JP2010509315A

JP2010509315A - 抗血管形成化合物

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Publication number: JP2010509315A
Application number: JP2009535878A
Authority: JP
Inventors: ブハットアブヒジット; ブラッドショーカート; ドッパラプディヴェンカタ; ライジン‐ユ; リウディングオ
Original assignee: コヴェックス・テクノロジーズ・アイルランド・リミテッド
Priority date: 2006-11-10
Filing date: 2007-11-12
Publication date: 2010-03-25
Anticipated expiration: 2027-11-12
Also published as: KR101309948B1; AU2007318912A1; CN101611053A; US8912148B2; US20150057431A1; DK2089425T3; NO20092203L; MY146985A; JP2012121886A; CN101611053B; NZ576751A; EP2368908A2; PT2089425E; AU2007318912B2; KR20120043028A; WO2008056346B1; MX2009005045A; BRPI0718591A2; US8288349B2; US20080166364A1

Abstract

本発明は、抗体中の結合性部位と連結しているＡＡ標的化剤−リンカー複合体を含むＡＡ標的化化合物を提供する。異常血管形成と関係がある障害を治療するための方法を含む、化合物の様々な使用が提供される。
【化１】

Description

本発明は、抗血管形成活性を有する新規化合物およびこれらの化合物を作製および使用する方法に関する。

血管形成は、新たな血管を形成する基本過程であり、生殖、発生および創傷修復等の種々の正常な身体活動に不可欠なものである。血管形成は、正常状態では高度に調節された過程であるが、調節されていない血管形成によって多くの疾患（「血管形成疾患」と特徴付けられる）が引き起こされ、また増悪する。例えば、眼球の血管新生は、失明の最も多い原因に関与するとされている。関節炎等のいくつかの既存の状態において、新たに形成された毛細血管は、関節に浸潤し、軟骨を破壊する。糖尿病において、網膜中に形成された新たな毛細管は、硝子体に浸潤し、出血し、失明を引き起こす。固形腫瘍の成長および転移も血管形成依存性である（Ｊ．Ｆｏｌｋｍａｎ、ＣａｎｃｅｒＲｅｓ．、４６、４６７〜４７３（１９８６）、Ｊ．Ｆｏｌｋｍａｎ、Ｊ．Ｎａｔｌ．ＣａｎｃｅｒＩｎｓｔ．、８２、４〜６（１９８９））。例えば、２ｍｍ超まで肥大する腫瘍は、新たな毛細血管の成長を誘発することによってそれら独自の血液供給を得ることが示されている。これらの新たな血管が腫瘍を取り囲むと、腫瘍細胞が循環に入り、肝臓、肺および骨等の遠位部位に転移するための手段となる（Ｎ．Ｗｅｉｄｎｅｒら、Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．、３２４、１〜８（１９９１））。

血管形成関連因子アンジオポイエチン−２（「Ａｎｇ−２」）と結合する様々なペプチドが同定されている（Ｏｌｉｎｅｒ，Ｊ．ら、ＣａｎｃｅｒＣｅｌｌ、２０４（６）、５０７〜５１６（２００４））。Ａｎｇ−２結合ペプチドは、抗血管形成活性を有することを示した。

本明細書におけるいかなる技術の参照も、その参照された技術が共通の一般知識の一部を形成することのいかなる形態または示唆の肯定でもなく、そのように解釈されるべきではない。

本発明は、多くの用途において有用な固有の特異性および生物学的特性を持つＡｎｇ−２結合ペプチドに基づく抗血管形成標的化化合物（ＡＡ標的化化合物）を提供する。本発明の抗血管形成標的化化合物は、抗血管形成標的化剤を抗体中の結合性部位と共有結合させることによって形成される。本発明の標的化化合物および薬学的に許容できる担体を含む医薬組成物も提供される。一部の実施形態において、本発明は、

と実質的に相同の配列を含むペプチドを含む標的化剤を提供し、
ここで、
ｘ^１は任意の残基であってよく、ｘ^２は任意の残基であってよく、ｘ^３は任意の芳香族アミノ酸残基であってよく、ｘ^４は任意の残基であってよく、ｘ^５は、Ｐ、ｈＰ、ｄｈＰまたはＢｎＨＰであってよく、ｘ^６は任意の残基であってよく、ｘ^８はＤまたはＥであってよく、ｘ^９は求核性または求電子性側鎖を含む任意の残基であってよく、ｘ^１０はＤまたはＥであってよく、ｘ^１１は求核性または求電子性側鎖を含む任意の残基であってよく、ｘ^１２は任意の残基であってよく、ｘ^１３は、Ｌ、ＨＬ、Ｎｖａ、Ｉ、ＨｃｈＡ、ＨＦおよびＴｈＡからなる群より選択されてよく、ｘ^１４は任意の芳香族アミノ酸残基であってよく、ｘ^１５はＤまたはＥであってよく、ｘ^１６は任意の残基であってよく、ｘ^１７は任意の芳香族アミノ酸残基であってよく、ｘ^１８は任意の残基であってよく、ｘ^１９は任意の残基であってよく、ｘ^２０は任意の残基であってもよく、またｘ^２２およびｘ^２１が存在しない場合は存在しなくてもよく、ｘ^２１は任意の残基であってもよく、またｘ^２２が存在しない場合は存在しなくてもよく、ｘ^２２は任意の残基であってもよく、また存在しなくてよい。

ｘ^１はＱであってよい。ｘ^１はＴであってよい。ｘ^１はＳであってよい。ｘ^１はＲであってよい。ｘ^１はＨであってよい。ｘ^２はＫであってよい。ｘ^２はＮであってよい。ｘ^２はＲであってよい。ｘ^２はＨであってよい。ｘ^２はＡｃＫであってよい。ｘ^２はＮｉｃｋであってよい。ｘ^２はＣｂｃＫであってよい。一部の実施形態において、ｘ^２は、Ｋ、Ｎ、Ｒ、Ｈ、ＡｃＫ、ＮｉｃｋまたはＣｂｃＫからなる群より選択されてよい。Ｘ^２は、Ｎ、Ｒ、Ｈ、ＡｃＫ、ＮｉｃｋまたはＣｂｃＫからなる群より選択されてよい。Ｘ^２は、Ｒ、Ｈ、ＡｃＫ、ＮｉｃｋまたはＣｂｃＫからなる群より選択されてよい。Ｘ^２は、Ｒ、Ｈ、ＡｃＫまたはＣｂｃＫからなる群より選択されてよい。ｘ^２は、Ｒ、ＨまたはＡｃＫからなる群より選択されてよい。ｘ^３はＦであってよい。ｘ^３はＹであってよい。ｘ^３はＷであってよい。ｘ^３はＢＰＡであってよい。ｘ^３はＣＦであってよい。ｘ^３はＮＦであってよい。ｘ^４はＱであってよい。ｘ^４はＭであってよい。ｘ^４はＥであってよい。ｘ^４はＫであってよい。ｘ^５はＰであってよい。ｘ^５はＨＰであってよい。ｘ^５はＤＨＰであってよい。ｘ^５はＢｎＨＰであってよい。ｘ^６はＭであってよい。ｘ^６はＬであってよい。ｘ^６はＩであってよい。ｘ^８はＥであってよい。ｘ^８はＤであってよい。ｘ^９はＬであってよい。ｘ^９はＩであってよい。ｘ^９はＴＡであってよい。ｘ^９はＴｈＡであってよい。ｘ^９はＫであってよい。ｘ^９はＡｃＫであってよい。ｘ^１０はＥであってよい。ｘ^１０はＤであってよい。ｘ^１１はＱであってよい。ｘ^１１はＮであってよい。ｘ^１１はＣであってよい。ｘ^１１はＫであってよい。ｘ^１１はＡｃＫであってよい。ｘ^１１はＤａｂであってよい。Ｘ^１１はＤａｐであってよい。ｘ^１２はＴであってよい。ｘ^１２はＲであってよい。ｘ^１２はＫであってよい。ｘ^１３はＬであってよい。ｘ^１３はＨＬであってよい。ｘ^１３はＮｖａであってよい。ｘ^１３はＩであってよい。ｘ^１３はＨｃｈＡであってよい。ｘ^１３はＨＦであってよい。ｘ^１３はＴｈＡであってよい。ｘ^１３はＫであってよい。一部の実施形態において、ｘ^１３は、Ｌ、ＨＬ、Ｎｖａ、Ｉ、ＨｃｈＡ、ＨＦおよびＴｈＡからなる群より選択されてよい。一部の実施形態において、ｘ^１３は、Ｌ、ＨＬおよびＮｖａからなる群より選択されてよい。ｘ^１４はＦであってよい。ｘ^１４はＹであってよい。ｘ^１４はＷであってよい。ｘ^１４はＢＰＡであってよい。ｘ^１４はＣＦであってよい。ｘ^１４はＮＦであってよい。ｘ^１５はＤであってよい。ｘ^１５はＥであってよい。ｘ^１６はＱであってよい。ｘ^１６はＮであってよい。ｘ^１７はＦであってよい。ｘ^１７はＹであってよい。ｘ^１７はＷであってよい。ｘ^１７はＢＰＡであってよい。Ｘ^１７はＣＦであってよい。ｘ^１７はＮＦであってよい。ｘ^１８はＭであってよい。ｘ^１９はＬであってよい。ｘ^１９はＩであってよい。ｘ^２０はＱであってよい。ｘ^２０はＮであってよい。ｘ^２１はＱであってよい。ｘ^２１はＮであってよい。ｘ^２２はＧであってよい。

一部の実施形態において、本発明は、

と実質的に相同の配列を含むペプチドを含む標的化剤を提供し、
ここで、
ｘ^１、ｘ^２、ｘ^４、ｘ^６、ｘ^１２、ｘ^１６、ｘ^１８、ｘ^１９のそれぞれは、個々に、任意の残基であってよく、
ｘ^３、ｘ^１４およびｘ^１７のそれぞれは、個々に、任意の芳香族アミノ酸残基であってよく、
ｘ^５は、Ｐ、ｈＰ、ｄｈＰまたはＢｎＨＰのうちの１つであってよく、
ｘ^９およびＸ^１１のそれぞれは、個々に、求核性または求電子性側鎖を含む任意の残基であってよく、
ｘ^１３は、Ｌ、ＨＬ、Ｎｖａ、Ｉ、ＨｃｈＡ、ＨＦおよびＴｈＡからなる群より選択されてよく、
ｘ^２０は任意の残基であってもよく、またｘ^２２およびｘ^２１が存在しない場合は存在しなくてもよく、
ｘ^２１は任意の残基であってもよく、またｘ^２２が存在しない場合は存在しなくてもよく、
ｘ^２２は任意の残基であってもよく、また存在しなくてもよい。

ｘ^１はＱであってよい。ｘ^１はＴであってよい。ｘ^１はＳであってよい。ｘ^１はＲであってよい。ｘ^１はＨであってよい。ｘ^２はＫであってよい。ｘ^２はＮであってよい。ｘ^２はＲであってよい。ｘ^２はＨであってよい。ｘ^２はＡｃＫであってよい。ｘ^２はＮｉｃｋであってよい。ｘ^２はＣｂｃＫであってよい。一部の実施形態において、ｘ^２は、Ｋ、Ｎ、Ｒ、Ｈ、ＡｃＫ、ＮｉｃｋまたはＣｂｃＫからなる群より選択されてよい。ｘ^２は、Ｎ、Ｒ、Ｈ、ＡｃＫ、ＮｉｃｋまたはＣｂｃＫからなる群より選択されてよい。Ｘ^２は、Ｒ、Ｈ、ＡｃＫ、ＮｉｃｋまたはＣｂｃＫからなる群より選択されてよい。ｘ^２は、Ｒ、Ｈ、ＡｃＫまたはＣｂｃＫからなる群より選択されてよい。ｘ^２は、Ｒ、ＨまたはＡｃＫからなる群より選択されてよい。ｘ^３はＦであってよい。ｘ^３はＹであってよい。ｘ^３はＷであってよい。ｘ^３はＢＰＡであってよい。ｘ^３はＣＦであってよい。ｘ^３はＮＦであってよい。ｘ^４はＱであってよい。ｘ^４はＭであってよい。ｘ^４はＥであってよい。ｘ^４はＫであってよい。ｘ^５はＰであってよい。ｘ^５はＨＰであってよい。ｘ^５はＤＨＰであってよい。ｘ^５はＢｎＨＰであってよい。ｘ^６はＭであってよい。ｘ^６はＬであってよい。ｘ^６はＩであってよい。ｘ^９はＬであってよい。ｘ^９はＩであってよい。ｘ^９はＴＡであってよい。ｘ^９はＴｈＡであってよい。ｘ^９はＫであってよい。ｘ^９はＡｃＫであってよい。ｘ^１１はＱであってよい。ｘ^１１はＮであってよい。ｘ^１１はＣであってよい。Ｘ^１１はＫであってよい。Ｘ^１１はＡｃＫであってよい。ｘ^１１はＤａｂであってよい。Ｘ^１１はＤａｐであってよい。ｘ^１２はＴであってよい。ｘ^１２はＲであってよい。ｘ^１２はＫであってよい。ｘ^１３はＬであってよい。ｘ^１３はＨＬであってよい。ｘ^１３はＮｖａであってよい。ｘ^１３はＩであってよい。ｘ^１３はＨｃｈＡであってよい。ｘ^１３はＨＦであってよい。ｘ^１３はＴｈＡであってよい。一部の実施形態において、ｘ^１３は、Ｌ、ＨＬ、Ｎｖａ、Ｉ、ＨｃｈＡ、ＨＦおよびＴｈＡからなる群より選択されてよい。一部の実施形態において、ｘ^１３は、Ｌ、ＨＬおよびＮｖａからなる群より選択されてよい。ｘ^１４はＦであってよい。ｘ^１４はＹであってよい。ｘ１^４はＷであってよい。ｘ^１４はＢＰＡであってよい。ｘ^１４はＣＦであってよい。ｘ^１４はＮＦであってよい。ｘ^１６はＱであってよい。ｘ^１６はＮであってよい。ｘ^１７はＦであってよい。ｘ^１７はＹであってよい。ｘ^１７はＷであってよい。ｘ^１７はＢＰＡであってよい。ｘ^１７はＣＦであってよい。ｘ^１７はＮＦであってよい。ｘ^１８はＭであってよい。ｘ^１９はＬであってよい。ｘ^１９はＩであってよい。ｘ^２０はＱであってよい。ｘ^２０はＮであってよい。ｘ^２１はＱであってよい。ｘ^２１はＮであってよい。ｘ^２２はＧであってよい。

一部の実施形態において、本発明は、

と実質的に相同の配列を含むペプチドを含む標的化剤を提供し、
ここで、ｘ^１、ｘ^４、ｘ^６、ｘ^１２、ｘ^１６、ｘ^１８、ｘ^１９のそれぞれは、個々に、任意の残基であってよく、ｘ^３、ｘ^１４およびｘ^１７のそれぞれは、個々に、任意の芳香族アミノ酸残基であってよく、ｘ^５は、Ｐ、ｈＰ、ｄｈＰまたはＢｎＨＰであってよい。
ｘ^９およびＸ^１１のそれぞれは、個々に、求核性または求電子性側鎖を含む任意の残基であってよく、ｘ^１３は、Ｌ、ＨＬ、Ｎｖａ、Ｉ、ＨｃｈＡ、ＨＦおよびＴｈＡからなる群より選択されてよく、ｘ^２０は任意の残基であってもよく、またｘ^２２およびｘ^２１が存在しない場合は存在しなくてもよく、ｘ^２１は任意の残基であってもよく、またｘ^２２が存在しない場合は存在しなくてもよく、ｘ^２２は任意の残基であってもよく、また存在しなくてもよい。表７中の化合物２２、２４、２９、３０、３１、３２、３３、４４、４５、５６、５７、５８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３４、３５および４２は、この式に包括される本発明の態様を例示している。

ｘ^１はＱであってよい。ｘ^１はＴであってよい。ｘ^１はＳであってよい。ｘ^１はＲであってよい。ｘ^１はＨであってよい。ｘ^３はＦであってよい。ｘ^３はＹであってよい。ｘ^３はＷであってよい。ｘ^３はＢＰＡであってよい。ｘ^３はＣＦであってよい。ｘ^３はＮＦであってよい。ｘ^４はＱであってよい。ｘ^４はＭであってよい。ｘ^４はＥであってよい。ｘ^４はＫであってよい。ｘ^５はＰであってよい。ｘ^５はＨＰであってよい。ｘ^５はＤＨＰであってよい。ｘ^５はＢｎＨＰであってよい。ｘ^６はＭであってよい。ｘ^６はＬであってよい。ｘ^６はＩであってよい。ｘ^９はＬであってよい。ｘ^９はＩであってよい。ｘ^９はＴＡであってよい。ｘ^９はＴｈＡであってよい。ｘ^９はＫであってよい。ｘ^９はＡｃＫであってよい。ｘ^１１はＱであってよい。ｘ^１１はＮであってよい。ｘ^１１はＣであってよい。ｘ^１１はＫであってよい。ｘ^１１はＡｃＫであってよい。ｘ^１１はＤａｂであってよい。ｘ^１１はＤａｐであってよい。ｘ^１２はＴであってよい。ｘ^１２はＲであってよい。ｘ^１２はＫであってよい。ｘ^１３はＬであってよい。ｘ^１３はＨＬであってよい。ｘ^１３はＮｖａであってよい。ｘ^１３はＩであってよい。ｘ^１３はＨｃｈＡであってよい。ｘ^１３はＨＦであってよい。ｘ^１３はＴｈＡであってよい。一部の実施形態において、ｘ^１３は、Ｌ、ＨＬ、Ｎｖａ、Ｉ、ＨｃｈＡ、ＨＦおよびＴｈＡからなる群より選択されてよい。一部の実施形態において、ｘ^１３は、Ｌ、ＨＬおよびＮｖａからなる群より選択されてよい。ｘ^１４はＦであってよい。ｘ^１４はＹであってよい。ｘ１^４はＷであってよい。ｘ^１４はＢＰＡであってよい。ｘ^１４はＣＦであってよい。ｘ^１４はＮＦであってよい。ｘ^１６はＱであってよい。ｘ^１６はＮであってよい。ｘ^１７はＦであってよい。ｘ^１７はＹであってよい。ｘ^１７はＷであってよい。ｘ^１７はＢＰＡであってよい。Ｘ^１７はＣＦであってよい。ｘ^１７はＮＦであってよい。ｘ^１８はＭであってよい。ｘ^１９はＬであってよい。ｘ^１９はＩであってよい。ｘ^２０はＱであってよい。ｘ^２０はＮであってよい。ｘ^２１はＱであってよい。ｘ^２１はＮであってよい。ｘ^２２はＧであってよい。

一部の実施形態において、本発明は、

と実質的に相同の配列を含むペプチドを含む標的化剤を提供し、
ここで、
ｘ^１、ｘ^４、ｘ^６、ｘ^１２、ｘ^１６、ｘ^１８、ｘ^１９のそれぞれは、個々に、任意の残基であってよく、ｘ^３、ｘ^１４およびｘ^１７のそれぞれは、個々に、任意の芳香族アミノ酸残基であってよく、ｘ^５は、Ｐ、ｈＰ、ｄｈＰまたはＢｎＨＰであってよく、ｘ^９およびｘ^１１のそれぞれは、個々に、求核性または求電子性側鎖を含む任意の残基であってよく、ｘ^１３は、Ｌ、ＨＬ、Ｎｖａ、Ｉ、ＨｃｈＡ、ＨＦおよびＴｈＡからなる群より選択されてよく、ｘ^２０は任意の残基であってもよく、またｘ^２２およびｘ^２１が存在しない場合は存在しなくてもよく、ｘ^２１は任意の残基であってもよく、またｘ^２２が存在しない場合は存在しなくてもよく、ｘ^２２は任意の残基であってもよく、また存在しなくてもよい。表７中の化合物２３、２５、２８、５６、５７および５８は、本発明のこれらの態様を例示している。

一部の実施形態において、本発明は、

と実質的に相同の配列を含むペプチドを含む標的化剤を提供し、
ここで、ｘ^１、ｘ^２、ｘ^４、ｘ^６、ｘ^１２、ｘ^１６、ｘ^１８、ｘ^１９のそれぞれは、個々に、任意の残基であってよく、ｘ^３、ｘ^１４およびｘ^１７のそれぞれは、個々に、任意の芳香族アミノ酸残基であってよく、ｘ^５は、Ｐ、ｈＰ、ｄｈＰまたはＢｎＨＰであってよく、ｘ^９は任意の残基であってよく、Ｌ、Ｉ、Ｋ、ＴｈＡおよびＡｃＫの群より選択されてよく、Ｘ^１３は、Ｌ、ＨＬ、Ｎｖａ、Ｉ、ＨｃｈＡ、ＨＦおよびＴｈＡからなる群より選択されてよく、ｘ^２０は任意の残基であってもよく、またｘ^２２およびｘ^２１が存在しない場合は存在しなくてもよく、ｘ^２１は任意の残基であってもよく、またｘ^２２が存在しない場合は存在しなくてもよく、ｘ^２２は任意の残基であってもよく、また存在しなくてもよい。

ｘ^１はＱであってよい。ｘ^１はＴであってよい。ｘ^１はＳであってよい。ｘ^１はＲであってよい。ｘ^１はＨであってよい。ｘ^２はＫであってよい。ｘ^２はＮであってよい。ｘ^２はＲであってよい。ｘ^２はＨであってよい。ｘ^２はＡｃＫであってよい。ｘ^２はＮｉｃｋであってよい。ｘ^２はＣｂｃＫであってよい。一部の実施形態において、ｘ^２は、Ｋ、Ｎ、Ｒ、Ｈ、ＡｃＫ、ＮｉｃｋまたはＣｂｃＫからなる群より選択されてよい。Ｘ^２は、Ｎ、Ｒ、Ｈ、ＡｃＫ、ＮｉｃｋまたはＣｂｃＫからなる群より選択されてよい。Ｘ^２は、Ｒ、Ｈ、ＡｃＫ、ＮｉｃｋまたはＣｂｃＫからなる群より選択されてよい。Ｘ^２は、Ｒ、Ｈ、ＡｃＫまたはＣｂｃＫからなる群より選択されてよい。Ｘ^２は、Ｒ、ＨまたはＡｃＫからなる群より選択されてよい。ｘ^３はＦであってよい。ｘ^３はＹであってよい。ｘ^３はＷであってよい。ｘ^３はＢＰＡであってよい。ｘ^３はＣＦであってよい。ｘ^３はＮＦであってよい。ｘ^４はＱであってよい。ｘ^４はＭであってよい。ｘ^４はＥであってよい。ｘ^４はＫであってよい。ｘ^５はＰであってよい。ｘ^５はＨＰであってよい。ｘ^５はＤＨＰであってよい。ｘ^５はＢｎＨＰであってよい。ｘ^６はＭであってよい。ｘ^６はＬであってよい。ｘ^６はＩであってよい。ｘ^９はＬであってよい。ｘ^９はＩであってよい。ｘ^９はＴＡであってよい。ｘ^９はＴｈＡであってよい。ｘ^９はＫであってよい。ｘ^９はＡｃＫであってよい。ｘ^１２はＴであってよい。ｘ^１２はＲであってよい。ｘ^１２はＫであってよい。ｘ^１３はＬであってよい。ｘ^１３はＨＬであってよい。ｘ^１３はＮｖａであってよい。ｘ^１３はＩであってよい。ｘ^１３はＨｃｈＡであってよい。ｘ^１３はＨＦであってよい。ｘ^１３はＴｈＡであってよい。一部の実施形態において、ｘ^１３は、Ｌ、ＨＬ、Ｎｖａ、Ｉ、ＨｃｈＡ、ＨＦおよびＴｈＡからなる群より選択されてよい。一部の実施形態において、ｘ^１３は、Ｌ、ＨＬおよびＮｖａからなる群より選択されてよい。ｘ^１４はＦであってよい。ｘ^１４はＹであってよい。ｘ１^４はＷであってよい。ｘ^１４はＢＰＡであってよい。Ｘ^１４はＣＦであってよい。ｘ^１４はＮＦであってよい。ｘ^１６はＱであってよい。ｘ^１６はＮであってよい。ｘ^１７はＦであってよい。ｘ^１７はＹであってよい。ｘ^１７はＷであってよい。ｘ^１７はＢＰＡであってよい。Ｘ^１７はＣＦであってよい。ｘ^１７はＮＦであってよい。ｘ^１８はＭであってよい。ｘ^１９はＬであってよい。ｘ^１９はＩであってよい。ｘ^２０はＱであってよい。ｘ^２０はＮであってよい。ｘ^２１はＱであってよい。ｘ^２１はＮであってよい。ｘ^２２はＧであってよい。

一部の実施形態において、本発明は、

と実質的に相同の配列を含むペプチドを含む標的化剤を提供し、
ここで、
ｘ^２はＡｃＫ、Ｎ、Ｒ、Ｈ、Ｎｉｃｋ、ＣｂｃＫであってよく、ｘ^３、ｘ^１４およびｘ^１７のそれぞれは、個々に、任意の芳香族アミノ酸残基であってよく、ｘ^５は、Ｐ、ｈＰ、ｄｈＰまたはＢｎＨＰであってよく、ｘ^９は、Ｋ、ＡｃＫ、Ｉｌｅ、ＬまたはＴｈＡのうちのいずれか１つであってよく、ｘ^１１は、Ｋ、Ｄａｂ、Ｄａｐ、ＡｃＫ、ＣまたはＲのうちのいずれか１つであってよく、ｘ^１３は、Ｌ、ＨＬ、Ｎｖａ、Ｉ、ＨｃｈＡ、ＨＦおよびＴｈＡからなる群より選択されてよい。

ｘ^２はＫであってよい。ｘ^２はＮであってよい。ｘ^２はＲであってよい。ｘ^２はＨであってよい。ｘ^２はＡｃＫであってよい。ｘ^２はＮｉｃｋであってよい。ｘ^２はＣｂｃＫであってよい。一部の実施形態において、ｘ^２は、Ｋ、Ｎ、Ｒ、Ｈ、ＡｃＫ、ＮｉｃｋまたはＣｂｃＫからなる群より選択されてよい。Ｘ^２は、Ｎ、Ｒ、Ｈ、ＡｃＫ、ＮｉｃｋまたはＣｂｃＫからなる群より選択されてよい。Ｘ^２は、Ｒ、Ｈ、ＡｃＫ、ＮｉｃｋまたはＣｂｃＫからなる群より選択されてよい。Ｘ^２は、Ｒ、Ｈ、ＡｃＫまたはＣｂｃＫからなる群より選択されてよい。Ｘ^２は、Ｒ、ＨまたはＡｃＫからなる群より選択されてよい。ｘ^３はＦであってよい。ｘ^３はＹであってよい。ｘ^３はＷであってよい。ｘ^３はＢＰＡであってよい。ｘ^３はＣＦであってよい。ｘ^３はＮＦであってよい。ｘ^５はＰであってよい。ｘ^５はＨＰであってよい。ｘ^５はＤＨＰであってよい。ｘ^５はＢｎＨＰであってよい。ｘ^９はＬであってよい。ｘ^９はＩであってよい。ｘ^９はＴＡであってよい。ｘ^９はＴｈＡであってよい。ｘ^９はＫであってよい。ｘ^９はＡｃＫであってよい。ｘ^１１はＱであってよい。ｘ^１１はＮであってよい。ｘ^１１はＣであってよい。ｘ^１１はＫであってよい。ｘ^１１はＡｃＫであってよい。ｘ^１１はＤａｂであってよい。ｘ^１３はＬであってよい。ｘ^１３はＨＬであってよい。ｘ^１３はＮｖａであってよい。ｘ^１３はＩであってよい。ｘ^１３はＨｃｈＡであってよい。ｘ^１３はＨＦであってよい。ｘ^１３はＴｈＡであってよい。一部の実施形態において、ｘ^１３は、Ｌ、ＨＬ、Ｎｖａ、Ｉ、ＨｃｈＡ、ＨＦおよびＴｈＡからなる群より選択されてよい。一部の実施形態において、ｘ^１３は、Ｌ、ＨＬおよびＮｖａからなる群より選択されてよい。ｘ^１４はＦであってよい。ｘ^１４はＹであってよい。ｘ１^４はＷであってよい。ｘ^１４はＢＰＡであってよい。Ｘ^１４はＣＦであってよい。ｘ^１４はＮＦであってよい。ｘ^１７はＦであってよい。ｘ^１７はＹであってよい。ｘ^１７はＷであってよい。ｘ^１７はＢＰＡであってよい。Ｘ^１７はＣＦであってよい。ｘ^１７はＮＦであってよい。

一部の実施形態において、本発明は、

と実質的に相同の配列を含むペプチドを含む標的化剤を提供し、
ここで、
ｘ^２は、Ｋ、Ｎ、Ｒ、Ｈ、ＡｃＫ、ＮｉｃｋまたはＣｂｃＫのうちのいずれか１つであってよく、ｘ^３、ｘ^１４およびｘ^１７のそれぞれは、個々に、任意の芳香族アミノ酸残基であってよく、ｘ^５は、Ｐ、ｈＰ、ｄｈＰまたはＢｎＨＰであってよく、ｘ^９は、Ｋ、ＡｃＫ、Ｉｌｅ、ＬまたはＴｈＡのうちのいずれか１つであってよく、ｘ^１３は、Ｌ、ＨＬ、Ｎｖａ、Ｉ、ＨｃｈＡ、ＨＦおよびＴｈＡからなる群より選択されてよい。ｘ^２はＫであってよい。ｘ^２はＮであってよい。ｘ^２はＲであってよい。ｘ^２はＨであってよい。ｘ^２はＡｃＫであってよい。ｘ^２はＮｉｃｋであってよい。ｘ^２はＣｂｃＫであってよい。一部の実施形態において、ｘ^２は、Ｋ、Ｎ、Ｒ、Ｈ、ＡｃＫ、ＮｉｃｋまたはＣｂｃＫからなる群より選択されてよい。Ｘ^２は、Ｎ、Ｒ、Ｈ、ＡｃＫ、ＮｉｃｋまたはＣｂｃＫからなる群より選択されてよい。Ｘ^２は、Ｒ、Ｈ、ＡｃＫ、ＮｉｃｋまたはＣｂｃＫからなる群より選択されてよい。Ｘ^２は、Ｒ、Ｈ、ＡｃＫまたはＣｂｃＫからなる群より選択されてよい。Ｘ^２は、Ｒ、ＨまたはＡｃＫからなる群より選択されてよい。

ｘ^３はＦであってよい。ｘ^３はＹであってよい。ｘ^３はＷであってよい。ｘ^３はＢＰＡであってよい。ｘ^３はＣＦであってよい。ｘ^３はＮＦであってよい。ｘ^５はＰであってよい。ｘ^５はＨＰであってよい。ｘ^５はＤＨＰであってよい。ｘ^５はＢｎＨＰであってよい。ｘ^９はＬであってよい。ｘ^９はＩであってよい。ｘ^９はＴＡであってよい。ｘ^９はＴｈＡであってよい。ｘ^９はＫであってよい。ｘ^９はＡｃＫであってよい。ｘ^１３はＬであってよい。ｘ^１３はＨＬであってよい。ｘ^１３はＮｖａであってよい。ｘ^１３はＩであってよい。ｘ^１３はＨｃｈＡであってよい。ｘ^１３はＨＦであってよい。ｘ^１３はＴｈＡであってよい。一部の実施形態において、ｘ^１３は、Ｌ、ＨＬ、Ｎｖａ、Ｉ、ＨｃｈＡ、ＨＦおよびＴｈＡからなる群より選択されてよい。一部の実施形態において、ｘ^１３は、Ｌ、ＨＬおよびＮｖａからなる群より選択されてよい。ｘ^１４はＦであってよい。ｘ^１４はＹであってよい。ｘ１^４はＷであってよい。ｘ^１４はＢＰＡであってよい。Ｘ^１４はＣＦであってよい。ｘ^１４はＮＦであってよい。ｘ^１７はＦであってよい。ｘ^１７はＹであってよい。ｘ^１７はＷであってよい。ｘ^１７はＢＰＡであってよい。Ｘ^１７はＣＦであってよい。ｘ^１７はＮＦであってよい。

一部の実施形態において、本発明は、

と実質的に相同の配列を含むペプチドを含む標的化剤を提供し、
ここで、
ｘ^３、ｘ^１４およびｘ^１７のそれぞれは、個々に、任意の芳香族アミノ酸残基であってよく、ｘ^５は、Ｐ、ｈＰ、ｄｈＰまたはＢｎＨＰであってよく、ｘ^９は、Ｋ、ＡｃＫ、Ｉｌｅ、ＬまたはＴｈＡのうちのいずれか１つであってよく、ｘ^１３は、Ｌ、ＨＬ、Ｎｖａ、Ｉ、ＨｃｈＡ、ＨＦおよびＴｈＡからなる群より選択されてよい。ｘ^３はＦであってよい。ｘ^３はＹであってよい。ｘ^３はＷであってよい。ｘ^３はＢＰＡであってよい。ｘ^３はＣＦであってよい。またはｘ^３はＮＦであってよい。ｘ^５はＰであってよい。ｘ^５はＨＰであってよい。ｘ^５はＤＨＰであってよい。ｘ^５はＢｎＨＰであってよい。ｘ^９はＬであってよい。ｘ^９はＩであってよい。ｘ^９はＴＡであってよい。ｘ^９はＴｈＡであってよい。ｘ^９はＫであってよい。ｘ^９はＡｃＫであってよい。ｘ^１３はＬであってよい。ｘ^１３はＨＬであってよい。ｘ^１３はＮｖａであってよい。ｘ^１３はＩであってよい。ｘ^１３はＨｃｈＡであってよい。ｘ^１３はＨＦであってよい。ｘ^１３はＴｈＡであってよい。一部の実施形態において、ｘ^１３は、Ｌ、ＨＬ、Ｎｖａ、Ｉ、ＨｃｈＡ、ＨＦおよびＴｈＡからなる群より選択されてよい。一部の実施形態において、ｘ^１３は、Ｌ、ＨＬおよびＮｖａからなる群より選択されてよい。ｘ^１４はＦであってよい。ｘ^１４はＹであってよい。ｘ１^４はＷであってよい。ｘ^１４はＢＰＡであってよい。Ｘ^１４はＣＦであってよい。またはｘ^１４はＮＦであってよい。ｘ^１７はＦであってよい。ｘ^１７はＹであってよい。ｘ^１７はＷであってよい。ｘ^１７はＢＰＡであってよい。Ｘ^１７はＣＦであってよい。またはｘ^１７はＮＦであってよい。

一部の実施形態において、本発明は、

と実質的に相同の配列を含むペプチドを含む標的化剤を提供し、
ここで、ｘ^３、ｘ^１４およびｘ^１７のそれぞれは、個々に、任意の芳香族アミノ酸残基であってよく、
ｘ^５は、Ｐ、ｈＰ、ｄｈＰまたはＢｎＨＰであってよく、ｘ^９は、Ｋ、ＡｃＫ、Ｉｌｅ、ＬまたはＴｈＡのうちのいずれか１つであってよく、
ｘ^１３は、Ｌ、ＨＬ、Ｎｖａ、Ｉ、ＨｃｈＡ、ＨＦおよびＴｈＡからなる群より選択されてよい。

一部の実施形態において、本発明は、

と実質的に相同の配列を含むペプチドを含む標的化剤を提供し、
ここで、
ｘ^１、ｘ^４、ｘ^６、ｘ^１２、ｘ^１６、ｘ^１８、ｘ^１９のそれぞれは、個々に、任意の残基であってよく、ｘ^２は、ＡｃＫ、Ｎ、Ｒ、Ｈ、Ｎｉｃｋ、ＣｂｃＫであってよく、ｘ^３、ｘ^１４およびｘ^１７のそれぞれは、個々に、任意の芳香族アミノ酸残基であってよく、
ｘ^５は、Ｐ、ｈＰ、ｄｈＰまたはＢｎＨＰのうちの１つであってよく、ｘ^９およびｘ^１１のそれぞれは、個々に、求核性または求電子性側鎖を含む任意の残基であってよく、ｘ^２０は任意の残基であってもよく、またｘ^２２およびｘ^２１が存在しない場合は存在しなくてもよく、ｘ^２１は任意の残基であってもよく、またｘ^２２が存在しない場合は存在しなくてもよく、ｘ^２２は任意の残基であってもよく、また存在しなくてもよい。

一部の実施形態において、本発明は、

と実質的に相同の配列を含むペプチドを含む標的化剤を提供し、
ここで、ｘ^１、ｘ^４、ｘ^６、ｘ^１２、ｘ^１６、ｘ^１８、ｘ^１９のそれぞれは、個々に、任意の残基であってよく、ｘ^３、ｘ^１４およびｘ^１７のそれぞれは、個々に、任意の芳香族アミノ酸残基であってよく、ｘ^５は、Ｐ、ｈＰ、ｄｈＰまたはＢｎＨＰであってよく、
ｘ^９およびＸ^１１のそれぞれは、個々に、求核性または求電子性側鎖を含む任意の残基であってよく、ｘ^２０は任意の残基であってもよく、またｘ^２２およびｘ^２１が存在しない場合は存在しなくてもよく、ｘ^２１は任意の残基であってもよく、またｘ^２２が存在しない場合は存在しなくてもよく、ｘ^２２は任意の残基であってもよく、また存在しなくてもよい。
表７中の化合物２２、２４、２９、３０、３３、３４、３５、３６、３７、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５４、５５および６２は、この式に包括される本発明の態様を例示している。

一部の実施形態において、本発明は、

と実質的に相同の配列を含むペプチドを含む標的化剤を提供し、
ここで、ｘ^１、ｘ^４、ｘ^６、ｘ^１２、ｘ^１６、ｘ^１８、ｘ^１９のそれぞれは、個々に、任意の残基であってよく、ｘ^３、ｘ^１４およびｘ^１７のそれぞれは、個々に、任意の芳香族アミノ酸残基であってよく、ｘ^５は、Ｐ、ｈＰ、ｄｈＰまたはＢｎＨＰであってよく、
ｘ^９およびＸ^１１のそれぞれは、個々に、求核性または求電子性側鎖を含む任意の残基であってよく、ｘ^２０は任意の残基であってもよく、またｘ^２２およびｘ^２１が存在しない場合は存在しなくてもよく、ｘ^２１は任意の残基であってもよく、またｘ^２２が存在しない場合は存在しなくてもよく、ｘ^２２は任意の残基であってもよく、また存在しなくてもよい。
表７中の化合物２３、２５、２８、５６、５７および５８は、この式に包括される本発明の態様を例示している。

一部の実施形態において、本発明は、

と実質的に相同の配列を含むペプチドを含む標的化剤を提供し、
ここで、ｘ^１、ｘ^４、ｘ^６、ｘ^１２、ｘ^１６、ｘ^１８、ｘ^１９のそれぞれは、個々に、任意の残基であってよく、ｘ^２は、ＡｃＫ、Ｎ、Ｒ、Ｈ、Ｎｉｃｋ、ＣｂｃＫであってよく、ｘ^３、ｘ^１４およびｘ^１７のそれぞれは、個々に、任意の芳香族アミノ酸残基であってよく、ｘ^５は、Ｐ、ｈＰ、ｄｈＰまたはＢｎＨＰであってよく、ｘ^９は任意の残基であってよく、Ｌ、Ｉ、Ｋ、ＴｈＡおよびＡｃＫの群より選択されてよく、ｘ^２０は任意の残基であってもよく、またｘ^２２およびｘ^２１が存在しない場合は存在しなくてもよく、ｘ^２１は任意の残基であってもよく、またｘ^２２が存在しない場合は存在しなくてもよく、ｘ^２２は任意の残基であってもよく、また存在しなくてもよい。

一部の実施形態において、本発明は、

と実質的に相同の配列を含むペプチドを含む標的化剤を提供し、
ここで、ｘ^２は、ＡｃＫ、Ｎ、Ｒ、Ｈ、Ｎｉｃｋ、ＣｂｃＫであってよく、ｘ^３、ｘ^１４およびｘ^１７のそれぞれは、個々に、任意の芳香族アミノ酸残基であってよく、ｘ^５は、Ｐ、ｈＰ、ｄｈＰまたはＢｎＨＰであってよく、ｘ^９は、Ｋ、ＡｃＫ、Ｉｌｅ、ＬまたはＴｈＡのうちのいずれか１つであってよく、ｘ^１１は、Ｋ、Ｄａｂ、ＡｃＫ、ＣまたはＲのうちのいずれか１つであってよい。

一部の実施形態において、本発明は、

と実質的に相同の配列を含むペプチドを含む標的化剤を提供し、
ここで、ｘ^２は、Ｋ、Ｎ、Ｒ、Ｈ、ＡｃＫ、ＮｉｃｋまたはＣｂｃＫのうちのいずれか１つであってよく、ｘ^３、ｘ^１４およびｘ^１７のそれぞれは、個々に、任意の芳香族アミノ酸残基であってよく、ｘ^５は、Ｐ、ｈＰ、ｄｈＰまたはＢｎＨＰであってよく、ｘ^９は、Ｋ、ＡｃＫ、Ｉｌｅ、ＬまたはＴｈＡのうちのいずれか１つであってよい。

一部の実施形態において、本発明は、

と実質的に相同の配列を含むペプチドを含む標的化剤を提供し、
ここで、ｘ^３、ｘ^１４およびｘ^１７のそれぞれは、個々に、任意の芳香族アミノ酸残基であってよく、ｘ^５は、Ｐ、ｈＰ、ｄｈＰまたはＢｎＨＰであってよく、ｘ^９は、Ｋ、ＡｃＫ、Ｉｌｅ、ＬまたはＴｈＡのうちのいずれか１つであってよい。

一部の実施形態において、本発明は、

本発明の化合物は、アミノ末端（Ｎ末端）キャッピング基またはカルボキシ末端（Ｃ末端）キャッピング基を含み得る。Ｎ末端キャッピング基は、「ａｃ」：Ｃ（Ｏ）ＣＨ_３）であってよい（例えば、表７中の化合物２１、２２、２３、２４、２５、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３）。本発明の化合物は、Ｎ末端キャッピング基としてＤＣＢ基を含み得る（例えば、表７中の化合物４９）。本発明の化合物は、Ｎ末端キャッピング基としてＤＦＢ基を含み得る（例えば、表７中の化合物５０）。本発明の化合物は、Ｎ末端キャッピング基としてＰｙＣ基を含み得る（例えば、表７中の化合物５１）。本発明の化合物は、Ｎ末端キャッピング基として２−ＰＥＧ基を含み得る（例えば、表７中の化合物５２）。Ｃ末端キャッピング基は、「ａｍ」：ＮＨ_２であってよい。

一部の実施形態において、本発明は、

と実質的に相同の配列を含むペプチドを含むアンジオポイエチン受容体アンタゴニスト（ＡＡ）標的化剤を提供し、
ここで、
ｘ^２は、Ｋ、Ｎ、Ｒ、Ｈ、ＡｃＫ、Ｎｉｃｋ、ＣｂｃＫおよび連結残基からなる群より選択され、ｘ^５は、Ｐ、ｈＰ、ｄｈＰまたはＢｎＨＰからなる群より選択され、ｘ^９は、Ｌ、Ｉ、ＴｈＡ、ＡｃＫおよび連結残基からなる群より選択され、ｘ^１１は、Ｑ、Ｎ、Ｃ、Ｋ、ＡｃＫ、Ｄａｂ、Ｄａｐおよび連結残基からなる群より選択され、ｘ^１３は、Ｌ、ＨＬ、Ｎｖａ、Ｉ、ＨｃｈＡ、ＨＦ、ＴｈＡおよび連結残基からなる群より選択され、ｘ^１４は、芳香族残基および連結残基からなる群より選択され、ｘ^１５は、Ｄおよび連結残基からなる群より選択され、ｘ^１６は、Ｑ、Ｎおよび連結残基からなる群より選択され、ｘ^１８は、Ｍおよび連結残基からなる群より選択され、ｘ^１９は、Ｌ、Ｉおよび連結残基からなる群より選択され、ここで、Ｑ^１、ｘ^９、ｘ^１１、ｘ^１３、ｘ^１５、ｘ^１６、ｘ^１８、ｘ^１９およびＧ^２２のうちの１つは、抗体中の結合性部位と直接的にまたは中間体リンカーを介して共有結合可能な求核性側鎖を含む連結残基であり、該連結残基は、Ｋ、Ｒ、Ｙ、Ｃ、ＴおよびＳ、またはＮ末端もしくはＣ末端を含む群より選択される。

一部の実施形態において、本発明は、

と実質的に相同の配列を含むペプチドを含むアンジオポイエチン受容体アンタゴニスト（ＡＡ）標的化剤を提供し、
ここで、
ｘ^２は、Ｋ、Ｎ、Ｒ、Ｈ、ＡｃＫ、Ｎｉｃｋ、ＣｂｃＫおよび連結残基からなる群より選択され、ｘ^５は、Ｐ、ｈＰ、ｄｈＰまたはＢｎＨＰからなる群より選択され、ｘ^８はＥまたは連結残基であり、ｘ^９は、Ｌ、Ｉ、ＴｈＡ、ＡｃＫおよび連結残基からなる群より選択され、ｘ^１１は、Ｑ、Ｎ、Ｃ、Ｋ、ＡｃＫ、Ｄａｂ、Ｄａｐおよび連結残基からなる群より選択され、ｘ^１２はＴまたは連結残基であり、ｘ^１３は、Ｌ、ＨＬ、Ｎｖａ、Ｉ、ＨｃｈＡ、ＨＦ、ＴｈＡからなる群より選択され、ｘ^１４は、芳香族残基および連結残基からなる群より選択され、ｘ^１５は、Ｄおよび連結残基からなる群より選択され、ｘ^１６は、Ｑ、Ｎおよび連結残基からなる群より選択され、ｘ^１８は、Ｍおよび連結残基からなる群より選択され、ｘ^１９は、Ｌ、Ｉおよび連結残基からなる群より選択され、ここで、Ｑ^１、ｘ^９、ｘ^８、ｘ^１１、ｘ^１２、ｘ^１５、ｘ^１６、ｘ^１８、ｘ^１９およびＧ^２２のうちの１つは、抗体中の結合性部位と直接的にまたは中間体リンカーを介して共有結合可能な求核性側鎖を含む連結残基であり、該連結残基は、Ｋ、Ｒ、Ｙ、Ｃ、Ｔ、Ｓ、Ｄａｐ、Ｄａｂ、Ｓの相同体、Ｃの相同体、Ｋの相同体、またはＮ末端もしくはＣ末端を含む群より選択される。

