JP2010208973A - Il−8及びgm−csf発現抑制剤 - Google Patents
Il−8及びgm−csf発現抑制剤 Download PDFInfo
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Abstract
【解決手段】地中海地方原産のシソ科植物であるローズマリー又はその抽出物を有効成分とするIL−8及びGM−CSFの発現抑制剤。該ローズマリーの抽出物は、水、アルコール類、多価アルコール類及びケトン類から選ばれる1種又は2種以上の極性溶剤で抽出したものであることが好ましい。
【選択図】なし
Description
また、胃食道逆流症において、食道でIL−8遺伝子の発現が亢進しており、症状の軽減によりその発現は速やかに低下することが報告されている(非特許文献5)。
従って、IL−8及びGM−CSFの発現やその作用を抑制することができれば、胃食道逆流症の改善、脂肪組織での血管新生の阻害、結膜炎の改善及びダニアレルギーの改善などに有用であると考えられる。
しかしながら、これまでにローズマリーが表皮細胞におけるIL−8及びGM−CSFの発現に対して与える影響については全く知られていない。
抽出方法は、浸漬、煎出、浸出、還流抽出、超臨界抽出、超音波抽出、マイクロ波抽出などのいずれでもよい。
なお、ローズマリーの含有量は、抽出物の乾燥物換算として算出したものである。
表皮角化細胞増殖用培地EpiLifeTM中にヒト表皮細胞(NHEK (F) 新生児包皮由来,クラボウ社)を2500個/cm2ずつ播種し、37℃にて細胞密度がサブコンフルエントになるまで培養した。PBS(−)にて洗浄後、5〜100μM H2O2を含む2.0ml PBS(−)を添加し、37℃にて1時間培養した。無処理コントロールは、PBS(−)で洗浄後、2.0ml PBS(−)を添加し、37℃にて1時間培養した。
表皮角化細胞増殖用培地EpiLifeTMで洗浄した後、新たに増殖用培地を2.0ml添加して培養を再開し、6時間後にそれぞれISOGEN(和光純薬工業(株))を用いて細胞の総RNAを回収し、これを鋳型としてスーパースクリプトIIIファーストストランド合成スーパーミックス(Invitrogen社)を用いてcDNAを作成した。このcDNAを用いてTaqMan(登録商標)Gene Expression Assays をプライマーおよびプローブとしてIL-8及びGM-CSF遺伝子発現量をリアルタイムPCRにより測定した(使用機器:ABI PRISM(登録商標)7000 シークエンスディテクションシステム)。
有意差の検定は分散分析により行い、有意水準は5%とした。
図1から明らかなように、過酸化水素によってヒト表皮細胞におけるIL-8遺伝子及びGM-CSF遺伝子の発現が上昇した。なお、図1におけるIL-8遺伝子及びGM-CSF遺伝子の発現変動は、無処理コントロールのIL-8遺伝子及びGM-CSF遺伝子の発現量を100とした場合の相対比(%)として表した。従って、当該過酸化水素負荷条件下の細胞におけるIL-8遺伝子及びGM-CSF遺伝子の発現抑制作用を指標とすれば、被検物質のIL-8及びGM-CSF発現抑制効果の評価が可能であると考えられる。
1)方法
[細胞培養]
培養ヒト表皮細胞(NHEK (F) 新生児包皮由来,クラボウ社)を表皮角化細胞増殖用培地EpiLifeTMに増殖添加剤(インスリン 0.5ml,hEGF 0.5ml,ハイドロコーチゾン 0.5ml,抗菌剤 0.5ml,BPE 2ml)を添加したもの(以下、増殖用培地)で培養した。継代には、0.025%トリプシン/0.01%EDTAを用いた。
培地を除き、PBS(−)で2回洗浄した後100μM H2O2を含むPBS(−)を2.0ml添加して37℃にて1時間培養した。無処理コントロールは、過酸化水素処理と同様にPBS(−)で洗浄後PBS(−)2.0mlを添加して37℃にて1時間培養した。
6wellプレートに表皮細胞を2500個/cm2ずつ播種し、2.0mlの増殖用培地中で培養した。細胞密度がサブコンフルエントに達したことを確認した後、サンプルを添加した培地に交換した。サンプル添加培地はファルコレックスローズマリー E(一丸ファルコス株式会社製 抽出溶媒50%エタノール水溶液)を最終濃度0.00075%残渣となるように増殖用培地に添加して作成した。
サンプル添加培地で24時間培養後、上記の過酸化水素処理を行い、その後増殖用培地で洗浄した後、新たに増殖用培地を2.0ml添加して12時間培養した。サンプルの細胞毒性は細胞の形態を観察し、異常の有無で判定した。なお、溶媒コントロールとしてサンプルの代わりに50%エタノール水溶液を用いた。
培養再開後、6時間および12時間後にそれぞれISOGEN(和光純薬工業(株))を用いて細胞の総RNAを回収し、これを鋳型としてスーパースクリプトIIIファーストストランド合成スーパーミックス(Invitrogen社)を用いてcDNAを作成した。このcDNAを用いて参考例1と同様にTaqMan(登録商標)Gene Expression Assays をプライマーおよびプローブとしてIL-8及びGM-CSF遺伝子発現量をリアルタイムPCRにより比較検討した。
