JP2012509289A - ヘパラン硫酸の精製方法並びに美容用及び皮膚用調製物中におけるその使用 - Google Patents
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Abstract
Description
ブタ小腸粘膜由来のヘパラン硫酸5 gを、200 mlの脱塩水中に溶解した。90 gのLewatit S 6238 A(登録商標)を、溶液に添加した。混合物を、室温で72時間ゆっくりと撹拌し、その後濾過した。濾過物を解析し、ヘパラン硫酸は検出されなかった。
細胞培養物の粗材料のブリーチング活性のIn vitro評価−試験手順
HSのin vitroホワイトニング効果を、2つの異なる濃度:0.1 mg/ml (0.01%)及び0.05 mg/ml(0.005%)でHSと6日間接触させたメラノーマ細胞B16(メラニンを生成することができる線維芽細胞様細胞)のメラニン含量を測定することにより検出した。
試験手順
単純盲検モードで試験を実行した。(手、前頭部、腕、顔、首)に存在する年齢スポット(aged spot)を有する20人のボランティア(40歳から50歳の年齢)。年齢スポットを有する領域は、2つのゾーンに分割される:試験基質で処理するためのものと、プラセボのもの。スポットを連続30日間試験した:1適用(基質1 mg)/試験エリア(150-200 cm2)で死亡[コリパガイドライン(Colipa guideline)による]。
T0−基礎値、基質を適用する前のメラニン指標値
T15−基質適用後15日のメラニン指標値
T30−最終値、(基質適用後30日の)試験の最後におけるメラニン指標値
In vitro -美容用粗材料による好塩基球細胞の脱顆粒試験−試験手順
好塩基球細胞は、刺激性基質と接触した場合、炎症イベントに寄与する(ヒスタミン、ロイコトリエン、ヘキサミニダーゼのようなタンパク質分解酵素のような)基質の(分解による)分泌である生物化学反応を引き起こす。
単純盲検モードで試験を実行した。各ボランティアの背中に1 cm2の外接処理ゾーンで(36歳から52歳の年齢の)20人のボランティアを処理した。試験を、試験エリア(1 cm2)に単独適用(2 mgの基質)により実行した[コリパガイドライン(Colipa guideline)による]。総時間:適用後60分。
T0−基礎値、UVB放射後、および基質を適用する前の紅斑指標値
T15−基質適用後15分の紅斑指標値
T30−基質適用後30分の紅斑指標値
T60−基質適用後60分の紅斑指標値
試験手順
HSの抗酸化効果を、7つの異なる濃度:0.031 mg/ml (0.0031%)、0.063 mg/ml (0.0063%)、0.125 mg/ml (0.0125%)、0.250 mg/ml (0.0250%)、0.500 mg/ml (0.0500%)、1.000 mg/ml (0.1000%) および9.000 mg/ml (0.9000%)のHSと、1分30秒(1’30’’)、3分(3’)、および4分30秒(4’30’’)の3つの異なるUVA照射への暴露後に、反応性酸素種(Reactive Oxygen Species (ROS))としてフリーラジカルの減少を測定することにより検出した。陰性対照(NC)は、非処理細胞(基質で処理しない細胞)であった。陰性対照(NC)は、ビタミンC(0.15 mg/ml) (0.015%)であった。
HSの細胞分裂効果を、2つの異なる濃度:0.1 mg/ml (0.01%)および0.05 mg/ml (0.005%)のHSを使用して、48時間および78時間の曝露後に、線維芽細胞細胞増殖の測定、タンパク質合成の測定により検出した。陰性対照(NC)を、非処理細胞(基質で処理しない細胞)により示し、陽性対照(PC)は、EGF(上皮成長因子)(10 μg/ml) (0.001%)である。
Claims (13)
- ヘパラン硫酸を含む美容用および皮膚用組成物。
- ヘパラン硫酸が0.01重量%から5重量%、好ましくは0.05重量%から2重量%、より好ましくは0.1重量%から1重量%含まれる濃度で存在する、請求項1に記載の組成物。
- 以下の成分:保存剤、乳化剤、安定化剤、保湿剤、抗酸化剤、ならびに美容用及び皮膚用組成物に含まれる他の成分のうち一つ以上をさらに含む、請求項1または2に記載の美容用および皮膚用組成物。
- 抗加齢組成物としての、請求項1から3のいずれか一項に記載の組成物の使用。
- 鎮痛剤としての、請求項1から3のいずれか一項に記載の組成物の使用。
- 美白剤としての、請求項1から3のいずれか一項に記載の組成物の使用。
- 美容用適用のためのヘパラン硫酸の精製方法であって、以下の工程:
水中へのヘパラン硫酸の可溶化、アニオン交換樹脂への吸着、ヘパラン硫酸の選択的脱離をもたらす条件を使用することによる樹脂からの脱離
を含む方法。 - アルカリまたはアルカリ土類金属塩を使用することにより脱離が発生する、請求項7に記載の方法。
- 前記塩が、二塩化マグネシウム、二酢酸マグネシウム、塩化ナトリウム、酢酸ナトリウム、塩化カリウム及び酢酸カリウムからなるリストから選択される、請求項8に記載の方法。
- 前記塩の溶液のpHが、7.0から10.0の間に含まれる、請求項7から9のいずれか一項に記載の方法。
- 前記塩の濃度が、0.3 Mから1.0 Mの間に含まれる、請求項7から10のいずれか一項に記載の方法。
- 前記塩の濃度が、0.5 Mから0.8 Mの間に含まれる、請求項11に記載の方法。
- 美容及び皮膚分野におけるヘパラン硫酸を利用する医療機器。
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