JP2011256164A - 琥珀由来のvegf産生促進剤及び琥珀由来のvegf産生促進剤を含む製剤又は化粧料若しくは頭髪・頭皮用化粧料 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】本発明は、琥珀から低級アルコールで抽出する工程を含む方法で抽出した抽出物を含むVEGF産生促進剤、琥珀から低級アルコールで抽出する工程を含む方法で抽出した抽出物を含むVEGF産生促進剤を含有する頭髪・頭皮用化粧料及び頭髪・頭皮用外用薬を提供する。
【選択図】なし
Description
更に、本願発明は、琥珀から低級アルコール抽出により調製されたVEGF産生促進剤の使用方法及び用途を提供することを課題とする。
1−1 . 琥珀とは主にマツ属植物の樹脂が長期間地下に埋没し凝結してできた化石で、主に樹脂、精油、コハク酸等を含む。エタノールやジエチルエーテル或いはベンゼンに少量溶ける(非特許文献1)。琥珀そのものを装飾工芸品、宝石、絶縁材料に用いたり、琥珀の削りカスをお香にするなどの用途のほかに、19世紀頃にはキズ薬などに使用されていた(非特許文献2)。さらに老化に伴う種種の病気に対する防止効果が言い伝えられてきた(ヤマノビューティメイトHP http://www.yamanobeautymate.com)。
VEGFは、血管新生を促進する作用を持つ脈管新生及び血管新生に関与する一群の糖タンパク質であり、細胞分裂や遊走、分化を刺激し、微小血管の血管透過性を亢進させる働きを持つ。VEGFファミリーには、VEGFA、VEGFB、VEGFC、VEGFD、VEGFE、などが含まれる。本発明に係る新規VEGF産生促進剤のうちF2画分並びにN画分を培養ヒト由来不死化表皮角化細胞に投与し、GeneChipRによる網羅的な遺伝子発現解析を行ったところ、F2画分によってcontrolと比較してVEGFA-mRNA発現量が1355%に上昇したのに対し、VEGFB-mRNA並びにVEGFC-mRNA発現量は変化しなかった。一方、N画分はVEGFA-mRNA発現量を3767%、VEGFB-mRNA発現量を281%、VEGFC-mRNA発現量を311%上昇させた。VEGFD及びVEGFE-mRNA発現量の変化については調べていない。VEGFファミリーの中で主として血管新生に働くのがVEGFA及びVEGFEであり、VEGFBはVEGFAよりも血管新生促進活性が1/10かそれ以下と非常に弱く、単球走化作用などに関与し、VEGFC及びVEGFDはリンパ管内皮細胞の増殖に関与している(非特許文献10)。そこで、以下本発明では血管新生活性が一番強いVEGFAに着目した。
本願発明の琥珀から抽出したVEGF産生促進剤としては、琥珀から抽出した抽出物であってVEGF産生促進能を有する成分を含有する琥珀抽出物、該琥珀抽出物の粗精製物、および該琥珀抽出物から精製した組成物が包含される。本願発明においては、特に、琥珀から抽出したVEGF産生促進剤及びその調製方法が提供される。
皮膚細胞に働きかけて、活性化させる組成物として、VEGF産生促進剤を琥珀から抽出することにより調製することができる。該抽出物もVEGF産生促進剤として用いることができる。
(i)前処理工程
琥珀を溶媒抽出しやすいように、適宜な大きさまで粉砕する。粉砕手段としては、やすり、ジェットミル粉砕機を用いることができる。また、琥珀を宝石として加工する際に出る切りくずを粉砕したものなどを用いることもできる。粉砕する大きさは特に限定されないが、溶媒による抽出効率から見て、例えば、平均粒径が100μmまで、好適には、10〜30μm程度とすることができる。粉砕した琥珀を、必要に応じ、疎水性有機溶媒で、洗浄する。疎水性有機溶媒としては、ヘキサン、ベンゼン、クロロホルム又はこれらの混合物等を用いることができる。この洗浄は、省略することもできる。
