JP2010183907A - 組換え抗vla4抗体分子 - Google Patents
組換え抗vla4抗体分子 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2010183907A JP2010183907A JP2010056608A JP2010056608A JP2010183907A JP 2010183907 A JP2010183907 A JP 2010183907A JP 2010056608 A JP2010056608 A JP 2010056608A JP 2010056608 A JP2010056608 A JP 2010056608A JP 2010183907 A JP2010183907 A JP 2010183907A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- seq
- antibody
- vla4
- humanized
- antibodies
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/2839—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the integrin superfamily
- C07K16/2842—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the integrin superfamily against integrin beta1-subunit-containing molecules, e.g. CD29, CD49
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
- A61P11/06—Antiasthmatics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
- A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
- C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
- C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
Abstract
【解決手段】VLA4に対する特異性及び抗原結合部位を有するヒト化組換え抗体分子であって、可変領域の相補性決定領域(CDR)の少なくとも1つが非ヒト抗VLA4抗体から導かれ且つ該抗体がマウスHP1/2モノクローナル抗体の効力の約20〜100%の効力を有する、上記のヒト化組換え抗体分子。
【選択図】なし
Description
天然の免疫グロブリンは、種々の断片例えば酵素開裂によって誘導することの出来るFab、(Fab’)2及びFc断片を有するものとして長年にわたって公知である。天然の免疫グロブリンは、一般に、各上腕の自由末端側に抗原結合部位を有するY型分子を含む。構造の残り特にYの幹は、免疫グロブリンと関係するエフェクター機能を媒介する。
しかしながら、殆どのMAbは、ゲッ歯類(即ち、マウス、ラット)の脾臓細胞とゲッ歯類のミエローマ細胞との融合により生成される。従って、それらは、本質的にゲッ歯動物の蛋白質である。
初期のキメラ抗体製造のための方法に続いて、新たなアプローチが特許文献6[12]に記載され、それにより、抗体は一の種についてのそれらの相補性決定領域(CDR)を他の種からのもので代用することによって変更される。この方法を用いて、例えば、ヒトの重鎖及び軽鎖Igの可変領域ドメインからのCDRを別のマウス可変領域ドメインからのCDRで代用することが出来る。これらの変更されたIg可変領域を、続いて、ヒトIg定常領域と結合して、置換されたマウスCDRを除いて全体的にヒトの組成である抗体を造ることが出来る。かかるマウスCDR置換された抗体は、相当少ないマウス成分しか含まないので、ヒトにおいて、キメラ抗体と比較して、相当に減じた免疫応答を誘出することはありそうにないと予想され得る。
ァーする。この方法 の最後の段階で、所望のイソタイプ(通常、CHについてはガンマー1及びCLについてはカッパー)のヒト定常領域遺伝子セグメントを加え且つこれらのヒト化重鎖及び軽鎖遺伝子を、哺乳動物細胞内で同時発現させて可溶性のヒト化抗体を生成する。
現在まで、ヒト化組換え抗体は、主として急性疾患状態の治療適用(非特許文献5[5])又は診断用イメージング(非特許文献13[21])のために開発されてきた。最近、臨床研究が、NEWM及びREIV領域フレームワークを有する少なくとも2つのヒト化抗体、CAMPATH−IH(非特許文献4[4])及びヒト化抗胎盤アルカリホスファターゼ(PLAP)(非特許文献13[21])を用いて開始され、これらの研究は、初期に、これらの抗体に対する如何なる顕著な免疫反応も存在しないことを示した。CAMPATH−IHを用いる治療コースは、非ホジキンリンパ腫を有する2人の患者に対して緩解を与え、それ故、慢性疾患状態における効力を示した(非特許文献14[23])。更に、CAMPATH−IHの免疫原性の欠如が、これらの2人の患者の30日及び43日の日々の治療の後に示された。ヒト化抗体に対する十分な寛容がCAMPATH−IHを用いて認められたので、ヒト化抗体を用いる治療は、急性疾患の予防及び低死亡率の病気の治療に有望である。
血管内皮細胞は、血管の裏打ちを構成し、通常、循環白血球には低いアフィニティーしか示さない(非特許文献15[24])。炎症部位におけるサイトカインの放出は(及び免疫反応に応答して)、それらの活性化を引き起こして、表面抗原の宿主の増大した発現を生じる(非特許文献16[25];非特許文献17[26];非特許文献18[27];非特許文献19[28])。これらは、接着蛋白質ELAM−1(好中球に結合する)(非特許文献20[29])、ICAM−1(すべての白血球と相互作用する)(非特許文献21[30];非特許文献17[26];非特許文献22[31];非特許文献23[32])及びVCAM−1(リンパ球に結合する)(非特許文献24[33])を含む。これらのサイトカイン誘導された接着分子は、血管外組織への白血球補充において重要な役割を演じるらしい。
重要なことには、エピトープ「B」に対する抗体の1つの特定のグループは、すべてのVLA4依存性接着機能の有効なブロッカーである(非特許文献44[54])。かかるVLA4のエピトープBに対するモノクローナル抗体(例えば、HP1/2MAbを含む)の調製は、非特許文献45[55]により記載されている。HP1/2の結合アフィニティーに匹敵するVLA4に対する類似の特異性及び高い結合アフィニティーを有する抗体は、アッセイ試薬、診断薬及び治療剤としてに有用なヒト化組換え抗VLA4抗体の調製物に特に有望な候補であり得る。
本発明は、組換え抗VLA4抗体分子を構築する方法を提供する。特に、本発明による組換え抗体は、抗VLA抗体の重鎖及び/又は軽鎖可変領域から導いた抗原結合領域を含む。
(項目1)
抗VLA4抗体の重鎖可変領域または軽鎖可変領域に由来する抗原結合領域を含む、組換え抗体分子。
(項目2)
VLA4に対する特異性を有し、かつ抗原結合部位を有するヒト化組換え抗体分子であって、ここで、可変領域の少なくとも1つの相補性決定領域(CDR)は、非ヒト抗VLA4抗体に由来する、ヒト化組換え抗体分子。
(項目3)
31〜35位(CDR1)、50〜65位(CDR2)および95〜102位(CDR3)(Kabatの番号付け)に非ヒトCDRを含む、項目2に記載のヒト化組換え重鎖。(項目4)
フレームワークの27〜30位(Kabatの番号付け)に非ヒト残基を含む、項目3に記載のヒト化組換え重鎖。
(項目5)
フレームワークの75位(Kabatの番号付け)に更なる非ヒト残基を含む、項目4に記載のヒト化組換え重鎖。
(項目6)
フレームワークの77〜79位または66〜67位および69〜71位または84〜5位または38位および40位または24位に更なる非ヒト残基を含む、項目5に記載のヒト組換え重鎖。
(項目7)
24〜34位(CDR1)、50〜56位(CDR2)および89〜97位(CDR3)に非ヒトCDRを含む、項目2に記載のヒト化組換え軽鎖。
(項目8)
フレームワークの60位および67位に非ヒト残基を含む、項目7に記載のヒト化組換え軽鎖。
(項目9)
項目3に記載の少なくとも1つの抗体重鎖および項目7に記載の少なくとも1つの抗体軽鎖を含む、ヒト化組換え抗体分子。
(項目10)
前記非ヒトCDRが、HP1/2マウスモノクローナル抗体に由来する、項目7に記載のヒト化組換え抗体分子。
(項目11)
項目3に記載の抗体重鎖をコードするDNA。
(項目12)
項目7に記載の抗体軽鎖をコードするDNA。
(項目13)
項目10に記載の抗体分子をコードするDNA。
(項目14)
項目11に記載のDNAを含むベクター。
(項目15)
項目12に記載のDNAを含むベクター。
(項目16)
項目13に記載のDNAを含むベクター。
(項目17)
項目3に記載の抗体重鎖をコードするDNAを、項目7に記載の抗体軽鎖をコードするDNAと作動的に組み合わせて含む、発現ベクター。
(項目18)
項目10に記載の抗体分子をコードするDNAを含む、発現ベクター。
(項目19)
項目14に記載のベクターおよび項目15に記載のベクターを用いてトランスフォームした、宿主細胞。
(項目20)
項目16に記載のベクターを用いてトランスフォームした、宿主細胞。
(項目21)
ヒト化組換え抗VLA4抗体の製造方法であって、以下:
(a)抗体重鎖または軽鎖をコードするDNA配列を有するオペロンを含む発現ベクターを製造する工程であって、ここで、可変ドメインの少なくとも1つのCDRは、非ヒト抗VLA4抗体に由来し、抗体鎖の残りの免疫グロブリン由来部分は、ヒト免疫グロブリンに由来する、工程;
(b)相補的抗体軽鎖または重鎖をコードするDNA配列を有するオペロンを含む発現ベクターを製造する工程であって、ここで、可変ドメインの少なくとも1つのCDRは、非ヒト抗VLA4抗体に由来し、抗体鎖の残りの免疫グロブリン由来部分は、ヒト免疫グロブリンに由来する、工程;
(c)各々のベクターを用いて宿主細胞をトランスフェクトする工程;および
(d)該トランスフェクトした細胞を培養して、該ヒト化組換え抗VLA4抗体分子を製造する工程
を包含する、方法。
(項目22)
前記重鎖および軽鎖をコードするDNA配列が、同一のベクターを含む、項目21に記載の方法。
(項目23)
項目1に記載の抗体分子またはその断片を、製薬上許容しうる希釈剤、賦形剤またはキャリアーと共に含む、治療用組成物。
(項目24)
項目1に記載の抗体分子またはその断片を検出可能に標識された形態で含む、診断用組成物。
(項目25)
項目1に記載の抗体の治療有効量をヒト被験体または動物被験体に投与する工程を包含する、治療方法。
(項目26)
哺乳動物被験体における特定の防御系の応答から生じる炎症を治療する方法であって、該方法は、そのような治療を必要とする被験体に、該炎症を抑制するのに十分な量の抗炎症剤を提供する工程を包含し、ここで、該抗炎症剤は、項目1に記載の抗体である、方法。
(項目27)
VH−STAW(SEQ ID NO:39)、VH−KAITAS(SEQ ID NO:43)、VHSSE(SEQ ID NO:47)、VH−KRS(SEQ ID NO:51)およびVH−AS(SEQ ID NO:55)からなる群より選択される重鎖可変領域を含むヒト化重鎖を、VK−DQL(SEQ ID NO:31)、VK2−SVMDY(SEQ ID NO:63)およびVK3−DQMDY(SEQ ID NO:67)からなる群より選択される軽鎖可変領域を含むヒト化軽鎖と共に含む抗体の特徴を有する、ヒト化組換え抗VLA4抗体分子
(項目28)
項目27に記載のヒト化重鎖およびヒト化軽鎖をコードするDNA。
(項目29)
項目28に記載のDNAを含む、ベクター。
(項目30)
項目27に記載の抗体分子をコードするDNAを含む発現ベクター。
(項目31)
項目29に記載のベクターを用いてトランスフォームした宿主細胞。
(項目32)
項目30に記載のベクターを用いてトランスフォームした宿主細胞。
(項目33)
ATCC CRL 11175である、項目32に記載の宿主細胞。
(項目34)
ヒト化組換え抗VLA4抗体分子であって、VH−AS(SEQ ID NO:55)の重鎖可変領域を含むヒト化重鎖をVK2−SVMDY(SEQ ID NO:63)の軽鎖可変領域を含むヒト化軽鎖と共に含む抗体の効力の約20%〜約100%の効力を有する、ヒト化組換え抗VLA4抗体分子。
(項目35)
項目27または34に記載の抗体分子またはそれらの断片を、製薬上許容しうる希釈剤、賦形剤またはキャリアーと共に含む、治療用組成物。
(項目36)
項目27または34に記載の抗体分子またはそれらの断片を、検出可能に標識された形態で含む、治療用組成物。
(項目37)
項目27または34に記載の抗体の有効量をヒト被験体または動物被験体に投与する工程を包含する、治療方法。
(項目38)
哺乳動物被験体における特定の防御系の応答から生じる炎症を治療するための方法であって、該方法は、そのような治療を必要とする被験体に、該炎症を抑制するのに十分な量の抗炎症剤を提供する工程を包含し、ここで、該抗炎症剤は、項目27または34に記載の抗体である、方法。
(項目39)
ATCC CRL 11175によって産生される抗体であるか、またはATCC CRL 11175によって産生される抗体の特徴を有する抗体である、ヒト化組換え抗VLA4抗体分子。
(項目40)
ATCC CRL 11175によって産生される抗体の効力の約20%〜約100%の効力を有する、ヒト化組換え抗VLA4抗体分子。
(項目41)
マウスモノクローナル抗体HP1/2によって産生される抗体の効力の約20%〜約100%の効力を有する、ヒト化組換え抗VLA4抗体分子。
モノクローナル抗体を生成するための技術は周知である。簡単に言えば、不滅細胞系統(典型的には、ミエローマ細胞)を、所定の抗原例えばVLA4を発現している全細胞で免疫化した哺乳動物からのリンパ球(典型的には、脾臓細胞)と融合させ、その結果生成したハイブリドーマ細胞の培養上清をその抗原に対する抗体についてスクリーニングする(Kohler等、1975[1]を参照されたい)。
(マウス抗VLA4可変領域をコードするDNA配列の単離)
(A.HP1/2重鎖及び軽鎖cDNAの単離)