連結残基は、Ｋ、Ｙ、Ｔ、ＤａｐおよびＤａｂからなる群より選択することができる。連結残基は、Ｘ^９、Ｘ^１１、Ｘ^１２、Ｘ^１５、Ｘ^１６、Ｘ^１８およびＸ^１９のうちの１つに位置していてよい。一部の実施形態において、Ｘ^１１は連結残基である。表７および８は、異なる連結残基においてｈ３８Ｃ２中の結合性部位と共有結合している本発明の化合物の例を提供する。

ｘ^２は、Ｋ、Ｎ、ＡｃＫからなる群より選択することができる。ｘ^２がＮである本発明の例示的な化合物は、２３、２５、２８、５６、５７および５８である。ｘ^２がＡｃＫである本発明の例示的な化合物は、２２、２４、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４３（ａ）、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５４、５５、６２、６３、６４、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７および９１である。

ｘ^５は、Ｐ、ｈＰおよびｄｈＰからなる群より選択することができる。ｘ^５がＰである本発明の例示的な化合物は、２１、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４３（ａ）、４４、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０および９１である。ｘ^５がＨＰである本発明の例示的な化合物は、３５、４５、４６および４７である。ｘ^５がＤＨＰである本発明の例示的な化合物は、３４である。

ｘ^８はＥであってよい。

ｘ^１１は、Ｋ、ＡｃＫ、ＤａｂおよびＤａｐからなる群より選択することができる。ｘ^１１がＡｃＫである本発明の例示的な化合物は、３０および３２である。ｘ^１１がＤａｂである本発明の例示的な化合物は、５４である。ｘ^１１がＤａｐである本発明の例示的な化合物は、５５である。

Ｘ^１２はＴであってよい。

ｘ^１３は、Ｋ、Ｌ、ＨＬ、ＮｖａおよびＩからなる群より選択することができる。ｘ^１３がＫである本発明の例示的な化合物は、３１および３２である。ｘ^１３がＨＬである本発明の例示的な化合物は、４２である。ｘ^１３がＮｖａである本発明の例示的な化合物は、４１である。ｘ^１３がＩである本発明の例示的な化合物は、３６である。

ｘ^１４は、Ｆ、Ｙ、Ｗ、ＢＰＡ、ＣＦおよびＮＦからなる群より選択することができる。ｘ^１４がＦである本発明の例示的な化合物は、４４である。ｘ^１４がＢＰＡである本発明の例示的な化合物は、４６および５６である。ｘ^１４がＣＦである本発明の例示的な化合物は、４７、５７および６２である。ｘ^１４がＮＦである本発明の例示的な化合物は、４５、４８および５８である。

本発明のＡＡ標的化剤は、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４３（ａ）、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０および９１からなる群より選択される１種または複数の化合物と実質的に相同の配列を含むペプチドを含み得る。

本発明のＡＡ標的化剤は、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３４、３５、３７、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、７５、７６、７７、７８および７９からなる群より選択される１種または複数の化合物と実質的に相同の配列を含むペプチドを含み得る。

本発明のＡＡ標的化剤は、２４、２５、２７、２８、２９、３０、３４、３５、３７、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、５６、５７、５８、６０、６２、７５、７６、７７、７８および７９からなる群より選択される１種または複数の化合物と実質的に相同の配列を含むペプチドを含み得る。

本発明のＡＡ標的化剤は、２２、３４、４１、４３、４４、４８および９１からなる群より選択される１種または複数の化合物と実質的に相同の配列を含むペプチドを含み得る。

本発明のＡＡ標的化剤は、２７、２８、２９、４３、４５および４８からなる群より選択される１種または複数の化合物と実質的に相同の配列を含むペプチドを含み得る。

本発明の化合物は、Ａｎｇ２を標的化するのに有用であり、既存のＡｎｇ２標的化剤よりも有利な特性を実証する。本発明のいくつかの態様において、本発明の有利な剤および化合物は、半減期とＩＣ５０値との間の魅力的なバランスを提供する。

本発明の一部の実施形態において、ｘ^９およびｘ^１１の少なくとも１個の残基は、その側鎖が、求電子剤または求核剤をそれぞれ含む化学基と共有結合できるアミノ酸を含む連結残基である。

連結残基の存在は、本発明の標的化剤に、足場、巨大分子およびその他の部分との連結のための高い柔軟性を提供する。特に、本発明の化合物は、抗体等の足場と、確実に、安全に、かつ効率的に共有結合することができる。驚くべきことに、連結残基をペプチド中のいくつかの主要位置に位置付けることは、ペプチドの安定性および／または結合の増大につながることがわかっている。

連結残基は、連結残基のアミノ末端、カルボキシ末端または側鎖を介する共有結合に利用可能なアミノ酸残基である。連結残基はＫであってよい。その他の実施形態において、連結残基はＹであってよい。その他の実施形態において、連結残基はＴであってよい。連結残基はＤａｂであってよい。連結残基はＤａｐであってよい。一部の実施形態において、連結残基は、Ｋ、Ｄａｂ、Ｄａｐ、ＹおよびＴからなる群より選択される。

その他の実施形態において、連結残基はＣであってよい。連結残基はＲであってよい。連結残基はＳであってよい。連結残基はＮであってよい。連結残基はＱであってよい。連結残基はＤであってよい。連結残基はＥであってよい。

連結残基は任意の１個の残基であってよい。一部の実施形態において、連結残基はｘ^９であってよい。連結残基はｘ^１１であってよい。一部の実施形態において、リシンの側鎖および修飾リシン残基を連結残基として使用することは、その位置における特異的な、確実な、指向性の効率的な化学的共有結合を可能にすることを含むいくつかの有利点を提供することがわかっている。

前述の式（配列番号：１６１〜１７８および配列番号：１９３）を参照すると、より一般的には、
ｘ^１はＱであってよい。ｘ^１はＴであってよい。ｘ^１はＳであってよい。ｘ^１はＲであってよい。ｘ^１はＨであってよい。ｘ^２はＮであってよい。ｘ^２はＲであってよい。ｘ^２はＨであってよい。ｘ^２はＡｃＫであってよい。ｘ^２はＮｉｃｋであってよい。ｘ^２はＣｂｃＫであってよい。一部の実施形態において、ｘ^２は、Ｋ、Ｎ、Ｒ、Ｈ、ＡｃＫ、ＮｉｃｋまたはＣｂｃＫからなる群より選択されてよい。Ｘ^２は、Ｎ、Ｒ、Ｈ、ＡｃＫ、ＮｉｃｋまたはＣｂｃＫからなる群より選択されてよい。Ｘ^２は、Ｒ、Ｈ、ＡｃＫ、ＮｉｃｋまたはＣｂｃＫからなる群より選択されてよい。Ｘ^２は、Ｒ、Ｈ、ＡｃＫまたはＣｂｃＫからなる群より選択されてよい。Ｘ^２は、Ｒ、ＨまたはＡｃＫからなる群より選択されてよい。リンカーおよび抗体を含む本発明の一部の実施形態において、ｘ^２はＫであってよい。ｘ^３はＦであってよい。ｘ^３はＹであってよい。ｘ^３はＷであってよい。ｘ^３はＢＰＡであってよい。ｘ^３はＣＦであってよい。ｘ^３はＮＦであってよい。ｘ^４はＱであってよい。ｘ^４はＭであってよい。ｘ^４はＥであってよい。ｘ^４はＫであってよい。ｘ^６はＭであってよい。ｘ^６はＬであってよい。ｘ^６はＩであってよい。ｘ^８はＥであってよい。ｘ^８はＤであってよい。Ｘ^９はＬであってよい。ｘ^９はＩであってよい。Ｘ^９はＴＡであってよい。Ｘ^９はＴｈＡであってよい。Ｘ^９はＫであってよい。Ｘ^９はＡｃＫであってよい。Ｘ^９は連結残基であってよい。ｘ^１０はＥであってよい。ｘ^１０はＤであってよい。ｘ^１１はＱであってよい。Ｘ^１１はＮであってよい。Ｘ^１１はＣであってよい。Ｘ^１１はＫであってよい。Ｘ^１１はＡｃＫであってよい。Ｘ^１１はＤａｂであってよい。Ｘ^１１はＤａｐであってよい。Ｘ^１１は連結残基であってよい。ｘ^１２はＴであってよい。ｘ^１２はＲであってよい。ｘ^１２はＫであってよい。ｘ^１３はＬであってよい。ｘ^１３はＨＬであってよい。ｘ^１３はＮｖａであってよい。ｘ^１３はＩであってよい。ｘ^１３はＨｃｈＡであってよい。ｘ^１３はＨＦであってよい。ｘ^１３はＴｈＡであってよい。一部の実施形態において、ｘ^１３は、Ｌ、ＨＬ、Ｎｖａ、Ｉ、ＨｃｈＡ、ＨＦおよびＴｈＡからなる群より選択されてよい。一部の実施形態において、ｘ^１３は、Ｌ、ＨＬおよびＮｖａからなる群より選択されてよい。ｘ^１４はＦであってよい。ｘ^１４はＹであってよい。ｘ^１４はＷであってよい。ｘ^１４はＢＰＡであってよい。Ｘ^１４はＣＦであってよい。ｘ^１４はＮＦであってよい。ｘ^１５はＤであってよい。ｘ^１５はＥであってよい。ｘ^１６はＱであってよい。ｘ^１６はＮであってよい。ｘ^１７はＦであってよい。ｘ^１７はＹであってよい。ｘ^１７はＷであってよい。ｘ^１７はＢＰＡであってよい。Ｘ^１７はＣＦであってよい。ｘ^１７はＮＦであってよい。ｘ^１８はＭであってよい。ｘ^１９はＬであってよい。ｘ^１９はＩであってよい。ｘ^２０はＱであってよい。ｘ^２０はＮであってよい。ｘ^２１はＱであってよい。ｘ^２１はＮであってよい。ｘ^２２はＧであってよい。

本発明のいくつかの態様において、本発明のＡＡ標的化剤は、任意のアンジオポイエチン２アンタゴニストを含み得る。

本発明のいくつかの態様において、本発明のＡＡ標的化剤は、

からなる群より選択される１つまたは複数の配列と実質的に相同の配列を含むペプチドを含み得る。

いくつかの態様において、本発明は、

からなる群より選択されるＡＡ標的化剤を提供し、
ここで、
Ｒ^１は、ＣＨ_３、Ｃ（Ｏ）ＣＨ_３、Ｃ（Ｏ）ＣＨ_３、Ｃ（Ｏ）ＣＨ_２ＣＨ_３、Ｃ（Ｏ）ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３、Ｃ（Ｏ）ＣＨ（ＣＨ_３）ＣＨ_３、Ｃ（Ｏ）ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３、Ｃ（Ｏ）ＣＨ（ＣＨ_３）ＣＨ_２ＣＨ_３、Ｃ（Ｏ）Ｃ_６Ｈ_５、Ｃ（Ｏ）ＣＨ_２ＣＨ_２（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_１〜５Ｍｅ、ジクロロベンゾイル（ＤＣＢ）、ジフルオロベンゾイル（ＤＦＢ）、ピリジニルカルボキシレート（ＰｙＣ）もしくはアミド−２−ＰＥＧ、アミノ保護基、脂質脂肪酸基または炭水化物であり、
Ｒ^２は、ＯＨ、ＮＨ_２、ＮＨ（ＣＨ_３）、ＮＨＣＨ_２ＣＨ_３、ＮＨＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３、ＮＨＣＨ（ＣＨ_３）ＣＨ_３、ＮＨＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３、ＮＨＣＨ（ＣＨ_３）ＣＨ_２ＣＨ_３、ＮＨＣ_６Ｈ_５、ＮＨＣＨ_２ＣＨ_２ＯＣＨ_３、ＮＨＯＣＨ_３、ＮＨＯＣＨ_２ＣＨ_３、カルボキシ保護基、脂質脂肪酸基または炭水化物である。

いくつかの態様において、本発明は、式Ｉを有するＡＡ標的化剤−リンカー複合体を提供し、
Ｌ−［ＡＡ標的化剤］（Ｉ）
式中、
［ＡＡ標的化剤］は、

からなる群より選択されるペプチド、薬学的に許容できるその塩、立体異性体、互変異性体、溶媒和物およびプロドラッグであり、ここで、
Ｒ^１は、標的化剤のアミノ末端残基のアミノ基部を指し、ＮＨ_２、ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ_３、ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ_２ＣＨ_３、ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３、ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ（ＣＨ_３）ＣＨ_３、ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３、ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ（ＣＨ_３）ＣＨ_２ＣＨ_３、ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ_６Ｈ_５、ＮＨ（ＣＨ_３）Ｃ（Ｏ）ＣＨ_２ＣＨ_２（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_１〜５Ｍｅ、アミノ保護基、脂質脂肪酸基または炭水化物であり、
Ｒ^２は、標的化剤のカルボキシ末端残基のカルボキシ末端部を指し、ＣＯＯＨ、Ｃ（Ｏ）ＮＨ_２、Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ＣＨ_３）、Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ_２ＣＨ_３、Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３、Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ（ＣＨ_３）ＣＨ_３、Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３、Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ（ＣＨ_３）ＣＨ_２ＣＨ_３、Ｃ（Ｏ）ＮＨＣ_６Ｈ_５、Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ_２ＣＨ_２ＯＣＨ_３、Ｃ（Ｏ）ＮＨＯＣＨ_３、Ｃ（Ｏ）ＮＨＯＣＨ_２ＣＨ_３、カルボキシ保護基、脂質脂肪酸基または炭水化物であり、
Ｌは、式−Ｘ−Ｙ−Ｚを有するリンカー部分であり、ここで、
Ｘは存在していてもよく、ＡＡ標的化剤を含む残基のうちの１つに結合している、生物学的に適合するポリマー、ブロックコポリマーＣ、Ｈ、Ｎ、Ｏ、Ｐ、Ｓ、ハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）またはその塩、アルキル、アルケニル、アルキニル、オキソアルキル、オキソアルケニル、オキソアルキニル、アミノアルキル、アミノアルケニル、アミノアルキニル、スルホアルキル、スルホアルケニル、スルホアルキニル、ホスホアルキル、ホスホアルケニルまたはホスホアルキニル基であり、
Ｙは、少なくとも環構造を含む存在していてもよい認識基であり、
Ｚは、抗体中の結合性部位において側鎖と共有結合することができる反応基である。

上記の発明の態様の記述において、最初のＮＨ基またはＲ^１は、問題のペプチドのＮ末端アミノ酸残基によって提供され、したがって、ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ_３は、ペプチドのＮ末端と共有結合したＣ（Ｏ）ＣＨ_３基を表し、本明細書および特許請求の範囲全体を通して他の箇所では、Ｃ（Ｏ）ＣＨ_３等として記載することができる。したがって、Ｒ^１は、
Ｒ^１は、ＣＨ_３、Ｃ（Ｏ）ＣＨ_３、Ｃ（Ｏ）ＣＨ_３、Ｃ（Ｏ）ＣＨ_２ＣＨ_３、Ｃ（Ｏ）ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３、Ｃ（Ｏ）ＣＨ（ＣＨ_３）ＣＨ_３、Ｃ（Ｏ）ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３、Ｃ（Ｏ）ＣＨ（ＣＨ_３）ＣＨ_２ＣＨ_３、Ｃ（Ｏ）Ｃ_６Ｈ_５、Ｃ（Ｏ）ＣＨ_２ＣＨ_２（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_１〜５Ｍｅ、ジクロロベンゾイル（ＤＣＢ）、ジフルオロベンゾイル（ＤＦＢ）、ピリジニルカルボキシレート（ＰｙＣ）もしくはアミド−２−ＰＥＧ、アミノ保護基、脂質脂肪酸基または炭水化物である、
として記載することができる。

同様に、上記の発明の態様の記述において、Ｒ^２の最初のＣ（Ｏ）基は、問題のペプチドのＣ末端アミノ酸残基によって提供され、したがって、Ｃ（Ｏ）ＮＨ_２は、ペプチドのＣ末端と共有結合したＮＨ_２基を表し、他の箇所では、ＮＨ_２等として記載することができる。したがって、Ｒ^２は、
Ｒ^２は、ＯＨ、ＮＨ_２、ＮＨ（ＣＨ_３）、ＮＨＣＨ_２ＣＨ_３、ＮＨＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３、ＮＨＣＨ（ＣＨ_３）ＣＨ_３、ＮＨＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３、ＮＨＣＨ（ＣＨ_３）ＣＨ_２ＣＨ_３、ＮＨＣ_６Ｈ_５、ＮＨＣＨ_２ＣＨ_２ＯＣＨ_３、ＮＨＯＣＨ_３、ＮＨＯＣＨ_２ＣＨ_３、カルボキシ保護基、脂質脂肪酸基または炭水化物である、
として記載することができる。

列挙されているペプチド配列において、非標準的なアミノ酸残基は、括弧で囲まれている。いくつかの事例において、ペプチドのアミノ末端は、下記キャッピング基：ジクロロベンゾイル（ＤＣＢ）、ジフルオロベンゾイル（ＤＦＢ）、ピリジニルカルボキシレート（ＰｙＣ）またはアミド−２−ＰＥＧのうちの１つに結合している。

その他の態様において、本発明は、

からなる群より選択される式を有する化合物に従う化合物を提供し、
ここで、
Ｒ^１は、ＣＨ_３、Ｃ（Ｏ）ＣＨ_３、Ｃ（Ｏ）ＣＨ_３、Ｃ（Ｏ）ＣＨ_２ＣＨ_３、Ｃ（Ｏ）ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３、Ｃ（Ｏ）ＣＨ（ＣＨ_３）ＣＨ_３、Ｃ（Ｏ）ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３、Ｃ（Ｏ）ＣＨ（ＣＨ_３）ＣＨ_２ＣＨ_３、Ｃ（Ｏ）Ｃ_６Ｈ_５、Ｃ（Ｏ）ＣＨ_２ＣＨ_２（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_１〜５Ｍｅ、ジクロロベンゾイル（ＤＣＢ）、ジフルオロベンゾイル（ＤＦＢ）、ピリジニルカルボキシレート（ＰｙＣ）もしくはアミド−２−ＰＥＧ、アミノ保護基、脂質脂肪酸基または炭水化物であり、
Ｒ^２は、ＯＨ、ＮＨ_２、ＮＨ（ＣＨ_３）、ＮＨＣＨ_２ＣＨ_３、ＮＨＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３、ＮＨＣＨ（ＣＨ_３）ＣＨ_３、ＮＨＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３、ＮＨＣＨ（ＣＨ_３）ＣＨ_２ＣＨ_３、ＮＨＣ_６Ｈ_５、ＮＨＣＨ_２ＣＨ_２ＯＣＨ_３、ＮＨＯＣＨ_３、ＮＨＯＣＨ_２ＣＨ_３、カルボキシ保護基、脂質脂肪酸基または炭水化物であり、
Ｋ（Ｌ）は、リンカーＬに結合して備わっているリシンであり、ここで、Ｌは、抗体中の結合性部位においてアミノ酸側鎖と共有結合を形成することができる。

一部の実施形態において、Ｋ（Ｌ）は

であり、式中、Ｌは、式−Ｘ−Ｙ−Ｚ−を有するリンカー部分であり、ここで、
Ｘは

であり、式中、ｖおよびｗは、Ｘの主鎖長が６〜１２個の原子となるように選択され、
Ｙは、少なくとも環構造を含む認識基であり、
Ｚは、アルドラーゼ抗体中の結合性部位においてアミノ酸側鎖と共有結合を形成することができる反応基である。

一部の実施形態において、Ｙは、置換されていてもよい構造

を有し、式中、ａ、ｂ、ｃ、ｄおよびｅは、独立に、炭素または窒素であり、ｆは、炭素、窒素、酸素または硫黄であり、Ｙは、十分な原子価の任意の２つの環位置においてＸおよびＺに独立に結合しており、ａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅまたはｆのうちの４つ以下は、同時に窒素である。

一部の実施形態において、Ｚは、置換１，３−ジケトンまたはアシルβ−ラクタムからなる群より選択される。

一部の実施形態において、Ｚは構造

を有し、式中、ｑ＝０、１、２、３、４または５である。その他の実施形態において、ｑ＝１、２または３である。

式Ｉの化合物の一部の実施形態において、Ｘは
−Ｒ^２２−Ｐ−Ｒ^２３−または−Ｒ^２２−Ｐ−Ｒ^２１−Ｐ’−Ｒ^２３−であり、
ここで、
ＰおよびＰ’は、ポリエチレンオキシド、ポリエチルオキサゾリン、ポリ−Ｎ−ビニルピロリドン、ポリビニルアルコール、ポリヒドロキシエチルアクリレート、ポリヒドロキシエチルメタクリレートおよびポリアクリルアミド等のポリオキシアルキレンオキシド類、ポリマー主鎖またはポリマー側鎖のいずれか上にアミン基を有するポリリシン、ポリオルニチン、ポリアルギニンおよびポリヒスチジン等のポリアミン類、ポリアミノスチレン、ポリアミノアクリレート、ポリ（Ｎ−メチルアミノアクリレート）、ポリ（Ｎ−エチルアミノアクリレート）、ポリ（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノアクリレート）、ポリ（Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノアクリレート）、ポリ（アミノメタクリレート）、ポリ（Ｎ−メチルアミノ−メタクリレート）、ポリ（Ｎ−エチルアミノメタクリレート）、ポリ（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノメタクリレート）、ポリ（Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノメタクリレート）、ポリ（エチレンイミン）等の非ペプチドポリアミン類、ポリ（Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルアミノアクリレートクロリド）、ポリ（メチアクリルアミドプロピルトリメチルアンモニウムクロリド）等の第四級アミン類のポリマー、コンドロイチン硫酸−Ａ（４−硫酸）、コンドロイチン硫酸−Ｃ（６−硫酸）およびコンドロイチン硫酸−Ｂ等のプロテオグリカン類、ポリセリン、ポリスレオニン、ポリグルタミン等のポリペプチド類、キトサン、ヒドロキシエチルセルロース等の天然または合成多糖類、ならびに脂質類からなる群より独立に選択され、
Ｒ^２１、Ｒ^２２およびＲ^２３は、それぞれ独立に、共有結合、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＲ^ｂ−、アミド、置換もしくは非置換の直鎖もしくは分岐鎖Ｃ_１〜５０アルキレン、または置換もしくは非置換の直鎖もしくは分岐鎖Ｃ_１〜５０ヘテロアルキレンであり、
Ｒ^ｂは、水素、置換もしくは非置換のＣ_１〜１０アルキル、置換もしくは非置換のＣ_３〜７シクロアルキル−Ｃ_０〜６アルキル、または置換もしくは非置換のアリール−Ｃ_０〜６アルキルであり、
Ｒ^２１、Ｒ^２２およびＲ^２３は、Ｘの主鎖長が約２００個以下の原子となるように選択される。

式Ｉの化合物の一部の実施形態において、Ｘは、［ＡＡ標的化剤］中のアミノ酸残基に結合しており、置換されていてもよい−Ｒ^２２−［ＣＨ_２−ＣＨ_２−Ｏ］_ｔ−Ｒ^２３−、−Ｒ^２２−シクロアルキル−Ｒ^２３−、−Ｒ^２２−アリール−Ｒ^２３−または−Ｒ^２２−ヘテロシクリル−Ｒ^２３−であり、ここで、ｔは０〜５０である。

式Ｉの化合物の一部の実施形態において、Ｒ^２２は、−（ＣＨ_２）_ｖ−、−（ＣＨ_２）_ｕ−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ_２）_ｖ−、−（ＣＨ_２）_ｕ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｖ−、−（ＣＨ_２）_ｕ−Ｃ（Ｓ）−ＮＲ^ｂ−（ＣＨ_２）_ｖ−、−（ＣＨ_２）_ｕ−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ^ｂ−（ＣＨ_２）_ｖ−、−（ＣＨ_２）_ｕ−ＮＲ^ｂ−（ＣＨ_２）_ｖ−、−（ＣＨ_２）_ｕ−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｖ−、−（ＣＨ_２）_ｕ−Ｓ（Ｏ）_０〜２−（ＣＨ_２）_ｖ−、−（ＣＨ_２）_ｕ−Ｓ（Ｏ）_０〜２−ＮＲ^ｂ−（ＣＨ_２）_ｖ−または−（ＣＨ_２）_ｕ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ^ｂ）−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｖ−であり、ここで、ｕおよびｖは独立に、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９または２０である。

式Ｉの化合物の一部の実施形態において、Ｒ^２１およびＲ^２３は独立に、−（ＣＨ_２）_ｓ−、−（ＣＨ_２）_ｒ−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ_２）_ｓ−、−（ＣＨ_２）_ｒ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｖ−、−（ＣＨ_２）_ｒ−Ｃ（Ｓ）−ＮＲ^ｂ−（ＣＨ_２）_ｓ−、−（ＣＨ_２）_ｒ−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ^ｂ−（ＣＨ_２）_ｓ−、−（ＣＨ_２）_ｒ−ＮＲ^ｂ−（ＣＨ_２）_ｓ−、−（ＣＨ_２）_ｒ−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｓ−、−（ＣＨ_２）_ｒ−Ｓ（Ｏ）_０〜２−（ＣＨ_２）_ｓ−、−（ＣＨ_２）_ｒ−Ｓ（Ｏ）_０〜２−ＮＲ^ｂ−（ＣＨ_２）_ｓ−または−（ＣＨ_２）_ｒ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ^ｂ）−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｓ−であり、ここで、ｒ、ｓおよびｖは独立に、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９または２０である。

式Ｉの一部の実施形態において、ｔ＞１である場合、またはＸが、−Ｒ^２２−［ＣＨ_２−ＣＨ_２−Ｏ］_ｔ−Ｒ^２３−、−Ｒ^２２−シクロアルキル−Ｒ^２３、−Ｒ^２２−アリール−Ｒ^２３−もしくは−Ｒ^２２−ヘテロシクリル−Ｒ^２３−である場合、Ｙは存在している。

式Ｉに従う例示的な化合物［式中、Ｒ^１はＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ_３またはＤＦＢのいずれかであり、Ｒ^２はＣ（Ｏ）ＮＨ_２であり、リンカー部分のＸ部は「Ｏ」ＰＥＧである］は、

を含む。

式ＩＩに例示されている本発明の別の態様は、介在リンカーＬ’を介して抗体中の結合性部位と共有結合しているＡＡ標的化剤を含むＡＡ標的化化合物である。ＡＡ標的化化合物の抗体部は、この用語が本明細書で使用される場合、全（全長）抗体、固有の抗体断片またはその他任意の形態の抗体を含み得る。一実施形態において、抗体は、ヒトＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ、ＩｇＤまたはＩｇＥ抗体由来の定常領域を含むマウスアルドラーゼ抗体のヒト化型である。別の実施形態において、抗体は、マウスアルドラーゼ抗体由来の可変領域およびヒトＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ、ＩｇＤまたはＩｇＥ抗体由来の定常領域を含むキメラ抗体である。さらなる実施形態において、抗体は、天然または天然ヒトＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ、ＩｇＤまたはＩｇＥ抗体由来のポリペプチド配列を含むマウスアルドラーゼ抗体の完全ヒト型である。
抗体−Ｌ’−［ＡＡ標的化剤］（ＩＩ）
式中、
［ＡＡ標的化剤］は、

からなる群より選択されるペプチド、薬学的に許容できるその塩、立体異性体、互変異性体、溶媒和物およびプロドラッグであり、ここで、
Ｒ^１は、ＣＨ_３、Ｃ（Ｏ）ＣＨ_３、Ｃ（Ｏ）ＣＨ_３、Ｃ（Ｏ）ＣＨ_２ＣＨ_３、Ｃ（Ｏ）ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３、Ｃ（Ｏ）ＣＨ（ＣＨ_３）ＣＨ_３、Ｃ（Ｏ）ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３、Ｃ（Ｏ）ＣＨ（ＣＨ_３）ＣＨ_２ＣＨ_３、Ｃ（Ｏ）Ｃ_６Ｈ_５、Ｃ（Ｏ）ＣＨ_２ＣＨ_２（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_１〜５Ｍｅ、ジクロロベンゾイル（ＤＣＢ）、ジフルオロベンゾイル（ＤＦＢ）、ピリジニルカルボキシレート（ＰｙＣ）もしくはアミド−２−ＰＥＧ、アミノ保護基、脂質脂肪酸基または炭水化物であり、
Ｒ^２は、ＯＨ、ＮＨ_２、ＮＨ（ＣＨ_３）、ＮＨＣＨ_２ＣＨ_３、ＮＨＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３、ＮＨＣＨ（ＣＨ_３）ＣＨ_３、ＮＨＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３、ＮＨＣＨ（ＣＨ_３）ＣＨ_２ＣＨ_３、ＮＨＣ_６Ｈ_５、ＮＨＣＨ_２ＣＨ_２ＯＣＨ_３、ＮＨＯＣＨ_３、ＮＨＯＣＨ_２ＣＨ_３、カルボキシ保護基、脂質脂肪酸基または炭水化物であり、
Ｌ’は、式−Ｘ−Ｙ−Ｚ’を有するリンカー部分であり、ここで、
Ｘは、ＡＡ標的化剤を含む残基のうちの１つに結合している、生物学的に適合するポリマーまたはブロックコポリマーであり、
Ｙは、少なくとも環構造を含む存在していてもよい認識基であり、
Ｚは、抗体中の結合性部位において側鎖と共有結合する基である。

式ＩＩの化合物の一部の実施形態において、Ｘは
−Ｒ^２２−Ｐ−Ｒ^２３−または−Ｒ^２２−Ｐ−Ｒ^２１−Ｐ’−Ｒ^２３−であり、
ここで、
ＰおよびＰ’は、ポリエチレンオキシド、ポリエチルオキサゾリン、ポリ−Ｎ−ビニルピロリドン、ポリビニルアルコール、ポリヒドロキシエチルアクリレート、ポリヒドロキシエチルメタクリレートおよびポリアクリルアミド等のポリオキシアルキレンオキシド類、ポリマー主鎖またはポリマー側鎖のいずれか上にアミン基を有するポリリシン、ポリオルニチン、ポリアルギニンおよびポリヒスチジン等のポリアミン類、ポリアミノスチレン、ポリアミノアクリレート、ポリ（Ｎ−メチルアミノアクリレート）、ポリ（Ｎ−エチルアミノアクリレート）、ポリ（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノアクリレート）、ポリ（Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノアクリレート）、ポリ（アミノメタクリレート）、ポリ（Ｎ−メチルアミノ−メタクリレート）、ポリ（Ｎ−エチルアミノメタクリレート）、ポリ（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノメタクリレート）、ポリ（Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノメタクリレート）、ポリ（エチレンイミン）等の非ペプチドポリアミン類、ポリ（Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルアミノアクリレートクロリド）、ポリ（メチアクリルアミドプロピルトリメチルアンモニウムクロリド）等の第四級アミン類のポリマー、コンドロイチン硫酸−Ａ（４−硫酸）、コンドロイチン硫酸−Ｃ（６−硫酸）およびコンドロイチン硫酸−Ｂ等のプロテオグリカン類、ポリセリン、ポリスレオニン、ポリグルタミン等のポリペプチド類、キトサン、ヒドロキシエチルセルロース等の天然または合成多糖類、ならびに脂質類からなる群より独立に選択され、
Ｒ^２１、Ｒ^２２およびＲ^２３は、それぞれ独立に、共有結合、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＲ^ｂ−、置換もしくは非置換の直鎖もしくは分岐鎖Ｃ_１〜５０アルキレン、または置換もしくは非置換の直鎖もしくは分岐鎖Ｃ_１〜５０ヘテロアルキレンであり、
Ｒ^ｂは、水素、置換もしくは非置換のＣ_１〜１０アルキル、置換もしくは非置換のＣ_３〜７シクロアルキル−Ｃ_０〜６アルキル、または置換もしくは非置換のアリール−Ｃ_０〜６アルキルであり、
Ｒ^２１、Ｒ^２２およびＲ^２３は、Ｘの主鎖長が約２００個以下の原子となるように選択される。

式ＩＩの化合物の一部の実施形態において、Ｘは、［ＡＡ標的化剤］中のアミノ酸残基に結合しており、置換されていてもよい−Ｒ^２２−［ＣＨ_２−ＣＨ_２−Ｏ］_ｔ−Ｒ^２３−、−Ｒ^２２−シクロアルキル−Ｒ^２３−、−Ｒ^２２−アリール−Ｒ^２３−または−Ｒ^２２−ヘテロシクリル−Ｒ^２３−であり、ここで、ｔは０〜５０である。

式ＩＩの化合物の一部の実施形態において、Ｒ^２２は、−（ＣＨ_２）_ｖ−、−（ＣＨ_２）_ｕ−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ_２）_ｖ−、−（ＣＨ_２）_ｕ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｖ−、−（ＣＨ_２）_ｕ−Ｃ（Ｓ）−ＮＲ^ｂ−（ＣＨ_２）_ｖ−、−（ＣＨ_２）_ｕ−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ^ｂ−（ＣＨ_２）_ｖ−、−（ＣＨ_２）_ｕ−ＮＲ^ｂ−（ＣＨ_２）_ｖ−、−（ＣＨ_２）_ｕ−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｖ−、−（ＣＨ_２）_ｕ−Ｓ（Ｏ）_０〜２−（ＣＨ_２）_ｖ−、−（ＣＨ_２）_ｕ−Ｓ（Ｏ）_０〜２−ＮＲ^ｂ−（ＣＨ_２）_ｖ−または−（ＣＨ_２）_ｕ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ^ｂ）−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｖ−であり、ここで、ｕおよびｖは独立に、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９または２０である。

式ＩＩの化合物の一部の実施形態において、Ｒ^２１およびＲ^２３は独立に、−（ＣＨ_２）_ｓ−、−（ＣＨ_２）_ｒ−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ_２）_ｓ−、−（ＣＨ_２）_ｒ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｖ−、−（ＣＨ_２）_ｒ−Ｃ（Ｓ）−ＮＲ^ｂ−（ＣＨ_２）_ｓ−、−（ＣＨ_２）_ｒ−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ^ｂ−（ＣＨ_２）_ｓ−、−（ＣＨ_２）_ｒ−ＮＲ^ｂ−（ＣＨ_２）_ｓ−、−（ＣＨ_２）_ｒ−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｓ−、−（ＣＨ_２）_ｒ−Ｓ（Ｏ）_０〜２−（ＣＨ_２）_ｓ−、−（ＣＨ_２）_ｒ−Ｓ（Ｏ）_０〜２−ＮＲ^ｂ−（ＣＨ_２）_ｓ−または−（ＣＨ_２）_ｒ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ^ｂ）−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｓ−であり、ここで、ｒ、ｓおよびｖは独立に、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９または２０である。

本発明のいくつかの態様は、

からなる群より選択される化合物を提供し、
ここで、
Ｒ^１は、ＣＨ_３、Ｃ（Ｏ）ＣＨ_３、Ｃ（Ｏ）ＣＨ_３、Ｃ（Ｏ）ＣＨ_２ＣＨ_３、Ｃ（Ｏ）ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３、Ｃ（Ｏ）ＣＨ（ＣＨ_３）ＣＨ_３、Ｃ（Ｏ）ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３、Ｃ（Ｏ）ＣＨ（ＣＨ_３）ＣＨ_２ＣＨ_３、Ｃ（Ｏ）Ｃ_６Ｈ_５、Ｃ（Ｏ）ＣＨ_２ＣＨ_２（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_１〜５Ｍｅ、ジクロロベンゾイル（ＤＣＢ）、ジフルオロベンゾイル（ＤＦＢ）、ピリジニルカルボキシレート（ＰｙＣ）もしくはアミド−２−ＰＥＧ、アミノ保護基、脂質脂肪酸基または炭水化物であり、
Ｒ^２は、ＯＨ、ＮＨ_２、ＮＨ（ＣＨ_３）、ＮＨＣＨ_２ＣＨ_３、ＮＨＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３、ＮＨＣＨ（ＣＨ_３）ＣＨ_３、ＮＨＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３、ＮＨＣＨ（ＣＨ_３）ＣＨ_２ＣＨ_３、ＮＨＣ_６Ｈ_５、ＮＨＣＨ_２ＣＨ_２ＯＣＨ_３、ＮＨＯＣＨ_３、ＮＨＯＣＨ_２ＣＨ_３、カルボキシ保護基、脂質脂肪酸基または炭水化物であり、
Ｋ（Ｌ’）は、リンカーＬ’に結合して備わっているリシンであり、ここで、Ｌは、抗体中の結合性部位においてアミノ酸側鎖と共有結合する。

一部の実施形態において、Ｋ（Ｌ’）は

であり、
Ｌ’は、式−Ｘ−Ｙ−Ｚ’−を有するリンカー部分であり、ここで、
Ｘは

であり、式中、ｖおよびｗは、Ｘの主鎖長が６〜１２個の原子となるように選択され、
Ｙは、少なくとも環構造を含む認識基であり、
Ｚ’は、抗体中の結合性部位においてアミノ酸側鎖との共有結合を含む結合部分である。

を有し、
式中、ａ、ｂ、ｃ、ｄおよびｅは、独立に、炭素または窒素であり、ｆは、炭素、窒素、酸素または硫黄であり、Ｙは、十分な原子価の任意の２つの環位置においてＸおよびＺ’に独立に結合しており、ａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅまたはｆのうちの４つ以下は、同時に窒素である。

一部の実施形態において、Ｚ’は、構造

を有し、式中、ｑ＝０、１、２、３、４または５であり、−Ｎ−抗体は、アミノ基を担持する抗体中の結合性部位におけるアミノ酸側鎖との共有結合を指す。その他の態様において、ｑ＝１、２または３である。

図ＩＩＩに例示されている本発明の別の態様は、同じであっても異なっていてもよい２種のＡＡ標的化剤が、それぞれ抗体中の結合性部位と共有結合している、ＡＡ標的化化合物である。ＡＡ標的化化合物の抗体部は、この用語が本明細書で使用される場合、全（全長）抗体、固有の抗体断片またはその他任意の形態の抗体を含み得る。一実施形態において、抗体は、ヒトＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ、ＩｇＤまたはＩｇＥ抗体由来の定常領域を含むマウスアルドラーゼ抗体のヒト化型である。別の実施形態において、抗体は、マウスアルドラーゼ抗体由来の可変領域およびヒトＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ、ＩｇＤまたはＩｇＥ抗体由来の定常領域を含むキメラ抗体である。さらなる実施形態において、抗体は、天然または天然ヒトＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ、ＩｇＤまたはＩｇＥ抗体由来のポリペプチド配列を含むマウスアルドラーゼ抗体の完全ヒト型である。
抗体［−Ｌ’−［ＡＡ標的化剤］］_２（ＩＩＩ）
式中、
［ＡＡ標的化剤］、抗体およびＬ’は、式ＩＩに従って定義された通りである。

本発明のＡＡ標的化化合物を送達または投与する方法および本発明のＡＡ標的化化合物を使用する治療の方法も提供される。例えば、対象における異常血管形成に関連する疾患または状態を治療（予防を含む）する方法は、治療有効量の本発明のＡＡ標的化化合物を対象に投与するステップを含む。治療することができる疾患および状態は、癌、関節炎、高血圧、腎疾患、乾癬、眼疾患、感染または外科的介入に関連する眼の血管形成、黄斑変性、糖尿病性網膜症等を含む。

本発明の別の態様は、診断目的で本発明のＡＡ標的化化合物を使用する方法を含む。例えば、ＡＡ標的化化合物を、癌、関節炎、乾癬、眼疾患、感染または外科的介入に関連する眼の血管形成、黄斑変性、糖尿病性網膜症等を含む、異常血管形成に関連する疾患または状態の診断のために使用することができる。

式ＩＩまたは式ＩＩＩに従う一実施形態を例示する図である。式ＩＩまたは式ＩＩＩに従う一実施形態を例示する図である。式ＩＩまたは式ＩＩＩに従う一実施形態を例示する図である。式ＩＩまたは式ＩＩＩに従う一実施形態を例示する図である。式ＩＩまたは式ＩＩＩに従う一実施形態を例示する図である。式ＩＩまたは式ＩＩＩに従う一実施形態を例示する図である。式ＩＩまたは式ＩＩＩに従う一実施形態を例示する図である。本発明の標的化剤−リンカー複合体の固相合成を例示する図である。本発明の標的化剤−リンカー複合体の固相合成を例示する図である。ｍ３８ｃ２、ｈ３８ｃ２およびヒト生殖細胞系の可変ドメインのアミノ酸配列アラインメントを例示する図である。フレームワーク領域（ＦＲ）および相補性決定領域（ＣＤＲ）は、Ｋａｂａｔらによって定義されている。アスタリスクは、ｍ３８ｃ２とｈ３８ｃ２との間またはｈ３８ｃ２とヒト生殖細胞系との間の差異をマークしている。ヒト化３８ｃ２ＩｇＧ１の一実施形態の軽鎖および重鎖（それぞれ配列番号：１８９および１９０）のアミノ酸配列を例示する図である。リンカー反応基としての役割を果たすことができる様々な構造を示す図である。構造Ａ〜Ｃは、抗体中の結合性部位の、表面にアクセス可能な反応性求核基（例えば、リシンまたはシステイン側鎖）と可逆的な共有結合を形成する。構造Ａ〜Ｃ中のＲ’_１、Ｒ’_２、Ｒ’_３およびＲ_４は、例えば、Ｃ、Ｈ、Ｎ、Ｏ、Ｐ、Ｓ、ハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）またはその塩を含む置換基を表す。Ｘは、Ｎ、Ｃまたはその他任意のヘテロ原子である。これらの置換基は、アルキル、アルケニル、アルキニル、オキソアルキル、オキソアルケニル、オキソアルキニル、アミノアルキル、アミノアルケニル、アミノアルキニル、スルホアルキル、スルホアルケニルまたはスルホアルキニル基、ホスホアルキル、ホスホアルケニル、ホスホアルキニル基等の基を含んでもよい。Ｒ’_２およびＲ’_３は、構造ＢおよびＣに例示されている通り環状であってよく、一方、Ｘは、ヘテロ原子であってよい。例えば、構造Ａは、ＸがＮである場合ならびにＲ’_１およびＲ_３が環状構造の一部を形成する場合、反応性求核剤と不可逆的な共有結合を形成し得る。構造Ｄ〜Ｇは、抗体中の結合性部位において、反応性求核基と非可逆的な共有結合を形成することができる。これらの構造において、Ｒ”_１およびＲ”_２は、Ｃ、Ｏ、Ｎ、ハロゲン化物またはメシルもしくはトシル等の離脱基を表す。抗体中の結合性部位における反応性アミノ酸側鎖による反応性修飾に適しており、したがってリンカー反応基としての役割を果たし得る、様々な求電子剤を示す図である。主要なもの：（Ａ）アシルβ−ラクタム、（Ｂ）単純ジケトン、（Ｃ）スクシンイミド活性エステル、（Ｄ）マレイミド、（Ｅ）リンカーを持つハロアセトアミド、（Ｆ）ハロケトン、（Ｇ）シクロヘキシルジケトンおよび（Ｈ）アルデヒド。波線は、残りのリンカーまたは標的化剤との結合点を指示している。Ｘはハロゲンを指す。抗体中の結合性部位における求核性（「ｎｕ」）側鎖の、図８中の化合物Ａ〜Ｇへの添加を示す図である。抗体−Ｎ−ｕ−は、抗体中の結合性部位における、求核剤を担持するアミノ酸側鎖との共有結合を指す。抗体結合における求核性側鎖の、図９中の化合物Ａ〜Ｈへの添加を示す図である。抗体−Ｎ−ｕ−は、抗体中の結合性部位における、求核剤を担持するアミノ酸側鎖との共有結合を指す。

の合成を示す図である。

の合成を示す図である。

の合成を示す図である。

の合成を示す図である。

の合成を示す図である。

の合成を示す図である。

の合成を示す図である。

の合成を示す図である。

の合成を示す図である。

の合成を示す図である。

の合成を示す図である。

の合成を示す図である。

の合成を示す図である。

の合成を示す図である。

の合成を示す図である。

の合成を示す図である。

の合成を示す図である。
本発明の一実施形態を例示する図である。本発明の一実施形態を例示する図である。本発明の一実施形態を例示する図である。本発明の一実施形態を例示する図である。本発明の一実施形態を例示する図である。本発明の一実施形態を例示する図である。本発明の一実施形態を例示する図である。本発明の一実施形態を例示する図である。本発明の一実施形態を例示する図である。本発明の一実施形態を例示する図である。本発明の一実施形態を例示する図である。本発明の一実施形態を例示する図である。本発明の一実施形態を例示する図である。

定義
下記略号、用語および語句は、本明細書において、以下で定義される通りに使用される。

標的化剤のあらゆるアミノ担持側鎖は、本明細書において定義されている通りのＲ^１によって終端することができる。標的化剤のあらゆるＣＯＯＨ／ＣＯＯ⁻担持側鎖は、本明細書において定義されている通りのＲ^２によって終端することができる。

