしくはＥ）のうちの１つをとることもある。

ＡＡは、天然または非天然アミノ酸を表す。ＡＡは、α、βまたはγアミノ酸である場合がある。とりわけ次のアミノ酸の名を挙げることができる：アラニン（Ａｌａ）、β−アラニン、２−アミノ−２−シクロヘキシル酢酸、２−アミノ−２−フェニル酢酸、アルギニン（Ａｒｇ）、アスパラギン酸（Ａｓｐ）、システイン（Ｃｙｓ）、グルタミン（Ｇｌｎ）、グルタミン酸（Ｇｌｕ）、グリシン（Ｇｌｙ）、ヒスチジン（Ｈｉｓ）、イソロイシン（Ｉｌｅ）、ロイシン（Ｌｅｕ）、リシン（Ｌｙｓ）、メチオニン（Ｍｅｔ）、フェニルアラニン（Ｐｈｅ）、プロリン（Ｐｒｏ）、セリン（Ｓｅｒ）、トレオニン（Ｔｈｒ）、トリプトファン（Ｔｒｐ）、チロシン（Ｔｙｒ）、バリン（Ｖａｌ）、γ−アミノ酪酸、α，α−ジメチル−γ−アミノ酪酸、β，β−ジメチル−γ−アミノ酪酸、オルチニン（Ｏｒｎ）、シトルリン（Ｃｉｔ）およびまた前記アミノ酸の保護形態（例えば、アセチル、ホルミル、トシル、ニトロ）。好ましくは、ＡＡは、天然アミノ酸である。さらに特に、ＡＡは、グリシンである。

Ｒ_１およびＲ_２は、一緒にエポキシド単位を形成することもある。

クリプトフィシン誘導体と結合剤との結合は、単位ＣＲ_１を有するフェニル核のオルト（ｏ）、メタ（ｍ）またはパラ（ｐ）位に位置するリンカーＬによって生成され；従って、コンジュゲーションが可能なクリプトフィシン誘導体は、式（ＩＩ）を有する：

結合剤への結合は、前記リンカーＬの他方の末端で、該結合剤上に存在する反応性基に対して起こる。従って、Ｌは、結合剤上に存在する反応性化学基（ＲＣＧ２）に対して反応性である少なくとも１つの反応性化学基（ＲＣＧ１）を含む。ＲＣＧ１とＲＣＧ２の間の反応は、共有結合の形成により式（ＩＩ）の化合物の結合剤への結合を確実にする。このようにして式（ＩＩ）のクリプトフィシン誘導体を結合剤にコンジュゲートさせることができる。

例示するものを含めて、本発明のクリプトフィシン誘導体は、とりわけ医薬的に許容される酸の、塩基または酸付加塩の形態で存在し得る。

言及することができるＲＣＧ１の例としては、以下のものが挙げられる：
（ｉ）反応性基−ＳＺ_ａ（この基について、Ｚ_ａは、Ｈまたは基−ＳＲ_ａを表し、Ｒ_ａは、基（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル、（Ｃ_３−Ｃ_７）シクロアルキル、アリール、ヘテロアリールまたは（Ｃ_３−Ｃ_７）ヘテロシクロアルキルを表す。）；
（ｉｉ）反応性基−Ｃ（＝Ｏ）−Ｚ_ｂＲ_ｂ（この基について、Ｚ_ｂは、単結合、−Ｏ−または−ＮＨ−、さらに特に−Ｏ−を表し、およびＲ_ｂは、Ｈまたは基（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル、（Ｃ_３−Ｃ_７）シクロアルキル、アリール、ヘテロアリールもしくは（Ｃ_３−Ｃ_７）ヘテロシクロアルキルを表す。）；
（ｉｉｉ）基Ｇ＝−（ＣＨ_２）_ｎＹ［この場合、Ｙ＝−Ｃｌ、−Ｎ_３、−ＯＨ、−ＮＨ_２、
マレイミド

または
ハロアセトアミド

（この場合のＲ_１２は、Ｈまたは基（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル、さらに特にＭｅを表す。）］を含む式（ＩＩＩ）の化合物：

の場合、次の反応性基：−Ｃｌ、−Ｎ_３、−ＯＨ、−ＮＨ_２、

または

反応性基（この場合のＲ_１２は、Ｈまたは基（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル、さらに特にＭｅを表す。）のいずれか；
（ｉｖ）反応性基マレイミド

またはハロアセトアミド

（この場合のＲ_１２は、Ｈまたは基（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル、さらに特にＭｅを表す。）。

さらに特に、−ＳＺ_ａは、−ＳＨまたは−ＳＳ（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル、とりわけ−ＳＳＭｅまたは−ＳＳ−ヘテロアリール、とりわけ

もしくは

（Ｘ_１およびＸ_２は、本明細書において下記で定義する。）を表すことがある。さらに特に、−Ｚ_ｂＲ_ｂは、−ＯＨ、−ＯＣＨ_３、−ＯＣＨ_２ＣＨ＝ＣＨ_２、

または

または基

（この式中のＧＩは、少なくとも１つの電気誘導性基、例えば−ＮＯ_２または−Ｈａｌ、とりわけ−Ｆを表す。）を表すことがある。これらは、例えば次の基であることがある：

または

もう１つのタイプの基−Ｃ（＝Ｏ）Ｚ_ｂＲ_ｂは、次のものである：

反応性基−ＳＨおよび

は、良好な反応性を示す。さらに特に、ＲＣＧ１は、例に記載するもののいずれかから選択することができる。

言及することができるＲＣＧ２の例としては、抗体の表面に存在するリシン残基の側鎖が持つリシンのε−アミノ基；ヒンジ領域の糖類基；または鎖内ジスルフィド結合を還元することによるシステインのチオールが挙げられる（ＧａｒｎｅｔｔＭ．Ｃ．ら、「ＡｄｖａｎｃｅｄＤｒｕｇＤｅｌｉｖｅｒｙＲｅｖｉｅｗｓ」２００１、５３、１７１−２１６）。さらに最近、他のアプローチ、例えば、突然変異によるシステインの導入（ＪｕｎｕｔｕｌａＪ．Ｒ．ら、ＮａｔｕｒｅＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ」２００８、２６、９２５−９３２；ＷＯ０９／０２６２７４または他のタイプの化学作用を可能にする非天然アミノ酸の導入（ｄｅＧｒａａｆＡ．Ｊ．ら、「ＢｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅＣｈｅｍ．」２００９、公開日（ウェブ）：２００９年２月３日（総説）；ＤＯＩ：１０．１０２１／ｂｃ８００２９４ａ；ＷＯ２００６／０６９２４６およびＣｈｉｎＪ．Ｗ．ら、「ＪＡＣＳ」２００２、１２４、９０２６−９０２７（ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙＲｅＣｏｄｅ（登録商標））による。）が考究されている。抗体に関して用いられるこれらの結合様式は、公知の結合剤すべてにこれらの構造の機能として適用できる。

結合基を化学的に修飾して新規反応性化学基ＲＣＧ２を導入することも可能である。従って、修飾剤を利用して抗体を修飾する方法は、当業者に周知である（とりわけＷＯ２００５／０７７０９０、１４頁参照）。この修飾は、コンジュゲーション反応の改善および様々な基ＲＣＧ１の使用を可能にする。

ジスルフィド基を導入するための修飾剤
前記修飾剤は、式

の活性化エステルＮＨＳ（式中、Ｒは、基（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル、アリール、ヘテロアリール、（Ｃ_３−Ｃ_７）シクロアルキル、（Ｃ_３−Ｃ_７）ヘテロシクロアルキルを表し、およびＡＬＫは、基（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキレンを表す。）であることがあり；例えば、Ｎ−スクシンイミジルピリジルジチオプロピオナート（ＳＰＤＰ）またはＮ−スクシンイミジルピリジルジチオブチラート（ＳＰＤＢ、即ち４−（２−ピリジルジチオ）酪酸のＮ−ヒドロキシスクシンイミジルエステル）を使用して、ジチオピリジル反応性基ＲＣＧ２を導入することができ（ＢｏｕｒｄｏｎＭ．Ａ．ら、「Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．」１９７８、１７３、７２３−７３７；ＵＳ５２０８０２０参照）、この後、このＲＣＧ２を、クリプトフィシン誘導体のリンカー上に存在する−ＳＨタイプの反応性化学基ＲＣＧ１と反応させて、新規−Ｓ−Ｓ−結合を形成することができる（ジスルフィド結合とのコンジュゲートについては、Ｅｘ．９を参照のこと）。Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド基は、抗体上に存在するアミノ基と優先的に反応してアミド結合を形成する。修飾剤の別の例は、ＷＯ２００４／０１６８０１に式

のものが記載されており、またはＷＯ２００９／１３４９７６に記載されている式

のＰＥＧ化類似体、またはＷＯ２００９／１３４９７７に記載されている式

のスルホン酸類似体であり、これらの式中、
−Ｘ_３、Ｘ_４、Ｘ_５およびＸ_６は、Ｈまたは（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル基を表し、
−Ｘ_１およびＸ_２は、−Ｈ、−ＣＯＮＸ_８Ｘ_９、−ＮＯ_２を表し、−Ｘ_８および−Ｘ_９は、Ｈまたは基（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキルを表し、
−Ｘ_７は、−ＳＯ_３ ⁻Ｍ^＋もしくはＨ、または代替的に第四級アンモニウム基を表し、
−ａは、０から４の整数を示し、およびｂは、０から２０００にわたるおよび好ましくは１と２００の間の整数を表し；ａおよびｂは、それぞれ、０と４の間または０と２０００の間のすべての値をとることができる。

マレイミド基を導入するための修飾剤
修飾剤のもう１つの例は、スクシンイミジル−４−（Ｎ−マレイミドメチル）シクロヘキサン−１−カルボキシラート（ＳＭＣＣ）、ＥＰ０３０６９４３に記載されている類似化合物、またはスルホ−ＳＭＣＣ（スルホスクシンイミジル４−（Ｎ−マレイミドメチル）シクロヘキサン−１−カルボキシラート）である。言及することができる他の例としては、

例えば、Ｎ−スクシンイミジル３−マレイミドプロパノアート；

例えば、Ｎ−スクシンイミジル６−（３−マレイミドプロピオンアミド）ヘキサノアート；

［ｂは、０と２０００の間、好ましくは１と２００の間の整数である（ｂは、０と２０００の間のすべての値をとることができる。）。］、例えば、Ｎ−スクシンイミジル３−（２−｛２−［３−マレイミドプロピオニルアミド］エトキシ｝エトキシ）プロパノアートもしくはＳＭ（ＰＥＧ）_２；

例えば、マレイミドエチルＮ−スクシンイミジルスクシナート；

例えば、Ｎ−スクシンイミジル４−（４−マレイミドフェニル）ブタノアート、または

例えば、Ｎ−スクシンイミジル３−マレイミドベンゾアートが挙げられる。

チオール基を導入するための修飾剤
ＷＯ９０／０６７７４に記載されている修飾剤のもう１つの例は、式

のものであり、この式中、
−Ｈａｌは、ハロゲン原子を表し；
−Ｘ_１０は、ハロゲン原子または基ＣＯＯＸ_１４、ニトロ、非置換もしくはハロゲン化（Ｃ_１−Ｃ_８）アルキル、非置換もしくはハロゲン化（Ｃ_１−Ｃ_８）アルコキシ、非置換もしくはハロゲン化（Ｃ_２−Ｃ_８）アルケニル、非置換もしくはハロゲン化（Ｃ_２−Ｃ_８）アルキニル、非置換（Ｃ_３−Ｃ_８）シクロアルキル、非置換であるアリール、またはアミノ、ハロゲン原子、非置換もしくはハロゲン化（Ｃ_１−Ｃ_８）アルキル基、非置換もしくはハロゲン化（Ｃ_１−Ｃ_８）アルコキシから選択される１から３個の置換基で置換されているアリールを表し；
−Ｘ_１１、Ｘ_１２およびＸ_１３のそれぞれは、独立して、水素原子を表し、もしくはＸ_３を表すことがあり；
またはＸ_１０およびＸ_１１は、非置換であるもしくは１から５個の基（Ｃ_１−Ｃ_４）アルキルで置換されている環（Ｃ_２−Ｃ_５）アルキレンを一緒に形成し；
またはＸ_１０およびＸ_１１は、Ｘ_１２と一緒に、非置換であるもしくは１から５個の基（Ｃ_１−Ｃ_４）アルキルで置換されている環（Ｃ_１−Ｃ_５）アルキレンを形成し；
およびＸ_１４は、−Ｈまたは基（Ｃ_１−Ｃ_８）アルキルである。

好ましくは、Ｈａｌは、塩素または臭素原子を表す。下の表は、Ｘ_１０−Ｘ_１３についての可能性を提示するものである：

好ましいイミノチオランの例は、次のものである：

ハロアセトアミド基を導入するための修飾剤
修飾剤のもう１つの例は、スクシンイミジル−４−（Ｎ−ヨードアセチル）アミノベンゾアート（ＳＩＡＢ）

または類似化合物であり、該類似化合物には、スクシンイミジル−Ｎ−ヨードアセタート（ＳＩＡ）

スクシンイミジル−Ｎ−ブロモアセタート（ＳＢＡ）、またはＷＯ２００９／１３４９７６に記載されているスクシンイミジル−３−（Ｎ−ブロモアセトアミド）プロピオナート（ＳＢＡＰ）もしくは類似のＰＥＧ化化合物

（ｂは、前に説明したとおりである。）などがある。図１および２は、ＳＰＤＰでのまたは上記の好ましいイミノチオランでの結合剤のアミノ基の修飾を図示するものである。

従って、ＲＣＧ１が−ＳＨを表す場合、ジスルフィド基ＲＣＧ２（−ＳＳＲ）、とりわけピリジルジスルフィドタイプのもの

または

を結合剤上に導入することが可能である。類似して、ＲＣＧ１がジスルフィドを表す場合［即ち、ＲＣＧ１＝−ＳＺ_ａ（この場合、Ｚ_ａ≠Ｈ、例えば、Ｚ_ａ＝

）］、例えばイミノチオランで、チオール基ＲＣＧ２（−ＳＨ）を結合剤上に導入することが可能である。両方の場合、ＲＣＧ１とＲＣＧ２との反応によって形成する共有結合は、開裂可能なジスルフィド結合である。

ＲＣＧ１が−ＳＨを表す場合、マレイミドタイプ（

）またはハロアセトアミドタイプ（例えば、ブロモ−もしくはヨードアセトアミド

）のＲＣＧ２基を結合剤の表面に導入することも可能である。相互的に、ＲＣＧ１が

または

を表す場合、例えばイミノチオランで、チオール基ＲＣＧ２（−ＳＨ）を結合剤上に導入することが可能である。この場合、ＲＣＧ１とＲＣＧ２との反応によって形成する共有結合は、開裂不能なスルフィド結合である。

さらに特に、ＲＣＧ１が上記のタイプ（ｉｉｉ）のものである場合、適切な修飾剤を使用して結合剤を化学修飾することが可能であり、または１つ以上の非天然アミノ酸を導入して適切な官能基ＲＣＧ２を導入することが可能である。例えば：
−官能基−Ｎ_３の場合：ＲＣＧ２は、基−Ｃ≡ＣＨであり得る；
−官能基−ＯＨまたは−ＮＨ_２の場合：ＲＣＧ２は、カルボン酸官能基であり得る；
−官能基−Ｃｌの場合：ＲＣＧ２は、基−ＳＨであり得る。

ＲＣＧ１がマレイミド

またはハロアセトアミド

反応性基（この場合のＲ_１２は、Ｈまたは（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル、さらに特にＭｅを表す。）を表す場合、このクリプトフィシン誘導体は、下記の式（ＩＩａ）または（ＩＩｂ）によって表すことができる：

（Ｌ^＊は、Ｌ＝−Ｌ^＊−マレイミドまたはＬ＝−Ｌ^＊−ハロアセトアミドのようなリンカーＬのフラグメントを表す。）
クリプトフィシン誘導体は、Ｃ−５２およびＣ−１系列の中の、次のＤ_１−Ｄ_８のうちの１つ：

または例の１つに記載する等価の単位である場合がある。

さらに特に、Ｌは、単位ＲＣ_１のパラ位にある。

クリプトフィシン誘導体を調製するための方法
式（ＩＩＩ）のクリプトフィシン誘導体およびリンカー前駆体（ＬＰ）で出発して、スキーム１に従って式（ＩＩ）の化合物を調製する：

Ｇは、基−ＣＨ＝ＣＨ_２、−（ＣＨ_２）_ｎＹまたは−（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキレン−Ｙを表し、この場合、ｎは、１から６にわたる整数であり、およびＹは、−ＯＨ、−ＳＨ、−Ｃｌ、−ＯＬＧ（この場合のＬＧは、脱離基、例えばメシラート（ＯＭｓ）もしくはトシラート基を示す。）を表し、または代替的に、Ｙは、−Ｎ_３、−ＮＨ_２、−ＣＯＯＨ、−ＮＲ_１２−ＣＨ_２−Ｃ≡ＣＨ（この場合のＲ_１２は、Ｈもしくは基（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル、さらに特にメチル基を表す。）を表す。前記リンカー前駆体ＬＰは、基ＧとＬＰ上に存在する化学官能基との反応後にリンカーＬをクリプトフィシン誘導体に導入する機能を有する。

Ｇは、下記の９つの基（Ｒ_１２およびＲ’_１２は、Ｈまたは基（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキルを表す。）のいずれかから選択される基

（即ち、Ｙは、基

を表す。）：

または−（ＣＨ_２）_ｎ−ＳＨを表すこともある。

スキーム１において、クリプトフィシン誘導体（ＩＩＩ）から出発してクリプトフィシン誘導体（ＩＩ）に到達するために幾つかの工程および／または反応が必要であることがある。従って、例えば、Ｚ_ａ＝Ｈの場合、対応するリンカー前駆体を使用して、Ｚ_ａ＝Ｓ（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキルのリンカーを導入し、この後、ジスルフィド官能基−ＳＳ（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキルをチオール官能基−ＳＨに還元することが好ましい。このことを行うために、例えばＴＣＥＰを用いることができる：この点に関しては、ＢｕｒｎｓＪ．Ａ．ら、「Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．」１９９１、５６（８）、２６４８−２６５０を参照のこと。この転化−ＳＳ（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル→−ＳＨは、例えば、表ＩＩのリンカーＬ_１−４およびＬ_{２１−２３}に適用することができる。

同様に、Ｚ_ｂＲ_ｂ＝

の場合、対応するリンカー前駆体を使用してＺ_ｂＲ_ｂ＝−Ｏ−アリルのリンカーＬを導入し、この後、官能基ＣＯＯＨを脱保護し、

を導入することができる。脱保護は、「スカベンジャー」アミン、例えばモルホリンの存在下、パラジウム触媒、例えばＰｄ（ＰＰｈ_３）_４での処理によって行うことができ；活性化は、塩基、例えばＤＩＰＥＡの存在下、Ｎ，Ｎ’−ジスクシンイミジルカルボナートを用いて、またはカップリング剤、例えばＤＣＣの存在下、ＮＨＳを用いて行うことができる。基Ｚ_ｂＲ_ｂの別の基Ｚ_ｂＲ_ｂへ（例えば−Ｏ−アリル→

）のこの転化は、他の基Ｚ_ｂＲ_ｂ、とりわけ上記で説明したものに適用することができる。

Ｒ_１がハロゲン原子を表し、およびＲ_２がアシル基を表す場合、Ｒ_２が基−ＯＨを表す式（ＩＩ）の化合物を先ず調製し（リンカーを導入してしまったら）、この後、対応するアシル化化合物を使用してアシル基を導入することが好ましい。

スキーム１’およびスキーム１’’は、マレイミドまたはハロアセトアミド基をそれぞれ含むリンカーを含むクリプトフィシン誘導体の調製を類似に図示するものである（Ｌ＊は、Ｌ＝−Ｌ＊−マレイミドまたはＬ＝−Ｌ＊−ハロマレイミドのようなリンカーのフラグメントを表す。）。

これらの誘導体は、アミノまたはチオール基を含むリンカーＬ’を含むクリプトフィシン誘導体とマレイミドまたはハロアセトアミド基をそれぞれ導入するための修飾剤との反応によって得られる。

基ＧとＬＰ上に存在する化学官能基との反応の例
アミノ官能基−ＮＨ−（アミン塩が使用に適することもある。）を有するリンカー前駆体ＬＰとＧ＝−（ＣＨ_２）_ｎＣｌまたは−（ＣＨ_２）_ｎＯＭｓの間の求核置換（例えば、表ＩＩ、ＬＰ_１−４、ＬＰ_７ａ、ＬＰ_８−１０、ＬＰ_{２１−２３}参照）：この反応は、極性非プロトン性溶媒中、塩基、例えばＴＥＡまたはＤＩＰＥＡの存在下で行うことができる。Ｅｘ．１、化合物７またはＥｘ．１５、化合物４８参照。

カルバモイルハリド官能基を有するリンカー前駆体ＬＰとＧ＝−（ＣＨ_２）_ｎＯＨの間のアシル化（例えば、表ＩＩ、ＬＰ_５参照）：この反応は、極性非プロトン性溶媒中、アミン塩基、例えばＴＥＡの存在下で行うことができる。

１つの変形によると、下記のスキーム（Ｒ_１２＝Ｈまたは（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル）に従って、アミン官能基−ＮＨ−を有するリンカー前駆体ＬＰと、Ｇ＝−（ＣＨ_２）_ｎＯＨおよびクロロギ酸ｐ−ニトロフェニル（カルボナートの形態でのアルコールの活性化）から得られるＧ＝−（ＣＨ_２）_ｎＯ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−（４−ニトロフェニル）とを反応させることも可能である：
−ＮＨＲ_１２＋ｃｒｙｐｔｏ−（ＣＨ_２）_ｎＯ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−（４−ニトロフェニル）→ｃｒｙｐｔｏ−（ＣＨ_２）_ｎＯ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲ_１２−
下記のそれぞれのスキームに従って、カルボナートの形態でのアルコールの活性化を用いて、官能基−ＯＨを有するリンカー前駆体とＧ＝−（ＣＨ_２）_ｎＮＨ_２または−（ＣＨ_２）_ｎＯＨとを反応させて、それぞれ、カルバマート官能基（−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−）またはカルボナート（−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−）を得ることもできる：
−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−（４−ニトロフェニル）＋ｃｒｙｐｔｏ−（ＣＨ_２）_ｎＮＨ_２→ｃｒｙｐｔｏ−（ＣＨ_２）_ｎＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−
−ＯＨ＋ｃｒｙｐｔｏ−（ＣＨ_２）_ｎＯ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−（４−ニトロフェニル）→ｃｒｙｐｔｏ−（ＣＨ_２）_ｎＯ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−
（例えば、表ＩＩ、ＬＰ_{６ａ−６ｂ}、ＬＰ_{２４−２５}参照）
酸官能基−ＣＯＯＨを有するリンカー前駆体ＬＰとＧ＝−（ＣＨ_２）_ｎＯＨの間のエステル化（例えば、表ＩＩ、ＬＰ_１４ｂ参照）：この反応は、極性非プロトン性溶媒中、アミン塩基、例えばＤＭＡＰ、およびカップリング剤、例えばＤＣＣの存在下で行うことができる；
酸官能基−ＣＯＯＨを有するリンカー前駆体ＬＰとＧ＝−（ＣＨ_２）_ｎＮＨ_２の間のアミド化（例えば、表ＩＩ、ＬＰ_１４ａ参照）：この反応は、極性非プロトン性溶媒中、カップリング剤、例えばＥＤＣＩまたはＨＯＢｔの存在下で行うことができる；
官能基−ＮＨ_２を有するリンカー前駆体ＬＰとＧ＝−（ＣＨ_２）_ｎＣＯＯＨの間のアミド化（例えば、表ＩＩ、ＬＰ_７ｃ参照）：この反応は、極性非プロトン性溶媒中、カップリング剤、例えばＥＤＣＩまたはＨＯＢｔの存在下で行うことができる；
アルキン末端官能基を有するリンカー前駆体ＬＰとＧ＝−（ＣＨ_２）_ｎＮ_３の間のまたは代替的にアジド官能基を有するリンカー前駆体ＬＰとＧ＝−（ＣＨ_２）_ｎＮＲ_１２−ＣＨ_２Ｃ≡ＣＨの間の１，３−双極付加環化（「クリック」ケミストリーとしても公知）（例えば、表ＩＩ、ＬＰ_{１５−１８}参照）：この反応は、極性溶媒中、触媒としてのＣｕ（Ｉ）の存在下で行うことができる（この反応に関しては、Ｈｕｉｓｇｅｎｃｙｃｌｏａｄｄｉｔｉｏｎ：ＲｏｓｔｏｖｔｓｅｖＶ．Ｖ．ら、「Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．」２００２、４１、２５９６−２５９９；ＴｏｒｎｏｅＣ．Ｗ．ら、「Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．」２００２、６７、３０５７−３０６４参照）；
エチレン末端官能基を有するリンカー前駆体ＬＰとＧ＝−ＣＨ＝ＣＨ_２の間のメタセシス（表ＩＩ、ＬＰ_１９、ＬＰ_２０参照）：この反応は、極性非プロトン性溶媒中、第二世代グラブス触媒（ＣＡＳＮｏ．２４６０４７−７２−３、この触媒に関しては、Ｐｏｅｙｌａｕｔ−ＰａｌｅｎａＡ．Ａ．ら、「Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．」２００８、７３、２０２４−２０２７参照）の存在下で行うことができる。

リンカーＬに関して
リンカーＬは、下記のもののいずれかから選択することができる：
−Ｇ’Ｘ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｙ（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＱＲＣＧ_１；
−Ｇ’Ｘ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｙ−Ｙ’−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＱＲＣＧ_１；
−Ｇ’Ｘ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ（ＣＲ_１７＝ＣＲ_１８）（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｙＱＲＣＧ_１；
Ｇ’Ｘ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｙ（ＣＲ_１７＝ＣＲ_１８）（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＱＲＣＧ_１；
−Ｇ’Ｘ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−フェニル（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＹ’ＱＲＣＧ_１；−Ｇ’Ｘ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−フリル−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＹ’ＱＲＣＧ_１；
−Ｇ’Ｘ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−オキサゾリル−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＹ’ＱＲＣＧ_１；−Ｇ’Ｘ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−チアゾリル−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＹ’ＱＲＣＧ_１；−Ｇ’Ｘ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−チエニル−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＹ’ＱＲＣＧ_１；−Ｇ’Ｘ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−イミダゾリル−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＹ’ＱＲＣＧ_１；−Ｇ’Ｘ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−ピペラジニル−ＣＯ（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＹ’ＱＲＣＧ_１；−Ｇ’Ｘ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−ピペリジニル−メチル−ＮＲ_１２−ＣＯ（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＹ’ＱＲＣＧ_１；−Ｇ’Ｘ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−ピペリジル−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＹ’ＱＲＣＧ_１；−Ｇ’Ｘ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−ピペリジル−ＮＲ_１２−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＹ’ＱＲＣＧ_１；−Ｇ’Ｘ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−トリアゾリル（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＹ’ＱＲＣＧ_１；−Ｇ’Ｘ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−トリアゾリル−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＹ’ＱＲＣＧ_１；
−Ｇ’Ｘ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−フェニル−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＱＲＣＧ_１；−Ｇ’Ｘ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−フリル−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＱＲＣＧ_１、−Ｇ’Ｘ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−オキサゾリル−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＱＲＣＧ_１；−Ｇ’Ｘ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−チアゾリル−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＱＲＣＧ_１；−Ｇ’Ｘ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−チエニル−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＱＲＣＧ_１；−Ｇ’Ｘ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−イミダゾリル−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＱＲＣＧ_１；−Ｇ’Ｘ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−ピペラジニルｌ−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＱＲＣＧ_１；−Ｇ’Ｘ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−ピペリジル−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＱＲＣＧ_１； −Ｇ’Ｘ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−ピペリジル−メチル−ＮＲ_１２−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＱＲＣＧ_１；−Ｇ’Ｘ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−ピペリジル−ＮＲ_１２−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＱＲＣＧ_１；−Ｇ’Ｘ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−トリアゾリル−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＱＲＣＧ_１；
または
−Ｇ”Ｙ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｙ（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＱＲＣＧ_１；
−Ｇ”Ｙ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｙ−Ｙ’−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＱＲＣＧ_１；
−Ｇ”Ｙ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ（ＣＲ_１７＝ＣＲ_１８）（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｙＱＲＣＧ_１；
−Ｇ”Ｙ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｙ（ＣＲ_１７＝ＣＲ_１８）（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＱＲＣＧ_１；
−Ｇ”Ｙ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−フェニル−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＹ’ＱＲＣＧ_１；−Ｇ”Ｙ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−フリル（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＹ’ＱＲＣＧ_１；−Ｇ”Ｙ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−オキサゾリル−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＹ’ＱＲＣＧ_１；−Ｇ”Ｙ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−チアゾリル−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＹ’ＱＲＣＧ_１；−Ｇ”Ｙ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−チエニル−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＹ’ＱＲＣＧ_１；−Ｇ”Ｙ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−イミダゾリル（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＹ’ＱＲＣＧ_１；−Ｇ”Ｙ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−ピペラジニル−ＣＯ（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＹ’ＱＲＣＧ_１；−Ｇ”Ｙ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−ピペリジル−メチル−ＮＲ_１２−ＣＯ（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＹ’ＱＲＣＧ_１；−Ｇ”Ｙ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−ピペリジル−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＹ’ＱＲＣＧ_１；−Ｇ”Ｙ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−ピペリジル−ＮＲ_１２−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＹ’ＱＲＣＧ_１；−Ｇ”Ｙ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−トリアゾリル−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＹ’ＱＲＣＧ_１；
−Ｇ”Ｙ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−フェニル−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＱＲＣＧ_１；−Ｇ”Ｙ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−フリル−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＱＲＣＧ_１、−Ｇ”Ｙ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−オキサゾリル−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＱＲＣＧ_１；−Ｇ”Ｙ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−チアゾリル−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＱＲＣＧ_１；−Ｇ”Ｙ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−チエニル−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＱＲＣＧ_１；−Ｇ”Ｙ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−イミダゾリル−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＱＲＣＧ_１；−Ｇ”Ｙ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−ピペラジニル−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＱＲＣＧ_１；−Ｇ”Ｙ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−ピペラジニル−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＱＲＣＧ_１；Ｇ”Ｙ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−ピペリジル−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＱＲＣＧ_１；−Ｇ”Ｙ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−ピペリジル−メチル−ＮＲ_１２−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＱＲＣＧ_１；−Ｇ”Ｙ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−ピペリジル−ＮＲ_１２−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＱＲＣＧ_１；−Ｇ”Ｙ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−トリアゾリル−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＱＲＣＧ_１；；
Ｇ’は、基−ＣＨ＝ＣＨ−または−（ＣＨ_２）_ｎ−を表し；
Ｇ”は、基−（ＣＨ_２）_ｎ−を表し；
ｎは、１から６にわたる整数を表し；
Ｘは、単結合または基−ＣＯ−、−ＣＯＯ−もしくは−ＣＯＮＲ_１２−を表し、前記基ＣＯは、Ｇ’に結合しており；
Ｙは、基−Ｏ−、−ＯＣＯ−、−ＯＣＯＯ−、−ＯＣＯＮＲ_１２−、−ＮＲ_１２−、−ＮＲ_１２ＣＯ−、−ＮＲ_１２ＣＯＮＲ’_１２−、−ＮＲ_１２ＣＯＯ−または−Ｓ（Ｏ）_ｑ−を表し、前記原子Ｏまたは基ＮＲ_１２は、Ｇ”に結合しており；
Ｙ’は、基−Ｏ−、−ＯＣＯ−、−ＯＣＯＯ−、−ＯＣＯＮＲ_１２−、−ＮＲ_１２−、−ＮＲ_１２ＣＯ−、−ＮＲ_１２ＣＯＮＲ’_１２−、−ＮＲ_１２ＣＯＯ−、−Ｓ（Ｏ）_ｑ−、−ＣＯ−、−ＣＯＯ−または−ＣＯＮＲ_１２−を表し；
Ｒ_１２、Ｒ’_１２、Ｒ_１３、Ｒ_１４、Ｒ_１５およびＲ_１６、Ｒ_１７およびＲ_１８は、互いに独立して、Ｈまたは基（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキルを表し；
ｔ、ｕおよびｙは、０（基不在の場合）から２０にわたり得る、およびｔ＋ｕ＋ｙが１以上であるような、整数を表し；
ｑは、０、１または２であり得る整数を表し；
Ｑは、単結合、基（Ｃ_１−Ｃ_１０）アルキレンまたは基（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｉを表し、ｉは、１から２０、さらに特に１から１０、さらにいっそう特に１から８または１から６、およびさらにいっそう特に２から５にわたる整数である。ｉは、これらの範囲の値のそれぞれをとることができ、とりわけ２、３、４または５であり得る。

式−Ｇ”Ｙ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）ｙ−Ｙ’−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）ｕＱＲＣＧ_１のリンカーの場合、ｙが０（ＰＥＧ基なし）であるならば、およびＱが単結合を表すならば、ｕは０であることができない。さらに特に、末端基−ＮＲ_１２−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−を含むリンカー（Ｙ’＝ＮＲ_１２；ｕ＝０；Ｑ＝単結合およびＲＣＧ_１＝−Ｃ（＝Ｏ）Ｚ_ｂＲ_ｂ）は、除外される。

ｙは、０から２０、さらに特に１から２０、さらにいっそう特に１から１０、１から８または１から６、およびさらにいっそう特に２から５にわたる整数を表す。ｙは、これらの範囲の値のそれぞれをとることができ、とりわけ２、３、４または５であり得る。

これらのリンカーの一部は、特許出願ＷＯ０７／０８５９３０およびＷＯ０９／０１６５１６に記載されている。

リンカーＬは、式（ＩＶ）のものから選択することができる：

（式中、
（ＡＡ）_ｗは、ペプチド結合によって互いに接続されているｗ個のアミノ酸ＡＡの配列を表し；
ｗは、１から１２および好ましくは１から６にわたる整数を表し；
ｎは、１から６にわたる整数を表し；
Ｄは、下記の単位：

のうちの１つを表し、これらの式について、
Ｒ_１２は、Ｈまたは基（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキルを表し；
Ｒ_１９、Ｒ_２０、Ｒ_２１およびＲ_２２は、互いに独立して、Ｈ、ハロゲン原子、−ＯＨ、−ＣＮまたは基（Ｃ_１−Ｃ_４）アルキルを表し；
（ＣＨ_２）_ｎに結合しているＴは、ＮＲ_１２またはＯを表し；
Ｖ_１は、Ｏ、ＳまたはＮＲ_１２を表し；
Ｖ_２は、ＣＲ_２２またはＮを表し；
Ｖ_３、Ｖ_４およびＶ_５は、互いに独立して、ＣＲ_２２およびＮから選択される。）。

Ｄ２の例は、次のとおりである：

ＡＡは、天然または非天然アミノ酸、さらに特にアラニン（Ａｌａ）、β−アラニン、２−アミノ−２−シクロヘキシル酢酸、２−アミノ−２−フェニル酢酸、アルギニン（Ａｒｇ）、アスパラギン酸（Ａｓｐ）、システイン（Ｃｙｓ）、グルタミン（Ｇｌｎ）、グルタミン酸（Ｇｌｕ）、グリシン（Ｇｌｙ）、ヒスチジン（Ｈｉｓ）、イソロイシン（Ｉｌｅ）、ロイシン（Ｌｅｕ）、リシン（Ｌｙｓ）、メチオニン（Ｍｅｔ）、フェニルアラニン（Ｐｈｅ）、プロリン（Ｐｒｏ）、セリン（Ｓｅｒ）、トレオニン（Ｔｈｒ）、トリプトファン（Ｔｒｐ）、チロシン（Ｔｙｒ）、バリン（Ｖａｌ）、γ−アミノ酪酸、α，α−ジメチル−γ−アミノ酪酸、β，β−ジメチル−γ−アミノ酪酸、オルチニン（Ｏｒｎ）、シトルリン（Ｃｉｔ）から選択される天然または非天然アミノ酸を示す。

配列（ＡＡ）_ｗは、式：

（式中、Ｒ_２３は、上記に記載したアミノ酸のうちの１つの残基を表す。）を有する。配列の例は、次のとおりである：Ｇｌｙ−Ｇｌｙ、Ｐｈｅ−Ｌｙｓ、Ｖａｌ−Ｌｙｓ、Ｖａｌ−Ｃｉｔ、Ｐｈｅ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ、Ｄ−Ｐｈｅ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ、Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ｌｓｙ、Ａｌａ−Ｌｙｓ、Ｖａｌ−Ｃｉｔ、Ｐｈｅ−Ｃｉｔ、Ｌｅｕ−Ｃｉｔ、Ｉｌｅ−Ｃｉｔ、Ｔｒｐ−Ｃｉｔ、Ｐｈｅ−Ａｌａ、Ａｌａ−Ｐｈｅ、Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ、Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｐｈｅ、Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｃｉｔ、Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ｃｉｔ、Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ、Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｌｅｕ。

リンカー前駆体は、対応する−ＯＨ単位を含むものである：

ＷＯ２００５／０８２０２３（とりわけ６１−６４頁参照）には、一定のリンカー前駆体を得る方法が記載されている。下記で説明するリンカー前駆体ＬＰ２５およびＬＰ２６の調製を、別の配列（ＡＡ）_ｗを含む他の類似したリンカー前駆体を得るために用いることもできる。

リンカーＬは、表ＩＩに記載するもののいずれかからまたは例示する化合物から選択することもできる。リンカーの式のすべてにおいて、ＮＲ_１２またはＮＲ’_１２は、さらに特に、ＮＨまたはＮＭｅを表す。

式（ＩＩＩ）の化合物の調製
Ｇ＝−（ＣＨ _２） _ｎＯＨまたは−ＣＨ＝ＣＨ _２の場合

Ｐ_１は、特許出願ＷＯ９８／０８５０５、ＷＯ００／２３４２９またはＷＯ００／３４２５２およびまた次の出版物：ＲｅｊＲ．ら、「Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．」１９９６、６１、６２８９−６２９５；ＳａｌａｍｏｎｃｚｙｋＧ．Ｍ．ら、「Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．」１９９６、６１、６８９３−６９００または「Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．」１９９９、４２（１４）、２５８８−２６０３（参照により本明細書に援用されている。）の教示に従って調製される。「Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒａｇｅｎｔｓｆｒｏｍｎａｔｕｒａｌｐｒｏｄｕｃｔｓ」、Ｔａｙｌｏｒ＆Ｆｒａｎｃｉｓ、ＣＲＣｐｒｅｓｓｂｏｏｋ、ＩＳＢＮ＝０−８４９３−１８６３−７の第９章、「Ｔｈｅｉｓｏｌａｔｉｏｎ，ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎａｎｄｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆａｎｏｖｅｌｃｌａｓｓｏｆｐｏｔｅｎｔａｎｔｉｍｉｔｏｔｉｃｍａｃｒｏｃｙｃｌｉｃｄｅｐｓｉｐｅｐｔｉｄｅｓ：ｔｈｅｃｒｙｐｔｏｐｈｙｃｉｎｓ」の１５８−１５９頁に、様々なクリプトフィシンフラグメント（Ａ、Ｂ、ＣおよびＤ）を調製するためのおよびＰ_１を生成するための合成スキームが与えられている。ＲｅｊＲ．ら、「Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．」１９９６、６１、６２８９−６２９５には、スキーム１−６に、図１のクリプトフィシン誘導体の１つに到達する経路が記載されているが、これらのスキームは、適する出発試薬を使用することによりＰ_１の調製に適用することができる。

Ｐ_１は、下記で詳述する工程を利用することによって他のクリプトフィシン誘導体の調製を可能にする：
工程（ｉ）：ジオール官能基を得るための酸媒体中でのＰ_１のエポキシド環の開環。例えば、濃過塩素酸を使用することができる；
工程（ｉｉ）：例えば過ヨウ素酸ナトリウムを使用する、前記ジオールの酸化開裂；
工程（ｉｉｉ）：適するハロゲン化ホスホニウム、例えば臭化物、および強塩基、例えばＢｕＬｉを使用するウィティッヒ（Ｗｉｔｔｉｇ）反応；
工程（ｉｖ）：塩基、例えばＫＯＨの存在下でのキラルスルホニウム塩、例えばトリフラートが関与するコーリー・チャイコフスキー（Ｃｏｒｅｙ−Ｃｈａｙｋｏｖｓｋｙ）エポキシ化反応；
工程（ｖ）：例えばテトラブチルアンモニウムフルオリド溶液を使用する、シリルエーテルの脱保護。

４−（トリイソプロピルシロキシメチル）ベンジルトリフェニルホスホニウムブロミドは、１−（ブロモメチル）−４−（トリイソプロピルシロキシメチル）ベンゼン（ＣＡＳＮｏ．９３４６６７−３８−６）から得られ、１，４−ベンゼンジメタノール（ＣＡＳＮｏ．５８９−２９−７、市販製品）から出発するこの化合物の調製は、ＰｏｔｔｅｒＲ．Ｇ．ら、「ＯｒｇａｎｉｃＬｅｔｔｅｒｓ」２００７、９（７）、１１８７−１１９０により記載されている。Ｒ_１１が基（Ｃ_１−Ｃ_４）アルキルを表す化合物は、対応するジオールで出発して類似の手法で得られ、このジオールは、市販生成物であるか、１，４−ベンゼンジメタノールで出発するフリーデル・クラフツＣ−アルキル化によって得られる。

１−（ブロモメチル）−４−（トリイソプロピルシロキシメチル）ベンゼン（ＣＡＳＮｏ．１３５４０８−７３−０）（この化合物の調製は、ＥＰ０４９６５４８のスキーム４ａに、またはＮｅｖｉｌｌＣ．Ｒ．Ｊｒ．らによる論文、「Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ＆Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．」１９９１、１（１）、８３−８６の８３頁に記載されている。）で出発して、対応するホスホニウムブロミドを得ることができる。Ｒ_１１が基（Ｃ_１−Ｃ_４）アルキルを表す化合物は、ＮｅｖｉｌｌＣ．Ｒ．Ｊｒ．らによる報文、「Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ＆Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．」１９９１、１（１）、８３−８６の８３頁に記載されている化合物１と等価の化合物（この化合物は、市販製品であるか、ｐ−トリル酢酸で出発するフリーデル・クラフツＣ−アルキル化によって得られる。）から類似の手法で得られる。

工程（ｉｖ）において用いるトリフルオロメタンスルホン酸（１Ｒ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｒ）−４，７，７−トリメチル−６−（４−ビニルベンジル）−６−チオニア−ビシクロ［３．２．１］オクタンは、（１Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−イソチオシネオール（ＡｇｇａｒｗａｌＶ．ら、「ＪＡＣＳ」２０１０、１３２、１８２８−１８３０参照）から得られ、（Ｒ）−リモネン（ＣＡＳＮｏ．９５３２７−９８−３、市販製品）からのこの化合物の調製は、この同じ参考文献に記載されている。

トリフェニル（ｐ−ビニルベンジル）ホスホニウムブロミド（ＣＡＳＮｏ．１１８７６６−５１−１）は、対応するブロモ誘導体（ＤｒｅｆａｈｌＧ．ら、「Ｃｈｅｍ．Ｂｅｒ．」１９６１、９４（８）、２００２−２０１０参照）から得られ、４−ビニルベンジルアルコール（ＣＡＳＮｏ．１０７４−６１−９、市販製品）で出発するこの化合物の調製は、ＳｈｉｍｏｍｕｒａＯ．らによる論文、「Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ」２００５、６１、１２１６０−１２１６７に記載されている。

Ｇ＝−（ＣＨ_２）_ｎＯＨの式（ＩＩＩ）の化合物であるＰ_７およびＰ_８で出発して、他の基Ｇを含有する式（ＩＩＩ）の化合物を得ることができる。

Ｇ＝−（ＣＨ _２） _ｎＣｌまたは−（ＣＨ _２） _ｎＮ _３の場合

基Ｇ＝−ＣＨ_２ＯＨで出発して、基Ｇ＝−ＣＨ_２Ｃｌまたは−ＣＨ_２Ｎ_３を得ることができる。
−−Ｃｌの導入をＣＭＳの存在下で行うことができる：Ｅｘ．１、化合物２参照；
−アジ化を、ジフェニルホルホラジド（ＰｈＯ）_２Ｐ（＝Ｏ）Ｎ_３および塩基、例えばＤＢＵの存在下で行うことができる。スキーム３は、ｎ＝１の場合についてのこれらの反応を記載するものであるが、ｎ＞１についてのものにも適用することができる。

Ｇ＝−（ＣＨ _２） _ｎＣＯＯＨの場合

基Ｇ＝−（ＣＨ_２）_２ＯＨで出発して、酸化により基Ｇ＝−ＣＨ_２ＣＯＯＨを得ることができる。スキーム４は、二重酸化：デス・マーチン（Ｄｅｓｓ−Ｍａｒｔｉｎ）試薬を使用する第一の酸化（「ＥｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａｏｆＲｅａｇｅｎｔｓｆｏｒＯｒｇａｎｉｃＳｙｎｔｈｅｓｉｓ」；ＰａｑｕｅｔｔｅＬ．Ａ．編；Ｗｉｌｅｙ：Ｃｈｉｃｈｅｓｔｅｒ、ＵＫ、１９９５、第７巻、４９８２−４９８７またはＢｏｅｃｋｍａｎＲ．Ｋ．Ｊｒ．ら、Ｊ．Ｊ．「ＴｈｅＤｅｓｓ−ＭａｒｔｉｎＰｅｒｉｏｄｉｎａｔｅ」「Ｏｒｇ．Ｓｙｎｔｈ．」２００４、１０、６９６−７０２参照）、続いての、２−メチル−２−ブテンの存在下でのピニック（Ｐｉｎｎｉｃｋ）タイプの第二の酸化（ＰｉｎｎｉｃｋＨ．Ｗ．、「Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ」１９８１、３７、２０９１−２０９６参照）を記載するものである。スキーム４は、ｎ＝２の出発化合物の場合についてこれらの反応を記載するものであるが、ｎ＞２についてのものにも適用することができる。

Ｇ＝−（ＣＨ _２） _ｎＮＨ _２の場合

基Ｇ＝−ＣＨ_２Ｎ_３（この化合物の調製は、スキーム３に記載されている。）で出発して、ＴＣＥＰなどのホスフィンを使用する還元反応を利用することによって、基Ｇ＝−ＣＨ_２ＮＨ_２を得ることができる。この方法に関しては：ＦａｕｃｈｅｒＡ．−Ｍ．ら、「ＳｙｎｔｈｅｔｉｃＣｏｍｍ．」２００３、３３、３５０３−３５１１参照：

１つの変形によると、基Ｇ＝−ＣＨ_２ＯＨで出発して、トリフェニルホスフィンおよびＤＥＡＤを使用する光延（Ｍｉｔｓｕｎｏｂｕ）反応を利用することによって、基Ｇ＝−ＣＨ_２ＮＨ_２を得ることができる。この方法に関しては、ＭｉｔｓｕｎｏｂｕＯ．、「Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」１９８１、１−２８；ＨｕｇｈｅｓＤ．Ｌ．、「Ｏｒｇ．Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ」１９９２、４２、３３５−６５６；ＨｕｇｈｅｓＤ．Ｌ．、「Ｏｒｇ．Ｐｒｅｐ．」１９９６、２８、１２７−１６４参照。スキーム５および５’は、ｎ＝１の場合を記載するものであるが、ｎ＞１についてのものにも適用することができる。

Ｇ＝−（ＣＨ _２） _ｎ −ＮＲ _１２ −ＣＨ _２Ｃ≡ＣＨの場合
基Ｇ＝−（ＣＨ_２）_ｎＣｌで出発して、式ＮＨＲ_１２−ＣＨ_２−Ｃ≡ＣＨの化合物（Ｒ_１２＝Ｈ：プロパルギルアミン；Ｒ_１２＝（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル：ＭｏｃｋＷ．Ｌ．ら、「Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．」１９８９、５４（２２）、５３０２−８に従って調製したもの）を使用する求核置換を利用することによって、基Ｇ＝−（ＣＨ_２）_ｎ−ＮＲ_１２−ＣＨ_２−Ｃ≡ＣＨを得ることができる。