VLA4に対する特異性を有するヒト化組換え抗体をデザインするためには、マウスHP1/2重鎖及び軽鎖の可変ドメインの配列を決定することが第1に必要であった。この配列は、Tempest等、1991[5]にて参照される方法によって細胞質RNAから合成された重鎖及び軽鎖cDNAから決定された。
細胞質RNA(〜200μg)をFavaloro等、1980[63]の方法によって、150cm2フラスコ中の準コンフルエントのHP1/2産生ハイブリドーマ細胞(約5×105対数期細胞)から調製した。これらの細胞をペレット化して上清を抗体の存在について、Inno−Liaマウスモノクローナル抗体イソタイピングキット(ベルギー、Antwerp,Innogenetics)を用いて固相ELISAによってアッセイした(カッパー結合体及びラムダ結合体の両者を使用)。抗体をこの方法によってIgG1/κであることを確認した。
cDNAをHP1/2 RNAから、マウスIgG1CH1又はマウスカッパー定常ドメインの5’末端に基づくプライマーから開始する、1μl/50μlPharmacia(英国、Milton Keynes)RNA Guard(商標)及び250マイクロモルのdNTPを含む逆転写酵素緩衝液中の約5μgRNA及び25pモルプライマーを用いる逆転写によって合成した。これらのプライマーCG1FOR及びCK2FORの配列をそれぞれSEQ ID NO:1及びSEQ ID NO:2として示す。この混合物を70℃まで加熱し、次いでゆっくり室温まで冷却する。次いで、100単位/50μlのMMLV逆転写酵素(LifeTechnologies,英国、Paisley在)を加え、反応を42℃で1時間進行させた。
マウスMAb可変領域のポリメラーゼ連鎖反応(PCR)を、例えばアンカードPCR又は保存配列に基づくプライマー等の手順の変法を用いて達成することが出来る(Orlandi等、1989[64]を参照されたい)。Orlandi等、[64],Huse等、1989[65]並びにJones及びBendig,1991[66]は、幾つかの可変領域プライマーを記載している。しかしながら、我々は、かかるプライマーの多く特にHP1/2誘導したVK配列の軽鎖PCRに対するものを用いて成功していない。
VHDNAの増幅用に用いたプライマーは、配列決定用ベクター中へのクローニングを容易にするPstI及びHindIII制限酵素部位を含んでいる。一般的クローニング及びライゲーション技術は、Molecular Cloning,A Laboratory Manual 1982,[68]に記載されたものである。増幅したDNAをPstIで消化して内部PstI部位をチェックし、内部PstI部位を見出した。それ故、VHDNAをPstI−PstI断片及びPstI−HindIII断片としてM13mp18及び19中にクローン化した。2つの独立のcDNA調製物からの生成したクローンのコレクションを、シーケナーゼ(商標)(United States Biochemicals,米国、オハイオ、Cleveland 在)を用いて、ジデオキシ法(Sanger等、1977,[69])によって配列決定した。約100〜250bpの範囲の配列を、25クローンの各々から決定した。配列決定した4000より多いヌクレオチドの内、3つのPCR誘導した過渡的突然変異が3つの分離したクローン中にあった。HP1/2VHDNA配列及びその翻訳されたアミノ酸配列を、それぞれ、SEQ
ID NO:5及びSEQ ID NO:6に示す。最初の8アミノ酸が、PCRで用いられた5’プライマーによって指図されていることは注意すべきである。コンピューター補助された比較は、HP1/2VH[SEQ ID NO:5及び6]がファミリーIICのメンバーであることを示す(Kabat等、1991[15])。HP1/2VH[SEQ ID NO:5及び6]とファミリーIICのコンセンサス配列との間の比較は、単に異常な残基がアミノ酸の80、98及び121位にあることを示した(Kabatの番号付けでは、79、94及び121位)。サブグループIICにおいてTyr80が不変であるにもかかわらず、他の配列決定したマウスVH領域は、この位置に他の芳香族アミノ酸を有する(但し、Trpを有するものはない)。ヒト及びマウスのVHの大多数は、Kabatの位置94にアルギニン残基を有する。HP1/2VH中のAsp94の存在は、極めて稀である(この位置で負に帯電した残基の報告例は1つしかない)。Kabatの位置113のプロリンも又異常であるが、そのCDRからの距離からして、CDRのコンホメーションにおいて重要であることはありそうもない。CDR1を作っているアミノ酸は、3つの他の配列決定されたマウスVH領域に見出された。しかしながら、CDR2及びCDR3は、HP1/2にユニークであり、如何なる他の報告されたマウスVH中にも見出されない。
VKDNAの増幅に用いたプライマーは、酵素EcoRI及びHindIIIに対する制限部位を含んでいる。プライマーVK1BACK[SEQ ID NO:7]、VK5BACK[SEQ ID NO:4]及びVK7BACK[SEQ ID NO:8]を用いて得たPCR生成物を精製してM13中にクローン化した。信頼すべきカッパー配列は、VK5BACK[SEQ ID NO:4]を用いてのみ得られた。約200〜350bpの領域の配列を、2つの独立のcDNA調製物からの10クローンの各々から、シーケナーゼ(商標)(United States Biochemica1s,米国、オハイオ、Cleveland在)を用いて、ジデオキシ法(Sanger等、1977,[69])によって配列決定した。配列決定した2kbより多くの内で、2つのクローンのみが、それぞれ、1つのPCR誘導された過渡的突然変異を含んでいた。
(CDRグラフト抗VLA4抗体のデザイン)
CDRグラフト抗VLA4抗体をデザインするためには、マウスHP1/2のどの残基が軽鎖及び重鎖のCDRを含むのかを決定することが必要である。3つの超可変領域(一層変化の少ない可変フレームワーク配列の中にある)が軽鎖と重鎖の両方において見出されている(Wu及びkabat,1970 [16];Kabat等、1991[15])。殆どの場合において、これらの超可変領域は、CDRに対応するが、それを超えて広がってもよい。マウスHP1/2VH及びVK鎖のアミノ酸配列を、それぞれ、SEQ ID NO:6及びSEQ ID NO:10に示す。マウスHP1/2のCDRは、Kabat等、1991[15]により、他のVH及びVK配列との整列によって解明された。これらのマウスHP1/2VHのCDRは、下記のように、同定され、ここに開示するヒト化VH配列中で同定された残基に対応している:
CDR1 AA31〜AA35
CDR2 AA50〜AA66
CDR3 AA90〜AA110
これらは、それぞれ、Kabatの番号付けにおけるAA31〜AA35、AA50〜AA65及びAA95〜AA102に対応している。マウスHP1/2VKのCDRは、下記のように、同定され、ここに開示するヒト化VK配列中で同定された残基に対応している:
CDR1 AA24〜AA34
CDR2 AA50〜AA56
CDR3 AA89〜AA97
これらは、Kabatの番号付けにおける同じ番号のアミノ酸に対応している。従って、VK(VHではない)の境界のみがKabatのCDR残基に対応した。HP1/2CDRを受容するために選択したヒトフレームワークは、重鎖及び軽鎖のそれぞれについてNEWM及びREIであった。NEWM及びREI配列は、Kabat等、1991[15]に公開されている。
(CDR配列の移植及び選択したフレームワーク残基の突然変異誘発)
CDRのヒトフレームワーク中への移植を、M13突然変異誘発ベクターを用いて実施した。実施例2で概説したCDR配列を受容するために選択したヒトフレームワークをNEWM(VH用)及びREI(VK用)から導いた(各々、M13突然変異誘発ベクター中)。VH及びVKについて用いるM13突然変異誘発ベクターは、それぞれ、M13VHPCR1及びM13VKPCR2であった。M13VKPCR2は、Orlandi等、1989[64]に記載されたように、M13VHPCR1と同一である。但し、バリン(GTG)からグルタミン(GAA)への単一アミノ酸変化が、REI VKコード配列のフレームワーク4にある。Orlandi等、1989[64]により記載されたM13VHPCR1は、抗ハプテン(4−ヒドロキシ−3−ニトロフェニルアセチルカプロン酸)抗体から導かれたCDRを有するNEWMフレームワーク配列であるVH領域に対するコード配列を含むM13である。これらの無関係のVHCDRを、下記のように、位置指定突然変異導入法によって、HP1/2VHから導いたCDRで置換する。M13VHPCR1によりコードされたVH領域の配列(DNA及びアミノ酸)をSEQ ID NO:14及び15として示す。M13VKPCR2は、Orlandi等、[64]により記載されたM13VKPCR1と同様に、抗リゾチーム抗体から導いたCDRを有するN末端修飾REIフレームワーク配列であるVK領域に対するコード鎖を含むM13である。これらの無関係のVKCDRを、下記のように、位置指定突然変異導入法によって、HP1/2VKから導いたCDRで置換する。M13PCR2によってコードされたVK領域の配列(DNA及びアミノ酸)を、SEQ ID NO:16及び17として示す。
Type Culture Collection(メリーランド、Rockville 在、ATCC)から入手することが出来る。ELISA陽性クローンを増大させて、抗体を培地からプロテインAアフィニティークロマトグラフィーにより精製した。トランスフェクトした細胞を、実施例7に記載のようにして、抗VLA4抗体活性についてアッセイする。
(CDRグラフト抗体の修飾)
上記の実施例2及び3に記載のような抗VLA4抗体を生成するためのデザイン及び調製のステージの次に、更なる経験的修飾のステージを用いて上首尾にヒト化組換え抗VLA4抗体を調製した。実施例3に記載のステージ1修飾は、我々の一次配列分析及び上首尾に抗体をヒト化する試みにおける経験に基づくものであった。ステージ2と称する次の修飾は、部分的に我々の3Dモデリングデータの分析に基づく経験的なものであった。VH領域について、ステージ3と称する更なる修飾は、アフィニティーその他の抗体特性の任意の残存する欠点を修正するために経験的に為されたいわゆる「スキャニング」修飾であった。これらの幾つかのステージで為された修飾は、ヒト化抗VLA4抗体のアフィニティーその他の所望の特性の最適化を目的とする種々のアミノ酸ブロックの経験的変更であった。種々のステージで為された修飾が何れも所望の特性を有する抗体を生じた訳ではない。
(a.ステージ2修飾)
VHフレームワーク内の更なる経験的変更を、コンピューターモデリングを利用して行ない、そのDNA配列を有するステージ2構築物及びその翻訳生成物を生成した(それぞれ、SEQ ID NO:32及びSEQ ID NO:33に示す)。ステージ1VH領 域のコンピューターモデリングを用いて、我々は、ステージ2についてのフレームワーク内の単一変更(即ち、位置75のLys(Kabatの番号付け、即ちSEQ ID
NO:33中の76位)をSerで代用する)を為すことを決定した。この決定は、部分的に、Lys−75がCDR1に位置してそのコンホメーションを変え得る可能性に基づくものであった。実施例3で記載したステージ1CDRグラフトHuVHを含むM13ベクターを、2ステップPCR指示突然変異誘発のためのテンプレートとして用いた(Ho等、1989[74]により記載された重複/伸長法を使用)。第1ステップにおいて、2つの別々のPCRをセットアップした。1つは、末端プライマーオリゴ10[SEQ
ID NO:24]及び所望の突然変異を含むプライマー684[SEQ ID NO:34]を用い、他は、反対の末端プライマーオリゴ11[SEQ ID NO:26]及びプライマー683[SEQ ID NO:35](これは、第1の突然変異誘発プライマーと相補的である)を用いた。このPCRの最初の対の増幅生成物を、次いで、一緒に混合して、第2PCRステップを、末端プライマーオリゴ10及び11(それぞれ、SEQ ID NO:24及びSEQ ID NO:26)のみを用いて行なった。このPCRの突然変異誘発した増幅生成物を、次いで、M13mp19中にクローン化して配列決定し、LysからSerへの変化(ステージ2又は「S突然変異体」)を有する突然変異体を同定した。
更なる経験的変更を、ステージ3構築物として作成した。ステージ3において、主として経験的理由のために、一連の5つの異なるアミノ酸のブロック変更を作成して効力を改善することを試みた。これらの構築物は、STAW、KAITAS、SSE、KRS及びASと称する。すべては、ステージ2で変更した75位のSer(Kabatの番号付け)[SEQ ID NO:35の76位]及び上記の他の変更を含む。これらの構築物の各々を、2ステップPCR指示突然変異誘発により、ステージ2のSer突然変異体について上述したHo等、1989[74]の重複/発現法を用いて調製した。STAWについて、更なる変更は、77位のGlnからThr、78位のPheからAla及び79位のSerからTrp(Kabatの番号付け)であった。これらの変更は、末端プライマーオリゴ10[SEQ ID NO:24]及び11[SEQ ID NO:26]を突然変異誘発プライマー713[SEQ ID NO:36]及び716[SEQ ID NO:37]と共に用いて達成した。STAW VHDNA配列及びその翻訳アミノ酸配列を、それぞれ、SEQ ID NO:38及びSEQ ID NO:39に示す。更なる変更ArgからLys(66位)、ValからAla(67位)、MetからIle(69位)、LeuからThr(70位)及びValからAla(71位)(Kabatの番号付け)を有するKAITASを、オリゴ10[SEQ ID NO:24]及び11[SEQ ID NO:26]をオリゴ706[SEQ ID NO:40]及び707[SEQ ID NO:41]と共に用いて調製した。KAITAS VHDNA配列及びその翻訳アミノ酸配列を、それぞれ、SEQ ID NO:42及びSEQ ID NO:43に示す。SSEは、更なる変更AlaからSer(84位)及びAlaからGlu(85位)(Kabatの番号付け)を有した(オリゴ10及び11をオリゴ768[SEQ ID NO:44]及び769[SEQ ID NO:45]と共に用いて達成)。SSE VHDNA 配列及びその翻訳アミノ酸配列を、それぞれ、SEQ ID NO:46及びSEQ ID NO:47に示す。KRSは、更なる変更ArgからLys(38位)及びProからArg(40位)(Kabatの番号付け)を有した(オリゴ10[SEQ ID NO:24]及び11[SEQ ID NO:26]並びにオリゴ704[SEQ ID NO:48]及び705[SEQ ID NO:49]の使用による)。KRS VHDNA配列及びその翻訳アミノ酸配列を、それぞれ、SEQ ID NO:50及びSEQ ID NO:51に示す。ASは、オリゴ10[SEQ ID NO:24]及び11[SEQ ID NO:26]並びにオリゴ745[SEQ ID NO:52]及び746[SEQ ID NO:53]に由来する更なる変更ValからAlaを24位(Kabatの番号付け)に有した。AS VHDNA配列及びその翻訳アミノ酸配列を、それぞれ、SEQ ID NO:54及びSEQ ID NO:55に示す。CDRグラフトしたステージ3フレームワーク配列の、NEWM、ステージ0(下記参照)、ステージ1及びステージ2配列との整列を表Iに示す。重要なことに、実施例7に示したように、STAW及びASヒト化抗体の効力は改善されたが、他方、KAITAS及びKRSヒト化抗体はより良い効力を有しなかった。これは、予想しえなかった。