デヒドロプロリンまたはＤＨＰは

を指す。

ヒドロキシプロリンまたはＨＰは

を指す。

ホモシクロヘキシルアラニンまたはＨＣｈＡは

を指す。

ホモフェニルアラニンまたはＨＦは

を指す。

チアゾリルアラニンまたはＴｈＡは

を指す。

ノルバリンまたはＮｖａは

を指す。

ホモロイシンまたはＨＬは

を指す。

イプシロンアシルリシンまたはＡｃＫは

を指す。

４−ベンゾイルフェニルアラニンまたはＢＰＡは

を指す。

４−カルボキシフェニルアラニンまたは（ＣＯ２Ｈ）ＦまたはＣＦは

を指す。

イプシロンクロロベンジルカルバメートリシンまたは（ＣｌＢｎカルバメート）ＫまたはＣｂｃＫは

を指す。

ジアミノ酪酸またはＤａｂは

を指す。

ジアミノプロピオン酸またはＤａｐは

を指す。

４−ニトロフェニルアラニンまたはＮＯ２ＦまたはＮＦは

を指す。

チエニルアラニンまたはＴＡは

を指す。

ニコチニルリシン（ＮｉｃＫ）は

を指す。

アミド２−ＰＥＧは

を指す。

ジクロロベンゾイルまたはＤＣＢは

を指す。

ジフルオロベンゾイルまたはＤＦＢは

を指す。

ピリジニルカルボキシレートまたはＰｙＣは

を指す。

「Ｏ」ＰＥＧまたはＯＰは

を指す。

「４」ＰＥＧまたは４Ｐは、リシン残基に結合して示されている

を指す。

接頭辞「Ｄ」による別段の指示（例えば、Ｄ−ＡｌａまたはＮ−Ｍｅ−Ｄ−Ｉｌｅ）がない限り、この明細書および添付の特許請求の範囲において記述されているペプチド中のアミノ酸およびアミノアシル残基のα炭素の立体化学は、天然または「Ｌ」配置である。Ｃａｈｎ−Ｉｎｇｏｌｄ−Ｐｒｅｌｏｇの「Ｒ」および「Ｓ」指定は、ペプチドのＮ末端のいくつかのアシル置換基におけるキラル中心の立体化学を特定するために使用される。指定「Ｒ，Ｓ」は、２つの鏡像異性体形態のラセミ混合物を指示することが意図されている。この命名法は、Ｒ．Ｓ．Ｃａｈｎら、Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．Ｅｎｇｌ．、５、３８５〜４１５（１９６６）において記述されているものに追従する。

「ポリペプチド」、「ペプチド」および「タンパク質」は、アミノ酸残基のポリマーを指すために同義で使用される。本明細書で使用される場合、これらの用語は、１個または複数のアミノ酸残基が、対応する自然発生的なアミノ酸の人工の化学的類似体であるアミノ酸ポリマーに当てはまる。これらの用語は、自然発生的なアミノ酸ポリマーにも当てはまる。アミノ酸は、ペプチドの結合機能が維持される限り、Ｌ形態であってもＤ形態であってもよい。ペプチドは、ペプチド中の２種の非隣接アミノ酸の間において、例えば、主鎖と主鎖、側鎖と主鎖、および側鎖と側鎖環化の分子内結合を有する、環状であってよい。環状ペプチドは、当該技術分野において既知の方法によって調製することができる。例えば、米国特許第６，０１３，６２５号を参照されたい。

すべてのペプチド配列は、一般に認められている慣習に従って記載されており、それにより、α−Ｎ末端アミノ酸残基は左側に、α−Ｃ末端アミノ酸残基は右側にある。本明細書で使用される場合、「Ｎ末端」という用語は、ペプチド中のアミノ酸の遊離α−アミノ基を指し、「Ｃ末端」という用語は、ペプチド中のアミノ酸の遊離α−カルボン酸末端を指す。基によってＮ−終端されているペプチドは、Ｎ末端アミノ酸残基のα−アミノ窒素上に基を担持するペプチドを指す。基によってＮ−終端されているアミノ酸は、α−アミノ窒素上に基を担持するアミノ酸を指す。

「実質的に相同」は、アミノ酸残基の少なくとも約７５％（好ましくは少なくとも約８０％、より好ましくは少なくとも約９０％、または最も好ましくは少なくとも約９５％が、所定の長さのペプチド配列上に合致することを意味する。実質的に相同の配列は、その長さ上のアミノ酸残基の少なくとも６５％を共有する配列および保守的置換である非共有配列の少なくとも１０％を含む。実質的に相同である配列は、ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ．においてＮａｔｉｏｎａｌＣａｎｃｅｒＣｅｎｔｅｒｆｏｒＢｉｏｔｅｃｈｏｌｏｇｙＩｎｆｏｒｍａｔｉｏｎから入手可能なＢＬＡＳＴプログラム等、配列データバンクで入手可能な標準ソフトウェアを使用して配列を比較することにより、同定することができる。

概して、「置換（されている）」は、その中に含有されている水素原子との１つまたは複数の結合が、それだけに限らないが、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒおよびＩ等のハロゲン原子；ヒドロキシル基、アルコキシ基、アリールオキシ基およびエステル基等の基中の酸素原子；チオール基、アルキルおよびアリールスルフィド基、スルホン基、スルホニル基およびスルホキシド基等の基中の硫黄原子；アミン類、アミド類、アルキルアミン類、ジアルキルアミン類、アリールアミン類、アルキルアリールアミン類、ジアリールアミン類、Ｎ−オキシド類、イミド類およびエナミン類等の基中の窒素原子；トリアルキルシリル基、ジアルキルアリールシリル基、アルキルジアリールシリル基およびトリアリールシリル基等の基中のケイ素原子；ならびに様々な他の基中の他のヘテロ原子等、非水素または非炭素原子との結合によって置き換えられている、以下で定義される通りの基を指す。置換アルキル基およびさらに置換シクロアルキル基等は、（１つまたは複数の）炭素または（１つまたは複数の）水素原子との１つまたは複数の結合が、カルボニル、カルボキシルおよびエステル基中の酸素；イミン類、オキシム類、ヒドラゾン類およびニトリル類等の基中の窒素等のヘテロ原子との結合によって置き換えられている基も含む。本明細書で用いられる場合、「置換されていてもよい」基は、置換されていても非置換であってもよい。したがって、例えば「置換されていてもよいアルキル」は、置換アルキル基および非置換アルキル基の両方を指す。

「非置換アルキル」という語句は、ヘテロ原子を含有しないアルキル基を指す。したがって、該語句は、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノニル、デシル、ウンデシル、ドデシル等の直鎖アルキル基を含む。該語句は、それだけに限らないが、例として提供される下記を含む直鎖アルキル基の分岐鎖異性体も含む：−ＣＨ（ＣＨ_３）_２、−ＣＨ（ＣＨ_３）（ＣＨ_２ＣＨ_３）、−ＣＨ（ＣＨ_２ＣＨ_３）_２、−Ｃ（ＣＨ_３）_３、−Ｃ（ＣＨ_２ＣＨ_３）_３、−ＣＨ_２ＣＨ（ＣＨ_３）_２、−ＣＨ_２ＣＨ（ＣＨ_３）（ＣＨ_２ＣＨ_３）、−ＣＨ_２ＣＨ（ＣＨ_２ＣＨ_３）_２、−ＣＨ_２Ｃ（ＣＨ_３）_３、−ＣＨ_２Ｃ（ＣＨ_２ＣＨ_３）_３、−ＣＨ（ＣＨ_３）ＣＨ（ＣＨ_３）（ＣＨ_２ＣＨ_３）、−ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ（ＣＨ_３）_２、−ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ（ＣＨ_３）（ＣＨ_２ＣＨ_３）、−ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ（ＣＨ_２ＣＨ_３）_２、−ＣＨ_２ＣＨ_２Ｃ（ＣＨ_３）_３、−ＣＨ_２ＣＨ_２Ｃ（ＣＨ_２ＣＨ_３）_３、−ＣＨ（ＣＨ_３）ＣＨ_２ＣＨ（ＣＨ_３）_２、−ＣＨ（ＣＨ_３）ＣＨ（ＣＨ_３）ＣＨ（ＣＨ_３）_２、−ＣＨ（ＣＨ_２ＣＨ_３）ＣＨ（ＣＨ_３）ＣＨ（ＣＨ_３）（ＣＨ_２ＣＨ_３）他。該語句は、シクロアルキル基を含まない。したがって、非置換アルキル基という語句は、第一アルキル基、第二アルキル基および第三アルキル基を含む。非置換アルキル基は、親化合物中の１個または複数の炭素原子、酸素原子、窒素原子および／または硫黄原子と結合していてよい。考えられる非置換アルキル基は、１〜２０個の炭素原子を有する直鎖および分岐鎖アルキル基を含む。あるいは、そのような非置換アルキル基は、１〜１０個の炭素原子を有するか、または１〜約６個の炭素原子を有する低級アルキル基である。その他の非置換アルキル基は、１〜３個の炭素原子を有する直鎖および分岐鎖アルキル基を含み、メチル、エチル、プロピルおよび−ＣＨ（ＣＨ_３）_２を含む。

「置換アルキル」という語句は、（１つまたは複数の）炭素または（１つまたは複数の）水素との１つまたは複数の結合が、それだけに限らないが、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒおよびＩ等のハロゲン化物中のハロゲン原子；ヒドロキシル基、アルコキシ基、アリールオキシ基およびエステル基等の基中の酸素原子；チオール基、アルキルおよびアリールスルフィド基、スルホン基、スルホニル基およびスルホキシド基等の基中の硫黄原子；アミン類、アミド類、アルキルアミン類、ジアルキルアミン類、アリールアミン類、アルキルアリールアミン類、ジアリールアミン類、Ｎ−オキシド類、イミド類およびエナミン類等の基中の窒素原子；トリアルキルシリル基、ジアルキルアリールシリル基、アルキルジアリールシリル基およびトリアリールシリル基等の基中のケイ素原子；ならびに様々な他の基中の他のヘテロ原子等、非水素および非炭素原子との結合によって置き換えられている、アルキル基を指す。置換アルキル基は、（１つまたは複数の）炭素または（１つまたは複数の）水素原子との１つまたは複数の結合が、カルボニル、カルボキシルおよびエステル基中の酸素；イミン類、オキシム類、ヒドラゾン類およびニトリル類等の基中の窒素等のヘテロ原子との結合によって置き換えられている基も含む。置換アルキル基は、数ある中でも、炭素または水素原子との１つまたは複数の結合が、フッ素原子との１つまたは複数の結合によって置き換えられている、アルキル基を含む。置換アルキル基の一例は、トリフルオロメチル基およびトリフルオロメチル基を含有するその他のアルキル基である。その他のアルキル基は、置換アルキル基がヒドロキシル、アルコキシ、アリールオキシ基またはヘテロシクリルオキシ基を含有するように、炭素または水素原子との１つまたは複数の結合が、酸素原子との結合によって置き換えられているものを含む。さらに他のアルキル基は、アミン、アルキルアミン、ジアルキルアミン、アリールアミン、（アルキル）（アリール）アミン、ジアリールアミン、ヘテロシクリルアミン、（アルキル）（ヘテロシクリル）アミン、（アリール）（ヘテロシクリル）アミンまたはジヘテロシクリルアミン基を有するアルキル基を含む。

「非置換アルキレン」という語句は、上記で定義された通りの二価非置換アルキル基を指す。したがって、メチレン、エチレンおよびプロピレンは、それぞれ非置換アルキレンの例である。「置換アルキレン」という語句は、上記で定義された通りの二価置換アルキル基を指す。置換または非置換の低級アルキレン基は、１〜約６個の炭素を有する。

「非置換シクロアルキル」という語句は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチルおよびシクロオクチル等の環式アルキル基、ならびに上記で定義された通りの直鎖および分岐鎖アルキル基で置換されているそのような環を指す。該語句は、それだけに限らないが、アダマンチルノルボルニルおよびビシクロ［２．２．２］オクチル等の多環式アルキル基、ならびに上記で定義された通りの直鎖および分岐鎖アルキル基で置換されているそのような環も含む。したがって、該語句は、数ある中でもメチルシクロヘキシル基を含むであろう。該語句は、ヘテロ原子を含有する環式アルキル基を含まない。非置換シクロアルキル基は、親化合物中の１個または複数の炭素原子、酸素原子、窒素原子および／または硫黄原子と結合していてよい。一部の実施形態において、非置換シクロアルキル基は、３〜２０個の炭素原子を有する。その他の実施形態において、そのような非置換アルキル基が３〜８個の炭素原子を有することもあれば、そのような基が３〜７個の炭素原子を有することもある。

「置換シクロアルキル」という語句は、置換アルキル基が非置換アルキル基に対して有するのと同じ意味を非置換シクロアルキル基に対して有する。したがって、該語句は、それだけに限らないが、オキソシクロヘキシル、クロロシクロヘキシル、ヒドロキシシクロペンチルおよびクロロメチルシクロヘキシル基を含む。

「非置換アリール」という語句は、ヘテロ原子を含有しないアリール基を指す。したがって、該語句は、それだけに限らないが、例として、フェニル、ビフェニル、アントラセニルおよびナフテニル等の基を含む。「非置換アリール」という語句は、ナフタレン等の縮合環を含有する基を含むが、トリル等のアリール基が本明細書において下述の通りの置換アリール基であるとみなされるように、環員のうちの１つと結合しているアルキルまたはハロ基等の他の基を有するアリール基を含まない。典型的には、非置換アリールは、６〜約１０個の炭素原子を有する低級アルキルであってよい。１つの非置換アリール基はフェニルである。しかしながら、非置換アリール基は、親化合物中の１個または複数の炭素原子、酸素原子、窒素原子および／または硫黄原子と結合していてよい。

「置換アリール基」という語句は、置換アルキル基が非置換アルキル基に対して有するのと同じ意味を非置換アリール基に対して有する。しかしながら、置換アリール基は、芳香族炭素のうちの１個が、上述の非炭素または非水素原子のうちの１個と結合しているアリール基も含み、アリール基の１個または複数の芳香族炭素が、本明細書において定義されている通りの置換および／または非置換アルキル、アルケニルまたはアルキニル基と結合しているアリール基も含む。これは、アリール基の２個の炭素原子が、アルキル、アルケニルまたはアルキニル基の２個の原子と結合して縮合環系（例えば、ジヒドロナフチルまたはテトラヒドロナフチル）を定義する結合アレンジメントを含む。したがって、「置換アリール」という語句は、数ある中でも、それだけに限らないが、トリルおよびヒドロキシフェニルを含む。

「非置換アルケニル」という語句は、少なくとも１つの二重結合が２個の炭素原子間に実在することを除き、上記で定義された通りの非置換アルキル基に関して記述されたもの等、直鎖および分岐鎖ならびに環式基を指す。例は、数ある中でも、それだけに限らないが、ビニル、−ＣＨ＝Ｃ（Ｈ）（ＣＨ_３）、−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ_３）_２、−Ｃ（ＣＨ_３）＝Ｃ（Ｈ）_２、−Ｃ（ＣＨ_３）＝Ｃ（Ｈ）（ＣＨ_３）、−Ｃ（ＣＨ_２ＣＨ_３）＝ＣＨ_２、シクロヘキセニル、シクロペンテニル、シクロヘキサジエニル、ブタジエニル、ペンタジエニルおよびヘキサジエニルを含む。低級非置換アルケニル基は、１〜約６個の炭素を有する。

「置換アルケニル」という語句は、置換アルキル基が非置換アルキル基に対して有するのと同じ意味を非置換アルケニル基に対して有する。置換アルケニル基は、非炭素または非水素原子が別の炭素と二重結合している炭素と結合しているアルケニル基、および非炭素または非水素原子のうちの１個が別の炭素との二重結合に関わっていない炭素と結合しているアルケニル基を含む。例えば、−ＣＨ＝ＣＨ−ＯＣＨ_３および−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ_２−ＯＨはいずれも置換アルケニルである。ＣＨ_２基が−ＣＨ＝ＣＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ_３等のカルボニルによって置き換えられているオキソアルケニルも、置換アルケニルである。

「非置換アルケニレン」という語句は、上記で定義された通りの二価非置換アルケニル基を指す。例えば、−ＣＨ＝ＣＨ−は例示的な非置換アルケニレンである。「置換アルケニレン」という語句は、上記で定義された通りの二価置換アルケニル基を指す。

「非置換アルキニル」という語句は、少なくとも１つの三重結合が２個の炭素原子間に実在することを除き、上記で定義された通りの非置換アルキル基に関して記述されたもの等、直鎖および分岐鎖基を指す。例は、数ある中でも、それだけに限らないが、−Ｃ≡Ｃ（Ｈ）、−Ｃ≡Ｃ（ＣＨ_３）、−Ｃ≡Ｃ（ＣＨ_２ＣＨ_３）、−Ｃ（Ｈ_２）Ｃ≡Ｃ（Ｈ）、−Ｃ（Ｈ）_２Ｃ≡Ｃ（ＣＨ_３）および−Ｃ（Ｈ）_２Ｃ≡Ｃ（ＣＨ_２ＣＨ_３）を含む。非置換低級アルキニル基は、１〜約６個の炭素を有する。

「置換アルキニル」という語句は、置換アルキル基が非置換アルキル基に対して有するのと同じ意味を非置換アルキニル基に対して有する。置換アルキニル基は、非炭素または非水素原子が別の炭素と三重結合している炭素と結合しているアルキニル基、および非炭素または非水素原子が別の炭素との三重結合に関わっていない炭素と結合しているアルキニル基を含む。例は、それだけに限らないが、ＣＨ_２基が−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ≡ＣＨ−ＣＨ_３および−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ_２−ＣＨ≡ＣＨ等のカルボニルによって置き換えられているオキソアルキニルを含む。

「非置換アルキニレン」という語句は、上記で定義された通りの二価非置換アルキニル基を指す。Ａ−Ｃ≡Ｃ−は、非置換アルキニレンの例である。「置換アルキニレン」という語句は、上記で定義された通りの二価置換アルキニル基を指す。

「非置換アラルキル」という語句は、非置換アルキル基の水素または炭素結合が、上記で定義された通りのアリール基との結合で置き換えられている、上記で定義された通りの非置換アルキル基を指す。例えば、メチル（−ＣＨ_３）は非置換アルキル基である。メチルの炭素がベンゼンの炭素と結合していた場合等、メチル基の水素原子がフェニル基との結合によって置き換えられている場合、化合物は非置換アラルキル基（すなわち、ベンジル基）である。したがって、該語句は、それだけに限らないが、ベンジル、ジフェニルメチルおよび１−フェニルエチル（−ＣＨ（Ｃ_６Ｈ_５）（ＣＨ_３））等の基を含む。

「置換アラルキル」という語句は、置換アリール基が非置換アリール基に対して有するのと同じ意味を非置換アラルキル基に対して有する。しかしながら、置換アラルキルは、基のアルキル部分の炭素または水素結合が、非炭素または非水素原子との結合によって置き換えられている基も含む。置換アラルキル基の例は、それだけに限らないが、−ＣＨ_２Ｃ（＝Ｏ）（Ｃ_６Ｈ_５）および−ＣＨ_２（２−メチルフェニル）を含む。

「非置換アラルケニル」という語句は、非置換アルケニル基の水素または炭素結合が、上記で定義された通りのアリール基との結合で置き換えられている、上記で定義された通りの非置換アルケニル基を指す。例えば、ビニルは非置換アルケニル基である。ビニルの炭素がベンゼンの炭素と結合していた場合等、ビニル基の水素原子がフェニル基との結合によって置き換えられている場合、化合物は非置換アラルケニル基（すなわち、スチリル基）である。したがって、該語句は、それだけに限らないが、スチリル、ジフェニルビニルおよび１−フェニルエテニル（−Ｃ（Ｃ_６Ｈ_５）（ＣＨ_２））等の基を含む。

「置換アラルケニル」という語句は、置換アリール基が非置換アリール基に対して有するのと同じ意味を非置換アラルケニル基に対して有する。置換アラルケニル基は、基のアルケニル部分の炭素または水素結合が、非炭素または非水素原子との結合によって置き換えられている基も含む。置換アラルケニル基の例は、それだけに限らないが、−ＣＨ＝Ｃ（Ｃｌ）（Ｃ_６Ｈ_５）および−ＣＨ＝ＣＨ（２−メチルフェニル）を含む。

「非置換アラルキニル」という語句は、非置換アルキニル基の水素または炭素結合が、上記で定義された通りのアリール基との結合で置き換えられている、上記で定義された通りの非置換アルキニル基を指す。例えば、アセチレンは非置換アルキニル基である。アセチレンの炭素がベンゼンの炭素と結合していた場合等、アセチレン基の水素原子がフェニル基との結合によって置き換えられている場合、化合物は非置換アラルキニル基である。したがって、該語句は、それだけに限らないが、−Ｃ≡Ｃ−フェニルおよび−ＣＨ_２−Ｃ≡Ｃ−フェニル等の基を含む。

「置換アラルキニル」という語句は、置換アリール基が非置換アリール基に対して有するのと同じ意味を非置換アラルキニル基に対して有する。しかしながら、置換アラルキニル基は、基のアルキニル部分の炭素または水素結合が、非炭素または非水素原子との結合によって置き換えられている基も含む。置換アラルキニル基の例は、それだけに限らないが、−Ｃ≡Ｃ−Ｃ（Ｂｒ）（Ｃ_６Ｈ_５）および−Ｃ≡Ｃ（２−メチルフェニル）を含む。

「非置換ヘテロアルキル」という語句は、炭素鎖が、Ｎ、ＯおよびＳから選定される１個または複数のヘテロ原子によって中断されている、上記で定義された通りの非置換アルキル基を指す。Ｎを含有する非置換ヘテロアルキルは、炭素鎖中にＮＨまたはＮ（非置換アルキル）を有し得る。例えば、非置換ヘテロアルキルは、アルコキシ、アルコキシアルキル、アルコキシアルコキシ、チオエーテル、アルキルアミノアルキル、アミノアルキルオキシおよび他のそのような基を含む。典型的には、非置換ヘテロアルキル基は、１〜５個のヘテロ原子、特に１〜３個のヘテロ原子を含有する。一部の実施形態において、非置換ヘテロアルキルは、例えば、エチルオキシエチルオキシエチルオキシ等のアルコキシアルコキシアルコキシ基を含む。

「置換ヘテロアルキル」という語句は、置換アルキル基が非置換アルキル基に対して有するのと同じ意味を非置換ヘテロアルキル基に対して有する。

「非置換ヘテロアルキレン」という語句は、上記で定義された通りの二価非置換ヘテロアルキル基を指す。例えば、−ＣＨ_２−Ｏ−ＣＨ_２−および−ＣＨ_２−ＮＨ−ＣＨ_２ＣＨ_２−はいずれも例示的な非置換ヘテロアルキレンである。「置換ヘテロアルキレン」という語句は、上記で定義された通りの二価置換ヘテロアルキル基を指す。

「非置換ヘテロアルケニル」という語句は、炭素鎖が、Ｎ、ＯおよびＳから選定される１個または複数のヘテロ原子によって中断されている、上記で定義された通りの非置換アルケン基を指す。Ｎを含有する非置換ヘテロアルケニルは、炭素鎖中にＮＨまたはＮ（非置換アルキルまたはアルケン）を有し得る。「置換ヘテロアルケニル」という語句は、置換ヘテロアルキル基が非置換ヘテロアルキル基に対して有するのと同じ意味を非置換ヘテロアルケニル基に対して有する。

「非置換ヘテロアルケニレン」という語句は、上記で定義された通りの二価非置換ヘテロアルケニル基を指す。したがって、−ＣＨ_２−Ｏ−ＣＨ＝ＣＨ−は非置換ヘテロアルケニレンの例である。「置換ヘテロアルケニレン」という語句は、上記で定義された通りの二価置換ヘテロアルケニル基を指す。

「非置換ヘテロアルキニル」という語句は、炭素鎖が、Ｎ、ＯおよびＳから選定される１個または複数のヘテロ原子によって中断されている、上記で定義された通りの非置換アルキニル基を指す。Ｎを含有する非置換ヘテロアルキニルは、炭素鎖中にＮＨまたはＮ（非置換アルキル、アルケンまたはアルキン）を有し得る。「置換ヘテロアルキニル」という語句は、置換ヘテロアルキル基が非置換ヘテロアルキル基に対して有するのと同じ意味を非置換ヘテロアルキニル基に対して有する。

「非置換ヘテロアルキニレン」という語句は、上記で定義された通りの二価非置換ヘテロアルキニル基を指す。したがって、−ＣＨ_２−Ｏ−ＣＨ_２−Ｃ≡Ｃ−は非置換ヘテロアルキニレンの例である。「置換ヘテロアルキニレン」という語句は、上記で定義された通りの二価置換ヘテロアルキニル基を指す。

「非置換ヘテロシクリル」という語句は、それだけに限らないが、Ｎ、ＯおよびＳ等、その１個または複数がヘテロ原子である３個以上の環員を含有する、それだけに限らないが、キヌクリジル等、単環式、二環式および多環式の環化合物を含む、芳香族および非芳香族の環化合物両方を指す。「非置換ヘテロシクリル」という語句は、ベンズイミダゾリル等の縮合複素環を含むが、２−メチルベンズイミダゾリル等の化合物が置換ヘテロシクリル基であるように、環員のうちの１つと結合しているアルキルまたはハロ基等の他の基を有するヘテロシクリル基を含まない。ヘテロシクリル基の例は、それだけに限らないが、ピロリル、ピロリニル、イミダゾリル、ピラゾリル、ピリジル、ジヒドロピリジル、ピリミジル、ピラジニル、ピリダジニル、トリアゾリル（例えば、４Ｈ−１，２，４−トリアゾリル、１Ｈ−１，２，３−トリアゾリル、２Ｈ−１，２，３−トリアゾリル等）、テトラゾリル（例えば、１Ｈ−テトラゾリル、２Ｈテトラゾリル等）等の１〜４個の窒素原子を含有する不飽和３〜８員環；それだけに限らないが、ピロリジニル、イミダゾリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル等の１〜４個の窒素原子を含有する飽和３〜８員環；それだけに限らないが、インドリル、イソインドリル、インドリニル、インドリジニル、ベンズイミダゾリル、キノリル、イソキノリル、インダゾリル、ベンゾトリアゾリル等の１〜４個の窒素原子を含有する縮合不飽和複素環基；それだけに限らないが、オキサゾリル、イソオキサゾリル、オキサジアゾリル（例えば、１，２，４−オキサジアゾリル、１，３，４−オキサジアゾリル、１，２，５−オキサジアゾリル等）等の１〜２個の酸素原子および１〜３個の窒素原子を含有する不飽和３〜８員環；それだけに限らないが、モルホリニル等の１〜２個の酸素原子および１〜３個の窒素原子を含有する飽和３〜８員環；１〜２個の酸素原子および１〜３個の窒素原子を含有する不飽和縮合複素環基、例えば、ベンゾオキサゾリル、ベンゾオキサジアゾリル、ベンゾオキサジニル（例えば、２Ｈ−１，４−ベンゾオキサジニル等）；それだけに限らないが、チアゾリル、イソチアゾリル、チアジアゾリル（例えば、１，２，３−チアジアゾリル、１，２，４−チアジアゾリル、１，３，４−チアジアゾリル、１，２，５−チアジアゾリル等）等の１〜３個の硫黄原子および１〜３個の窒素原子を含有する不飽和３〜８員環；それだけに限らないが、チアゾロジニル等の１〜２個の硫黄原子および１〜３個の窒素原子を含有する飽和３〜８員環；それだけに限らないが、チエニル、ジヒドロジチイニル、ジヒドロジチオニル、テトラヒドロチオフェン、テトラヒドロチオピラン等の１〜２個の硫黄原子を含有する飽和および不飽和３〜８員環；それだけに限らないが、ベンゾチアゾリル、ベンゾチアジアゾリル、ベンゾチアジニル（例えば、２Ｈ−１，４−ベンゾチアジニル等）、ジヒドロベンゾジアジニル（例えば、２Ｈ−３，４−ジヒドロベンゾジアジニル等）等の１〜２個の硫黄原子および１〜３個の窒素原子を含有する不飽和縮合複素環、それだけに限らないが、フリル等の酸素原子を含有する不飽和３〜８員環；ベンゾジオキソリル（例えば、１，３−ベンゾジオキソイル等）等の１〜２個の酸素原子を含有する不飽和縮合複素環；それだけに限らないが、ジヒドロオキサチイニル等の酸素原子および１〜２個の硫黄原子を含有する不飽和３〜８員環；１，４−オキサチアン等の１〜３個の酸素原子および１〜２個の硫黄原子を含有する飽和３〜８員環；ベンゾチエニル、ベンゾジチイニル等の１〜２個の硫黄原子を含有する不飽和縮合環；ならびに、ベンゾオキサチイニル等の酸素原子および１〜３個の酸素原子を含有する不飽和縮合複素環を含む。ヘテロシクリル基は、環中の１個または複数のＳ原子が、１または２個の酸素原子と二重結合している上述のもの（スルホキシドおよびスルホン）も含む。例えば、ヘテロシクリル基は、テトラヒドロチオフェン、テトラヒドロチオフェンオキシドおよびテトラヒドロチオフェン１，１−ジオキシドを含む。一部の実施形態において、ヘテロシクリル基は、５または６個の環員を含有する。その他の実施形態において、ヘテロシクリル基は、モルホリン、ピペラジン、ピペリジン、ピロリジン、イミダゾール、ピラゾール、１，２，３−トリアゾール、１，２，４−トリアゾール、テトラゾール、チオモルホリン、該チオモルホリンのＳ原子が１個または複数のＯ原子と結合しているチオモルホリン、ピロール、ホモピペラジン、オキサゾリジン−２−オン、ピロリジン−２−オン、オキサゾール、キヌクリジン、チアゾール、イソオキサゾール、フランおよびテトラヒドロフランを含む。

「置換ヘテロシクリル」という語句は、環員のうちの１つが、置換アルキル基および置換アリール基に関して上述したもの等の非水素原子と結合している、上記で定義された通りの非置換ヘテロシクリル基を指す。例は、それだけに限らないが、２−メチルベンズイミダゾリル、５−メチルベンズイミダゾリル、５−クロロベンズチアゾリル、１−メチルピペラジニルおよび２−クロロピリジルを含む。

「非置換ヘテロアリール」という語句は、上記で定義された通りの非置換芳香族ヘテロシクリル基を指す。したがって、非置換ヘテロアリール基は、それだけに限らないが、フリル、イミダゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、ピリジニル、ベンズイミダゾリルおよびベンゾチアゾリルを含む。「置換ヘテロアリール」という語句は、上記で定義された通りの置換芳香族ヘテロシクリル基を指す。

「非置換ヘテロシクリルアルキル」という語句は、非置換アルキル基の水素または炭素結合が、上記で定義された通りのヘテロシクリル基との結合で置き換えられている、上記で定義された通りの非置換アルキル基を指す。例えば、メチル（−ＣＨ_３）は非置換アルキル基である。メチルの炭素がピリジンの炭素２（ピリジンのＮと結合している炭素のうちの１個）またはピリジンの炭素３もしくは４と結合していた場合等、メチル基の水素原子がヘテロシクリル基との結合によって置き換えられている場合、化合物は非置換ヘテロシクリルアルキル基である。

「置換ヘテロシクリルアルキル」という語句は、置換アラルキル基が非置換アラルキル基に対して有するのと同じ意味を非置換ヘテロシクリルアルキル基に対して有する。置換ヘテロシクリルアルキル基は、非水素原子が、それだけに限らないが、ピペリジニルアルキル基のピペリジン環中の窒素原子等、ヘテロシクリルアルキル基のヘテロシクリル基中のヘテロ原子と結合している基も含む。

「非置換ヘテロシクリルアルケニル」という語句は、非置換アルケニル基の水素または炭素結合が、上記で定義された通りのヘテロシクリル基との結合で置き換えられている、上記で定義された通りの非置換アルケニル基を指す。例えば、ビニルは非置換アルケニル基である。ビニルの炭素がピリジンの炭素２またはピリジンの炭素３もしくは４と結合していた場合等、ビニル基の水素原子がヘテロシクリル基との結合によって置き換えられている場合、化合物は非置換ヘテロシクリルアルケニル基である。

「置換ヘテロシクリルアルケニル」という語句は、置換アラルケニル基が非置換アラルケニル基に対して有するのと同じ意味を非置換ヘテロシクリルアルケニル基に対して有する。しかしながら、置換ヘテロシクリルアルケニル基は、非水素原子が、それだけに限らないが、ピペリジニルアルケニル基のピペリジン環中の窒素原子等、ヘテロシクリルアルケニル基のヘテロシクリル基中のヘテロ原子と結合している基も含む。

「非置換ヘテロシクリルアルキニル」という語句は、非置換アルキニル基の水素または炭素結合が、上記で定義された通りのヘテロシクリル基との結合で置き換えられている、上記で定義された通りの非置換アルキニル基を指す。例えば、アセチレンは非置換アルキニル基である。アセチレンの炭素がピリジンの炭素２またはピリジンの炭素３もしくは４と結合していた場合等、アセチレン基の水素原子がヘテロシクリル基との結合によって置き換えられている場合、化合物は非置換ヘテロシクリルアルキニル基である。

「置換ヘテロシクリルアルキニル」という語句は、置換アラルキニル基が非置換アラルキニル基に対して有するのと同じ意味を非置換ヘテロシクリルアルキニル基に対して有する。置換ヘテロシクリルアルキニル基は、非水素原子が、それだけに限らないが、ピペリジニルアルキニル基のピペリジン環中の窒素原子等、ヘテロシクリルアルキニル基のヘテロシクリル基中のヘテロ原子と結合している基も含む。

「非置換アルコキシ」という語句は、水素原子との結合が、上記で定義された通りの別様の非置換アルキル基の炭素原子との結合によって置き換えられている、ヒドロキシル基（−ＯＨ）を指す。

「置換アルコキシ」という語句は、水素原子との結合が、上記で定義された通りの別様の置換アルキル基の炭素原子との結合によって置き換えられている、ヒドロキシル基（−ＯＨ）を指す。

「薬学的に許容できる塩」は、無機塩基、有機塩基、無機酸、有機酸、または塩基性もしくは酸性アミノ酸との塩を含む。無機塩基の塩は、例えば、ナトリウムまたはカリウム等のアルカリ金属；カルシウムおよびマグネシウムまたはアルミニウム等のアルカリ土類金属；ならびにアンモニアを含む。有機塩基の塩は、例えば、トリメチルアミン、トリエチルアミン、ピリジン、ピコリン、エタノールアミン、ジエタノールアミンおよびトリエタノールアミンを含む。無機酸の塩は、例えば、塩酸、ヒドロホウ酸、硝酸、硫酸およびリン酸を含む。有機酸の塩は、例えば、ギ酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、フマル酸、シュウ酸、酒石酸、マレイン酸、クエン酸、コハク酸、リンゴ酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸およびｐ−トルエンスルホン酸を含む。塩基性アミノ酸の塩は、例えば、アルギニン、リシンおよびオルニチンを含む。酸性アミノ酸は、例えば、アスパラギン酸およびグルタミン酸を含む。

「互変異性体」は、互いに平衡状態にある化合物の異性体形態を指す。異性体形態の濃度は、化合物が見られる環境に依存することになり、例えば、化合物が固体であるか、有機または水溶液であるかに応じて異なり得る。例えば、水溶液中において、ケトンは、典型的には、そのエノール形態と平衡状態にある。したがって、ケトンおよびそのエノールを、互いの互変異性体と称する。当業者であれば容易に了解するように、多種多様な官能基およびその他の構造が互変異性を呈し得、式Ｉ、ＩＩおよびＩＩＩの化合物の互変異性体はすべて本発明の範囲内である。

本発明に従う化合物は、溶媒和、とりわけ水和されていてよい。水和は、化合物もしくは化合物を含む組成物の製造中に発生し得るか、または、水和は、化合物の吸湿性により経時的に発生し得る。

いくつかの実施形態は、プロドラッグと称される誘導体である。「プロドラッグ」という表現は、薬学的または治療的に活性な薬物の誘導体、例えばエステル類およびアミド類の名称であり、ここで、誘導体は、例えば増強された送達および治療的価値等、薬物と比較して増強された特徴を有し、酵素的または化学的過程によって薬物に転換することができる。例えば、Ｒ．Ｅ．Ｎｏｔａｒｉ、ＭｅｔｈｏｄｓＥｎｚｙｍｏｌ．、１１２、３０９〜３２３（１９８５）；Ｎ．Ｂｏｄｏｒ、ＤｒｕｇｓｏｆｔｈｅＦｕｔｕｒｅ、６、１６５〜１８２（１９８１）；Ｈ．Ｂｕｎｄｇａａｒｄ、ＤｅｓｉｇｎｏｆＰｒｏｄｒｕｇｓ（Ｈ．Ｂｕｎｄｇａａｒｄ編）の第１章、Ｅｌｓｅｖｉｅｒ、ＮｅｗＹｏｒｋ（１９８５）；およびＡ．Ｇ．Ｇｉｌｍａｎら、ＧｏｏｄｍａｎＡｎｄＧｉｌｍａｎ’ｓＴｈｅＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌＢａｓｉｓｏｆＴｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ、第８版、ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ（１９９０）を参照されたい。したがって、プロドラッグは、薬物の代謝安定性もしくは輸送特徴を変更する、薬物の副作用もしくは毒性を遮断する、薬物の香味を改良する、または薬物の他の特徴もしくは特性を変更するように設計することができる。

本発明の化合物は、描写から明らかなように、任意またはすべての不斉原子における富化または分解された光学異性体を含む。ラセミおよびジアステレオマー混合物の両方、ならびに個々の光学異性体は、その鏡像異性的またはジアステレオ異性的パートナーが実質的にないように、単離または合成することができる。そのような立体異性体はすべて本発明の範囲内である。

「カルボキシ保護基」という用語は、本明細書で使用される場合、化合物の他の官能部位を巻き込む反応が行われる間、カルボン酸官能性をブロックまたは保護するために用いられるカルボン酸保護エステル基を指す。カルボキシ保護基は、例えば、参照することにより本明細書に組み込まれる、Ｇｒｅｅｎｅ、ＰｒｏｔｅｃｔｉｖｅＧｒｏｕｐｓｉｎＯｒｇａｎｉｃＳｙｎｔｈｅｓｉｓ、１５２〜１８６ページ、ＪｏｈｎＷｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ、ＮｅｗＹｏｒｋ（１９８１）において開示されている。加えて、カルボキシ保護基はプロドラッグとして使用することができ、これにより、カルボキシ保護基を、例えば酵素加水分解によってインビボで容易に切断し、生物学的に活性な親を放出することができる。Ｔ．ＨｉｇｕｃｈｉおよびＶ．Ｓｔｅｌｌａは、参照することにより本明細書に組み込まれる、「Ｐｒｏ−ｄｒｕｇｓａｓＮｏｖｅｌＤｅｌｉｖｅｒｙＳｙｓｔｅｍｓ」、Ａ．Ｃ．Ｓ．ＳｙｍｐｏｓｉｕｍＳｅｒｉｅｓの第１４巻、ＡｍｅｒｉｃａｎＣｈｅｍｉｃａｌＳｏｃｉｅｔｙ（１９７５）においてプロドラッグ概念の考察を提供している。そのようなカルボキシ保護基は当業者に既知であり、その開示が参照することにより本明細書に組み込まれる、米国特許第３，８４０，５５６号および第３，７１９，６６７号、Ｓ．Ｋｕｋｏｌｊａ、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．、９３、６２６７〜６２６９（１９７１）、ならびにＧ．Ｅ．Ｇｕｔｏｗｓｋｉ、ＴｅｔｒａｈｅｄｒｏｎＬｅｔｔ．、２１、１７７９〜１７８２（１９７０）に記述されている通り、ペニシリンおよびセファロスポリン分野におけるカルボキシル基の保護に広く使用されている。カルボキシル基を含有する化合物のプロドラッグとして有用なエステル類の例は、例えば、参照することにより本明細書に組み込まれる、ＢｉｏｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅＣａｒｒｉｅｒｓｉｎＤｒｕｇＤｅｓｉｇｎ：ＴｈｅｏｒｙａｎｄＡｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ（Ｅ．Ｂ．Ｒｏｃｈｅ編）の１４〜２１ページ、ＰｅｒｇａｍｏｎＰｒｅｓｓ、ＮｅｗＹｏｒｋ（１９８７）において見ることができる。代表的なカルボキシ保護基は、Ｃ_１〜Ｃ_８アルキル（例えば、メチル、エチルまたは第三ブチル等）；ハロアルキル；アルケニル；シクロアルキルおよびシクロヘキシル、シクロペンチル等のその置換誘導体；シクロアルキルアルキルおよびシクロヘキシルメチル、シクロペンチルメチル等のその置換誘導体；アリールアルキル、例えばフェネチルまたはベンジルおよびアルコキシベンジルまたはニトロベンジル基等のその置換誘導体；アリールアルケニル、例えばフェニルエテニル等；アリールおよびその置換誘導体、例えば５−インダニル等；ジアルキルアミノアルキル（例えば、ジメチルアミノエチル等）；アセトキシメチル、ブチリルオキシメチル、バレリトキシキシメチル、イソブチリルオキシメチル、イソバレリルオキシメチル、１−（プロピオニルオキシ）−１−エチル、１−（ピバロイルオキシル）−１−エチル、１−メチル−１−（プロピオニルオキシ）−１−エチル、ピバロイルオキシメチル、プロピオニルオキシメチル等のアルカノイルオキシアルキル基；シクロプロピルカルボニルオキシメチル、シクロブチルカルボニルオキシメチル、シクロペンチルカルボニルオキシメチル、シクロヘキシルカルボニルオキシメチル等のシクロアルカノイルオキシアルキル基；ベンゾイルオキシメチル、ベンゾイルオキシエチル等のアロイルオキシアルキル；ベンジルカルボニルオキシメチル、２−ベンジルカルボニルオキシエチル等のアリールアルキルカルボニルオキシアルキル；メトキシカルボニルメチル、シクロヘキシルオキシカルボニルメチル、１−メトキシカルボニル−１−エチル等のアルコキシカルボニルアルキル；メトキシカルボニルオキシメチル、ｔ−ブチルオキシカルボニルオキシメチル、１−エトキシカルボニルオキシ−１−エチル、１−シクロヘキシルオキシカルボニルオキシ−１−エチル等のアルコキシカルボニルオキシアルキル；ｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル等のアルコキシカルボニルアミノアルキル；メチルアミノカルボニルアミノメチル等のアルキルアミノカルボニルアミノアルキル；アセチルアミノメチル等のアルカノイルアミノアルキル；４−メチルピペラジニルカルボニルオキシメチル等の複素環カルボニルオキシアルキル；ジメチルアミノカルボニルメチル、ジエチルアミノカルボニルメチル等のジアルキルアミノカルボニルアルキル；（５−ｔ−ブチル−２−オキソ−１，３−ジオキソレン−４−イル）メチル等の（５−（アルキル）−２−オキソ−１，３−ジオキソレン−４−イル）アルキル；ならびに、（５−フェニル−２−オキソ−１，３−ジオキソレン−４−イル）メチル等の（５−フェニル−２−オキソ−１，３−ジオキソレン−４−イル）アルキルである。

「Ｎ保護基」または「Ｎ保護された」という用語は、本明細書で使用される場合、アミノ酸もしくはペプチドのＮ末端を保護すること、または合成手順中の望ましくない反応に対してアミノ基を保護することを意図されている基を指す。よく使用されるＮ保護基は、例えば、参照することにより本明細書に組み込まれる、Ｇｒｅｅｎｅ、ＰｒｏｔｅｃｔｉｖｅＧｒｏｕｐｓｉｎＯｒｇａｎｉｃＳｙｎｔｈｅｓｉｓ、ＪｏｈｎＷｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ、ＮｅｗＹｏｒｋ（１９８１）において開示されている。例えば、Ｎ保護基は、ホルミル、アセチル、プロピオニル、ピバロイル、ｔ−ブチルアセチル、２−クロロアセチル、２−ブロモアセチル、トリフルオロアセチル、トリクロロアセチル、フタリル、ｏ−ニトロフェノキシアセチル、ａ−クロロブチリル、ベンゾイル、４−クロロベンゾイル、４−ブロモベンゾイル、４−ニトロベンゾイル等のアシル基；ベンゼンスルホニル、ｐ−トルエンスルホニル等のスルホニル基；ベンジルオキシカルボニル、ｐ−クロロベンジルオキシカルボニル、ｐ−メトキシベンジルオキシカルボニル、ｐ−ニトロベンジルオキシカルボニル、２−ニトロベンジルオキシカルボニル、ｐ−ブロモベンジルオキシカルボニル、３，４−ジメトキシベンジルオキシカルボニル、３，５−ジメトキシベンジルオキシカルボニル、２，４−ジメトキシベンジルオキシカルボニル、４−メトキシベンジルオキシカルボニル、２−ニトロ−４，５−ジメトキシベンジルオキシカルボニル、３，４，５−トリメトキシベンジルオキシカルボニル、１−（ｐ−ビフェニリル）−１−メチルエトキシカルボニル、α，α−ジメチル−３，５−ジメトキシベンジルオキシカルボニル、ベンズヒドリルオキシカルボニル、ｔ−ブチルオキシカルボニル、ジイソプロピルメトキシカルボニル、イソプロピルオキシカルボニル、エトキシカルボニル、メトキシカルボニル、アリルオキシカルボニル、２，２，２，−トリクロロエトキシカルボニル、フェノキシカルボニル、４−ニトロフェノキシカルボニル、フルオレニル−９−メトキシカルボニル、シクロペンチルオキシカルボニル、アダマンチルオキシカルボニル、シクロヘキシルオキシカルボニル、フェニルチオカルボニル等のカルバメート形成基；ベンジル、トリフェニルメチル、ベンジルオキシメチル等のアルキル基；および、トリメチルシリル等のシリル基を含み得る。一部の実施形態において、Ｎ保護基は、ホルミル、アセチル、ベンゾイル、ピバロイル、ｔ−ブチルアセチル、フェニルスルホニル、ベンジル、９−フルオレニルメチルオキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）、ｔ−ブチルオキシカルボニル（Ｂｏｃ）およびベンジルオキシカルボニル（Ｃｂｚ）である。