琥珀又は前記前処理工程で粉砕若しくは粉砕及び洗浄された琥珀を低級アルコールに浸漬して抽出物を得ることができる。例えば、琥珀又は前記前処理工程で粉砕若しくは粉砕及び洗浄された琥珀を微温もしくは室温で低級アルコールに長期間浸漬して抽出物を得る。具体的には、琥珀又は前記前処理工程で粉砕若しくは粉砕及び洗浄された琥珀を、例えば25℃から50℃の温度で、低級アルコールに、7日以上、好適には15日以上浸漬することにより抽出物を得る。浸漬する時間の上限は特に限定されないが、製造効率の観点から例えば3ヶ月以下とすることできる。より具体的には、例えば、エタノールの場合には、琥珀又は前記前処理工程で粉砕若しくは粉砕及び洗浄された琥珀を、25℃から50℃の温度で7日以上、好適には40℃で約1ヶ月(15日から30日間)浸漬することにより抽出物を得る。抽出物は、濃縮し、乾固すると、茶褐色あめ状の乾固物となる。なお、低級アルコールとしては、炭素数1〜5の直鎖状、分岐状、環状のアルコールであれば特に限定されず、例えばメタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール又はこれらの混合物などを用いることができる。
上記2−1.で得られた(ii)VEGF産生促進能を有する成分を含有する抽出物を、カラムクロマトグラフィー又は二相分離により分画し、粗精製物又は精製した組成物を得ることができる。
(i)カラムクロマトグラフィー分画工程
得られた抽出物(乾固物)を、低級アルコール、例えば、エタノールに溶かし、炭化水素化学結合型シリカゲル、例えばオクタデシルシリル化したシリカゲルを担体としたカラムクロマトグラフィーを行うことにより、溶出液を分画することができる。特に、最初に溶出される無色透明な液(例えば、全溶出量の1〜5体積%)の次に溶出される、濃黄色透明な液でかつ乾固したとき濃黄色あめ状になる画分(例えば、全溶出量の10〜15体積%)は、保存安定性に優れ、VEGF産生促進能を有している。
また、吸着カラムクロマトグラフィーにより、更に精製することができる。
具体的には、吸着カラムクロマトグラフィーとしては、シリカゲルを担体としたカラムクロマトグラフィーを用いることができる。溶出溶媒としては、例えば、ベンゼン、酢酸エチルの混合液を溶媒として、具体的には、ベンゼン:酢酸エチル=50:1で溶出することができる。このように精製したものを、VEGF産生促進能を有する成分を含有する、琥珀抽出物から精製した組成物として用いることができる。
(i)水溶成分除去
上記2−1.により得られた琥珀の低級アルコール抽出物(乾固物)を、適宜な有機溶媒を用いて、水相と有機溶媒相の二相で更に分画することができる。有機溶媒としては、例えば、低級エーテル、具体的には、ジメチルエーテル又はジエチルエーテルが挙げられる。該有機溶媒に、得られた琥珀の低級アルコール抽出物を溶解し、溶け残った成分を除去する。次に、琥珀抽出物を溶解した有機溶媒を水で洗浄する。具体的には、純水、例えば、超純水製造装置で製造された超純水を添加し、水溶性成分を取り除く。必要に応じて、純水を用いる水溶性成分の除去を3〜5度繰り返す。
その後、酸性の水溶液及び塩基性の水溶液を、必要に応じ、複数回添加し、混合することにより、それぞれ塩基性の水溶性成分及び酸性の水溶性成分を、最終的に着色成分が除かれるまで、除去する。まず酸性の水溶液で3〜5回洗浄し、次に、塩基性の水溶液で、複数回洗浄し、琥珀抽出物を溶解した有機溶媒の着色が除かれるまで、洗浄することが望ましい。酸性の水溶液としては、例えば、pH3.0の希塩酸、塩基性の水溶液としては、例えば、pH12.0の水酸化ナトリウム水溶液を用いることができる。最後に純水で洗浄する。
本願発明の琥珀抽出物の粗精製物又は該抽出物から精製した組成物がVEGF産生促進能を有することは、例えば、これらを培養細胞に投与して、VEGFA-mRNAの発現を測定することにより確認することができる。或いは、管腔形成(チューブフォーメーション)アッセイで確認できる。具体的には、本願発明の琥珀抽出物の粗精製物又は該抽出物から精製した組成物を細小血管内皮細胞培養用の培地を用いて、血管内皮細胞を培養し、血管新生促進作用があるか否かを確認することができる。
育毛効果、養毛効果、及び/又は発毛効果は、例えば、横山大三郎、油化学、44(4)、266-273 (1995).、足立邦明、香粧会誌、19(1)、20-24 (1995).、或いは、児林昇、薬学誌、113(10)、718-724 (1993)に記載の方法により、確認することができる。より具体的には、例えば、マウス背部を電気バリカンで部分的に刈毛し、シェーバーでさらに剃毛する。馴化飼育した後、試料を、剃毛部位に繰り返し塗布する。一定期間後、被毛の成長を目視し、育毛効果、養毛効果、及び/又は発毛効果を確認することができる。