ステージ1を生成するために作成した28〜30位(NIK)及び94位(D)の2ブロックの変更を、28〜30位(TFS)、94位(R)又は27〜30位(TFS)と94位(R)の両方において突然変異させてNEWMに戻した。これらの構築物は、それぞれ、ステージ0−A、0−B及び0−Cと称した。これらの構築物の各々を、2ステップPCR指示突然変異誘発により、ステージ2のSer突然変異体について上述したHo等、1989[74]の重複/伸長法を用いて調製した。ステージ0−A及び0−Bは、ステージ1から生成し;ステージ0−Cは、ステージ0−Aから下記のようにして生成した。ステージ0−Aについて、変更は、94位のAspからArgであった。この変更は、末端プライマーオリゴ10[SEQ ID NO:24]及び11[SEQ ID NO:26]を突然変異誘発プライマー915[SEQ ID NO:56]及び917[SEQ ID NO:57]と共に用いて達成した。ステージ0−Bについて、変更は、28〜30位のAsn−Ile−LysからThr−Phe−Serであった。これらの変更は、末端プライマー10[SEQ ID NO:24]及び11[SEQ ID NO:26]を突然変異誘発プライマー918[SEQ ID NO:58]及び919[SEQ ID NO:59]と共に用いることによって達成した。最後に、ステージ0−Cについては、変更は、ステージ0−Aでの94位のAspからArgへの変更に加えて、28〜30位のAsn−Ile−Lys−からThr−Phe−Serであった。これらの変更は、ステージ0−B構築物について上述したのと同じ末端プライマー及び突然変異誘発プライマーを用いて達成した。
(2.軽鎖の修飾)
我々の経験において、ヒト化軽鎖は、一般に、僅かの修飾(それが必要である場合でも)しか必要としない。しかしながら、ヒト化抗VLA4抗体の調製において、HP1/2の軽鎖は幾つかの経験的変更を必要とすることが明らかとなった。例えば、マウス軽鎖を有するステージ2構築物(Ser突然変異体)のヒト化重鎖は、マウスHP1/2より約2.5倍効力が低かったが、他方、ヒト化軽鎖を有する同じヒト化重鎖は、約4倍効力が低かった。ステージ1ヒト化VK構築物は、VK1(DQL)と称し、そのDNA配列及びその翻訳アミノ酸配列を、それぞれ、SEQ ID NO:30及びSEQ ID NO:31に示す。DQL突然変異は、VK領域の初期クローニングにおいて用いたPCRプライマーから生じた(実施例1参照)。別法をこの軽鎖に行なって、2つの突然変異体SVMDY及びDQMDY(それぞれ、VK2及びVK3)を生成した。SVMDY突然変異体は、DQL配列から、DY配列については、オリゴ10[SEQ ID NO:24]及び11[SEQ ID NO:26]を用いて、SVM配列については、オリゴ697[SEQ ID NO:60]及び698[SEQ ID NO:61]を用いて調製した。VK2(SVMDY)DNA配列及びその翻訳アミノ酸配列を、それぞれ、SEQ ID NO:62及びSEQ ID NO:63に示す。DQMDY配列は、末端プライマー10[SEQ ID NO:24]及び11[SEQ ID NO:26]を突然変異誘発プライマー803[SEQ ID NO:64]及び804[SEQ ID NO:65]と共に用い、SVMDY配列をテンプレートとして用いる2ステップPCR指示突然変異誘発によって、元のREIフレームワーク配列に戻した。VK3(DQMDY)DNA配列及びその翻訳アミノ酸配列を、それぞれ、SEQ ID NO:66及びSEQ ID NO:67に示す。アミノ末端における変更(SVM対DQM)は、無関係であり、マウス軽鎖のアミノ末端に関係する。他の2つの変更D及びYを行なって効力を改善し、実際、実施例7に記載のように、そのようにした。CDRグラフトDQL(VK1)、SVMDY(VK2)及びDQMDY(VK3)フレームワーク配列のREI配列と比較した整列を表IIに示す。
或は、HP1/2VH領域[SEQ ID NO:5]に基づくヒト化VH領域配列を調製することが出来る。かかる選択肢の一つは、VH−PDLNと称するものである。PDLN VHのDNA配列及びその翻訳アミノ酸配列を、それぞれ、SEQ ID NO:68及びSEQ ID NO:69に示す。
(実施例5)
(組換え抗VLA4抗体の発現)
実施例1〜4によって調製したVH領域配列及びVK領域配列の各々を、定常領域配列と共に、発現ベクター中にトランスファーし、それらのベクターで、好ましくは電気穿孔法によって、哺乳動物細胞をトランスフェクトする。これらの重鎖及び軽鎖配列は、別個のベクター上にコードされて細胞に同時トランスフェクトしてもよいし、或は、重鎖及び軽鎖配列を単一ベクターでコードしてトランスフェクトしてもよい。かかる単一ベクターは、3つの発現カセット(1つはIg重鎖用、1つはIg軽鎖用、そして1つは選択マーカーである)を含む。抗体の発現レベルを、トランスフェクション後、下記のように又は実施例7に記載のようにして測定する。
(アッセイ用調整培地からのMAbの精製)
最大結合若しくは最大阻害の半分(half−maximal)の正確な値を得るためには、濃度既知の精製抗体のストック溶液が必要である。関心のある抗体を分泌する安定な細胞系統を作成して、ヒト化組換え抗VLA4抗体を調整培地から慣用のプロテインAクロマトグラフィーを用いて精製した。精製した抗体の 濃度を、それらの280nmでの吸光度係数により評価した(これは、抗体について十分確立している)。
Inc.)でのゲル濾過にかける。このカラムでの処理は20ml/時で行ない、1.5分の画分を集める。ピークのカラム画分をプールしてアリコートを採取し、ドライアイス上で凍結して−70℃に保存する。最終生成物のSDS−ポリアクリルアミドゲルプロフィルを、還元条件及び非還元条件下で得る。幾つかの場合には、試料を非還元条件下で分析したときに、生成物の約10%が無傷の抗体ではない。これらの場合の研究は、この生成物が重−軽鎖ダイマーであることを示している。これは、以前に、IgG4抗体の問題として認められている。
(ヒト化組換え抗VLA4抗体の相対的結合アフィニティーの決定)
本発明の組換え抗体を、実施例6に記載のようにして精製し、アッセイしてそれらのVLA4に対する特異性及び結合アフィニティー若しくは効力を決定する。特に、組換え抗VLA4抗体の効力を、下記の2つの異なるアッセイを用いて、最大結合定数の半分(half−maximal binding constant)(精製抗体のng/ml又はμg/mlとして報告)を計算することによって評価した。
抗VLA4抗体の臨界的機能は、VCAM1/VLA4接着経路を阻止する能力により規定される。精製した組換えの可溶性VCAM1(rsVCAM1)はプラスチック上に固定化され得て、機能性接着分子であることが以前に示されている(Lobb等、1991a,[81])。固定化rsVCAM1は、VLA4発現細胞例えばヒトB細胞系統Ramos等に結合し、この結合は、VCAM1に対するMAb例えば4B9又はVLA4に対するMAb例えばHP1/2によって阻止され得る。このアッセイは、任意のヒト化組換え抗体の効力を評価するための再現可能な方法を提供する。簡単に言えば、抗体溶液を希釈して、一連の抗体希釈物をRamos細胞と共にインキュベートし、次いで、それをrsVCAM1被覆したプレートでインキュベートする。Ramos細胞は、により記載されたようにして蛍光標識し、結合を、下記のプロトコールに従って、96ウェルクラスタープレートにて、蛍光により評価する。
ヒト化組換え抗体の細胞表面への結合を、蛍光標識抗体を用いて、蛍光活性化セルソーター(FACS)分析によって直接評価することが出来る。これは、投与量応答測定の後の半最大結合情報をも提供する標準的技術である。これらのFACS法は、Lobb等、1991b[82]に記載されている。
(寄託)
下記のプラスミッドを、大腸菌K12 J221(Iq)にて、ブダペスト条約の下、メリーランド(USA)Rockville在、American Type Culture Collection(ATCC)に、1992年10月30日に寄託した。これらの寄託物は、下記の通りである:
プラスミッド 受託番号
pBAG 184(VH−STAW) 69110
pBAG 183(VH−KAITAS) 69109
pBAG 185(VH−KRS) 69111
pBAG 207(VH−SSE) 69116
pBAG 195(VH−AS) 69113
pBAG 190(VK1−DQL) 69112
pBAG 198(VK2−SVMDY) 69115
pBAG 197(VK3−DQMDY) 69114
更に、ヒト化組換え抗VLA4抗体を産生するNSO細胞系統を、ブダペスト条約の下、メリーランド(USA)Rockville在、American Type Culture Collection(ATCC)に、1992年11月3日に寄託した。この寄託物は、ATCC受託番号CRL11175を付与された。
下記は、Sequence Listingに示した配列の要約である:
SEQ ID NO:1 CG1FORプライマーのDNA配列
SEQ ID NO:2 CK2FORプライマーのDNA配列
SEQ ID NO:3 VH1BACKプライマーのDNA配列
SEQ ID NO:4 VH5BACKプライマーのDNA配列
SEQ ID NO:5 HP1/2重鎖可変領域のDNA配列
SEQ ID NO:6 HP1/2重鎖可変領域のアミノ酸配列
SEQ ID NO:7 VH1BACKプライマーのDNA配列
SEQ ID NO:8 VK7BACKプライマーのDNA配列
SEQ ID NO:9 HP1/2軽鎖可変領域のDNA配列
SEQ ID NO:10 HP1/2軽鎖可変領域のアミノ酸配列
SEQ ID NO:11 VH1FORプライマーのDNA配列
SEQ ID NO:12 VK3BACKプライマーのDNA配列
SEQ ID NO:13 VK1FORプライマーのDNA配列
SEQ ID NO:14 M13VHPCR1中のVH挿入物のDNA配列
SEQ ID NO:15 M13VHPCR1中のVH挿入物のアミノ酸配列
SEQ ID NO:16 M13VKPCR2中のVK挿入物のDNA配列
SEQ ID NO:17 M13VKPCR2中のVK挿入物のアミノ酸配列
SEQ ID NO:18 オリゴ598のDNA配列
SEQ ID NO:19 オリゴ599のDNA配列
SEQ ID NO:20 オリゴ600のDNA配列
SEQ ID NO:21 オリゴ605のDNA配列
SEQ ID NO:22 オリゴ606のDNA配列
SEQ ID NO:23 オリゴ607のDNA配列
SEQ ID NO:24 オリゴ10のDNA配列
SEQ ID NO:25 オリゴ385のDNA配列
SEQ ID NO:26 オリゴ11のDNA配列
SEQ ID NO:27 オリゴ391のDNA配列
SEQ ID NO:28 ステージ1重鎖可変領域のDNA配列
SEQ ID NO:29 ステージ1重鎖可変領域のアミノ酸配列
SEQ ID NO:30 VK1(DQL)軽鎖可変領域のDNA配列
SEQ ID NO:31 VK1(DQL)軽鎖可変領域のアミノ酸配列
SEQ ID NO:32 ステージ2重鎖可変領域のDNA配列
SEQ ID NO:33 ステージ2重鎖可変領域のアミノ酸配列
SEQ ID NO:34 オリゴ684のDNA配列
SEQ ID NO:35 オリゴ683のDNA配列
SEQ ID NO:36 オリゴ713のDNA配列
SEQ ID NO:37 オリゴ716のDNA配列
SEQ ID NO:38 STAW重鎖可変領域のDNA配列
SEQ ID NO:39 STAW重鎖可変領域のアミノ酸配列
SEQ ID NO:40 オリゴ706のDNA配列
SEQ ID NO:41 オリゴ707のDNA配列
SEQ ID NO:42 KAITAS重鎖可変領域のDNA配列
SEQ ID NO:43 KAITAS重鎖可変領域のアミノ酸配列
SEQ ID NO:44 オリゴ768のDNA配列
SEQ ID NO:45 オリゴ769のDNA配列
SEQ ID NO:46 SSE重鎖可変領域のDNA配列
SEQ ID NO:47 SSE重鎖可変領域のアミノ酸配列
SEQ ID NO:48 オリゴ704のDNA配列
SEQ ID NO:49 オリゴ705のDNA配列
SEQ ID NO:50 KRS重鎖可変領域のDNA配列
SEQ ID NO:51 KRS重鎖可変領域のアミノ酸配列
SEQ ID NO:52 オリゴ745のDNA配列
SEQ ID NO:53 オリゴ746のDNA配列
SEQ ID NO:54 AS重鎖可変領域のDNA配列
SEQ ID NO:55 AS重鎖可変領域のアミノ酸配列
SEQ ID NO:56 オリゴ915のDNA配列
SEQ ID NO:57 オリゴ917のDNA配列
SEQ ID NO:58 オリゴ918のDNA配列
SEQ ID NO:59 オリゴ919のDNA配列
SEQ ID NO:60 オリゴ697のDNA配列
SEQ ID NO:61 オリゴ698のDNA配列
SEQ ID NO:62 VK2(SVMDY)軽鎖可変領域のDNA配列
SEQ ID NO:63 VK2(SVMDY)軽鎖可変領域のアミノ酸配列
SEQ ID NO:64 オリゴ803のDNA配列
SEQ ID NO:65 オリゴ804のDNA配列
SEQ ID NO:66 VK3(DQMDY)軽鎖可変領域のDNA配列
