JP2008079583A - 乳酸菌培養基材 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】乳酸菌培養の培地に用いる窒素源として、高価なペプトン等の代わりに、酵母菌体残渣および/または酵母菌体残渣酵素処理物を用いる。
【選択図】なし
Description
しかしながらこれらの方法は、処理が煩雑であったり、特殊な菌を作用させなければならいという欠点があり、更に有利な利用方法が求められていた。
(1)培地として酵母菌体残渣または酵母菌体残渣酵素処理物を用いる乳酸菌の培養方法。
(2)前記酵母がキャンディダ属酵母である、上記(1)の培養方法。
(3)酵母菌体残渣または酵母菌体残渣酵素処理物を含有する、乳酸菌培養用の培養基材。
を提供するものである。
本発明は、乳酸菌の培養の際に、培地として酵母菌体残渣または酵母菌体残渣酵素処理物を用いるものである。
用いられる酵母は、酵母エキス等を生産するための酵母であればいずれでもよく、例えば、サッカロミセス属酵母、キャンディダ属酵母等を例示することができるが、中でもキャンディダ属酵母が好ましい。
反応条件は使用する酵素の種類、使用量等によって異なるが、pH3.0〜11.0の範囲、好ましくはpH6.0〜9.0の範囲とし、反応温度は30〜80℃、望ましくは35〜70℃とし、反応時間は1〜10時間程度で十分である。
キャンディダ・ユティリスAHU3053株を常法により培養し集菌することにより酵母菌体を得た。該菌体からエキス分を熱水抽出し、該熱水可溶性成分(エキス分)を分離・除去することにより、酵母菌体残渣を得た。
得られた酵母菌体残渣の組成を表1に示す。
製造例1で得た酵母菌体残渣22.5kg(乾燥重量)を水127.5Lに懸濁しpHを6.5に調製した。本懸濁液に、ツニカーゼ(大和化成製)225gを水に溶解した溶液を0.22μmのフィルターを通して添加した。添加終了後、35〜40℃で攪拌下4時間酵素反応を行った。
反応終了後、反応液をドラムドライヤーを用いて150℃で乾燥を行い、次いで粉砕器で粉砕し、酵母菌体残渣酵素処理物18kgを得た。
得られた酵母菌体残渣酵素処理物の組成を表2に示す。
微生物としてLactobacillus reuteriを用い、1000ml容の三角フラスコにロゴサ培地(表3の組成)200mlを調製し殺菌した後、乳酸菌を接種して培養温度37℃で12時間静置培養し前培養液を得た。本培養培地として、グルコース1%、酵母エキス0.5%、塩化ナトリウム0.5%、市販のポリペプトン(日本製薬製)0.5%を添加した培地を基準培地とし、基準培地のポリペプトンの代わりに製造例1で得られた酵母菌体残渣0.75%を添加した培地をA培地とし、基準培地のポリペプトンの代わりに製造例2で得られた酵母菌体残渣酵素処理物0.75%を添加した培地をB培地とした。前記の基準培地、A培地、B培地をそれぞれ、30Lジャーファーメンターに15Lずつ調製し、121℃、30分間オートクレーブ殺菌を行った。冷却後の各培地に、ロゴサ培地で作成した前培養液全量を無菌的に接種し、撹拌回転数100rpm、培養温度37℃、pH5.2以下にならないように制御を行いながら24時間培養を行った。培養液中の生菌数の測定のために、ロゴサ培地(表3の組成)に寒天を2%加えたものを調製し殺菌し、シャーレに平板培地を作成した。該平板培地に無菌的に採取した培養液を塗布して培養温度37℃で24時間静置培養し、生菌数を測定した。各培養液中の生菌数の測定結果を表4に示す。基準培地と比較して、A培地ならびにB培地を用いた培養液の生菌数は同等の値を示しており、酵母菌体残渣および酵母菌体残渣酵素処理物が十分にペプトンの代替として使用できることが確認された。
微生物としてEnterococcus faecalisを用い、1000ml容の三角フラスコにロゴサ培地(表3の組成)200mlを調製し殺菌した後、乳酸菌を接種して培養温度37℃で12時間静置培養し前培養液を得た。本培養培地として、グルコース1%、酵母エキス0.5%、塩化ナトリウム0.5%、市販のポリペプトン(日本製薬製)0.5%を添加した培地を基準培地とし、基準培地のポリペプトンの代わりに製造例1で得られた酵母菌体残渣0.75%を添加した培地をA培地とし、基準培地のポリペプトンの代わりに製造例2で得られた酵母菌体残渣酵素処理物0.75%を添加した培地をB培地とした。前記の基準培地、A培地、B培地をそれぞれ、30Lジャーファーメンターに15Lずつ調製し、121℃、30分間オートクレーブ殺菌を行った。冷却後の各培地に、ロゴサ培地で作成した前培養液全量を無菌的に接種し、撹拌回転数100rpm、培養温度37℃、pH5.2以下にならないように制御を行いながら24時間培養を行った。培養液中の生菌数の測定のために、ロゴサ培地(表3の組成)に寒天を2%加えたものを調製し殺菌し、シャーレに平板培地を作成した。該平板培地に無菌的に採取した培養液を塗布して培養温度37℃で24時間静置培養し、生菌数を測定した。各培養液中の生菌数の測定結果を表5に示す。基準培地と比較して、A培地ならびにB培地を用いた培養液の生菌数は同等の値を示しており、酵母菌体残渣および酵母菌体残渣酵素処理物が十分にペプトンの代替として使用できることが確認された。
Claims (3)
- 培地として酵母菌体残渣または酵母菌体残渣酵素処理物を用いる乳酸菌の培養方法。
- 前記酵母がキャンディダ属酵母である、請求項1記載の培養方法。
- 酵母菌体残渣または酵母菌体残渣酵素処理物を含有する、乳酸菌培養用の培養基材。
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