JP2010071707A - 親水性相互作用クロマトグラフィー用充填剤 - Google Patents
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Abstract
Description
これとは逆に、充填剤に親水性官能基を修飾し、分析対象物質の微弱な親水性の差を認識して分離する方法が、親水性相互作用クロマトグラフィーである。
したがって、このようなベタイン構造では親水性相互作用のみならずイオン交換相互作用が同時に現れることから、イオン性化合物の吸着やピーク形状の乱れが生じる。
以上から、従来の当業者の技術常識は、ホスホリルコリン基により修飾された充填剤はおよそ親水性相互作用カラムには使用できないというものであった。
一方、グラフト重合により、極めて立体障害性の高いホスホリルコリン基を、定量的に高い密度で、充填剤となる担体表面に修飾させることは、極めて困難でもあった。
しかしながら、特許文献8に記載のクロマトグラフィー用充填剤は主としてサイズ排除モードのクロマトグラフィーに応用するものであって、これを親水性相互作用による極性化合物分離のための充填剤として使用するという発想はおよそ当業者に存在しなかった。
このことは、非特許文献2において、グラフト重合により導入したホスホリルコリン基修飾シリカを充填したカラムではピークのシャープさを示す理論段数が低いことに深く関連する。
式中、mは2〜6、nは1〜4である。
X1、X2、X3は、それぞれ単独に、メトキシ基、エトキシ基またはハロゲンである。ただし、X1、X2、X3のうち、2つまではメチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチル基のいずれでも良い。
Rは下記式(3)〜(5)中の構造のいずれかである(ただし、下記式(3)〜(5)において、式(2)の化合物をA−R−Bで表す)。
式(3)〜(5)中、Lは1〜6、Pは1〜3を表す。
式中、mは2〜6、nは1〜4である。X1、X2、X3は、それぞれ単独に、メトキシ基、エトキシ基またはハロゲンである。ただし、X1、X2、X3のうち、2つまではメチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチル基のいずれでも良い。
そして、充填剤にシリカを使用した場合は、ホスホリルコリン基は一般的な親水性官能基(ジオール基やカルバモイル基)に比べて嵩高いため、負に帯電したシリカゲル表面に分析対象物質が相互作用することを防ぐことができるという利点を有する。加えて、同程度に嵩高い、ホスホリルコリン基以外の双性イオン(スルホン酸−4級アンモニウム型やカルボン酸−4級アンモニウム型)のように電荷を有さない。
したがって、ホスホリルコリン基は、親水性以外の相互作用が極めて抑制された充填剤を提供することが可能である。
<表面改質剤>
下記式(8)に示したホスホリルコリン誘導体を蒸留水に溶解させる。下記式(8)のホスホリルコリン誘導体は公知の化合物であり市販品を入手できる。
得られたメタノール溶液を減圧濃縮し、残留物を蒸留水に溶解させる。この水溶液を試料とする。疎水性相互作用とカチオン交換能を有する高速液体クロマトグラフィー用カラムである、カプセルパックSCX UG80 S−5 (サイズ:4.6mmi.d.×250mm)(株式会社資生堂)をHPLC装置に接続し、0.2mmol/Lのリン酸緩衝液(pH3.5)を1mL/分の流速で流して平衡化させたのちに、試料を10μL注入する。検出器として示差屈折計を用いることでクロマトグラムを得られ、目的とする化合物を単離することができる。
ただし、これらの化合物は、精製前のメタノール溶液の段階で、シリカを初めとする担体の表面修飾にそのまま用いることが可能である。
また、式(6)または(7)中のメトキシ基(OCH3)がエトキシ基(OC2H5)である場合にはメタノールをエタノールに変えて反応を行い、Clの場合はジメチルホルムアミドやジメチルスルホキシドに変更する。
さらには、Siと結合するメトキシ基またはエトキシ基またはClの内、2つまたは1つがメチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチル基のいずれかで置換されている場合も上記の手法と同様に製造することができる。
なお、反応溶媒は水でも可能であり、また、過ヨウ素酸以外にも他の過ヨウ素酸塩や過ヨウ素酸などを用いることも可能であり、三塩化ルテニウム以外にも、他の二価及び/または三価のルテニウム化合物やそれらの水和物などを用いることも可能である。
なお、反応溶媒はN,N−ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、クロロホルムなどメタノール以外でも可能であり、また、NHS、EDC以外にも、ジシクロカルボジイミド(DCC)、カルボキシジイミダゾール(CDI)などを用いることも可能である。
上記の手順は、式(7)に示した化合物中のm、nが変わっても全く同様に行うことができる。ここで示した手順はm=3、n=2の場合である。ただし、反応中の有機シラン化合物の重合を防ぐためには脱水溶媒が好ましい。
また、式(7)中のメトキシ基(OCH3)がエトキシ基(OC2H5)である場合にはメタノールをエタノールに変えて反応を行い、Clの場合はジメチルホルムアミドやジメチルスルホキシドに変更する。