SEQ ID NO:67 VK3(DQMDY)軽鎖可変領域のアミノ酸配列
SEQ ID NO:68 PDLN重鎖可変領域のDNA配列
SEQ ID NO:69 PDLN重鎖可変領域のアミノ酸配列
SEQ ID NO:70 PDLN軽鎖可変領域のDNA配列
SEQ ID NO:71 PDLN軽鎖可変領域のアミノ酸配列
SEQ ID NO:72 オリゴ370−119のDNA配列
SEQ ID NO:73 オリゴ370−120のDNA配列
SEQ ID NO:74 オリゴ370−121のDNA配列
SEQ ID NO:75 オリゴ370−122のDNA配列
SEQ ID NO:76 オリゴ370−123のDNA配列
SEQ ID NO:77 オリゴ370−124のDNA配列
SEQ ID NO:78 オリゴ370−125のDNA配列
SEQ ID NO:79 オリゴ370−126のDNA配列
SEQ ID NO:80 オリゴ370−127のDNA配列
SEQ ID NO:81 オリゴ370−128のDNA配列
SEQ ID NO:82 オリゴ370−129のDNA配列
SEQ ID NO:83 オリゴ370−130のDNA配列
SEQ ID NO:84 オリゴ370−131のDNA配列
SEQ ID NO:85 オリゴ370−132のDNA配列
SEQ ID NO:86 オリゴ370−133のDNA配列
SEQ ID NO:87 オリゴ370−134のDNA配列
SEQ ID N0:88 オリゴ370−135のDNA配列
SEQ ID N0:89 オリゴ370−136のDNA配列
SEQ ID NO:90 オリゴ370−137のDNA配列
SEQ ID NO:91 オリゴ370−138のDNA配列
SEQ ID NO:92 オリゴ370−139のDNA配列
SEQ ID NO:93 オリゴ370−140のDNA配列
SEQ ID NO:94 オリゴ370−141のDNA配列
SEQ ID NO:95 オリゴ370−142のDNA配列
SEQ ID NO:96 VK1−DQLプライマー370−247のDNA配列
SEQ ID NO:97 VK1−DQLプライマー370−210のDNA配列
SEQ ID NO:98 VK2−SVMDYプライマー370−269のDNA配列SEQ ID N0:99 VK3−SVMDYプライマー370−268のDNA配列
我々は、上に、この発明の幾つかの具体例を説明してきたが、我々の基本的具体例を変形して、この発明の組成物及び方法を利用する他の具体例を与え得ることは明白である。それ故に、この発明の範囲は、上記の明細書中に規定され及び添付の請求の範囲により規定されるすべての別の具体例及び変法を含み且つ、この発明は説明のためにここに提供した特定の具体例に限定されるべきでないことは、認められるであろう。
Claims (1)
- 明細書中に記載の発明。
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US479893A | 1993-01-12 | 1993-01-12 |
Related Parent Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2007227202A Division JP2008024711A (ja) | 1993-01-12 | 2007-08-31 | 組換え抗vla4抗体分子 |
Related Child Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2012115391A Division JP2012191936A (ja) | 1993-01-12 | 2012-05-21 | 組換え抗vla4抗体分子 |
JP2013118704A Division JP2013198493A (ja) | 1993-01-12 | 2013-06-05 | 組換え抗vla4抗体分子 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2010183907A true JP2010183907A (ja) | 2010-08-26 |
Family
ID=21712583
Family Applications (7)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP6516243A Withdrawn JPH08507680A (ja) | 1993-01-12 | 1994-01-07 | 組換え抗vla4抗体分子 |
JP2004141719A Withdrawn JP2005000165A (ja) | 1993-01-12 | 2004-05-11 | 組換え抗vla4抗体分子 |
JP2006157882A Expired - Lifetime JP4416759B2 (ja) | 1993-01-12 | 2006-06-06 | 組換え抗vla4抗体分子 |
JP2007227202A Withdrawn JP2008024711A (ja) | 1993-01-12 | 2007-08-31 | 組換え抗vla4抗体分子 |
JP2010056608A Pending JP2010183907A (ja) | 1993-01-12 | 2010-03-12 | 組換え抗vla4抗体分子 |
JP2012115391A Withdrawn JP2012191936A (ja) | 1993-01-12 | 2012-05-21 | 組換え抗vla4抗体分子 |
JP2013118704A Withdrawn JP2013198493A (ja) | 1993-01-12 | 2013-06-05 | 組換え抗vla4抗体分子 |
Family Applications Before (4)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP6516243A Withdrawn JPH08507680A (ja) | 1993-01-12 | 1994-01-07 | 組換え抗vla4抗体分子 |
JP2004141719A Withdrawn JP2005000165A (ja) | 1993-01-12 | 2004-05-11 | 組換え抗vla4抗体分子 |
JP2006157882A Expired - Lifetime JP4416759B2 (ja) | 1993-01-12 | 2006-06-06 | 組換え抗vla4抗体分子 |
JP2007227202A Withdrawn JP2008024711A (ja) | 1993-01-12 | 2007-08-31 | 組換え抗vla4抗体分子 |
Family Applications After (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2012115391A Withdrawn JP2012191936A (ja) | 1993-01-12 | 2012-05-21 | 組換え抗vla4抗体分子 |
JP2013118704A Withdrawn JP2013198493A (ja) | 1993-01-12 | 2013-06-05 | 組換え抗vla4抗体分子 |
Country Status (14)
Country | Link |
---|---|
US (5) | US6602503B1 (ja) |
EP (1) | EP0678122B1 (ja) |
JP (7) | JPH08507680A (ja) |
AT (1) | ATE182625T1 (ja) |
AU (1) | AU688751B2 (ja) |
CA (1) | CA2153692C (ja) |
DE (1) | DE69419721T2 (ja) |
DK (1) | DK0678122T3 (ja) |
ES (1) | ES2137354T3 (ja) |
GR (1) | GR3031692T3 (ja) |
HK (1) | HK1011031A1 (ja) |
NZ (1) | NZ261259A (ja) |
SG (1) | SG44845A1 (ja) |
WO (1) | WO1994016094A2 (ja) |
Families Citing this family (139)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5234212A (en) * | 1992-07-06 | 1993-08-10 | Dutra Jr Joseph G | Document receiving tray assembly and method of using such |
JPH08507680A (ja) * | 1993-01-12 | 1996-08-20 | バイオジェン インコーポレイテッド | 組換え抗vla4抗体分子 |
DK0682529T4 (da) * | 1993-02-09 | 2006-05-15 | Biogen Idec Inc | Antistof til behandling af insulinkrævende diabetes |
US5677291A (en) * | 1993-12-10 | 1997-10-14 | Hoechst Marion Roussel, Inc. | Method of lowering serum cholesterol levels with 2,6-di-alkyl-4-silyl-phenols |
ES2424292T3 (es) * | 1994-01-25 | 2013-09-30 | Biogen Idec Ma Inc. | Anticuerpos humanizados contra la molécula de adhesión leucocitaria VLA-4 |
US7435802B2 (en) | 1994-01-25 | 2008-10-14 | Elan Pharaceuticals, Inc. | Humanized anti-VLA4 immunoglobulins |
FR2724393A1 (fr) * | 1994-09-12 | 1996-03-15 | Inst Nat Sante Rech Med | Obtention d'un anticorps monoclonal recombinant humanise a partir d'un anticorps monoclonal murin, sa production en cellules d'insecte, et ses utilisations |
US7750137B2 (en) | 1995-09-01 | 2010-07-06 | Millennium Pharmaceuticals, Inc. | Mucosal vascular addressins |
US7803904B2 (en) | 1995-09-01 | 2010-09-28 | Millennium Pharmaceuticals, Inc. | Mucosal vascular addressing and uses thereof |
US6551593B1 (en) | 1995-02-10 | 2003-04-22 | Millennium Pharmaceuticals, Inc. | Treatment of Inflammatory bowel disease by inhibiting binding and/or signalling through α 4 β 7 and its ligands and madcam |
US5608095A (en) * | 1996-04-30 | 1997-03-04 | Hoechst Marion Roussel, Inc. | Alkyl-4-silyl-phenols and esters thereof as antiatherosclerotic agents |
US5795876A (en) * | 1996-04-30 | 1998-08-18 | Hoechst Marion Rousssel, Inc. | Method of inhibiting vascular cell adhesion molecule-1 and treating chronic inflammatory diseases with 2, 6-di-alkyl-4-silyl-phenols |
US7147851B1 (en) | 1996-08-15 | 2006-12-12 | Millennium Pharmaceuticals, Inc. | Humanized immunoglobulin reactive with α4β7 integrin |
US6114572A (en) * | 1996-11-20 | 2000-09-05 | Hoechst Marion Roussel, Inc. | Substituted phenols and thiophenols useful as antioxidant agents |
US6121463A (en) * | 1997-06-24 | 2000-09-19 | Hoechst Marion Roussel, Inc. | Alkyl-4-silylheterocyclic phenols and thiophenols useful as antioxidant agents |
US6133467A (en) * | 1997-06-25 | 2000-10-17 | Hoechst Marion Roussel, Inc. | 2,6-di-t-butyl-4-[(dimethyl-4-methoxyphenylsilyl)-methyl-oxy]phenol and 2,6-di-t-butyl-4-[(dimethyl-2-methoxy-phenylsilyl)methyloxy]phenol |
DE19741235A1 (de) | 1997-09-18 | 1999-03-25 | Hoechst Marion Roussel De Gmbh | Neue Imidazolidinderivate, ihre Herstellung, ihre Verwendung und sie enthaltende pharmazeutische Präparate |
