JP2009039129A - 突然変異体ルシフェラーゼ - Google Patents
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Abstract
【解決手段】甲虫類から突然変異ルシフェラーゼを取得。突然変異ルシフェラーゼは、野生型酵素によって生成される生物発光のピーク強度の波長から少なくとも1nmは異なるピーク強度の波長を有する生物発光を生じることで対応野生型ルシフェラーゼとは異なる。この突然変異ルシフェラーゼ及びDNAは種々のバイオ検出に使用される。
【選択図】なし
Description
表Iに示した、様々な甲虫類ルシフェラーゼをコードするcDNAの配列、及びcDNA配列から推定されるアミノ酸配列が公知である。
本発明は、甲虫類の突然変異体ルシフェラーゼ、及び該突然変異体ルシフェラーゼをコードするDNAを提供する。好ましくは、上記突然変異体ルシフェラーゼは対応する野生型ルシフェラーゼとは異なる色の発光を生起し、この色の相違は好ましくは、突然変異体の発光ピーク強度波長が野生型酵素のものと少なくとも1nm相違することによる。
本発明の突然変異体ルシフェラーゼは対応する野生型ルシフェラーゼから、1個以上の、しかし典型的には2個以下のアミノ酸の置換によって相違する。本発明のルシフェラーゼは、3個のカルボキシ末端アミノ酸のうちの1個以上を改変してペルオキシソーム標的化を低減することも可能である。
以下の説明及び実施例において方法実施及び濃度測定は、特に記載のない限りは室温(約20℃〜25℃)及び大気圧で行った。
ポリペプチド中のある位置での置換は、[元のアミノ酸の記号]位置番号[置換アミノ酸の記号]で表わされる。
例えば、ポリペプチドの位置100にあるアラニンがグルタミン酸で置換されていることは、Ala100GluまたはA100Eと表わされる。通常は、置換表示の前にそれが生じたポリペプチドを表示する。例えば、“Luck”と名付ける仮想タンパク質に置換A100Eが存在する場合、置換はLuck−Ala100GluまたはLuck−A100Eと表わされる。ポリペプチド中に2つ以上の置換がある場合、置換表示はスラッシュ(/)によって区切られる。例えば、仮想タンパク質“Luck”において、位置100のアラニンがグルタミン酸で置換され、位置150のリシンがアスパラギンで置換されている場合、置換を有するポリペプチドはLuck−Ala100Glu/Lys150AsnまたはLuckA100E/K150Nと表わされる。ポリペプチド中の1つの位置に異なる置換があることを示すためには、置換アミノ酸の記号をコンマ(,)で区切る。例えば仮想タンパク質が、位置100でアラニンに代わってグルタミン酸、グリシンまたはリシンで置換されている場合、表示はLuck−Ala100/Glu,Gly,LysまたはLuck−A100/E,G,Kとなる。
Claims (8)
- 野生型ルシフェラーゼのアミノ酸配列が1か所または2か所で置換されている野生型ルシフェラーゼとは異なるアミノ酸配列を有する突然変異甲虫ルシフェラーゼであって、少なくとも1か所の置換位置が、LucPplGRのアミノ酸配列における位置214、215、223、224、232、236、237、238、242、244、245、247、248、282、283及び348からなる群から選択される位置に対応している前記突然変異甲虫ルシフェラーゼ。
- 1か所のアミノ酸が置換されている請求項1に記載の突然変異ルシフェラーゼ。
- 2か所のアミノ酸が置換されていて、それぞれのアミノ酸の置換が、LucPplGRのアミノ酸配列における位置214、215、223、224、232、236、237、238、242、244、245、247、248、282、283及び348からなる群から選択される位置に対応している請求項1に記載の突然変異甲虫ルシフェラーゼ。
- 野生型ルシフェラーゼが、LucPplGR、LucPplYG、LucPplYE、LucPplOR、Photinus pyralisルシフェラーゼ、Luciola crusiataルシフェラーゼ、Luciola lateralisルシフェラーゼ及びLuciola mingrelicaルシフェラーゼからなる群から選択される野生型ルシフェラーゼに対応する請求項1〜3に記載の突然変異ルシフェラーゼ。
- 対応する野生型ルシフェラーゼが、LucPplGR、LucPplYG、LucPplYE及びLucPplORからなる群から選択される請求項1〜4に記載の突然変異ルシフェラーゼ。
- 対応する野生型ルシフェラーゼがLucPplGRである請求項1〜5に記載の突然変異ルシフェラーゼ。
- 請求項1〜7に記載の突然変異甲虫ルシフェラーゼをコードする配列部分からなるDNA分子。
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Cited By (1)
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Non-Patent Citations (2)
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---|
JPN6010058297, Journal of Bioluminescence and Chemiluminescence, 5(1990) p.107−114 * |
JPN6010058298, Journal of Bioluminescence and Chemiluminescence, 4(1989) p.31−39 * |
Cited By (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2017529840A (ja) * | 2014-09-11 | 2017-10-12 | プロメガ コーポレイションPromega Corporation | 増強された発光を産生するために赤外発光基質を活用するルシフェラーゼ配列 |
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