本願発明には、琥珀から低級アルコールを用いて抽出した、VEGF産生促進成分を含む養毛剤及び/又は育毛剤が包含される。本願発明の養毛剤及び/又は育毛剤を琥珀から抽出する方法には、琥珀から低級アルコールで抽出する工程を含んでいる。より具体的には、本願発明は、少なくとも、琥珀から有効成分として養毛作用及び/又は育毛作用を有する成分を含有する抽出物(組成物)を低級アルコールで抽出する工程を含み、好適には、抽出の前処理工程として、琥珀を粉砕する工程、及び、必要に応じて、粉砕された琥珀を疎水性有機溶媒で洗浄処理する工程が含まれる。また、本願発明には、前記琥珀から低級アルコールで抽出する工程により抽出された抽出物を炭化水素結合型シリカゲルカラムで分画する工程を含めることもできる。
例えば、上記した2−2−1.カラムクロマトグラフィーによる分画、及び/又は2−2−2.二相分離による分画、いずれについても、養毛剤及び/又は育毛剤全体を100とした場合に、0.001〜5.0質量%程度、より好ましくは、0.001〜1.0質量%添加することができる。具体的には、F2画分及び/又はN画分を、養毛剤及び/又は育毛剤全体を100とした場合に、0.001〜1.0質量%程度添加することができる。
本願発明のVEGF産生促進剤、具体的には、例えば、VEGF産生促進能を有する成分を含有する琥珀からの抽出物、その粗精製物又は該抽出物から精製した組成物は、適切な賦形剤を用いて、例えば、医薬製剤又は化粧料とすることができる。例えば、VEGF産生促進能を有する成分を含有する抽出物並びにその粗精製物又は該抽出物から精製した組成物は、乳糖、シリカゲル、結晶セルロース、又はデンプンなどの添加物に吸収させることで、粉体化して製剤とすることもできる。
本願発明の琥珀から低級アルコールを用いて抽出したVEGF産生促進剤、具体的には、例えば、VEGF産生促進能を有する成分を含有する琥珀から抽出した抽出物、その粗精製物又は該抽出物から精製した組成物は、化粧料(好ましくは、頭髪・頭皮用化粧料)又は皮膚外用薬(好ましくは、頭髪・頭皮用外用薬)に添加することができる。より具体的には、本願発明の琥珀から低級アルコールを用いて抽出したVEGF産生促進剤を含有する化粧料又は皮膚外用薬は、皮膚外用剤として使用することができる。また、上記3.記載の琥珀から低級アルコールを用いて抽出した育毛剤及び又は養毛剤は、化粧料(好ましくは、頭髪・頭皮用化粧料)又は皮膚外用薬(好ましくは、頭髪・頭皮用外用薬)に添加することができる。
本発明の琥珀から抽出したVEGF産生促進剤は、また、皮膚外用薬(好ましくは、頭髪・頭皮用外用薬)に添加することもできる。
例えば、上記した2−2−1.カラムクロマトグラフィーによる分画、及び/又は2−2−2.二相分離による分画、いずれについても、皮膚外用薬全体を100とした場合に、0.001〜5.0質量%程度、より好ましくは、0.001〜1.0質量%添加することができる。具体的には、F2画分及び/又はN画分を、皮膚外用薬全体を100とした場合に、0.001〜1.0質量%程度添加することができる。
<琥珀エタノール抽出物の調製>
ロシア・バルト海沿岸産琥珀を100メッシュ程度にまで粉砕し、10gをヘキサン100mLに浸漬し、室温で一週間放置後、ろ紙(No. 2) でろ過し、ろ液は廃棄した。ろ取した粉末をエタノール100mLに浸漬し、40℃の水浴上あるいは恒温機内に一週間放置した後、ろ紙(No. 2) でろ過し、ろ液は暗所で保管した。ろ取した粉末はエタノール50mLに浸漬し、アルミホイル等でフタをして40℃の水浴上あるいは恒温機内に一週間放置した後、ろ紙(No. 2) で再度ろ過した。ろ物をさらに50mLのエタノールに浸漬することを2回繰り返し、ろ過後、ろ液をすべて合わせた。これをわずかに温めながら(38℃程度) エバポレーターで濃縮、乾固し、茶褐色であめ状のエタノール抽出物約1.3gを得た。
このエタノール抽出物0.4gをエタノール2mLに溶かし、オクタデシルシリル化シリカゲル(和光純薬工業社製 ワコーゲル100C18) 11gを担体とし、メタノール(和光純薬工業社製 試薬特級)を溶媒としたカラムクロマトグラフィー(カラムサイズ: 2.2cm i.d.×4.7cm) を行い、溶出液を分取した。全溶出液の量が132mlであるうち、最初の5mlの無色透明な液の後に溶出された濃黄色透明である画分(採取量17mL) を集め、エバポレーターで乾固し、濃黄色透明なあめ状画分を330mg得た。この画分をF2とした。