本明細書で使用される場合、「ハロ」「ハロゲン」または「ハロゲン化物」は、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩを指す。

本明細書で使用される場合、任意の保護基、アミノ酸または他の化合物の略号は、別段の指示がない限り、それらの一般的用法、認識されている略号またはＩＵＰＡＣ−ＩＵＢＣｏｍｍｉｓｓｉｏｎｏｎＢｉｏｃｈｅｍｉｃａｌＮｏｍｅｎｃｌａｔｕｒｅ、Ｂｉｏｃｈｅｍ．、１１、９４２〜９４４（１９７２）と一致する。

本明細書で使用される場合、「実質的に純粋」は、薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）、ゲル電気泳動および高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）等、そのような純度を評価するために当業者によって使用される標準的な分析方法によって測定した際に、容易に検出可能な不純物がないように思われるほどに十分に均質であること、または、さらなる精製が、物質の酵素的および生物学的活性等の物理的および化学的特性を検出可能に変更しないように実質的に純粋であることを意味する。実質的に純粋は、ＡＡ標的化剤またはＡＡ標的化化合物が、組成物中の物質の約５０％、約６０％、約７０％、約８０％、約９０％または約９５％以上を構成する等、組成物の主成分を形成する組成物を含む。実質的に化学的に純粋な化合物を生成するための、化合物の精製の方法は、当業者に既知である。しかしながら、実質的に化学的に純粋な化合物は、立体異性体の混合物であってよい。そのような事例において、さらなる精製により、化合物の特異的活性を増大させることができる。しかしながら、ＡＡ標的化剤は、常に特異的な精製状況で提供される必要はない。部分的に精製された組成物は、いくつかの実施形態において、所望の使用に応じて有用性を有する。例えば、ＡＡ標的化剤のより高い総回収率を産出し得る精製方法により、より低度の相対精製を生成することができる。

本明細書で使用される場合、「生物学的活性」は、化合物、組成物または他の混合物のインビボ投与に帰する、化合物、組成物もしくは他の混合物のインビボ活性または生理学的応答を指す。したがって、生物学的活性は、そのような化合物、組成物および混合物の治療効果、診断効果および薬学的活性を包含する。「生物学的に活性」または「官能」という用語は、ポリペプチド類を含有する発明のＡＡ標的化剤またはその組成物の修飾因子として使用する場合、ＡＡ標的化剤の特徴である、またはそれと同様の、少なくとも１つの活性を呈するポリペプチドを指す。

本明細書で使用される場合、「薬物動態」は、血清中における投与された化合物の経時的な濃度を指す。薬力学は、標的および非標的組織中における投与された化合物の経時的な濃度ならびに標的組織（例えば、効能）および非標的組織（例えば、毒性）に対する効果を指す。例えば、薬物動態または薬力学における改良は、不安定な結合を使用すること、または任意のリンカーの化学的性質を改変すること（例えば、溶解度、電荷等を変化させること）等により、特定の標的化剤または生物学的剤用に設計することができる。

本明細書で用いられる場合、「有効量」および「治療有効量」という語句は、ＡＡ標的化剤の１つもしくは複数の生物学的活性特徴のレベル、または、そのレシピエントに対して有益な効果、例えば、症状の寛解を与えるために十分な用量における観測可能な変化を支援するために有用な、または支援することができるＡＡ標的化剤またはＡＡ標的化剤を含む化合物の量を指す。任意の特定の対象のための特異的な治療有効用量レベルは、治療されている症状または障害、症状または障害の重症度、特定化合物の活性、投与経路、化合物の浄化速度、治療の持続期間、化合物と合わせてまたは同時発生的に使用される薬物、対象の年齢、体重、性別、食生活および全体的な健康等、ならびに医療技術および科学において既知の他の要因を含む種々の要因に依存することになる。治療有効量は、治療されている組織中の血管形成の計測可能な阻害を生成するために十分なＡＡ標的化化合物の量、すなわち血管形成阻害量であってよい。血管形成の阻害は、免疫組織化学または当業者に既知の他の方法によって、インシチュで計測することができる。「治療有効量」を決定する際に考慮される様々な概論は、当業者に既知であり、例えば、Ｇｉｌｍａｎ，Ａ．Ｇ．ら、ＧｏｏｄｍａｎＡｎｄＧｉｌｍａｎ’ｓＴｈｅＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌＢａｓｉｓｏｆＴｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ、第８版、ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ（１９９０）；およびＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ、第１７版、ＭａｃｋＰｕｂｌｉｓｈｉｎｇＣｏ．、Ｅａｓｔｏｎ、ＰＡ（１９９０）において記述されている。

一態様において、本発明は、ＡＡ標的化剤が抗体中の結合性部位と共有結合している様々な標的化化合物を提供する。

別の態様において、本発明は、ＡＡ標的化剤の少なくとも１つの物理的または生物学的特徴を変更する方法を含む。該方法は、直接的にまたはリンカーを介してのいずれかで、ＡＡ標的化剤を抗体中の結合性部位と共有結合させるステップを含む。修飾することができるＡＡ標的化剤の特徴は、それだけに限らないが、結合親和性、崩壊（例えば、プロテアーゼによる）に対する脆弱性、薬物動態、薬力学、免疫原性、溶解度、親油性、親水性、疎水性、安定性（より安定またはより不安定のいずれか、および計画された崩壊）、剛性、柔軟性、抗体結合の調節等を含む。また、特定のＡＡ標的化剤の生物学的潜在能は、抗体によって提供される（１つまたは複数の）エフェクター機能の添加によって増大させることができる。例えば、抗体は、補体媒介性エフェクター機能等のエフェクター機能を提供する。いかなる理論にも束縛されることは望まず、ＡＡ標的化化合物の抗体部は、概して、よりサイズの小さいＡＡ標的化剤の半減期をインビボで延長することができる。したがって、一態様において、本発明は、ＡＡ標的化剤の有効循環半減期を増大させるための方法を提供する。

別の態様において、本発明は、ＡＡ標的化剤を、抗体中の結合性部位に共有結合的に結合させることによって、抗体の結合活性を調節するための方法を提供する。いかなる理論にも束縛されることを望まないが、抗原との抗体結合の実質的な低減は、抗原が抗体中の結合性部位に接触することを、連結している（１つまたは複数の）ＡＡ標的化剤が立体的に妨げていることに起因する場合がある。あるいは、抗体結合の実質的な低減は、共有結合によって修飾された抗体中の結合性部位のアミノ酸側鎖が、抗原との結合のために重要である場合に生じ得る。対照的に、抗原との抗体結合の実質的な増大は、抗原が抗体中の結合性部位に接触することを、連結している（１つまたは複数の）ＡＡ標的化剤が立体的に妨げていない場合、および／または共有結合によって修飾された抗体中の結合性部位のアミノ酸側鎖が、抗原との結合のために重要でない場合に生じ得る。

別の態様において、本発明は、Ａｎｇ−２に対する結合特異性を生み出すために抗体中の結合性部位を修飾する方法を含む。そのような方法は、抗体中の結合性部位における反応性アミノ酸側鎖を、本明細書において記述されている通りのＡＡ標的化剤−リンカー化合物のリンカー上の化学的部分と共有結合させるステップを含み、ここで、ＡＡ標的化剤は、Ａｎｇ−２結合ペプチドに基づく。リンカーの化学的部分は、ＡＡ標的化剤−リンカー化合物が抗体中の結合性部位と共有結合している場合、ＡＡ標的化剤がその同族を拘束することができるように、ＡＡ標的化剤から十分に離れている。典型的には、抗体は、標的分子に特異的であるとはみなされない。いくつかの実施形態において、抗体は、共有結合前にはＡｎｇ−２に対して約１×１０^−５モル／リットル未満の親和性を有するであろう。しかしながら、抗体がＡＡ標的化剤−リンカー化合物と共有結合した後、修飾された抗体は、好ましくは、標的分子に対して、少なくとも約１×１０^−６モル／リットル、または、少なくとも約１×１０^−７モル／リットル、または、少なくとも１×１０^−８モル／リットル、または少なくとも１×１０^−９モル／リットル、または、少なくとも約１×１０^−１０モル／リットルの親和性を有する。

ＡＡ標的化剤
ＡＡ標的化剤は、

からなる群より選択されるペプチドであり、
ここで、
Ｒ^１は、ＣＨ_３、Ｃ（Ｏ）ＣＨ_３、Ｃ（Ｏ）ＣＨ_３、Ｃ（Ｏ）ＣＨ_２ＣＨ_３、Ｃ（Ｏ）ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３、Ｃ（Ｏ）ＣＨ（ＣＨ_３）ＣＨ_３、Ｃ（Ｏ）ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３、Ｃ（Ｏ）ＣＨ（ＣＨ_３）ＣＨ_２ＣＨ_３、Ｃ（Ｏ）Ｃ_６Ｈ_５、Ｃ（Ｏ）ＣＨ_２ＣＨ_２（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_１〜５Ｍｅ、ジクロロベンゾイル（ＤＣＢ）、ジフルオロベンゾイル（ＤＦＢ）、ピリジニルカルボキシレート（ＰｙＣ）もしくはアミド−２−ＰＥＧ、アミノ保護基、脂質脂肪酸基または炭水化物であり、
Ｒ^２は、ＯＨ、ＮＨ_２、ＮＨ（ＣＨ_３）、ＮＨＣＨ_２ＣＨ_３、ＮＨＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３、ＮＨＣＨ（ＣＨ_３）ＣＨ_３、ＮＨＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３、ＮＨＣＨ（ＣＨ_３）ＣＨ_２ＣＨ_３、ＮＨＣ_６Ｈ_５、ＮＨＣＨ_２ＣＨ_２ＯＣＨ_３、ＮＨＯＣＨ_３、ＮＨＯＣＨ_２ＣＨ_３、カルボキシ保護基、脂質脂肪酸基または炭水化物である。

ＡＡ標的化化合物は、当該技術分野において既知の技能を使用して調製することができる。典型的には、ペプチジルＡＡ標的化剤の合成が第１のステップであり、本明細書において記述されている通りに行われる。その後、標的化剤は、接続成分（リンカー）との連結のために誘導体化され、続いてこれが抗体と合わせられる。当業者であれば、使用される特異的な合成ステップは３種の成分の厳密な性質に依存することを容易に理解するであろう。したがって、本明細書において記述されているＡＡ標的化剤−リンカー複合体およびＡＡ標的化化合物は、容易に合成することができる。

ＡＡ標的化剤ペプチドは、当業者に既知である多くの技能によって合成することができる。固相ペプチド合成のための、例示的な技能の概要は、ＣｈｅｍｉｃａｌＡｐｐｒｏａｃｈｅｓｔｏｔｈｅＳｙｎｔｈｅｓｉｓｏｆＰｅｐｔｉｄｅｓａｎｄＰｒｏｔｅｉｎｓ（Ｗｉｌｌｉａｍｓら編）、ＣＲＣＰｒｅｓｓ、ＢｏｃａＲａｔｏｎ、ＦＬ（１９９７）において見ることができる。

典型的には、所望のペプチド性ＡＡ標的化剤は、当該技術分野において既知の手順に従って固相上で順次合成される。例えば、米国特許出願第２００３／００４５４７７号を参照されたい。）リンカーは、固相上の一部または全部においてペプチドに結合させてもよく、また樹脂からのペプチドの除去後、液相技能を使用して添加してもよい（図６Ａおよび６Ｂを参照）。例えば、Ｎ保護されたアミノおよびカルボン酸含有連結部分は、４−ヒドロキシメチル−フェノキシメチル−ポリ（スチレン−１％ジビニルベンゼン）等の樹脂に結合していてよい。Ｎ保護基は、適当な酸（例えば、ＢｏｃではＴＦＡ）または塩基（例えば、Ｆｍｏｃではピペリジン）によって除去することができ、ペプチド配列は、正常なＣ末端からＮ末端への方式で発生することができる（図６Ａを参照）。あるいは、ペプチド配列を最初に合成し、最後にリンカーをＮ末端アミノ酸残基に添加してもよい（図６Ｂ参照）。また別の方法は、合成中に適当な側鎖を脱保護するステップと、適切に反応性のリンカーによって誘導体化するステップとを伴う。例えば、リシン側鎖は、脱保護してもよく、また活性エステルを有するリンカーと反応させてもよい。あるいは、既に側鎖に結合している適切に保護されたリンカー部分を持つアミノ酸誘導体（図６Ｂを参照）、またはいくつかの事例において、α−アミノ窒素を、成長ペプチド配列の一部として添加してよい。

固相合成の終了時、標的化剤−リンカー複合体は、遷移または単一動作のいずれかで、樹脂から除去され、脱保護される。標的化剤−リンカー複合体の除去および脱保護は、樹脂結合ペプチド−リンカー複合体を、切断試薬、例えば、チアニソール、水またはエタンジチオール等のトリフルオロ酢酸含有スカベンジャーで処理することにより、単一動作で遂行することができる。標的化剤の脱保護および放出後、標的化剤ペプチドのさらなる誘導体化を行ってよい。

完全に脱保護された標的化剤−リンカー複合体は、下記種類：酢酸形態の弱塩基性樹脂上でのイオン交換；非誘導体化ポリスチレン−ジビニルベンゼン（例えば、ＡＭＢＥＲＬＩＴＥＸＡＤ）上での疎水性吸着クロマトグラフィー；シリカゲル吸着クロマトグラフィー；カルボキシメチルセルロース上でのイオン交換クロマトグラフィー；例えば、ＳＥＰＨＡＤＥＸＧ−２５、ＬＨ−２０または向流分配上での分配クロマトグラフィー；高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）、とりわけ、オクチル−またはオクタデシルシリル−シリカ結合相カラムパッキング上での逆相ＨＰＬＣのうちのいずれかまたはすべてを用いる一連のクロマトグラフステップによって精製される。

抗体
本明細書で使用される場合、「抗体」は、免疫反応活性を有する重鎖および／または軽鎖を含むポリペプチド分子を含む。抗体には、Ｂ細胞の産物である免疫グロブリンとその変異体、ならびにＴ細胞の産物であるＴ細胞受容体（ＴｃＲ）とその変異体が含まれる。免疫グロブリンは、免疫グロブリンκおよびλ、α、γ、δ、ε、およびμ定常領域遺伝子、ならびに無数の免疫グロブリン可変領域遺伝子によって実質的にコードされる、１つまたは複数のポリペプチドを含むタンパク質である。軽鎖は、κまたはλのいずれかに分類される。重鎖は、γ、μ、α、δ、またはεとして分類され、これらはそれぞれ、免疫グロブリンクラスである、ＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ、ＩｇＤ、およびＩｇＥを定義する。重鎖のサブクラスも知られている。例えば、ヒトのＩｇＧ重鎖は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、およびＩｇＧ４サブクラスのいずれかとなり得る。

典型的な免疫グロブリン構造単位は、四量体を含むことが知られている。各四量体は、ポリペプチド鎖の２つの同一の対から構成され、各対は、１本の「軽」鎖（約２５ｋＤ）と１本の「重」鎖（約５０〜７０ｋＤ）を有する。各鎖のＮ末端は、主に抗原認識に関与する、約１００から１１０またはそれ以上のアミノ酸の可変領域を画定する。用語可変軽鎖（Ｖ_Ｌ）および可変重鎖（Ｖ_Ｈ）は、それぞれこれらの軽鎖および重鎖を指す。抗体のアミノ酸は、天然に存在するものであっても非天然に存在するものであってもよい。

２つの結合性部位を含有する抗体は、これらが２つの相補性または抗原認識部位を有するという点で二価である。典型的な天然の二価の抗体はＩｇＧである。脊椎動物抗体は、２本の重鎖と２本の軽鎖を一般に含むが、重鎖のみの抗体も知られている。Ｍｕｙｌｄｅｒｍａｎｓら、ＴＲＥＮＤＳｉｎＢｉｏｃｈｅｍ．Ｓｃｉ．２６（４）：２３０〜２３５（１９９１）を参照されたい。そのような抗体は二価であり、重鎖の対形成によって形成される。抗体は、ＩｇＡの二量体形態および五量体ＩｇＭ分子の場合のように、多価となることもできる。抗体にはハイブリッド抗体も含まれ、その抗体鎖は、参照哺乳動物抗体鎖と別個に相同である。重鎖と軽鎖の一方の対は、１つの抗原に特異的な結合性部位を有し、重鎖と軽鎖の他方の対は、異なる抗原に特異的な結合性部位を有する。そのような抗体は、同時に２つの異なる抗原を結合することができるので、二重特異性と呼ばれる。抗体は、例えば、ＦａｂまたはＦａｂ’断片の場合などのように一価となることもできる。

抗体は、全長のインタクトな抗体として、または様々なペプチダーゼもしくは化学物質で消化することによって生成された、いくつかのよく特徴付けられた断片として存在する。したがって、例えば、ペプシンは、ヒンジ領域中のジスルフィド結合の下方で抗体を消化することによって、Ｆａｂの二量体であるＦ（ａｂ’）_２を生成し、これ自体は、ジスルフィド結合によってＶ_Ｈ−ＣＨ_１に連結された軽鎖である。Ｆ（ａｂ’）_２は、温和な条件下で還元されることによって、ヒンジ領域中のジスルフィド結合を切断することができ、これによってＦ（ａｂ’）_２二量体をＦａｂ’単量体に転換する。Ｆａｂ’単量体は、本質的にヒンジ領域の一部を有するＦａｂ断片である（他の抗体断片のより詳細な説明については、例えば、ＦｕｎｄａｍｅｎｔａｌＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（Ｗ．Ｅ．Ｐａｕｌ編）、ＲａｖｅｎＰｒｅｓｓ、Ｎ．Ｙ．（１９９３）を参照されたい）。別の例として、パパインでの部分消化によって、一価のＦａｂ／ｃ断片を得ることができる。Ｍ．Ｊ．Ｇｌｅｎｎｉｅら、Ｎａｔｕｒｅ２９５：７１２〜７１４（１９８２）を参照されたい。インタクトな抗体の消化の観点から様々な抗体断片が定義されるが、当業者は、任意の様々な抗体断片を、化学的に、または組換えＤＮＡ法を利用することによって、新規に合成することができることを理解するであろう。したがって、本明細書で使用される場合、用語抗体には、全抗体の修飾によって生成された抗体断片、新規に合成された抗体断片、または組換えＤＮＡ法から得た抗体断片も含まれる。当業者は、全抗体よりも抗体断片を使用するほうが有利である状況があることを認識するであろう。例えば、より小さいサイズの抗体断片により、急速なクリアランスが可能になり、固形腫瘍へのアクセスを改善することができる。

組換え抗体は、従来の全長抗体、ハイブリッド抗体、重鎖抗体、タンパク分解消化からわかっている抗体断片、Ｆｖまたは単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）などの抗体断片、Ｖ_ＨまたはＶ_Ｌなどの単一ドメイン断片、ダイアボディ、ドメイン欠失抗体、ミニボディなどとすることができる。Ｆｖ抗体は、サイズが約５０ｋＤであり、軽鎖および重鎖の可変領域を含む。軽鎖および重鎖は、細菌中で発現することができ、そこでこれらは集合してＦｖ断片を構築する。あるいは、２本の鎖は、操作することによって鎖間ジスルフィド結合を形成してｄｓＦｖを得ることができる。単鎖Ｆｖ（「ｓｃＦｖ」）は、介在リンカー配列によって連結されたＶ_ＨおよびＶ_Ｌ配列ドメインを含む単一のポリペプチドであり、このポリペプチドが折り重なると、得られる３次構造は抗原結合部位の構造を模倣するようになっている。Ｊ．Ｓ．Ｈｕｓｔｏｎら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．８５：５８７９〜５８８３（１９８８）を参照されたい。当業者は、特定の発現方法および／または所望の抗体分子に応じて、組換え抗体の適切なプロセシングを実施することによって、所望の再構成または再構築抗体を得ることができることを認識するであろう。例えば、ワールドワイドウェブのＵＲＬｍｉｃｒｏｂｉａｌｃｅｌｌｆａｃｔｏｒｉｅｓ．ｃｏｍ／ｃｏｎｔｅｎｔ／３／１／１１で利用可能なＶａｌｌｅｊｏおよびＲｉｎａｓ、ＢｉｏｍｅｄＣｅｎｔｒａｌ．を参照されたい。

単一ドメイン抗体は、抗体の最小機能性結合単位（サイズが約１３ｋＤ）であり、重Ｖ_Ｈ鎖または軽Ｖ_Ｌ鎖のいずれかの可変領域に対応する。米国特許第６，６９６，２４５号、ＷＯ０４／０５８８２１、ＷＯ０４／００３０１９およびＷＯ０３／００２６０９を参照されたい。単一ドメイン抗体は、細菌、酵母、および他の下等真核生物発現系において十分に発現される。ドメイン欠失抗体は、ＣＨ２など、全長抗体と比べて欠失したドメインを有する。多くの場合、そのようなドメイン欠失抗体、特にＣＨ２欠失抗体は、全長の対応物に比べてクリアランスを改善する。ダイアボディは、２つのＶ_Ｈドメインを含む第１の融合タンパク質を、２つのＶ_Ｌドメインを含む第２の融合タンパク質と会合させることによって形成される。全長抗体と同様に、ダイアボディは二価であり、二重特異性となり得る。ミニボディは、ＣＨ３に直接または介在ＩｇＧヒンジによって連結したＶ_Ｈ、Ｖ_Ｌ、またはｓｃＦｖを含む融合タンパク質である。Ｔ．Ｏｌａｆｓｅｎら、ＰｒｏｔｅｉｎＥｎｇ．Ｄｅｓ．Ｓｅｌ．１７：３１５〜３２３（２００４）を参照されたい。ドメイン欠失抗体と同様に、ミニボディは、操作されることによって全長抗体の結合特異性を保存するが、そのより小さな分子量のためにクリアランスが改善されている。

Ｔ細胞受容体（ＴｃＲ）は、２本の鎖から構成される、ジスルフィドで連結されたヘテロ二量体である。この２本の鎖は、抗体ヒンジ領域に類似している、短く拡張された一続きのアミノ酸中で、Ｔ細胞原形質膜のちょうど外側で一般にジスルフィド結合されている。各ＴｃＲ鎖は、１つの抗体様可変ドメインと１つの定常ドメインから構成されている。全ＴｃＲは、約９５ｋＤの分子質量を有し、個々の鎖は、３５から４７ｋＤまでサイズが変動している。例えば、可変領域などの受容体の部分も、ＴｃＲの意味の範囲内に包含されており、これは、当技術分野で周知の方法を使用して可溶性タンパク質として生成することができる。例えば、米国特許第６，０８０，８４０号、ならびにＡ．Ｅ．ＳｌａｎｅｔｚおよびＡ．Ｌ．Ｂｏｔｈｗｅｌｌ、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２１：１７９〜１８３（１９９１）には、Ｔｈｙ−１のグリコシルホスファチジルイノシトール（ＧＰＩ）膜アンカー配列に、ＴｃＲの細胞外ドメインをスプライスすることによって調製される可溶性Ｔ細胞受容体が記載されている。この分子は、細胞表面上にＣＤ３が存在しない中で発現され、ホスファチジルイノシトール特異的ホスホリパーゼＣ（ＰＩ−ＰＬＣ）での処理によって膜から切断することができる。可溶性ＴｃＲは、本質的に米国特許第５，２１６，１３２号およびＧ．Ｓ．Ｂａｓｉら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ１５５：１７５〜１９１（１９９２）に記載されているように、ＴｃＲ可変ドメインを抗体重鎖ＣＨ_２もしくはＣＨ_３ドメインにカップリングすることによって、またはＥ．Ｖ．Ｓｈｕｓｔａら、Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１８：７５４〜７５９（２０００）もしくはＰ．Ｄ．Ｈｏｌｌｅｒら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．９７：５３８７〜５３９２（２０００）に記載されているように、可溶性ＴｃＲ単鎖としても調製することができる。本発明のある特定の実施形態では、ＴｃＲ「抗体」を可溶性抗体として使用する。ＴｃＲ中の結合性部位は、抗体について上記で考察した同じ方法を使用して、ＣＤＲ領域および他のフレームワーク残基を参照することによって同定することができる。

結合性部位は、抗原結合に関与する抗体分子の一部を指す。抗原結合部位は、重（「Ｈ」）鎖および軽（「Ｌ」）鎖のＮ末端可変（「Ｖ」）領域のアミノ酸残基によって形成される。抗体可変領域は、「高頻度可変領域」または「相補性決定領域」（ＣＤＲ）と呼ばれる、３つの高度に分岐したストレッチを含み、これらは、「フレームワーク領域」（ＦＲ）として知られる、より保存されたフランキングストレッチ同士間に介在している。軽鎖の３つの高頻度可変領域（ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、およびＬＣＤＲ３）と重鎖の３つの高頻度可変領域（ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、およびＨＣＤＲ３）は、３次元空間内に互いに関連して配置されることによって、抗原結合表面またはポケットを形成する。重鎖抗体またはＶ_Ｈドメインでは、抗原結合部位は、重鎖の３つの高頻度可変領域によって形成される。Ｖ_Ｌドメインでは、抗原結合部位は、軽鎖の３つの高頻度可変領域によって形成される。

結合性部位を構成する、特定の抗体中のアミノ酸残基の素性は、当技術分野で周知の方法を使用して求めることができる。例えば、抗体ＣＤＲは、Ｋａｂａｔらによって最初に定義された高頻度可変領域として同定することができる。Ｅ．Ａ．Ｋａｂａｔら、ＳｅｑｕｅｎｃｅｓｏｆＰｒｏｔｅｉｎｓｏｆＩｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌＩｎｔｅｒｅｓｔ、５版、ＰｕｂｌｉｃＨｅａｌｔｈＳｅｒｖｉｃｅ、ＮＩＨ、ＷａｓｈｉｎｇｔｏｎＤ．Ｃ．（１９９２）を参照されたい。ＣＤＲの位置も、Ｃｈｏｔｈｉａらによって最初に記述された構造的ループ構造として同定することができる。例えば、Ｃ．ＣｈｏｔｈｉａおよびＡ．Ｍ．Ｌｅｓｋ、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１〜９１７（１９８７）；Ｃ．Ｃｈｏｔｈｉａら、Ｎａｔｕｒｅ３４２：８７７〜８８３（１９８９）；ならびにＡ．Ｔｒａｍｏｎｔａｎｏら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２１５：１７５〜１８２（１９９０）を参照されたい。他の方法には、ＫａｂａｔとＣｈｏｔｈｉａの折衷案であり、ＯｘｆｏｒｄＭｏｌｅｃｕｌａｒ（現在はＡｃｃｅｌｒｙｓ）のＡｂＭ抗体モデル化ソフトウェアを使用して得られる「ＡｂＭ定義」、またはＲ．Ｍ．ＭａｃＣａｌｌｕｍら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２６２：７３２〜７４５（１９９６）に示されている、ＣＤＲの「接触定義」が含まれる。表２に、様々な既知の定義に基づいてＣＤＲを同定する。

配列単独から抗体中のＣＤＲを同定することができる一般的なガイドラインは、以下の通りである。
ＬＣＤＲ１：
開始 − 約残基２４。
前の残基は常にＣｙｓである。
後の残基は常にＴｒｐであり、典型的にはＴｙｒ−Ｇｌｎが続くが、Ｌｅｕ−Ｇｌｎ、Ｐｈｅ−Ｇｌｎ、またはＴｙｒ−Ｌｅｕも続く。
長さは１０から１７残基である。
ＬＣＤＲ２：
開始 − Ｌ１の末端後の１６残基。
前の配列は、一般にＩｌｅ−Ｔｙｒであるが、Ｖａｌ−Ｔｙｒ、Ｉｌｅ−Ｌｙｓ、またはＩｌｅ−Ｐｈｅであってもよい。
長さは一般に７残基である。
ＬＣＤＲ３：
開始 − Ｌ２の末端後の３３残基。
前の残基はＣｙｓである。
後の配列はＰｈｅ−Ｇｌｙ−Ｘ−Ｇｌｙである。
長さは７から１１残基である。
ＨＣＤＲ１：
開始 − 約残基２６、Ｃｈｏｔｈｉａ／ＡｂＭ定義下でＣｙｓ後の４残基；開始は、Ｋａｂａｔ定義下で５残基後である。
前の配列はＣｙｓ−Ｘ−Ｘ−Ｘである。
後の残基はＴｒｐであり、典型的にはＶａｌが続くがＩｌｅまたはＡｌａも続く。
長さは、ＡｂＭ定義下で１０から１２残基であり、Ｃｈｏｔｈｉａ定義では、最後の４残基が除外される。
ＨＣＤＲ２：
開始 − ＣＤＲ−Ｈ１のＫａｂａｔ／ＡｂＭ定義の末端後の１５残基。
前の配列は、典型的にはＬｅｕ−Ｇｌｕ−Ｔｒｐ−Ｉｌｅ−Ｇｌｙであるが、いくつかの変形も可能である。
後の配列は、Ｌｙｓ／Ａｒｇ−Ｌｅｕ／Ｉｌｅ／Ｖａｌ／Ｐｈｅ／Ｔｈｒ／Ａｌａ−Ｔｈｒ／Ｓｅｒ／Ｉｌｅ／Ａｌａである。
長さは、Ｋａｂａｔ定義下で１６から１９残基であり、ＡｂＭ定義では、最後の７残基が除外される。
ＨＣＤＲ３：
開始 − ＣＤＲ−Ｈ２の末端後の３３残基（Ｃｙｓ後の２残基）。
前の配列はＣｙｓ−Ｘ−Ｘ（典型的にはＣｙｓ−Ａｌａ−Ａｒｇ）である。
後の配列はＴｒｐ−Ｇｌｙ−Ｘ−Ｇｌｙである。
長さは３から２５残基である。

ＣＤＲの外側にあるにもかかわらず、結合性部位のライニングの一部である側鎖を有することによって結合性部位の一部を構成する（すなわち、結合性部位による連鎖に利用可能である）、特定の抗体中のアミノ酸残基の素性は、分子モデル化およびＸ線結晶学などの、当技術分野で周知の方法を使用して求めることができる。例えば、Ｌ．Ｒｉｅｃｈｍａｎｎら、Ｎａｔｕｒｅ３３２：３２３〜３２７（１９８８）を参照されたい。

考察したように、抗体ベースのＡＡ標的化化合物を調製するのに使用することができる抗体は、抗体中の結合性部位において反応性側鎖を必要とする。反応性側鎖は天然に存在することができ、または突然変異によって抗体中に配置することができる。抗体中の結合性部位の反応性残基は、抗体を作製するために最初に同定されるリンパ球中に存在する核酸によって残基がコードされる場合などには、抗体と付随することができる。あるいは、アミノ酸残基は、特定の残基をコードするようにＤＮＡを意図的に突然変異させることによって生じることができる（例えば、ＭｅａｒｅｓらへのＷＯ０１／２２９２２を参照されたい）。反応性残基は、例えば、本明細書に考察したような、ユニークコドン、ｔＲＮＡ、およびアミノアシル−ｔＲＮＡを使用して、生合成で組み込むことによって生じる非天然の残基とすることができる。別の手法では、アミノ酸残基またはその反応性官能基（例えば、求核性アミノ基またはスルフヒドリル基）は、抗体中の結合性部位におけるアミノ酸残基に結合させてもよい。したがって、本明細書で使用される場合、「抗体中の結合性部位におけるアミノ酸残基を通じて」起こる抗体との共有結合連鎖は、抗体中の結合性部位のアミノ酸残基に直接とするか、または抗体中の結合性部位のアミノ酸残基の側鎖に連結された化学部分を通じてとすることができることを意味する。

触媒抗体は、１つまたは複数の反応性アミノ酸側鎖を含む結合性部位を有する抗体の一供給源である。そのような抗体として、アルドラーゼ抗体、βラクタマーゼ抗体、エステラーゼ抗体、アミダーゼ抗体などが挙げられる。

一実施形態は、マウスモノクローナル抗体ｍＡｂ３８Ｃ２またはｍＡｂ３３Ｆ１２などのアルドラーゼ抗体、ならびにそのような抗体の適切にヒト化した型およびキメラ型を含む。マウスｍＡｂ３８Ｃ２は、ＨＣＤＲ３付近であるがその外側に反応性リシンを有し、反応性免疫化によって生成され、天然アルドラーゼ酵素を機構的に模倣する新規クラスの触媒抗体のプロトタイプである。Ｃ．Ｆ．Ｂａｒｂａｓ３世ら、Ｓｃｉｅｎｃｅ２７８：２０８５〜２０９２（１９９７）を参照されたい。使用することができる他のアルドラーゼ触媒抗体には、ＡＴＣＣアクセション番号ＰＴＡ−１０１５を有するハイブリドーマ８５Ａ２、ＡＴＣＣアクセション番号ＰＴＡ−１０１４を有するハイブリドーマ８５Ｃ７；ＡＴＣＣアクセション番号ＰＴＡ−１０１７を有するハイブリドーマ９２Ｆ９；ＡＴＣＣアクセション番号ＰＴＡ−８２３を有するハイブリドーマ９３Ｆ３；ＡＴＣＣアクセション番号ＰＴＡ−８２４を有するハイブリドーマ８４Ｇ３；ＡＴＣＣアクセション番号ＰＴＡ−１０１８を有するハイブリドーマ８４Ｇ１１；ＡＴＣＣアクセション番号ＰＴＡ−１０１９を有するハイブリドーマ８４Ｈ９；ＡＴＣＣアクセション番号ＰＴＡ−８２５を有するハイブリドーマ８５Ｈ６；ＡＴＣＣアクセション番号ＰＴＡ−１０１６を有するハイブリドーマ９０Ｇ８によって産生される抗体が含まれる。反応性リシンを介して、これらの抗体は、天然アルドラーゼのエナミン機構を使用するアルドール反応および逆アルドール反応を触媒する。例えば、Ｊ．Ｗａｇｎｅｒら、Ｓｃｉｅｎｃｅ２７０：１７９７〜１８００（１９９５）；Ｃ．Ｆ．Ｂａｒｂａｓ３世ら、Ｓｃｉｅｎｃｅ２７８：２０８５〜２０９２（１９９７）；Ｇ．Ｚｈｏｎｇら、Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．Ｅｎｇｌ．３８：３７３８〜３７４１（１９９９）；Ａ．Ｋａｒｌｓｔｒｏｍら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．、９７：３８７８〜３８８３（２０００）を参照されたい。アルドラーゼ抗体およびアルドラーゼ抗体を生成する方法は、米国特許第６，２１０，９３８号、同第６，３６８，８３９号、同第６，３２６，１７６号、同第６，５８９，７６６号、同第５，９８５，６２６号、および同第５，７３３，７５７号に開示されている。

ＡＡ標的化化合物は、チオエステラーゼおよびエステラーゼ触媒抗体中の結合性部位に見出されるものなど、ＡＡ標的化剤を反応性システインに連結することによっても形成することができる。適当なチオエステラーゼ触媒抗体は、Ｋ．Ｄ．Ｊａｎｄａら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．９１：２５３２〜２５３６（１９９４）によって記載されている。適当なエステラーゼ抗体は、Ｐ．Ｗｉｒｓｃｈｉｎｇら、Ｓｃｉｅｎｃｅ２７０：１７７５〜１７８２（１９９５）によって記載されている。反応性アミノ酸含有抗体は、反応性アミノ酸をコードするために抗体中の結合性部位残基を突然変異させること、または反応性基を含有するリンカーを含む抗体中の結合性部位におけるアミノ酸側鎖を化学的に誘導体化することを含めて、当技術分野で周知の手段によって調製することができる。

本発明で使用するのに適した抗体は、従来の免疫化、インビボでの反応性免疫化によって、またはファージディスプレイを用いてなどの、インビトロでの反応選択によって得ることができる。抗体は、ハイブリドーマもしくは細胞融合法、またはインビトロ宿主細胞発現系によっても得ることができる。抗体は、ヒトまたは他の動物種において産生することができる。１つの種の動物由来の抗体は、修飾することによって別の種の動物を反映することができる。例えば、ヒトキメラ抗体は、抗体の少なくとも１つの領域がヒト免疫グロブリン由来のものである。ヒトキメラ抗体は、ヒト免疫グロブリンに相同なアミノ酸配列を有する定常領域とともに、非ヒト動物、例えば、げっ歯類に相同な可変領域アミノ酸配列を有すると典型的には理解される。対照的に、ヒト化抗体には、ヒト免疫グロブリン由来の可変フレームワーク領域配列のほとんどまたはすべてと、すべての定常領域配列とともに、非ヒト抗体由来のＣＤＲ配列が使用される。キメラおよびヒト化抗体は、ＣＤＲ移植手法（例えば、Ｎ．Ｈａｒｄｍａｎら、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ４４：４２４〜４３３（１９８９）；Ｃ．Ｑｕｅｅｎら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．８６：１００２９〜１００３３（１９８９）を参照されたい）、鎖シャッフリング法（例えば、Ｒａｄｅｒら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．９５：８９１０〜８９１５（１９９８）を参照されたい）、遺伝子工学の分子モデル化法（例えば、Ｍ．Ａ．Ｒｏｇｕｓｋａら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．９１：９６９〜９７３（１９９４）を参照されたい）などを含めた、当技術分野で周知の方法によって調製することができる。

非ヒト抗体をヒト化するための方法は、当技術分野で記載されている。ヒト化抗体は、非ヒトである供給源から、その中に導入された１つまたは複数のアミノ酸残基を有することが好ましい。これらの非ヒトアミノ酸残基は、「移入」残基と呼ばれることが多く、これらは、典型的には「移入」可変ドメインから取得される。ヒト化は、本質的に、ヒト抗体の対応配列を高頻度可変領域配列で置換することによる、Ｗｉｎｔｅｒらの方法に従って実施することができる（例えば、Ｐ．Ｔ．ＪｏｎｅｓらＮａｔｕｒｅ３２１：５２２〜５２５（１９８６）；Ｌ．Ｒｉｅｃｈｍａｎｎら、Ｎａｔｕｒｅ３３２：３２３〜３２７（１９８８）；Ｍ．Ｖｅｒｈｏｅｙｅｎら、Ｓｃｉｅｎｃｅ２３９：１５３４〜１５３６（１９８８）を参照されたい）。したがって、そのような「ヒト化」抗体は、インタクトなヒト可変ドメインより実質的に少ないドメインが、非ヒト種由来の対応配列によって置換されたキメラ抗体である。実際には、ヒト化抗体は、典型的には、いくつかの高頻度可変領域残基と、場合によりいくつかのフレームワーク（ＦＲ）残基が、げっ歯類抗体の類似部位由来の残基によって置換されているヒト抗体である。

ヒト化抗体を作製するのに使用される、軽鎖および重鎖の両方のヒト可変ドメインの選択は、抗体がヒトの治療用途を意図されている場合、抗原性およびヒト抗マウス抗体（ＨＡＭＡ）応答を低減するために非常に重要である。いわゆる「最良適合」法によれば、ヒト化に利用されるヒト可変ドメインは、対象とするげっ歯類可変領域との高度の相同性に基づく既知のドメインのライブラリーから選択される（Ｍ．Ｊ．Ｓｉｍｓら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、１５１：２２９６〜２３０８（１９９３）；Ｍ．ＣｈｏｔｈｉａおよびＡ．Ｍ．Ｌｅｓｋ、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１〜９１７（１９８７））。別の方法では、軽鎖または重鎖の特定のサブグループのヒト抗体すべてのコンセンサス配列に由来するフレームワーク領域が使用される。同じフレームワークを、いくつかの異なるヒト化抗体に使用することができる（例えば、Ｐ．Ｃａｒｔｅｒら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．８９：４２８５〜４２８９（１９９２）；Ｌ．Ｇ．Ｐｒｅｓｔａら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、１５１：２６２３〜２６３２（１９９３）を参照されたい）。

抗体は、Ｚ基に対する高い連結親和性を保持してヒト化されることがさらに重要である。この目的を達成するために、一方法によれば、ヒト化抗体は、親配列およびヒト化配列の３次元モデルを使用して、親配列および様々な概念的ヒト化産物を分析することによって調製される。３次元免疫グロブリンモデルは、一般に利用可能であり、当業者によく知られている。選択された候補免疫グロブリン配列の有望な３次元コンホメーション構造を例示し、提示するコンピュータープログラムが利用可能である。これらのディスプレイの検査により、Ｚ基への連結に関する候補免疫グロブリン配列の機能における、残基のあり得る役割の分析が可能になる。このようにして、ＦＲ残基は、レシピエントから選択し、組み合わせ、配列を移入することができ、その結果、（１つまたは複数の）標的抗原に対する増大した親和性などの所望の抗体特性が達成される。

様々な形態のヒト化マウスアルドラーゼ抗体が企図されている。一実施形態では、ヒト定常ドメインＣ_□およびＣ_□１１を有する、ヒト化アルドラーゼ触媒抗体ｈ３８ｃ２ＩｇＧ１またはｈ３８ｃ２Ｆａｂを使用する。Ｃ．Ｒａｄｅｒら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏ．３３２：８８９〜８９９（２００３）には、ｈ３８ｃ２Ｆａｂおよびｈ３８ｃ２ＩｇＧ１を生成するのに使用することができる遺伝子配列およびベクターが開示されている。ヒト生殖系列Ｖ_ｋ遺伝子ＤＰＫ−９およびヒトＪ_ｋ遺伝子ＪＫ４は、ｍ３８ｃ２のκ軽鎖可変ドメインのヒト化のためのフレームワークとして使用され、ヒト生殖系列遺伝子ＤＰ−４７およびヒトＪ_Ｈ遺伝子ＪＨ４は、ｍ３８ｃ２の重鎖可変ドメインのヒト化のためのフレームワークとして使用された。図７Ａは、ｍ３８ｃ２、ｈ３８ｃ２、およびヒト生殖系列における可変軽鎖と重鎖の間の配列アライメントを例示する。ｈ３８ｃ２は、任意のそのアロタイプを含めたＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４定常ドメインを利用することができる。図７Ｂは、Ｇ１ｍ（ｆ）アロタイプを使用するｈ３８ｃ２ＩｇＧ１の一実施形態を例示しており、このｈ３８ｃ２ＩｇＧ１の軽鎖および重鎖アミノ酸配列が図中に示されている。抗体が、Ｇ１ｍ（ｆ）アロタイプを有するｈ３８ｃ２ＩｇＧ１である、式ＩＩまたはＩＩＩのＡＡ標的化化合物のある特定の実施形態では、Ｚは、重鎖の位置９９にあるリシン残基の側鎖に結合する。この残基は、図７Ｂ中に太字で表されている。別の実施形態では、ｈ３８ｃ２の可変ドメイン（Ｖ_ＬおよびＶ_Ｈ）ならびにＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４由来の定常ドメインを含むキメラ抗体を使用する。

様々な形態のヒト化アルドラーゼ抗体断片も企図されている。一実施形態では、ｈ３８ｃ２Ｆ（ａｂ’）_２を使用する。ｈ３８ｃ２Ｆ（ａｂ’）_２は、ｈ３８ｃ２ＩｇＧ１のタンパク質分解消化によって生成することができる。別の実施形態では、介在リンカー（Ｇｌｙ_４Ｓｅｒ）_３によって場合によって接続されているｈ３８ｃ２由来のＶ_ＬおよびＶ_Ｈドメインを含むｈ３８ｃ２ｓｃＦｖを使用する。

ヒト化に代わるものとして、ヒト抗体を生成することができる。例えば、免疫化（または触媒抗体の場合、反応性免疫化）すると、内在性免疫グロブリン産生のない状態で、ヒト抗体の全レパートリーを産生することができるトランスジェニック動物（例えば、マウス）を現在では作製することが可能である。例えば、そのような生殖細胞系列突然変異マウス中への、キメラおよび生殖細胞系列免疫グロブリン遺伝子アレイ中の抗体重鎖連結領域（Ｊ_Ｈ）遺伝子のホモ接合型欠失は、抗原チャレンジの後にヒト抗体の産生をもたらすと説明された。例えば、Ｂ．Ｄ．Ｃｏｈｅｎら、Ｃｌｉｎ．ＣａｎｃｅｒＲｅｓ．１１：２０６３〜２０７３（２００５）；Ｊ．Ｌ．Ｔｅｅｌｉｎｇら、Ｂｌｏｏｄ１０４：１７９３〜１８００（２００４）；Ｎ．Ｌｏｎｂｅｒｇら、Ｎａｔｕｒｅ３６８：８５６〜８５９（１９９４）；Ａ．Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．９０：２５５１〜２５５５（１９９３）；Ａ．Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓら、Ｎａｔｕｒｅ３６２：２５５〜２５８（１９９３）；Ｍ．Ｂｒｕｇｇｅｍａｎｎら、ＹｅａｒＩｍｍｕｎｏｌ．７：３３〜４０（１９９３）；Ｌ．Ｄ．ＴａｙｌｏｒらＮｕｃｌｅｉｃＡｃｉｄｓＲｅｓ．２０：６２８７〜６２９５（１９９２）；Ｍ．Ｂｒｕｇｇｅｍａｎｎら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．８６：６７０９〜６７１３（１９８９）；およびＷＯ９７／１７８５２を参照されたい。