Ｇ＝−（ＣＨ _２） _ｎ −ＳＨの場合

基Ｇ＝−（ＣＨ_２）Ｃｌで出発して、ＨｕＪ．ら、「Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．」１９９９、６４、４９５９−４９６１（Ｅｘ．８参照）に従ってテトラブチルアンモニウムフルオリドおよびヘキサメチルジシラチアンからインサイチューで調製したテトラブチルアンモニウムトリメチルシリルチオラートを利用することによって直接官能化により基Ｇ＝−（ＣＨ_２）_ｎＳＨを得ることができる。スキーム６は、ｎ＝１の場合についてこの反応を記載するものであるが、ｎ＞１についてのものにも適用することができる。この反応の過程で、下記の式を有する中間体ダイマーを形成することができる：

Ｇ＝−ＡＬＫ−ＳＨの場合

スキーム７に従って、Ｐ_３は、他のクリプトフィシン誘導体の調製を可能にする：
工程（ｉ）：適するハロゲン化ホスホニウム、例えば臭化物、および強塩基、例えばＢｕＬｉを使用するウィティッヒ反応；
工程（ｉｉ）：パラジウムまたはニッケル触媒の存在下で適するグリニャール（Ｇｒｉｇｎａｒｄ）試薬、例えばシリルエーテル形態で保護されたアルコキシマグネシウムブロミドを使用する熊田（Ｋｕｍａｄａ）カップリング（例えば、「ＯｒｇａｎｉｃＬｅｔｔｅｒｓ」２００９、１１、５６８６−５６８９または「Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」２００９、１４１、２４０８−２４１２参照）。

工程（ｉｉｉ）から（ｖ）は、スキーム２に記載されており、および工程（ｖｉ）は、スキーム６に記載されている。

（４−ブロモベンジル）トリフェニルホスホニウムブロミドは、市販製品（ＣＡＳＮｏ．５１０４４−１３−４）である。シリルエーテル形態で保護されたアルコキシマグネシウムブロミドは、対応するブロモアルコールから、適切なクロロシランでのアルコール官能基の保護、続いて、無水極性非プロトン性溶媒、例えばＴＨＦ中、マグネシウムの存在下での有機マグネシウム試薬の形成により調製することができる（例えば、「ＯｒｇａｎｉｃＬｅｔｔｅｒｓ」２００５、７、１８３−１８６参照）。１から６個の炭素原子を含有する線状または分岐ブロモアルコールは、市販されており［例えば３−ブロモ−１−プロパノール（ＣＡＳＮｏ．６２７−１８−９）もしくは１−ブロモ−２−プロパノール（ＣＡＳＮｏ．１９６８６−７３−８］、または文献に記載されている方法に従って対応するブロモエステルもしくはブロモケトンから調製することができる。前記クロロシランは、例えば、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルクロロシラン（ＣＡＳＮｏ．１８１６２−４８−６）またはトリイソプロピルクロロシラン（ＣＡＳＮｏ．１３１５４−２４−０）であり得る。

Ｇ＝−（ＣＨ _２） _ｎ −マレイミドの場合

マレイミド単位を含むクリプトフィシン誘導体を調製するための方法を記載するスキーム１’に加えて、基Ｇ＝−ＣＨ_２ＯＨで出発して、ＭａｔｕｓｚａｋＮ．ら、「Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．」２００９、５２、７４１０−７４２０に従って、トリフェニルホスフィンおよびＤＥＡＤの存在下での光延反応により、基Ｇ＝

を得ることができる。スキーム８は、ｎ＝１の場合についてこの反応を記載するものであるが、ｎ＞１のものについても適用することができる。

上記のスキーム１−８は、パラ位におけるリンカーについて与えたものであるが、オルトまたはメタ位のものについて同じく適用することができる。類似して、これらのスキームは、クリプトフィシン誘導体について与えたものであるが、式（ＩＩ）の他の誘導体、とりわけＤ_１−Ｄ_８の調製にも適用することができる。

さらに特に、Ｃ−５２の場合、下記の化合物を使用することができ、これらの調製は、Ａｌ−ａｗａｒＲ．Ｓ．ら、「Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．」２００３、４６、２９８５−３００７にまたはＷＯ９８／０８５０５に記載されている：

Ｇ＝−ＣＨ_２ＯＨ：スキーム５の化合物３１ｂ
Ｇ＝−ＣＨ_２ＣＨ_２ＯＨ：スキーム９の化合物４９
Ｇ＝−ＣＨ_２ＣＯＯＨ：スキーム９の化合物５１またはＷＯ９８／０８５０５のＥｘ．８１
Ｇ＝−Ｃ（＝Ｏ）Ｈ：ＷＯ９８／０８５０５のＥｘ．８０
さらに、Ｇ＝−ＣＨ_２ＯＨの化合物３１ｂで出発して、Ｇ＝−ＣＨ_２Ｃｌまたは−ＣＨ_２Ｎ_３の化合物を得ることが可能である：
Ｇ＝−ＣＨ_２Ｃｌ：実施例１、化合物２参照；
Ｇ＝−ＣＨ_２Ｎ_３：−ＣＨ_２ＯＨの−ＣＨ_２Ｎ_３への転化は、極性非プロトン性溶媒中、ジフェニルホスホラジドおよび塩基、例えばＤＢＵの存在下で行うことができる、実施例１９、化合物６０参照；
Ｇ＝−ＣＨ_２−マレイミド：−ＣＨ_２ＯＨの−ＣＨ_２−マレイミドへの転化は、極性非プロトン性溶媒中、マレイミド、トリフェニルホスフィンおよびＤＥＡＤの存在下で行うことができる。

「Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．」２００３、４６、２９８５−３００７の教示を、他の置換基Ｒ_６−Ｒ_９を含む他のクリプトフィシン誘導体に適用することができる。

リンカー前駆体ＬＰの調製
ＬＰは、下記のものの１つであり得る：
ＬＰ_１

は下記のスキームに従って調製される：

工程（ｉ）：ＮＨＳを使用する酸の活性化：この活性化は、無水非プロトン性溶媒、例えばＤＣＭに溶解したカップリング剤、例えば１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド・塩酸塩の存在下、室温で行う。この手順は、実施例１、化合物４の条件に基づくものであり得る。

工程（ｉｉ）：ピペリジンＮ−Ｂｏｃでのアミド化；このペプチドカップリングは、極性非プロトン性溶媒中、室温で、塩基の存在下で行い、該塩基は、第三級アミン、例えばＴＥＡまたはＤＩＰＥＡであり得る。前記溶媒は、ＤＭＦであり得る。この手順は、実施例１、化合物５の条件に基づくものであり得る。

工程（ｉｉｉ）：酸溶液、例えば塩酸（例えば、ジオキサン中の溶液としてのもの）を使用するアミンの脱保護。この手順は、実施例１、化合物６の条件に基づくものであり得る。

出発酸、例えば４−メチル−４−（メチルジチオ）ペンタン酸は、市販されていることがあり、またはハロカルボン酸からチオ酢酸カリウムおよびメタンチオスルホナートタイプの誘導体での逐次的処理により調製することができる。ＵＳ２７１９１７０も参照。

ＬＰ_２

は下記のスキームに従って調製される：

工程（ｉ）：アルデヒドでの還元アミノ化：この反応は、室温で、無水極性非プロトン性溶媒、例えばＴＨＦ中、二工程：チタンイソプロポキシドの存在下での中間複合体の形成、続いて、還元剤、例えばシアノ水素化ホウ素ナトリウムでのインサイチュー還元で行う。この手順は、実施例５、化合物１７の条件に基づくものであり得る。

工程（ｉｉ）：酸溶液、例えば塩酸（例えば、ジオキサン中の溶液としてのもの）でのアミンの脱保護。この手順は、実施例５、化合物１８の条件に基づくものであり得る。

出発アルデヒド、例えば、２−メチル−２−（メチルジチオ）プロパナールは、市販されていることがあり、または適切に保護されたハロゲン化アルコール（例えば、シリルエーテル形態のもの）からチオ酢酸カリウムおよびメタンチオスルホナートタイプの誘導体での逐次的処理によって達成されるジスルフィド単位を有するアルコールの酸化によって調製することができる。

ＬＰ_３

は下記のスキームに従って調製される：

Ｒ _１２＝Ｈの場合

工程（ｉ）：オキシムの形成：前に説明したアルデヒドをエタノールなどの極性プロトン性溶媒に溶解し、この後、水酸化ナトリウムなどの塩基の存在下で還流させながらＯ−メチルヒドロキシルアミン・塩酸塩で処理する。この手順は、実施例３、化合物１１の条件に基づくものであり得る。

工程（ｉｉ）：オキシムの還元；ＴＨＦなどの無水極性非プロトン性溶媒中のボラン−ジメチルスルフィドの溶液で還流させながら処理することによりオキシムを還元する。この手順は、実施例３、化合物１２の条件に基づくものであり得る。

Ｒ _１２ ≠Ｈの場合

工程（ｉ）：アルデヒドでの還元アミノ化；この反応は、室温で、ＴＨＦなどの無水極性非プロトン性溶媒中、還元剤、例えばトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウムの存在下で行う。

ＬＰ_４

は下記のスキームに従って調製される：

このリンカーは、ＬＰ_２について提示したものに類似した手法で調製する。

工程（ｉ）：アルデヒドでの還元アミノ化：この反応は、室温で、無水極性非プロトン性溶媒、例えばＴＨＦ中、二工程：チタンイソプロポキシドの存在下での中間複合体の形成、続いて、シアノ水素化ホウ素ナトリウムなどの還元剤でのインサイチュー還元で行う。この手順は、実施例５、化合物１７の条件に基づくものであり得る。

工程（ｉｉ）：酸溶液、例えば塩酸（例えば、ジオキサン中の溶液でのもの）でのアミンの脱保護。この手順は、実施例５、化合物１８の条件に基づくものであり得る。

ＬＰ_５

は下記のスキームに従って調製される：

工程（ｉ）：アミンの保護；この反応は、室温で、ＤＣＭなどの極性非プロトン性溶媒中で、塩基、例えばＴＥＡの存在下、二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルでのアミンの処理により行う。

工程（ｉｉ）：アルコールの臭化物への転化；この反応は、室温で、ＴＨＦなどの極性非プロトン性溶媒中で、ホスフィン、例えばトリフェニルホスフィンの存在下、ＣＢｒ_４でアルコール官能基を処理することによって行う；この反応に関しては、ＡｐｐｅｌＲ．、「Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．Ｅｎｇｌ．」１９７５、１４、８０１−８１１またはＤｅｓｍａｒｉｓＮ．ら、「ＴｅｔｒａｈｅｄｒｏｎＬｅｔｔｅｒｓ」２００３、４４（４１）、７５８９−７５９１参照。

工程（ｉｉｉ）：チオ酢酸塩での臭化物の置換；この反応は、室温で、ＤＭＦなどの極性非プロトン性溶媒中で、チオ酢酸カリウムを求核試薬として使用して行う。

工程（ｉｖ）：ジスルフィド結合の形成；この反応は、メタノールなどの無水極性プロトン性溶媒中、塩基、例えばナトリウムメトキシド、およびピリジルジスルフィド単位を含む試薬の存在下で行う。

１つの変形によると：
工程（ｖ）：メシラート形態でのアルコールの活性化；この反応は、ＤＣＭなどの無水極性非プロトン性溶媒中で、塩基、例えばＴＥＡの存在下、塩化メシルでの処理により行う。

工程（ｖｉ）：遊離チオールの形成；この反応は、エタノール／水混合物などの還流極性プロトン性溶媒中で、逐次的二工程：チオウレアでのメシラートの置換、続いて、ＮａＯＨなどの塩基の添加によるイソチオウロニウム塩のインサイチュー加水分解で行う。

工程（ｖｉｉ）：ピリジルジスルフィド形態でのチオールの活性化；この反応は、室温で、エタノールなどの極性プロトン性溶媒中で、酢酸などの酸の存在下、ピリジルジスルフィド単位を含む試薬での処理により行う。

工程（ｖｉｉｉ）：酸溶液、例えば塩酸（例えば、ジオキサン中の溶液でのもの）でのアミンの脱保護。

工程（ｉｘ）：塩化カルバモイルの形態でのアミンの活性化；この反応は、ＤＣＭなどの無水極性非プロトン性溶媒中で、ＴＥＡなどの塩基の存在下、ジホスゲンでの処理により行う。

ＬＰ_６

は下記のスキームに従って調製される：

ＡＬＫ＝ＣＨ _２ＣＨ _２の場合
経路Ａ：

経路Ｂ：

工程（ｉ）：塩酸の溶液（例えば、ジオキサン中の溶液）またはトリフルオロ酢酸の溶液での脱保護。

工程（ｉｉ）：アリルエステル形態でのカルボン酸の保護；この反応は、室温で、ＤＭＦなどの極性非プロトン性溶媒中、臭化アリルの存在下および炭酸カリウムなどの塩基の存在下で行う。

工程（ｉｉｉ）：ＰＥＧ鎖の伸長；この反応は、ＴＨＦなどの無水極性非プロトン性溶媒中で、触媒量のナトリウムの作用により生成されたアルコキシドでのエステル形態で保護された不飽和酸の処理によって行う。

ＡＬＫ≠ＣＨ _２ＣＨ _２の場合

工程（ｉｖ）：ＰＥＧ鎖の伸長；この反応は、ＴＨＦまたはＤＭＦなどの無水極性非プロトン性溶媒中で、テトラヒドロピラン（ＴＨＰ）エーテル形態でモノ保護されたＰＥＧジオールのアルコキシドでのハロゲン化エステルの処理によって行う。このタイプのモノ保護ＰＥＧジオールの調製は、文献に十分に記載されている：例えば、ＲｉｃｈａｒｄＡ．ら、「Ｃｈｅｍ．Ｅｕｒ．Ｊ．」２００５、１１、７３１５−７３２１またはＳａｋｅｌｌａｒｉｏｕＥ．Ｇ．ら、「Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ」２００３、５９、９０８３−９０９０参照。

ｔｅｒｔ−ブチルエステル形態で保護された酸官能基を含むＰＥＧアルコールは、市販されており（例えば、１２−ヒドロキシ−４，７，１０−トリオキサドデカン酸ｔｅｒｔ−ブチル）、またはアクリル酸ｔｅｒｔ−ブチルおよびＰＥＧジオールから調製される。出発ＰＥＧジオールは、ｉ＝３から１２のものについては、市販されている。

ＬＰ_７下記のスキームに従って調製されるＲｂＺｂＯＣ−ＡＬＫ−（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｉ−ＮＨＲ_１２：

ＡＬＫ＝ＣＨ _２ＣＨ _２の場合
Ｒ _１２＝Ｈの場合

Ｒ _１２ ≠Ｈの場合

ＡＬＫ≠ＣＨ _２ＣＨ _２の場合
Ｒ _１２＝Ｈの場合

Ｒ _１２ ≠Ｈの場合

工程（ｉ）：アリルエステル形態でのカルボン酸の保護；この反応は、室温で、ＤＣＭなどの極性非プロトン性溶媒中、アリルアルコール、ＥＤＣＩなどのカップリング剤、およびＤＭＡＰなどの塩基の存在下で行う。この手順は、実施例１４、化合物４２の条件に基づくものであり得る。

工程（ｉｉ）：塩酸の溶液（例えば、ジオキサン中の溶液）またはトリフルオロ酢酸の溶液を使用する脱保護。この手順は、実施例１４、化合物４３の条件に基づくものであり得る。

工程（ｉｉｉ）：窒素原子のアルキル化；この反応は、ＴＨＦなどの無水極性非プロトン性溶媒中で、ハロゲン化アルキルなどの離核性基を有する試薬の存在下、ＮａＨなどの塩基での処理によって行う。この手順は、実施例１５、化合物４６の条件に基づくものであり得る。

工程（ｉｖ）：ＰＥＧ鎖の伸長：この反応は、ＴＨＦまたはＤＭＦなどの無水極性非プロトン性溶媒中で、ＷＯ２００７／１２７４４０に記載されているようなＮａＨまたはカリウムナフタレニドの作用により生成されるベンゾフェノン−イミン−ＰＥＧ−アルコールのアルコキシドでのハロゲン化エステルの処理によって行う。

工程（ｖ）：エステルの鹸化；この反応は、水の存在下でエステルと水酸化リチウムを反応させることによって行う。

工程（ｖｉ）：アミンの保護；この反応は、室温で、ＤＣＭなどの極性非プロトン性溶媒中で、塩基、例えばＴＥＡの存在下、二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルでのアミンの処理によって行う。

前記アミノ−ＰＥＧ−酸は、ｉ＝３、５、６、１０のものについては市販されており、またはアクリル酸ｔｅｒｔ−ブチルおよび対応するアミノ−ＰＥＧ−アルコールから調製することができる。

前記アミノ−ＰＥＧ−アルコールは、例えばｉ＝３、４、７、８のものについては、市販されており、またはＵＳ７２３０１０１に記載されている手順に従ってＰＥＧジオール（ｉ＝３から１２のものについては市販されている。）から調製することができる。ベンゾフェノンでのアミン官能基の保護は、ＢＦ_３エーテラートなどのルイス（Ｌｅｗｉｓ）酸の存在下での共沸脱水によって行うことができる。

ＬＰ_８

は下記のスキームに従って調製される：

ＡＬＫ＝ＣＨ _２ＣＨ _２の場合

工程（ｉ）：塩酸の溶液（例えば、ジオキサン中の溶液）またはトリフルオロ酢酸の溶液を使用する出発化合物の脱保護。この手順は、実施例１６、化合物５０の条件に基づくものであり得る。

工程（ｉｉ）：アリルエステル形態でのカルボン酸官能基の保護；この反応は、室温で、ＤＭＦなどの極性非プロトン性溶媒中、臭化アリルの存在下および炭酸カリウムなどの塩基の存在下で行う。この手順は、実施例１６、化合物５１の条件に基づくものであり得る。

工程（ｉｉｉ）：メシラート形態でのアルコールの活性化；この反応は、ＤＣＭなどの無水極性非プロトン性溶媒中で、ＴＥＡなどの塩基の存在下、塩化メシルでの処理により行う。

工程（ｉｖ）：メシラート官能基と化合物

のアミン官能基との反応（アルキル化）；この反応は、室温で、ＤＣＭなどの無水極性非プロトン性溶媒中、ＴＥＡなどの塩基の存在下で行う。この手順は、実施例１６、化合物５２の条件に基づくものであり得る。

ＡＬＫ≠ＣＨ _２ＣＨ _２の場合

工程（ｖ）：ＰＥＧ鎖の伸長；この反応は、ＴＨＦまたはＤＭＦなどの無水極性非プロトン性溶媒中で、テトラヒドロピラン（ＴＨＰ）エーテル形態でモノ保護されたＰＥＧジオールのアルコキシドでのハロゲン化エステルの処理によって行う。このタイプのモノ保護ＰＥＧジオールの調製は、文献に十分に記載されている：例えば、ＲｉｃｈａｒｄＡ．ら、「Ｃｈｅｍ．Ｅｕｒ．Ｊ．」２００５、１１、７３１５−７３２１またはＳａｋｅｌｌａｒｉｏｕＥ．Ｇ．ら、「Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ」２００３、５９、９０８３−９０９０参照。

ＬＰ_９

は下記のスキームに従って調製される：

工程（ｉ）：アミンのアルキル化；この反応は、アセトニトリルなどの無水極性非プロトン性溶媒中、塩基、例えばＴＥＡの存在下、ハロアルキルカルボン酸アリル、例えばブロモ酢酸アリルを用いて行う。この手順は、実施例１３、化合物３８の条件に基づくものであり得る。

工程（ｉｉ）：酸溶液、例えば塩酸（例えば、ジオキサン中の溶液でのもの）を使用するアミンの脱保護。この手順は、実施例１３、化合物３９の条件に基づくものであり得る。

前記ハロアルキルカルボン酸アリルは、アリルアルコールおよび対応するハロゲン化ハロアシルから得ることができ、ならびにＡＬＫ＝−（ＣＨ_２）_１−６−のもの（例えば、臭化ブロモアセチルまたは塩化４−ブタノイル）については市販されている。

ＬＰ_１０

は下記のスキームに従って調製される：

ＡＬＫ＝ＣＨ _２ＣＨ _２の場合

ＡＬＫ≠ＣＨ _２ＣＨ _２の場合

工程（ｉ）：環状無水物の開環；この反応は、室温で、ＤＣＭなどの無水極性非プロトン性溶媒中、ＴＥＡなどの塩基の存在下で行う。

工程（ｉｉ）：アリルエステル形態でのカルボン酸の保護；この反応は、室温で、ＤＣＭなどの極性非プロトン性溶媒中、アリルアルコール、ＥＤＣＩなどのカップリング剤、およびＤＭＡＰなどの塩基の存在下で行う。

工程（ｉｉｉ）：塩酸の溶液（例えば、ジオキサン中の溶液）を使用する脱保護。

工程（ｉｖ）：ペプチドカップリング；室温で、ＤＣＭなどの極性非プロトン性溶媒中、ＤＩＣ／ＨＯＢｔ系などのカップリング剤の存在下でカルボン酸とアミンとの反応を行う。

工程（ｖ）：メチルエステルの鹸化；この反応は、室温で、ＴＨＦ／水混合物などの極性溶媒の混合物中、水酸化リチウムの存在下で行う。

メチルエステル形態でモノ保護された二酸は、ＡＬＫ＝−（ＣＨ_２）_１−６−のもの（例えば、１，６−ヘキサン二酸のモノメチルエステル）については市販されている。

ＬＰ_１１

は下記のスキームに従って調製される：

ＡＬＫ＝ＣＨ _２ＣＨ _２の場合
Ｒ _１２＝Ｈの場合

工程（ｉ）：アミドの形成および酸の活性化；ＤＣＭなどの極性非プロトン性溶媒中で二工程を逐次的に行う：アミン官能基とＮ−ヒドロキシスクシンイミジルハロアセタートとの反応、続いて、ＤＩＣなどのカップリング剤のインサイチュー付加。この手順は、実施例１７、化合物５６の条件に基づくものであり得る。

Ｒ _１２ ≠Ｈの場合

工程（ｉｉ）：メチルエステル形態でのカルボン酸の保護およびトリフルオロアセトアミド形態でのアミンの保護；この反応は、ＤＣＭなどの極性非プロトン性溶媒中で、逐次的二工程：メタノールの存在下でのトリメチルシリルジアゾメタンでの処理による酸の保護、続いて、トリフルオロ酢酸無水物の付加およびＴＥＡなどの塩基の付加によるアミンの保護で行う。

工程（ｉｉｉ）：アミンのアルキル化およびエステルの鹸化；この反応は、ＴＨＦなどの無水極性非プロトン性溶媒中で逐次的二工程：離核性基を有する試薬、例えばハロゲン化アルキルＲ_１２Ｈａｌの存在下、ＮａＨなどの塩基での処理によるアミンのアルキル化、続いて、水酸リチウムおよび水の添加で行う。

工程（ｉ）：工程（ｉｉｉ）の後、Ｒ_１２＝Ｈの場合には工程（ｉ）の反応を繰り返す。

ＡＬＫ≠ＣＨ _２ＣＨ _２の場合
Ｒ _１２＝Ｈの場合

Ｒ _１２ ≠Ｈの場合

工程（ｉｖ）：ＰＥＧ鎖の伸長：この反応は、ＴＨＦまたはＤＭＦなどの無水極性非プロトン性溶媒中で、ＮａＨまたはカリウムナフタレニドの作用により生成されたベンゾフェノン−イミン−ＰＥＧ−アルコールのアルコキシドでのハロゲン化エステルの処理によって行う（ＷＯ２００７／１２７４４０参照）。

工程（ｖ）：炭担持パラジウムの存在下での水素化によるイミンの選択的開裂（Ｗｅｓｓｊｏｈａｎｎ，Ｌ．ら、「Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」１９８９、５、３５９−６３参照）；
工程（ｖｉ）：トリフルオロ酢酸無水物の付加およびＴＥＡなどの塩基の付加によるアミンの保護。

ＬＰ_１２

は下記のスキームに従って調製される：

ＡＬＫ＝ＣＨ _２ＣＨ _２の場合
経路Ａ：

経路Ｂ：

ＡＬＫ≠ＣＨ _２ＣＨ _２の場合

工程（ｉ）：メシラート形態でのアルコールの活性化；この反応は、ＤＣＭなどの無水極性非プロトン性溶媒中で、ＴＥＡなどの塩基の存在下、塩化メシルでの処理により行う。

工程（ｉｉ）：メシラート／ハロゲン交換；この反応は、アセトンなどの還流極性非プロトン性溶媒中、ヨウ化ナトリウムなどのハロゲン化ナトリウムを用いて行う。

工程（ｉｉｉ）：塩酸の溶液（例えば、ジオキサン中の溶液）またはトリフルオロ酢酸の溶液を使用する脱保護。

工程（ｉｖ）：酸の活性化；この反応は、室温で、ＤＣＭなどの極性非プロトン性溶媒中で、ＤＣＣなどのカップリング剤の存在下、ＮＨＳでの処理によって行う。

工程（ｖ）：ＰＥＧ鎖の伸長；この反応は、ＴＨＦなどの無水極性非プロトン性溶媒中で、触媒量のナトリウムの作用により生成されたアルコキシドでのエステル形態で保護された不飽和酸の処理によって行う。

工程（ｖｉ）：ＰＥＧ鎖の伸長；この反応は、ＴＨＦまたはＤＭＦなどの無水極性非プロトン性溶媒中で、テトラヒドロピラン（ＴＨＰ）エーテルとしてモノ保護されたＰＥＧジオールのアルコキシドでのハロゲン化エステルの処理によって行う。このタイプのモノ保護ＰＥＧジオールの調製は、文献に十分に記載されている：例えば、ＲｉｃｈａｒｄＡ．ら、「Ｃｈｅｍ．Ｅｕｒ．Ｊ．」２００５、１１、７３１５−７３２１またはＳａｋｅｌｌａｒｉｏｕＥ．Ｇ．ら、「Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ」２００３、５９、９０８３−９０９０参照。形成された中間体は、ｐＨ５で選択的にヒドロキシエステルに加水分解される。

ＬＰ_１３

は下記のスキームに従って調製される：

ＡＬＫ＝ＣＨ _２ＣＨ _２の場合
経路Ａ：

経路Ｂ：

ＡＬＫ≠ＣＨ _２ＣＨ _２の場合

工程（ｉ）：塩酸の溶液（例えば、ジオキサン中の溶液）またはトリフルオロ酢酸の溶液を使用する脱保護。後のほうの場合、ヒドロキシ官能基のトリフルオロ酢酸塩が形成されることがある。この形成物は、次の工程（ｉｉ）の間に開裂される。

工程（ｉｉ）：メチルエステル形態でのカルボン酸の保護；この反応は、室温で、メタノールなどの極性非プロトン性溶媒中で、トリメチルシリルジアゾメタンでの処理によって行う。

工程（ｉｖ）：遊離チオールの形成およびメチルエステルの鹸化；この反応は、エタノール／水混合物などの還流極性プロトン性溶媒中で、逐次的二工程：チオウレアでのメシラートの置換、続いて、水酸化ナトリウムなどの塩基の添加によるイソチオウロニウム塩のインサイチュー加水分解で行う。

工程（ｖｉ）：ＰＥＧ鎖の伸長；この反応は、ＴＨＦまたはＤＭＦなどの無水極性非プロトン性溶媒中で、テトラヒドロピラン（ＴＨＰ）エーテルとしてモノ保護されたＰＥＧジオールのアルコキシドでのハロゲン化エステルの処理によって行う。このタイプのモノ保護ＰＥＧジオールの調製は、文献にて十分に公知である：例えば、ＲｉｃｈａｒｄＡ．ら、「Ｃｈｅｍ．Ｅｕｒ．Ｊ．」２００５、１１、７３１５−７３２１またはＳａｋｅｌｌａｒｉｏｕＥ．Ｇ．ら、「Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ」２００３、５９、９０８３−９０９０参照。

ｎ＝８の場合のリンカー（３−［２−メルカプトエトキシヘプタ（エチレンオキシ）］プロピオン酸）は、市販されている。ｔｅｒｔ−ブチルエステル形態で保護された酸官能基を含むＰＥＧアルコールは、市販されており（例えば、１２−ヒドロキシ−４，７，１０−トリオキサドデカン酸ｔｅｒｔ−ブチル）、またはアクリル酸ｔｅｒｔ−ブチルおよびＰＥＧジオールから調製される。出発ＰＥＧジオールは、ｉ＝３から１２のものについては、市販されている。

ＬＰ_１４

は下記のスキームに従って調製される：

ＡＬＫ＝ＣＨ _２ＣＨ _２の場合

ＡＬＫ≠ＣＨ _２ＣＨ _２の場合

工程（ｉ）：ＰＥＧ鎖の伸長；この反応は、ＴＨＦなどの無水極性非プロトン性溶媒中で、触媒量のナトリウムの作用により生成されたアルコキシドでのエステル形態で保護された不飽和酸の処理によって行う。

工程（ｉｉ）：塩酸の溶液（例えば、ジオキサン中の溶液）またはトリフルオロ酢酸の溶液を使用する脱保護。後のほうの場合、この構造上に場合により存在するアルコール官能基のトリフルオロ酢酸塩が形成されることがある。このトリフルオロ酢酸塩は、次の工程（ｉｉｉ）の間に開裂される。

工程（ｉｉｉ）：メチルエステル形態でのカルボン酸の保護；この反応は、室温で、メタノールなどの極性非プロトン性溶媒中で、トリメチルシリルジアゾメタンでの処理によって行う。

工程（ｉｖ）：メチルエステルの鹸化；この反応は、室温で、ＴＨＦ／水混合物などの極性溶媒の混合物中、水酸化リチウムの存在下で行う。

工程（ｖ）：アリルエステル形態でのカルボン酸の保護；この反応は、室温で、ＤＣＭなどの極性非プロトン性溶媒中、アリルアルコール、ＥＤＣＩなどのカップリング剤、およびＤＭＡＰなどの塩基の存在下で行う。

工程（ｖｉ）：ＰＥＧ鎖の伸長；この反応は、ＴＨＦまたはＤＭＦなどの無水極性非プロトン性溶媒中で、テトラヒドロピラン（ＴＨＰ）エーテルとしてモノ保護されたＰＥＧジオールのアルコキシドでのハロゲン化エステルの処理によって行う。このタイプのモノ保護ＰＥＧジオールの調製は、文献に十分に記載されている：例えば、ＲｉｃｈａｒｄＡ．ら、「Ｃｈｅｍ．Ｅｕｒ．Ｊ．」２００５、１１、７３１５−７３２１またはＳａｋｅｌｌａｒｉｏｕＥ．Ｇ．ら、「Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ」２００３、５９、９０８３−９０９０参照。

出発ＰＥＧジオールは、ｉ＝３から１２のものについては、市販されている。

ＬＰ_１５

は下記のスキームに従って調製される：

ＡＬＫ＝ＣＨ _２ＣＨ _２の場合
経路Ａ：

経路Ｂ：

ＡＬＫ≠ＣＨ _２ＣＨ _２の場合

工程（ｉ）：求核置換；この反応は、ＴＨＦなどの無水極性非プロトン性溶媒中、ＮａＨなどの塩基の存在下およびプロパルギルブロミドまたは４−ブロモ−１−ブチンなどのハロゲン化アルキンの存在下で行う。この手順は、実施例２０、化合物６３の条件に基づくものであり得る。

工程（ｉｉ）：塩酸の溶液（例えば、ジオキサン中の溶液）またはトリフルオロ酢酸の溶液を使用する脱保護。この手順は、実施例２０、化合物６５の条件に基づくものであり得る。

工程（ｉｉｉ）：ＮＨＳエステル形態でのカルボン酸の活性化；この反応は、室温で、ＤＣＭなどの極性非プロトン性溶媒中で、固定型ＤＣＣなどのカップリング剤の存在下、ＮＨＳでの処理によって行う。

工程（ｉｖ）：ＰＥＧ鎖の伸長；この反応は、ＴＨＦなどの無水極性非プロトン性溶媒中で、触媒量のナトリウムの作用により生成されたアルコキシドでのエステル形態で保護された不飽和酸の処理によって行う。この手順は、実施例２０、化合物６４の条件に基づくものであり得る。

工程（ｖ）：ＰＥＧ鎖の伸長；この反応は、ＴＨＦまたはＤＭＦなどの無水極性非プロトン性溶媒中で、テトラヒドロピラン（ＴＨＰ）エーテルとしてモノ保護されたＰＥＧジオールのアルコキシドでのハロゲン化エステルの処理によって行う。このタイプのモノ保護ＰＥＧジオールの調製は、文献に十分に記載されている：例えば、ＲｉｃｈａｒｄＡ．ら、「Ｃｈｅｍ．Ｅｕｒ．Ｊ．」２００５、１１、７３１５−７３２１またはＳａｋｅｌｌａｒｉｏｕＥ．Ｇ．ら、「Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ」２００３、５９、９０８３−９０９０参照。

ＬＰ_１６

は下記のスキームに従って調製される：

ＡＬＫ＝ＣＨ _２ＣＨ _２の場合

ＡＬＫ≠ＣＨ _２ＣＨ _２の場合

工程（ｉｉ）：塩酸の溶液（例えば、ジオキサン中の溶液）またはトリフルオロ酢酸の溶液を使用する脱保護。

工程（ｉｖ）：ヒドロキシアジドＰＥＧ鎖の伸長；この反応は、ＴＨＦまたはＤＭＦなどの無水極性非プロトン性溶媒中で、ヒドロキシアジドＰＥＧのアルコキシドでのハロゲン化エステルの処理によって行う。

前記アジドＰＥＧアルコールは、市販されており、または対応するＰＥＧアルコール（ｉ＝３から１２のものについては市販されている。）から調製することができる。

ＬＰ_１７

は下記のスキームに従って調製される：

工程（ｉ）：ＮＨＳエステル形態でのカルボン酸の活性化；この反応は、室温で、ＤＣＭなどの極性非プロトン性溶媒中で、固定型ＤＣＣなどのカップリング剤の存在下、ＮＨＳでの処理によって行う。

アセチレン基を有する酸は、ＡＬＫ＝−（ＣＨ_２）_ｍ−（この場合、ｍ＝１から１０）のもの（例えば、３−ブチン酸）については、市販されている。

ＬＰ_１８

は下記のスキームに従って調製される：

工程（ｉ）：アジ化物によるハロゲン化物の求核置換；この反応は、アセトンなどの極性非プロトン性溶媒中、アジ化ナトリウムの存在下で行う。

工程（ｉｉ）：メチルエステルの鹸化；この反応は、室温で、ＴＨＦ／水混合物などの極性溶媒の混合物中、水酸化リチウムの存在下で行う。

ハロアルキル単位を有するメチルエステルは、ＡＬＫ＝−（ＣＨ_２）_ｍ−（この場合、ｍ＝１から６）のもの（例えば、ブロモ酢酸メチル）については、市販されている。

ＬＰ_１９

は下記のスキームに従って調製される：

ＡＬＫ＝ＣＨ _２ＣＨ _２の場合
経路Ａ：

経路Ｂ：

ＡＬＫ≠ＣＨ _２ＣＨ _２の場合

工程（ｉ）：求核置換；この反応は、ＴＨＦなどの無水極性非プロトン性溶媒中、ＮａＨなどの塩基の存在下および臭化アリルまたは４−ブロモ−１−ブテンなどのハロゲン化アルケニルの存在下で行う。

工程（ｉｖ）：ＰＥＧ鎖の伸長；この反応は、ＴＨＦなどの無水極性非プロトン性溶媒中で、触媒量のナトリウムの作用により生成されたアルコキシドでのエステル形態で保護された不飽和酸の処理によって行う。

ＬＰ_２０

は下記のスキームに従って調製される：

エチレン基を有する酸は、ＡＬＫ＝−（ＣＨ_２）_ｍ−（この場合、ｍ＝１から１０）のもの（例えば、３−ブテン酸）については、市販されている。

ＬＰ_２１下記のスキームに従って調製されるＺａＳ−ＡＬＫ−ＣＨ_２−ＮＲ_１２−（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_ｉ−ＣＨ_２ＣＨ_２−ＮＨＲ’_１２：

Ｒ _１２およびＲ’ _１２＝Ｈの場合

Ｒ _１２ ≠ＨおよびＲ’ _１２＝Ｈの場合

Ｒ _１２＝ＨおよびＲ’ _１２ ≠Ｈの場合

Ｒ _１２およびＲ’ _１２ ≠Ｈの場合

工程（ｉ）：トシラート形態でのアルコールの活性化；この反応は、ＤＣＭなどの極性非プロトン性溶媒中で、酸化銀およびヨウ化カリウムの存在下、塩化トシルでの処理によって行う。この手順は、実施例６、化合物２３の条件に基づくものであり得る。

工程（ｉｉ）：トシラートの求核置換；この反応は、アセトニトリルなどの極性非プロトン性溶媒中、アジ化ナトリウムでの処理によって行う。この手順は、実施例６、化合物２４の条件に基づくものであり得る。

工程（ｉｉｉ）：アジ化物の還元；この反応は、ＴＨＦ／水混合物などの極性溶媒中、トリフェニルホスフィンの存在下で行う。この手順は、実施例６、化合物２６の条件に基づくものであり得る。

工程（ｉｖ）：アルデヒドでの還元アミノ化；この反応は、室温で、ＤＣＭなどの無水極性非プロトン性溶媒中、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウムなどの還元剤および、必要な場合には、触媒としての酢酸の存在下で行う。この手順は、実施例６、化合物２７の条件に基づくものであり得る。

工程（ｖ）：塩酸の溶液（例えば、ジオキサン中の溶液）またはトリフルオロ酢酸の溶液を使用する脱保護。この手順は、実施例６、化合物２９の条件に基づくものであり得る。

工程（ｖｉ）：ＮＨＢｏｃ官能基の保護；この反応は、ＴＨＦまたはＤＭＦなどの極性非プロトン性溶媒中で、１当量の塩基、例えば水素化ナトリウム、続いてハロゲン化ベンジル、例えば塩化ベンジルでの処理によって行う。

工程（ｖｉｉ）：ベンジル基の開裂およびアジド官能基の還元；この反応は、メタノールなどのプロトン性溶媒中、水酸化パラジウムなどの触媒の存在下で行う。

工程（ｖｉｉｉ）：アミンのアルキル化；この反応は、ＴＨＦなどの無水極性非プロトン性溶媒中で、ハロゲン化アルキルなどの離核性基を有する試薬の存在下、水素化ナトリウムなどの塩基で処理することによって行う。この手順は、実施例６、化合物２５の条件に基づくものであり得る。

アミン官能基がＢｏｃ基で場合により保護されているアミノ−ＰＥＧ−アルコールは、市販されており（例えば、Ｎ−Ｂｏｃ−アミノエトキシエトキシエタノールもしくは１−アミノ−３，６，９−トリオキサウンデカニル−１１−オール）、またはＵＳ７２３０１０１に記載されている手順に従ってＰＥＧジオール（ｉ＝３から１２のものについては市販されている。）から調製することができる。アルデヒドＺａＳＳ−ＡＬＫ−ＣＨＯ、例えば２−メチル−２−（メチルジチオ）プロパナールは、市販されており、または適切に保護されたハロゲン化アルコール（例えば、シリルエーテル形態のもの）からチオ酢酸カリウムおよびメタンチオスルホナートタイプの誘導体での逐次的処理によって達成されるジスルフィド単位を有するアルコールの酸化によって調製することができる。

ＬＰ_２２

は下記のスキームに従って調製される：

Ｒ _１２およびＲ’ _１２＝Ｈの場合

Ｒ _１２ ≠ＨおよびＲ’ _１２＝Ｈの場合

Ｒ _１２＝ＨおよびＲ’ _１２ ≠Ｈの場合

Ｒ _１２およびＲ’ _１２ ≠Ｈの場合

工程（ｉ）：トシラート形態でのアルコールの活性化；この反応は、ＤＣＭなどの極性非プロトン性溶媒中で、酸化銀およびヨウ化カリウムの存在下、塩化トシルでの処理によって行う。この工程は、実施例６、化合物２３の条件に基づくものであり得る。

工程（ｉｉ）：トシラートの求核置換；この反応は、アセトニトリルなどの極性非プロトン性溶媒中、アジ化ナトリウムでの処理によって行う。この工程は、実施例６、化合物２４の条件に基づくものであり得る。

工程（ｉｖ）：ペプチドカップリング；この反応は、ジメチルホルムアミドなどの極性非プロトン性溶媒中、Ｎ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド／１−ヒドロキシベンゾトリアゾール系などのカップリング剤の存在下およびＴＥＡなどの塩基の存在下で行う。

工程（ｖ）：塩酸の溶液（例えば、ジオキサン中の溶液）またはトリフルオロ酢酸の溶液を使用する脱保護。この手順は、実施例７、化合物３２の条件に基づくものであり得る。

工程（ｖｉ）：官能基ＮＨＢｏｃの保護；この反応は、ＴＨＦまたはＤＭＦなどの極性非プロトン性溶媒中で、１当量の塩基、例えば水素化ナトリウム、続いてハロゲン化ベンジル、例えば塩化ベンジルでの処理によって行う。

工程（ｖｉｉ）：ベンジル基の開裂およびアジド官能基の還元；この反応は、メタノールなどのプロトン性溶媒中、水酸化パラジウムなどの触媒の存在下での水素を用いて行う。

工程（ｖｉｉｉ）：アルデヒドでの還元アミノ化によるアミンのアルキル化；この反応は、室温で、ＤＣＭなどの無水極性非プロトン性溶媒中、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウムなどの還元剤および、必要な場合には、触媒としての酢酸の存在下で行う。

工程（ｉｘ）：ＮＨＢｏｃ基のアルキル化；この反応は、ＴＨＦなどの無水極性非プロトン性溶媒中で、ハロゲン化アルキルなどの離核性基を有する試薬の存在下、水素化ナトリウムなどの塩基での処理によって行う。この手順は、実施例６、化合物２５の条件に基づくものであり得る。

アミン官能基がＢｏｃ基で保護されているまたはそうでないアミノ−ＰＥＧ−アルコールは、市販されており（例えば、Ｎ−Ｂｏｃ−アミノエトキシエトキシエタノールもしくは１−アミノ−３，６，９−トリオキサウンデカニル−１１−オール）、またはＵＳ７２３０１０１に記載されている手順に従ってＰＥＧジオール（ｉ＝３から１２のものについては市販されている。）から調製することができる。カルボン酸ＺａＳ−ＡＬＫ−ＣＯ_２Ｈ、例えば４−メチル−４−（メチルジチオ）ペンタン酸は、市販されており、またはハロゲン化カルボン酸からチオ酢酸カリウムおよびメタンチオスルホナートタイプの誘導体での逐次的処理により調製することができる。

ＬＰ_２３

は下記のスキームに従って調製される：

Ｒ _１２＝Ｈの場合

Ｒ _１２ ≠Ｈの場合

工程（ｉ）：メシラート形態のアルコールの活性化；この反応は、ＤＣＭなどの無水極性非プロトン性溶媒中で、ＴＥＡなどの塩基の存在下、塩化メシルでの処理により行う。

工程（ｉｉ）：遊離チオールの形成；この反応は、エタノール／水混合物などの還流極性プロトン性溶媒中で、逐次的二工程：チオウレアでのメシラートの置換、続いて、水酸化ナトリウムなどの塩基を添加することによるイソチオウロニウム塩のインサイチュー加水分解で行う。

工程（ｉｉｉ）：チオールの保護；この反応は、エタノール／水混合物などの極性溶媒の混合物中で、炭酸ナトリウムなどの塩基の存在下、メタンチオスルホナート官能基、例えばメタンチオスルホン酸メチルを含む試薬を用いて行う。

工程（ｉｖ）：塩酸の溶液（例えば、ジオキサン中の溶液）またはトリフルオロ酢酸の溶液を使用する脱保護。

工程（ｖ）：アミンのアルキル化；この反応は、ＴＨＦなどの無水極性非プロトン性溶媒中で、ハロゲン化アルキルなどの離核性基を有する試薬の存在下、水素化ナトリウムなどの塩基での処理によって行う。

アミン官能基がＢｏｃ基で保護されているまたは保護されていないアミノ−ＰＥＧ−アルコールは、市販されており（例えば、Ｎ−Ｂｏｃ−アミノエトキシエトキシエタノールもしくは１−アミノ−３，６，９−トリオキサウンデカニル−１１−オール）、またはＵＳ７２３０１０１に記載されている手順に従ってＰＥＧジオール（ｉ＝３から１２のものについては市販されている。）から調製することができる。
ＬＰ_２４

は下記のスキームに従って調製される：

工程（ｉ）：ＮＨＳエステルの形態でのＦｍｏｃ−Ｌ−バリンの活性化；この反応は、ＴＨＦなどの無水極性非プロトン性溶媒中で、ＤＣＣなどのカップリング剤の存在下、ＮＨＳでの処理によって行う。

工程（ｉｉ）：Ｆｍｏｃ−Ｌ−バリン−ＮＨＳとＬ−シトルリンとのペプチドカップリング；この反応は、ジメトキシエタン／ＴＨＦ／水混合物などの極性溶媒中、重炭酸ナトリウムなどの塩基の存在下で行う。

工程（ｉｉｉ）：４−アミノベンジルアルコールとのペプチドカップリング；この反応は、ＤＣＭ／メタノール混合物などの極性溶媒中、ＥＥＤＱなどのカップリング剤の存在下で行う。

工程（ｉｖ）：アミンＦｍｏｃの脱保護；この反応は、ＤＣＭ／メタノール混合物などの極性溶媒中、ジエチルアミンなどの塩基の存在下で行う。

工程（ｖ）：ＮＨＳエステル形態でのカルボン酸の活性化；この反応は、ＤＣＭなどの極性非プロトン性溶媒中で、ＥＤＣＩ塩酸塩などのカップリング剤の存在下、ＮＨＳでの処理によって行う。

工程（ｖｉ）：ジペプチドとＮＨＳエステルとのペプチドカップリング；この反応は、室温で、ＤＣＭ／アセトニトリル混合物などの極性非プロトン性溶媒中で行う。

アリルエステル形態でモノ保護された二酸は、ｎ＝２のもの（コハク酸モノアリル）については市販されており、またはメチルもしくはｔ−ブチルモノエステル（ｎ＝２から６のものについては市販されている。）のエステル交換によって調製することができる。

ＬＰ_２５

は下記のスキームに従って調製される：

工程（ｉ）：ＮＨＳエステル形態でのＦｍｏｃ−Ｌ−バリンの活性化；この反応は、ＴＨＦなどの無水極性非プロトン性溶媒中で、ＤＣＣなどのカップリング剤の存在下、ＮＨＳでの処理によって行う。

工程（ｉｉ）：Ｆｍｏｃ−Ｌ−バリン−ＮＨＳとＬ−シトルリンとのペプチドカップリング；この反応は、ＤＭＥ／ＴＨＦ／水混合物などの極性溶媒中、重炭酸ナトリウムなどの塩基の存在下で行う。

工程（ｖ）：ＮＨＳエステル形態のカルボン酸の活性化；この反応は、室温で、ＤＣＭなどの極性非プロトン性溶媒中で、固定型ＤＣＣなどのカップリング剤の存在下、ＮＨＳでの処理によって行う。

アリル形態でモノ保護されたＰＥＧ二酸は、リンカーＬ_１４の調製の説明に従って調製する。

ＬＰ_２６

ブロモ酢酸およびヨード酢酸２，５−ジオキソピロリジン−１−イルは、市販製品であり、これらのＣＡＳ番号は、それぞれ、４２０１４−５１−７および３９０２８−２７−８である。

コンジュゲートを調製するための方法
コンジュゲートは、
（ｉ）結合剤の場合により緩衝された水溶液と式（ＩＩ）のクリプトフィシン誘導体の溶液とを接触させ、放置して反応させる工程；
（ｉｉ）ならびにこの後、工程（ｉ）において形成されたコンジュゲートをクリプトフィシン誘導体からおよび／または未反応結合剤からおよび／または形成された任意の凝集体から場合により分離する工程
に存する方法によって得られる。

さらに特に、工程（ｉｉ）において、工程（ｉ）からのコンジュゲートを未反応クリプトフィシン誘導体からおよび形成された任意の凝集体からのみ分離し、任意の未反応結合剤を溶液中に残す。