またF2とは別に、エタノール抽出物0.5gをジエチルエーテル(国産化学社製 試薬特級) 20mLに溶かし、溶け残ったものをろ過して除去した後、ろ液を100mL分液ロート(SIBATA社製) に入れ、超純水製造装置(日本ミリポア社製)から採取した超純水5mLを加えて、栓をして振り混ぜ、時々コックを開いて内圧を戻しながら、平衡に達するまで1分程度振り混ぜて抽出した。その後2層に分離するまで5分程静置し、下層を抜いた。再び超純水5mLを分液ロートに加えて抽出し、下層を抜く作業を2回繰り返した。その後、あらかじめ超純水18mLに塩酸(シグマ社製 試薬特級) 2μLを加えて調製しておいたpH 3.0 希塩酸を5mL分液ロートに加えて抽出し、下層を抜く作業を3回繰り返した。そして、超純水5mLを分液ロートに加えて抽出し、下層を抜いた。その後、あらかじめ超純水62mLに水酸化ナトリウム(関東化学社製) 45mgを加えて調製しておいたpH 12.0 水酸化ナトリウム水溶液を5mL分液ロートに加えて抽出し、下層を抜く作業を3回繰り返した。通常、抽出回数は3〜5回で充分に分配できると言われているが(非特許文献11)、pH 12.0 水酸化ナトリウム水溶液を加えて洗浄する際、1回目の下層と3回目の下層が同程度の色(薄黄色)をしていたため、まだ十分に分配できていないと判断し、下層に色がつかなくなるまで12回程度繰り返した。この時、振り混ぜると2層に分離できなくなることがあったが、その際は少量の塩化ナトリウム(和光純薬社 試薬特級)を加えるか、一夜放置するか、分液ロートの中身を取り出して遠心機(KUBOTA社製) で遠心して分離させた。最後に、超純水5mLを分液ロートに加えて抽出し、下層を抜いた。分液ロートに残ったエーテル層を集め、エバポレーターで乾固し、薄黄色固体の画分を105mg得た。この画分をNとした。
<F2画分及びN画分のGeneChipRによる遺伝子解析でのVEGFA遺伝子の発現確認>
ダルベッコ変性イーグル培地(DMEM) (インビトロジェン社製) に5%ウシ血清(FETAL BOVINE SERUM) (EQUITECH-BIO社製) と1%防腐剤(Penicillin-Streptomycin Glutamine) (インビトロジェン社製) を添加した培養液(以下、DMEM培地とする)に、ヒト由来不死化表皮角化細胞(以下HaCaTとする) を2.64×106コ/ mLの濃度で懸濁し、あらかじめDMEM培地を13mL入れておいた直径15cmのディッシュ(Nunc社製) に2mLずつ播種し、95%空気‐5%炭酸ガスの下、37℃で24時間培養した。培養上清を吸引除去後、フェノールレッド不含ダルベッコ変性イーグル培地(インビトロジェン社製) に1%防腐剤(Penicillin-Streptomycin Glutamine) (インビトロジェン社製)を入れた培養液(以下無血清培地とする) を15mLずつディッシュに入れ、さらに48時間培養した。培養上清を吸引除去後、フェノールレッド不含ダルベッコ変性イーグル培地(インビトロジェン社製) に0.1%ウシ血清アルブミン(EQUITECH-BIO社製) と1%防腐剤(Penicillin-Streptomycin Glutamine) (インビトロジェン社製)を入れた培養液(以下、処理用培地とする) を10mL加えた。そこへ、終濃度30μg/ mLになるようエタノールに溶解したF2画分(由来琥珀: 平成14年4月入荷分) 及びN画分(由来琥珀: 平成18年5月入荷) をそれぞれ処理用培地に混ぜたものを(エタノール終濃度: 0.33%)、5mLずつ滴下した。また、処理用培地にエタノール終濃度0.33%になるようエタノールを添加した培養液を処理したものをcontrolとした。これらのディッシュを95%空気‐5%炭酸ガスの下、37℃で24時間培養した。
結果を表1に示した。
<HaCaTを用いたF2画分及びN画分のVEGFA-mRNA発現確認>
DMEM培地に、HaCaTを1.56×106コ/ mLの濃度で懸濁し、あらかじめDMEM培地を4.49mL入れておいた直径6cmのディッシュ(CORNING社製) に512μLずつ播種し、95%空気‐5%炭酸ガスの下、37℃で24時間培養した。培養上清を吸引除去後、無血清培地を5mLずつディッシュに入れ、さらに48時間培養した。培養上清を吸引除去後、処理用培地を3.75mL加えた。そこへ終濃度6、9、12、25μg/ mLになるようエタノールに溶解したF2画分及びN画分をそれぞれ処理用培地に混ぜたもの(エタノール終濃度: 0.25%)を、1.25mLずつ滴下した。また、処理用培地にエタノール終濃度0.25%になるようエタノールを添加した培養液を処理したものをcontrolとした。これらのディッシュを95%空気‐5%炭酸ガスの下、37℃で6時間培養した。