あるいは、ファージディスプレイ技術（例えば、Ｊ．ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙら、Ｎａｔｕｒｅ３４８：５５２〜５５３（１９９０）；Ｈ．Ｊ．ｄｅＨａａｒｄら、ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ２７４、１８２１８〜１８２３０（１９９９）；およびＡ．Ｋａｎｐｐｉｋら、ＪＭｏｌＢｉｏｌ、２９６、５７〜８６（２０００）を参照されたい）を使用することによって、未免疫ドナー由来の免疫グロブリン可変（Ｖ）ドメイン遺伝子レパートリーを使用して、インビトロでヒト抗体および抗体断片を生成することができる。この技法によれば、抗体Ｖドメイン遺伝子は、Ｍ１３またはｆｄなどの繊維状バクテリオファージの主要または微量コートタンパク質遺伝子のいずれかの中にインフレームでクローン化され、ファージ粒子表面上の機能性抗体断片として提示される。繊維状粒子は、ファージゲノムの一本鎖ＤＮＡコピーを含有するので、抗体の機能的特性に基づく選択により、これらの特性を呈する抗体をコードする遺伝子の選択ももたらされる。したがって、このファージは、Ｂ細胞のいくつかの特性を模倣する。ファージディスプレイは、様々な形式で実施することができ、例えば、Ｋ．Ｓ．ＪｏｈｎｓｏｎおよびＤ．Ｊ．Ｃｈｉｓｗｅｌｌ、Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．３：５６４〜５７１（１９９３）に概説されている。Ｖ遺伝子セグメントのいくつかの供給源を、ファージディスプレイのために使用することができる。Ｔ．Ｃｌａｃｋｓｏｎら、Ｎａｔｕｒｅ、３５２：６２４〜６２８（１９９１）は、免疫化マウスの脾臓に由来するＶ遺伝子の小さなランダムコンビナトリアルライブラリーからの抗オキサゾロン抗体の多様なアレイを単離した。未免疫ヒトドナー由来のＶ遺伝子のレパートリーを構築することができ、抗原（自己抗原を含めて）の多様なアレイに対する抗体は、本質的にＪ．Ｄ．Ｍａｒｋｓら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２２：５８１〜５９７（１９９１）またはＡ．Ｄ．Ｇｒｉｆｆｉｔｈｓら、ＥＭＢＯＪ．１２：７２５〜７３４（１９９３）に記載されている技法に従って単離することができる。米国特許第５，５６５，３３２号および同第５，５７３，９０５号；ならびにＬ．Ｓ．Ｊｅｓｐｅｒｓら、Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ１２：８９９〜９０３（１９９４）も参照されたい。

上記に示したように、ヒト抗体は、インビトロで活性化されたＢ細胞によっても生成することができる。例えば、米国特許第５，５６７，６１０号および同第５，２２９，２７５号；ならびにＣ．Ａ．Ｋ．Ｂｏｒｒｅｂａｅｃｋら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．８５：３９９５〜３９９９（１９８８）を参照されたい。

本明細書に記載される抗体のアミノ酸配列の（１つまたは複数の）修飾は企図されている。例えば、抗体の結合親和性および／または他の生物学的特性を改善することが望ましい場合がある。抗体のアミノ酸配列変異体は、抗体核酸中に適切なヌクレオチド変化を導入することによって、またはペプチド合成によって調製される。そのような修飾には、例えば、抗体のアミノ酸配列内の残基からの欠失、この残基中への挿入、および／またはこの残基の置換が含まれる。欠失、挿入、および置換の任意の組合せが行われることによって、最終のコンストラクトに達し、ただしこの最終コンストラクトは所望の特徴を有する。グリコシル化部位の数または位置を変化させることなどのアミノ酸変化も、抗体の翻訳後プロセスを変更することができる。

突然変異誘発に好ましい位置である、抗体のある特定の残基または領域を同定するための有用な方法は、Ｂ．Ｃ．ＣｕｎｎｉｎｇｈａｍおよびＪ．Ａ．Ｗｅｌｌｓ、Ｓｃｉｅｎｃｅ２４４：１０８１〜１０８５（１９８９）に記載されているように、「アラニン走査突然変異誘発」と呼ばれる。ここでは、標的残基の残基または基が同定され（例えば、Ａｒｇ、Ａｓｐ、Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、およびＧｌｕなどの荷電残基）、中性または負に荷電したアミノ酸（Ａｌａまたはポリアラニンであることが最も好ましい）により置換されることによって、リンカーのＺ基とのアミノ酸の相互作用に影響する。次いで、置換に対して機能的感受性を示すこれらのアミノ酸位置は、置換部位で、または置換部位の代わりに、さらなるまたは他の変異体を導入することによって洗練される。したがって、アミノ酸配列変異を導入するための部位はあらかじめ決められるが、突然変異自体の性質はあらかじめ決める必要はない。例えば、所与の部位での突然変異の性能を分析するために、標的コドンまたは領域でアラニン走査またはランダム突然変異誘発が行われ、発現された抗体変異体は、Ｚと共有結合を形成する能力についてスクリーニングされる。

アミノ酸配列挿入には、長さが１個の残基から１００個以上の残基を含有するポリペプチドの範囲のアミノ末端融合および／またはカルボキシル末端融合、ならびに１個または複数個のアミノ酸残基の配列内挿入が含まれる。末端挿入の例には、Ｎ末端メチオニル残基を有する抗体、または細胞毒性ポリペプチドに融合した抗体が含まれる。抗体分子の他の挿入変異体には、抗体の血清中半減期を増大させる酵素またはポリペプチドに対する抗抗体のＮ末端またはＣ末端への融合物が含まれる。

別の種類の変異体は、アミノ酸置換変異体である。これらの変異体は、異なる残基によって置換された、抗体分子中の少なくとも１個のアミノ酸残基を有する。置換突然変異誘発に関して最も興味ある部位には、高頻度可変領域が含まれるが、ＦＲ変化も企図されている。同類置換は、以下の表３で、「好ましい置換」の表題の下に示されている。そのような置換によって生物学的活性の変化がもたらされる場合、アミノ酸クラスを参照して以下にさらに記載されるように、「例示的置換」と称されるより多くの置換変化を導入することができ、産物をスクリーニングすることができる。

抗体の生物学的特性における実質的な修飾は、（ａ）例えば、シートもしくはらせんコンホメーションのような、置換範囲内のポリペプチド主鎖の構造、（ｂ）標的部位での分子の電荷または疎水性、または（ｃ）側鎖のバルクを維持することへの、その効果が著しく異なる置換を選択することによって達成される。天然に存在する残基は、共通の側鎖の特性に基づいてグループに分けられる。
（１）疎水性：Ｎｌｅ、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ；
（２）中性親水性：Ｃｙｓ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ；
（３）酸性：Ａｓｐ、Ｇｌｕ；
（４）塩基性：Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ；
（５）鎖配向に影響する残基：Ｇｌｙ、Ｐｒｏ；および
（６）芳香族：Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ。
非同類置換は、これらのクラスの１つのメンバーを別のクラスのメンバーと交換することを伴うことになる。

抗体の適切なコンホメーションを維持することに関与していない任意のシステイン残基は、一般にセリンと置換することによって、分子の酸化安定性を改善し、異常な架橋を防止することができる。逆に、（１つまたは複数の）システイン結合は、抗体に加えることによってその安定性を改善することができる（特に、抗体がＦｖ断片などの抗体断片である場合）。

置換変異体の１つの種類は、親抗体（例えば、ヒト化またはヒト抗体）の１つまたは複数の高頻度可変領域残基を置換することを伴う。一般に、さらに展開するために選択される、（１つまたは複数の）得られた変異体は、これらが生成される親抗体と比べて、改善された生物学的特性を有することになる。そのような置換変異体を生成するのに好都合な方法は、ファージディスプレイを使用する親和性成熟を伴う。簡単に言えば、いくつかの高頻度可変領域部位（例えば、６〜７個の部位）は突然変異されて、各部位ですべての可能なアミノ置換が生じる。こうして生成された抗体変異体は、繊維状ファージ粒子から、各粒子内に詰められたＭ１３の遺伝子ＩＩＩ産物への融合物として一価の様式で提示される。次いでファージディスプレイ変異体は、本明細書に開示されるように、その生物活性（例えば、結合親和性）についてスクリーニングされる。修飾のための候補高頻度可変領域部位を同定するために、アラニン走査突然変異誘発を実施することによって、抗原結合に大きく寄与する高頻度可変領域残基を同定することができる。あるいは、またはさらに、抗体コンジュゲート複合体の構造を分析することによって、抗体とＺ基の接触点を同定することは有益となり得る。そのような接触残基および隣接残基は、本明細書で詳述される技法による置換の候補である。そのような変異体が生成された場合、変異体のパネルは、本明細書に説明されるようにスクリーニングにかけられ、１つまたは複数の関連するアッセイにおいて優れた特性を有する抗体を、さらなる展開のために選択することができる。

抗体の別の種類のアミノ酸変異体は、抗体中に見出される１つまたは複数の炭水化物部分を欠失させる、かつ／または抗体中に存在していない１つまたは複数のグリコシル化部位を添加することによって、抗体の最初のグリコシル化パターンを変更する。

抗体のグリコシル化は、典型的には、Ｎ結合型かＯ結合型のいずれかである。Ｎ結合型は、アスパラギン残基の側鎖への炭水化物部分の結合を指す。Ｘ”がプロリンを除く任意のアミノ酸である、トリペプチド配列のＡｓｎ−Ｘ”−ＳｅｒおよびＡｓｎ−Ｘ”−Ｔｈｒは、一般に、アスパラギン側鎖への炭水化物部分の酵素的結合のための認識配列である。したがって、ポリペプチド中にこれらのトリペプチド配列のいずれかが存在することにより、潜在的なグリコシル化部位が作り出される。Ｏ結合型グリコシル化は、ヒドロキシアミノ酸、すなわち、５−ヒドロキシプロリンまたは５−ヒドロキシリジンも使用することができるが、最も一般的にはセリンまたはスレオニンへの、糖であるＮ−アセチルガラクトサミン、ガラクトース、またはキシロースのうちの１つの結合を指す。

抗体へのグリコシル化部位の添加は、抗体が、上述したトリペプチド配列の１つまたは複数を含有するように（Ｎ結合型グリコシル化部位に関して）、アミノ酸配列を変更することによって達成されることが好都合である。最初の抗体の配列への１つまたは複数のセリンまたはスレオニン残基の添加、またはこれらの残基による置換によっても変更することができる（Ｏ結合型グリコシル化部位に関して）。

例えば、抗体の抗原依存細胞媒介細胞毒性（ＡＤＣＣ）および／または補体依存細胞毒性（ＣＤＣ）を増強するために、エフェクター機能に関して抗体を修飾することが望ましい場合がある。これは、抗体のＦｃ領域中に１つまたは複数のアミノ酸置換を導入することによって達成することができる。あるいは、二重Ｆｃ領域を有し、それによって増強された補体溶解およびＡＤＣＣ能を有することができる抗体を操作することができる。Ｇ．Ｔ．Ｓｔｅｖｅｎｓｏｎら、ＡｎｔｉｃａｎｃｅｒＤｒｕｇＤｅｓ．３：２１９〜２３０（１９８９）を参照されたい。

抗体の血清中半減期を増加させるために、例えば、米国特許第５，７３９，２７７号に記載されているように、抗体（特に抗体断片）中にサルベージ受容体結合エピトープを組み込むことができる。本明細書で使用される場合、用語「サルベージ受容体結合エピトープ」は、ＩｇＧ分子のインビボ血清中半減期を増加させることに関与するＩｇＧ分子（例えば、ＩｇＧ_１、ＩｇＧ_２、ＩｇＧ_３、またはＩｇＧ_４）のＦｃ領域のエピトープを指す。

全抗体および抗体断片を生成するために、様々な技法が開発されてきた。従来では、抗体断片は、インタクトな抗体のタンパク分解消化によって得られた（例えば、Ｋ．ＭｏｒｉｍｏｔｏおよびＫ．Ｉｎｏｕｙｅ、Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ２４：１０７〜１１７（１９９２）；Ｍ．Ｂｒｅｎｎａｎら、Ｓｃｉｅｎｃｅ２２９：８１〜８３（１９８５）を参照されたい）。しかし、こうした断片は、現在では、組換え宿主細胞によって直接生成することができる。Ｆａｂ、Ｆｖ、Ｖ_Ｈ、Ｖ_Ｌ、およびｓｃＦｖ抗体断片はすべて、以下に詳述されるように、大腸菌中で発現し、大腸菌から分泌することができ、したがって、大量のこれらの断片の容易な生成を可能にしている。抗体断片は、上記に考察した抗体ファージライブラリーから単離することができる。あるいは、Ｆａｂ’−ＳＨ断片は、大腸菌から直接回収し、化学的にカップリングさせてＦ（ａｂ’）_２断片を形成することができる（Ｐ．Ｃａｒｔｅｒら、Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ１０：１６３〜１６７（１９９２））。別の手法によれば、Ｆ（ａｂ’）_２断片は、組換え宿主細胞培養物から直接単離することができる。

抗体を発現させるために、様々な発現ベクター／宿主系を利用することができる。これらの系として、それだけに限らないが、組換えバクテリオファージ、プラスミドもしくはコスミドＤＮＡ発現ベクターで形質転換された細菌などの微生物；酵母発現ベクターで形質転換された酵母；ウイルス発現ベクター（例えば、バキュロウイルス）に感染した昆虫細胞系；ウイルス発現ベクター（例えば、カリフラワーモザイクウイルス、ＣａＭＶ；タバコモザイクウイルス、ＴＭＶ）で形質移入されたか、または細菌発現ベクター（例えば、ＴｉもしくはｐＢＲ３２２プラスミド）で形質転換された植物細胞系；または動物細胞系が挙げられる。

組換え抗体発現において有用な哺乳動物細胞として、それだけに限らないが、ＶＥＲＯ細胞、ＨｅＬａ細胞、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞株、ＣＯＳ細胞（ＣＯＳ−７など）、Ｗ１３８、ＢＨＫ、ＨｅｐＧ２、３Ｔ３、ＲＩＮ、ＭＤＣＫ、Ａ５４９、ＰＣ１２、Ｋ５６２および２９３細胞、ならびに本明細書に記載されるようなハイブリドーマ細胞株が挙げられる。哺乳動物細胞は、典型的にグリコシル化され、活性のために適切な再折りたたみを必要とする抗体の調製にとって好ましい。好ましい哺乳動物細胞として、ＣＨＯ細胞、ハイブリドーマ細胞、および骨髄細胞が挙げられる。

抗体の組換え発現のためのいくつかの例示的なプロトコルを、本明細書で以下に説明する。

用語「発現ベクター」または「ベクター」は、ＤＮＡ（ＲＮＡ）配列からポリペプチドを発現するためのプラスミド、ファージ、ウイルス、またはベクターを指す。発現ベクターは、（１）遺伝子発現を制御する、１つまたは複数の制御配列、例えば、プロモーターまたはエンハンサー、（２）１つまたは複数のポリペプチドをコードする、１つまたは複数の配列、ならびに（３）適切な転写開始および終止配列を含む、転写単位を含むことができる。酵母または真核生物発現系での使用に意図された発現ベクターは、宿主細胞による翻訳されたタンパク質の細胞外分泌を可能にするリーダー配列を含むことが好ましい。あるいは、（１つまたは複数の）抗体ポリペプチドがリーダーまたは輸送配列なしで発現される場合、これはアミノ末端メチオニン残基を含むことができる。この残基は、最終抗体産物を提供するために、発現された組換えタンパク質から引き続いて切断されても、されなくてもよい。

抗体、特に抗体断片は、大腸菌などの原核生物系中で発現することができる。別の例では、特定の結合剤ペプチドをコードするＤＮＡ配列は、ＰＣＲによって増幅し、例えばｐＧＥＸ−３ｘ（Ｐｈａｒｍａｃｉａ）などの適切なベクター中にクローン化することができる。ｐＧＥＸベクターは、このベクターによってコードされるグルタチオンＳトランスフェラーゼ（ＧＳＴ）と、このベクターのクローン化部位中に挿入されたＤＮＡ断片によってコードされたペプチドを含む融合タンパク質を産生するように設計されている。ＰＣＲのためのプライマーは、例えば、適切な切断部位を含むように生成することができる。ｐＧＥＸ−３ｘ抗体ペプチドコンストラクトは、大腸菌ＸＬ−１Ｂｌｕｅ細胞（Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅ、ＬａＪｏｌｌａＣａｌｉｆ．）中に形質転換され、個々の形質転換体は、単離され、成長させられる。次いで、発現されたペプチド融合タンパク質は、この融合タンパク質のＧＳＴ部分から切断することができる。

上述した組換え系を使用する、抗体をコードするポリヌクレオチドの発現により、抗体またはその断片の生成をもたらすことができ、これらは生物学的に活性となるために、「再び折りたたまれ」なければならない（様々なジスルフィドブリッジを適切に作り出すために）。

細菌細胞中で作製される抗体、特に抗体断片は、細菌中で不溶性封入体として産生することができる。そのような抗体は、以下のように精製することができる。宿主細胞は、遠心分離によって死滅させ、０．１５ＭのＮａＣｌ、１０ｍＭのＴｒｉｓ、ｐＨ８、１ｍＭのＥＤＴＡ中で洗浄し、０．１ｍｇ／ｍｌのリゾチーム（Ｓｉｇｍａ、Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ、Ｍｏ．）を用いて室温で１５分間処理することができる。ライセートは、超音波処理によって除去することができ、細胞破壊片は、１２，０００×ｇで１０分間遠心分離することによってペレットにすることができる。抗体を含有するペレットは、５０ｍＭのＴｒｉｓ、ｐＨ８、および１０ｍＭのＥＤＴＡ中に再懸濁させ、５０％グリセロール上に層状に重ね、６０００×ｇで３０分間遠心分離することができる。ペレットは、ＭｇおよびＣａイオンのない標準リン酸緩衝溶液（ＰＢＳ）中に再懸濁させることができる。抗体は、変性ＳＤＳポリアクリルアミドゲル中の再懸濁させたペレットを分画することによってさらに精製することができる（Ｓａｍｂｒｏｏｋら、上記を参照されたい）。このゲルは、０．４ＭのＫＣｌ中に浸漬することによってタンパク質を視覚化することができ、これは切除し、ＳＤＳを欠いたゲルランニング緩衝液中で電気溶出することができる。

抗体発現のための哺乳動物宿主系は、当業者に周知である。宿主細胞系統は、発現されたタンパク質を処理し、またはタンパク質活性を提供するのに有用となる、ある特定の翻訳後修飾を生じさせる特定の能力について選択することができる。ポリペプチドのそのような修飾として、それだけに限らないが、アセチル化、カルボキシル化、グリコシル化、リン酸化、脂質化およびアシル化が挙げられる。様々な宿主細胞、例えば、ＣＨＯ、ＨｅＬａ、ＭＤＣＫ、２９３、Ｗ１３８など、ならびにハイブリドーマ細胞株などは、そのような翻訳後活性に関して特定の細胞機構および特徴的な機序を有し、導入された異種タンパク質の正確な修飾およびプロセシングを保証するために選択することができる。

いくつかの選択系を使用することによって、組換え抗体産生のために形質転換された細胞を回収することができる。そのような選択系として、それだけに限らないが、それぞれｔｋ−、ｈｇｐｒｔ−またはａｐｒｔ−細胞中のＨＳＶチミジンキナーゼ、ヒポキサンチングアニンホスホリボシルトランスフェラーゼ、およびアデニンホスホリボシルトランスフェラーゼ遺伝子が挙げられる。また、メトトレキセートに対する耐性を与えるＤＨＦＲ；ミコフェノール酸に対する耐性を与えるｇｐｔ；アミノグリコシドＧ４１８に対する耐性を与え、クロルスルフロンに対する耐性を与えるｎｅｏ；ハイグロマイシンに対する耐性を与えるｈｙｇｒｏの選択の基礎として、代謝拮抗剤耐性を使用することができる。有用となり得る追加の選択可能遺伝子には、細胞がトリプトファンの代わりにインドールを利用することを可能にするｔｒｐＢ、または細胞がヒスチジンの代わりにヒスチノールを利用することを可能にするｈｉｓＤが含まれる。形質転換体を同定するための視覚的指標を与えるマーカーとして、アントシアニン、β−グルクロニダーゼおよびその基質、ＧＵＳ、ならびにルシフェラーゼおよびその基質、ルシフェリンが挙げられる。

いくつかの場合では、上述した手順を使用して生成した抗体は、生物学的に活性にするために、「再び折りたたみ」、酸化して適切な三次構造にし、ジスルフィド結合を生成させる必要がある場合がある。再折りたたみは、当技術分野で周知のいくつかの手順を使用して達成することができる。そのような方法には、例えば、カオトロピック剤の存在下で、可溶化ポリペプチド剤を通常７超のｐＨにさらすことが含まれる。カオトロープの選択は、封入体可溶化のために使用される選択と類似している。しかし、カオトロープは、低濃度で典型的には使用される。例示的なカオトロピック剤はグアニジンである。ほとんどの場合、再折りたたみ／酸化溶液は、特定の比で還元剤とその酸化形態も含有することによって、特定の酸化還元電位を生成することになり、これにより、ジスルフィドシャッフリングが起こることが可能になることによってシステインブリッジが形成される。いくつかの一般に使用される酸化還元対として、システイン／シスタミン、グルタチオン／ジチオビスＧＳＨ、塩化第二銅、ジチオスレイトールＤＴＴ／ジチアンＤＴＴ、および２−メルカプトエタノール（ｂＭＥ）／ジチオ−ｂＭＥが挙げられる。多くの場合では、共溶媒を使用することによって、再折りたたみの効率を増大させることができる。一般に使用される共溶媒として、グリセロール、様々な分子量のポリエチレングリコール、およびアルギニンが挙げられる。

リンカーおよび連結された化合物
ＡＡ標的化剤は、直接的にまたはリンカーを介して、抗体中の結合性部位と共有結合していてよい。適当なリンカーは、標的化剤と抗体との間に十分な距離を提供するように選定することができる。ＡＡ標的化化合物を調製する際に使用するためのリンカーの実施形態の一般設計は、式−Ｘ−Ｙ−Ｚで表され、ここで、Ｘは接続鎖であり、Ｙは認識基であり、Ｚは反応基である。リンカーは、線形であっても分岐していてもよく、１個または複数の炭素環基または複素環基を場合により含む。リンカー長は、環周囲の最短経路をとることによって計数される芳香環等の環式部分を持つ線形原子の数の観点から見ることができる。一部の実施形態において、リンカーは、５〜１５個の原子、その他の実施形態において、１５〜３０個の原子、さらに他の実施形態において、３０〜５０個の原子、さらに他の実施形態において、５０〜１００個の原子、さらに他の実施形態において、１００〜２００個の原子の線形伸縮を有する。その他のリンカーの考慮事項は、溶解度、親油性、親水性、疎水性、安定性（より安定またはより不安定のいずれか、および計画された崩壊）、剛性、柔軟性、免疫原性、抗体結合の調節、ミセルまたはリポソームに組み込まれる能力等、結果として生じたＡＡ標的化化合物またはＡＡ標的化剤−リンカーの物理学的または薬物速度論的特性に対する効果を含む。

リンカーの接続鎖Ｘは、基Ｃ、Ｈ、Ｎ、Ｏ、Ｐ、Ｓ、ハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）またはその塩由来の任意の原子を含む。Ｘは、アルキル、アルケニル、アルキニル、オキソアルキル、オキソアルケニル、オキソアルキニル、アミノアルキル、アミノアルケニル、アミノアルキニル、スルホアルキル、スルホアルケニル、スルホアルキニル、ホスホアルキル、ホスホアルケニルまたはホスホアルキニル基等の基も含み得る。一部の実施形態において、Ｘは、１つまたは複数の環構造を含み得る。一部の実施形態において、リンカーは、２〜１００単位を含むポリエチレングリコール等の繰り返しポリマーである。

リンカーの認識基Ｙは任意選択であり、存在する場合、反応基と接続鎖との間に位置付けられている。一部の実施形態において、Ｙは、Ｚから原子１〜２０個のところに位置付けられている。いかなる理論にも束縛されることを望まないが、認識基は、反応基が反応性アミノ酸側鎖と反応することができるよう、反応基を抗体中の結合性部位に正しく位置決めするように作用すると考えられている。例示的な認識基は、好ましくは５または６個の原子を有する炭素環基および複素環基を含む。しかしながら、より大きい環構造を使用してもよい。一部の実施形態において、ＡＡ標的化剤は、介在リンカーを使用することなく、直接的にＹと連結されている。

Ｚは、抗体中の結合性部位において反応性側鎖と共有結合を形成することができる。一部の実施形態において、Ｚは、ジケトン、アシルβ−ラクタム、活性エステル、ハロケトン、シクロヘキシルジケトン基、アルデヒド、マレイミド、活性アルケン、活性アルキン、または、概して、求核または求電子転位の影響を受けやすい離脱基を含む分子を形成するように並べられた１個または複数のＣ＝Ｏ基を含む。その他の基は、ラクトン、無水物、α−ハロアセトアミド、イミン、ヒドラジドまたはエポキシドを含み得る。抗体中の結合性部位において反応性求核基（例えば、リシンまたはシステイン側鎖）と共有結合することができる例示的なリンカー求電子性反応基は、アシルβ−ラクタム、単純ジケトン、スクシンイミド活性エステル、マレイミド、リンカーを持つハロアセトアミド、ハロケトン、シクロヘキシルジケトン、アルデヒド、アミジン、グアニジン、イミン、エネアミン（ｅｎｅａｍｉｎｅ）、ホスフェート、ホスホネート、エポキシド、アジリジン、チオエポキシド、遮断または保護されているジケトン（例えばケタール）、ラクタム、スルホネート等、イミン類、ケタール類、アセタール類およびその他任意の既知の求電子基等の遮断されたＣ＝Ｏ基を含む。いくつかの実施形態において、反応基は、アシルβ−ラクタム、単純ジケトン、スクシンイミド活性エステル、マレイミド、リンカーを持つハロアセトアミド、ハロケトン、シクロヘキシルジケトンまたはアルデヒドを形成するように並べられた１個または複数のＣ＝Ｏ基を含む。

リンカー反応基または同様のそのような反応基は、特定の結合性部位において反応性残基とともに使用するために選定される。例えば、アルドラーゼ抗体による修飾のための化学的部分は、ケトン、ジケトン、βラクタム、活性エステルハロケトン、ラクトン、無水物、マレイミド、α−ハロアセトアミド、シクロヘキシルジケトン、エポキシド、アルデヒド、アミジン、グアニジン、イミン、エネアミン、ホスフェート、ホスホネート、エポキシド、アジリジン、チオエポキシド、遮断または保護されているジケトン（例えばケタール）、ラクタム、ハロケトン、アルデヒド等であってよい。

抗体中の反応性スルフヒドリル基による共有結合修飾に適したリンカー反応基化学的部分は、ジスルフィド、ハロゲン化アリール、マレイミド、α−ハロアセトアミド、イソシアネート、エポキシド、チオエステル、活性エステル、アミジン、グアニジン、イミン、エネアミン、ホスフェート、ホスホネート、エポキシド、アジリジン、チオエポキシド、遮断または保護されているジケトン（例えばケタール）、ラクタム、ハロケトン、アルデヒド等であってよい。

当業者であれば、抗体中の結合性部位中の反応性アミノ酸側鎖が、ＡＡ標的化剤またはそのリンカー上で求核基と反応する求電子基を有し得る一方、その他の実施形態において、アミノ酸側鎖中の反応性求核基が、ＡＡ標的化剤またはリンカー中の求電子基と反応することを容易に理解するであろう。

ＡＡ標的化化合物は、数種のアプローチによって調製することができる。１つのアプローチにおいて、ＡＡ標的化剤−リンカー化合物は、抗体中の結合性部位におけるアミノ酸の側鎖との共有結合反応用に設計された１個または複数の反応基を含むリンカーを用いて合成される。標的化剤−リンカー化合物および抗体を、リンカー反応基がアミノ酸側鎖と共有結合を形成する条件下で合わせる。

別のアプローチにおいて、連結は、抗体およびリンカーを含む抗体−リンカー化合物を合成することによって実現でき、ここで、該リンカーは、ＡＡ標的化剤の適当な化学的部分との共有結合反応用に設計された１個または複数の反応基を含む。ＡＡ標的化剤は、リンカー反応基との反応のために適当な部分を提供するように修飾されることが必要な場合がある。抗体−リンカーおよびＡＡ標的化剤を、リンカー反応基が標的化および／または生物学的剤と共有結合する条件下で合わせる。

抗体−ＡＡ標的化化合物を形成するためのさらなるアプローチでは、二元リンカー設計（ｄｕａｌｌｉｎｋｅｒｄｅｓｉｇｎ）を使用する。いくつかの実施形態において、ＡＡ標的化剤と反応基を持つリンカーとを含むＡＡ標的化剤−リンカー化合物が合成される。第１のステップのＡＡ標的化剤−リンカーの反応基との反応度の影響を受けやすい、抗体と化学基を持つリンカーとを含む抗体−リンカー化合物が合成される。その後、これらの２種のリンカー含有化合物を、リンカーが共有結合する条件下で合わせ、抗体−ＡＡ標的化化合物を形成する。

連結に関わることができる例示的な官能基は、例えば、エステル類、アミド類、エーテル類、ホスフェート類、アミノ、ケト、アミジン、グアニジン、イミン類、エネアミン類、ホスフェート類、ホスホネート類、エポキシド類、アジリジン類、チオエポキシド類、遮断または保護されているジケトン類（例えばケタール類）、ラクタム類、ハロケトン類、アルデヒド類、チオカルバメート、チオアミド、チオエステル、スルフィド、ジスルフィド、ホスホルアミド、スルホンアミド、尿素、チオ尿素、カルバメート、カーボネート、ヒドロキサミド等を含む。

リンカーは、基Ｃ、Ｈ、Ｎ、Ｏ、Ｐ、Ｓ、ハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）またはその塩由来の任意の原子を含む。リンカーは、アルキル、アルケニル、アルキニル、オキソアルキル、オキソアルケニル、オキソアルキニル、アミノアルキル、アミノアルケニル、アミノアルキニル、スルホアルキル、スルホアルケニル、スルホアルキニル基、ホスホアルキル、ホスホアルケニルまたはホスホアルキニル基等の基も含み得る。リンカーは、１つまたは複数の環構造も含み得る。本明細書で使用される場合、「環構造」は、飽和、不飽和および芳香族の炭素環、ならびに飽和、不飽和および芳香族の複素環を含む。環構造は、単環式、二環式または多環式であってよく、縮合または非縮合環を含み得る。その上、環構造は、それだけに限らないが、ハロゲン、オキソ、−ＯＨ、−ＣＨＯ、−ＣＯＯＨ、−ＮＯ_２、−ＣＮ、−ＮＨ_２、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ_２、Ｃ_１〜６アルキル、Ｃ_２〜６アルケニル、Ｃ_２〜６アルキニル、Ｃ_１〜６オキソアルキル、オキソアルケニル、オキソアルキニル、アミノアルキル、アミノアルケニル、アミノアルキニル、スルホアルキル、スルホアルケニル、スルホアルキニル、ホスホアルキル、ホスホアルケニルまたはホスホアルキニル基を含む、当該技術分野において既知の官能基で置換されていてもよい。上記の基および環の組合せは、ＡＡ標的化化合物のリンカー中に存在してもよい。

本発明の一態様は、式Ｉを有するＡＡ標的化剤−リンカー複合体
Ｌ−［ＡＡ標的化剤］（Ｉ）
であり、
ここで、［ＡＡ標的化剤］は、ＡＡ標的化剤ペプチドである。

式Ｉの化合物中のリンカー部分Ｌは、ＡＡ標的化剤のアミノ末端、カルボキシ末端または任意のアミノ酸側鎖に結合していてよい。いくつかの実施形態において、Ｌは、ＡＡ標的化剤のカルボキシ末端と連結している。いくつかの他の実施形態において、Ｌは、ＡＡ標的化剤のアミノ末端と連結している。さらに他の実施形態において、Ｌは、求核性または求電子性側鎖のいずれかと連結している。求電子性側鎖と連結している場合、Ｌは、求電子性側鎖との共有結合反応の影響を受けやすい求核基を有するはずである。例示的な求電子性側鎖は、ＡｓｐおよびＧｌｕである。例示的な求核性側鎖は、Ｃｙｓ、Ｌｙｓ、Ｓｅｒ、ＴｈｒおよびＴｙｒである。求核性側鎖と連結している場合、Ｌは、求核性側鎖との共有結合反応の影響を受けやすい求電子基を含むはずである。別の実施形態において、求核性アミノ酸はＡＡ標的化剤のカルボキシ末端またはアミノ末端のいずれかに添加され、リンカーＬは、この追加のアミノ酸の側鎖に共有結合的に結合している。いくつかの実施形態において、Ｌｙｓは、ＡＡ標的化剤のアミノ末端に添加される。いくつかの他の実施形態において、Ｌｙｓは、ＡＡ標的化剤のカルボキシ末端に添加される。

したがって、Ｒ^１−ＱＫＹＱＰＬＤＥＬＤＫＴＬＹＤＱＦＭＬＱＱＧ−Ｒ^２ベースのＡＡ標的化剤を含むそれらの実施形態において、ｉ）Ｄ、Ｅ、Ｋ、ＴおよびＹの側鎖またはｉｉ）アミノもしくはカルボキシ末端のいずれかと連結することによって形成される式Ｉの例示的な化合物は下記を含み、ここで、アミノ酸残基の次の（Ｌｉ）は、その残基との連結を指示している。

同様に、Ｒ^１−Ｑ−［ＡＣＫ］−ＹＱＰＬＤＥＬＤＫＴＬＹＤＱＦＭＬＱＱＧ−Ｒ^２ベースのＡＡ標的化剤を含むそれらの実施形態において、ｉ）Ｄ、Ｅ、Ｋ、ＴおよびＹの側鎖またはｉｉ）アミノもしくはカルボキシ末端のいずれかと連結することによって形成される式Ｉの例示的な化合物は、以下を含む。

式Ｉの化合物において、Ｌは、式−Ｘ−Ｙ−Ｚを有するリンカー部分であり、ここで、
Ｘは、ＡＡ標的化剤を含む残基のうちの１つに結合している、存在していてもよい生物学的に適合するポリマーまたはブロックコポリマーであり、
Ｙは、少なくとも環構造を含む存在していてもよい認識基であり、
Ｚは、抗体中の結合性部位において側鎖と共有結合することができる反応基である。

式Ｉの化合物の一部の実施形態において、Ｘは
−Ｒ^２２−Ｐ−Ｒ^２−−または−Ｒ^２２−Ｐ−Ｒ^２１−Ｐ’−Ｒ^２３−であり、
ここで、
ＰおよびＰ’は、ポリエチレンオキシド、ポリエチルオキサゾリン、ポリ−Ｎ−ビニルピロリドン、ポリビニルアルコール、ポリヒドロキシエチルアクリレート、ポリヒドロキシエチルメタクリレートおよびポリアクリルアミド等のポリオキシアルキレンオキシド類、ポリマー主鎖またはポリマー側鎖のいずれか上にアミン基を有するポリリシン、ポリオルニチン、ポリアルギニンおよびポリヒスチジン等のポリアミン類、ポリアミノスチレン、ポリアミノアクリレート、ポリ（Ｎ−メチルアミノアクリレート）、ポリ（Ｎ−エチルアミノアクリレート）、ポリ（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノアクリレート）、ポリ（Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノアクリレート）、ポリ（アミノメタクリレート）、ポリ（Ｎ−メチルアミノ−メタクリレート）、ポリ（Ｎ−エチルアミノメタクリレート）、ポリ（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノメタクリレート）、ポリ（Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノメタクリレート）、ポリ（エチレンイミン）等の非ペプチドポリアミン類、ポリ（Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルアミノアクリレートクロリド）、ポリ（メチアクリルアミドプロピルトリメチルアンモニウムクロリド）等の第四級アミン類のポリマー、コンドロイチン硫酸−Ａ（４−硫酸）、コンドロイチン硫酸−Ｃ（６−硫酸）およびコンドロイチン硫酸−Ｂ等のプロテオグリカン類、ポリセリン、ポリスレオニン、ポリグルタミン等のポリペプチド類、キトサン、ヒドロキシエチルセルロース等の天然または合成多糖類、ならびに脂質類からなる群より独立に選択され、
Ｒ^２１、Ｒ^２２およびＲ^２３は、それぞれ独立に、共有結合、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＲ^ｂ−、置換もしくは非置換の直鎖もしくは分岐鎖Ｃ_１〜５０アルキレン、または置換もしくは非置換の直鎖もしくは分岐鎖Ｃ_１〜５０ヘテロアルキレンであり、
Ｒ^ｂは、水素、置換もしくは非置換のＣ_１〜１０アルキル、置換もしくは非置換のＣ_３〜７シクロアルキル−Ｃ_０〜６アルキル、または置換もしくは非置換のアリール−Ｃ_０〜６アルキルであり、
Ｒ^２１、Ｒ^２２およびＲ^２３は、Ｘの主鎖長が約２００個以下の原子となるように選択される。

式Ｉの化合物の一部の実施形態において、Ｒ^２２は、−（ＣＨ_２）_ｖ−、−（ＣＨ_２）_ｕ−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ_２）_ｖ−、−（ＣＨ_２）_ｕ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｖ−、−（ＣＨ_２）_ｕ−Ｃ（Ｓ）−ＮＲ^ｂ−（ＣＨ_２）_ｖ−、−（ＣＨ_２）_ｕ−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ^ｂ−（ＣＨ_２）_ｖ−、−（ＣＨ_２）_ｕ−ＮＲ^ｂ−（ＣＨ_２）_ｖ−、−（ＣＨ_２）_ｕ−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｖ−、−（ＣＨ_２）_ｕ−Ｓ（Ｏ）_０〜２−（ＣＨ_２）_ｖ−、−（ＣＨ_２）_ｕ−Ｓ（Ｏ）_０〜２−ＮＲ^ｂ−（ＣＨ_２）_ｖ−または−（ＣＨ_２）_ｕ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ^ｂ）−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｖ−であり、ここで、ｕおよびｖはそれぞれ独立に、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９または２０である。

式Ｉの化合物のまた他の実施形態において、Ｒ^２２は、−（ＣＨ_２）_ｖ−、−（ＣＨ_２）_ｕ−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ_２）_ｖ−、−（ＣＨ_２）_ｕ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｖ−、−（ＣＨ_２）_ｕ−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ^ｂ−（ＣＨ_２）_ｖ−または−（ＣＨ_２）_ｕ−ＮＲ^ｂ−（ＣＨ_２）_ｖである。さらに他の実施形態において、Ｒ^−２は−（ＣＨ_２）_ｕ−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ^ｂ−（ＣＨ_２）_ｖ−である。

式Ｉの化合物の一部の実施形態において、Ｒ^２１およびＲ^２３はそれぞれ独立に、−（ＣＨ_２）_ｓ−、−（ＣＨ_２）_ｒ−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ_２）_ｓ−、−（ＣＨ_２）_ｒ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｖ−、−（ＣＨ_２）_ｒ−Ｃ（Ｓ）−ＮＲ^ｂ−（ＣＨ_２）_ｓ−、−（ＣＨ_２）_ｒ−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ^ｂ−（ＣＨ_２）_ｓ−、−（ＣＨ_２）_ｒ−ＮＲ^ｂ−（ＣＨ_２）_ｓ−、−（ＣＨ_２）_ｒ−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｓ−、−（ＣＨ_２）_ｒ−Ｓ（Ｏ）_０〜２−（ＣＨ_２）_ｓ−、−（ＣＨ_２）_ｒ−Ｓ（Ｏ）_０〜２−ＮＲ^ｂ−（ＣＨ_２）_ｓ−または−（ＣＨ_２）_ｒ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ^ｂ）−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｓ−であり、ここで、ｒ、ｓおよびｖはそれぞれ独立に、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９または２０である。

また他の実施形態において、Ｒ^２１およびＲ^２３は、それぞれ独立に、−（ＣＨ_２）_ｓ−、−（ＣＨ_２）_ｒ−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ_２）_ｓ−、−（ＣＨ_２）_ｒ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｓ−、−（ＣＨ_２）_ｒ−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ^ｂ−（ＣＨ_２）_ｓ−または−（ＣＨ_２）_ｒ−ＮＲ^ｂ−（ＣＨ_２）_ｓおよび−（ＣＨ_２）_ｒ−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ^ｂ−（ＣＨ_２）_ｓ−である。

さらに他の実施形態において、Ｒ^２１およびＲ^２３は、それぞれ独立に、構造

を有し、式中、ｐは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、３２、４３、４４または４５であり、ｗ、ｒおよびｓは、それぞれ独立に、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９または２０であり、Ｒ^ｂは、各出現時、独立に、水素、置換もしくは非置換のＣ_１〜１０アルキル、置換もしくは非置換のＣ_３〜７シクロアルキル−Ｃ_０〜６アルキル、または置換もしくは非置換のアリール−Ｃ_０〜６アルキルである。

式Ｉの化合物のいくつかの実施形態において、Ｘは構造

を有し、式中、Ｈ^１およびＨ^１’は、各出現時、独立に、Ｎ、Ｏ、ＳまたはＣＨ_２であり、ｒおよびｓは、それぞれ独立に、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９または２０であり、ｔおよびｔ’は、それぞれ独立に、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、３２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９または５０であり、Ｒ^ｂは、水素、置換もしくは非置換のＣ_１〜１０アルキル、置換もしくは非置換のＣ_３〜７シクロアルキル−Ｃ_０〜６アルキル、または置換もしくは非置換のアリール−Ｃ_０〜６アルキルである。

式Ｉの化合物のいくつかの実施形態において、Ｘは構造

を有し、式中、Ｈ^１およびＨ^１’は、各出現時、独立に、Ｎ、Ｏ、ＳまたはＣＨ_２であり、ｒおよびｓは、それぞれ独立に、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９または２０であり、ｔおよびｔ’は、それぞれ独立に、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、３２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９または５０であり、Ｒ^ｂは、各出現時、独立に、水素、置換もしくは非置換のＣ_１〜１０アルキル、置換もしくは非置換のＣ_３〜７シクロアルキル−Ｃ_０〜６アルキル、または置換もしくは非置換のアリール−Ｃ_０〜６アルキルである。

式Ｉの化合物のいくつかの実施形態において、Ｘは構造

式Ｉの化合物のいくつかの実施形態において、Ｘは構造

式Ｉの化合物のいくつかの実施形態において、Ｘは構造

式Ｉの化合物のいくつかの実施形態において、Ｘは構造

式Ｉの化合物のいくつかの実施形態において、Ｘは構造

を有し、式中、ｖおよびｗは、それぞれ独立に、１、２、３、４または５であり、Ｒ^ｂは、水素、置換もしくは非置換のＣ_１〜１０アルキル、置換もしくは非置換のＣ_３〜７シクロアルキル−Ｃ_０〜６アルキル、または置換もしくは非置換のアリール−Ｃ_０〜６アルキルである。これらの実施形態のいくつかにおいて、ｖは１、２または３であり、ｗは１、２または３であり、Ｒ^ｂは水素である。

式Ｉのいくつかの実施形態において、Ｌは、式−Ｘ−Ｙ−Ｚを有するリンカー部分であり、ここで、
Ｘは、ＡＡ標的化剤を含む残基のうちの１つに結合しており、置換されていてもよい−Ｒ^２２−［ＣＨ_２−ＣＨ_２−Ｏ］_ｔ−Ｒ^２３−、−Ｒ^２２−シクロアルキル−Ｒ^２３−、−Ｒ^２２−アリール−Ｒ^２３−または−Ｒ^２２−ヘテロシクリル−Ｒ^２３−であり、ここで、
Ｒ^２２およびＲ^２３は、それぞれ独立に、共有結合、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＲ^ｂ−、置換もしくは非置換の直鎖もしくは分岐鎖Ｃ_１〜５０アルキレン、置換もしくは非置換の直鎖もしくは分岐鎖Ｃ_１〜５０ヘテロアルキレン、置換もしくは非置換の直鎖もしくは分岐鎖Ｃ_２〜５０アルケニレン、または置換もしくは非置換のＣ_２〜５０ヘテロアルケニレンであり、
Ｒ^ｂは、水素、置換もしくは非置換のＣ_１〜１０アルキル、置換もしくは非置換のＣ_３〜７シクロアルキル−Ｃ_０〜６アルキル、または置換もしくは非置換のアリール−Ｃ_０〜６アルキルであり、
ｔは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、３２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９または５０であり、
Ｒ^２２およびＲ^２３のサイズは、Ｘの主鎖長が約２００個以下の原子抗体−Ｎ−となるようなものであり、
Ｙは、少なくとも環構造を含む存在していてもよい認識基であり、
Ｚは、抗体中の結合性部位において側鎖と共有結合することができる反応基である。式Ｉの化合物の一部の実施形態において、ｔ＞１である場合、または−Ｘが、−Ｒ^２２−シクロアルキル−Ｒ^２３−、−Ｒ^２２−アリール−Ｒ^２３−もしくは−Ｒ^２２−ヘテロシクリル−Ｒ^２３−である場合、Ｙは存在している。

