JP2009506332A - 凝固検査系 - Google Patents
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Abstract
Description
本発明は、生理学的流体サンプルにおいて血液の凝固を測定するための凝固検査系に関する。
血液凝固のプロセスは複雑であり、フィブリン繊維の生成を含む、多数の血液成分に関係している。この繊維は、フィブリノゲンというタンパク質分子の重合によって形成される。フィブリノゲンはトロンビンという酵素によって触媒され、トロンビン自体はプロトロンビンとう酵素によって触媒される。
トロンボプラスチンは、血液の検査サンプル中の凝固を活性化するリン脂質−タンパク質製剤である。トロンボプラスチンは、一般に様々なメーカーから入手でき、肺、脳、または胎盤抽出物から採取でき、また、合成的に製造することもできる。通常、PT値は様々な研究所の間で一致していないため、この値によって抗凝固療法の治療域を定義することは好ましくない。
血漿または全血サンプルにおける凝固を測定するための検査要素を提供する本発明は、互いの間に所定の距離を有する第1面および第2面を備え、上記両面は、高界面エネルギー領域および低界面エネルギー領域を形成する、実質的に同一なパターンが形成され、かつ略一致に揃えられ、それにより高界面エネルギー領域は少なくとも1つの検出領域を備えるサンプル分配系を形成し、第1面および第2面における検出領域は、少なくとも1種の凝固刺激剤を備える。
図1および図2に示すように、本発明に係る凝固検査帯状片1は、基底層2、基底層2を覆う中央層3、および中央層3を覆う被覆層4を備える積層構造をしている。中央層3は間隙5を有し、間隙5は基底層4および被覆層4とともに、窪みのある空洞を形成している。上記空洞の内側には、サンプル分布系6が配置され、凝固検査帯状片の一端に配置されたサンプル導入領域9と繋がっている。使用者とのインターフェイスであるサンプル導入領域9は、サンプルを導入しやすくするため、凝固検査帯状片の第1の主要側面に広がる凸曲面10に形成されるのが好ましい。凝固検査帯状片においてサンプル導入領域9および10と反対側である第2の主要側面には、空気を排出させる空気孔11が配置される。一方、予定検出領域6aおよび6’aには、生理液または水性の液体が分配される(図3参照)。上記構造について、凝固検査要素に用いられる予定検出領域の数に係らず、空気孔は1つあればよい。サンプル分配系の上記要素は、高界面エネルギー領域、サンプル導入領域、空気孔、中央層、および中央層の間隙を備えることによって、凝固検査要素が全て形成される。この凝固検査要素は、内部の毛管現象を引き起こすことによって、導入された生理液または水性の液体を予定検出領域へ分配する。
反応1が起こると、基底層2の第1面2aまたは被覆層4の第2面4aにおける、サンプル分配系の検出領域6’aは、図5(a)および図5(b)に示すように、製剤18および19を被覆されることにおいて特徴付けられる。製剤18および19は、血液サンプルにおいて凝固反応の促進および検出を可能とする。
本発明に係る凝固検査要素は、帯状片の形状で形成されることが好ましく、印刷、穴抜きおよび積層法における通常の周知技術によって、簡単に製造することができる。凝固検査要素の設計は、簡単かつ費用効率の高い製造工程を可能とするが、繰り返して使う必要はないことが好ましい。
Claims (21)
- 血漿または全血サンプルにおける凝固を測定するための凝固検査要素であって、
一定の距離を置いて互いに向かい合う、第1面(2a)および第2面(4a)を備え、
第1面および第2面には、略一致するように配置された高界面エネルギー領域および低界面エネルギー領域を形成する2つの実質的同一パターンが設けられており、
上記高界面エネルギー領域は、少なくとも1つの検出領域(6a)を備えるサンプル分配系(6)を形成しており、
第1面(2a)および第2面(4a)の上記検出領域(6a,6’a)には、少なくとも1種の凝固刺激剤が提供されていることを特徴とする凝固検査要素。 - 上記サンプル分配系(6)は、少なくとも2つの凝固検出領域(6a1,6a2)を含むことを特徴とする請求項1に記載の凝固検査要素。
- 少なくとも1つの凝固検出領域は、上記液体サンプル(陽性対照)の迅速かつ十分な凝固を促す凝固促進剤を含む製剤を備えることを特徴とする請求項2に記載の凝固検査要素。
- 少なくとも1つの凝固検出領域は、上記液体サンプル(陰性対照)の凝固を抑制する凝固抑制剤を含む製剤を備えることを特徴とする請求項2に記載の凝固検査要素。
- 上記サンプル分配系(6)は、少なくとも3つの凝固検出領域を備え、そのうち、少なくとも1つの凝固検出領域は、上記液体サンプル(陽性対照)の凝固を促進する製剤を備え、かつ少なくとも1つの凝固検出領域は、上記液体サンプル(陰性対照)の凝固を抑制する製剤を備えることを特徴とする請求項2に記載の凝固検査要素。
- 上記凝固刺激剤は、トロンボプラスチンおよび/またはカルシウムイオンであることを特徴とする請求項1〜5のいずれか1項に記載の凝固検査要素。