接触させることの目的は、化学基ＲＣＧ１と化学基ＲＣＧ２を反応させて、共有結合の形成によりクリプトフィシン誘導体を結合剤に確実に結合させることであり；好ましくは
ＲＣＧ１が−ＳＺ_ａを表すとき：結合剤を、修飾剤で、該結合剤上に適する基ＲＣＧ２、とりわけ表Ｉの第二列に記載したもの：
ＲＣＧ１が−ＳＨを表す場合、ジスルフィド化学基；
ＲＣＧ１が、ＳＺ_ａ（この場合、Ｚ_ａ≠Ｈ）を表す場合、チオール化学基；
ＲＣＧ１が−ＳＨを表す場合、マレイミドまたはヨードアセトアミド化学基、
を導入するように修飾する。；
抗体（ＭＡｂ）の場合のコンジュゲートの式は、表Ｉの第４列において見つけられる；
ＲＣＧ１が、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｚ_ｂＲ_ｂを表すとき：前記反応は、好ましくは、結合剤のアミノ官能基、とりわけ抗体のリシン（Ｌｙｓ）残基の側鎖が持つε−アミノ基に対して起こる。抗体（ＭＡｂ）の場合、次の式のコンジュゲートが、この場合、得られる：ＭＡｂ−［ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｌ＊−Ｃｒｙｐｔｏ］_ｄ（この場合、Ｌ＊＝（ＲＣＧ１＝−Ｃ＝（＝Ｏ）−Ｚ_ｂＲ_ｂを含み、およびＬ＝−Ｌ＊Ｃ（＝Ｏ）−Ｚ_ｂＲ_ｂのような）リンカーＬのフラグメント）；
Ｇ＝−（ＣＨ_２）_ｎＹの場合の式（ＩＩＩ）のクリプトフィシン誘導体が存在する場合には、結合剤は、Ｙ＝−Ｃｌのとき基−ＳＨを、Ｙ＝−Ｎ_３のとき基−Ｃ≡ＣＨを、またはＹ＝−ＯＨもしくは−ＮＨ_２のときカルボン酸基を含む；
マレイミドまたはハロアセトアミドタイプの反応性化学基ＲＣＧ１を含むクリプトフィシン誘導体が存在する場合には、結合剤は、チオール化学基を含む。

用語「凝集体」は、２つ以上結合剤の間で形成し得る会合体を意味し、前記結合剤は、コンジュゲーションによってことによると修飾されている。凝集体は、多種多様なパラメータ、例えば、溶液中の結合剤の高い濃度、溶液のｐＨ、高い剪断力、グラフトされているダイマーの数およびこれらのダイマーの疎水性、温度の影響を受けて形成しやすい（「Ｊ．ＭｅｍｂｒａｎｅＳｃｉ．」２００８、３１８、３１１−３１６の序論に引用されている参考文献を参照のこと）が、これらのパラメータのうちの幾つかの影響は、明確に解明されていない。タンパク質または抗体の場合、ＡＡＰＳＪｏｕｒｎａｌ、「ＰｒｏｔｅｉｎＡｇｇｒｅｇａｔｉｏｎａｎｄＢｉｏｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ」２００６、８（３）、Ｅ５７２−Ｅ５７９を参照してもよい。凝集体含有量は、ＳＥＣなどの公知の技術によって決定することができる（この技術に関しては、「ＡｎａｌｙｔｉｃａｌＢｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ」１９９３、２１２（２）、４６９−４８０参照）。

結合剤の水溶液を、例えば、緩衝液、例えばリン酸カリウムもしくはＮ−２−ヒドロキシエチルピペラジン−Ｎ’−２−エタンスルホン酸（ＨＥＰＥＳ緩衝液）、または緩衝液の混合物、例えば後で説明する緩衝液Ａで緩衝することができる。緩衝液は、結合剤の性質に依存する。クリプトフィシン誘導体を極性有機溶媒、例えばＤＭＳＯまたはＤＭＡに溶解する。

反応を一般には２０℃と４０℃の間の温度で行う。反応時間は、１時間と２４時間の間で様々であり得る。屈折率および／または紫外線検出器を伴うＳＥＣによって抗体とクリプトフィシン誘導体との反応をモニターして、この反応の進行度を決定することができる。置換度が不十分である場合、反応をより長く放置してもよく、および／またはクリプトフィシン誘導体を添加してもよい。特定の条件に関するさらなる詳細については実施例の節で与える一般法を参照することができる。特定の実施形態を実施例９、１０、１１、２５、２６および２７において説明する。

当業者は、工程（ｉｉ）の分離のために自由に使える様々なクロマトグラフ技術を有する：コンジュゲートを、例えば、立体排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）により、吸着クロマトグラフィー（例えば、イオン交換、ＩＥＣ）により、疎水性相互作用クロマトグラフィー（ＨＩＣ）により、アフィニティークロマトグラフィーにより、セラミックハイドロキシアパタイトなどの混合支持体を用いるクロマトグラフィーにより、またはＨＰＬＣにより、精製することができる。透析またはダイアフィルトレーションによる精製を用いることもできる。

工程（ｉ）または（ｉｉ）の後、コンジュゲートの溶液を限外濾過および／またはダイアフィルトレーション工程（ｉｉｉ）に付してもよい。このようにして、これらの工程の後、水溶液の状態のコンジュゲートが得られる。

抗体
抗体（抗体に関しては、Ｊａｎｅｗａｙら、「Ｉｍｍｕｎｏｂｉｏｌｏｇｙ」、第５版、２００１，ＧａｒｌａｎｄＰｕｂｌｉｓｈｉｎｇ、ＮｅｗＹｏｒｋ参照）は、とりわけＷＯ０４／０４３３４４、ＷＯ０８／０１０１０１、ＷＯ０８／０４７２４２、ＷＯ０５／００９３６９（抗ＣＡ６）またはＷＯ２０１０／０１４８１２に記載されているものから選択することができる。場合により、抗体を、修飾剤で、クリプトフィシン誘導体の結合を促進するように修飾してもよい（上記参照）。抗体は、とりわけ、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体または多重特異性抗体であり得る。抗体フラグメントである場合もある。マウス、ヒト、ヒト化またはキメラ抗体である場合もある。

コンジュゲート
コンジュゲートは、一般に、結合剤に共有結合で結合している約１から１０のクリプトフィシン誘導体を含む（このことが、グラフト度、または「薬物対抗体比」即ち「ＤＡＲ」である。）。この数は、結合剤のおよびクリプトフィシン誘導体の性質の関数として変化し、ならびにまた、コンジュゲーション工程で用いられる操作条件（例えば、結合剤に対するクリプトフィシン誘導体の当量数、反応時間、溶媒のおよび任意の補助溶媒の性質）の関数として変化する。結合剤とクリプトフィシン誘導体を接触させると、異なるＤＡＲにより互いに個々に区別される幾つかのコンジュゲート、場合により未反応結合剤、場合により凝集体を含む混合物となる。従って、最終溶液に関して決定するＤＡＲは、平均ＤＡＲに相当する。

結合剤が抗体である場合、ＵＶ分光法が、ＤＡＲを決定するために用いられる方法であり得る。この方法は、ＡｎｔｏｎｙＳ．Ｄｉｍｉｔｒｏｖ（編者）、ＬＬＣ、２００９、（「ＴｈｅｒａｐｅｕｔｉｃＡｎｔｉｂｏｄｉｅｓａｎｄＰｒｏｔｏｃｏｌｓ」、ｖｏｌ．５２５、４４５、ＳｐｒｉｎｇｅｒＳｃｉｅｎｃｅに提示されているものに基づく。この方法は、分離工程（ｉｉ）の後、コンジュゲートの溶液の吸光度を、λ１およびλ２と示す２つの波長で測定することに存する。コンジュゲーション前に測定した裸の抗体のおよびクリプトフィシン誘導体の下記のモル吸光係数を用いる。

λ１およびλ２でのコンジュゲート溶液の吸光度（Ａ_λ１）および（Ａ_λ２）を、ＳＥＣスペクトルの対応するピークを用いて（この方法により「ＤＡＲ（ＳＥＣ）」を計算することができる。）または標準的なＵＶ分光光度計を使用することによって（この方法により「ＤＡＲ（ＵＶ）」を計算することができる。）測定する。吸光度は、
Ａ_λ１＝（ｃ_Ｄ×ε_Ｄλ１）＋（ｃ_Ａ×ε_Ａλ１））
Ａ_λ２＝（ｃ_Ｄ×ε_Ｄλ２）＋（ｃ_Ａ×ε_Ａλ２）
の形で表示することができ、これらの方程式について、
ｃ_Ｄおよびｃ_Ａは、それぞれ、クリプトフィシン誘導体に関するコンジュゲートの部分の溶液中の濃度、および抗体に関するコンジュゲートの部分の溶液中の濃度を示し；
ε_Ｄλ１およびε_Ｄλ２は、それぞれ、コンジュゲーション前のクリプトフィシン誘導体についての２つの波長λ１およびλ２でのモル吸光係数を示し、これらの係数は、Ｚ_ａ＝−ＳＭｅの場合のタイプＳＺ_ａの式（ＩＩ）の化合物およびＺ_ｂＲ_ｂ＝ＯＭｅまたはＯＣＨ_２−ＣＨ＝ＣＨ_２の場合のタイプ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｚ_ｂＲ_ｂの式（ＩＩ）の化合物に関して測定したものであり；
ε_Ａλ１およびε_Ａλ２は、それぞれ、波長λ１およびλ２での裸の抗体のモル吸光係数を示す。

用語「裸の抗体」は、クリプトフィシン誘導体に結合していない抗体、即ち、コンジュゲーション工程前の抗体を意味する。

これら２つの方程式を解くと、
ｃ_Ｄ＝［（ε_Ａλ１×Ａ_λ２）−（ε_Ａλ２×Ａ_λ１）］／［（ε_Ｄλ２×ε_Ａλ１）−（ε_Ａλ２×ε_Ｄλ１）］
ｃ_Ａ＝［Ａ_λ１−（ｃ_Ｄ×ε_Ｄλ１）］／ε_Ａλ１
となる。

従って、平均ＤＡＲは、ｃ_Ｄ／ｃ_Ａに対応する。クリプトフィシン誘導体の場合、波長λ１＝２８０ｎｍを考えることができ、クリプトフィシン誘導体の性質に依存して、λ２は、特定波長範囲２４６ｎｍ−２５２ｎｍ内で選択される。ＤＡＲ（ＵＶ）は、好ましくは０．５より大きく、さらに特に１と１０の間、およびさらにいっそう特に２と７の間である。

前記コンジュゲートを抗癌剤として使用することができる。結合剤の存在のため、前記コンジュゲートは、健常細胞ではなく腫瘍細胞に対して高選択的になる。このことにより、クリプトフィシン誘導体を腫瘍に似た環境に向けることまたは腫瘍に直接向けることが可能になる；（このことに関しては、癌治療におけるモノクローナル抗体コンジュゲートの使用を記載している以下の出版物を参照のこと：「Ａｎｔｉｂｏｄｙ−ｄｒｕｇｃｏｎｊｕｇａｔｅｓｆｏｒｃａｎｃｅｒｔｈｅｒａｐｙ」、ＣａｒｔｅｒＰ．Ｊ．ら、ＣａｎｃｅｒＪ．２００８、１４、１５４−１６９；「Ｔａｒｇｅｔｅｄｃａｎｃｅｒｔｈｅｒａｐｙ：ｃｏｎｆｅｒｒｉｎｇｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙｔｏｃｙｔｏｔｏｘｉｃｄｒｕｇｓ」、ＣｈａｒｉＲ．、Ａｃｃ．Ｃｈｅｍ．Ｒｅｓ．２００８，４１，９８−１０７）。固形癌または液状癌を治療することが可能である。前記コンジュゲートは、単独で使用することができ、または少なくとも１つの他の抗癌剤と併用することができる。

前記コンジュゲートは、一般には１ｍｇ／ｍＬと１０ｍｇ／ｍＬの間の濃度の、緩衝水溶液の形態で調合される。この溶液自体を潅流形態で注入することができ、またはこの溶液を再希釈して潅流溶液を作ることができる。

（実施例）
用いる分析法
高圧液体クロマトグラフィー−質量分析法（ＬＣＭＳ）
方法Ａ１
この分析は、ＷａｔｅｒｓＺＱマシンおよびＸＢｒｉｄｇｅＣ_１８２．５μｍ（３×５０ｍｍ）カラムにより、７０℃で、０．９ｍＬ／分の流量、（Ａ）水／０．１％ギ酸のおよび（Ｂ）アセトニトリル／０．１％ギ酸の溶出勾配（７分）（勾配：５．３分かけて５％から１００％Ｂ；５．５分：１００％Ｂ；６．３分：５％Ｂ）ならびにポジティブおよび／またはネガティブモードでのエレクトロスプレーイオン化を用いて行う。

方法Ａ２
この分析は、ＷａｔｅｒｓＵＰＬＣ−ＳＱＤマシンおよびＡｃｑｕｉｔｙＢＥＨＣ_１８１．７μｍ（２．１×５０ｍｍ）カラムにより、５０℃で、１ｍＬ／分の流量、（Ａ）水／０．１％ギ酸のおよび（Ｂ）アセトニトリル／０．１％ギ酸の溶出勾配（２分）（勾配：０．８分かけて５％から５０％Ｂ；１．２分：１００％Ｂ；１．８５分：１００％Ｂ；１．９５分：５％Ｂ）ならびにポジティブおよび／またはネガティブモードでのエレクトロスプレーイオン化を用いて行う。

方法Ａ３
この分析は、ＷａｔｅｒｓＵＰＬＣ−ＳＱＤマシンおよびＡｃｑｕｉｔｙＢＥＨＣ_１８１．７μｍ（２．１×５０ｍｍ）カラムにより、７０℃で、１ｍＬ／分の流量、（Ａ）水／０．１％ギ酸のおよび（Ｂ）アセトニトリル／０．１％ギ酸の溶出勾配（２分）（勾配：１分かけて５％から５０％Ｂ；１．３分：１００％Ｂ；１．４５分：１００％Ｂ；１．７５分：５％Ｂ）ならびにポジティブおよび／またはネガティブモードでのエレクトロスプレーイオン化を用いて行う。

方法Ａ４
この分析は、ＷａｔｅｒｓＺＱマシンおよびＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘＫｉｎｅｔｅｘＣ_１８１００Ａ２．６μｍ（３×５０ｍｍ）カラムにより、４５℃で、１ｍＬ／分の流量、（Ａ）水／０．１％ギ酸のおよび（Ｂ）アセトニトリル／０．１％ギ酸の溶出勾配（６分）（勾配：６％Ｂ：０．８分；４．１分かけて６％から１００％Ｂ；４．８分：１００％Ｂ；５．０−６．０分：６％Ｂ）ならびにポジティブおよび／またはネガティブモードでのエレクトロスプレーイオン化を用いて行う。

方法Ａ５
この分析は、ＷａｔｅｒｓＺＱマシンおよびＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘＫｉｎｅｔｅｘＣ_１８２．６μｍ（３×１０００ｍｍ）カラムにより、５０℃で、０．８ｍＬ／分の流量、（Ａ）水／０．１％ギ酸のおよび（Ｂ）アセトニトリル／０．１％ギ酸の溶出勾配（８分）（勾配：４％Ｂ：０．１５分；６．８５分かけて４％から１００％Ｂ；７．１分：１００％Ｂ；７．４−８．２分：４％Ｂ）ならびにポジティブおよび／またはネガティブモードでのエレクトロスプレーイオン化を用いて行う。

質量分析法（ＭＳ）
ＷａｔｅｒｓＧＣＴマシンへの直接導入（ＬＣなしの直接導入）によりスペクトルを獲得した。

立体排除クロマトグラフィー−高分解能質量分析法（ＳＥＣ−ＨＲＭＳ）
この分析は、コンジュゲートの事前の脱グリコシル化工程を必要とすることがある。この工程は、コンジュゲート溶液に２容量％の酵素ＰＮＧａｓｅＦ溶液（Ｎ−グリカナーゼ酵素の凍結乾燥物１００単位のフラスコをＭｉｌｌｉＱ水で１００ｍＬにすることによって調製したもの）を添加することによって行う。この溶液をボルテックスにより均質化し、３７℃で１９時間インキュベートする。脱グリコシル化サンプルのＳＥＣ−ＨＲＭＳによる分析のための準備が整う。クロマトグラフ分析は、ＡｇｉｌｅｎｔＨＰ１１００マシンおよびＷａｔｅｒｓＢｉｏｓｕｉｔｅ２５０ＨＲＳＥＣ４μｍ（４．６×３００ｍｍ）カラムにより、３０℃で、０．４ｍＬ／分の流量および（Ａ）２５ｍＭギ酸アンモニウムｐＨ＝７／（Ｂ）アセトニトリル７０／３０の１５分間の均一濃度溶離を用いて行う。質量分析法は、ＷａｔｅｒｓＱＴＯＦＩＩマシンにより、ポジティブモードでのエレクトロスプレーイオン化を用いて行う。質量スペクトルをＷａｔｅｒｓＭａｘＥｎｔ１ソフトウェアでデコンボリューションする。

立体排除クロマトグラフィー（ＳＥＣＨＰＬＣ）
この分析は、Ｌ２４５５ＤＡＤ分光光度検出器を備えたＭｅｒｃｋＬａｃｈｒｏｍＥｌｉｔｅＨＰＬＣマシン、およびＴｏｓｏｈＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅＴＳＫｇｅｌＧ３０００ＳＷＸＬ５μｍ（７．８×３００ｍｍ）カラムにより、０．５ｍＬ／分の流量、および０．２ＭのＫＣｌと０．０５２ＭのＫＨ_２ＰＯ_４と２０容量％のイソプロパノールとを含有するｐＨ７緩衝液での３０分の均一濃度溶離を用いて行う。

^１Ｈ核磁気共鳴（ＮＭＲ）
^１ＨＮＭＲスペクトルは、モデルＤＲＸ−３００、ＤＲＸ−４００、ＤＲＸ−５００またはＤＲＸ−６００いずれかのＢｒｕｋｅｒＡｖａｎｃｅ分光計により獲得した。化学シフトをｐｐｍで与える。

−ＳＺ _ａを末端に有するリンカーＬを含むクリプトフィシン誘導体の場合のコンジュゲートを調製するために使用する一般法
逐次的二工程での方法
第一工程
先ず、抗体を活性化ＮＨＳエステルで修飾して、抗体の表面にピリジルジスルフィド基を導入する。０．０５Ｍのリン酸カリウムと０．０５ＭのＮａＣｌとを含有する水性ｐＨ６．５緩衝液（緩衝液Ａと呼ぶ）中の抗体ｈｕ２Ｈ１１の溶液を、最終抗体濃度が５ｍｇ／ｍＬと１０ｍｇ／ｍＬの間になるようにおよび該水性緩衝液中のＤＭＡの百分率が５％になるようにＤＭＡに溶解した５から１０当量のＮＨＳ活性化エステルで処理する。反応を２時間、室温で継続する。この混合物を、０．０５ＭのＨＥＰＥＳと０．０５ＭのＮａＣｌと２ｍＭのＥＤＴＡとを含有する水性ｐＨ８緩衝液中で前もって平衡させたゲル（Ｓｅｐｈａｄｅｘ（商標）Ｇ２５マトリックス、ＧＥＨｅａｌｔｈｃａｒｅ）を用いる濾過カラムに入れる。修飾抗体をｐＨ８ＨＥＰＥＳ緩衝液で溶出させ、回収し、ＵＶ分光法によって検定して、サンプルの抗体濃度およびピリジルジスルフィド基の数を決定する。修飾抗体の試料をジチオトレイトールで処理してジスルフィド結合を還元し、放出されたピリジン−２−チオンを分光法によって検定する（吸光係数：ε_{３４３ｎｍ}：８０８０Ｍ^−１ｃｍ^−１、ε_{２８０ｎｍ}：ピリジン−２−チオンについては５１００Ｍ^−１ｃｍ^−１、ε_{２８０ｎｍ}：抗体については２０８３８０Ｍ^−１ｃｍ^−１）。平均で、１抗体分子あたり３から６のピリジルジスルフィド基がグラフトされる。

第二工程
第一工程からの修飾抗体溶液を、上記で説明した水性ｐＨ８緩衝液で希釈し、この後、最終抗体濃度が３ｍｇ／ｍＬになるようにおよび該水性緩衝液中のＤＭＡの百分率が２０％になるようにクリプトフィシン誘導体（５当量）の溶液で処理する；クリプトフィシン誘導体の当量数を、第一工程中に導入されたピリジルジスルフィド分子数に対して表示する。反応を一晩、３０℃でまたは約２０００ｒｐｍで攪拌しながら継続する。この混合物をＳＥＣＨＰＬＣによって分析して、抗体へのクリプトフィシン誘導体のグラフト度を決定する。置換度が不十分である場合、前記混合物をＤＭＡ中１から５当量の追加のクリプトフィシン誘導体で、３時間、３０℃でまたは約２０００ｒｐｍで攪拌しながら処理する。混合物をＭｉｌｌｅｘ（登録商標）−ＳＶ５μｍフィルター（ＰＶＤＦ膜、Ｄｕｒａｐｏｒｅ、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）によって濾過し、この後、０．０１Ｍのリン酸塩と０．１４ＭのＮａＣｌと１０％から２０％のＮＭＰとを含有する水性ｐＨ６．５緩衝液で前もって平衡させたＳｕｐｅｒｄｅｘ２００ｐｇマトリックス（ＨｉＬｏａｄ１６／６０脱塩カラム、ＧＥＨｅａｌｔｈｃａｒｅ）を使用するゲル濾過によって精製する。モノマー形態のコンジュゲート化抗体を含有する画分を回収し、プールし、ＡｍｉｃｏｎＵｌｔｒａ−１５（Ｕｌｔｒａｃｅｌ１０ｋまたは５０ｋ膜、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）で２ｍｇ／ｍＬと５ｍｇ／ｍＬの間の濃度に濃縮する。緩衝液の交換を最後に行って、コンジュゲート保存緩衝液から有機溶媒を除去する。組成およびｐＨがそれぞれのコンジュゲートに適している水性緩衝液で前もって平衡させたＳｅｐｈａｄｅｘ（商標）Ｇ２５マトリックス（Ｎａｐ−５、−１０、ＰＤ−１０、Ｈｉｐｒｅｐ２６／１０脱塩カラム、ＧＥＨｅａｌｔｈｃａｒｅ）から成るゲル濾過カラムに入れる。抗体および対応するクリプトフィシン誘導体について決定した吸光係数を用いてＵＶ分光法により最終コンジュゲートを検定して、抗体濃度および１抗体あたりの平均細胞傷害性因子数（ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｎｕｍｂｅｒ）を判定する。コンジュゲートのＳＥＣ−ＨＲＭＳスペクトルのデコンボリューションから置換度も計算することができる。

「ワン・ポット」二工程法
先ず、抗体を活性化ＮＨＳエステルによって修飾して、抗体の表面にピリジルジスルフィド基を導入する。０．０５Ｍのリン酸カリウムと０．０５ＭのＮａＣｌとを含有する水性ｐＨ６．５緩衝液中の抗体ｈｕ２Ｈ１１の溶液をｐＨ６．５リン酸緩衝液およびＨＥＰＥＳの１Ｎ水溶液で、初期ｐＨ６．５リン酸緩衝液のおよびＨＥＰＥＳの最終比率が９６／４になるように希釈して、ｐＨ≒７．５−８を得る。この抗体溶液を、最終抗体濃度が５ｍｇ／ｍＬと１０ｍｇ／ｍＬの間になるようにおよび水性緩衝液中のＤＭＡの百分率が５％になるようにＤＭＡに溶解したＮＨＳ活性化エステル５から１０当量で処理する。反応を２時間、室温で継続する。このように修飾した抗体溶液を、ｐＨ６．５リン酸緩衝液とＨＥＰＥＳの９６／４混合物で直接希釈し、この後、最終抗体濃度が３ｍｇ／ｍＬになるようにおよび前記水性緩衝液中のＤＭＡの百分率が２０％になるようにＤＭＡ中のクリプトフィシン誘導体（４当量）の溶液で処理する；クリプトフィシン誘導体の当量数を、第一工程中に導入されたＮＨＳ活性化エステルの当量数に対して表示する。反応を一晩、３０℃でまたは約２０００ｒｐｍで攪拌しながら継続する。この混合物をＳＥＣＨＰＬＣによって分析して、抗体へのクリプトフィシン誘導体のグラフト度を決定する。置換度が不十分である場合、前記混合物をＤＭＡ中１から５当量のさらなるクリプトフィシン誘導体で、３時間、３０℃でまたは約２０００ｒｐｍで攪拌しながら処理する。混合物をＭｉｌｌｅｘ（登録商標）−ＳＶ５μｍフィルター（ＰＶＤＦ膜、Ｄｕｒａｐｏｒｅ、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）によって濾過し、この後、０．０１Ｍのリン酸塩と０．１４ＭのＮａＣｌと１０％から２０％のＮＭＰとを含有する水性ｐＨ６．５緩衝液で前もって平衡させたＳｕｐｅｒｄｅｘ２００ｐｇマトリックス（ＨｉＬｏａｄ１６／６０脱塩カラム、ＧＥＨｅａｌｔｈｃａｒｅ）を使用するゲル濾過によって精製する。モノマー形態のコンジュゲート化抗体を含有する画分を回収し、プールし、ＡｍｉｃｏｎＵｌｔｒａ−１５（Ｕｌｔｒａｃｅｌ１０ｋまたは５０ｋ膜、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）で２ｍｇ／ｍＬと５ｍｇ／ｍＬの間の濃度に濃縮する。緩衝液の交換を最後に行って、コンジュゲート保存緩衝液から有機溶媒を除去する。組成およびｐＨがそれぞれのコンジュゲートに適している水性緩衝液で前もって平衡させたＳｅｐｈａｄｅｘ（商標）Ｇ２５マトリックス（Ｎａｐ−５、−１０、ＰＤ−１０、Ｈｉｐｒｅｐ２６／１０脱塩カラム、ＧＥＨｅａｌｔｈｃａｒｅ）から成るゲル濾過カラムに入れる。抗体および対応するクリプトフィシン誘導体について決定した吸光係数を用いてＵＶ分光法により最終コンジュゲートを検定して、抗体濃度および１抗体あたりの平均細胞傷害性因子数を判定する。コンジュゲートのＳＥＣ−ＨＲＭＳスペクトルのデコンボリューションから置換度も計算することができる。

−Ｃ（＝Ｏ）Ｚ _ｂＲ _ｂを末端に有するリンカーを含むクリプトフィシン誘導体の場合のコンジュゲートを調製するために使用する一般法
０．０５ＭのＨＥＰＥＳと０．０５ＭのＮａＣｌと２ｍＭのＥＤＴＡとを含有する水性ｐＨ８緩衝液中のまたは０．０５Ｍのリン酸カリウムと０．０５ＭのＮａＣｌとを含有する水性ｐＨ６．５緩衝液／１ＮＨＥＰＥＳの９６／４混合物から成る水性ｐＨ８緩衝液中の抗体ｈｕ２Ｈ１１の溶液を、最終抗体濃度が３ｍｇ／ｍＬになるようにおよび水性緩衝液中のＤＭＡの百分率が２０％になるようにＤＭＡ中の溶液（クリプトフィシン誘導体に対して過剰量）で処理する。反応を３時間、３０℃でまたは約２０００ｒｐｍで攪拌しながら継続する。この混合物をＳＥＣＨＰＬＣによって分析して、モノマー抗体集団に関する細胞傷害剤のグラフト度を決定する。置換度が不十分である場合、前記混合物をＤＭＡ中１から５当量のさらなるクリプトフィシン誘導体で、３時間、３０℃でまたは約２０００ｒｐｍで攪拌しながら処理する。混合物をＭｉｌｌｅｘ（登録商標）−ＳＶ５μｍフィルター（ＰＶＤＦ膜、Ｄｕｒａｐｏｒｅ、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）によって濾過し、この後、０．０１Ｍのリン酸塩と０．１４ＭのＮａＣｌと１０％から２０％のＮＭＰとを含有する水性ｐＨ６．５緩衝液で前もって平衡させたＳｕｐｅｒｄｅｘ２００ｐｇマトリックス（ＨｉＬｏａｄ１６／６０脱塩カラム、ＧＥＨｅａｌｔｈｃａｒｅ）を使用するゲル濾過によって精製する。モノマー形態のコンジュゲート化抗体を含有する画分を回収し、プールし、ＡｍｉｃｏｎＵｌｔｒａ−１５（Ｕｌｔｒａｃｅｌ１０ｋまたは５０ｋ膜、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）で２ｍｇ／ｍＬと５ｍｇ／ｍＬの間の濃度に濃縮する。緩衝液の交換を最後に行って、コンジュゲート保存緩衝液から有機溶媒を除去する。組成およびｐＨがそれぞれのコンジュゲートに適している水性緩衝液で前もって平衡させたＳｅｐｈａｄｅｘ（商標）Ｇ２５マトリックス（Ｎａｐ−５、−１０、ＰＤ−１０カラムまたはＨｉｐｅｒｐ２６／１０脱塩カラム、ＧＥＨｅａｌｔｈｃａｒｅ）から成るゲル濾過カラムに入れる。抗体および対応するクリプトフィシン誘導体について決定した吸光係数を用いてＵＶ分光法により最終コンジュゲートを検定して、抗体濃度およびグラフト度を測定する。コンジュゲートのＳＥＣ−ＨＲＭＳスペクトルのデコンボリューションから置換度も計算することができる。

抗体ｈｕ２Ｈ１１の場合について説明した方法を他の抗体におよび他の結合剤にも同様に適用することができる。

（Ｅ）−（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−３−イソブチル−１６−［（Ｓ）−１−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−｛４−［４−（４−メルカプト−４−メチルペンタノイル）ピペラジン−１−イルメチル］フェニル｝オキシラニル）エチル］−６，６−ジメチル−１，４−ジオキサ−８，１１−ジアザシクロヘキサデカ−１３−エン−２，５，９，１２−テトラオン

化合物２：（Ｅ）−（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−１６−｛（Ｓ）−１−［（Ｒ）−３−（４−クロロメチルフェニル）オキシラニル］エチル｝−３−イソブチル−６，６−ジメチル−１，４−ジオキサ−８，１１−ジアザビシクロヘキサデカ−１３−エン−２，５，９，１２−テトラオン

化合物１（３０ｍｇ；４２．９μｍｏｌ、Ａｌ−ａｗａｒＲ．Ｓ．ら、「Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．」２００３、４６、２９８５−３００７に従って調製したもの）を無水ＤＭＦ（２ｍＬ）に溶解し、この混合物を０℃に冷却し、この後、ＴＥＡ（１０７μｍｏｌ）および次いでＣＭＳ（６４．６μｍｏｌ）を添加する。１５分後、浴を取り外し、攪拌を１２時間、室温で継続する。混合物をＥｔＯＡｃ（２ｍＬ）の添加によって希釈し、有機相を水（２×１ｍＬ）で、ＮａＨＣＯ_３飽和水溶液（１ｍＬ）でおよびＮａＣｌ飽和水溶液（１ｍＬ）で洗浄する。有機相をＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過および減圧下での溶媒の蒸発後、生成物２を、結晶化する無色の油の形態で得る（２５ｍｇ；８１％）。^１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：０．７７−０．８３（ｍ，６Ｈ）；１．０２（ｓ，３Ｈ）；１．０４−１．０７（ｍ，３Ｈ）；１．１４（ｓ，３Ｈ）；１．２９−１．３６（ｍ，１Ｈ）；１．５４−１．６３（ｍ，２Ｈ）；１．８０−１．８７（ｍ，１Ｈ）；２．２４−２．３３（ｍ，１Ｈ）；２．６３−２．７３（ｍ，２Ｈ）；２．９６−３．０６（ｍ，３Ｈ）；３．２８−３．３２（ｍ，１Ｈ）；３．８３（ｓ，３Ｈ）；３．９３（ｄ，Ｊ＝１．６Ｈｚ，１Ｈ）；４．２７（ｄｄｄ，Ｊ＝１１．３，８．０，３．６Ｈｚ，１Ｈ）；４．７８（ｓ，２Ｈ）；４．９３（ｄｄ，Ｊ＝９．６，３．６Ｈｚ，１Ｈ）；５．１３（ｄｄ，Ｊ＝１０．８，５．１Ｈｚ，１Ｈ）；５．８１（ｄ，Ｊ＝１４．８Ｈｚ，１Ｈ）；６．４９（ｄｄｄ，Ｊ＝１５．０，１１．２，３．７Ｈｚ，１Ｈ）；７．０７（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．１８（ｄｄ，Ｊ＝８．５，１．９Ｈｚ，１Ｈ）；７．２３（ｄ，Ｊ＝９．６Ｈｚ，１Ｈ）；７．２９（ｄ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，１Ｈ）；７．３４（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，２Ｈ）；７．４７（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，２Ｈ）；８．３５（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ａ１）：ＥＳｍ／ｚ＝７１３［Ｍ＋Ｈ］^＋；ｍ／ｚ＝７１５［Ｍ−Ｈ］^−；ｔ_Ｒ＝５．１７分。

化合物４：２，５−ジオキソピロリジン−１−イル４−メチル−４−メチルジスルファニルペンタノアート

ＤＣＭ（３０ｍＬ）中の化合物３（３．０５ｇ、１５．７ｍｍｏｌ、ＷＯ２００７／０８５９３０に従って調製したもの）の、アルゴンでパージした溶液に、ＮＨＳ（１７．３ｍｍｏｌ）およびＥＤＣＩクロリド（１７．３ｍｍｏｌ）を順次添加する。この混合物を３時間、室温で攪拌し、この後、ｐＨ６リン酸緩衝液（２×３０ｍＬ）でおよび次いでＮａＣｌ飽和溶液（３０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で脱水し、濃縮乾固させる。結晶化する、得られた琥珀色の油を、７５／２５ヘプタン／ＥｔＯＡｃ混合物で洗浄し、焼結漏斗により濾過して化合物４を白色固体の形態で得る（２．０８ｇ、４５％）。濾液を濃縮乾固させ、得られた粗生成物を、５０／５０から０／１００のヘプタン／ＥｔＯＡｃ混合物で溶出させるシリカゲルでのクロマトグラフィーによって精製する。期待生成物を含有する画分を濃縮乾固させ、イソプロピルエーテル（５ｍＬ）に溶かす；沈殿を焼結漏斗によって濾過して、期待生成物４を得る（１ｇ、２２％）。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）：１．２９（ｓ，６Ｈ）；１．９２ｔｏ１．９８（ｍ，２Ｈ）；２．４１（ｓ，３Ｈ）；２．７２ｔｏ２．７８（ｍ，２Ｈ）；２．８１（ｓ，４Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ａ４）：ＥＩｍ／ｚ＝２９１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

化合物５：４−（４−メチル−４−メチルジスルファニルペンタノイル）ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル

化合物４（２００ｍｇ、６８６μｍｏｌ）、１−Ｂｏｃ−ピペラジン（６８６μｍｏｌ）、ＴＥＡ（７５５μｍｏｌ）およびＤＭＦ（１．６ｍＬ）をＷｈｅａｔｔｏｎチューブに入れる。この混合物を室温で一晩攪拌し、この後、ＥｔＯＡｃ（５ｍＬ）で希釈し、水（２×５ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で脱水し、濃縮乾固させる。この粗生成物をイソプロピルエーテル（３ｍＬ）に溶かし；沈殿を焼結漏斗によって濾過して化合物５を得る（２１３ｇ、８６％）。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：１．２７（ｓ，６Ｈ）；１．４１（ｓ，９Ｈ）；１．７３ｔｏ１．８７（ｍ，２Ｈ）；２．３４ｔｏ２．４１（ｍ，２Ｈ）；２．４０（ｓ，３Ｈ）；３．２３ｔｏ３．３６（ｐａｒｔｉａｌｌｙｍａｓｋｅｄｍ，４Ｈ）；３．３９ｔｏ３．４５（ｍ，４Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ａ２）：ＥＳｍ／ｚ＝３６３［Ｍ＋Ｈ］^＋；ｍ／ｚ＝３０７［Ｍ＋Ｈ−Ｃ_４Ｈ_８］⁻；ｔ_Ｒ＝１０８分。

化合物６：４−メチル−４−メチルジスルファニル−１−ピペラジン−１−イルペンタン−１−オン・塩酸塩

ジオキサン（４．４ｍＬ）中の化合物５（２１３ｍｇ、５８８μｍｏｌ）の溶液に、ジオキサン中のＨＣｌの４Ｍ溶液（４．４ｍＬ）を添加する。攪拌を４時間、室温で継続する。この混合物を焼結漏斗によって濾過し、得られた固体をジオキサン（２ｍＬ）および次いでイソプロピルエーテル（２ｍＬ）ですすいて、化合物６（１３２ｍｇ、７５％）をクリーム色の固体の形態で得る。^１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：１．２７（ｓ，６Ｈ）；１．７３ｔｏ１．８５（ｍ，２Ｈ）；２．３７ｔｏ２．４５（ｍ，２Ｈ）；２．４０（ｓ，３Ｈ）；２．９８ｔｏ３．１５（ｍ，４Ｈ）；３．６２ｔｏ３．７３（ｍ，４Ｈ）；９．３９（ｂｒｏａｄｍ，２Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ａ１）：ＥＳｍ／ｚ＝２６３［Ｍ＋Ｈ］^＋；ｔ_Ｒ＝２．４０分。

化合物７：（Ｅ）−（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−３−イソブチル−６，６−ジメチル−１６−［（Ｓ）−１−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−｛４−［４−（４−メチル−４−メチルジスルファニルペンタノイル）ピペラジン−１−イルメチル］フェニル｝オキシラニル）エチル］−１，４−ジオキサ−８，１１−ジアザシクロヘキサデカ−１３−エン−２，５，９，１２−テトラオン

化合物１（２０．３ｍｇ；２９．０μｍｏｌ）を無水ＤＭＦ（０．７７ｍＬ）およびＴＥＡ（７２．６μｍｏｌ）に溶解し、この後、ＣＭＳ（４３．６μｍｏｌ）を添加する。室温で１２時間後、形成された生成物２を単離せず、ＴＥＡ（５８．０μｍｏｌ）および次いで４−メチル−４−メチルジスルファニル−１−ピペラジン−１−イルペンタン−１−オン・塩酸塩６（３４．８μｍｏｌ）を添加する。この混合物をさらに７２時間、室温で攪拌し、この後、ＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）で希釈する。有機相を水（２×２ｍＬ）で、ＮａＨＣＯ_３飽和水溶液（２ｍＬ）でおよびＮａＣｌ飽和水溶液（２ｍＬ）で洗浄する。ＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過した後、溶媒を減圧下で蒸発させる。この粗反応生成物を、９９／１から９８／２ＤＣＭ／メタノール混合物で溶出させるシリカゲルでのクロマトグラフィーによって精製する。白色固体、７を得る（５．７ｍｇ；２１％）。ＴＬＣ（ＤＣＭ９０／ＭｅＯＨ１０）：Ｒｆ＝０．６；^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：０．７５−０．８１（ｍ，６Ｈ）；１．０１（ｓ，３Ｈ）；１．０５（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ）；１．１２（ｓ，３Ｈ）；１．２６（ｓ，６Ｈ）；１．２８−１．３３（ｍ，１Ｈ）；１．５２−１．６１（ｍ，２Ｈ）；１．７６−１．８３（ｍ，２Ｈ）；２．２７−２．３８（ｍ，４Ｈ）；２．３９（ｓ，３Ｈ）；２．６４−２．７４（ｍ，２Ｈ）；２．９５−３．０５（ｍ，２Ｈ）；３．２４−３．３４（ｍ，６Ｈ）；３．４４（ｂｒ．ｓ．，４Ｈ）；３．４９（ｓ，２Ｈ）；３．８１（ｓ，３Ｈ）；３．８８（ｄ，Ｊ＝１．７Ｈｚ，１Ｈ）；４．２２−４．２９（ｍ，１Ｈ）；４．９２（ｄｄ，Ｊ＝９．９，３．５Ｈｚ，１Ｈ）；５．０８−５．１５（ｍ，１Ｈ）；５．８１（ｄ，Ｊ＝１４．２Ｈｚ，１Ｈ）；６．４８（ｄｄｄ，Ｊ＝１５．２，１１．３，３．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．０５（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，１Ｈ）；７．１７（ｄｄ，Ｊ＝８．４，２．３Ｈｚ，１Ｈ）；７．２２（ｄ，Ｊ＝９．３Ｈｚ，１Ｈ）；７．２５−７．３４（ｍ，５Ｈ）；８．３４（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ）；ＬＣＭＳ（Ａ１）：ＥＳｍ／ｚ＝９４３［Ｍ＋Ｈ］^＋；ｍ／ｚ＝９４１［Ｍ−Ｈ］⁻；ｔ_Ｒ＝４．０３分。

実施例１：（Ｅ）−（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−３−イソブチル−６，６−ジメチル−１６−［（Ｓ）−１−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−｛４−［４−（４−メルカプト−４−メチルペンタノイル）ピペラジン−１−イルメチル］フェニル｝オキシラニル）エチル］−１，４−ジオキサ−８，１１−ジアザシクロヘキサデカ−１３−エン−２，５，９，１２−テトラオン

生成物７（９．６ｍｇ；１０．２μｍｏｌ）をエタノール（１．２ｍＬ）／水（１ｍＬ）の混合物に溶解する。混合物が濁ってくる。この後、ＴＣＥＰ（２５．４μｍｏｌ）を添加し、混合物を５時間、室温で攪拌する。混合物をＥｔＯＡｃの添加によって希釈し、有機相を、水およびＮＨ_４Ｃｌ飽和水溶液の１／１混合物（１ｍＬ）で洗浄する。有機相をＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過し、減圧下で溶媒を蒸発させた後、最終生成物、Ｅｘ．１を白色固体の形態で得る（６．５ｍｇ；７１％）。ＴＬＣ（ＤＣＭ９０／ＭｅＯＨ１０）：Ｒｆ＝０．５６；^１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：０．７６−０．８１（ｍ，６Ｈ）；１．０１（ｓ，３Ｈ）；１．０６（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ）；１．１３（ｓ，３Ｈ）；１．２４（ｓ，６Ｈ）；１．２７−１．３１（ｍ，１Ｈ）；１．５６−１．６４（ｍ，２Ｈ）；１．７３−１．８５（ｍ，３Ｈ）；２．２６−２．３３（ｍ，３Ｈ）；２．３６−２．４５（ｍ，４Ｈ）；２．６３−２．７５（ｍ，２Ｈ）；２．９５−３．０６（ｍ，３Ｈ）；３．３４−３．３６（ｍ，１Ｈ）；３．４２−３．５１（ｍ，６Ｈ）；３．８２（ｓ，３Ｈ）；３．８９（ｓ，１Ｈ）；４．２２−４．２９（ｍ，１Ｈ）；４．９２（ｄｄ，Ｊ＝９．８，３．４Ｈｚ，１Ｈ）；５．１２（ｄｄ，Ｊ＝１０．８，４．９Ｈｚ，１Ｈ）；５．８１（ｄ，Ｊ＝１５．２Ｈｚ，１Ｈ）；６．４８（ｄｄｄ，Ｊ＝１５．０，１１．４，３．４Ｈｚ，１Ｈ）；７．０６（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ）；７．１８（ｄｄ，Ｊ＝８．３，１，５Ｈｚ，１Ｈ）；７．２４（ｄ，Ｊ＝９．８Ｈｚ，１Ｈ）；７．２６−７．３６（ｍ，５Ｈ）；８．３７（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ）；ＬＣＭＳ（Ａ２）：ＥＳｍ／ｚ＝８９７［Ｍ＋Ｈ］^＋；ｍ／ｚ＝８９５［Ｍ−Ｈ］⁻；ｔ_Ｒ＝０．９７分。

（Ｅ）−（３Ｓ，６Ｒ，１０Ｒ，１６Ｓ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−３−イソブチル−１６−［（Ｓ）−１−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−｛４−［４−（４−メルカプト−４−メチルペンタノイル）ピペラジン−１−イルメチル］フェニル｝オキシラニル）エチル］−６−メチル−１，４−ジオキサ−８，１１−ジアザシクロヘキサデカ−１３−エン−２，５，９，１２−テトラオン

化合物９：（Ｅ）−（３Ｓ，６Ｒ，１０Ｒ，１６Ｓ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−１６−｛（Ｓ）−１−［（Ｒ）−３−（４−クロロメチルフェニル）オキシラニル］エチル｝−３−イソブチル−６−メチル−１，４−ジオキサ−８，１１−ジアザシクロヘキサデカ−１３−エン−２，５，９，１２−テトラオン

化合物８（４９ｍｇ；７１．４μｍｏｌ、この化合物は、Ａｌ−ａｗａｒＲ．Ｓ．ら、「Ｍ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．」２００３、４６、２９８５−３００７に従って調製することができる。）を無水ＤＣＭ（５ｍＬ）に溶解し、この混合物を０℃に冷却し、この後、ＤＩＰＥＡ（４２８μｍｏｌ）および次いでＣＭＳ（２１４μｍｏｌ）を添加する。混合物を放置して室温に戻し、４０時間、室温で攪拌を継続する。この混合物を５ｍＬの水で加水分解し、水性相をＤＣＭ（３×５ｍＬ）で抽出する。有機相を併せ、ＮａＨＣＯ_３飽和水溶液（１０ｍＬ）でおよびＮａＣｌ飽和水溶液（１０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で脱水する。濾過し、減圧下で溶媒を蒸発させた後、粗生成物を、１００／０から９０／１０ＤＣＭ／ＭｅＯＨ混合物で溶出させるシリカゲルでのクロマトグラフィーによって精製する。化合物９を白色固体の形態で得る（３７ｍｇ；７９％）。^１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：０．７８（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，３Ｈ）；０．８０（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，３Ｈ）；１．０１（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，３Ｈ）；１．０５（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，３Ｈ）；１．３０（ｍ，１Ｈ）；１．５４（ｍ，１Ｈ）；１．６０（ｍ，１Ｈ）；１．８２（ｍ，１Ｈ）；２．２７（ｍ，１Ｈ）；２．６０ｔｏ２．７８（ｍ，３Ｈ）；２．９７ｔｏ３．０５（ｍ，２Ｈ）；３．１５（ｍ，１Ｈ）；３．４１（ｍ，１Ｈ）；３．８１（ｓ，３Ｈ）；３．９２（ｄ，Ｊ＝１．６Ｈｚ，１Ｈ）；４．２６（ｄｄｄ，Ｊ＝３．８ａｎｄ８．２ａｎｄ１１．５Ｈｚ，１Ｈ）；４．７７（ｓ，２Ｈ）；４．８８（ｄｄ，Ｊ＝３．８ａｎｄ９．６Ｈｚ，１Ｈ）；５．１２（ｄｄｄ，Ｊ＝１．５ａｎｄ５．３ａｎｄ１１．２Ｈｚ，１Ｈ）；５．８０（ｄｄ，Ｊ＝１．５ａｎｄ１５．０Ｈｚ，１Ｈ）；６．４７（ｄｄｄ，Ｊ＝３．７ａｎｄ１１．２ａｎｄ１５．０Ｈｚ，１Ｈ）；７．０５（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．１７（ｄｄ，Ｊ＝２．２ａｎｄ８．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．２３（ｄｄ，Ｊ＝２．７ａｎｄ９．１Ｈｚ，１Ｈ）；７．２９（ｄ，Ｊ＝２．２Ｈｚ，１Ｈ）；７．３２（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，２Ｈ）；７．４５（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，２Ｈ）；８．３４（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ａ２）：ＥＳｍ／ｚ＝７０３［Ｍ＋Ｈ］^＋；ｍ／ｚ＝７０１［Ｍ−Ｈ］^−；ｍ／ｚ＝７４７［Ｍ−Ｈ＋ＨＣＯ_２Ｈ］⁻ベースピーク；ｔ_Ｒ＝１．１７分。

化合物１０：（Ｅ）−（３Ｓ，６Ｒ，１０Ｒ，１６Ｓ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−３−イソブチル−６−メチル−１６−［（Ｓ）−１−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−｛４−［４−（４−メチル−４−メチルジスルファニルペンタノイル）ピペラジン−１−イルメチル］フェニル｝オキシラニル）エチル］−１，４−ジオキサ−８，１１−ジアザシクロヘキサデカ−１３−エン−２，５，９，１２−テトラオン