さらには、Siと結合するメトキシ基またはエトキシ基またはClの内、2つまたは1つがメチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチル基のいずれかで置換されている場合も上記の手法と全く同様に製造することができる。
上述の表面改質剤により、担体表面を改質して、容易に希望する量のホスホリルコリン基を有する本発明のクロマトグラフィー用充填剤を製造することが出来る。
具体的には、担体表面に存在する水酸基と、式(6)または(7)の化合物のSi−OCH3との脱水反応によってホスホリルコリン基を担体表面に導入する。
反応溶媒は水−メタノール混合溶媒以外にも、水、エタノール、2−プロパノール等のプロトン性溶媒や、ジメチルスルホキシド、ジメチルホルムアミド、トルエン、ジエチルエーテル等の非プロトン性溶媒を使用でき、これらを単一、または組み合わせて用いることができる。
本法は水酸基を持たない担体のみならず、水酸基を有する担体についても極めて有効である。
すなわち、上記方法は、担体表面に未反応のアミノ基を混在させることなくホスホリルコリン基だけを導入することができる。先にアミノ基を粉体表面に導入する場合は、2段階目のホスホリルコリン基を導入させる反応が、液相中のグリセロホスホリルコリンのアルデヒド体と固相表面のアミノ基とが反応しなければならないために拡散律速や固相表面の立体構造による立体障害、ホスホリルコリン基自体の立体性等によって反応率が低い。そのため、約30%のアミノ基にしかホスホリルコリン基を導入することができない。残存したアミノ基は別の低分子化合物を結合させることによってある程度封鎖することが可能であるが、担体表面の親水性を維持することが困難である上に、その全てを封鎖することはできない。
水溶性有機溶媒とは、例えばアセトニトリル、ジメチルスルホキシド、ジメチルホルムアミド及びメタノールなどの脂肪族アルコールのような一般的に液体高速クロマトグラフィーで用いられる溶媒である。これら複数を任意の比率で混合して用いてよい。
当然、液体高速クロマトグラフィー用移動相に用いられる一般的な塩、pH調整剤、pH緩衝剤、分離調整剤のような添加剤を用いてよい。
有機溶媒とは、例えばアセトニトリル、ジメチルスルホキシド、ジメチルホルムアミド、メタノールなどの脂肪族アルコール、シクロヘキサノールのような環状アルコール、シクロヘキサン、トルエン、キシレン、ベンゼンのような一般的に液体高速クロマトグラフィーで用いられる溶媒であり、これら複数を任意の比率で混合して用いてよい。
当然、液体高速クロマトグラフィー用移動相に用いられる一般的な塩、pH調整剤、pH緩衝剤、分離調整剤のような添加剤を用いてよい。
また、上記式(10)に示した化合物の代わりに、ホスホリルコリン基とカルボキシル基の間に炭素数5の飽和アルキル鎖を有するO−ホスホリルコリンヒドロキシヘキサン酸を用いると、同様の手順により、式(2)中、m=3、n=2、Rが式(4)L=5で示される化合物が得られる。
1650cm-1付近にアミド結合に特有の吸収を観測することができた。
移動相: 10 mmol/L HCOONH4, CH3CN/H2O=90/10 (pH=7.19)
流速: 1.0 mL/min
温度: 40℃
検出: UV 254 nm
さらに本発明によれば、親水性の高い核酸塩基3種どうしも極めて良好に分離されている。ピークの対称性をあらわすンメトリー係数(シンメトリー係数=1でピークが完全に対称、1以上でテーリング(ピーク後半が尾を引く)であることを示す)も1に近く、極めて良好な分離が行われていることがわかる。
図8に、本発明の充填剤と、代表的な親水性官能基であるポリエチレンオキサイドを実施例1と同一のシリカゲルに修飾したカラム充填剤との比較を示した。
クロマトグラムの取得条件は次の通りである。
移動相: 10 mmol/L HCOONH4, CH3CN/H2O=90/10 (pH=7.19)
流速: 1.0 mL/min
温度: 40℃
検出: UV 254 nm
カラム: 4.6 mmi.d. x 250 mm
温 度: 40℃
移動相: 10 mmol/L HCOONH4, CH3CN/H2O=90/10 (pH=7.19)
10 mmol/L HCOONH4, CH3CN/H2O=90/10 (pH=3.50)
流 速: 1.0 mL/min
検 出: UV/254 nm
試 料: チミン 50μg/mL、アデニン 50μg/mL、シトシン 100μg/mL、ナフタレン 100μg/mL in 50% CH3CN
注入量: 5μL
先ずpHが酸性の移動相を用いた結果を図9に示した。移動相が酸性の場合、カラム充填剤担体のシリカゲル上に残存するシラノール基は中性であるので、カラム全体としては電気的に中性となり、親水性相互作用以外の相互作用は存在しないと考えられる。
この条件において、本発明の充填剤は、比較例2よりも大きい保持を示した。これは本発明のカラムがより強い親水性相互作用を有するカラムであることを示している。
さらに着目すべきは、本発明によるカラムによって得られたピークの理論段数の高さ(理論段数が高いほどシャープなピークであることを表す)である。本発明では全ての核酸塩基化合物について、理論段数20000以上を得た。比較例2では、理論段数5000〜7000であることを考えると、本発明のカラムは親水性相互作用における親水性化合物の分離に極めて有効であることを示す。