DE19741873A1 (de) * | 1997-09-23 | 1999-03-25 | Hoechst Marion Roussel De Gmbh | Neue 5-Ring-Heterocyclen, ihre Herstellung, ihre Verwendung und sie enthaltende pharmazeutische Präparate |
DE19751251A1 (de) | 1997-11-19 | 1999-05-20 | Hoechst Marion Roussel De Gmbh | Substituierte Imidazolidinderivate, ihre Herstellung, ihre Verwendung und sie enthaltende pharmezeutische Präparate |
ES2340112T3 (es) † | 1998-04-20 | 2010-05-28 | Glycart Biotechnology Ag | Ingenieria de glicosilacion de anticuerpos para la mejora de la citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos. |
DE19821483A1 (de) | 1998-05-14 | 1999-11-18 | Hoechst Marion Roussel De Gmbh | Imidazolidinderivate, ihre Herstellung, ihre Verwendung und sie enthaltende pharmazeutische Präparate |
EE05558B1 (et) | 1998-09-14 | 2012-08-15 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Antikeha v?i selle antigeeni siduva fragmendi v?i lahustuva polpeptiidi kasutamine farmatseutilise kompositsiooni valmistamiseks |
US7618630B2 (en) | 1998-09-14 | 2009-11-17 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Methods of treating multiple myeloma and myeloma-induced bone resorption using integrin antagonists |
EP1176195B1 (en) | 1999-04-09 | 2013-05-22 | Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. | Method for controlling the activity of immunologically functional molecule |
CA2370814C (en) | 1999-04-22 | 2010-07-06 | Biogen, Inc. | Method for the treatment of fibrosis using an antagonist of the integrin alpha-4 subunit |
DE19922462A1 (de) | 1999-05-17 | 2000-11-23 | Aventis Pharma Gmbh | Spiro-imidazolidinderivate, ihre Herstellung ihre Verwendung und sie enthaltende pharmazeutische Präparate |
ES2529706T3 (es) | 1999-06-01 | 2015-02-24 | Biogen Idec Ma Inc. | Un anticuerpo monoclonal bloqueante contra el dominio alfa1-I de VLA-1, y su uso para el tratamiento de trastornos inflamatorios |
EP1214091B1 (en) * | 1999-09-14 | 2006-05-10 | Biogen Idec MA Inc. | Therapies for chronic renal failure using one or more integrin antagonists |
EP1242118B1 (en) | 1999-12-16 | 2009-11-11 | Biogen Idec MA Inc. | Methods of treating central nervous system ischemic or hemorrhagic injury using anti alpha4 integrin antagonists |
US20060115473A1 (en) * | 2000-12-14 | 2006-06-01 | Biogen Idec Ma Inc., A Massachusetts Corporation | Methods of treating central nervous system ischemic or hemorrhagic injury using anti alpha4 integrin antagonists |
JP3459609B2 (ja) * | 2000-03-17 | 2003-10-20 | 三洋電機株式会社 | ライトキャッシュ回路、ライトキャッシュ回路を備えた記録装置、およびライトキャッシュ方法 |
AU2016204535C1 (en) * | 2000-04-12 | 2017-02-23 | Laboratoire Français Du Fractionnement Et Des Biotechnologies | Anti-D monoclonal antibodies |
FR2807767B1 (fr) | 2000-04-12 | 2005-01-14 | Lab Francais Du Fractionnement | Anticorps monoclonaux anti-d |
US6946292B2 (en) | 2000-10-06 | 2005-09-20 | Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. | Cells producing antibody compositions with increased antibody dependent cytotoxic activity |
DE10111877A1 (de) | 2001-03-10 | 2002-09-12 | Aventis Pharma Gmbh | Neue Imidazolidinderivate, ihre Herstellung, ihre Verwendung und sie enthaltende pharmazeutische Präparate |
WO2002083854A2 (en) | 2001-04-13 | 2002-10-24 | Biogen, Inc. | Antibodies to vla-1 |
DE10137595A1 (de) | 2001-08-01 | 2003-02-13 | Aventis Pharma Gmbh | Neue Imidazolidinderivate, ihre Herstellung und ihre Verwendung |
EP2180044A1 (en) | 2001-08-03 | 2010-04-28 | GlycArt Biotechnology AG | Antibody glycosylation variants having increased anti-body-dependent cellular cytotoxicity |
JP4470219B2 (ja) | 2002-02-20 | 2010-06-02 | 味の素株式会社 | 新規フェニルアラニン誘導体 |
ATE512163T1 (de) | 2002-02-25 | 2011-06-15 | Elan Pharm Inc | Verabreichung von mitteln zur behandlung von entzündungen |
CA2514125A1 (en) | 2003-01-24 | 2004-08-12 | Elan Pharmaceuticals, Inc. | Composition for and treatment of demyelinating diseases and paralysis by administration of remyelinating agents |
US20040241808A1 (en) * | 2003-04-14 | 2004-12-02 | Renata Pasqualini | Methods for ex vivo hybridoma-free production of polyclonal and monoclonal antibodies and generation of immortalized cell populations |
US7485291B2 (en) * | 2003-06-03 | 2009-02-03 | Cell Genesys, Inc. | Compositions and methods for generating multiple polypeptides from a single vector using a virus derived peptide cleavage site, and uses thereof |
US20050136035A1 (en) * | 2003-06-03 | 2005-06-23 | Derek Ko | Cell specific replication-competent viral vectors comprising a self processing peptide cleavage site |
EP1636360A4 (en) * | 2003-06-03 | 2006-11-08 | Cell Genesys Inc | COMPOSITIONS AND METHODS FOR ENHANCED EXPRESSION OF RECOMBINANT POLYPEPTIDES FROM A SINGLE VECTOR USING A PEPTIDE CLEAVAGE SITE |
US7691810B2 (en) | 2003-10-09 | 2010-04-06 | Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd | Method of producing recombinant antithrombin III composition |
US7496938B2 (en) * | 2003-11-24 | 2009-02-24 | Sabic Innovative Plastics Ip B.V. | Media drive with a luminescence detector and methods of detecting an authentic article |
ES2548853T3 (es) | 2003-12-22 | 2015-10-21 | Ajinomoto Co., Inc. | Derivado de fenilalanina |
ZA200606557B (en) * | 2004-02-06 | 2008-02-27 | Elan Pharm Inc | Methods and compositions for treating tumors and metastatic disease |
US7419666B1 (en) | 2004-02-23 | 2008-09-02 | Massachusetts Eye And Ear Infirmary | Treatment of ocular disorders |
RU2006140377A (ru) * | 2004-04-16 | 2008-05-27 | Дженентек, Инк. (Us) | Способ усиления уничтожения в-клеток |
JP2008506389A (ja) * | 2004-07-13 | 2008-03-06 | セル ジェネシス インコーポレイテッド | Aavベクター組成物および免疫グロブリンの発現の増強のための方法ならびにその使用方法 |
CA2478458A1 (en) * | 2004-08-20 | 2006-02-20 | Michael Panzara | Treatment of pediatric multiple sclerosis |
GB0420771D0 (en) * | 2004-09-17 | 2004-10-20 | Randox Lab Ltd | Antibody |
EP2808033A1 (en) * | 2004-11-19 | 2014-12-03 | Biogen Idec MA Inc. | Treatment for multiple sclerosis |
US20090169477A1 (en) * | 2004-12-03 | 2009-07-02 | Michael Panzara | Delaying or preventing onset of multiple sclerosis |
DK2332408T3 (da) | 2005-02-17 | 2013-12-02 | Biogen Idec Inc | Behandling af neurologiske sygdomme |
AU2006218489B2 (en) | 2005-03-02 | 2011-02-24 | Biogen Ma Inc. | KIM-1 antibodies for treatment of Th2-mediated conditions |
CN101171263A (zh) | 2005-03-04 | 2008-04-30 | 比奥根艾迪克Ma公司 | 通过合理修饰互补决定区残基使免疫球蛋白可变区人源化的方法 |
KR20140068234A (ko) | 2005-03-31 | 2014-06-05 | 더 제너럴 하스피탈 코포레이션 | Hgf/hgfr 활성의 모니터링 및 조정 |
