JP2011257241A - 細胞分析装置 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】本発明は、連続して細胞をマイクロ流路の特定の領域に連続配置する機能と、画像ベースで1細胞単位でその細胞の集団状態の有無と蛍光の発光を同時認識する機能と、その形状と蛍光の発光の情報に基づいて認識を行って細胞集団あるいは細胞塊を選択的に分離精製する機能を有する細胞濃縮精製装置を提供する。
【選択図】図1
Description
1)目視による形態学的な細胞分類:例えば尿中に出現する異型細胞検査による膀胱がんや尿道のがんなどの検査や血中の異型細胞分類、組織中における細胞診によるがん検査などをあげることができる。
2)蛍光抗体法による細胞表面抗原(マーカー)染色による細胞分類:一般にCDマーカーと呼ばれる細胞表面抗原を、それに特異的な蛍光標識抗体で染色するもので、セルソーターによる細胞分離やフローサイトメーターや組織染色によるがん検査などに用いられている。もちろんこれらは、医療面のみならず、細胞生理研究用や、工業的な細胞利用の上でも多用されている。
3)あるいは、幹細胞の分離に関しては、細胞内に取り込まれる蛍光色素をレポーターとして幹細胞を含む細胞を大まかに分離し、更にその後で実際に培養を行うことで目的の幹細胞を分離する例がある。これは、幹細胞の有効なマーカーがまだ確立されていないので、実際に培養し、分化誘導したもののみを利用することで、実質的に目的細胞を分離しているのである。
被験者由来の血液中の細胞を含む試料液を流すための第一の流路、該第一の流路を流れる該試料液中の細胞を検出するための上記第一の流路上の細胞検出領域、上記第一の流路上の上記細胞検出領域の下流に配置された細胞分離領域、および該細胞分離領域の下流で上記第一の流路から分岐する、細胞の選択的回収が行われるための少なくとも2本の分岐流路を含むセルソーターチップと、
上記細胞検出領域を流れる上記細胞に光を照射するための光照射手段および少なくとも200フレーム/秒の画像取り込みレートで上記細胞が孤立細胞状態であるか、あるいは細胞集団状態または細胞塊状態であるかを判別するために画像情報を取得するための高速カメラを含む光学系と、
上記判別の結果に基づいて上記細胞分離領域にて、上記細胞を上記少なくとも2本の分岐流路のうちどちらの流路に誘導して流すかを制御することができる外力を細胞に選択的に印加するための手段と、
を備え、
上記細胞集団または細胞塊の存在が上記血液中での癌細胞の存在を示唆する、細胞解析装置システム。
[2]上記外力が、超音波放射圧、重力、静電力、または誘電電気泳動力である、上記[1]に記載の装置システム。
[3]上記光学系から得られる上記細胞の画像を2値化し、該2値化画像の輝度重心、面積、周囲長、長径、および短径からなる群から選択される少なくとも1つの指標によって、各上記細胞を一細胞レベルで検出し、孤立一細胞であるか、あるいは細胞集団または細胞塊であるかを識別する、上記[1]または[2]に記載の装置システム。
[4]上記細胞試料液中の上記細胞が蛍光標識されており、上記光学系が、蛍光検出手段をさらに含み、上記細胞の蛍光画像の情報が追加的な指標として上記制御・解析部により利用される、上記[3]に記載の装置システム。
[5]血液中の癌細胞の定量解析方法であって、
被験体由来の血液中の細胞を含む試料液を準備する工程と、
前記試料液を、セルソーターチップを用いた細胞分離に供する工程であって、
該細胞分離チップが、
上記試料液を流すための第一の流路、
該第一の流路を流れる該試料液中の細胞を検出するための上記第一の流路上の細胞検出領域、
上記第一の流路上の上記細胞検出領域の下流に配置された細胞分離領域、および
該細胞分離領域の下流で上記第一の流路から分岐する、細胞の選択的回収が行われるための少なくとも2本の分岐流路を含む、工程と、
光照射手段および高速カメラを含む光学系により、上記細胞検出領域を流れる上記細胞に光を照射し、少なくとも200フレーム/秒の画像取り込みレートで細胞の画像を得、それによって、上記画像情報が、上記細胞が孤立細胞状態であるか、あるいは細胞集団状態または細胞塊状態であるかを判別する工程と、
上記判別の結果に基づいて上記細胞分離領域にて外力を細胞に選択的に印加して、上記細胞を上記少なくとも2本の分岐流路のうちいずれかの流路に誘導して流す工程と、
を備え、
上記細胞集団または細胞塊の存在が上記血液中での癌細胞の存在を示唆する、細胞解析方法。
[6]上記外力が、超音波放射圧、重力、静電力、または誘電電気泳動力である、上記[5]に記載の方法。