比較例2においては5000段であるところ、本発明のカラムにおいては22000段という驚異的な理論段数を得た。
すなわち、本発明の充填剤はチミンの分離特性に極めて優れている。
さらには、極めて微量な物質であっても、ピークがシャープであることにより検出感度を向上できることを意味しており、単純計算でも本例におけるチミンについては4倍以上もの、そのほかの物質についても3倍程度の感度向上を見込むことができる。
このように、本発明の親水性相互作用クロマトグラフィー用カラム充填剤は、現在最も信頼される同分野のカラム充填剤と比べて圧倒的に優れている。
しかしながら、図9に示したとおり、本発明のカラム充填剤(4.9MPa)は比較対象(4.6MPa)と同等のカラム圧力であった。
この結果は、本発明のカラム充填剤により得られる理論段数の高さが充填剤の粒子径という、官能基とは無関係な理由によるものではないことを示している。加えて、粒子径に依存する理論段数の変化は物理的な要因であるから、全ての化合物に対して同じ割合で理論段数が変化するのに対し、本発明ではチミンにおいて驚異的な理論段数を示した。
このような、化合物に応じて増減する傾向は、充填剤の物理的要因を否定し、表面修飾の効果を反映するものである。
したがって、親水性相互作用カラムとしてはイオン性相互作用がイレギュラーに関与したり、正電荷を帯びる塩基性物質の吸着や理論段数の低下を招いたりするため、望ましくない。この観点で図9と図10を比較すると、比較対象カラムでは移動相が中性になることによって各物質の保持時間が大幅に増加していることがわかる。分析対象物質が正電荷を帯びやすい塩基性物質である核酸塩基(すなわち負電荷を帯びた充填剤と相互作用する)であることを考えれば、比較対象カラムにおいてはイオン交換相互作用が生じたことは明白である。これはシリカゲル表面に残存したシラノール基による影響と推察される。このような、比較対象における中性移動相での保持時間の増加は好ましくない保持時間の増加である。
本発明にて分離可能な親水性物質には、糖類、DNAなどを構成する核酸塩基、タンパク質を構成するアミノ酸、水溶性のビタミン、ホルモン類など生物学的に極めて重要な化合物が含まれ、これらの分析において高感度な検出、高性能な分離を実現するものである。
Claims (8)
- 前記担体が、シリカであることを特徴とする請求項1〜3記載のクロマトグラフィー用充填剤。
- 前記シリカが球状または破砕型で、その平均粒径が1〜200μmであることを特徴とする請求項4記載のクロマトグラフィー用充填剤。
- 前記シリカが多孔性で、その細孔の平均径が10〜2000オングストロームであることを特徴とする請求項4又は5記載のクロマトグラフィー用充填剤。
- 水溶性有機溶媒を50%以上含む水溶液を移動相として使用して、請求項1〜6の何れか1項記載のクロマトグラフィー用充填剤が充填されたカラムにより、高極性物質を含む物質を分離する方法。
- 水を含まない有機溶媒を移動相として使用して、請求項1〜6の何れか1項記載のクロマトグラフィー用充填剤が充填されたカラムに、高極性物質を含む物質を分離する方法。
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Cited By (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2012033104A1 (ja) * | 2010-09-10 | 2012-03-15 | 株式会社資生堂 | 充填剤の製造方法、充填剤及びカラム |
JP2016140772A (ja) * | 2015-01-29 | 2016-08-08 | 京都府公立大学法人 | 陽イオン交換能を発現する両性イオン導入樹脂 |
JP2016140771A (ja) * | 2015-01-29 | 2016-08-08 | 京都府公立大学法人 | 陰イオン交換能を発現する両性イオン導入樹脂 |
JP2017527824A (ja) * | 2014-07-17 | 2017-09-21 | エイゼットワイピー エルエルシーAzyp,Llc | 表面多孔性粒子(spp)上に結合した、高効率で、超安定な親水性相互作用クロマトグラフィー(hilic)基材 |
JP2018500149A (ja) * | 2014-10-29 | 2018-01-11 | サーモ エレクトロン マニュファクチュアリング リミテッド | クロマトグラフィー材料及びその調製方法 |
WO2019088167A1 (ja) * | 2017-10-31 | 2019-05-09 | 住友ベークライト株式会社 | 糖鎖又は糖ペプチドの精製剤及びその使用 |
Families Citing this family (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
MY178616A (en) | 2012-09-17 | 2020-10-19 | Grace W R & Co | Chromatography media and devices |
CN102941073B (zh) * | 2012-10-22 | 2014-12-31 | 暨南大学 | 一种仿生磷脂膜整体柱的制备方法及用途 |