<HaCaTでのHB-EGF中和抗体を用いたF2画分及びN画分のVEGFA-mRNA発現確認>
DMEM培地に、HaCaTを1.46×106コ/ mLの濃度で懸濁し、あらかじめDMEM培地を760μL入れておいた直径3.5cmのディッシュ(ファルコン社製) に240μLずつ播種し、95%空気‐5%炭酸ガスの下、37℃で24時間培養した。培養上清を吸引除去後、無血清培地を1mLずつディッシュに入れ、さらに48時間培養した。培養上清を吸引除去後、処理用培地を710μL加えた。そこへ終濃度25μg/ mLになるようエタノールに溶解したF2画分及びN画分を処理用培地に混ぜたもの (エタノール終濃度: 0.25%)を、それぞれ250μLずつ滴下した。また、処理用培地にエタノール終濃度0.25%になるようエタノールを添加した培養液を処理したものをcontrolとした。さらに、終濃度10μg/mLになるようPBSに溶解した抗ヒト HB-EGF 中和抗体(R&D SYSTEMS社製) (以下、αHB-EGFとする) を40μL滴下した。陰性controlとして、αHB-EGFの代わりに無免疫性ヤギ抗体(シグマ社製) とPBSを用いた。また、αHB-EGFの中和活性があることを確かめるため、PBSに100μg/mLになるよう溶解した組換えヒトHB-EGF (R&D SYSTEMS社製) (以下HB-EGFタンパクとする)をあらかじめ濃度20μg/mLになるようエタノールで希釈し、終濃度50ng/mLになるよう処理用培地に混ぜたものを250μLずつ滴下した。これらのディッシュを95%空気‐5%炭酸ガスの下、37℃で6時間培養した。
<管腔形成(チューブフォーメーション)アッセイによる血管新生促進確認>
ヒト細小血管内皮細胞培養用低血清培地(以下、MCDB131とする) (シグマ社製) に5%ウシ血清(FETAL BOVINE SERUM) (EQUITECH-BIO社製) と0.01μg/mLFibroblast Growth Factor (PEPROTEC社製) を添加した培養液(以下、MCDB131培地とする)でヒト皮膚微小血管内皮細胞 (以下HMVECとする) を95%空気‐5%炭酸ガスの下、37℃で培養した。実験にはBD MatrigelTM Basement Membrane Matrix Growth Factor Reduced, Phenol Red Free(BD社製) (以下、マトリゲルとする) を96 穴 プレート (ファルコン社製) に50μL /wellずつ分注し、37℃で1時間コートしたものを使用した。培養しておいたHMVECを1.0×105コ/ mLの濃度でMCDB131に1%ウシ血清と0.01μg/mL Fibroblast Growth Factorを添加した培養液(以下、MCDB131飢餓培地とする) に懸濁し、あらかじめマトリゲルをコートしておいた96 穴 プレートに50μLずつ播種した。そこへ終濃度15、25μg/ mLになるようエタノールに溶解したF2画分並びにN画分をそれぞれMCDB131飢餓培地に混ぜた培養液を(エタノール終濃度: 0.25%)、50μLずつ滴下した。また、MCDB131飢餓培地にエタノール終濃度0.25%になるようエタノールを添加した培養液を処理したものをcontrolとした。このプレートを95%空気‐5%炭酸ガスの下、37℃で6時間培養した。解析には、血管新生定量ソフトウェアver. 2.0 (クラボウ社製) を用いた。controlサンプルにおける定量結果を100としたときの、試料添加サンプルにおける血管の総面積(以下、AREAとする)、血管の総延長(以下、LENGTHとする)、血管の総分岐点の数(以下、JOINTとする)、一本一本の血管の長さの平均(以下、PATHとする)の値を算出した。
<F2画分並びにN画分のHB-EGF非依存的管腔形成(チューブフォーメーション)促進活性の確認>