ローズマリーエキス添加時のIL-8遺伝子発現量及び50%エタノール水溶液(溶媒コントロール)添加時のIL-8遺伝子発現量を図2に示す。また、ローズマリーエキス添加時のGM-CSF遺伝子発現量及び50%エタノール水溶液(溶媒コントロール)添加時のGM-CSF遺伝子発現量を図3に示す。図2及び3におけるIL-8遺伝子及びGM-CSF遺伝子の発現変動は、無処理コントロールのIL-8遺伝子及びGM-CSF遺伝子の発現量を100とした場合の相対比(%)として求めた。ローズマリーエキスは、過酸化水素負荷条件下の表皮細胞からのIL-8遺伝子及びGM-CSF遺伝子の両方の発現を有意に抑制した(図2及び3)。このことから、ローズマリーエキスにはIL-8及びGM-CSF発現抑制効果があることが確認された。
Claims (2)
- ローズマリー又はその抽出物を有効成分とするIL−8及びGM−CSF発現抑制剤。
- ローズマリーの抽出物が、水、アルコール類、多価アルコール類及びケトン類から選ばれる1種又は2種以上の極性溶剤で抽出したものである請求項1記載のIL−8及びGM−CSF発現抑制剤。
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Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2011256118A (ja) * | 2010-06-07 | 2011-12-22 | Kao Corp | Il−8及びgm−csf発現抑制剤 |
WO2022034833A1 (ja) * | 2020-08-11 | 2022-02-17 | 株式会社 資生堂 | Il-8抑制剤、皮膚抗老化剤、およびそれを用いて皮膚老化を抑制する方法 |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2000072685A (ja) * | 1998-08-31 | 2000-03-07 | Nagase & Co Ltd | 消化器潰瘍を抑制するための食品および医薬組成物 |
JP2001064192A (ja) * | 1999-08-25 | 2001-03-13 | Sunstar Inc | ランゲルハンス細胞の遊走抑制剤及び抗原提示抑制剤 |
JP2001316276A (ja) * | 2000-03-02 | 2001-11-13 | Meiji Seika Kaisha Ltd | 植物由来抽出物を配合してなる咳止め用組成物 |
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Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2000072685A (ja) * | 1998-08-31 | 2000-03-07 | Nagase & Co Ltd | 消化器潰瘍を抑制するための食品および医薬組成物 |
JP2001064192A (ja) * | 1999-08-25 | 2001-03-13 | Sunstar Inc | ランゲルハンス細胞の遊走抑制剤及び抗原提示抑制剤 |
JP2001316276A (ja) * | 2000-03-02 | 2001-11-13 | Meiji Seika Kaisha Ltd | 植物由来抽出物を配合してなる咳止め用組成物 |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
CACERES A ET AL: "SCREENING OF ANTIMICROBIAL ACTIVITY OF PLANTS POPULARLY USED IN GUATEMALA FOR THE TREATMENT OF DERMA", J ETHNOPHARMACOL, vol. 20(3), JPN6013025728, 1987, pages 223 - 227, ISSN: 0002541854 * |
DIMAYUGA R E ET AL: "ANTIMICROBIAL ACTIVITY OF MEDICINAL PLANTS FROM BAJA CALIFORNIA SUR (MEXICO)", PHARMACEUTICAL BIOL, vol. 36 (1), JPN6013025729, 1998, pages 33 - 43, ISSN: 0002541855 * |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2011256118A (ja) * | 2010-06-07 | 2011-12-22 | Kao Corp | Il−8及びgm−csf発現抑制剤 |
WO2022034833A1 (ja) * | 2020-08-11 | 2022-02-17 | 株式会社 資生堂 | Il-8抑制剤、皮膚抗老化剤、およびそれを用いて皮膚老化を抑制する方法 |
CN116322731A (zh) * | 2020-08-11 | 2023-06-23 | 株式会社资生堂 | Il-8抑制剂、皮肤抗老化剂、和使用它们来抑制皮肤老化的方法 |
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