式Ｉの化合物の一部の実施形態において、Ｘは
−Ｒ^２２−［ＣＨ_２−ＣＨ_２−Ｏ］_ｔ−Ｒ^２３−であり、
ここで、
Ｒ^２２は、−（ＣＨ_２）_ｖ−、−（ＣＨ_２）_ｕ−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ_２）_ｖ−、−（ＣＨ_２）_ｕ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｖ−、−（ＣＨ_２）_ｕ−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ^ｂ−（ＣＨ_２）_ｖ−、−（ＣＨ_２）_ｕ−Ｃ（Ｓ）−ＮＲ^ｂ−（ＣＨ_２）_ｖ−、−（ＣＨ_２）_ｕ−ＮＲ^ｂ−（ＣＨ_２）_ｖ−、−（ＣＨ_２）_ｕ−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｖ−、−（ＣＨ_２）_ｕ−Ｓ（Ｏ）_０〜２−（ＣＨ_２）_ｖ−、−（ＣＨ_２）_ｕ−Ｓ（Ｏ）_０〜２−ＮＲ^ｂ−（ＣＨ_２）_ｖ−または−（ＣＨ_２）_ｕ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ^ｂ）−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｖ−であり、
ｕおよびｖは、それぞれ独立に、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９または２０であり、ｔは０から５０である。

Ｒ^２３は構造

を有し、
式中、
ｐは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、３２、４３、４４または４５であり、
ｗおよびｒは、それぞれ独立に、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９または２０であり、
ｓは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９または２０であり、
Ｒ^ｂは、各出現時、独立に、水素、置換もしくは非置換のＣ_１〜１０アルキル、置換もしくは非置換のＣ_３〜７シクロアルキル−Ｃ_０〜６アルキル、または置換もしくは非置換のアリール−Ｃ_０〜６アルキルであり、
ｔ、ｕ、ｗ、ｐ、ｖ、ｒおよびｓの値は、Ｘの主鎖長が約２００個以下の原子抗体−Ｎ−となるようなものである。

式Ｉの化合物のいくつかの実施形態において、Ｘは式

を有し、式中、ｖ、ｔ、ｗおよびｐの値は、Ｘの主鎖長が、２００個未満の原子、または１００個未満の原子、または７５個未満の原子、または５０個未満の原子、または２５個未満の原子、または１５個未満の原子となるように選択される。

式Ｉの化合物のいくつかの実施形態において、Ｘは構造

を有し、式中、ｖ、ｔ、ｒおよびｓの値は、Ｘの主鎖長が、２００個未満の原子、または１００個未満の原子、または７５個未満の原子、または５０個未満の原子、または２５個未満の原子、または１５個未満の原子となるように選択される。

式Ｉの化合物のいくつかの実施形態において、Ｘは構造

を有し、式中、ｕ、ｖ、ｔ、ｗおよびｐの値は、Ｘの主鎖長が、２００個未満の原子、または１００個未満の原子、または７５個未満の原子、または５０個未満の原子、または２５個未満の原子、または１５個未満の原子となるように選択される。

式Ｉの化合物のいくつかの実施形態において、Ｘは構造

を有し、式中、ｕ、ｖ、ｔ、ｒおよびｓの値は、Ｘの主鎖長が、２００個未満の原子、または１００個未満の原子、または７５個未満の原子、または５０個未満の原子、または２５個未満の原子、または１５個未満の原子となるように選択される。

式Ｉの化合物のいくつかの実施形態において、Ｘは構造

式Ｉの化合物のいくつかの実施形態において、Ｘは構造

式Ｉの化合物のいくつかの実施形態において、Ｘは構造

式Ｉの化合物のいくつかの実施形態において、Ｘは構造

式Ｉの化合物のいくつかの実施形態において、Ｘは構造

式Ｉの化合物のいくつかの実施形態において、Ｘは構造

式Ｉの化合物のいくつかの実施形態において、Ｘは構造

式Ｉの化合物のいくつかの実施形態において、Ｘは構造

式Ｉを有する化合物［式中、Ｌは式−Ｘ−Ｙ−Ｚを有する］において、Ｙの環構造は、飽和、不飽和および芳香族の炭素環、ならびに飽和、不飽和および芳香族の複素環を含む。（１つまたは複数の）環構造は、単環式、二環式または多環式であってよく、縮合または非縮合環を含み得る。その上、（１つまたは複数の）環構造は、それだけに限らないが、ハロゲン、オキソ、−ＯＨ、−ＣＨＯ、−ＣＯＯＨ、−ＮＯ_２、−ＣＮ、−ＮＨ_２、アミジン、グアニジン、ヒドロキシルアミン、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ_２、第二級および第三級アミド、スルホンアミド、置換または非置換のアルキル、置換または非置換のアルケニル、置換または非置換のアルキニル、オキソアルキル、オキソアルケニル、オキソアルキニル、アミノアルキル、アミノアルケニル、アミノアルキニル、スルホアルキル、スルホアルケニル、スルホアルキニル、ホスホアルキル、ホスホアルケニルならびにホスホアルキニル基を含む、当該技術分野において既知の官能基で置換されていてもよい。

式Ｉを有する化合物の一部の実施形態において、Ｙの環構造は、置換されていてもよい構造

を有し、式中、ａ、ｂ、ｃ、ｄおよびｅは、それぞれ独立に、炭素または窒素であり、ｆは、炭素、窒素、酸素または硫黄であり、Ｙは、十分な原子価の任意の２つの環位置においてＸおよびＺに独立に結合しており、ａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅまたはｆのうちの４つ以下は、同時に窒素である。

環構造を構成する原子上に残存している任意の開放原子価（ｏｐｅｎｖａｌｅｎｃｅｓ）は、水素もしくは他の置換基によって、またはＸおよびＺとの共有結合的結合によって満たすことができる。例えば、ｂが炭素である場合、その原子価は、水素、ハロゲン等の置換基、Ｘとの共有結合的結合、またはＺとの共有結合的結合によって満たすことができる。一部の実施形態において、ａ、ｂ、ｃ、ｄおよびｅが炭素それぞれ炭素であることもあれば、ａ、ｃ、ｄおよびｆがそれぞれ炭素であることもある。その他の実施形態において、ａ、ｂ、ｃ、ｄまたはｅのうちの少なくとも１個が窒素であることもあれば、またｆが酸素または硫黄であることもある。また別の実施形態において、Ｙの環構造は非置換である。いくつかの実施形態において、Ｙはフェニルである。

式Ｉの化合物のいくつかの実施形態において、Ｘ−Ｙは構造

を有する。

これらの実施形態のいくつかにおいて、ｖは、１、２、３、４または５であり、ｗは、１、２、３、４または５であり、Ｒ^ｂは、水素、置換もしくは非置換のＣ_１〜１０アルキル、置換もしくは非置換のＣ_３〜７シクロアルキル−Ｃ_０〜６アルキル、または置換もしくは非置換のアリール−Ｃ_０〜６アルキルである。いくつかの他の実施形態において、ｖは、１、２または３であり、ｗは、１、２または３である。さらに他の実施形態において、ｖは１または２であり、ｗは１または２である。

式Ｉの化合物のいくつかの実施形態において、Ｘは構造

を有し、式中、Ｈ^１およびＨ^１’は、それぞれ独立に、Ｎ、Ｏ、ＳまたはＣＨ_２であり、ｒおよびｓは、それぞれ独立に、１、２、３、４または５であり、ｔおよびｔ’は、それぞれ独立に、０、１、２、３、４または５である。これらの実施形態のいくつかにおいて、Ｈ^１およびＨ^１’は、それぞれ独立に、ＯまたはＣＨ_２であり、ｒおよびｓは、それぞれ独立に、１または２であり、ｔおよびｔ’は、それぞれ独立に、０または１である。

式Ｉの化合物のいくつかの実施形態において、Ｘは構造

を有し、式中、Ｈ^１およびＨ^１’は、それぞれ独立に、Ｎ、Ｏ、ＳまたはＣＨ_２であり、ｒおよびｓは、それぞれ独立に、１、２、３、４または５であり、ｔおよびｔ’は、それぞれ独立に、０、１、２、３、４または５であり、Ｒ^ｂは、各出現時、独立に、水素、置換もしくは非置換のＣ_１〜１０アルキル、置換もしくは非置換のＣ_３〜７シクロアルキル−Ｃ_０〜６アルキル、または置換もしくは非置換のアリール−Ｃ_０〜６アルキルである。これらの実施形態のいくつかにおいて、Ｈ^１およびＨ^１’は、それぞれ独立に、ＯまたはＣＨ_２であり、ｒおよびｓは、それぞれ独立に、１または２であり、ｔおよびｔ’は、それぞれ独立に、０または１である。

式Ｉの化合物のいくつかの実施形態において、Ｘは構造

式Ｉの化合物のいくつかの実施形態において、Ｘは構造

式Ｉの化合物のいくつかの実施形態において、Ｘは構造

式Ｉの化合物のいくつかの実施形態において、Ｘは構造

を有し、式中、Ｈ^１およびＨ^１’は、それぞれ独立に、Ｎ、Ｏ、ＳまたはＣＨ_２であり、ｒおよびｓは、それぞれ独立に、１、２、３、４または５であり、ｔおよびｔ’は、それぞれ独立に、０、１、２、３、４または５であり、Ｒ^ｂは、水素、置換もしくは非置換のＣ_１〜１０アルキル、置換もしくは非置換のＣ_３〜７シクロアルキル−Ｃ_０〜６アルキル、または置換もしくは非置換のアリール−Ｃ_０〜６アルキルである。これらの実施形態のいくつかにおいて、Ｈ^１およびＨ^１’は、それぞれ独立に、ＯまたはＣＨ_２であり、ｒおよびｓは、それぞれ独立に、１または２であり、ｔおよびｔ’は、それぞれ独立に、０または１である。

式Ｉの化合物のいくつかの実施形態において、Ｘは構造

式Ｉの化合物のこれらの実施形態のいくつかにおいて、Ｘ−Ｙは構造

を有する。

これらの実施形態のいくつかにおいて、ｖは、０、１、２、３、４または５であり、ｔは、１、２、３、４、５または６であり、ｗは、１、２、３、４または５であり、ｐは、１、２、３、４または５であり、Ｒ^ｂは、各出現時、独立に、水素、置換もしくは非置換のＣ_１〜１０アルキル、置換もしくは非置換のＣ_３〜７シクロアルキル−Ｃ_０〜６アルキル、または置換もしくは非置換のアリール−Ｃ_０〜６アルキルである。いくつかの実施形態において、ｖは０であり、ｔは１、２、３、４、５または６であり、ｗは１であり、ｐは３である。一部の実施形態において、ｖは０であり、ｔは１、２または３であり、ｗは１であり、ｐは１または２である。

を有する。

これらの実施形態のいくつかにおいて、ｖは、０、１、２、３、４または５であり、ｔは、１、２、３、４、５または６であり、ｒは、１、２、３、４または５であり、ｓは、０、１、２、３、４または５であり、Ｒ^ｂは、水素、置換もしくは非置換のＣ_１〜１０アルキル、置換もしくは非置換のＣ_３〜７シクロアルキル−Ｃ_０〜６アルキル、または置換もしくは非置換のアリール−Ｃ_０〜６アルキルである。いくつかの実施形態において、ｖは０であり、ｔは１、２、３、４、５または６であり、ｒは１または２であり、ｓは３である。一部の実施形態において、ｖは０であり、ｔは１、２または３であり、ｒは１であり、ｓは１または２である。

を有する。

これらの実施形態のいくつかにおいて、ｕは、０、１、２、３、４または５であり、ｖは、０、１、２、３、４または５であり、ｔは、１、２、３、４、５または６であり、ｗは、１、２、３、４または５であり、ｐは、１、２、３、４または５であり、Ｒ^ｂは、各出現時、独立に、水素、置換もしくは非置換のＣ_１〜１０アルキル、置換もしくは非置換のＣ_３〜７シクロアルキル−Ｃ_０〜６アルキル、または置換もしくは非置換のアリール−Ｃ_０〜６アルキルである。いくつかの実施形態において、ｕは０であり、ｖは０であり、ｔは１、２、３、４、５または６であり、ｗは１であり、ｐは３である。一部の実施形態において、ｕは０または１であり、ｖは０であり、ｔは１または２であり、ｗは１であり、ｐは１または２である。

を有する。

これらの実施形態のいくつかにおいて、ｕは、０、１、２、３、４または５であり、ｖは、０、１、２、３、４または５であり、ｔは、１、２、３、４、５または６であり、ｒは、１、２、３、４または５であり、ｓは、０、１、２、３、４または５であり、Ｒ^ｂは、水素、置換もしくは非置換のＣ_１〜１０アルキル、置換もしくは非置換のＣ_３〜７シクロアルキル−Ｃ_０〜６アルキル、または置換もしくは非置換のアリール−Ｃ_０〜６アルキルである。いくつかの実施形態において、ｕは０であり、ｖは０であり、ｔは１、２、３、４、５または６であり、ｒは１または２であり、ｓは３である。一部の実施形態において、ｕは０または１であり、ｖは０であり、ｔは１、２または３であり、ｒは１であり、ｓは１または２である。

を有する。

を有する。

を有する。

を有する。

これらの実施形態のいくつかにおいて、ｕは、０、１、２、３、４または５であり、ｖは、０、１、２、３、４または５であり、ｔは、１、２、３、４、５または６であり、ｒは、１、２、３、４または５であり、ｓは、０、１、２、３、４または５であり、Ｒ^ｂは、各出現時、独立に、水素、置換もしくは非置換のＣ_１〜１０アルキル、置換もしくは非置換のＣ_３〜７シクロアルキル−Ｃ_０〜６アルキル、または置換もしくは非置換のアリール−Ｃ_０〜６アルキルである。いくつかの実施形態において、ｕは０であり、ｖは０であり、ｔは１、２、３、４、５または６であり、ｒは１または２であり、ｓは３である。一部の実施形態において、ｕは０または１であり、ｖは０であり、ｔは１、２または３であり、ｒは１であり、ｓは１または２である。

を有する。

を有する。

を有する。

を有する。

式Ｉを有する化合物［式中、Ｌは式−Ｘ−Ｙ−Ｚを有する］において、反応基Ｚは、抗体中の結合性部位においてアミノ酸との共有結合を形成することができる部分を含有する。例えば、Ｚは、置換アルキル、置換シクロアルキル、置換アリール、置換アリールアルキル、置換ヘテロシクリルまたは置換ヘテロシクリルアルキルであってよく、ここで、少なくとも１個の置換基は、１，３−ジケトン部分、アシルβ−ラクタム、活性エステル、α−ハロケトン、アルデヒド、マレイミド、ラクトン、無水物、α−ハロアセトアミド、アミン、ヒドラジドまたはエポキシドである。一部のそのような実施形態において、Ｚは置換アルキルである。

Ｚは、可逆的または不可逆的な共有結合を形成する基であってよい。一部の実施形態において、可逆的な共有結合は、図８に示されているもの等のジケトンＺ基を使用して形成することができる。したがって、構造Ａ〜Ｃは、抗体中の結合性部位において、反応性求核基（例えば、リシンまたはシステイン側鎖）と可逆的な共有結合を形成することができる。図８の構造Ａ〜Ｃ中のＲ’_１、Ｒ’_２、Ｒ’_３およびＲ_４は、Ｃ、Ｈ、Ｎ、Ｏ、Ｐ、Ｓ、ハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）またはその塩であってよい置換基を表す。これらの置換基は、アルキル、アルケニル、アルキニル、オキソアルキル、オキソアルケニル、オキソアルキニル、アミノアルキル、アミノアルケニル、アミノアルキニル、スルホアルキル、スルホアルケニルまたはスルホアルキニル基、ホスホアルキル、ホスホアルケニル、ホスホアルキニル基等の基を含んでもよい。Ｒ’_２およびＲ’_３は、構造ＢおよびＣに例示されている通りの環構造を形成することもできる。図８中のＸは、ヘテロ原子であってよい。可逆的な共有結合を形成するその他のＺ基は、アミジン、イミン、および図８の構造Ｇによって包含される他の反応基を含む。図９は、可逆的な共有結合を形成する他のリンカー反応基の構造、例えば、構造Ｂ、Ｇ、Ｈを含み、ここで、Ｘは、離脱基、ＥおよびＦではない。

抗体中の結合性部位と不可逆的な共有結合を形成するＺ反応基は、図８の構造Ｄ〜Ｇ（例えば、Ｇがイミデートである場合）ならびに図９の構造Ａ、ＣおよびＤを含む。Ｘが離脱基である場合、図９の構造ＥおよびＦは、不可逆的な共有結合を形成することもできる。そのような構造は、抗体中の結合性部位において、反応性求核基に標的化剤−リンカーを不可逆的に結合させるために有用である。

他のそのような実施形態において、Ｚは１，３−ジケトン部分である。さらに他のそのような実施形態において、Ｚは、１，３−ジケトン部分により置換されているアルキルである。いくつかの実施形態において、Ｚは構造

を有し、式中、ｑ＝０〜５である。いくつかの他の実施形態において、Ｚは構造

を有する。

ＡＡ標的化化合物において使用するため、およびＡＡ標的化剤−リンカー化合物を調製するための１種のリンカーは、１，３−ジケトン反応基をＺとして含む。式Ｉのいくつかの実施形態において、Ｌは構造

を有する。

これらの実施形態のいくつかにおいて、ｖは、０、１、２、３、４または５であり、ｔは、１、２、３、４、５または６であり、ｗは、１、２、３、４または５であり、ｐは、１、２、３、４または５であり、ｑは、０、１、２、３、４または５であり、Ｒ^ｂは、各出現時、独立に、水素、置換もしくは非置換のＣ_１〜１０アルキル、置換もしくは非置換のＣ_３〜７シクロアルキル−Ｃ_０〜６アルキル、または置換もしくは非置換のアリール−Ｃ_０〜６アルキルである。いくつかの実施形態において、ｖは０であり、ｔは１、２、３、４、５または６であり、ｗは１であり、ｐは３であり、ｑは０、１、２または３である。一部の実施形態において、ｖは０であり、ｔは１または２であり、ｗは１であり、ｐは１または２であり、ｑは１または２である。

式Ｉのいくつかの実施形態において、Ｌは構造

を有する。

これらの実施形態のいくつかにおいて、ｖは、０、１、２、３、４または５であり、ｔは、１、２、３、４、５または６であり、ｗは、１、２、３、４または５であり、ｐは、１、２、３、４または５であり、ｑは、０、１、２または３であり、Ｒ^ｂは、各出現時、独立に、水素、置換もしくは非置換のＣ_１〜１０アルキル、置換もしくは非置換のＣ_３〜７シクロアルキル−Ｃ_０〜６アルキル、または置換もしくは非置換のアリール−Ｃ_０〜６アルキルである。いくつかの実施形態において、ｖは０であり、ｔは１、２、３、４、５または６であり、ｗは１であり、ｐは３であり、ｑは０、１、２または３である。一部の実施形態において、ｖは０であり、ｔは１または２であり、ｗは１であり、ｐは１または２であり、ｑは２または３である。

式Ｉのいくつかの実施形態において、Ｌは構造

を有する。

式Ｉのいくつかの実施形態において、Ｌは構造

を有する。

これらの実施形態のいくつかにおいて、ｖは、０、１、２、３、４または５であり、ｔは、１、２、３、４、５または６であり、ｒは、１、２、３、４または５であり、ｓは、０、１、２、３、４または５であり、ｑは、０、１、２、３、４または５であり、Ｒ^ｂは、水素、置換もしくは非置換のＣ_１〜１０アルキル、置換もしくは非置換のＣ_３〜７シクロアルキル−Ｃ_０〜６アルキル、または置換もしくは非置換のアリール−Ｃ_０〜６アルキルである。いくつかの実施形態において、ｖは０であり、ｔは１、２、３、４、５または６であり、ｒは１または２であり、ｓは３であり、ｑは０、１、２または３である。一部の実施形態において、ｖは０であり、ｔは１、２または３であり、ｒは１であり、ｓは１または２であり、ｑは１または２である。

式Ｉのいくつかの実施形態において、Ｌは構造

を有する。

式Ｉのいくつかの実施形態において、Ｌは構造

を有する。

これらの実施形態のいくつかにおいて、ｖは、０、１、２、３、４または５であり、ｔは、１、２、３、４、５または６であり、ｒは、１、２、３、４または５であり、ｓは、０、１、２、３、４または５であり、ｑは、０、１、２または３であり、Ｒ^ｂは、水素、置換もしくは非置換のＣ_１〜１０アルキル、置換もしくは非置換のＣ_３〜７シクロアルキル−Ｃ_０〜６アルキル、または置換もしくは非置換のアリール−Ｃ_０〜６アルキルである。いくつかの実施形態において、ｖは０であり、ｔは１、２、３、４、５または６であり、ｒは１または２であり、ｓは３であり、ｑは０、１、２または３である。一部の実施形態において、ｖは０であり、ｔは１、２または３であり、ｒは１であり、ｓは１または２であり、ｑは２または３である。

式Ｉのいくつかの実施形態において、Ｌは構造

を有する。

これらの実施形態のいくつかにおいて、ｕは、０、１、２、３、４または５であり、ｖは、０、１、２、３、４または５であり、ｔは、１、２、３、４、５または６であり、ｗは、１、２、３、４または５であり、ｐは、１、２、３、４または５であり、ｑは、０、１、２、３、４または５であり、Ｒ^ｂは、各出現時、独立に、水素、置換もしくは非置換のＣ_１〜１０アルキル、置換もしくは非置換のＣ_３〜７シクロアルキル−Ｃ_０〜６アルキル、または置換もしくは非置換のアリール−Ｃ_０〜６アルキルである。いくつかの実施形態において、ｕは０であり、ｖは０であり、ｔは１、２、３、４、５または６であり、ｗは１であり、ｐは３であり、ｑは０、１、２または３である。一部の実施形態において、ｕは０または１であり、ｖは０であり、ｔは１または２であり、ｗは１であり、ｐは１または２であり、ｑは１または２である。

式Ｉのいくつかの実施形態において、Ｌは構造

を有する。

これらの実施形態のいくつかにおいて、ｕは、０、１、２、３、４または５であり、ｖは、０、１、２、３、４または５であり、ｔは、１、２、３、４、５または６であり、ｗは、１、２、３、４または５であり、ｐは、１、２、３、４または５であり、ｑは、０、１、２、３、４または５であり、Ｒ^ｂは、各出現時、独立に、水素、置換もしくは非置換のＣ_１〜１０アルキル、置換もしくは非置換のＣ_３〜７シクロアルキル−Ｃ_０〜６アルキル、または置換もしくは非置換のアリール−Ｃ_０〜６アルキルである。いくつかの実施形態において、ｕは０であり、ｖは０であり、ｔは１、２、３、４、５または６であり、ｗは１であり、ｐは３であり、ｑは０、１、２または３である。一部の実施形態において、ｖは０であり、ｔは１または２であり、ｗは１であり、ｐは１または２であり、ｑは１または２である。

式Ｉのいくつかの実施形態において、Ｌは構造

を有する。

これらの実施形態のいくつかにおいて、ｕは、０、１、２、３、４または５であり、ｖは、０、１、２、３、４または５であり、ｔは、１、２、３、４、５または６であり、ｗは、１、２、３、４または５であり、ｐは、１、２、３、４または５であり、ｑは、０、１、２または３であり、Ｒ^ｂは、各出現時、独立に、水素、置換もしくは非置換のＣ_１〜１０アルキル、置換もしくは非置換のＣ_３〜７シクロアルキル−Ｃ_０〜６アルキル、または置換もしくは非置換のアリール−Ｃ_０〜６アルキルである。いくつかの実施形態において、ｕは０であり、ｖは０であり、ｔは１、２、３、４、５または６であり、ｗは１であり、ｐは３であり、ｑは０、１、２または３である。一部の実施形態において、ｖは０であり、ｔは１または２であり、ｗは１であり、ｐは１または２であり、ｑは２または３である。

式Ｉのいくつかの実施形態において、Ｌは構造

を有する。

これらの実施形態のいくつかにおいて、ｕは、０、１、２、３、５または５であり、ｖは、０、１、２、３、４または５であり、ｔは、１、２、３、４、５または６であり、ｒは、１、２、３、４または５であり、ｓは、０、１、２、３、４または５であり、ｑは、０、１、２、３、４または５であり、Ｒ^ｂは、水素、置換もしくは非置換のＣ_１〜１０アルキル、置換もしくは非置換のＣ_３〜７シクロアルキル−Ｃ_０〜６アルキル、または置換もしくは非置換のアリール−Ｃ_０〜６アルキルである。いくつかの実施形態において、ｕは０であり、ｖは０であり、ｔは１、２、３、４、５または６であり、ｒは１または２であり、ｓは３であり、ｑは０、１、２または３である。一部の実施形態において、ｕは０または１であり、ｖは０であり、ｔは１または２であり、ｗは１であり、ｐは１または２であり、ｑは１または２である。

式Ｉのいくつかの実施形態において、Ｌは構造

を有する。

これらの実施形態のいくつかにおいて、ｕは、０、１、２、３、５または５であり、ｖは、０、１、２、３、４または５であり、ｔは、１、２、３、４、５または６であり、ｒは、１、２、３、４または５であり、ｓは、０、１、２、３、４または５であり、ｑは、０、１、２、３、４または５であり、Ｒ^ｂは、水素、置換もしくは非置換のＣ_１〜１０アルキル、置換もしくは非置換のＣ_３〜７シクロアルキル−Ｃ_０〜６アルキル、または置換もしくは非置換のアリール−Ｃ_０〜６アルキルである。いくつかの実施形態において、ｕは０であり、ｖは０であり、ｔは１、２、３、４、５または６であり、ｒは１または２であり、ｓは３であり、ｑは０、１、２または３である。一部の実施形態において、ｕは０または１であり、ｖは０であり、ｔは１、２または３であり、ｒは１であり、ｓは１または２であり、ｑは１または２である。

式Ｉのいくつかの実施形態において、Ｌは構造

を有する。

これらの実施形態のいくつかにおいて、ｕは、０、１、２、３、５または５であり、ｖは、０、１、２、３、４または５であり、ｔは、１、２、３、４、５または６であり、ｒは、１、２、３、４または５であり、ｓは、０、１、２、３、４または５であり、ｑは、０、１、２または３であり、Ｒ^ｂは、水素、置換もしくは非置換のＣ_１〜１０アルキル、置換もしくは非置換のＣ_３〜７シクロアルキル−Ｃ_０〜６アルキル、または置換もしくは非置換のアリール−Ｃ_０〜６アルキルである。いくつかの実施形態において、ｕは０であり、ｖは０であり、ｔは１、２、３、４、５または６であり、ｒは１または２であり、ｓは３であり、ｑは０、１、２または３である。一部の実施形態において、ｕは０または１であり、ｖは０であり、ｔは１、２または３であり、ｒは１であり、ｓは１または２であり、ｑは２または３である。

式Ｉのいくつかの実施形態において、Ｌは構造

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式Ｉのいくつかの実施形態において、Ｌは構造

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式Ｉのいくつかの実施形態において、Ｌは構造

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これらの実施形態のいくつかにおいて、ｕは、０、１、２、３、４または５であり、ｖは、０、１、２、３、４または５であり、ｔは、１、２、３、４、５または６であり、ｗは、１、２、３、４または５であり、ｐは、１、２、３、４または５であり、ｑは、０、１、２または３であり、Ｒ^ｂは、各出現時、独立に、水素、置換もしくは非置換のＣ_１〜１０アルキル、置換もしくは非置換のＣ_３〜７シクロアルキル−Ｃ_０〜６アルキル、または置換もしくは非置換のアリール−Ｃ_０〜６アルキルである。いくつかの実施形態において、ｕは０であり、ｖは０であり、ｔは１、２、３、４、５または６であり、ｗは１であり、ｐは３であり、ｑは０、１、２または３である。一部の実施形態において、ｕは０または１であり、ｖは０であり、ｔは１または２であり、ｗは１であり、ｐは１または２であり、ｑは２または３である。

式Ｉのいくつかの実施形態において、Ｌは構造

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式Ｉのいくつかの実施形態において、Ｌは構造

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式Ｉのいくつかの実施形態において、Ｌは構造

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式Ｉのいくつかの実施形態において、Ｌは構造

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式Ｉのいくつかの実施形態において、Ｌは構造

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式Ｉのいくつかの実施形態において、Ｌは構造

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式Ｉのいくつかの実施形態において、Ｌは構造

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これらの実施形態のいくつかにおいて、ｕは、０、１、２、３、５または５であり、ｖは、０、１、２、３、４または５であり、ｔは、１、２、３、４、５または６であり、ｒは、１、２、３、４または５であり、ｓは、０、１、２、３、４または５であり、ｑは、０、１、２、３、４または５であり、Ｒ^ｂは、各出現時、独立に、水素、置換もしくは非置換のＣ_１〜１０アルキル、置換もしくは非置換のＣ_３〜７シクロアルキル−Ｃ_０〜６アルキル、または置換もしくは非置換のアリール−Ｃ_０〜６アルキルである。いくつかの実施形態において、ｕは０であり、ｖは０であり、ｔは１、２、３、４、５または６であり、ｒは１または２であり、ｓは３であり、ｑは０、１、２または３である。一部の実施形態において、ｕは０または１であり、ｖは０であり、ｔは１、２または３であり、ｒは１であり、ｓは１または２であり、ｑは１または２である。

式Ｉのいくつかの実施形態において、Ｌは構造

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式Ｉのいくつかの実施形態において、Ｌは構造

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これらの実施形態のいくつかにおいて、ｕは、０、１、２、３、５または５であり、ｖは、０、１、２、３、４または５であり、ｔは、１、２、３、４、５または６であり、ｒは、１、２、３、４または５であり、ｓは、０、１、２、３、４または５であり、ｑは、０、１、２または３であり、Ｒ^ｂは、各出現時、独立に、水素、置換もしくは非置換のＣ_１〜１０アルキル、置換もしくは非置換のＣ_３〜７シクロアルキル−Ｃ_０〜６アルキル、または置換もしくは非置換のアリール−Ｃ_０〜６アルキルである。いくつかの実施形態において、ｕは０であり、ｖは０であり、ｔは１、２、３、４、５または６であり、ｒは１または２であり、ｓは３であり、ｑは０、１、２または３である。一部の実施形態において、ｕは０または１であり、ｖは０であり、ｔは１、２または３であり、ｒは１であり、ｓは１または２であり、ｑは２または３である。

式Ｉのいくつかの実施形態において、Ｌは構造

を有する。

これらの実施形態のいくつかにおいて、ｕは、０、１、２、３、４または５であり、ｖは、０、１、２、３、４または５であり、ｔは、１、２、３、４、５または６であり、ｗは、１、２、３、４または５であり、ｐは、１、２、３、４または５であり、ｑは、０、１、２、３、４または５であり、Ｒ^ｂは、各出現時、独立に、水素、置換もしくは非置換のＣ_１〜１０アルキル、置換もしくは非置換のＣ_３〜７シクロアルキル−Ｃ_０〜６アルキル、または置換もしくは非置換のアリール−Ｃ_０〜６アルキルである。いくつかの実施形態において、ｕは０であり、ｖは０であり、ｔは１、２、３、４、５または６であり、ｗは１であり、ｐは３であり、ｑは０、１、２または３である。さらに一部の実施形態において、ｕは０または１であり、ｖは０であり、ｔは１または２であり、ｗは１であり、ｐは１または２であり、ｑは１または２である。

式Ｉのいくつかの実施形態において、Ｌは構造

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式Ｉのいくつかの実施形態において、Ｌは構造

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これらの実施形態のいくつかにおいて、ｕは、０、１、２、３、４または５であり、ｖは、０、１、２、３、４または５であり、ｔは、１、２、３、４、５または６であり、ｗは、１、２、３、４または５であり、ｐは、１、２、３、４または５であり、ｑは、０、１、２、３、４または５であり、Ｒ^ｂは、各出現時、独立に、水素、置換もしくは非置換のＣ_１〜１０アルキル、置換もしくは非置換のＣ_３〜７シクロアルキル−Ｃ_０〜６アルキル、または置換もしくは非置換のアリール−Ｃ_０〜６アルキルである。いくつかの実施形態において、ｕは０であり、ｖは０であり、ｔは１、２、３、４、５または６であり、ｗは１であり、ｐは３であり、ｑは０、１、２または３である。さらに他の実施形態において、ｕは０または１であり、ｖは０であり、ｔは１または２であり、ｗは１であり、ｐは１または２であり、ｑは１または２である。

式Ｉのいくつかの実施形態において、Ｌは構造

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式Ｉのいくつかの実施形態において、Ｌは構造

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式Ｉのいくつかの実施形態において、Ｌは構造

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式Ｉのいくつかの実施形態において、Ｌは構造

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式Ｉのいくつかの実施形態において、Ｌは構造

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本明細書で使用される場合、「ＡＡ_１−ＡＡ_２〜ＡＡ_ｎ」はＡＡ標的化剤を指し、ここで、「ＡＡ_１」は、Ｎ末端から計測してＡＡ標的化剤配列中の１番目のアミノ酸であり、「ＡＡ_２」は、Ｎ末端から計測してＡＡ標的化剤配列中の２番目のアミノ酸であり、「ＡＡ_ｎ」は、Ｎ末端から計測してＡＡ標的化剤配列中のｎ番目のアミノ酸である。

式Ｉに従ういくつかの実施形態は、構造

を有する。

これらの実施形態のいくつかにおいて、ｖは、１、２、３、４または５であり、ｗは、１、２、３、４または５であり、ｑは、０、１、２、３、４または５であり、Ｒ^ｂは、水素、置換もしくは非置換のＣ_１〜１０アルキル、置換もしくは非置換のＣ_３〜７シクロアルキル−Ｃ_０〜６アルキル、または置換もしくは非置換のアリール−Ｃ_０〜６アルキルである。いくつかの実施形態において、ｖは、１、２または３であり、ｗは、１、２または３であり、ｑは、０、１、２または３である。一部の実施形態において、ｖは１または２であり、ｗは１または２であり、ｑは１または２である。

式Ｉに従ういくつかの実施形態は、構造

を有する。

これらの実施形態のいくつかにおいて、ｖは、１、２、３、４または５であり、ｗは、１、２、３、４または５であり、ｑは、０、１、２または３であり、Ｒ^ｂは、水素、置換もしくは非置換のＣ_１〜１０アルキル、置換もしくは非置換のＣ_３〜７シクロアルキル−Ｃ_０〜６アルキル、または置換もしくは非置換のアリール−Ｃ_０〜６アルキルである。いくつかの実施形態において、ｖは、１、２または３であり、ｗは、１、２または３であり、ｑは、０、１、２、３である。一部の実施形態において、ｖは１または２であり、ｗは１または２であり、ｑは２または３である。

式Ｉに従ういくつかの実施形態は、構造

を有する。

これらの実施形態のいくつかにおいて、ｖは、１、２、３、４または５であり、ｗは、１、２、３、４または５であり、ｑは、０、１、２、３、４または５であり、Ｒ^ｂは、水素、置換もしくは非置換のＣ_１〜１０アルキル、置換もしくは非置換のＣ_３〜７シクロアルキル−Ｃ_０〜６アルキル、または置換もしくは非置換のアリール−Ｃ_０〜６アルキルである。いくつかの実施形態において、ｖは、１、２または３であり、ｗは、１、２または３であり、ｑは、０、１、２、３である。一部の実施形態において、ｖは１または２であり、ｗは１または２であり、ｑは２または３である。

式Ｉに従ういくつかの実施形態は、構造

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式Ｉに従ういくつかの実施形態は、構造

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式Ｉに従ういくつかの実施形態は、構造

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これらの実施形態のいくつかにおいて、ｖは、０、１、２、３、４または５であり、ｔは、１、２、３、４、５または６であり、ｗは、１、２、３、４または５であり、ｐは、１、２、３、４または５であり、ｑは、０、１、２または３であり、Ｒ^ｂは、各出現時、独立に、水素、置換もしくは非置換のＣ_１〜１０アルキル、置換もしくは非置換のＣ_３〜７シクロアルキル−Ｃ_０〜６アルキル、または置換もしくは非置換のアリール−Ｃ_０〜６アルキルである。いくつかの実施形態において、ｖは、０、１、２、３、４または５であり、ｔは、１、２、３、４、５または６であり、ｗは、１、２、３、４または５であり、ｐは、１、２、３、４または５であり、ｑは、０、１、２または３である。いくつかの実施形態において、ｖは０であり、ｔは１、２、３、４、５または６であり、ｗは１であり、ｐは３であり、一部の実施形態において、ｖは０であり、ｔは１または２であり、ｗは１であり、ｐは１または２であり、ｑは２または３である。

式Ｉに従ういくつかの実施形態は、構造

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これらの実施形態のいくつかにおいて、ｖは、０、１、２、３、４または５であり、ｔは、１、２、３、４、５または６であり、ｒは、１、２、３、４または５であり、ｓは、０、１、２、３、４または５であり、ｑは、０、１、２、３、４または５であり、Ｒ^ｂは、各出現時、独立に、水素、置換もしくは非置換のＣ_１〜１０アルキル、置換もしくは非置換のＣ_３〜７シクロアルキル−Ｃ_０〜６アルキル、または置換もしくは非置換のアリール−Ｃ_０〜６アルキルである。いくつかの実施形態において、ｖは０であり、ｔは１、２、３、４、５または６であり、ｒは１または２であり、ｓは３であり、ｑは０、１、２または３である。一部の実施形態において、ｖは０であり、ｔは１、２または３であり、ｒは１であり、ｓは１または２であり、ｑは１または２である。

式Ｉに従ういくつかの実施形態は、構造

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式Ｉに従ういくつかの実施形態は、構造

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これらの実施形態のいくつかにおいて、ｖは、０、１、２、３、４または５であり、ｔは、１、２、３、４、５または６であり、ｒは、１、２、３、４または５であり、ｓは、０、１、２、３、４または５であり、ｑは、０、１、２または３であり、Ｒ^ｂは、各出現時、独立に、水素、置換もしくは非置換のＣ_１〜１０アルキル、置換もしくは非置換のＣ_３〜７シクロアルキル−Ｃ_０〜６アルキル、または置換もしくは非置換のアリール−Ｃ_０〜６アルキルである。いくつかの実施形態において、ｖは０であり、ｔは１、２、３、４、５または６であり、ｒは１または２であり、ｓは３であり、ｑは０、１、２または３である。一部の実施形態において、ｖは０であり、ｔは１、２または３であり、ｒは１であり、ｓは１または２であり、ｑは２または３である。

式Ｉに従ういくつかの実施形態は、構造

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は、本明細書で使用される場合、ＡＡ標的化剤を指し、ここで、「ＡＡ_１」は、Ｎ末端から計測してＡＡ標的化剤配列中の１番目のアミノ酸であり、「ＡＡ_２」は、Ｎ末端から計測してＡＡ標的化剤配列中の２番目のアミノ酸であり、「ＡＡ_ｎ」は、Ｎ末端から計測してＡＡ標的化剤配列中のｎ番目のアミノ酸である。標的化剤は、Ｎ末端から計測して任意位置ｍ＋１にＬｙｓ残基をさらに含む。ＡＡ標的化剤の本体中でＬｙｓ側鎖と連結することに加えて、ＡＡ標的化剤のＮ末端またはＣ末端上でＬｙｓ側鎖と連結することも可能であることが理解されるであろう。

式Ｉに従ういくつかの実施形態は、構造

を有する。

これらの実施形態のいくつかにおいて、ｖは、１、２、３、４または５であり、ｗは、１、２、３、４、５または６であり、ｑは、１、２、３、４または５であり、Ｒ_ｂは、各出現時、独立に、水素、置換もしくは非置換のＣ_１〜１０アルキル、置換もしくは非置換のＣ_３〜７シクロアルキル−Ｃ_０〜６アルキル、または置換もしくは非置換のアリール−Ｃ_０〜６アルキルである。いくつかの実施形態において、ｖは、１、２または３であり、ｗは、１、２または３であり、ｑは、１、２または３である。一部の実施形態において、ｖは１または２であり、ｗは１または２であり、ｑは２または３である。

式Ｉに従ういくつかの実施形態は、構造

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免疫適格個体へのＡＡ標的化化合物の投与は、複合体に対する抗体の生成をもたらし得る。そのような抗体は、抗体イディオタイプを含む可変領域、および標的化剤または標的化剤を抗体と複合するために使用される任意のリンカーに方向付けることができる。ＡＡ標的化化合物の免疫原性を低減することは、長鎖ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）ベースのスペーサー等をＡＡ標的化化合物に結合させる等、当該技術分野において既知の方法によって遂行することができる。長鎖ＰＥＧおよび他のポリマーは、外来エピトープを表示する治療用タンパク質の免疫原性低減をもたらす、外来エピトープを遮断するその能力で知られている（Ｎ．Ｖ．Ｋａｔｒｅ、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、１４４、２０９〜２１３（１９９０）；Ｇ．Ｅ．Ｆｒａｎｃｉｓら、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｈｅｍａｔｏｌ．、６８、１〜１８（１９９８）。あるいは、または加えて、抗体−ＡＡ標的化剤複合体の投与を受けた個体に、シクロスポリンＡ、抗ＣＤ３抗体等の免疫抑制薬を投与してよい。

一実施形態において、ＡＡ標的化化合物は式ＩＩによって示され、その立体異性体、互変異性体、溶媒和物、プロドラッグ、および薬学的に許容できる塩を含む。
抗体−Ｌ’−［ＡＡ標的化剤］（ＩＩ）

式ＩＩの化合物において、［ＡＡ標的化剤］は式Ｉで定義された通りである。Ｌ’は、抗体を標的化剤に連結し、式−Ｘ−Ｙ−Ｚ’−を有するリンカー部分である。式ＩＩの化合物において、ＸおよびＹは式Ｉで定義された通りであり、抗体は、本明細書において定義されている通りの抗体である。図１０および１１は、それぞれ、図８および９に例示されているＺ部分への、抗体中の結合性部位における、反応性の求核性側鎖の付加機構を例示する。

いくつかの実施形態において、抗体はアルドラーゼ触媒抗体であり、Ｚ’−抗体は構造

を有し、式中、ＨＮ−抗体は、アミノ基を担持する抗体中の結合性部位における任意側鎖を指す。

式ＩＩを有する化合物において、Ｚ’は、共有結合と抗体が結合している０〜２０個の炭素原子とを含む結合部分である。リンカーが反応基としてジケトン部分を有し、抗体中の結合性部位においてリシン残基の側鎖アミノ基との連結が発生する場合について、これを以下に示す。抗体を、指示されている各結合性部位について、反応性アミノ酸側鎖を持つ二価として図式的に示す。

以下に示す別の実施形態は、リンカーが反応基としてβラクタム部分を有し、抗体中の結合性部位においてリシン残基の側鎖アミノ基との連結が発生する場合のものである。抗体を、指示されている各結合性部位について、反応性アミノ酸側鎖を持つ二価として図式的に示す。

式ＩＩに従ういくつかの実施形態は、構造

を有する。

これらの実施形態のいくつかにおいて、ｖは、０、１、２、３、４または５であり、ｔは、１、２、３、４、５または６であり、ｗは、１、２、３、４または５であり、ｐは、１、２、３、４または５であり、ｑは、０、１、２、３、４または５であり、Ｒ^ｂは、各出現時、独立に、水素、置換もしくは非置換のＣ_１〜１０アルキル、置換もしくは非置換のＣ_３〜７シクロアルキル−Ｃ_０〜６アルキル、または置換もしくは非置換のアリール−Ｃ_０〜６アルキルである。いくつかの実施形態において、ｖは０であり、ｔは１、２、３、４、５または６であり、ｗは１であり、ｐは３であり、ｑは０、１、２または３である。一部の実施形態において、ｖは０であり、ｔは１または２であり、ｗは１であり、ｐは１または２であり、ｑは２または３である。

式ＩＩに従ういくつかの実施形態は、構造

を有する。

式ＩＩに従ういくつかの実施形態は、構造

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これらの実施形態のいくつかにおいて、ｖは、０、１、２、３、４または５であり、ｔは、１、２、３、４、５または６であり、ｗは、１、２、３、４または５であり、ｐは、１、２、３、４または５であり、Ｒ^ｂは、各出現時、独立に、水素、置換もしくは非置換のＣ_１〜１０アルキル、置換もしくは非置換のＣ_３〜７シクロアルキル−Ｃ_０〜６アルキル、または置換もしくは非置換のアリール−Ｃ_０〜６アルキルである。いくつかの実施形態において、ｖは０であり、ｔは１、２、３、４、５または６であり、ｗは１であり、ｐは３である。一部の実施形態において、ｖは０であり、ｔは１または２であり、ｗは１であり、ｐは１または２である。

式ＩＩに従ういくつかの実施形態は、構造

を有する。

これらの実施形態のいくつかにおいて、ｖは、１、２、３、４または５であり、ｗは、１、２、３、４または５であり、ｑは、０、１、２、３、４または５であり、Ｒ^ｂは、水素、置換もしくは非置換のＣ_１〜１０アルキル、置換もしくは非置換のＣ_３〜７シクロアルキル−Ｃ_０〜６アルキル、または置換もしくは非置換のアリール−Ｃ_０〜６アルキルである。いくつかの実施形態において、ｖは１、２または３であり、ｗは１、２または３であり、ｑは０、１、２、３である。一部の実施形態において、ｖは１または２であり、ｗは１または２であり、ｑは１または２である。

式ＩＩに従ういくつかの実施形態は、構造

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これらの実施形態のいくつかにおいて、ｖは、１、２、３、４または５であり、ｗは、１、２、３、４または５であり、ｑは、０、１、２または３であり、Ｒ^ｂは、水素、置換もしくは非置換のＣ_１〜１０アルキル、置換もしくは非置換のＣ_３〜７シクロアルキル−Ｃ_０〜６アルキル、または置換もしくは非置換のアリール−Ｃ_０〜６アルキルである。いくつかの実施形態において、ｖは１、２または３であり、ｗは１、２または３であり、ｑは０、１、２、３である。一部の実施形態において、ｖは１または２であり、ｗは１または２であり、ｑは２または３である。