化合物９（３６．６ｍｇ；５２μｍｏｌ）を無水アセトニトリル（３ｍＬ）に溶解し、この後、ＤＩＰＥＡ（２６０μｍｏｌ）および化合物６（１５６μｍｏｌ）を順次添加する。反応媒体を２０時間、室温で攪拌し、この後、４ｍＬの水の添加により加水分解する。水性相をＥｔＯＡｃ（３×４ｍＬ）で抽出し、有機相を併せ、ＮａＨＣＯ_３飽和水溶液（５ｍＬ）でおよびＮａＣｌ飽和水溶液（５ｍＬ）で洗浄する。ＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過した後、溶媒を減圧下で蒸発させる。この粗反応生成物を、１００／０から９５／５ＤＣＭ／メタノール混合物で溶出させるシリカゲルでのクロマトグラフィーによって精製する。化合物１０を白色固体の形態で得る（３９ｍｇ；８０％）。^１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：０．７８（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，３Ｈ）；０．８０（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，３Ｈ）；１．０１（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，３Ｈ）；１．０５（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，３Ｈ）；１．２６（ｓ，６Ｈ）；１．３０（ｍ，１Ｈ）；１．５３（ｍ，１Ｈ）；１．６０（ｍ，１Ｈ）；１．７５ｔｏ１．８４（ｍ，３Ｈ）；２．２６ｔｏ２．３７（ｍ，７Ｈ）；２．３９（ｓ，３Ｈ）；２．６１ｔｏ２．７７（ｍ，３Ｈ）；２．９６ｔｏ３．０５（ｍ，２Ｈ）；３．１５（ｍ，１Ｈ）；３．３８（ｐａｒｔｉａｌｌｙｍａｓｋｅｄｍ，１Ｈ）；３．４４（ｍ，４Ｈ）；３．４８（ｓ，２Ｈ）；３．８１（ｓ，３Ｈ）；３．８８（ｄ，Ｊ＝１．６Ｈｚ，１Ｈ）；４．２７（ｄｄｄ，Ｊ＝４．０ａｎｄ８．１ａｎｄ１１．５Ｈｚ，１Ｈ）；４．８８（ｄｄ，Ｊ＝３．８ａｎｄ９．６Ｈｚ，１Ｈ）；５．１２（ｄｄｄ，Ｊ＝１．６ａｎｄ５．３ａｎｄ１１．５Ｈｚ，１Ｈ）；５．８０（ｄｄ，Ｊ＝１．６ａｎｄ１５．１Ｈｚ，１Ｈ）；６．４７（ｄｄｄ，Ｊ＝３．６ａｎｄ１１．５ａｎｄ１５．１Ｈｚ，１Ｈ）；７．０５（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．１７（ｄｄ，Ｊ＝２．２ａｎｄ８．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．２３（ｄｄ，Ｊ＝２．６ａｎｄ９．２Ｈｚ，１Ｈ）；７．２７（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ）；７．２９（ｄ，Ｊ＝２．２Ｈｚ，１Ｈ）；７．３２（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ）；８．３５（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ａ２）：ＥＳｍ／ｚ＝９２９［Ｍ＋Ｈ］^＋；ｍ／ｚ＝９２７［Ｍ−Ｈ］⁻；ｍ／ｚ＝９７３［Ｍ−Ｈ＋ＨＣＯ_２Ｈ］⁻ベースピーク；ｔ_Ｒ＝０．９９分。

実施例２：（Ｅ）−（３Ｓ，６Ｒ，１０Ｒ，１６Ｓ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−３−イソブチル−６−メチル−１６−［（Ｓ）−１−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−｛４−［４−（４−メルカプト−４−メチルペンタノイル）ピペラジン−１−イルメチル］フェニル｝オキシラニル）エチル］−１，４−ジオキサ−８，１１−ジアザシクロヘキサデカ−１３−エン−２，５，９，１２−テトラオン

生成物１０（３４ｍｇ；３６．６μｍｏｌ）をエタノール（４．３ｍＬ）／水（３．６ｍＬ）の混合物に溶解する。混合物が濁る。この後、ＴＣＥＰ（１４６μｍｏｌ）を添加し、混合物は無色になり、この混合物を２時間、室温で攪拌する。ＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）を添加することにより混合物を希釈し、有機相を水とＮＨ_４Ｃｌ飽和水溶液の１／１混合物（２０ｍＬ）で洗浄する。水性相を２×２０ｍＬのＥｔＯＡｃで抽出し、有機相を併せ、ＮａＣｌ飽和溶液（２０ｍＬ）で洗浄する。ＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過し、溶媒を減圧下で蒸発させた後、粗生成物を、９８／２から９０／１０ＤＣＭ／ＭｅＯＨ混合物で溶出させるシリカゲルでのクロマトグラフィーによって精製する。化合物Ｅｘ．２を白色固体の形態で得る（２８．２ｍｇ；８７％）。^１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：０．７７（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，３Ｈ）；０．７９（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，３Ｈ）；１．０１（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，３Ｈ）；１．０４（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，３Ｈ）；１．２７（ｍ，１Ｈ）；１．３１（ｓ，６Ｈ）；１．５３（ｍ，１Ｈ）；１．５９（ｍ，１Ｈ）；１．７７（ｍ，２Ｈ）；１．８２（ｍ，１Ｈ）；２．２４ｔｏ２．３２（ｍ，３Ｈ）；２．３４ｔｏ２．４４（ｍ，４Ｈ）；２．６２ｔｏ２．７６（ｍ，４Ｈ）；２．９８ｔｏ３．０４（ｍ，２Ｈ）；３．１５（ｍ，１Ｈ）；３．４１（ｍ，１Ｈ）；３．４６（ｍ，４Ｈ）；３．４８（ｓ，２Ｈ）；３．８１（ｓ，３Ｈ）；３．８８（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ）；４．２６（ｄｄｄ，Ｊ＝３．４ａｎｄ８．３ａｎｄ１１．５Ｈｚ，１Ｈ）；４．８８（ｄｄ，Ｊ＝３．７ａｎｄ１０．０Ｈｚ，１Ｈ）；５．１２（ｄｄｄ，Ｊ＝２．０ａｎｄ５．３ａｎｄ１１．１Ｈｚ，１Ｈ）；５．８０（ｄｄ，Ｊ＝２．０ａｎｄ１５．０Ｈｚ，１Ｈ）；６．４７（ｄｄｄ，Ｊ＝３．７ａｎｄ１１．１ａｎｄ１５．０Ｈｚ，１Ｈ）；７．０５（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ）；７．１７（ｄｄ，Ｊ＝２．０ａｎｄ８．３Ｈｚ，１Ｈ）；７．２３（ｄｄ，Ｊ＝２．９ａｎｄ９．３Ｈｚ，１Ｈ）；７．２７（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ）；７．２９（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ）；７．３２（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ）；８．３５（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ａ２）：ＥＳｍ／ｚ＝８８３［Ｍ＋Ｈ］^＋；ｍ／ｚ＝８８１［Ｍ−Ｈ］⁻；ｔ_Ｒ＝０．９２分。

（Ｅ）−（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−３−イソブチル−１６−［（Ｓ）−１−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−｛４−［（２−メルカプト−２−メチルプロピルアミノ）メチル］フェニル｝オキシラニル）エチル］−６，６−ジメチル−１，４−ジオキサ−８，１１−ジアザシクロヘキサデカ−１３−エン−２，５，９，１２−テトラオン

化合物１１：２−メチル−２−メチルジスルファニルプロピオンアルデヒドＯ−メチルオキシム

５ｇ（３３．３ｍｍｏｌ）の２−（メチルジチオ）イソブチルアルデヒドを不活性雰囲気下で５０ｍＬのエタノールに溶解する。５０ｍＬのエタノール中の５．５６ｇ（６６．５４ｍｍｏｌ）のＯ−メチルヒドロキシルアミンクロリドの懸濁液および次いで６．６５ｍＬ（６６．５４ｍｍｏｌ）のＮａＯＨを順次添加する。この濁った白色混合物を一晩還流させる。室温に冷却した後、混合物を５００ｍＬの水に注入する。水性相をＥｔＯＡｃ（３×１７５ｍＬ）で抽出し、併せた有機相をＮａＣｌ飽和溶液（２００ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で脱水する。濾過し、減圧下で濃縮した後、化合物１１を無色の油の形態で得る（５．８９ｇ、３２．９ｍｍｏｌ）。

化合物１２：２−メチル−２−メチルジスルファニルプロピルアミン

アルゴンでパージした丸底フラスコに、室温で、１．７８ｇ（９．９ｍｍｏｌ）のオキシムエーテル１１、１９ｍＬの無水ＴＨＦ、およびＴＨＦ中のボラン−硫化メチルの２Ｍ溶液９９．５ｍＬを順次導入する。この混合物を１６時間、還流させる。この後、反応を停止させ、混合物を放置して室温に冷却し、この後、１００ｍＬのＭｅＯＨを０℃で一滴ずつ注意深く添加し（この間に泡沫が形成する。）、次いで室温で一滴ずつ注意深く添加する。この混合物を減圧下で蒸発させて、約２．８ｇの黄色油を得、この油を、イソプロパノール中のＨＣｌの５から６Ｎ溶液３０ｍＬに溶かす。この混合物を１時間還流させ、この後、室温で一晩放置する。減圧下で蒸発させた後、得られた残留物を８０ｍＬの１ＮＨＣｌに溶かし、この後、ジエチルエーテル（３×２０ｍＬ）で抽出する。水性相を３０％アンモニア水で、１２．５−１３のｐＨが得られるまで、即ち１２ｍＬで処理し（淡紫色水性相）、この後、３×２０ｍＬのエーテルで再び抽出する。有機相を併せ、ＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過し、減圧下で蒸発乾固させて、７６０ｍｇの粗生成物を得る。この残留物を、１００／０から９０／１０ＤＣＭ／メタノール混合物で溶出させるシリカゲルでのクロマトグラフィーによって最終精製する。化合物１２を淡黄色の油の形態で得る（３０１ｍｇ、２０％）。ＬＣＭＳ（Ａ２）：ＥＳｍ／ｚ＝１５２［Ｍ＋Ｈ］^＋；ｔ_Ｒ＝０．２７分。

化合物１３：（Ｅ）−（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−３−イソブチル−１６−［（Ｓ）−１−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−｛４−［（２−メチル−２−メチルジスルファニルプロピルアミノ）メチル］フェニル｝オキシラニル）エチル］−６，６−ジメチル−１，４−ジオキサ−８，１１−ジアザシクロヘキサデカ−１３−エン−２，５，９，１２−テトラオン

３．１ｍＬの無水ＤＭＦ中の２５ｍｇ（３５μｍｏｌ）の化合物２の、アルゴンでパージした溶液に、室温で、９．８μＬ（７０μｍｏｌ）のＴＥＡおよび６．３ｍｇ（４２μｍｏｌ）の化合物１２を順次添加する。攪拌を４０℃で継続する。７２時間、反応させた後、一部の出発原料２が残存するので、さらなる９．８μＬ（７０μｍｏｌ）のＴＥＡおよび６．３ｍｇ（４２μｍｏｌ）のアミン１２を添加する。４０℃でさらに７２時間後、一部の化合物２が依然として残存する：６．３ｍｇ（４２μｍｏｌ）のアミン１２を添加し、４０℃で攪拌を継続する。１日後に反応が完了する。この混合物を１０ｍＬのＥｔＯＡｃで希釈し、２×１０ｍＬの水で、１０ｍＬのＮａＨＣＯ_３飽和溶液でおよび１０ｍＬのＮａＣｌ飽和溶液で洗浄する。有機相をＭｇＳＯ_４で脱水した後、濾過し、この後、減圧下で蒸発させて、３０ｍｇの粗生成物を得る。この残留物を、９８／２から９３／７ＤＣＭ／メタノール混合物で溶出させるシリカゲルでのクロマトグラフィーによって精製する。化合物１３を白色粉末の形態で得る（２３．３ｍｇ、８１％）。ＴＬＣ（ＤＣＭ９０／ＭｅＯＨ１０）：Ｒｆ＝０．５５；^１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：０．７６ｔｏ０．８１（ｍ，６Ｈ）；１．０２（ｓ，３Ｈ）；１．０７（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，３Ｈ）；１．１３（ｓ，３Ｈ）；１．２７ｔｏ１．３３（ｍ，７Ｈ）；１．５２ｔｏ１．６３（ｍ，２Ｈ）；１．８２（ｓｘｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，１Ｈ）；２．０６（ｂｒｏａｄｓ，１Ｈ）；２．２５ｔｏ２．３４（ｍ，１Ｈ）；２．３７（ｓ，３Ｈ）；２．５７（ｓ，２Ｈ）；２．６６ｔｏ２．７６（ｍ，２Ｈ）；２．９７ｔｏ３．０６（ｍ，３Ｈ）；３．３３ｔｏ３．３８（ｍ，１Ｈ）；３．７５（ｓ，２Ｈ）；３．８３（ｓ，３Ｈ）；３．８８（ｄ，Ｊ＝１．６Ｈｚ，１Ｈ）；４．２７（ｄｄｄ，Ｊ＝３．７ａｎｄ８．０ａｎｄ１１．４Ｈｚ，１Ｈ）；４．９３（ｄｄ，Ｊ＝３．７ａｎｄ９．７Ｈｚ，１Ｈ）；５．１２（ｄｄ，Ｊ＝５．８ａｎｄ１１．３Ｈｚ，１Ｈ）；５．８２（ｄｄ，Ｊ＝１．５ａｎｄ１５．２Ｈｚ，１Ｈ）；６．４９（ｄｄｄ，Ｊ＝３．８ａｎｄ１１．３ａｎｄ１５．２Ｈｚ，１Ｈ）；７．０７（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．１８（ｄｄ，Ｊ＝１．９ａｎｄ８．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．２３（ｄｄ，Ｊ＝２．６ａｎｄ９．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．２６（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，２Ｈ）；７．３０（ｄ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，１Ｈ）；７．３５（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，２Ｈ）；８．３５（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ａ２）：ＥＳｍ／ｚ＝８３２［Ｍ＋Ｈ］^＋；ｍ／ｚ＝８３０［Ｍ−Ｈ］⁻；ｔ_Ｒ＝０．９６分。

実施例３：（Ｅ）−（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−３−イソブチル−１６−［（Ｓ）−１−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−｛４−［（２−メルカプト−２−メチルプロピルアミノ）メチル］フェニル｝オキシラニル）エチル］−６，６−ジメチル−１，４−ジオキサ−８，１１−ジアザシクロヘキサデカ−１３−エン−２，５，９，１２−テトラオン

生成物１３（１０．６ｍｇ；１２．８μｍｏｌ）をエタノール（１．５ｍＬ）／水（１．２６ｍＬ）の混合物に溶解する。この後、ＴＣＥＰ（９．１ｍｇ、３１．９μｍｏｌ）を添加し、混合物を２時間３０分、室温で攪拌する。この混合物を１５ｍＬのＥｔＯＡｃで希釈し、有機相を、水とＮＨ_４Ｃｌ飽和水溶液の１／１混合物（５ｍＬ）で洗浄する。有機相をＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過し、溶媒を減圧下で蒸発させた後、得られた粗生成物を、９８／２から９２／８ＤＣＭ／メタノール混合物で溶出させるシリカゲルでのクロマトグラフィーによって最終精製する。化合物Ｅｘ．３を白色固体の形態で得る（６．４ｍｇ；６３％）。ＴＬＣ（ＤＣＭ９０／ＭｅＯＨ１０）：Ｒｆ＝０．４７；^１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：０．８０ｔｏ０．８６（ｍ，６Ｈ）；１．０６（ｓ，３Ｈ）；１．１１（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，３Ｈ）；１．１８（ｓ，３Ｈ）；１．３１ｔｏ１．３８（ｍ，７Ｈ）；１．５７ｔｏ１．６７（ｍ，２Ｈ）；１．８７（ｓｘｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，１Ｈ）；２．２９ｔｏ２．３８（ｍ，１Ｈ）；２．５６（ｓ，２Ｈ）；２．７０ｔｏ２．８０（ｍ，２Ｈ）；３．００ｔｏ３．１１（ｍ，３Ｈ）；３．３９ｔｏ３．４３（ｍ，１Ｈ）；３．８２（ｓ，２Ｈ）；３．８７（ｓ，３Ｈ）；３．９２（ｄ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，１Ｈ）；４．３１（ｄｄｄ，Ｊ＝３．６ａｎｄ８．０ａｎｄ１１．５Ｈｚ，１Ｈ）；４．９７（ｄｄ，Ｊ＝３．７ａｎｄ９．７Ｈｚ，１Ｈ）；５．１７（ｄｄ，Ｊ＝５．８ａｎｄ１１．３Ｈｚ，１Ｈ）；５．８６（ｄｄ，Ｊ＝１．４ａｎｄ１５．１Ｈｚ，１Ｈ）；６．５４（ｄｄｄ，Ｊ＝３．８ａｎｄ１１．３ａｎｄ１５．１Ｈｚ，１Ｈ）；７．１１（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，１Ｈ）；７．２３（ｄｄ，Ｊ＝１．９ａｎｄ８．７Ｈｚ，１Ｈ）；７．２７（ｄｄ，Ｊ＝２．７ａｎｄ９．６Ｈｚ，１Ｈ）；７．３１（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ）；７．３４（ｄ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，１Ｈ）；７．４２（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ）；８．４０（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ａ２）：ＥＳｍ／ｚ＝７８６［Ｍ＋Ｈ］^＋；ｍ／ｚ＝７８４［Ｍ−Ｈ］⁻；ｔ_Ｒ＝０．９２分。

（Ｅ）−（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−３−イソブチル−１６−［（Ｓ）−１−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−｛４−［（｛２−メルカプト−２−メチルプロピル｝メチルアミノ）メチル］フェニル｝オキシラニル）エチル］−６，６−ジメチル−１，４−ジオキサ−８，１１−ジアザシクロヘキサデカ−１３−エン−２，５，９，１２−テトラオン

化合物１４：メチル［２−メチル−２−メチルジスルファニルプロパ−（Ｅ）−イリデン］アミン

１ｇ（６．６６ｍｍｏｌ）の２−（メチルジチオ）イソブチルアルデヒドを不活性雰囲気下で１０ｍＬの無水ＴＨＦに溶解する。ＴＨＦ中のメチルアミンの２Ｍ溶液（３３．３ｍＬ、６６，６ｍｍｏｌ）を添加し、この後、この混合物を５時間、室温で攪拌する。この混合物を５０ｍＬのＥｔＯＡｃで希釈し、水（３０ｍＬ）でおよびＮａＣｌ飽和溶液（３０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で脱水する。濾過し、減圧下で濃縮した後、化合物１４を淡黄色の油の形態で得る（１．０１ｇ、９３％）。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、クロロホルム−ｄ）：１．４６（ｓ，６Ｈ）；２．３６（ｓ，３Ｈ）；３．３２（ｓ，３Ｈ）；７．５２（ｓ，１Ｈ）。

化合物１５：２−メチル−２−メチルジスルファニルプロピルアミン

３０ｍＬのＴＨＦ中の化合物１４（１．０１ｇ、６．１８５ｍｍｏｌ）の溶液をアルゴンでパージし、０℃に冷却し、この後、１．４４ｇ（６．８０ｍｍｏｌ）のトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウムを０℃で添加する。攪拌を１５時間、室温で継続する：一部の出発イミンが残存する；１．４４ｇ（６．８０ｍｍｏｌ）のトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウムおよび３５４μＬ（６．１８５ｍｍｏｌ）の酢酸を０℃で添加し、この後、攪拌を３時間、室温で継続する。この混合物を５０ｍＬのＥｔＯＡｃで希釈し、水（５０ｍＬ）で洗浄する。１４ｍＬの１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液の添加により水性相のｐＨを約１２に調整し、この後、ジエチルエーテル（３×５０ｍＬ）で抽出する。有機相を併せ、ＮａＣｌ飽和溶液（５０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で脱水する。濾過し、減圧下で濃縮した後、化合物１５を無色の油の形態で得る（６９５ｍｇ、６８％）。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：１．２５（ｓ，６Ｈ）；１．４７（ｂｒｏａｄｍ，１Ｈ）；２．３１（ｓ，３Ｈ）；２．３８（ｓ，３Ｈ）；２．５３（ｍ，２Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ａ２）：ＥＳｍ／ｚ＝１６６［Ｍ＋Ｈ］^＋；ｔ_Ｒ＝０．２８分。

化合物１６：（Ｅ）−（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−３−イソブチル−１６−｛（Ｓ）−１−［（２Ｒ，３Ｒ）−３−（４−｛［（２−メチル−２−メチルジスルファニルプロピル）メチルアミノ］メチル｝フェニル）オキシラニル）エチル］−６，６−ジメチル−１，４−ジオキサ−８，１１−ジアザシクロヘキサデカ−１３−エン−２，５，９，１２−テトラオン

化合物１６は、化合物３０の調製について説明した方法を適用することにより、アミン１５での誘導体２のクロロ基の求核置換によって得ることができる。

実施例４：（Ｅ）−（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−３−イソブチル−１６−｛（Ｓ）−１−［（２Ｒ，３Ｒ）−３−（４−｛［（２−メルカプト−２−メチルプロピル）メチルアミノ］メチル｝フェニル）オキシラニル）エチル］−６，６−ジメチル−１，４−ジオキサ−８，１１−ジアザシクロヘキサデカ−１３−エン−２，５，９，１２−テトラオン

実施例４は、実施例６の調製について説明した方法を化合物１６に適用することによって得ることができる。

（Ｅ）−（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−３−イソブチル−１６−［（Ｓ）−１−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−｛４−［４−（２−メルカプト−２−メチルプロピル）ピペラジン−１−イルメチル］フェニル｝オキシラニル）エチル］−６，６−ジメチル−１，４−ジオキサ−８，１１−ジアザシクロヘキサデカ−１３−エン−２，５，９，１２−テトラオン

化合物１７：４−（２−メチル−２−メチルジスルファニルプロピル）ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル

無水ＴＨＦ（２０ｍＬ）中の１−Ｂｏｃ−ピペラジン（１．０ｇ、５．３７ｍｍｏｌ）の、アルゴンでパージした溶液に、２−（メチルジチオ）イソブチルアルデヒド（５．３７ｍｍｏｌ）およびチタン（ＩＶ）イソプロポキシド（６．７１ｍｍｏｌ）を添加する。この混合物を２０分間、室温で攪拌し、２−（メチルジチオ）イソブチルアルデヒド（５．３７ｍｍｏｌ）およびチタン（ＩＶ）イソプロポキシド（６．７１ｍｍｏｌ）のさらなる添加を行う。攪拌を２時間継続し、この後、１２ｍＬのエタノールを添加し、攪拌を５分間継続する。シアノ水素化ホウ素ナトリウム（５．３７ｍｍｏｌ）を添加し、この混合物を１時間攪拌し、この後、さらなる５．３７ｍｍｏｌのシアノ水素化ホウ素ナトリウムを添加する。攪拌を１時間継続する。この混合物を濃縮乾固させ、この後、ＥｔＯＡｃに溶かす。水を添加して沈殿を形成させ、この沈殿を焼結漏斗で濾過し、ＥｔＯＡｃおよび水ですすぐ。得られた固体を１ＮＨＣｌ水溶液（５０ｍＬ）に溶解し、この媒体を５ＮＮａＯＨ水溶液で中和し、この後、ＤＣＭで抽出する。有機相を併せ、ＮａＣｌ飽和溶液で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮する。この粗生成物を、１００／０から９７／３ＤＣＭ／メタノール混合物で溶出させるシリカゲルでのクロマトグラフィーによって精製する。化合物１７を淡黄色の油の形態で得る（６５０ｍｇ；４０％）。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：１．２６（ｓ，６Ｈ）；１．３９（ｓ，９Ｈ）；２．３９（ｓ，３Ｈ）；２．４２（ｓ，２Ｈ）；２．４４ｔｏ２．４８（ｍ，４Ｈ）；３．２７（ｐａｒｔｉａｌｌｙｍａｓｋｅｄｍ，４Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ａ１）：ＥＳｍ／ｚ＝３２１［Ｍ＋Ｈ］^＋；ｍ／ｚ＝２６５ベースピーク；ｔ_Ｒ＝３．０２分。

化合物１８：１−（２−メチル−２−メチルジスルファニルプロピル）ピペラジン・塩酸塩

ジオキサン（１３ｍＬ）中の化合物１７（３２２ｍｇ、１．０１ｍｍｏｌ）の溶液に、ジオキサン中のＨＣｌの４Ｍ溶液（５ｍＬ）を添加する。攪拌を１６時間、室温で継続する。この混合物を焼結漏斗によって濾過し、得られた固体をジオキサンですすいで、化合物１８（２３１ｍｇ、９０％）を白色粉末の形態で得る。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：１．３１（ｂｒｏａｄｓ，６Ｈ）；２．４２（ｓ，３Ｈ）；２．５９ｔｏ３．３８（ｖｅｒｙｂｒｏａｄｍ，１０Ｈ）；８．７８（ｂｒｏａｄｍ，２Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ａ２）：ＥＳｍ／ｚ＝２２１［Ｍ＋Ｈ］^＋；ｔ_Ｒ＝０．４６分。

化合物１９：（Ｅ）−（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−３−イソブチル−６，６−ジメチル−１６−［（Ｓ）−１−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−｛４−［４−（２−メチル−２−メチルジスルファニルプロピル）ピペラジン−１−イルメチル］フェニル｝オキシラニル）エチル］−１，４−ジオキサ−８，１１−ジアザシクロヘキサデカ−１３−エン−２，５，９，１２−テトラオン

無水ＤＭＦ（０．９ｍＬ）中の化合物２（１５．０２ｍｇ、２０．９３μｍｏｌ）の、アルゴンでパージした溶液に、ＤＭＦ（１ｍＬ）中の化合物１８（２５．１２μｍｏｌ）およびＴＥＡ（５２．３μｍｏｌ）の溶液を添加する。この混合物を４０℃、アルゴン下で攪拌する。２４時間後、２５．１２μｍｏｌの化合物１８および３１．４μｍｏｌのＴＥＡを添加する。４０℃でさらに２４時間後、反応が完了する。この混合物をＥｔＯＡｃ（６ｍＬ）で希釈し、水（２×６ｍＬ）で、ＮａＨＣＯ_３飽和溶液（６ｍＬ）でおよびＮａＣｌ飽和溶液（６ｍＬ）で洗浄する。有機相をＭｇＳＯ_４で脱水した後、濾過し、この後、減圧下で蒸発させて、４６ｍｇの粗生成物を得る。この残留物を、１００／０から９５／５ＤＣＭ／メタノール混合物で溶出させるシリカゲルでのクロマトグラフィーによって精製する。化合物１９を白色粉末の形態で得る（５．２ｍｇ、２８％）。^１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：０．７６（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，３Ｈ）；０．７８（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，３Ｈ）；１．０１（ｓ，３Ｈ）；１．０６（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ）；１．１３（ｓ，３Ｈ）；１．２５（ｓ，６Ｈ）；１．２７ｔｏ１．３３（ｍ，１Ｈ）；１．５１ｔｏ１．６３（ｍ，２Ｈ）；１．７６ｔｏ１．８５（ｍ，１Ｈ）；２．２３ｔｏ２．３２（ｍ，１Ｈ）；２．３７（ｍ，４Ｈ）；２．３９（ｓ，３Ｈ）；２．４１（ｓ，２Ｈ）；２．５３ｔｏ２．５６（ｍ，４Ｈ）；２．６３ｔｏ２．７６（ｍ，２Ｈ）；２．９４ｔｏ３．０６（ｍ，３Ｈ）；３．３４（ｐａｒｔｉａｌｌｙｍａｓｋｅｄｍ，１Ｈ）；３．４０ｔｏ３．４８（ｍ，２Ｈ）；３．８２（ｓ，３Ｈ）；３．８７（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ）；４．２６（ｄｄｄ，Ｊ＝３．８ａｎｄ７．８ａｎｄ１１．３Ｈｚ，１Ｈ）；４．９２（ｄｄ，Ｊ＝３．８ａｎｄ９．８Ｈｚ，１Ｈ）；５．０７ｔｏ５．１４（ｍ，１Ｈ）；５．８１（ｄ，Ｊ＝１５．２Ｈｚ，１Ｈ）；６．４８（ｄｄｄ，Ｊ＝３．８ａｎｄ１１．３ａｎｄ１５．２Ｈｚ，１Ｈ）；７．０６（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．１８（ｄｄ，Ｊ＝２．２ａｎｄ８．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．２１ｔｏ７．３２（ｍ，６Ｈ）；８．３５（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ａ１）：ＥＳｍ／ｚ＝９０１［Ｍ＋Ｈ］^＋；ｍ／ｚ＝４５１ベースピーク；ｔ_Ｒ＝４．３３分。

実施例５：（Ｅ）−（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−３−イソブチル−１６−［（Ｓ）−１−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−｛４−［４−（２−メルカプト−２−メチルプロピル）ピペラジン−１−イルメチル］フェニル｝オキシラニル）エチル］−６，６−ジメチル−１，４−ジオキサ−８，１１−ジアザシクロヘキサデカ−１３−エン−２，５，９，１２−テトラオン

生成物１９（５．７ｍｇ；６．３μｍｏｌ）をエタノール（０．８ｍＬ）／水（０．５ｍＬ）の混合物に溶解する。この後、ＴＣＥＰ（４．５４ｍｇ、１５．８３μｍｏｌ）を添加し、混合物を１時間、室温で攪拌する。この混合物を７ｍＬのＥｔＯＡｃで希釈し、有機相を、水とＮＨ_４Ｃｌ飽和水溶液の１／１混合物（７ｍＬ）で洗浄する。有機相をＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過し、溶媒を減圧下で蒸発させた後、得られた粗生成物を、９９／１から９５／５ＤＣＭ／メタノール混合物で溶出させるシリカゲルでのクロマトグラフィーによって精製する。化合物Ｅｘ．５を白色固体の形態で得る（２．９５ｍｇ；５５％）。^１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：０．７７（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，３Ｈ）；０．７８（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，３Ｈ）；１．０２（ｓ，３Ｈ）；１．０６（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，３Ｈ）；１．１３（ｓ，３Ｈ）；１．２７（ｓ，６Ｈ）；１．２９ｔｏ１．３４（ｍ，１Ｈ）；１．５２ｔｏ１．６３（ｍ，２Ｈ）；１．８２（ｍ，１Ｈ）；２．２９（ｍ，１Ｈ）；２．３７（ｓ，２Ｈ）；２．３９ｔｏ２．４１（ｍ，４Ｈ）；２．５７ｔｏ２．６２（ｍ，４Ｈ）；２．６５ｔｏ２．７６（ｍ，２Ｈ）；２．９６ｔｏ３．０６（ｍ，３Ｈ）；３．３４（ｐａｒｔｉａｌｌｙｍａｓｋｅｄｍ，１Ｈ）；３．４６（ｓ，２Ｈ）；３．８３（ｓ，３Ｈ）；３．８８（ｄ，Ｊ＝２．２Ｈｚ，１Ｈ）；４．２７（ｄｄｄ，Ｊ＝３．７ａｎｄ８．０ａｎｄ１１．５Ｈｚ，１Ｈ）；４．９３（ｄｄ，Ｊ＝３．７ａｎｄ９．７Ｈｚ，１Ｈ）；５．１２（ｍ，１Ｈ）；５．８２（ｄ，Ｊ＝１５．２Ｈｚ，１Ｈ）；６．４９（ｄｄｄ，Ｊ＝３．７ａｎｄ１１．５ａｎｄ１５．２Ｈｚ，１Ｈ）；７．０７（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．１８（ｄｄ，Ｊ＝２．２ａｎｄ８．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．２１ｔｏ７．３３（ｍ，６Ｈ）；８．３６（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ａ１）：ＥＳｍ／ｚ＝８５５［Ｍ＋Ｈ］^＋；ｍ／ｚ＝４２８［Ｍ＋２Ｈ］^２＋ベースピーク；ｔ_Ｒ＝４．１３分。

（Ｅ）−（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−３−イソブチル−１６−［（Ｓ）−１−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−｛４−［４−（｛２−［２−（２−｛２−メチル［２−メルカプト−２−メチルプロピル］アミノエトキシ｝エトキシ）エトキシ］エチル｝メチルアミノ）メチル］フェニル｝オキシラニル）エチル］−６，６−ジメチル−１，４−ジオキサ−８，１１−ジアザシクロヘキサデカ−１３−エン−２，５，９，１２−テトラオン

化合物２０：２−｛２−［２−（２−ヒドロキシエトキシ）エトキシ］エトキシ｝エチル４−トルエンスルホナート

６８．７ｍＬのＤＣＭ中の５ｇ（２５．７４ｍｍｏｌ）のテトラエチレングリコールの、アルゴンでパージし、０℃に冷却した溶液に、８．９５ｇ（３８．６１ｍｍｏｌ）の酸化銀および５．４０ｇ（２８．３１ｍｍｏｌ）の塩化トシルを、適する攪拌を維持するように少しずつ、順次添加する。８５５ｍｇ（５．１５ｍｍｏｌ）のＫＩを、混合物の温度を５℃未満で維持するように、少しずつ添加する。５℃未満に温度を保持しながら、１時間、攪拌を継続する。室温に温めた後、この混合物をＣｌａｒｃｅｌによって濾過し、残留物をＤＣＭですすぎ、この後、濾液を減圧下で濃縮乾固させる。９９／１から９５／５ＤＣＭ／メタノール混合物を溶離剤として使用するシリカゲルでのクロマトグラフィーによってこの粗生成物を精製する。化合物２０を無色の油の形態で得る（５．４ｇ、６０％）。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：２．４３（ｓ，３Ｈ）；３．４０（ｍ，２Ｈ）；３．４４ｔｏ３．５２（ｍ，１０Ｈ）；３．５８（ｍ，２Ｈ）；４．１１（ｍ，２Ｈ）；４．５３（ｔ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，１Ｈ）；７．４８（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ）；７．７８（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ａ２）：ＥＳｍ／ｚ＝３４９［Ｍ＋Ｈ］^＋；ｍ／ｚ＝３７１［Ｍ＋Ｎａ］^＋；ｔ_Ｒ＝０．６９分。

化合物２１：１−アジド−３，６−９−トリオキサウンデカン−１１−オール

４０．６ｍＬの無水アセトニトリル中の５．４ｇ（１５．５１ｍｍｏｌ）の化合物２０の溶液に、１．３４ｇ（２０．６３ｍｍｏｌ）のＮａＮ_３を添加し、この後、この混合物を６時間３０分、還流させる。室温に冷却した後、混合物をＣｌａｒｃｅｌによって濾過し、減圧下で濃縮する。一部の出発化合物２０が残存する：この粗生成物を２５ｍＬの無水アセトニトリルに溶解し、２３０ｍｇ（３．５ｍｍｏｌ）のＮａＮ_３を添加する。この混合物を５時間、還流させる。室温に冷却した後、Ｃｌａｒｃｅｌによって濾過し、減圧下で濃縮乾固させて、化合物２１を淡黄色の油の形態で得る（３．３７ｇ、９９％）。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：３．３７ｔｏ３．４３（ｍ，４Ｈ）；３．４５ｔｏ３．５８（ｍ，１０Ｈ）；３．６０（ｍ，２Ｈ）；４．５４（ｔ，Ｊ＝５．１Ｈｚ，１Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ａ２）：ＥＳｍ／ｚ＝２２０［Ｍ＋Ｈ］^＋；ｍ／ｚ＝２４２［Ｍ＋Ｎａ］^＋ベースピーク；ｔ_Ｒ＝０．３９分。

化合物２２：Ｎ−Ｂｏｃ−アミノエトキシエトキシエトキシエタノール

５ｍＬのＥｔＯＡｃ中の３２０ｍｇの炭素担持１０％パラジウムの、アルゴン下で不活性にした溶液に、４５ｍＬのＥｔＯＡｃ中の３．２５ｇ（１４．８ｍｍｏｌ）の化合物２１、６．４６ｇ（２９．６ｍｍｏｌ）の二炭酸ｔｅｒｔ−ブチルおよび４．１３ｍＬ（２９．６ｍｍｏｌ）のＴＥＡの溶液を添加する。反応を１７時間、３０℃で、２バールの水素圧のもとで行う。室温および大気圧に冷却した後、混合物をＣｌａｒｃｅｌによって濾過し、減圧下で濃縮する。９８／２から９０／１０ＤＣＭ／メタノール混合物を溶離剤として使用するシリカゲルでのクロマトグラフィーによってこの粗生成物を精製する。化合物２２を無色の油の形態で得る（２．９２ｇ、６７％）。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：１．３７（ｓ，９Ｈ）；３．０６（ｑ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，２Ｈ）；３．３７（ｔ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，２Ｈ）；３．４２（ｍ，２Ｈ）；３．４６ｔｏ３．５３（ｍ，１０Ｈ）；４．５４（ｂｒｏａｄｔ，Ｊ＝５．１Ｈｚ，１Ｈ）；６．７１（ｂｒｏａｄｔ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，１Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ａ１）：ＥＳｍ／ｚ＝３１６［Ｍ＋Ｎａ］^＋；ｍ／ｚ＝１９４ベースピーク；ｔ_Ｒ＝２．８１分。

化合物２３：２−｛２−［２−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノエトキシ）エトキシ］エトキシ｝エチル４−トルエンスルホナート

２０ｍＬのＤＣＭ中の３．０６ｇ（１０．４２ｍｍｏｌ）の化合物２２の、アルゴンでパージした溶液に、２．５３ｍＬ（３１．２６ｍｍｏｌ）のピリジンを添加する。この混合物を０℃に冷却し、この後、１０ｍＬのＤＣＭ中の２．９８ｇ（１５．６３ｍｍｏｌ）の塩化トシルの溶液を一滴ずつ添加する。攪拌を１５時間、室温で継続する。混合物を２０ｍＬのＤＣＭで希釈し、ＮａＨＣＯ_３飽和溶液（３０ｍＬ）で、水（２×３０ｍＬ）でおよびＮａＣｌ飽和溶液（３０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で脱水する。濾過し、減圧下で濃縮した後、１００／０から９０／１０ＤＣＭ／メタノール混合物を溶離剤として使用するシリカゲルでのクロマトグラフィーによってこの粗生成物を精製する。化合物２３を淡黄色の油の形態で得る（４．３８ｇ、９４％）。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：１．３７（ｓ，９Ｈ）；２．４２（ｓ，３Ｈ）；３．０５（ｑ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，２Ｈ）；３．３６（ｔ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，２Ｈ）；３．４６（ｍ，８Ｈ）；３．５８（ｍ，２Ｈ）；４．１０（ｍ，２Ｈ）；６，７１（ｂｒｏａｄｔ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，１Ｈ）；７．４８（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，２Ｈ）；７．７８（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，２Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ａ２）：ＥＳｍ／ｚ＝４４８［Ｍ＋Ｈ］^＋；ｍ／ｚ＝４７０［Ｍ＋Ｎａ］^＋；ｍ／ｚ＝３４８ベースピーク；ｍ／ｚ＝４９２［Ｍ−Ｈ＋ＨＣＯ_２Ｈ］⁻；ｔ_Ｒ＝１．００分。

化合物２４：（２−｛２−［２−（２−アジドエトキシ）エトキシ］エトキシ｝エチル）カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル

２５ｍＬのアセトニトリル中の４．３８ｇ（９．７９ｍｍｏｌ）の化合物２３の溶液に、８４６ｍｇ（１３．０２ｍｍｏｌ）のアジ化ナトリウムを添加し、この後、この混合物を６時間、還流させる。出発化合物の大部分が残存する：室温に冷却した後、１．７ｇ（２６．１３ｍｍｏｌ）をこの混合物に添加する。還流させながら２４時間、攪拌を継続する。室温に冷却した後、混合物をＣｌａｒｃｅｌによって濾過し、減圧下で濃縮する。９８／２から９０／１０ＤＣＭ／メタノール混合物を溶離剤として使用するシリカゲルでのクロマトグラフィーによってこの粗生成物を精製する。化合物２４を淡黄色の油の形態で得る（２．１６ｇ、６９％）。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：１．３７（ｓ，９Ｈ）；３．０６（ｑ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，２Ｈ）；３．３４ｔｏ３．４３（ｍ，４Ｈ）；３．４６ｔｏ３．５８（ｍ，８Ｈ）；３．６０（ｍ，２Ｈ）；６．７０（ｂｒｏａｄｔ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，１Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ａ２）：ＥＳｍ／ｚ＝３４１［Ｍ＋Ｎａ］^＋；ｔ_Ｒ＝０．８１分。

化合物２５：（２−｛２−［２−（２−アジドエトキシ）エトキシ］エトキシ｝エチル）メチルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル

２５ｍＬの無水ＴＨＦ中の２．０６ｇ（６．４７ｍｍｏｌ）の化合物２４の、アルゴンでパージし、０℃に冷却した溶液に、８５４ｍｇ（２１．３５ｍｍｏｌ）の６０％ＮａＨ（鉱物油中の分散体として）（少しずつ）および８８６μＬ（１４．２３ｍｍｏｌ）のヨウ化メチルを順次添加する。攪拌を１時間０℃で、およびこの後１６時間、室温で継続する。この混合物をＣｌａｒｃｅｌによって濾過し、ＴＨＦで洗浄し、減圧下で濃縮する。９９／１から９０／１０ＤＣＭ／メタノール混合物を溶離剤として使用するシリカゲルでのクロマトグラフィーによってこの粗生成物を精製する。化合物２５を無色の油の形態で得る（１．６７ｇ、７８％）。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：１．３９（ｓ，９Ｈ）；２，８０（ｂｒｏａｄｓ，３Ｈ）；３．２９（ｐａｒｔｉａｌｌｙｍａｓｋｅｄｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，２Ｈ）；３．３８（ｍ，２Ｈ）；３．４６ｔｏ３．５６（ｍ，１０Ｈ）；３．６０（ｔ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，２Ｈ）。

化合物２６：（２−｛２−［２−（２−アミノエトキシ）エトキシ］エトキシ｝エチル）メチルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル

２０ｍＬのＴＨＦ中の１．６６ｇ（４．９９ｍｍｏｌ）の化合物２５の、アルゴンでパージした溶液に、１．３１ｇ（４．９９４ｍｍｏｌ）のトリフェニルホスフィンおよび１０８μＬ（５．９９ｍｍｏｌ）の水を順次添加する。攪拌を２５時間３０分継続し、この後、この混合物を濃縮乾固させる。コンディショニングし、メタノールで洗浄し、およびこの後、メタノール中のアンモニア水の０．５Ｎ溶液で溶出させるＳＣＸカートリッジ（Ｖａｒｉａｎ）でのＳＰＥ濾過によって、この混合物を精製する。化合物２６を無色の油の形態で得る（１．２３ｇ、８０％）。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：１．３９（ｓ，９Ｈ）；２．６５（ｔ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，２Ｈ）；２．８０（ｂｒｏａｄｓ，３Ｈ）；３．２９（ｔ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，２Ｈ）；３．３６（ｔ，Ｊ＝５．７Ｈｚ，２Ｈ）；３．４５ｔｏ３．５６（ｍ，１０Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ａ２）：ＥＳｍ／ｚ＝３０７［Ｍ＋Ｈ］^＋；ｔ_Ｒ＝０．４９分。

化合物２７：メチル［２−（２−｛２−［２−（２−メチル−２−メチルジスルファニルプロピルアミノ）エトキシ］エトキシ｝エトキシ）エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル

３ｍＬのＤＣＭ中の１３１ｍｇ（４２６μｍｏｌ）の化合物２６の、アルゴンでパージした溶液に、６４ｍｇ（４２６μｍｏｌ）の２−メチルジチオイソブチルアルデヒド、１２６ｍｇ（５９６μｍｏｌ）のトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウムおよび２４．４μＬの酢酸を添加する。攪拌を６時間、室温、アルゴン下で継続し、１ｍＬの１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液の添加により反応を停止させ、この後、この混合物を１０ｍＬのジエチルエーテルで抽出する。減圧下で濃縮した後、９０／１０ＤＣＭ／イソプロパノール混合物を溶離剤として使用するシリカゲルでのクロマトグラフィーによってこの粗生成物を精製する。この精製は、残留出発アミンからの期待生成物の分離を可能にしない。得られた生成物を、９５／５から５／９５水／アセトニトリル混合物を溶離剤として使用するＲＰ１８逆相クロマトグラフィーによって再び精製する。化合物２７を無色の油の形態で得る（６７ｍｇ、３６％）。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：１．２５（ｓ，６Ｈ）；１．３９（ｓ，９Ｈ）；１．５８（ｂｒｏａｄｍ，１Ｈ）；２．３８（ｓ，３Ｈ）；２．５９（ｓ，２Ｈ）；２．６８（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，２Ｈ）；２．８０（ｂｒｏａｄｓ，３Ｈ）；３．４６（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，２Ｈ）；３．４８ｔｏ３．５４（ｍ，１２Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ａ１）：ＥＳｍ／ｚ＝４４１［Ｍ＋Ｈ］^＋；ｔ_Ｒ＝３．２９分。

化合物２８：メチル｛２−［２−（２−｛２−［メチル（２−メチル−２−メチルジスルファニルプロピル）アミノ］エトキシ｝エトキシ）エトキシ］エチル｝カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル

１ｍＬのＤＣＭ中の６５ｍｇ（１４８μｍｏｌ）の化合物２７の、アルゴンでパージし、０℃に冷却した溶液に、１９．５ｍｇ（４８７μｍｏｌ）のＮａＨ（鉱物油中の６０％分散体として）および２０μＬ（３２５μｍｏｌ）のヨウ化メチルを順次添加する。攪拌を４５分間０℃で、およびこの後７２時間、室温で継続する。この混合物をＣｌａｒｃｅｌによって濾過し、この後、減圧下で濃縮する。９９／１から９０／１０ＤＣＭ／メタノール混合物を溶離剤として使用するシリカゲルでのクロマトグラフィーによってこの粗生成物を精製する。化合物２８を無色の油の形態で得る（４３ｍｇ、６４％）。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：１．２５（ｓ，６Ｈ）；１．３９（ｓ，９Ｈ）；２．３２（ｓ，３Ｈ）；２．３９（ｓ，３Ｈ）；２．５４（ｍ，２Ｈ）；２．６１（ｔ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，２Ｈ）；２．８０（ｂｒｏａｄｓ，３Ｈ）；３．４２ｔｏ３．５４（ｍ，１４Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ａ２）：ＥＳｍ／ｚ＝４５５［Ｍ＋Ｈ］^＋；ｔ_Ｒ＝０．７７分。

化合物２９：メチル（２−｛２−［２−（２−メチルアミノエトキシ）エトキシ］エトキシ｝エチル）（２−メチル−２−メチルジスルファニルプロピル）アミン

１．５ｍＬのＤＣＭ中の４３ｍｇ（９５μｍｏｌ）の化合物２８の溶液に、３５１μＬのＴＦＡを添加する。攪拌を５時間室温で継続し、この後、この混合物を濃縮乾固させる。コンディショニングし、メタノールで洗浄し、この後、メタノール中のアンモニア水の０．５Ｎ溶液で溶出させるＳＣＸカートリッジ（Ｖａｒｉａｎ）でのＳＰＥ濾過によって、この粗生成物を精製する。化合物２９を無色の油の形態で得る（２５ｍｇ、７５％）。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：１．２５（ｓ，６Ｈ）；１．７５（ｂｒｏａｄｍ，１Ｈ）；２．２７（ｓ，３Ｈ）；２．３２（ｓ，３Ｈ）；２．３９（ｓ，３Ｈ）；２．５３（ｍ，２Ｈ）；２．５７ｔｏ２．６４（ｍ，４Ｈ）；３．４４（ｔ，Ｊ＝５．７Ｈｚ，２Ｈ）；３．４６ｔｏ３．５５（ｍ，１０Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ａ２）：ＥＳｍ／ｚ＝３５５［Ｍ＋Ｈ］^＋；ｔ_Ｒ＝０．３０分。

化合物３０：（Ｅ）−（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−３−イソブチル−１６−［（Ｓ）−１−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−｛４−［４−（｛２−［２−（２−｛２−メチル［２−メチル−２−メチルジスルファニルプロピル］アミノエトキシ｝エトキシ）エトキシ］エチル｝メチルアミノ）メチル］フェニル｝オキシラニル）エチル］−６，６−ジメチル−１，４−ジオキサ−８，１１−ジアザシクロヘキサデカ−１３−エン−２，５，９，１２−テトラオン