[7]上記光学系から得られる上記細胞の画像を2値化し、該2値化画像の輝度重心、面積、周囲長、長径、および短径からなる群から選択される少なくとも1つの指標によって、各上記細胞を一細胞レベルで検出し、孤立一細胞であるか、あるいは細胞集団または細胞塊であるかを識別する、上記[5]または[6]に記載の方法。
[8]上記細胞試料液中の上記細胞が蛍光標識されており、上記光学系が、蛍光検出手段をさらに含み、上記細胞の蛍光画像の情報が追加的な指標として上記制御・解析部により利用される、上記[7]に記載の方法。
[9]癌の診断および/または薬物投与計画策定のために使用される、上記[1]〜[4]のいずれかに記載の装置システム。
[10]癌の診断および/または薬物投与計画策定のために使用される、上記[5]〜[7]のいずれかに記載の方法。
(1)細胞分離のためのセルソーターチップ、
(2)セルソーターチップの流路を流れる細胞を検出するための光照射手段(例えば、レーザー)およびカメラ(例えば、CCDカメラ)を含む光学系、
(3)セルソーターチップの流路を流れる細胞を分離するために細胞に外力を与えるための手段(例えば、櫛形電極)、ならびに
(4)上記光学系での検出結果に基づいて上記細胞に外力を与えるための手段の動作を制御する制御手段を備える。
なお、上記制御手段は、上記細胞に外力を与えるための手段と一体化していてもよい。
(1)被験体由来の血液中の細胞を含む試料液を準備する工程、
(2)前記試料液を、セルソーターチップを用いた細胞分離に供する工程、
(3)光照射手段および高速カメラを含む光学系により、前記細胞検出領域を流れる前記細胞に光を照射して、所定の画像取り込みレートで細胞の画像を得、それによって、前記画像情報が、前記細胞が孤立細胞状態であるか、あるいは細胞集団状態または細胞塊状態であるかを判別する工程、ならびに
(4)前記判別の結果に基づいて前記細胞分離領域にて外力を細胞に選択的に印加して、前記細胞を前記少なくとも2本の分岐流路のうちいずれかの流路に誘導して流す工程
を備える。
図1は、本発明の細胞分析装置を用いて血中サンプルの分離を行うセルソーターチップ100の一例を図示したものである。
101 細胞サンプルの導入路
102 流路
103 外力発生器
104 外力の向き
105 回収細胞の流れ(1)
106 回収細胞の流れ(2)
201 レーザー
202 ミラー
203 集光レンズ
204 ダイクロイックミラー
205 フィルター
206 蛍光検出用フォトマルチプライヤー
207 高速カメラ
208 前方散乱光検出用フォトダイオード
301、302 正常血中孤立1細胞
303、304 異常血中細胞集団、細胞塊
Claims (8)
- 血液中の癌細胞を選択的に分離・精製する細胞解析装置システムであって、
被験者由来の血液中の細胞を含む試料液を流すための第一の流路、該第一の流路を流れる該試料液中の細胞を検出するための前記第一の流路上の細胞検出領域、前記第一の流路上の前記細胞検出領域の下流に配置された細胞分離領域、および該細胞分離領域の下流で前記第一の流路から分岐する、細胞の選択的回収が行われるための少なくとも2本の分岐流路を含むセルソーターチップと、
前記細胞検出領域を流れる前記細胞に光を照射するための光照射手段および少なくとも200フレーム/秒の画像取り込みレートで前記細胞が孤立細胞状態であるか、あるいは細胞集団状態または細胞塊状態であるかを判別するために画像情報を取得するための高速カメラを含む光学系と、
前記判別の結果に基づいて前記細胞分離領域にて、前記細胞を前記少なくとも2本の分岐流路のうちどちらの流路に誘導して流すかを制御することができる外力を細胞に選択的に印加するための手段と、
を備え、
前記細胞集団または細胞塊の存在が前記血液中での癌細胞の存在を示唆する、細胞解析装置システム。 - 前記外力が、超音波放射圧、重力、静電力、または誘電電気泳動力である、請求項1に記載の装置システム。
- 前記光学系から得られる前記細胞の画像を2値化し、該2値化画像の輝度重心、面積、周囲長、長径、および短径からなる群から選択される少なくとも1つの指標によって、各前記細胞を一細胞レベルで検出し、孤立一細胞であるか、あるいは細胞集団または細胞塊であるかを識別する、請求項1または2に記載の装置システム。
- 前記細胞試料液中の前記細胞が蛍光標識されており、前記光学系が、蛍光検出手段をさらに含み、前記細胞の蛍光画像の情報が追加的な指標として前記制御・解析部により利用される、請求項3に記載の装置システム。
- 血液中の癌細胞の定量解析方法であって、
被験体由来の血液中の細胞を含む試料液を準備する工程、
前記試料液を、セルソーターチップを用いた細胞分離に供する工程であって、
該細胞分離チップが、
前記試料液を流すための第一の流路、
該第一の流路を流れる該試料液中の細胞を検出するための前記第一の流路上の細胞検出領域、