式ＩＩに従ういくつかの実施形態は、構造

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これらの実施形態のいくつかにおいて、ｖは、１、２、３、４または５であり、ｗは、１、２、３、４または５であり、Ｒ^ｂは、水素、置換もしくは非置換のＣ_１〜１０アルキル、置換もしくは非置換のＣ_３〜７シクロアルキル−Ｃ_０〜６アルキル、または置換もしくは非置換のアリール−Ｃ_０〜６アルキルである。いくつかの実施形態において、ｖは１、２または３であり、ｗは１、２または３である。一部の実施形態において、ｖは１または２であり、ｗは１または２である。

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これらの実施形態のいくつかにおいて、ｖは、０、１、２、３、４または５であり、ｔは、１、２、３、４、５または６であり、ｒは、１、２、３、４または５であり、ｓは、０、１、２、３、４または５であり、Ｒ^ｂは、各出現時、独立に、水素、置換もしくは非置換のＣ_１〜１０アルキル、置換もしくは非置換のＣ_３〜７シクロアルキル−Ｃ_０〜６アルキル、または置換もしくは非置換のアリール−Ｃ_０〜６アルキルである。いくつかの実施形態において、ｖは０であり、ｔは１、２、３、４、５または６であり、ｒは１または２であり、ｓは３である。一部の実施形態において、ｖは０であり、ｔは１、２または３であり、ｒは１であり、ｓは１または２である。

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式ＩＩに従ういくつかの実施形態は、構造

を有する。

これらの実施形態のいくつかにおいて、ｖは、１、２、３、４または５であり、ｗは、１、２、３、４、５または６であり、ｑは、１、２、３、４または５であり、Ｒ_ｂは、各出現時、独立に、水素、置換もしくは非置換のＣ_１〜１０アルキル、置換もしくは非置換のＣ_３〜７シクロアルキル−Ｃ_０〜６アルキル、または置換もしくは非置換のアリール−Ｃ_０〜６アルキルである。いくつかの実施形態において、ｖは１、２または３であり、ｗは１、２または３であり、ｑは１、２または３である。一部の実施形態において、ｖは１または２であり、ｗは１または２であり、ｑは２または３である。

式ＩＩに従ういくつかの実施形態は、構造

を有する。

これらの実施形態のいくつかにおいて、ｖは、１、２、３、４または５であり、ｗは、１、２、３、４、５であり、Ｒ_ｂは、各出現時、独立に、水素、置換もしくは非置換のＣ_１〜１０アルキル、置換もしくは非置換のＣ_３〜７シクロアルキル−Ｃ_０〜６アルキル、または置換もしくは非置換のアリール−Ｃ_０〜６アルキルである。いくつかの実施形態において、ｖは１、２または３であり、ｗは１、２または３である。一部の実施形態において、ｖは１または２であり、ｗは１または２である。

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あるいは、リンカーは、反応基としてアミンまたはヒドラジドを有することができ、抗体は、ジケトン部分を有するように操作することができる。非天然ジケトン含有アミノ酸は、当技術分野で周知の技法を使用して抗体中の結合性部位に容易に組み込むことができ、非天然アミノ酸を含有するタンパク質は、酵母および細菌中で産生された。例えば、Ｊ．Ｗ．Ｃｈｉｎら、Ｓｃｉｅｎｃｅ３０１：９６４〜９６６（２００３）；Ｌ．Ｗａｎｇら、Ｓｃｉｅｎｃｅ２９２：４９８〜５００（２００１）；Ｊ．Ｗ．Ｃｈｉｎら、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１２４：９０２６〜９０２７（２００２）；Ｌ．Ｗａｎｇら、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１２４：１８３６〜１８３７（２００２）；Ｊ．Ｗ．ＣｈｉｎおよびＰ．Ｇ．Ｓｃｈｕｌｔｚ、Ｃｈｅｍｂｉｏｃｈｅｍ．３：１１３５〜１１３７（２００２）；Ｊ．Ｗ．Ｃｈｉｎら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．９９：１１０２０〜１１０２４（２００２）；Ｌ．ＷａｎｇおよびＰ．Ｇ．Ｓｃｈｕｌｔｚ、Ｃｈｅｍ．Ｃｏｍｍｕｎ．（１）：１〜１１（２００２）；Ｚ．Ｚｈａｎｇら、Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．Ｅｎｇｌ．４１：２８４０〜２８４２（２００２）；Ｌ．Ｗａｎｇ、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．１００：５６〜６１（２００３）を参照されたい。したがって、例えば、ジケトン部分を含有する非天然アミノ酸を酵母サッカロミセスセレビシアエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）中に挿入するために、タンパク質生合成機構に、ユニークコドン、ｔＲＮＡ、およびアミノアシル−ｔＲＮＡ合成酵素（ａａＲＳ）を含めた新規成分を添加する必要がある。例えば、真核生物についてＪ．Ｗ．Ｃｈｉｎら、Ｓｃｉｅｎｃｅ３０１：９６４〜９６６（２００３）に報告されているように、大腸菌由来のアンバーサプレッサーチロシル−ｔＲＮＡ合成酵素（ＴｙｒＲＳ）−ｔＲＮＡ_ＣＵＡ対を使用することができる。アンバーコドンは、対象とする非天然アミノ酸をコードするのに使用される。次いで、突然変異体ＴｙｒＲＳおよびｔＲＮＡ_ＣＵＡのライブラリーを作製し、ＴｙｒＲＳがｔＲＮＡ_ＣＵＡに対象とする非天然アミノ酸、例えば、ジケトン含有アミノ酸をチャージするａａＲＳ−ｔＲＮＡ_ＣＵＡ対について選択することができる。引き続いて、ジケトン含有アミノ酸を組み込んでいる抗体は、１つまたは複数の抗体中の結合性部位でアンバーコドンを含有している遺伝子をクローン化し、発現させることによって生成することができる。

式ＩＩの化合物のいくつかの実施形態では、抗体は全長抗体である。他の実施形態では、抗体は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’Ｆ（ａｂ’）_２、Ｆｖ、Ｖ_Ｈ、Ｖ_Ｌ、またはｓｃＦｖである。ある特定の実施形態では、抗体は、ヒト抗体、ヒト化抗体、またはキメラヒト抗体である。ある特定の実施形態では、抗体は触媒抗体である。一実施形態では、抗体は、ヒトＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、またはＩｇＥ抗体由来の定常領域を含むマウス３８ｃ２のヒト化型である。別の実施形態では、抗体は、マウス３８ｃ２由来の可変領域とヒトＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、またはＩｇＥ抗体由来の定常領域を含むキメラ抗体である。

いくつかの場合では、２つ以上のＡＡ標的化剤は、１個の全長二価抗体に連結することができる。これを式ＩＩＩとして以下に示す：
抗体［−Ｌ’−［ＡＡ標的化剤］］_２（ＩＩＩ）

その立体異性体、互変異性体、溶媒和物、プロドラッグ、および薬学的に許容できる塩も提供される。

式ＩＩＩの化合物において、［ＡＡ標的化剤］、Ｌ’および抗体はそれぞれ、式ＩＩに定義されている。

式ＩＩの化合物などの標的化化合物も、本明細書に記載されるような標的化剤−リンカー化合物を、多価抗体中の結合性部位に共有結合的に連結することによって容易に合成することができる。例えば、リンカーがジケトン反応性部分を含む、ＡＡ標的化剤リンカーコンジュゲートは、０．５当量の、ｈ３８Ｃ２ＩｇＧ１などのアルドラーゼ抗体でインキュベートすることによって、ＡＡ標的化化合物を生成することができる。あるいは、式ＩＩＩの化合物などのＡＡ標的化化合物は、本明細書に記載されるようなＡＡ標的化剤−リンカー化合物を、二価抗体の各結合性部位に共有結合的に連結することによって生成することができる。

ＡＡ標的化化合物の使用方法
本発明の一態様では、インビボでＡｎｇ−２活性を調節する方法であって、対象に、有効量の本明細書に記載されるようなＡＡ標的化化合物を投与するステップを含む方法を提供する。対象中の異常血管形成または血管形成媒介状態を治療するための方法もさらに提供する。そのような方法は、治療有効量の本明細書に記載されるようなＡＡ標的化化合物を対象に投与するステップを含む。本明細書で使用される場合、血管形成媒介状態は、異常血管形成活性によって引き起こされる状態、または血管形成活性を調節する化合物が治療用途を有する状態である。治療することができる疾患および状態として、癌、関節炎、乾癬、感染もしくは外科的介入に関連する眼の血管形成、黄斑変性症または糖尿病性網膜症が挙げられる。特に、癌を治療する方法として、乳房、大腸、直腸、肺、中咽頭、下咽頭、食道、胃、膵臓、肝臓、胆のうおよび胆管、小腸、尿路、女性生殖管、男性、生殖管、内分泌腺、ならびに皮膚の癌；血管腫；黒色腫；肉腫；脳、神経、眼、および髄膜の腫瘍；白血病；またはリンパ腫が挙げられる。

医薬組成物および投与方法
本発明の別の態様では、ＡＡ標的化化合物の医薬組成物を提供する。ＡＡ標的化化合物は、薬学的に許容できる担体と混合することによって、単独または１つもしくは複数の他の療法モダリティーと組み合わせて、細胞または対象に投与するための医薬組成物を形成することができる。

医薬組成物は、意図された投与経路に適合するように一般に製剤化される。当業者は、医薬媒体の選択および組成物の適切な調製は、意図された使用と投与形態に依存することがわかるであろう。投与経路の例として、非経口（例えば、静脈内、筋肉内、髄内、皮内、皮下）、経口（例えば、吸入、経口摂取）、鼻腔内、経皮（例えば、局所的）、経粘膜、および直腸投与が挙げられる。ＡＡ標的化化合物の投与経路として、くも膜下腔内、直接脳室内および腹腔内送達も挙げることができる。ＡＡ標的化化合物は、製剤の直接注射、または注入基質、例えば正常食塩水、Ｄ５Ｗ、乳酸リンゲル液もしくは他の一般に使用される注入媒質などとの標的化ＡＡ化合物製剤の混合物の注入による、任意の非経口経路を通じて投与することができる。

ＡＡ標的化化合物は、当技術分野で周知の技法を使用して投与することができる。薬剤は製剤化され、全身的に投与されることが好ましい。製剤化および投与の技法は、「Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ」、１８版、１９９０、ＭａｃｋＰｕｂｌｉｓｈｉｎｇＣｏ．、Ｅａｓｔｏｎ、ＰＡに見出すことができる。注射用には、ＡＡ標的化化合物は、水溶液、エマルジョン、または懸濁液中に製剤化することができる。ＡＡ標的化化合物は、生理的に適合した緩衝液、例えば、クエン酸、酢酸、ヒスチジン、またはリン酸などを含有する水溶液中に製剤化されることが好ましい。必要な場合、そのような製剤は、様々な等張化剤、可溶化剤および／または安定化剤（例えば、塩化ナトリウムなどの塩、またはスクロース、マンニトール、およびトレハロースなどの糖、またはアルブミンなどのタンパク質、またはグリシンおよびヒスチジンなどのアミノ酸、またはポリソルベート（ツイーン）などの界面活性物質、またはエタノール、ポリエチレングリコールおよびプロピレングリコールなどの共溶媒）も含有することができる。

医薬組成物は、例えば、ｐＨ、浸透圧モル濃度、粘性、透明度、色、等張性、匂い、無菌性、安定性、溶解または放出の速度、組成物の吸着または浸透を修正、維持、または保存するための製剤材料を含有することができる。適当な製剤材料として、それだけに限らないが、アミノ酸（グリシン、グルタミン、アスパラギン、アルギニンもしくはリシンなど）、抗菌剤；抗酸化剤（アスコルビン酸、亜硫酸ナトリウムもしくは亜硫酸水素ナトリウムなど）；緩衝液（ホウ酸、重炭酸、Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、クエン酸、リン酸、他の有機酸、キレート化剤［エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）など］など）；溶媒（グリセリン、プロピレングリコールもしくはポリエチレングリコールなど）；糖アルコール（マンニトールもしくはソルビトールなど）；懸濁剤；界面活性物質もしくは湿潤剤（プルロニック、ＰＥＧ、ソルビタンエステル、ポリソルベート２０、ポリソルベート８０などのポリソルベート、トリトン、トロメタミン、レシチン、コレステロール、チロキサパルなど）；安定性増強剤（スクロースもしくはソルビトール）；張性増強剤（ハロゲン化アルカリ金属（塩化ナトリウムもしくは塩化カルシウムが好ましい）、マンニトールソルビトールなど）；送達ビヒクル；希釈剤；賦形剤および／または補助薬が挙げられる。（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ、１８版、Ａ．Ｒ．Ｇｅｎｎａｒｏ編、ＭａｃｋＰｕｂｌｉｓｈｉｎｇＣｏｍｐａｎｙ、１９９０）。

非経口投与が企図される場合、治療組成物は、薬学的に許容できるビヒクル中にＡＡ標的化化合物を含む、発熱物質がない、非経口的に許容できる水溶液の形態とすることができる。非経口注射用の１つのビヒクルは、ＡＡ標的化化合物が、滅菌等張液として製剤化されている、滅菌蒸留水である。さらに別の製剤は、製品の制御放出または徐放を提供する作用剤、例えば、注射用マイクロスフィア、生分解性粒子、ポリマー化合物（ポリ乳酸、ポリグリコール酸）、ビーズ、またはリポソームなどともにＡＡ標的化化合物を製剤化することを伴うことができ、次いでこれは、デポー注射によって送達することができる。ヒアルロン酸も使用することができ、これは、循環の期間の持続を促進する効果を有することができる。所望分子を導入するための他の適当な手段には、移植可能な薬物送達デバイスが含まれる。

別の態様では、非経口投与に適した医薬製剤は、水溶液、好ましくは、生理的に適合した緩衝液、例えば、ハンクス液、リンゲル液、または生理的に緩衝された食塩水中などで製剤化することができる。水性注射懸濁液は、懸濁液の粘性を増大させる物質、例えば、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、ソルビトール、またはデキストランなどを含有することができる。適当な親油性溶媒またはビヒクルとしてゴマ油などの脂肪油、またはオレイン酸エチルなどの合成脂肪酸エステル、トリグリセリド、またはリポソームが挙げられる。非脂質ポリカチオン性アミノポリマーも送達のために使用することができる。場合により、懸濁液も適当な安定剤または作用剤を含有することによって、化合物の溶解度を増大させ、高度に濃縮された溶液の調製を可能にすることができる。

インビボ投与のために使用される医薬組成物は、典型的には滅菌されていなければならない。これは、滅菌ろ過膜を通してろ過することによって達成することができる。組成物が凍結乾燥される場合、凍結乾燥および再構成の前または後に、この方法を使用して滅菌を行うことができる。非経口投与用の組成物は、凍結乾燥形態で、または溶液中に貯蔵することができる。さらに、非経口組成物は、滅菌アクセスポートを有する容器、例えば、皮下注射針によって穿刺可能なストッパーを有する静脈内用溶液バッグまたはバイアル中に一般に入れられる。

医薬組成物が製剤化された場合、溶液、懸濁液、ゲル、エマルジョン、固体、または脱水粉末もしくは凍結乾燥粉末として滅菌バイアル中に貯蔵することができる。そのような製剤は、すぐ使用できる形態、または投与前に再構成を必要とする形態（例えば、凍結乾燥された）で貯蔵することができる。

一実施形態は、単回用量投与単位をもたらすためのキットを対象とする。これらキットはそれぞれ、ＡＡ標的化化合物を有する第１の容器と水性製剤を有する第２の容器の両方を含有する。単一およびマルチチャンバープレフィルドシリンジを含有するキットも、本発明の範囲内に含められる。

障害に対する血管形成要素を伴った障害を有する、ヒトを含めた哺乳動物を治療することにおいて、治療有効量のＡＡ標的化化合物または薬学的に許容できる誘導体が投与される。投薬の頻度は、使用される製剤中のＡＡ標的化化合物の薬物動態学的パラメータに依存する。典型的には、この組成物は、所望の効果を達成する投与量に到達するまで投与される。したがって、この組成物は、単回投与、または時間をかけた多回投与（同じもしくは異なる濃度／投与量で）、または連続注入として投与することができる。組成物の投与経路および頻度ならびに投与量は、個体によって変動する場合があり、標準的な技法を使用して容易に確立することができる。適切な投与量のさらなる洗練は、日常的に行われる。適切な投与量は、適切な用量−応答データを使用して、当業者によって明らかにすることができる。

適切な投与量および治療レジメンにより、治療的および／または予防的利点を提供するのに十分な量で（１つまたは複数の）活性化合物が提供される。そのような応答は、治療されない患者と比較した場合に、治療される患者において改善された臨床成績（例えば、標的範囲における血管数の低減、腫瘍サイズまたは容積の減少）を確立することによってモニターされる。典型的には、適切な用量は、本明細書に記載されるように投与されるとき、抗血管形成応答を促進することができ、かつ／または基礎レベルもしくは未治療レベルより少なくとも１０〜５０％超である化合物の量である。

いくつかの実施形態では、本発明の組成物についての最も有効な投与形態および投与量レジメンは、疾患の重症度と過程、患者の健康と治療に対する応答、および治療する医師の判断に依存する。したがって、本発明の組成物の投与量は、個々の患者に対して滴定されるべきである。化合物の有効用量は、１日当たり、１キログラム当たり約０．１μｇから約４０ｍｇである。ＡＡ標的化化合物は、体重１ｋｇ当たり０．１ｍｇから体重１ｋｇ当たり約１５ｍｇの一日の静脈内注入として投与することができる。したがって、一実施形態では、体重１ｋｇ当たり約０．５ｍｇの用量を提供する。別の実施形態では、体重１ｋｇ当たり約０．７５ｍｇの用量を提供する。別の実施形態では、体重１ｋｇ当たり約１．０ｍｇの用量を提供する。別の実施形態では、体重１ｋｇ当たり約２．５ｍｇの用量を提供する。別の実施形態では、体重１ｋｇ当たり約５ｍｇの用量を提供する。別の実施形態では、体重１ｋｇ当たり約１０．０ｍｇの用量を提供する。別の実施形態では、体重１ｋｇ当たり約１５．０ｍｇの用量を提供する。ＡＡ標的化化合物または薬学的に許容できる誘導体の用量は、１日当たり約１回から１週間当たり２回、または、毎週約１回から１カ月当たり１回の間隔で投与されるべきである。一実施形態では、約．００２ｍｇ／ｍｌから３０ｍｇ／ｍｌの、ＡＡ標的化化合物または薬学的に許容できるその誘導体のピーク血漿中濃度を達成する用量を投与する。これは、投与される成分の適切な製剤中の溶液（化学分野の当業者に既知の任意の適当な製剤溶液を使用することができる）を滅菌注射することによって達成することができる。望ましい血中レベルは、立証された分析的方法によって測定された血漿中レベルにより確認されるように、ＡＡ標的化化合物の連続注入によって維持することができる。

個体にＡＡ標的化化合物を投与するための一方法は、個体にＡＡ標的化剤−リンカーコンジュゲートを投与するステップと、これをインビボで適切な抗体中の結合性部位との共有結合化合物を形成させるステップとを含む。インビボで形成するＡＡ標的化化合物の抗体部分は、標的化剤−リンカーコンジュゲートを投与する前、投与すると同時、または投与した後に個体に投与することができる。既に考察したように、ＡＡ標的化剤は、リンカー／反応性部分を含むことができ、または抗体中の結合性部位は、適当に修飾されることによって、標的化剤に共有結合的に連結することができる。あるいは、またはさらに、抗体は、適切な免疫源で免疫化した後に、個体の血液循環中に存在することができる。例えば、触媒抗体は、担体タンパク質にコンジュゲートした基質の反応性中間体で免疫化することによって生成することができる。Ｒ．Ａ．ＬｅｒｎｅｒおよびＣ．Ｆ．Ｂａｒｂａｓ３世、ＡｃｔａＣｈｅｍ．Ｓｃａｎｄ．５０：６７２〜６７８（１９９６）を参照されたい。特に、アルドラーゼ触媒抗体は、Ｐ．Ｗｉｒｓｃｈｉｎｇら、Ｓｃｉｅｎｃｅ２７０：１７７５〜１７８２（１９９５）（Ｊ．Ｗａｇｎｅｒら、Ｓｃｉｅｎｃｅ２７０：１７９７〜１８００（１９９５）を論評して）に記載されているように、ジケトン部分に連結したキーホールリンペットヘモシニアンを投与することによって生成することができる。

本発明は、組織および細胞中のＡｎｇ−２または抗血管形成標的（すなわち、ＡＡ−標的化剤受容体）を視覚化または局在化する方法も提供する。一実施形態では、ＡＡ−標的化剤受容体の存在について、生検された組織を検査することができる。別の実施形態では、対象中の血管新生は、検出可能標識を含むＡＡ標的化剤または化合物をその対象に投与することによって映像化することができる。本明細書で使用される場合、用語「検出可能標識」は、インビボで投与し、引き続いて検出することができる任意の分子を指す。例示的な検出可能標識には、放射標識および蛍光分子が含まれる。例示的な放射性核種として、インジウム−１１１、テクネチウム−９９、炭素−１１、および炭素−１３が挙げられる。蛍光分子として、限定することなく、フルオレセイン、アロフィコシアニン、フィコエリトリン、ローダミン、およびテキサスレッドが挙げられる。

組合せ療法
腫瘍内の脈管構造は、活性な血管形成を一般に起こし、新規血管の頻繁な形成をもたらすことによって成長する腫瘍を補助している。そのような血管形成性血管は、血管形成性脈管構造が、∀_ｖ∃_３インテグリン（Ｂｒｏｏｋｓ、Ｃｅｌｌ７９：１１５７〜１１６４（１９９４）；ＷＯ９５／１４７１４、国際出願日１９９４年１１月２２日）および血管形成成長因子のための受容体（ＭｕｓｔｏｎｅｎおよびＡｌｉｔａｌｏ、Ｊ．ＣｅｌｌＢｉｏｌ．１２９：８９５〜８９８（１９９５）；Ｌａｐｐｉ、Ｓｅｍｉｎ．ＣａｎｃｅｒＢｉｏｌ．６：２７９〜２８８（１９９５））を含めてユニークな内皮細胞表面マーカーを発現するという点において、成熟した脈管構造と区別可能である。

本発明は、１つまたは複数の腫瘍治療薬と組み合わせた、１つまたは複数のＡＡ標的化剤の投与も含み、それぞれは、その治療薬に適したレジメンに従って投与される。組合せ療法の成分は、同時的、または非同時的に投与することができる。本明細書で使用される場合、用語「同時的に投与される」および「同時的投与」は、１つまたは複数のＡＡ標的化合物と１つの他の腫瘍治療薬の実質的に同時の投与を包含する。

本明細書で使用される場合、「非同時的」投与は、部分的に重複していてもいなくても、任意の順序で異なる時間に１つまたは複数のＡＡ標的化化合物を投与することを包含する。これには、それだけに限らないが、組合せの成分での経時的治療（前治療、後治療、または重複治療など）、ならびに薬物が交互にされている、または１つの成分が長期に投与され、（１つまたは複数の）他の成分が断続的に投与されるレジメンが含まれる。成分は、同じまたは別々の組成物で、同じまたは異なる投与経路で投与することができる。

ＡＡ標的化化合物と組み合わせて使用することができる適当な腫瘍治療薬および組合せを表４〜６に列挙する。

本発明の典型的な実施形態を例示するものであり、決して特許請求の範囲または明細書の限定ではない下記実施例によって、本発明の多用途性を例示する。

（実施例１）
例示的な化合物の合成

（実施例２）
実施例１のように調製されたペプチドの樹脂からの切断
樹脂からのペプチドの切断

（実施例３）
実施例２のように調製された化合物のリンカーとのカップリング
リンカーのカップリング

（実施例４）
以下の合成を図１２に提供する。

（実施例５）
以下の合成を図１３に提供する。

（実施例６）
以下の合成を図１４に提供する。

（実施例７）
以下の合成を図１５に提供する。

（実施例８）
以下の合成を図１６に提供する。

（実施例９）
以下の合成を図１７に提供する。

（実施例１０）
以下の合成を図１８に提供する。

（実施例１１）
以下の合成を図１９に提供する。

（実施例１２）
以下の合成を図２０に提供する。

（実施例１３）
以下の合成を図２１に提供する。

（実施例１４）
以下の合成を図２２に提供する。

（実施例１５）
以下の合成を図２３に提供する。

（実施例１６）
以下の合成を図２４に提供する。

（実施例１７）
以下の合成を図２５に提供する。

この実施例では実施例１２の化合物を使用するが、実施例１３の化合物を用いることも十分に可能である。その上、この実施例ではＮ末端との連結を示すが、実施例１２および１３の化合物の左側にある遊離酸は、Ｃ、Ｋ、Ｓ、ＴまたはＹ側鎖等、ペプチド上の任意の求核性側鎖と連結していてもよい。この実施例にも示すように、実施例１２および１３の化合物の右側にあるＦｍｏｃ保護アミノ基は、アミド結合を介して認識基Ｙと連結するために使用される。

（実施例１８）
以下の合成を図２６に提供する。

この実施例では実施例１５の化合物を使用するが、実施例１４および１６の化合物を用いることも十分に可能である。その上、この実施例ではＮ末端との連結を示すが、実施例１４〜１６の化合物の左側にある遊離酸は、Ｃ、Ｋ、Ｓ、ＴまたはＹ側鎖等、ペプチド上の任意の求核性側鎖と連結していてもよい。この実施例にも示すように、実施例１４〜１６の化合物の右側にある遊離酸は、アミド結合を介して抗体認識基Ｙと連結するために使用される。

（実施例１９）
３−｛２−［２−（２−｛２−［２−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−エトキシ］エトキシ｝−プロピオン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの合成

表題化合物は、報告されている方法を使用して調製した（Ｏ．ＳｅｉｔｚおよびＨ．Ｋｕｎｚ、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．、６２、８１３〜８２６（１９９７））。ナトリウム金属の小片を、ＴＨＦ（２００ｍｌ）中のテトラ（エチレングリコール）（４７．５ｇ、２４４ｍｍｏｌ）の溶液に添加し、ナトリウムが完全に溶解するまで撹拌した。その後、^ｔブチルアクリレート（９４ｇ、７３０ｍｍｏｌ）を添加し、室温で２日間、撹拌を続けた。別のバッチの^ｔブチルアクリレート（９４ｇ、７３０ｍｍｏｌ）を添加し、さらに２日間、撹拌を続けた。反応混合物を数滴の１ＮＨＣｌで中和し、減圧濃縮した。残留物を水中に懸濁し、酢酸エチル（３×１５０ｍｌ）で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧下での揮発物の蒸発により、粗生成物を無色液体として提供し、シリカゲルカラムを使用して精製した（４２ｇ、５１％）。

（実施例２０）
３−｛２−［２−（２−｛２−［２−（２−カルボキシ−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−プロピオン酸の合成

アニソール（２０ｍｌ）中の３−｛２−［２−（２−｛２−［２−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−プロピオン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（６ｇ、１８．６ｍｍｏｌ）の溶液を氷浴中で冷却し、トリフルオロ酢酸（６５ｇ）を添加した。室温で３時間後、揮発物を減圧下で除去し、残留物を酢酸エチル（５０ｍｌ）と５％重炭酸ナトリウム溶液とに分配した。水層を１ＮＨＣｌで酸性化し、ＮａＣｌで飽和させ、その後、酢酸エチル（３×５０ｍｌ）で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧下での揮発物の除去により、生成物を無色液体として提供し、これを冷凍下で凝固させた（３．８ｇ、８２％）。

（実施例２１）
３−（２−｛２−［２−（２−｛２−［２−（４−｛２−［２−（２−メチル−［１，３］ジオキソラン−２−イルメチル）−［１，３］ジオキソラン−２−イル］−エチル｝−フェニルカルバモイル）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−プロピオン酸の合成

実施例２０からの化合物（０．６ｇ、１．８ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１０ｍｌ）中に溶解し、４−｛２−［２−（２−メチル−［１，３］ジオキソラン−２−イルメチル）−［１，３］ジオキソラン−２−イル］−エチル｝−フェニルアミン（０．３ｇ、１．４ｍｍｏｌ）、続いてＥＤＣＩ（０．２８ｇ、１．８ｍｍｏｌ）を室温で添加した。室温で１時間後、反応混合物を水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥した。揮発物の蒸発およびジクロロメタン中の１〜１５％メタノールを用いるシリカゲルカラム上での精製により、表題化合物をガム状物（０．４７ｇ、３２％）として提供した。

（実施例２２）
４−｛２−［２−（２−メチル−［１，３］ジオキソラン−２−イルメチル）−［１，３］ジオキソラン−２−イル］−エチル｝−フェニルアミンの合成

清浄な炉乾燥フラスコに６−（４−ニトロ−フェニル）−ヘキサン−２，４−ジオン（３．７ｇ、１５．７２ｍｍｏｌ）を充填し、乾燥ＣＨ_２Ｃｌ_２（２０ｍｌ）、続いてビスＴＭＳエチレングリコール（３８．５ｍｌ、１５７．３ｍｌ）をフラスコに添加し、結果として生じた溶液を、アルゴン下、撹拌しながら−５℃まで冷却した。ＴＭＳＯＴｆ（３００μｌ）を反応混合物に添加し、溶液を−５℃で６時間撹拌した。反応物をピリジン（１０ｍｌ）でクエンチし、飽和ＮａＨＣＯ_３中に注いだ。混合物をＥｔＯＡｃで抽出し、有機層を水、ブラインで洗浄し、乾燥し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濃縮し、黄色固体を生じさせた。固体をヘキサンで粉砕し、自由流動性の淡黄色固体（３．５ｇ、７２％）を生じさせ、これをＥｔＯＡｃ（５０ｍｌ）中に溶解し、５０ｐｓｉの水素圧で開始するパールシェーカーで水素化した。２時間後、セライトのパッドを通して反応物をろ過し、セライトをＣＨ_２Ｃｌ_２／ＭｅＯＨで徹底的に洗浄し、合わせた有機物を濃縮し、表題化合物（１．４６ｇ、１００％）を、静置すると凝固する油として生じさせた。

（実施例２３）
４−［４−（３，５−ジオキソ−ヘキシル）−フェニルカルバモイル］−酪酸２，５−ジオキソピロリジン−１−イルエステル（１０）の合成

ステップ１
６−（４−ニトロ−フェニル）−ヘキサン−２，４−ジオン（１１）
反応槽（熱および真空乾燥ならびに磁気回転棒装備）に、テトラヒドロフランおよびリチウムジイソプロピルアミド（２Ｍヘプタン／エチルベンゼン／テトラヒドロフラン；６９．４ｍＬ、１３８．９ｍｍｏｌ）を添加した。溶液を−７８℃まで冷却した。ペンタン−２，４−ジオン（７．１３ｍＬ、６９．４ｍｍｏｌ）を滴下添加し、溶液を−７８℃で３０分間撹拌した。４−ニトロベンジルブロミド（１５．０ｇ、６９．４ｍｍｏｌ）を一度に添加した。溶液をドライアイス／アセトン浴から除去し、室温まで加温させ、１６時間撹拌した。溶液を約０℃まで冷却し、反応物を１ＭＨＣｌでクエンチした。テトラヒドロフランを減圧下で除去した。粗材料をジクロロメタン中に溶かし、１ＭＨＣｌおよびブラインで洗浄した。水層をジクロロメタンで再度洗浄した。合わせたジクロロメタン層を乾燥し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、減圧下で除去した。５％〜１５％酢酸エチル／ヘキサンを使用して勾配フラッシュカラムクロマトグラフィー（ＦＣＣ）を実施し、表題化合物（８．５ｇ、５２％；黄色固体）を産生した。^１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）：δ８．１４（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ）、δ７．４３（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ）、δ５．４５（ｓ，１Ｈ）、δ３．０６（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ）、δ２．６４（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，２Ｈ）、δ２．０４（ｓ，３Ｈ）。

ステップ２
４−［４−（３，５−ジオキソ−ヘキシル）−フェニルカルバモイル］−酪酸（１２）
２００ｍＬのテトラヒドロフラン、６−（４−ニトロ−フェニル）−ヘキサン−２，４−ジオン（８．０ｇ、３４．０ｍｍｏｌ）およびジヒドロ−ピラン−２，６−ジオン（３．８８ｇ、３４．０ｍｍｏｌ）を、反応槽に添加した。反応槽をアルゴンで３回パージした。約２００ｍｇのパラジウム（活性炭上１０ｗｔ％）を添加した。反応槽をアルゴンで再度パージし、バルーンを介して過剰水素を導入した。溶液を室温で１６時間撹拌した。水素を減圧下で除去し、セライトを通すろ過によって触媒を除去した。テトラヒドロフランを減圧下で除去し、表題化合物（１０．５ｇ、９７％、黄色固体）を産生した。

ステップ３
４−［４−（３，５−ジオキソ−ヘキシル）−フェニルカルバモイル］−酪酸２，５−ジオキソピロリジン−１−イルエステル（１０）
反応槽（熱および真空乾燥ならびに磁気回転棒装備）に、４−［４−（３，５−ジオキソ−ヘキシル）−フェニルカルバモイル］−酪酸（１０．５３ｇ、３３．０ｍｍｏｌ）、Ｎ−ヒドロキシコハク酸イミド（３．８ｇ、３３．０ｍｍｏｌ）および１−［３−（ジメチルアミノ）プロピル］−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（６．３ｇ、３３．０ｍｍｏｌ）およびジクロロメタン（２５０ｍＬ）を添加した。溶液を、窒素下、室温で１６時間撹拌し、その後、１０％クエン酸、ブラインで洗浄し、乾燥した（Ｎａ_２ＳＯ_４）。ジクロロメタンを減圧下で除去した。７０％酢酸エチル／ヘキサンを用いるＦＣＣにより、表題化合物（７．４ｇ、黄色固体、５４％）を生じさせた。^１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）：δ７．８７（ｓ，１Ｈ）、δ７．４３（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ）、δ７．１２（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ）、δ５．４６（ｓ，１Ｈ）、δ２．８９（ｔ（＆ｍ）、Ｊ＝８．１Ｈｚ（ｔについて）、７Ｈ）、δ２．７３（ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，２Ｈ）、δ２．５６（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ）、δ２．４７（ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，２Ｈ）、δ２．２１（ｐ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，２Ｈ）、δ２．０４（ｓ，３Ｈ）。

（実施例２４）
３−｛２−［２−（２−｛４−［４−（３，５−ジオキソ−ヘキシル）−フェニルカルバモイル］−ブチリルアミノ｝−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−プロピオン酸２，５−ジオキソ−ピロリジン−１−イルエステル、（２０）の合成

ステップ１
３−｛２−［２−（２−ヒドロキシ−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−プロピオン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
Ｎａ金属（触媒）を、０℃のＴＨＦ（１００ｍＬ）中のアクリル酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（６．７ｍＬ、４６ｍｍｏｌ）および２−［２−（２−ヒドロキシ−エトキシ）−エトキシ］−エタノール（２０．７ｇ、１３８ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に添加し、混合物を終夜撹拌した。溶媒を除去し、残存油をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）中に溶解した。有機層を水（３×５０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、溶媒を真空除去し、次のステップにそのまま使用されるであろう表題化合物に相当する油を生じさせた。（Ｍ＋１）＝２７９。

ステップ２
３−｛２−［２−（２−トシルスルホニルオキシ−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−プロピオン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
塩化トシル（２２．３ｇ、１１７ｍｍｏｌ）を、（２４０ｍＬ）中の３−｛２−［２−（２−ヒドロキシ−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−プロピオン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１６．３ｇ、５８．６ｍｍｏｌ）およびピリジン６０ｍＬの撹拌溶液に少量ずつ添加し、混合物を終夜撹拌した。反応物を水（３００ｍＬ）でクエンチし、有機層を分離した。水層をＣＨ_２Ｃｌ_２（２×１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を、ＨＣｌ（１Ｎ、１００ｍＬ）、水（１００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、溶媒を真空除去し、次のステップにそのまま使用されるであろう表題化合物に相当する油を生じさせた。（Ｍ＋１）＝４３３。

ステップ３
３−｛２−［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−プロピオン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
ＮａＮ_３（３５ｇ、５３８ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（１５０ｍＬ）中の３−｛２−［２−（２−トシルスルホニルオキシ−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−プロピオン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（２０ｇ、４６ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に添加し、反応物を終夜撹拌した。反応物を水（２００ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（４×１００ｍＬ）で抽出した。有機層を水（１００ｍＬ）およびブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥した。溶媒を真空除去し、油を生じさせた。カラムクロマトグラフィーＥｔＯＡｃ／Ｈｅｘ（１：４）により、３−｛２−［２−（２−アジド−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−プロピオン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル、（Ｍ＋１）＝３０４に相当する油を生じさせた。ＥｔＯＡｃ中のＰｄ（炭素上５％）を使用して、水素（１気圧）下、この油を３日間水素化した。ろ過によって触媒を除去し、溶媒を真空除去し、表題化合物、（Ｍ＋１）＝２７８に相当する油を生じさせた。

ステップ４
３−｛２−［２−（２−｛４−［４−（３，５−ジオキソ−ヘキシル）−フェニルカルバモイル］−ブチリルアミノ｝−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−プロピオン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
ＣＨ_２Ｃｌ_２（１０ｍＬ）中の、４−［４−（３，５−ジオキソ−ヘキシル）−フェニルカルバモイル］−酪酸２，５−ジオキソ−ピロリジン−１−イルエステル（１．５ｇ、３．６ｍｍｏｌ）、３−｛２−［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−プロピオン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１．０ｇ、３．６ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（１．３μＬ、７．２ｍｍｏｌ）の溶液を、室温で終夜撹拌した。溶媒を真空除去し、カラムクロマトグラフィーＥｔＯＡｃ／ＭｅＯＨ（９５：５）を使用して残油を精製し、表題化合物を透明油、（Ｍ＋１）＝５７９として生じさせた。

ステップ５
３−｛２−［２−（２−｛４−［４−（３，５−ジオキソ−ヘキシル）−フェニルカルバモイル］−ブチリルアミノ｝−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−プロピオン酸２，５−ジオキソ−ピロリジン−１−イルエステル
３−｛２−［２−（２−｛４−［４−（３，５−ジオキソ−ヘキシル）−フェニルカルバモイル］−ブチリルアミノ｝−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−プロピオン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（４００ｍｇ、０．６９２ｍｍｏｌ）をＴＦＡ／ＣＨ_２Ｃｌ_２（１：１、３ｍＬ）中に溶解し、混合物を終夜撹拌した。溶媒を除去し、油を酸中間体として生じさせた。ＤＩＥＡ（５６９μＬ、３．０９ｍｍｏｌ）、Ｎ−ヒドロキシコハク酸イミド（１１９ｍｇ、１．０３ｍｍｏｌ）およびＥＤＣ（１９７ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）を含有するＣＨ_２Ｃｌ_２（４ｍＬ）中にこの油を溶解し、混合物を終夜撹拌した。溶媒を除去し、カラムクロマトグラフィーＥｔＯＡｃ／ＭｅＯＨ（９５：５）を使用して残油を精製し、油を表題化合物、（Ｍ＋１）＝６２０として生じさせた。

（実施例２５）
ＡＡ標的化化合物の合成
実施例１７または１８の化合物は、下記手順によって抗体３８Ｃ２と連結させることができる。リン酸緩衝溶液（１０ｍｇ／ｍＬ）中の１ｍＬの抗体３８Ｃ２を、１２μＬのＡＡ標的化剤の１０ｍｇ／ｍＬ原液に添加し、結果として生じた混合物を、使用前に２時間、室温で維持した。

（実施例２６）
以下の合成を図２７に提供する。

この実施例では実施例１２の化合物を使用するが、実施例１３の化合物を用いることも十分に可能である。

（実施例２７）
Ｃ．Ｒａｄｅｒら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、３３２、８８９〜８９９（２００３）は、ｈ３８ｃ２を作製する１つの方法を詳述している。下記は、この参考文献中の結果、材料および方法を詳述するものである。

ヒト化
ヒトＶκ遺伝子ＤＰＫ−９およびヒトＪκ遺伝子ＪＫ４を、カッパ軽鎖可変ドメインのヒト化のためのフレームワークとして使用し、ヒトＶＨ遺伝子ＤＰ−４７およびヒトＪ_Ｈ遺伝子Ｊ_Ｈ４を、ｍ３８Ｃ２の重鎖可変ドメインのヒト化のためのフレームワークとして使用した。Ｋａｂａｔらによって定義されている通りのすべての相補性決定領域（ＣＤＲ）残基、ならびに軽鎖および重鎖可変ドメインの両方における所定のフレームワーク残基を、ｍ３８Ｃ２からヒトフレームワークに移植した。移植されるフレームワーク残基の選択は、マウスｍＡｂ３３Ｆ１２Ｆａｂ（ＰＤＢ１ＡＸＴ）の結晶構造に基づき得る。ｍＡｂ３３Ｆ１２Ｆａｂは、ｍ３８ｃ２と、可変ドメインにおける９２％の配列相同性および同一のＣＤＲ長を共有する。しかも、３３Ｆ１２およびｍ３８Ｃ２は、いずれも同様の触媒活性を有する。フレームワーク残基は、軽鎖中の５個の残基および重鎖中の７個の残基からなっており（図７Ａ）、ｍ３８Ｃ２の触媒活性に直接的または間接的に加担している可能性がある残基を包含していた。これらは、重鎖のフレームワーク領域３（ＦＲ３）内に位置決めされているｍ３８Ｃ２、Ｌｙｓ^Ｈ９３の反応性リシンを含む。マウスｍＡｂ３３Ｆ１２と３８Ｃ２との間に保存される６個の残基、Ｓｅｒ^Ｈ３５、Ｖａｌ^Ｈ３７、Ｔｒｐ^Ｈ４７、Ｔｒｐ^Ｈ１０３およびＰｈｅ^Ｌ９８は、Ｌｙｓ^Ｈ９３のεアミノ基の５Å半径内にある。これらの残基も、ヒト化中に保存した。Ｌｙｓ^Ｈ９３は、マウスｍＡｂ３３Ｆ１２および３８Ｃ２の高度に疎水性の基質結合性部位の底部に位置する。ＣＤＲ残基に加えて、多数のフレームワーク残基がこのポケットに並んでいる。これらのうち、Ｌｅｕ^Ｌ３７、Ｇｌｎ^Ｌ４２、Ｓｅｒ^Ｌ４３、Ｖａｌ^Ｌ８５、Ｐｈｅ^Ｌ８７、Ｖａｌ^Ｈ５、Ｓｅｒ^Ｈ４０、Ｇｌｕ^Ｈ４２、Ｇｌｙ^Ｈ８８、Ｉｌｅ^Ｈ８９およびＴｈｒ^Ｈ９４をヒトフレームワークに移植した。

発現
ヒト化可変ドメインをヒト定常ドメインＣ_κおよびＣ_γ１１と融合させることにより、大腸菌中に発現するＦａｂとして初めにｈ３８Ｃ２が生み出された。次に、哺乳動物細胞中におけるヒトＩｇＧ１発現のために操作されたＰＩＧＧベクターを使用して、ｈ３８ｃ２Ｆａｂからｈ３８ｃ２ＩｇＧを形成した。一過性に形質移入したヒト２９３Ｔ細胞由来の上清を組換えタンパク質Ａ上での親和性クロマトグラフィーに付し、約１ｍｇ／Ｌのｈ３８Ｃ２ＩｇＧ１を産出した。ＳＤＳ−ＰＡＧＥ、それに続くクマシーブルー染色によって純度を証明した。

β−ジケトン化合物

β−ジケトンのｍ３８ｃ２との共有結合的付加によって形成されるエナミノンは、λ_ｍａｘ＝３１８ｎｍにおいて特徴的なＵＶ吸光度を有する。ｍ３８Ｃ２ＩｇＧと同じく、ｈ３８Ｃ２ＩｇＧは、β−ジケトンとのインキュベーション後、特徴的なエナミノン吸光度を示した。陰性対照として、ｈ３８Ｃ２と同じＩｇＧ１アイソタイプを持つが反応性リシンを持たない組換えヒト抗−ＨＩＶ−１ｇｐ１２０ｍＡｂｂ１２は、β−ジケトン２とのインキュベーション後、エナミノン吸光度を明らかにしなかった。β−ジケトンのｍ３８Ｃ２およびｈ３８Ｃ２との結合の定量比較に、著者らは競争ＥＬＩＳＡを使用した。β−ジケトン２および３の濃度を増大させて抗体をインキュベートし、固定化ＢＳＡ複合β−ジケトン１に対してアッセイした。見かけの平衡解離定数は、β−ジケトン２では３８μＭ（ｍ３８Ｃ２）および７．６μＭ（ｈ３８Ｃ２）、β−ジケトン３では０．４３μＭ（ｍ３８Ｃ２）および１．０μＭ（ｈ３８Ｃ２）であり、マウスおよびヒト化抗体と同様のβ−ジケトン結合特性を明らかにした（図６）。

分子モデリング
関連アルドラーゼ抗体であるマウス３３Ｆ１２Ｆａｂ（ＰｒｏｔｅｉｎＤａｔａＢａｎｋＩＤ：１ＡＸＴ）の結晶構造を鋳型として使用するホモロジーモデリングによって、ｈ３８Ｃ２Ｆａｂの分子モデルを構築した。マウス３３Ｆ１２Ｆａｂの結晶構造は、２．１５Å^４の分解能であらかじめ測定しておいた。ＩＮＳＩＧＨＴＩＩソフトウェア（Ａｃｃｅｌｒｙｓ）内のＨＯＭＯＬＯＧＹモジュールを使用するマウス３３Ｆ１２および３８Ｃ２アミノ酸配列のアラインメントにより、双方の配列が高度に相同であることを確認した。それらは、２つの可変ドメインにおいて、２２６個のアミノ酸中１９個だけ互いに異なっており、そのＣＤＲは、同じ長さを共有する。高い配列相同性に加えて、両構造は、３８Ｃ２の低分解能結晶構造によって観測されるように、かなりの構造的類似性を呈する。モデル中の残基を、ｈ３８Ｃ２アミノ酸配列と一致するように突然変異させ、標準的な回転異性体に基づいて側鎖を置いた。その後、それぞれ１００ステップの、最急降下最小化、それに続く共役勾配最小化を使用するＩＮＳＩＧＨＴＩＩ内のＤＩＳＣＯＶＥＲモジュールにより、このモデルを最小化した。