１ｍＬの無水アセトニトリル中の１５．３ｍｇ（２１．３μｍｏｌ）の、アルゴンでパージした溶液に、１８．６μＬ（１０６．６μｍｏｌ）のＤＩＰＥＡ、および１ｍＬの無水アセトニトリル中の２２．７ｍｇ（６４μｍｏｌ）の化合物２９の溶液を順次添加する。攪拌を２４時間、アルゴン下、４０℃で継続する。室温に冷却した後、この混合物を７ｍＬのＥｔＯＡｃで希釈し、水（２×３ｍＬ）で、ＮａＨＣＯ_３飽和溶液（３ｍＬ）でおよびＮａＣｌ飽和溶液（３ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で脱水する。濾過し、減圧下で濃縮した後、９０／１０ＤＣＭ／メタノール混合物を溶離剤として使用するシリカゲルでのクロマトグラフィーによってこの粗生成物を精製する。化合物３０を無色の固体の形態で得る（１４．６ｍｇ、６６％）。^１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：０．７６（ｄ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，３Ｈ）；０．７６（ｄ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，３Ｈ）；１．００（ｓ，３Ｈ）；１．０４（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ）；１．１２（ｓ，３Ｈ）；１．２４（ｓ，６Ｈ）；１．２９（ｍ，１Ｈ）；１．５０ｔｏ１．６２（ｍ，２Ｈ）；１．８１（ｍ，１Ｈ）；２．１５（ｓ，３Ｈ）；２．２７（ｍ，１Ｈ）；２．３１（ｓ，３Ｈ）；２．３８（ｓ，３Ｈ）；２．４５ｔｏ２．５４（ｐａｒｔｉａｌｌｙｍａｓｋｅｄｍ，４Ｈ）；２．６０（ｔ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，２Ｈ）；２．６３ｔｏ２．７５（ｍ，２Ｈ）；２．９２ｔｏ３．０６（ｍ，３Ｈ）；３．２５ｔｏ３．３５（ｐａｒｔｉａｌｌｙｍａｓｋｅｄｍ，１Ｈ）；３．４４ｔｏ３．５４（ｍ，１４Ｈ）；３．８１（ｓ，３Ｈ）；３．８７（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ）；４．２５（ｄｄｄ，Ｊ＝３．９ａｎｄ８．３ａｎｄ１１．７Ｈｚ，１Ｈ）；４．９１（ｄｄ，Ｊ＝３．４ａｎｄ９．８Ｈｚ，１Ｈ）；５．１１（ｄｄｄ，Ｊ＝１．５ａｎｄ５．７ａｎｄ１１．５Ｈｚ，１Ｈ）；５．８０（ｄｄ，Ｊ＝１．５ａｎｄ１５．５Ｈｚ，１Ｈ）；６．４７（ｄｄｄ，Ｊ＝３．５ａｎｄ１１．５ａｎｄ１５．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．０５（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）；７．１７（ｄｄ，Ｊ＝２．０ａｎｄ８．８Ｈｚ，１Ｈ）；７．２０ｔｏ７．２６（ｍ，３Ｈ）；７．２７ｔｏ７．３３（ｍ，３Ｈ）；８．３５（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ａ２）：ＥＳｍ／ｚ＝１０３５［Ｍ＋Ｈ］^＋；ｍ／ｚ＝５１８［Ｍ＋２Ｈ］^２＋ベースピーク；ｔ_Ｒ＝０．８６分。

実施例６：（Ｅ）（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−３−イソブチル−１６−［（Ｓ）−１−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−｛４−［４−（｛２−［２−（２−｛２−メチル［２−メルカプト−２−メチルプロピル］アミノエトキシ｝エトキシ）エトキシ］エチル｝メチルアミノ）メチル］フェニル｝オキシラニル）エチル］−６，６−ジメチル−１，４−ジオキサ−８，１１−ジアザシクロヘキサデカ−１３−エン−２，５，９，１２−テトラオン

１．２４ｍＬのエタノール中の１０．９ｍｇ（１０．５μｍｏｌ）の化合物３０の溶液に、１．０４ｍＬの水中の１２．０６ｍｇ（４２．１μｍｏｌ）のＴＣＥＰの溶液を添加する。攪拌を４時間、室温で継続する。この混合物を６ｍＬのＥｔＯＡｃで希釈し、水／ＮＨ_４Ｃｌ飽和（６ｍＬ）の１／１混合物でおよびＮａＣｌ飽和溶液（６ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で脱水する。濾過し、減圧下で濃縮した後、９９／１から９０／１０ＤＣＭ／メタノール混合物を使用するシリカゲルでのクロマトグラフィーによってこの粗生成物を精製する。化合物Ｅｘ．６を白色固体の形態で得る（７．３６ｍｇ、７１％）。^１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：０．７６（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，３Ｈ）；０．７８（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，３Ｈ）；１．００（ｓ，３Ｈ）；１．０４（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ）；１．１２（ｓ，３Ｈ）；１．２５（ｓ，６Ｈ）；１．２８（ｍ，１Ｈ）；１．５１ｔｏ１．６２（ｍ，２Ｈ）；１．８０（ｍ，１Ｈ）；２．１５（ｓ，３Ｈ）；２．２７（ｍ，１Ｈ）；２．３４（ｓ，３Ｈ）；２．４４（ｓ，２Ｈ）；２．５１（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，２Ｈ）；２．６０（ｓ，１Ｈ）；２．６３（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，２Ｈ）；２．６６ｔｏ２．７４（ｍ，２Ｈ）；２．９３ｔｏ３．０４（ｍ，３Ｈ）；３．２５ｔｏ３．３７（ｐａｒｔｉａｌｌｙｍａｓｋｅｄｍ，１Ｈ）；３．４５ｔｏ３．５５（ｍ，１４Ｈ）；３．８１（ｓ，３Ｈ）；３．８７（ｄ，Ｊ＝１．５Ｈｚ，１Ｈ）；４．２５（ｄｄｄ，Ｊ＝３．７ａｎｄ８．０ａｎｄ１１．５Ｈｚ，１Ｈ）；４．９１（ｄｄ，Ｊ＝３．４ａｎｄ９．８Ｈｚ，１Ｈ）；５．１１（ｄｄｄ，Ｊ＝１．５ａｎｄ５．６ａｎｄ１１．５Ｈｚ，１Ｈ）；５．８０（ｄｄ，Ｊ＝１．５ａｎｄ１５．２Ｈｚ，１Ｈ）；６．４７（ｄｄｄ，Ｊ＝３．９ａｎｄ１１．５ａｎｄ１５．２Ｈｚ，１Ｈ）；７．０５（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）；７．１７（ｄｄ，Ｊ＝２．２ａｎｄ８．８Ｈｚ，１Ｈ）；７．２０ｔｏ７．２６（ｍ，３Ｈ）；７．２７ｔｏ７．３２（ｍ，３Ｈ）；８．３５（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ）、ＬＣＭＳ（Ａ１）：ＥＳｍ／ｚ＝９８９［Ｍ＋Ｈ］^＋；ｍ／ｚ＝４９５［Ｍ＋２Ｈ］^２＋ベースピーク；ｔ_Ｒ＝３．２４分。

（Ｅ）−（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−３−イソブチル−１６−［（Ｓ）−１−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−｛４−［４−（｛２−［２−（２−｛４−メチル−４−メチルジスルファニルペンタノイルアミノエトキシ｝エトキシ）エトキシ］エチル｝メチルアミノ）メチル］フェニル｝オキシラニル）エチル］−６，６−ジメチル−１，４−ジオキサ−８，１１−ジアザシクロヘキサデカ−１３−エン−２，５，９，１２−テトラオン

化合物３１：メチル［２−（２−｛２−［２−（４−メチル−４−メチルジスルファニルペンタノイルアミノ）エトキシ］エトキシ｝エトキシ）エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル

２７０ｍｇ（６４９μｍｏｌ）の化合物４、１９９ｍｇ（６４９μｍｏｌ）の化合物２６を１．５ｍＬのＤＭＦに溶解し、この後、１００μＬ（７１４μｍｏｌ）のＴＥＡをこの混合物に添加する。攪拌を１６時間、室温で継続する。混合物を１０ｍＬのＥｔＯＡｃで希釈し、水（２×５ｍＬ）でおよびＮａＣｌ飽和溶液（５ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で脱水する。濾過し、減圧下で濃縮した後、９８／２から９０／１０ＤＣＭ／メタノール混合物を溶離剤として使用するシリカゲルでのクロマトグラフィーによってこの粗生成物を精製する。化合物３１を無色の油の形態で得る（２５１ｍｇ、８０％）。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：１．２４（ｓ，６Ｈ）；１．３９（ｓ，９Ｈ）；１．７９（ｍ，２Ｈ）；２．１６（ｍ，２Ｈ）；２．４０（ｓ，３Ｈ）；２，８０（ｂｒｏａｄｓ，３Ｈ）；３．１８（ｑ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，２Ｈ）；３．３９（ｔ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，２Ｈ）；３．４５ｔｏ３．５４（ｍ，１２Ｈ）；７．８８（ｂｒｏａｄｔ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ａ２）：ＥＳｍ／ｚ＝４８３［Ｍ＋Ｈ］^＋；ｍ／ｚ＝５０５［Ｍ＋Ｎａ］^＋；ｍ／ｚ＝５２７［Ｍ−Ｈ＋ＨＣＯ_２Ｈ］⁻；ｔ_Ｒ＝１．０４分。

化合物３２：Ｎ−（２−｛２−［２−（２−メチルアミノエトキシ）エトキシ］エトキシ｝エチル）−４−メチル−４−メチルジスルファニルペンタアミド

８ｍＬのＤＣＭ中の２５１ｍｇ（５２０μｍｏｌ）の化合物３１の溶液に、１．９３ｍＬ（２６ｍｍｏｌ）のＴＦＡを添加する。攪拌を３時間室温で継続し、この後、この混合物を濃縮乾固させる。この粗生成物を最少量のＤＣＭに溶解し、この後、トルエンを数回混入する。コンディショニングし、メタノールで洗浄し、この後、メタノール中のアンモニア水の０．５Ｎ溶液で溶出させるＳＣＸカートリッジ（Ｖａｒｉａｎ）でのＳＰＥ濾過によって、この粗生成物を精製する。化合物３２を無色の油の形態で得る（１５９ｍｇ、８０％）。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：１．２４（ｓ，６Ｈ）；１．７９（ｍ，２Ｈ）；２．１５（ｍ，２Ｈ）；２．２７（ｓ，３Ｈ）；２．４０（ｓ，３Ｈ）；２．５８（ｔ，Ｊ＝５．７Ｈｚ，２Ｈ）；３．１８（ｑ，Ｊ＝５．７Ｈｚ，２Ｈ）；３．３９（ｔ，Ｊ＝５．７Ｈｚ，２Ｈ）；３．４４（ｔ，Ｊ＝５．７Ｈｚ，２Ｈ）；３．４７ｔｏ３．５４（ｍ，８Ｈ）；７．８９（ｂｒｏａｄｔ，Ｊ＝５．７Ｈｚ，１Ｈ）、ＬＣＭＳ（Ａ１）：ＥＳｍ／ｚ＝３８３［Ｍ＋Ｈ］^＋；ｔ_Ｒ＝２．６８分。

実施例７：（Ｅ）−（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−３−イソブチル−１６−［（Ｓ）−１−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−｛４−［４−（｛２−［２−（２−｛４−メチル−４−メチルジスルファニルペンタノイルアミノエトキシ｝エトキシ）エトキシ］エチル｝メチルアミノ）メチル］フェニル｝オキシラニル）エチル］−６，６−ジメチル−１，４−ジオキサ−８，１１−ジアザシクロヘキサデカ−１３−エン−２，５，９，１２−テトラオン

実施例７は、化合物３０の調製について説明した方法を適用することによる誘導体２のクロロ基のアミン３２での求核置換、続いて、実施例６の調製について説明した方法を適用することによるジスルフィドの還元によって得ることができる。

（Ｅ）−（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−３−イソブチル−１６−｛（Ｓ）−１−［（２Ｒ，３Ｒ）−３−（４−メルカプトメチルフェニル）オキシラニル］エチル｝−６，６−ジメチル−１，４−ジオキサ−８，１１−ジアザシクロヘキサデカ−１３−エン−２，５，９，１２−テトラオン

化合物３３：実施例８のダイマー

化合物２（２４．５ｍｇ；３４．１μｍｏｌ）を無水ＴＨＦ（２．５ｍＬ）に溶解し、この混合物を−１０℃に冷却し、この後、ヘキサメチルジシラチアン（４４．３μｍｏｌ）および次いでＴＨＦ中のテトラブチルアンモニウムフルオリドの１Ｍ溶液（４０．９μｍｏｌ）を添加する。この混合物を室温に冷却し攪拌を１時間３０分継続する。ＥｔＯＡｃ（５ｍＬ）を添加することにより混合物を希釈し、有機相をＮＨ_４Ｃｌ飽和水溶液（５ｍＬ）で洗浄する。水性相をＥｔＯＡｃ（２×５ｍＬ）で抽出する。有機相を併せ、ＮａＣｌ飽和水溶液（５ｍＬ）で洗浄する。ＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過した後、溶媒を減圧下で蒸発させる。この粗反応生成物を、１００／０から９７／３ＤＣＭ／メタノール混合物を溶離剤として用いて溶出させるシリカゲルでのクロマトグラフィーによって精製する。白色固体、化合物３３を得る（１９ｍｇ；７８％）。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：０．７８（ｍ，１２Ｈ）；１．００（ｓ，６Ｈ）；１．０４（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，６Ｈ）；１．１１（ｓ，６Ｈ）；１．３０（ｍ，２Ｈ）；１．４９−１．６３（ｍ，４Ｈ）；１．８２（ｍ，２Ｈ）；２．２６（ｍ，２Ｈ）；２．６３−２．７２（ｍ，４Ｈ）；２．９３−３．０５（ｍ，６Ｈ）；３．２５−３．３７（ｐａｒｔｉａｌｌｙｍａｓｋｅｄｍ，２Ｈ）；３．８１（ｓ，６Ｈ）；３．８２（ｓ，４Ｈ）；３．８９（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，２Ｈ）；４．２５（ｄｄｄ，Ｊ＝３．７，８．０ａｎｄ１１．５Ｈｚ，２Ｈ）；４．９１（ｄｄ，Ｊ＝３．７，９．６Ｈｚ，２Ｈ）；５．１０（ｄｄｄ，Ｊ＝１．３，５．３ａｎｄ１０．８Ｈｚ，２Ｈ）；５．７９（ｄｄ，Ｊ＝１．３，１５．３Ｈｚ，２Ｈ）；６．４７（ｄｄｄ，Ｊ＝３．７，１０．８ａｎｄ１５．３Ｈｚ，２Ｈ）；７．０５（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，２Ｈ）；７．１７（ｄｄ，Ｊ＝２．０，８．６Ｈｚ，２Ｈ）；７．２２（ｄｄ，Ｊ＝２．５，９．３Ｈｚ，２Ｈ）；７．２６−７．３２（ｍ，１０Ｈ）；８．３４（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ）、ＬＣＭＳ（Ａ２）：ＥＳｍ／ｚ＝１４２７［Ｍ＋Ｈ］^＋；ｔ_Ｒ＝１．３１分。

実施例８：（Ｅ）−（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−３−イソブチル−１６−｛（Ｓ）−１−［（２Ｒ，３Ｒ）−３−（４−メルカプトメチルフェニル）オキシラニル］エチル｝−６，６−ジメチル−１，４−ジオキサ−８，１１−ジアザシクロヘキサデカ−１３−エン−２，５，９，１２−テトラオン

化合物３３（１１ｍｇ；７．７μｍｏｌ）をメタノール（８．８ｍＬ）に溶解する。この後、２．２ｍＬの水に溶解したＴＣＥＰ（７６．７μｍｏｌ）を添加し、この混合物を２時間、室温で攪拌する。この混合物を２０ｍＬのＥｔＯＡｃで希釈し、有機相を、水とＮＨ_４Ｃｌ飽和水溶液の１／１混合物（２０ｍＬ）で洗浄する。水性相をＥｔＯＡｃ（２×１５ｍＬ）で抽出する。有機相を併せ、ＮａＣｌ飽和水溶液（１５ｍＬ）で洗浄する。ＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過した後、溶媒を減圧下で蒸発させる。この粗反応生成物を、１００／０から９５／５ＤＣＭ／メタノール混合物で溶出させるシリカゲルでのクロマトグラフィーによって精製する。白色固体、Ｅｘ．８を得る（４．７ｍｇ；３１％）。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：０．７９（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，６Ｈ）；１．００（ｓ，３Ｈ）；１．０５（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，３Ｈ）；１．１２（ｓ，３Ｈ）；１．３０（ｍ，１Ｈ）；１．５０−１．６３（ｍ，２Ｈ）；１．８０（ｍ，１Ｈ）；２．２７（ｍ，１Ｈ）；２．６２−２．７５（ｍ，２Ｈ）；２．８４（ｂｒｏａｄｔ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，１Ｈ）；２．９３−３．０６（ｍ，３Ｈ）；３．３４（ｐａｒｔｉａｌｌｙｍａｓｋｅｄｍ，１Ｈ）；３．７３（ｂｒｏａｄｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，２Ｈ）；３．８１（ｓ．，３Ｈ）；３．８７（ｄ，Ｊ＝１．６Ｈｚ，１Ｈ）；４．２５（ｄｄｄ，Ｊ＝３．７，８．０ａｎｄ１１．４Ｈｚ，１Ｈ）；４．９１（ｄｄ，Ｊ＝３．６，９．６Ｈｚ，１Ｈ）；５．１１（ｄｄｄ，Ｊ＝１．３，５．３ａｎｄ１１．４Ｈｚ，１Ｈ）；５．７９（ｄｄ，Ｊ＝１．３，１５．２Ｈｚ，１Ｈ）；６．４７（ｄｄｄ，Ｊ＝３．４，１１．３ａｎｄ１５．２Ｈｚ，１Ｈ）；７．０５（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．１７（ｄｄ，Ｊ＝１．９，８．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．２２（ｄｄ，Ｊ＝２．３，９．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．２５（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ）；７．２８（ｄ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，２Ｈ）；７．３５（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ）；８．３４（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ａ２）：ＥＳｍ／ｚ＝７１５［Ｍ＋Ｈ］^＋；ｍ／ｚ＝７１３［Ｍ−Ｈ］⁻；ｔ_Ｒ＝１．１８分。

ｈｕ２Ｈ１１−ＳＰＤＢ−Ｅｘ１

一般二工程法に従って、８．８６ｍｇ／ｍＬの初期濃度を有する１０．４ｍｇ（０．０７１μｍｏｌ、１．１７４ｍＬ）の裸の抗体ｈｕ２Ｈ１１を、混合物中の最終抗体濃度が８ｍｇ／ｍＬになるように、３４．２μＬのＤＭＡに溶解した７当量の４−（２−ピリジルジチオ）酪酸のＮ−ヒドロキシスクシンイミジルエステル（０．１６ｍｇ、０．４９６μｍｏｌ）で処理する。精製後、１抗体あたり平均で４．６８のピリジルジスルフィド分子を有する２．２ｍＬの修飾抗体ｈｕ２Ｈ１１を、４．２８ｍｇ／ｍＬ（９．４２ｍｇ、９１％）の濃度で得る。１．６８ｍＬ（７．２ｍｇ，０．０４９μｍｏｌ）の修飾抗体ｈｕ２Ｈ１１を、１０１．２μＬのＤＭＡに溶解した１．０３ｍｇの（Ｅ）−（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−３−イソブチル−１６−［（Ｓ）−１−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−｛４−［４−（４−メルカプト−４−メチルペンタノイル）ピペラジン−１−イルメチル］フェニル｝オキシラニル）エチル］−６，６−ジメチル−１，４−ジオキサ−８，１１−ジアザシクロヘキサデカ−１３−エン−２，５，９，１２−テトラオン（化合物Ｅｘ．１、１．１４８μｍｏｌ）で処理する。１０％ＮＭＰの存在下でのＳｕｐｅｒｄｅｘでの精製およびＡｍｉｃｏｎＵｌｔｒａ−１５での濃縮の後、０．０１Ｍのリン酸塩と０．１４ＭのＮａＣｌとを含有する水性ｐＨ６．５緩衝液において緩衝液の最終交換を行う。このようにして、１抗体あたり平均で３のクリプトフィシン誘導体（ＨＲＭＳ）および９９．９％のモノマー純度を有する１．５ｍＬのコンジュゲートＥｘ．９を１．１ｍｇ／ｍＬの濃度で得る。

ｈｕ２Ｈ１１−ＳＰＤＢ−Ｅｘ２

一工程一般法に従って、１０．２４ｍｇ／ｍＬの初期濃度で１３．５ｍｇ（０．０９２μｍｏｌ、１．３１８ｍＬ）の裸の抗体ｈｕ２Ｈ１１を、混合物中の最終抗体濃度が９ｍｇ／ｍＬになるように、３８．４μＬのＤＭＡに溶解した６当量の４−（２−ピリジルジチオ）酪酸のＮ−ヒドロキシスクシンイミジルエステル（０．１８ｍｇ、０．５５１μｍｏｌ）で処理する。２時間、約２０００ｒｐｍで、室温で攪拌した後、修飾抗体ｈｕ２Ｈ１１と１．７６０ｍＬのｐＨ７．５−８緩衝液と５４３μＬのＤＭＡとの混合物１．３３３ｍＬ（１２．０ｍｇ、０．０８１μｍｏｌ）、および次いで１８２μＬのＤＭＡに溶解した１．７３ｍｇの（Ｅ）−（３Ｓ，６Ｒ，１０Ｒ，１６Ｓ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−３−イソブチル−１６−［（Ｓ）−１−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−｛４−［４−（４−メルカプト−４−メチルペンタノイル）ピペラジン−１−イルメチル］フェニル｝オキシラニル）エチル］−６−メチル−１，４−ジオキサ−８，１１−ジアザシクロヘキサデカ−１３−エン−２，５，９，１２−テトラオン（化合物Ｅｘ．２、１．９５８μｍｏｌ）を順次添加する。２０％ＮＭＰの存在下でのＳｕｐｅｒｄｅｘでの精製およびＡｍｉｃｏｎＵｌｔｒａ−１５での濃縮の後、０．０１Ｍのヒスチジンと１０％のスクロース（ｗ／ｖ）と５％のＮＭＰ（ｖ／ｖ）とを含有する水性ｐＨ６．５緩衝液において緩衝液の最終交換を行う。このようにして、１抗体あたり平均で３．７のクリプトフィシン誘導体および９８．８％のモノマー純度を有する１．５ｍＬのコンジュゲートＥｘ．１０を２．８３ｍｇ／ｍＬの濃度で得る。

ｈｕ２Ｈ１１−ＳＰＤＢ−Ｅｘ５

一工程一般法に従って、１０．２４ｍｇ／ｍＬの初期濃度で９．４５ｍｇ（０．０６４μｍｏｌ、０．９２３ｍＬ）の裸の抗体ｈｕ２Ｈ１１を、混合物中の最終抗体濃度が９ｍｇ／ｍＬになるように、２６．８８μＬのＤＭＡに溶解した６当量の４−（２−ピリジルジチオ）酪酸のＮ−ヒドロキシスクシンイミジルエステル（０．１３ｍｇ、０．３９８μｍｏｌ）で処理する。２時間、約２０００ｒｐｍで、室温で攪拌した後、修飾抗体ｈｕ２Ｈ１１の反応媒体１．０ｍＬ（９．０ｍｇ，０．０６１μｍｏｌ）、１．４５ｍＬのｐＨ≒７．５−８緩衝液、２６５μＬのＤＭＡおよびこの後、２８５μＬのＤＭＡに溶解した１．２６ｍｇの（Ｅ）（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−３−イソブチル−１６−［（Ｓ）−１−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−｛４−［４−（２−メルカプト−２−メチルプロピル）ピペラジン−１−イルメチル］フェニル｝オキシラニル）エチル］−６，６−ジメチル−１，４−ジオキサ−８，１１−ジアザシクロヘキサデカ−１３−エン−２，５，９，１２−テトラオン（化合物Ｅｘ．５、１．４７２μｍｏｌ）を順次添加する。２０％ＮＭＰの存在下でのＳｕｐｅｒｄｅｘでの精製およびＡｍｉｃｏｎＵｌｔｒａ−１５での濃縮の後、０．０１Ｍのヒスチジンと１０％のスクロース（ｗ／ｖ）と５％のＮＭＰ（ｖ／ｖ）とを含有する水性ｐＨ６．５緩衝液において緩衝液の最終交換を構成する。このようにして、１抗体あたり平均で３．７／３．１のクリプトフィシン誘導体（ＵＶ／ＨＲＭＳ）および９８．０％のモノマー純度を有する２．５ｍＬのコンジュゲートＥｘ．１２を１．７０ｍｇ／ｍＬの濃度で得る。

ｈｕ２Ｈ１１−ＳＰＤＢ−Ｅｘ６

一工程一般法に従って、１０．２４ｍｇ／ｍＬの初期濃度で１０．３１ｍｇ（０．０７０μｍｏｌ、１．００６ｍＬ）の裸の抗体ｈｕ２Ｈ１１を、混合物中の最終抗体濃度が９ｍｇ／ｍＬになるように、２９．３２μＬのＤＭＡに溶解した６当量の４−（２−ピリジルジチオ）酪酸のＮ−ヒドロキシスクシンイミジルエステル（０．１４ｍｇ、０．４２９μｍｏｌ）で処理する。２時間、約２０００ｒｐｍで、室温で攪拌した後、１．５９５ｍＬのｐＨ≒７．５−８緩衝液、２９１μＬのＤＭＡ、およびこの後、３１４μＬのＤＭＡに溶解した１．６０ｍｇの（Ｅ）−（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−３−イソブチル−１６−［（Ｓ）−１−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−｛４−［４−（｛２−［２−（２−｛２−メチル［２−メルカプト−２−メチルプロピル］アミノエトキシ｝エトキシ）エトキシ］エチル｝メチルアミノ）メチル］フェニル｝オキシラニル）エチル］−６，６−ジメチル−１，４−ジオキサ−８，１１−ジアザシクロヘキサデカ−１３−エン−２，５，９，１２−テトラオン（化合物Ｅｘ．６、１．６１７μｍｏｌ）を、修飾抗体ｈｕ２Ｈ１１の混合物１．１ｍＬ（９．９ｍｇ，０．０６７μｍｏｌ）に順次添加する。２０％ＮＭＰの存在下でのＳｕｐｅｒｄｅｘでの精製およびＡｍｉｃｏｎＵｌｔｒａ−１５での濃縮の後、０．０１Ｍのヒスチジンと１０％のスクロース（ｗ／ｖ）と５％のＮＭＰ（ｖ／ｖ）とを含有する水性ｐＨ６．５緩衝液において緩衝液の最終交換を行う。このようにして、１抗体あたり平均で３．４のクリプトフィシン誘導体（ＨＲＭＳ）および９９．８％のモノマー純度を有する３ｍＬのコンジュゲートＥｘ．１２を１．９７ｍｇ／ｍＬの濃度で得る。

（４−｛４−［（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（Ｓ）−１−｛（Ｅ）−（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ）−１０−［３−クロロ−４−メトキシベンジル］−３−イソブチル−６，６−ジメチル−２，５，９，１２−テトラオキソ−１，４−ジオキサ−８，１１−ジアザシクロヘキサデカ−１３−エン−１６−イル｝エチル）オキシラニル］ベンジル｝ピペラジン−１−イル）酢酸２，５−ジオキソピロリジン−１−イル

化合物３４：４−メトキシカルボニルメチルピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル

２００ｍｇ（１．０７ｍｍｏｌ）のピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルを無水アセトニトリル（１０ｍＬ）に溶解する。この後、ＴＥＡ（１．０７ｍｍｏｌ）および次いでブロモ酢酸メチル（１．６１ｍｍｏｌ）を添加する。この白色懸濁液を４８時間、室温で攪拌し、この後、ＮａＨＣＯ_３飽和水溶液（１０ｍＬ）を添加する。水性相をＤＣＭ（３×１０ｍＬ）で抽出し、有機相を併せ、ＮａＣｌ飽和水溶液で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で脱水する。濾過し、減圧下で溶媒を蒸発させた後、粗生成物を得る。この粗生成物を、９８／２ＤＣＭ／メタノール混合物で溶出させるシリカゲルでのクロマトグラフィーによって精製する。このようにして期待生成物３４、無色油を得る（１７４．８ｍｇ；６３％）。ＴＬＣ（ＤＣＭ９０／ＭｅＯＨ１０）：Ｒｆ＝０．６６；^１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：１．３９（ｓ，９Ｈ）；２．４０ｔｏ２．４８（ｍ，４Ｈ）；３．２５（ｓ，２Ｈ）；３．２８ｔｏ３．３３（ｐａｒｔｉａｌｌｙｍａｓｋｅｄｍ，４Ｈ）；３．６１（ｓ，３Ｈ）。

化合物３５：ピペラジン−１−イル酢酸メチル・塩酸塩

化合物３４（１７４ｍｇ；０．６７ｍｍｏｌ）を無水ジオキサン（５ｍＬ）に溶解し、ジオキサン中のＨＣｌの４Ｍ溶液（０．０２ｍｍｏｌ）を添加する。この混合物を５時間、室温で攪拌し、この後、この懸濁液を焼結漏斗で濾過する。このようにして得た固体をジオキサン（２ｍＬ）でおよび次いでイソプロピルエーテル（２ｍＬ）で洗浄し、この後、真空下で乾燥させる。ベージュ色の固体、３５を得る（１３１ｍｇ；１００％）。^１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：２．８８ｔｏ２．９７（ｍ，４Ｈ）；３．０９ｔｏ３．１９（ｍ，４Ｈ）；３．５３ｔｏ３．５９（ｍ，２Ｈ）；３．６５（ｓ，３Ｈ）；８．６５ｔｏ９．２２（ｂｒｏａｄｍ，２Ｈ）。

化合物３６：（４−｛４−［（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（Ｓ）−１−｛（Ｅ）−（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ）−１０−［３−クロロ−４−メトキシベンジル］−３−イソブチル−６，６−ジメチル−２，５，９，１２−テトラオキソ−１，４−ジオキサ−８，１１−ジアザシクロヘキサデカ−１３−エン−１６−イル｝エチル）オキシラニル］ベンジル｝ピペラジン−１−イル）酢酸メチル

誘導体１（２０ｍｇ；２８．６μｍｏｌ）を無水ＤＣＭ（１ｍＬ）に溶解し、ＴＥＡ（７１．５μｍｏｌ）および次いでＣＭＳ（４５．８μｍｏｌ）を添加する。室温で１２時間後、形成した生成物２を単離しない。ＴＥＡ（８５．７μｍｏｌ）および次いでピペラジン−１−イル酢酸メチル・塩酸塩３５（４２．８μｍｏｌ）を添加する。この混合物をさらに７２時間、室温で攪拌し、この後、無水ＤＭＦ（１ｍＬ）およびＮａＩ（３０μｍｏｌ）を添加する。この混合物を４８時間、４５℃で攪拌し、この後、ＥｔＯＡｃ（５ｍＬ）で希釈する。有機相を水（２×２ｍＬ）で、ＮａＨＣＯ_３飽和水溶液（２ｍＬ）でおよびＮａＣｌ飽和水溶液（２ｍＬ）で洗浄する。ＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過した後、溶媒を減圧下で蒸発させる。この粗反応生成物を、１００／０から９８／２ＤＣＭ／メタノール混合物で溶出させるシリカゲルでのクロマトグラフィーによって精製する。化合物３６を白色固体の形態で得る（８．２ｍｇ；３４％）。ＴＬＣ（ＤＣＭ９０／ＭｅＯＨ１０）：Ｒｆ＝０．４５；^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：０．７７（ｄ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，３Ｈ）；０．７８（ｄ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，３Ｈ）；１．００（ｓ，３Ｈ）；１．０５（ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，３Ｈ）；１．１２（ｓ，３Ｈ）；１．２７ｔｏ１．３２（ｍ，１Ｈ）；１．５０ｔｏ１．６０（ｍ，２Ｈ）；１．７４ｔｏ１．８４（ｍ，１Ｈ）；２．２１ｔｏ２．３０（ｍ，１Ｈ）；２．３７（ｂｒｏａｄｓ，４Ｈ）；２．６４ｔｏ２．７４（ｍ，２Ｈ）；２．９４ｔｏ３．０６（ｍ，３Ｈ）；３．１８ｔｏ３．５２（ｐａｒｔｉａｌｌｙｍａｓｋｅｄｍ，９Ｈ）；３．６０（ｓ，３Ｈ）；３．８１（ｓ，３Ｈ）；３．８７（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ）；４．２０ｔｏ４．３１（ｍ，１Ｈ）；４．９１（ｄｄ，Ｊ＝３．８ａｎｄ９．９Ｈｚ，１Ｈ）；５．１１（ｍ，１Ｈ）；５．８０（ｄ，Ｊ＝１５．２Ｈｚ，１Ｈ）；６．４８（ｄｄｄ，Ｊ＝３．８ａｎｄ１１．２ａｎｄ１５．２Ｈｚ，１Ｈ）；７．０５（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ）；７．１７（ｄｄ，Ｊ＝２．２ａｎｄ８．３Ｈｚ，１Ｈ）；７．２０ｔｏ７．３３（ｍ，６Ｈ）；８．３４（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ａ１）：ＥＳｍ／ｚ＝８３９［Ｍ＋Ｈ］^＋；ｍ／ｚ＝４２０［Ｍ＋２Ｈ］^２＋（ベースピーク）；ｍ／ｚ＝８３７［Ｍ−Ｈ］⁻；ｍ／ｚ＝８８３［Ｍ＋ＨＣＯ２Ｈ−Ｈ］⁻（ベースピーク）；ｔ_Ｒ＝３．５７分。

化合物３７：ブロモ酢酸アリル

２８８ｍｇ（４．９５ｍｍｏｌ）のアリルアルコールを２５ｍＬのＤＣＭに溶解する。この溶液を０℃に冷却し、この後、７６０μＬ（５．４５ｍｍｏｌ）のＴＥＡおよび３．０３ｍｇ（２４．８μｍｏｌ）のＤＭＡＰを添加する。この混合物を０℃で攪拌し、この後、１．０ｇ（４．９５ｍｍｏｌ）のブロモアセチルブロミドを添加する。反応を一晩、室温で継続する。混合物に水を添加し；水性相をＤＣＭで洗浄する。有機画分を併せ、水でおよびＮａＣｌ飽和溶液で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で脱水する。濾過し、減圧下で溶媒を蒸発させた後、生成物３７を得る（７４７ｍｇ、８４％）。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：４．１８（ｓ，２Ｈ）；４．６４（ｔｄ，Ｊ＝１．５ａｎｄ５．４Ｈｚ，２Ｈ）；５．２５（ｑｄ，Ｊ＝１．５ａｎｄ１０．５Ｈｚ，１Ｈ）；５．３５（ｑｄ，Ｊ＝１．５ａｎｄ１７．２Ｈｚ，１Ｈ）；５．９２（ｔｄｄ，Ｊ＝５．４ａｎｄ１０．５ａｎｄ１７．２Ｈｚ，１Ｈ）。

化合物３８：４−アリルオキシカルボニルメチルピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル

８ｍＬのアセトニトリル中の２００ｍｇ（１．０７ｍｍｏｌ）の１−Ｂｏｃ−ピペラジンの溶液に、１５０μＬ（１．０７ｍｍｏｌ）のＴＥＡおよび２５０ｍｇ（１．４０ｍｍｏｌ）のブロモ酢酸アリル３７を添加する。この混合物を室温で一晩攪拌する。ＮａＨＣＯ_３飽和溶液を添加することによって反応を停止させる。混合物をＥｔＯＡｃで抽出し（３回）；有機相を併せ、ＮａＣｌ飽和溶液で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で脱水する。濾過し、減圧下で溶媒を蒸発させた後、この粗生成物を、１００／９０から９５／５ＤＣＭ／メタノール混合物で溶出させるシリカゲルでのクロマトグラフィーによって精製する。期待生成物３８を黄色油の形態で得る（３１４ｍｇ；１００％）。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：１．３９（ｓ，９Ｈ）；２．４５ｔｏ２．４８（ｍ，４Ｈ）；３．２５ｔｏ３．３４（ｐａｒｔｉａｌｌｙｍａｓｋｅｄｍ，６Ｈ）；４．５７（ｔｄ，Ｊ＝１．５ａｎｄ５．６Ｈｚ，２Ｈ）；５．２２（ｑｄ，Ｊ＝１．５ａｎｄ１０．３Ｈｚ，１Ｈ）；５．３０（ｑｄ，Ｊ＝１．５ａｎｄ１７．１Ｈｚ，１Ｈ）；５．８３ｔｏ５．９８（ｍ，１Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ａ２）：ＥＳｍ／ｚ＝２８５［Ｍ＋Ｈ］^＋；ｍ／ｚ＝２２９ベースピーク；ｔ_Ｒ＝０．５１分。

化合物３９：ピペラジン−１−イル酢酸アリル・塩酸塩

３１４ｍｇ（１．１０ｍｍｏｌ）の化合物３８を１２．６ｍＬのジオキサンに溶解し、この後、ジオキサン中のＨＣｌの４Ｍ溶液５．５ｍＬ（２２．０ｍｍｏｌ）を添加する。攪拌を一晩、室温で継続する。この混合物を濃縮乾固させて、期待化合物３９を黄色油の形態で得る（２６０ｍｇ；１００％）。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：２．７９ｔｏ２．８８（ｍ，４Ｈ）；３．０７ｔｏ３．１５（ｍ，４Ｈ）；３．４８ｔｏ３．５１（ｍ，２Ｈ）；４．６０（ｔｄ，Ｊ＝１．５ａｎｄ５．６Ｈｚ，２Ｈ）；５．２３（ｑｄ，Ｊ＝１．５ａｎｄ１０．３Ｈｚ，１Ｈ）；５．３２（ｑｄ，Ｊ＝１．５ａｎｄ７．４Ｈｚ，１Ｈ）；５．８６ｔｏ５．９８（ｍ，１Ｈ）；８，７４（ｂｒｏａｄｓ，２Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ａ２）：ＥＳｍ／ｚ＝１８５［Ｍ＋Ｈ］^＋；ｔ_Ｒ＝０．１９分。

化合物４０：（４−｛４−［（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（Ｓ）−１−｛（Ｅ）−（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ）−１０−［３−クロロ−４−メトキシベンジル］−３−イソブチル−６，６−ジメチル−２，５，９，１２−テトラオキソ−１，４−ジオキサ−８，１１−ジアザシクロヘキサデカ−１３−エン−１６−イル｝エチル）オキシラニル］ベンジル｝ピペラジン−１−イル）酢酸アリル

無水アセトニトリル（２．５ｍＬ）中の化合物２（２８．３ｍｇ、３９．５μｍｏｌ）の、アルゴンでパージした溶液に、無水アセトニトリル（１ｍＬ）中の化合物３９（１１８．５μｍｏｌ）およびＴＥＡ（１９８μｍｏｌ）の溶液を添加する。攪拌を２４時間、４０℃で継続する。この混合物をＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）で希釈する。有機相を水（１０ｍＬ）で、ＮａＨＣＯ_３飽和水溶液（１０ｍＬ）およびＮａＣｌ飽和水溶液（１０ｍＬ）で洗浄する。ＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過した後、溶媒を減圧下で蒸発させる。この粗反応生成物を、９８／２ＤＣＭ／メタノール混合物で溶出させるシリカゲルでのクロマトグラフィーによって精製する。化合物４０を白色固体の形態で得る（１９．２ｍｇ；５６％）。^１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：０．７５（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，３Ｈ）；０．７７（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，３Ｈ）；１．００（ｓ，３Ｈ）；１．０５（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，３Ｈ）；１．１２（ｓ，３Ｈ）；１．２５ｔｏ１．３３（ｍ，１Ｈ）；１．５０ｔｏ１．６１（ｍ，２Ｈ）；１．７４ｔｏ１．８４（ｍ，１Ｈ）；２．２７（ｄｔ，Ｊ＝１１．３ａｎｄ１４．２Ｈｚ，１Ｈ）；２．３２ｔｏ２．４２（ｍ，４Ｈ）；２．５２（ｐａｒｔｉａｌｌｙｍａｓｋｅｄｍ，４Ｈ）；２．６４ｔｏ２．７４（ｍ，２Ｈ）；２．９４ｔｏ３．０５（ｍ，３Ｈ）；３．２５（ｓ，２Ｈ）；３．３２ｔｏ３．３５（ｐａｒｔｉａｌｌｙｍａｓｋｅｄｍ，１Ｈ）；３．４０ｔｏ３．４８（ｍ，２Ｈ）；３．８１（ｓ，３Ｈ）；３．８７（ｄ，Ｊ＝１．６Ｈｚ，１Ｈ）；４．２５（ｄｄｄ，Ｊ＝３．７ａｎｄ８．０ａｎｄ１１．６Ｈｚ，１Ｈ）；４．５６（ｔｄ，Ｊ＝１．５ａｎｄ５．５Ｈｚ，２Ｈ）；４．９１（ｄｄ，Ｊ＝３．７ａｎｄ９．７Ｈｚ，１Ｈ）；５．１１（ｍ，１Ｈ）；５．２１（ｑｄ，Ｊ＝１．５ａｎｄ１０．５Ｈｚ，１Ｈ）；５．３０（ｑｄ，Ｊ＝１．５ａｎｄ１７．３Ｈｚ，１Ｈ）；５．８０（ｄ，Ｊ＝１６．２Ｈｚ，１Ｈ）；５．８６ｔｏ５．９５（ｍ，１Ｈ）；６．４７（ｄｄｄ，Ｊ＝３．８ａｎｄ１１．２ａｎｄ１５．２Ｈｚ，１Ｈ）；７．０５（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．１７（ｄｄ，Ｊ＝２．２ａｎｄ８．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．１９ｔｏ７．３２（ｍ，６Ｈ）；８．３４（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ａ２）：ＥＳｍ／ｚ＝８６５［Ｍ＋Ｈ］^＋；ｍ／ｚ＝４３３．５［Ｍ＋２Ｈ］^２＋（ベースピーク）；ｍ／ｚ＝８６３［Ｍ−Ｈ］⁻；ｍ／ｚ＝９０９［Ｍ＋ＨＣＯ_２Ｈ−Ｈ］⁻；ｔ_Ｒ＝０．９２分。

化合物４１：（４−｛４−［（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（Ｓ）−１−｛（Ｅ）−（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ）−１０−［３−クロロ−４−メトキシベンジル］−３−イソブチル−６，６−ジメチル−２，５，９，１２−テトラオキソ−１，４−ジオキサ−８，１１−ジアザシクロヘキサデカ−１３−エン−１６−イル｝エチル）オキシラニル］ベンジル｝ピペラジン−１−イル）酢酸

無水ＴＨＦ中の化合物４０（１２．８ｍｇ、１４．８μｍｏｌ）のアルゴン下の溶液に、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（１．４８μｍｏｌ）およびモルホリン（１４８μｍｏｌ）を添加する。３時間反応させた後、この混合物を濃縮乾固させ、５ｍＬのＤＣＭに溶かす。有機相を３ｍＬの水中の０．１ＮＨＣｌ溶液１ｍＬ（ｐＨ≒５）で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過し、蒸発させて化合物４１を得る（６．７ｍｇ、５５％）。^１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：０．７６（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，３Ｈ）；０．７８（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，３Ｈ）；１．００（ｓ，３Ｈ）；１．０５（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，３Ｈ）；１．１２（ｓ，３Ｈ）；１．２８（ｍ，１Ｈ）；１．５２ｔｏ１．５９（ｍ，２Ｈ）；１．７６ｔｏ１．８４（ｍ，１Ｈ）；２．２１ｔｏ２．３２（ｍ，１Ｈ）；２．４２（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，４Ｈ）；２．５８ｔｏ２．７６（ｍ，６Ｈ）；２．９７ｔｏ３．０９（ｍ，３Ｈ）；３．１４（ｂｒｏａｄｓ，２Ｈ）；３．３３（ｍａｓｋｅｄｍ，１Ｈ）；３．４６（ｂｒｏａｄｓ，２Ｈ）；３．８１（ｓ，３Ｈ）；３．８７（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ）；４．２０ｔｏ４．２９（ｍ，１Ｈ）；４．８９ｔｏ４．９３（ｍ，１Ｈ）；５．０６ｔｏ５．１４（ｍ，１Ｈ）；５．８０（ｄ，Ｊ＝１５．２Ｈｚ，１Ｈ）；６．４３ｔｏ６．５０（ｍ，１Ｈ）；７．０５（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．１７（ｄｄ，Ｊ＝２．２ａｎｄ８．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．２０ｔｏ７．３２（ｍ，６Ｈ）；８．３４（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ａ２）：ＥＳｍ／ｚ＝８２５［Ｍ＋Ｈ］^＋；ｍ／ｚ＝４１３［Ｍ＋２Ｈ］^２＋（ベースピーク）；ｍ／ｚ＝８２３［Ｍ−Ｈ］⁻；ｔ_Ｒ＝０．８６分。

実施例１３：（４−｛４−［（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（Ｓ）−１−｛（Ｅ）−（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ）−１０−［３−クロロ−４−メトキシベンジル］−３−イソブチル−６，６−ジメチル−２，５，９，１２−テトラオキソ−１，４−ジオキサ−８，１１−ジアザシクロヘキサデカ−１３−エン−１６−イル｝エチル）オキシラニル］ベンジル｝ピペラジン−１−イル）酢酸２，５−ジオキソピロリジン−１−イル

実施例１３は、実施例１８について説明した方法に従って酸４１を活性化することによって得ることができる。

（２−｛２−［２−（２−｛４−［（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（Ｓ）−１−｛（Ｅ）−（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ）−１０−［３−クロロ−４−メトキシベンジル］−３−イソブチル−６，６−ジメチル−２，５，９，１２−テトラオキソ−１，４−ジオキサ−８，１１−ジアザシクロヘキサデカ−１３−エン−１６−イル｝エチル）オキシラニル］ベンジルアミノ｝エトキシ）エトキシ］エトキシ｝エトキシ）プロパン酸２，５−ジオキソピロリジン−１−イル

化合物４２：３−（２−｛２−［２−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノエトキシ）エトキシ］エトキシ｝エトキシ）プロパン酸アリル

１．２５ｍＬのＤＣＭ中のＢｏｃ−１５−アミノ−４，７，１０，１３−テトラオキサペンタデカン酸（５０ｍｇ、１３７μｍｏｌ）の溶液に、ＥＤＣＩ塩酸塩（１６４．２μｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（１３．７μｍｏｌ）およびアリルアルコール（１６４．２μｍｏｌ）を順次添加する。この混合物を室温で１６時間攪拌し、この後、蒸発乾固させる。この粗生成物を、１００／０から９５／５ＤＣＭ／メタノール混合物で溶出させるシリカゲルでのクロマトグラフィーによって精製する。化合物４２を無色の油の形態で得る（３７．５ｍｇ；６７％）。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：１．３７（ｓ，９Ｈ）；２．５７（ｔ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，２Ｈ）；３．０６（ｑ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，２Ｈ）；３．３７（ｔ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，２Ｈ）；３．４４ｔｏ３．５３（ｍ，１２Ｈ）；３．６４（ｔ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，２Ｈ）；４．５５（ｔｄ，Ｊ＝１．６ａｎｄ５．４Ｈｚ，２Ｈ）；５．２０（ｑｄ，Ｊ＝１．６ａｎｄ１０．５Ｈｚ，１Ｈ）；５．３０（ｑｄ，Ｊ＝１．６ａｎｄ１７．３Ｈｚ，１Ｈ）；５．９０（ｔｄｄ，Ｊ＝５．４ａｎｄ１０．５ａｎｄ１７．３Ｈｚ，１Ｈ）；６．７０（ｂｒｏａｄｔ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，１Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ａ２）ＥＳｍ／ｚ＝４０６［Ｍ＋Ｈ］^＋；ｍ／ｚ＝４２８［Ｍ＋Ｎａ］^＋；ｍ／ｚ＝３０６ベースピークｔ_Ｒ＝０．９１分。

化合物４３：３−（２−｛２−［２−（２−アミノエトキシ）エトキシ］エトキシ｝エトキシ）プロパン酸アリル・塩酸塩

２ｍＬのジオキサン中の化合物４２（３７．５ｍｇ、９２．５μｍｏｌ）の溶液に、ジオキサン中の塩化水素の４Ｍ溶液４６０μＬ（１．８５ｍｍｏｌ）を添加する。攪拌を室温で一晩継続し、この後、反応媒体を蒸発乾固させて、化合物４３を無色の油の形態で得る（３１ｍｇ、定量的）。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：２．５８（ｔ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，２Ｈ）；２．９６（ｔ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，２Ｈ）；３．４８ｔｏ３．５３（ｍ，８Ｈ）；３．５５ｔｏ３．５８（ｍ，４Ｈ）；３．６０（ｔ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，２Ｈ）；３．６５（ｔ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，２Ｈ）；４．５６（ｔｄ，Ｊ＝１．６ａｎｄ５．４Ｈｚ，２Ｈ）；５．２１（ｑｄ，Ｊ＝１．６ａｎｄ１０．５Ｈｚ，１Ｈ）；５．３０（ｑｄ，Ｊ＝１．６ａｎｄ１７．３Ｈｚ，１Ｈ）；５．９１（ｔｄｄ，Ｊ＝５．４ａｎｄ１０．５ａｎｄ１７．３Ｈｚ，１Ｈ）；７．９１（ｂｒｏａｄｍ，３Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ａ２）：ＥＳｍ／ｚ＝３０６［Ｍ＋Ｈ］^＋；ｔ_Ｒ＝０．４２分。