MCDB131培地でHMVECを95%空気‐5%炭酸ガスの下、37℃で培養した。実験にはマトリゲルを48穴 プレート (ファルコン社製) に150μL /穴ずつ分注し、37℃で1時間コートしたものを使用した。HMVECを1.0×105コ/ mLの濃度でMCDB131飢餓培地に懸濁し、あらかじめマトリゲルをコートしておいた48穴プレートに150μLずつ播種した。そこへ終濃度15μg/ mLになるようエタノールに溶解したF2画分並びにN画分をそれぞれMCDB131飢餓培地に混ぜた培養液 (エタノール終濃度: 0.25%)を、150μLずつ添加した。また、MCDB131飢餓培地にエタノール終濃度0.25%になるようエタノールを添加した培養液を処理したものをcontrolとした。さらに、終濃度10μg/mLになるようPBSに溶解したαHB-EGFを6μL添加した。陰性controlとして、αHB-EGFの代わりに無免疫ヤギ抗体(シグマ社製) とPBSを用いた。また、αHB-EGFの中和活性があることを確かめるため、PBSに100μg/mLになるよう溶解したHB-EGFタンパクをあらかじめ濃度2.0μg/mLになるようPBSで希釈し、終濃度5ng/mLになるよう処理用培地に混ぜたものを150μLずつ添加した。このプレートを95%空気‐5%炭酸ガスの下、37℃で6時間培養した。解析には、血管新生定量ソフトウェアver. 2.0 (クラボウ社製) を用いた。controlサンプルにおける定量結果を100としたときの、試料添加サンプルにおけるAREA、LENGTH、JOINT、PATHの値を算出した。
<マウス皮膚に塗布したF2画分及びN画分による表皮層におけるVEGF産生促進能の確認>
6週齢のC3Hマウス(日本SLC社)を購入し、1週間馴化飼育した後、背部を除毛剤(カネボウ社製)で除毛した(約2.5 cm×4.0 cm)。一晩馴化飼育した後、F2画分並びにN画分をそれぞれ5 mg/dayあるいは10mg/dayの容量になるようエタノールに溶解したサンプル(25 mg/mLあるいは50 mg/mL)を200μLずつ除毛部位に塗布した。controlとしてはエタノール200μLを同様に塗布した。これを1週間あたり5回塗布(月曜日から金曜日までは24時間ごと5回、土曜日と日曜日は休み)を3週繰り返し、計21日間塗布した。なお、1群につき2匹ずつ用いた。
<マウス皮膚に塗布したF2画分及びN画分による毛成長促進活性の確認>
5週齢のC3Hマウス(日本SLC社)を購入し、2週間馴化飼育した後、背部を電気バリカン(スライヴ社製)で刈毛(約2.5 cm×4.0 cm)し、シェーバー(ダイエー社製)でさらに剃毛した。一晩馴化飼育した後、F2画分並びにN画分をそれぞれ2 mg/dayあるいは5 mg/dayの容量になるようエタノールに溶解したサンプル(10 mg/mLあるいは25 mg/mL)を200μLずつ、剃毛部位に塗布した。controlとしてエタノール200μLを同様に塗布した。また、陽性controlとしてミノキシジル(シグマアルドリッチジャパン社製)を2 mg/dayになるようエタノールに溶解した1%溶液(10 mg/mL)を200μL同様に塗布した。これを1週間あたり5回塗布(月曜日から金曜日までは24時間ごと5回、土曜日と日曜日は休み)を3.5週繰り返し、計24日間塗布した。なお、1群につき3匹ずつ用いた。被毛の成長は、塗布開始25日目に肉眼観察・写真撮影、及び毛成長スコアにて評価した。なお、毛成長スコアは目視的に0:ほとんど毛の成長が認められない状態、1:産毛が生えた状態、2:正常な毛の見た目0〜10%回復した状態、3:正常な毛の見た目10〜20%回復した状態、4:正常な毛の見た目20〜30%回復した状態、5:正常な毛の見た目30〜40%回復した状態、6:正常な毛の見た目40〜50%回復した状態、7:正常な毛の見た目50〜60%回復した状態、8:正常な毛の見た目60〜70%回復した状態、9:正常な毛の見た目70〜80%回復した状態、10:正常な毛の見た目80〜100%回復した状態を設定し,各マウスの毛成長スコアを求めた。
Claims (14)
- 琥珀から低級アルコールで抽出する工程を含むVEGF産生促進剤の製造方法。
- 琥珀を粉砕後疎水性有機溶媒により洗浄する工程、低級アルコールで抽出する工程、及びカラムクロマトグラフィーで分画する工程を含む、VEGF産生促進剤の製造方法。
- カラムクロマトグラフィーが、炭化水素が化学結合したシリカゲルを充填剤とする、請求項2項記載の方法。
- 琥珀を粉砕後疎水性有機溶媒により洗浄する工程、低級アルコールで抽出する工程、及び二相分離により分画する工程を含むVEGF産生促進剤の製造方法。