ｈ３８Ｃ２Ｆａｂの構築
ｍ３８Ｃ２の可変軽鎖および重鎖ドメイン（それぞれ、配列番号：１５および１６）の配列、ならびにヒト生殖細胞系配列ＤＰＫ−９（配列番号：１７）、ＪＫ４（配列番号：１８）、ＤＰ−４７（配列番号：１９）およびＪＨ４（配列番号：２０、１８７および１８８）（ＶＢＡＳＥ；ｈｔｔｐ：／／ｖｂａｓｅ．ｍｒｃ−ｃｐｅ．ｃａｍ．ａｃ．ｕｋ／）の配列を使用して、それぞれヒト化Ｖ_κおよびＶ_Ｈの合成的アセンブリのための重複オリゴヌクレオチドを設計した。配列ＮＸＳ／Ｔを持つＮ−グリコシル化部位、ならびに内部制限部位ＨｉｎｄＩＩＩ、Ｘｂａｌ、ＳａｃＩ、ＡｐａＩおよびＳｆｉＩは回避した。ＥｘｐａｎｄＨｉｇｈＦｉｄｅｌｉｔｙＰＣＲシステム（ＲｏｃｈｅＭｏｌｅｃｕｌａｒＳｙｓｔｅｍｓ）を使用してＰＣＲを行った。ヒト化Ｖ_κオリゴヌクレオチドは、Ｌフランクセンス（ｆｌａｎｋｓｅｎｓｅ）（Ｒａｄｅｒ，Ｃ．、Ｒｉｔｔｅｒ，Ｇ．、Ｎａｔｈａｎ，Ｓ．、Ｅｌｉａ，Ｍ．、Ｇｏｕｔ，Ｉ．、Ｊｕｎｂｌｕｔｈ，Ａ．Ａ．、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、２７５、１３６６８〜１３６７６（２０００））（センス５’−ＧＡＧＧＡＧＧＡＧＧＡＧＧＡＧＧＧＣＣＣＡＧＧＣＧＧＣＣＧＡＧＣＴＣＣＡＧＡＴＧＡＣＣＣＡＧＴＣＴＣＴＣＣＡ−３’配列番号１７９）；ｈ３８Ｃ２Ｌ１（センス；５’−ＧＡＧＣＴＣＣＡＧＡＴＧＡＣＣＣＡＧＴＣＴＣＣＡＴＣＣＴＣＣＣＴＧＴＣＴＧＣＡＴＣＴＧＴＡＧＧＴＧＡＣＣＧＣＧＴＣＡＣＣＡＴＣＡＣＴＴＧ−３’）（配列番号１）；ｈ３８Ｃ２Ｌ２（アンチセンス；５’−ＡＴＴＣＡＧＡＴＡＴＧＧＧＣＴＧＣＣＡＴＡＡＧＴＧＴＧＣＡＧＧＡＧＧＣＴＣＴＧＡＣＴＧＧＡＧＣＧＧＣＡＡＧＴＧＡＴＧＧＴＧＡＣＧＣＧＧＴＣ−３’）（配列番号２）；ｈ３８Ｃ２Ｌ３（センス；５’−ＴＡＴＧＧＣＡＧＣＣＣＡＴＡＴＣＴＧＡＡＴＴＧＧＴＡＴＣＴＣＣＡＧＡＡＡＣＣＡＧＧＣＣＡＧＴＣＴＣＣＴＡＡＧＣＴＣＣＴＧＡＴＣＴＡＴ−３’）（配列番号３）；ｈ３８Ｃ２Ｌ４（アンチセンス；５’−ＣＴＧＡＡＡＣＧＴＧＡＴＧＧＧＡＣＡＣＣＡＣＴＧＡＡＡＣＧＡＴＴＧＧＡＣＡＣＴＴＴＡＴＡＧＡＴＣＡＧＧＡＧＣＴＴＡＧＧＡＧＡＣＴＧ−３’）（配列番号４）；ｈ３８Ｃ２Ｌ５（センス；５’−ＡＧＴＧＧＴＧＴＣＣＣＡＴＣＡＣＧＴＴＴＣＡＧＴＧＧＣＡＧＴＧＧＴＴＣＴＧＧＣＡＣＡＧＡＴＴＴＣＡＣＴＣＴＣＡＣＣＡＴＣＡＧＣＡＧＴＣＴＧＣＡＡＣＣＴＧＡＡＧＡＴＴＴＴＧＣＡＧＴＧ−３’）（配列番号５）；ｈ３８Ｃ２Ｌ６（アンチセンス；５’−ＧＡＴＣＴＣＣＡＣＣＴＴＧＧＴＣＣＣＴＣＣＧＣＣＧＡＡＡＧＴＡＴＡＡＧＧＧＡＧＧＴＧＧＧＴＧＣＣＣＴＧＡＣＴＡＣＡＧＡＡＧＴＡＣＡＣＴＧＣＡＡＡＡＴＣＴＴＣＡＧＧＴＴＧＣＡＧ−３’）（配列番号６）；Ｌアンチセンスフランク（Ｃ．Ｒａｄｅｒら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、２７５、１３６６８〜１３６７６（２０００））（アンチセンス５’−ＧＡＣＡＧＡＴＧＧＴＧＣＡＧＣＣＡＣＡＧＴＴＣＧＴＴＴＧＡＴＣＴＣＣＡＣＣＴＴＧＧＴＣＣＣＴＣＣ−３’配列番号１８０）であった。ヒト化Ｖ_Ｈオリゴヌクレオチドは、Ｈフランクセンス（Ｃ．Ｒａｄｅｒら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、２７５、１３６６８〜１３６７６（２０００））（センス５’−ＧＣＴＧＣＣＣＡＡＣＣＡＧＣＣＡＴＧＧＣＣＧＡＧＧＴＧＣＡＧＣＴＧＧＴＧＧＡＧＴＣＴＧＧＧＧＧＡ−３’配列番号１８１）；ｈ３８Ｃ２Ｈ１（センス；５’−ＧＡＧＧＴＧＣＡＧＣＴＧＧＴＧＧＡＧＴＣＴＧＧＣＧＧＴＧＧＣＴＴＧＧＴＡＣＡＧＣＣＴＧＧＣＧＧＴＴＣＣＣＴＧＣＧＣＣＴＣＴＣＣＴＧＴＧＣＡＧＣＣＴＣＴＧＧＣＴ−３’）（配列番号７）；ｈ３８Ｃ２Ｈ２（アンチセンス；５’−ＣＴＣＣＡＧＧＣＣＣＴＴＣＴＣＴＧＧＡＧＡＣＴＧＧＣＧＧＡＣＣＣＡＧＣＴＣＡＴＣＣＡＡＴＡＧＴＴＧＣＴＡＡＡＧＧＴＧＡＡＧＣＣＡＧＡＧＧＣＴＧＣＡＣＡＧＧＡＧＡＧ−３’）（配列番号８）；ｈ３８Ｃ２Ｈ３（センス；５’−ＴＣＴＣＣＡＧＡＧＡＡＧＧＧＣＣＴＧＧＡＧＴＧＧＧＴＣＴＣＡＧＡＧＡＴＴＣＧＴＣＴＧＣＧＣＡＧＴＧＡＣＡＡＣＴＡＣＧＣＣＡＣＧＣＡＣＴＡＴＧＣＡＧＡＧＴＣＴＧＴＣ−３’）（配列番号９）；ｈ３８Ｃ２Ｈ４（アンチセンス；５’−ＣＡＧＡＴＡＣＡＧＣＧＴＧＴＴＣＴＴＧＧＡＡＴＴＧＴＣＡＣＧＧＧＡＧＡＴＧＧＴＧＡＡＧＣＧＧＣＣＣＴＴＧＡＣＡＧＡＣＴＣＴＧＣＡＴＡＧＴＧＣＧＴＧ−３’）（配列番号１０）；ｈ３８Ｃ２Ｈ５（センス；５’−ＣＡＡＴＴＣＣＡＡＧＡＡＣＡＣＧＣＴＧＴＡＴＣＴＧＣＡＡＡＴＧＡＡＣＡＧＣＣＴＧＣＧＣＧＣＣＧＡＧＧＡＣＡＣＧＧＧＣＡＴＴＴＡＴＴＡＣＴＧＴＡＡＡＡＣＧ−３’）（配列番号１１）；ｈ３８Ｃ２Ｈ６（アンチセンス；５’−ＴＧＡＧＧＡＧＡＣＧＧＴＧＡＣＣＡＧＧＧＴＧＣＣＣＴＧＧＣＣＣＣＡＧＴＡＧＣＴＧＡＡＡＣＴＧＴＡＧＡＡＧＴＡＣＧＴＴＴＴＡＣＡＧＴＡＡＴＡＡＡＴＧＣＣＣＧＴＧ−３’）（配列番号１２）；Ｈフランクアンチセンス（Ｃ．Ｒａｄｅｒら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、２７５、１３６６８〜１３６７６（２０００））（アンチセンス５’−ＧＡＣＣＧＡＴＧＧＧＣＣＣＴＴＧＧＴＧＧＡＧＧＣＴＧＡＧＧＡＧＡＣＧＧＴＧＡＣＣＡＧＧＧＴＧＣＣ−３’配列番号１８２）であった。アセンブリに続いて、ヒト化Ｖ_κおよびＶ_ＨをそれぞれヒトＣ_κおよびＣ_γｌ１と融合させ、結果として生じた軽鎖および重鎖断片を融合し、記述されている通り、ファージミドベクターｐＣｏｍｂ３Ｘ中にＳｆｉＩ−クローン化した（Ｃ．Ｒａｄｅｒら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、２７５、１３６６８〜１３６７６（２０００）；Ｃ．Ｆ．Ｂａｒｂａｓ三世ら、ＰｈａｇｅＤｉｓｐｌａｙ：Ａｌａｂｏｒａｔｏｒｙｍａｎｕａｌ、ＣｏｌｄＳｐｒｉｎｇＨａｒｂｏｒＬａｂｏｒａｔｏｒｙ、ＣｏｌｄＳｐｒｉｎｇＨａｒｂｏｒＮ．Ｙ．（２００１））。クローンを正しいｈ３８Ｃ２配列で富化するために、Ｆａｂをファージ上に表示し、ＢＳＡと複合した固定化β−ジケトン１（ＪＷ）に対する１ラウンドのパニングによって選択した。可溶性Ｆａｂを単一クローンから生成し、西洋ワサビペルオキシダーゼと複合したロバ抗ヒトＦ（ａｂ’）_２ポリクローナル抗体（ＪａｃｋｓｏｎＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈＬａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）を二次抗体として使用するＥＬＩＳＡにより、固定化ＪＷ−ＢＳＡとの結合について試験した。プライマーＯＭＰＳＥＱ（５’−ＡＡＧＡＣＡＧＣＴＡＴＣＧＣＧＡＴＴＧＣＡＧ−３’配列番号１８３）およびＰＥＬＳＥＱ（５’−ＣＴＡＴＴＧＣＣＴＡＣＧＧＣＡＧＣＣＧＣＴＧ−３’配列番号１８４）（Ｃ．Ｆ．Ｂａｒｂａｓ三世ら、ＰｈａｇｅＤｉｓｐｌａｙ：Ａｌａｂｏｒａｔｏｒｙｍａｎｕａｌ、ＣｏｌｄＳｐｒｉｎｇＨａｒｂｏｒＬａｂｏｒａｔｏｒｙ、ＣｏｌｄＳｐｒｉｎｇＨａｒｂｏｒＮ．Ｙ．（２００１））をそれぞれ使用するＤＮＡ配列決定によって、陽性クローンの配列をコードする軽鎖および重鎖を分析し、ｈ３８Ｃ２のアセンブリされたＶ_κおよびＶ_Ｈ配列を確認した。

ｈ３８Ｃ２ＩｇＧ１の構築、生成および精製
最近記述されたベクターＰＩＧＧ（Ｃ．Ｒａｄｅｒら、ＦＡＳＥＢＪ．、１６、２０００〜２００２（２００２））を、ｈ３８Ｃ２ＩｇＧ１の哺乳動物発現のために使用した。哺乳動物発現ベクターＰＩＧＧ−ｈ３８ｃ２は、図２３に例示されている。９ｋｂベクターは、双方向性ＣＭプロモーター構築物によって駆動される重鎖γ１および軽鎖κ発現カセットを含む。プライマーＰＩＧＧ−ｈ３８Ｃ２Ｈ（センス；５’−ＧＡＧＧＡＧＧＡＧＧＡＧＧＡＧＧＡＧＣＴＣＡＣＴＣＣＧＡＧＧＴＧＣＡＧＣＴＧＧＴＧＧＡＧＴＣＴＧ−３’）（配列番号１３）およびＧＢＡＣＫ（５’−ＧＣＣＣＣＣＴＴＡＴＴＡＧＣＧＴＴＴＧＣＣＡＴＣ−３’配列番号１８５）（Ｃ．Ｆ．Ｂａｒｂａｓ三世ら、ＰｈａｇｅＤｉｓｐｌａｙ：Ａｌａｂｏｒａｔｏｒｙｍａｎｕａｌ、ＣｏｌｄＳｐｒｉｎｇＨａｒｂｏｒＬａｂｏｒａｔｏｒｙ、ＣｏｌｄＳｐｒｉｎｇＨａｒｂｏｒＮ．Ｙ．（２００１））を使用して、ファージミドベクターｐＣｏｍｂ３Ｘ中のｈ３８Ｃ２Ｆａｂ由来のＶＨコード配列を増幅し、ＳａｃＩおよびＡｐａＩで消化し、適当に消化されたベクターＰＩＧＧ中にクローン化した。プライマーＰＩＧＧ−ｈ３８Ｃ２Ｌ（センス：５’−ＧＡＧＧＡＧＧＡＧＧＡＧＧＡＧＡＡＧＣＴＴＧＴＴＧＣＴＣＴＧＧＡＴＣＴＣＴＧＧＴＧＣＣＴＡＣＧＧＧＧＡＧＣＴＣＣＡＧＡＴＧＡＣＣＣＡＧＴＣＴＣＣ−３’）（配列番号１４）およびＬＥＡＤＢ（５’−ＧＣＣＡＴＧＧＣＴＧＧＴＴＧＧＧＣＡＧＣ−３’配列番号１８６）（（Ｃ．Ｆ．Ｂａｒｂａｓ三世ら、ＰｈａｇｅＤｉｓｐｌａｙ：Ａｌａｂｏｒａｔｏｒｙｍａｎｕａｌ、ＣｏｌｄＳｐｒｉｎｇＨａｒｂｏｒＬａｂｏｒａｔｏｒｙ、ＣｏｌｄＳｐｒｉｎｇＨａｒｂｏｒＮ．Ｙ．（２００１））を使用して、ファージミドベクターｐＣｏｍｂ３Ｘ中のｈ３８Ｃ２Ｆａｂ由来の軽鎖コード配列を増幅し、ＨｉｎｄＩＩＩおよびＸｂａＩで消化し、ｈ３８Ｃ２重鎖を既に含有する適当に消化されたベクターＰＩＧＧ中にクローン化した。中間体および最終ＰＩＧＧベクター構築物を大腸菌株ＳＵＲＥ（Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅ）中で増幅し、ＱＩＡＧＥＮＰｌａｓｍｉｄＭａｘｉＫｉｔを用いて調製した。ｈ３８Ｃ２ＩｇＧ１は、Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ２０００（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を使用するヒト２９３Ｔ細胞の一過性形質移入により、調製された最終ＰＩＧＧベクター構築物から生成した。形質移入された細胞を、ＲＰＭＩ１６４０（Ｈｙｃｌｏｎｅ）内のＧＩＢＣＯ１０％超低ＩｇＧ（＜０．１％）ＦＣＳ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）中に２週間維持した。この期間中に、培地を収集し、３回交換した。収集した培地を、組換えタンパク質ＡＨｉＴｒａｐカラム（ＡｍｅｒｓｈａｍＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）上での親和性クロマトグラフィーに付した。この精製ステップは、ＥｐｐｅｎｄｏｒｆＢｉｏＰｈｏｔｏｍｅｔｅｒを使用して２８０ｎｍにおける光学密度を計測することによって測定したところ、２，３００ｍＬの収集した培地から２．４５ｍｇのｈ３８Ｃ２ＩｇＧ１を産出した。Ｓｌｉｄｅ−Ａ−Ｌｙｚｅｒ１０Ｋ透析カセット（Ｐｉｅｒｃｅ）中のＰＢＳに対する透析に続いて、Ｕｌｔｒａｆｒｅｅ−１５遠心ろ過デバイス（ＵＦＶ２ＢＴＫ４０；Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）を使用して抗体を７６０μｇ／ｍＬまで濃縮し、０．２μｍのＡｃｒｏｄｉｓｃ１３ＭＭＳ−２００シリンジフィルター（Ｐａｌｌ）を通して無菌ろ過した。最終収率は２．１３ｍｇ（８７％）であった。非還元ＳＤＳ−ＰＡＧＥ、それに続くクマシーブルー染色により、精製されたｈ３８Ｃ２ＩｇＧ１を確認した。

エナミノン形成
２５μＭの抗体中の結合性部位および１２５μＭのβ−ジケトンの最終濃度となるまで、抗体（ｈ３８Ｃ２ＩｇＧ１またはｂ１２ＩｇＧ１）をβ−ジケトン２に添加した。この混合物を室温で１０分間インキュベートした後、ＳＯＦＴｍａｘＰｒｏソフトウェア（バージョン３．１．２）を使用するＳｐｅｃｔｒａＭａｘＰｌｕｓ３８４ＵＶプレートリーダー（ＭｏｌｅｃｕｌａｒＤｅｖｉｃｅｓ）でＵＶスペクトルを取得した。

結合アッセイ
特に断りのない限り、すべての溶液はリン酸緩衝溶液（ｐＨ７．４）であった。β−ジケトン２または３いずれかの２倍溶液（５０μＬ）を５０μＬの抗体（ｈ３８Ｃ２またはｍ３８Ｃ２のいずれか）に添加し、３７℃で１時間インキュベートさせた。ピペッティングにより、溶液を混合した。抗体の最終濃度は０．４〜８ｎＭの抗体中の結合性部位であり、β−ジケトン２および３の最終濃度はそれぞれ１０^−９〜１０^−２Ｍおよび１０^−１０〜１０^−４Ｍであった。Ｃｏｓｔａｒ３６９０９６−ウェルプレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ）の各ウェルに、ＴＢＳ中のβ−ジケトン１のＢＳＡ複合体を１００ｎｇコーティングした。その後、ＴＢＳ中の３％（ｗ／ｖ）ＢＳＡでウェルをブロックした。その後、５０μＬの抗体／β−ジケトン混合物、続いて、西洋ワサビペルオキシダーゼと複合した、ヤギ抗ヒトＦｃＩｇＧポリクローナル抗体（Ｐｉｅｒｃｅ）またはウサギ抗マウスＦｃＩｇＧポリクローナル抗体（ＪａｃｋｓｏｎＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈＬａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）いずれかの５０μＬの１：１，０００希釈物を添加した。これに５０μＬのＡＢＴＳ基質溶液が続いた。各添加の間、プレートを覆い、３７℃で１時間インキュベートし、その後、脱イオンＨ_２Ｏで５回洗浄した。上述の通りにして、４０５ｎｍにおける吸光度を、β−ジケトンのない反応が適当な値（０．５＜Ａ_４０５＜１．０）に到達するまでモニターした。各ウェルについて、方程式ｉを使用してＥＬＩＳＡシグナル（ｖ_ｉ）の分画阻害を計算し、
ｖ_ｉ＝（Ａ_ｏ−Ａ_ｉ）／（Ａ_ｏ）（ｉ）
ここで、Ａ_ｏは、β−ジケトンの不在下で得られたＥＬＩＳＡ吸光度であり、Ａ_ｉは、β−ジケトンの存在下で得られた吸光度である。一価結合タンパク質について、可溶性β−ジケトン（ｆ）と結合している抗体の分画はｖ_ｉに等しい。しかしながら、ＩｇＧ抗体は二価であり、ＥＬＩＳＡシグナルは一価結合によってではなく２倍リガンド化された（ｄｏｕｂｌｙｌｉｇａｎｄｅｄ）抗体の存在によってのみ阻害される。したがって、二価抗体のスティーブンス補正（Ｓｔｅｖｅｎｓｃｏｒｒｅｃｔｉｏｎ）を使用した。
ｆ_ｉ＝（ｖ_ｉ）^１／２（ｉｉ）
下記関係を使用して、見かけの平衡解離定数（［参考文献３７］により修正）を測定した。
ｆ_ｉ＝ｆ_ｍｉｎ＋（ｆ_ｍａｘ−ｆ_ｍｉｎ）（１＋Ｋ_Ｄ／ａ_０）^−１（ｉｉｉ）
ここで、ａ_０は総β−ジケトン濃度に相当し、Ｋ_Ｄは平衡解離定数であり、ｆ_ｍｉｎおよびｆ_ｍａｘは、抗体中の結合性部位が非占有または飽和している場合の実験的に決定した値をそれぞれ表す。この方程式は、Ｋ_Ｄ値が抗体濃度よりも少なくとも１０倍高い場合にのみ妥当となるため、方程式ｉｉｉによって決定されたＫ_Ｄ値はこの基準に合うことが検証された。ＫａｌｅｉｄａＧｒａｐｈ（バージョン３．０．５、Ａｂｅｌｂｅｃｋｓｏｆｔｗａｒｅ）の非線形最小二乗当てはめ手順を、調整可能なパラメータとしてのＫ_Ｄ、ｆ_ｍａｘおよびｆ_ｍｉｎとともに使用してデータを当てはめ、方程式ｉｖ：
ｆ_ｎｏｒｍ＝（ｆ_ｉ−ｆ_ｍｉｎ）／（ｆ_ｍａｘ−ｆ_ｍｉｎ）（ｉｖ）
を使用して正規化した。

（実施例２８）
Ａｎｇ−２結合化合物のＡｎｇ−２と相互作用する能力を、Ｔｉｅ−２との競争によって計測した。

競争ＥＬＩＳＡのために、ヒトアンジオポイエチン−２タンパク質およびＴｉｅ−２−Ｆｃ（Ｒ＆ＤＳｙｓｔｅｍｓ）を担体タンパク質なしで再構成した。マウス抗ヒトＴｉｅ−２（Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｎ）を一次抗体として使用し、ヤギ抗マウス−ＩｇＧ１−ＨＲＰ（Ｐｉｅｒｃｅ）を二次抗体として使用した。Ｐｉｅｒｃｅ製のＴＭＢ基質を使用した。

高結合のハーフウェルプレートに、５０μｌのＰＢＳ中のＡｎｇ−２（１００ｎｇ／ウェル）をコーティングし、４℃で終夜インキュベートした。プレートを洗浄緩衝液（０．１％Ｔｗｅｅｎ２０、ＰＢＳ、ｐＨ７．４）で３回洗浄し、Ｓｕｐｅｒｂｌｏｃｋ（Ｓｃｙｔｅｋ）、１００μｌ／ウェルにより、室温（「ＲＴ」）で１時間ブロックした。ブロッキング溶液を除去後、０．２５ｎＭのｈＴｉｅ−２−Ｆｃの存在下、Ｓｕｐｅｒｂｌｏｃｋを希釈剤として使用して５０μｌのＡｎｇ−２結合ペプチド化合物（１μＭおよび５×連続希釈）を添加し、ＲＴで２時間インキュベートした。プレートを洗浄緩衝液で３回洗浄した。その後、Ｓｕｐｅｒｂｌｏｃｋ中に希釈した５０μｌの０．１μｇ／ｍｌマウス抗ヒトＴｉｅ−２を添加し、ＲＴで１時間インキュベートした。インキュベーションに続いて、Ｓｕｐｅｒｂｌｏｃｋ中のヤギ抗マウスＩｇＧ−ＨＲＰの５０μｌの１：５，０００希釈物を添加し、ＲＴで１時間インキュベートした。３回洗浄後、５０μｌ（２５μｌのＴＭＢ＋２５μｌのＨ_２Ｏ_２）を添加し、３〜５分間インキュベートした。着色をモニターし、２５μｌの２ＭＨ_２ＳＯ_４によって停止させた。５４０ｎｍの補正波長を持つＯＤ４５０ｎｍが計測された。Ｐｒｉｓｍ４ソフトウェア（ＧｒａｐｈＰａｄ）中の非線形シグモイド用量反応曲線当てはめ関数を使用して、ＩＣ５０値（Ａｎｇ−２−Ｔｉｅ−２結合の５０％阻害）を計算した。

逆競争（ｒｅｖｅｒｓｅｃｏｍｐｅｔｉｔｉｏｎ）ＥＬＩＳＡには、ヒトＴｉｅ−２−Ｆｃ、アンジオポイエチン−２タンパク質、ビオチン化抗ヒトＡｎｇ−２抗体およびストレプトアビジンＨＲＰ（Ｒ＆ＤＳｙｓｔｅｍｓ）、ならびにＰｉｅｒｃｅ製のＴＭＢ基質を使用した。

高結合のハーフウェルプレートに、５０μｌのＰＢＳ中のＴｉｅ−２−Ｆｃ（５０ｎｇ／ウェル）をコーティングし、４℃で終夜インキュベートした。プレートを洗浄緩衝液（０．１％Ｔｗｅｅｎ２０、ＰＢＳ、ｐＨ７．４）で３回洗浄し、Ｓｕｐｅｒｂｌｏｃｋ、１５０μｌ／ウェルにより、ＲＴで１時間ブロックした。プレートを３回洗浄した。洗浄に続いて、Ｓｕｐｅｒｂｌｏｃｋ中の５０ｎｇ／ｍｌ（０．８３ｎＭ）Ａｎｇ−２の存在下、５０μｌのＡｎｇ−２結合ペプチド化合物（５０ｎＭ、５×連続希釈）を添加し、ＲＴで１時間インキュベートした。プレートを３回洗浄し、Ｓｕｐｅｒｂｌｏｃｋ中の５０μｌの１μｇ／ｍｌビオチン化抗−Ａｎｇ−２検出抗体を添加し、ＲＴで２時間インキュベートした。プレートを３回洗浄し、５０μｌのストレプトアビジンＨＲＰ（Ｓｕｐｅｒｂｌｏｃｋ中の１：２００希釈物）をＲＴで２０分間添加した。プレートを３回洗浄し、５０μｌ（２５μｌのＴＭＢ＋２５μｌのＨ_２Ｏ_２）の基質溶液を添加し、２０〜３０分間インキュベートした。着色を２５μｌの２ＭＨ_２ＳＯ_４によって停止させた。５４０ｎｍの補正波長を持つＯＤ４５０ｎｍが計測された。Ｐｒｉｓｍ４ソフトウェア中の非線形シグモイド用量反応曲線当てはめ関数を使用して、ＩＣ５０値（Ａｎｇ−２−Ｔｉｅ−２結合の５０％阻害）を計算した。

競争ＥＬＩＳＡによって測定した際の例示的なＡｎｇ−２結合ペプチド化合物のＩＣ５０値を、表７に提示する。ＩＣ５０値は、特別の定めのない限り、標的化ペプチドプラスリンカー（図３、または化合物２４および２５については図２に示されている通り）（Ｔ）および図３のリンカーを介して抗体（Ｐ）と連結している標的化ペプチドについて提供されている。表７において、配列番号：２１〜２３の化合物は、Ａｎｇ−２結合ペプチド単独であってリンカーまたはリンカー−抗体のいずれとも複合しておらず、配列番号：６５および６６の化合物は、リンカー−抗体と複合したＡｎｇ−２結合ペプチドであり、ここで、リンカーは４Ｐ（「４」ＰＥＧ）であって図２に示されているリンカーの構造を有し、化合物２６〜６３は、リンカー−抗体と複合したＡｎｇ−２結合ペプチドであり、ここで、リンカーはＯＰ（「Ｏ」ＰＥＧ）であって図３に示されているリンカーの構造を有する。化合物２４〜６３は、特に指示されている場合を除き、ヒト化アルドラーゼ抗体ｈ３８ｃ２ならびに以下に示されているデータを得た際の図２（４Ｐ）および図３（ＯＰ）に示されているリンカー構造と複合している。表中に示されている本発明のすべての化合物は、特に指示されている場合を除き、Ｎ末端でアシル基により、Ｃ末端でアミノ基によりキャップされていた（例えば、化合物２６、４９、５０、５１および５２）。

表７では、リンカーが結合している内部アミノ酸残基の次の括弧内に指示されたリンカーＯＰまたは４Ｐの位置とともに、ペプチド化合物のアミノ酸配列が示されている。配列番号：６７の化合物では、Ｎ末端「ＯＰ」リンカーがペプチド配列の先頭に指示されている。

例えば、表７中の化合物２４は、下記配列：ＱＡｃＫＹＱＰＬＤＥＬＤＫ（４Ｐ）ＴＬＹＤＱＦＭＬＱＱＧ（配列番号：６５）を有する。この例において、２番目のアミノ酸残基はイプシロンアシルリシン、続いてチロシンであり、連結位置（この事例では４Ｐリンカー）はリシン残基１１、続いてスレオニンである。また、化合物５２は下記配列：（アミド２−ＰＥＧ）ＱＡｃＫＹＱＰＬＤＥＬＤＫ（０Ｐ）ＴＬＹＤＱＦＭＬＱＱＧ（配列番号：９３）を有する。この事例では、Ｎ末端グルタミン残基がアミド−２−ＰＥＧ基でキャップされており、２番目のアミノ酸残基がイプシロンアシルリシンであり、ＯＰリンカーがリシン残基１１に結合している。

表７および８は、半減期（Ｔ１／２）および「スクリーニング」半減期（括弧内の結果）も示しており、これは本質的に、より短い試験期間に基づいてＴ１／２を測定する代替的方法である。「スクリーニング」Ｔ１／２では、試験化合物を雄ＳｗｉｓｓＷｅｂｓｔｅｒマウスに静脈内投与した。下記時点：０．０８、５および３２時間において、眼窩後血脈洞出血により４匹のマウスから時点毎の血液試料を採取した。試験化合物の血中レベルをＥＬＩＳＡによって測定した。データは、３２時間対５分における試験化合物のパーセンテージとして報告された。ＷｉｎＮｏｎｌｉｎバージョン４．１（ＰｈａｒｓｉｇｈｔＣｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）を使用する追加のデータ分析を受けた後、同様の方式で正常なＴ１／２を計算した。曲線の形状に基づいて、データをモデルに当てはめた（すなわち、二次指数関数的な下降は２コンパートメントモデルに当てはまる等）。最良適合（すなわち、最低％ＣＶ）の基準は、反復再重み付け最小二乗に基づくものとした。

逆競争ＥＬＩＳＡによって測定した際の例示的なＡｎｇ−２結合ペプチド化合物のＩＣ５０値を、表８に提示する。ＩＣ５０値は、特別の定めのない限り、標的化ペプチドプラスリンカー（図３に示されている通り）および図３のリンカーを介して抗体（Ｐ）と連結している標的化ペプチドについて提供されている。表８において、化合物は、ヒト化アルドラーゼ抗体ｈ３８ｃ２および図３に示すリンカー構造（ＯＰ）と複合している。

トランケーション研究
組換えヒトＡｎｇ−２を、２〜８℃で終夜、１００μＬ中０．５μｇ／ｍＬで、マイクロタイタープレートにコーティングした。すべてのステップの間でプレートを洗浄し、その後のインキュベーションはすべて室温で発生させた。１ウェル当たり２５０μＬのＳｕｐｅｒＢｌｏｃｋでプレートを１〜３時間ブロックした。試験化合物を、１０ｎｇ／ｍＬで、リンカー（図３に示されている通り）およびｈ３８ｃ２と連結している化合物４３とあらかじめ混合した。その後、ペプチド混合物を１００μＬずつ、列挙されている最終濃度で添加し、プレートを密封し、１〜２時間インキュベートした。ＨＲＰ標識抗ヒトＩｇＧ試薬の１００μＬの１：２０，０００希釈物で１〜２時間、結合した化合物４３を検出した。最後に、１００μＬのＴＭＢ基質を１０分間添加し、１００μＬの２ＮＨ_２ＳＯ_４停止液で反応を停止させた。その後、４５０ｎｍでプレートを読み出し、６５０ｎｍで補正した（ＩＣ５０値は表９に示されている）。

異種移植片研究
Ｃｏｌｏ２０５細胞を１０％ＦＢＳＲＰＭＩ培地で培養し、０．１ｍｌのハンクス液（ＨＢＳＳ）中の３×１０^６細胞をヌードマウスの上部右側腹部に皮下注射した。７〜９日後、動物を、平均腫瘍サイズが２００〜３００ｍｍ^３となる適当な数の群に無作為に分けた。その後、マウスを必要量の本発明の化合物で処置し、腫瘍体積を２週間に１回計測した。その平均腫瘍体積が２０００ｍｍ^３に到達すると、動物を処分した。処分時に、腫瘍を秤量し、さらなる組織学的研究のために保管した。処置群対対照群の腫瘍体積における差異を計測することによって治効を評定した。結果は％Ｔ／Ｃとして報告され、ここで％Ｔ／Ｃは、％Ｔ／Ｃ＝（Ｖｔ−Ｖ０）／（Ｃｔ−Ｃ０）×１００として計算された［ここで、Ｖ０およびＶｔは、処置群の開始時および処分時における該群の平均腫瘍体積であった。Ｃ０およびＣｔは、対照群の開始時および処分時における該群の平均腫瘍体積であった］（表１０）。

（実施例２９）
以下の合成を図２８に提供する。

このように、本発明を大まかに開示し、上述の代表的な実施形態を参照して例示してきた。当業者であれば、その趣旨および範囲から逸脱することなく、本発明に様々な修正が為され得ることを認識するであろう。すべての刊行物、特許出願および交付済み特許は、参照することにより、各個別の刊行物、特許出願または交付済み特許が、参照することによりその全体が組み込まれることを具体的かつ個々に指示されているかのような場合と同程度まで、本明細書に組み込まれる。参照することにより組み込まれるテキスト中に含有されている定義は、この開示中の定義に矛盾する程度であれば除外される。

明確にするために別個の実施形態の文脈において記述されている本発明のいくつかの特色を、単一の実施形態において組み合わせて提供してもよいことが理解される。反対に、簡潔にするために単一の実施形態の文脈において記述されている本発明の様々な特色を、別個にまたは任意の適切なサブ組合せで提供してもよい。

本発明の一実施形態に関して考察されている任意の制限を、本発明のその他任意の実施形態に適用し得ることが具体的に検討されている。しかも、本発明の任意の組成物を本発明の任意の方法において使用してよく、本発明の任意の方法を、本発明の任意の組成物を生成または利用するために使用してよい。特に、特許請求の範囲に記述されている本発明の任意の態様は、単独で、または１つもしくは複数の追加の請求項および／もしくは明細書の態様と組み合わせて、特許請求の範囲および／または明細書中の他の箇所に述べられている本発明の他の態様と組合せ可能なものとして理解されたい。

特許請求項における「または（もしくは）」という用語の使用は、代替物のみを指すことが明示的に指示されているか、またはその代替物が相互排他的なものでない限り、「および／または」を意味するために使用されるが、本開示は、代替物のみと「および／または」とを指す定義を支持する。

本明細書で使用される場合、「ａ」または「ａｎ」は、別段の明確な指示がない限り、１つまたは複数を意味し得る。（１つまたは複数の）請求項において使用される場合、「を含む」という語と併せて使用する際には、「ａ」または「ａｎ」という語は、１つまたは１つを超えることを意味し得る。本明細書で使用される場合、「別の」は、少なくとも２番目以上を意味し得る。

「を含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ／ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」という語および「を有する／含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」という語は、本発明を参照して本明細書で使用される場合、規定された特色、整数、ステップまたは成分の存在を特定するために使用されるが、１つまたは複数の他の特色、整数、ステップ、成分またはそれらの群の存在または付加を排除しない。

Claims

と実質的に相同の配列を含むペプチドを含む抗血管形成（ＡＡ）標的化剤
［ここで、
Ｒ^１は、ＣＨ_３、Ｃ（Ｏ）ＣＨ_３、Ｃ（Ｏ）ＣＨ_３、Ｃ（Ｏ）ＣＨ_２ＣＨ_３、Ｃ（Ｏ）ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３、Ｃ（Ｏ）ＣＨ（ＣＨ_３）ＣＨ_３、Ｃ（Ｏ）ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３、Ｃ（Ｏ）ＣＨ（ＣＨ_３）ＣＨ_２ＣＨ_３、Ｃ（Ｏ）Ｃ_６Ｈ_５、Ｃ（Ｏ）ＣＨ_２ＣＨ_２（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_１〜５Ｍｅ、ジクロロベンゾイル（ＤＣＢ）、ジフルオロベンゾイル（ＤＦＢ）、ピリジニルカルボキシレート（ＰｙＣ）もしくはアミド−２−ＰＥＧ、アミノ保護基、脂質脂肪酸基または炭水化物であり、
Ｒ^２は、ＯＨ、ＮＨ_２、ＮＨ（ＣＨ_３）、ＮＨＣＨ_２ＣＨ_３、ＮＨＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３、ＮＨＣＨ（ＣＨ_３）ＣＨ_３、ＮＨＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３、ＮＨＣＨ（ＣＨ_３）ＣＨ_２ＣＨ_３、ＮＨＣ_６Ｈ_５、ＮＨＣＨ_２ＣＨ_２ＯＣＨ_３、ＮＨＯＣＨ_３、ＮＨＯＣＨ_２ＣＨ_３、カルボキシ保護基、脂質脂肪酸基または炭水化物であり、
ここで、
Ｑ^１、Ｅ^８、（ＡｃＫ）^９、Ｋ^１１、Ｔ^１２、Ｄ^１５、Ｑ^１６、Ｍ^１８、Ｌ^１９またはＧ^２２のうちの１つは、抗体中の結合性部位と直接的にまたは中間体リンカーを介して共有結合可能な求核性側鎖を含む連結残基によって置換されており、前記連結残基は、Ｋ、Ｙ、Ｔ、リシンの相同体、ホモシステイン、ホモセリン、ＤａｐおよびＤａｂ、またはＮ末端もしくはＣ末端を含む群より選択される］。
前記連結残基がＫ、Ｙ、Ｔ、ＤａｐおよびＤａｂからなる群より選択される、請求項１に記載のＡＡ標的化剤。
前記連結残基がＫである、請求項２に記載のＡＡ標的化剤。
（ＡｃＫ）^９、Ｋ^１１、Ｔ^１２、Ｄ^１５、Ｑ^１６、Ｍ^１８およびＬ^１９のうちの１つが前記連結残基によって置換されている、前記請求項のいずれかに記載のＡＡ標的化剤。
Ｋ^１１が前記連結残基によって置換されている、前記請求項のいずれかに記載のＡＡ標的化剤。
Ｒ^１がＣ（Ｏ）ＣＨ_３である、前記請求項のいずれかに記載のＡＡ標的化剤。
Ｒ^２がＮＨ_２である、前記請求項のいずれかに記載のＡＡ標的化剤。
式
Ｌ−［ＡＡ標的化剤］または
Ｌ’−［ＡＡ標的化剤］
を有する化合物
［式中、
［ＡＡ標的化剤］は、前記請求項のいずれかに記載のＡＡ標的化剤であり、Ｌは式−Ｘ−Ｙ−Ｚ−を有するリンカー部分であり、Ｌ’は式−Ｘ−Ｙ−Ｚ’を有するリンカー部分であり、ここで、
Ｘは、前記連結残基のアミノ末端、カルボキシ末端または側鎖を介してＡＡ標的化剤に結合しており、Ｃ、Ｈ、Ｎ、Ｏ、Ｐ、Ｓ、Ｆ、ＣＬ、ＢｒおよびＩからなる群より選択される任意の原子を含む生物学的に適合する接続鎖であり、ポリマーまたはブロックコポリマーを含んでよく、
Ｙは、少なくとも環構造を含む存在していてもよい認識基であり、
Ｚは、抗体中の結合性部位においてアミノ酸側鎖と共有結合を形成することができる反応基であり、
Ｚ’は、抗体中の結合性部位においてアミノ酸側との共有結合を含む結合部分である］。
環構造Ｙが、置換されていてもよい構造

を有する、請求項８に記載の化合物
［式中、ａ、ｂ、ｃ、ｄおよびｅは、独立に、炭素または窒素であり、ｆは、炭素、窒素、酸素または硫黄であり、Ｙは、十分な原子価の任意の２つの環位置においてＸおよびＺに独立に結合しており、ａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅまたはｆのうちの４つ以下は、同時に窒素であり、好ましくは、環構造中のａ、ｂ、ｃ、ｄおよびｅは、それぞれ炭素である］。
環構造Ｙがフェニルである、請求項８および９のいずれか一項に記載の化合物。
ＺまたはＺ’が、存在する場合、置換アルキル、置換シクロアルキル、置換アリール、置換アリールアルキル、置換ヘテロシクリルまたは置換ヘテロシクリルアルキルであり、ここで、少なくとも１個の置換基は、１，３−ジケトン部分、アシルβ−ラクタム、活性エステル、α−ハロケトン、アルデヒド、マレイミド、ラクトン、無水物、α−ハロアセトアミド、アミン、ヒドラジドまたはエポキシドである、請求項８から１０のいずれか一項に記載の化合物。
少なくとも１個の置換基が、置換１，３−ジケトンまたはアシルβ−ラクタムからなる群より選択される、請求項１１に記載の化合物。
Ｚが、存在する場合、構造

を有し、
Ｚ’が、存在する場合、構造

［式中、ｑ＝０〜５である］
を有し、抗体−Ｎ−が、存在する場合、抗体中の結合性部位における側鎖との共有結合である、
請求項８から１２のいずれか一項に記載の化合物。
Ｘが、前記連結残基に結合しており、置換または非置換であり、−Ｒ^２２−［ＣＨ_２−ＣＨ_２−Ｏ］_ｔ−Ｒ^２３−、−Ｒ^２２−シクロアルキル−Ｒ^２３−、−Ｒ^２２−アリール−Ｒ^２３−または−Ｒ^２２−ヘテロシクリル−Ｒ^２３−から選択され、ここで、
Ｒ^２２およびＲ^２３は、独立に、共有結合、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＲ^ｂ−、置換もしくは非置換の直鎖もしくは分岐鎖Ｃ_１〜５０アルキレン、置換もしくは非置換の直鎖もしくは分岐鎖Ｃ_１〜５０ヘテロアルキレン、置換もしくは非置換の直鎖もしくは分岐鎖Ｃ_２〜５０アルケニレンまたは置換もしくは非置換のＣ_２〜５０ヘテロアルケニレンであり、
Ｒ^ｂは、各出現時、独立に、水素、置換もしくは非置換のＣ_１〜１０アルキル、置換もしくは非置換のＣ_３〜７シクロアルキル−Ｃ_０〜６アルキルまたは置換もしくは非置換のアリール−Ｃ_０〜６アルキルであり、
ｔ＝２〜５０であり、
Ｒ^２２およびＲ^２３のサイズは、Ｘの主鎖長が約２００個以下の原子となるようなものである、
請求項８から１３のいずれか一項に記載の化合物。
Ｘが

である、請求項８から１４のいずれか一項に記載の化合物
［式中、ｖおよびｗは、Ｘの主鎖長が６〜１２個の原子となるように選択される］。
Ｘ−Ｙが

である、請求項１５に記載の化合物
［ｖ＝１または２、ｗ＝１または２、Ｒｂは水素である］。
配列番号１３９に記載のペプチドを含む、請求項８から１６のいずれか一項に記載の化合物。
式

を有する、請求項８から１６のいずれか一項に記載の化合物。
Ｚ基が、抗体中の結合性部位と共有結合している、請求項８から１８のいずれか一項に記載の化合物。
構造

を有する、請求項１９に記載の化合物。
抗体が触媒抗体であり、好ましくはアルドラーゼ触媒抗体である、請求項１９および２０のいずれか一項に記載の化合物。
前記抗体が、ｈ３８ｃ２由来のＶ_ＨおよびＶ_Ｌドメインを含む全長抗体、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）_２、Ｆ_ｖ、ｄｓＦ_ｖ、ｓｃＦ_ｖ、Ｖ_Ｈ、ダイアボディもしくはミニボディであるか、またはｈ３８ｃ２由来のＶ_ＨおよびＶ_ＬドメインならびにＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３およびＩｇＧ４からなる群より選択される定常ドメインを含む抗体である、請求項１９から２１のいずれか一項に記載の化合物。
抗体がｈ３８ｃ２ＩｇＧ１である、請求項１９から２２のいずれか一項に記載の化合物。
治療有効量の請求項８から２３のいずれか一項に記載の化合物または請求項１から７のいずれか一項に記載のＡＡ標的化剤を含む、医薬組成物。
５−フルロウラシル、イリノテカン、オキシラプラチン、ベバシズマブおよびセツキシマブからなる群より選択される化合物であることが好ましい、治療有効量の１種または複数の化学療法剤をさらに含む、請求項２４に記載の医薬組成物。
血管形成を阻害もしくは低減する、または血管形成障害に関連する疾患もしくは症状を治療もしくは予防するための方法における、請求項１から７のいずれか一項に記載のＡＡ標的化剤、または請求項８から２３のいずれか一項に記載の化合物、または請求項２４および２５のいずれか一項に記載の医薬組成物の使用。