前記第一の流路上の前記細胞検出領域の下流に配置された細胞分離領域、および
該細胞分離領域の下流で前記第一の流路から分岐する、細胞の選択的回収が行われるための少なくとも2本の分岐流路を含む、工程、
光照射手段および高速カメラを含む光学系により、前記細胞検出領域を流れる前記細胞に光を照射し、少なくとも200フレーム/秒の画像取り込みレートで細胞の画像を得、それによって、前記画像情報が、前記細胞が孤立細胞状態であるか、あるいは細胞集団状態または細胞塊状態であるかを判別する工程と、
前記判別の結果に基づいて前記細胞分離領域にて外力を細胞に選択的に印加して、前記細胞を前記少なくとも2本の分岐流路のうちいずれかの流路に誘導して流す工程と、
を備え、
前記細胞集団または細胞塊の存在が前記血液中での癌細胞の存在を示唆する、細胞解析方法。 - 前記外力が、超音波放射圧、重力、静電力、または誘電電気泳動力である、請求項5に記載の方法。
- 前記光学系から得られる前記細胞の画像を2値化し、該2値化画像の輝度重心、面積、周囲長、長径、および短径からなる群から選択される少なくとも1つの指標によって、各前記細胞を一細胞レベルで検出し、孤立一細胞であるか、あるいは細胞集団または細胞塊であるかを識別する、請求項5または6に記載の方法。
- 前記細胞試料液中の前記細胞が蛍光標識されており、前記光学系が、蛍光検出手段をさらに含み、前記細胞の蛍光画像の情報が追加的な指標として前記制御・解析部により利用される、請求項7に記載の方法。
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Cited By (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2013147114A1 (ja) | 2012-03-30 | 2013-10-03 | 公益財団法人神奈川科学技術アカデミー | イメージングセルソーター |
WO2015146404A1 (ja) * | 2014-03-24 | 2015-10-01 | 東レエンジニアリング株式会社 | 血小板産生装置および血小板産生方法 |
WO2016013041A1 (ja) * | 2014-07-22 | 2016-01-28 | 株式会社がん免疫研究所 | 末梢循環癌細胞の検出方法および検出装置 |
JP2016539331A (ja) * | 2013-11-22 | 2016-12-15 | ザ ジェネラル ホスピタル コーポレイション | 粒子クラスタを単離するためのマイクロ流体方法およびシステム |
CN112638533A (zh) * | 2018-09-10 | 2021-04-09 | 索尼公司 | 微粒分类装置、细胞治疗剂制造装置、微粒分类方法和程序 |
CN112646701A (zh) * | 2020-12-10 | 2021-04-13 | 中国科学院深圳先进技术研究院 | 一步式单细胞分离分配系统 |
CN113477282A (zh) * | 2021-04-25 | 2021-10-08 | 深圳大学 | 一种基于液滴微流控的单细胞分离系统及方法 |
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Citations (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2003107099A (ja) * | 2001-09-27 | 2003-04-09 | Japan Science & Technology Corp | 微粒子分別マイクロチップと微粒子分別装置 |
WO2004101731A1 (ja) * | 2003-05-19 | 2004-11-25 | Japan Science And Technology Agency | 細胞分離装置 |
WO2005103642A1 (ja) * | 2004-04-23 | 2005-11-03 | The Furukawa Electric Co., Ltd. | 検体の分離と識別と分注方法とその装置及び解析装置 |
JP2006180810A (ja) * | 2004-12-28 | 2006-07-13 | Japan Science & Technology Agency | 細胞計測および分離チップ |
JP2006275771A (ja) * | 2005-03-29 | 2006-10-12 | Olympus Corp | 細胞画像解析装置 |
JP2009186280A (ja) * | 2008-02-05 | 2009-08-20 | Tokyo Medical & Dental Univ | 微粒子画像計測装置 |