PL2645106T3 (pl) | 2005-04-04 | 2017-11-30 | Biogen Ma Inc. | Sposoby oceniania odpowiedzi immunologicznej na środek leczniczy |
US7632509B2 (en) * | 2005-07-19 | 2009-12-15 | Biosante Pharmaceuticals, Inc. | Methods to express recombinant proteins from lentiviral vectors |
CN101595228A (zh) | 2005-07-21 | 2009-12-02 | 艾博特公司 | 包括sorf构建体的多基因表达和使用多蛋白、前体蛋白和蛋白酶解的方法 |
ES2350269T3 (es) | 2006-01-18 | 2011-01-20 | The General Hospital Corporation | Métodos de aumento de la función linfática. |
CA2641160A1 (en) * | 2006-02-28 | 2007-09-07 | Elan Pharmaceuticals, Inc. | Methods of treating inflammatory and autoimmune diseases with alpha-4 inhibitory compounds |
LT2676967T (lt) * | 2006-02-28 | 2019-09-10 | Biogen Ma Inc. | Uždegiminių ir autoimuninių ligų gydymo būdai su natalizumabu |
MX2008011176A (es) | 2006-03-03 | 2008-09-10 | Elan Pharm Inc | Metodos para tratar padecimientos inflamatorios y autoinmunes con natalizumab. |
CA2646671A1 (en) | 2006-03-30 | 2007-11-01 | University Of California | Methods and compositions for localized secretion of anti-ctla-4 antibodies |
US20070292922A1 (en) * | 2006-03-31 | 2007-12-20 | Cell Genesys, Inc. | Regulated expression of recombinant proteins from adeno-associated viral vectors |
US7919079B2 (en) * | 2006-03-31 | 2011-04-05 | Biosante Pharmaceuticals, Inc. | Cancer immunotherapy compositions and methods of use |
DK2034830T3 (da) | 2006-05-25 | 2014-10-27 | Biogen Idec Inc | Anti-vla-1-antistof til behandling af slagtilfælde |
US8288110B2 (en) * | 2006-12-04 | 2012-10-16 | Perkinelmer Health Sciences, Inc. | Biomarkers for detecting cancer |
CA2714335A1 (en) | 2007-02-20 | 2008-08-28 | Merrimack Pharmaceuticals, Inc. | Methods of treating multiple sclerosis by administration of alpha-fetoprotein in combination with an integrin antagonist |
PT2170390T (pt) | 2007-06-14 | 2019-02-12 | Biogen Ma Inc | Formulações com anticorpo natalizumab |
WO2009038684A1 (en) | 2007-09-14 | 2009-03-26 | Biogen Idec Ma Inc. | Compositions and methods for the treatment of progressive multifocal leukoencephalopathy (pml) |
EP2085407A1 (en) | 2008-02-04 | 2009-08-05 | Sahltech I Göteborg AB | Treatment of idiopathic thrombocytopenic purpura |
EP2860260A1 (en) | 2008-04-11 | 2015-04-15 | Merrimack Pharmaceuticals, Inc. | Human serum albumin linkers and conjugates thereof |
CA2726804C (en) | 2008-06-02 | 2021-12-28 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Xbp1, cd138, and cs1 peptides |
CA2729961C (en) | 2008-07-09 | 2018-05-01 | Biogen Idec Ma Inc. | Li113, li62 variant co2, anti-lingo antibodies |
KR20110112301A (ko) | 2008-11-18 | 2011-10-12 | 메리맥 파마슈티컬즈, 인크. | 인간 혈청 알부민 링커 및 그 콘쥬게이트 |
EP2419137A4 (en) * | 2009-04-17 | 2013-01-09 | Biogen Idec Inc | COMPOSITIONS AND METHOD FOR TREATING ACUTE MYELOGENIC LEUKEMIA |
EP2467159A1 (en) | 2009-08-20 | 2012-06-27 | INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) | Vla-4 as a biomarker for prognosis and target for therapy in duchenne muscular dystrophy |
CA2776756A1 (en) * | 2009-10-11 | 2011-04-14 | Biogen Idec Ma Inc. | Anti-vla-4 related assays |
US8623368B2 (en) | 2009-10-23 | 2014-01-07 | Hanwha Chemical Corporation | Human recombinant monoclonal antibody that specifically binds to VCAM-1 and inhibits adhesion and transmigration between leukocytes and endothelial cells |
MX2012005117A (es) | 2009-10-30 | 2012-06-14 | Abbott Lab | Construcciones de sorf y expresion de gen multiple. |
IN2012DN06139A (ja) | 2010-01-11 | 2015-09-18 | Biogen Idec Inc | |
US11287423B2 (en) | 2010-01-11 | 2022-03-29 | Biogen Ma Inc. | Assay for JC virus antibodies |
DK3466977T3 (en) | 2010-04-16 | 2022-04-11 | Biogen Ma Inc | Anti-vla-4-antistoffer |
DK2598526T3 (en) | 2010-07-29 | 2018-11-19 | Eleven Biotherapeutics Inc | CHEMICAL IL-1 RECEPTOR TYPE-I AGONISTS AND ANTAGONISTS |
WO2012019168A2 (en) | 2010-08-06 | 2012-02-09 | Moderna Therapeutics, Inc. | Engineered nucleic acids and methods of use thereof |
WO2012027494A1 (en) | 2010-08-24 | 2012-03-01 | Regents Of The University Of Minnesota | Bispecific targeting reagents |
US20120237975A1 (en) | 2010-10-01 | 2012-09-20 | Jason Schrum | Engineered nucleic acids and methods of use thereof |
RS60565B1 (sr) | 2010-10-25 | 2020-08-31 | Biogen Ma Inc | Postupci za određivanje razlika u aktivnosti alfa-4 integrina putem uspostavljanja korelacije sa razlikama u nivoima svcam i/ili smadcam |
WO2012103240A2 (en) | 2011-01-25 | 2012-08-02 | Eleven Biotherapeutics, Inc. | Receptor binding agents |
DK2683736T3 (en) | 2011-03-09 | 2018-04-23 | Cell Signaling Technology Inc | METHODS AND REAGENTS FOR CREATING MONOCLONAL ANTIBODIES |
AU2012236099A1 (en) | 2011-03-31 | 2013-10-03 | Moderna Therapeutics, Inc. | Delivery and formulation of engineered nucleic acids |
UA116189C2 (uk) | 2011-05-02 | 2018-02-26 | Мілленніум Фармасьютікалз, Інк. | КОМПОЗИЦІЯ АНТИ-α4β7 АНТИТІЛА |
CN107998388B (zh) | 2011-05-02 | 2023-07-14 | 千禧制药公司 | 抗α4β7抗体的制剂 |
US9464124B2 (en) | 2011-09-12 | 2016-10-11 | Moderna Therapeutics, Inc. | Engineered nucleic acids and methods of use thereof |
EP3682905B1 (en) | 2011-10-03 | 2021-12-01 | ModernaTX, Inc. | Modified nucleosides, nucleotides, and nucleic acids, and uses thereof |
EP2769223A1 (en) | 2011-10-17 | 2014-08-27 | Westfälische Wilhelms-Universität Münster | Assessment of pml risk and methods based thereon |
RS63244B1 (sr) | 2011-12-16 | 2022-06-30 | Modernatx Inc | Kompozicije modifikovane mrna |
WO2013091903A1 (en) | 2011-12-22 | 2013-06-27 | Novo Nordisk A/S | Anti-crac channel antibodies |
CN104271122A (zh) | 2012-02-16 | 2015-01-07 | 桑塔鲁斯股份有限公司 | 抗vla1(cd49a)抗体药物组合物 |
CA2867902C (en) | 2012-03-20 | 2023-09-26 | Biogen Idec Ma Inc. | Jcv neutralizing antibodies |
US9572897B2 (en) | 2012-04-02 | 2017-02-21 | Modernatx, Inc. | Modified polynucleotides for the production of cytoplasmic and cytoskeletal proteins |
US9283287B2 (en) | 2012-04-02 | 2016-03-15 | Moderna Therapeutics, Inc. | Modified polynucleotides for the production of nuclear proteins |
US10501512B2 (en) | 2012-04-02 | 2019-12-10 | Modernatx, Inc. | Modified polynucleotides |
EP2833892A4 (en) | 2012-04-02 | 2016-07-20 | Moderna Therapeutics Inc | MODIFIED POLYNUCLEOTIDES FOR THE PRODUCTION OF PROTEINS AND PEPTIDES ASSOCIATED WITH ONCOLOGY |
US9717453B2 (en) | 2012-04-20 | 2017-08-01 | Biogen Idec Ma Inc. | Cognitive composite parameters and uses thereof for evaluating multiple sclerosis |
