JP2011515685A5 - - Google Patents
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Description
これに加えて、本発明の主題は、本明細書中に開示する方法であって、ビーズが、化学物質、例えば小分子またはヌクレオチドもしくはアミノ酸から構築される分子に、あるいはタンパク質、ペプチドまたは環状ペプチドに、あるいは酵素、例えばホスファターゼ、キナーゼ、リパーゼまたは他のものに結合している、前記方法に関する。また本発明の主題は、ビーズが、抗体または他の結合剤、スキャフォールドタンパク質、例えばアンチカリン、アンキリンリピートタンパク質、システインノットタンパク質、ナノ体および他のものに結合していることである。ビーズはまた、ヌクレオチド配列、例えばプライマー、DNAまたはRNA断片、結合分子、例えばアプタマー、より大きいDNAまたはRNA構造に結合していてもよい。
本発明の好ましい態様において、ビーズは、酵素、例えばホスファターゼ、キナーゼ、リパーゼまたは他のものに結合している。最も好ましくは、ビーズはキナーゼに結合している。
Claims (12)
- 基質結合ビーズを長期間保存する方法であって、該基質結合ビーズにおいては、ヌクレオチド配列、例えばプライマー、RNA断片、結合分子、例えばアプタマー、またはより大きいRNA構造、および酵素、例えばホスファターゼ、キナーゼおよびリパーゼからなる群から選択される基質が、ビーズの表面に共有結合しているか、または、対応するアフィニティーリガンドによって捕獲されるタグによって結合しており、該方法は以下の段階
a)ソルビトール、マンニトール、イソマルトース、ラクチット、キシリトール、トレイット、エリスリトール、スクロース、フルクトース、トレハロース、ラフィノースおよびグルコースの群から選択される、少なくとも1種の多価アルコールまたは糖を、水、および、必要に応じて緩衝および安定化特性を有する添加剤を含む基質結合ビーズの懸濁液に加える段階
b)懸濁液を少なくとも4℃の低温に冷却する段階
および
c)低温における保存
を含む、前記方法。 - 段階a)において、グリセロールおよび/またはスクロース、あるいは、グリセロールおよび/またはトレハロース、あるいは、グリセロールおよび/またはフルクトース、あるいは、グリセロールおよび/またはマンニトールを加える、請求項1に記載の方法。
- 段階a)において、少なくとも1種の多価アルコールまたは多価糖を、緩衝および安定化特性を有する他の添加剤と組み合わせて懸濁液に加える、請求項1または2に記載の方法。
- 段階a)において、少なくとも1種の多価アルコールまたは糖を、塩、例えばNaClまたはKClと、6〜8のpH範囲において有効である緩衝液系とを含む、基質結合ビーズの水性懸濁液に加える、請求項1〜3のいずれか一項に記載の方法。
- 段階b)において、懸濁液の冷却を、該懸濁液を極めて迅速に凍結することにより行う、請求項1〜4のいずれか一項に記載の方法。
- 得られた懸濁液を液体窒素中でショック凍結し、少なくとも−20℃の温度で保存する、請求項5に記載の方法。
- 段階c)において、保存を、−20から−196℃までの範囲内の温度にて、好ましくは−60から−100℃までの範囲内の温度にて行う、請求項1〜6のいずれか一項に記載の方法。
- 基質結合ポリスチレンビーズを長期間保存するための、請求項1〜7のいずれか一項に記載の方法。
- 蛍光色素によりコードされる基質結合ポリスチレンビーズを長期間保存するための、請求項8に記載の方法。
- ビーズが、化学物質、例えば小分子またはヌクレオチドもしくはアミノ酸から構築される分子に、またはタンパク質、ペプチドもしくは環状ペプチドに、または酵素、例えばホスファターゼ、キナーゼもしくはリパーゼ等に結合している、基質結合ビーズを長期間保存するための請求項1〜9のいずれか一項に記載の方法。
- ビーズが、抗体または他の結合剤、スキャフォールドタンパク質、例えばアンチカリン、アンキリンリピートタンパク質、システインノットタンパク質、ナノ体等に結合している、基質結合ビーズを長期間保存するための請求項1〜9のいずれか一項に記載の方法。
- ビーズがキナーゼに結合している、基質結合ビーズを長期間保存するための請求項1〜9のいずれか一項に記載の方法。
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