化合物４４：（２−｛２−［２−（２−｛４−［（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（Ｓ）−１−｛（Ｅ）−（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ）−１０−［３−クロロ−４−メトキシベンジル］−３−イソブチル−６，６−ジメチル−２，５，９，１２−テトラオキソ−１，４−ジオキサ−８，１１−ジアザシクロヘキサデカ−１３−エン−１６−イル｝エチル）オキシラニル］ベンジルアミノ｝エトキシ）エトキシ］エトキシ｝エトキシ）プロパン酸アリル

１．４８ｍＬの無水アセトニトリル中の化合物２（１２．７ｍｇ、１７．７μｍｏｌ）の、アルゴンでパージした溶液に、２２．２μＬのＴＥＡ（１５９μｍｏｌ）および３０．２ｍｇの化合物４３（８８．４μｍｏｌ）を順次添加する。攪拌を４０℃で２４時間、継続する。一部の出発化合物２が残存する；この混合物に２２．２μＬのＴＥＡ（１５９μｍｏｌ）および３０．２ｍｇの化合物４３（８８．４μｍｏｌ）を添加し、４０℃でさらに４８時間、攪拌を継続する。２ｍＬの水を混合物に添加し、この後、２×２ｍＬのＥｔＯＡｃで抽出する。有機相を併せ、ＮａＨＣＯ_３飽和溶液（２ｍＬ）でおよび塩化ナトリウム飽和溶液（２ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で脱水する。濾過し、減圧下で濃縮した後、この粗反応生成物を、１００／０から９５／５ＤＣＭ／メタノール混合物で溶出させるシリカゲルでのクロマトグラフィーによって精製する。化合物４４を白色固体の形態で得る（４．８ｍｇ；２７％）。^１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：０．７７（ｍ，６Ｈ）；１．００（ｓ，３Ｈ）；１．０５（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，３Ｈ）；１．１２（ｓ，３Ｈ）；１．２９（ｍ，１Ｈ）；１．４９ｔｏ１．６０（ｍ，２Ｈ）；１．８１（ｍ，１Ｈ）；２．２６（ｍ，１Ｈ）；２．５６（ｔ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，２Ｈ）；２．６１ｔｏ２．７３（ｍ，４Ｈ）；２．９３ｔｏ３．０４（ｍ，３Ｈ）；３．２８ｔｏ３．３８（ｐａｒｔｉａｌｌｙｍａｓｋｅｄｍ，１Ｈ）；３．４５ｔｏ３．５３（ｍ，１４Ｈ）；３．６３（ｔ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，２Ｈ）；３．７２（ｓ，２Ｈ）；３．８１（ｓ，３Ｈ）；３．８６（ｂｒｏａｄｓ，１Ｈ）；４．２５（ｄｄｄ，Ｊ＝３．４ａｎｄ８．２ａｎｄ１１．４Ｈｚ，１Ｈ）；４．５５（ｄｍ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，２Ｈ）；４．９０（ｄｄ，Ｊ＝３．９ａｎｄ９．８Ｈｚ，１Ｈ）；５．１１（ｄｄｄ，Ｊ＝１．４ａｎｄ５．４ａｎｄ１１．２Ｈｚ，１Ｈ）；５．１９（ｄｍ，Ｊ＝１０．８Ｈｚ，１Ｈ）；５．２９（ｄｍ，Ｊ＝１７．２Ｈｚ，１Ｈ）；５．７９（ｄｄ，Ｊ＝１．４ａｎｄ１５．２Ｈｚ，１Ｈ）；５．９０（ｍ，１Ｈ）；６．４７（ｄｄｄ，Ｊ＝３．９ａｎｄ１１．２ａｎｄ１５．２Ｈｚ，１Ｈ）；７．０５（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）；７．１７（ｄｄ，Ｊ＝２．０ａｎｄ８．８Ｈｚ，１Ｈ）；７．２１（ｍ，１Ｈ）；７．２４（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ）；７．２８（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ）；７．３３（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ）；８．３５（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ａ２）：ＥＳｍ／ｚ＝９８６［Ｍ＋Ｈ］^＋；ｍ／ｚ＝４９３．５［Ｍ＋２Ｈ］^２＋ベースピーク；ｍ／ｚ＝９８４［Ｍ−Ｈ］⁻；ｍ／ｚ＝１０３０［Ｍ−Ｈ＋ＨＣＯ_２Ｈ］⁻ベースピーク；ｔ_Ｒ＝０．９５分。

実施例１４：２−｛２−［２−（２−｛４−［（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（Ｓ）−１−｛（Ｅ）−（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ）−１０−［３−クロロ−４−メトキシベンジル］−３−イソブチル−６，６−ジメチル−２，５，９，１２−テトラオキソ−１，４−ジオキサ−８，１１−ジアザシクロヘキサデカ−１３−エン−１６−イル｝エチル）オキシラニル］ベンジルアミノ｝エトキシ）エトキシ］エトキシ｝エトキシ）プロパン酸２，５−ジオキソピロリジン−１−イル

実施例１４は、化合物４１について説明した方法に従って化合物４４を脱保護することによりおよび実施例１８について説明した方法に従って得た酸を活性化することにより得ることができる。

（２−｛２−［２−（２−｛４−［（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（Ｓ）−１−｛（Ｅ）−（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ）−１０−［３−クロロ−４−メトキシベンジル］−３−イソブチル−６，６−ジメチル−２，５，９，１２−テトラオキソ−１，４−ジオキサ−８，１１−ジアザシクロヘキサデカ−１３−エン−１６−イル｝エチル）オキシラニル］ベンジルメチルアミノ｝エトキシ）エトキシ］エトキシ｝エトキシ）プロパン酸２，５−ジオキソピロリジン−１−イル

化合物４５：３−［２−（２−｛２−［２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルメチルアミノ）エトキシ］エトキシ｝エトキシ）エトキシ］プロパン酸

５２０ｍｇ（１．４２３ｍｍｏｌ）のＢｏｃ−１５−アミノ−４，７，１０，１３−テトラオキサペンタデカン酸を１４ｍＬの無水ＴＨＦに溶解し、この後、この混合物を０℃に冷却し、この後、８５．４ｍｇ（２．１３５ｍｍｏｌ）の水素化ナトリウムをスパチュラにより添加する。攪拌を１０分間、０℃で継続し、この後、１５０．６μＬ（２．４１９ｍｍｏｌ）のヨウ化メチルを０℃で添加する。放置して温度を室温に戻し、攪拌を２時間、継続する。８ｍＬの水を混合物に添加し、酢酸の添加によりこの混合物のｐＨを酸性化してｐＨ≒４を得る。混合物を３×１０ｍＬのＥｔＯＡｃで抽出する。有機相を併せ、１０ｍＬのＮａＣｌ飽和溶液で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で脱水する。濾過し、減圧下で濃縮乾固させた後、化合物４５を無色の油の形態で得る（４１４ｍｇ、７７％）。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：１．３８（ｓ，９Ｈ）；２．４３（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，２Ｈ）；２．８０（ｂｒｏａｄｓ，３Ｈ）；３．２９（ｔ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，２Ｈ）；３．４５ｔｏ３．５２（ｍ，１４Ｈ）；３．６０（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，２Ｈ）；１２．０１（ｂｒｏａｄｍ，１Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ａ２）：ＥＳｍ／ｚ＝４０２［Ｍ＋Ｎａ］^＋；ｍ／ｚ＝３７８［Ｍ−Ｈ］⁻；ｍ／ｚ＝２８０ベースピーク；ｔ_Ｒ＝０．９５分。

化合物４６：３−［２−（２−｛２−［２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルメチルアミノ）エトキシ］エトキシ｝エトキシ）エトキシ］プロパン酸アリル

１５ｍＬの無水ＤＣＭ中の５４０ｍｇ（１．４２３ｍｍｏｌ）の化合物４５の溶液に、３２７ｍｇ（１．７１ｍｍｏｌ）のＥＤＣＩ、１７．４ｍｇ（１４２μｍｏｌ）のＤＭＡＰおよび１１６μＬ（１．７１ｍｍｏｌ）のアリルアルコールを順次添加する。攪拌を１５時間、室温で継続し、この後、混合物を濃縮乾固させる。得られた粗生成物を、１００／０から９０／１０ＤＣＭ／メタノール混合物で溶出させるシリカゲルでのクロマトグラフィーによって精製する。化合物４６を無色の油の形態で得る（３３７ｍｇ；５６％）。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：１．３８（ｓ，９Ｈ）；２．５７（ｔ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，２Ｈ）；２．８０（ｂｒｏａｄｓ，３Ｈ）；３．２２ｔｏ３．３３（ｐａｒｔｉａｌｌｙｍａｓｋｅｄｍ，２Ｈ）；３．４４ｔｏ３．５４（ｍ，１４Ｈ）；３．６４（ｔ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，２Ｈ）；４．５５（ｂｒｏａｄｄ，Ｊ＝４．９Ｈｚ，２Ｈ）；５．２０（ｂｒｏａｄｄ，Ｊ＝１０．３Ｈｚ，１Ｈ）；５．３０（ｂｒｏａｄｄ，Ｊ＝１７．１Ｈｚ，１Ｈ）；５．９０（ｍ，１Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ａ２）：ＥＳｍ／ｚ＝４４２［Ｍ＋Ｎａ］^＋；ｍ／ｚ＝３２０ベースピーク；ｔ_Ｒ＝０．９８分。

化合物４７：３−（２−｛２−［２−（２−メチルアミノエトキシ）エトキシ］エトキシ｝エトキシ）プロパン酸アリル

２０ｍＬのＤＣＭ中の３３７ｍｇ（０．８０２ｍｍｏｌ）の化合物４６の溶液に、１．１９ｍＬ（１６．０４ｍｍｏｌ）のＴＦＡを添加する。攪拌を３時間室温で継続し、この後、減圧下でこの混合物を濃縮乾固させる。コンディショニングし、メタノールで洗浄し、この後、メタノール中のアンモニア水の０．５Ｎ溶液で溶出させるＳＣＸカートリッジ（Ｖａｒｉａｎ）でのＳＰＥ濾過によって、この粗生成物を精製する。化合物４７を無色の油の形態で得る（２０８ｍｇ、８１％）。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：２．２７（ｓ，３Ｈ）；２．５４ｔｏ２，６１（ｍ，４Ｈ）；３．４４（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，２Ｈ）；３．４７ｔｏ３．５２（ｍ，１２Ｈ）；３．６５（ｔ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，２Ｈ）；４．５６（ｂｒｏａｄｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，２Ｈ）；５．２０（ｂｒｏａｄｄ，Ｊ＝１０．５Ｈｚ，１Ｈ）；５．３０（ｂｒｏａｄｄ，Ｊ＝１７．２Ｈｚ，１Ｈ）；５．９０（ｍ，１Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ａ２）：ＥＳｍ／ｚ＝３２０［Ｍ＋Ｈ］^＋；ｔ_Ｒ＝０．４２分。

化合物４８：（２−｛２−［２−（２−｛４−［（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（Ｓ）−１−｛（Ｅ）−（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ）−１０−［３−クロロ−４−メトキシベンジル］−３−イソブチル−６，６−ジメチル−２，５，９，１２−テトラオキソ−１，４−ジオキサ−８，１１−ジアザシクロヘキサデカ−１３−エン−１６−イル｝エチル）オキシラニル］ベンジルアミノ｝エトキシ）エトキシ］エトキシ｝エトキシ）プロパン酸アリル

５ｍＬの無水アセトニトリル中の化合物２（４０ｍｇ、５５．７μｍｏｌ）の、アルゴンでパージした溶液に、４８．５μＬのＤＩＰＥＡ（２７９μｍｏｌ）および５３ｍｇの化合物４７（１６７μｍｏｌ）を順次添加する。攪拌を４０℃で１５時間継続する；５ｍＬの水をこの混合物に添加し、この後、４×５ｍＬのＥｔＯＡｃで抽出する。有機相を併せ、ＮａＨＣＯ_３飽和溶液（５ｍＬ）でおよびＮａＣｌ飽和溶液（５ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で脱水する。濾過し、減圧下で濃縮した後、この粗反応生成物を、１００／０から９０／１０ＤＣＭ／メタノール混合物で溶出させるシリカゲルでのクロマトグラフィーによって精製する。化合物４８を無色の固体の形態で得る（４５．３ｍｇ；８０％）。^１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：０．７６（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，３Ｈ）；０．７８（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，３Ｈ）；１．００（ｓ，３Ｈ）；１．０４（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ）；１．１２（ｓ，３Ｈ）；１．２９（ｍ，１Ｈ）；１．５０ｔｏ１．６１（ｍ，２Ｈ）；１．８０（ｍ，１Ｈ）；２．１５（ｓ，３Ｈ）；２．２８（ｍ，１Ｈ）；２．５２（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，２Ｈ）；２．５６（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，２Ｈ）；２．６３ｔｏ２．７３（ｍ，２Ｈ）；２．９４ｔｏ３．０６（ｍ，３Ｈ）；３．２５ｔｏ３．３５（ｐａｒｔｉａｌｌｙｍａｓｋｅｄｍ，１Ｈ）；３．４８（ｓ，２Ｈ）；３．４９ｔｏ３．５１（ｍ，１２Ｈ）；３．５２（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，２Ｈ）；３．６３（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，２Ｈ）；３．８１（ｓ，３Ｈ）；３．８７（ｄ，Ｊ＝１．５Ｈｚ，１Ｈ）；４．２５（ｄｄｄ，Ｊ＝３．４ａｎｄ８．３ａｎｄ１１．５Ｈｚ，１Ｈ）；４．５５（ｂｒｏａｄｄ，Ｊ＝５．０Ｈｚ，２Ｈ）；４．９１（ｄｄ，Ｊ＝３．７ａｎｄ９．５Ｈｚ，１Ｈ）；５．１１（ｄｄｄ，Ｊ＝１．５ａｎｄ５．７ａｎｄ１１．５Ｈｚ，１Ｈ）；５．１９（ｄｍ，Ｊ＝１０．３Ｈｚ，１Ｈ）；５．２９（ｄｍ，Ｊ＝１７．６Ｈｚ，１Ｈ）；５．８０（ｄｄ，Ｊ＝１．５ａｎｄ１５．２Ｈｚ，１Ｈ）；５．９０（ｍ，１Ｈ）；６．４７（ｄｄｄ，Ｊ＝３．７ａｎｄ１１．５ａｎｄ１５．２Ｈｚ，１Ｈ）；７．０５（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．１７（ｄｄ，Ｊ＝２．０ａｎｄ８．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．２２（ｄｄ，Ｊ＝２．９ａｎｄ９．８Ｈｚ，１Ｈ）；７．２５（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ）；７．２８（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ）；７．３０（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ）；８．３５（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ａ２）：ＥＳｍ／ｚ＝１０００［Ｍ＋Ｈ］^＋；ｍ／ｚ＝５００．５［Ｍ＋２Ｈ］^２＋；ｍ／ｚ＝１０４４［Ｍ−Ｈ＋ＨＣＯ_２Ｈ］⁻；ｔ_Ｒ＝１．０１分。

化合物４９：（２−｛２−［２−（２−｛４−［（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（Ｓ）−１−｛（Ｅ）−（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ）−１０−［３−クロロ−４−メトキシベンジル］−３−イソブチル−６，６−ジメチル−２，５，９，１２−テトラオキソ−１，４−ジオキサ−８，１１−ジアザシクロヘキサデカ−１３−エン−１６−イル｝エチル）オキシラニル］ベンジルアミノ｝エトキシ）エトキシ］エトキシ｝エトキシ）プロパン酸

１９ｍｇ（１８．９μｍｏｌ）の化合物４８を３．８ｍＬの無水ＴＨＦに溶解し、アルゴンでパージする。６μＬ（１８．９μｍｏｌ）のジエチルアミンを混合物に添加し、この混合物を１５分間室温で攪拌し、この後、４．４５ｍｇ（１９．８μｍｏｌ）の酢酸パラジウム（ＩＩ）および１８．８９ｍｇの固定型トリフェニルホスフィンを添加する。攪拌を６日間、室温で継続する：一部の出発原料が残存するが、反応はもはや進行しない。この混合物を濾過し、濃縮乾固させ、２ｍＬの無水ＴＨＦに溶かし、１０μＬ（３１．５μｍｏｌ）のジエチルアミンおよび１０ｍｇのテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウムで１時間、処理する。混合物を２ｍＬの２Ｍ硫酸水素ナトリウム水溶液で加水分解し、３×２ｍＬのＤＣＭで抽出する。有機相を併せ、ＮａＣｌ飽和溶液（２ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で脱水する。濾過し、減圧下で濃縮した後、この粗生成物を、９８／２から９０／１０ＤＣＭ／メタノール混合物で溶出させるジオールグラフト型シリカゲルでのクロマトグラフィーによって精製する。化合物４９を無色の固体の形態で得る（５．４ｍｇ；３０％）。^１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：０．７６（ｔ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，３Ｈ）；０．７８（ｔ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，３Ｈ）；１．００（ｓ，３Ｈ）；１．０４（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ）；１．１２（ｓ，３Ｈ）；１．３１（ｍ，１Ｈ）；１．５１ｔｏ１．６２（ｍ，２Ｈ）；１．８０（ｍ，１Ｈ）；２．１５（ｓ，３Ｈ）；２．２８（ｍ，１Ｈ）；２．４２（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，２Ｈ）；２．５２（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，２Ｈ）；２．６４ｔｏ２．７３（ｍ，２Ｈ）；２．９４ｔｏ３．０４（ｍ，３Ｈ）；３．２５ｔｏ３．４４（ｐａｒｔｉａｌｌｙｍａｓｋｅｄｍ，３Ｈ）；３．４５ｔｏ３．５１（ｍ，１２Ｈ）；３．５３（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，２Ｈ）；３．５９（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，２Ｈ）；３．８１（ｓ，３Ｈ）；３．８７（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ）；４．２５（ｄｄｄ，Ｊ＝４．２ａｎｄ７．８ａｎｄ１１．５Ｈｚ，１Ｈ）；４．９１（ｄｄ，Ｊ＝３．４ａｎｄ９．８Ｈｚ，１Ｈ）；５．１１（ｄｄ，Ｊ＝５．４ａｎｄ１１．２Ｈｚ，１Ｈ）；５．８０（ｄ，Ｊ＝１５．２Ｈｚ，１Ｈ）；６．４７（ｄｄｄ，Ｊ＝３．７ａｎｄ１１．２ａｎｄ１５．２Ｈｚ，１Ｈ）；７．０５（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ）；７．１７（ｄｄ，Ｊ＝２．０ａｎｄ８．３Ｈｚ，１Ｈ）；７．２１ｔｏ７．２７（ｍ，３Ｈ）；７．２８ｔｏ７．３２（ｍ，３Ｈ）；８．３８（ｂｒｏａｄｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ）；１１．２２（ｖｅｒｙｂｒｏａｄｍ，１Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ａ２）：ＥＳｍ／ｚ＝９６０［Ｍ＋Ｈ］^＋；ｍ／ｚ＝４８０．５［Ｍ＋２Ｈ］^２＋ベースピーク；ｍ／ｚ＝９５８［Ｍ−Ｈ］⁻；ｔ_Ｒ＝０．９０分。

実施例１５：（２−｛２−［２−（２−｛４−［（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（Ｓ）−１−｛（E）−（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ）−１０−［３−クロロ−４−メトキシベンジル］−３−イソブチル−６，６−ジメチル−２，５，９，１２−テトラオキソ−１，４−ジオキサ−８，１１−ジアザシクロヘキサデカ−１３−エン−１６−イル｝エチル）オキシラニル］ベンジルメチルアミノ｝エトキシ）エトキシ］エトキシ｝エトキシ）プロパン酸２，５−ジオキソピロリジン−１−イル

実施例１５は、実施例１８について説明した方法に従って酸４９を活性化することによって調製することができる。

（２−｛２−［２−（４−｛（２Ｒ，３Ｒ）−３−［（Ｓ）−１−（（Ｅ）−（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ）−１０−｛３−クロロ−４−メトキシベンジル｝−３−イソブチル−６，６−ジメチル−２，５，９，１２−テトラオキソ−１，４−ジオキサ−８，１１−ジアザシクロヘキサデカ−１３−エン−１６−イル）エチル］オキシラニル｝ベンジルピペラジン−１−イル）エトキシ］エトキシ｝エトキシ）プロパン酸２，５−ジオキソピロリジン−１−イル

化合物５０：３−｛２−［２−（２−ヒドロキシエトキシ）エトキシ］エトキシ｝プロパン酸

６ｍＬのＤＣＭ中の３００ｍｇ（１．０８ｍｍｏｌ）の１２−ヒドロキシ−４，７，１０−トリオキサドデカン酸ｔｅｒｔ−ブチルの溶液に１．６ｍＬ（２１．５６ｍｍｏｌ）のＴＦＡを添加する。攪拌を室温で３時間、継続する。この混合物を濃縮乾固させ、最少量のＤＣＭに溶かし、トルエンを数回混入し、化合物５０を淡黄色油の形態で得る（２４０ｍｇ、定量的）。

化合物５１：３−｛２−［２−（２−ヒドロキシエトキシ）エトキシ］エトキシ｝プロパン酸アリル

３ｍＬのＤＣＭ中の２４０ｍｇ（１．０８ｍｍｏｌ）の化合物５０の溶液に、２４８ｍｇ（１．２９ｍｍｏｌ）のＥＤＣＩ、１３．２ｍｇ（１．２９ｍｍｏｌ）のＤＭＡＰおよび８８μＬ（１．２９ｍｍｏｌ）のアリルアルコールを順次添加する。攪拌を室温で１５時間継続し、この後、この混合物を減圧下で濃縮乾固させ、９８／２から９０／１０ＤＭＣ／メタノール混合物を溶離剤として使用してシリカゲルでのクロマトグラフィーによってこの粗生成物を精製する。化合物５１を無色の油の形態で得る（１４４ｍｇ、５１％）。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：２．５７（ｔ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，２Ｈ）；３．４１（ｍ，２Ｈ）；３．４６ｔｏ３．５２（ｍ，１０Ｈ）；３，６５（ｔ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，２Ｈ）；４．５２（ｔ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，１Ｈ）；４．５６（ｍ，２Ｈ）；５．２０（ｄｍ，Ｊ＝１０．５Ｈｚ，１Ｈ）；５，５０（ｄｍ，Ｊ＝１７．４Ｈｚ，１Ｈ）；５．９０（ｍ，１Ｈ）。

化合物５２：４−（２−｛２−［２−（２−アリルオキシカルボニルエトキシ）エトキシ］エトキシ｝エチル）ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル

３．７ｍＬのＤＣＭ中の９４ｍｇ（３５７μｍｏｌ）の化合物５１の、０℃に冷却した溶液に、１２５μＬ（８９３μｍｏｌ）のＴＥＡおよび３０．４μＬ（３９３μｍｏｌ）の塩化メシルを順次添加し、攪拌を室温で１時間継続する。この混合物を減圧下で濃縮乾固させ、この後、５ｍＬのアセトニトリルに溶かす。２４９μＬ（１．７８５ｍｍｏｌ）のＴＥＡおよび２００ｍｇ（１．０７１ｍｍｏｌ）のＢｏｃ−ピペラジンを溶液に添加し、この混合物を１５時間、４０℃で攪拌および加熱する。室温に冷却した後、混合物を濃縮乾固させ、９８／２から９０／１０ＤＣＭ／メタノール混合物を溶離剤として使用して、シリカゲルでのクロマトグラフィーにより精製する。化合物５２を無色の油の形態で得る（６９ｍｇ、４５％）。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：１．３９（ｓ，９Ｈ）；２．３３（ｍ，４Ｈ）；２．４６（ｔ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，２Ｈ）；２．５７（ｔ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，２Ｈ）；３．２８（ｐａｒｔｉａｌｌｙｍａｓｋｅｄｍ，４Ｈ）；３．４５ｔｏ３．５３（ｍ，１０Ｈ）；３．６４（ｔ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，２Ｈ）；４．５５（ｍ，２Ｈ）；５．２０（ｄｍ，Ｊ＝１０．５Ｈｚ，１Ｈ）；５．３０（ｄｍ，Ｊ＝１７．２Ｈｚ，１Ｈ）；５．９０（ｍ，１Ｈ）。

化合物５３：３−｛２−［２−（２−ピペラジン−１−イルエトキシ）エトキシ］エトキシ｝プロパン酸アリル

１０ｍＬのＤＣＭ中の１１０ｍｇ（２５６μｍｏｌ）の化合物５２の溶液に、３８０μＬ（５．１１ｍｍｏｌ）のＴＦＡを添加する。攪拌を２４時間、室温で継続する。この混合物を濃縮乾固させ、最少量のＤＣＭに溶かし、トルエンを数回混入する。コンディショニングし、メタノールで洗浄し、この後、メタノール中のアンモニア水の０．５Ｎ溶液で溶出させるＳＣＸカートリッジ（Ｖａｒｉａｎ）でのＳＰＥ濾過によって、この粗生成物を精製する。化合物５３を無色の油の形態で得る（４７ｍｇ、５５％）。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：２．５８（ｔ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，２Ｈ）；３．１０ｔｏ３．３６（ｂｒｏａｄｍ，６Ｈ）；３．４５ｔｏ３．７８（ｐａｒｔｉａｌｌｙｍａｓｋｅｄｍ，１６Ｈ）；４．５６（ｍ，２Ｈ）；５．２０（ｄｍ，Ｊ＝１０．５Ｈｚ，１Ｈ）；５．３０（ｄｍ，Ｊ＝１７．２Ｈｚ，１Ｈ）；５．９０（ｍ，１Ｈ）；９．００（ｂｒｏａｄｍ，１Ｈ）。

化合物５４：（２−｛２−［２−（４−｛（２Ｒ，３Ｒ）−３−［（Ｓ）−１−（（Ｅ）−（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ）−１０−｛３−クロロ−４−メトキシベンジル｝−３−イソブチル−６，６−ジメチル−２，５，９，１２−テトラオキソ−１，４−ジオキサ−８，１１−ジアザシクロヘキサデカ−１３−エン−１６−イル）エチル］オキシラニル｝ベンジルピペラジン−１−イル）エトキシ］エトキシ｝エトキシ）プロパン酸アリル

化合物５４は、化合物３０の調製について説明した方法を適用することによるアミン５３での誘導体２のクロロ基の求核置換によって得ることができる。

化合物５５：（２−｛２−［２−（４−｛（２Ｒ，３Ｒ）−３−［（Ｓ）−１−（（Ｅ）−（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ）−１０−｛３−クロロ−４−メトキシベンジル｝−３−イソブチル−６，６−ジメチル−２，５，９，１２−テトラオキソ−１，４−ジオキサ−８，１１−ジアザシクロヘキサデカ−１３−エン−１６−イル）エチル］オキシラニル｝ベンジルピペラジン−１−イル）エトキシ］エトキシ｝エトキシ）プロパン酸

化合物５５は、化合物４１について説明した方法に従って得ることができる。

実施例１６：（２−｛２−［２−（４−｛（２Ｒ，３Ｒ）−３−［（Ｓ）−１−（（Ｅ）−（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ）−１０−｛３−クロロ−４−メトキシベンジル｝−３−イソブチル−６，６−ジメチル−２，５，９，１２−テトラオキソ−１，４−ジオキサ−８，１１−ジアザシクロヘキサデカ−１３−エン−１６−イル）エチル］オキシラニル｝ベンジルピペラジン−１−イル）エトキシ］エトキシ｝エトキシ）プロパン酸２，５−ジオキソピロリジン−１−イル

実施例１６は、実施例１８について説明した方法に従って得ることができる。

３−（２−｛２−［２−（２−｛２−［４−（４−｛４−［（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（Ｓ）−１−｛（Ｅ）−（１０Ｒ，１６Ｓ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−３−イソブチル−６，６−ジメチル−２，５，９，１２−テトラオキソ−１，４−ジオキサ−８，１１−ジアザシクロヘキサデカ−１３−エン−１６−イル｝エチル）オキシラニル］ベンジル｝ピペラジン−１−イル）−１，１−ジメチル−４−オキソブチルスルファニル］アセチルアミノ｝エトキシ）エトキシ］エトキシ｝エトキシ）プロパン酸２，５−ジオキソピロリジン−１−イル

化合物５６：３−（２−｛２−［２−（２−｛２−ブロモアセチルアミノ｝エトキシ）エトキシ］エトキシ｝エトキシ）プロパン酸２，５−ジオキソピロリジン−１−イル

ＤＣＭ（１０ｍＬ）中の３−（２−｛２−［２−（２−アミノエトキシ）エトキシ］エトキシ｝エトキシ）プロピオン酸（６７１ｍｇ、２．５３ｍｍｏｌ）の溶液に、４．７ｍＬのＤＣＭ中のブロモ酢酸２，５−ジオキソピロリジン−１−イル（２．５３ｍｍｏｌ）の溶液を添加する。攪拌を１５分間、室温で継続し、この後、ＤＣＣをこの混合物に添加する。４時間、反応させた後、混合物を焼結漏斗によって濾過し、この後、濾液を蒸発させ、９９／１から９４／６ＤＣＭ／メタノール混合物で溶出させるシリカゲルでのクロマトグラフィーによって精製する。得られた油（８００ｍｇ）を、９９／１ＤＣＭ／メタノール混合物で溶出させるシアノグラフト型シリカゲルでのクロマトグラフィーによって再び精製する。化合物５６を無色の油の形態で得る（６１１ｍｇ；５０％）。^１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：２．８１（ｓ，４Ｈ）；２．９２（ｔ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，２Ｈ）；３．２３（ｑ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，２Ｈ）；３．４３（ｔ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，２Ｈ）；３．４８ｔｏ３．５５（ｍ，１２Ｈ）；３．７２（ｔ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，２Ｈ）；３．８５（ｓ，２Ｈ）；８．３０（ｂｒｏａｄｔ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ａ２）：ＥＳｍ／ｚ＝４８３［Ｍ＋Ｈ］^＋；ｍ／ｚ＝４８１［Ｍ−Ｈ］⁻；ｔ_Ｒ＝０．５１分。

無水アセトニトリル（２．５ｍＬ）中の化合物２（１９．８ｍｇ、２７．６μｍｏｌ）の、アルゴンでパージした溶液に、ＴＥＡ（１３８μｍｏｌ）および４−メチル−４−メチルジスルファニル−１−ピペラジン−１−イルペンタン−１−オン・塩酸塩６（８３μｍｏｌ）を順次添加する。攪拌を４０℃で２４時間継続し、この後、混合物をＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）で希釈する。有機相を水（２×１０ｍＬ）で、ＮａＨＣＯ_３飽和水溶液（１０ｍＬ）でおよびＮａＣｌ飽和水溶液（１０ｍＬ）で洗浄する。ＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過した後、溶媒を減圧下で蒸発させる。この粗反応生成物を、９９／１から９０／１０ＤＣＭ／メタノール混合物で溶出させるシリカゲルでのクロマトグラフィーによって精製する。白色粉末、７を得る（１９．４ｍｇ；７５％）。ＴＬＣ（ＤＣＭ９０／ＭｅＯＨ１０）：Ｒｆ＝０．６；^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：０．７５−０．８１（ｍ，６Ｈ）；１．０１（ｓ，３Ｈ）；１．０５（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ）；１．１２（ｓ，３Ｈ）；１．２６（ｓ，６Ｈ）；１．２８−１．３３（ｍ，１Ｈ）；１．５２−１．６１（ｍ，２Ｈ）；１．７６−１．８３（ｍ，２Ｈ）；２．２７−２．３８（ｍ，４Ｈ）；２．３９（ｓ，３Ｈ）；２．６４−２．７４（ｍ，２Ｈ）；２．９５−３．０５（ｍ，２Ｈ）；３．２４−３．３４（ｍ，６Ｈ）；３．４４（ｂｒ．ｓ．，４Ｈ）；３．４９（ｓ，２Ｈ）；３．８１（ｓ，３Ｈ）；３．８８（ｄ，Ｊ＝１．７Ｈｚ，１Ｈ）；４．２２−４．２９（ｍ，１Ｈ）；４．９２（ｄｄ，Ｊ＝９．９，３．５Ｈｚ，１Ｈ）；５．０８−５．１５（ｍ，１Ｈ）；５．８１（ｄ，Ｊ＝１４．２Ｈｚ，１Ｈ）；６．４８（ｄｄｄ，Ｊ＝１５．２，１１．３，３．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．０５（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，１Ｈ）；７．１７（ｄｄ，Ｊ＝８．４，２．３Ｈｚ，１Ｈ）；７．２２（ｄ，Ｊ＝９．３Ｈｚ，１Ｈ）；７．２５−７．３４（ｍ，５Ｈ）；８．３４（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ａ１）：ＥＳｍ／ｚ＝９４３［Ｍ＋Ｈ］^＋；ｍ／ｚ＝９４１［Ｍ−Ｈ］⁻；ｔ_Ｒ＝４．０３分。

注記：化合物７は、Ｇ＝ＯＭｓから調製することもできる（実施例１参照）。
化合物Ｅｘ．１：（Ｅ）−（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−３−イソブチル−６，６−ジメチル−１６−［（Ｓ）−１−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−｛４−［４−（４−メルカプト−４−メチルペンタノイル）ピペラジン−１−イルメチル］フェニル｝オキシラニル）エチル］−１，４−ジオキサ−８，１１−ジアザシクロヘキサデカ−１３−エン−２，５，９，１２−テトラオン

化合物７（１７．９ｍｇ；１８．９７μｍｏｌ）をエタノール（２．２ｍＬ）／水（１．８ｍＬ）の混合物に溶解する。混合物が濁る。この後、ＴＣＥＰ（４７．４μｍｏｌ）を添加し、この混合物を３時間、室温で攪拌し、この後、ＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）を添加することにより希釈し、有機相を、水とＮＨ_４Ｃｌ飽和水溶液の１／１混合物（２０ｍＬ）でおよび次いで２０ｍＬのＮａＣｌ飽和溶液で洗浄する。有機相をＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過し、減圧下で溶媒を蒸発させた後、生成物Ｅｘ．１を白色固体の形態で得る（１５．６ｍｇ；９２％）。ＴＬＣ（ＤＣＭ９０／ＭｅＯＨ１０）：Ｒｆ＝０．５６；^１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：０．７６−０．８１（ｍ，６Ｈ）；１．０１（ｓ，３Ｈ）；１．０６（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ）；１．１３（ｓ，３Ｈ）；１．２４（ｓ，６Ｈ）；１．２７−１．３１（ｍ，１Ｈ）；１．５６−１．６４（ｍ，２Ｈ）；１．７３−１．８５（ｍ，３Ｈ）；２．２６−２．３３（ｍ，３Ｈ）；２．３６−２．４５（ｍ，４Ｈ）；２．６３−２．７５（ｍ，２Ｈ）；２．９５−３．０６（ｍ，３Ｈ）；３．３４−３．３６（ｍ，１Ｈ）；３．４２−３．５１（ｍ，６Ｈ）；３．８２（ｓ，３Ｈ）；３．８９（ｓ，１Ｈ）；４．２２−４．２９（ｍ，１Ｈ）；４．９２（ｄｄ，Ｊ＝９．８，３．４Ｈｚ，１Ｈ）；５．１２（ｄｄ，Ｊ＝１０．８，４．９Ｈｚ，１Ｈ）；５．８１（ｄ，Ｊ＝１５．２Ｈｚ，１Ｈ）；６．４８（ｄｄｄ，Ｊ＝１５．０，１１．４，３．４Ｈｚ，１Ｈ）；７．０６（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ）；７．１８（ｄｄ，Ｊ＝８．３，１．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．２４（ｄ，Ｊ＝９．８Ｈｚ，１Ｈ）；７．２６−７．３６（ｍ，５Ｈ）；８．３７（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ａ２）：ＥＳｍ／ｚ＝８９７［Ｍ＋Ｈ］^＋；ｍ／ｚ＝８９５［Ｍ−Ｈ］⁻；ｔ_Ｒ＝０．９７分。

実施例１７：３−（２−｛２−［２−（２−｛２−［４−（４−｛４−［（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（Ｓ）−１−｛（Ｅ）−（１０Ｒ，１６Ｓ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−３−イソブチル−６，６−ジメチル−２，５，９，１２−テトラオキソ−１，４−ジオキサ−８，１１−ジアザシクロヘキサデカ−１３−エン−１６−イル｝エチル）オキシラニル］ベンジル｝ピペラジン−１−イル）−１，１−ジメチル−４−オキソ−ブチルスルファニル］アセチルアミノ｝エトキシ）エトキシ］エトキシ｝エトキシ）プロパン酸２，５−ジオキソピロリジン−１−イル

無水アセトニトリル（１．０ｍＬ）中の化合物Ｅｘ．１（１５．６ｍｇ、１７．８μｍｏｌ）の、アルゴンでパージした溶液に、ＤＩＰＥＡ（１９．１２μｍｏｌ）および化合物５６（１９．１２μｍｏｌ）を順次添加する。攪拌を室温で４時間継続し、この後、さらなる２９．５μｍｏｌのＤＩＰＥＡを添加し、攪拌を１６時間継続する。翌日、さらなる２９．５μｍｏｌの化合物５６およびさらなる２９．５μｍｏｌのＤＩＰＥＡを添加し、この混合物を５０℃に加熱する。さらに２４時間反応させた後、２２．６μｍｏｌの化合物５６および２９．５μｍｏｌのＤＩＰＥＡを添加し、この混合物を６０℃でさらに２４時間加熱する。この後、加熱を停止し、室温で６４時間、攪拌を継続する。混合物を１０ｍＬのＥｔＯＡｃで希釈し、有機相を２×１０ｍＬの水および次いで１０ｍＬのＮａＣｌ飽和溶液で洗浄する。有機相をＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過し、減圧下で溶媒を蒸発させた後、この粗生成物を、９９／１から９０／１０ＤＣＭ／メタノール混合物で溶出させるシリカゲルでのクロマトグラフィーによって精製する。生成物Ｅｘ．１７を無色の固体の形態で得る（９．２ｍｇ；４１％）。^１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：０．７７ｔｏ０．８２（ｍ，６Ｈ）：１．０２（ｓ，３Ｈ）：１．０６（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，３Ｈ）：１．１３（ｓ，３Ｈ）：１．２３（ｓ，６Ｈ）：１．２６ｔｏ１．３５（ｍ，１Ｈ）：１．５２ｔｏ１．６４（ｍ，２Ｈ）：１．６８ｔｏ１．７７（ｍ，２Ｈ）：１．７８ｔｏ１．８６（ｍ，１Ｈ）：２．２６ｔｏ２．３３（ｍ，３Ｈ）：２．３５ｔｏ２．４１（ｍ，４Ｈ）：２．６８ｔｏ２．７６（ｍ，２Ｈ）：２．８２（ｓ，４Ｈ）：２．９３（ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，２）：２．９６ｔｏ３．０７（ｍ，４Ｈ）：３．１３（ｓ，２Ｈ）：３．２０（ｑ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，２Ｈ）：３．３３（ｍ，１Ｈ）：３．３８ｔｏ３．５７（ｍ，１８Ｈ）：３．７３（ｔ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，２Ｈ）：３．８３（ｓ，３Ｈ）：３．８９（ｓ，２Ｈ）：４．２７（ｍ，１Ｈ）：４．９３（ｄｄ，Ｊ＝３．８ａｎｄ１０．０Ｈｚ，１Ｈ）：５．１３（ｍ，１Ｈ）：５．８２（ｄ，Ｊ＝１５．４Ｈｚ，１Ｈ）：６．４９（ｄｄｄ，Ｊ＝３．８ａｎｄ１１．１ａｎｄ１５．４Ｈｚ，１Ｈ）：７．０７（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）：７．１５ｔｏ７．３７（ｍ，７Ｈ）：８．０１（ｔ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，１Ｈ）：８．３５（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ａ２）：ＥＳｍ／ｚ＝１２９９［Ｍ＋Ｈ］^＋：ｍ／ｚ＝６５０［Ｍ＋２Ｈ］^２＋：ｍ／ｚ＝１２９７［Ｍ−Ｈ］⁻：ｔ_Ｒ＝０．９２分。

３−（２−｛２−［２−（２−｛４−［（２Ｓ，３Ｓ）−３−（（Ｓ）−１−｛（Ｅ）−（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ）−１０−［３−クロロ−４−メトキシベンジル］−３−イソブチル−６，６−ジメチル−２，５，９，１２−テトラオキソ−１，４−ジオキサ−８，１１−ジアザシクロヘキサデカ−１３−エン−１６−イル｝エチル）オキシラニル］ベンジルオキシカルボニルアミノ｝エトキシ）エトキシ］エトキシ｝エトキシ）プロパン酸２，５−ジオキソピロリジン−１−イル

実施例５８：４−（（２Ｓ，３Ｓ）−３−｛（Ｓ）−１−［（Ｅ）−（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−３−イソブチル−６，６−ジメチル−２，５，９，１２−テトラオキソ−１，４−ジオキサ−８，１１−ジアザシクロヘキサデカ−１３−エン−１６−イル］エチル｝オキシラニル）ベンジルカルバミン酸４−ニトロフェニル

化合物５７（２０ｍｇ；２８．６μｍｏｌ、Ａｌ−ａｗａｒＲ．Ｓ．ら、「Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．」２００３、４６、２９８５−３００７に従って調製したもの）を無水ＤＣＭ（０．３ｍＬ）に溶解し、この溶液をアルゴンでパージし、この後、ＴＥＡ（４０μｍｏｌ）および次いでクロロギ酸４−ニトロフェニル（３２．３２μｍｏｌ）を添加する。３時間３０分、室温で攪拌した後、混合物を加水分解し、７ｍＬのＥｔＯＡｃで希釈する。有機相を水でおよび次いでＮａＣｌ飽和溶液で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過し、蒸発乾固させて、化合物５８を白色固体の形態で得る（２３ｍｇ、９３％）。ＬＣＭＳ（Ａ３）：ＥＳｍ／ｚ＝８６４［Ｍ＋Ｈ］^＋；ｍ／ｚ＝９０８［Ｍ＋ＨＣＯ_２Ｈ−Ｈ］⁻；ｔ_Ｒ＝１．４３分。

化合物５９：３−（２−｛２−［２−（２−｛４−［（２Ｓ，３Ｓ）−３−（（Ｓ）−１−｛（Ｅ）−（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ）−１０−［３−クロロ−４−メトキシベンジル］−３−イソブチル−６，６−ジメチル−２，５，９，１２−テトラオキソ−１，４−ジオキサ−８，１１−ジアザシクロヘキサデカ−１３−エン−１６−イル｝エチル）オキシラニル］ベンジルオキシカルボニルアミノ｝エトキシ）エトキシ］エトキシ｝エトキシ）プロパン酸

無水アセトニトリル（１．６ｍＬ）中の化合物５８（２３ｍｇ、２６．６μｍｏｌ）の、アルゴンでパージした溶液に、３−（２−｛２−［２−（２−アミノエトキシ）エトキシ］エトキシ｝エトキシ）プロピオン酸（３９．９μｍｏｌ）およびＴＥＡ（５３．２μｍｏｌ）を順次添加する。２４時間、室温で攪拌した後、この混合物を１０ｍＬのＥｔＯＡｃで希釈する。２５０μＬの０．１ＮＨＣｌ（ｐＨ≒４）を含有する１０ｍＬの水で有機相を洗浄する。水性相を１０ｍＬのＥｔＯＡｃで抽出する（２×）；有機相を併せ、１０ｍＬの水でおよび次いで１０ｍＬのＮａＣｌ飽和溶液で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過し、蒸発乾固させて、化合物５９を非常に淡い黄色の固体の形態で得る（１８．５ｍｇ、７０％）。ＬＣＭＳ（Ａ３）：ＥＳｍ／ｚ＝９９０［Ｍ＋Ｈ］^＋；ｍ／ｚ＝９８８［Ｍ−Ｈ］⁻；ｔ_Ｒ＝１．３２分。

実施例１８：３−（２−｛２−［２−（２−｛４−［（２Ｓ，３Ｓ）−３−（（Ｓ）−１−｛（Ｅ）−（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ）−１０−［３−クロロ−４−メトキシベンジル］−３−イソブチル−６，６−ジメチル−２，５，９，１２−テトラオキソ−１，４−ジオキサ−８，１１−ジアザシクロヘキサデカ−１３−エン−１６−イル｝エチル）オキシラニル］ベンジルオキシカルボニルアミノ｝エトキシ）エトキシ］エトキシ｝エトキシ）プロパン酸２，５−ジオキソピロリジン−１−イル

ＴＨＦ（１．５ｍＬ）中の化合物５９（１８．５ｍｇ、１８．６μｍｏｌ）の、アルゴンでパージした溶液に、ＤＩＰＥＡ（５５．８μｍｏｌ）およびＮ，Ｎ’−ジスクシンイミジルカルボナート（３７．２μｍｏｌ）を順次添加する。１９時間、室温で攪拌した後、この混合物を１０ｍＬのＥｔＯＡｃで希釈し、１０ｍＬの水（２回）でおよび次いで１０ｍＬのＮａＣｌ飽和溶液で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で脱水し、蒸発乾固させる。この粗生成物を、１００／０から０／１００ヘプタン／ＥｔＯＡｃ混合物（１０％イソプロパノール含有）で溶出させるシリカゲルでのクロマトグラフィーによって精製する。生成物Ｅｘ．１７を白色固体の形態で得る（６．０８ｍｇ；３０％）。^１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：０．８３ｔｏ０．８８（ｍ，６Ｈ）；０．９７（ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，３Ｈ）；１．０２（ｓ，３Ｈ）；１．１５（ｓ，３Ｈ）；１．４７ｔｏ１．５６（ｍ，１Ｈ）；１．５８ｔｏ１．６８（ｍ，２Ｈ）；１．８２ｔｏ１．９０（ｍ，１）；２．３９ｔｏ２．４７（ｍ，１Ｈ）；２．６０ｔｏ２．６６（ｍ，１Ｈ）；２．７１（ｄｄ，Ｊ＝１１．５ａｎｄ１４．４Ｈｚ，１Ｈ）；２．８０（ｓ，４Ｈ）；２．９１（ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，２Ｈ）；２．９４ｔｏ３．０７（ｍ，３Ｈ）；３．１４（ｑ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，２Ｈ）；３．３７ｔｏ３．５６（ｐａｒｔｉａｌｌｙｍａｓｋｅｄｍ，１５Ｈ）；３．７１（ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，２Ｈ）；３．７９（ｍ，１Ｈ）；３．８１（ｓ，３Ｈ）；４．２７（ｄｄｄ，Ｊ＝３．８ａｎｄ８．０ａｎｄ１１．３Ｈｚ，１Ｈ）；４．９６ｔｏ５．０５（ｍ，３Ｈ）；５．１１（ｍ，１Ｈ）；５．８８（ｄ，Ｊ＝１５．４Ｈｚ，１Ｈ）；６．４８（ｄｄｄ，Ｊ＝３．８ａｎｄ１１．３ａｎｄ１５．４Ｈｚ，１Ｈ）；７．０５（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）；７．１４ｔｏ７．３９（ｍ，８Ｈ）；８．４０（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ａ２）：ＥＳｍ／ｚ＝１０８７［Ｍ＋Ｈ］^＋；ｍ／ｚ＝１０８５［Ｍ−Ｈ］⁻；ｔ_Ｒ＝１．０９分。

（１−｛４−［（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（Ｓ）−１−｛（Ｅ）−（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ）−１０−［３−クロロ−４−メトキシベンジル］−３−イソブチル−６，６−ジメチル−２，５，９，１２−テトラオキソ−１，４−ジオキサ−８，１１−ジアザシクロヘキサデカ−１３−エン−１６−イル｝エチル）オキシラニル］ベンジル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）酪酸２，５−ジオキソピロリジン−１−イル

化合物６０：（Ｅ）−（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ）−１６−｛（Ｓ）−１−［（２Ｒ，３Ｒ）−３−（４−アジドメチルフェニル）オキシラニル］エチル｝−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−３−イソブチル−６，６−ジメチル−１，４−ジオキサ−８，１１−ジアザシクロヘキサデカ−１３−エン−２，５，９，１２−テトラオン