- 前記二相分離により分画する工程が、低級エーテル及び水相による二相分離により分画する工程であって、水相に酸性の水溶液及び塩基性の水溶液を用いて、それぞれ塩基性の水溶性成分及び酸性の水溶性成分を除去して中性画分を得る工程を含む請求項4記載の方法。
- 低級アルコールでの抽出を微温ないし室温で7日以上行なう請求項1〜5いずれか1項記載の方法。
- 疎水性有機溶媒が、ベンゼン、ヘキサン及びクロロホルムからなる群から選択される1種以上の有機溶媒である請求項2〜6いずれか1項に記載のVEGF産生促進剤の製造方法。
- 低級アルコールが、エタノール、メタノール、プロパノールもしくはブタノール又はこれらのアルコールからなる群から選ばれる2種以上のアルコール混合物である請求項1〜7いずれか1項記載の方法。
- 琥珀から抽出した抽出物を含むVEGF産生促進剤。
- 請求項1〜8いずれか1項に記載の方法により得られるVEGF産生促進剤。
- 請求項9又は10記載のVEGF産生促進剤を含む養毛剤又は育毛剤。
- 請求項9又は10に記載のVEGF産生促進剤を含有する頭髪・頭皮用化粧料。
- 請求項9又は10に記載のVEGF産生促進剤を含有する頭髪・頭皮用外用薬。
- 琥珀から低級アルコールで抽出する工程を含む方法で抽出した抽出物を含む養毛剤又は育毛剤。
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Cited By (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN103961897A (zh) * | 2013-11-21 | 2014-08-06 | 美乔欣生技股份有限公司 | 超声波辅助萃取与二氧化碳超临界梯度冲提萃取琥珀中之疗效成分 |
CN105267526A (zh) * | 2014-06-12 | 2016-01-27 | 森元生技股份有限公司 | 可溶于水的医用琥珀脂结晶体萃取液的制造方法 |
WO2017119143A1 (ja) * | 2016-01-06 | 2017-07-13 | 株式会社琥珀研究所byヤマノ | 皮膚外用剤 |
WO2018212362A1 (ja) | 2017-05-19 | 2018-11-22 | 株式会社ヤマノビューティケミカル | 糖質の分解・吸収抑制剤 |
WO2019156213A1 (ja) | 2018-02-09 | 2019-08-15 | 琥珀バイオテクノロジー株式会社 | グリセロール放出促進剤 |
CN110496071A (zh) * | 2019-09-29 | 2019-11-26 | 白宏斌 | 一种琥珀精华及其提取方法和应用 |
WO2020031638A1 (ja) | 2018-08-10 | 2020-02-13 | 琥珀バイオテクノロジー株式会社 | アンジオテンシンi変換酵素活性阻害剤 |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2002085314A1 (en) * | 2001-04-24 | 2002-10-31 | Fabryka Kosmetyków 'pollena-Ewa' S.A. | Cosmetic and perfume products with amber |
JP2007314522A (ja) * | 2006-04-25 | 2007-12-06 | Institute Of Physical & Chemical Research | 琥珀から得られる皮膚ターンオーバー促進因子を含有する組成物及びその使用 |
JP2008266260A (ja) * | 2007-04-24 | 2008-11-06 | Institute Of Physical & Chemical Research | 琥珀から得られるヒアルロン酸産生促進因子を含有する組成物及びその使用 |
-
2011
- 2011-05-11 JP JP2011106743A patent/JP5858561B2/ja active Active
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2002085314A1 (en) * | 2001-04-24 | 2002-10-31 | Fabryka Kosmetyków 'pollena-Ewa' S.A. | Cosmetic and perfume products with amber |