US10119944B2 (en) | 2013-12-24 | 2018-11-06 | Waters Technologies Corporation | Materials for hydrophilic interaction chromatography and processes for preparation and use thereof for analysis of glycoproteins and glycopeptides |
US11092574B2 (en) | 2013-12-24 | 2021-08-17 | Waters Technologies Corporation | Materials for hydrophilic interaction chromatography and processes for preparation and use thereof for analysis of glycoproteins and glycopeptides |
CN107847907A (zh) | 2014-05-02 | 2018-03-27 | 格雷斯公司 | 官能化载体材料以及制备和使用官能化载体材料的方法 |
EP3302784B1 (en) | 2015-06-05 | 2021-10-06 | W.R. Grace & Co.-Conn. | Adsorbent bioprocessing clarification agents and methods of making and using the same |
CN105727593B (zh) * | 2016-02-03 | 2017-11-21 | 暨南大学 | 亲水性胆碱磷酸基质的有机聚合物液相整体色谱柱的制备与应用 |
JP7156146B2 (ja) * | 2019-04-10 | 2022-10-19 | 株式会社島津製作所 | 親水性材料の疎水化方法 |
CN114405489B (zh) * | 2022-01-12 | 2022-08-09 | 浙江月旭材料科技有限公司 | 一种液相色谱杂质捕集用填料及其制备方法和用途 |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2004258013A (ja) * | 2003-02-28 | 2004-09-16 | Shiseido Co Ltd | クロマトグラフィー用充填剤 |
JP2005337713A (ja) * | 2004-05-24 | 2005-12-08 | Shiseido Co Ltd | クロマトグラフィー用充填剤 |
JP2006007203A (ja) * | 2004-05-24 | 2006-01-12 | Shiseido Co Ltd | アフィニティー粒子及びアフィニティー分離方法 |
Family Cites Families (19)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS59169532A (ja) * | 1983-03-17 | 1984-09-25 | Asahi Chem Ind Co Ltd | C反応性蛋白の吸着材 |
US5108595A (en) * | 1985-11-01 | 1992-04-28 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Porous silica microspheres having silanol-enriched and silanized surfaces |
JPH085904B2 (ja) * | 1986-05-02 | 1996-01-24 | オリエンタル酵母工業株式会社 | 新規ホスホリルコリン誘導体の製造法 |
JPH0751584B2 (ja) | 1987-05-26 | 1995-06-05 | ダウコーニングアジア株式会社 | シリル基含有アミン化合物の製造法 |
JP2622222B2 (ja) | 1992-02-12 | 1997-06-18 | 信越化学工業株式会社 | 含けい素スルホベタイン化合物およびその製造方法 |
JP3178950B2 (ja) | 1993-10-19 | 2001-06-25 | ポーラ化成工業株式会社 | 化粧料用の粉体及びそれを含有する化粧料 |
JP2870727B2 (ja) | 1996-07-04 | 1999-03-17 | 科学技術振興事業団 | 2−メタクリロイルオキシエチルホスホリルコリン共重合体 |
JP3737241B2 (ja) | 1997-04-24 | 2006-01-18 | 日本油脂株式会社 | ホスホリルコリン基含有重合体の製造方法 |
US6110362A (en) * | 1997-11-19 | 2000-08-29 | Cohesive Technologies, Inc. | Chemical analysis |
JP4712924B2 (ja) | 1999-03-30 | 2011-06-29 | 日油株式会社 | 医療用材料および製造方法 |
JP4680361B2 (ja) | 2000-09-22 | 2011-05-11 | 一彦 石原 | 分離・回収方法 |
CN100480351C (zh) * | 2002-11-25 | 2009-04-22 | 株式会社资生堂 | 原材料的表面改性方法 |