９ｍＬの無水ＴＨＦ中の６０ｍｇ（８５．８μｍｏｌ）の化合物１の、アルゴンでパージした溶液に、２５．９μＬ（１２０μｍｏｌ）のジフェニルホスホラジドを添加する。この混合物を室温で１０分間攪拌し、この後、０℃に冷却し、この後、１８．０μＬ（１２０μｍｏｌ）のＤＢＵを添加する。室温で１５時間、攪拌を継続する。反応は完了しない：２５．９μＬ（１２０μｍｏｌ）のジフェニルホスホラジドおよび１８．０μＬ（１２０μｍｏｌ）のＤＢＵを添加し、攪拌を２４時間継続する。一部の出発化合物１が残存する：２５．９μＬ（１２０μｍｏｌ）のジフェニルホルホラジドおよび１８．０μＬ（１２０μｍｏｌ）のＤＢＵを添加し、攪拌を２４時間継続する。この反応混合物を６ｍＬの水の添加により加水分解し、この後、ＤＣＭ（３×６ｍＬ）で抽出する。有機相を併せ、ＮａＣｌ飽和溶液（８ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で脱水する。濾過し、減圧下で濃縮した後、１００／０から９０／１０ＤＣＭ／メタノール混合物を溶離剤として使用するシリカゲルでのクロマトグラフィーによってこの粗生成物を精製する。化合物６０を白色固体の形態で得る（４６ｍｇ、７４％）。^１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：０．７６（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，３Ｈ）；０．７８（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，３Ｈ）；１．００（ｓ，３Ｈ）；１．０５（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，３Ｈ）；１．１２（ｓ，３Ｈ）；１．３０（ｍ，１Ｈ）；１．４９ｔｏ１．６３（ｍ，２Ｈ）；１．８２（ｍ，１Ｈ）；２．２７（ｍ，１Ｈ）；２．６３ｔｏ２．７４（ｍ，２Ｈ）；２．９５ｔｏ３．０５（ｍ，３Ｈ）；３．２５ｔｏ３．３８（ｐａｒｔｉａｌｌｙｍａｓｋｅｄｍ，１Ｈ）；３．８１（ｓ，３Ｈ）；３．９２（ｄ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，１Ｈ）；４．２５（ｄｄｄ，Ｊ＝３．６ａｎｄ８．０ａｎｄ１１．５Ｈｚ，１Ｈ）；４．４６（ｓ，２Ｈ）；４．９２（ｄｄ，Ｊ＝３．６ａｎｄ９．６Ｈｚ，１Ｈ）；５．１１（ｄｄｄ，Ｊ＝１．５ａｎｄ５．７ａｎｄ１１．３Ｈｚ，１Ｈ）；５．８０（ｄｄ，Ｊ＝１．５ａｎｄ１５．１Ｈｚ，１Ｈ）；６．４８（ｄｄｄ，Ｊ＝３．８ａｎｄ１１．３ａｎｄ１５．１Ｈｚ，１Ｈ）；７．０５（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，１Ｈ）；７．１７（ｄｄ，Ｊ＝２．２ａｎｄ８．６Ｈｚ，１Ｈ）；７．２２（ｄｄ，Ｊ＝２．６ａｎｄ９．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．２８（ｄ，Ｊ＝２．２Ｈｚ，１Ｈ）；７．３４（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ）；７．３８（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ）；８．３４（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ａ２）：ＥＳｍ／ｚ＝７２４［Ｍ＋Ｈ］^＋；ｍ／ｚ＝７２２［Ｍ−Ｈ］⁻；ｍ／ｚ＝７６８［Ｍ−Ｈ＋ＨＣＯ_２Ｈ］⁻ベースピーク；ｔ_Ｒ＝１．１８分。

化合物６１：（１−｛４−［（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（Ｓ）−１−｛（Ｅ）−（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ）−１０−［３−クロロ−４−メトキシベンジル］−３−イソブチル−６，６−ジメチル−２，５，９，１２−テトラオキソ−１，４−ジオキサ−８，１１−ジアザシクロヘキサデカ−１３−エン−１６−イル｝エチル）オキシラニル］ベンジル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）酪酸

５００μＬの水中の２２ｍｇ（３０．４μｍｏｌ）の化合物６０の懸濁液に、５００μＬのＴＨＦ中の６．８ｍｇ（６０．８μｍｏｌ）の５−ヘキシン酸の溶液を添加する。この後、１２２μＬ（１２．２μｍｏｌ）の０．１Ｍ硫酸銅水溶液および１２２μＬ（２４．３μｍｏｌ）の０．２Ｍアスコルビン酸ナトリウム水溶液を添加する。攪拌を２時間、室温で継続する。２ｍＬの水を添加することにより混合物を加水分解し、この後、ＥｔＯＡｃ（３×２ｍＬ）で抽出する。有機相を併せ、ＮａＣｌ飽和溶液（３ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で脱水する。濾過し、減圧下で濃縮した後、９８／２から９０／１０ＤＣＭ／メタノール混合物を溶離剤として使用するシリカゲルでのクロマトグラフィーによってこの粗生成物を精製する。化合物６１を白色固体の形態で得る（１９．４ｍｇ、７６％）。^１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：０．７３（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，３Ｈ）；０．７５（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，３Ｈ）；１．００（ｓ，３Ｈ）；１．０４（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，３Ｈ）；１．１１（ｓ，３Ｈ）；１．２９（ｍ，１Ｈ）；１．５０ｔｏ１．５９（ｍ，２Ｈ）；１．７６ｔｏ１．８５（ｍ，３Ｈ）；２．２０ｔｏ２．３０（ｍ，３Ｈ）；２．６２（ｔ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，２Ｈ）；２．６５ｔｏ２．７２（ｍ，２Ｈ）；２．９４ｔｏ３．０４（ｍ，３Ｈ）；３．２８ｔｏ３．３８（ｐａｒｔｉａｌｌｙｍａｓｋｅｄｍ，１Ｈ）；３．８１（ｓ，３Ｈ）；３．８９（ｄ，Ｊ＝１．６Ｈｚ，１Ｈ）；４．２５（ｄｄｄ，Ｊ＝３．６ａｎｄ８．０ａｎｄ１１．５Ｈｚ，１Ｈ）；４．９０（ｄｄ，Ｊ＝３．６ａｎｄ９．６Ｈｚ，１Ｈ）；５．１０（ｄｄｄ，Ｊ＝１．６ａｎｄ５．２ａｎｄ１１．２Ｈｚ，１Ｈ）；５．５３（ｓ，２Ｈ）；５．７８（ｄｄ，Ｊ＝１．６ａｎｄ１５．０Ｈｚ，１Ｈ）；６．４６（ｄｄｄ，Ｊ＝３．７ａｎｄ１１．２ａｎｄ１５．０Ｈｚ，１Ｈ）；７．０５（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．１７（ｄｄ，Ｊ＝１．９ａｎｄ８．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．２２（ｄｄ，Ｊ＝２．３ａｎｄ９．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．２８（ｄ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，１Ｈ）；７．３１（ｓ，４Ｈ）；７．９２（ｓ，１Ｈ）；８．３７（ｂｒｏａｄｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ）；１２．０３（ｖｅｒｙｂｒｏａｄｍ，１Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ａ２）：ＥＳｍ／ｚ＝８３６［Ｍ＋Ｈ］^＋；ｍ／ｚ＝４１８．５［Ｍ＋２Ｈ］^２＋ベースピーク；ｍ／ｚ＝８３４［Ｍ−Ｈ］⁻；ｔ_Ｒ＝１．０４分。

化合物６２：（１−｛４−［（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（Ｓ）−１−｛（Ｅ）−（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ）−１０−［３−クロロ−４−メトキシベンジル］−３−イソブチル−６，６−ジメチル−２，５，９，１２−テトラオキソ−１，４−ジオキサ−８，１１−ジアザシクロヘキサデカ−１３−エン−１６−イル｝エチル）オキシラニル］ベンジル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）酪酸メチル

５００μＬのＤＣＭおよび２００μＬのメタノール中の５ｍｇ（６μｍｏｌ）の化合物６１の溶液に、ヘキサン中のトリメチルシリルジアゾメタンの２Ｍ溶液４．５μＬ（９．０μｍｏｌ）を添加する。攪拌を３０分間継続する。この混合物を減圧下で濃縮し、９８／２ＤＣＭ／メタノール混合物で溶出させるシリカゲルでの濾過によって精製する。化合物６２を白色固体の形態で得る（５ｍｇ、９８％）。^１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：０．７２（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，３Ｈ）；０．７５（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，３Ｈ）；０．９９（ｓ，３Ｈ）；１．０４（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ）；１．１１（ｓ，３Ｈ）；１．２８（ｍ，１Ｈ）；１．５０ｔｏ１．５９（ｍ，２Ｈ）；１．７９（ｍ，１Ｈ）；１．８３（ｍ，２Ｈ）；２．２５（ｍ，１Ｈ）；２．３５（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，２Ｈ）；２．６２（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，２Ｈ）；２．６５ｔｏ２．７２（ｍ，２Ｈ）；２．９４ｔｏ３．０５（ｍ，３Ｈ）；３．２５ｔｏ３．３８（ｐａｒｔｉａｌｌｙｍａｓｋｅｄｍ，１Ｈ）；３．５７（ｓ，３Ｈ）；３．８１（ｓ，３Ｈ）；３．８９（ｄ，Ｊ＝１．５Ｈｚ，１Ｈ）；４．２５（ｄｄｄ，Ｊ＝３．７ａｎｄ８．３ａｎｄ１１．４Ｈｚ，１Ｈ）；４．８９（ｄｄ，Ｊ＝３．４ａｎｄ９．８Ｈｚ，１Ｈ）；５．０９（ｄｄｄ，Ｊ＝１．５ａｎｄ５．４ａｎｄ１１．４Ｈｚ，１Ｈ）；５．５３（ｓ，２Ｈ）；５．７８（ｄｄ，Ｊ＝１．５ａｎｄ１５．２Ｈｚ，１Ｈ）；６．４６（ｄｄｄ，Ｊ＝３．４ａｎｄ１１．４ａｎｄ１５．２Ｈｚ，１Ｈ）；７．０５（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）；７．１７（ｄｄ，Ｊ＝２．０ａｎｄ８．８Ｈｚ，１Ｈ）；７．２２（ｄｄ，Ｊ＝２．５ａｎｄ９．８Ｈｚ，１Ｈ）；７．２８（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ）；７．３１（ｓ，４Ｈ）；７．９２（ｓ，１Ｈ）；８．３４（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ａ２）：ＥＳｍ／ｚ＝８５０［Ｍ＋Ｈ］^＋；ｍ／ｚ＝４２５．５［Ｍ＋２Ｈ］^２＋ベースピーク；ｍ／ｚ＝８４８［Ｍ−Ｈ］⁻；ｍ／ｚ＝８９４［Ｍ−Ｈ＋ＨＣＯ_２Ｈ］⁻ベースピーク；ｔ_Ｒ＝１．１１分。

実施例１９：（１−｛４−［（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（Ｓ）−１−｛（Ｅ）−（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ）−１０−［３−クロロ−４−メトキシベンジル］−３−イソブチル−６，６−ジメチル−２，５，９，１２−テトラオキソ−１，４−ジオキサ−８，１１−ジアザシクロヘキサデカ−１３−エン−１６−イル｝エチル）オキシラニル］ベンジル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）酪酸２，５−ジオキソピロリジン−１−イル

１．２ｍＬのＴＨＦ中の１３．４ｍｇ（１６μｍｏｌ）の化合物６１の、アルゴンでパージした溶液に、８．４μＬ（４８．１μｍｏｌ）のＤＩＰＥＡおよび８．２１ｍｇ（３２．０４μｍｏｌ）のＮ，Ｎ−ジスクシンイミジルカルボナートを順次添加する。攪拌を室温で２６時間継続する。２ｍＬの水の添加によりこの混合物を加水分解し、この後、２×２ｍＬのＥｔＯＡｃで抽出する。有機相を併せ、ＭｇＳＯ_４で脱水する。濾過し、減圧下で濃縮した後、この粗生成物を、９８／２ＤＣＭ／メタノール混合物で溶出させるシリカゲルでの濾過によって精製する。得られる生成物は、０．１５ｍｏｌのＮＨＳを含有する。この生成物を２ｍＬのＤＣＭに溶かし、水（２×３ｍＬ）で洗浄し、この後、ＭｇＳＯ_４で脱水する。濾過し、濃縮乾固させた後、化合物Ｅｘ．１９を白色固体の形態で得る（１２．５６ｍｇ、８４％）。^１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：０．７３（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，３Ｈ）；０．７５（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，３Ｈ）；１．００（ｓ，３Ｈ）；１．０４（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，３Ｈ）；１．１１（ｓ，３Ｈ）；１．３０（ｍ，１Ｈ）；１．４９ｔｏ１．６０（ｍ，２Ｈ）；１．７９（ｍ，１Ｈ）；１．９５（ｑｕｉｎ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ）；２．２６（ｍ，１Ｈ）；２．６５ｔｏ２．７７（ｍ，６Ｈ）；２．８１（ｂｒｏａｄｓ，４Ｈ）；２．９２ｔｏ３．０５（ｍ，３Ｈ）；３．３４（ｐａｒｔｉａｌｌｙｍａｓｋｅｄｍ，１Ｈ）；３．８１（ｓ，３Ｈ）；３．８９（ｄ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，１Ｈ）；４．２５（ｄｄｄ，Ｊ＝３．７ａｎｄ８．１ａｎｄ１１．５Ｈｚ，１Ｈ）；４．９０（ｄｄ，Ｊ＝３．６ａｎｄ９．６Ｈｚ，１Ｈ）；５．０９（ｄｄｄ，Ｊ＝１．４ａｎｄ５．５ａｎｄ１１．３Ｈｚ，１Ｈ）；５．５４（ｓ，２Ｈ）；５．７９（ｄｄ，Ｊ＝１．４ａｎｄ１５．１Ｈｚ，１Ｈ）；６．４６（ｄｄｄ，Ｊ＝３．８ａｎｄ１１．３ａｎｄ１５．１Ｈｚ，１Ｈ）；７．０５（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．１７（ｄｄ，Ｊ＝２．２ａｎｄ８．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．２１（ｄｄ，Ｊ＝２．５ａｎｄ９．６Ｈｚ，１Ｈ）；７．２８（ｄ，Ｊ＝２．２Ｈｚ，１Ｈ）；７．３１（ｓ，４Ｈ）；７．９５（ｓ，１Ｈ）；８．３３（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ａ２）：ＥＳｍ／ｚ＝９３３［Ｍ＋Ｈ］^＋；ｍ／ｚ＝４６７［Ｍ＋２Ｈ］^２＋ベースピーク；ｍ／ｚ＝９７７［Ｍ−Ｈ＋ＨＣＯ_２Ｈ］⁻ベースピーク；ｔ_Ｒ＝１．０８分。

３−（２−｛２−［２−（２−｛１−［１−（４−｛（２Ｒ，３Ｒ）−３−［（Ｓ）−１−（（Ｅ）−（１０Ｒ，１６Ｓ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−３−イソブチル−６，６−ジメチル−２，５，９，１２−テトラオキソ−１，４−ジオキサ−８，１１−ジアザシクロヘキサデカ−１３−エン−１６−イル）エチル］オキシラニル｝ベンジル）−１，２，３−トリアゾール−１−イル］メトキシ｝エトキシ）エトキシ］エトキシ｝エトキシ）プロパン酸２，５−ジオキサピロリジン−１−イル

化合物６３：２−｛２−［２−（２−プロパ−２−イニルオキシエトキシ）エトキシ］エトキシ｝エタノール

２５ｍＬの無水ＴＨＦ中の１ｇ（５．１５ｍｍｏｌ）のテトラエチレングリコールの、アルゴンでパージし、０℃に冷却した溶液に、１４４ｍｇ（３６．０ｍｍｏｌ）のＮａＨを鉱物油中の６０％分散体として添加する。３０分間、０℃で攪拌を継続し、この後、１９４μＬ（２．５８ｍｍｏｌ）のプロパルギルブロミドを添加する。室温で１５時間、攪拌を継続する。混合物を減圧下で濃縮し、この後、９８／２から９０／１０ＤＣＭ／メタノール混合物を溶離剤として使用するシリカゲルでのクロマトグラフィーによってこの粗生成物を精製する。化合物６３を無色の油の形態で得る（７８９ｍｇ、６５％）。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：３．４０（ｔ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ）；３．４２（ｔ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，２Ｈ）；３．４８（ｑ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，２Ｈ）；３．５１ｔｏ３．５８（ｍ，１２Ｈ）；４．１４（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，２Ｈ）；４．５３（ｔ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，１Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ａ２）：ＥＳｍ／ｚ＝２３３［Ｍ＋Ｈ］^＋；ｔ_Ｒ＝０．３８分。

化合物６４：３−（２−｛２−［２−（２−プロパ−２−イニルオキシエトキシ）エトキシ］エトキシ｝エトキシ）プロパン酸ｔｅｒｔ−ブチル

８．８ｍＬの無水ＴＨＦ中の７９０ｍｇ（３．４０ｍｍｏｌ）の化合物６３の、アルゴンでパージした溶液に、４．４ｍｇ（１９０μｍｏｌ）のナトリウムを添加する。混合物を４０℃で２時間加熱して、この混合物を十分に溶解する；室温に冷却した後、７４０μＬ（５．０９ｍｍｏｌ）のアクリル酸ｔｅｒｔ−ブチルを混合物に添加する。１５時間、室温で攪拌を継続し、この後、この混合物を減圧下で濃縮し、９８／２から９０／１０ＤＣＭ／メタノール混合物を溶離剤として使用するシリカゲルでのクロマトグラフィーによってこの粗生成物を精製する。化合物６４を無色の油の形態で得る（９４４ｍｇ、７７％）。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：１．４４（ｓ，９Ｈ）；２．４１（ｔ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，２Ｈ）；３．３８（ｔ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ）；３．４６ｔｏ３．６２（ｍ，１６Ｈ）；３．５９（ｔ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，２Ｈ）；４．１４（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，２Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ａ１）：ＥＳｍ／ｚ＝３６１［Ｍ＋Ｈ］^＋；ｍ／ｚ＝３８３［Ｍ＋Ｎａ］^＋；ｔ_Ｒ＝３．７９分。

化合物６５：３−（２−｛２−［２−（２−プロパ−２−イニルオキシエトキシ）エトキシ］エトキシ｝エトキシ）プロパン酸

９４４ｍｇ（２．６２ｍｍｏｌ）の化合物６４の溶液に、２ｍＬ（５２．４ｍｍｏｌ）のＴＦＡを添加する。この混合物を６時間、室温で攪拌し、この後、濃縮乾固させ、最少量のＤＣＭに溶かし、トルエンを数回混入する。化合物６５を無色の油の形態で得る（７２２ｍｇ、９１％）。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：２．４４（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，２Ｈ）；３．３９（ｔ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ）；３．４６ｔｏ３．５６（ｍ，１６Ｈ）；３．６０（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，２Ｈ）；４．１４（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，２Ｈ）；７．４４ｔｏ９．７３（ｖｅｒｙｂｒｏａｄｍ，１Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ａ２）：ＥＳｍ／ｚ＝３０５［Ｍ＋Ｈ］^＋；ｍ／ｚ＝３０３［Ｍ−Ｈ］⁻；ｔ_Ｒ＝０．４８分。

実施例２０：３−（２−｛２−［２−（２−｛１−［１−（４−｛（２Ｒ，３Ｒ）−３−［（Ｓ）−１−（（Ｅ）−（１０Ｒ，１６Ｓ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−３−イソブチル−６，６−ジメチル−２，５，９，１２−テトラオキソ−１，４−ジオキサ−８，１１−ジアザシクロヘキサデカ−１３−エン−１６−イル）エチル］オキシラニル｝ベンジル）−１，２，３−トリアゾール−１−イル］メトキシ｝エトキシ）エトキシ］エトキシ｝エトキシ）プロパン酸２，５−ジオキサピロリジン−１−イル

実施例２０は、化合物６１について説明した方法に従って化合物６０および６５から得ることができ、この後、実施例１９について説明した方法に従ってこの酸を活性化する。

（４−｛１−［（４−｛（２Ｒ，３Ｒ）−３−［（Ｓ）−１−（（Ｅ）−（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ）−１０−｛３−クロロ−４−メトキシベンジル｝−３−イソブチル−６，６−ジメチル−２，５，９，１２−テトラオキソ−１，４−ジオキサ−８，１１−ジアザシクロヘキサデカ−１３−エン−１６−イル）エチル］オキシラニル｝ベンジル）メチルアミノ］メチル｝−１，２，３−トリアゾール−１−イル）酪酸２，５−ジオキソピロリジン−１−イル

化合物６６：（Ｅ）−（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−３−イソブチル−６，６−ジメチル−１６−［（Ｓ）−１−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−｛４−［（メチルプロパ−２−イニルアミノ）メチル］フェニル｝オキシラニル）エチル］−１，４−ジオキサ−８，１１−ジアザシクロヘキサデカ−１３−エン−２，５，９，１２−テトラオン

５ｍＬの無水アセトニトリル中の４０ｍｇ（５５．７μｍｏｌ）の化合物２の、アルゴンでパージした溶液に、４８．５μＬ（２７９μｍｏｌ）のＤＩＰＥＡおよび１３．９μＬ（１６７μｍｏｌ）のＮ−メチルプロパルギルアミンを順次添加する。この混合物を４０℃で１５時間加熱する。一部の出発化合物２が残存する：さらなる４８．５μＬ（２７９μｍｏｌ）のＤＩＰＥＡおよび１３．９μＬ（１６７μｍｏｌ）のＮ−メチルプロパルギルアミンを添加する。２４時間、４０℃で攪拌した後、この混合物を５ｍＬのＥｔＯＡｃで希釈し、この後、５ｍＬの水で洗浄する。水性相を３×５ｍＬのＥｔＯＡｃで抽出し、有機相を併せ、ＮａＨＣＯ_３飽和溶液（１０ｍＬ）でおよびＮａＣｌ飽和溶液（１０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で脱水する。濾過し、減圧下で濃縮した後、９８／２から９０／１０ＤＣＭ／メタノール混合物を溶離剤として使用するシリカゲルでのクロマトグラフィーによってこの粗生成物を精製する。化合物６６を白色固体の形態で得る（４５ｍｇ、定量的）。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：０．７８（ｍ，６Ｈ）；１．００（ｓ，３Ｈ）；１．０５（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ）；１．１２（ｓ，３Ｈ）；１．３０（ｍ，１Ｈ）；１．４９ｔｏ１．６１（ｍ，２Ｈ）；１．８１（ｍ，１Ｈ）；２．２０（ｓ，３Ｈ）；２．２８（ｍ，１Ｈ）；２．６３ｔｏ２．７６（ｍ，２Ｈ）；２．９２ｔｏ３．０７（ｍ，３Ｈ）；３．１７（ｔ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ）；３．２７（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，２Ｈ）；３．３３（ｐａｒｔｉａｌｌｙｍａｓｋｅｄｍ，１Ｈ）；３．５０（ｓ，２Ｈ）；３．８１（ｓ，３Ｈ）；３．８８（ｄ，Ｊ＝１．７Ｈｚ，１Ｈ）；４．２５（ｄｄｄ，Ｊ＝３．４ａｎｄ７．８ａｎｄ１１．４Ｈｚ，１Ｈ）；４．９２（ｄｄ，Ｊ＝３．５ａｎｄ９．７Ｈｚ，１Ｈ）；５．１１（ｄｄｄ，Ｊ＝１．５ａｎｄ５．５ａｎｄ１１．２Ｈｚ，１Ｈ）；５．８０（ｄｄ，Ｊ＝１．５ａｎｄ１５．０Ｈｚ，１Ｈ）；６．４７（ｄｄｄ，Ｊ＝３．９ａｎｄ１１．２ａｎｄ１５．０Ｈｚ，１Ｈ）；７．０５（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，１Ｈ）；７．１７（ｄｄ，Ｊ＝２．１ａｎｄ８．６Ｈｚ，１Ｈ）；７．２２（ｄｄ，Ｊ＝２．１ａｎｄ９．４Ｈｚ，１Ｈ）；７．２５ｔｏ７．３３（ｍ，５Ｈ）；８．３３（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ａ２）：ＥＳｍ／ｚ＝７５０［Ｍ＋Ｈ］^＋；ｍ／ｚ＝３７５．５［Ｍ＋２Ｈ］^２＋ベースピーク；ＥＳｍ／ｚ＝７４８［Ｍ−Ｈ］⁻；ｍ／ｚ＝７９４［Ｍ−Ｈ＋ＨＣＯ_２Ｈ］⁻；ｔ_Ｒ＝０．９１分。

化合物６７：４−アジド酪酸エチル

２．８６ｍＬ（２０ｍｍｏｌ）の４−ブロモ酪酸エチルおよび２．６ｇ（４０ｍｍｏｌ）のＮａＮ_３を３０ｍＬの２／１アセトン／水混合物に溶解する。この混合物を７時間還流させる。室温に冷却し、減圧下で濃縮した後、残留物を５０ｍＬの水に溶かす。水性相を３×３０ｍＬのＤＣＭで抽出する。有機相を併せ、ＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮して、化合物６７を無色の油の形態で得る（３ｇ、９５％）。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、クロロホルム−ｄ）：１．２７（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ）；１．９２（ｍ，２Ｈ）；２．４１（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ）；３．３６（ｔ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，２Ｈ）；４．１５（ｑ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ）。

化合物６８：４−アジド酪酸

４７ｍＬのメタノールおよび３７ｍＬの水中の３ｇ（１９．９ｍｍｏｌ）の化合物６７の溶液に、５．５８ｇ（９９．５ｍｍｏｌ）の水酸化カリウムを少しずつ添加する。この混合物を室温で６時間攪拌し、この後、減圧下で約２８ｍＬに濃縮する。残留物を２５ｍＬの水で希釈し２×２０ｍＬのＤＣＭで抽出する。濃ＨＣｌを添加することによって水性相をｐＨ≒１に酸性化し、この後、３×２５ｍＬのジエチルエーテルで抽出する。有機相を併せ、ＮａＣｌ飽和溶液（１５ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で脱水する。濾過し、減圧下で濃縮乾固させた後、化合物６８を無色の油の形態で得る（２．０５ｇ、８０％）。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、クロロホルム−ｄ）：１．９３（ｍ，２Ｈ）；２．４９（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ）；３．３９（ｔ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，２Ｈ）；１１．２４（ｂｒｏａｄｍ，１Ｈ）。

化合物６９：（４−｛１−［（４−｛（２Ｒ，３Ｒ）−３−［（Ｓ）−１−（（Ｅ）−（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ）−１０−｛３−クロロ−４−メトキシベンジル｝−３−イソブチル−６，６−ジメチル−２，５，９，１２−テトラオキソ−１，４−ジオキサ−８，１１−ジアザシクロヘキサデカ−１３−エン−１６−イル）エチル］オキシラニル｝ベンジル）メチルアミノ］メチル｝−１，２，３−トリアゾール−１−イル）酪酸

５４５μＬのＴＨＦ中の２４ｍｇ（３２μｍｏｌ）の化合物６６の溶液に、８．３ｍｇ（１３μｍｏｌ）の化合物６８、５４５μＬの水、１２８μＬの０．１Ｍ硫酸銅水溶液および１２８μＬの０．２Ｍアスコルビン酸ナトリウム水溶液を順次添加する。この混合物を４５分間、室温で攪拌し、この後、２ｍＬの水で希釈する。水性相を３×２ｍＬのＥｔＯＡｃで抽出する。有機相を併せ、ＮａＣｌ飽和溶液（２ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ_４に通して濾過する。濾過し、減圧下で濃縮した後、９８／２から９０／１０ＤＣＭ／メタノール混合物を溶離剤として使用して、ジオールグラフト型シリカゲルでのクロマトグラフィーによりこの粗生成物を精製する。化合物６９を白色固体の形態で得る（２２．６ｍｇ、８０％）。^１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：０．７６（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，３Ｈ）；０．７８（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，３Ｈ）；１．００（ｓ，３Ｈ）；１．０５（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，３Ｈ）；１．１１（ｓ，３Ｈ）；１．３０（ｍ，１Ｈ）；１．５０ｔｏ１．６２（ｍ，２Ｈ）；１．８１（ｍ，１Ｈ）；２．０３（ｍ，２Ｈ）；２．１０（ｓ，３Ｈ）；２．２０（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ）；２．３０（ｍ，１Ｈ）；２．６４ｔｏ２．７４（ｍ，２Ｈ）；２．９４ｔｏ３．０３（ｍ，３Ｈ）；３．３５（ｐａｒｔｉａｌｌｙｍａｓｋｅｄｍ，１Ｈ）；３．４８（ｓ，２Ｈ）；３．６１（ｓ，２Ｈ）；３．８１（ｓ，３Ｈ）；３．８７（ｄ，Ｊ＝１．６Ｈｚ，１Ｈ）；４．２５（ｄｄｄ，Ｊ＝３．７ａｎｄ７．７ａｎｄ１１．５Ｈｚ，１Ｈ）；４．３７（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ）；４．９１（ｄｄ，Ｊ＝３．６ａｎｄ９．６Ｈｚ，１Ｈ）；５．１１（ｄｄｄ，Ｊ＝１．５ａｎｄ５．５ａｎｄ１１．３Ｈｚ，１Ｈ）；５．８０（ｄｄ，Ｊ＝１．５ａｎｄ１５．１Ｈｚ，１Ｈ）；６．４７（ｄｄｄ，Ｊ＝３．７ａｎｄ１１．３ａｎｄ１５．１Ｈｚ，１Ｈ）；７．０５（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．１７（ｄｄ，Ｊ＝２．２ａｎｄ８．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．２３（ｄｄ，Ｊ＝２．５ａｎｄ９．８Ｈｚ，１Ｈ）；７．２６（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ）；７．２８（ｄ，Ｊ＝２．２Ｈｚ，１Ｈ）；７．３４（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ）；８．０２（ｓ，１Ｈ）；８．３９（ｂｒｏａｄｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，１Ｈ）；１２．１４（ｂｒｏａｄｍ，１Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ａ２）：ＥＳｍ／ｚ＝８７９［Ｍ＋Ｈ］^＋；ｍ／ｚ＝８７７［Ｍ−Ｈ］⁻；ｔ_Ｒ＝０．８６分。

化合物７０：（４−｛１−［（４−｛（２Ｒ，３Ｒ）−３−［（Ｓ）−１−（（Ｅ）−（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ）−１０−｛３−クロロ−４−メトキシベンジル｝−３−イソブチル−６，６−ジメチル−２，５，９，１２−テトラオキソ−１，４−ジオキサ−８，１１−ジアザシクロヘキサデカ−１３−エン−１６−イル）エチル］オキシラニル｝ベンジル）メチルアミノ］メチル｝−１，２，３−トリアゾール−１−イル）酪酸メチル

０．５ｍＬのＤＣＭおよび０．２ｍＬのメタノール中の５．５ｍｇ（６．２μｍｏｌ）の化合物６９の、アルゴンでパージした溶液に、４．７μＬ（９．３μｍｏｌ）のトリメチルシリルジアゾメタンを添加する。この混合物を４５分間、室温で攪拌し、この後、濃縮乾固させる。９８／２から９５／５ＤＣＭ／メタノール混合物を溶離剤として使用するシリカゲルでのクロマトグラフィーによってこの粗生成物を精製する。化合物７０を白色固体の形態で得る（３．４ｍｇ、６２％）。^１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：０．７５（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，３Ｈ）；０．７７（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，３Ｈ）；１．００（ｓ，３Ｈ）；１．０５（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，３Ｈ）；１．１１（ｓ，３Ｈ）；１．２８（ｍ，１Ｈ）；１．４９ｔｏ１．６１（ｍ，２Ｈ）；１．８０（ｍ，１Ｈ）；２．０７（ｍ，２Ｈ）；２．１０（ｍ，３Ｈ）；２．２６（ｍ，１Ｈ）；２．３１（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ）；２．６２ｔｏ２．７４（ｍ，２Ｈ）；２．９３ｔｏ３．０４（ｍ，３Ｈ）；３．２７ｔｏ３．３７（ｐａｒｔｉａｌｌｙｍａｓｋｅｄｍ，１Ｈ）；３．４８（ｓ，２Ｈ）；３．５８（ｓ，３Ｈ）；３．６１（ｓ，２Ｈ）；３．８１（ｓ，３Ｈ）；３．８７（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ）；４．２５（ｄｄｄ，Ｊ＝３．７ａｎｄ８．２ａｎｄ１１．６Ｈｚ，１Ｈ）；４．３８（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ）；４．９１（ｄｄ，Ｊ＝３．９ａｎｄ９．８Ｈｚ，１Ｈ）；５．１１（ｄｄｄ，Ｊ＝１．５ａｎｄ５．３ａｎｄ１１．２Ｈｚ，１Ｈ）；５．７９（ｄｄ，Ｊ＝１．５ａｎｄ１５．２Ｈｚ，１Ｈ）；６．４７（ｄｄｄ，Ｊ＝３．９ａｎｄ１１．２ａｎｄ１５．２Ｈｚ，１Ｈ）；７．０５（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，１Ｈ）；７．１６（ｄｄ，Ｊ＝２．２ａｎｄ８．６Ｈｚ，１Ｈ）；７．２２（ｄｄ，Ｊ＝２．４ａｎｄ９．８Ｈｚ，１Ｈ）；７．２６（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，２Ｈ）；７．２８（ｄ，Ｊ＝２．２Ｈｚ，１Ｈ）；７．３３（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，２Ｈ）；８．０３（ｓ，１Ｈ）；８．３４（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ａ２）：ＥＳｍ／ｚ＝８９３［Ｍ＋Ｈ］^＋；ｍ／ｚ＝４４７［Ｍ＋２Ｈ］^２＋ベースピーク；ｍ／ｚ＝８９１［Ｍ−Ｈ］⁻；ｍ／ｚ＝９３７［Ｍ−Ｈ＋ＨＣＯ_２Ｈ］⁻ベースピーク；ｔ_Ｒ＝０．９０分。

実施例２１：（４−｛１−［（４−｛（２Ｒ，３Ｒ）−３−［（Ｓ）−１−（（Ｅ）−（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ）−１０−｛３−クロロ−４−メトキシベンジル｝−３−イソブチル−６，６−ジメチル−２，５，９，１２−テトラオキソ−１，４−ジオキサ−８，１１−ジアザシクロヘキサデカ−１３−エン−１６−イル）エチル］オキシラニル｝ベンジル）メチルアミノ］メチル｝−１，２，３−トリアゾール−１−イル）酪酸２，５−ジオキソピロリジン−１−イル

実施例２１は、実施例１９について説明した方法に従って酸６９を活性化することによって得ることができる。

化合物７１：（Ｅ）−（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ）−１６−｛（Ｓ）−１−［（２Ｓ，３Ｓ）−３−（４−アジドメチルフェニル）オキシラニル］エチル｝−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−３−イソブチル−６，６−ジメチル−１，４−ジオキサ−８，１１−ジアザシクロヘキサデカ−１３−エン−２，５，９，１２−テトラオン

化合物５７（３６ｍｇ；５１．４８μｍｏｌ、Ａｌ−ａｗａｒＲ．Ｓ．ら、「Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．」２００３、４６、２９８５−３００７に従って調製したもの）を無水ＴＨＦ（２ｍＬ）に溶解する。この溶液をアルゴンでパージし、氷冷水浴で冷却し、この後、ＤＰＰＡ（７４μｍｏｌ）および次いでＤＢＵ（８０μｍｏｌ）を添加する。この混合物を放置して室温に温め、攪拌を一晩継続する。翌日、この溶液を再び氷冷水浴で冷却し、この後、さらなる７４μｍｏｌのＤＰＰＡおよび８０μｍｏｌのＤＢＵを添加する。２時間、０℃でおよび２時間、室温で反応させた後、混合物を５ｍＬの水で加水分解し、この後、ＤＣＭで３回抽出する。併せた有機相をＮａ_２ＳＯ_４で脱水し、濾過し、減圧下で蒸発させる。この後、この粗生成物を、１００／０から９５／５ＤＣＭ／メタノール混合物で溶出させるシリカゲルでのクロマトグラフィーによって精製する。化合物５７を無色の固体の形態で得る（２４ｍｇ；６４％）。^１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ（ｐｐｍ）：０．８４（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，３Ｈ）；０．８６（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，３Ｈ）；０．９８（ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，３Ｈ）；１．０３（ｓ，３Ｈ）；１．１５（ｓ，３Ｈ）；１．４８ｔｏ１．６７（ｍ，３Ｈ）；１．８８（ｍ，１Ｈ）；２．４５（ｍ，１Ｈ）；２．６３（ｍ，１Ｈ）；２．７１（ｄｄ，Ｊ＝１１．５ａｎｄ１４．０Ｈｚ，１Ｈ）；２．９７ｔｏ３．０８（ｍ，３Ｈ）；３．３６（ｐａｒｔｉａｌｌｙｍａｓｋｅｄｍ，１Ｈ）；３．８２（ｂｒｏａｄｓ，４Ｈ）；４．２８（ｄｄｄ，Ｊ＝３．６ａｎｄ８．０ａｎｄ１１．５Ｈｚ，１Ｈ）；４．４４（ｓ，２Ｈ）；４．９９（ｄｄ，Ｊ＝３．７ａｎｄ９．５Ｈｚ，１Ｈ）；５．１２（ｄｄｄ，Ｊ＝１．４ａｎｄ５．７ａｎｄ１１．４Ｈｚ，１Ｈ）；５．８８（ｄｄ，Ｊ＝１．４ａｎｄ１５．２Ｈｚ，１Ｈ）；６．４９（ｄｄｄ，Ｊ＝３．８ａｎｄ１１．４ａｎｄ１５．２Ｈｚ，１Ｈ）；７．０５（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．１８（ｄｄ，Ｊ＝２．２ａｎｄ８．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．２６ｔｏ７．３２（ｍ，４Ｈ）；７．３６（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ）；８．４０（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ａ２）：ＥＳｍ／ｚ＝７２２［Ｍ−Ｈ］⁻；ｍ／ｚ＝７２４［Ｍ＋Ｈ］^＋；ｍ／ｚ＝７６８［Ｍ＋ＨＣＯ_２Ｈ−Ｈ］⁻；ｔ_Ｒ＝１．１９分。

化合物７２：（Ｅ）−（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ）−１６−｛（Ｓ）−１−［（２Ｓ，３Ｓ）−３−（４−アミノメチルフェニル）オキシラニル］エチル｝−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−３−イソブチル−６，６−ジメチル−１，４−ジオキサ−８，１１−ジアザシクロヘキサデカ−１３−エン−２，５，９，１２−テトラオン

化合物７１（２２ｍｇ、３０．３８μｍｏｌ）を、メタノール（１ｍＬ）／水（０．２ｍＬ）の混合物に溶解し、この後、ＴＣＥＰ（３４．８９μｍｏｌ）を添加する。得られた溶液を一晩、室温で攪拌し、この後、減圧下で濃縮する。この後、残留物をＮａＨＣＯ_３飽和水溶液に溶かし、ＤＣＭで３回抽出する。併せた有機相をＮａ_２ＳＯ_４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮する。このようにして中間体７２を無色の固体の形態で得（２１ｍｇ、９９％）、この中間体７２を粗製形態で次の工程で使用する。ＬＣＭＳ（Ａ５）：ＥＳｍ／ｚ＝６９６［Ｍ−Ｈ］⁻；ｍ／ｚ＝６９８［Ｍ＋Ｈ］^＋；ｍ／ｚ＝７４２［Ｍ＋ＨＣＯ_２Ｈ−Ｈ］⁻；ｔ_Ｒ＝３．１９分。

化合物７４：ＦｍｏｃＶａｌ−Ｃｉｔ−ＰＡＢＡＣ−α−アミノクリプトフィシン７２

化合物７２（２１ｍｇ、３０．０８μｍｏｌ）をアセトニトリル（２ｍＬ）／無水ＤＭＦ（０．５ｍＬ）の混合物に溶解し、この後、アセトニトリル（２ｍＬ）中の化合物７３（２３ｍｇ、３０．１μｍｏｌ；ＷＯ２００６／１１０４７６に従って調製したもの）の溶液を添加する。この混合物を２２時間、室温で攪拌し、この後、減圧下で濃縮する。残留物をＤＣＭに溶かし、ＮａＨＣＯ_３飽和水溶液で洗浄し、この後、Ｎａ_２ＳＯ_４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮する。この後、この粗生成物を、１００／０から９０／１０ＤＣＭ／メタノール混合物で溶出させるシリカゲルでのクロマトグラフィーによって精製する。化合物７４を白色固体の形態で得（２２ｍｇ）、この化合物を粗製形態で次の工程において用いる。ＬＣＭＳ（Ａ５）：ＥＳｍ／ｚ＝１３２５［Ｍ＋Ｈ］^＋；ｍ／ｚ＝１３６９［Ｍ＋ＨＣＯ_２Ｈ−Ｈ］⁻；ｔ_Ｒ＝４．３０分。

化合物７５：Ｖａｌ−Ｃｉｔ−ＰＡＢＡＣ−α−アミノクリプトフィシン７２

化合物７４（２２ｍｇ、１６．５９μｍｏｌ）をＤＭＦ（３ｍＬ）に溶解し、この後、ピペリジン（１５０μＬ、１．５１ｍｍｏｌ）を添加し、この混合物を３０分間、室温で攪拌する。混合物を減圧下で濃縮し；残留物を最少量のメタノールに溶解し、エーテルから沈殿させる。このようにして化合物７５を白色固体の形態で得る（１５ｍｇ、８２％）。ＬＣＭＳ（Ａ５）：ＥＳｍ／ｚ＝１１０３［Ｍ＋Ｈ］^＋；ｍ／ｚ＝１１０１［Ｍ−Ｈ］⁻；ｍ／ｚ＝１１４８［Ｍ＋ＨＣＯ_２Ｈ−Ｈ］⁻；ｔ_Ｒ＝３．３８分。

化合物７６：グルタル酸−Ｖａｌ−Ｃｉｔ−ＰＡＢＡＣ−α−アミノクリプトフィシン７２

無水ＤＭＦ（２００μＬ）中のグルタル酸（８ｍｇ、７０μｍｏｌ）の溶液を、アルゴン下条件で化合物７５（１５ｍｇ、１３．５９μｍｏｌ）に添加する。得られた溶液を一晩、室温で攪拌し、この後、ＮＨ_４Ｃｌ飽和水溶液を添加し、ＤＣＭで３回抽出する。併せた有機相をＮａ_２ＳＯ_４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮する。得られた残留物をＤＣＭに溶かし、エーテルで沈殿させる。焼結漏斗による濾過およびエーテルでの洗浄後、化合物７６をベージュ色の固体の形態で得る（８ｍｇ、４８％）。^１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ（ｐｐｍ）：０．８０ｔｏ０．９２（ｍ，１２Ｈ）；０．９６（ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，３Ｈ）；１．０２（ｓ，３Ｈ）；１．１５（ｓ，３Ｈ）；１．３０ｔｏ１．７２（ｍ，９Ｈ）；１．８６（ｍ，１Ｈ）；２．００（ｍ，１Ｈ）；２．１１ｔｏ２．２６（ｍ，４Ｈ）；２．４２（ｍ，１Ｈ）；２．６０ｔｏ２．７４（ｍ，２Ｈ）；２．９１ｔｏ３．１１（ｍ，５Ｈ）；３．３８（ｐａｒｔｉａｌｌｙｍａｓｋｅｄｍ，１Ｈ）；３．７６（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ）；３．８１（ｓ，３Ｈ）；４．１７（ｍ，３Ｈ）；４．２７（ｍ，１Ｈ）；４．３７（ｍ，１Ｈ）；４．９０ｔｏ５．０４（ｍ，３Ｈ）；５．１１（ｍ，１Ｈ）；５．５０（ｂｒｏａｄｍ，２Ｈ）；５．８８（ｂｒｏａｄｄ，Ｊ＝１５．２Ｈｚ，１Ｈ）；６．２０（ｂｒｏａｄｍ，１Ｈ）；６．４８（ｍ，１Ｈ）；７．０６（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ）；７．１１ｔｏ７．３２（ｍ，９Ｈ）；７．６０（ｍ，２Ｈ）；７．７５（ｍ，１Ｈ）；７．８９（ｍ，１Ｈ）；８．２８（ｂｒｏａｄｍ，１Ｈ）；８．４１（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ）；９．９２（ｂｒｏａｄｓ，１Ｈ）；１２．０６（ｂｒｏａｄｍ，１Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ａ２）：ＥＳｍ／ｚ＝１２１７［Ｍ＋Ｈ］^＋；ｍ／ｚ＝１２１５［Ｍ−Ｈ］⁻；ｔ_Ｒ＝１．０５分。

実施例２２

化合物７６（６ｍｇ、４．９３μｍｏｌ）をＤＣＭ（０．５ｍＬ）とＤＭＦ（０．１ｍＬ）の混合物に溶解し、この後、Ｎ，Ｎ’−ジスクシンイミジルカルボナート（６ｍｇ、２３．４２μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（４μＬ、２２．９６μｍｏｌ）を順次添加する。３時間、室温で反応させた後、ＮＨ_４Ｃｌ飽和水溶液を添加し、この混合物を３回、ＤＣＭで抽出する。併せた有機相をＮａ_２ＳＯ_４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮する。この粗生成物を、１００／０から９０／１０ＤＣＭ／メタノール混合物で溶出させるシリカゲルでのクロマトグラフィーによって精製する。化合物Ｅｘ．２２を白色固体の形態で得る（４ｍｇ；６１％）。^１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ（ｐｐｍ）：０．８０ｔｏ０．９０（ｍ，１２Ｈ）；０．９６（ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，３Ｈ）；１．０３（ｓ，３Ｈ）；１．１５（ｓ，３Ｈ）；１．３２ｔｏ１．７６（ｍ，７Ｈ）；１．８０ｔｏ１．８９（ｍ，３Ｈ）；１．９７（ｍ，１Ｈ）；２．２９（ｍ，２Ｈ）；２．４４（ｍ，１Ｈ）；２．６０ｔｏ２．７５（ｍ，４Ｈ）；２．８１（ｓ，４Ｈ）；２．８９ｔｏ３．０８（ｍ，５Ｈ）；３．４１（ｐａｒｔｉａｌｌｙｍａｓｋｅｄｍ，１Ｈ）；３．７７（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ）；３．８１（ｓ，３Ｈ）；４．１４ｔｏ４．２４（ｍ，３Ｈ）；４．２７（ｄｄｄ，Ｊ＝３．９ａｎｄ８．３ａｎｄ１１．５Ｈｚ，１Ｈ）；４．３８（ｍ，１Ｈ）；４．９３ｔｏ５．０３（ｍ，３Ｈ）；５．１１（ｍ，１Ｈ）；５．３９（ｂｒｏａｄｓ，２Ｈ）；５．８８（ｂｒｏａｄｄ，Ｊ＝１５．２Ｈｚ，１Ｈ）；５．９６（ｔ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）；６．４８（ｄｄｄ，Ｊ＝３．７ａｎｄ１１．１ａｎｄ１５．２Ｈｚ，１Ｈ）；７．０５（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ）；７．１６ｔｏ７．３６（ｍ，９Ｈ）；７．５９（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，２Ｈ）；７．７６（ｔ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，１Ｈ）；７．８８（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）；８．１０（ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，１Ｈ）；８．４１（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ）；９．９７（ｂｒｏａｄｓ，１Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ａ２）：ＥＳｍ／ｚ＝１３１４［Ｍ＋Ｈ］^＋；ｍ／ｚ＝１３５８［Ｍ＋ＨＣＯ_２Ｈ−Ｈ］⁻；ｔ_Ｒ＝１．０６分。

化合物７７：（Ｅ）−（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ）−１６−｛（Ｓ）−１−［（２Ｒ，３Ｒ）−３−（４−アミノメチルフェニル）オキシラニル］エチル｝−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−３−イソブチル−６，６−ジメチル−１，４−ジオキサ−８，１１−ジアザシクロヘキサデカ−１３−エン−２，５，９，１２−テトラオン

化合物６０（２３ｍｇ、３１．７６μｍｏｌ）をメタノール（１ｍＬ）と水（０．２ｍＬ）の混合物に溶解し、この後、ＴＣＥＰ（３４．９０μｍｏｌ）およびＤＣＭ（前述のものを溶解するために十分な量）を添加する。得られた溶液を一晩、室温で攪拌し、この後、減圧下で濃縮する。この後、残留物をＮａＨＣＯ_３飽和水溶液に溶かし、ＤＣＭで３回抽出する。併せた有機相をＮａ_２ＳＯ_４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮する。この粗生成物を、１００／０から９０／１０ＤＣＭ／メタノール混合物で溶出させるシリカゲルでのクロマトグラフィーによって最終精製する。このようにして化合物７７を白色固体の形態で得る（１２ｍｇ、５９％）。^１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ（ｐｐｍ）：０．７８（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，６Ｈ）；１．００（ｓ，３Ｈ）；１．０５（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，３Ｈ）；１．１２（ｓ，３Ｈ）；１．３０（ｍ，１Ｈ）；１．４７ｔｏ１．６２（ｍ，２Ｈ）；１．７９（ｍ，１Ｈ）；２．２２ｔｏ２．３２（ｍ，３Ｈ）；２．６３ｔｏ２．７３（ｍ，２Ｈ）；２．９２ｔｏ３．０５（ｍ，３Ｈ）；３．３５（ｐａｒｔｉａｌｌｙｍａｓｋｅｄｍ，１Ｈ）；３．７１（ｓ，２Ｈ）；３．８１（ｓ，３Ｈ）；３．８６（ｄ，Ｊ＝１．６Ｈｚ，１Ｈ）；４．２５（ｄｄｄ，Ｊ＝３．６ａｎｄ８．０ａｎｄ１１．３Ｈｚ，１Ｈ）；４．９０（ｄｄ，Ｊ＝３．６ａｎｄ９．６Ｈｚ，１Ｈ）；５．１１（ｄｄｄ，Ｊ＝１．５ａｎｄ５．２ａｎｄ１１．３Ｈｚ，１Ｈ）；５．７９（ｄｄ，Ｊ＝１．５ａｎｄ１５．０Ｈｚ，１Ｈ）；６．４７（ｄｄｄ，Ｊ＝３．６ａｎｄ１１．３ａｎｄ１５．０Ｈｚ，１Ｈ）；７．０５（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．１７（ｄｄ，Ｊ＝１．９ａｎｄ８．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．１９ｔｏ７．２６（ｍ，３Ｈ）；７．２８（ｄ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，１Ｈ）；７．３４（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ）；８．３４（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ａ２）：ＥＳｍ／ｚ＝６９８［Ｍ＋Ｈ］^＋；ｍ／ｚ＝６９６［Ｍ−Ｈ］⁻；ｍ／ｚ＝７４２［Ｍ＋ＨＣＯ_２Ｈ−Ｈ］⁻；ｔ_Ｒ＝０．８７分。