- 上記液体サンプル(陽性対照)の上記凝固促進製剤は、ゲル化剤を含むことを特徴とする請求項2〜6のいずれか1項に記載の凝固検査要素。
- 上記液体サンプル(陰性対照)の上記凝固抑制剤は、リチウムヘパリンおよび/またはEDTAを含むことを特徴とする請求項2〜7のいずれか1項に記載の凝固検査要素。
- 上記検出領域(6a,6’a)における第1面(2a)および第2面(4a)のうち少なくとも一方は、透過率または吸光度測定による凝固反応の測定を可能にする化合物を備えることを特徴とする請求項1〜8のいずれか1項に記載の凝固検査要素。
- 上記検出領域(6a,6’a)における第1面(2a)および第2面(4a)のうち少なくとも一方は、凝固反応の蛍光測定を可能にする化合物を備えることを特徴とする請求項1〜9のいずれか1項に記載の凝固検査要素。
- 凝固反応の蛍光測定を可能にする上記化合物は、蛍光分子ローターであることを特徴とする請求項10に記載の凝固検査要素。
- 凝固検査要素を製造する方法であって、以下の各工程を含むことを特徴とする方法:
少なくとも1つの所定の検出領域(6a)を備える親水性のサンプル分配系を形成する高界面エネルギー領域と、低界面エネルギー領域とを、基底層(2)の備える第1面(2a)上に生成する工程;
高界面エネルギー領域および低界面エネルギー領域の同一パターンを、被覆層(4)の備える第2面(4a)上に生成する工程;
第1面(2a)および/または第2面(4a)において所定の検出領域(6a)を、少なくとも1種の凝固刺激剤によって被覆する工程;および
サンプル分配系(6)用の空洞を形成する間隙を備える中央層(3)を間にして、第1面および第2面が向かい合うように各層を配置し、第1層(2)および第2層(4)の第1面(2a)および第2面(4a)に、高界面エネルギー領域によるサンプル分配系(6)を形成する工程。 - 下記の各工程をさらに含むことを特徴とする請求項12に記載の方法:
他の凝固検出領域(6a2)における第1面(2a)および第2面(4a)のうち少なくとも一方を、液体サンプル(陽性対照)の凝固を迅速かつ十分に促進する凝固促進剤を含む製剤によって被覆する工程;および
他の凝固検出領域(6a3)における第1面(2a)および第2面(4a)のうち少なくとも一方を、液体サンプル(陰性対照)の凝固を抑制する凝固抑制剤を含む製剤によって被覆する工程。 - 凝固検出領域における第1面(2a)および第2面(4a)のうち少なくとも一方を、凝固反応の蛍光測定を可能にする化合物によって被覆する工程をさらに含むことを特徴とする請求項12または13に記載の方法。
- 上記高界面エネルギー領域は、第1面(2a)および第2面(4a)に不水溶性の親水性化合物を塗布することによって生成されることを特徴とする請求項12〜14のいずれか1項に記載の凝固検査要素の製造方法。
- 上記低界面エネルギー領域は、第1面(2a)および第2面(4a)に疎水性化合物を塗布することによって生成されることを特徴とする請求項12〜15のいずれか1項に記載の凝固検査要素の製造方法。
- 上記親水性化合物および/または上記疎水性化合物は、フレキソ印刷、リソグラフィー、グラビア印刷、墨塗法、またはインクジェット印刷によって、第1面(2a)および第2面(4a)に印刷されることを特徴とする請求項15または16に記載の凝固検査要素の製造方法。
- 凝固刺激剤、性質制御化合物、および/または蛍光検出補助剤は、ミクロ接触プリンティングまたは微量な投与によって、第1面(2a)および/または第2面(4a)の凝固検出領域(6a,6’a)に塗布されることを特徴とする請求項12〜17に記載の凝固検査要素の製造方法。
- 請求項1〜11のいずれか1項に記載の凝固検査要素と、
所定の検出領域上の血清または全血の液体サンプルにおける、吸光度または蛍光の変化を検出するための検出手段と、
光検出手段からのデータを処理し、かつ凝固時間および/またはINR値を計算するための処理手段と、
使用者へ出力値を示すための表示手段とを備えることを特徴とする、血漿または全血サンプルにおける凝固を測定するための凝固検査系。 - 血清または全血の液体サンプルにおける凝固を測定するための方法であり、以下の各工程を含むことを特徴とする方法:
請求項1〜11のいずれか1項に記載の凝固検査要素に対して、血清または全血の液体サンプルを導入する工程;
検出手段および処理手段を含む測定装置に、上記凝固検査要素を付加する工程;および
表示手段における出力値を読み込む工程。 - 血清または全血サンプルにおける凝固を測定するための凝固検査要素であって、
一定の距離を置いて互いに向かい合う第1面および第2面を備え、
上記第1面および上記第2面のうち一方には、親水性または疎水性のパターンが形成されており、もう一方の面は、疎水性領域によって囲まれた親水性領域の、相同パターンを備え、それゆえ、半親水性および半疎水性の性質を有する面を形成しており、
親水性および半親水性の領域は、少なくとも1つの検出領域を備えるサンプル分配系を形成しており、
第1面および第2面の検出領域には、少なくとも1つの凝固刺激剤が提供されていることを特徴とする凝固検査要素。
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