EA030716B1 (ru) | 2012-05-14 | 2018-09-28 | Байоджен Ма Инк. | Антагонисты lingo-2 для лечения заболеваний, в которых участвуют двигательные нейроны |
US20150220693A1 (en) | 2012-08-13 | 2015-08-06 | Biogen Idec Ma Inc. | Disease progression parameters and uses thereof for evaluating multiple sclerosis |
US20150202287A1 (en) | 2012-08-30 | 2015-07-23 | Merrimack Pharmaceuticals, Inc. | Combination therapies comprising anti-erbb3 agents |
AU2013329421A1 (en) | 2012-10-09 | 2015-04-30 | Biogen Ma Inc. | Combination therapies and uses for treatment of demyelinating disorders |
EP2914278B1 (en) | 2012-11-05 | 2021-06-02 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Xbp1, cd138, and cs1 peptides, pharmaceutical compositions that include the peptides, and methods of using such peptides and compositions |
ES2921623T3 (es) | 2012-11-26 | 2022-08-30 | Modernatx Inc | ARN modificado terminalmente |
CN107693781B (zh) | 2013-03-13 | 2021-11-09 | 巴扎德制药公司 | 用于眼部递送的嵌合细胞因子制剂 |
US8980864B2 (en) | 2013-03-15 | 2015-03-17 | Moderna Therapeutics, Inc. | Compositions and methods of altering cholesterol levels |
EP3004334A4 (en) | 2013-05-28 | 2016-12-21 | Biogen Ma Inc | METHODS OF EVALUATION RISK OF DEVELOPMENT OF PML |
KR102435648B1 (ko) | 2013-09-11 | 2022-08-25 | 이글 바이오로직스 인코퍼레이티드 | 점도저하제를 함유하는 액체 단백질 제형 |
WO2015048744A2 (en) | 2013-09-30 | 2015-04-02 | Moderna Therapeutics, Inc. | Polynucleotides encoding immune modulating polypeptides |
AU2014329452B2 (en) | 2013-10-03 | 2019-06-20 | Moderna Therapeutics, Inc. | Polynucleotides encoding low density lipoprotein receptor |
WO2015063604A2 (en) | 2013-11-01 | 2015-05-07 | Imberti Luisa | BIOMARKERS PREDICTIVE OF THERAPEUTIC RESPONSIVENESS TO IFNβ AND USES THEREOF |
US20170216434A1 (en) * | 2014-08-05 | 2017-08-03 | Wayne State University | Compositions and methods for treatment of sickle cell disease |
US11471479B2 (en) | 2014-10-01 | 2022-10-18 | Eagle Biologics, Inc. | Polysaccharide and nucleic acid formulations containing viscosity-lowering agents |
EP3242893A1 (en) | 2015-01-08 | 2017-11-15 | Biogen MA Inc. | Lingo-1 antagonists and uses for treatment of demyelinating disorders |
US10118904B2 (en) | 2015-06-05 | 2018-11-06 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Triazoles for the treatment of Demyelinating Diseases |
AU2017297404A1 (en) | 2016-07-13 | 2019-01-24 | Biogen Ma Inc. | Dosage regimens of LINGO-1 antagonists and uses for treatment of demyelinating disorders |
WO2018045162A1 (en) | 2016-09-01 | 2018-03-08 | Biogen Ma Inc. | Biomarkers predictive of primary progressive multiple sclerosis and uses thereof |
WO2018106641A1 (en) | 2016-12-06 | 2018-06-14 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Pyrazoles for the treatment of demyelinating diseases |
WO2018106646A1 (en) | 2016-12-06 | 2018-06-14 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Aminotriazoles for the treatment of demyelinating diseases |
WO2018106643A1 (en) | 2016-12-06 | 2018-06-14 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Heterocyclic azoles for the treatment of demyelinating diseases |
WO2018140510A1 (en) | 2017-01-25 | 2018-08-02 | Biogen Ma Inc. | Compositions and methods for treatment of stroke and other cns disorders |
WO2018211517A1 (en) | 2017-05-16 | 2018-11-22 | Bhami's Research Laboratory, Pvt. Ltd. | High concentration protein formulations with reduced viscosity |
KR20210027352A (ko) | 2018-06-04 | 2021-03-10 | 바이오젠 엠에이 인코포레이티드 | 감소된 효과기 기능을 갖는 항-vla-4 항체 |
JP2022524814A (ja) | 2019-03-11 | 2022-05-10 | バイオジェン・エムエイ・インコーポレイテッド | 抗lingo-1抗体を含む医薬組成物 |
US11339061B2 (en) | 2020-02-05 | 2022-05-24 | Garron M. Hobson | Solar water pasteurizer |
BR112022023392A2 (pt) | 2020-05-19 | 2022-12-20 | Janssen Biotech Inc | Composições que compreendem um agente terapêutico de redirecionamento de células t e um inibidor da via de adesão de vla-4 |
CA3220458A1 (en) | 2021-05-18 | 2022-11-24 | Janssen Biotech, Inc. | Compositions comprising a t cell redirection therapeutic and an anti-cd44 therapeutic |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH04505398A (ja) * | 1989-12-21 | 1992-09-24 | セルテツク リミテツド | 人体化抗体 |
EP0519596A1 (en) * | 1991-05-17 | 1992-12-23 | Merck & Co. Inc. | A method for reducing the immunogenicity of antibody variable domains |
Family Cites Families (25)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
GB8308235D0 (en) | 1983-03-25 | 1983-05-05 | Celltech Ltd | Polypeptides |
US4816567A (en) | 1983-04-08 | 1989-03-28 | Genentech, Inc. | Recombinant immunoglobin preparations |
GB8422238D0 (en) | 1984-09-03 | 1984-10-10 | Neuberger M S | Chimeric proteins |
WO1986005807A1 (en) | 1985-04-01 | 1986-10-09 | Celltech Limited | Transformed myeloma cell-line and a process for the expression of a gene coding for a eukaryotic polypeptide employing same |
GB8601597D0 (en) | 1986-01-23 | 1986-02-26 | Wilson R H | Nucleotide sequences |
GB8607679D0 (en) | 1986-03-27 | 1986-04-30 | Winter G P | Recombinant dna product |
HU196394B (en) * | 1986-06-27 | 1988-11-28 | Richter Gedeon Vegyeszet | Process for preparing 2-halogenated ergoline derivatives |
GB8717430D0 (en) | 1987-07-23 | 1987-08-26 | Celltech Ltd | Recombinant dna product |
SE461013B (sv) | 1988-02-11 | 1989-12-18 | Christian Wesslau | Farmaceutisk komposition verksam mot lungobstruktioner bestaaende av en betaadrenerg antagonist och ett tyroideahormon |
EP0330506A3 (en) * | 1988-02-26 | 1990-06-20 | Dana Farber Cancer Institute | Vla proteins |
GB8809129D0 (en) | 1988-04-18 | 1988-05-18 | Celltech Ltd | Recombinant dna methods vectors and host cells |
IL162181A (en) | 1988-12-28 | 2006-04-10 | Pdl Biopharma Inc | A method of producing humanized immunoglubulin, and polynucleotides encoding the same |
US5530101A (en) * | 1988-12-28 | 1996-06-25 | Protein Design Labs, Inc. | Humanized immunoglobulins |
US5217870A (en) * | 1989-04-28 | 1993-06-08 | Biogen, Inc. | Monoclonal antibodies against CDX |
US6307025B1 (en) | 1989-04-28 | 2001-10-23 | Biogen, Inc. | VCAM fusion proteins and DNA coding therefor |
US5272263A (en) | 1989-04-28 | 1993-12-21 | Biogen, Inc. | DNA sequences encoding vascular cell adhesion molecules (VCAMS) |
US5859205A (en) * | 1989-12-21 | 1999-01-12 | Celltech Limited | Humanised antibodies |
GB9019812D0 (en) | 1990-09-11 | 1990-10-24 | Scotgen Ltd | Novel antibodies for treatment and prevention of infection in animals and man |