WO2009157385A1 (ja) * | 2008-06-27 | 2009-12-30 | 古河電気工業株式会社 | 細胞の識別およびソーティング方法およびその装置 |
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Patent Citations (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2003107099A (ja) * | 2001-09-27 | 2003-04-09 | Japan Science & Technology Corp | 微粒子分別マイクロチップと微粒子分別装置 |
WO2004101731A1 (ja) * | 2003-05-19 | 2004-11-25 | Japan Science And Technology Agency | 細胞分離装置 |
WO2005103642A1 (ja) * | 2004-04-23 | 2005-11-03 | The Furukawa Electric Co., Ltd. | 検体の分離と識別と分注方法とその装置及び解析装置 |
JP2006180810A (ja) * | 2004-12-28 | 2006-07-13 | Japan Science & Technology Agency | 細胞計測および分離チップ |
JP2006275771A (ja) * | 2005-03-29 | 2006-10-12 | Olympus Corp | 細胞画像解析装置 |
JP2009186280A (ja) * | 2008-02-05 | 2009-08-20 | Tokyo Medical & Dental Univ | 微粒子画像計測装置 |
WO2009157385A1 (ja) * | 2008-06-27 | 2009-12-30 | 古河電気工業株式会社 | 細胞の識別およびソーティング方法およびその装置 |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
JPN6013011505; 安田賢二: '先端のバイオ技術を知る!テクノトレンド テクノ・トレンド 3 オンチップ細胞分離(セルソ-タ-)システム' バイオテクノロジージャーナル Vol.6,No.2, 20060301, Page.201-204 * |
Cited By (11)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2013147114A1 (ja) | 2012-03-30 | 2013-10-03 | 公益財団法人神奈川科学技術アカデミー | イメージングセルソーター |
JP2016539331A (ja) * | 2013-11-22 | 2016-12-15 | ザ ジェネラル ホスピタル コーポレイション | 粒子クラスタを単離するためのマイクロ流体方法およびシステム |
JP2019211483A (ja) * | 2013-11-22 | 2019-12-12 | ザ ジェネラル ホスピタル コーポレイション | 粒子クラスタを単離するためのマイクロ流体方法およびシステム |
WO2015146404A1 (ja) * | 2014-03-24 | 2015-10-01 | 東レエンジニアリング株式会社 | 血小板産生装置および血小板産生方法 |
WO2016013041A1 (ja) * | 2014-07-22 | 2016-01-28 | 株式会社がん免疫研究所 | 末梢循環癌細胞の検出方法および検出装置 |
JP6052756B2 (ja) * | 2014-07-22 | 2016-12-27 | 株式会社がん免疫研究所 | 末梢循環癌細胞の検出方法および検出装置 |
CN112638533A (zh) * | 2018-09-10 | 2021-04-09 | 索尼公司 | 微粒分类装置、细胞治疗剂制造装置、微粒分类方法和程序 |
CN112638533B (zh) * | 2018-09-10 | 2023-08-22 | 索尼公司 | 微粒分类装置、细胞治疗剂制造装置、微粒分类方法和程序 |
CN112646701A (zh) * | 2020-12-10 | 2021-04-13 | 中国科学院深圳先进技术研究院 | 一步式单细胞分离分配系统 |
CN112646701B (zh) * | 2020-12-10 | 2023-12-26 | 中国科学院深圳先进技术研究院 | 一步式单细胞分离分配系统 |
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