US7238426B2 (en) * | 2003-08-13 | 2007-07-03 | Sequant Ab | Column packing material |
JP3898688B2 (ja) * | 2003-11-07 | 2007-03-28 | 株式会社日立ハイテクノロジーズ | グラジエント送液装置 |
JP4086305B2 (ja) * | 2003-12-02 | 2008-05-14 | 株式会社資生堂 | ホスホリルコリン基含有化合物及び該化合物からなる表面改質剤 |
US20060060553A1 (en) * | 2004-09-23 | 2006-03-23 | Fleming Larry L | Baby bottle cap holder |
US20100300971A1 (en) * | 2005-05-18 | 2010-12-02 | Sequant Ab | Zwitterionic stationary phase as well as method for using and producing said phase |
US20080220532A1 (en) * | 2007-03-08 | 2008-09-11 | Polylc Inc. | Separation of Charged Solutes by Electrostatic Repulsion-Hydrophilic Interaction Chromatography |
EP2210086B1 (en) * | 2007-11-12 | 2017-09-06 | Agilent Technologies, Inc. | Hplc-system with variable flow rate |
-
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Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2004258013A (ja) * | 2003-02-28 | 2004-09-16 | Shiseido Co Ltd | クロマトグラフィー用充填剤 |
JP2005337713A (ja) * | 2004-05-24 | 2005-12-08 | Shiseido Co Ltd | クロマトグラフィー用充填剤 |
JP2006007203A (ja) * | 2004-05-24 | 2006-01-12 | Shiseido Co Ltd | アフィニティー粒子及びアフィニティー分離方法 |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
JPN6012043642; 東條洋介,隅田如光,佐久間健一,神田武利,宮沢和之,沓名裕,村本光二: 'ホスホリルコリン基を結合した生体適合性HPLC用固定相の合成およびそのタンパク質分離特性' 分析化学討論会講演要旨集 Vol.67, 20060429, P.73 * |
Cited By (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2012033104A1 (ja) * | 2010-09-10 | 2012-03-15 | 株式会社資生堂 | 充填剤の製造方法、充填剤及びカラム |
JP2012078346A (ja) * | 2010-09-10 | 2012-04-19 | Shiseido Co Ltd | 充填剤の製造方法、充填剤及びカラム |
JP2017527824A (ja) * | 2014-07-17 | 2017-09-21 | エイゼットワイピー エルエルシーAzyp,Llc | 表面多孔性粒子(spp)上に結合した、高効率で、超安定な親水性相互作用クロマトグラフィー(hilic)基材 |
JP2018500149A (ja) * | 2014-10-29 | 2018-01-11 | サーモ エレクトロン マニュファクチュアリング リミテッド | クロマトグラフィー材料及びその調製方法 |
JP2016140772A (ja) * | 2015-01-29 | 2016-08-08 | 京都府公立大学法人 | 陽イオン交換能を発現する両性イオン導入樹脂 |
JP2016140771A (ja) * | 2015-01-29 | 2016-08-08 | 京都府公立大学法人 | 陰イオン交換能を発現する両性イオン導入樹脂 |
WO2019088167A1 (ja) * | 2017-10-31 | 2019-05-09 | 住友ベークライト株式会社 | 糖鎖又は糖ペプチドの精製剤及びその使用 |
JPWO2019088167A1 (ja) * | 2017-10-31 | 2019-11-21 | 住友ベークライト株式会社 | 糖鎖又は糖ペプチドの精製剤及びその使用 |
US11136344B2 (en) | 2017-10-31 | 2021-10-05 | Sumitomo Bakelite Co., Ltd. | Purification agent for sugar chain or glycopeptide, and use thereof |
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