JP2007314522A (ja) * | 2006-04-25 | 2007-12-06 | Institute Of Physical & Chemical Research | 琥珀から得られる皮膚ターンオーバー促進因子を含有する組成物及びその使用 |
JP2008266260A (ja) * | 2007-04-24 | 2008-11-06 | Institute Of Physical & Chemical Research | 琥珀から得られるヒアルロン酸産生促進因子を含有する組成物及びその使用 |
Non-Patent Citations (4)
Title |
---|
CSNC200801422012; 森脇 繁: '特集 育毛剤開発の現状と課題' FRAGRANCE JOURNAL Vol.35, No.12 , 20071215, p.26-27, フレグランス ジャーナル社 * |
CSNC201100738001; 丸善製薬株式会社: FRAGRANCE JOURNAL Vol.37, No.10 , 20091015, p.9, フレグランス ジャーナル社 * |
JPN6015000775; 丸善製薬株式会社: FRAGRANCE JOURNAL Vol.37, No.10 , 20091015, p.9, フレグランス ジャーナル社 * |
JPN6015000778; 森脇 繁: '特集 育毛剤開発の現状と課題' FRAGRANCE JOURNAL Vol.35, No.12 , 20071215, p.26-27, フレグランス ジャーナル社 * |
Cited By (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN103961897A (zh) * | 2013-11-21 | 2014-08-06 | 美乔欣生技股份有限公司 | 超声波辅助萃取与二氧化碳超临界梯度冲提萃取琥珀中之疗效成分 |
CN105267526A (zh) * | 2014-06-12 | 2016-01-27 | 森元生技股份有限公司 | 可溶于水的医用琥珀脂结晶体萃取液的制造方法 |
WO2017119143A1 (ja) * | 2016-01-06 | 2017-07-13 | 株式会社琥珀研究所byヤマノ | 皮膚外用剤 |
WO2018212362A1 (ja) | 2017-05-19 | 2018-11-22 | 株式会社ヤマノビューティケミカル | 糖質の分解・吸収抑制剤 |
EP3626246A4 (en) * | 2017-05-19 | 2021-03-10 | Kohaku Bio Technology Co., Ltd. | AGENT TO PREVENT THE DEGRADATION AND ABSORPTION OF CARBON HYDRATES |
US11007237B2 (en) | 2017-05-19 | 2021-05-18 | Kohaku Bio Technology Co., Ltd. | Agent for suppressing carbohydrate breakdown and absorption |
WO2019156213A1 (ja) | 2018-02-09 | 2019-08-15 | 琥珀バイオテクノロジー株式会社 | グリセロール放出促進剤 |
WO2020031638A1 (ja) | 2018-08-10 | 2020-02-13 | 琥珀バイオテクノロジー株式会社 | アンジオテンシンi変換酵素活性阻害剤 |
CN110496071A (zh) * | 2019-09-29 | 2019-11-26 | 白宏斌 | 一种琥珀精华及其提取方法和应用 |
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Publication number | Publication date |
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JP5858561B2 (ja) | 2016-02-10 |
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