化合物７８：ＦｍｏｃＶａｌ−Ｃｉｔ−ＰＡＢＡＣ−α−アミノクリプトフィシン７７

化合物７７（１０ｍｇ、１４．３２μｍｏｌ）を無水ＤＭＦ（０．１ｍＬ）に溶解し、この後、アセトニトリル（１ｍＬ）とＤＭＦ（０．１ｍＬ）の混合物中の中間体７３（１１ｍｇ、１４．３５μｍｏｌ；ＷＯ２００６／１１０４７６に従って調製したもの）の溶液を添加する。この混合物を３時間、室温で攪拌し、この後、減圧下で濃縮する。この後、残留物を、１００／０から９０／１０ＤＣＭ／メタノール混合物で溶出させるシリカゲルでのクロマトグラフィーによって精製する。化合物７８を白色固体の形態で得る（１８ｍｇ、９５％）。ＬＣＭＳ（Ａ５）：ＥＳｍ／ｚ＝１３２５［Ｍ＋Ｈ］^＋；ｍ／ｚ＝１３６９［Ｍ＋ＨＣＯ_２Ｈ−Ｈ］⁻；ｔ_Ｒ＝４．３２分。

化合物７９：Ｖａｌ−Ｃｉｔ−ＰＡＢＡＣ−α−アミノクリプトフィシン７７

化合物７８（４２ｍｇ、３１．６８μｍｏｌ）をＤＭＦ（５ｍＬ）に溶解し、この後、ピペリジン（１５０μＬ、１．５１ｍｍｏｌ）を添加し、この混合物を３０分間、室温で攪拌する。混合物を減圧下で濃縮し、残留物を最少量のメタノールに溶解し、エーテルから沈殿させる。このようにして化合物７９を白色固体の形態で得る（２１ｍｇ、６０％）。ＬＣＭＳ（Ａ４）：ＥＳｍ／ｚ＝１１０３［Ｍ＋Ｈ］^＋；ｍ／ｚ＝１１０１［Ｍ−Ｈ］⁻；ｍ／ｚ＝１１４７［Ｍ＋ＨＣＯ_２Ｈ−Ｈ］⁻；ｔ_Ｒ＝３．６７分。

化合物８０：グルタル酸−Ｖａｌ−Ｃｉｔ−ＰＡＢＡＣ−α−アミノクリプトフィシン７７

化合物７９（２０ｍｇ、１８．１２μｍｏｌ）をＤＭＦ（１００μＬ）と無水ＤＣＭ（５００μＬ）の混合物に溶解し、この後、グルタル酸無水物（４ｍｇ、３５．０６μｍｏｌ）を添加する。得られた溶液を一晩、室温で攪拌し、この後、減圧下で濃縮する。残留物を最少量のＤＣＭおよびメタノールに溶かし、エーテルとペンタンの混合物から沈殿させ、焼結漏斗で濾過する。このようにして化合物８０を白色固体の形態で得（２３ｍｇ、１０４％粗製）、この化合物を粗製形態で次の工程において用いる。^１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：０．７８（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，６Ｈ）；０．８４（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，３Ｈ）；０．８６（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，３Ｈ）；１．００（ｓ，３Ｈ）；１．０４（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，３Ｈ）；１．１２（ｓ，３Ｈ）；１．２２ｔｏ１．４７（ｍ，３Ｈ）；１．５１ｔｏ１．６４（ｍ，３Ｈ）；１．７２（ｍ，３Ｈ）；１．８０（ｍ，１Ｈ）；１．９９（ｍ，１Ｈ）；２．２０（ｍ，４Ｈ）；２．２８（ｍ，１Ｈ）；２．５９ｔｏ２．７３（ｍ，２Ｈ）；２．９０ｔｏ３．０７（ｍ，５Ｈ）；３．３２（ｐａｒｔｉａｌｌｙｍａｓｋｅｄｍ，１Ｈ）；３．８１（ｓ，３Ｈ）；３．８７（ｂｒｏａｄｓ，１Ｈ）；４．１９（ｍ，３Ｈ）；４．２４（ｍ，１Ｈ）；４．３８（ｍ，１Ｈ）；４．９１（ｄｄ，Ｊ＝３．３ａｎｄ９．６Ｈｚ，１Ｈ）；４．９７（ｂｒｏａｄｓ，２Ｈ）；５．１０（ｄｄ，Ｊ＝４．４ａｎｄ１０．７Ｈｚ，１Ｈ）；５．４０（ｂｒｏａｄｓ，２Ｈ）；５．７９（ｂｒｏａｄｄ，Ｊ＝１５．１Ｈｚ，１Ｈ）；５．９９（ｂｒｏａｄｍ，１Ｈ）；６．４７（ｄｄｄ，Ｊ＝３．６ａｎｄ１１．３ａｎｄ１５．１Ｈｚ，１Ｈ）；７．０５（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．１７（ｂｒｏａｄｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．２０ｔｏ７．３４（ｍ，８Ｈ）；７．６０（ｂｒｏａｄｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，２Ｈ）；７．７６（ｂｒｏａｄｔ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，１Ｈ）；７．８３（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）；８．０９（ｂｒｏａｄｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，１Ｈ）；８．３４（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ）；９．９５（ｂｒｏａｄｓ，１Ｈ）；１１．９８（ｂｒｏａｄｍ，１Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ａ２）：ＥＳｍ／ｚ＝１２１７［Ｍ＋Ｈ］^＋；ｍ／ｚ＝１２１５［Ｍ−Ｈ］⁻；ｔ_Ｒ＝１．０３分。

実施例２３

実施例２３は、実施例２２について説明した方法に従って酸８０を活性化することによって得ることができる。

４−（（２Ｓ，３Ｓ）−３−｛（Ｓ）−１−［（Ｅ）−（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−３−イソブチル−６，６−ジメチル−２，５，９，１２−テトラオキソ−１，４−ジオキサ−８，１１−ジアザシクロヘキサデカ−１３−エン−１６−イル］エチル｝オキシラニル）ベンジル［２−メチル−２−（ピリジン−２−イルジスルファニル）プロピル］メチルカルバマート

化合物８１：メチル［２−メチル−２−（ピリジン−２−イルジスルファニル）プロピル］アミン

ＭｅＯＨ（３５ｍＬ）中のアミン１５（４７８ｍｇ、２．９０ｍｍｏｌ）の溶液にＴＣＥＰ（８３１ｍｇ、２．９ｍｍｏｌ）を添加する。２時間、室温で反応させた後、得られた溶液をエタノール（７０ｍＬ）中の２，２’−ジピリジルジスルフィド（９６０ｍｇ、４．３６ｍｍｏｌ）の溶液にアルゴン雰囲気下で一滴ずつ添加する。さらに２時間、室温で反応させた後、この混合物を減圧下で濃縮する。残留物をＤＣＭに溶かし、ＮａＨＣＯ_３飽和水溶液で洗浄する。有機相を分離し、この後、水性相をＤＣＭでさらに２回抽出する。併せた有機相をＮａ_２ＳＯ_４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮する。この粗生成物を、９８／２から８５／１５ＤＣＭ／メタノール混合物で溶出させるシリカゲルでのクロマトグラフィーによって精製する。化合物８１を淡黄色の油の形態で得る（５８７ｍｇ、８９％）。^１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：１．２５（ｓ，６Ｈ）；１．８０（ｂｒｏａｄｍ，１Ｈ）；２．１９（ｓ，３Ｈ）；２．４５（ｓ，２Ｈ）；７．２２（ｄｄｄ，Ｊ＝１．５ａｎｄ５．０ａｎｄ７．０Ｈｚ，１Ｈ）；７．７４ｔｏ７．８５（ｍ，２Ｈ）；８．４２（ｄｄｄ，Ｊ＝１．１ａｎｄ１．５ａｎｄ５．０Ｈｚ，１Ｈ）。

実施例２４：４−（（２Ｓ，３Ｓ）−３−｛（Ｓ）−１−［（Ｅ）−（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−３−イソブチル−６，６−ジメチル−２，５，９，１２−テトラオキソ−１，４−ジオキサ−８，１１−ジアザシクロヘキサデカ−１３−エン−１６−イル］エチル｝オキシラニル）ベンジル［２−メチル−２−（ピリジン−２−イルジスルファニル）プロピル］メチルカルバマート

無水ＤＣＭ中の中間体５８（２１ｍｇ、２４．３μｍｏｌ）の溶液に、アミン８１（１０ｍｇ、４３．７９μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（８μＬ、４５．４３μｍｏｌ）を添加する。室温で２４時間後、ＮａＨＣＯ_３飽和水溶液を添加し、この混合物をＤＣＭで３回抽出する。併せた有機相をＮａ_２ＳＯ_４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮する。この粗生成物を、１００／０から９５／５ＤＣＭ／メタノール混合物で溶出させるシリカゲルでのクロマトグラフィーによって精製する。このようにして化合物Ｅｘ．２４を無色の固体の形態で得る（７ｍｇ、３０％）。^１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：０．８２（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，３Ｈ）；０．８４（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，３Ｈ）；０．９７（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ）；１．０３（ｓ，３Ｈ）；１．１４（ｓ，３Ｈ）；１．２５（ｂｒｏａｄｓ，６Ｈ）；１．４５ｔｏ１．６８（ｍ，３Ｈ）；１．８８（ｍ，１Ｈ）；２．４２（ｐａｒｔｉａｌｌｙｍａｓｋｅｄｍ，１Ｈ）；２．５８ｔｏ２．７５（ｍ，２Ｈ）；２．８３ｔｏ３．０９（ｍ，６Ｈ）；３．３４（ｐａｒｔｉａｌｌｙｍａｓｋｅｄｍ，１Ｈ）；３．４６（ｂｒｏａｄｓ，２Ｈ）；３．８１（ｂｒｏａｄｓ，４Ｈ）；４．２８（ｍ，１Ｈ）；４．９１ｔｏ５．１７（ｍ，４Ｈ）；５．８８（ｂｒｏａｄｄ，Ｊ＝１５．２Ｈｚ，１Ｈ）；６．４９（ｍ，１Ｈ）；７．０５（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，１Ｈ）；７．１５ｔｏ７．３８（ｍ，８Ｈ）；７．８０（ｂｒｏａｄｍ，２Ｈ）；８．３９（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ）；８．４３（ｂｒｏａｄｄ，Ｊ＝４．６Ｈｚ，１Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ａ２）：ＥＳｍ／ｚ＝９５３［Ｍ＋Ｈ］^＋；ｍ／ｚ＝４７７［Ｍ＋２Ｈ］^２＋；ｍ／ｚ＝９９７［Ｍ＋ＨＣＯ_２Ｈ−Ｈ］⁻；ｔ_Ｒ＝１．２３分。

ｈｕ２Ｈ１１−Ｅｘ１７

一般法に従って、５．６６ｍｇ／ｍＬの濃度で８．３１ｍｇ（０．０５７μｍｏｌ、１．４８６ｍＬ）の裸の抗体ｈｕ２Ｈ１１を、最終抗体濃度が混合物中３ｍｇ／ｍＬになるように、３７．３μＬのＤＭＡに溶解した５当量の化合物Ｅｘ．１７（０．４４２ｍｇ、０．３４０μｍｏｌ）で処理する。Ｓｕｐｅｒｄｅｘ２００ｐｇで精製し、ＡｍｉｃｏｎＵｌｔｒａ−１５（Ｕｌｔｒａｃｅｌ５０ｋ膜、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）で濃縮した後、１抗体あたり平均で２．２の細胞傷害性単位、および０．０１Ｍのリン酸塩と０．１４ＭのＮａＣｌと２０容量％のＮＭＰとを含有する水性ｐＨ６．５緩衝液中９９．７％のモノマー純度を有する２．１５ｍＬのコンジュゲートを２．４８ｍｇ／ｍＬの濃度で得る。１ｍＬのコンジュゲートに対して０．０１Ｍのリン酸塩と０．１４ＭのＮａＣｌとを含有する水性ｐＨ６．５緩衝液中で最終緩衝液交換を行う。このようにして、１抗体あたり（ＵＶによって判定して）平均で２．８のクリプトフィシン誘導体および９９．７％のモノマー純度を有する１．５ｍＬのコンジュゲートＥｘ．２５の溶液を１．０６ｍｇ／ｍＬの濃度で得る。

ｈｕ２Ｈ１１−Ｅｘ１８

一般法に従って、５．３５ｍｇ／ｍＬの濃度で７．８ｍｇ（０．０５３μｍｏｌ、１．４５８ｍＬ）の裸の抗体ｈｕ２Ｈ１１を、最終抗体濃度が混合物中３ｍｇ／ｍＬになるように、２７２μＬのＤＭＡに溶解した６当量の化合物Ｅｘ．１８（０．５７８ｍｇ、０．５３１μｍｏｌ、純度６０％）で処理する。Ｓｕｐｅｒｄｅｘ２００ｐｇで精製し、ＡｍｉｃｏｎＵｌｔｒａ−１５（Ｕｌｔｒａｃｅｌ５０ｋ膜、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）で濃縮した後、１抗体あたり平均で２．５のクリプトフィシン誘導体および０．０１Ｍのリン酸塩と０．１４ＭのＮａＣｌと２０容量％のＮＭＰとを含有する水性ｐＨ６．５緩衝液中１００％のモノマー純度を有する２．３５ｍＬのコンジュゲートを２．４９ｍｇ／ｍＬの濃度で得る。１ｍＬのコンジュゲートに対して０．０１Ｍのリン酸塩と０．１４Ｍの塩化ナトリウムとを含有する水性ｐＨ６．５緩衝液中で最終緩衝液交換を行う。このようにして、１抗体あたり（ＵＶによって判定して）平均で２．２２のクリプトフィシン誘導体および９９．９％のモノマー純度を有する１．５ｍＬのコンジュゲートＥｘ．２６の溶液を０．８４ｍｇ／ｍＬの濃度で得る。

ｈｕ２Ｈ１１−Ｅｘ１９

一般法に従って、１０．２４ｍｇ／ｍＬの濃度で１２ｍｇ（８１．７μｍｏｌ、１．１７２ｍＬ）の裸の抗体ｈｕ２Ｈ１１を、最終抗体濃度がこの反応媒体中３ｍｇ／ｍＬになるように、４４．３μＬのＤＭＡに溶解した２×５当量の化合物Ｅｘ．１９（０．３８２ｍｇ、０．４１μｍｏｌ）で処理する。２０％ＮＭＰの存在下、Ｓｕｐｅｒｄｅｘ２００ｐｇで精製し、ＡｍｉｃｏｎＵｌｔｒａ−１５（Ｕｌｔｒａｃｅｌ５０ｋ膜、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）で濃縮した後、０．０１Ｍのリン酸塩と０．１４ＭのＮａＣｌと２０容量％のＮＭＰとを含有する水性ｐＨ６．５緩衝液中の１．０４ｍＬのコンジュゲートを得る。０．０１Ｍのヒスチジンと１０％のスクロース（ｗ／ｖ）と５％のＮＭＰ（ｖ／ｖ）とを含有する水性ｐＨ６．５緩衝液中で最終緩衝液交換を行う。このようにして、１抗体あたり平均で１．４のクリプトフィシン誘導体（ＨＲＭＳ）および９９．８％のモノマー純度を有する１．５ｍＬのコンジュゲートＥｘ．２７の溶液を２．６６ｍｇ／ｍＬの濃度で得る。

上に与えた実施例は、特定のクリプトフィシン誘導体（多くの場合、誘導体Ｄ_１）を用いて調製したが、群Ｄ_１−Ｄ_８の別の誘導体にまたは一般式（ＩＩ）のクリプトフィシン誘導体に適用することができる。類似して、実施例１０、１１、１２、２５、２６および２７におけるコンジュゲートの実施例をｈｕ２Ｈ１１以外の抗体に適用することができる。

注記：前記実施例において、−Ｌｙｓ−は、結合が抗体のリシンのε−アミノ基上で起こることを意味する。

細胞傷害剤によるＭＤＡ−ＭＢ−２３１、ＭＤＡ−Ａ１およびＨＣＴ１１６細胞系の増殖の阻害の評価、タイプＳＺ_ａ（この場合、Ｚ_ａ＝ＳＭｅ）またはタイプ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｚ_ｂＲ_ｂ（この場合、Ｚ_ｂＲ_ｂ＝ＯＭｅまたはＯＣＨ_２−ＣＨ＝ＣＨ_２）の式（ＩＩ）の化合物で行った研究
指数増殖期のＭＤＡ−ＭＢ−２３１、ＭＤＡ−Ａ１またはＨＣＴ１１６細胞をトリプシン処理し、これらのそれぞれの培養基（ＭＤＡ細胞についてはＤＭＥＭ／Ｆ１２Ｇｉｂｃｏ＃２１３３１、１０％ＦＣＳＧｉｂｃｏ＃１０５００−０５６、２ｎＭグルタミンＧｉｂｃｏ＃２５０３０；ＨＣＴ１１６細胞についてはＤＭＥＭＧｉｂｃｏ＃１１９６０、１０％ＦＣＳＧｉｂｃｏ＃１０５００−０５６、２ｍＭグルタミンＧｉｂｃｏ＃２５０３０）に再び浮遊させる。細胞浮遊液をＣｙｔｏｓｔａｒ９６ウエル培養プレート（ＧＥＨｅａｌｔｈｃａｒｅＥｕｒｏｐｅ、＃ＲＰＮＱ０１６３）における血清を含有する全培地に５０００細胞／ウエルの密度で接種する（ＭＤＡ−ＭＢ−２３１、ＤＭＡ−Ａ１、ＨＣＴ１１６）。４時間のインキュベーション後、クリプトフィシン誘導体の系列希釈物をこれらのウエルに１０^−７から１０^−１２Ｍの漸減濃度で（各濃度について三重反復で）添加する。３日間、３７℃で、５％ＣＯ_２を含有する雰囲気下、細胞傷害剤の存在下で細胞を培養する。第４日に、各ウエルに１０μＬの^１４Ｃ−チミジン溶液（０．１μＣｉ／ウエル、ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ＃ＮＥＣ５６８２５０００）を添加する。実験開始の９６時間後、マイクロベータ放射能カウンター（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）を使用して^１４Ｃ−チミジンの取り込みを測定する。細胞傷害剤で処理した細胞で得られた低減されたカウントと（培養基のみで処理した）対照ウエルの細胞で得たカウントとの比を決定することにより、生存率の形でデータを表示する。

抗体−細胞傷害剤コンジュゲートによるＭＤＡ−ＭＢ−２３１、ＭＤＡ−Ａ１およびＨＣＴ１１６細胞系の増殖の阻害の評価
指数増殖期のＭＤＡ−ＭＢ−２３１、ＭＤＡ−Ａ１またはＨＣＴ１１６細胞をトリプシン処理し、これらのそれぞれの培養基（ＭＤＡ細胞についてはＤＭＥＭ／Ｆ１２Ｇｉｂｃｏ＃２１３３１、１０％ＦＣＳＧｉｂｃｏ＃１０５００−０５６、２ｎＭグルタミンＧｉｂｃｏ＃２５０３０；ＨＣＴ１１６細胞についてはＤＭＥＭＧｉｂｃｏ＃１１９６０、１０％ＦＣＳＧｉｂｃｏ＃１０５００−０５６、２ｍＭグルタミンＧｉｂｃｏ＃２５０３０）に再び浮遊させる。細胞浮遊液をＣｙｔｏｓｔａｒ９６ウエル培養プレート（ＧＥＨｅａｌｔｈｃａｒｅＥｕｒｏｐｅ、＃ＲＰＮＱ０１６３）における血清を含有する全培地に５０００細胞／ウエルの密度で接種する（ＭＤＡ−ＭＢ−２３１、ＤＭＡ−Ａ１、ＨＣＴ１１６）。４時間のインキュベーション後、クリプトフィシン誘導体の系列希釈物をこれらのウエルに１０^−７から１０^−１２Ｍの漸減濃度で（各濃度について三重反復で）添加する。３７℃、５％ＣＯ_２を含有する雰囲気で、抗体−細胞傷害剤イムノコンジュゲートの存在下、３日間、細胞を培養する。第４日に、１０μＬの^１４Ｃ−チミジン溶液（０．１μＣｉ／ウエル、ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ＃ＮＥＣ５６８２５０００）を各ウエルに添加する。実験開始の９６時間後、マイクロベータ放射能カウンター（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）を用いて^１４Ｃ−チミジンの取り込みを測定する。イムノコンジュゲートで処理した細胞で得られた低減されたカウントと（培養基のみで処理した）対照ウエルの細胞で得たカウントとの比を決定することにより、生存率の形でデータを表示する。一定の実験では、裸の抗体ｈｕ２Ｈ１１を実験開始時に１μＭの濃度でウエルに添加し、前に説明したように増殖の阻害を測定した。

Claims

式（ＩＩ）のクリプトフィシン誘導体：

［式中、
Ｒ_１は、ハロゲン原子を表し、およびＲ_２は、基−ＯＨ、アミノ酸ＡＡに由来するアシル基、もしくは基（Ｃ_１−Ｃ_４）アルカノイルオキシを表し；
または代替的にＲ_１およびＲ_２は、エポキシド単位を形成し；
ＡＡは、天然または非天然アミノ酸を示し；
Ｒ_３は、基（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキルを表し；
Ｒ_４およびＲ_５は、両方ともＨを表し、または一緒にＣ１３とＣ１４の間の二重結合ＣＨ＝ＣＨを形成し；
Ｒ_６およびＲ_７は、互いに独立して、Ｈまたは基（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキルを表し；
Ｒ_８およびＲ_９は、互いに独立して、Ｈまたは基（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキルを表し；
Ｒ_１０は、Ｈ、基ＯＨ、（Ｃ_１−Ｃ_４）アルコキシ、ハロゲン原子または基−ＮＨ_２、−ＮＨ（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキルもしくは−Ｎ（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル_２から選択されるフェニル核の少なくとも１つの置換基を表し；
Ｒ_１１は、Ｈおよび基（Ｃ_１−Ｃ_４）アルキルから選択されるフェニル核の少なくとも１つの置換基を表し；
Ｌは、
−Ｇ’Ｘ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｙ（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＱＲＣＧ_１；
−Ｇ’Ｘ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｙ−Ｙ’−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＱＲＣＧ_１；
−Ｇ’Ｘ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ（ＣＲ_１７＝ＣＲ_１８）（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｙＱＲＣＧ_１；
−Ｇ’Ｘ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｙ（ＣＲ_１７＝ＣＲ_１８）（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＱＲＣＧ_１；
−Ｇ’Ｘ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−フェニル−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＹ’ＱＲＣＧ_１；−Ｇ’Ｘ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−フリル−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＹ’ＱＲＣＧ_１；
−Ｇ’Ｘ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−オキサゾリル−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＹ’ＱＲＣＧ_１；−Ｇ’Ｘ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−チアゾリル−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＹ’ＱＲＣＧ_１；−Ｇ’Ｘ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−チエニル−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＹ’ＱＲＣＧ_１；−Ｇ’Ｘ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−イミダゾリル−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＹ’ＱＲＣＧ_１；−Ｇ’Ｘ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−ピペラジニル−ＣＯ（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＹ’ＱＲＣＧ_１；−Ｇ’Ｘ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−ピペリジル−メチル−ＮＲ_１２−ＣＯ（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＹ’ＱＲＣＧ_１；−Ｇ’Ｘ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−ピペリジル−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＹ’ＱＲＣＧ_１；−Ｇ’Ｘ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−ピペリジル−ＮＲ_１２−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＹ’ＱＲＣＧ_１；−Ｇ’Ｘ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−トリアゾリル−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＹ’ＱＲＣＧ_１；−Ｇ’Ｘ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−トリアゾリル−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＹ’ＱＲＣＧ_１；
−Ｇ’Ｘ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−フェニル−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＱＲＣＧ_１；−Ｇ’Ｘ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−フリル−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＱＲＣＧ_１、−Ｇ’Ｘ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−オキサゾリル−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＱＲＣＧ_１；−Ｇ’Ｘ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−チアゾリル−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＱＲＣＧ_１；−Ｇ’Ｘ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−チエニル−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＱＲＣＧ_１；−Ｇ’Ｘ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−イミダゾリル−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＱＲＣＧ_１；−Ｇ’Ｘ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−ピペラジニル−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＱＲＣＧ_１；−Ｇ’Ｘ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−ピペリジル−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＱＲＣＧ_１；−Ｇ’Ｘ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−ピペリジル−メチル−ＮＲ_１２−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＱＲＣＧ_１；−Ｇ’Ｘ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−ピペリジル−ＮＲ_１２−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＱＲＣＧ_１；−Ｇ’Ｘ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−トリアゾリル−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＱＲＣＧ_１；
または
−Ｇ”Ｙ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｙ（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＱＲＣＧ_１；
−Ｇ”Ｙ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｙ−Ｙ’−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＱＲＣＧ_１；
−Ｇ”Ｙ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ（ＣＲ_１７＝ＣＲ_１８）（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｙＱＲＣＧ_１；
−Ｇ”Ｙ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｙ（ＣＲ_１７＝ＣＲ_１８）（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＱＲＣＧ_１；
−Ｇ”Ｙ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−フェニル−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＹ’ＱＲＣＧ_１；−Ｇ”Ｙ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−フリル−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＹ’ＱＲＣＧ_１；−Ｇ”Ｙ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−オキサゾリル−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＹ’ＱＲＣＧ_１；−Ｇ”Ｙ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−チアゾリル−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＹ’ＱＲＣＧ_１；−Ｇ”Ｙ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−チエニル−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＹ’ＱＲＣＧ_１；−Ｇ”Ｙ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−イミダゾリル−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＹ’ＱＲＣＧ_１；−Ｇ”Ｙ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−ピペラジニル−ＣＯ（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＹ’ＱＲＣＧ_１；−Ｇ”Ｙ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−ピペリジル−メチル−ＮＲ_１２−ＣＯ（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＹ’ＱＲＣＧ_１；−Ｇ”Ｙ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−ピペリジル−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＹ’ＱＲＣＧ_１；−Ｇ”Ｙ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−ピペリジル−ＮＲ_１２−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＹ’ＱＲＣＧ_１；−Ｇ”Ｙ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−トリアゾリル−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＹ’ＱＲＣＧ_１；
−Ｇ”Ｙ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−フェニル−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＱＲＣＧ_１；−Ｇ”Ｙ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−フリル−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＱＲＣＧ_１、
−Ｇ”Ｙ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−オキサゾリル−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＱＲＣＧ_１；−Ｇ”Ｙ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−チアゾリル−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＱＲＣＧ_１；−Ｇ”Ｙ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−チエニル−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＱＲＣＧ_１；−Ｇ”Ｙ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−イミダゾリル−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＱＲＣＧ_１；−Ｇ”Ｙ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−ピペラジニル−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＱＲＣＧ_１；−Ｇ”Ｙ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−ピペラジニル−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＱＣＣＲ_１；Ｇ”Ｙ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−ピペリジル−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＱＲＣＧ_１；−Ｇ”Ｙ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−ピペリジル−メチル−ＮＲ_１２−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＱＲＣＧ_１；−Ｇ”Ｙ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−ピペリジル−ＮＲ_１２−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＱＲＣＧ_１；−Ｇ”Ｙ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ−トリアゾリル−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＱＲＣＧ_１；；
（これらの式中、
Ｇ’は、基−ＣＨ＝ＣＨ−または−（ＣＨ_２）_ｎ−を表し；
Ｇ”は、基−（ＣＨ_２）_ｎ−を表し；
ｎは、１から６にわたる整数を表し；
Ｘは、単結合または基−ＣＯ−、−ＣＯＯ−もしくは−ＣＯＮＲ_１２−を表し、前記基ＣＯは、Ｇ’に結合しており；
Ｙは、基−Ｏ−、−ＯＣＯ−、−ＯＣＯＯ−、−ＯＣＯＮＲ_１２−、−ＮＲ_１２−、−ＮＲ_１２ＣＯ−、−ＮＲ_１２ＣＯＮＲ’_１２−、−ＮＲ_１２ＣＯＯ−または−Ｓ（Ｏ）_ｑ−を表し、前記原子Ｏおよび基ＮＲ_１２は、Ｇ”に結合しており；
ｑは、０、１または２であり得る整数を表し；
Ｙ’は、基−Ｏ−、−ＯＣＯ−、−ＯＣＯＯ−、−ＯＣＯＮＲ_１２−、−ＮＲ_１２−、−ＮＲ_１２ＣＯ−、−ＮＲ_１２ＣＯＮＲ’_１２−、−ＮＲ_１２ＣＯＯ−、−Ｓ（Ｏ）_ｑ−、−ＣＯ−、−ＣＯＯ−または−ＣＯＮＲ_１２−を表し；
Ｒ_１２、Ｒ’_１２、Ｒ_１３、Ｒ_１４、Ｒ_１５、Ｒ_１６、Ｒ_１７およびＲ_１８は、互いに独立して、Ｈまたは基（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキルを表し；
ｔ、ｕおよびＹは、０から２０にわたり得る、およびｔ＋ｕ＋ｙが１以上であるような、整数を表し；
式−Ｇ”Ｙ（ＣＲ_１３Ｒ_１４）_ｔ（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_Ｙ−Ｙ’−（ＣＲ_１５Ｒ_１６）_ｕＱＲＣＧ_１のリンカーの場合、ｙが０でありおよびＱが単結合を表すならば、ｕは０であることができず；
Ｑは、単結合、基（Ｃ_１−Ｃ_１０）アルキレンまたは基（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｉを表し、ｉは、１から２０、さらに特に１から１０、さらにいっそう特に１から８または１から６、およびさらにいっそう特に２から５にわたる整数であり；
ＲＣＧ１は、−ＳＺ_ａ、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｚ_ｂＲ_ｂ、

または

を表し、この場合のＲ_１２は、Ｈもしくは（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル、さらに特にメチル基を表す。）
から選択される単位ＲＣＧ_１を有するフェニル核のオルト（ｏ）、メタ（ｍ）またはパラ（ｐ）位の、好ましくはパラ位の、リンカーを表し；
またはＬは；

−ＡＬＫ−ＳＺ_ａまたは−（ＣＨ_２）_ｎ−ＳＺ_ａ
（これらの式中、

は、次の９つの基：

のうちの１つを表し；
ｎは、１から６にわたる整数を表し；
ＡＬＫは、基（Ｃ_１−Ｃ_１２）アルキレンを表し；
Ｒ_１２およびＲ’_１２は、互いに独立して、Ｈまたは基（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル、さらに特にメチル基を表し；
ｉは、１から２０、さらに特に１から１０、さらにいっそう特に１から８または１から６およびさらにいっそう特に２から５にわたる整数を表す。）
から選択され；
または代替的に、Ｌは、式（ＩＶ）のリンカーである：

（この式中、
（ＡＡ）_ｗは、ペプチド結合によって互いに接続されているｗ個のアミノ酸ＡＡの配列を表し；
ｗは、１から１２および好ましくは１から６にわたる整数を表し；
ｎは、１から６にわたる整数を表し；
Ｄは、次の単位：

のうちの１つを表し；
これらの式について、
Ｒ_１２は、Ｈまたは基（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキルを表し；
Ｒ_１９、Ｒ_２０、Ｒ_２１およびＲ_２２は、互いに独立して、Ｈ、ハロゲン原子、−ＯＨ、−ＣＮまたは基（Ｃ_１−Ｃ_４）アルキルを表し；
（ＣＨ_２）_ｎに結合しているＴは、ＮＲ_１２またはＯを表し；
Ｖ_１は、Ｏ、ＳまたはＮＲ_１２を表し；
Ｖ_２は、ＣＲ_２２またはＮを表し；
Ｖ_３、Ｖ_４およびＶ_５は、互いに独立して、ＣＲ_２２およびＮから選択され；
Ｚ_ａは、Ｈまたは基−ＳＲ_ａを表し、Ｒ_ａは、基（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル、（Ｃ_３−Ｃ_７）シクロアルキル、アリール、ヘテロアリールまたは（Ｃ_３−Ｃ_７）ヘテロシクロアルキルを表し；
Ｚ_ｂは、単結合、−Ｏ−または−ＮＨ−を表し、Ｒ_ｂは、Ｈまたは基（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル、（Ｃ_３−Ｃ_７）シクロアルキル、アリール、ヘテロアリールもしくは（Ｃ_３−Ｃ_７）ヘテロシクロアルキルを表す。）。］。
Ｒ_１０が、Ｈ、基ＯＨ、（Ｃ_１−Ｃ_４）アルコキシ、ハロゲン原子から選択されるフェニル核上の少なくとも１つの置換基を表す、請求項１に記載のクリプトフィシン誘導体。
ＲＣＧ１が、−ＳＺ_ａまたはＣ（＝Ｏ）−Ｚ_ｂＲ_ｂを表す、請求項１または２に記載のクリプトフィシン誘導体。
が、次の７つの基：

のうちの１つを表す、請求項１から３に記載のクリプトフィシン誘導体。
ｎが、１である、請求項１から４に記載のクリプトフィシン誘導体。
Ｌが、

−ＣＨ_２ＳＺ_ａ；−ＡＬＫ−ＳＺ_ａ
（Ｒ_１２およびＲ’_１２は、互いに独立して、Ｈまたは基（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル、さらに特にメチル基を表し；
ｉは、１から２０、さらに特に１から１０、さらにいっそう特に１から８または１から６、およびさらにいっそう特に２から５にわたる整数を表し；
Ｚ_ａは、Ｈまたは基−ＳＲ_ａを表し、Ｒ_ａは、基（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル、（Ｃ_３−Ｃ_７）シクロアルキル、アリール、ヘテロアリールまたは（Ｃ_３−Ｃ_７）ヘテロシクロアルキルを表し；
Ｚ_ｂは、単結合、−Ｏ−または−ＮＨ−を表し、Ｒ_ｂは、Ｈまたは基（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル、（Ｃ_３−Ｃ_７）シクロアルキル、アリール、ヘテロアリールもしくは（Ｃ_３−Ｃ_７）ヘテロシクロアルキルを表す。）
から選択される、請求項１に記載のクリプトフィシン誘導体。
Ｌが、

（Ｒ_１２は、Ｈまたは基（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル、さらに特にメチル基を表す。）
から選択される、請求項１に記載のクリプトフィシン誘導体。
Ｒ_１２が、Ｈを表す、請求項７に記載のクリプトフィシン誘導体。
Ｒ_１２が、（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル、さらに特にメチル基を表す、請求項７に記載のクリプトフィシン誘導体。
Ｚ_ａが、Ｈもしくは−Ｓ（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル、特に−ＳＭｅ、もしくは−Ｓ−ヘテロアリール、特に

を表し、またはＺ_ｂＲ_ｂが、−Ｏ（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル、−ＯＨ、−ＯＣＨ_３、−ＯＣＨ_２ＣＨ＝ＣＨ_２、

もしくは

もしくは基

（この式中のＧＩは、少なくとも１つの電気誘導性基を表す。）を表し、または代替的に−Ｃ（＝Ｏ）Ｚ_ｂＲ_ｂが、

を表す、請求項１から９に記載のクリプトフィシン誘導体。
Ｌが、好ましくはパラ位にある、下記の式のうちの１つによって定義される、請求項１から１０のうちの一項に記載のクリプトフィシン誘導体：
（Ｚ_ａ、Ｚ_ｂおよびＲ_ｂは、請求項１または１０において定義したとおりである。）
から選択される、請求項１に記載のクリプトフィシン誘導体。
式（ＩＩＩ）のクリプトフィシン誘導体：

［式中、Ｒ_１からＲ_１１は、請求項１、１１または１２の場合と同じ意味を有し、およびＧは、単位ＣＲ_１を有するフェニル核上のオルト（ｏ）、メタ（ｍ）またはパラ（ｐ）位、好ましくはパラ位にある基−（ＣＨ_２）_ｎＹを表し、ｎは、１から６にわたる整数であり、およびＹは、−Ｎ_３；−ＮＲ_１２−ＣＨ_２−Ｃ≡ＣＨ（この場合のＲ_１２は、Ｈもしくは基（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキルを表す。）；−ＯＭｓ；−ＯＣ（＝Ｏ）−Ｏ−（４−ニトロフェニル）、

または

（Ｒ_１２は、Ｈもしくは（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル、さらに特にメチル基を表す。）を示す。］。
Ｙが、−Ｎ_３；−ＮＲ_１２−ＣＨ_２−Ｃ≡ＣＨ（この場合のＲ_１２は、Ｈもしくは基（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキルを表す。）；−ＯＭｓまたは−ＯＣ（＝Ｏ）−Ｏ−（４−ニトロフェニル）を表す、請求項１３に記載のクリプトフィシン誘導体。
結合剤にコンジュゲートさせることを意図したものである、請求項１から１２のうちの一項に記載のクリプトフィシン誘導体またはＧ＝−（ＣＨ_２）_ｎＹ（この場合、Ｙ＝−Ｃｌ、−Ｎ_３、−ＯＨ、−ＮＨ_２、マレイミド、ハロアセトアミド）を有する請求項１３に記載の式（ＩＩＩ）のクリプトフィシン誘導体。
結合剤が、リガンド、タンパク質、抗体、さらに特にモノクローナル抗体、タンパク質もしくは抗体フラグメント、ペプチド、オリゴヌクレオチドまたはオリゴ糖である、請求項１５に記載のクリプトフィシン誘導体。
コンジュゲートと呼ばれる、少なくとも１つのクリプトフィシン誘導体に結合している結合剤を調製するための方法であって、
（ｉ）場合により緩衝された結合剤の水溶液と請求項１から１６のうちの一項に記載のクリプトフィシン誘導体の溶液を接触させ、放置して反応させる工程；
（ｉｉ）ならびに次に、工程（ｉ）において形成されたコンジュゲートを、クリプトフィシン誘導体および／または未反応結合剤および／または形成された任意の凝集体から場合により分離する工程
に存する方法。
タイプ−ＳＺ_ａの反応性化学基ＲＣＧ１を含むクリプトフィシン誘導体が存在する場合には、結合剤が、
ＲＣＧ１が−ＳＨを表す場合、ジスルフィド化学基；
ＲＣＧ１が、−ＳＺ_ａ（この場合、Ｚ_ａ≠Ｈ）を表す場合、チオール化学基；
ＲＣＧ１が−ＳＨを表す場合、マレイミドまたはヨードアセトアミド化学基
を含む；
タイプ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｚ_ｂＲ_ｂの反応性化学基ＲＣＧ１を含むクリプトフィシン誘導体が存在する場合には、該クリプトフィシン誘導体が、結合剤のアミノ官能基、とりわけ抗体のリシン残基（Ｌｙｓ）の側鎖が持つε−アミノ基と反応される；
Ｇ＝−（ＣＨ_２）_ｎＹを有する式（ＩＩＩ）のクリプトフィシン誘導体が存在する場合には、結合剤が、Ｙ＝−Ｃｌもしくは−マレイミドのときには基−ＳＨを、Ｙ＝−Ｎ_３のときには基−Ｃ≡ＣＨを、またはＹ＝−ＯＨもしくは−ＮＨ_２のときにはカルボン酸基を含む；
マレイミドまたはハロアセトアミドタイプの反応性化学基ＲＣＧ１を含むクリプトフィシン誘導体が存在する場合には、結合剤が、チオール化学基を含む、
請求項１７に記載の方法。
タイプ−ＳＺ_ａの反応性化学基ＲＣＧ１を含むクリプトフィシン誘導体が存在する場合には、結合剤が、式

の化合物（この式中、Ｒは、基（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル、アリール、ヘテロアリール、（Ｃ_３−Ｃ_７）シクロアルキル、（Ｃ_３−Ｃ_７）ヘテロシクロアルキルを表し、およびＡＬＫは、基（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキレンを表す。）；

式：

のＰＥＧ化類似体または式

のスルホン酸類似体（これらの式中、Ｘ_３、Ｘ_４、Ｘ_５およびＸ_６は、Ｈまたは基（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキルを表し、Ｘ_１およびＸ_２は、−Ｈ、−ＣＯＮＸ_８Ｘ_９、−ＮＯ_２を表し、Ｘ_８およびＸ_９は、Ｈまたは基（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキルを表し、Ｘ_７は、−ＳＯ_３ ⁻Ｍ^＋もしくはＨを表し、または代替的に第四級アンモニウム基を表し、ならびにａは、０から４にわたる整数を示し、およびｂは、０から２０００にわたる整数を示す。）；

（この式中、
−Ｈａｌは、ハロゲン原子を表し；
−Ｘ_１０は、ハロゲン原子もしくは基ＣＯＯＸ_１４、ニトロ、非置換もしくはハロゲン化（Ｃ_１−Ｃ_８）アルキル、非置換もしくはハロゲン化（Ｃ_１−Ｃ_８）アルコキシ、非置換もしくはハロゲン化（Ｃ_２−Ｃ_８）アルケニル、非置換もしくはハロゲン化（Ｃ_２−Ｃ_８）アルキニル、非置換（Ｃ_３−Ｃ_８）シクロアルキル、非置換であるアリール、またはアミノ、ハロゲン原子、非置換もしくはハロゲン化（Ｃ_１−Ｃ_８）アルキル基、非置換もしくはハロゲン化（Ｃ_１−Ｃ_８）アルコキシから選択される１から３個の置換基で置換されているアリールを表し；
−Ｘ_１１、Ｘ_１２およびＸ_１３のそれぞれは、独立して、水素原子を表し、もしくはＸ_３を表すことがあり；
またはＸ_１０およびＸ_１１は、非置換であるもしくは１から５個の基（Ｃ_１−Ｃ_４）アルキルで置換されている環（Ｃ_２−Ｃ_５）アルキレンを一緒に形成し；
またはＸ_１０およびＸ_１１は、Ｘ_１２と一緒に、非置換であるもしくは１から５個の基（Ｃ_１−Ｃ_４）アルキルで置換されている環（Ｃ_１−Ｃ_５）アルキレンを形成し；
ならびにＸ_１４は、−Ｈまたは基（Ｃ_１−Ｃ_８）アルキルである。）
から選択される修飾剤で修飾される；
タイプ−ＳＨの反応性化学基ＲＣＧ１を含むクリプトフィシン誘導体が存在する場合には、結合剤が、スクシンイミジル−４−（Ｎ−マレイミドメチル）シクロヘキサン−１−カルボキシラート；スクシンイミジル４−（Ｎ−マレイミドメチル）シクロヘキサン−１−カルボキシラート；

（ＡＬＫは、基（Ｃ_１−Ｃ_１２）アルキレンを示し、およびｂは、０と２０００の間の整数である。）；

スクシンイミジル−Ｎ−ブロモアセタート；スクシンイミジル−３−（Ｎ−ブロモアセトアミド）プロピオナート；

（ｂは、０と２０００の間の整数である。）から選択される修飾剤で修飾される、
請求項１７または１８に記載の方法。
請求項１７から１９のうちの一項に記載の方法によって得ることができるコンジュゲート。
１より大きい、好ましくは２と１０の間の、およびさらに特に２と７の間の、ＨＲＭＳスペクトルのデコンボリューションから決定されるＤＡＲを特徴とする、請求項２０に記載のコンジュゲート。
０．５より大きい、好ましくは１より大きい、さらに特に１と１０の間の、およびさらにいっそう特に２と７の間の、ＵＶ分光光度計を用いて決定されるＤＡＲを特徴とし、該ＤＡＲが、方程式：
ＤＡＲ＝_ｃＤ／_ｃＡ
（式中、
ｃ_Ｄ＝［（ε_Ａλ１×Ａ_λ２）−（ε_Ａλ２×Ａ_λ１）］／［（ε_Ｄλ２×ε_Ａλ１）−（ε_Ａλ２ｘε_Ｄλ１）］
ｃ_Ａ＝［Ａ_λ１−（ｃ_Ｄ×ε_Ｄλ１）］／ε_Ａλ１
ならびに
Ａ_λ１およびＡ_λ２は、それぞれ波長λ１およびλ２での、コンジュゲート溶液の吸光をそれぞれ示し；
ε_Ｄλ１およびε_Ｄλ２は、波長λ１およびλ２でのコンジュゲーション前のクリプトフィシン誘導体のモル吸光係数をそれぞれ示し、これらの係数は、タイプ−ＳＺ_ａ（この場合、Ｚ_ａ＝−ＳＭｅ）またはタイプ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｚ_ｂＲ_ｂ（この場合、Ｚ_ｂＲ_ｂ＝−ＯＭｅもしくは−ＯＣＨ_２−ＣＨ＝ＣＨ_２）の式（ＩＩ）の化合物に関して測定したものであり；
ε_Ａλ１およびε_Ａλ２は、２つの波長λ１およびλ２での、コンジュゲーション前の裸の抗体のモル吸光係数をそれぞれ示す。）
によって計算される、請求項２０に記載のコンジュゲート。
λ１＝２８０ｎｍ、およびλ２が特定の波長範囲２４６ｎｍ−２５２ｎｍ内から選択される、請求項２２に記載のコンジュゲート。
請求項１７から１９のうちの一項に記載の方法によって得ることができる、または請求項２０から２３のうちの一項において定義したとおりのコンジュゲートを含む、コンジュゲート溶液。
請求項１から１３のうちの一項に記載のクリプトフィシン誘導体の、該クリプトフィシン誘導体の少なくとも１つに結合している結合剤の調製のための、使用。
式（ＩＩＩ）：

（式中、
Ｇは、単位ＣＲ_１を有するフェニル核上のオルト（ｏ）、メタ（ｍ）またはパラ（ｐ）位にある、好ましくはパラ位にある、基−ＣＨ＝ＣＨ_２または−（ＣＨ_２）_ｎＹを表し；
Ｙは、−ＯＨ；−Ｃｌ；−Ｎ_３；−ＮＨ_２；−ＳＨ；−ＣＯＯＨ；−ＮＲ_１２−ＣＨ_２−Ｃ≡ＣＨ（この場合のＲ_１２は、Ｈまたは基（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル、さらに特にメチル基を表す。）；−ＯＬＧ（この場合のＬＧは、脱離基を表す。）；−ＯＣ（＝Ｏ）−Ｏ−（４−ニトロフェニル）；マレイミド；
または式：

（基Ｒ_１からＲ_１１は、請求項１、１１または１２の場合と同じ意味を有し、およびｎは、１から６にわたる整数である。）
を表す。）
のクリプトフィシン誘導体の、該クリプトフィシン誘導体の少なくとも１つに結合している結合剤の調製のための、使用。
下記のもの：

（Ｚ_ａ、Ｚ_ｂおよびＲ_ｂは、請求項１から１０において定義したとおりである。）
のいずれかから選択されるクリプトフィシン誘導体の、少なくとも１つのクリプトフィシン誘導体に結合している結合剤の調製のための、使用。
式：

（基Ｒ_１からＲ_１１は、請求項１、１１または１２の場合と同じ意味を有し、およびｎは、１から６にわたる整数である。）
のクリプトフィシン誘導体。
抗癌剤として使用するための、請求項１から１５のうちの一項に記載のクリプトフィシン誘導体。
抗癌剤として使用するための、請求項２０から２３に記載のコンジュゲート。
抗癌剤として使用するための、請求項２４に記載のコンジュゲート溶液。
抗癌薬の調製のための、請求項１から１５のうちの一項に記載のクリプトフィシン誘導体の使用。
抗癌薬の調製のための、請求項２０から２３に記載のコンジュゲートの使用。
抗癌薬の調製のための、請求項２４に記載のコンジュゲート溶液の使用。