JPH07506091A (ja) * | 1992-01-13 | 1995-07-06 | バイオゲン インコーポレイテッド | 喘息の処置 |
US5871734A (en) * | 1992-01-13 | 1999-02-16 | Biogen, Inc. | Treatment for asthma with VLA-4 blocking agents |
US5932214A (en) | 1994-08-11 | 1999-08-03 | Biogen, Inc. | Treatment for inflammatory bowel disease with VLA-4 blockers |
ATE150975T1 (de) * | 1992-11-13 | 1997-04-15 | Univ Washington | Peripheralisierung hämatopoietischer stammzellen |
JPH08507680A (ja) * | 1993-01-12 | 1996-08-20 | バイオジェン インコーポレイテッド | 組換え抗vla4抗体分子 |
DK0682529T4 (da) * | 1993-02-09 | 2006-05-15 | Biogen Idec Inc | Antistof til behandling af insulinkrævende diabetes |
ES2424292T3 (es) | 1994-01-25 | 2013-09-30 | Biogen Idec Ma Inc. | Anticuerpos humanizados contra la molécula de adhesión leucocitaria VLA-4 |
-
1994
- 1994-01-07 JP JP6516243A patent/JPH08507680A/ja not_active Withdrawn
- 1994-01-07 DK DK94906056T patent/DK0678122T3/da active
- 1994-01-07 DE DE69419721T patent/DE69419721T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1994-01-07 AT AT94906056T patent/ATE182625T1/de active
- 1994-01-07 SG SG1996008715A patent/SG44845A1/en unknown
- 1994-01-07 ES ES94906056T patent/ES2137354T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1994-01-07 AU AU59936/94A patent/AU688751B2/en not_active Expired
- 1994-01-07 WO PCT/US1994/000266 patent/WO1994016094A2/en active IP Right Grant
- 1994-01-07 EP EP94906056A patent/EP0678122B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1994-01-07 CA CA2153692A patent/CA2153692C/en not_active Expired - Lifetime
- 1994-01-07 NZ NZ261259A patent/NZ261259A/en not_active IP Right Cessation
-
1995
- 1995-05-31 US US08/454,899 patent/US6602503B1/en not_active Expired - Lifetime
-
1998
- 1998-11-09 HK HK98111868A patent/HK1011031A1/xx not_active IP Right Cessation
-
1999
- 1999-10-29 GR GR990402783T patent/GR3031692T3/el unknown
-
2003
- 2003-05-02 US US10/428,662 patent/US7157086B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2004
- 2004-05-11 JP JP2004141719A patent/JP2005000165A/ja not_active Withdrawn
-
2006
- 2006-06-06 JP JP2006157882A patent/JP4416759B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 2006-11-29 US US11/606,388 patent/US7482003B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2007
- 2007-08-31 JP JP2007227202A patent/JP2008024711A/ja not_active Withdrawn
-
2008
- 2008-12-18 US US12/338,570 patent/US7829092B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2010
- 2010-03-12 JP JP2010056608A patent/JP2010183907A/ja active Pending
- 2010-09-27 US US12/891,284 patent/US8226950B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2012
- 2012-05-21 JP JP2012115391A patent/JP2012191936A/ja not_active Withdrawn
-
2013
- 2013-06-05 JP JP2013118704A patent/JP2013198493A/ja not_active Withdrawn
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH04505398A (ja) * | 1989-12-21 | 1992-09-24 | セルテツク リミテツド | 人体化抗体 |
EP0519596A1 (en) * | 1991-05-17 | 1992-12-23 | Merck & Co. Inc. | A method for reducing the immunogenicity of antibody variable domains |
Non-Patent Citations (4)
Title |
---|
JPN4003002432; Eur J Immunol,1991年,21(11),2871-2875 * |
JPN4003002433; BIO/TECHNOLOGY Vol.9, 1991, p.266-271 * |
JPN4003002434; Nature Vol.332, 1988, p.323-327 * |
JPN4007003961; J Biol Chem 266(16) p.10241-10245 (1991) * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JP2006290897A (ja) | 2006-10-26 |
CA2153692A1 (en) | 1994-07-21 |
CA2153692C (en) | 2011-11-08 |
US20070248598A1 (en) | 2007-10-25 |
JP2013198493A (ja) | 2013-10-03 |
JP4416759B2 (ja) | 2010-02-17 |
EP0678122A1 (en) | 1995-10-25 |
HK1011031A1 (en) | 1999-07-02 |
JP2012191936A (ja) | 2012-10-11 |
DK0678122T3 (da) | 2000-03-06 |
JP2005000165A (ja) | 2005-01-06 |
ES2137354T3 (es) | 1999-12-16 |
ATE182625T1 (de) | 1999-08-15 |
WO1994016094A3 (en) | 1994-09-29 |
DE69419721D1 (de) | 1999-09-02 |
AU5993694A (en) | 1994-08-15 |
NZ261259A (en) | 1996-12-20 |
JP2008024711A (ja) | 2008-02-07 |
US7157086B2 (en) | 2007-01-02 |
US20120022236A1 (en) | 2012-01-26 |
US6602503B1 (en) | 2003-08-05 |
SG44845A1 (en) | 1997-12-19 |
DE69419721T2 (de) | 2000-04-27 |
US7482003B2 (en) | 2009-01-27 |
US20100203042A1 (en) | 2010-08-12 |
EP0678122B1 (en) | 1999-07-28 |
WO1994016094A2 (en) | 1994-07-21 |
US8226950B2 (en) | 2012-07-24 |
US7829092B2 (en) | 2010-11-09 |
AU688751B2 (en) | 1998-03-19 |
GR3031692T3 (en) | 2000-02-29 |
JPH08507680A (ja) | 1996-08-20 |
US20030185819A1 (en) | 2003-10-02 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP4416759B2 (ja) | 組換え抗vla4抗体分子 | |
JP3242913B2 (ja) | Cd3特異的組換え抗体 | |
EP0804237B1 (en) | Humanized antibodies against leukocyte adhesion molecule vla-4 | |
JP4303475B2 (ja) | Vla−1に対する抗体 | |
US5861155A (en) | Humanized antibodies and uses thereof | |
US8246958B2 (en) | Methods of inhibiting alpha-4-dependent interactions with VCAM-1 with anti-VLA-4 antibodies | |
EP0918797B1 (en) | Humanized immunoglobulin reactive with alpha4beta7 integrin | |
AU747898B2 (en) | Monoclonal antibodies to human CD6 | |
WO1997018838A1 (en) | Therapeutic uses of humanized antibodies against alpha-4 integrin | |
EP0957166A1 (en) | HUMANIZED IMMUNOGLOBULIN REACTING SPECIFICALLY WITH Fas LIGAND OR ACTIVE FRAGMENTS THEREOF AND REGION INDUCING APOPTOSIS ORIGINATING IN Fas LIGAND |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20110302 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20111121 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20120216 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20120221 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20120315 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20120321 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20120417 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20120420 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20120521 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20121205 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20130228 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20130305 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20130402 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20130405 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20130430 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20130507 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20130605 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20130605 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20130716 |